CN101225424B - 环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 - Google Patents
环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101225424B CN101225424B CN2008100043800A CN200810004380A CN101225424B CN 101225424 B CN101225424 B CN 101225424B CN 2008100043800 A CN2008100043800 A CN 2008100043800A CN 200810004380 A CN200810004380 A CN 200810004380A CN 101225424 B CN101225424 B CN 101225424B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- raw material
- water
- alcohol
- extract
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J17/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
- C07J17/005—Glycosides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明提供了一种制备环黄芪醇的单葡萄糖苷CMG(环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷)的方法,包括下述步骤:a.使用黄芪甲苷或按常规方法制备的黄芪提取物作为原料,往其中加入适当溶剂配制药液;b.加入水解酶在恒温下进行水解得到水解液;c.水解液经大孔吸附树脂分离;和d.纯化分离得到的产物。本发明还提供了由该方法制备的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷及其在制备用于治疗心血管疾病的药物中的应用和含有其的药物组合物。
Description
技术领域
本发明属医药技术领域。具体地,本发明涉及一种环黄芪醇的单葡萄糖苷即环黄芪醇6-O-β-D-葡萄糖苷的制备方法,以及由所述方法制得的环黄芪醇6-O-β-D-葡萄糖苷、所述环黄芪醇6-O-β-D-葡萄糖苷在制备用于治疗心脑血管病的药物中的应用和含有治疗有效量的所述环黄芪醇6-O-β-D-葡萄糖苷的药物组合物。
背景技术
环黄芪醇(Cycloastragenol)类化合物属羊毛甾烷型四环三萜类结构,是豆科黄芪属(Astragalus)植物中的指标性成分类群。环黄芪醇类三萜皂苷成分是常用中药黄芪(Astragalus membranaceus Bge.)中的主要生物活性成分,具有调节免疫、强心、抗心脑缺血损伤、保肝、抗炎、抗病毒以及改善肾脏、胰岛损伤等诸多药理作用。尽管黄芪皂苷类成分的药理作用已得到肯定,总皂苷以及单体皂苷(黄芪甲苷)的工业化生产工艺也比较成熟(CN1172677C、CN 1543976A、CN 1189176C),但这类化合物普遍具有的溶解惰性以及低生物利用度等性质导致了制剂研究的滞后,限制了其作为药物的开发和推广,至目前尚无产品上市。
式1 CMG的结构
环黄芪醇6-O-β-D-葡萄糖苷(CMG)的结构(式1)由Isao Kitagawa等于1983年首次报道(Chem.Pharm.Bull.31(2)698-708,1983),是在黄芪甲苷结构研究过程中以橙皮苷酶水解黄芪甲苷制备其苷元时得到的副产物,对其药理作用未见文献报道。我们的研究发现CMG具有与黄芪甲苷类似的心血管药理活性(见本专利申请实施例),而溶解性好于黄芪甲苷等已知的其他环黄芪醇类化合物,更具备作为药物开发的可行性。已公开的发明专利申请(国际申请:PCT/US2004/020277;中国专利申请公开号:CN1809364A)中是以温和酸水解黄芪甲苷的方法制备CMG,反应中实际得到的主产物是环黄芪醇(52%),CMG收率很低(21%),而且因其他副产物的干扰,需经硅胶柱层析等分离方法纯化,才可得到纯品,不适合用于工业化的大批量生产。
发明内容
本发明针对现有生产方法的技术不足,提出了适合工业化的CMG生产方法,并根据CMG的溶解度较好、具有明显的治疗心血管疾病的作用特点,发明了相关的制剂。
本发明的目的是提供一种环黄芪醇的单葡萄糖苷-环黄芪醇6-O-β-D-葡萄糖苷(CMG)的工业化制备方法。该方法结合工业酶制剂仿生转化技术和高效的天然产物纯化技术制备CMG,无需使用毒害有机溶剂以及强酸碱性试剂,工艺路线简洁、环保,产品收率稳定,适合工业化生产。
本发明的另一个目的是提供由本发明方法制备的CMG、含有治疗有效量的该CMG和一种或多种药学上可接受的辅料的药用组合物,以及该CMG在制备用于治疗心血管疾病的药物中的应用。
现结合本发明的目的对本发明加以详细描述:
本发明制备CMG的方法是通过如下技术方案实现的。具体地,本发明提供了一种制备环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷的方法,包括下述步骤:
a.使用黄芪甲苷或按常规方法制备的黄芪提取物作为原料,往其中加入适当溶剂制成药液;
b.加入水解酶在恒温下进行水解得到水解液;
c.水解液经大孔吸附树脂分离;和
d.纯化分离得到的产物。
优选地,当原料为黄芪甲苷时,黄芪甲苷在溶液中的浓度为0.01%-1%(W/V),优选浓度为0.01-0.5%,(W/V),更优选浓度为0.01-0.1%W/V; 当原料为黄芪提取物时,溶液浓度为提取物∶溶液比1∶2-1∶1000(W∶V),优选比例是提取物∶溶液1∶15-1∶1000(W∶V)。所述溶剂是选自水、低级醇或含水低级醇。所述低级醇优选是选自碳数为1-3的一元醇,更优选选自乙醇和甲醇,最优选乙醇。当原料为黄芪甲苷或水难溶性提取物时,原料需要用适当浓度的低级醇增溶,有助于提高水解效率。本发明中所述药液中低级醇的最终浓度优选是1-30%(V/V),更优选5-20%(V/V)。
在本发明的一个优选实施方案中,所述水解酶优选选自β-糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、橙皮苷酶或这些酶与纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、糖化酶、果胶酶、淀粉酶中一种或数种酶的混合物,更优选β-糖苷酶、β-葡萄糖苷酶或木聚糖酶,最优选木聚糖酶。所述木聚糖酶是指外切型木聚糖酶,酶活为50-500万活力单位/g(ml)。
在本发明的另一个优选实施方案中,当底物为黄芪甲苷时,底物与酶的比例为1∶1-50(W∶W);和当底物为药材提取物时,酶与底物配比为1∶100-10∶1(W∶W),优选配比为1∶50-10∶1(W∶W)。
在本发明的又一个优选实施方案中,所述水解在40-55℃下恒温进行12-72小时,优选48-72小时,和溶液适合的pH值为4-7。
在本发明的再一个优选实施方案中,所述分离按如下步骤进行:
水解液经苯乙烯为骨架的大孔吸附树脂,先用水洗脱1-2个柱体积,后用0.5-2%的碱溶液洗脱1-2个柱体积,再用20-40%的乙醇溶液洗脱1-3个柱体积,最后用70-95%乙醇洗脱1-3个柱体积,收集高浓度乙醇洗脱部分,减压浓缩至使溶液含少量乙醇或无醇味,见白色沉淀析出。所述原料∶树脂比当原料为提取物时优选为1∶20-4∶1(g∶ml),更优选1∶10-3∶1(g∶ml);当原料为黄芪甲苷时优选为0.1∶1-20∶1(mg∶ml),更优选为2∶1-10∶1(mg∶ml)。
在本发明的又一个优选实施方案中,所述纯化按如下步骤进行:
过滤分离得到的所述白色沉淀物,用低级醇转溶,过滤,浓缩滤液至溶液微见浑浊。放置,待析出结晶。过滤得结晶,再用低级醇或含水低级醇重结晶,得纯度95%以上的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷。所述低级醇优选是碳数1-5的一元醇或多元醇,更优选选自甲醇和乙醇。
本发明还提供了根据本发明方法制备的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷。本发明的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷是白色细针状结晶(甲醇、乙 醇-水)或无定型粉末(其他溶剂)。
本发明还提供了一种药物组合物,其包含治疗有效量的根据本发明方法制备的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷和药学上可接受的辅料。
优选地,所述药学上可接受的辅料选自稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、稳定剂和溶剂。所述稀释剂包括但不限于淀粉、微晶纤维素、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖、低分子右旋糖苷、高岭土、氯化钠、甘露醇等;所述润滑剂包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸、硼酸、氯化钠、油酸钠、DL-亮氨酸、月桂醇硫酸钠、聚乙二醇4000-6000、泊洛沙母等;所述粘合剂包括但不限于水、乙醇、淀粉浆、糖浆、明胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、茄替胶、聚乙烯吡咯烷酮等;所述崩解剂包括但不限于淀粉、羧甲基淀粉钠、泡腾混合物即碳酸氢钠和枸橼酸、酒石酸、低取代羟丙基纤维素等;所述稳定剂包括但不限于多糖如金合欢胶、琼脂、藻酸、瓜耳胶、黄芪胶、丙烯酸酯树脂、纤维素醚和羧甲基甲壳酯等;所述溶剂包括但不限于林格式溶液、水、磷酸盐缓冲液、平衡的盐溶液等。
活性成份与辅料成份的组合比例根据制剂的不同而不同,活性成份的剂量可以在0.01mg/kg-50mg/kg,根据治疗的目的不同剂量不同。
本发明的药物组合物可为固体口服制剂、液体口服制剂、注射剂、膜剂或气雾剂的形式。所述固体口服制剂优选为普通片剂、分散片、肠溶片、颗粒、胶囊、滴丸或散剂,或缓控释制剂。所述缓控释制剂优选为缓控释片剂、颗粒或胶囊。所述液体口服制剂优选为口服液或乳剂。所述注射剂优选为小水针、输液或冻干粉针。
当本发明药物组合物为小水针剂时,该药物组合物除注射用水外,优选还含有适当比例的选自葡萄糖、氯化钠、山梨醇和磷酸盐的药用辅料,选自乙醇、甘油和丙二醇的有机溶剂,或选自注射用PEG和羟丙基β-环糊精的助溶剂。当本发明药物组合物为输液时,除注射用水外,该药物组合物优选还含有根据需要添加的葡萄糖、氯化钠和/或等渗剂。当本发明药物组合物为冻干粉针剂时,该药物组合物优选还含有适当比例的冻干支持剂,该冻干支持剂优选选自甘露醇、葡萄糖、山梨醇、氯化钠、右旋糖苷、蔗糖、乳糖、水解明胶、羟丙基-β-环糊精、磺丁醚环糊精、泊洛沙姆和聚乙二醇中的一种、两种或两种以上组合。
在本发明的药物组合物中,所述冻干粉针剂中环黄芪醇-6-O-β-D-葡 萄糖苷与药学上可接受的辅料的重量配比优选为1∶10-200,更优选1∶50-200,更优选1∶100-150。
优选地,所述冻干支持剂为甘露醇或甘露醇-乳糖组合物,所述甘露醇-乳糖组合物中甘露醇与乳糖的重量配比是10∶1-1∶1,优选5∶1-1∶1。
所述冻干支持剂为右旋糖苷、聚乙二醇-甘露醇或右旋糖苷-聚乙二醇-甘露醇组合物,其中优选聚乙二醇-甘露醇组合物。所述聚乙二醇优选为聚乙二醇200-600,更优选聚乙二醇400。对于所述聚乙二醇-甘露醇组合物,重量配比聚乙二醇∶甘露醇为1∶1-1∶10,优选1∶1-1∶5。
本发明还提供了根据本发明方法制备的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷在制备用于治疗心血管疾病的药物中的应用。
本发明提供的CMG制备技术方案中,底物溶液浓度和酶与底物的配比是影响CMG收率的主要因素。当底物溶液浓度过高时因影响酶的活性而减低水解效率,当底物溶液过稀即会不必要地增加溶液体积和酶的用量而且延长处理时间,随之影响生产周期。一般地,当底物为黄芪粗提物时(黄芪甲苷含量0.2-8‰),底物溶液稀释倍数可以低一些(提取物-溶液比1∶5-1∶30W∶V);当底物为精制提取物时(黄芪甲苷含量1-50%),底物溶液稀释倍数(提取物-溶液比)应为1∶40-1∶1000W∶V;当底物中黄芪甲苷含量高于50%时,应按黄芪甲苷溶液配制方法配制底物溶液。
本发明提供的化合物CMG制备方法也可以直接从黄芪药材制备CMG,不需先制备高纯度黄芪甲苷,再由其制备所需化合物,大量节省生产成本,而且工艺路线简洁。采用生物酶水解方法,全工艺过程不需要使用毒害有机溶剂,实际生产可实施性强,产品收率(从药材计平均0.1%)和质量稳定。
本发明提供的化合物CMG水溶性高于其他环黄芪醇类成分,适合制成注射用制剂。注射剂因具有疗效快,稳定而且适用于危重患者或不能口服用药的患者,在临床具有一定的优势。
将化合物CMG制成水针剂时可以直接将化合物用注射用水溶解,加适当比例的葡萄糖,氯化钠,山梨醇,磷酸盐等按常规的水针剂制备方法制备。但需要制备大剂量高浓度的针剂时需加乙醇,甘油,丙二醇等有机溶剂或注射用PEG,羟丙基β-环糊精等助溶。
本发明所述药物组合物为水针剂时,该水针剂中环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷的浓度优选为0.01%-1%g/100ml,更优选为0.01%-0.2%g/100ml。
将化合物CMG制成输液时,可将处方剂量化合物用注射用水溶解,根据需要添加葡萄糖,氯化钠以及等渗剂按输液的常规制备方法制备成不同规格的输液。
本发明所述的药物组合物为输液时,该输液中环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷的浓度优选为0.001%-0.1%g/100ml,更优选为0.002%-0.05%g/100ml。
将化合物CMG制成冻干粉针剂时,应根据制剂需要添加适当比例的冻干支持剂。所述支持剂是选自甘露醇、葡萄糖、山梨醇、氯化钠、右旋糖苷、蔗糖、乳糖、水解明胶、羟丙基-β-环糊精、磺丁醚环糊精、泊洛沙姆和聚乙二醇中的一种、两种或两种以上组合。
适当比例的支持剂可提高化合物溶解性,使产品具有较好的外观以及稳定性,因此支持剂的比例和适合支持剂的选择对最终产品的质量起到很重要的作用。本发明所述CMG冻干粉针剂中CMG-药用辅料重量配比为1∶10-200,优选1∶50-200,更优选1∶100-150。
本发明再优选甘露醇、甘露醇-乳糖组合物作为冻干支持剂,所述甘露醇-乳糖组合物重量配比可以是10∶1-1∶1(W∶W),优选重量配比是5∶1-1∶1。
本发明更优选右旋糖苷、聚乙二醇-甘露醇或右旋糖苷-聚乙二醇-甘露醇组合物作为冻干支持剂,其中优选聚乙二醇-甘露醇组合物。所述聚乙二醇优选为聚乙二醇200-600,更优选聚乙二醇400。对于所述聚乙二醇-甘露醇组合物,重量配比聚乙二醇∶甘露醇为1∶1-1∶10,优选1∶1-1∶5,更优选1∶1-1∶2。
本发明提供的CMG冻干粉针剂,可以采用本领域常规的制备工艺进行制备。但CMG在水中溶解度有限,而且在不同溶解条件下其水中的溶解度受较大影响。因此,为保证每批次产品中药物含量的一致性以及满足冻干溶液浓度的要求,制备工艺中尤其是溶液配制过程中采取适当措施是必要的。
本发明采用下述步骤解决了如上所述的问题:
a.将处方量样品溶于0.1-0.5%活性炭处理过的溶剂中;
b.将a中所述样品溶液搅拌下滴加到经过0.1-0.5%活性炭处理过的冻干支持剂溶液中;
c.加水至处方量,滤膜过滤,分装,冻干。
在所述冻干粉针剂的制备步骤中,所述步骤a中的溶剂优选为乙醇、丙二醇或聚乙二醇,其用量优选为处方量溶液总体积的1-10%。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明,以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明,但不以此作为对本发明的限制。
实施例1
黄芪甲苷2g,加药用乙醇150ml加热溶解,后加水稀释至3000ml,加β-糖苷酶30g溶解,调整溶液pH值为5.0,在45℃恒温下酶解24小时,过滤。滤液经500ml D101大孔吸附树脂吸附,依次用水、0.5%氢氧化钠溶液、30%乙醇溶液分别洗脱2个柱体积,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,见白色沉淀析出。过滤,得到沉淀,再用95%乙醇复溶,过滤,滤液浓缩至溶液开始变浑浊,放置待析出结晶,过滤得结晶,即CMG纯品(白色细针状粉末)。
实施例2
黄芪药材(2kg)的水煎煮提取物540g,用水稀释至提取物∶药液比为1∶15W∶V,加β-葡萄糖苷酶90g溶解,调整溶液pH值为6.0,在40℃酶解48小时,过滤,滤液经500ml AB-8大孔吸附树脂吸附,依次用1个柱体积的水、2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液、2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以80%乙醇洗脱2个柱体积,收集80%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,待析出白色沉淀。滤得白色沉淀,再用95%乙醇复溶,过滤,滤液浓缩至溶液开始变浑浊,放置待析出结晶,过滤,得CMG纯品(白色无定型粉末)。
实施例3
黄芪药材醇提取物300g,加水稀释至提取物∶药液比为1∶20 W∶V,加葡聚糖酶50g,β-葡萄糖苷酶50g溶解,调整溶液pH值为5.5,在50℃酶解24小时,过滤,滤液经400ml D101大孔吸附树脂吸附,先用2个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的1%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积 的40%乙醇溶液洗脱,最后以80%乙醇洗脱2个柱体积,收集80%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,待析出白色沉淀。滤得白色沉淀,再用甲醇复溶,过滤,滤液浓缩至溶液开始变浑浊,放置待析出结晶,过滤得结晶,再用乙醇-水重结晶,得CMG纯品(白色无定型粉末)。
实施例4
黄芪甲苷2g,加水4000ml混悬,加β-葡萄糖苷酶40g溶解,调整溶液pH值为6.5,在45℃酶解48小时,过滤,滤液经400ml D101大孔吸附树脂吸附,依次用水、40%乙醇溶液分别洗脱2个柱体积,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,待析出白色沉淀。滤得白色沉淀,再用甲醇复溶,过滤,滤液浓缩至溶液开始变浑浊,放置待析出结晶,过滤得结晶,再以甲醇-水重结晶,得CMG纯品(白色细针状结晶)。
实施例5
黄芪(2kg)水煎煮提取液(出膏率32%),浓缩至提取物∶溶液比为1∶10W∶V,加β-葡萄糖苷酶80g溶解,调整溶液pH值为6.5,在45℃酶解24小时,过滤,滤液经600ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,待析出白色沉淀。滤得白色沉淀,再用乙醇复溶,过滤,滤液浓缩至溶液开始变浑浊,放置待析出结晶,过滤得结晶,再以乙醇-水重结晶,得CMG纯品(白色无定型粉末)。
实施例6
黄芪药材(2kg)水煎煮醇沉提取物(出膏率23%),用水稀释至提取物∶药液比为1∶30W∶V,加纤维素酶50g、葡聚糖酶50g、β-葡萄糖苷酶130g溶解,调整溶液pH值为4.5,在45℃酶解72小时,过滤,滤液经400ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,待析出白色沉淀。滤得白色沉淀,再用乙醇复溶,过滤,滤液浓缩至溶液开始变浑浊,放置待析出结晶,过滤得结晶,再以乙醇-水重结晶,得CMG纯品(白色无定型粉末)。
实施例7
黄芪药材(2kg)水煎煮提取液(出膏率29%),浓缩至提取物∶药液比为1∶25W∶V,加纤维素酶50g、果胶酶15g、β-葡萄糖苷酶80g溶解,调整溶液pH值为5.0,在40℃酶解24小时,过滤,滤液经500ml D101大孔吸附树脂吸附,先用2个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味,待析出白色沉淀。后操作同实施例6。
实施例8
黄芪甲苷2g,加300ml乙醇溶解,加水稀释至1000ml,加β-葡萄糖苷酶10g溶解,调整溶液pH值为5.5,在45℃酶解72小时,过滤,滤液经200ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例9
黄芪药材提取物30g,用水配制成提取物∶药液比为1∶30W∶V,加β-葡萄糖苷酶30g溶解,调整溶液pH值为6.0,在45℃酶解48小时,过滤,滤液经700ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例10
黄芪药材提取物20g,加水溶解,稀释至提取物∶药液比为1∶40W∶V,加β-葡萄糖苷酶2g,木聚糖酶3g溶解,调整溶液pH值为5.0,在40℃酶解48小时,过滤,滤液经600ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例11
黄芪药材(2kg)水煎煮提取液(出膏率32%),浓缩至提取物∶药液比为1∶7W∶V,加β-葡萄糖苷酶40g,糖化酶10g,木聚糖酶14g溶解,调整溶液pH值为7.0,在40℃酶解72小时,过滤,滤液经800ml D101大 孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例12
黄芪药材(2kg)水煎煮提取液(出膏率32%),浓缩至提取物∶药液比为1∶12W∶V,加β-葡萄糖苷酶32g溶解,调整溶液pH值为5.5,在40℃酶解72小时,过滤,滤液经500ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例13
黄芪药材提取物15g,加水溶解至提取物∶药液比为1∶60W∶V,加β-葡萄糖苷酶1g溶解,调整溶液pH值为4.5,在50℃酶解48小时,过滤,滤液经400ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例14
黄芪药材提取物30g,加水溶解至提取物∶药液比为1∶80W∶V,加β-糖苷酶3g溶解,调整溶液pH值为5.0,在50℃酶解48小时,过滤,滤液经250ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例15
黄芪药材(2kg)乙醇提取液(出膏率24%),加水溶解至提取物∶药液比为1∶20W∶V,加β-葡萄糖苷酶96g溶解,调整溶液pH值为6.0,在45℃酶解24小时,过滤,滤液经200ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例16
黄芪药材提取物200g,加水溶解至提取物∶药液比为1∶90W∶V,加β-葡萄糖苷酶5g,淀粉酶5g溶解,调整溶液pH值为5.5,纤维素酶20g在40℃酶解12小时,过滤,滤液经300ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例17
黄芪药材(2kg)乙醇提取物(出膏率20%),加水溶解至提取物∶药液比为1∶100W∶V,加β-葡萄糖苷酶10g溶解,调整溶液pH值为6.0,在45℃酶解48小时,过滤,滤液经1000ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例18
黄芪药材提取物200g,加水溶解至提取物-药液比为1∶10W∶V,加β-葡萄糖苷酶4g溶解,调整溶液pH值为6.0,在50℃酶解36小时,过滤,滤液经500ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例19
黄芪药材提取物30g,加水溶解至提取物-药液比为1∶20W∶V,加β-葡萄糖苷酶1g溶解,调整溶液pH值为5.0,在40℃酶解24小时,过滤,滤液经50ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例20
黄芪药材提取物5g,加水溶解至提取物-药液比为1∶100W∶V,加β-葡萄糖苷酶50g溶解,调整溶液pH值为5.5,在45℃酶解24小时,过滤,滤液经100ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液 洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例21
黄芪药材提取物1g,加水溶解至提取物-药液比为1∶80W∶V,加β-葡萄糖苷酶5g溶解,调整溶液pH值为5.5,在45℃酶解72小时,过滤,滤液经20ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例22
黄芪药材提取物1g,加水溶解至提取物-药液比为1∶90W∶V,加β-葡萄糖苷酶9g溶解,调整溶液pH值为4.5,在55℃酶解48小时,过滤,滤液经20ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例23
黄芪药材提取物3g,加水溶解至提取物-药液比为1∶70W∶V,加β-葡萄糖苷酶21g溶解,调整溶液pH值为4.0,在50℃酶解36小时,过滤,滤液经60ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例24
黄芪药材提取物1g,加水溶解至提取物-药液比为1∶50W∶V,加β-葡萄糖苷酶3g溶解,调整溶液pH值为5.0,在45℃酶解24小时,过滤,滤液经10ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例25
黄芪药材提取物100g,加水溶解至提取物-药液比为1∶10W∶V,加 β-葡萄糖苷酶1g溶解,调整溶液pH值为4.5,在40℃酶解48小时,过滤,滤液经500ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例26
黄芪药材提取物70g,加水溶解至提取物-药液比为1∶30W∶V,加β-葡萄糖苷酶1g溶解,调整溶液pH值为5.5,在50℃酶解48小时,过滤,滤液经300ml D101大孔吸附树脂吸附,先用1个柱体积的水洗脱,再用2个柱体积的0.5%氢氧化钠溶液洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例27
黄芪甲苷1g,用125ml药用乙醇溶解,搅拌下加至1800ml水中,将10g外切型木聚糖酶(酶活300万U/g)溶解于200ml水,加至黄芪甲苷溶液中,补水使溶液总体积为2500ml,调节溶液pH值为4.5,在50℃酶解12小时,过滤,滤液经100ml D101大孔吸附树脂,先用1个柱体积的水洗脱,后用2个柱体积的40%乙醇溶液洗脱,最后以70%乙醇洗脱2个柱体积,收集70%乙醇洗脱液,减压浓缩至无醇味。后操作同实施例6。
实施例28
黄芪甲苷0.6g,分散至1800ml水中,制备黄芪甲苷混悬液。将3g外切型木聚糖酶(酶活500万U/g)用100ml水溶解,加至黄芪甲苷溶液中,补水使溶液最终体积为2000ml,调节溶液pH值为5.0,在45℃水解24小时,过滤。后操作同实施例27。
实施例29
黄芪甲苷0.5g,溶解于100ml药用乙醇,搅拌下加至800ml水中,将10g外切型木聚糖酶(酶活200万U/g)溶解于100ml水,加至黄芪甲苷溶液中,调节溶液pH值为4.5,在50℃酶解48小时,过滤。后操作同实施例27。
实施例30
黄芪甲苷0.5g,溶解于50ml药用乙醇,搅拌下加至400ml水中,将4g外切型木聚糖酶(酶活400万U/g)溶解于50ml水,加至黄芪甲苷溶液 中,调节溶液pH值为4.5,在50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例27。
实施例31
黄芪甲苷0.2g,溶解于800ml水中,将8g外切型木聚糖酶(酶活50万U/g)溶解于200ml水中,加至黄芪甲苷溶液中,调节溶液pH值为4.5,在50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例27。
实施例32
黄芪甲苷0.8g,溶解于350ml水中,将2.4g外切型木聚糖酶(酶活500万U/g)溶解于50ml水中,加至黄芪甲苷溶液中,调节溶液pH值为4.5,在50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例27。
实施例33
黄芪提取物25g,加水溶解至提取物-药液比为1∶20,加外切型木聚糖酶1g(酶活300万U/g)溶解,调节溶液pH值为4.5,50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例34
黄芪提取物30g,加水溶解至提取物-药液比为1∶10,加外切型木聚糖酶2g(酶活200万U/g)溶解,调节溶液pH值为5,50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例35
黄芪提取物10g,加水溶解至提取物-药液比为1∶40,加外切型木聚糖酶0.25g(酶活400万U/g)溶解,调节溶液pH值为4.5,45℃酶解24小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例36
黄芪提取物5g,加水溶解至提取物-药液比为1∶80,加外切型木聚糖酶5g(酶活50万U/g)溶解,调节溶液pH值为5,50℃酶解48小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例37
黄芪提取物3g,加水溶解至提取物-药液比为1∶100,加外切型木聚糖酶0.5g(酶活500万U/g)溶解,调节溶液pH值为4.5,50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例38
黄芪提取物1g,加水溶解至提取物-药液比为1∶300,加外切型木聚 糖酶0.5g(酶活400万U/g)溶解,调节溶液pH值为5,50℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例39
黄芪提取物0.5g,加水溶解至提取物-药液比为1∶500,加外切型木聚糖酶3g(酶活500万U/g)溶解,调节溶液pH值为5,45℃酶解12小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例40
黄芪提取物0.3g,加水溶解至提取物-药液比为1∶800,加外切型木聚糖酶3g(酶活300万U/g)溶解,调节溶液pH值为5,50℃酶解24小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例41
黄芪提取物0.5g,加水溶解至提取物-药液比为1∶1000,加外切型木聚糖酶4g(酶活100万U/g)溶解,调节溶液pH值为4.5,50℃酶解48小时,过滤。后操作同实施例6。
实施例42
CMG 10g,加40g乳糖∶微晶纤维素=5∶1、硬脂酸镁1%,用70%乙醇制粒、压片即得1000片片剂。规格:10mg/片。
实施例43
CMG0.8g,甘露醇80g,加2000ml注射用水溶解,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥。规格:2mg、5mg/支(以CMG计),用前先以10-20ml注射用水、5%葡萄糖注射液或氯化钠注射液溶解,再注入到静脉输液中,静脉滴注。
实施例44
CMG0.2g,甘露醇20g,乳糖5g,加500ml热注射用水溶解,再补水至1000ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例45
CMG1g,甘露醇60g,乳糖30g,加2000ml热注射用水溶解,再补水至2500ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例46
CMG1g,甘露醇50g,乳糖10g,加2500ml热注射用水溶解,再补水至 4000ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例47
CMG1g,甘露醇60g,乳糖10g,加2000ml热注射用水溶解,再补水至2500ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例48
CMG0.5g,甘露醇50g,乳糖5g,加2000ml热注射用水溶解,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例49
CMG0.5g,甘露醇15g,乳糖5g,加1000ml热注射用水溶解,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例50
CMG0.5g,乳糖25g,加1000ml热注射用水溶解,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例51
CMG0.4g,甘露醇40g,乳糖40g,加1000ml热注射用水溶解,补足注射用水至2000ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例52
CMG1g,甘露醇90g,乳糖60g,加2500ml热注射用水溶解,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,冷冻干燥,供静脉注射用。用法同实施例13。
实施例53
CMG0.67g,用经0.3%活性炭处理过的乙醇80g加热溶解;50g右旋糖苷40加注射用水500ml溶解,加0.3%活性碳处理,将配制好的样品乙醇溶液搅拌下加入到右旋糖苷溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例54
CMG0.67g,经0.4%活性炭处理过的乙醇16g加热溶解,分散,再滴加到用活性炭处理过的50g聚乙二醇400中。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含20g右旋糖苷40和甘露醇50g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例55
CMG0.67g,经0.3%活性炭处理过的50g聚乙二醇400加热溶解。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇50g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例56
CMG0.67g,经0.3%活性炭处理过的50g丙二醇加热溶解。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇50g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例57
CMG0.5g,经0.3%活性炭处理过的50g聚乙二醇400加热溶解。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇25g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例58
CMG0.5g,经0.3%活性炭处理过的30g聚乙二醇400加热溶解。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇60g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例59
CMG0.6g,经0.3%活性炭处理过的60g乙醇加热溶解,再滴加到用活性炭处理过的10g聚乙二醇400中。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇50g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例60
CMG0.5g,经0.3%活性炭处理过的60g乙醇加热溶解,再滴加到用活性炭处理过的10g聚乙二醇400中。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇15g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例61
CMG0.5g,经0.3%活性炭处理过的60g乙醇加热溶解,再滴加到用活 性炭处理过的10g聚乙二醇400中。样品溶液搅拌下加入到活性炭处理过的800ml含甘露醇30g的水溶液中,补足水至1000ml,0.2μm滤膜过滤,分装,冷冻干燥。
实施例62
CMG 10g,加糊精10g、乳糖30g用60%乙醇制粒、干燥、装胶囊,制得1000粒胶囊剂。
实施例63
CMG 1g,葡萄糖125g,加2000ml热注射用水溶解,补足注射用水至2500ml,调等渗,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例64
CMG 0.8g,氯化钠18g,加2000ml热注射用水溶解,补足注射用水至4000ml,调等渗,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例65
CMG 0.6g,葡萄糖10g,加1500ml热注射用水溶解,补足注射用水至2000ml,调等渗,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例66
CMG 0.6g,加50ml丙二醇溶解,补足注射用水至1000ml,调等渗,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例67
CMG 0.1g,加500ml热注射用水溶解,补足注射用水至1000ml,调等渗,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例68
CMG 0.4g,加100ml乙醇溶解,补足注射用水至500ml,调等渗,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例69
CMG 1g,葡萄糖50g,山梨醇10g,乙醇300ml;先用处方量乙醇溶解CMG,加200ml注射用水稀释,后加处方量葡萄糖和山梨醇溶解,补足注射用水至1000ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例70
CMG 1g,葡萄糖50g,山梨醇10g,丙二醇200ml,先用处方量丙二醇溶解CMG,加100ml注射用水稀释,后加处方量葡萄糖和山梨醇溶解,补足注射用水至500ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例71
CMG 1g,用60ml乙醇溶解,补足注射用水至100ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例72
CMG 0.8g,用30ml乙醇溶解,加20ml丙二醇混合均匀,补足注射用水至100ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例73
CMG 0.8g,用60ml乙醇溶解,加30ml丙二醇混合均匀,补足注射用水至200ml,加适量活性炭除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得小水针。
实施例74
CMG 1g,葡萄糖1000g,加3L注射用水加热溶解,补足注射用水至20L,调节pH6.5,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶、500ml/瓶。
实施例75
CMG 0.8g,氯化钠180g,加3L热注射用水溶解,补足注射用水至20L,调节pH值7.0,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶。
实施例76
CMG 2g,葡萄糖1000g,加5L热注射用水溶解,补足注射用水至20L,调节pH值7.0,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶。
实施例77
CMG 2g,葡萄糖500g,加5L热注射用水溶解,补足注射用水至10L,调节pH值7.0,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶,500ml/瓶。
实施例78
CMG 0.4g,葡萄糖1000g,加5L注射用水加热溶解,补足注射用水至20L,调节pH7.0,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶、500ml/瓶。
实施例79
CMG 0.8g,葡萄糖1000g,加5L注射用水加热溶解,补足注射用水至10L,调节pH6.0,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶、500ml/瓶。
实施例80
CMG 1g,葡萄糖100g,加500ml注射用水加热溶解,补足注射用水至2000ml,调节pH6.5,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶、500ml/瓶。
实施例81
CMG 0.1g,葡萄糖500g,加5L注射用水加热溶解,补足注射用水至10L,调节pH7.5,加适量活性碳除热源,0.2μm微孔滤膜滤过,灌装,制得输液。规格:100ml/瓶,250ml/瓶、500ml/瓶。
实施例82
CMG 5g,PEG600050g,95%乙醇适量。取处方量CMG用适量乙醇溶解,水浴加热并加入PEG6000熔化,在50℃保温下滴入10℃以下的液状石蜡冷却液中,冷凝成丸,制得滴丸。
实施例83
CMG 5g,泊洛沙姆50g,95%乙醇适量。取处方量CMG用适量乙醇溶解,加入到已熔化的泊洛沙姆中,搅拌,保温下滴入冷却的二甲基硅油中,制得滴丸。
我们的研究发现CMG药理活性与黄芪甲苷相当,但溶解性得到大幅改善(黄芪甲苷2~4mg/100ml;CMG:40~50mg/100ml),具有较好的口服吸收特性,具备作为药品开发的可能性。
实施例84:CMG对离体心脏的强心作用
方法:wistar大鼠,261.79.8(250~280)g,12%水合氯醛360mg/vkgip麻醉。舌下静脉给予肝素1mg/只,进行肝素化。开胸,取心脏,迅速置于以95±5%CO2饱和的K-H液中,主动脉插管接Langendorff灌流装置逆行心脏灌注,灌注压为74cm水柱。心尖部缝合丝线接张力换能器并与RM6000 八导生理记录仪连接,再将输出信号经Biopec system输入至计算机,分析处理。
结果:
1.对心率(HR)的影响(bpm)
CMG与对照药黄芪甲苷均可减慢心率,二者无明显差异(见表1)。
2.对收缩力的影响(g)
CMG与对照药黄芪甲苷均可增加收缩力,二者无明显差异(见表2)。
表1.对心率(HR)的影响(bpm)
*P<0.05,**P<0.001vs药前,+P<0.05,++P<0.01,+++P<0.001vs control。
表2.对收缩力的影响(g)
[0230] *P<0.05,**P<0.01vs药前,+P<0.05,++P<0.01vs control。
3.对收缩力变化率的影响(g/s)
CMG与黄芪甲苷均可增加收缩力变化率,二者无明显差异。
表3.对收缩力变化率的影响
*P<0.05,**P<0.01vs药前,+P<0.05,+++P<0.001vs control。
4.对舒张力变化率的影响(g/s)
CMG与黄芪甲苷均可增加舒张力变化率,二者无明显差异。
表4.对舒张力变化率的影响(g/s)
*P<0.05,**P<0.01vs药前,+P<0.05,+++P<0.001vs control。
结论:CMG在离体心脏模型上显示强心作用,其作用强度与黄芪甲苷相当。
实施例85:CMG对麻醉开胸犬血流动力学的影响
1.实验目的
观察CMG静脉给药对麻醉开胸犬心功能各项指标的影响,并与黄芪甲苷进行比较,为该药进一步开发提供实验依据。
2.实验材料
2.1药物及配制
(1)CMG注射液(简称ASP-II):无色透明液体,0.35mg·mL-1,批号041230。天津药物研究院创新中心提供。临用时以对照溶剂配制成0.3mg·mL-1的药液。按动物体重及给药剂量量取药液,以生理盐水稀释至30ml,供犬静脉给药用。
(2)黄芪甲苷注射液:无色透明液体,1.5mg·mL-1,批号040323。天津药物研究院创新中心提供。临用时以对照溶剂配制成0.3mg·mL-1的药液。按动物体重量取药液,以生理盐水稀释至30ml,供犬静脉给药用。
2.2实验动物
成年健康杂种犬:购自天津市郊,饲养两周以上备用。
2.3实验仪器
(1)RM-6300型八道生理记录仪,日本光电株式会社产品;
(2)MFV-3200型电磁血液流量计,日本光电株式会社产品;
(3)MP-100数据采集系统,美国BIOPAC公司产品;
(4)SC-3型电动呼吸机,上海医疗器械四厂产品。
3实验方法
动物静脉推注戊巴比妥钠30mg/kg麻醉。气管插管接SC-3型电动呼吸机行人工正压呼吸。左侧第IV肋间开胸,暴露心脏,分离主动脉根部,卡上直径12或14mm(FC-120/140T)的血液流量计探头,测定主动脉血流量,以此代表心输出量(CO);分离冠状动脉左旋支,卡上2或2.5mm(FC-020T、025T)的血流量探头,经MFV-3200型电磁血液流量计测定冠脉流量(CBF)。心尖部插入充满肝素生理盐水的聚乙烯导管至左心室,经TP-400T型压力换能器接AP-641G血压放大器测量左室内压(LVP)、左室舒张末期压(LVEDP),将LVP电讯号经微分处理,记录左室内压最大上升和下降速率 (±LVdp/dtmax);分离股动脉,插入充满肝素生理盐水的聚乙烯导管至腹主动脉,经TP-400T型压力换能器接AP-641G血压放大器测定收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)。四肢皮下插入针状电极,经AC-601G心电放大器测量标准II导联心电图(ECG II)。上述模拟信号同步输入RM-6300型八导生理记录仪,经MP-100系统采集、转换为数字信号存储于电脑中,以AcqKnowledge v.3.5.7软件进行分析处理。另行股静脉插管,供给药及补液用。
手术完毕待各项指标稳定后记录给药前各项指标,开始静脉输注给药。实验分5组,每组6只犬,给药组分别给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg,空白对照组给予对照溶剂1ml/kg,阳性药物对照组给予黄芪甲苷0.3mg/kg,体积均为15ml/只,速度1ml/min。记录开始给药后5、10、15、20、30、45、60、90、120min上述诸项指标。实验结束后放血处死动物,剪下心脏并称重,以1/3心脏重量作为左旋支引流区,计算每百克心肌的血流量(CF),并按公式计算冠脉阻力(CR)、心脏指数(CI)、左室做功(LVW)及总外周阻力(TPR)。公式如下:
CF=CBF×300/心脏重量 CR=MAP/CF CI=CO/0.11×(体重)2/3
LVW=CO×(MAP-5)×1.052×0.0136 TPR=MAP×79.92/CO
4实验结果
4.1对血压、心率的影响
麻醉开胸犬静脉给予对照溶剂后SBP、DBP、MAP和HR在120min内与给药前相比无明显变化。
给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg,SBP、DBP、MAP、HR在120min内无明显变化。黄芪甲苷给药后血压与给药前比较无明显变化,心率有所减慢。等剂量(0.3mg/kg)ASP-II与黄芪甲苷比较无明显差异。
4.2对左心功能的影响(表5、6)
麻醉开胸犬给予对照溶剂后120minLVP、LVEDP、LVW、±LVdp/dtmax无明显变化。
LVP:静脉给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg,左室内压在120min内无明显变化。
LVEDP:给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg,左室舒张末期压剂量依赖性降低,LVEDP最大分别下降了1.1±0.4、1.5±0.8、2.1±0.5mmHg(P均<0.01),作用持续2h以上。
LVW:静脉给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg,对左室作功无明显影响。
±LVdp/dtmax:给予ASP-II 0.15mg/kg,±LVdp/dtmax在120min内无明显变化,0.3、0.6mg/kg给药5~10min后+LVdp/dtmax明显增加,最大分别增加了12.0±5.0、22.6±11.8%(P均<0.01),对-LVdp/dtmax无明显影响。
黄芪甲苷给药后LVSP、LVW、-LVdp/dtmax无明显变化,+LVdp/dtmax明显增加,LVEDP明显降低。等剂量(0.3mg/kg)ASP-II与黄芪甲苷比较无明显差异。
4.3对心脏泵血功能及总外周阻力的影响(表7)
麻醉开胸犬静脉给予生理盐水后120min CO、CI及TPR无明显变化。
CO、CI:静脉给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg,CO、CI在120min内无明显变化。
TPR:给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg总外周阻力在120min内无明显变化。
阳性药物黄芪甲苷对CO、CI、TPR无明显影响,与等剂量ASP-II比较无明显差异。
4.4对冠脉流量及冠脉阻力的影响(表8)
麻醉开胸犬给予生理盐水后120min CF、CR无明显变化。
静脉给予ASP-II 0.15、0.3、0.6mg/kg对CF、CR无明显影响。
阳性药物黄芪甲苷给药后120min CF、CR亦无明显变化。
结论
单次给予ASP-II 0.15mg/kg后麻醉开胸犬除LVEDP外各项血流动力学指标无明显变化;0.3、0.6mg/kg明显降低LVEDP,升高+LVdp/dtmax,其它血流动力学指标无明显变化。对照药物黄芪甲苷明显降低LVEDP,升高+LVdp/dtmax,与等剂量的ASP-II相比,对麻醉开胸犬各项指标的影响无显著性差异。
CMG可有效改善麻醉犬血流动力学指标,作用强度与等剂量黄芪甲苷相当。
Claims (16)
1.一种制备环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷的方法,包括下述步骤:
a.使用黄芪甲苷或按常规方法制备的黄芪提取物作为原料,往其中加入适当溶剂配制药液,其中,当原料为黄芪甲苷时,黄芪甲苷在溶液中的浓度为0.01-0.1%W/V;当原料为黄芪提取物时,溶液浓度为提取物:溶液=1:15-1:1000W:V;
b.加入水解酶在恒温下进行水解得到水解液,所述水解是在溶液pH4-7,40-55℃下恒温进行48-72小时,其中,当原料为黄芪甲苷时,原料与酶的比例为1:1-50W:W;当原料为药材提取物时,酶与原料的配比为1:100-10:1W:W;其中,所述水解酶选自β-糖苷酶、橙皮苷酶或这些酶与纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、糖化酶、果胶酶、淀粉酶中一种或数种酶的混合物,或者所述水解酶为木聚糖酶;
c.水解液经苯乙烯为骨架的大孔吸附树脂,先用水洗脱1-2个柱体积,后用0.5-2%的碱溶液洗脱1-2个柱体积,再用20-40%的乙醇溶液洗脱1-3个柱体积,最后用70-95%乙醇洗脱1-3个柱体积,收集高浓度乙醇洗脱部分,减压浓缩;
d.纯化分离得到的产物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述溶剂选自水、低级醇或含水低级醇。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述低级醇选自碳数为1-3的一元醇。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述低级醇选自乙醇和甲醇。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述低级醇为乙醇。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述药液中醇的浓度是1-30%V/V。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述药液中醇的浓度是5-20%V/V。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述水解酶选自β-糖苷酶或木聚糖酶。
9.根据权利要求1或8所述的方法,其特征在于,所述β-糖苷酶为β-葡萄糖苷酶。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述水解酶为木聚糖酶。
11.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,当原料为药材提取物时,酶与原料的配比为1:50-10:1W:W。
12.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,原料:树脂比当原料为提取物时为1:20-4:1g:ml;当原料为黄芪甲苷时为0.1:1-20:1mg:ml。
13.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,原料:树脂比当原料为提取物时为1:10-3:1g:ml;当原料为黄芪甲苷时为2:1-10:1mg:ml。
14.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述纯化按如下步骤进行:
过滤分离得到的产物,用低级醇或含水低级醇转溶,过滤,浓缩滤液并放置至析出结晶,过滤得结晶,再用低级醇或含水低级醇重结晶,得纯度95%以上的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷。
15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,所述低级醇是碳数1-5的一元醇或多元醇。
16.根据权利要求14或15所述的方法,其特征在于,所述低级醇选自甲醇和乙醇。
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2008100043800A CN101225424B (zh) | 2007-09-13 | 2008-01-23 | 环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 |
EP08783682A EP2199402A4 (en) | 2007-09-13 | 2008-09-08 | CYCLOASTRAGENOL MONOGLYCOSIDE, PREPARATION THEREOF, PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING SAME AND USE THEREOF |
PCT/CN2008/001594 WO2009046620A1 (en) | 2007-09-13 | 2008-09-08 | Cycloastragenol monoglucoside, preparation, pharmaceutical composition and application thereof |
US12/678,025 US8835134B2 (en) | 2007-09-13 | 2008-09-08 | Cycloastragenol monoglucoside, preparation, pharmaceutical composition and application thereof |
JP2010524334A JP5294509B2 (ja) | 2007-09-13 | 2008-09-08 | シクロアストラゲノールモノグルコシド、その製造方法及び医薬用組成物としての使用 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN200710059591 | 2007-09-13 | ||
CN200710059591.X | 2007-09-13 | ||
CN2008100043800A CN101225424B (zh) | 2007-09-13 | 2008-01-23 | 环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101225424A CN101225424A (zh) | 2008-07-23 |
CN101225424B true CN101225424B (zh) | 2013-05-29 |
Family
ID=39857629
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2008100043800A Active CN101225424B (zh) | 2007-09-13 | 2008-01-23 | 环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8835134B2 (zh) |
EP (1) | EP2199402A4 (zh) |
JP (1) | JP5294509B2 (zh) |
CN (1) | CN101225424B (zh) |
WO (1) | WO2009046620A1 (zh) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102030799B (zh) * | 2009-09-27 | 2012-09-05 | 天津药物研究院 | 环黄芪醇-6-O-β-D葡萄糖苷一水合物及其晶体 |
CN102652731A (zh) * | 2011-03-04 | 2012-09-05 | 天津药物研究院 | 一种环黄芪醇的单葡萄糖苷注射液、其制备方法及应用 |
CN103397064B (zh) | 2013-08-14 | 2015-04-15 | 苏州汉酶生物技术有限公司 | 一种酶法制备瑞鲍迪甙m的方法 |
EP3508584A1 (en) * | 2014-01-28 | 2019-07-10 | PepsiCo, Inc. | Method for preparing rebaudioside m by using enzyme method |
CN104152491B (zh) * | 2014-08-18 | 2017-02-15 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种发酵黄芪的制备方法及其总皂苷的提取方法 |
CN105154404A (zh) * | 2015-10-27 | 2015-12-16 | 东营凤起生物科技发展有限公司 | 黄芪提取物fqr-8及其在肿瘤细胞免疫治疗中的应用 |
CN105566434B (zh) * | 2015-12-15 | 2017-10-24 | 安徽诚亚生物科技有限公司 | 一种高效制备环黄芪醇的方法 |
US11352653B2 (en) | 2016-10-21 | 2022-06-07 | Pepsico, Inc. | Enzymatic method for preparing rebaudioside N |
EP3530746A4 (en) | 2016-10-21 | 2020-06-24 | Pepsico, Inc. | METHOD FOR PRODUCING REBAUDIOSIDE C BY ENZYMATIC METHOD |
CA3041147A1 (en) | 2016-10-21 | 2018-04-26 | Pepsico, Inc. | Method for preparing rebaudioside j using enzymatic method |
CN107034261B (zh) * | 2017-05-05 | 2020-09-04 | 北京化工大学 | 炭黑曲霉转化黄芪甲苷制备6-o-葡萄糖-环黄芪醇的方法 |
CN107058445B (zh) * | 2017-05-09 | 2020-11-20 | 北京化工大学 | 一种利用两步酶解法转化黄芪甲苷制备环黄芪醇的方法 |
CN109718379B (zh) * | 2017-10-31 | 2024-04-12 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种环黄芪醇制剂 |
CN114369636A (zh) * | 2021-12-27 | 2022-04-19 | 泰州丹鼎生物科技有限公司 | 一种环黄芪醇的生物催化制备方法 |
CN115645418B (zh) * | 2022-11-11 | 2024-01-30 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 环黄芪醇及组合物在制备抗血小板及抗血栓药物中的应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1544458A (zh) * | 2003-11-27 | 2004-11-10 | 上海博泰医药科技有限公司 | 高纯度黄芪甲苷的制备方法 |
CN1569884A (zh) * | 2004-04-29 | 2005-01-26 | 南京医科大学 | 黄芪甲苷的制法及在制备防治糖尿病肾病药物中的应用 |
CN1793132A (zh) * | 2006-01-12 | 2006-06-28 | 天津药物研究院 | 环黄芪醇类衍生物以及用途 |
CN1809364A (zh) * | 2003-06-23 | 2006-07-26 | 杰龙公司 | 增加端粒酶活性的组合物和方法 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AUPO644897A0 (en) * | 1997-04-28 | 1997-05-22 | Novogen Inc | Preparation of isoflavones from legumes |
CN1172677C (zh) | 2000-07-14 | 2004-10-27 | 复旦大学附属中山医院 | 黄芪甲苷在制备药物组合物中的应用 |
CN1189176C (zh) | 2002-07-22 | 2005-02-16 | 江苏正大天晴药业股份有限公司 | 黄芪甲甙组合物及其制备方法 |
US20040020277A1 (en) | 2002-07-31 | 2004-02-05 | Mcgarvey Gordon Bryce | Monitoring erosion of ceramic insulation or shield with wide area pneumatic grids |
WO2005000248A2 (en) | 2003-06-25 | 2005-01-06 | Geron Corporation | Compositions and methods for skin conditioning |
CN1543976A (zh) | 2003-11-27 | 2004-11-10 | 上海博泰医药科技有限公司 | 黄芪甲苷注射剂制剂及其制备方法 |
CN1319538C (zh) | 2004-03-19 | 2007-06-06 | 天津药物研究院 | 一种黄芪甲苷原料药的制备方法及其原料药和制剂 |
CN1854148B (zh) | 2005-02-06 | 2011-05-11 | 成都地奥九泓制药厂 | 黄芪总苷提取物及其制备方法 |
US20060292251A1 (en) | 2005-06-23 | 2006-12-28 | Nuliv Science Inc. - A Taiwan, R.O.C. Corporation | Method for enhancing nutrient absorption with astragalosides |
-
2008
- 2008-01-23 CN CN2008100043800A patent/CN101225424B/zh active Active
- 2008-09-08 US US12/678,025 patent/US8835134B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-08 JP JP2010524334A patent/JP5294509B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-08 EP EP08783682A patent/EP2199402A4/en not_active Withdrawn
- 2008-09-08 WO PCT/CN2008/001594 patent/WO2009046620A1/zh active Application Filing
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1809364A (zh) * | 2003-06-23 | 2006-07-26 | 杰龙公司 | 增加端粒酶活性的组合物和方法 |
CN1544458A (zh) * | 2003-11-27 | 2004-11-10 | 上海博泰医药科技有限公司 | 高纯度黄芪甲苷的制备方法 |
CN1569884A (zh) * | 2004-04-29 | 2005-01-26 | 南京医科大学 | 黄芪甲苷的制法及在制备防治糖尿病肾病药物中的应用 |
CN1793132A (zh) * | 2006-01-12 | 2006-06-28 | 天津药物研究院 | 环黄芪醇类衍生物以及用途 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
.1983,第31卷(第2期),698-708. * |
CHEMICAL & * |
ISAO KITAGAWA等.Saponin and Sapogenol. XXXV. Chemical Constituents of Astragali Radix, the Root of Astragalus membranaceus BUNGE. (2). Astragalosides I, II and IV, Acetylastragaloside I and Isoastragalosides I and II.< * |
ISAOKITAGAWA等.SaponinandSapogenol.XXXV.ChemicalConstituentsofAstragaliRadix the Root of Astragalus membranaceus BUNGE. (2). Astragalosides I |
PHARMACEUTICAL BULLETIN> * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2009046620A1 (en) | 2009-04-16 |
JP5294509B2 (ja) | 2013-09-18 |
US20110218161A1 (en) | 2011-09-08 |
CN101225424A (zh) | 2008-07-23 |
US8835134B2 (en) | 2014-09-16 |
JP2010538621A (ja) | 2010-12-16 |
EP2199402A1 (en) | 2010-06-23 |
EP2199402A4 (en) | 2011-07-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101225424B (zh) | 环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用 | |
CN1985846B (zh) | 褐藻多糖硫酸酯在制备治疗心脑血管疾病的药物中的用途 | |
CN101033245B (zh) | 具栖冬青苷的制备方法及应用 | |
US20070213280A1 (en) | Steroidal Saponins Compound, the Process for Producing the Same and the Use Thereof | |
CN1931217B (zh) | 一种由银杏叶与红景天制成的药物组合物 | |
CN101658525A (zh) | 用于抗血栓性疾病的药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN101367799B (zh) | 苦参碱丹参酚酸b复盐和苦参素丹参酚酸b复盐及其制备方法和用途 | |
CN101851162B (zh) | 一种丹酚酸化合物的制备方法和用途 | |
CN102125662A (zh) | 一种用于治疗中风的复方中药、其制备方法及其用途 | |
CN101974011B (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸甲酯 | |
CN100417389C (zh) | 一种用于治疗微血管循环障碍疾病的药物组合物及其制备方法 | |
CN100563647C (zh) | 灯盏花和丹参酮ⅱa磺酸钠的药用组合物 | |
CN1068790C (zh) | 含有西洋参茎叶总皂甙的药物组合物 | |
CN1923229B (zh) | 三七提取物、丹参提取物和葛根素的药用组合物 | |
CN101297861A (zh) | 从槐花中提取的一种降糖活性物质 | |
CN1582946B (zh) | 积雪草酸衍生物在制备防治心、脑血管疾病的药物中的用途 | |
JP2021512998A (ja) | 分離された白茅根多糖及びその用途 | |
CN1923191B (zh) | 二氢黄酮类化合物在制备治疗心血管疾病药物中的应用 | |
CN1985881A (zh) | 一种复方丹参川芎口服制剂的制备方法及其应用 | |
CN102846705B (zh) | 一种治疗心血管疾病的紫丹参有效部位及其制备方法 | |
CN103977163B (zh) | 一种具有抗心肌缺血作用的药物组合与制备方法及其应用 | |
CN100355424C (zh) | 治疗糖尿病的楤木提取物及楤木皂苷在制备治疗糖尿病的药物中的应用 | |
CN101974012A (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸乙酯 | |
CN113398186B (zh) | 一种紫花地丁提取物及其制备方法和应用 | |
CN101974010B (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |