ES2800308T3

ES2800308T3 - Dihidropteridinonas para el tratamiento de enfermedades oncológicas

Info

Publication number: ES2800308T3
Application number: ES05770942T
Authority: ES
Inventors: Gerd Munzert; Martin Steegmaier
Original assignee: Oncoheroes Biosciences Inc
Current assignee: Oncoheroes Biosciences Inc
Priority date: 2004-08-14
Filing date: 2005-08-09
Publication date: 2020-12-29
Anticipated expiration: 2025-08-09
Also published as: TW200612956A; KR101283378B1; WO2006018185A8; AU2005274387B2; US20080221099A1; CN104055778A; JP2012211178A; CA2575787C; EP3560499A1; KR20070044052A; WO2006018185A2; US20060074088A1; AR050694A1; KR101353990B1; JP2008509949A; IL227841A; RU2007109109A; EP1778240A2; CA2575787A1; IL181304A

Abstract

Un compuesto representado por una fórmula estructural seleccionada entre **(Ver fórmula)** y **(Ver fórmula)** opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables para su uso en el tratamiento de cánceres seleccionados del grupo que consiste en melanomas, mieloma, leucemias agudas o crónicas de origen mieloide y síndromes mielodisplásicos (MDS).

Description

DESCRIPCIÓN

Dihidropteridinonas para el tratamiento de enfermedades oncológicas

La presente invención se refiere a dihidropteridinonas de Fórmula general (I),

en la que los grupos L, R1, R2, R3, R4 y R5 tienen los significados dados en las reivindicaciones y en la memoria descriptiva, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos farmacológicamente aceptables de los mismos, y su uso en la terapia contra el cáncer.

Antecedentes de la invención

Las quinasas tipo polo (PLK) son quinasas de serina/treonina que juegan papeles importantes en la regulación de procesos en el ciclo celular. Se desvelan cuatro PLK en el estado de la técnica, es decir, PLK-1, PLK-2, PLK-3 y PLK-4. Las PLK juegan un papel en la regulación del ciclo de las células eucarióticas (por ejemplo regulación de la maquinaria mitótica en células de mamíferos). Se muestra un papel central especialmente para PLK-1, con respecto a la regulación de la mitosis (G1overy col. 1,998, Genes Dev. 12:3,777-87; Qian y col. 2,001, Mol Biol Cell. 12:1,791-9). La sobreexpresión de PLK-1 parece estar fuertemente asociada con células neoplásicas incluyendo cánceres (solicitud de patente internacional WO 2004/014899). Se ha documentado sobreexpresión de PLK1 para diversos tipos de tumores tales como cáncer de pulmón no microcítico, carcinomas celulares escamosos, carcinomas de mama, ovario o papilar así como cánceres Colorrectales (Wolf y col. 1.997, Oncogene 14, páginas 543-549; Knecht y col.

1.999, Cáncer Res. 59, páginas 2,794-2,797; Wolf y col. 2.000, Pathol Res Pract. 196, páginas 753-759; Weichert y col. 2.004, Br. J. Cancer 90, páginas 815-821; Ito y col. 2.004, Br. J. Cancer 90, páginas 414-418; Takahashi y col.

2.003, Cancer Sci. 94, páginas 148-152).

El documento WO 03/020722 derivados de dihidropteridinonas, su capacidad para inhibir quinasas específicas del ciclo celular y su potencial uso en el tratamiento de enfermedades caracterizadas por una excesiva proliferación celular anormal.

Es el propósito de la presente invención proporcionar compuestos para el tratamiento de diversas enfermedades oncológicas.

Descripción detallada de la invención

La invención desvela el uso de compuestos de Fórmula (I),

en la que

R ¹ , R ² los cuales pueden ser idénticos o diferentes, indican hidrógeno o alquilo C i -C ⁶ opcionalmente sustituido, 0

R ¹ y R ² juntos indican un puente de alquilo de 2 a 5 miembros que puede contener 1 a 2 heteroátomos, R ³ indica hidrógeno o un grupo seleccionado de entre: alquilo C1-C12, alquenilo C2-C12, alquinilo C2-C12 y arilo C ⁶ -C14, opcionalmente sustituidos, o

un grupo seleccionado de entre: cicloalquilo C ³ -C ¹² , cicloalquenilo C ³ -C ¹² , policicloalquilo C ⁷ -C ¹² , policicloalquenilo C ⁷ -C ¹² , espirocicloalquilo C ⁵ -C ¹² , heterocicloalquilo C ³ -C ¹² , opcionalmente sustituidos y/o de puente, que contiene 1 a 2 heteroátomos y heterocicloalquenilo C3-C 12 que contiene 1 a 2 heteroátomos o

R ¹ y R ³ o R ² y R ³ juntos indican un puente de alquilo C ³ -C ⁴ , saturado o insaturado, que puede contener 1 heteroátomo,

R ⁴ indica un grupo seleccionado de entre: hidrógeno, -CN, hidroxilo, -NR6R7 y halógeno, o

un grupo seleccionado de entre: alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, alquiloxi C1-C5, alqueniloxi C2-C5, alquiniloxi C2-C5, alquiltio C1-C6, alquil (C1-C6)sulfoxo y alquil (C1-C6)sulfonilo, opcionalmente sustituidos, L indica un enlazador seleccionado de entre: alquilo C ² -C ¹⁰ , alquenilo C ² -C ¹⁰ , arilo C ⁶ -C ¹⁴ , -alquil (C ² -C ⁴ ) - arilo (C ⁶ -C ¹⁴ ) , -aril (C ⁶ -C ¹⁴ )-alquilo (C ¹ -C ⁴ ) , opcionalmente sustituidos, opcionalmente cicloalquilo C ³ -C ¹² de puente y heteroarilo que contiene 1 o 2 átomos de nitrógeno,

n indica 0 o 1

m indica 1 o 2

R ⁵ indica un grupo seleccionado de entre: morfolinilo, piperidinilo, piperazinilo, piperazinilcarbonilo, pirrolidinilo, tropenilo, R ⁸ - dicetometiIpiperazinilo, sulfoxomorfolinilo, sulfonilmorfolinilo, tiomorfolinilo, -NR ⁸ R ⁹ y azacicloheptilo, opcionalmente sustituidos,

R ⁶ , R ⁷ que pueden ser idénticos o diferentes, indican hidrógeno o alquilo C ¹ -C ⁴ ,

y

R ⁸ , R ⁹ indican sustituyentes de nitrógeno, no sustituidos en R ⁵ , que pueden ser idénticos o diferentes, indican un hidrógeno o un grupo seleccionado de entre: alquilo C1-C6, -alquil (C1-C4) -cicloalquilo (C3-C10) , cicloalquilo C3-C ¹⁰ , - aril-o C ⁶ -C ¹⁴ , -alquil (C ¹ -C ⁴ )-arilo (C ⁶ -C ¹⁴ ) , piranilo, piridinilo, pirimidinilo, alquiloxicarbonilo C ¹ -C ⁴ , arilcarbonilo C ⁶ -C ¹⁴ , alquilcarbonilo C ¹ -C ⁴ , arilmetiloxicarbonilo C ⁶ -C ¹⁴ , arilsulfonilo C ⁶ -C ¹⁴ , alquilsulfonilo C ¹ -C ⁴ y aril (C ⁶ -C ¹⁴ )-alquilsulfonilo (C ¹ -C ⁴ ),

opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y sus mezclas y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos farmacológicamente aceptables de los mismos,

para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por una proliferación celular anormal en un cuerpo de mamífero humano o no humano mediante la inhibición de quinasas tipo polo como reguladores mitóticos.

Además se desvela el uso de acuerdo con la invención de compuestos de Fórmula (I) en la que

R ¹ a R ⁴ , R ⁶ y R ⁷ son como se definió anteriormente, y

L indica un enlazador seleccionado de entre: alquilo C ² -C ¹⁰ , alquenilo C ² -C ¹⁰ , arilo C ⁶ -C ¹⁴ , -alquil (C ² -C ⁴ ) - arilo (C ⁶ -C ¹⁴ ) , -aril (C ⁶ -C ¹⁴ )-alquilo (C ¹ -C ⁴ ) , opcionalmente sustituidos, opcionalmente cicloalquilo C ³ -C ¹² de puente y heteroarilo que contiene 1 o 2 átomos de nitrógeno

n indica 1

m indica 1 o 2

R ⁵ indica un grupo que está unido a L vía un átomo de nitrógeno, seleccionado de entre: morfolinilo, piperidinilo, R ⁸ -piperazinilo, pirrolidinilo, tropenilo, R ⁸ - dicetom etiIpiperazinilo, sulfoxomorfolinilo, sulfonilmorfolinilo, tiomorfolinilo, -NR ⁸ R ⁹ y azacicloheptilo, opcionalmente sustituidos,

R ⁸ , R ⁹ indican sustituyentes de nitrógeno, no sustituidos, en R ⁵ , que pueden ser idénticos o diferentes, hidrógeno o un grupo seleccionado de entre: alquilo C1-C6, -alquil (Ci -C4)-cicloalquilo (C3-C10) , cicloalquilo C3-C10, arilo C6-C14, -alquil (Ci -C4)-arilo (C6-C14) , piranilo, piridinilo, pirimidinilo, alquiloxicarbonilo C1-C4, arilcarbonilo C6-C14, alquilcarbonilo C1-C4, arilmetiloxicarbonilo C6-C14, arilsulfonilo C6-C14, alquilsulfonilo C1-C4 y aril (C6-C14) -alquilsulfonilo (C1-C4), opcionalmente en la forma de los tautómeros, los racematos, los enantiómeros, los díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente las sales de adición de ácido farmacológicamente aceptables de los mismos.

También se desvela el uso de acuerdo con la invención de compuestos de Fórmula (I), en la que:

R ¹ a R ⁴ , R ⁵ y R ⁷ son como se definió anteriormente,

L indica un enlazador seleccionado de entre: alquilo C2-C10, alquenilo C2-C10, arilo C6-C14, -alquil (C2-C4)- arilo (C6-C14) , -aril (C6-C14)-alquilo (C1-C4) , opcionalmente sustituidos, opcionalmente cicloalquilo C3-C12 de puente y heteroarilo que contiene 1 o 2 átomos de nitrógeno,

n indica 0 o 1

m indica 1 o 2

R ⁵ indica un grupo que está unido a L vía un átomo de carbono, seleccionado de entre: R ⁸ -piperidinilo, R ⁸ R ⁹ -piperazinilo, R8_pirrolidinilo, R8'piperazinilcarbonilo, R8'tropenilo, R ⁸ 1norfolinilo y R8'azacicloheptilo, y

R ⁸ , R ⁹ indican sustituyentes de nitrógeno, no sustituidos, en R ⁵ , que pueden ser idénticos o diferentes, hidrógeno o un grupo seleccionado de entre: alquilo C1-C6, -alquil (C1-C4)-cicloalquilo (C3-C10) , cicloalquilo C3-C10, arilo C6-C14, -alquil (C1-C4)-arilo (C6-C14) , piranilo, piridinilo, pirimidinilo, alquiloxicarbonilo C1-C4, arilcarbonilo C6-C14, alquilcarbonilo C1-C4, arilmetiloxicarbonilo C6-C14, arilsulfonilo C6-C14, alquilsulfonilo C1-C4 y aril (C6-C14) -alquilsulfonilo C1-C4, opcionalmente en la forma de los tautómeros, los racematos, los enantiómeros, los díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente las sales de adición de ácido farmacológicamente aceptables de los mismos.

Se desvela particularmente el uso de compuestos de Fórmula (I) en la que:

L, m, n y R ³ a R ⁹ son como se definió anteriormente, y

R ¹ , R ² que pueden ser idénticos o diferentes, indican un grupo seleccionado de entre: hidrógeno, Me, Et, Pr, o R ¹ y R ² forman juntos un puente de alquilo C2-C4, opcionalmente en la forma de los tautómeros, los racematos, los enantiómeros, los díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente las sales de adición de ácido farmacológicamente aceptables de los mismos.

Se desvela además el uso de acuerdo con la invención de compuestos de Fórmula (I) en la que:

R ¹ , R ² , m, n y R ⁵ a R ⁸ son como se definió anteriormente, y

R ³ indica un grupo seleccionado de entre: alquilo C1-C10, cicloalquilo C3-C7, heterocicloalquilo C3-C6 y arilo C6-C14, opcionalmente sustituidos, o

R ¹ y R ³ o R ² y R ³ juntos indican un puente de alquilo C3-C4, saturado o insaturado, que puede contener 1 a 2 heteroátomos,

R ⁴ indica un grupo seleccionado de entre: hidrógeno, OMe, OH, Me, Et, Pr, OEt, NHMe, NH2, F, CL, Br, O-propargilo, O-butinilo, CN,- SMe, NMe2, - CONH2, etinilo, propinilo, butinilo y alilo, y

L indica un enlazador seleccionado de entre: fenilo, fenilmetilo, ciclohexilo y alquilo C1-C6 ramificado, opcionalmente sustituidos,

opcionalmente en la forma de los tautómeros, los racematos, los enantiómeros, los díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente las sales de adición de ácido farmacológicamente aceptables de los mismos.

En una realización adicional, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención, en la que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en los compuestos de Fórmula (I) mostrados en la siguiente Tabla:

en la que las abreviaturas X 1, X2, X3, X4 y X5 usadas en la Tabla en cada caso, indican una unión a una posición en la Fórmula general mostrada en la Tabla en lugar de los correspondientes grupos: R1, R2, R3, R4 y L-R5

En una realización preferente, la invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención, en la que la quinasa tipo polo es PLK-1.

En otra realización desvelada, la invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención, en la que la enfermedad se caracteriza por: proliferación celular inadecuada, migración, apoptosis o angiogénesis, preferentemente por proliferación celular inadecuada. Proliferación celular inadecuada quiere decir proliferación celular resultante de crecimiento celular inadecuado, de división celular excesiva, de división celular a una velocidad acelerada y/o de supervivencia celular inadecuada.

Además, la invención desvela el uso de un compuesto de Fórmula (I) según la invención, en el que la enfermedad es cáncer seleccionado entre el grupo que consiste en melanomas, mieloma, leucemias agudas o crónicas de origen mieloide y síndromes mielodisplásicos (MDS).

Ejemplos de carcinomas dentro del ámbito de la divulgación incluyen pero no se limitan a: adenocarcinoma (AC), carcinoma escamoso (SCC) y carcinomas mixtos o no diferenciados. Los carcinomas dentro del ámbito de la invención incluyen pero no se limitan a las siguientes histologías:

• Tumores de cabeza y cuello: SCC, AC, cánceres de células de transición, cánceres mucoepidermoides, carcinomas no diferenciados;

• Tumores del sistema nervioso central: Astrocitoma, glioblastoma, meningeoma, neurinoma, schwannoma, ependimoma, hipofisoma, Oligodendroglioma, meduloblastoma;

• Tumores bronquiales y medíastínicos:

o Tumores bronquiales:

■ Cánceres de pulmón microciticos (SCLC) : cáncer de pulmón de células en granos de avena, cáncer de células intermedías, cáncer de pulmón de células en granos de avena combinado;

■ Cánceres de pulmón no microciticos (NSCLC): SCC, carcinoma fusocelular, AC, carcinoma bronquioalveolar, NSCLC macrocitico, NSCLC de células claras;

o Mesotelioma;

o Timoma;

o Carcinomas tiroideos: papilar, folicular, anaplásico, medular;

• Tumores del tracto gastrointestinal:

o Cánceres esofágicos: SCC, AC, anaplásico, carcinoide, sarcoma;

o Cánceres gástricos: AC, adenoescamoso, anaplásico;

o Cánceres colorrectales: AC, incluyendo formas hereditarias de AC, carcinoide, sarcoma;

o Cánceres anales: SCC, cáncer del epitelio de transición, AC, carcinoma basocelular;

o Cánceres pancreáticos: AC, incluyendo cánceres ductales y acinares, papilares, adenoescamosos, no diferenciados, tumores del páncreas endocrino;

o Carcinoma hepatocelular, colangiocarcinoma, angiosarcoma, hepatoblastoma;

o Carcinomas biliares: AC, SCC, microcitico, no diferenciado;

o Tumores del estroma gastrointestinal (GIST);

• Cánceres ginecológicos:

o Cánceres de mama: AC, incluyendo cánceres ductales, lobulares y medulares, invasores, cánceres mucinosos, tubulares, carcinoma de Paget, carcinoma inflamatorio, carcinoma ductal y lobular in situ;

o Cánceres de ovario: Tumores epiteliales, tumores de estroma, tumores de células germinativas, tumores no diferenciados;

o Cánceres cervicales: SCC, AC, tumores mixtos y no diferenciados;

o Cánceres del endometrio: AC, SCC, tumores mixtos, no diferenciados;

o Cánceres de la vulva: SCC, AC;

o Cánceres vaginales: SCC, AC;

• Cánceres del tracto urinario y testiculares:

o Cánceres testiculares: seminoma;

o Cánceres de células germinativas no seminomatosas: teratoma, carcinoma de células embrionarias, coriocarcinoma, tumor del saco vitelino, tumores de células de Sertoli y Leydig, mixtos;

o Tumores de células germinativas extragonadales;

o Cánceres de próstata: AC, microciticos, SCC; .

o Cánceres de células renales: AC, incluyendo carcinomas de células claras, papilares y cromófobos, formas hereditarias (por ejemplo síndrome de von-Hippel-Lindau), nefroblastoma;

o Cánceres de la vejiga urinaria: cánceres de células de transición (uroteliales), SCC, AC;

o Cánceres de la uretra: SCC, cánceres de células de transición, AC;

o Cánceres de pene: SCC;

• Tumores del tejido endocrino:

o Cánceres del tiroides: carcinomas medular, anaplásico, folicular, papilar, incluyendo síndrome de MEN;

o Tumores del páncreas endocrino; Carcinoides;

o Feocromocitoma.

Ejemplos de sarcomas dentro del ámbito de la invención incluyen pero no se limitan a: sarcoma de Ewing, osteosarcoma o sarcoma osteogénico, condrosarcoma, sarcoma sinovial, Ieiomiosarcoma, rabdomiosarcoma, sarcoma mesotelial o mesotelioma, fibrosarcoma, angiosarcoma o Fiemangioendotelioma, Iiposarcoma, glioma o astrocitoma, mixosarcoma, Fiistiocitoma fibroso maligno, tumor Inesenquimatoso o mesodérmico mixto, neuroblastoma y sarcoma de células claras.

Ejemplos de melanomas dentro del ámbito de la invención incluyen pero no se limitan a: melanoma de extensión superficial, melanoma nodular y lentigo maligno.

Ejemplos de mielomas dentro del ámbito de la invención incluyen pero no se limitan a: inmunocitoma, plasmocitoma y mieloma múltiple.

En otra realización preferente, la invención se refiere al uso de acuerdo con la invención, en el que las neoplasias hematológicas son leucemias agudas o crónicas de origen mieloide.

Ejemplos adicionales de neoplasias hematológicas dentro del alcance de la invención incluyen leucemias agudas o crónicas de origen mieloide, síndromes mielodisplásicos (MDS) y síndromes mieloproliferativos (MPS, tales como leucemia mielógena crónica, osteomielofibrosis, policitemia vera o trombocitemia esencial).

Ejemplos de Iinfomas dentro del ámbito de la divulgación incluyen pero no se limitan a:

• Linfoma de Hodgkin;

• Linfomas no Hodgkin: Iinfomas de células T y B

o Linfomas de células B

■ Grado bajo e intermedio: Leucemia Iinfocitica crónica (LLC), leucemia prolinfocitica (LPL), Iinfoma Iinfocitico pequeño, leucemia de células pilosas, Iinfoma plasmacitoide, Iinfoma de las células del manto, Iinfoma folicular, Iinfoma de la zona marginal incluyendo Iinfoma MALT;

■ Grado alto: Iinfoma difuso de células grandes B (LDCGB incluyendo variantes inmunoblásticas - y centroblásticas), linfoblástico, Iinfoma de Burkitt;

o Linfomas de células T:

■ Grado bajo: T-LLC, T-LPL, Micosis fúngica, síndrome de Sezary;

■ Grado alto: célula grande anaplásica, inmunoblástico T y linfoblástico.

En otra realización preferente, la divulgación desvela al uso de acuerdo con la invención, en el que la enfermedad es cáncer seleccionado entre el grupo que consiste en tumores mixtos, tumores no diferenciados y metástasís de los mismos.

Ejemplos de tumores mixtos dentro del ámbito de la divulgación incluyen pero no se limitan a carcinomas adenoescamosos, tumores mesodérmicos mixtos, carcinosarcomas y teratocarcinomas.

Ejemplos de otros tumores o metástasís, no diferenciados, de los mismos, dentro del ámbito de la divulgación incluyen pero no se limitan a: tumores no diferenciados, carcinomas de tumor primario desconocido (CUP), metástasís de tumor primario desconocido (MUP) y feocromocitoma, carcinoides.

En una realización adicional la divulgación desvela el uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de las sales de adición de ácido, los solvatos, los hidratos, los polimórficos, los derivados fisiológicamente funcionales o los profármacos de los mismos, farmacológicamente aceptables, para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias seleccionadas del grupo que consiste en: amiloidosis, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn, esclerosis múltiple, esclerosis sistémica (esclerodermia), enfermedad mixta del tejido conjuntivo, síndrome de Sjogren, espondilitis anquilosante, vasculitis autoinmunitaria, síndrome de Behcet, psoriasis, artritis autoinmunitaria, sarcoidosis y diabetes mellitus. En una realización adicional, la invención desvela el uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables, para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de trastornos como se especifica en las reivindicaciones.

Se han identificado genes homólogos que codifican quinasas tipo polo a partir de diversas células eucariotas que oscilan desde hongos (S. cerevisiae, S. pombe, C. albicans), mosca (D. melanogaster) , gusanos (C. elegans) y vertebrados y representan un mecanismo central para regular la progresión mitótica (G1over y col. 1,996, J Cell Biol, 135, páginas 1,681-1,684, Bachewich y col. 2,003, Mol Biol Cell 14, páginas 2,163-2,180). De ese modo, la administración preferentemente local o sistémica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de Fórmula (I), opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de las sales de adición de ácido, los solvatos, los hidratos, los polimórficos o los derivados fisiológicamente funcionales de los mismos, farmacológicamente aceptables, representa un .procedimiento novedoso para tratar enfermedades fúngicas (no forman parte de la invención).

En una realización adicional, la invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables, en el que el principio activo se administra por vía oral, entérica, transdérmica, intravenosa, peritoneal o mediante inyección, preferentemente por vía intravenosa.

La presente descripción describió un compuesto de Fórmula (I), opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y sus mezclas y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos, polimorfos farmacológicamente aceptables, los cuales inhiben la proliferación de varias líneas celulares tumorales humanas, que incluyen pero no se limitan a Saos-2, H4, MDA-MB-435S, MDA-MB453, MCF7, HeLa S3, HCT116, Colo 205, HT29, FaDu, HL-60, K-562, THP-1, HepG2, A549, NCI-H460, NCI-H520, GRANTA-519, Raji, Ramos, BRO, SKOV-3, BxPC-3, Mia CaPa2, DU145, PC-3, NCI-N87, MES-SA, SK-UT-1B y A431.

El siguiente ejemplo ilustra la presente invención sin restringir su ámbito.

La actividad de 4-[[(7R)-8-ciclopentil-7-etil- 5,6,7,8-tetrahidro-5-metil-6-oxo-2-pteridinil]amino]-3- metoxi-N-(1-metil-4-piperidinil)-benzamida, que es un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la invención (compuesto ejemplificado No 46 en la Tabla 2), se puede determinar en ensayos de Citotoxicidad en células cultivadas de tumores de seres humanos y/o por análisis FACS en el caso de que se controle su efecto inhibidor en la progresión del ciclo celular. En ambos procedimientos de ensayo, este compuesto presenta una actividad de buena a muy buena (véase la Tabla 1).

Ensayos de citotoxicidad Alamar BIueMR

El ensayo Alamar BIueMR se diseña para medir cuantitativamente la proliferación de células por incorporación de un indicador de crecimiento fluorométrico/colorimétrico basado en la detección de actividad metabólica.

Cultivo celular: Las diversas líneas celulares de tumores de seres humanos se pueden adquirir de American Type Culture Collection (ATCC) o la German Collection of Microorganisms y Cell Cultures (DSMZ) y se cultivaron en matraces de cultivo de tejido de 75 a 175 cm2 en el medio de cultivo indicado por el proveedor. Las células se mantuvieron a 37 °C y CO²al 5 % en una atmósfera humidificada, con una relación de escisión apropiada. Se usaron células de crecimiento logarítmico para los ensayos.

Condiciones de ensayo: El primer día del experimento se siembran 1000-4000 células (en 100 pl de medio de cultivo) en cada pozo de una placa de 96 pozos, estéril. El número de células usado depende de la velocidad de crecimiento y del tamaño de las células. Se ió dejaron libres ocho pozos en cada placa para tener cabida para controles (4 pozos para medio de cultivo más AlamarBlueMR reducido y 4 pozos para medio de cultivo más AlamarBlueMR oxidado) . Las placas se mantuvieron en la incubadora durante la noche. El segundo día del experimento se prepararon series de diluciones del inhibidor en medio de cultivo que contiene DMSO al 0,1 %. Las concentraciones típicas usadas fueron: 10; 3; 1; 0,3; 0,1; 0,03; 0,01; 0,003 y 0,001 pM. Se añadieron 100 pl de la dilución (concentrado x2) a cada pozo para producir un volumen final de 200 pl por pozo. Como controles, se añadió medio de cultivo normal y medio de cultivo que contiene DMSO al 0,1 %, a los pozos designados. Todos los puntos de datos se hacen por cuadriplicado. Las células se incubaron después durante 72 h. Después de este periodo de incubación se añadieron 20 pl de AlamarBlueMR a cada pozo. Como control, se añadieron 20 pl de AlamarBlueMR reducido (AlamarBlueMR esterilizado en autoclave, durante 30 minutos) a 4 pozos sin células y se añadieron 20 pl de AlamarBlueMR a los 4 pozos restantes sin células. Después de 4-5 h de incubación, las placas se midieron en un espectrofotómetro de fluorescencia (excitación 530 nm, emisión 590 nm, rendijas 15, tiempo de integración 0,1).

Análisis de los datos: Para los cálculos se tomó el valor medio de los cuadruplicados y se substrae el fondo. El valor de DMSO al 0,1 % (la medía obtenida de 8 pozos con células en medio de cultivo con DMSO al 0,1 % pero sin compuesto) se tomó como control del 100 %. Los datos se ajustaron por cálculos iterativos usando un programa de análisis de curvas Sigmoidales (Graph Pad Prism versión 3.03) con pendiente de Hill variable.

Análisis FACS en células de tumores teñidas con IP

El yoduro de propidio (IP) se unió estequiométricamente a ADN bicatenario y de ese modo es un agente adecuado para medir el contenido de células en a Dn para determinar el porcentaje de células que reside en diversas etapas del ciclo celular (fases G0/1-, S-y G2/M), mientras las células en la fase G0 o G1 tienen un contenido (2N) en ADN diploide las células en la fase G2 y M (mitosis) tienen un contenido en ADN doble (4N ).

Cultivo celular: Las diversas líneas celulares de tumores de seres humanos se pueden adquirir de American Type Culture Collection (ATCC) o la German Collection of Microorganisms y Cell Cultures (DSMZ) y se cultivaron en matraces de cultivo de tejido de 75 a 175 cm ² en el medio de cultivo indicado por el proveedor. Las células se mantuvieron a 37 °C y CO2 al 5 % en una atmósfera humidificada, con una relación de escisión apropiada. Se usaron células de crecimiento logarítmico para los ensayos.

Condiciones de ensayo: El primer día del experimento se pusieron en placa 1x10 ⁶ células de tumores en 15 ml de medio de cultivo en cada matraz de cultivo de tejido de 75 cm ² y se devolvieron los cultivos a la incubadora. Al día siguiente se prepararon series de diluciones de dos veces (concentrado x100) del inhibidor en medio de cultivo de tejido que contiene DMSO al 0,1 %. Se añadieron 150 pl de la dilución concentrada x100 a los 15 ml de medio de cultivo en el matraz. Como control, se dio DMSO en un matraz independiente para producir una concentración final de 0,1 %. Las concentraciones finales típicas usadas fueron: 1,6; 0,8; 0,4; 0,2; 0,1; 0,05; 0,025; 0,0125; 0,00625 pM en medio de cultivo que contiene DMSO al 0,1 %. Después de 24 h de incubación se recogieron las células por lavado x2 con PBS y adición posterior de tripsina/AEDT. Las células tripsinizadas se eliminaron por lavado del plástico con BSA al 1 % en PBS. Las células no adherentes en el medio de cultivo y las células en los fluidos de lavado de PBS se aglomeraron junto con las células tripsinizadas centrifugándolas durante 5 min a 105 rad/s (1,000 rpm), a 4 °C. Los sobrenadantes se desecharon y se lavó el botón dos veces con PBS. Después de la aspiración de los sobrenadantes, se volvieron a suspender los botones en el PBS residual (~100 pl). Para fijación celular, se prepararon tubos de ensayo de 15 ml (Falcon) con 5 ml de etanol frío al 80 % y se añadió lentamente la suspensión de células y se mantuvo durante al menos 2 h o durante la noche, a menos 20 °C. Las células fijadas se aglomeraron, se lavaron una vez con PBS y el botón de células se volvió a suspender después en 2 ml de Tritón X-100 al 0,25 % en PBS. Después de 5 min de incubación sobre hielo, se añadieron 5 ml de PBS a cada muestra y se centrifugó de nuevo la muestra a 105 rad/s (1,000 rpm ), durante 5 min, a 4 °C. El sobrenadante se desechó y se volvió a suspender el botón en 0,5 ml de solución de teñido de yoduro de propidio (IP) (RNasa al 0,1 % y 10 pg/ml de yoduro de propidio en PBS). Las células se incubaron durante 20 min en la oscuridad y se transfirieron con posterioridad a tubos de poliestireno de 5 ml.

Análisis de datos: El análisis del contenido en ADN de las células se puede llevar a cabo usando un analizador FACS equipado con un láser de argón (500 mW, emisión 488 nm) y el uso del software de análisis DNA Cell Quest (Beckton Dickinson). La fluorescencia de IP logarítmica se determinó en un filtro de paso de banda (Beckton Dickinson 585/43). La cuantificacion de las poblaciones celulares que residen en las fases individuales del ciclo celular (por ejemplo fases G0/G1-, S- y G2/M) se hizo con el paquete de software ModFit LT de Becton Dickinson. Un valor de EC5O para células detenidas en la fase G2/M del ciclo celular se calcula usando un programa de análisis de curvas Sigmoidales (Graph Pad Prism versión 3,03).

Tabla 1

Un compuesto de Fórmula (I), sus tautómeros, los racematos, los enantiómeros, los díastereoisómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente las sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos farmacológicamente aceptables de los mismos, se pueden usar solos o combinados con otras sustancias activas de acuerdo con la invención, opcionalmente también en combinación con otras sustancias farmacológicamente activas.

Las preparaciones farmacéuticas adecuadas para el uso de acuerdo con la invención incluyen, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, supositorios, soluciones y particularmente, soluciones para inyección (s.c., i.v., i.m.) e infusión intravenosa, jarabes, emulsiones o polvos dispersables. La cantidad de compuesto farmacéuticamente activo en cada caso debería estar en el intervalo de 0,1 - 90 % en peso, preferentemente 0,5 - 50 % en peso de la composición total, es decir, en cantidades que son suficientes para conseguir el intervalo de administración dado a continuación. Las dosis especificadas, si es necesario, se pueden dar varias veces al día.

Se pueden obtener comprimidos adecuados, por ejemplo, por mezcla de la(s) sustancia(s) activa(s) con excipientes conocidos, por ejemplo, diluyentes inertes tales como: carbonato de calcio, fosfato de calcio o lactosa, desintegradores tales como almidón de maíz o ácido algínico, aglutinantes tales como almidón o gelatina, lubricantes tales como estearato de magnesio o talco y/o agentes para liberación retardada, tales como: carboximetilcelulosa, acetato-ftalato de celulosa o poli(acetato de vinilo). Los comprimidos también pueden comprender varias capas.

Se pueden preparar comprimidos recubiertos de acuerdo con esto, recubriendo núcleos producidos de manera análoga a los comprimidos con sustancias normalmente usadas para recubrimientos de comprimidos, por ejemplo, colidona o goma laca, goma arábiga, talco, dióxido de titanio o azúcar. Para conseguir liberación retardada o evitar incompatibilidades, el núcleo puede consistir también en una serie de capas. Similarmente el recubrimiento del comprimido puede consistir en una serie de capas para conseguir liberación retardada, posiblemente usando los excipientes mencionados anteriormente para los comprimidos.

Los jarabes o elixires que contienen las sustancias activas o asociaciones de las mismas de acuerdo- con la invención pueden contener adicionalmente un edulcorante tal como: sacarina, ciclamato, glicerol o azúcar y un potenciador del sabor, por ejemplo, un Saborizante tal como vainillina o extracto de naranja. También pueden contener adyuvantes de suspensión o espesantes tales como: carboximetilcelulosa de sodio, agentes humectantes tales como, por ejemplo, productos de condensación de alcoholes grasos con óxido de etileno o conservadores tales como p-hidroxibenzoatos.

Se prepararon soluciones para inyección e infusión de la manera normal, por ejemplo, con la adición de conservadores tales como p-hidroxibenzoatos o estabilizantes tales como sales de metal alcalino de ácido etilendíaminotetraacético, usando opcionalmente emulsificantes y/o dispersantes, mientras que si se usa agua como el diluyente, se pueden usar opcionalmente disolventes orgánicos como solubilizantes o disolventes auxiliares y transferir a frascos o ampollas de inyección o botes de infusión.

Se pueden preparar por ejemplo, cápsulas que contengan una o más sustancias activas o asociaciones de sustancias activas por mezcla de las sustancias activas con portadores inertes tales como lactosa o sorbitol y envasándolas en cápsulas de gelatina.

Se pueden hacer supositorios adecuados por ejemplo, por mezcla con portadores proporcionados para este propósito, tales como grasas neutras o polietilenglicol o los derivados de los mismos.

Pueden ser excipientes adecuados, por ejemplo, agua, disolventes orgánicos farmacéuticamente aceptables, tales como parafinas (por ejemplo, fracciones de petróleo), aceites de origen vegetal (por ejemplo, aceite de cacahuate o de sésamo), alcoholes mono- o polifuncionales (por ejemplo etanol o glicerol), portadores tales como, por ejemplo polvos minerales naturales (por ejemplo caolín, arcillas, talco, tiza), polvos minerales sintéticos (por ejemplo, sílice y silicatos altamente dispersados), azúcar (por ejemplo glucosa, lactosa y dextrosa), emulsificantes (por ejemplo lignina, Iejías negras sulfiticas, metilcelulosa, almidón y polivinilpirrolidona) y lubricantes (por ejemplo estearato de magnesio, talco, ácido esteárico y Iaurilsulfato de sodio).

Las preparaciones se administran de la manera normal, preferentemente por vía oral o transdérmica, particularmente preferentemente por vía oral. Cuando se administran por vía oral, los comprimidos pueden contener, por supuesto, aditivos tales como por ejemplo citrato de sodio, carbonato de calcio y fosfato dicálcico junto con diversos aditivos, tales como almidón, preferentemente almidón de papa, gelatina y similares, además de los portadores mencionados anteriormente. También se pueden usar lubricantes tales como: estearato de magnesio, laurilsulfato de sodio y talco, para formar comprimidos. En el caso de suspensiones acuosas, las sustancias activas se pueden combinar con diversos potenciadores del sabor o colorantes además de los excipientes mencionados anteriormente.

Para uso parenteral, se pueden preparar soluciones de las sustancias activas usando materiales portadores, líquidos, adecuados.

La dosis para uso intravenoso es 1 - 2000 mg por hora, preferentemente entre 5 - 1000 mg por hora.

Sin embargo, puede ser opcionalmente necesario desviarse de las cantidades especificadas, dependiendo del peso corporal o del procedimiento de administración, la respuesta individual a la medicación, la naturaleza de la formulación usada y el tiempo o el intervalo durante el cual se administra. De ese modo, en algunos casos, puede ser suficiente usar menos de la cantidad mínima especificada anteriormente, mientras en otros casos se tendrá que exceder el límite superior especificado. Cuando se administran grandes cantidades puede ser aconsejable efectuarlos en el día en una serie de dosis únicas.

Los ejemplos de formulación que siguen ilustran la presente invención sin restringir su ámbito:

Ejemplos de formulaciones farmacéuticas

A)

Comprimidos por comprimido

sustancia activa 100 mg

lactosa 140 mg

almidón de maíz 240 mg

polivinilpirrolidona 15 mg

estearato de magnesio 5 mg

500 mg

Se mezclaron juntos la sustancia activa finamente molida, lactosa y algo del almidón de maíz. La mezcla se tamizó, después se humedeció con una solución de polivinilpirrolidona en agua, se amasó, se granuló en húmedo y se seca. Los gránulos, el almidón de maíz restante y el estearato de magnesio se tamizan y se mezclaron juntos. La mezcla se comprimió para producir comprimidos de forma y tamaño adecuados.

B)

Comprimidos por comprimido por comprimido

sustancia activa 80 mg

lactosa 55 mg

almidón de maíz 190 mg

celulosa microcristalina 35 mg

polivinilpirrolidona 15 mg

carboximetilalmidon sódico 23 mg

estearato de magnesio 2 mg

400 mg

Se mezclaron juntos la sustancia activa finamente molida, algo del almidón de maíz, lactosa, celulosa microcristalina y polivinilpirrolidona, la mezcla se tamizó y se trabaja con el almidón de maíz restante y el agua para formar un granulado que se secó y se tamizó. Se añadieron y se mezclaron el carboximetilalmidon de sodio y el estearato de magnesio y la mezcla se comprimió para formar comprimidos de un tamaño adecuado.

C)

Solución de ampolla

sustancia activa 50 mg

cloruro de sodio 50 mg

agua para inyección 5 ml

La sustancia activa se disolvió en agua a su propio pH u opcionalmente a pH 5,5 a 6,5 y se añadió cloruro de sodio para hacerla isotónica. La solución obtenida se filtró para eliminar los pirógenos y el líquido filtrado se transfirió en condiciones asépticas a ampollas que después se esterilizaron y se sellaron por fusión. Las ampollas contenían 5 mg, 25 mg y 50 mg de sustancia activa.

D) Soluciones inyectables adicionales

Se describió un procedimiento para la fabricación del compuesto 4-[[(7-R)-8-ciclopentil-7-etil-5,6,7,8- tetrahidro-5-metil-6-oxo-2-pteridinil]amino]-3-metoxi-N-(1- metil-4-piperidinil)-benzamida, en el documento WO 03/20722 así como en el documento WO 04/76454.

Sin embargo, para claridad de completitud, se describió también de ahora en adelante un procedimiento para la fabricación del compuesto 4-[[(7P)-8-ciclopentil-7-etil-5,6,7,8-tetrahidro-5-metil-6-oxo-2-pteridinil]amino]-3- metoxi-N-(1-metil-4-piperidinil)-benzamida. Este procedimiento se tiene que entender como una ilustración de la invención sin restringirla al contenido de la misma.

Síntesis de 4-[[(7A) -8-ciclopentil-7-et¡l-5. 6,7,8- tetrahidro-5-metil-6-oxo-2-pteridinil1amino1-3-metoxi-N-M-metil-4-p¡perid¡n¡l)-benzam¡da

Para la síntesis, en primer lugar se preparó un compuesto intermedio Z3 como se describió a continuación.

Se suspendieron 54,0 g (0,52 mol) de ácido D-2-aminobutírico en 540 ml de metanol y se combinaron lentamente con 132 g (1,1 mol) de cloruro detionilo mientras se estuvo enfriando con hielo. La mezcla se hizo hervir a reflujo durante 1,5 h y después se concentró. El aceite restante se combinó con 540 ml de ferc-butilmetiléter y se filtraron por succión los cristales incoloros formados. Rendimiento: 78,8 g de un compuesto Z3a (cristales incoloros).

Se disolvieron 74,2 g del compuesto Z3a y 43,5 ml (0,49 mol) de ciclopentanona en 800 ml de diclorometano. Después de la adición de 40,0 g (0,49 mol) de acetato de sodio y 150,0 g (0,7l mol) de triacetoxiborohidruro de sodio a 0 °C, se agitó la mezcla -durante 12 h, a temperatura ambiente y después se añadieron 500 ml de solución de carbonato ácido de sodio al 20 %. La fase acuosa se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre MgSO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 85,8 g de un compuesto Z3b (aceite amarillo claro).

Se suspendieron 40,0 g del compuesto Z3b y 30,0 g (0,22 mol) de carbonato de potasio, en 600 ml de acetona y se combinaron con 45,0 g (0,23 mol) de 2,4-dicloro-5- nitropirimidina en 200 ml de acetona mientras se estuvo enfriando con hielo. Después de 12 h se añadieron unos 5,0 g adicionales de 2,4-dicloro-5-nitropirimidina y se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró, se absorbió en 800 ml de acetato de etilo y 600 ml de agua y se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre MgSO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 75,0 g de un compuesto Z3c (aceite pardo).

Se disolvieron 100 g del compuesto Z3c en 650 ml de ácido acético glacial y a 70 °C se añadieron en forma discontinua 20 g de limaduras de hierro. La mezcla se agitó durante 1 h, a 70 °C, después durante 1,5 h, a 100 °C y después se filtró caliente por díatomita (Jcieselguhr). La mezcla de reacción se concentró, se absorbió en metanol/diclorometano, se aplicó a gel de sílice y se purificó con acetato de etilo por extracción de Soxhlet. Se retiró el disolvente y se agitó el residuo con metanol.

Rendimiento: 30,0 g de un compuesto Z3d (cristales pardo claro).

25,0 g del compuesto Z3d y 6,5 ml (0,1 mol) de yoduro de metilo se pusieron en 250 ml de dimetilacetamida y a -10 °C se añadieron 3,8 g (0,95 mol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. Se agitó durante 20 min, a 0°C, después durante 30 min, a temperatura ambiente y finalmente se añadió hielo. La mezcla de reacción se concentró y se combinó con 300 ml de agua. El precipitado formado se filtró por succión y se lavó con éter de petróleo.

Rendimiento: 23,0 g de un compuesto Z3e (sólido incoloro).

Se suspendieron 6,0 g del compuesto Z3e y 5,1 g (31 mmol) de ácido 4-amino-3-metoxibenzoico en 90 ml de etanol y 350 ml de agua, se combinaron con 3,5 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 48 h. La mezcla de reacción se concentró, el residuo se agitó con metanol/éter dietílico y el precipitado formado se filtró por succión.

Rendimiento: 6,3 g de un compuesto Z3 (cristales beis claro).

Se obtuvo 4-[[(7R)-8-ciclopentil-7-etil-5, 6, 7,8- tetrahidro-5-metil-6-oxo-2-pteridinil]amino]-3-metoxi-N- (1- metil-4-piperidinil)-benzamida, como se describió a continuación.

Se disolvieron 0,15 g del compuesto Z3, 0,12 g de TBTU, 0,12 ml de DIPEA, en 5 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 50 mg de 1-metil-4-aminopiperidina y la mezcla se agitó durante unas 2,5 horas adicionales, a 25 °C. Después se extrajo la solución con agua y después se concentró. Se disolvió el residuo en acetato de etilo caliente y se cristalizó de éter y éter de petróleo.

Rendimiento: 0,025 g de cristales blancos. P.f: 203 °C como la base.

Todos los compuestos de Fórmula (I) de acuerdo con la invención se pueden preparar por los procedimientos A de síntesis, descritos de ahora en adelante, mientras los sustituyentes de Fórmula general (A1) a (A9) tienen los significados dados anteriormente. Este procedimiento se tiene que entender como una ilustración de la invención sin restringirla al contenido de la misma.

Procedimiento A

Etapa 1A

Un compuesto de Fórmula (A1) se hizo reaccionar con un compuesto de Fórmula (A2) para obtener un compuesto de Fórmula (A3) (Diagrama 1A). Esta reacción se puede llevar a cabo según la solicitud de patente internacional WO 00/43369 o la solicitud de patente internacional Wo 00/43372. El compuesto (A1) está comercialmente disponible, por ejemplo, de City Chemical LLC, 139 Allings Crossing Road, West Haven, CT, 06516, EE. UU. Se puede preparar compuesto (A2) por procedimientos conocidos de la bibliografía: (a) F. Effenberger, U. Burkhart, J. Willfahrt Liebigs Ann. Chem. 1986, 314-333; (b) T. Fukuyama, C.-K. Jow, M. Cheung, Tetrahedron Lett. 1995, 36, 6373-6374; (c) R. K. Olsen, J. Org. Chem. 1970, 35, 1912-1915; (d) F.E. Dutton, B.H. Byung Tetrahedron Lett. 1998, 30, 5313-5316; (e) J. M. Ranajuhi, M. M. Joullie Synth. Commun. 1996, 26, 1379-1384.).

Diagrama 1A

En la etapa 1A, 1 equivalente del compuesto (A1) y 1 a 1,5 equivalentes, preferentemente 1,1 equivalentes de una base, preferentemente carbonato de potasio, carbonato ácido de potasio, carbonato de sodio o carbonato ácido de sodio, carbonato de calcio, lo más preferentemente carbonato de potasio, se agitaron en un diluyente mezclado opcionalmente con agua, por ejemplo, acetona, tetrahidrofurano, éter dietílico, ciclohexano, éter de petrolero o dioxano, preferentemente ciclohexano o éter dietílico.

A una temperatura de 0 a 15 °C, preferentemente 5 a 10 °C, se añadió gota a gota 1 equivalente de un aminoácido de Fórmula (A2), se disolvió en un disolvente orgánico, por ejemplo acetona, tetrahidrofurano, éter dietílico, ciclohexano o dioxano. Se calentó la mezcla de reacción a una temperatura de 18 °C a 30 °C, preferentemente aproximadamente 22°C, con agitación y después se agitó durante unas 10 a 24 horas, adicionales, preferentemente aproximadamente 12 horas. Después se separó por destilación el diluyente, se combinó el residuo con agua y la mezcla se extrajo dos a tres veces con un disolvente orgánico, tal como éter dietílico o acetato de etilo, preferentemente acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron y se separó por destilación el disolvente. El residuo (compuesto A3) se puede usar en la Etapa 2 sin ninguna purificación previa.

Etapa 2A

El compuesto obtenido en la Etapa 1A (A3) se redujo al grupo nitro y se cicló para formar el compuesto de Fórmula (A4) (Diagrama 2A).

Diagrama 2A

En la Etapa 2A, 1 equivalente del compuesto nitro (A3) se disolvió en un ácido, preferentemente ácido acético glacial, ácido fórmico o ácido clorhídrico, preferentemente ácido acético glacial y se calentó a 50 a 70 °C, preferentemente aproximadamente 60 °C. Después se añadió un agente reductor, por ejemplo, cinc, estaño o hierro, preferentemente limaduras de hierro, para completar la reacción exotérmica y se agitó la mezcla durante 0,2 a 2 horas, preferentemente 0,5 horas, a 100 a 125 °C, preferentemente a aproximadamente 117 °C. Después de enfriamiento a temperatura ambiente, la sal de hierro se separó por filtración y se separó por destilación el disolvente. Se absorbió el residuo en un disolvente o mezcla de disolventes, por ejemplo acetato de etilo o diclorometano/metanol 9/1 y solución de NaCl semisaturada y se filtró por kieselgur, por ejemplo. La fase orgánica se secó y se concentró. Se puede purificar el residuo (compuesto (A4)) por cromatografía o por cristalización o usar como el producto bruto en la Etapa 3A de la síntesis.

Etapa 3A

Se puede hacer reaccionar el compuesto obtenido en la Etapa 2A (A4) por sustitución electrófila como se muestra en el Diagrama 3A para obtener el compuesto de Fórmula (A5).

Diagrama 3A

En la Etapa 3A se disolvió 1 equivalente de la amida de Fórmula (A4) en un disolvente orgánico, por ejemplo, dimetilformamida o dimetilacetamida, preferentemente dimetilacetamida y se enfrió a aproximadamente -5 a 5 °C, preferentemente 0 °C.

Después se añadieron 0,9 a 1,3 equivalentes de hidruro de sodio y 0,9 a 1,3 equivalentes de un reactivo metilante, por ejemplo yoduro de metilo. Se agitó la mezcla de reacción durante 0 ,1 -3 horas, preferentemente aproximadamente 1 hora, a aproximadamente 0 a 10 °C, preferentemente a aproximadamente 5 °C y se puede dejar reposar opcionalmente durante unas 12 horas adicionales a esta temperatura. La mezcla de reacción se vertió sobre agua de hielo y se aisló el precipitado. Se puede purificar el residuo (compuesto (A5)) por cromatografía, preferentemente sobre gel de sílice o por cristalización, o usar como el producto bruto en la etapa 4A de la síntesis.

Etapa 4A

La aminación del compuesto (A5) obtenido en la Etapa 3A para producir el- compuesto de Fórmula (A9) (Diagrama 4A) se puede llevar a cabo usando los procedimientos conocidos de la bibliografía, para las variantes 4,1 A de por ejemplo (a) M.P.V. Boarland, J.F.W. McOmie J. Chem. Soc. 1951, 1218-1221 o (b) F. H. S. Curd, F. C. Rose J. Chem. Soc. 1946, 343-348, para las variantes 4,2 A de por ejemplo (a) Banks J. Am. Chem. Soc. 1944, 66, 1131, (b) Ghosh y Dolly J. Indian Chem. Soc. 1981, 58, 512-513 o (c) N. P. Reddy y M. Tanaka Tetrahedron Lett. 1997, 38, 4807-4810.

Diagrama 4A

Por ejemplo, en la variante 4,1 A, 1 equivalente del compuesto (A5) y 1 a 3 equivalentes, preferentemente aproximadamente 2 equivalentes del compuesto (A6) se calentaron sin un disolvente o en un disolvente orgánico tal como por ejemplo sulfolano, dimetilformamida, dimetilacetamida, tolueno, N-metilpirrolidona, dimetilsulfóxido o dioxano, preferentemente sulfolano, durante 0,1 a 4 horas, preferentemente 1 hora, a 100 a 220 °C, preferentemente a aproximadamente 160 °C. Después de enfriamiento, se cristalizó el producto (A9) por la adición de disolventes orgánicos o mezclas de disolventes, por ejemplo éter dietílico/metanol, acetato de etilo, cloruro de metileno o éter dietílico, preferentemente éter dietílico/metanol 9/1 o purificado por cromatografía.

Por ejemplo, en la variante 4,2 A , se agitó 1 equivalente del compuesto (A5) y 1 a 3 equivalentes del compuesto (A6), con ácido, por ejemplo 1-10 equivalentes de ácido clorhídrico al 10-38 % y/o un alcohol, por ejemplo: etanol, propanol, butanol, preferentemente etanol, a temperatura de reflujo, durante 1 a 48 horas, preferentemente aproximadamente 5 horas. El producto precipitado (A9) se separó por filtración y se lavó opcionalmente con agua, se secó y se cristalizó de un disolvente orgánico adecuado.

Por ejemplo, en la variante 4,3 A, se disolvió 1 equivalente del compuesto (A5) y 1 a 3 equivalentes del compuesto (A7) en un disolvente, por ejemplo tolueno o dioxano y se combinó con un ligando de fosfina, por ejemplo 2,2'-bis-(difenilfosfino)-1,1 '-binaftilo y un catalizador de paladio, por ejemplo tris(dibenciliden-acetona)- dipaladio(0) y una base, por ejemplo carbonato de cesio y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 1-24 h, preferentemente 17 h. La mezcla de reacción se purificó por ejemplo sobre gel de sílice y el producto (A8) se aisló de la solución o se obtuvo por cristalización adecuada. Se disolvió el producto (A8) en un disolvente adecuado, por ejemplo dioxano y se mezcló con ácido, por ejemplo ácido clorhídrico semiconcentrado, por ejemplo en la relación de disolvente a ácido de 3:1. Después se calentó la mezcla para hacerla hervir a reflujo durante 1 - 48 h, por ejemplo 12 h y se aisló el precipitado formado. Si se desea se purifica el producto (A9) por cristalización.

Etapa 5A

Diagrama 5A

Por ejemplo, se disolvió 1 equivalente del compuesto (A9) con 1 equivalente de un reactivo activador, por ejemplo tetrafluoroborato de O-benzotriazolil- N,N,N',N'-tetrametiluronio (TBTU) y una base, por ejemplo 1,5 equivalentes de diisopropiletilamina (DIPEA) en un diluyente orgánico, por ejemplo diclorometano, tetrahidrofurano, dimetilformamida, M-metilpirrolidona, dimetilacetamida, preferentemente diclorometano o dimetilformamida. Después de la adición de 1 equivalente de la amina (A10) se agitó la mezcla de reacción durante 0,1 a 24 horas, preferentemente aproximadamente 2 horas, a 20 °C a 100 °C. Se obtiene el producto de Fórmula (A11) por ejemplo por cristalización o purificación cromatográfica.

Se pueden sintetizar los compuestos de Fórmula general (I) de manera análoga a los siguientes ejemplos de síntesis. La numeración de los Ejemplos corresponde a la numeración usada en la Tabla 2. Se desea, sin embargo, que estos ejemplos sean sólo ejemplos de procedimientos para ilustrar la invención adicionalmente, sin restringir la invención a su contenido.

También se describió de ahora en adelante la preparación de algunos compuestos intermedios usados para sintetizar los compuestos.

Preparación de los ácidos

Para sintetizar los compuestos de los Ejemplos de referencia 94 y 95 de la Tabla 2, primero se preparó un compuesto intermedio Z1,

como se describió de ahora en adelante.

Se pusieron 50,0 g (0,48 mol) del éster metílico de D-alanina x HCl y 49,1 g (0,50 mol) de ciclohexanona, en 300 ml de diclorometano y después se combinaron con 41,0 g (0,50 mol) de acetato de sodio y 159,0 g (0,75 mol) de triacetoxiborohidruro de sodio. La mezcla se agitó durante la noche y después se añadieron 300 ml de solución de carbonato ácido de sodio al 10 %. La fase acuosa se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución de carbonato ácido de sodio al 10 %, se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 72,5 g de un compuesto Z1a (líquido claro).

72,5 g del compuesto Z1a se pusieron en 500 ml de agua y se añadieron 76,6 g (0,39 mol) de 2,4-dicloro-5-nitropirimidina en 500 ml de éter dietílico. A una temperatura de -5 °C se añadieron gota a gota 100 ml de solución de carbonato ácido de potasio al 10%. La mezcla se agitó durante 3 h, a -5 °C y durante unas 12 h adicionales a temperatura ambiente. La fase orgánica se separó y se secó sobre Na²SO⁴. En la evaporación, el producto cristalizó. Rendimiento: 48,0 g de un compuesto Z1b (cristales amarillos).

Se disolvieron 48,0 g del compuesto Z1b en 350 ml de ácido acético glacial y se calentó a 60 °C. Se añadieron 47,5 g de limaduras de hierro, mientras la temperatura aumenta a 105 °C. La mezcla de reacción se agitó durante tres horas, a 80 °C, después se filtró caliente por celulosa y se concentró. El residuo se agitó en agua y acetato de etilo, se filtró por succión y el precipitado gris claro se lavó con acetato de etilo. El líquido filtrado se lavó con amoniaco diluido y agua, la fase orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró por carbón vegetal activado y se concentró. Se obtienen algunos sólidos más gris claro.

Rendimiento: 29,5 g de un compuesto Z1c (cristales grises claro).

Se pusieron 32,1 g del compuesto Z1c en 300 ml de dimetilacetamida y se combinó con 13 ml (0,2 mol) de yoduro de metilo. A -5 °C, se añadieron de forma discontinua 6,4 g (0,16 mol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. Después de 2 h, se vertió la mezcla de reacción sobre 800 ml de agua de hielo. El precipitado formado se filtró por succión y se lavó con éter de petróleo.

Rendimiento: 33,0 g de un compuesto Z1d (cristales beis).

Se suspendieron 4,0 g del compuesto Z1d y 2,3 g (15 mmol) de ácido 4-amino-3-metilbenzoico en 50 ml de etanol y 120 ml de agua, se combinaron con 2 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 48 h. Se filtró por succión el precipitado formado en el enfriamiento y se lavó con agua, etanol y éter dietílico. Rendimiento: 2,9 g de un compuesto Z1 (cristales incoloros).

Para sintetizar los compuestos del Ejemplo de referencia 188 y el Ejemplo de referencia203 de la Tabla 2, en primer lugar se preparó un compuesto intermedio Z2

como se describió a continuación.

Se combinó una solución de 128,2 g (0,83 mol) de éster etílico de D-alanina x HCl y 71,5 g (0,85 mol) de ciclopentanona en 1500 ml de diclorometano, con 70,1 (0,85 mol) de acetato de sodio y 265,6 g (1,25 mol) de triacetoxiborohidruro de sodio. Se agitó la mezcla de reacción, durante 12 h y después se vertió en 1,5 1 de una solución de carbonato ácido de sodio al 10 %. La fase acuosa se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 143,4 g de un compuesto Z2a (aceite incoloro).

Se pusieron 66,0 g del compuesto Z2a en 500 ml de agua y se combinaron con 85,0 g (0,44 mol) de 2,4-dicloro- 5-nitropirimidina en 500 ml de éter dietílico. A -5 °C, se añadieron gota a gota 100 ml de solución de carbonato ácido de potasio al 10 % y la mezcla de reacción se agitó durante 48 h, a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con éter dietílico, las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na³SO⁴y se concentraron. El sólido rojo oscuro se agitó con éter de petróleo y se filtró por succión.

Rendimiento: 88,0 g de un compuesto Z2b (cristales amarillos).

88,0. g del compuesto Z2b se disolvieron en 1000 ml de ácido acético glacial y a 60 °C se combinaron en forma discontinua con 85 g de limaduras de hierro, mientras la temperatura aumenta a 110 °C. Se agitó durante 1 h, a 60 °C, después se filtró por succión caliente por celulosa y se concentró. El sólido pardo se agitó con 700 ml de agua y se filtró por succión.

Rendimiento: 53,3 g de un compuesto Z2c (cristales pardo claro).

53,3 g del compuesto Z2c se disolvieron en 300 ml de dimetilacetamida y se combinaron con 13 ml (0,21 mol) de yoduro de metilo. A -5 °C, se añadieron en forma discontinua 5,0 g (0,21 mol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. Después de 12 h, la mezcla de reacción se vertió sobre 1000 ml de agua de hielo y el precipitado formado se filtró por succión.

Rendimiento: 40,0 g de un compuesto Z2d (cristales incoloros).

4,0 g del compuesto Z2d y 2,8 g (16 mmol) de ácido 4-amino-3-clorobenzoico se suspendieron en 25 ml de etanol y 60 ml de agua, se combinaron con 3 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 43 h. El precipitado formado en el enfriamiento se filtró por succión y se lavó con agua, etanol y éter dietílico. Rendimiento: 0,9 g de un compuesto Z2 (cristales incoloros).

Para sintetizar los compuestos de los Ejemplos de referencia 19, 21, 22, 23, 45, 46, 55, 58, 116, 128, 131, 133, 134, 136, 138,177, 217, 231,239, 46, 184, 166 y 187 y el Ejemplo 46 de la Tabla 2, en primer lugar se preparó un compuesto intermedio Z3

como se describió a continuación.

Se suspendieron 54,0 g (0,52 mol) de ácido D-2- aminobutírico en 540 ml de metanol y se combinaron lentamente con 132 g (1,1 mol) de cloruro detionilo mientras se estuvo enfriando con hielo. La mezcla se hizo hervir a reflujo durante 1,5 h y después se concentró. El aceite restante se combinó con 540 ml de éter ferc-butílico y se filtraron por succión los cristales incoloros formados.

Rendimiento: 78,8 g de un compuesto Z3a (cristales incoloros).

Se disolvieron 74,2 g del compuesto Z3a y 43,5 ml (0,49 mol) de ciclopentanona en 800 ml de diclorometano. Después de la adición de 40,0 g (0,49 mol) de acetato de sodio y 150,0 g (0,71 mol) de triacetoxiborohidruro de sodio, a 0 °C, se agitó la mezcla durante 12 h, a temperatura ambiente y después se añadieron 500 ml de solución de carbonato ácido de sodio al 20 %. La fase acuosa se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre MgSO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 85,8 g de un compuesto Z3b (aceite amarillo claro).

Se suspendieron 40,0 g del compuesto Z3b y 30,0 g (0,22 mol) de carbonato de potasio en 600 ml de acetona y se combinaron con 45,0 g (0,23 mol) de 2,4-dicloro-5- nitropirimidina en 200 ml de acetona mientras se estuvo enfriando con hielo. Después de 12 h, se añadieron unos 5,0 g adicionales de 2,4-dicloro-5-nitropirimidina y se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró, se absorbió en 800 ml de acetato de etilo y 600 ml de agua y se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre MgSO⁴y se concentraron,

Rendimiento: 75,0 g de un compuesto Z3c (aceite pardo).

Se disolvieron 100 g del compuesto Z3c en 650 ml de ácido acético glacial y a 70 °C, se añadieron en forma discontinua 20 g de limaduras de hierro. La mezcla se agitó durante 1 h a 70 °C, después durante 1,5 h, a 100 °C y después se filtró caliente por kieselgur. La mezcla de reacción se concentró, se absorbió en metanol/diclorometano, se aplicó a gel de sílice y se purificó con acetato de etilo por extracción de Soxhlet. Se retiró el disolvente y se agitó el residuo con metanol.

Rendimiento: -30,0 g de un compuesto Z3d (cristales pardo claro).

Se pusieron 25,0 g del compuesto Z3d y 6,5 ml (0,1 mol) de yoduro de metilo en 250 ml de dimetilacetamida y, a -10 °C, se añadieron 3,8 g (0,95 mol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. Se agitó durante 20 min, a 0 °C, después durante 30 min a temperatura ambiente y finalmente se añadió hielo. La mezcla de reacción se concentró y se combinó con 300 ml de agua. El precipitado formado se filtró por succión y se lavó con éter de petróleo.

Rendimiento: 23,0 g de un compuesto Z3e (sólido incoloro).

Se suspendieron 6,0 g del compuesto Z3e y 5,1 g (31 mmol) de ácido 4-amino-3-metoxibenzoico, en 90 ml de etanol y 350 ml de agua, se combinaron con 3,5 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 48 h. La mezcla de reacción se concentró, se agitó el residuo con metanol/éter dietílico y se filtró por succión el precipitado formado.

Rendimiento: 6,3 g de un compuesto Z3 (cristales beis claro).

Para sintetizar el compuesto de los Ejemplos de referencia 81, 82, 93 y 137 de la Tabla 2, se preparó en primer lugar un compuesto intermedio Z4

como se describió a continuación.

Se disolvieron 25,0 g (0,19 mol) de 1-aminociclopropan-1-carboxilato de etilo x HCl y 16,8 g (0,20 mol) de ciclopentanona en 300 ml de diclorometano y se combinaron con 16,4 g (0,20 mol) de acetato de sodio y 61,7 g (0,29 mol) de triacetoxiborohidruro de sodio. Se agitó durante la noche y después se vertió la mezcla de reacción sobre 400 ml de solución de carbonato ácido de sodio al 10 %. La fase acuosa se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 34,5 g de un compuesto Z4a (aceite incoloro).

Se añadieron 42,5 g (0,22 mol) de 2,4-dicloro-5-nitropirimidina en 350 ml de éter dietílico, a una mezcla de 34,5 g del compuesto Z4a en 350 ml de agua. A -5 °C, se combinó la mezcla con 80 ml de solución de carbonato ácido - de potasio al 10 % y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con éter dietílico. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron.

Rendimiento: 53,8 g de un compuesto Z4b (aceite pardo).

Se disolvieron 20,1 g del compuesto Z4b en 200 ml de ácido acético glacial y se combinaron de forma discontinua, a 60 °C, con 19,1 g de limaduras de hierro, tiempo durante el cual se aumenta la temperatura a 100 °C. La mezcla se agitó durante 3 h, a 60 °C, después se filtró por succión por celulosa y se concentró. El residuo se agitó en agua y acetato de etilo y se filtró por succión el precipitado amarillo. El líquido filtrado se lavó con amoniaco diluido y agua, la fase orgánica se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. Después de la adición de éter dietílico cristalizó producto adicional.

Rendimiento: 4,0 g de un compuesto Z4c (cristales amarillos).

Se disolvieron 7,8 g del compuesto Z4c y 2,6 ml (0,04 mol) de yoduro de metilo, en 100 ml de dimetilacetamida y, a -5 °C, se añadieron de forma discontinua 1,5 g (0,04 mol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. Después de 2 h, la mezcla de reacción se vertió sobre agua de hielo y el -precipitado formado se filtró por succión.

Rendimiento: 7,5 g de un compuesto Z4d (cristales pardo claro).

Se suspendieron 3,0 g del compuesto Z4d y 1,9 g (11 mmol) de ácido 4-amino-3-metoxibenzoico en 40 ml de etanol y 80 ml de agua, se combinaron con 2 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 20 h. Se añadieron unos 0,5 g adicionales de ácido 4-amino-3-metoxibenzoico y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 48 h. El precipitado formado en el enfriamiento se filtró por succión y se lavó con agua, etanol y éter dietílico.

Rendimiento: 2,1 g de un compuesto Z4 (cristales incoloros) p.f.: 222-223 °C.

Para sintetizar los compuestos de los Ejemplos de referencia 162, 43, 53, 161, 202, 211, 215 y 212 de la Tabla 2, se preparó en primer lugar un compuesto intermedio Z5

como se describió a continuación.

Una mezcla de 73,4 ml (0,5 mol) de 2-bromoisobutirato de etilo, 87,1 ml (0,75 mol) de 3-metil-1-butilamina, 82,5 g (0,6 mol) de yoduro de sodio y 76,0 g (0,6 mol) de carbonato de potasio en 1000 ml de acetato de etilo, se calentó para hacerla hervir a reflujo durante 3 días. Se separó por filtración cualquier sal presente y se concentró el líquido filtrado.

Rendimiento: 97,0 g de un compuesto Z5a (aceite rojo).

Se suspendieron 49,0 g (0,25 mol) de 2,4-dicloro- 5-nitropirimidina y 38,3 g (0,28 mol) de carbonato de potasio, en 500 ml de acetona y, a 0 °C, se combinaron con 93,0 g del compuesto Z5a en 375 ml de acetona. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se filtró y se concentró. El residuo se disuelto en acetato de etilo se lavó con agua y la fase orgánica se secó sobre MgSO⁴y se concentró.

Rendimiento: 102,7 g de un compuesto Z5b (aceite pardo).

Se disolvieron 22,7 g del compuesto Z5b en 350 ml de ácido acético glacial y, a 60 °C, se combinaron de forma discontinua con 17,4 g de limaduras de hierro. Después de que termina la adición, la mezcla se calentó para hacerla hervir a reflujo durante 0,5 h, se filtró caliente y se concentró. Él residuo se absorbió en 200 ml de diclorometano/metanol (9:1) y se lavó con solución de cloruro de sodio. La fase orgánica se filtró por succión por kieselgur, se secó sobre MgSO⁴, se concentró y se purificó por cromatografía de columna (eluyente: acetato de etilo/ciclohexano 1:1).

Rendimiento: 1,9 g de un compuesto Z5c (cristales incoloros).

Se disolvieron 1,9 g del compuesto Z5c en 32 ml de dimetilacetamida y mientras se estuvo enfriando con hielo se combinó con 0,3 g (7 mmol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. Después de 10 min, se añadieron 0,5 ml (7 mmol) de yoduro de metilo y se agitó durante 3 h, a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró y se combinó con agua. El precipitado formado se filtró por succión y se lavó con éter de petróleo.

Rendimiento: 1,6 g de un compuesto Z5d (cristales incoloros).

Se suspendieron 14,0 g del compuesto Z5d y 10,0 g (0,06 mol) de ácido 4-amino-3-metoxibenzoico, en 200 ml de dioxano y 80 ml de agua, se combinaron con 10 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 40 h. El precipitado formado en el enfriamiento se filtró por succión y se lavó con agua, - dioxano y éter dietílico.

Rendimiento: 13,9 g de un compuesto Z5 (cristales incoloros).

Para sintetizar los compuestos de los Ejemplos de referencia 88, 194, 229 y 89 de la Tabla 2, se preparó en primer lugar un compuesto intermedio Z6,

como se describió a continuación.

Se pusieron 6,0 a (0,06 mol) de ácido L-2-aminobutirico en 80 ml de ácido sulfúrico 0,5 M y, a 0 °C, se combinaron con 5,5 g (0,08 mol) de nitrito de sodio en 15 ml de agua. La mezcla de reacción se agitó durante 22 h, a 0 °C, se combinaron con sulfato de amonio y se filtró. El líquido filtrado se extrajo con éter dietílico y la parte orgánica combinada se secó sobre MgSO4 y se concentró.

Rendimiento: 6,0 g de un compuesto Z6a (aceite amarillo).

Se combinaron sucesivamente 200 ml de metanol con 65,0 ml (0,89 mol) de cloruro de tionilo y 76,0 g del compuesto Z6a en 50 ml de metanol mientras se estuvo enfriando con hielo. La mezcla resultante se agitó durante 1 h, a0 °C y 2 h a temperatura ambiente y después el metanol y el cloruro de tionilo restante se eliminaron a vacío, a 0 °C.

Rendimiento: 40,0 g de un compuesto Z6b (aceite amarillo).

Se pusieron 30,0 ml (0,17 mol) de anhídrido de ácido trifluorometansulfonico en 150 ml de diclorometano y mientras se estuvo enfriando con hielo se añadió una solución de 20,0 g del compuesto Z6by 14,0 ml (0,17 mol) de piridina en 50 ml de diclorometano, en una hora. La mezcla se agitó durante 2 h, a temperatura ambiente, se filtró por succión cualquier sal formada y después se lavó con 100 ml de agua. La fase orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró. Rendimiento: 42,0 g de un compuesto Z6c (aceite amarillo claro).

Se añadieron gota a gota, en una hora, 42,0 g del compuesto Z6c en 200 ml de diclorometano, a una solución de 15,5 ml (0,17 mol) de anilina y 24,0 ml (0,17 mol) de trietilamina en 400 ml de diclorometano mientras se estuvo enfriando con hielo. La mezcla se agitó durante 1 h, a temperatura ambiente y unas 2 h adicionales a 35 °C. La mezcla de reacción se lavó con agua, se secó sobre MgSO4 y se concentró. Se purificó el residuo restante por destilación (95 100 °C; 0,1 Pa).

Rendimiento: 14,0 de un compuesto Z6d (aceite incoloro).

Se suspendieron 14,0 g del compuesto Z6dy 16,0 g (0,1 mol) de carbonato de potasio en 100 ml de acetona y a 10 °C se combinaron con 16,0 g (0,08 mol) de 2,4-dicloro-5-nitropirimidina. La mezcla se agitó durante 4 h, a 40 °C, cualquier sal formada se filtró por succión y se concentró el líquido filtrado. Se absorbió el residuo en 300 ml de acetato de etilo y se lavó con agua. La fase orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró.

Rendimiento: 31,0 g de un compuesto Z6e (aceite pardo).

Se disolvieron 31,0 g del compuesto Z6e en 200 ml de ácido acético glacial y, a 60 °C, se combinaron de forma discontinua con 10 g de limaduras de hierro, tiempo durante el cual se aumenta la temperatura a 85 °C. La mezcla se agitó durante una hora adicional, a 60 °C, se filtró por kieselgury se concentró. El residuo se agitó con metanol. Rendimiento: 4,5 g de un compuesto Z6f (cristales pardos).

A -20 °C, se añadieron de forma discontinua 0,6 g (16 mmol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina, a una mezcla de 4,5 g del compuesto Z6f y 1,0 ml (16 mmol) de yoduro de metilo en 100 ml de dimetilacetamida. Después de 1 h, se combinó la mezcla de reacción con 50 ml de agua y se concentró. El residuo se agitó con 200 ml de agua, el precipitado se filtró por succión y se lavó con éter de petróleo.

Rendimiento: 4,5 g de un compuesto Z6 g (cristales incoloros).

Una suspensión de 1,5 g del compuesto Z6 g y 1,4 g (8 mmol) de 4-amino-3-metoxibenzoato de metilo en 30 ml de tolueno se combinó con 0,4 g (0,6 mmol) de 2,2'-bis-(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo, 0,23 g (0,3 mmol) de tris(dibencilidenoacetona)-dipaladio(0) y 7,0 g (21 mmol) de carbonato de cesio y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 17 h. La mezcla de reacción se aplicó a gel de sílice y se purificó por cromatografía de columna (eluyente: diclorometano/metanol 9:1).

Rendimiento: 1,7 g de un compuesto Z6 h (cristales amarillos).

Se disolvieron 1,7 g del compuesto Z6 h en 50 ml de dioxano, se combinaron con 15 ml de ácido clorhídrico semiconcentrado y se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 12 h. Después de enfriamiento, el precipitado formado se filtró por succión.

Rendimiento: 1,1 g de un compuesto Z6 (sólido incoloro).

Para sintetizar los compuestos de los Ejemplos de referencia 26, 20, 32, 56, 101, 112 y 209 de la Tabla 2, se preparó en primer lugar un compuesto intermedio Z7

como se describió a continuación.

Se suspendieron 50,0 g (0,36 mol) de éster metílico de D-alanina x HCl en 500 ml de diclorometano y 35 ml de acetona y se combinaron con 30,0 g (0,37 mol) de acetato de sodio y 80,0 g (0,38 mol) de triacetoxiborohidruro de sodio. La mezcla se agitó durante 12 h y después se vertió sobre 400 ml de solución de carbonato ácido de sodio al 10 %. La fase orgánica se secó sobre Na²SO⁴y se concentró.

Rendimiento: 51,0 g de un compuesto Z7a (aceite amarillo).

Una suspensión de 51,0 g del compuesto Z7a en 450 ml de agua se combinaron con 80,0 g (0,41 mol) de 2,4- dicloro-5-nitropiridina en 450 ml de éter dietílico. A -5 °C, se añadieron, gota a gota ,-100 ml de- solución de carbonato ácido de potasio al 10 %. La mezcla de reacción se agitó durante 3 h, la fase orgánica se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. Rendimiento: 74 g de un compuesto Z7b (aceite amarillo).

Se disolvieron 18,6 g del compuesto Z7b en 200 ml de ácido acético glacial y, a 60 °C, se combinaron de forma discontinua con 20,0 g de limaduras de hierro. La mezcla se agitó, durante 2 h, a 60 °C y después se filtró por succión por celulosa. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y amoniaco concentrado. La fase orgánica se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. El residuo se cristalizó de éter dietílico.

Rendimiento: 9,8 g de un compuesto Z7c (cristales incoloros).

Se disolvieron 17,0 g del compuesto Z7c y 7 ml (0,1 mol) de yoduro de metilo, en 200 ml de dimetilacetamida y, a -5 °C, se combinaron con 4,0 g 40,1 mol) de hidruro de sodio como una dispersión al 60 % en aceite de parafina. La mezcla de reacción se agitó durante 30 min y después se vertió sobre 300 ml de agua de hielo. El precipitado formado se filtró por succión y se agitó con éter de petróleo.

Rendimiento: 14,8 g de un compuesto Z7d (cristales beis).

Se calentaron 0,9 g del compuesto Z7d y 1,5 g (9 mmol) de ácido 4-amino-3-metoxibenzoico, a 210 °C, durante 30 min. Después de enfriamiento, el residuo se agitó con acetato de etilo y el precipitado obtenido se filtró por succión. Rendimiento: 1,2 g de un compuesto Z7 (cristales grises).

Los siguientes ácidos, se pueden preparar por ejemplo, de manera análoga a los procedimientos de síntesis descritos anteriormente.

Síntesis de los componentes amino L-R5

Las siguientes aminas,

1,1-dimetil-2-dimetilamino-1-il-etilamina y 1,1-dimetil-2-piperidin-1-il-etilamina,

se pueden obtener como sigue.

Los compuestos se pueden preparar según Las siguientes referencias: (a) S. Schuetz y col. Arzneimittel- Forschung 1971, 21, 739-763, (b) V. M. Belikov y col.Tetrahedron 1970, 26, 1,199-1,216 y (c) E.B. Butler y McMillan J. Amer. Chem. Soc. 1950, 72, 2978.

Otras aminas se pueden preparar como sigue, de una manera modificada comparado con la bibliografía descrita anteriormente.

1.1-dimet¡l-2-morfol¡n-1-¡l-et¡lam¡na

Se prepararon 8,7 ml de morfolina y 9,3 ml de 2-nitropropano mientras se estuvo enfriando la reacción con hielo, 7,5 ml de formaldehído (37 %) y 4 ml de una solución de NaOH de 0,5 mol/1 se añadieron lentamente, gota a gota (<10 °C). Después se agitó la mezcla, durante 1 h, a 25 °C y 1 h a 50 °C. La solución se trató con agua y éter y la fase acuosa se extrajo x3 con éter. La fase orgánica combinada se secó sobre NaSO⁴y se combinó con HCl en dioxano (4 mol/1), el precipitado formado se filtró por succión. Rendimiento: 21,7 de polvo blanco. Se disolvieron 5 g del polvo blanco en 80 ml de metanol y con la adición de 2 g de RaNi tratados con hidrógeno, a 35 °C y 345 kPa, durante 40 minutos. Esto produjo 3,6 g de 1,1-dimetil-2- morfoIin-1-i1-etilamina.

Las siguientes aminas se pueden preparar de manera análoga.

1.1-dimet¡1-N-met¡Ip¡peraz¡n-1-¡1-et¡lam¡na

1.1-dimet¡l-2-p¡rrol¡d¡n-1-¡l-et¡lam¡na

1.3-dimorfol¡n-2-am¡no-propano

Se disolvieron 5 g de 1,3 Dimorfolin-2-nitropropano obtenidos de Messrs. Se disolvió Aldrich en 80 ml de metanol y se trató con hidrógeno, durante 5,5 h, a 30 °C y 345 kPa, con la adición de 2 g de RaNi. Esto produjo 4,2 g de 1,3 dimorfolin-2-amino-propano.

4-AminobenciImorfolina

La preparación de esta amina se describió en la siguiente referencia: S. Mitsuru y col. J. Med. Chem. 2000, 43, 2049-2063.

4-amino-1-tetrah¡dro-4H-p¡ran-4-¡l-p¡per¡d¡na

Se disolvieron 20 g (100 mmol) de 4-terbutiloxicarbonil-aminopiperidina en 250 ml de CH2Ch y se agitaron durante 12 h, a TA, con 10 g (100 mmol) de tetrahidro-4H-piran-4-ona y 42 g (200 mmol) de NaBH(OAc)3. Después se añadió agua y carbonato de potasio, se separó la fase orgánica, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se disolvió en 200 ml de CH²CI²y se agitó durante 12 h, a TA, con 100 ml de ácido trifluoroacético. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se absorbió con CHCh y se concentró de nuevo, después se absorbió en acetona y se precipitó el clorhidrato con HCl etéreo. Rendimiento: 14,3 g (56 %).

Cis- y trans-4-morfolin-ciclohexilamina

Dibenc¡1-4-morfol¡n-c¡clohex¡lam¡na

Se disolvieron 3,9 g (30 mmol) de 4- dibencilciclohexanona en 100 ml de CH2Ch y se agitó durante 12 h, a TA, con 3,9 g (45 mmol) de morfolina y 9,5 g (45 mmol) de NaBH(OAc)3. Después se añadió agua y carbonato de potasio, se separó la fase orgánica, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se purificó por una columna de gel de sílice (aproximadamente 20 ml de gel de sílice; aproximadamente -500 ml de 90 de acetato de etilo/10 de metanol 1 % de amoniaco concentrado). Las fracciones apropiadas se concentraron a vacío. Rendimiento: 6,6 g (60 %) de isómero cis y 2 g (18 %) de isómero trans.

Alternativamente, se puede preparar el trans- dibencil-4-morfolin-ciclohexilamina por el siguiente procedimiento: Se disolvieron 33 g (112 mmol) de 4-dibencilciclohexanona en 300 ml de MeOH, se combinaron con 17,4 g (250 mmol) de clorhidrato de hidroxilamina y se agitó durante 4 h, a 60 °C. El disolvente se concentró a vacío, se combinó con 500 ml de agua y 50 g de carbonato de potasio y se extrajo dos veces con 300 ml de diclorometano. La fase orgánica se secó, se concentró a vacío, se cristalizó el residuo de éter de petróleo, se disolvió en 1,5 l de EtOH y se calentó a 70 °C. Se añadieron 166 g de sodio de forma discontinua y la mezcla se calentó para hacerla hervir a reflujo hasta que se disolvió el sodio. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se combinó con 100 ml de agua y se extrajo dos veces con 400 ml de éter. La fase orgánica se lavó con agua, se secó, se concentró a vacío y se aisló el isómero trans usando una columna (aproximadamente 1,5 l de gel de sílice; aproximadamente 2 l acetato de etilo 80/metanol 20 2 % de amoniaco concentrado). Rendimiento: 12,6 g (41,2 %).

Se disolvieron 6,8 g (23 mmol) de trans-1-amino-4-dibencilaminociclohexano en 90 ml de DMF y se agitó durante 8 h, a 100 °C, con 5 ml (42 mmol) de éter 2,2'-dicloroetílico y 5 g de carbonato de potasio. Después de enfriamiento, se añadieron 30 ml de agua, los cristales precipitados se filtraron por succión y se purificaron por una columna corta (aproximadamente 20 ml de gel de sílice, aproximadamente 100 ml de acetato de etilo). El residuo se cristalizó de metanol y HCl concentrado como el diclorhidrato. Rendimiento: 7,3 g (72,4 %).

Trans-4-morfolin-ciclohexilamina

Se disolvieron 7,2 g (16,4 mmol) de trans-dibencil-4-moríolin-ciclohexilamina en 100 ml de MeOH y se hidrogenó sobre 1,4 g de Pd/C (10 %) a 30-50 °C. El disolvente se eliminó a vacío y el residuo se cristalizó de etanol y HCl concentrado. Rendimiento: 3,9 g (93 %).

El isómero cis se puede preparar de manera análoga.

Cis- y trans-4-piperidin-cicl-ohexilamina.

Trans-dibencil-4-piperidin-ciclohexilamina

Se disolvieron 2,0 g (6,8 mmol) de trans-1amino- 4-dibencilaminociclohexano (véase el Ejemplo 2) en 50 ml de DMF y se agitó durante 48 h, a TA, con 1,6 g (7 mmol) de 1,5-dibromopentano y 2 g de carbonato de potasio. La mezcla se enfrió, se combinó con agua, se extrajo dos veces con 100 ml de diclorometano, se secó y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se purificó sobre una columna (aproximadamente 100 ml de gel de sílice, aproximadamente 500 ml de acetato de etilo 80/metanol 20 1 % de amoniaco concentrado). Las fracciones deseadas se concentraron a vacío y se cristalizan de éter de petróleo. Rendimiento: 1,2 g (49 %).

Trans-4-piperidin-ciclohexilamina

Se disolvieron 1,7 g (4,8 mmol) de trans-dibencil-4-piperidin-ciclohexilamina, en 35 ml de MeOH y se hidrogenó sobre 350 mg de Pd/C (10 %) a 20 °C. Se eliminó el disolvente a vacío y se cristalizó el residuo de etanol y HCl concentrado. Rendimiento: 1,1 g (78 %).

El isómero cis se puede preparar de manera análoga.

Cis- y trans-4-(4-fenil-piperazin-1-il)-ciclohexilamina

Se disolvieron 4,1 g (25,3 mmol) de 4-dibencilciclohexanona en 50 ml de diclorometano y se agitó durante 12 h, a TA, con 7,4 g (25,3 mmol) de N-fenilpiperazina y 7,4 g (35 mmol) de NaBH(OAc)3- Después se añadió agua y carbonato de potasio, la fase orgánica se separó, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se purificó sobre una columna de gel de sílice (acetato de etilo 80/metanol 20 0,5% de amoniaco concentrado). Rendimiento: 1,7 g (15,8 %) de isómero cis y 0,27 (2,5 %) de isómero trans.

Trans-4-(4-fenil-p¡peraz¡n-1-¡l)-c¡clohex¡lamina

Se disolvieron 270 mg (0,61 mmol) de trans- dibencil-[4-(4-fenil-piperazin-1-il)-ciclohexil]-amina en 5 ml de MeOH y se hidrogenó sobre 40 mg de Pd/C (10 %), a 20- 30 °C. Se eliminó el disolvente a vacío y se cristalizó el residuo de etanol y HCl concentrado. Rendimiento: 110 mg (69 %).

El isómero cis se puede preparar de manera análoga.

Cis- y trans-4-(4-c¡cloprop¡lmetil-p¡peraz¡n-1-¡l)-c¡clohex¡lam¡na

Se disolvieron 9,8 g (33,4 mol) de 4-dibencilcíclohexanona en 100 ml de diclorometano y se agitó durante 12 h, a TA, con 5,6 g (40 mmol) de N-ciclopropilmetilpiperazina y 8,5 g (40 mmol) de NaBH(OAc)3. Después se añadió agua y carbonato de potasio, se separó la fase orgánica, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se purificó sobre una columna de gel de sílice, aproximadamente 50 ml de gel de sílice, aproximadamente 3 l de acetato de etilo 95/metanol 5 5 % de amoniaco concentrado 0,2. Las fracciones apropiadas se concentraron a vacío. El compuesto cis que eluye más rápido cristalizó de acetato de etilo. El compuesto trans se cristalizó de etanol HCl concentrado. Rendimiento: 8,5 g (61 %) de isómero cis y 2,2 (13 %) de isómero trans.

c¡s-4-(4-c¡cloprop¡lmetil-p¡peraz¡n-1-¡l)-c¡clohex¡lam¡na

Se disolvieron 8,5 g (20 mmol) de cis-dibencil- [4-(4-ciclopropilmetil-piperazin-1-il)-ciclohexil]-amina en 170 ml de MeOH y se hidrogenó sobre 1,7 g de Pd/C (10 %), a 30-50 °C. El disolvente se eliminó a vacío y el residuo se cristalizó de etanol y HCl concentrado. Rendimiento: 4,4 g (91 %).

El isómero trans se puede preparar de manera análoga.

Síntesis de los Ejemplos

Ejemplo de referencia 152

Se disolvieron 0,15 g del compuesto Z10, 0,14 g TBTU, 0,13 ml de DIPEA, en diclorometano y se agitó durante 20 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 90 pl de 1(3-aminopropil)-4-metilpiperazina y se agitó durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. La solución se diluyó después con diclorometano y se extrajo con agua. El producto se precipitó por la adición de éter de petróleo, éter y acetato de etilo a la fase orgánica. Rendimiento: 0,16 g de sólido beis. Ejemplo de referencia 164

Se disolvieron 0,10 g del compuesto Z10, 0,1 g TBTU, 0,08 ml de DIPEA, en 4 ml de diclorometano y se agitó durante 20 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 44 pl de dimetilaminopropilamina y se agitó durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. La solución se diluyó después con diclorometano y se extrajo con agua. El producto se precipitó por la adición de éter de petróleo, éter y acetona a la fase orgánica. Rendimiento: 0,08 g de sólido amarillo.

Ejemplo de referencia 242

Se disolvieron 0,15 g del compuesto Z10, 0,14 g de TBTU, 0,13 ml de DIPEA, en 5 ml de diclorometano y se agitó durante 20 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 75 pl de 1-(2-aminoetil)piperidina y se agitó durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. La solución se diluyó después con diclorometano y se extrajo con agua. El producto se precipitó por la adición de éter de petróleo, éter y acetato de etilo a la fase orgánica. Rendimiento: 0,14 g de sólido amarillo.

Ejemplo de referencia 188

Se disolvieron 0,1 g del compuesto Z2, 0,09 g de TBTU, 0,05 ml de DIPEA, en 15 ml de diclorometano y se agitó durante 20 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 33 mg de l-metil-4-aminopiperidina y se agitó la mezcla durante unas 3 horas adicionales, a 25 °C. La solución se extrajo con 20 ml de agua, después se concentró a vacío. El producto se cristalizó usando éter. Rendimiento: 0,047 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 203

Se disolvieron 0,1 g del compuesto Z2, 0,09 g de TBTU, 0,5 ml de DIPEA, en 15 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 50 mg de 4-amino-1-bencilpiperidina y se agitó la mezcla durante unas 3 horas adicionales, a 25 °C. La solución se extrajo con 20 ml de agua, después concentró a vacío. Después se sometió a cromatografía el residuo sobre gel de sílice y el producto aislado se cristalizó con éter. Rendimiento: 0,015 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 94

Se disolvieron 0,17 g del compuesto Z1, 0,19 g de TBTU, 0,11 ml de DIPEA, en 50 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Se añadieron después 63 mg de 1-metil-4-aminopiperidina y se agitó la mezcla durante unas 17 horas adicionales, a 25 °C. Se añadieron 50 ml de agua y 1 g de carbonato de potasio, a la solución y se separó la fase orgánica usando un cartucho de separación de fases, después se concentró a vacío. Después se purificó el producto por cromatografía de gel de sílice y el producto purificado se cristalizó con éter. Rendimiento: 0,1 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 95

Se disolvieron 0,17 g del compuesto Z1, 0,19 g de TBTU, 0,11 ml de DIPEA, en 50 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 77 mg de exo-3-p-amino-tropano y se agitó la mezcla durante unas 17 horas adicionales, a 25 °C. Se añadieron 50 ml de agua y 1 g de carbonato de potasio, a la solución y se separó la fase orgánica usando un cartucho de separación de fases, después se concentró a vacío. Después se purificó el producto por cromatografía de gel de sílice y el producto purificado se cristalizó con éter. Rendimiento: 0,03 g de cristales blancos.

Ejemplo 46

Se disolvieron 0,15 g del compuesto Z3, 0,12 g de TBTU., 0,12 ml de DIPEA, en 5 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 50 mg de 1-metil-4-aminopiperidina y la mezcla se agitó durante unas 2,5 horas adicionales, a 25 °C. Después se extrajo la solución con agua y después se concentró. Se disolvió el residuo en acetato de etilo caliente y se cristalizó de éter y éter de petróleo. Rendimiento: 0,025 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 80

Se disolvieron 0,2 g del compuesto Z8, 0,2 g de TBTU, 0,1 ml de DIPEA, en 10 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 100 mg de 1-metil-4-aminopiperidina y se agitó la mezcla durante unas 17 horas adicionales, a 25 °C. Después se extrajo la solución con una solución diluida de carbonato de potasio y se concentró. El residuo se cristalizó usando éter. Rendimiento: 0,12 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 190

Se disolvieron 0,2 g de compuesto Z8, 0,2 g de TBTU, 0,3 ml de DIPEA, en 5 ml de diclorometano y se agitó durante 1 h, a 2,5 °C. Después se añadieron 0,13 g de 4- amino-1-bencilpiperidina y se agitó la mezcla durante una hora adicional, a 25 °C. Después se diluyó la solución con 10 ml de cloruro de metileno y se extrajo con 20 ml de agua. Después se purificó el producto sobre gel de sílice y se cristalizó de acetato de etilo y éter. Rendimiento: 0,23 g del compuesto Z8.

Se disolvieron 0,23 g de la bencilamina Z8, en 10 ml de metanol, se combinaron con 50 mg de Pd/C y se hidrogenó en 3x105Pa, durante 3 h, a 25 °C. Por adición de éter de petróleo y acetato de etilo se produjeron cristales blancos. Éstos se sometieron a cromatografía sobre gel de sílice y se cristalizaron de acetato de etilo y éter. Rendimiento: 0,075 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 196

Se disolvieron 0,1 g de compuesto Z1O, 0,09 g de TBTU, 0,3 ml de DIPEA, en 4 ml de diclorometano y se agitó durante 20 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 67 mg de xx amina y se agitó durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. La solución se diluyó después con diclorometano y se extrajo con agua. Después se sometió a cromatografía sobre gel de sílice y el residuo se disolvió en acetona, se combinó con HCl etéreo y se aisló el precipitado formado. Rendimiento: 0,09 g de sólido amarillo claro.

Ejemplo de referencia 166

Se disolvió 0,1 g del compuesto Z10, 0,11 g de TBTU, 0,14 ml de DIPEA, en 2 ml de dimetilformamida y se agitó durante 3 h, a 50 °C. Después se añadieron 55 mg de 4-morfolinmetilfenilamina. La mezcla de reacción se enfrió después a temperatura ambiente dentro de 17 h. Después se eliminó la dimetilformamida a vacío, el residuo se absorbió en diclorometano y se extrajo con agua. Después se sometió a cromatografía sobre gel de sílice y el producto cristalizó de acetato de etilo y éter. Rendimiento: 0,06 g de cristales amarillentos.

Ejemplo de referencia 81

Se disolvieron 0,2 g del compuesto Z4, 0,2 g de TBTU, 0,1 ml de DIPEA, en 10 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 0,1 g de 1-metil-4-aminopiperidina y se agitó la mezcla durante unas 17 horas adicionales, a 25 °C. La solución se extrajo después con solución acuosa de carbonato de potasio y después se concentró. El producto se cristalizó usando éter. Rendimiento: 0,16 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 162

Se disolvieron 0,1 g del compuesto Z5, 0,07 g de TBTU, 0,15 ml de DIPEA, en 5 ml de diclorometano y se agitó durante 20 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 0,04 g de 1-metil-4-aminopiperidina y se agitó la mezcla durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. Después se diluyó la solución con 15 ml de diclorometano y se extrajo con 20 ml de agua. El residuo se disolvió en MeOH y acetona, se combinó con 1 ml de HCl etéreo y se concentró. Se produjo un producto cristalino usando éter, acetato de etilo y un poco de MeOH. Rendimiento: 0,1 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 88

Se disolvieron 0,1 g del compuesto Z6, 0,12 g de TBTU, 0,12 ml de DIPEA, en 10 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 0,04 g de 1-metil-4-aminopiperidina y se agitó la mezcla durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. Después se diluyó la solución con 10 ml de diclorometano y se extrajo con 10 ml de agua. Se produjo un producto cristalino usando éter, acetato de etilo y éter de petróleo. Rendimiento: 0,6 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 89

Se disolvieron 0,1 g del compuesto Z6. O-OR g TBTU, 0,08 ml de DIPEA, en 10 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25 °C. Después se añadieron 37 pl g de N,N-dimetilneopentanodíamina y se agitó la mezcla durante unas 2 horas adicionales, a 25 °C. Después se diluyó la solución con 10 ml de diclorometano y se extrajo con 10 ml de agua. Después se sometió a cromatografía el producto sobre gel de sílice y se cristalizó de acetato de etilo, éter y éter de petróleo. Rendimiento: 0,005 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 26

Se disolvieron 0,15 g del compuesto Z7, 0,16 g de TBTU, 1 ml de DIPEA, en 5 ml de diclorometano y se agitó durante 30 minutos, a 25°C. Después se añadieron 0,1 g de 4-morfOlinociclohexilamina y se agitó la mezcla durante unas 17 horas adicionales, a 25 °C. El residuo se combinó después con 10 ml de solución de carbonato de potasio al 10 %, se aisló el precipitado y se lavó con agua. Después se disolvió en diclorometano y se concentró de nuevo. El producto se cristalizó de acetato de etilo. Rendimiento: 0,1 g de cristales blancos.

Ejemplo de referencia 9

Se disolvieron 150 mg del compuesto Z 9 y 93 mg de amina, en 5 ml de diclorometano y se agitó con 160 mg de TBTU y 1 ml de DIPEA, durante 12 h, a TA. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se combinó con 10 ml de solución de carbonato de potasio al 10 % El precipitado se filtró por succión, se lavó con agua, se absorbió en diclorometano, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se cristalizó de acetato de etilo. Rendimiento: 82,0 mg.

Ejemplo de referencia 16

Se disolvieron -150 mg del compuesto Z8 y 73 mg de trans-4-piperidin-ciclohexilamina, en 5 ml de diclorometano y se agitó con 160 mg (0,50 mmol) de TBTU y 1 ml de DIPEA, durante 12 h, a TA. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se combinó con 10 ml de solución de carbonato de potasio al 10 %. El precipitado se filtró por succión, se lavó con agua, se absorbió en diclorometano, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se cristalizó de acetato de etilo. Rendimiento: 87,0 mg.

Ejemplo de referencia 37

Se disolvieron 100 mg del compuesto Z9 y 42 mg de 3-amino-1 -etil-pirolidina, en 10 ml de diclorometano y se agitó con 90 mg de TBTU y 0,5 ml de DIPEA, durante 12 h, a TA. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se combinó con 10 ml de solución de carbonato de potasio al 10%. El precipitado se filtró por succión, se lavó con agua, se absorbió en diclorometano, se secó y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se cristalizó de acetato de etilo/éter de petróleo. Rendimiento: 24,0 mg.

Ejemplo de referencia 120

Se disolvieron 100 mg del compuesto Z1l y 73 mg de 4-amino-1tetrahidro-4H-piran-4-il-piperidina, en 10 ml de diclorometano y se agitó con 90 mg de TBTU y 0,5 ml de DIPEA, durante 1 h, a TA. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se combinó con 10 ml de solución de carbonato de potasio al 10 %. El precipitado se filtró por succión, se lavó con agua, se absorbió en diclorometano, se secó y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se cristalizó de acetato de etilo/éter de petróleo. Rendimiento: 89 mg.

Ejemplo de referencia 212

Se disolvieron 150 mg del compuesto Z5 y 150 mg de trans-4-(4-ciclopropilmetil-piperazin-1-il)-ciclohexilamina (como el clorhidrato), en 5 ml de diclorometano y se agitó con 160 mg de TBTU y 2 ml de DIPEA, durante 2h, a TA. El disolvente se eliminó a vacío, el residuo se combinó con 10 ml de solución de carbonato de potasio al 10%. El precipitado se filtró por succión, se lavó con agua, se absorbió en diclorometano, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se purificó sobre una columna (20 ml de gel de sílice, 300 ml de 90 de acetato de etilo/10 de metanol 2 % de amoniaco concentrado). Las fracciones apropiadas se concentraron a vacío y se cristalizó de acetato de etilo. Rendimiento: 140 mg.

Ejemplo de referencia 232

Se disolvieron 390 mg del compuesto Z1l y 240 mg de trans-4-(4-t-butiloxicarbonil-piperazin-1-il)- ciclohexilamina, en 2,5 ml de NMP y se agitó con 482 mg de TBTU y 1 ml de trietilamina durante 2 h, a ^{t A .}Después se añadieron 100 ml de agua y 200 mg de carbonato de potasio, el precipitado se filtró por succión, se lavó con agua y se purificó por una columna de gel de sílice. Se concentraron las fracciones apropiadas a vacío, se disolvieron en 2 ml de diclorometano, se combinaron con 2 ml de ácido trifIuoroacético y se agitó durante 2 h, a TA, se combinaron con otros 100 ml de agua y 200 mg de carbonato de potasio y el precipitado se filtró por succión y se lavó con agua. Después se purificó el precipitado por una columna de gel de sílice. Las fracciones apropiadas se concentraron a vacío y se cristalizó el residuo de etanol y ácido clorhídrico concentrado. Rendimiento: 95 mg.

Ejemplo de referencia 213

Se disolvieron 60 mg del compuesto del Ejemplo 232, en 10 ml de acetato de etilo y se agitó con 1 ml de anhídrido acético y 1 ml de trietilamina, durante 30 min, a TA. Se eliminó el disolvente a vacío, se combinó el residuo con agua y amoniaco, se filtraron por succión los cristales precipitados y se lavaron con agua y un poco de acetona fría. Rendimiento: 40 mg.

Ejemplo de referencia 218

Se disolvieron 1,2 g del compuesto Z9 y 0,5 g de 1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-ilamina, en 20 ml de diclorometano y se agitó con 1,28 g de TBTU y 4 ml de trietilamina, durante 12 h, a TA. Después se añadieron 50 ml de agua y 0,5 g de carbonato de potasio, se separó la fase orgánica, se secó y se concentró a vacío. El residuo se cristalizó de acetato de etilo, se combinó con 25 ml de ácido clorhídrico 1 N y 20 ml de metanol y se agitó durante 30 min, a 50 °C. Se eliminó a vacío el metanol, se filtró por succión el precipitado, se lavó con agua y se secó.

El residuo se absorbió en 20 ml de diclorometano, se agitó con 0,5 g de tiomorfolina y 0,5 g de NaBH (OAc)3 durante 12 h, a TA. Después se añadió agua y carbonato de potasio, la fase orgánica se separó, se secó y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se purificó sobre columna de gel de sílice. Las fracciones apropiadas se concentraron a vacío y se precipitó el clorhidrato con HCl etéreo. Rendimiento: 86 mg de isómero trans; polvo amorfo.

Ejemplo de referencia 187

Se combinaron 200 mg del compuesto Z3 en 5 ml de diclorometano, con 0,1 ml de diisopropiletilamina y 180 mg de TBTU y se agitó durante 30 min. Después se añadieron 191 mg de 4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamina y la mezcla se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se combinó con agua y se extrajo la fase acuosa con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía de columna (eluyente: diclorometano/metanol 100:7).

Rendimiento: 128 mg (cristales amarillo claro).

Los compuestos de Fórmula (I) listados en la Tabla 2, entre otras cosas, se obtienen de manera análoga al procedimiento descrito anteriormente. Las abreviaturas X 1, X2, X3, X4 y X5 usadas en la Tabla 2, indican en cada caso una unión a una posición en la Fórmula general mostrada bajo la Tabla 2, en lugar de los correspondientes grupos: R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ y L-R ⁵ .

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto representado por una fórmula estructural seleccionada entre

opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables para su uso en el tratamiento de cánceres seleccionados del grupo que consiste en melanomas, mieloma, leucemias agudas o crónicas de origen mieloide y síndromes mielodisplásicos (MDS).

2. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables, en el tratamiento de leucemias agudas o crónicas de origen mieloide.

3. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables, en el tratamiento de síndromes mielodisplásicos (MDS).

4. Compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el ingrediente compuesto se administra por vía oral, entérica, transdérmica, intravenosa, peritoneal o mediante inyección.

5. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y las mezclas de los mismos y opcionalmente en forma de sus sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos farmacológicamente aceptables, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de cánceres seleccionados del grupo que consiste en melanomas, mieloma, leucemias agudas o crónicas de origen mieloide y síndromes mielodisplásicos (MDS).

6. Uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el que el ingrediente compuesto se administra por vía oral, entérica, transdérmica, intravenosa, peritoneal o mediante inyección.

7. Compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el compuesto está representado por una fórmula estructural

opcionalmente en forma de sus tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros y sus mezclas y opcionalmente en forma de sales de adición de ácido, solvatos, hidratos o polimorfos de los mismos farmacológicamente aceptables.