ES2666864T3 - Composiciones para aumentar la actividad telomerasa y tratar infección por VIH - Google Patents
Composiciones para aumentar la actividad telomerasa y tratar infección por VIH Download PDFInfo
- Publication number
- ES2666864T3 ES2666864T3 ES04777032.6T ES04777032T ES2666864T3 ES 2666864 T3 ES2666864 T3 ES 2666864T3 ES 04777032 T ES04777032 T ES 04777032T ES 2666864 T3 ES2666864 T3 ES 2666864T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- cells
- compound
- formula
- glycoside
- telomerase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 100
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 title description 97
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 86
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 185
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 74
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims abstract description 8
- WENNXORDXYGDTP-UOUCMYEWSA-N cycloastragenol Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O WENNXORDXYGDTP-UOUCMYEWSA-N 0.000 claims description 68
- WENNXORDXYGDTP-UHFFFAOYSA-N cyclosiversigenin Natural products O1C(C(C)(O)C)CCC1(C)C1C2(C)CCC34CC4(CCC(O)C4(C)C)C4C(O)CC3C2(C)CC1O WENNXORDXYGDTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 61
- QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N astragaloside IV Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N 0.000 claims description 48
- QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N astragaloside IV Natural products CC(C)(O)[C@@H]1CC[C@@](C)(O1)[C@H]2[C@@H](O)C[C@@]3(C)[C@@H]4C[C@H](O[C@@H]5O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]5O)[C@H]6C(C)(C)[C@H](CC[C@@]67C[C@@]47CC[C@]23C)O[C@@H]8OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]8O QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N 0.000 claims description 43
- PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N cyclosieversioside F Natural products CC(C)(O)C1COC(C)(C1)C2C(O)CC3(C)C4CC(OC5OC(CO)C(O)C(O)C5O)C6C(C)(C)C(CCC67CC47CCC23C)OC8OCC(O)C(O)C8O PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 29
- KNESISUQBYQIIU-UHFFFAOYSA-N 6-Angeloyl-1,6-Dihydroxyfuranoeremophilan-9-one Natural products O1C(C(C)(O)C)CCC1(C)C1C2(C)CC=C3C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4C(O)CC3C2(C)CC1O KNESISUQBYQIIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- KZGXEJKMJNLRSF-UHFFFAOYSA-N Astragenol Natural products CC(C)(O)C1CCC(C)(O1)C2C(O)CC3(C)C4CC(O)C5(C)C(C)(C)C(O)CCC5(C)C4=CCC23C KZGXEJKMJNLRSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 13
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 150000008505 β-D-glucopyranosides Chemical group 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 160
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 124
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 114
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 description 57
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 41
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 41
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 38
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 36
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 35
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 26
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 23
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 23
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 23
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 22
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 22
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 20
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 20
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 17
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 14
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 description 14
- 210000003411 telomere Anatomy 0.000 description 14
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 description 14
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 13
- -1 methoxy, acetyloxy Chemical group 0.000 description 13
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 12
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 12
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 12
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 11
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 10
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 10
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 10
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 10
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 9
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 8
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 8
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 8
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 8
- SMDOOINVMJSDPS-UHFFFAOYSA-N Astragaloside Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(CO)O2)O)=C1 SMDOOINVMJSDPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QMNWISYXSJWHRY-XWJCTJPOSA-N astragaloside Chemical class O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)C4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)CC3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-XWJCTJPOSA-N 0.000 description 7
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940123582 Telomerase inhibitor Drugs 0.000 description 6
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 6
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 6
- 239000003277 telomerase inhibitor Substances 0.000 description 6
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 5
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 5
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 5
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- RAQNTCRNSXYLAH-RFCGZQMISA-N (20S)-ginsenoside Rh1 Chemical compound O([C@@H]1[C@H]2C(C)(C)[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]2C[C@@H](O)[C@H]3[C@@]([C@@]2(C1)C)(C)CC[C@@H]3[C@@](C)(O)CCC=C(C)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RAQNTCRNSXYLAH-RFCGZQMISA-N 0.000 description 4
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 4
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 4
- RAQNTCRNSXYLAH-UHFFFAOYSA-N Ginsenoside Rh1 Natural products CC(C)=CCCC(C)(O)C1CCC(C2(C3)C)(C)C1C(O)CC2C1(C)CCC(O)C(C)(C)C1C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RAQNTCRNSXYLAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 4
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 4
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 4
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N Triiodomethane Natural products IC(I)I OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 4
- 238000005299 abrasion Methods 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000010094 cellular senescence Effects 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 239000004533 oil dispersion Substances 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 4
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 4
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 4
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 description 3
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 3
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 3
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 244000309464 bull Species 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 3
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 229930182494 ginsenoside Natural products 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- NSPJNIDYTSSIIY-UHFFFAOYSA-N methoxy(methoxymethoxy)methane Chemical compound COCOCOC NSPJNIDYTSSIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 3
- LEHBURLTIWGHEM-UHFFFAOYSA-N pyridinium chlorochromate Substances [O-][Cr](Cl)(=O)=O.C1=CC=[NH+]C=C1 LEHBURLTIWGHEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004233 talus Anatomy 0.000 description 3
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O Chemical compound CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N 0.000 description 2
- 206010011985 Decubitus ulcer Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 2
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGLPBDUCMAPZCE-UHFFFAOYSA-N Trioxochromium Chemical compound O=[Cr](=O)=O WGLPBDUCMAPZCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000558 Varicose Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 2
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 239000012676 herbal extract Substances 0.000 description 2
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 2
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 208000011379 keloid formation Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 2
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 210000001127 pigmented epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 2
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 2
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 2
- 210000001732 sebaceous gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000001057 smooth muscle myoblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 1
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 1
- MSSYPWFHLFBMMP-UHFFFAOYSA-N (20S,24R)-cycloartan-3beta,6alpha,16beta,25-tetraol-3-O-beta-xylopyranoside-25-O-beta-D-glucopyranoside Natural products CC(C)(OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2CCC(C)(O2)C3C(O)CC4(C)C5CC(O)C6C(C)(C)C(CCC67CC57CCC34C)OC8OCC(O)C(O)C8O MSSYPWFHLFBMMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- VOYADQIFGGIKAT-UHFFFAOYSA-N 1,3-dibutyl-4-hydroxy-2,6-dioxopyrimidine-5-carboximidamide Chemical compound CCCCn1c(O)c(C(N)=N)c(=O)n(CCCC)c1=O VOYADQIFGGIKAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- JCLFHZLOKITRCE-UHFFFAOYSA-N 4-pentoxyphenol Chemical compound CCCCCOC1=CC=C(O)C=C1 JCLFHZLOKITRCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010953 Ames test Methods 0.000 description 1
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- LAWPHHZXTUPSDG-UHFFFAOYSA-N Astragaloside I Natural products CC(=O)OC1C(O)COC(OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C)(CCC6(O)C7(C)CCC(O7)C(C)(C)O)C5CC(OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C4C2(C)C)C1OC(=O)C LAWPHHZXTUPSDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBBFSAOZTBEFKN-UHFFFAOYSA-N Astragaloside V Natural products CC(C)(OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2COC(C)(C2)C3C(O)CC4(C)C5CC(O)C6C(C)(C)C(CCC67CC57CCC34C)OC8OCC(O)C(O)C8OC9OC(CO)C(O)C(O)C9O DBBFSAOZTBEFKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXUHEBWWYMBFBA-UHFFFAOYSA-N Astragaloside VII Natural products CC(C)(OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2COC(C)(C2)C3C(O)CC4(C)C5CC(OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C7C(C)(C)C(CCC78CC58CCC34C)OC9OCC(O)C(O)C9O KXUHEBWWYMBFBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXHCYYSIAXMSPA-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-I Chemical compound CC(=O)OC1C(OC(=O)C)C(O)COC1OC1C(C)(C)C2C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)CC3C4(C)CC(O)C(C5(C)OC(CC5)C(C)(C)O)C4(C)CCC43CC42CC1 KXHCYYSIAXMSPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLKGXASMCRAVAK-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-II Natural products CC(=O)OC1C(O)C(O)COC1OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C)(CCC6(O)C7(C)CCC(O7)C(C)(C)O)C5CC(OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C4C2(C)C JLKGXASMCRAVAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVBLYMQWWGLBRE-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-II Chemical compound CC(=O)OC1C(C(COC1OC2CCC34CC35CCC6(C(C(CC6(C5CC(C4C2)OC7C(C(C(C(O7)CO)O)O)O)C)O)C8(CCC(O8)C(C)(C)O)C)C)O)O LVBLYMQWWGLBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MZILQGNQYYOFEZ-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-V Chemical compound C1CC(C)(C2C3(CCC45CC55C(C(C(OC6C(C(O)C(O)CO6)OC6C(C(O)C(O)C(CO)O6)O)CC5)(C)C)C(O)CC4C3(C)CC2O)C)OC1C(C)(C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O MZILQGNQYYOFEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FLPVEPQEIRRVKG-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-VI Chemical compound O1C(C(C)(O)C)CCC1(C)C1C2(C)CCC34CC4(CCC(OC4C(C(O)C(O)CO4)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C4(C)C)C4C(OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)CC3C2(C)CC1O FLPVEPQEIRRVKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDELUYNKSQLCJK-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-VII Chemical compound C1CC(C)(C2C3(CCC45CC55C(C(C(OC6C(C(O)C(O)CO6)O)CC5)(C)C)C(OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC4C3(C)CC2O)C)OC1C(C)(C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O YDELUYNKSQLCJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001229621 Astragalus verrucosus Species 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- WSNMPAVSZJSIMT-UHFFFAOYSA-N COc1c(C)c2COC(=O)c2c(O)c1CC(O)C1(C)CCC(=O)O1 Chemical compound COc1c(C)c2COC(=O)c2c(O)c1CC(O)C1(C)CCC(=O)O1 WSNMPAVSZJSIMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100268670 Caenorhabditis elegans acc-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004434 Calcinosis Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000128735 Chapsa Species 0.000 description 1
- XJUZRXYOEPSWMB-UHFFFAOYSA-N Chloromethyl methyl ether Chemical compound COCCl XJUZRXYOEPSWMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 1
- DJHCVWLJAINILQ-UHFFFAOYSA-N Cyclosieversioside D Natural products CC(=O)OC1C(O)C(O)COC1OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C(O)CC6(C)C5CC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O)C4C2(C)C)C8(C)CC(CO8)C(C)(C)O DJHCVWLJAINILQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 150000008212 D-arabinopyranosides Chemical class 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N D-ribopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 206010056340 Diabetic ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003972 Fibroblast growth factor 7 Human genes 0.000 description 1
- 108090000385 Fibroblast growth factor 7 Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- HVPKALQHGQMJER-XOUPSZAESA-N Isoastragaloside I Chemical compound CC(=O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C)CO[C@H]1O[C@@H]1C(C)(C)[C@@H]2[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C[C@H]3[C@]4(C)C[C@H](O)[C@H]([C@]5(C)O[C@@H](CC5)C(C)(C)O)[C@@]4(C)CC[C@@]43C[C@@]42CC1 HVPKALQHGQMJER-XOUPSZAESA-N 0.000 description 1
- NWLKARBSFUGLOG-UHFFFAOYSA-N Isoastragaloside I Natural products CC(=O)OC1COC(OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C(O)CC6(C)C5CC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O)C4C2(C)C)C8(C)CC(CO8)C(C)(C)O)C(OC(=O)C)C1O NWLKARBSFUGLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- QFJUYMMIBFBOJY-UXZRXANASA-N Panaxatriol Chemical compound C[C@]1([C@H]2CC[C@@]3([C@@H]2[C@H](O)C[C@H]2[C@]3(C[C@@H](O)[C@H]3C(C)(C)[C@@H](O)CC[C@@]32C)C)C)CCCC(C)(C)O1 QFJUYMMIBFBOJY-UXZRXANASA-N 0.000 description 1
- VIXIMKLMEZTTTC-UHFFFAOYSA-N Panaxatriol Natural products CC1(C)CCCC(O1)C2CCC3(C)C2C(O)CC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5C(O)CC34C VIXIMKLMEZTTTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 102100035254 Sodium- and chloride-dependent GABA transporter 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710104417 Sodium- and chloride-dependent GABA transporter 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010064127 Solar lentigo Diseases 0.000 description 1
- 239000004163 Spermaceti wax Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 208000013200 Stress disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 125000003668 acetyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)O[*] 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229940023476 agar Drugs 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005012 alkyl thioether group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008188 altrosides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 150000008209 arabinosides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- SRPWHXRCOLBHSL-UHFFFAOYSA-N astragaloside III Natural products CC(C)(O)C1COC(C)(C1)C2C(O)CC3(C)C4CC(OC5OCC(O)C(O)C5OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C7C(C)(C)C(O)CCC78CC48CCC23C SRPWHXRCOLBHSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHXCWJXWRVEKEB-UHFFFAOYSA-N astragaloside VI Natural products CC(C)(O)C1COC(C)(C1)C2C(O)CC3(C)C4CC(OC5OC(CO)C(O)C(O)C5O)C6C(C)(C)C(CCC67CC47CCC23C)OC8OCC(O)C(O)C8OC9OC(CO)C(O)C(O)C9O WHXCWJXWRVEKEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FVFSMBDVZVUETN-PTCJJXKDSA-N astragalosideiii Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O FVFSMBDVZVUETN-PTCJJXKDSA-N 0.000 description 1
- 229930192689 astraverrucin Natural products 0.000 description 1
- 239000003212 astringent agent Substances 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002021 butanolic extract Substances 0.000 description 1
- 230000002308 calcification Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 239000004203 carnauba wax Substances 0.000 description 1
- 235000013869 carnauba wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000003822 cell turnover Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- UMCMPZBLKLEWAF-UHFFFAOYSA-N chaps detergent Chemical compound OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 UMCMPZBLKLEWAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940061627 chloromethyl methyl ether Drugs 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 1
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 201000010251 cutis laxa Diseases 0.000 description 1
- GPWDPLKISXZVIE-UHFFFAOYSA-N cyclo[18]carbon Chemical compound C1#CC#CC#CC#CC#CC#CC#CC#CC#C1 GPWDPLKISXZVIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HJCCJZGOBHFQSX-UHFFFAOYSA-N cyclosieversioside B Natural products CC(CCC(O)C(C)(C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2C(CC3(C)C4CC(O)C5C(C)(C)C(CCC56CC46CCC23C)OC7OCC(O)C(O)C7O)OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O HJCCJZGOBHFQSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N diethyl pyrocarbonate Chemical compound CCOC(=O)OC(=O)OCC FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPLRAVKSCUXZTP-UHFFFAOYSA-N diglycerol Chemical class OCC(O)COCC(O)CO GPLRAVKSCUXZTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001891 dimethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000003372 endocrine gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000003499 exocrine gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 150000008195 galaktosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940089161 ginsenoside Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000442 hair follicle cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000026030 halogenation Effects 0.000 description 1
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- FUKUFMFMCZIRNT-UHFFFAOYSA-N hydron;methanol;chloride Chemical compound Cl.OC FUKUFMFMCZIRNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 150000008160 idosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000001821 langerhans cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000008263 liquid aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 150000008146 mannosides Chemical class 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000004925 microvascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- MDPXIRWVLJUABC-CXLWPVPUSA-N molport-002-524-324 Chemical compound O1[C@@H](C(C)(O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C4(C)C)C4[C@@H](O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O MDPXIRWVLJUABC-CXLWPVPUSA-N 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N n-heptadecyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCO GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003136 n-heptyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008203 oral pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000004663 osteoprogenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000003961 penetration enhancing agent Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000013014 purified material Substances 0.000 description 1
- RYVMUASDIZQXAA-UHFFFAOYSA-N pyranoside Natural products O1C2(OCC(C)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C2)C(C)C(C2(CCC3C4(C)CC5O)C)C1CC2C3CC=C4CC5OC(C(C1O)O)OC(CO)C1OC(C1OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OCC(O)C(O)C1O RYVMUASDIZQXAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000037309 reepithelialization Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 1
- 150000008223 ribosides Chemical class 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N saquinavir Chemical compound C([C@@H]([C@H](O)CN1C[C@H]2CCCC[C@H]2C[C@H]1C(=O)NC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)C=1N=C2C=CC=CC2=CC=1)C1=CC=CC=C1 QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N 0.000 description 1
- 229960001852 saquinavir Drugs 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008275 solid aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940084106 spermaceti Drugs 0.000 description 1
- 235000019385 spermaceti wax Nutrition 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000000475 sunscreen effect Effects 0.000 description 1
- 239000000516 sunscreening agent Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 150000008202 talosides Chemical class 0.000 description 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 101150005573 uvrA gene Proteins 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
- NLIVDORGVGAOOJ-MAHBNPEESA-M xylene cyanol Chemical compound [Na+].C1=C(C)C(NCC)=CC=C1C(\C=1C(=CC(OS([O-])=O)=CC=1)OS([O-])=O)=C\1C=C(C)\C(=[NH+]/CC)\C=C/1 NLIVDORGVGAOOJ-MAHBNPEESA-M 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J3/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, substituted in position 17 beta by one carbon atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
Abstract
Un compuesto aislado de fórmula I:**Fórmula** donde: X1 es hidroxi o ß-D-xilopiranósido, X2 es hidroxi o ß-D-glucopiranósido, y X3 es hidroxi; OR1 es hidroxi; y R2 forma, junto con el carbono 9, un anillo ciclopropilo fusionado, y representa un enlace sencillo entre los carbonos 9 y 11, en una cantidad eficaz para uso en tratar una infección por VIH.
Description
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
DESCRIPCION
Composiciones para aumentar la actividad telomerasa y tratar infección por VIH Campo de la invención
La presente invención se refiere a compuestos que inducen la actividad telomerasa en células para su uso en tratar infección por VIH, y a composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos, como se define en las reivindicaciones.
Antecedentes de la invención y referencias
Telomerasa
La telomerasa es una ribonucleoproteína que cataliza la adición de repeticiones teloméricas a los extremos de los telómeros. Los telómeros son largos tramos de secuencias repetidas que cubren los extremos de los cromosomas y se cree que estabilizan el cromosoma. En seres humanos, los telómeros típicamente tienen de 7-10 kb de longitud y comprenden múltiples repeticiones de la secuencia -TTAGGG-. La telomerasa no se expresa en la mayoría de las células adultas, y la longitud de los telómeros disminuye con sucesivas rondas de replicación. Después de un cierto número de rondas de replicación, el acortamiento progresivo de los telómeros produce que las células entren en una fase de crisis telomérica, que a su vez lleva a senescencia celular. Ciertas enfermedades se asocian con pérdida telomérica rápida, produciendo senescencia celular prematura. Se ha mostrado que la expresión del gen que codifica la proteína telomerasa humana en células humanas confiere un fenotipo inmortal, presumiblemente evitando la ruta de senescencia natural de las células. Además, se ha mostrado que la expresión del gen de la telomerasa en células en envejecimiento con telómeros cortos produce un aumento en la longitud del telómero y restablece un fenotipo típicamente asociado con células más jóvenes.
Las células somáticas, al contrario que las células tumorales y ciertas células madre, tienen poca o ninguna actividad telomerasa y dejan de dividirse cuando los extremos teloméricos de al menos algunos cromosomas se han acortado a una longitud crítica, produciendo senescencia celular programada (muerte celular). Puesto que la pérdida de las repeticiones teloméricas en células somáticas, que produce senescencia, aumenta por baja actividad telomerasa, la inducción de la actividad telomerasa, que tiene el efecto de añadir haces de repeticiones teloméricas a los telómeros, otorga por tanto a células somáticas mortales capacidad replicativa aumentada, y otorga a células senescentes la capacidad para proliferar y salir apropiadamente del ciclo celular tras la reparación del tejido dañado.
Los beneficios terapéuticos potenciales de la actividad telomerasa aumentada en células somáticas incluyen, por ejemplo, tratamiento de SIDA, que se caracteriza por la senescencia temprana de los linfocitos T citotóxicos (células CD8+) que son responsables de destruir células CD4+ infectadas (véase, por ejemplo, Dagarag et al., 2003); neuroprotección en pacientes de Alzheimer (véase, por ejemplo, Mattson, 2000); cicatrización y mantenimiento de células en explantes, tal como células corticosuprarrenales (véase, por ejemplo, Thomas et al., 2000) o células de médula ósea o injerto estromal/mesenquimatoso (véase, por ejemplo, Simonsen et al., 2002). Las citas enteras de estas referencias aparecen a continuación.
Las referencias que discuten estas y otras características de la telomerasa incluyen:
Allsopp, R.C. et al., "Telomere shortening is associated with cell division in vitro and in vivo", Exp. Cell Res. 220(1):194-200 (Sep 1995).
Allsopp, R.C. et al., "Telomerase is required to slow telomere shortening and extend replicative lifespan of HSC during serial transplantation", Blood (e-publicación) 27 Mar 2003.
Bodnar, A.G. et al., "Extension of life-span by introduction of telomerase into normal human cells" Science 279(5349):349-52 (16 enero 1998).
Cech, T.R. et al., Patente en EE UU No. 6.093.809 (25 de julio, 2000).
Cech, T.R. et al., Patente en EE UU No. 6.166.178 (26 Dic, 2000).
Cech, T.R. et al., Patente en EE UU No. 6.261.836 (Jul 2001).
Chiu, C.P. et al., "Replicative senescence and cell immortality: the role of telomeres and telomerase" Proc. Soc. Exp.
Biol. Med. 214(2):99-106 (Feb 1997).
Dagarag, M. et al., "Differential impairment of lytic and cytokine functions in senescent human immunodeficiency virus type 1-specific cytotox T lymphocytes", J. Virol. 77(5):3077-83 (Mar 2003).
Farwell, D.G. et al., "Genetic and epigenetic changes in human epithelial cells immortalized by telomerase", American Journal of Pathology 156(5):1537-47 (Mayo 2000).
Fujimoto, R. et al., "Expression of telomerase components in oral keratinocytes and squamous cell carcinomas", Oral Oncology 37(2):132-40 (Feb 2001).
Funk, Walter D. et al., "Telomerase expression restores dermal integrity to in vitro-aged fibroblasts in a reconstituted skin model", Experimental Cell Research 258(2):270-278 (1 de agosto, 2000).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Hannon, G.J. y Beach, D.H., "Increasing proliferative capacity and preventing replicative senescence by increasing telomerase activity and inhibiting pathways inhibiting cell proliferation", Publicación de solicitud internacional PCT No. WO 2000/031238 (Junio 2000).
Hannon, G. J. et al., Extension of cellular lifespan using telomerase-activating therapeutic agents", publicación de solicitud internacional PCT No. WO 99/35243 (Julio 1999).
Harle-Bachor, C. et al., "Telomerase activity in the regenerative basal layer of the epidermis inhuman skin and in immortal and carcinoma-derived skin keratinocytes", Proc Natl Acad Sci uSa 93(13):6476-81 (25 de Junio 1996). Harley, C.B. et al., "Telomeres shorten during ageing of human fibroblasts", Nature 345(6274):458-60 (31 de Mayo 1990).
Harley, C.B. et al., "Telomerase, cell immortality, and cancer", Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 59:307-15 (1994).
Harley, C.B. et al., "Telomeres and telomerase in aging and cancer", Curr. Opin Genet. Dev. 5(2):249-55 (Abr 1995). Harley, C.B. et al., "Telomerase and cancer", Important Adv. Oncol. 57-67 (1996).
Harley, C.B., "Human aging and telomeres", Ciba Found. Symp. 211:129-39 (1997).
Harley, C.B., "Telomerase is not an oncogene", Oncogene 21: 494-502 (2002)
Henderson, S. et al., "In situ analysis of changes in telomere size during replicative aging and cell transformation", J. Cell Biol. 134(1):1-12 (Jul 1996).
Jiang, X.R. et al., Publicación PCT No. WO 02/91999.
Jiang, X.R. et al., "Telomerase expression in human somatic cells does not induce changes associated with a transformed phenotype", Nature Genetics 21(1):111-4 (Enero 1999).
Kang, M.K. et al., "Replicative senescence of normal human oral keratinocytes is associated with the loss of telomerase activity without shortening of telomeres", Cell Growth &Differentiation 9(1):85-95 (Enero 1998).
Kim, N.W. et al., "Telomerase activity assays", Patente en EE UU No. 5.629.154 (Mayo 1997).
Lee, K.M. et al., "Immortalization with telomerase of the Nestin-positive cells of the human pancreas", Biochem Biophys Res Commun 301(4):1038-44 (21 Feb 2003).
Ludwig, A. et al., "Ribozyme cleavage of telomerase mRNA sensitizes breast epithelial cells to inhibitors of topoisomerase", Cancer Res., 61: 3053-3061 (2001).
Mattson, M.P., "Emerging neuroprotective strategies for Alzheimer's disease: dietary restriction, telomerase activation, and stem cell therapy", Exp Gerontol. 35(4):489-502 (Jul 2000).
Morales, C. P. et al., "Absence of cancer-associated changes in human fibroblasts immortalized with telomerase", Nature Genetics 21(1):115-8 (Enero 1999).
Oh, H. y Schneider, M.D., "The emerging role of telomerase in cardiac muscle cell growth and survival", J Mol Cell Cardiol 34(7):717-24 (Jul 2002).
Simonsen, J.L. et al., "Telomerase expression extends the proliferative life-span and maintains the osteogenic potential of human bone marrow stromal cells", Nat Biotechnol 20(6):592-6 (Jun 2002).
Thomas, M., Yang, L., y Hornsby, P.J., "Formation of functional tissue from transplanted adrenocortical cells expressing telomerase reverse transcriptase", Nat Biotechnol 18(1):39-42 (Enero 2000).
Vasa, M. et al., "Nitric oxide activates telomerase and delays endothelial cell senescence", Circ. Res. 87(7):540-542 (2000).
Villeponteau, B. et al., Patente en EE UU No. 5.583.016 (Dic 1996).
West, M.D. et al., "Methods of screening for compounds that derepress or increase telomerase activity", Patente en EE UU No. 6.007.989 (Dic 1999).
White, M.A., "Assembly of telomerase components and chaperonins and methods and compositions for inhibiting or stimulating telomerase assembly", publicación de solicitud internacional PCT No. WO 2000/08135 (Feb. 2000).
Yang, J. et al., "Telomerized human microvasculature is functional in vivo", Nature Biotechnology (Estados Unidos) 19(3):219-24 (Mar 2001).
Yang, J., et al., "Human endothelial cell life extension by telomerase expression", J. Biol. Chem. 274(37):26141-8 (10 Sep 1999).
Yudoh, K. et al., "Reconstituting telomerase activity using the telomerase catalytic subunit prevents the telomere shorting and replicative senescence in human osteoblasts", J. Bone and Mineral Res. 16(8):1453-1464 (2001).
Se han investigado métodos de aumentar la actividad telomerasa terapéuticamente por, por ejemplo, Bodnar (1997), White (2000), Hannon et al. (1999; 2000), Franzese et al. (2001), y Yudoh et al. (2001), todos citados anteriormente. En estos artículos, la actividad telomerasa se aumenta en general por sobreexpresión de hTRT, el gen que codifica el componente proteico de la telomerasa humana, o por expresión de proteínas que median el ensamblaje de la telomerasa, por ejemplo, proteínas de choque térmico (White). Franzese et al. describen que Saquinavir, un inhibidor de proteasa recetado para el tratamiento de la infección por VIH, aumentó la actividad telomerasa en células mononucleares de sangre periférica; Vasa et al. describieron la activación de la telomerasa, y un retraso resultante en senescencia endotelial, por administración de un precursor del óxido nítrico (NO).
Astragalósidos y ginsenósidos
Se han descrito compuestos de las familias de astragalósido y ginsenósido como que tienen varios efectos biológicos. las referencias que discuten la actividad biológica de los astragalósidos y ginsenósidos incluyen:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Bedir, E. et al., "Immunostimulatory effects of cycloartane-type triterpene glycosides from Astragalus species", Biol & Pharm Bull 23(7):834-7 (2000).
Binder, B. et al., "Use of triterpensaponins, such as notoginsenoside R1 (NR1) and/or astragaloside (ASIV) for preparing medicaments", patente en EE UU No. 5.770.578 (Junio 1998).
Calzada, L. et al., "Effect of tetracyclic triterpenes (argentatins A, B and D) on the estradiol receptor of hormone- dependent tumors of human breast", Medical Science Research 23(12):815-16 (1995).
Chen, X. et al., "Protective effect of ginsenoside Rg1 on dopamin-induced apoptotis in PC12 cells", Acta Pharmacol Sinica 22(8):673-678 (2001).
Hashimoto, K. et al., "Skin tissue regeneration promoters comprising ginsenoside Rb1 ", WO 200192289 (2001); EP 1295893 A1 (2003).
Hong, H.-Y. et al., "Stimulatory effects of ginsenoside-Rg1 on p56 kinase and cell proliferation in Jurkat T cells", Korean J. Ginseng Sci. 19(2):117-21 (1995).
Huang, Y. et al., "Selected non-timber forest products with medicinal applications from Jilin Province in China", Título de la conferencia: Forest communities in the third millennium: Linking research, business, and policy toward a sustainable non-timber forest product sector; Kenora, Ontario, Canadá, 1-4 Octubre, 1999; General Technical Report-North Central Research Station, USDA Forest Service (No.NC-217): p.93-101 (2000).
Kaneko, M. et al., "Accelerated recovery from cyclophosphamide-induced leukopenia in mice administered a Japanese ethical herbal drug, Hochu-ekki-to", Immunopharmacology 44(3):223-231 (1999).
Kinjo, J. et al., "Anti-herpes virus activity of fabaceous triterpenoidal saponins", Biological & Pharmaceutical Bulletin 23(7):887-9 (Jul 2000).
Khushbaktova, Z. A. et al., "Influence of cycloartanes from plants of the genus Astragalus and their synthetic analogs on the contractive function of the myocarbium and the activity of Na,K-ATPase", Chem. Nat. Compounds 30(4): 469473 (1994).
Lee, Y.J. et al.,"Ginsenoside-Rg1, one of the major active molecules from Panax ginseng, is a functional ligand of glucocorticoid receptor", Mol Cell Endocrinol 133(2):135-40 (Oct 1997).
Liu, P. et al., "Effect of ginsenosides Rb1, Rg1, Rh1and Re on proliferation of cells in vitro", Tianran Chanwu Yanjiu Yu Kaifa 8(4):36-41 (1996); CA Abstract No. 1997:400846.
Oda, K. et al., "Adjuvant and haemolytic activities of 47 saponins derived from medicinal and food plants", Biol. Chem. 381(1):67-74 (2000).
Pistelli, L., et al., "Antimicrobial and antifungal activity of crude extracts and isolated saponins from Astragalus verrucosus", Fitoterapia 73(4):336-339 (2002).
Prince, R.L. y Min, X., "Compositions and method for treating or preventing osteoporosis", publicación PCT No. WO 2001/01996.
Sengupta, S. et al., "Pharmaceutically effective compounds and their use", publicaciones PCT Nos. WO 2002/69980 y WO 2002/07732.
Wang, S. et al., "Promoting effect of ginsenoside Re on the proliferation of murine bone marrow cells", Baiqiuen Yike DaxueXuebao 23(2):141-142 (1997); CA Abstract No. 1997:570234.
Wang, Y-P. et al., "Effect of astragaloside IV on T,B lymphocyte proliferation and peritoneal macrophage function in mice", Acta Pharmacologica Sinica 23(3):263-6 (Mar 2002).
Yasukawa, K. et al., "Sterol and triterpene derivatives from plants inhibit the effects of a tumor promoter, and sitosterol and betulinic acid inhibit tumor formation in mouse skin two-stage carcinogenesis", Oncology 48(1):72-6 (1991).
Yamamoto, M. et al., "The stimulatory effects of ginseng saponins on proliferation and DNA synthesis of human vascular endothelial cells and skin fibroblasts in relation to cytokines or growth factors", Nissei Byoin Igaku Zasshi 24(1):12-13 (1996).
Zhang W.J. et al., “Regulation of the fibrinolytic potential of cultured human umbilical vein endothelial cells: astragaloside IV downregulates plasminogen activator inhibitor-1 and upregulates tissue-type plasminogen activator expression", Journal of Vascular Research 34(4):273-80 (Jul-Ag 1997).
Zi-Pu, L. y Qian, C., "Effects of astragaloside IV on myocardial calcium transport and cardiac function in ischemic rats", Acta Pharmacol Sin 23(10): 898-904 (Oct 2002).
Rokia et al. divulgan en Pharmazie, 48(6), 1993, 452-454 que astragalósido II tiene actividad anti-VIH y anticancerosa. La misma enseñanza se puede encontrar en Phytochemistry, 45(8), 1997, 1597-1600 por lonkova et al.
Compendio de la invención
El objeto que no está abarcado por el ámbito de las reivindicaciones no forma parte de la presente invención reivindicada.
La invención descrita en el presente documento en general se refiere a composiciones para uso en métodos de aumentar la actividad telomerasa en células. Tales composiciones se pueden usar en células en cultivo, es decir, in vitro o ex vivo, o in vivo, tal como células en crecimiento en tejidos de un sujeto, incluyendo sujetos humanos y animales no humanos, particularmente mamíferos no humanos.
5
10
15
20
25
30
35
40
En aspectos particulares de la divulgación, las composiciones comprenden un compuesto de fórmula I, II, o III como se describe posteriormente. Aspectos de la divulgación incluyen formulaciones de tales compuestos para uso en aplicaciones cosméticas, nutracéuticas y farmacéuticas, en particular en aplicaciones donde aumentar la actividad telomerasa en células se muestra que es, o espera que sea, beneficioso. También se proporcionan métodos de usar los compuestos y formulaciones de los mismos para tales aplicaciones, incluyendo métodos para aplicar o administrar tales formulaciones después de que se haya determinado la necesidad para, o ventaja de, aumentar la actividad telomerasa en células o tejidos.
La presente divulgación incluye, en un aspecto, un método de aumentar la actividad telomerasa en una célula o tejido. El método comprende poner en contacto la célula o tejido con una formulación de un compuesto aislado de fórmula I, fórmula II, o fórmula III posteriormente. En formas de realización preferidas, el compuesto es de fórmula I o II posteriormente. El método puede comprender además la etapa preliminar de identificar una célula o tejido en el que se desea un aumento en la actividad telomerasa.
Según la divulgación, en compuestos de fórmula I:
cada uno de X1, X2 y X3 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido;
OR1 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido;
en donde cualquiera de los grupos hidroxilo en dicho glucósido puede estar sustituido con un glucósido adicional, alquilo inferior, o acilo inferior, de modo que el compuesto incluye un máximo de tres glucósidos; y R2 es metilo y — representa un doble enlace entre los carbonos 9 y 11; o, en formas de realización preferidas, R2 forma, junto con el carbono 9, un anillo de ciclopropilo fusionado, y representa un enlace sencillo entre los carbonos 9 y 11.
Preferiblemente, el compuesto incluye cero, uno, o dos, más preferiblemente cero o dos, glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional. Preferiblemente, los glucósidos son de la configuración D (natural).
En aspectos seleccionados de la divulgación de fórmula I, cada uno de X1 y X2 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido y X3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido. En formas de realización adicionales, X1 es OH o un glucósido, cada uno de X2 y OR1 es independientemente OH o un glucósido; y X3 es OH o ceto. Los compuestos ejemplares de fórmula I incluyen astragalósido IV, cicloastragenol, astragenol, astragalósido IV 16-ona, cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido y cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido. Los compuestos para uso según la invención se definen en las reivindicaciones.
En formas de realización seleccionadas, el compuesto se selecciona de astragalósido IV, cicloastragenol, astragenol y astragalósido IV 16-ona. En una forma de realización, el compuesto es astragalósido IV.
Según un aspecto de la divulgación, en compuestos de fórmula II:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
cada uno de X4 y X5 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido, y
OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido,
en donde cualquiera de los grupos hidroxilo en dicho glucósido puede estar sustituido con un glucósido adicional, alquilo inferior, o acilo inferior, de modo que el compuesto incluye un máximo de tres glucósidos.
Preferiblemente, el compuesto incluye cero, uno, o dos glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional. Preferiblemente, los glucósidos son de la configuración D.
En aspectos seleccionados de la fórmula II, cada uno de X4 y OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido, y X5 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto (=O). En formas de realización adicionales X4 es OH o un glucósido, y cada uno de X5 y OR3 es OH. En una forma de realización, X4 es OH.
Según un aspecto de la divulgación, en compuestos de fórmula III:
cada uno de X6, X7 y X8 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido, y
OR4 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido,
en donde cualquiera de los grupos hidroxilo en dicho glucósido puede estar sustituido con un glucósido adicional, alquilo inferior, o acilo inferior, de modo que el compuesto incluye un máximo de tres glucósidos.
Preferiblemente, el compuesto incluye cero, uno, o dos glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional. Preferiblemente, los glucósidos son de la configuración D.
En aspectos seleccionados de la fórmula III, cada uno de X6, X7, X8 y OR4 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido, y preferiblemente se selecciona de hidroxi y un glucósido. En formas de realización adicionales, cada uno de X8 y OR4 es OH, y cada uno de X6 y X7 se selecciona independientemente de hidroxilo y un glucósido. En aspectos aun adicionales, cada uno de OR4, X6 y X8 es OH y X7 es un glucósido. Un compuesto ejemplar de fórmula III es ginsenósido RH1.
Un compuesto preferido de fórmula I, II o III anteriormente, cuando se formula en un solvente a una concentración de 1 |jg/ml o menos, es eficaz para producir un nivel de actividad telomerasa en queratinocitos o fibroblastos, medido en un ensayo TRAP, al menos el 50% mayor que el nivel en dichas células tratadas con dicho solvente, medido en un ensayo TRAP como se describe en el presente documento. En formas de realización más preferidas, el compuesto es eficaz para producir un nivel de actividad telomerasa en queratinocitos o fibroblastos, medido en un ensayo TRAP, al menos el 100% mayor que el nivel en dichas células tratadas con dicho solvente, medido en un ensayo TRAP como se describe en el presente documento.
Los compuestos ejemplares de fórmulas I-III incluyen los representados en la figura 1 y designados en el presente documento como 1 (astragalósido IV), 2 (cicloastragenol), 3 (astragenol), 4 (astragalósido IV 16-ona), 5 (20R,24S- epoxi-3p,16p,25-trihidroxi-9p-metiM9-norlanost-1,5-dieno), 6 (cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido), 7 (cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido), y 8 (ginsenósido RH1). Los compuestos 1-4, 6 y 7 son según la invención. En formas de realización seleccionadas, el compuesto se selecciona de los designados en el presente documento como 1 (astragalósido IV), 2 (cicloastragenol), 3 (astragenol), 4 (astragalósido IV 16-ona), 6 (cicloastragenol 6-p-D- glucopiranósido), y 7 (cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido). En formas de realización adicionales, el compuesto se selecciona de los designados en el presente documento como 1, 2, 3, y 4. En una forma de realización, el compuesto es astragalósido IV (1) o cicloastragenol (2).
El método de poner en contacto una formulación de un compuesto aislado de fórmula I, II, o III con una célula o tejido puede comprender, antes de dicho poner en contacto, identificar una célula o tejido en el que se desea un
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
aumento en la actividad telomerasa. Los beneficios que se van a producir al aumentar la actividad telomerasa en una célula o tejido incluyen, por ejemplo, aumento de la capacidad replicativa y/o longevidad de dicha célula o células en dicho tejido.
El método puede incluir diagnosticar una afección en un sujeto de modo que se desea aumentar la actividad telomerasa en las células o tejido del sujeto, y administrar la formulación al sujeto. El sujeto es preferiblemente un sujeto mamífero, tal como un sujeto o paciente humano. Tales afecciones pueden incluir, por ejemplo, infección por VIH, varias enfermedades degenerativas, tal como enfermedad neurodegenerativa, enfermedad degenerativa de los huesos o articulaciones, degeneración macular, ateroesclerosis, y anemia. Tales afecciones también incluyen heridas y otras afecciones agudas o crónicas de la epidermis, tal como, por ejemplo, una quemadura, una abrasión, una incisión, un sitio de injerto, una lesión causada por un agente infeccioso, una úlcera venosa crónica, una úlcera diabética, una úlcera de compresión, úlceras de decúbito, una úlcera mucosa, y formación de queloide.
Según esto, la divulgación proporciona métodos de tratar una afección en un paciente, tal como las indicadas anteriormente, aumentando la actividad telomerasa en células o tejido del paciente, el método comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento, una formulación de un compuesto aislado de fórmula I, de fórmula II, o de fórmula III, como se ha definido anteriormente. Según la invención, los compuestos reivindicados se usan para tratar una infección por VIH. Las composiciones se pueden administrar por varias rutas, por ejemplo, por vía oral, tópica o parenteral.
La divulgación proporciona además un método de diagnosticar en un sujeto un estado de enfermedad sujeto a tratamiento aumentando la actividad telomerasa en una célula o tejido del sujeto, y administrar un compuesto de fórmula I, II o III como se ha descrito anteriormente, preferiblemente un compuesto de fórmula I o II, en un vehículo farmacéutico, al sujeto en necesidad de tal tratamiento.
En un aspecto adicional, la divulgación proporciona un método de tratar una afección aguda o crónica de la epidermis, que comprende poner en contacto células epidérmicas con una formulación tópica de un compuesto aislado de fórmula I, de fórmula II, o de fórmula III, como se ha definido anteriormente. En aspectos preferidos, el compuesto es de fórmula I o fórmula II. En formas de realización adicionales, el compuesto se selecciona de astragalósido IV, cicloastragenol, astragenol, astragalósido IV 16-ona, cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido, cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido, y 20R,24S-epoxi-3p,16p,25-trihidroxi-9p-metil-l9-norlanost-1,5-dieno (designado en el presente documento como 5).
Las células con las que la formulación se pone en contacto también pueden incluir células en explante que se ponen en contacto ex vivo, por ejemplo, para terapias celulares, u otras células en cultivo. Según esto, la divulgación proporciona un método de aumentar la capacidad replicativa de células in vitro o ex vivo, que comprende poner en contacto dichas células con una cantidad eficaz de una composición que comprende un compuesto de fórmula I, de fórmula II o de fórmula III, como se ha definido anteriormente, incluyendo aspectos seleccionados de los compuestos como se ha definido anteriormente. En aspectos preferidos, el compuesto es de fórmula I o de fórmula II, incluyendo aspectos seleccionados de los compuestos como se ha definido anteriormente. En general, las células son células de mamífero no transformadas; en aspectos seleccionados, las células son células madre, tal como células madre de médula ósea, células estromales de médula ósea, fibroblastos dérmicos jóvenes o de pase temprano, células precursoras de islotes, células de neuroesfera, células corticosuprarrenales, células satélite de músculo, osteoblastos, células epiteliales pigmentadas retinales, y células CD8+ restringidas a VIH.
En un aspecto relacionado, la divulgación proporciona una composición farmacéutica que comprende, en un vehículo farmacéuticamente aceptable, un compuesto de fórmula I como se ha representado anteriormente donde:
cada uno de X1 y X2 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido;
X3 es ceto;
OR1 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido;
en donde cualquiera de los grupos hidroxilo en dicho glucósido puede estar sustituido con un glucósido adicional, alquilo inferior, o acilo inferior, de modo que el compuesto incluye un máximo de tres glucósidos; y R2 es metilo y mi representa un doble enlace entre los carbonos 9 y 11; o, en formas de realización preferidas, R2 forma, junto con el carbono 9, un anillo de ciclopropilo fusionado, y mi representa un enlace sencillo entre los carbonos 9 y 11.
Preferiblemente, el compuesto incluye, cero, uno o dos glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional, y los glucósidos son de la configuración D.
En aspectos seleccionados de la composición X1 es OH o un glucósido, y cada uno de X2 y OR1 es independientemente OH o un glucósido. Según la invención, la composición farmacéutica es como se define en las reivindicaciones.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una forma de realización, el compuesto es astragalósido IV 16-ona (designado en el presente documento como 4).
En un aspecto de la divulgación, la composición comprende, en un vehículo farmacéuticamente aceptable, un compuesto de fórmula I como se representa anteriormente, donde:
uno de X1 y X2 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto, y el otro es un glucósido; y
cada uno de X3 y OR1 es independientemente hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido;
en donde cualquiera de los grupos hidroxilo en dicho glucósido puede estar sustituido con un glucósido adicional,
alquilo inferior, o acilo inferior, de modo que el compuesto incluye un máximo de tres glucósidos; y
R2 es metilo y representa un doble enlace entre los carbonos 9 y 11; o, en formas de realización preferidas, R2
forma, junto con el carbono 9, un anillo de ciclopropilo fusionado, y representa un enlace sencillo entre los
carbonos 9 y 11.
Preferiblemente, el compuesto incluye un glucósido, que no está sustituido con un glucósido adicional, y que es de la configuración D. En una forma de realización, el compuesto se selecciona de cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido (designado en el presente documento como 6) y cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido (designado en el presente como 7).
En otro aspecto de la divulgación, la composición farmacéutica comprende, en un vehículo farmacéuticamente aceptable, un compuesto de fórmula II como se ha definido anteriormente. Aspectos seleccionados del compuesto también son como se ha definido anteriormente. En un aspecto, el compuesto es el designado en el presente documento como 5.
La divulgación también proporciona compuestos de fórmula II como se han definido anteriormente, incluyendo aspectos seleccionados como se han definido anteriormente. En un aspecto, el compuesto es el designado en el presente documento como 5.
En un aspecto relacionado, la divulgación proporciona una formulación farmacéutica tópica de un compuesto aislado de fórmula I, de fórmula II o de fórmula III, como se han definido anteriormente. Aspectos seleccionados de los compuestos también se definen anteriormente. En aspectos preferidos de la divulgación el compuesto es de fórmula I o fórmula II. Según la invención, en la composición farmacéutica que comprende una formulación tópica, el compuesto aislado se selecciona de cicloastragenol, astragenol, astragalósido IV 16-ona, cicloastragenol 6-p-D- glucopiranósido y cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido.
La formulación tópica típicamente comprende uno o más componentes seleccionados del grupo que consiste en un emulsionante, un espesante, y un emoliente de la piel. Tales composiciones se pueden usar para el tratamiento de heridas u otras afecciones agudas o crónicas de la epidermis.
En otro aspecto relacionado, la divulgación proporciona composiciones nutracéuticas que comprenden una formulación nutracéutica de un compuesto aislado de fórmula I, de fórmula II o de fórmula III, como se ha definido anteriormente. Aspectos seleccionados de los compuestos también se definen anteriormente. En aspectos preferidos el compuesto es de fórmula I o fórmula II, incluyendo formas de realización seleccionadas como se han definido anteriormente. En aspectos adicionales, el compuesto se selecciona de astragalósido IV, cicloastragenol, astragenol, astragalósido IV 16-ona, cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido, cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido, y 20R,24S-epoxi-3p,16p,25-trihidroxi-9p-metil-19-norlanost-1,5-dieno (designado en el presente documento como 5). En aspectos adicionales, la formulación nutracéutica comprende, además del compuesto aislado de fórmula I, II o III, un extracto de hierbas nutracéutico, que puede ser un extracto de Astragalus membranaceous.
Un compuesto aislado de fórmula I, II o III, como se ha definido anteriormente, incluyendo aspectos seleccionados como se han descrito anteriormente, también se puede usar para la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad sujeta a tratamiento aumentando la actividad telomerasa en una célula o tejido. Los ejemplos de tales enfermedades se discuten en más detalle posteriormente. De forma similar, un compuesto aislado de fórmula I, II o III, como se ha definido anteriormente, incluyendo aspectos seleccionados como se han descrito anteriormente, también se puede usar para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección crónica o aguda de la epidermis. En aspectos preferidos de tales usos, el compuesto aislado es de fórmula I o fórmula II, incluyendo aspectos seleccionados de fórmula I o fórmula II como se describe anteriormente.
También se proporciona un método de seleccionar un compuesto eficaz para aumentar la actividad telomerasa en una célula. Según este método, un derivado de un compuesto de fórmula I, fórmula II, fórmula III, como se ha definido anteriormente, se ensaya para su capacidad de aumentar la actividad telomerasa en queratinocitos o fibroblastos, medido por un ensayo TRAP como se describe en el presente documento. El derivado se selecciona si, cuando se formula en un solvente a una concentración de 1 pg/ml o menos, es eficaz para producir un nivel de actividad telomerasa en queratinocitos o fibroblastos, medido en un ensayo TRAP, al menos el 50% mayor, y preferiblemente al menos el 100% mayor, que ese medido en dichas células tratadas con dicho solvente. El derivado se puede formular después con un vehículo tópico, farmacéutico o nutracéutico.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
También se proporciona, en un aspecto relacionado, un método de seleccionar un agente para el tratamiento de afecciones agudas o crónicas de la epidermis. Según este método, un derivado de un compuesto de fórmula I, fórmula II, fórmula III, como se ha definido anteriormente, se ensaya para actividad de cicatrización en queratinocitos o fibroblastos, en un ensayo de arañazo como se describe en el presente documento. El derivado se selecciona si tiene una actividad cicatrizante medida en un ensayo de arañazo, a una concentración de 1 |jg/ml, al menos el 50% mayor que la de un control de solvente, preferiblemente al menos el 100% mayor que la de un control de solvente. El derivado se puede formular después con un vehículo tópico.
Estos y otros objetos y características de la invención serán más completamente aparentes cuando se lea la siguiente descripción detallada junto con los dibujos acompañantes.
Breve descripción de los dibujos
Las figuras 1A-H muestran las estructuras de compuestos ejemplares para uso en los métodos y composiciones descritos en el presente documento. Los compuestos 1-4, 6 y 7 están dentro del ámbito de las reivindicaciones.
La figura 2 muestra un aumento de la actividad telomerasa en queratinocitos neonatales tratados con 2 (cicloastragenol), medido en un ensayo TRAP.
La figura 3 muestra un aumento de la actividad telomerasa en queratinocitos neonatales por 1 (astragalósido IV), en comparación con EGF (10 nM) y un control de solvente, medido en un ensayo TRAP.
La figura 4 es una serie de imágenes generadas por ordenador que muestran la actividad cicatrizante de 1 (astragalósido IV) en queratinocitos adultos que envejecen, medido en un “ensayo de arañazo”.
La figura 5 es una serie de imágenes generadas por ordenador que muestran la actividad cicatrizante de 1 (astragalósido IV) y 2 (cicloastragenol) en queratinocitos neonatales jóvenes.
La figura 6 es una serie de imágenes generadas por ordenador que muestran la actividad cicatrizante de 1 (astragalósido IV) en queratinocitos que envejecen, solo y en presencia de un oligonucleótido inhibidor de telomerasa (GRN163) o un oligonucleótido control (GRN137227).
La figura 7 es un gráfico que muestra la actividad cicatrizante de 1 (astragalósido IV) en queratinocitos neonatales que envejecen, en presencia y ausencia del inhibidor de telomerasa GRN163, y en comparación con PDGF (factor de crecimiento derivado de plaquetas) ~2 nM.
Descripción detallada de la invención
I. Definiciones
Los siguientes términos, como se usan en el presente documento, tienen los significados dados a continuación, a menos que se indique de otra manera:
Se muestra a continuación un esquema general de numeración de átomos de carbono usado para la nomenclatura de los compuestos descritos en el presente documento. (Nótese que los compuestos de estructura II carecen del carbono 19, y los compuestos de estructura III carecen del carbono 18 mostrado en este esquema. Según esto, no se pretende que el esquema de numeración limite las composiciones de la invención).
“Alquilo” se refiere a un radical monovalente acíclico completamente saturado que contiene carbono e hidrógeno, que puede ser ramificado o lineal. Los ejemplos de grupos alquilo son metilo, etilo, n-butilo, t-butilo, n-heptilo, e isopropilo. “Alcoxi” se refiere a un grupo de forma OR, donde R es alquilo como se ha definido anteriormente.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
“Aciloxi” se refiere a un grupo de la forma -OC(=O)R, donde R es alquilo como se ha definido anteriormente. Según esto, “acilo” se refiere al grupo -C(=O)R.
“Alquilo inferior” (o alcoxi inferior, o aciloxi inferior) se refiere a tal grupo que tiene de uno a seis átomos de carbono; en formas de realización seleccionadas, tales grupos incluyen de uno a cuatro átomos de carbono, uno o dos átomos de carbono, o un átomo de carbono (es decir, metilo, metoxi, acetiloxi).
“Células madre” se refiere a células relativamente no diferenciadas de un linaje común que retienen la capacidad de dividirse y ciclar durante toda la vida postnatal, para proporcionar células que se pueden diferenciar más y especializarse (por ejemplo, células madre en las capas basales de la piel o en tejido hematopoyético, tal como células primitivas en la médula ósea de las que derivan todos los diferentes tipos de células sanguíneas).
Mediante “eficaz para aumentar la actividad telomerasa en una célula”, con referencia a un compuesto, se quiere decir que una composición que contiene el compuesto a una concentración de 1 pg/ml o menos es eficaz para producir un nivel de actividad telomerasa en un queratinocito o fibroblasto, medido en un ensayo TRAP como se describe en el presente documento, que es mayor, en un factor de al menos 1,5 (es decir, al menos el 50% mayor) que el nivel producido por una formulación similar que no contiene el compuesto, medido en un ensayo TRAP. En formas de realización preferidas, el compuesto es eficaz, a una concentración de 1 pg/ml o menos, para producir un nivel de actividad telomerasa en tal célula, medido en un ensayo TRAP como se describe en el presente documento, que es mayor en un factor de al menos 2 (es decir, al menos el 100% mayor) que el nivel producido por una formulación similar que no contiene el compuesto.
En referencia a la administración de un compuesto a un paciente, una “cantidad eficaz” se refiere a una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa en las células o tejidos del paciente, de modo que se logra un resultado terapéutico deseado. En referencia al tratamiento de células in vitro o ex vivo, una “cantidad eficaz” se refiere a una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa en las células, aumentando de esta manera la capacidad replicativa y/o longevidad de las células.
En concentraciones expresadas en el presente documento como % (p/v), el 100% (p/v) corresponde a 1 g de soluto/ml de solvente. Por ejemplo, el 0,1% (p/v) = 1 mg/ml.
Una “formulación de un compuesto aislado” se refiere a una formulación preparada combinando el compuesto aislado con uno o más otros ingredientes (que pueden ser ingredientes activos o inactivos) para producir la formulación. Donde el compuesto se ha purificado directamente de una fuente natural, la frase “compuesto aislado” requiere que el compuesto (antes de la formulación) se haya purificado no menos de 100 veces comparado con la pureza del compuesto en la fuente natural. Donde el compuesto no se purifica directamente de una fuente natural, la frase “compuesto aislado” se refiere a un compuesto que (antes de la formulación) se ha producido por un proceso que implica una o más etapas de síntesis química, produciendo una preparación del compuesto que no tiene menos del 5% (p/p) de pureza.
II. Métodos y composiciones para aumentar la actividad telomerasa
Según la presente invención, se proporcionan composiciones y métodos para aumentar la actividad telomerasa en una célula. Según la invención, estos compuestos son para uso en tratar infección por VIH. Según el método, una célula o tejido se pone en contacto con una formulación de un compuesto aislado de fórmula I, II o III como se divulga en el presente documento, en una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa en la célula o tejido, relativa al nivel de actividad telomerasa en la célula o tejido en ausencia del compuesto. El método también puede incluir una etapa preliminar de identificar una célula o tejido en que se desea una actividad telomerasa aumentada.
En un aspecto de la divulgación, el compuesto está representado por la fórmula I:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En la fórmula I, cada uno de X1, X2 y X3 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido, y el grupo OR1 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido. En aspectos seleccionados, cada uno de X1 y X2 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido.
En aspectos seleccionados de la fórmula I, R2 es metilo y — representa un doble enlace entre los carbonos 9 y 11, como se representa. En otros aspectos, R2 forma, junto con el carbono 9, un anillo de ciclopropilo fusionado, y representa un enlace sencillo entre los carbonos 9 y 11, como se muestra, por ejemplo, en el compuesto 1 (véase, la figura 1).
Mediante un “glucósido”, como se usa en el presente documento en referencia a cualquiera de los compuestos objeto de fórmulas I, II, o III (o derivados de los mismos), se quiere decir uno de los glucósidos conocidos (es decir, ribósido, arabinósido, xilósido, lixósido, altrósido, glucósido, manósido, gulósido, idósido, galactósido, y talósido). El glucósido típicamente está en la forma de anillo de seis miembros (piranósido), por ejemplo, glucopiranósido o manopiranósido. En formas de realización seleccionadas, el glucósido es un D-glucósido, es decir, tiene la configuración encontrada en monosacáridos naturales. Ejemplos específicos incluyen, D-ribopiranósido, D- arabinopiranósido, D-xilopiranósido, D-glucopiranósido, manopiranósido y D-galactopiranósido. Los glucósidos preferidos incluyen D-glucopiranósido y D-xilopiranósido. En aspectos adicionales, la unión es de la configuración p; por ejemplo, p-D-glucopiranósido.
Cualquiera de los grupos hidroxilo libres en un anillo glucósido presente en los compuestos objeto de fórmulas I, II o III (o derivados de los mismos) puede estar sustituido adicionalmente con un glucósido adicional, alquilo inferior, o acilo inferior, por ejemplo, metoxi o acetiloxi. Preferiblemente, como mucho uno de tal grupo hidroxilo está sustituido con un glucósido adicional. Más preferiblemente, ninguno de tal grupo hidroxilo está sustituido con un glucósido adicional, es decir, la sustitución es acilo inferior, tal como acetilo, o alquilo inferior, tal como metilo. En una forma de realización, todos los grupos hidroxilo en el/los glucósido(s) están sin sustituir.
Preferiblemente, un compuesto objeto de fórmula I, II o III (o un derivado de los mismos) incluye un máximo de tres glucósidos, más preferiblemente un máximo de dos glucósidos. En aspectos seleccionados, el compuesto incluye cero, uno o dos glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional. En aspectos seleccionados adicionales, particularmente con respecto a la fórmula I, el compuesto incluye cero o dos glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional.
En aspectos seleccionados de fórmula I, cada uno de X1 y X2 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, glucopiranósido, y xilopiranósido, y X3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, glucopiranósido, y xilopiranósido, preferiblemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto.
En aspectos adicionales de fórmula I, X1 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior y p-D-xilopiranósido; X2 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior y p-D-glucopiranósido; X3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto (=O); y OR1 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y p-D- glucopiranósido.
En aspectos seleccionados adicionales de fórmula I, X1 es OH o un glucósido, cada uno de X2 y OR1 es independientemente OH o un glucósido, y X3 es OH o ceto. Según la invención, cada uno de X1 y X2 es OH o un glucósido, OR1 es OH, y X3 es OH, en donde si X1 es un glucósido, es beta-D-xilopiranósido, y en donde si X2 es un glucósido, es beta-D-glucopiranósido. En formas de realización adicionales, X1 es B-D-xilopiranósido, X2 es p-D- glucopiranósido, OR1 es oH, y X3 es OH. En otra forma de realización, cada uno de X1, X2, X3 y OR1 es OH.
Para cada una de estas formas de realización descritas, R2 forma, junto con el carbono 9, un anillo de ciclopropilo fusionado.
Los compuestos ejemplares de estructura I según la invención para uso en los métodos de la invención incluyen los mostrados en la figura 1, y designados en el presente documento como 1 (astragalósido IV), 2 (cicloastragenol), 3 (astragenol), 4 (astragalósido IV 16-ona), 6 (cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido), y 7 (cicloastragenol 3-p-D- xilopiranósido).
Otros compuestos que tienen la estructura esqueleto de cicloastragenol (2) sustituido con 3-p-D-glucopiranósido también se consideran para uso en los métodos de la divulgación. Preferiblemente, el compuesto incluye un total de uno o dos glucósidos, unidos a carbonos separados de la estructura esqueleto (es decir, un glucósido no está unido a un glucósido adicional). Los ejemplos incluyen los compuestos naturales astragalósidos A, 1, 2, y 7, así como las astraverrucinas I y II (que se pueden aislar de Astragalus verrucosus).
La divulgación también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos de fórmula I, en donde uno de X1 y X2 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto, y el otro es un glucósido. En formas de realización adicionales, los compuestos se seleccionan de los designados 6 y 7. En otras
5
10
15
20
25
30
35
40
formas de realización, la composición farmacéutica incluye un compuesto de fórmula I en el que X3 es ceto; en una forma de realización, el compuesto es el compuesto designado como 4.
En otro aspecto, la divulgación proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos representados por la fórmula II.
En la fórmula II, cada uno de X4 y X5 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido, y OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido; donde “glucósido” y sus varios aspectos son como se ha descrito anteriormente. Como se ha indicado anteriormente, el compuesto incluye un máximo de tres glucósidos, más preferiblemente, un máximo de dos glucósidos. En aspectos seleccionados, el compuesto incluye cero, uno o dos glucósidos, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional.
En aspectos seleccionados de la fórmula II, X4 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido. En formas de realización adicionales, cada uno de X4, X5 y OR3 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, glucopiranósido y xilopiranósido.
En aspectos adicionales de fórmula II, cada uno de X4 y OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior y un glucósido, preferiblemente, D-xilopiranósido o D-glucopiranósido, y X5 se selecciona hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto (=O). Preferiblemente, en estos aspectos, OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, y aciloxi inferior, y es más preferiblemente hidroxi.
En aspectos adicionales de fórmula II, cada uno de X4, X5 y OR3 es independientemente OH o un glucósido, por ejemplo, D-xilopiranósido o D-glucopiranósido. En aspectos aún adicionales, X4 es OH o un glucósido, y cada uno de X5 y OR3 es Oh. En un aspecto, cada uno de X4, X5 y OR3 es OH. Este compuesto (formalmente nombrado 20R,24S-epoxi-3p,16p,25-trihidroxi-9p-metiM9-norlanost-1,5-dieno) se designa en el presente documento como 5.
La divulgación también proporciona compuestos de fórmula II, anteriormente, donde cada uno de X4 y X5 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido, y OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido, en donde cualquiera de los grupos hidroxilo en dicho glucósido puede estar sustituido con un glucósido adicional, alquilo inferior o acilo inferior. En aspectos seleccionados, el compuesto incluye cero, uno o dos glucósidos. Preferiblemente cada uno de dicho glucósido, cuando está presente, es de la configuración D. En aspectos adicionales, cada uno de X4 y OR3 se selecciona de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior y un glucósido, y X5 se selecciona hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y ceto (=O). En aspectos aún adicionales, X4 es OH o un glucósido, y cada uno de X5 y OR3 es OH. En un aspecto, cada uno de X4, X5 y OR3 es OH, es decir, el compuesto designado en el presente documento como 5.
En un aspecto adicional, la divulgación proporciona un método de aumentar la telomerasa en una célula o tejido, poniendo en contacto la célula o tejido con una formulación de un compuesto aislado de fórmula III. De nuevo, el método puede incluir la etapa de identificar una célula o tejido en que se desea un aumento en actividad telomerasa.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En la fórmula III, cada uno de X6, X7, X8 y OR4 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, ceto, y un glucósido, donde “glucósido” y sus varios aspectos son como se ha descrito anteriormente. Preferiblemente, el compuesto incluye un máximo de dos glucósidos, más preferiblemente, un máximo de un glucósido, ninguno de los cuales está sustituido con un glucósido adicional. Los glucósidos preferidos incluyen D- glucopiranósido y D-xilopiranósido.
En aspectos seleccionados de la estructura NI, cada uno de X6, X7, X8 y OR4 se selecciona independientemente de hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi inferior, y un glucósido, y preferiblemente se selecciona de hidroxi y un glucósido.
En aspectos adicionales de la estructura III, cada uno de X8 y OR4 es OH, y cada uno de X6 y X7 se selecciona independientemente de hidroxilo y un glucósido, por ejemplo p-D-glucopiranósido. En aspectos adicionales, OR4 es OH. Preferiblemente cada uno de X6 y X8 es también Oh y X7 es un glucósido. Un compuesto ejemplar de estructura III es ginsenósido RH1, designado en el presente documento como 8.
III. Fuentes y síntesis de compuestos de fórmulas I-III
Los compuestos de fórmulas I, II y III se pueden en general aislar o sintetizar de materiales naturales. Por ejemplo, los astragalósidos I-VII se pueden aislar de raíz de Asatragalus membranaceus, como se describe, por ejemplo, en
A. Kadota et al. JP Kokai No. 62012791 A2 (1987). Como se describe en ella, el tejido de raíz (8 kg), que está comercialmente disponible de varias fuentes de hierbas beneficiosas, se somete a reflujo con MeOH, y el extracto concentrado (200 g) se redisuelve en MeOH y se fracciona por cromatografía en columna en gel de sílice usando mezclas de CHCl3/MeOH/H2O como eluyentes. Cada fracción se procesa por cromatografía inversa en gel de sílice usando mezclas de solventes similares, para dar las siguientes cantidades aproximadas de compuestos aislados: acetilastragalósido I (0,2 g), astragalósido I (3,5 g), isoastragalósido I (0,3 g), astragalósido II (2,3 g), astragalósido III (1,0 g), astragalósido IV (0,8 g), astragalósido V (0,1 g), astragalósido VI (0,3 g), y astragalósido VII (0,1 g). Véase también Kitagawa et al., Chem. Pharm. Bull. 31(2):698-708 (1983b).
Astragalósido IV (designado en el presente documento como 1) también se obtuvo por los presentes autores de Ai Chunmei, Chengdu 610041, P.R. China.
Cicloastragenol (2) se puede preparar por tratamiento de astragalósido IV (1) con HCl metanólico, seguido por neutralización, procesamiento estándar, y purificación por cromatografía, como se describe en la sección experimental posteriormente (ejemplo 1). También se puede obtener cicloastragenol por degradación oxidativa (tratamiento con oxígeno y sodio elemental) de un extracto en butanol de Astragalus membranaceus, como describen P-H Wang et al., J. Chínese Chem. Soc. 49:103-6 (2002). Astragenol (3) y cicloastragenol (2) también se pueden obtener según el procedimiento de Kitagawa et al., Chem. Pharm. Bull. 31(2):689-697 (1983a).
Los compuestos designados en el presente documento como 6 (cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido) y 7 (cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido) se obtuvieron sometiendo a reflujo una solución de astragalósido IV (1) y ácido sulfúrico en metanol seguido por procesamiento estándar y cromatografía en gel de sílice, como se describe en la sección experimental posteriormente (ejemplo 2). También se obtuvieron el producto de reorganización 5 (no reivindicado) y la aglucona, es decir, cicloastragenol (2).
El compuesto 16-ceto 4 se preparó por acetilación de los grupos hidroxilo del glucósido de astragalósido IV, seguido por oxidación con clorocromato de piridinio del 16-hidroxilo y restablecimiento de los hidroxilos del glucósido por tratamiento con borohidruro de sodio (véase, Kitagawa et al., 1983b, citado anteriormente).
La preparación de varios aspectos de las fórmulas I-III, por ejemplo, compuestos que tienen grados variables de alquilación o acilación, o grupos ceto, se puede preparar según métodos conocidos de síntesis orgánica, usando materiales de partida naturales y/o comercialmente disponibles tal como cicloastragenol, astragenol, los astragalósidos o astraverricinas, o panaxatriol, con separación se productos según se necesite. Se dan varios ejemplos en la sección experimental posteriormente. Por ejemplo, los grupos hidroxilo 3, 6 y/o 16 menos estéricamente entorpecidos en general se pueden modificar selectivamente, por ejemplo, por acilación. Si se desea, los grupos hidroxilo sin reaccionar se pueden modificar después por separado, por ejemplo, por alquilación, seguido por eliminación opcional de los grupos acilo. Los compuestos de fórmula I que tienen un anillo ciclopropilo fusionado (por ejemplo, cicloastragenoles) se pueden convertir a los compuestos que tiene un grupo 19-metilo y un doble enlace 9-11 (por ejemplo, astragenoles) por tratamiento con ácido sulfúrico. Esta reacción se puede acompañar de desglucosilación, como se muestra en las reacciones de los ejemplos 9B y 10B, posteriormente.
IV. Determinación de la actividad biológica A. Protocolo del ensayo TRAP
La capacidad de un compuesto para aumentar la actividad telomerasa en una célula se puede determinar usando el ensayo TRAP (Protocolo de Amplificación de Repeticiones Teloméricas), que se conoce en la técnica (por ejemplo,
5
10
15
20
25
30
35
40
Kim et al., Patente en EE UU No. 5.629.154; Harley et al., Patente en EE UU No. 5.891.639). Como se usa en el presente documento, “actividad telomerasa medida en un ensayo TRAP” se refiere a la actividad telomerasa medida en queratinocitos o fibroblastos según el siguiente protocolo. La actividad típicamente se compara con la actividad medida de forma similar en un ensayo control de tales células (por ejemplo, una actividad telomerasa el 50% mayor que la observada en un control de solvente).
Se pueden obtener líneas celulares adecuadas para su uso en el ensayo, preferiblemente fibroblastos humanos normales (NHF) o queratinocitos humanos normales (NHK), de fuentes comerciales, tal como Cascade Biologics, Portland, OR o 4C Biotech, Seneffe, Bélgica, o de la ATCC (Colección Americana de Cultivos Tipo). Las líneas de fibroblastos humanos normales de la ATCC que se pueden localizar en la página web de la ATCC incluyen, por ejemplo, CCL135, CCL137, y CCL151.
Las células se siembran a aproximadamente 5000 células/pocillo, en medio de cultivo (por ejemplo, medio Epi-Life + suplemento de factor de crecimiento de queratinocitos + CaCl2 60 mM, suministrado por Cascade Biologics, Inc.) durante dos días. Se añaden las composiciones de prueba en un solvente adecuado, tal como etanol al 95% o DMSO, a los pocillos seleccionados en un intervalo de concentraciones y se incuban durante 16-24 horas. Para los datos descritos en el presente documento, el solvente usado fue DMSO.
La solución de lisado de las células se prepara por adición de 3,0 ml de Nonidet® P-40, 1,0 ml de tampón de lisis CHAPS (véase posteriormente), y 1,0 ml de tampón TRAP 10X (véase posteriormente) a 5,0 ml de H2O sin DNasa, ni RNasa (El agua sin DNasa, ni RNasa se puede generar por tratamiento con DEPC (pirocarbonato de dietilo) o comprar de vendedores tal como Sigma).
La morfología de las células tratadas primero se observa en un microscopio, para verificar que no hay signos visuales de crecimiento irregular. El medio se elimina de los pocillos, y las células se enjuagan dos veces en PBS (sin Ca ni Mg). Las placas se enfrían, preferiblemente en hielo, y se añade (aprox. 100 pl por pocillo) tampón de lisis (véase posteriormente) y se trituran pipeteando arriba y abajo varias veces. Las células se incuban en hielo durante 1 hora.
Solución madre Tris-HCl 1 M pH 7,5 MgCl2 1 M EGTA 0,5 M AESBF 100 mM CHAPSa al 10%
BSA
Glicerol al 100%
H2O sin DNasa, ni RNasa
Tampón de lisis CHAPS
Para 1 ml 10 pl
1 pl
2 pl 1 pl 50 pl 1 mg 100 pl
936 pl (hasta 1 ml)
Concentración final
10 mM
1 mM
1 mM
0,1 mM
0,5%
1 mg/ml 10%
a El detergente CHAPS se añade justo antes del uso del tampón de lisis. Además, se añade AESBF (fluoruro de 4- (2-aminoetil)-bencenosulfonilo HCl) al tampón de lisis justo antes de la etapa de extracción.
Tampón TRAP 10X
Solución madre
Para 5 ml
Concentración final
Tris-HCl 1 M pH 8,3 1 ml 200 mM
MgCl2 1 M 75 pl 15 mM
KCl 1M 3,15 ml 630 mM
Tween 20 (Boehringer Mannheim) 25 pl 0,5%
EGTA 0,1 M 500 pl 10 mM
BSA 20 mg/ml 250 pl 1 mg/ml
Se combinan los siguientes materiales para generar una mezcla maestra de PCR
Solución madre Tampón TRAP 10X dNTPs 2,5 mM Cebador Cy5-TS (0,1 mg/ml) Cebador aCx (0,1 mg/ml) Est. Int. TSU2 (1 pg/ml) Cebador U2 (0,1 mg/ml)
Taq polimerasa (5 U/pl)
H2O sin DNasa, ni RNasa
Por reacción (40 pl)
5.0 pl
1.0 pl 0,2 pl
1.0 pl
1.0 pl
1.0 pl 0,4 pl
30,4 pl (hasta 40 pl total)
Concentración final3 1X
50 pM 0,4 ng/ml 2 ng/ml 20 fg/ml 2 ng/ml 2 unidades
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
a Basado en el volumen final de 40 |jl de mezcla de PCR más 10 |jl de lisado celular = 50 jl.
La mezcla de PCR incluye los siguientes componentes: el cebador Cy5-TS, un oligonucleótido marcado con Cy5 en 5' que tiene la secuencia 5'-AAT CCG TCG AGC AGA GTT-3' (SEQ ID NO:1), es un sustrato de telomerasa. Dependiendo de la actividad telomerasa del medio, se añadirán repeticiones teloméricas (que tienen la secuencia ..AGGGTT..) al sustrato, para formar productos extendidos de telomerasa, también denominados productos de telomerasa o productos TRAP. El cebador ACX, que tiene la secuencia 5'- GCG CGG CTT ACC CTT ACC CTT ACC CTA ACC-3' (SEQ ID NO: 2), es un cebador inverso anclado que hibrida con los productos extendidos de telomerasa.
El estándar interno TSU2, un oligonucleótido que tiene la secuencia 5'-AAT CCG TCG AGC AGA GTT AAA AGG CCG AGA AGC GAT-3'; SEQ ID NO:3), una extensión de la secuencia del cebador TS, se añade en una cantidad pequeña controlada para fines de cuantificación. El cebador U2, que tiene la secuencia 5'-ATC GCT TCT CGG CCT TTT (SEQ ID NO:4), es un cebador inverso diseñado para hibridar con la región 3' del estándar interno.
Se añade una muestra del lisado celular (10 jl) a 40 jl de esta mezcla de PCR en un tubo de reacción, y la mezcla se incuba a temperatura ambiente (30°C) durante 30 minutos. La PCR se lleva a cabo incubando la mezcla a las siguientes temperaturas durante los tiempos indicados: 94°C/30 seg, 60°C/30 seg, y 72°C/30 seg; repitiendo este ciclo de tres etapas para realizar 20-30, preferiblemente 31 ciclos.
Se añade colorante de carga que contiene, por ejemplo, azul de bromofenol y xileno cianol, y las muestras se someten a PAGE no desnaturalizante del 10-15% en TBE 0,6x, hasta que el azul de bromofenol se sale del gel. La formación se producto se observa, por ejemplo, usando un fluoroimager para la detección de los productos de telomerasa marcados con CY5 (excitación máxima a 650 nm; emisión máxima a 670 nm).
La cantidad final del estándar interno TSU2 después de la amplificación es en general 5-10 amol por mezcla de reacción de 50 jl. Este control interno da un producto específico de amplificación de PCR 36-mero que aparece como una banda distinta en el gel por debajo del primer producto de adición telomérica (es decir, el producto de una adición telomérica al oligonucleótido TS, seguido por amplificación con el cebador inverso ACX). Esta banda de control interno se puede usar para normalizar las amplificaciones de PCR de diferentes muestras.
El número relativo de moléculas producto de telomerasa (TM) generadas en el ensayo se determina según la fórmula siguiente:
TM = (Tproductos TRAP - TBKD1)/(TEst Int-TeKD2)
donde: Tproductos trap es la intensidad total medida en el gel para todos los productos de telomerasa, Tbkd1 es la intensidad de fondo medida en un carril en blanco para un área equivalente en tamaño a la abarcada por los productos de telomerasa, Test Int es la intensidad para la banda del estándar interno, y Tbkd2 es la intensidad de fondo en un carril en blanco para un área equivalente en tamaño a la abarcada por la banda del estándar interno. El número resultante es el número de moléculas de productos de telomerasa generados para un tiempo de incubación determinado que, para los fines de determinar TM, se designa en el presente documento como 30 minutos.
Los compuestos preferidos de fórmulas I, II o III como se han descrito anteriormente son capaces de producir, a una concentración de 1 jg/ml o menor, un nivel de actividad telomerasa en fibroblastos o queratinocitos al menos el 25% mayor que el nivel de tal actividad visto en un control de solvente. Más preferiblemente, el compuesto es capaz de producir, a una concentración de 1 jg/ml o menor, una actividad telomerasa al menos el 50% mayor que la vista en un control de solvente. Actividades incluso más potentes pueden ser apropiadas para algunas aplicaciones, tal como compuestos que producen actividades telomerasa al menos aproximadamente el 75%, 100% o 500% mayores que el nivel de tal actividad visto en un control de solvente, medido en el ensayo TRAP descrito, a una concentración de 1 jg/ml o menor.
B. Resultados de ensayo TRAP ejemplares
Se evaluó la eficacia en aumentar la actividad telomerasa para compuesto de fórmula I anteriormente en varias concentraciones. Los ensayos se llevaron a cabo en células HEKneoP (queratinocitos neonatales), según el protocolo descrito anteriormente. Las concentraciones variaron desde aprox. 0,03 jM a 10 jM en DMSO.
Como se muestra en la figura 2, para composiciones que contienen el compuesto 1 (astragalósido IV), la actividad telomerasa aumentó al aumentar la concentración, hasta aproximadamente el 306% del control a 1,0 jM, después disminuyó según la concentración aumentó más hasta 10 jM. Como se muestra en la figura 2, para composiciones que contienen 2 (cicloastragenol), la actividad telomerasa aumentó hasta aproximadamente el 300% del control a
1,0 jM (comparada con aproximadamente el 200% en células tratadas con EGF (factor de crecimiento epidérmico) 10 nM), después disminuyó con aumentos adicionales en concentración.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
La tabla 1 da, para composiciones que contienen cada uno de los compuestos mostrados en las figuras 1A-G, la concentración eficaz mínima (CEM) del compuesto que produjo un nivel de actividad telomerasa dos veces la vista en un control de DMSO (es decir, el 100% mayor).
Tabla 1
- Designación
- Nombre CEM,pM
- 1
- astragalósido IV 0,01
- 2
- cicloastragenol 0,01
- 3
- astragenol 0,03
- 4
- astragalósido IV 16-ona 0,03
- 5
- 20R,24S-epoxi-33,163,25-trihidroxi-9p-metil-19-norlanost-1,5-dieno 0,10
- 6
- cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido 3,2
- 7
- cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido 3,2
- 8
- ginsenósido RH1 10
C. Protocolo de ensayo de cicatrización
Los compuestos de fórmula I-III se pueden usar para fomentar la cicatrización de heridas, quemaduras, abrasiones u otras afecciones agudas o crónicas de la epidermis, como se discute posteriormente. Como se usa en el presente documento, “actividad de cicatrización medida en un ensayo de arañazo” se refiere a la actividad medida en queratinocitos o fibroblastos según el siguiente protocolo, y expresada como el valor de C mostrado en la fórmula posterior.
Las células se siembran en botellas (5 x 105 células por botellas) y se cultivan durante dos días en una cámara humidificada a CO2 al 5%, 37°C. Para crear la “herida”, una pipeta de plástico de 2 ml se arrastra suavemente para “arañar” la superficie celular. La herida ideal tiene aproximadamente 2-3 mm de anchura y 50 mm de longitud (a lo largo del eje largo de la botella de cultivo). Las células se vuelven a tratar con medio que contiene o bien vehículo (DMSO, muestra control) o composiciones de prueba a múltiples concentraciones. Se identifica un área de herida, la botella se marca, y el aspecto de las células se documenta fotográficamente durante 3-4 días de cultivo seguido de las células.
La cantidad de cierre de herida se determina midiendo la anchura de la herida a lo largo del tiempo para muestras tratadas con compuesto relativas a células tratadas con vehículo u otras control. Las medidas se hacen a partir de las fotografías tomadas para cada una de las muestras los días 1 (inmediatamente después de arañar), 2, 3 y 4. El porcentaje de cicatrización (también expresado como “actividad de cicatrización”) se calcula mediante la siguiente fórmula:
C = 100 -[100 x An/Ao]
donde An es la anchura de la herida el día n y A0 es la anchura de la herida el día uno (inmediatamente después de arañar).
Los compuestos preferidos de fórmula I-III como se han descrito anteriormente son capaces de producir, a una concentración de 1 pg/ml o menos, una cantidad de cierre de herida (actividad de cicatrización) en un ensayo de arañazo de queratinocitos o fibroblastos, como se ha descrito anteriormente, que es al menos el 25% mayor que la vista en células sin tratar o control. Actividades incluso más potentes pueden ser apropiadas para algunas aplicaciones, tal como compuestos que producen, a una concentración de 1 pg/ml o menos, una cantidad de cierre de herida en un ensayo de arañazo de queratinocitos o fibroblastos que el al menos aproximadamente el 50% o el 100% mayor que la vista en células sin tratar o control.
D. Resultados ejemplares del ensayo de arañazo
Se evaluó la actividad de cicatrización de los compuestos de la invención 1 (astragalósido IV) y 2 (cicloastragenol) en queratinocitos que envejecen, mediante un ensayo de arañazo como se ha descrito anteriormente. Los resultados de un ensayo típico se muestran en la figura 4, donde la fila superior de imágenes muestra células control (tratadas con solvente, DMSO), y la fila inferior muestra células tratadas con 1 0,1 pg/ml (aproximadamente 0,13 pM) en el mismo solvente. Las células tratadas estaban confluentes el día 4, en contraste con las células control, en las que una “herida” considerable permanecía el día 4. Se vieron resultados similares con esta composición y con 2 (cicloastragenol) 0,01 pM en queratinocitos jóvenes, como se muestra en la figura 5.
La figura 6 muestra la actividad de cicatrización de una composición que contiene 1 (astragalósido IV) en queratinocitos adultos que envejecen, medida en un ensayo similar, en presencia y ausencia de un oligonucleótido inhibidor de telomerasa (GRN163) y un oligonucleótido control (GRN137227). Como se muestra, el oligo inhibidor de telomerasa GRN163 bloquea los efectos de cicatrización de la composición de 1; el efecto del oligo control GRN137227 es mínimo. (GRN163 es un oligonucleótido inhibidor de telomerasa que se dirige a la región molde del
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
componente ARN de la telomerasa. Específicamente, GRN163 es un oligonucleótido tiofosforamidato N3'^P5' 13- mero, descrito en detalle en la publicación PCT No. WO 01/18015. GRN137227 es un oligonucleótido control tiofosforamidato N3’^P5’ 13-mero que tiene una secuencia mal emparejada).
La tabla 2 a continuación muestra los valores de C (actividad de cicatrización) para los compuestos 1 y 2 empleados en los ensayos de arañazo mostrados en las figuras 5 y 6, basados en los resultados de esos ensayos, usando la fórmula mostrada anteriormente.
Tabla 2
- Anchura aprox. de la herida (unidades arbitrarias) Ccontrol Cprueba
- Día 1 control Día 4 control Día 1 prueba Día 4 prueba
- Fig. 4 (1)
- 22 10 17 0 54,5 100
- Fig. 5 (1)
- 19 9 18 0 52,6 100
- Fig. 5 (2)____
- 19 9 21 2 52,6 90,5
La figura 7 ilustra gráficamente el cierre de herida como porcentaje del control para el compuesto de la invención 1 (astragalósido IV) en queratinocitos neonatales que envejecen, en presencia y ausencia de un inhibidor de telomerasa (GRN163), y en comparación con PDGF (factor de crecimiento derivado de plaquetas) 50 ng/ml (aprox. 2 ml). Como se muestra, la eficacia de 1 era comparable a la de PDGF, y de nuevo se bloqueó por la adición de GRN163.
V. Selección de compuestos adicionales
La divulgación también proporciona métodos de seleccionar compuestos adicionales eficaces para aumentar la actividad telomerasa, por cribado de derivados de compuestos de fórmula I, II, o III en un ensayo TRAP como se describe en el presente documento. En este aspecto, un “derivado” incluye un compuesto producido por modificación de un compuesto de fórmula I, II o III en una o más de las siguientes formas: conversión de un grupo hidroxilo a un grupo carbamato de alquilo inferior, halógeno, tiol, tioéter de alquilo inferior, amino, alquilamino inferior, amida de alquilo inferior, aldehido, o ceto (por ejemplo, alquilación, con formación de un grupo hidroxilo adicional); adición de halógeno, hidroxilo y/o hidrógeno a un doble enlace carbono-carbono; eliminación de un grupo hidroxilo (es decir, conversión a hidrógeno); e inversión de estereoquímica en uno o más centros quirales, preferiblemente un centro quiral que tiene oxígeno. Como se usa en el presente documento, un “derivado” producido por tal(es) modificación(es) excluye los compuestos de fórmulas I, II y III mismos como se han definido anteriormente.
Todas estas modificaciones se pueden lograr usando métodos de síntesis estándar, empleando reacciones sintéticas bien conocidas tal como sustitución nucleófila, que puede incluir la conversión de un grupo hidroxilo a un grupo saliente mejor, tal como tosilato; esterificación; alquilación; oxidación; reducción; halogenación; hidratación; hidrogenación; etc.
Un derivado de un compuesto de fórmula I, II, o III, formulado en un medio solvente adecuado a una o más concentraciones, se criba en un ensayo TRAP de queratinocitos o fibroblastos como se ha descrito anteriormente. Los derivados preferidos para la selección incluyen los que son eficaces, cuando se formulan en un solvente a una concentración de 1 pg/ml o menos, para producir un nivel de actividad telomerasa en queratinocitos o fibroblastos, medido en un ensayo TRAP, al menos el 50% mayor que la medida en dichas células tratadas con dicho solvente.
Alternativamente, o además, un derivado de fórmula I, II, o III, formulado en un medio solvente adecuado a una o más concentraciones, se ensaya para actividad de cicatrización en un ensayo de arañazo como se ha descrito anteriormente. Los derivados preferidos para la selección incluyen los que tienen una actividad de cicatrización, a una concentración de 1 pg/ml o menos, al menos el 25% mayor, y más preferiblemente al menos el 50% mayor, que la de un control de solvente.
VI. Indicaciones terapéuticas y métodos de tratamiento
La presente divulgación proporciona métodos para aumentar la actividad telomerasa en una célula, poniendo en contacto una célula o tejido con una formulación de un compuesto aislado de fórmula I, II o III como se divulgan en la sección II anteriormente, en una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa en la célula. El método puede incluir la etapa preliminar de identificar una célula o tejido en el que se desea un aumento de la actividad telomerasa. La célula puede estar en cultivo, es decir, in vitro o ex vivo, o dentro de un sujeto o paciente in vivo.
Los beneficios que se van a producir de un aumento en la actividad telomerasa en una célula o tejido incluyen, por ejemplo, aumento de la capacidad replicativa y/o longevidad de las células puestas en contacto. El método puede comprender además diagnosticar una afección en un sujeto o paciente en donde se desea un aumento en la actividad telomerasa en células o tejido del paciente; por ejemplo, diagnosticar una enfermedad sujeta a tratamiento por un aumento en la actividad telomerasa en células o tejido. Según esto, la divulgación proporciona métodos de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
tratar una afección en un paciente, aumentando la actividad telomerasa en células o tejido de dicho paciente, el método comprende administrar a un sujeto en necesidad de tal tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, II o III como se ha divulgado en la sección II anteriormente. Una “cantidad eficaz” se refiere a una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa en la células o tejido del paciente, de modo que se alcance un resultado terapéutico.
Tales afecciones pueden incluir, por ejemplo, afecciones asociadas con senescencia celular o con una tasa aumentada de proliferación de una célula en ausencia de telomerasa, lo que produce pérdida de telómeros acelerada. Mediante “tasa de proliferación aumentada” se quiere decir mayor tasa de división celular comparada con células normales de ese tipo celular, o comparada con células normales en otros individuos de ese tipo celular. La senescencia de esos grupos de células a una edad anormalmente temprana puede finalmente producir enfermedad (véase, West et al., patente en EE UU No. 6.007.989).
Existen varios estados de enfermedad en los que un aumento en la actividad telomerasa en ciertos tipos celulares puede ser beneficioso. Según esto, la divulgación proporciona métodos de tratar en un paciente una afección seleccionada de las siguientes, aumentando la actividad telomerasa en las células del paciente, que comprende administrar a un sujeto en necesidad de tal tratamiento, una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, II, o III como se ha descrito anteriormente. En algunos casos, la afección también puede estar sometida a tratamiento por terapia celular ex vivo, como se describe posteriormente, empleando los tipos celulares asociados (indicados en paréntesis).
(a) enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, e ictus (células del sistema nervioso central, incluyendo neuronas, células de glía, por ejemplo, astrocitos, células endoteliales, fibroblastos),
(b) enfermedades seniles de la piel, tal como atrofia y adelgazamiento dérmico, elastolisis y arrugas en la piel, hiperplasia o hipoplasia de glándulas sebáceas, lentigo senil, y otras anomalías de pigmentación, encanecimiento del pelo y pérdida o adelgazamiento del pelo, o úlceras crónicas de la piel (fibroblastos, células de glándulas sebáceas, melanocitos, queratinocitos, células de Langerhans, células endoteliales microvasculares, células del folículo piloso),
(c) enfermedad degenerativa de las articulaciones (células del cartílago articular, tal como condrocitos y fibroblastos lacunares y sinoviales),
(d) osteoporosis y otras afecciones degenerativas del sistema esquelético (células del sistema esquelético, tal como osteoblastos, células estromales o mesenquimatosas de la médula ósea, células osteoprogenitoras),
(e) enfermedades seniles y de estrés del sistema vascular incluyendo ateroesclerosis, calcificación, trombosis y aneurismas (células del corazón y sistema vascular, incluyendo células endoteliales, células de músculo liso, y fibroblastos adventicios),
(f) degeneración macular senil (células del ojo, tal como células de epitelio pigmentadas y endoteliales vasculares),
(g) SIDA (células CD8+ restringidas a VIH), y
(h) alteración del sistema inmunitario senil y por estrés, incluyendo alteración de la renovación de tejido, que se produce con envejecimiento natural, cáncer, terapia de cáncer, infecciones agudas o crónicas, o con trastornos genéticos que producen recambio celular acelerado, y anemias relacionadas y otras afecciones degenerativas (otras células del sistema inmunitario, incluyendo células en los linajes linfoide, mieloide y eritroide, tal como linfocitos B y T, monocitos, macrófagos circulantes y especializados en tejido, neutrófilos, eosinófilos, basófilos, células NK, y sus respectivos progenitores).
Además de los tipos celulares indicados anteriormente, tipos celulares adicionales en los que un aumento en la actividad telomerasa puede ser terapéuticamente beneficioso incluyen, pero no están limitados a, células del hígado, glándulas endocrinas y exocrinas, musculatura lisa, o musculatura esquelética.
Según la invención, los compuestos son para uso en tratar infección por VIH. En el caso de individuos infectados por VIH, el recambio de células CD8+ aumenta ya que estas células intentan controlar el nivel de células cD4+ infectadas por VIH. En SIDA (punto (g) anteriormente), se cree que la enfermedad está causada por la senescencia temprana de células CD8+ restringidas a VIH. El envejecimiento de tales células se atribuye no solamente a la cantidad anómala de pérdida de secuencias de telómeros por duplicación celular, sino, además, a la tasa replicativa aumentada de las células, de modo que el desgaste de los telómeros es mayor de lo normal para ese grupo de células. La invención, por tanto, proporciona compuestos para uso en métodos de tratar un sujeto infectado por VIH, y más particularmente de reducir la senescencia temprana de células CD8+ restringidas a VIH en un sujeto infectado por VIH, administrando a un sujeto en necesidad de tal tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto como se especifica en las reivindicaciones.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Un aumento en la actividad telomerasa puede beneficiar a células que no se dividen, así como a células en proliferación, por ejemplo, en afecciones asociadas con susceptibilidad aumentada a muerte celular debido a estrés, tal como isquemia en insuficiencia cardiaca o en ictus (véase, por ejemplo, Oh y Schneider, J Mol Cell Cardiol 34(7):717-24; Mattson, Exp Gerontol. 35(4):489-502). La divulgación, por tanto, proporciona métodos de reducir la muerte celular inducida por estrés o daño al ADN en un sujeto, tal como un sujeto que experimenta afecciones isquémicas en tejido debido a insuficiencia cardiaca o ictus, aumentando la actividad telomerasa en las células del sujeto, que comprende administrar a un sujeto en necesidad de tal tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, II o III como se divulga en la sección II anteriormente. Como se ha indicado anteriormente, el método puede incluir la etapa preliminar de diagnosticar en el sujeto la afección indicada.
En otro aspecto, la composición se puede usar para el tratamiento de individuos en los que uno o más tipos celulares son limitantes en ese paciente, y cuya vida se puede extender extendiendo la capacidad de esas células de seguir la replicación o resistir la muerte celular inducida por estrés. Un ejemplo de tal grupo de células es linfocitos presentes en pacientes de síndrome de Down. La divulgación, por tanto, proporciona un método de aumentar la capacidad replicativa y/o longevidad de linfocitos presentes en un paciente con síndrome de Down, aumentando la actividad telomerasa en dichas células del paciente, que comprende administrar a tal paciente una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, II o III como se divulgan en la sección II anteriormente. Las composiciones también se pueden usar para mejorar la resistencia a muerte celular inducida por estrés que se produce durante el envejecimiento normal.
En un aspecto adicional de la divulgación, aumentar la actividad telomerasa es eficaz para fomentar la cicatrización de heridas, quemaduras, abrasiones u otras afecciones agudas o crónicas de la epidermis. La divulgación, por tanto, proporciona un método de tratar una afección aguda o crónica de la epidermis, administrando a un paciente en necesidad de tal tratamiento, preferiblemente por vía tópica al área afectada, una cantidad eficaz de una formulación de un compuesto aislado de fórmula I, II o III como se divulga en la sección II anteriormente.
Como se usa en el presente documento, una “afección aguda o crónica de la epidermis” incluye afecciones agudas tal como lesiones padecidas en traumatismo, quemaduras, abrasiones, incisiones quirúrgicas, sitios de injertos donantes, y lesiones causadas por agentes infecciosos, y afecciones crónicas tal como úlcera venosa crónica, úlcera diabética, úlcera de compresión, úlceras de decúbito, y úlceras o llagas de la superficie mucosa. También se incluyen lesiones de la piel o superficie epitelial causadas por una afección o infección inflamatoria persistente, o por un defecto genético (tal como formación de queloide y anomalías de coagulación). Véase, por ejemplo, la publicación PCT No. WO 02/91999.
Los efectos deseables de un aumento en la actividad telomerasa en tal tratamiento incluyen proliferación o migración celular en el sitio de tratamiento, epitelización de la superficie, cierre de una herida si está presente, o restablecimiento de función fisiológica normal. Mediante “epitelización” o “reepitelización” de un sitio de tratamiento se quiere decir un aumento en la densidad de células epiteliales en el sitio como resultado de la terapia aplicada.
El método también se puede usar para aumentar el crecimiento de células injertadas. Los efectos deseables de un aumento en la actividad telomerasa en tal tratamiento incluyen cobertura del sitio de tratamiento, supervivencia de las células injertadas, falta de rechazo inmunitario, cierre de una herida si está presente, o restablecimiento de la función fisiológica normal. Las células injertadas pueden participar en el cierre de una herida ya sea participando directamente en el proceso de cicatrización (por ejemplo, convirtiéndose en parte del tejido cicatrizado), o cubriendo la herida y proporcionando de esta manera un medio que fomenta la cicatrización por células huéspedes.
La divulgación también contempla la manipulación de la piel y la reparación de cualquier defecto percibido en la superficie de la piel para otros fines, tal como mejora estética.
En un aspecto adicional, los métodos y composiciones de la divulgación se pueden usar para aumentar la capacidad replicativa y/o extender la longevidad de células en cultivo, por ejemplo, en terapia celular ex vivo o en la producción de anticuerpos monoclonales, aumentando la actividad telomerasa en las células. Aumentar la actividad telomerasa aumenta la capacidad replicativa de tales células ralentizando la pérdida de repeticiones de los telómeros y/o mejorando la resistencia a muerte celular inducida por estrés durante la proliferación celular.
En el caso de aplicaciones ex vivo, una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, II o III como se han descrito anteriormente, se añade a células en explantes obtenidas de un sujeto. Una “cantidad eficaz” se refiere a una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa en las células, aumentando de esta manera la capacidad replicativa y/o la longividad de las células.
Las células en explantes pueden incluir, por ejemplo, células madre, tal como células madre de médula ósea (patente en EE UU No. 6.007.989), células estromales de médula ósea (Simonsen et al., Nat Biotechnol 20(6):592-6, 2002), o células corticosuprarrenales (Thomas et al, Nat Biotechnol 18(1):39-42, 2000). Los estados de enfermedad tal como los indicados en los puntos (a)-(g) anteriormente también se pueden someter a terapia celular ex vivo. Los ejemplos incluyen el uso de células satélite de músculo para el tratamiento de distrofia muscular, osteoblastos para
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
tratar osteoporosis, células epiteliales pigmentadas retínales para degeneración macular senil, condrocitos para artrosis, y así sucesivamente.
Por ejemplo, el reconocimiento de que células CD8+ funcionales son limitantes en pacientes de SIDA para controlar la expansión de células CD4+ infectadas permite que se conciba un protocolo terapéutico en el que células CD8+ restringidas a VIH se retiran de un individuo infectado por VIH en una fase temprana, cuando se detecta el SIDA, se almacenen en un banco, y después se vuelvan a introducir en el individuo en una fase posterior, cuando ese individuo ya no tiene las células CD8+ requeridas disponibles. Por tanto, la vida de un individuo se puede extender mediante un protocolo que implica la administración continuada de las células limitantes de ese individuo en puntos de tiempo apropiados. Estos puntos de tiempo apropiados se pueden determinar siguiendo la senescencia de células CD8+, o determinando la longitud de los telómeros en tales células CD8+, como una indicación de cuando esas células se volverán senescentes. Según la divulgación, las células almacenadas se pueden expandir en número en presencia de un agente que ralentiza la pérdida de repeticiones de telómeros, es decir, un compuesto de fórmula I, II o III como se divulga en la sección II anteriormente.
Según esto, la divulgación proporciona métodos de terapia celular ex vivo, que incluyen obtener una población celular de un sujeto, y expandir la población celular ex vivo, en donde la población celular se trata con un compuesto de fórmula I, II o III como se divulga en la sección II anteriormente, en una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa y aumentar mediante ello la capacidad replicativa y/o la longevidad de la población celular. El método generalmente incluye diagnosticar en un sujeto una afección objeto de tratamiento por terapia celular ex vivo, tales como las indicadas anteriormente.
En una forma de realización adicional, la divulgación proporciona un método de proliferación de células madre, en donde una población de células madre se trata con un compuesto de fórmula I, II o III como se divulga en la sección II anteriormente, en una cantidad eficaz para aumentar la actividad telomerasa y aumentar mediante ello la capacidad replicativa y/o la longevidad de la población celular.
VI. Formulaciones y métodos de administración
La divulgación abarca métodos de preparar composiciones farmacéuticas útiles para aumentar la actividad telomerasa en una célula y/o fomentar la cicatrización. Según esto, un compuesto aislado de fórmula I, II o III como se describe en la sección II se combina con un excipiente farmacéutico, y opcionalmente con otros agentes medicinales, adyuvantes, y similares, que pueden incluir ingredientes activos e inactivos. Las composiciones pueden tomar la forma de formas farmacéuticas sólidas, semisólidas, polvo liofilizado o líquidas, tal como, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación sostenida, soluciones, suspensiones, emulsiones, supositorios, cremas, pomadas, lociones, aerosoles, o similares. Las formulaciones se pueden proporcionar en formas farmacéuticas unitarias adecuadas para la administración sencilla de dosis precisas.
Un compuesto aislado de fórmula I, II o III también se puede formular como un suplemento nutricional o nutracéutico, para la administración oral. Para una formulación nutracéutica, o una formulación farmacéutica oral, los excipientes adecuados incluyen calidades farmacéuticas de soportes tal como manitol, lactosa, glucosa, sacarosa, almidón, celulosa, gelatina, estearato de magnesio, sacarina sódica, y/o carbonato de magnesio. Para uso en formulaciones líquidas orales, la composición se puede preparar como una solución, suspensión, emulsión, o jarabe, suministrándose o bien en forma sólida o líquida adecuada para hidratación en un soporte acuoso tal como, por ejemplo, solución salina acuosa, dextrosa acuosa, glicerol, o etanol, preferiblemente agua o solución salina normal. Si se desea, la composición también puede contener cantidades minoritarias de sustancias auxiliares no tóxicas tal como agentes humectantes, agentes emulsionantes, o tampones. Un compuesto aislado de fórmula I, II o III también se puede incorporar a formulaciones nutracéuticas existentes, tal como están convencionalmente disponibles, que también pueden incluir un extracto de hierbas, tal como un extracto de Astragalus membrananaceus.
Para uso en cicatrización o tratamiento de otras afecciones agudas o crónicas de la epidermis, un compuesto de fórmula I, II o III se formula para administración tópica. El vehículo para la aplicación tópica puede estar en una de varias formas, por ejemplo, una loción, crema, gel, pomada, barra, espray, o pasta. Estas formas de producto se pueden formular según métodos bien conocidos. Pueden comprender varios tipos de soportes, incluyendo, pero limitados a, soluciones, aerosoles, emulsiones, geles y liposomas. El soporte se puede formular, por ejemplo, como una emulsión que tiene una base de aceite en agua o agua en aceite. Los componentes hidrofóbicos (oleaginosos) adecuados empleados en emulsiones incluyen, por ejemplo, aceites vegetales, grasas y aceites animales, hidrocarburos sintéticos, y ésteres y alcoholes de los mismos, incluyendo poliésteres, así como aceites de organopolisiloxanos. Tales emulsiones también incluyen un emulsionante y/o tensioactivo, por ejemplo, un tensioactivo no iónico, tal como se conocen bien en la técnica, para dispersar y suspender la fase discontinua en la fase continua.
La formulación tópica típicamente contiene uno o más componentes seleccionados de un agente estructurante, un espesante o agente de gelificación, y un emoliente o lubricante. Los agentes estructurante empleados con frecuencia incluyen alcoholes de cadena larga, tal como alcohol estearílico, y éteres o ésteres de glicerilo y éteres o ésteres de oligo(óxido de etileno) de los mismos. Los espesantes y agentes gelificantes incluyen, por ejemplo,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
polímeros de ácido acrílico o metacrílico y ésteres de los mismos, poliacrilamidas, y espesantes naturales tal como agar, carragenano, gelatina y goma guar. Los ejemplos de emolientes incluyen ésteres triglicéridos, ésteres de ácidos grasos y amidas, ceras, tal como cera de abeja, espermaceti o cera carnauba, fosfolípidos tal como lecitina, y esteroles y ésteres de ácidos grasos de los mismos. Las formulaciones tópicas pueden incluir además otros componentes como se conocen en la técnica, por ejemplo, astringentes, fragancias, pigmentos, agentes potenciadores de penetración de la piel, protectores solares, etc.
Las composiciones farmacéuticas también se pueden formular para la administración por vía parenteral, transdérmica, o por inhalación. Una composición inyectable para administración parenteral típicamente contiene el compuesto activo en una solución IV adecuada, tal como solución salina fisiológica estéril. La composición también se puede formular como una suspensión en un lípido o fosfolípido, en una suspensión liposómica, o en una emulsión acuosa.
Para la administración por inhalación, el compuesto activo se formula como partículas de aerosol sólidas o líquidas. La formulación también incluye un propelente y/o un dispersante, tal como lactosa, para facilitar la formación de aerosol. Para la administración transdérmica, el compuesto activo preferiblemente se incluye en un parche transdérmico, que permite una administración lenta del compuesto a una región de la piel seleccionada, y que también puede incluir sustancias potenciadoras de penetración, tal como alcoholes alifáticos o glicerol.
Los métodos para preparar tales formulaciones son conocidos o serán aparentes para los expertos en la materia; por ejemplo, véase, Remington's Pharmaceutical Sciences (19a Ed., Williams & Wilkins, 1995). La composición que se va a administrar contendrá una cantidad del compuesto seleccionado en una cantidad farmacéuticamente segura y eficaz para aumentar la actividad telomerasa en las células o tejido diana.
Preferiblemente, la composición farmacéutica o nutracéutica contiene al menos el 0,1% (p/v) de un compuesto de fórmula I, II o III como se ha descrito anteriormente, preferiblemente mayor del 0,1%, hasta aproximadamente el 10%, preferiblemente hasta aproximadamente el 5%, y más preferiblemente hasta aproximadamente el 1% (p/v). La elección de una concentración adecuada depende de factores tales como la dosis deseada, frecuencia y método de administración del agente activo.
Para el tratamiento de un sujeto o paciente, tal como un mamífero o un paciente humano, las dosis se determinan basadas en factores tales como el peso y salud global del sujeto, la afección tratada, gravedad de los síntomas, etc. Se determinan dosis y concentraciones para producir el beneficio deseado al tiempo que se evita cualquier efecto secundario indeseado. Las dosis típicas de los compuestos objeto están en el intervalo desde aproximadamente 0,5 a 500 mg/día para un paciente humano, preferiblemente aproximadamente 1-100 mg/día. Por ejemplo, pautas de dosis mayores incluyen, por ejemplo, 50-100, 75-100, o 50-75 mg/día, y pautas de dosis menores incluyen, por ejemplo, 1-50, 25-50 o 1-25 mg/día. En formas de realización específicas, por ejemplo, el compuesto designado en el presente documento como 2 (cicloastragenol) se administra a un nivel de al menos 1 mg/día, preferiblemente al menos 5 mg/día; o el compuesto designado en el presente documento como 1 (astragalósido IV) se administra a un nivel de al menos 50 mg/día, preferiblemente al menos 100 mg/día.
Estudios en apoyo de la invención indican que los compuestos de fórmula I-III tienen excelente biodisponibilidad y baja toxicidad. Por ejemplo, un compuesto representativo, cicloastragenol (2), fue negativo para potencial mutación bacteriana inversa en la prueba de Ames, empleando cepas controladoras de Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537 y cepa controladora de E. coli WP2 uvrA, a niveles de hasta 5000 pg/placa. Se toleró bien sistémicamente en ratas Sprague-Dawley, después de inyecciones intravenosas únicas de hasta 10 mg/kg. No se observaron cambios dependientes de dosis significativos para machos o hembras en comportamiento (comer, beber), peso bruto, pesos de órganos (corazón, pulmón, hígado, riñones, glándulas suprarrenales y bazo), hematología o bioquímica clínica.
Ejemplos
(Los compuestos 1-4, 6 y 7 son según la invención)
Ejemplo 1. Conversión de astragalósido IV (1) a cicloastragenol (2)
5
10
15
20
25
30
35
40
Se añadió a astragalósido IV (1) (5,00 g, mmol) “HCl-MeOH 10” (TCI America) (500 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 7 días. La mezcla de reacción se concentró a aproximadamente la mitad del volumen a presión reducida a 20°C (sin calentar). La mezcla se repartió en bicarbonato de sodio acuoso y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo otra vez. Las fases orgánicas se combinaron, lavaron con cloruro de sodio saturado, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna (cloroformo/metanol 20:1 ~ 14:1). Para sustituir el solvente residual con etanol, el material purificado se disolvió en etanol y el solvente se eliminó a presión reducida para dar 2 (2,1 g, 64%).
1H RMN (CDCla) 8 (ppm) 0,34 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,48 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,92 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,0-1,8 (m, 13H), 1,11 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,22 (s, 6H), 1,27 (s, 3H), 1,9-2,0 (m, 4H), 2,30 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 2,54 (q, J= 11,8 Hz, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,72 (t, J= 7,4 Hz, 1H), 4,65 (q, J= 7,4 Hz, 1H). ESI-MS m/z Positivo 491 (M+H)+, Negativo 549 (M+AcO)-, TLC (Merck, Kieselgel 60) Rf = 0,33 (cloroformo/metanol 6:1)
Ejemplo 2. Preparación de los compuestos 5, 6 y 7 a partir de astragalósido IV (1): Eliminación de glucósidos de astragalósido IV (1), con y sin reorganización concomitante
A una solución de astragalósido IV (1, 1,00 g, 1,28 mmol) en metanol (80 ml) se añadió ácido sulfúrico (0,4 ml), y la mezcla se sometió a reflujo durante 1,5 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se echó en acetato de etilo y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (cloroformo/metanol 20:1 ~ 10:1 ~ 7:1) para dar el producto reorganizado 5 (24 mg, 4,0%), monoglucósidos 6 (172 mg, 21%) y 7 (29 mg, 3,6%) y la aglucona, cicloastragenol (2) (326 mg, 52%).
GRN140724: ESI-MS m/z 623 (M+H)+ C35H58O9 = 622 GRN140725: ESI-MS m/z 653 (M+H)+ C36H60O10 = 652 GRN140726: ESI-MS m/z 473 (M+H)+ C30H48O4 = 472.
1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm) 0,72, 0,85, 0,95, 1,05, 1,11, 1,17, 1,18, y 1,25 (s, 3H cada uno), 0,9-2,1 (m, 13H), 2,20 (d, J= 7,4 Hz, 1H), 2,4-2,6 (m, 2H), 3,42 (m, 1H), 3,70 (dd, J= 7,8, 5,9 Hz, 1H), 4,63 (q, J= 7,4 Hz, 1H), 5,45 (br s, 1H), 5,57 (br s, 1H).
Ejemplo 3. Acetilación de 1; formación de 16-cetona 10:
Los compuestos 9 y 10, a continuación, se obtuvieron según el método de Kitagawa 1983b, citado anteriormente. Brevemente, la acetilación de astragalósido IV (1) proporcionó 9, junto con una cantidad menor del equivalente 16- acetato. La oxidación con clorocromato de piridinio de 9 dio 10.
Ejemplo 4. Preparación de 4 (véase la figura 1) por desacilación de 10
5 A una solución de 10, anteriormente (10 mg, 0,0093 mmol) en metanol se añadió brorohidruro de sodio (10 mg, 0,26 mmol), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se diluyó con cloroformo (3 ml) y se sometió directamente a cromatografía en columna de gel de sílice (cloroformo/metanol 3:1) para dar 4 (8,0 mg, cuant.). ESI-MS m/z 783 (M+H)+ C41H66O14 = 782.
10 Ejemplo 5. Formación de triona 11 de cicloastragenol 2
El derivado 3,6,16-triona 11 de cicloastragenol se obtuvo por oxidación con CrO3 de 2, según el método de Kitagawa et al., Chem. Pharm. Bull. 31(2):689-697 (1983a).
15
Ejemplo 6. Acilación del grupo hidroxilo 3 o 6 de cicloastragenol (2)
20
A una solución de cicloastragenol (2) (50 mg, 0,10 mmol) en diclorometano (5 ml) se añadieron trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) y cloruro de pivaloilo (0,014 ml, 0,12 mmol) y la mezcla se agitó a 0°C durante la noche. La mezcla se sometió directamente a cromatografía en columna de gel de sílice (hexano/acetato de etilo 1:1 ~ 1:2) para dar 12 (17 mg, 30%) y 13 (3,3 mg, 2,9%).
25
12: ESI-MS m/z 575 (M+H)+ C35H5aO6= 574. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 8 (ppm) 0,32 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,49 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,92 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,07 (s, 3H), 1,1-2,0 (m, 17H), 1,15 (s, 9H), 1,18 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,34 (s, 6H), 2,19 (dd, J = 13,7, 9,8 Hz, 1H), 2,36 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,51 (td, J= 9,4, 3,5 Hz, 1H), 3,71 (t, J= 7,4 Hz, 1H), 5,32 (td, J= 7,8, 4,7 Hz, 1H).
30 13: ESI-MS m/z 575 (M+H)+ C35H5aO6= 574. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 8 (ppm) 0,35 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,51 (d, J=
4,3 Hz, 1H), 0,92 (s, 3H), 1,0-2,0 (m, 17H), 1,03 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 1,12 (s, 3H), 1,17 (s, 9H), 1,21 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 2,29 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 2,53 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,73 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,50 (dd, J= 10,9, 4,3 Hz, 1H), 4,65 (m, 1H).
5
10
15
20
25
Ejemplo 7A. Acetilación de los hidroxilos secundarios de cicloastragenol (2)
Esta reacción se llevó a cabo según el método de Kitagawa 1983a, citado anteriormente. Brevemente, la acetilación con anhídrido acético/piridina dio una mezcla de 14 (producto principal) y 15 (producto minoritario).
Ejemplo 7B. Metilación de 3.6-diacetil cicloastragenol (14), con retención de grupos acetilo
A una solución de 14 (30 mg. 0.052 mmol) en dimetilformamida (3 ml) se añadieron yodometano (0.75 ml. 12 mmol) e hidruro de sodio (dispersión en aceite al 60%. 40 mg. 1.0 mmol) a 0°C en nitrógeno. y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua. y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (hexano/acetato de etilo 4:1) para dar el compuesto 16 (29 mg. 92%).
ESI-MS m/z 603 (M+H)+ C36H5sO7= 602. 1H RMN (400 MHz. CDCla) 8 (ppm) 0.33 (d. J= 4.7 Hz. 1H). 0.56 (d. J= 4.7 Hz. 1H). 0.82 (s. 3H). 0.89 (s. 3H). 0.96 (s. 3H). 1.06 (s. 3H). 1.1-1.9 (m. 17H). 1.13 (s. 3H). 1.19 (s. 3H). 1.23 (s. 3H). 1.97 (s. 3H). 2.02 (s. 3H). 2.3-2.4 (m. 2H). 3.05 (s. 3H). 3.23 (s. 3H). 3.81 (dd. J= 9.0. 6.6 Hz. 1H). 3.95 (td. J= 7.8.
5.1 Hz. 1H). 4.54 (dd. J= 10.9. 4.7 Hz. 1H). 4.70 (td. J= 9.4. 4.3 Hz. 1H).
Ejemplo 7C. Preparación de 16.25-dimetoxi cicloastragenol. 17: eliminación de grupos acetilo de 16
Una mezcla de 16 (28 mg. 0.046 mmol) y metóxido de sodio (0.5 mol/l en metanol. 6 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. Se añadió agua. y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con
5
10
15
20
25
30
35
40
agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (hexano/acetato de etilo 2:3) para dar el compuesto dimetoxi diol 17 (23 mg, 96%)
ESI-MS m/z 519 (M+H)+ C32H54O5 = 518. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,32 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,47 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,90 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 1,11,9 (m, 17H), 1,13 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 2,3-2,4 (m, 2H), 3,06 (s, 3H), 3,23 (s, 3H), 3,27 (m, 1H), 3,51 (td, J= 9,4, 3,5 Hz, 1H), 3,81 (dd, J= 9,4, 6,6 Hz, 1H), 3,96 (td, J= 7,8, 5,5 Hz, 1H).
Ejemplo 7D. Alquilación de 3,6-diacetil cicloastragenol (14), con retención de grupos acetilo
A una solución de 14 (109 mg, 0,109 mmol) en diclorometano (10 ml) se añadieron diisopropiletilamina (1,0 ml) y clorometil metil éter (0,5 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (hexano/acetato de etilo 3:1) para dar el compuesto 18 (114 mg, 90%).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,31 (d, J= 5,1 Hz, 1H), 0,56 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,80 (s, 3H), 0,88 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,1-2,0 (m, 18H), 1,15 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 2,28 (d, J=
8,2 Hz, 1H), 3,30 (s, 3H), 3,33 (s, 3H), 3,81 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,5-4,6 (m, 3H), 4,7-4,8 (m, 3H).
Ejemplo 7E. Eliminación de los grupos acetilo de 18
Una mezcla de 18, anterior (derivado 3,6-diacetil-16,25-di(metoximetil)éter de cicloastragenol) (102 mg, 0,150 mmol) y metóxido de sodio (0,5 mol/l en metanol, 10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (hexano/acetato de etilo 1:1) para dar el compuesto di(metoximetil)éter 19 (80 mg, 92%).
ESI-MS m/z 579 (M+H)+ C34H58O7 = 578. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm) 0,32 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,48 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,89 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,1-2,0 (m, 18H), 1,15 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,29 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 2,29 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 3,28 (m, 1H), 3,30 (s, 3H), 3,33 (s, 3H), 3,53 (m, 1H), 3,81 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,18 (td, J= 7,8, 5,5 Hz, 1H), 4,50 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 4,54 (d, J= 6,2 Hz, 1H), 4,71 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 4,76 (d, J= 7,4 Hz, 1H).
Ejemplo 8. Alquilación de triacetil cicloastragenol 15, seguido por eliminación de grupos acetilo
5
10
15
20
25
30
35
A una solución de 15 (30 mg, 0,049 mmol) en dimetilformamida (3 ml) se añadieron yodometano (0,75 ml, 12 mmol) e hidruro de sodio (dispersión en aceite al 60%, 40 mg, 1,0 mmol) a 0°C en nitrógeno, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida.
Al residuo se añadió metóxido de sodio en metanol (0,5 mol/l, 6 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió ácido clorhídrico al 10%, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (hexano/acetato de etilo 1:2) para dar 20 (23 mg, 93%).
ESI-MS m/z 505 (M+H)+ C31H52O5 = 504. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,33 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,48 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,8-2,1 (m, 17H), 0,91 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 2,28 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 2,60 (q, J= 10,9 Hz, 1H), 3,17 (s, 3H), 3,27 (m, 1H), 3,51 (td, J= 9,8, 3,5 Hz, 1H), 3,72 (dd, J= 9,0, 5,5 Hz, 1H), 4,62 (m, 1H).
Ejemplo 9A. Alquilación de los hidroxilos libres de cicloastragenol monoglucósido 6
A una solución de 6 (50 mg, 0,077 mmol) en dimetilformamida (4 ml) se añadieron yodometano (1,0 ml, 16 mmol) e hidruro de sodio (dispersión en aceite al 60%, 60 mg, 1,5 mmol) a 0°C en nitrógeno, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (hexano/acetato de etilo 3:1) para dar el compuesto permetoxi 2l (33 mg, 57%).
ESI-MS m/z 751 (M+H)+ C43H74O10 = 750. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,21 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,47 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,8-2,0 (m, 17H), 0,87 (s, 3H), 0,89 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 2,3-2,4 (m, 2H), 2,67 (dd, J= 11,0, 4,1 Hz, 1H), 2,92 (t, J= 8,2 Hz, 1H), 3,06 (s, 3H), 3,1-3,6 (m, 6H), 3,22 (s, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,35 (s, 3H), 3,48 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 3,80 (dd, J= 9,0, 6,6 Hz, 1H), 3,94 (m, 1H), 4,24 (d, J= 7,4 Hz, 1H).
Ejemplo 9B. Preparación de 3,16,25-trimetoxi astragenol, 22: eliminación del glucósido del compuesto permetoxi 21, con reorganización concomitante
5
10
15
20
25
A una solución de 21 (30 mg, 0,040 mg) en metanol (10 ml) se añadió ácido sulfúrico (0,2 ml) y la mezcla se sometió a reflujo durante 10 horas. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (hexano/acetato de etilo 4:1) para dar 22 (3,6 mg, 17%).
ESI-MS m/z 533 (M+H)+ C3aH56O5= 532. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,73 (s, 3H), 0,8-2,0 (m, 18H), 0,85 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 2,3-2,4 (m, 2H), 2,58 (dd, J= 10,9, 3,9 Hz, 1H), 3,09 (s, 3H), 3,24 (s, 3H), 3,34 (s, 3H), 3,80 (dd, J= 9,4, 6,6 Hz, 1H), 3,98 (m, 1H), 5,25 (br d, = 5,5 Hz, 1H).
Ejemplo 10A. Alquilación de los hidroxilos libres de cicloastagenol monoglucósido 7
El compuesto 23 (18 mg, 53%) se obtuvo a partir de 7 (30 mg) según el procedimiento usado para la preparación del compuesto 21, anteriormente.
ESI-MS m/z 707 (M+H)+ C41H70O9 = 706. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,20 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,44 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,8-1,9 (m, 17H), 0,90 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 1,11 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 2,3-2,4 (m, 2H), 2,9-3,6 (m, 6H), 3,09 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 3,22 (s, 3H), 3,42 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 3,80 (dd, J= 9,0, 6,6 Hz, 1H), 3,9-4,0 (m, 2H), 4,21 (d, J= 7,4 Hz, 1H).
Ejemplo 10B. Preparación de 6,16,25-trimetoxi astragenol, 24: eliminación del glucósido del compuesto permetoxi 23, con reorganización concomitante
5
10
15
20
25
30
35
El compuesto 24 (7,1 mg, 56%) se obtuvo a partir de 23 (17 mg) según el procedimiento usado para la preparación del compuesto 22, anteriormente.
ESI-MS m/z 533 (M+H)+ C33H56O5 = 532. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 0,74 (s, 3H), 0,8-2,4 (m, 18H), 0,85 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 3,10 (s, 3H), 3,18 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 3,34 (s, 3H), 3,53 (m, 1H), 3,80 (dd, J= 9,4, 6,6 Hz, 1H), 3,97 (m, 1H), 5,24 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
Ejemplo 11. Preparación de 3,6-dimetoxi cicloastragenol, 25: metilación del compuesto 16,25-d¡(metoximet¡l)éter 19, con eliminación de los grupos di(metoximet¡l)éter
A una solución de 19 (30 mg, 0,052 mmol) en dimetilformamida (3 ml) se añadieron yodometano (0,75 ml, 12 mmol) e hidruro de sodio (dispersión en aceite al 60%, 40 mg, 1,0 mmol) a 0°C en nitrógeno, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida.
A este residuo se añadieron tetrahidrofurano (5 ml) y ácido clorhídrico al 10% (1 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, después se sometió a reflujo durante 1 hora. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (hexano/acetato de etilo 3:1 ~ 1:1) para dar 25 (13 mg, 48%) y una cantidad menor (7,4 mg, 25%) del compuesto 3,6-dimetoxi-16-(metoximetil)éter 26.
25: ESI-MS m/z 563 (M+H)+ C34H58O6 = 562. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm) 0,19 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 0,45 (J= 4,3 Hz, 1H), 0,8-2,3 (m, 18H), 0,86 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 1,07 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 2,41 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 2,70 (dd, J= 11,1, 4,5 Hz, 1H), 2,90 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 3,326 (s, 3H), 3,330 (s, 3H), 3,71 (t, J= 7,4 Hz, 1H), 4,37 (m, 1H), 4,53 (d, J= 6,2 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 6,2 Hz, 1H).
26: ESI-MS m/z 519 (M+H)+ C32H54O5 = 518. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm) 0,21 (d, J= 4,3 Hz, 1H), 0,45 (d, J=
4,3 Hz, 1H), 0,8-2,0 (m, 17H), 0,86 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 1,12 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 2,30 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 2,54 (q, J= 10,2 Hz, 1H), 2,69 (dd, J= 11,3, 4,3 Hz, 1H), 2,89 (td, J= 8,2, 4,3 Hz, 1H), 3,19 (s, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,72 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,66 (m, 1H).
Claims (4)
- REIVINDICACIONES1.5Un compuesto aislado de fórmula I:
imagen1 donde:X1 es hidroxi o p-D-xilopiranósido,10 X2 es hidroxi o p-D-glucopiranósido, yX3 es hidroxi;OR1 es hidroxi;yR2 forma, junto con el carbono 9, un anillo ciclopropilo fusionado, y representa un enlace sencillo entre 15 los carbonos 9 y 11,en una cantidad eficaz para uso en tratar una infección por VIH. - 2. Astragalósido IV 16-ona en una cantidad eficaz para uso en tratar una infección por VIH.20 3. Una composición farmacéutica que comprende, en un vehículo farmacéuticamente aceptable, un compuestoseleccionado de astragalósido IV 16-ona, cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido y cicloastragenol 3-p-D- xilopiranósido.
- 4.25Una composición farmacéutica que comprende una formulación tópica de un compuesto aislado seleccionado del cicloastragenol, astragenol, astragalósido IV 16-ona, cicloastragenol 6-p-D-glucopiranósido y cicloastragenol 3-p-D-xilopiranósido.
- 5.30La composición de la reivindicación 4, en donde dicho compuesto está presente en dicha formulación a una concentración de al menos el 0,1% (p/v).
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US48098803P | 2003-06-23 | 2003-06-23 | |
US480988P | 2003-06-23 | ||
PCT/US2004/020277 WO2005000245A2 (en) | 2003-06-23 | 2004-06-23 | Compositions and methods for increasing telomerase activity |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2666864T3 true ES2666864T3 (es) | 2018-05-08 |
Family
ID=33551962
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES04777032.6T Expired - Lifetime ES2666864T3 (es) | 2003-06-23 | 2004-06-23 | Composiciones para aumentar la actividad telomerasa y tratar infección por VIH |
ES12180710T Expired - Lifetime ES2716528T3 (es) | 2003-06-23 | 2004-06-23 | Composiciones para aumentar la actividad telomerasa |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES12180710T Expired - Lifetime ES2716528T3 (es) | 2003-06-23 | 2004-06-23 | Composiciones para aumentar la actividad telomerasa |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7846904B2 (es) |
EP (2) | EP1644009B1 (es) |
JP (4) | JP5583882B2 (es) |
KR (3) | KR20110089887A (es) |
CN (1) | CN1809364B (es) |
AP (1) | AP2280A (es) |
AU (2) | AU2004251753C1 (es) |
BR (1) | BRPI0411856A (es) |
CA (1) | CA2528483C (es) |
CY (2) | CY1119951T1 (es) |
DK (2) | DK1644009T3 (es) |
EA (1) | EA009442B1 (es) |
ES (2) | ES2666864T3 (es) |
HR (2) | HRP20180330T1 (es) |
HU (2) | HUE036559T2 (es) |
LT (2) | LT1644009T (es) |
MX (1) | MXPA05013844A (es) |
NZ (1) | NZ544191A (es) |
PL (2) | PL1644009T3 (es) |
PT (2) | PT2548880T (es) |
SI (2) | SI2548880T1 (es) |
TR (2) | TR201903587T4 (es) |
WO (1) | WO2005000245A2 (es) |
ZA (1) | ZA200509846B (es) |
Families Citing this family (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7585622B1 (en) | 1996-10-01 | 2009-09-08 | Geron Corporation | Increasing the proliferative capacity of cells using telomerase reverse transcriptase |
US6337200B1 (en) | 1998-03-31 | 2002-01-08 | Geron Corporation | Human telomerase catalytic subunit variants |
DK1644009T3 (en) * | 2003-06-23 | 2018-03-05 | Telomerase Activation Sciences Inc | Compositions for increasing telomerase activity and treating HIV infection |
US9248088B2 (en) * | 2003-06-25 | 2016-02-02 | Telomerase Activation Sciences, Inc. | Compositions and methods for skin conditioning |
WO2006113470A2 (en) | 2005-04-15 | 2006-10-26 | Geron Corporation | Cancer treatment by combined inhibition of proteasome and telomerase activities |
US8197860B2 (en) * | 2005-06-23 | 2012-06-12 | Nuliv Holding Inc. | Method for enhancing nutrient absorption with astragalosides |
CN100333731C (zh) * | 2005-09-08 | 2007-08-29 | 南京医科大学 | 黄芪甲苷在制备治疗糖尿病周围神经病变药物中的应用 |
CN100384830C (zh) * | 2006-01-12 | 2008-04-30 | 天津药物研究院 | 环黄芪醇类衍生物以及用途 |
US7992749B2 (en) | 2006-03-30 | 2011-08-09 | Nike, Inc. | Support element for a carry strap |
ES2696828T3 (es) | 2006-10-30 | 2019-01-18 | Geron Corp | Inhibidor de telomerasa y gemcitabina combinados para el tratamiento del cáncer |
CN101742906A (zh) | 2007-06-04 | 2010-06-16 | 本古里安大学内盖夫研究发展局 | 三芳基化合物和包含它们的组合物 |
CN101225424B (zh) | 2007-09-13 | 2013-05-29 | 天津药物研究院 | 环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 |
US8168596B2 (en) * | 2008-10-17 | 2012-05-01 | Nuliv Holding Inc. | Use of cycloartane compounds for treating arthritis |
US8481721B2 (en) * | 2009-05-18 | 2013-07-09 | Telomerase Activation Sciences, Inc. | Compositions and methods for increasing telomerase activity |
WO2014186603A1 (en) * | 2013-05-15 | 2014-11-20 | Fybrands Corp. | Compositions for improving the hair, skin, and nails |
JP6657101B2 (ja) | 2013-11-05 | 2020-03-04 | ベン グリオン ユニバーシティ オブ ザ ネガフ リサーチ アンド ディベロップメント オーソリティ | 糖尿病及びそれから生じる疾患合併症の治療のための化合物 |
CN104491185A (zh) * | 2014-12-06 | 2015-04-08 | 郭亮 | 一种祛风湿药酒及其制备方法 |
CN104435371A (zh) * | 2014-12-06 | 2015-03-25 | 郭亮 | 一种用于治疗关节炎的药酒 |
CN104435370A (zh) * | 2014-12-06 | 2015-03-25 | 王香平 | 风湿保健酒 |
KR20160069857A (ko) | 2014-12-09 | 2016-06-17 | (주)스피어테크 | 텔로미어 활성을 증가시키기 위한 조성물 및 그 조성물의 제조방법 |
CN104817610A (zh) * | 2015-03-15 | 2015-08-05 | 北京化工大学 | 利用硫酸水解制备环黄芪醇的方法 |
US10100285B2 (en) | 2015-04-03 | 2018-10-16 | Propagenix Inc. | Ex vivo proliferation of epithelial cells |
SG11201707970XA (en) | 2015-04-03 | 2017-10-30 | Propagenix Inc | Ex vivo proliferation of epithelial cells |
CN106474094A (zh) * | 2015-08-31 | 2017-03-08 | 南京理工大学 | 一种环黄芪醇电纺纤维膜及其制备方法 |
US10066201B2 (en) | 2015-09-11 | 2018-09-04 | Propagenix Inc. | Ex vivo proliferation of epithelial cells |
CN106307522A (zh) * | 2016-11-06 | 2017-01-11 | 谭淞文 | 一种抗衰老保健品及其制备方法和食用方法 |
CN106831927B (zh) * | 2017-02-07 | 2018-02-09 | 江西师范大学 | 一种黄芪甲苷的合成方法 |
CN108498521B (zh) * | 2017-02-24 | 2020-05-05 | 北京大学 | 环黄芪醇在制备抑制腹主动脉瘤的药物中的应用 |
US10098922B1 (en) | 2017-11-30 | 2018-10-16 | Optigenex, Inc. | Increasing telomere length in a cell |
CA3145888A1 (en) * | 2018-07-31 | 2020-02-06 | Isilay KAVADARLI | Ophthalmic formulations and uses thereof |
CN111053782B (zh) | 2018-10-17 | 2024-07-05 | 株式会社爱茉莉太平洋 | 包含人参皂苷的组合物 |
KR102635196B1 (ko) | 2018-10-17 | 2024-02-13 | (주)아모레퍼시픽 | 신규 진세노사이드를 포함하는 미백 조성물 |
US11000538B2 (en) | 2018-10-31 | 2021-05-11 | Amorepacific Corporation | Composition for enhancing exercise ability or anti-fatigue comprising novel ginsenoside |
WO2020131058A1 (en) * | 2018-12-20 | 2020-06-25 | Muhammed Majeed | Telomerase enhancement potential of ecdysterone |
CN109942663B (zh) * | 2019-04-22 | 2021-10-26 | 中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院 | 利用双相酸水解制备环黄芪醇的方法 |
MX2019006749A (es) | 2019-06-10 | 2022-11-28 | Univ Mexico Nac Autonoma | Compuestos activadores de senescencia celular. |
KR20210037257A (ko) | 2019-09-27 | 2021-04-06 | (주)아모레퍼시픽 | 신규 진세노사이드를 포함하는 피부 탄력 개선용 조성물 |
KR20210037256A (ko) | 2019-09-27 | 2021-04-06 | (주)아모레퍼시픽 | 신규 진세노사이드를 포함하는 갱년기 증상의 예방 또는 개선용 조성물 |
CN111419854B (zh) * | 2020-05-18 | 2021-03-30 | 南通大学 | 具有特殊七元环结构的三萜在制备预防和治疗神经损伤药物中的应用 |
CN113480628B (zh) * | 2021-08-17 | 2022-06-21 | 贵州师范大学 | 一种贵州疣螈多肽tk-cath及其编码基因和应用 |
CN113968894B (zh) * | 2021-11-05 | 2024-05-28 | 山西大学 | 一种用黄芪甲苷降解制备环黄芪醇的方法 |
KR102666469B1 (ko) * | 2023-05-04 | 2024-05-17 | 주식회사 아리바이오 | 텔로머라제 활성화제와 나노 입자를 포함하는 약물 전달용 조성물 및 이를 포함하는 탈모 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
Family Cites Families (63)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6212792A (ja) * | 1986-07-18 | 1987-01-21 | Osaka Chem Lab | オウギサポニン類の単離法 |
JPS6212791A (ja) | 1986-07-18 | 1987-01-21 | Osaka Chem Lab | オウギサポニン、その単離法およびその用途 |
IT1259645B (it) | 1992-04-10 | 1996-03-25 | Solis Srl | Metodo per la rivelazione della variazione di densita' di un tessuto e dispositivo per la sua attuazione |
US5629154A (en) | 1993-11-12 | 1997-05-13 | Geron Corporation | Telomerase activity assays |
US6007989A (en) * | 1992-05-13 | 1999-12-28 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods of screening for compounds that derepress or increase telomerase activity |
FR2695561B1 (fr) * | 1992-09-17 | 1994-12-02 | Lvmh Rech Gie | Composition cosmétique ou dermatologique contenant au moins une saponine de type ginsenoside, et ses applications, notamment pour le soin des cheveux. |
US5863726A (en) | 1993-11-12 | 1999-01-26 | Geron Corporation | Telomerase activity assays |
JPH07238026A (ja) * | 1994-02-25 | 1995-09-12 | Pola Chem Ind Inc | 動脈硬化抑制剤及びこれを含む食品又は医薬 |
AT402890B (de) * | 1994-03-16 | 1997-09-25 | Berbi Gmbh | Verwendung von notoginsenosid r1 zur herstellung von arzneimitteln |
WO1996001835A1 (en) * | 1994-07-07 | 1996-01-25 | Geron Corporation | Mammalian telomerase |
US5583016A (en) | 1994-07-07 | 1996-12-10 | Geron Corporation | Mammalian telomerase |
US6162459A (en) * | 1995-02-24 | 2000-12-19 | National Science Council | Acyclovir transdermal delivery system |
AUPN411195A0 (en) * | 1995-07-10 | 1995-08-03 | Cathay Herbal Laboratories Pty Ltd | Medicinal composition |
CN1079265C (zh) | 1995-08-01 | 2002-02-20 | 裴国增 | 灵芝口服液及其配制方法 |
US5785977A (en) * | 1996-02-07 | 1998-07-28 | Breithbarth; Richard | Non-metallic microparticle carrier materials |
US5916565A (en) * | 1996-03-08 | 1999-06-29 | In Clover, Inc. | Product and method for treating joint disorders in vertebrates |
TW452494B (en) * | 1996-03-12 | 2001-09-01 | Jang De Shan | Herbal composition for stimulating blood circulation |
US5900226A (en) * | 1997-04-09 | 1999-05-04 | Uop Llc | Drying agents for non-foamed polyurethanes |
JPH1036388A (ja) * | 1996-07-25 | 1998-02-10 | Kureha Chem Ind Co Ltd | ジンセノサイド類含有hsp47合成抑制剤 |
SG94355A1 (en) | 1996-10-01 | 2003-02-18 | Geron Corp | Human telomerase catalytic subunit |
US6093809A (en) | 1996-10-01 | 2000-07-25 | University Technology Corporation | Telomerase |
US6261836B1 (en) | 1996-10-01 | 2001-07-17 | Geron Corporation | Telomerase |
PT988044E (pt) * | 1997-01-28 | 2008-04-07 | Frank D Amelio | Extracto de planta centipeda cunninghamii em água/etanol |
US5786343A (en) * | 1997-03-05 | 1998-07-28 | Immudyne, Inc. | Phagocytosis activator compositions and their use |
ES2384552T3 (es) * | 1997-09-05 | 2012-07-06 | The Procter & Gamble Company | Productos de limpieza y acondicionado para la piel o el pelo con mejor deposición de los ingredientes acondicionadores |
DE69808790T3 (de) * | 1997-09-12 | 2009-07-16 | The Procter & Gamble Co., Cincinnati | Hautreinigungs- und konditionierungsartikel für haut und haar |
AU759437B2 (en) | 1998-01-12 | 2003-04-17 | Cold Spring Harbor Laboratory | Extension of cellular lifespan, methods and reagents |
GB9815177D0 (en) * | 1998-07-13 | 1998-09-09 | King S College London | Treatment of skin disorders |
AU5338199A (en) | 1998-08-09 | 2000-02-28 | Geron Corporation | Methods and compositions for inhibiting or stimulating telomerase assembly |
EP1133552A2 (en) | 1998-11-25 | 2001-09-19 | Genetica, Inc. | Methods and reagents for increasing proliferative capacity and preventing replicative senescence |
JP2000204091A (ja) * | 1999-01-13 | 2000-07-25 | Nippon Suisan Kaisha Ltd | 新規ベンゾジオキソ―ル誘導体 |
JP2000229827A (ja) * | 1999-02-05 | 2000-08-22 | Kose Corp | 皮膚外用剤 |
JP2000229834A (ja) * | 1999-02-10 | 2000-08-22 | Kanebo Ltd | 化粧料 |
AUPQ127399A0 (en) | 1999-06-29 | 1999-07-22 | Guangzhou University Of Traditional Chinese Medicine | Compositions and methods for treating or preventing osteoporosis |
DK1210357T3 (da) | 1999-09-10 | 2008-07-21 | Geron Corp | Oligonukleotid-N3' -P5' -thiophosphoramidater: syntese og anvendelse deraf |
JP2001258505A (ja) * | 2000-03-24 | 2001-09-25 | Fancl Corp | 食品組成物 |
CA2307393A1 (en) * | 2000-05-01 | 2001-11-01 | The University Of British Columbia | Ginsenoside chemotherapy |
US6277396B1 (en) * | 2000-05-11 | 2001-08-21 | Maximum Human Performance, Inc. | Dietary supplement containing a thermogenic substance and an adrenal support substance |
KR20030009454A (ko) | 2000-05-31 | 2003-01-29 | 카가쿠키쥬쯔 신코지교단 | 진세노사이드Rb1으로 된 피부조직 재생촉진제 |
CN1172677C (zh) * | 2000-07-14 | 2004-10-27 | 复旦大学附属中山医院 | 黄芪甲苷在制备药物组合物中的应用 |
GB0105613D0 (en) | 2001-03-07 | 2001-04-25 | Univ Cambridge Tech | Pharmaceutically effective compounds and their use |
WO2002007732A2 (en) * | 2000-07-26 | 2002-01-31 | Cambridge University Technical Services Limited | Use of panaxatriol for stimulation angiogenesis |
US6696094B2 (en) * | 2000-10-18 | 2004-02-24 | Tzu-Sheng Wu | Herbal pharmaceutical composition for treatment of HIV/AIDS patients |
CN1242807C (zh) * | 2000-11-08 | 2006-02-22 | 天津市延龄营养保健品有限公司 | 一种抗皮肤过敏的药物组合物及其制法和用途 |
CN1369276A (zh) * | 2001-02-12 | 2002-09-18 | 徐秀荣 | 有效减轻体重的组合物和方法 |
JP2002275086A (ja) * | 2001-03-15 | 2002-09-25 | Fancl Corp | 虚弱体質改善用組成物 |
WO2002091999A2 (en) | 2001-05-09 | 2002-11-21 | Geron Corporation | Treatment for wounds |
US20020182272A1 (en) * | 2001-05-30 | 2002-12-05 | Bruce Halstead | Methods of treatment of HIV-associated conditions |
US20040180938A1 (en) | 2001-07-03 | 2004-09-16 | Akio Ohtani | Novel butadiene derivatives, process for preparation of the same and intermediates for the synthesis thereof |
JP2003089687A (ja) * | 2001-07-03 | 2003-03-28 | Tanabe Seiyaku Co Ltd | 新規ブタジエン誘導体、その製法およびその合成中間体 |
US6855344B2 (en) * | 2001-07-17 | 2005-02-15 | Integrated Chinese Medicine Holdings, Ltd. | Compositions and methods for prostate and kidney health and disorders, an herbal preparation |
US20030108629A1 (en) * | 2001-07-17 | 2003-06-12 | Chou Wen Hsien | Compositions and methods for prostate and kidney health and disorders, an herbal preparation |
CN1164608C (zh) * | 2001-08-31 | 2004-09-01 | 上海中医药大学 | 具有抗心肌纤维化作用的黄芪皂甙甲 |
CN1406585A (zh) | 2001-09-07 | 2003-04-02 | 中国科学院上海药物研究所 | 一种治疗病毒性心肌炎的药物组合物 |
JP2003160497A (ja) * | 2001-11-22 | 2003-06-03 | Toshin Kagaku Kk | 皮膚外用剤 |
US20070042962A1 (en) * | 2002-02-04 | 2007-02-22 | Adams David S | Peptide dependent upregulation of telomerase expression |
CN1236803C (zh) | 2002-03-20 | 2006-01-18 | 郑国芃 | 一种治疗风湿症的中药 |
CN1189176C (zh) * | 2002-07-22 | 2005-02-16 | 江苏正大天晴药业股份有限公司 | 黄芪甲甙组合物及其制备方法 |
AU2003228378A1 (en) * | 2003-03-26 | 2004-11-23 | Westlake Partners | Herbal compositions and methods for effecting weight loss in humans |
AU2004249295A1 (en) * | 2003-06-20 | 2004-12-29 | Viral Genomix, Inc. | Compositions for and methods for treating HIV |
DK1644009T3 (en) | 2003-06-23 | 2018-03-05 | Telomerase Activation Sciences Inc | Compositions for increasing telomerase activity and treating HIV infection |
US9248088B2 (en) * | 2003-06-25 | 2016-02-02 | Telomerase Activation Sciences, Inc. | Compositions and methods for skin conditioning |
US20070122501A1 (en) * | 2003-06-27 | 2007-05-31 | Hong Kong University Of Science And Technology | Formulations containing astragalus extracts and uses thereof |
-
2004
- 2004-06-23 DK DK04777032.6T patent/DK1644009T3/en active
- 2004-06-23 CA CA2528483A patent/CA2528483C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 NZ NZ544191A patent/NZ544191A/en unknown
- 2004-06-23 PT PT12180710T patent/PT2548880T/pt unknown
- 2004-06-23 WO PCT/US2004/020277 patent/WO2005000245A2/en active Application Filing
- 2004-06-23 LT LTEP04777032.6T patent/LT1644009T/lt unknown
- 2004-06-23 KR KR1020117017367A patent/KR20110089887A/ko active Application Filing
- 2004-06-23 TR TR2019/03587T patent/TR201903587T4/tr unknown
- 2004-06-23 HU HUE04777032A patent/HUE036559T2/hu unknown
- 2004-06-23 AP AP2005003474A patent/AP2280A/xx active
- 2004-06-23 ES ES04777032.6T patent/ES2666864T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 KR KR1020057024720A patent/KR101312389B1/ko active IP Right Grant
- 2004-06-23 PL PL04777032T patent/PL1644009T3/pl unknown
- 2004-06-23 ZA ZA200509846A patent/ZA200509846B/en unknown
- 2004-06-23 DK DK12180710.1T patent/DK2548880T3/en active
- 2004-06-23 EP EP04777032.6A patent/EP1644009B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 ES ES12180710T patent/ES2716528T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 EA EA200600076A patent/EA009442B1/ru unknown
- 2004-06-23 BR BRPI0411856-1A patent/BRPI0411856A/pt not_active Application Discontinuation
- 2004-06-23 SI SI200432463T patent/SI2548880T1/sl unknown
- 2004-06-23 PL PL12180710T patent/PL2548880T3/pl unknown
- 2004-06-23 HU HUE12180710A patent/HUE043168T2/hu unknown
- 2004-06-23 SI SI200432425T patent/SI1644009T1/en unknown
- 2004-06-23 CN CN2004800172464A patent/CN1809364B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 EP EP12180710.1A patent/EP2548880B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 AU AU2004251753A patent/AU2004251753C1/en not_active Ceased
- 2004-06-23 JP JP2006517617A patent/JP5583882B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-06-23 TR TR2018/02543T patent/TR201802543T4/tr unknown
- 2004-06-23 MX MXPA05013844A patent/MXPA05013844A/es active IP Right Grant
- 2004-06-23 KR KR1020137031630A patent/KR101465515B1/ko active IP Right Grant
- 2004-06-23 PT PT47770326T patent/PT1644009T/pt unknown
- 2004-06-23 US US10/562,374 patent/US7846904B2/en active Active
- 2004-06-23 LT LTEP12180710.1T patent/LT2548880T/lt unknown
-
2008
- 2008-11-25 AU AU2008249200A patent/AU2008249200A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-03-05 US US12/718,812 patent/US8759304B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2011
- 2011-02-21 JP JP2011035191A patent/JP5841337B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2013
- 2013-10-23 JP JP2013219989A patent/JP5913253B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2014
- 2014-06-24 US US14/313,698 patent/US20150093455A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-01-04 JP JP2016000130A patent/JP2016041770A/ja not_active Withdrawn
-
2018
- 2018-02-23 HR HRP20180330TT patent/HRP20180330T1/hr unknown
- 2018-02-26 CY CY20181100225T patent/CY1119951T1/el unknown
-
2019
- 2019-02-18 HR HRP20190322TT patent/HRP20190322T1/hr unknown
- 2019-03-22 CY CY20191100342T patent/CY1121447T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2666864T3 (es) | Composiciones para aumentar la actividad telomerasa y tratar infección por VIH | |
US9913851B2 (en) | Compositions and methods for increasing telomerase activity |