ES2630711T3 - Bioprotección utilizando cepas de Lactobacillus rhamnosus - Google Patents
Bioprotección utilizando cepas de Lactobacillus rhamnosus Download PDFInfo
- Publication number
- ES2630711T3 ES2630711T3 ES13714671.8T ES13714671T ES2630711T3 ES 2630711 T3 ES2630711 T3 ES 2630711T3 ES 13714671 T ES13714671 T ES 13714671T ES 2630711 T3 ES2630711 T3 ES 2630711T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- strain
- lactobacillus rhamnosus
- food
- lactobacillus
- cfu
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 title claims abstract description 114
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 22
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 73
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 64
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 claims description 63
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 62
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 50
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 50
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 50
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 43
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims description 42
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 32
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 32
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 32
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 31
- 239000012871 anti-fungal composition Substances 0.000 claims description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 28
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 20
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 12
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 8
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 5
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 5
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 claims description 5
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 4
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 claims description 4
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 claims description 4
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 claims description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims description 3
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 claims 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 48
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 30
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 27
- 241001507662 Penicillium crustosum Species 0.000 description 22
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 21
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 21
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 18
- 241001507677 Penicillium commune Species 0.000 description 17
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 17
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 17
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 16
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 16
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 10
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 9
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 9
- 241000203233 Aspergillus versicolor Species 0.000 description 8
- 241000235036 Debaryomyces hansenii Species 0.000 description 8
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 8
- 235000021102 Greek yogurt Nutrition 0.000 description 8
- 241000960405 Penicillium paneum Species 0.000 description 8
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 description 7
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 description 7
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 7
- 241000228145 Penicillium brevicompactum Species 0.000 description 6
- 241000235546 Rhizopus stolonifer Species 0.000 description 6
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 6
- 230000000513 bioprotective effect Effects 0.000 description 6
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 2,4-Hexadienoic acid, potassium salt (1:1), (2E,4E)- Chemical compound [K+].CC=CC=CC([O-])=O CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 244000253911 Saccharomyces fragilis Species 0.000 description 5
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 5
- 235000020603 homogenised milk Nutrition 0.000 description 5
- 235000020200 pasteurised milk Nutrition 0.000 description 5
- 235000010241 potassium sorbate Nutrition 0.000 description 5
- 239000004302 potassium sorbate Substances 0.000 description 5
- 229940069338 potassium sorbate Drugs 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 4
- 241000864269 Penicillium nalgiovense Species 0.000 description 4
- 235000018368 Saccharomyces fragilis Nutrition 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 229940031154 kluyveromyces marxianus Drugs 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 235000015142 cultured sour cream Nutrition 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 3
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 description 3
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- JVKXKIBYHWRLOJ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl methanesulfonate Chemical compound CS(=O)(=O)OCCO JVKXKIBYHWRLOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Natural products OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 2
- 241000186610 Lactobacillus sp. Species 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241001279830 Penicillium discolor Species 0.000 description 2
- 241001150385 Penicillium palitans Species 0.000 description 2
- 240000000064 Penicillium roqueforti Species 0.000 description 2
- 241000864268 Penicillium solitum Species 0.000 description 2
- 241001466024 Penicillium spathulatum Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000021116 parmesan Nutrition 0.000 description 2
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 229940098377 penicillium brevicompactum Drugs 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 235000020202 standardised milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRKQWNFPTBNUKE-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1,2-dinitroguanidine Chemical compound [O-][N+](=O)N(C)\C(N)=N/[N+]([O-])=O SRKQWNFPTBNUKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186425 Acidipropionibacterium jensenii Species 0.000 description 1
- 102000040350 B family Human genes 0.000 description 1
- 108091072128 B family Proteins 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241001530515 Candida sake Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000222290 Cladosporium Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241000235035 Debaryomyces Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 description 1
- 241001112724 Lactobacillales Species 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000917016 Lactobacillus rhamnosus Lc 705 Species 0.000 description 1
- 241000194041 Lactococcus lactis subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000178948 Lactococcus sp. Species 0.000 description 1
- 244000172809 Leuconostoc cremoris Species 0.000 description 1
- 235000017632 Leuconostoc cremoris Nutrition 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 241000985530 Penicillium glabrum Species 0.000 description 1
- 235000002233 Penicillium roqueforti Nutrition 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 241000521553 Pichia fermentans Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 235000014969 Streptococcus diacetilactis Nutrition 0.000 description 1
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 1
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003270 Vitamin B Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008953 bacterial degradation Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 235000020186 condensed milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 230000000959 cryoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 235000020379 cucumber juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 235000011617 hard cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 description 1
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000020121 low-fat milk Nutrition 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 235000014102 seafood Nutrition 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000019832 sodium triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- -1 treitol Chemical compound 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
- A23B4/00—General methods for preserving meat, sausages, fish or fish products
- A23B4/14—Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12
- A23B4/18—Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12 in the form of liquids or solids
- A23B4/20—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23B4/22—Microorganisms; Enzymes; Antibiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C13/00—Cream; Cream preparations; Making thereof
- A23C13/12—Cream preparations
- A23C13/16—Cream preparations containing, or treated with, microorganisms, enzymes, or antibiotics; Sour cream
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/02—Making cheese curd
- A23C19/032—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
- A23C19/0323—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin using only lactic acid bacteria, e.g. Pediococcus and Leuconostoc species; Bifidobacteria; Microbial starters in general
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
- A23C19/068—Particular types of cheese
- A23C19/076—Soft unripened cheese, e.g. cottage or cream cheese
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/152—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations containing additives
- A23C9/158—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations containing additives containing vitamins or antibiotics
- A23C9/1585—Antibiotics; Bacteriocins; Fungicides from microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
- A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
- A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
- A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23L3/3571—Microorganisms; Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/165—Paracasei
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/175—Rhamnosus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physiology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
Abstract
Cepa de Lactobacillus rhamnosus seleccionada del grupo consistente en la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 que fue depositada en la Colección alemana de microorganismos y cultivos celulares (DSMZ) con el número de depósito DSM23035 y cepas mutantes derivadas de la misma, donde las cepas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifúngicas o mejoradas que la cepa con el número de depósito nº DSM23035.
Description
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
DESCRIPCION
Bioproteccion utilizando cepas de Lactobacillus rhamnosus CAMPO DE LA INVENCION
[0001] La presente invencion se refiere al campo de la bioproteccion, en particular a la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 con n° de deposito DSM23035. Ademas, la presente invencion se refiere a una composition antifungica que comprende la cepa, una composition antifungica que comprende la cepa y al menos una cepa de Lactobacillus paracasei, alimento, pienso y productos farmaceuticos que comprenden dicha composicion antifungica, un metodo de fabrication de dicho alimento, pienso y productos farmaceuticos, un metodo para la reduction del contenido de levaduras y hongos de dicho alimento, pienso y productos farmaceuticos y uso de la composicion antifungica.
ANTECEDENTES DE LA INVENCION
[0002] Durante muchos anos, las bacterias de acido lactico se han usado para aumentar el tiempo de conservation de productos alimenticios. Durante la fermentation, las bacterias de acido lactico producen acidos lacticos y otros acidos organicos, lo que reduce el pH del producto alimenticio y lo vuelve desfavorable para el crecimiento de microorganismos no deseados, tales como bacterias patogenicas, levaduras y mohos.
[0003] Adicionalmente, algunas bacterias de acido lactico tambien producen metabolitos con actividad antimicrobiana.
[0004] La solicitud de patente europea n° EP0221499 describe las propiedades antifungicas de Lactobacillus rhamnosus NRRL-B-15972, que es capaz de inhibir el crecimiento de diferentes mohos cuando se cultiva en medio de agar suplementado con zumo de pepino.
[0005] La solicitud de patente europea n° EP0576780 se refiere a Lactobacillus rhamnosus LC-705 que puede inhibir el crecimiento de Penicillium, Cladosporium, Fusarium y Candida en un medio a base de suero de leche, suplementado con hidrolizado de caseina y con extracto de levadura.
[0006] La solicitud de patente europea n° EP1442113 se refiere a mezclas de Propionibacterium jensenii y Lactobacillus sp., tal como Lactobacillus rhamnosus, con actividades antimicrobianas para uso para bioproteccion.
[0007] Sin embargo, sigue habiendo una necesidad de agentes bioprotectores con un efecto antifungico mejorado como cepas unicas o en combination con otras cepas bioprotectoras.
RESUMEN DE LA INVENCION
[0008] El objeto de la presente invencion es proporcionar nuevas cepas de bacterias de acido lactico con una eficacia alta como agentes bioprotectores.
[0009] Los presentes inventores han descubierto, mediante cribado e investigation exhaustivos, que determinadas cepas de Lactobacillus rhamnosus tienen un efecto significativamente mas alto contra las levaduras y mohos en comparacion con cultivos bioprotectores comerciales del mercado asi como con el sorbato de potasio, un conservante quimico usado habitualmente.
[0010] Los presentes inventores han descubierto ademas que un grupo determinado de bacterias de acido lactico, cuando se combina con otro grupo de bacterias de acido lactico, muestra un efecto antimicrobiano sinergistico significativo. El efecto antimicrobiano de los dos grupos de bacterias combinado, sorprendentemente, es mayor que la suma de los efectos individuales de los dos grupos de bacterias.
BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS
[0011]
La FIGURA 1 representa el crecimiento de mohos en yogur con 1,5% de grasa fermentada con un cultivo iniciador YF-L901 solo (fila superior), junto con HOLDBAC™ YM-B (fila intermedia) y junto con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366. Los contaminantes objetivo se anadieron a las concentraciones mencionadas en el texto de izquierda a derecha: Penicillium brevicompactum (M1), Penicillium commune (M6), Aspergillus versicolor (M7) y Penicillium crustosum (M10), respectivamente. Los yogures se habian incubado a 7±17°C durante 45 dias.
La FIGURA 2 representa el recuento de celulas de un aislado de Debaryomyces hansenii anadido a yogur con 1,5% de grasa fermentado con un cultivo iniciador YF-L901 solo (Referencia) o junto con las cepas
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
siguientes: HOLDBAC™ YM-B (HoldBac YM-B), HOLDBAC™ YM-C (HoldBac YM-C) o Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (CHCC 5366). Los yogures se almacenaron a 7±1°C y se analizaron a intervalos adecuados.
La FIGURA 3 muestra el crecimiento de mohos en placas obtenidos a partir de leche fermentada con un cultivo iniciador solo (referencia, primera imagen), junto con Lb. Paracasei CHCC14676 (segunda imagen), junto con Lb. Rhamnosus CHCC5366 (tercera imagen) o junto con una combinacion de Lb. Paracasei CHCC14676 y Lb. Rhamnosus CHCC5366 (cuarta imagen). Los contaminantes objetivo se anadieron a las concentraciones mencionadas en el texto desde arriba a la izquierda y desplazandose en el sentido de las agujas del reloj hasta abajo a la izquierda de la placa: Penicillium nalgiovense, Penicillium commune, Aspergillus versicolor y Penicillium crustosum, respectivamente. Las placas se habian incubado a 7±1°C durante 12 dias.
La FIGURA 4 muestra el crecimiento de: (1) Penicillium solitum, (2) P. palitans, (3) P. discolor, (4) P. spathulatum, (5) P. commune, (6). P. crustosum, (7) P. paneum, (8) P. roqueforti en un yogur de referencia (columna izquierda), un yogur hecho con 0,023% de sorbato de potasio (columna intermedia) y un yogur hecho con 1E+07 ufc/g de CHCC5366 (columna derecha) despues de 60 dias de incubacion a 7°C inoculados en concentraciones de aprox. 1000 esporas/vaso.
La FIGURA 5 muestra el crecimiento de Mucor ssp. en yogur griego obtenido a partir de leche fermentada con un cultivo iniciador solo (vaso de la izquierda) o de leche fermentada en presencia de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 (vaso de la derecha).
La FIGURA 6 muestra el crecimiento del moho Rhizopus stolonifer en yogur griego preparado a partir de leche fermentada con un cultivo iniciador solo (R. es decir, Referencia), con el cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (iM-B), con el cultivo iniciador y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366), o con el cultivo iniciador y una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5366+14676).
La FIGURA 7 muestra el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae en queso blanco en salmuera hecho a partir de leche fermentada solo con cultivo iniciador (referencia); con cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (iM-B); o con cultivo iniciador, Lactobacillus paracasei CHCC14676 y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366+14676).
La FIGURA 8 muestra el crecimiento de Kluyveromyces marxianus en queso blanco en salmuera hecho a partir de leche fermentada solo con cultivo iniciador (referencia); con cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (iM-B); o con cultivo iniciador, Lactobacillus paracasei CHCC14676 y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366+14676).
La FIGURA 9 muestra el crecimiento de Penicillium commune en queso blanco en salmuera hecho a partir de leche fermentada solo con cultivo iniciador (R, es decir, referencia); con cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (iM-B); o con cultivo iniciador, Lactobacillus paracasei CHCC14676 y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366+14676).
La FIGURA 10 muestra el crecimiento de P. Crustosum en queso blanco en salmuera hecho a partir de leche fermentada solo con cultivo iniciador (R, es decir, referencia); con cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (iM- B); o con cultivo iniciador y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366).
La FIGURA 11 representa el crecimiento del moho Penicillium paneum en yogur con 1,5% de grasa obtenido a partir de leche fermentada solo con un cultivo iniciador (R, es decir referencia), con el cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (iM-B), con el cultivo iniciador y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366), o con el cultivo iniciador y una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5366+14676).
La FIGURA 12 muestra el crecimiento del moho Penicillium crustosum en yogur con 1,5% de grasa obtenido a partir de leche fermentada solo con un cultivo iniciador (fila superior), con cultivo iniciador y HOLDBAC™ YM-B (segunda fila), con cultivo iniciador y Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (tercera fila) o con cultivo iniciador y una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 (fila inferior).
El contaminante objetivo se anadio en concentraciones de 100 esporas/vaso y los yogures se habian incubado a 7±1°C (columna izquierda), 12±1°C (columna central) o 22±1°C (columna derecha) durante 36 dias.
DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Definiciones
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
[0012] Como se utiliza en este caso, el termino "bacteria de acido lactico" designa una bacteria grampositiva microaerofilica o anaerobica, que fermenta azucares con la production de acidos incluyendo acido lactico como el acido producido predominantemente. Las bacterias de acido lactico mas utiles industrialmente se encuentran en el orden "Lactobacillales", que incluye Lactococcus, spp. Streptococcus, spp. Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Pseudoleuconostoc spp., Pediococcus spp., Brevibacterium spp. y Enterococcus spp. Estas se usan frecuentemente como cultivos de alimentos solas o en combination con otras bacterias de acido lactico.
[0013] Se entiende que el termino "alimento" tambien incluye el queso. Se entiende que el termino "queso" abarca cualquier queso, incluyendo quesos duros semiduros y blandos, tales como quesos de los siguientes tipos: cottage, feta, cheddar, parmesano, mozzarella, emmental, danbo, gouda, edam, de tipo feta, quesos azules, quesos salados, camembert y brie. El experto en la tecnica sabe como convertir la cuajada en queso, y se pueden encontrar metodos en la bibliografia, vease por ejemplo Kosikowski, F. V., y V. V. Mistry, "Cheese and Fermented Milk Foods", 1997,3rd Ed. F. V. Kosikowski, L. L. C. Westport, CT. Como se utiliza en este caso, un queso que tiene una concentration de NaCl por debajo de 1,7% (p/p) se denomina un "queso bajo en sal".
[0014] Las bacterias de acido lactico, incluyendo bacterias de las especies Lactobacillus sp. y Lactococcus sp., normalmente se suministran a la industria lactea o bien como cultivos congelados o liofilizados para la propagation de iniciadores en masa o como los denominados cultivos "Direct Vat Set" o de "inoculation directa a cuba" (SVD), destinados a la inoculacion directa en una cuba o tina de fermentation para la produccion de un producto lacteo, tal como un producto lacteo fermentado o un queso. Tales cultivos bacterianos de acido lactico se denominan en general "cultivos iniciadores" o "iniciadores".
[0015] El termino "mesofilo" en este contexto se refiere a microorganismos que crecen mejor a temperaturas moderadas (15°C-40°C). Las bacterias mesofilicas mas utiles industrialmente incluyen Lactococcus spp. y Leuconostoc spp. El termino "fermentacion mesofilica" en este contexto se refiere a la fermentacion a una temperatura entre aproximadamente 22°C y aproximadamente 35°C. El termino "producto lacteo fermentado mesofilico" se refiere a productos lacteos fermentados preparados mediante fermentacion mesofilica de un cultivo iniciador mesofilico e incluyen productos lacteos fermentados como suero de leche, leche agria, leche cultivada, smetana, crema agria y queso fresco, tal como quark, tvarog y queso crema.
[0016] El termino "termofilo" en este contexto se refiere a microorganismos que crecen mejor a temperaturas por encima de 43°C. Las bacterias termofilicas mas utiles industrialmente incluyen Streptococcus spp. y Lactobacillus spp. El termino "fermentacion termofilica" en este contexto se refiere a la fermentacion a una temperatura aproximadamente por encima de 35°C, tal como entre aproximadamente 35°C y aproximadamente 45°C. El termino "producto lacteo fermentado termofilico" se refiere a productos lacteos fermentados preparados mediante fermentacion termofilica de un cultivo iniciador termofilico e incluyen productos lacteos fermentados como el yogur firme, el yogur batido y el yogur liquido.
[0017] El termino "leche" debe entenderse como la secretion lactea obtenida mediante el ordeno de cualquier mamifero, por ejemplo vacas, ovejas, cabras, bufalos o camellos. En una forma de realization preferida, la leche es leche de vaca. El termino leche tambien incluye soluciones de proteina/grasa hechas de materiales vegetales, por ejemplo leche de soja.
[0018] El termino "sustrato de leche" puede ser cualquier material de leche crudo y/o procesado que se pueda someter a fermentacion segun el metodo de la invention. De este modo, los sustratos de leche utiles incluyen, pero de forma no limitativa, soluciones/suspensiones de cualquier producto lacteo o derivado lacteo que comprenden proteina, tal como leche de grasa entera o baja en grasa, leche desnatada, suero de leche, leche en polvo reconstituida, leche condensada, leche deshidratada, suero de leche, permeato de suero de leche, lactosa, liquido madre de cristalizacion de lactosa, concentrado de proteina de suero de leche, o nata.
Obviamente, el sustrato de leche puede proceder de cualquier mamifero, por ejemplo leche de mamifero sustancialmente pura, o leche en polvo reconstituida.
[0019] Antes de la fermentacion, el sustrato de leche se puede homogeneizar y pasteurizar segun metodos conocidos en la tecnica.
[0020] "Homogenization" como se utiliza en este caso significa una mezcla intensiva para obtener una emulsion o suspension soluble. Si la homogeneizacion se realiza antes de la fermentacion, se puede realizar para dividir la grasa lactea en tamanos menores de modo que esta ya no se separe de la leche. Esto se puede realizar haciendo pasar la leche a traves de pequenos orificios a alta presion.
[0021] "Pasteurization" segun se utiliza en este contexto significa el tratamiento del sustrato de leche para reducir o eliminar la presencia de organismos vivos, tales como microorganismos. Preferiblemente, la pasteurizacion se logra manteniendo una temperatura especifica durante un periodo de tiempo especifico. La temperatura especifica se logra normalmente por calentamiento. La temperatura y la duration se pueden seleccionar de modo que se maten o inactiven ciertas bacterias, tales como bacterias nocivas. Un paso de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
enfriamiento rapido puede ir a continuacion.
[0022] "Fermentacion", en los metodos de la presente invention, significa la conversion de carbohidratos en alcoholes o acidos a traves de la action de un microorganismo. Preferiblemente, la fermentacion en los metodos de la invencion comprende la conversion de lactosa en acido lactico.
[0023] Los procesos de fermentacion para ser usados en la production de productos lacteos son ampliamente conocidos y el experto en la tecnica sabra como seleccionar condiciones del proceso adecuadas, tales como temperatura, oxigeno, cantidad y caracteristicas del/de los microorganismo(s) y tiempo de proceso.
Obviamente, las condiciones de fermentacion se seleccionan para favorecer el logro de la presente invencion, es decir, para obtener un producto lacteo en forma solida (tal como un queso) o forma liquida (tal como un producto lacteo fermentado).
[0024] Las composiciones de la invencion proporcionan la ventaja de que se pueden inhibir los microorganismos no deseados seleccionados de entre hongos, bacterias y mezclas de los mismos, por ejemplo en alimentos, piensos y productos farmaceuticos y en seres humanos y animales. La prevention y/o inhibition del crecimiento de hongos, tales como levaduras y mohos, esta particularmente prevista. Por lo tanto, en una forma de realization preferida, el termino "antimicrobiano" debe entenderse como "antifungico".
[0025] El termino "microorganismos no deseados" en este contexto se refiere a microorganismos tales como bacterias y hongos, tales como levaduras, que son patogenicos y/o capaces de deteriorar alimentos, piensos o productos farmaceuticos. Las composiciones de la invencion proporcionan la ventaja de que se pueden inhibir los microorganismos no deseados seleccionados de hongos, bacterias y mezclas de los mismos, por ejemplo en alimentos, piensos y productos farmaceuticos y en seres humanos y animales. La prevencion y/o inhibicion del crecimiento de hongos, tales como levaduras y mohos, esta particularmente prevista.
[0026] Los terminos "inhibir" y "ser inhibidor" en relation con levaduras y mohos significa, por ejemplo, que el crecimiento o el numero o la concentration de levaduras y mohos, por ejemplo en productos alimenticios y/o en la superficie de productos alimenticios que comprenden las cepas segun la presente invencion, es menor que en productos alimenticios y/o en la superficie de productos alimenticios que no comprenden tales cepas.
[0027] En el presente contexto, el termino "mutante" deberia entenderse como una cepa derivada a partir de una cepa de la invencion mediante, por ejemplo, ingenieria genetica, radiation y/o tratamiento quimico.
Se prefiere que la mutante sea una mutante equivalente funcionalmente, por ejemplo una mutante que tiene sustancialmente las mismas propiedades, o mejoradas (por ejemplo en cuanto a las propiedades antifungicas), que la cepa progenitora. Tal mutante forma parte de la presente invencion. Especialmente, el termino "mutante" se refiere a una cepa obtenida sometiendo a una cepa de la invencion a cualquier tratamiento de mutagenizacion usado de forma convencional que incluye un tratamiento con un mutageno quimico tal como etano-metano- sulfonato (EMS) o N-metil-N'-nitro-N-nitroguanidina (NTG), luz UV o a una mutante presente de forma espontanea. Una mutante se puede haber sometido a mas tratamientos de mutagenizacion (un tratamiento unico deberia entenderse como un paso de mutagenizacion seguido de una etapa de cribado/seleccion), pero actualmente se prefiere que no se lleven a cabo mas de 20, o no mas de 10, o no mas de 5 tratamientos (o pasos de cribado/seleccion). En una mutante preferida actualmente, menos del 5%, o menos del 1% o incluso menos del 0,1% de los nucleotidos en el genoma bacteriano han sido desplazados con otro nucleotido, o eliminados, en comparacion con la cepa progenitora.
[0028] El uso de los terminos "un" y "el" y referentes similares en el contexto de la description de la invencion (especialmente en el contexto de las siguientes reivindicaciones) se deben interpretar cubriendo el singular y el plural, a menos que se indique lo contrario en este texto o el contexto lo contradiga claramente.
Los terminos "que comprende(n)", "que tiene(n)", "que incluye(n)" y "que contiene(n)" se deben interpretar como terminos abiertos (es decir, con el significado de "que incluye(n), pero no se limita(n) a,") a menos que se indique lo contrario. Las enumeraciones de rangos de valores en este texto estas destinadas meramente a servir como un metodo abreviado de hacer referencia individualmente a cada valor separado que este dentro del rango, a menos que se indique lo contrario en el texto, y cada valor separado se incorpora a la especificacion como si estuviera enumerado individualmente en ella. Todos los metodos aqui descritos se pueden realizar en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario aqui o a menos que lo contradiga claramente el contexto del presente documento. El uso de cualquier ejemplo y de todos los ejemplos o de expresiones ejemplificadoras (como "tal como") proporcionadas aqui tiene la mera intention de aclarar mejor la invencion y no plantea una limitation en el ambito de la invencion a menos que se reivindique lo contrario. Ninguna expresion de la especificacion deberia interpretarse como indicativa de que cualquier elemento no reivindicado es esencial para la practica de la invencion.
Implementation y aspectos de la invencion
[0029] Los presentes inventores han realizado un cribado entre 200 candidatos de Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paracasei y Lactobacillus rhamnosus para encontrar las cepas mas eficaces contra una gama
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
amplia de microorganismos, tales como levaduras y mohos.
[0030] Las pruebas de cribado se realizaron en un ensayo modelo que imitabla productos lacteos fermentados mesofilicos en la medida de lo posible en medios a base de leche a los que se anadio un cultivo iniciador pertinente con o sin candidatos bioprotectores y que se fermento bajo condiciones pertinentes para productos lacteos fermentados mesofilicos. Los organismos objetivo se aislaron de los productos lacteos fermentados mesofilicos. Las bacterias de acido lactico purificadas procedentes de los cultivos HOLDBAC™ de Danisco A/S, Dinamarca, al igual que los cultivos completos HOLDBAC™ YM-B y HOLDBAC™ YM-C cultivos, que contienen tanto bacterias de acido lactico como bacterias de acido propionico, se usaron como punto de referencia. El ensayo modelo se describe en la solicitud de patente europea n° EP11161609.0. Se descubrio que diecisiete candidatos entre Lactobacillus paracasei y Lactobacillus rhamnosus inhibian generalmente los 12 hongos indicadores tan bien o mejor que las bacterias de acido lactico de referencia cuando se evaluaron a 25°C.
Cuando se evaluo en yogur, una cepa de Lactobacillus rhamnosus, la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 depositada en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (DSMZ) con el numero de deposito DSM23035, demostro ser significativamente mejor en la inhibicion de levaduras y mohos que un cultivo bioprotector disponible comercialmente.
El efecto inhibidor de la cepa contra las levaduras y mohos podrian determinase mediante el almacenamiento de los productos lacteos fermentados a una temperatura adecuada durante un tiempo de almacenamiento adecuado como se describe en los ejemplos que aparecen a continuacion.
En general, la temperatura adecuada a la que este metodo deberia realizarse depende de la temperatura en la que el alimento, pienso o producto farmaceutico especifico, se almacena y/o se fabrica normalmente.
La temperatura a la que los productos se almacenan normalmente esta entre 5°C y 26°C, preferiblemente la temperatura es aproximadamente 8°C. El tiempo de almacenamiento a dicha temperatura depende del tiempo durante el que el alimento, pienso, o producto farmaceutico se almacena normalmente (vida util de almacenamiento). El tiempo de almacenamiento es normalmente 5-65, preferiblemente 7-60 dias, mas preferiblemente 7-28 dias, e incluso mas preferiblemente el tiempo de almacenamiento es aproximadamente 21 dias.
Por consiguiente, un primer aspecto de la presente invencion se refiere a una cepa de Lactobacillus rhamnosus seleccionada del grupo consistente en la cepa Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 que fue depositada en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (DSMZ) con el numero de deposito DSM23035 Y cepas mutantes derivadas de la misma, donde las cepas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que la cepa con el numero de deposito n° DSM23035.
Asi, ademas de la cepa depositada mencionada anteriormente, la invencion tambien se refiere a mutantes que se han derivado de esta cepa, es decir, que se han obtenido usando la cepa depositada CHCC5366 como material de partida. La cepa mutante se puede derivar de la cepa depositada, por ejemplo, mediante ingenieria genetica, radiacion, luz UV, tratamiento quimico y/o metodos que inducen cambios en el genoma.
Una mutante segun la invencion inhibira y/o prevendra el crecimiento de ciertas bacterias u hongos, preferiblemente mohos. Se prefiere que la mutante tenga esencialmente al menos el 80% o mas, al menos el 90% o mas, al menos el 95% o mas, o incluso hasta el 100% o mas del efecto antifungico en comparacion con su cepa progenitora cuando se determina, por ejemplo, en un ensayo como se describe en el ejemplo 1 que usa uno de los mohos P. brevicompactum, P. commune, A. versicolor, D. hansenii o P. crustosum como organismo de referencia cuyo crecimiento debe ser inhibido. Dichas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que la cepa con el numero de deposito DSM23035.
[0031] Es evidente para la persona experta que, al usar la cepa depositada como material de partida, el lector experto puede obtener de forma rutinaria por mutagenesis convencional o tecnicas de reaislamiento otras mutantes o derivadas de la misma que conservan las caracteristicas y ventajas pertinentes descritas aqui.
Por consiguiente, el termino "cepas mutanes deriveadas de la misma" del primer aspecto se refiere a cepas mutantes obtenidas usando la cepa depositada como material de partida.
[0032] Un segundo aspecto se refiere a una composition antifungica que comprende al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun el primer aspecto de la invencion, preferiblemente la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366.
[0033] Cuando se realizaron experimentos con la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 en combination con cepas de Lactobacillus paracasei diferentes, se descubrio de forma inesperada que estas combinaciones eran aun mejores que cualquiera de las cepas solas, incluso cuando las concentraciones totales de celulas eran identicas. En una forma de realization, la invencion se refiere a una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC12777. En otra forma de realizacion, la invencion se refiere a una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676.
Estas combinaciones parecieron ser mas eficaces que los cultivos de referencia HOLDBAC™ YM-B y HOLDBAC™ YM-C de Danisco, Dinamarca.
[0034] Por consiguiente, en una forma de realizacion preferida, la presente invencion se refiere a composiciones antimicrobianas y mas preferiblemente antifungicas que comprenden la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 que se deposito en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (DSMZ) con el
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
numero de deposito DSM23035 o una derivada mutante de la misma que tiene sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que la cepa depositada con el numero de deposito DSM23035 y al menos una cepa de Lactobacillus paracasei.
Preferiblemente, al menos una cepa de Lactobacillus paracasei se selecciona del grupo consistente en la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC14676 con numero de deposito DSM25612, la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC12777 con numero de deposito DSM24651 y cepas mutantes derivadas de estas cepas depositadas, donde las cepas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que una de las cepas depositadas con el numero de deposito DSM25612 o DSM24651.
[0035] En un aspecto, la invencion proporciona por lo tanto una composition antimicrobiana y mas preferiblemente antifungica que comprende la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 o una derivada mutante de la misma y la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC12777 o una derivada mutante de la misma.
En otro aspecto, la invencion proporciona una composicion antimicrobiana y mas preferiblemente antifungica que comprende al menos la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 o una derivada mutante de la misma y la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC14676 o una derivada mutante de la misma.
Dichas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que una de las cepas con el numero de deposito DSM23035; DSM24651 o DSM25612.
Preferiblemente, la combination de la cepa de Lactobacillus paracasei y la cepa de Lactobacillus rhamnosus en las composiciones de la invencion actua sinergisticamente en cuanto a su actividad antimicrobiana y/o antifungica.
[0036] La composicion antifungica comprende tipicamente las bacterias en una forma concentrada, incluyendo concentrados congelados, deshidratados o liofilizados que tienen tipicamente una concentration de celulas viables que esta en el rango de 104 a 1012 ufc (unidades formadoras de colonias) por gramo de la composicion incluyendo al menos 104 ufc por gramo de la composicion, tal como al menos 105 ufc/g, por ejemplo al menos 106 ufc/g, tal como al menos 107 ufc/g, por ejemplo al menos 108 ufc/g, tal como al menos 109 ufc/g, por ejemplo al menos 1010 ufc/g, tal como al menos 1011 ufc/g.
Asi, la composicion de la invencion preferiblemente esta presente en una forma congelada, deshidratada o liofilizada, por ejemplo como un cultivo de inoculation directa a cuba (DVS). Sin embargo, como se utiliza en este caso, la composicion tambien puede ser un liquido que se obtiene despues de la suspension de los concentrados congelados, deshidratados o liofilizados en un medio liquido tal como agua o tampon PBS.
Cuando la composicion de la invencion es una suspension, la concentracion de celulas viables esta en el rango de 104 a 1012 ufc (unidades formadoras de colonias) por ml de la composicion incluyendo al menos 104 ufc por ml de la composicion, tal como al menos 105 ufc/ml, por ejemplo al menos 106 ufc/ml, tal como al menos 107 ufc/ml, por ejemplo al menos 108 ufc/ml, tal como al menos 109 ufc/ml, por ejemplo al menos 1010 ufc/ml, tal como al menos 1011 ufc/ml.
[0037] La composicion puede contener como otros componentes aditivos crioprotectores y/o convencionales que incluyen nutrientes tales como extractos de levadura, azucares y vitaminas, por ejemplo vitamina A, C, D, K o vitaminas de la familia de la vitamina B. Los crioprotectores adecuados que se pueden anadir a las composiciones de la invencion son componentes que mejoran la tolerancia al frio de los microorganismos, tales como manitol, sorbitol, tripolifosfato de sodio, xilitol, glicerol, rafinosa, maltodextrina, eritritol, treitol, trehalosa, glucosa y fructosa. Otros aditivos pueden incluir, por ejemplo, carbohidratos, sabores, minerales, enzimas (por ejemplo cuajo, lactasa y/o fosfolipasa).
[0038] En composiciones de la invencion que comprenden la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y una cepa de Lactobacillus paracasei, la proportion entre la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y la cepa de Lactobacillus paracasei, por ejemplo la proporcion de la concentracion o numero de bacterias Lactobacillus rhamnosus y la concentracion o numero de bacterias Lactobacillus paracasei, preferiblemente es de 1:100 a 100:1, preferiblemente 1:10 a 10:1.
[0039] La composicion antifungica de la presente invencion se puede utilizar en relation con cualquier alimento, pienso y producto farmaceutico que sea susceptible a la degradation microbiana y/o contamination con levaduras y mohos. Estos incluyen, pero de forma no limitativa, frutas y verduras, incluyendo productos derivados, cereales y productos derivados de los cereales, productos lacteos, carne, carne de ave y pescado y marisco. En formas de realization particularmente preferidas, la composicion se usa en relacion con productos lacteos y/o carne y carne de ave. En una forma de realizacion preferida, las composiciones de la invencion son para un uso como aditivo en la preparation de productos lacteos, tales como yogur, tvarog, crema agria, queso crema y similar.
[0040] En una forma de realizacion preferida, las composiciones de la invencion se usan contra hongos, tales como levaduras y mohos. Esto significa que las composiciones se usan para inhibir y/o evitar el crecimiento de hongos que causan contaminacion en los procesos de la industria lactea, en particular en procesos de fermentation de la leche. Las composiciones de la presente invencion pueden utilizarse, por ejemplo, para inhibir y/o evitar el crecimiento de levaduras, tales como levaduras de los generos Klyveromyces (por ejemplo, K. marxianus, K. lactis), Pichia (por ejemplo, P. fermentans), Yarrowia (por ejemplo, Y. lipolytica), Candida (por
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
ejemplo, C. sake), y similates; o mohos, tales como mohos del genero Penicillium (por ejemplo, P. nalgiovense, P. commune, P. crustosum, P. brevicompactum, P. glabrum), Mucor spp., Cladiosporium ssp., Aspergillus (por ejemplo, A. versicolor), Debaryomyces (por ejemplo, D. hansenii), y similares.
Se prefiere especialmente el uso de las composiciones de la invencion para inhibir y/o evitar el crecimiento de las especies Klyveromyces marxianus, Yarrowia lipolytica, Penicillium nalgiovense, Cladiosporium ssp., Penicillium commune, Mucor ssp., Penicillium brevicompactum, Aspergillus versicolor, Penicillium crustosum, Kluyveromyces lactis, y/o Debaryomyces hansenii.
[0041] La composicion antifungica segun el segundo aspecto de la presente invencion tambien se puede usar como un producto farmaceutico, preferiblemente uno para tratar infecciones con hongos patogenicos, tales como levaduras patogenicas.
[0042] En un tercer aspecto, la presente invencion se refiere a un alimento, pienso o producto farmaceutico que comprende una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun el primer aspecto de la invencion o una composicion antifungica segun el segundo aspecto de la invencion.
[0043] En una forma de realization mas preferida, tal producto alimenticio se selecciona del grupo consistente en frutas y productos derivados de la fruta, vegetales y productos derivados vegetales, cereales y productos derivados de los cereales, productos lacteos, carne, carne de ave y pescado y marisco y mezclas de los mismos.
[0044] En una forma de realizacion aun mas preferida, el producto alimenticio es un producto lacteo, preferiblemente un producto lacteo fermentado mesofilico o termofilico, tal como queso fresco, un yogur, una crema agria o tvarog.
[0045] En otra forma de realizacion preferida, el producto alimenticio es carne o carne de ave.
[0046] En una forma de realizacion preferida el alimento, pienso o producto farmaceutico es un producto farmaceutico.
[0047] Preferiblemente, el producto farmaceutico es un producto util para la administration de la composicion antifungica segun un segundo aspecto de la presente invencion a un humano o a un animal para inhibir microorganismos patogenicos y paliar los sintomas relacionados con los microorganismos patogenicos.
Algunos ejemplos de tales sintomas incluyen los sintomas relacionados con la infection por levadura.
En tal forma de realizacion, el producto farmaceutico puede ser una forma de dosificacion unitaria que comprende la composicion antifungica. Preferiblemente, la forma de dosificacion unitaria es una capsula o un comprimido. Sin embargo, la forma de dosificacion unitaria tambien puede ser adecuada para la aplicacion a las mucosas o la piel y, por lo tanto, ser en forma de pasta, crema, pomada y similares.
[0048] Un cuarto aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo para la fabrication de un alimento, pienso o producto farmaceutico segun el tercer aspecto de la presente invencion que comprende anadir al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun el primer aspecto o una composicion antifungica segun el segundo aspecto de la invencion durante la production del alimento, pienso o producto farmaceutico. Preferiblemente, el metodo tambien comprende la etapa de controlar los parametros de fabricacion durante la fabricacion de manera que la concentration de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus permanezca constante o aumente.
[0049] En una forma de realizacion preferida, la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus es al menos 1x106 ufc/g o cada una al menos 1x106 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos 1x105 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico. Preferiblemente, la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus es al menos 5x106 ufc/g o cada una al menos 5x106 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos 5x105 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico, tal como al menos 1x107 ufc/g o cada una al menos 1x107 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos 1x106 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico, tal como al menos 5x107 ufc/g o cada una al menos 5x107 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos 5x106 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico.
[0050] Cuando el alimento, pienso o producto farmaceutico se fabrica por adicion de una composicion que comprende la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 o una derivada mutante de la misma y al menos una cepa de Lactobacillus paracasei, la concentracion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 o la derivada mutante de la misma y/o la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus paracasei es cada una de al menos 1x106 ufc/g o cada una al menos 1x106 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos 1x105 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico.
Preferiblemente, la concentracion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 o la derivada mutante de la misma y/o la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus paracasei es cada una de al menos 5x106 ufc/g o cada una al menos 5x106 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
5x105 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico.
En otra forma de realizacion, la concentracion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 o la derivada mutante de la misma y/o la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus paracasei es cada una al menos 1x108 ufc/g o cada una al menos 1x108 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o cada una al menos 1x107 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico.
[0051] En una forma de realizacion preferida, los parametros de fabricacion se controlan durante la fabricacion de manera que la concentracion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (o la derivada mutante de la misma) y la al menos una cepa de Lactobacillus paracasei aumenta o permanece constante.
[0052] Una composicion antifungica segun la presente invencion se usa de manera mas sencilla mezclandola con y/o aplicandola a un alimento pienso o producto farmaceutico mezclable, pero tambien deberia ser eficaz para tratar la superficie de productos alimenticios solidos, o el interior de tales productos, por ejemplo por inyeccion. En otras formas de realizacion, la composicion se puede aplicar como un liquido de marinado, empanado, aderezo, glaseado, mezcla colorante y similares, el criterio clave siendo que la composicion antifungica este disponible para la superficie sujeta a degradacion bacteriana y contaminacion con levaduras y mohos. En otras formas mas de realizacion, la composicion puede ponerse en contacto indirectamente con la superficie del alimento aplicando la composicion al envase del alimento y luego aplicando el envase a la superficie del alimento. La cantidad optima que se ha de usar dependera de la composicion del producto alimenticio particular que se va a tratar y del metodo usado para aplicar la composicion a la superficie alimenticia, pero se puede determinar por simple experimentation.
[0053] En una forma de realizacion muy preferida, el metodo comprende uno o mas pasos de fermentation y la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus o la composicion antifungica se pueden anadir al alimento, pienso o producto farmaceutico antes, durante o despues de dichos uno o mas pasos de fermentacion.
[0054] Preferiblemente, el metodo comprende la fermentacion de un sustrato, tal como un sustrato de leche, en presencia de al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la invencion durante un periodo de tiempo suficiente para la aparicion de actividad antifungica de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la invencion.
Esta actividad antifungica tiene el efecto de inhibir el desarrollo de levaduras y/o mohos en el producto fermentado con la al menos una cepa.
[0055] En una forma de realizacion aun mas preferida, el metodo comprende la fermentacion de un sustrato de leche con un cultivo iniciador que comprende al menos una cepa de los generos seleccionados de Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus y Leuconostoc, tal como al menos una cepa de Lactobacillus bulgaricus y al menos una cepa de Streptococcus thermophilus o tal como al menos una cepa de Lactococcus lactis subesp. lactis, al menos una cepa de Leuconostoc mesenteroides subesp. cremoris y al menos una cepa de Lactococcus lactis subesp. Diacetilactis.
[0056] El quinto aspecto de la presente invencion se refiere al uso de una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun el primer aspecto o una composicion antifungica segun el segundo aspecto para la preparation de un alimento, pienso o producto farmaceutico.
Preferiblemente, el producto alimenticio producido usando la cepa de Lactobacillus paracasei segun el primer aspecto o la composicion antifungica segun el segundo aspecto es un queso, tal como un cottage, feta, cheddar, parmesano, mozzarella, emmental, danbo, gouda, edam, de tipo feta, queso azul, queso salado, camembert o brie.
[0057] El ultimo aspecto de la invencion se refiere al uso de una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun el primer aspecto o una composicion antifungica segun el segundo aspecto para inhibir el crecimiento de levaduras y mohos, en particular en productos alimenticios y piensos.
[0058] Las formas de realizacion de la presente invencion se describen a continuation, por medio de ejemplos no limitativos.
Ejemplos
Ejemplo 1: prueba de exposition en el yogur con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366.
[0059] Para la evaluation visual del efecto inhibitorio de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 en los distintos mohos P. brevicompactum, P. commune, A. versicolor y P. crustosum, se preparo yogur con 1,5% de grasa:
Se termotrato leche homogeneizada (1,5% de grasa) a 95°C±1°C durante 5 min. en botellas de 1 L al bano maria y se enfrio inmediatamente. Un cultivo iniciador comercial (F-DVS YF-L901 obtenible de Chr.Hansen A/S, Dinamarca) se inoculo al 0,02%. Tambien se inoculo a la leche con HOLDBAC™ YM-B (20DCU/100l) o Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/ml) y se uso una botella como referencia y solo se inoculo
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
con cultivo iniciador.
[0060] La leche se fermento a 43°C±1°C hasta que se alcanzo un pH de 4.60±0.1. El yogur resultante se vertio en vasos (100 g) y se almaceno a 7°C±1°C.
[0061] Un dia despues de la preparacion del yogur, se inocularon diferentes mohos como contaminantes de superficie en vasos duplicados de yogur con un punto en la superficie del yogur con un objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento de los mohos se evaluo visualmente despues del almacenamiento durante 45 dias a 7°C±1°C
[0062] El resultado de la prueba con yogur se presenta en la figura 1, que muestra que P. brevicompactum (M1), P. commune (M6), A. versicolor (M7) y P. crustosum (M10) crecen bien en yogur hecho a partir de leche fermentada solo con el cultivo iniciador YF-L901 (fila superior) o con el cultivo iniciador y el cultivo HOLDBAC™ YM-B (fila intermedia). En cambio, cuando Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 estuvo presente durante la fermentacion de la leche (fila inferior) el crecimiento de todos los mohos evaluados se vio inhibido.
Ejemplo 2: determinaciones cuantitativas del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 contra Debaryomyces hansenii.
[0063] Para una evaluacion cuantitativa del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 en D. hansenii, se preparo yogur:
Se termotrato leche homogeneizada (1,5% de grasa) a 95°C±1°c durante 5 min. en botellas de 1 L al bano maria. La leche se enfrio inmediatamente. Se inoculo a cada botella un cultivo iniciador comercial (F-DVS YF- L901 obtenible de Chr.Hansen A/S, Dinamarca) al 0,02%. La leche tambien se inoculo con HOLDBAC™ YM- B (20 DCU/100L) o HOLDBAC™ YM-C (10 DCU/100L) o Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/g) y se uso una botella como referencia y solo se inoculo con cultivo iniciador.
[0064] La leche se fermento a 43°C±1°C hasta que se alcanzo un pH de 4.60±0.05. El yogur resultante se vertio en vasos (aprox. 75 ml) y se almaceno a 7°C±1°C.
[0065] El dia despues de la preparacion del yogur, los vasos se inocularon por duplicado con 0,75 ml/vaso de levadura en un objetivo de 20 ufc/g. La levadura se disperso de forma homogenea en el yogur.
Los vasos se almacenaron bajo tapa a 7°C±1°C y se analizaron a intervalos adecuados para detectar el nivel de contaminacion de D. hansenii mediante la preparacion en placa de 1 ml de yogur y otras diluciones de factor 1 apropiadas hechas en peptona salina sobre agar extracto de levadura-glucosa-cloranfenicol (YGC) seguida de incubacion aerobica durante 5 dias a 25°C.
[0066] Como se ilustra en la figura 2, el crecimiento de D. Hansenii fue inhibido en presencia de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 cuando se inoculo junto con el cultivo iniciador YF-L901 antes de la fermentacion. La cepa provocada causo una inhibicion significativamente mas alta que los cultivos comerciales, HOLDBAC™ YM-B y HOLDBAC™ YM-C.
[0067] Ejemplo 3: determinaciones semicuantitativas del efecto inhibitorio de Lb. paracasei CHCC14676 y Lb. rhamnosus CHCC5366 solas y en combinacion contra distintos mohos contaminantes.
[0068] Para las evaluaciones semicuantitativas de Lb. paracasei CHCC14676 y Lb. rhamnosus CHCC5366 solas y en combinacion, se utilizo un ensayo en agar, parecido al proceso de fabricacion y producto de yogur:
Se termotrato leche homogeneizada (1,5% p/v de grasa) a 95°C durante cinco minutos y se enfrio inmediatamente. Un cultivo iniciador comercial (F-DVS YC-350 obtenible de Chr. Hansen A/S, Dinamarca) se inoculo al 0,02%, y la leche se distribuyo a botellas de 220 ml. Las botellas ademas se inocularon con Lb. paracasei CHCC14676, Lb. rhamnosus CHCC5366 y una combinacion de las dos cepas, respectivamente, en concentraciones totalds de 1x107 ufc/ml. Una botella sin mas inoculacion que el cultivo iniciador se uso como referencia. Ademas, 5% de un indicador de pH de purpura de bromocresol y verde de bromcresol se anadio a todas las botellas para obtener una indicacion de la velocidad de acidificacion, y para obtener un color azul/verde de los medios que hana que el crecimiento posterior de levaduras y mohos objetivo fuera mas facilmente detectable. Todas las botellas se incubaron al bano maria a 43±1°C y se fermentaron a estas condiciones hasta que se alcanzo un pH de 4.60±0.1. Despues de la fermentacion, las botellas se enfriaron inmediatamente en hielo y se agitaron energicamente para romper la cuajada. Despues, la leche fermentada se calento a una temperatura de 40°C y se anadio a 40 ml de una solucion de agar esteril al 5% que habia sido derretida y enfriada hasta 60°C. Esta solucion luego se vertio en placas de Petri esteriles y las placas se secaron en una mesa de flujo laminar durante 30 min.
[0069] Se depositaron en las placas pequenas cantidades de suspensiones de esporas completamente cultivadas en diluciones apropiadas de los mohos seleccionados Penicillium nalgiovense (10x), Penicillium commune (100x), Aspergillus versicolor (100x) y Penicillium crustosum (100x). Las placas se incubaron a 7°C y se examino el crecimiento de moho a intervalos adecuados y regulares.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
[0070] Los resultados del ensayo en agar se presentan en la figura 3, que muestra que todos los mohos evaluados crecieron muy bien en las placas de agar a partir de leche fermentada solo con el cultivo iniciador (referencia). Sin embargo, cuando Lb. paracasei CHCC14676 o Lb. rhamnosus CHCC5366 estaban presentes durante la fermentacion de la leche, las placas resultantes redujeron considerablemente el crecimiento de todos los mohos. Ademas, cuando Lb. paracasei CHCC14676 y Lb. rhamnosus CHCC5366 estaban presentes en combinacion durante la fermentacion de la leche, se observo una inhibicion incluso mas fuerte para Penicillium commune, Aspergillus versicolor y Penicillium crustosum depositadas en pequenas cantidades en las placas.
Ejemplo 4: prueba de exposicion con Lb. rhamnosus CHCC5366 y sorbato de potasio.
[0071] Se uso leche pasteurizada con un 0,17% grasa para preparar tres lotes diferentes de yogur utilizando el cultivo iniciador comercial al que se hace referencia en el ejemplo 1. El cultivo iniciador se inoculo al 0,013%. Antes de la fermentacion, se anadio sorbato de potasio (0,023%) al primer lote, se anadio Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/g) al segundo lote, mientras que el tercer lote se uso como una referencia que contenia solo el cultivo iniciador. La fermentacion se efectuo a 43°C hasta que se alcanzo un pH de 4.55. Despues de alcanzar el pH de 4.55, el yogur se almaceno a 7°C.
[0072] Los tres tipos diferentes de yogur se distribuyeron en vasos pequenos con aprox. 100 g en cada uno y su superficie se inoculo con cada uno de los mohos siguientes previamente aislados de productos lacteos fermentados pasados para alcanzar una inoculacion objetivo de aprox. 1000 esporas /vaso:
Penicillium solitum,
Penicillium palitans,
Penicillium discolor,
Penicillium spathulatum,
Penicillium commune,
Penicillium crustosum,
Penicillium paneum,
Penicillium roqueforti,
[0073] Los yogures se incubaron a 7°C durante 60 dias, y el crecimiento de los distintos mohos se superviso visualmente mediante la toma de fotografias al final del periodo de 60 dias.
[0074] Los resultados presentados en la figura 4 demuestran que la presencia de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 redujo espectacularmente el crecimiento y la formation del color de verde/azul tipico de los distintos mohos en el yogur durante 60 dias de almacenamiento a 7°C. El efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 en el alcance del crecimiento y la formacion de color de los mohos resulto ser considerablemente mas fuerte que el efecto ejercido por la adicion de 0,023% de sorbato de potasio.
Ejemplo 5: prueba de exposicion en yogur griego con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion.
[0075] Para la evaluation visual del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion sobre Mucor ssp, se preparo sustacialmente yogur griego de la siguiente manera:
Se inoculo en leche pasteurizada un 1,5% de grasa un cultivo iniciador comercial (F-DVS YF-L901 obtenible de Chr. Hansen A/S, Dinamarca) al 0,02%. Un lote inoculado solamente con cultivo iniciador se uso como referencia. Otro lote tambien se inoculo con una combinacion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5x106 ufc/g) y la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5x106 ufc/g).
[0076] La leche se fermento a 43°C±1°C a un pH final de 4.55 (6-7 horas). Posteriormente, el yogur se enfrio a 25°C±1°C con una contrapresion de 2 bares y se almaceno a 6°C±1°C.
[0077] Un dia despues de la preparation del yogur, se inoculo Mucor ssp. como como contaminante de superficie en vasos duplicados de yogur aplicando un punto en la superficie del yogur con una concentration de inoculacion objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento del moho se evaluo visualmente despues del almacenamiento durante 15 dias a 22°C±1°C
[0078] Los resultados de la prueba con yogur griego se presentan en la figura 5, que muestra que Mucor ssp. crece bien en yogur hecho a partir de leche fermentada solamente con el cultivo iniciador (vaso de la izquierda). En cambio, cuando Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 estuvieron presentes durante la fermentacion de la leche (vaso de la derecha) el crecimiento de Mucor ssp. fue inhibido.
Ejemplo 6: segunda prueba de exposicion en yogur griego con una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
[0079] Para la evaluacion visual del efecto inhibitorio de la combination de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en el moho de pan negro Rhizopus stolonifer, el yogur griego se preparo sustancialmente de la siguiente manera:
Se inoculo en leche pasteurizada con un 1,5% de grasa un cultivo iniciador comercial (F-DVS YF-L901 obtenible de Chr.Hansen A/S, Dinamarca) al 0,02 %. Tambien se inoculo en la leche HOLDBaC™ YM-B (10 DCU/100 I), con la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/g), o con una combinacion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5x106 ufc/g) y la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5x106 ufc/g). Un lote se uso como referencia y solo se inoculo con cultivo iniciador.
[0080] La leche se fermento a 43°C±1°C hasta llegar a un pH final de 4.55 (6-7 horas).
Posteriormente, el yogur se enfrio a 25°C±1°C con una contrapresion de 2 bares y se almaceno a 6°C±1°C.
[0081] Un dia despues de la preparation del yogur, se inoculo Rhizopus stolonifer como contaminante de superficie en vasos duplicados de yogur aplicando un punto en la superficie del yogur con una contamination objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento del moho se evaluo visualmente despues del almacenamiento durante 42 dias a 7°C±1°C.
[0082] El resultado de la prueba con el yogur griego se presenta en la figura 6, que muestra que Rhizopus stolonifer crece bien en yogur hecho a partir de leche fermentada solamente con el cultivo iniciador ("R", es decir, referencia) o con el cultivo iniciador y el cultivo HOLDBAC™ YM-B (YM-B). Sin embargo, cuando el Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366) estuvo presente, el crecimiento de Rhizopus stolonifer fue inhibido significativamente. Cuando Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 estuvieron ambos presentes durante la fermentation de la leche (5366+14676) el crecimiento de Rhizopus stolonifer fue inhibido casi completamente.
Ejemplo 7: prueba de exposition en queso blanco en salmuera con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion.
[0083] Para la evaluacion cuantitativa del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion contra Saccharomyces cerevisiae, se preparo queso blanco en salmuera:
Se inoculo en leche pasteurizada y normalizada un cultivo iniciador comercial (FD-DVS SafeIT-1 obtenible de Chr.Hansen A/S, Dinamarca) a 40 U por 1000 l de leche Tambien se inoculo en la leche HOLDBAC™ YM-B (10 DCU/100 I) o con una combinacion de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5x106 ufc/g) y la cepa de Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5x106 ufc/g). Un lote se uso como referencia y solamente se inoculo con cultivo iniciador. La leche se trato con cuajo a 36°C±1°C usando Chy-Max plus (obtenido de Chr. Hansen A/S, Dinamarca) con 220 ml por 1000 l durante 90 min. antes del corte. A pH 6.0 la cuajada se bombeo hasta los mohos y se dejo drenar hasta alcanzar un pH final de 4.8-4.7 (20-24 horas). Los quesos se colocaron en latas con salmuera fria (8%) y se almacenaron a 5°C±1°C.
[0084] Un dia despues de la preparacion del queso blanco en salmuera, se inoculo levadura a las latas por duplicado con un objetivo de 20 ufc/ml. La levadura se disperso uniformemente en la solution salina.
Los vasos se almacenaron bajo tapa a 7°C±1°C durante hasta 40 dias y se analizaron 10 g a intervalos adecuados para detectar el nivel de contaminacion de Saccharomyces cerevisiae mediante la preparacion en placa apropiada de diluciones de factor 1 hechas en peptona salina sobre agar extracto de levadura-glucosa- cloranfenicol (YGC) seguida de incubation aerobica durante 5 dias a 25°C.
[0085] Como se ilustra en la figura 7, el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae fue inhibido en presencia de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion cuando se inocularon junto con el cultivo iniciador SafeIT-1. Las cepas provocaron una inhibition significativamente mas alta que el cultivo disponible comercialmente, HOLDBAC™ YM-B.
Ejemplo 8: segunda prueba de exposicion en queso blanco en salmuera con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion.
[0086] Para la evaluacion cuantitativa del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion contra Kluyveromyces marxianus, se preparo queso blanco en salmuera como se describe en el ejemplo 1, con la exception que se inoculo Kluyveromyces marxianus en las latas como levadura contaminante.
[0087] Como se ilustra en la figura 8, el crecimiento de Kluyveromyces marxianus fue inhibido en presencia de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion cuando se inocularon junto con el cultivo iniciador SafeIT-1. Las cepas provocaron una inhibicion significativamente mas alta que el cultivo disponible comercialmente, HOLDBAC™ YM-B.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Ejemplo 9: tercera prueba de exposicion en queso blanco en salmuera con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion.
[0088] Para la evaluacion visual del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 en combinacion contra P. commune, se preparo queso blanco en salmuera como se describe en el ejemplo 1.
[0089] 7 dias despues de la preparacion del queso blanco en salmuera, el queso se retiro de la solucion salina y se inoculo P. commune como contaminante de superficie en quesos duplicados con tres puntos en la superficie del queso con un objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento de dos aislados de P. commune diferentes se evaluo visualmente despues de almacenamiento durante 12 dias a 7°C±1°C y, posteriormente, 16 dias a 12°C±1°C
[0090] Los resultados de la prueba del queso blanco en salmuera se presentan en la figura 9, que muestra que los dos aislados de P. commune crecen bien en el queso blanco en salmuera hecho a partor de leche inoculada solo con el cultivo iniciador (izquierda).
En cambio, cuando Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 estuvieron presentes durante la produccion de queso (derecha), el crecimiento de P. commune fue fuertemente inhibido.
Ejemplo 10: prueba de exposicion en queso blanco en salmuera con Lactobacillus paracasei CHCC5366
[0091] Para la evaluacion visual del efecto inhibitorio de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 contra P. crustosum, se preparo queso blanco en salmuera:
Se inoculo leche pasteurizada y normalizada con un cultivo iniciador comercial (FD-DVS SafeIT-1 obtenible de Chr.Hansen A/S, Dinamarca) a 40 U por 1000 l de leche. La leche se inoculado ademas con HOLDBAC™ YM-B (10 DCU/100 I) o la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/g). Un lote se uso como referencia y solo se le inoculo el cultivo iniciador. La leche se trato con cuajo a 36°C±1°C utilizando Chy-Max plus (obtenido de Chr. Hansen A/S, Dinamarca) con 220 ml por 1000 l durante 90 min. antes del corte. A pH 6.0, la cuajada se bombeo hasta los mohos y se dejo drenar hasta alcanzar un pH final de 4.8-4.7 (20-24 horas). Los quesos se colocaron en latas con salmuera fria (8%) y se almacenaron a 5°C±1°C.
[0092] 7 dias despues de la preparacion del queso blanco en salmuera, el queso se retiro de la solucion salina y se inoculo P. Crustosum como contaminante de superficie en quesos duplicados con tres puntos en la superficie del queso con un objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento del aislado de P. crustosum se evaluo visualmente despues de almacenamiento durante 11 dias a 12°C±1°C, y, posteriormente, 16 dias a 12°C±1°C
[0093] Los resultados de la prueba de queso blanco en salmuera se presentan en la figura 10, que muestra que el aislado de P. Crustosum crece bien en el queso blanco en salmuera hecho a partir de leche inoculada solo con cultivo iniciador (izquierda). En cambio, cuando Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 estuvo presente durante la produccion (derecha) de queso, el crecimiento de P. Crustosum fue inhibido.
Ejemplo 11: prueba de exposicion en yogur con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y CHCC14676 contra Penicillium paneum
[0094] Para la evaluacion visual del efecto inhibitorio de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 sola o en combinacion con Lactobacillus paracasei CHCC14676 en el moho P. paneum, se preparo yogur con 1,5% de grasa:
Se termotrato leche homogeneizada (1,5% de grasa) a 95°C±1°C durante 5 min. en botellas de 1 L al bano maria y se enfrio inmediatamente. Se inoculo un cultivo iniciador comercial (F-DVS YF-L901 obtenible de Chr. Hansen A/S, Dinamarca) al 0,02%. Tambien se inoculo a la leche hOlDBAC™ YM-B (20DCU/100L), Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/ml) solo, o una combinacion de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5x106 ufc/ml) y Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5x106 ufc/ml). Se uso una botella como referencia y solo se le inoculo cultivo iniciador.
[0095] La leche se fermento a 43°C±1°C hasta que se alcanzo un pH de 4.60±0.1. El yogur resultante se vertio en vasos (100 g) y se almaceno a 7°C±1°C.
[0096] Un dia despues de la preparacion de yogur, se inocularon distintos mohos como contaminantes de superficie en vasos duplicados de yogur con un punto en la superficie del yogur con un objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento de los mohos se evaluo visualmente despues de almacenamiento durante 28 dias a 7°C±1°C
[0097] El resultado de la prueba con yogur se presenta en la figura 11, que muestra que P. Paneum crece bien en yogur hecho a partir de leche fermentada solo con el cultivo iniciador YF-L901 o con el cultivo iniciador y el cultivo HOLDBAC™ YM-B. En cambio, cuando el Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 estuvo presente durante la fermentacion de leche, el crecimiento de P. Paneum se vio fuertemente reducido, y la combinacion de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 causo una inhibition del crecimiento incluso mas fuerte que P. Paneum.
Ejemplo 12: prueba de exposition en yogur con Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y CHCC14676 a temperaturas de almacenamiento diferentes
[0098] Para la evaluation visual del efecto inhibitorio de la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 sola o en combination con Lactobacillus paracasei CHCC14676 en el moho P. crustosum a temperaturas de almacenamiento diferentes, se preparo yogur con 1,5% de grasa:
Se termotrato leche homogeneizada (1,5% de grasa) a 95°C±1°C durante 5 min. en botellas de 1 L al bano maria y se enfrio inmediatamente. Un cultivo iniciador comercial (F-DVS YF-L901 obtenible de Chr. Hansen A/S, Dinamarca) se inoculo al 0,02%. A la leche tambien se inoculo HOLDBAC™ YM-B (20 DCU/100L), Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1x107 ufc/ml) solo, o una combination de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5x106 ufc/ml) y Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5x106 ufc/ml). Se uso una botella como referencia y solo se le inoculo cultivo iniciador.
[0099] La leche se fermento a 43°C±1°C hasta que se alcanzo un pH de 4.60±0.1. El yogur resultante se vertio en vasos (100 g) y se almaceno a 7°C±1°C.
[0100] Un dia despues de la preparation del yogur, se inoculo Penicillium crustosum como contaminante de superficie en vasos duplicados de yogur con un punto en la superficie del yogur con un objetivo de 100 esporas/punto. El crecimiento de los mohos se evaluo visualmente despues de almacenamiento durante 36 dias a 7°C±1°C,12°C±1°C o 22°C±1°C
[0101] El resultado de la prueba con yogur se presenta en la figura 12, que muestra que P. Crustosum crece bien en yogur hecho a partir de leche fermentada solo con el cultivo iniciador YF-L901 o con el cultivo iniciador y el cultivo HOLDBAC™ YM-B a cualquier temperatura de almacenamiento.
En cambio, cuando Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 solo o en combinacion con Lactobacillus paracasei CHCC14676 estuvo presente durante la fermentation de la leche, el crecimiento de P. Crustosum fue completamente inhibido durante el almacenamiento tanto a 7°C±1°C como a 12°C±1°C durante 36 dias.
Tras el almacenamiento a 22°C±1°C, el crecimiento de P. crustosum fue fuertemente reducido en presencia de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 e incluso mas fuerte en presencia de la combination de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 y Lactobacillus paracasei CHCC14676.
DEPOSITOS Y SOLUCION EXPERTA
[0102] El solicitante pide que una muestra de los microorganismos depositados mencionados a continuation solo pueda estar disponible para un experto, hasta la fecha en la que se conceda la patente.
[0103] La cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 se deposito a fecha de en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig y se le asigno el n° de deposito DSM23035.
[0104] La cepa de Lactobacillus paracasei CHCC12777 se deposito a fecha de 15-03- 2011 en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig y se le asigno el n° de deposito DSM24651.
[0105] La cepa de Lactobacillus paracasei CHCC14676 se deposito a fecha de en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig y se le asigno el n° de deposito DSM25612.
[0106] El deposito se hizo segun el Tratado de Budapest sobre el Reconocimiento Internacional del Deposito de Microorganismos a los fines del Procedimiento en materia de Patentes.
REFERENCIAS
[0107]
EP0221499 EP0576780 EP1442113 US5,378,458 EP11161609.0
Kosikowski, F.V. Y Mistry, V.V., "Cheese and Fermented Milk Foods", 1997, 3a Ed. F.V. Kosikowski, L.L.C. Westport, CT
Claims (15)
- 5101520253035404550556065REIVINDICACIONES1. Cepa de Lactobacillus rhamnosus seleccionada del grupo consistente en la cepa de Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 que fue depositada en la Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares (DSMZ) con el numero de deposito DSM23035 y cepas mutantes derivadas de la misma, donde las cepas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que la cepa con el numero de deposito n° DSM23035.
- 2. Composicion antifungica que comprende al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la reivindicacion 1.
- 3. Composition antifungica segun la reivindicacion 2 que comprende ademas al menos una cepa de Lactobacillus paracasei.
- 4. Composicion antifungica segun la reivindicacion 3, donde la al menos una cepa de Lactobacillus paracasei se selecciona del grupo consistente en Lactobacillus paracasei CHCC12777 con numero de deposito DSM24651 y Lactobacillus paracasei CHCC14676 con numero de deposito DSM25612 y cepas mutantes derivadas de las mismas, donde las cepas mutantes tienen sustancialmente las mismas propiedades antifungicas o mejoradas que una de las cepas depositadas con el numero de deposito DSM24651 o DSM25612.
- 5. Alimento, pienso o producto farmaceutico que comprende una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la reivindicacion 1 o una composicion antifungica segun cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4.
- 6. Producto alimenticio segun la reivindicacion 5 que incluye una cantidad de una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la reivindicacion 1 eficaz para impartir propiedades antifungicas al producto alimenticio.
- 7. Producto alimenticio segun la reivindicacion 5 o 6, donde el producto alimenticio se selecciona del grupo consistente en frutas y productos derivados de fruta, vegetales y productos derivados vegetales, cereales y productos derivados de los cereales, productos lacteos, carne, carne de ave y pescado y marisco y mezclas de los mismos.
- 8. Producto alimenticio segun la reivindicacion 7, donde el producto alimenticio es un producto lacteo y el producto lacteo es un producto lacteo fermentado mesofilico o termofilico, tal como yogur.
- 9. Metodo para la production de un alimento, pienso o producto farmaceutico que comprende anadir al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la reivindicacion 1 o una composicion antifungica segun cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4 al alimento, pienso o producto farmaceutico durante la produccion y controlar los parametros de produccion durante la produccion de manera que la concentration de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus permanezca constante o aumente.
- 10. Metodo segun la reivindicacion 9, donde la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus es al menos 1x106 ufc/g o cada una al menos 1x106 ufc/ml de alimento, pienso o producto farmaceutico, o al menos 1x105 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico.
- 11. Metodo segun la reivindicacion 9, que comprende(a) anadir la composicion antifungica segun cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4 durante la produccion del alimento, pienso o producto farmaceutico de manera que la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus y/o al menos una cepa de Lactobacillus paracasei sea cada una de al menos 1x106 ufc/g o al menos 1x106 ufc/ml del alimento, pienso o producto farmaceutico, o al menos 1x105 ufc/cm2 de la superficie del alimento, pienso o producto farmaceutico, y(b) controlar los parametros de produccion durante la produccion de manera que la concentracion de la al menos una cepa de Lactobacillus rhamnosus y/o la al menos una cepa de Lactobacillus paracasei aumente o permanezca constante.
- 12. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, donde el metodo comprende uno o mas pasos de fermentacion.
- 13. Metodo segun la reivindicacion 12, donde el metodo comprende fermentar un sustrato de leche con un cultivo iniciador que comprende al menos una cepa de los generos seleccionados de Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus y Leuconostoc.
- 14. Uso de una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la reivindicacion 1 o una composicion antifungica segun cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4 para la preparation de un producto alimenticio, pienso o farmaco.
- 15. Uso no medico de una cepa de Lactobacillus rhamnosus segun la reivindicacion 1 o una composition antifungica segun cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4 para la inhibition del crecimiento de levaduras y mohos.
Applications Claiming Priority (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP12163508 | 2012-04-09 | ||
| WOPCT/EP2012/056384 | 2012-04-09 | ||
| PCT/EP2012/056384 WO2012136830A1 (en) | 2011-04-08 | 2012-04-09 | Synergistic antimicrobial effect |
| EP12163508 | 2012-04-09 | ||
| EP12168977 | 2012-05-22 | ||
| EP12168977 | 2012-05-22 | ||
| EP13154591 | 2013-02-08 | ||
| EP13154591 | 2013-02-08 | ||
| PCT/EP2013/057410 WO2013153074A1 (en) | 2012-04-09 | 2013-04-09 | Bioprotection using lactobacillus rhamnosus strains |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2630711T3 true ES2630711T3 (es) | 2017-08-23 |
Family
ID=49327139
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES13714671.8T Active ES2630711T3 (es) | 2012-04-09 | 2013-04-09 | Bioprotección utilizando cepas de Lactobacillus rhamnosus |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9485992B2 (es) |
| EP (1) | EP2836587B1 (es) |
| JP (1) | JP6430931B2 (es) |
| KR (1) | KR101947110B1 (es) |
| CN (1) | CN104284975B (es) |
| AR (1) | AR090631A1 (es) |
| BR (1) | BR112014024918B1 (es) |
| DK (1) | DK2836587T3 (es) |
| EA (2) | EA036321B1 (es) |
| ES (1) | ES2630711T3 (es) |
| HK (1) | HK1206391A1 (es) |
| HU (1) | HUE034259T2 (es) |
| MX (1) | MX351628B (es) |
| PL (1) | PL2836587T3 (es) |
| PT (1) | PT2836587T (es) |
| UA (1) | UA115330C2 (es) |
| WO (1) | WO2013153074A1 (es) |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9635870B2 (en) | 2011-02-28 | 2017-05-02 | Franklin Foods Holdings Inc. | Direct-set cheese |
| US9462817B2 (en) | 2011-02-28 | 2016-10-11 | Franklin Foods Holdings Inc. | Processes for making cheese products utilizing denatured acid whey proteins |
| AR085943A1 (es) | 2011-04-08 | 2013-11-06 | Chr Hansen As | Composicion antimicrobiana |
| KR101947110B1 (ko) | 2012-04-09 | 2019-02-13 | 시에이치알. 한센 에이/에스 | 락토바실러스 람노서스 균주를 이용한 바이오프로텍션 |
| MX351627B (es) | 2012-04-09 | 2017-10-23 | Chr Hansen As | Bioproteccion usando cepas de lactobacillus paracasei. |
| GB201409468D0 (en) * | 2014-05-28 | 2014-07-09 | Dupont Nutrition Biosci Aps | Bacterium |
| KR20160107635A (ko) | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 한국교통대학교산학협력단 | 제한된 항균작용을 갖는 박테리오신 생산 락토바실러스 람노서스 cjnu 0519 및 이의 용도 |
| WO2017026635A1 (ko) * | 2015-08-12 | 2017-02-16 | 씨제이제일제당(주) | 신규한 락토바실러스 속 미생물 및 이를 포함하는 동물 사료용 조성물 |
| MX2018002283A (es) * | 2015-08-31 | 2018-03-23 | Chr Hansen As | Bacterias lactobacillus fermentum que inhiben la acidificacion posterior. |
| EA201890407A1 (ru) * | 2015-08-31 | 2018-09-28 | Кхр. Хансен А/С | Бактерии lactobacillus fermentum, уменьшающие концентрацию ацетальдегида |
| AU2016315133A1 (en) * | 2015-08-31 | 2018-03-08 | Chr. Hansen A/S | Lactobacillus fermentum bacteria with antifungal activity |
| KR20190006999A (ko) * | 2016-05-11 | 2019-01-21 | 시에이치알. 한센 에이/에스 | 주위 온도에서 저장하기 위한 열처리 식품용 유산균 |
| EP3279312B1 (en) | 2016-08-02 | 2019-07-31 | DSM IP Assets B.V. | Bioprotection of dairy products |
| DK3700344T3 (da) * | 2017-10-27 | 2021-10-11 | Chr Hansen As | Lactobacillus rhamnosus med forøget diacetylproduktion |
| CN108450482B (zh) | 2018-03-26 | 2020-06-12 | 景岳生物科技股份有限公司 | 提高抗逆境能力的植物生长调节剂及其用途 |
| EA202092322A1 (ru) * | 2018-04-19 | 2021-02-02 | Кхр. Хансен А/С | Ингибирование роста грибов за счет истощения уровня марганца |
| WO2020214685A1 (en) * | 2019-04-16 | 2020-10-22 | Locus Ip Company, Llc | Microbe-based emulsifying food additives |
| IT201900006815A1 (it) * | 2019-05-14 | 2020-11-14 | Universita’ Degli Studi Di Parma | Produzione di antimicrobici da scarti vegetali |
| JP2022553396A (ja) * | 2019-10-23 | 2022-12-22 | セーホーエル．ハンセン アクティーゼルスカブ | 真菌による腐敗を制御するための細菌組成物およびその使用 |
| FR3105258B1 (fr) | 2019-12-23 | 2022-10-14 | Flores de Terroirs | Levains bioprotecteurs obtenus à partir de laits natifs : utilisation de ces levains pour préparer des levains terroirs et pour purifier le lait cru |
| CN111567261B (zh) * | 2020-05-14 | 2022-03-04 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 一种植物增色剂及应用、使用方法 |
| WO2023073187A1 (en) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | Dsm Ip Assets B.V. | Bioprotection of dairy products |
| WO2023073183A1 (en) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | Dsm Ip Assets B.V. | Bioprotection of dairy products |
| CN114027479A (zh) * | 2021-11-18 | 2022-02-11 | 武汉自然萃创新科技有限公司 | 一种微胶囊化益生菌蜂蜜的制备方法 |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5965414A (en) * | 1985-11-04 | 1999-10-12 | Microlife Technics, Inc. | Process for producing yeast and mold inhibiting products with lactobacillus |
| US4956177A (en) | 1985-11-04 | 1990-09-11 | Microlife Technics, Inc. | Method for inhibiting fungi |
| CA1320165C (en) | 1987-08-06 | 1993-07-13 | Microlife Technics, Inc. | Process for producing novel yeast and mold inhibiting products |
| US5107116A (en) | 1990-12-21 | 1992-04-21 | Eastman Kodak Company | Split V-roof mirror collector for photostimulable phosphor imaging system |
| JP3001338B2 (ja) * | 1992-06-10 | 2000-01-24 | ヴァリオ・マイイェリーン・ケスクソスースリーケ | 新規の微生物株、その菌株を含む細菌製剤、および酵母およびカビの制御のための上記菌株および製剤の使用 |
| FI92498C (fi) | 1992-06-10 | 1994-11-25 | Valio Meijerien | Uusi mikro-organismikanta, sitä sisältävät bakteerivalmisteet ja näiden käyttö hiivojen ja homeiden torjuntaan |
| FR2758051B1 (fr) | 1997-01-06 | 1999-12-17 | Cobiotex | Procedes d'eradication systematique du portage d'agents pathogenes par des animaux et compositions mises en oeuvre dans ces procedes |
| EP1308506A1 (en) * | 2001-11-06 | 2003-05-07 | Eidgenössische Technische Hochschule Zürich | Mixtures of Propionibacterium jensenii and Lactobacillus sp. with antimicrobial activities for use as a natural preservation system |
| DE60305159T2 (de) | 2002-02-21 | 2007-03-15 | Société des Produits Nestlé S.A. | Oral verabreichbare zusammensetzung zum schutz der haut vor licht |
| CA2476730C (en) | 2002-02-21 | 2012-07-10 | Lionel Breton | A photoprotective orally administrable composition for skin |
| FI113057B (fi) | 2002-11-04 | 2004-02-27 | Valio Oy | Menetelmä hiivojen kasvun estämiseksi |
| US20100166721A1 (en) | 2006-06-09 | 2010-07-01 | Fabiola Masri | Probotic compositions and uses thereof |
| US20080107699A1 (en) * | 2006-10-25 | 2008-05-08 | Mark Spigelman | Method of using topical probiotics for the inhibition of surface contamination by a pathogenic microorganism and composition therefor |
| DK1992351T3 (en) * | 2007-05-18 | 2016-06-06 | Nestec Sa | Lactobacillus johnsonii for the prevention of post-surgical infection |
| FR2924307B1 (fr) * | 2007-12-04 | 2010-08-27 | Gervais Danone Sa | Utilisation de l. casei ssp. paracasei comme antifongique |
| CN101613667B (zh) * | 2009-07-23 | 2011-02-02 | 中国科学院微生物研究所 | 一种制备l-乳酸的方法及其专用菌剂 |
| AR085943A1 (es) | 2011-04-08 | 2013-11-06 | Chr Hansen As | Composicion antimicrobiana |
| KR101947110B1 (ko) | 2012-04-09 | 2019-02-13 | 시에이치알. 한센 에이/에스 | 락토바실러스 람노서스 균주를 이용한 바이오프로텍션 |
| MX351627B (es) * | 2012-04-09 | 2017-10-23 | Chr Hansen As | Bioproteccion usando cepas de lactobacillus paracasei. |
-
2013
- 2013-04-09 KR KR1020147031570A patent/KR101947110B1/ko active IP Right Grant
- 2013-04-09 ES ES13714671.8T patent/ES2630711T3/es active Active
- 2013-04-09 MX MX2014012050A patent/MX351628B/es active IP Right Grant
- 2013-04-09 DK DK13714671.8T patent/DK2836587T3/en active
- 2013-04-09 EP EP13714671.8A patent/EP2836587B1/en active Active
- 2013-04-09 EA EA201891030A patent/EA036321B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-04-09 HU HUE13714671A patent/HUE034259T2/en unknown
- 2013-04-09 US US14/390,231 patent/US9485992B2/en active Active
- 2013-04-09 EA EA201491847A patent/EA033656B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-04-09 BR BR112014024918-0A patent/BR112014024918B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-04-09 CN CN201380018783.XA patent/CN104284975B/zh active Active
- 2013-04-09 AR ARP130101143A patent/AR090631A1/es active IP Right Grant
- 2013-04-09 PT PT137146718T patent/PT2836587T/pt unknown
- 2013-04-09 PL PL13714671T patent/PL2836587T3/pl unknown
- 2013-04-09 JP JP2015504932A patent/JP6430931B2/ja active Active
- 2013-04-09 UA UAA201412062A patent/UA115330C2/uk unknown
- 2013-04-09 WO PCT/EP2013/057410 patent/WO2013153074A1/en active Application Filing
-
2015
- 2015-07-22 HK HK15107001.5A patent/HK1206391A1/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20140148479A (ko) | 2014-12-31 |
| WO2013153074A1 (en) | 2013-10-17 |
| EP2836587A1 (en) | 2015-02-18 |
| MX351628B (es) | 2017-10-23 |
| CN104284975B (zh) | 2016-08-24 |
| DK2836587T3 (en) | 2017-05-08 |
| US20150079057A1 (en) | 2015-03-19 |
| EA201891030A3 (ru) | 2019-03-29 |
| HK1206391A1 (en) | 2016-01-08 |
| EA201891030A2 (ru) | 2018-09-28 |
| JP2015515273A (ja) | 2015-05-28 |
| KR101947110B1 (ko) | 2019-02-13 |
| AR090631A1 (es) | 2014-11-26 |
| HUE034259T2 (en) | 2018-02-28 |
| BR112014024918A2 (es) | 2017-06-20 |
| EA201491847A1 (ru) | 2015-05-29 |
| JP6430931B2 (ja) | 2018-11-28 |
| UA115330C2 (uk) | 2017-10-25 |
| CN104284975A (zh) | 2015-01-14 |
| EP2836587B1 (en) | 2017-03-01 |
| PL2836587T3 (pl) | 2017-08-31 |
| EA033656B1 (ru) | 2019-11-13 |
| EA036321B1 (ru) | 2020-10-26 |
| US9485992B2 (en) | 2016-11-08 |
| MX2014012050A (es) | 2015-01-16 |
| PT2836587T (pt) | 2017-05-26 |
| BR112014024918B1 (pt) | 2022-04-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2630711T3 (es) | Bioprotección utilizando cepas de Lactobacillus rhamnosus | |
| US10993974B2 (en) | Synergistic antimicrobial effect | |
| ES2623768T3 (es) | Bioprotección utilizando cepas de Lactobacillus paracasei | |
| US20180249727A1 (en) | Lactobacillus fermentum bacteria with antifungal activity | |
| AU2016315139A1 (en) | Lactobacillus fermentum bacteria inhibiting post-acidification |