JP3001338B2 - 新規の微生物株、その菌株を含む細菌製剤、および酵母およびカビの制御のための上記菌株および製剤の使用 - Google Patents
新規の微生物株、その菌株を含む細菌製剤、および酵母およびカビの制御のための上記菌株および製剤の使用Info
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- JP3001338B2 JP3001338B2 JP5017591A JP1759193A JP3001338B2 JP 3001338 B2 JP3001338 B2 JP 3001338B2 JP 5017591 A JP5017591 A JP 5017591A JP 1759193 A JP1759193 A JP 1759193A JP 3001338 B2 JP3001338 B2 JP 3001338B2
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、酵母およびカビに対す
る優れた阻害効果を持つ新規微生物株、上記菌株のみま
たは他の細菌および／または添加物と組み合わせた細菌
製剤、および酵母およびカビの阻害のための上記菌株お
よび上記細菌製剤の使用に関するものである。
る優れた阻害効果を持つ新規微生物株、上記菌株のみま
たは他の細菌および／または添加物と組み合わせた細菌
製剤、および酵母およびカビの阻害のための上記菌株お
よび上記細菌製剤の使用に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】食料品およびサイレージの貯蔵寿命およ
び効用は、例えば、酵母およびカビによる損傷によって
損なわれる場合が多い。酵母およびカビは食料品の生産
においても問題を生じ得る。特に発酵業においては有害
な効果が大きい。
び効用は、例えば、酵母およびカビによる損傷によって
損なわれる場合が多い。酵母およびカビは食料品の生産
においても問題を生じ得る。特に発酵業においては有害
な効果が大きい。
【０００３】様々なアルカリ塩の形のソルビン酸および
プロピオン酸が食料品中の酵母およびカビの阻害に多く
使用されている。しかし、この種の添加剤の使用を縮小
する傾向があり、例えば、ヨーロッパ諸国の中にはソル
ビン酸塩の使用を禁止しているところもある。プロピオ
ン酸塩の欠点には、常に十分な効果がもたらされるとは
限らない事実および食料品にフレーバーを与えるという
事実が含まれる。様々な国における異なる食料品法律と
同様に、添加物に対する反発が増加しているという消費
者態度も考慮にいれなければならないことから、本工業
は、こうした添加物にとって代わる天然の生物防腐剤を
見出だすことに凌ぎを削ってきた。
プロピオン酸が食料品中の酵母およびカビの阻害に多く
使用されている。しかし、この種の添加剤の使用を縮小
する傾向があり、例えば、ヨーロッパ諸国の中にはソル
ビン酸塩の使用を禁止しているところもある。プロピオ
ン酸塩の欠点には、常に十分な効果がもたらされるとは
限らない事実および食料品にフレーバーを与えるという
事実が含まれる。様々な国における異なる食料品法律と
同様に、添加物に対する反発が増加しているという消費
者態度も考慮にいれなければならないことから、本工業
は、こうした添加物にとって代わる天然の生物防腐剤を
見出だすことに凌ぎを削ってきた。
【０００４】乳酸菌は、有機酸、過酸化水素、ジアセチ
ルおよびバクテリオシンなどの様々な抗菌性化合物を生
産することが知られており、これらを食料品の貯蔵寿命
の改善のための添加物として利用することが試みられて
きた。商業的に有用なのは、細菌ラクトコッカスラクテ
ィス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）により
生産されるナイシンの精製物を含みグラム陽性菌のみに
効果を持つ（従って、カビや酵母の繁殖には阻害効果を
持たない）産物ニサプリン（Ｎｉｓａｐｌｉｎ（Ａｐｌ
ｉｎ＆Ｂａｒｒｅｔｔ）である。
ルおよびバクテリオシンなどの様々な抗菌性化合物を生
産することが知られており、これらを食料品の貯蔵寿命
の改善のための添加物として利用することが試みられて
きた。商業的に有用なのは、細菌ラクトコッカスラクテ
ィス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）により
生産されるナイシンの精製物を含みグラム陽性菌のみに
効果を持つ（従って、カビや酵母の繁殖には阻害効果を
持たない）産物ニサプリン（Ｎｉｓａｐｌｉｎ（Ａｐｌ
ｉｎ＆Ｂａｒｒｅｔｔ）である。
【０００５】乳酸菌を主に種々の酵素製剤と組み合わせ
てみることによる、例えば飼料の保存において乳酸菌を
大いに利用するような様々な努力によりなされてきた。
しかし、そのような組み合わせは酵母やカビの繁殖に対
する阻害効果を持たず、それ故、酵母およびカビによっ
てもたらされる問題への解決策を提供するものではなか
った。
てみることによる、例えば飼料の保存において乳酸菌を
大いに利用するような様々な努力によりなされてきた。
しかし、そのような組み合わせは酵母やカビの繁殖に対
する阻害効果を持たず、それ故、酵母およびカビによっ
てもたらされる問題への解決策を提供するものではなか
った。
【０００６】欧州特許第０ ３０２ ３００号は、ラク
トバシルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種の培養お
よび増殖培地中に放出される産物の単離によって、酵母
およびカビの阻害産物を調製するプロセスを開示してい
る。これらの産物は低分子量化合物（ＭＷ＜１０００）
の複雑な混合物であると述べられており、多段階プロセ
ス（ブタノールおよびエタノールを用いて行なわれる抽
出段階に加えて、カラムクロマトグラフィーおよびアセ
トン沈殿または透析段階を含む）により増殖培地から単
離される。このような複雑なプロセスは大量生産には適
さない。上記出願では、ペニシリウムオキザリカム（Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｏｘａｌｉｃｕｍ）の胞子が阻
害効果を示すものとして用いられている。
トバシルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種の培養お
よび増殖培地中に放出される産物の単離によって、酵母
およびカビの阻害産物を調製するプロセスを開示してい
る。これらの産物は低分子量化合物（ＭＷ＜１０００）
の複雑な混合物であると述べられており、多段階プロセ
ス（ブタノールおよびエタノールを用いて行なわれる抽
出段階に加えて、カラムクロマトグラフィーおよびアセ
トン沈殿または透析段階を含む）により増殖培地から単
離される。このような複雑なプロセスは大量生産には適
さない。上記出願では、ペニシリウムオキザリカム（Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｏｘａｌｉｃｕｍ）の胞子が阻
害効果を示すものとして用いられている。
【０００７】
【本発明が解決しようとする課題】本発明の目的は酵母
およびカビにより引き起こされる問題の新しい解決策を
見出だすことであった。種々の乳酸菌およびプロピオン
菌の抗菌性因子の、酵母およびカビの繁殖に対する効果
が研究されたとき、ラクトバシルス属の新規の細菌株、
ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
（Ｌａｃｔｏｂａｃｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｓｐ．ｒ
ｈａｍｎｏｓｕｓ ＬＣ−７０５）が、カビ（例えばペ
ニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｕｍ）種、アスペルギル
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）種、クラドスポリウム
（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、およびフサリウム
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種というカビ））および酵母（例
えばカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）種）に対し、特にその
発酵培地への細胞懸濁液として使用した場合に、優れた
阻害効果を持つことが予期せず見出だされた。
およびカビにより引き起こされる問題の新しい解決策を
見出だすことであった。種々の乳酸菌およびプロピオン
菌の抗菌性因子の、酵母およびカビの繁殖に対する効果
が研究されたとき、ラクトバシルス属の新規の細菌株、
ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
（Ｌａｃｔｏｂａｃｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｓｐ．ｒ
ｈａｍｎｏｓｕｓ ＬＣ−７０５）が、カビ（例えばペ
ニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｕｍ）種、アスペルギル
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）種、クラドスポリウム
（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、およびフサリウム
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種というカビ））および酵母（例
えばカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）種）に対し、特にその
発酵培地への細胞懸濁液として使用した場合に、優れた
阻害効果を持つことが予期せず見出だされた。
【０００８】更に、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノ
サスＬＣ−７０５株の効果がプロピオニバクテリウム
（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の細菌、特
にプロピオニバクテリウムシェルマニーＪＳ株（Ｐｒｏ
ｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｈｅｒｍａｎｉｉ Ｊ
Ｓ）によって本質的に改良され得ることが予期せず見出
だされた。本効果はラクトバシルス カゼイ亜種ラムノ
サス ＬＣ−７０５株を別のラクトバシルス カゼイ
株、特にラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタ
ルム１９３１株（ｐｓｅｕｄｏｐｌａｎｔａｒｕｍ １
９３１）と組み合わせることによっても改良することが
できる。
サスＬＣ−７０５株の効果がプロピオニバクテリウム
（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の細菌、特
にプロピオニバクテリウムシェルマニーＪＳ株（Ｐｒｏ
ｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｈｅｒｍａｎｉｉ Ｊ
Ｓ）によって本質的に改良され得ることが予期せず見出
だされた。本効果はラクトバシルス カゼイ亜種ラムノ
サス ＬＣ−７０５株を別のラクトバシルス カゼイ
株、特にラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタ
ルム１９３１株（ｐｓｅｕｄｏｐｌａｎｔａｒｕｍ １
９３１）と組み合わせることによっても改良することが
できる。
【０００９】アルカリ金属プロピオン酸塩またはフェニ
ルアラニンなどの、酵母およびカビの阻害に使用される
既知の物質によっても、上記株または上記組み合わせの
効果を改善することが可能である。
ルアラニンなどの、酵母およびカビの阻害に使用される
既知の物質によっても、上記株または上記組み合わせの
効果を改善することが可能である。
【００１０】従って本発明の目的はラクトバシルス属の
新規の細菌株、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス
ＬＣ−７０５（ＤＳＭ７０６１）である。
新規の細菌株、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス
ＬＣ−７０５（ＤＳＭ７０６１）である。
【００１１】本発明のいまひとつの目的はラクトバシル
ス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５（ＤＳＭ７０
６１）のみ、もしくはプロピオニバクテリウム属の細菌
または他のラクトバシルス カゼイ細菌と組み合わせた
（好適には発酵培地への細胞懸濁液としての）細菌製剤
である。
ス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５（ＤＳＭ７０
６１）のみ、もしくはプロピオニバクテリウム属の細菌
または他のラクトバシルス カゼイ細菌と組み合わせた
（好適には発酵培地への細胞懸濁液としての）細菌製剤
である。
【００１２】本発明のまた別の目的は酵母およびカビの
繁殖を阻害する方法、ラクトバシルス カゼイ亜種ラム
ノサス ＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）のみ、もし
くはプロピオニバクテリウム属の細菌または他のラクト
バシルス カゼイ細菌と組み合わせた（好適には発酵培
地への細胞懸濁液としての）細菌製剤を用いること特徴
であるような方法である。
繁殖を阻害する方法、ラクトバシルス カゼイ亜種ラム
ノサス ＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）のみ、もし
くはプロピオニバクテリウム属の細菌または他のラクト
バシルス カゼイ細菌と組み合わせた（好適には発酵培
地への細胞懸濁液としての）細菌製剤を用いること特徴
であるような方法である。
【００１３】
【課題を解決するための手段】本発明はドイツ国微生物
および細胞培養物コレクションＧｍｂＨ（Ｄｅｕｔｓｃ
ｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａ
ｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄＺｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ Ｇｍ
ｂＨ）（ＤＳＭ）に寄託番号ＤＳＭ７０６１として１９
９２年５月１３日に寄託され、以下の性質を持っている
新規のラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−
７０５株に基づいている： −グラム陽性の短い鎖状桿菌 −ホモ発酵性 −良好増殖温度１５−４５℃ −本菌株はタンパク質加水分解活性を持たない −アルギニンからアンモニアを生産しない −カタラ−ゼ陰性 −ＭＲＳ培地（ＬＡＢ Ｍ）で増殖させた場合、本菌株
はＬ（＋）立体配置の光学活性を持つ１．６％乳酸を生
産する；本菌株はクエン酸（０．１６９％）を分解しジ
アセチルおよびアセトインを生産する；本菌株は少なく
とも以下の炭水化物（糖、糖アルコール）を発酵する：
リボース、ガラクトース、Ｄ−グルコ−ス、Ｄ−フルク
トース、Ｄ−マンノース、Ｌ−ソルボース、ラムノー
ス、マンニトール、ソルビトール、メチル−Ｄ−グルコ
シド、Ｎ−アセチルグルコサミン、アミグダリン、アル
ブチン、エスクリン、サリシン、セロビオース、マルト
ース、ラクトース、ショ糖、トレハロース、メレジトー
ス、ジェンチオビオース、Ｄ−トゥラノースおよびＤ−
タガロース −５％の塩分でも十分生存可能、１０％の塩分でもかな
り生存可能。
および細胞培養物コレクションＧｍｂＨ（Ｄｅｕｔｓｃ
ｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａ
ｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄＺｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ Ｇｍ
ｂＨ）（ＤＳＭ）に寄託番号ＤＳＭ７０６１として１９
９２年５月１３日に寄託され、以下の性質を持っている
新規のラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−
７０５株に基づいている： −グラム陽性の短い鎖状桿菌 −ホモ発酵性 −良好増殖温度１５−４５℃ −本菌株はタンパク質加水分解活性を持たない −アルギニンからアンモニアを生産しない −カタラ−ゼ陰性 −ＭＲＳ培地（ＬＡＢ Ｍ）で増殖させた場合、本菌株
はＬ（＋）立体配置の光学活性を持つ１．６％乳酸を生
産する；本菌株はクエン酸（０．１６９％）を分解しジ
アセチルおよびアセトインを生産する；本菌株は少なく
とも以下の炭水化物（糖、糖アルコール）を発酵する：
リボース、ガラクトース、Ｄ−グルコ−ス、Ｄ−フルク
トース、Ｄ−マンノース、Ｌ−ソルボース、ラムノー
ス、マンニトール、ソルビトール、メチル−Ｄ−グルコ
シド、Ｎ−アセチルグルコサミン、アミグダリン、アル
ブチン、エスクリン、サリシン、セロビオース、マルト
ース、ラクトース、ショ糖、トレハロース、メレジトー
ス、ジェンチオビオース、Ｄ−トゥラノースおよびＤ−
タガロース −５％の塩分でも十分生存可能、１０％の塩分でもかな
り生存可能。
【００１４】プロピオニバクテリウム シェルマニーＪ
Ｓ株は、ドイツ国微生物および細胞培養コレクションＧ
ｍｂＨに寄託番号ＤＳＭ７０６７として１９９２年５月
１３日に寄託され、以下の性質を持っている： −グラム陽性の短い桿菌 −グルコース、フルクトース、ガラクトースおよびラク
トースを発酵する −乳酸をよく発酵する −最適増殖温度３２℃。
Ｓ株は、ドイツ国微生物および細胞培養コレクションＧ
ｍｂＨに寄託番号ＤＳＭ７０６７として１９９２年５月
１３日に寄託され、以下の性質を持っている： −グラム陽性の短い桿菌 −グルコース、フルクトース、ガラクトースおよびラク
トースを発酵する −乳酸をよく発酵する −最適増殖温度３２℃。
【００１５】ラクトバシルス カゼイ亜種シュードプラ
ンタルム１９３１株は、フィニッシュデイリーズ セン
トラル コオペラティブ ソサイエティ バリオ（Ｆｉ
ｎｎｉｓｈ Ｄａｉｒｉｅｓ´ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｃｏ
−Ｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｖａｌｉｏ）
から生産物番号１９３１で入手可能であり、以下の性質
を持っている： −グラム陽性の短い桿菌 −任意のヘテロ発酵性 −良好増殖温度１５−４５℃ −タンパク質加水分解活性なし −アルギニンからアンモニアを生産しない −Ｄ（−）およびＬ（＋）乳酸を生産する。
ンタルム１９３１株は、フィニッシュデイリーズ セン
トラル コオペラティブ ソサイエティ バリオ（Ｆｉ
ｎｎｉｓｈ Ｄａｉｒｉｅｓ´ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｃｏ
−Ｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｖａｌｉｏ）
から生産物番号１９３１で入手可能であり、以下の性質
を持っている： −グラム陽性の短い桿菌 −任意のヘテロ発酵性 −良好増殖温度１５−４５℃ −タンパク質加水分解活性なし −アルギニンからアンモニアを生産しない −Ｄ（−）およびＬ（＋）乳酸を生産する。
【００１６】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬ
Ｃ−７０５株は、例えばホエーをベースにした増殖培地
で３０−３７℃でｐＨ調整ありまたはなしで２から３日
間増殖させることにより産生される。細胞を含む発酵培
地を回収し例えば濃縮、または凍結乾燥して使用する。
濃縮はミクロ濾過装置またはこれに相当する他の方法を
用いて行なってもよい。ラクトバシルス カゼイ亜種ラ
ムノサスＬＣ−７０５株の細胞を含む発酵培地は、冷所
（冷蔵庫の温度）で保存した場合は最低２か月、そして
凍結乾燥の場合はもっと長く、その酵母およびカビ阻害
活性を保持している。
Ｃ−７０５株は、例えばホエーをベースにした増殖培地
で３０−３７℃でｐＨ調整ありまたはなしで２から３日
間増殖させることにより産生される。細胞を含む発酵培
地を回収し例えば濃縮、または凍結乾燥して使用する。
濃縮はミクロ濾過装置またはこれに相当する他の方法を
用いて行なってもよい。ラクトバシルス カゼイ亜種ラ
ムノサスＬＣ−７０５株の細胞を含む発酵培地は、冷所
（冷蔵庫の温度）で保存した場合は最低２か月、そして
凍結乾燥の場合はもっと長く、その酵母およびカビ阻害
活性を保持している。
【００１７】必要なら、酵母およびカビの阻害に使用さ
れる他の細菌または添加物を、この細胞含有発酵培地に
加えることができる。細菌が使用される場合、上記の他
の細菌株をラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ
−７０５株と同時にまたは独立して培養することができ
る。本菌株の同時培養はその単純性および容易性から有
利である。一方、本菌株の独立培養は、必要に応じて細
菌製剤に含ませる本菌株の割合を変えることが可能であ
る。両方の細菌の凍結乾燥製剤を使用し、これらを同時
にまたは独立に再構成することは当然可能である。
れる他の細菌または添加物を、この細胞含有発酵培地に
加えることができる。細菌が使用される場合、上記の他
の細菌株をラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ
−７０５株と同時にまたは独立して培養することができ
る。本菌株の同時培養はその単純性および容易性から有
利である。一方、本菌株の独立培養は、必要に応じて細
菌製剤に含ませる本菌株の割合を変えることが可能であ
る。両方の細菌の凍結乾燥製剤を使用し、これらを同時
にまたは独立に再構成することは当然可能である。
【００１８】プロピオニバクテリウム属の細菌またはラ
クトバシルス カゼイ細菌の別の菌株の細胞を、ラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む
発酵培地に加えること、即ち本菌株をプロピオニバクテ
リウム属の細菌またはラクトバシルス カゼイ細菌の別
の菌株と共に培養するのが望ましい。好適な製剤は、ラ
クトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株お
よびプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株また
はラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５
株およびラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタ
ルム１９３１株を含むものである。
クトバシルス カゼイ細菌の別の菌株の細胞を、ラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む
発酵培地に加えること、即ち本菌株をプロピオニバクテ
リウム属の細菌またはラクトバシルス カゼイ細菌の別
の菌株と共に培養するのが望ましい。好適な製剤は、ラ
クトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株お
よびプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株また
はラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５
株およびラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタ
ルム１９３１株を含むものである。
【００１９】最も好適なのはラクトバシルス カゼイ亜
種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む発酵培地にプロピオ
ニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を加えること、即
ち２つの菌株を共に培養することである。
種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む発酵培地にプロピオ
ニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を加えること、即
ち２つの菌株を共に培養することである。
【００２０】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬ
Ｃ−７０５株のみまたはそれと例えばプロピオニバクテ
リウム シェルマニーＪＳ株などのプロピオニバクテリ
ウム属の細菌またはラクトバシルス カゼイ亜種シュー
ドプランタルム１９３１株などのラクトバシルス カゼ
イ細菌の別の菌株を組み合わせて含む細菌製剤は、多く
の工業分野における酵母およびカビによってもたらされ
る問題の予防のため（例えば、製造過程において酵母お
よびカビの繁殖を阻害するため、または例えば食品、発
酵および飼料工業の産物について、酵母およびカビによ
る腐敗を阻害するため）に利用することができる。
Ｃ−７０５株のみまたはそれと例えばプロピオニバクテ
リウム シェルマニーＪＳ株などのプロピオニバクテリ
ウム属の細菌またはラクトバシルス カゼイ亜種シュー
ドプランタルム１９３１株などのラクトバシルス カゼ
イ細菌の別の菌株を組み合わせて含む細菌製剤は、多く
の工業分野における酵母およびカビによってもたらされ
る問題の予防のため（例えば、製造過程において酵母お
よびカビの繁殖を阻害するため、または例えば食品、発
酵および飼料工業の産物について、酵母およびカビによ
る腐敗を阻害するため）に利用することができる。
【００２１】本発明は下記の実施例により更に詳細に記
載されるであろう。これらの実施例は本発明を明らかに
するためにのみあるもので、その範囲を制限するものと
して理解されるべきではない。
載されるであろう。これらの実施例は本発明を明らかに
するためにのみあるもので、その範囲を制限するものと
して理解されるべきではない。
【００２２】
【００２３】
【実施例１】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株の産生 ５％のホエーパーミエート（Ｖａｌｉｏ）、２％のカゼ
イン水解物（Ｖａｌｉｏ）および１％の酵母エキストラ
クト（Ｄｉｆｃｏ）を滅菌水中に含む、ホエーをベース
とした増殖培地でラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株を増殖させた。増殖において、増殖培
地のｐＨを自動ｐＨ調整機により４．５に維持した。培
養はバッチ培養として３０−３７℃で２日間行なわれ、
その後ステーショナリーな増殖ステージにおいて細胞を
回収した。細胞含有発酵培地中の細菌含有量は１０9Ｃ
ＦＵ／ｍｌのオーダーであった。この細胞含有発酵培地
はそのままで、または濃縮して使用することができる。
濃縮液の調製にあたっては、細胞含有発酵培地を例えば
１０−１５倍濃縮した。濃縮はミクロ濾過装置を用いて
行なった。これに相当する他の方法を用いることもでき
る。この濃縮液の細菌含有量は１０10ＣＦＵ／ｍｌのオ
ーダーであった。本発酵培地はそのままで、または濃縮
液として、約４℃でまたは凍結乾燥して保存した。
株の産生 ５％のホエーパーミエート（Ｖａｌｉｏ）、２％のカゼ
イン水解物（Ｖａｌｉｏ）および１％の酵母エキストラ
クト（Ｄｉｆｃｏ）を滅菌水中に含む、ホエーをベース
とした増殖培地でラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株を増殖させた。増殖において、増殖培
地のｐＨを自動ｐＨ調整機により４．５に維持した。培
養はバッチ培養として３０−３７℃で２日間行なわれ、
その後ステーショナリーな増殖ステージにおいて細胞を
回収した。細胞含有発酵培地中の細菌含有量は１０9Ｃ
ＦＵ／ｍｌのオーダーであった。この細胞含有発酵培地
はそのままで、または濃縮して使用することができる。
濃縮液の調製にあたっては、細胞含有発酵培地を例えば
１０−１５倍濃縮した。濃縮はミクロ濾過装置を用いて
行なった。これに相当する他の方法を用いることもでき
る。この濃縮液の細菌含有量は１０10ＣＦＵ／ｍｌのオ
ーダーであった。本発酵培地はそのままで、または濃縮
液として、約４℃でまたは凍結乾燥して保存した。
【００２４】
【実施例２】プロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株の産生 エルレンマイヤーフラスコ（Ｅｒｌｅｎｍｅｙｅｒ ｆ
ｌａｓｋ）の使ってプロピオン発酵培地中で３日間、プ
ロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を増殖させ
た。本プロピオン発酵培地は、０．５％のトリプトン
（Ｄｉｆｃｏ）、１．０％の酵母エキストラクト（Ｄｉ
ｆｃｏ）および４．１％の乳酸ナトリウム（３０％、Ｖ
ａｌｉｏ）を滅菌水中に含むものであった。栄養組成に
おける変動は可能である。増殖はステーショナリー期に
あるときに、発酵培地中の細胞を回収した。プロピオニ
バクテリウム シェルマニーＪＳ含有量は１０10ＣＦＵ
／ｍｌのオーダーであった。細胞含有発酵培地はそのま
まで、または濃縮して使用することができる。濃縮は実
施例１に示したようにして行なうことができる。この細
胞懸濁液（細胞の入った発酵培地）をそのままで、また
は濃縮して約４℃の温度で保存することができる。
ｌａｓｋ）の使ってプロピオン発酵培地中で３日間、プ
ロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を増殖させ
た。本プロピオン発酵培地は、０．５％のトリプトン
（Ｄｉｆｃｏ）、１．０％の酵母エキストラクト（Ｄｉ
ｆｃｏ）および４．１％の乳酸ナトリウム（３０％、Ｖ
ａｌｉｏ）を滅菌水中に含むものであった。栄養組成に
おける変動は可能である。増殖はステーショナリー期に
あるときに、発酵培地中の細胞を回収した。プロピオニ
バクテリウム シェルマニーＪＳ含有量は１０10ＣＦＵ
／ｍｌのオーダーであった。細胞含有発酵培地はそのま
まで、または濃縮して使用することができる。濃縮は実
施例１に示したようにして行なうことができる。この細
胞懸濁液（細胞の入った発酵培地）をそのままで、また
は濃縮して約４℃の温度で保存することができる。
【００２５】
【実施例３】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を含
む製剤の産生 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を、最
終産物のプロピオン酸の必要な含有量に応じて１：２ま
たは１：５の比率でホエーをベースにした発酵培地に接
種した。ホエーをベースにした増殖培地の組成は、１）
３．５％のホエーパーミエート、１．０％のカゼイン水
解物、１．０％の酵母エキストラクトおよび０．５％の
クエン酸ナトリウム、２）３．５％のホエーパーミエー
ト、１．０％のカゼイン水解物、１．０％の酵母エキス
トラクト、０．５％のクエン酸ナトリウムおよび０．５
％の塩化ナトリウム、もしくは３）４．０％のホエーパ
ーミエート、１．０％のカゼイン水解物および１．０％
の酵母エキストラクトであった。
株とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を含
む製剤の産生 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を、最
終産物のプロピオン酸の必要な含有量に応じて１：２ま
たは１：５の比率でホエーをベースにした発酵培地に接
種した。ホエーをベースにした増殖培地の組成は、１）
３．５％のホエーパーミエート、１．０％のカゼイン水
解物、１．０％の酵母エキストラクトおよび０．５％の
クエン酸ナトリウム、２）３．５％のホエーパーミエー
ト、１．０％のカゼイン水解物、１．０％の酵母エキス
トラクト、０．５％のクエン酸ナトリウムおよび０．５
％の塩化ナトリウム、もしくは３）４．０％のホエーパ
ーミエート、１．０％のカゼイン水解物および１．０％
の酵母エキストラクトであった。
【００２６】自動ｐＨ調整機でｐＨを４．５に維持しな
がら、菌株を３０℃で３日間培養した。培養の最後に、
細胞を含んだ発酵培地を回収した。このような細胞含有
発酵培地は冷蔵した場合、最低２か月は有用である。
がら、菌株を３０℃で３日間培養した。培養の最後に、
細胞を含んだ発酵培地を回収した。このような細胞含有
発酵培地は冷蔵した場合、最低２か月は有用である。
【００２７】各細菌の含有量が１０8ＣＦＵ／ｍｌより
大きい細胞含有発酵培地を、カビおよび酵母の増殖を阻
害する製剤として使用した。本製剤の乳酸含有量は約
０．８−１．３％、プロピオン酸の含有量は約２００−
５５０ｍｇ／１００ｇ（使用した接種量（例えば１％ま
たは５％）に依存する）、および酢酸含有量は約１５０
−２５０ｍｇ／１００ｇであった。
大きい細胞含有発酵培地を、カビおよび酵母の増殖を阻
害する製剤として使用した。本製剤の乳酸含有量は約
０．８−１．３％、プロピオン酸の含有量は約２００−
５５０ｍｇ／１００ｇ（使用した接種量（例えば１％ま
たは５％）に依存する）、および酢酸含有量は約１５０
−２５０ｍｇ／１００ｇであった。
【００２８】本製剤は５５℃１５分の熱処理にも耐え、
その活性を完全には失わないが、７０℃での処理にはそ
の酵母およびカビの阻害活性が明らかに損なわれる。
その活性を完全には失わないが、７０℃での処理にはそ
の酵母およびカビの阻害活性が明らかに損なわれる。
【００２９】
【実施例４】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株とラクトバシルスカゼイ亜種シュードプランタルム
１９３１株を含む製剤の産生 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタルム１
９３１株を、５．０％のホエーパーミエート、２．０％
のカゼイン水解物および１．０％の酵母エキストラクト
を含むホエーをベースにした増殖培地において３０−３
７℃で２−３日間増殖させた。この細胞を含む発酵培地
をミクロ濾過装置で濃縮した。この発酵培地はそのまま
で（細菌含有量約１０9ＣＦＵ／ｍｌのオーダー）また
はカビおよび酵母の阻害に関して約１０10ＣＦＵ／ｍｌ
の細胞含有量になるように濃縮して使用した。
株とラクトバシルスカゼイ亜種シュードプランタルム
１９３１株を含む製剤の産生 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタルム１
９３１株を、５．０％のホエーパーミエート、２．０％
のカゼイン水解物および１．０％の酵母エキストラクト
を含むホエーをベースにした増殖培地において３０−３
７℃で２−３日間増殖させた。この細胞を含む発酵培地
をミクロ濾過装置で濃縮した。この発酵培地はそのまま
で（細菌含有量約１０9ＣＦＵ／ｍｌのオーダー）また
はカビおよび酵母の阻害に関して約１０10ＣＦＵ／ｍｌ
の細胞含有量になるように濃縮して使用した。
【００３０】
【実施例５】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
を用いたカビおよび酵母の阻害 パンから単離したカンジダ属の酵母と同じく、パンおよ
びチーズなどの食料品から単離したペニシリウム、アス
ペルギルスおよびクラドスポリウム属のカビ、およびサ
イレージから単離したフサリウム種のカビを阻害検定に
使用した。 フサリウムカビを除き、これらのカビおよ
び酵母を実際の検定前にマルト寒天（ＭＥＡ）スロープ
で２回再増殖させた。最終培養は２５℃で２から３日間
行なわれた。マルト寒天は２％のマルトエキストラクト
（Ｄｉｆｃｏ）、０．１％のペプトン（Ｄｉｆｃｏ）、
２．０％のグルコースおよび１．５％の寒天を含むもの
であった。フサリウムカビはポテトデキストロース寒天
（ＰＤ寒天、ＬＡＢ Ｍ）で再増殖させた。
を用いたカビおよび酵母の阻害 パンから単離したカンジダ属の酵母と同じく、パンおよ
びチーズなどの食料品から単離したペニシリウム、アス
ペルギルスおよびクラドスポリウム属のカビ、およびサ
イレージから単離したフサリウム種のカビを阻害検定に
使用した。 フサリウムカビを除き、これらのカビおよ
び酵母を実際の検定前にマルト寒天（ＭＥＡ）スロープ
で２回再増殖させた。最終培養は２５℃で２から３日間
行なわれた。マルト寒天は２％のマルトエキストラクト
（Ｄｉｆｃｏ）、０．１％のペプトン（Ｄｉｆｃｏ）、
２．０％のグルコースおよび１．５％の寒天を含むもの
であった。フサリウムカビはポテトデキストロース寒天
（ＰＤ寒天、ＬＡＢ Ｍ）で再増殖させた。
【００３１】５ｍｌの滅菌した０．９％塩化ナトリウム
溶液をカビまたは酵母スロープにピペットで加え、スロ
ープ上の増殖物を滅菌ループで混ぜながら上記溶液中に
注意深く懸濁した。この懸濁液１ｍｌを１００ｍｌの滅
菌した０．９％塩化ナトリウム溶液にピペットで移し
た。この段階でのカビ／酵母含有量は１０5−１０6ＣＦ
Ｕ／ｍｌであった。このベース懸濁液０．１ｍｌを各検
定皿に用いた。
溶液をカビまたは酵母スロープにピペットで加え、スロ
ープ上の増殖物を滅菌ループで混ぜながら上記溶液中に
注意深く懸濁した。この懸濁液１ｍｌを１００ｍｌの滅
菌した０．９％塩化ナトリウム溶液にピペットで移し
た。この段階でのカビ／酵母含有量は１０5−１０6ＣＦ
Ｕ／ｍｌであった。このベース懸濁液０．１ｍｌを各検
定皿に用いた。
【００３２】実施例１に記載した製剤（細菌含有量約１
０9ＣＦＵ／ｍｌ）１ｍｌ（または０．５ｍｌ）をディ
ッシュにピペットで入れ、そこに４５℃のＰＣ寒天（プ
レートカウントアガー（Ｐｌａｔｅ Ｃｏｕｎｔ Ａｇ
ａｒ），Ｄｉｆｃｏ）１０ｍｌを乗せ、寒天を固化し
た。フサリウムカビについては、ＰＤ寒天（ポテトデキ
ストロースアガー、ＬＡＢ Ｍ）を使用した。上記カビ
または酵母懸濁液０．１ｍｌを固まった寒天上にピペッ
トで加え、ディッシュ上に均一に延ばした、このディッ
シュを３０℃で１日培養しそれから２５℃で２日培養し
た。培養後、このディッシュを試験製剤を加えていない
コントロールディッシュと比較した。コントロールと比
較したカビまたは酵母の増殖強度をディッシュから読み
取った。
０9ＣＦＵ／ｍｌ）１ｍｌ（または０．５ｍｌ）をディ
ッシュにピペットで入れ、そこに４５℃のＰＣ寒天（プ
レートカウントアガー（Ｐｌａｔｅ Ｃｏｕｎｔ Ａｇ
ａｒ），Ｄｉｆｃｏ）１０ｍｌを乗せ、寒天を固化し
た。フサリウムカビについては、ＰＤ寒天（ポテトデキ
ストロースアガー、ＬＡＢ Ｍ）を使用した。上記カビ
または酵母懸濁液０．１ｍｌを固まった寒天上にピペッ
トで加え、ディッシュ上に均一に延ばした、このディッ
シュを３０℃で１日培養しそれから２５℃で２日培養し
た。培養後、このディッシュを試験製剤を加えていない
コントロールディッシュと比較した。コントロールと比
較したカビまたは酵母の増殖強度をディッシュから読み
取った。
【００３３】１０％および５％の濃度におけるラクトバ
シルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５株の酵母
およびカビに対する阻害効果を表１に示す。表中の酵母
およびカビの種の略号は、カビではペニシリウム種１
（１６Ａ）、ペニシリウム種２（１１４）、ペニシリウ
ム ディジタトゥム（ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）（Ｌ５）、
アスペルギルス ニガー（ｎｉｇｅｒ）（Ｌ２２）、ク
ラドスポリウム種１（Ｐ１）、ペニシリウム種３（ＭＺ
１）およびフサリウム種１（ＦＨ−１）そして酵母では
カンジダ種１（Ｌ９）およびカンジダルシタニエー（Ｃ
ａｎｄｉｄａ ｌｕｓｉｔａｎｉａｅ）（Ｌ１８）であ
る。表に示された結果の注釈は以下の通りである：＋＋
＋＝コントロールと同様非常に強いカビ繁殖；＋＋＝強
いカビ繁殖；＋＝弱いカビ繁殖；−＝カビ繁殖なし。
シルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５株の酵母
およびカビに対する阻害効果を表１に示す。表中の酵母
およびカビの種の略号は、カビではペニシリウム種１
（１６Ａ）、ペニシリウム種２（１１４）、ペニシリウ
ム ディジタトゥム（ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）（Ｌ５）、
アスペルギルス ニガー（ｎｉｇｅｒ）（Ｌ２２）、ク
ラドスポリウム種１（Ｐ１）、ペニシリウム種３（ＭＺ
１）およびフサリウム種１（ＦＨ−１）そして酵母では
カンジダ種１（Ｌ９）およびカンジダルシタニエー（Ｃ
ａｎｄｉｄａ ｌｕｓｉｔａｎｉａｅ）（Ｌ１８）であ
る。表に示された結果の注釈は以下の通りである：＋＋
＋＝コントロールと同様非常に強いカビ繁殖；＋＋＝強
いカビ繁殖；＋＝弱いカビ繁殖；−＝カビ繁殖なし。
【００３４】
【表１】 １０％の濃度でのラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株はペニシリウム種（１６ＡおよびＭＺ
１）、クラドスポリウム種（Ｐ１）およびフサリウム
（ＦＨ−１）カビおよびカンジダ酵母を阻害した。一
方、５％添加ではフサリウム（ＦＨ−１）カビのみの繁
殖が完全に阻害された。
スＬＣ−７０５株はペニシリウム種（１６ＡおよびＭＺ
１）、クラドスポリウム種（Ｐ１）およびフサリウム
（ＦＨ−１）カビおよびカンジダ酵母を阻害した。一
方、５％添加ではフサリウム（ＦＨ−１）カビのみの繁
殖が完全に阻害された。
【００３５】
【実施例６】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株
（１：２）を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株の製剤
（ＬＣ７０５とＪＳ製剤，１：２）を実施例３のように
して産生した。細胞懸濁液および細胞懸濁液濃縮液の両
方について、本製剤の１０％濃度での酵母およびカビに
対する阻害効果を、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノ
サスＬＣ−７０５株について実施例５で記載したのと同
様にして検定した。その結果を表２に示す。表に使われ
ているカビおよび酵母の種の略号および提示されている
結果の注釈は上記実施例５と同様である。表中に使われ
ているＳＳという略号は細胞含有発酵培地を示し、Ｋｏ
ｎｓという略号は濃縮された細胞含有発酵培地を示し、
ＳＮという略号は細胞を含まない発酵培地を示す。
株とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株
（１：２）を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株の製剤
（ＬＣ７０５とＪＳ製剤，１：２）を実施例３のように
して産生した。細胞懸濁液および細胞懸濁液濃縮液の両
方について、本製剤の１０％濃度での酵母およびカビに
対する阻害効果を、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノ
サスＬＣ−７０５株について実施例５で記載したのと同
様にして検定した。その結果を表２に示す。表に使われ
ているカビおよび酵母の種の略号および提示されている
結果の注釈は上記実施例５と同様である。表中に使われ
ているＳＳという略号は細胞含有発酵培地を示し、Ｋｏ
ｎｓという略号は濃縮された細胞含有発酵培地を示し、
ＳＮという略号は細胞を含まない発酵培地を示す。
【００３６】
【表２】 細胞含有発酵培地（ＳＳ）については、カビペニシリウ
ム（１６Ａ，Ｌ５およびＭＺ１）、クラドスポリウム
（Ｐ１）、アスペルギルス ニガー（Ｌ２２）およびフ
サリウム（ＦＨ−１）の増殖が全体的に阻害された。ま
た酵母（Ｌ９）および（Ｌ１８）の増殖も全体的に阻害
された。濃縮した細胞懸濁液で処理したディッシュの
内、２つのディッシュにおいてカビ繁殖が、１つのディ
ッシュニおいて酵母の繁殖が見られた。細胞培養液の上
清（これより細胞は遠心により除かれている）（ＳＮ）
はカビおよび酵母の増殖に対して阻害効果を持たなかっ
た。
ム（１６Ａ，Ｌ５およびＭＺ１）、クラドスポリウム
（Ｐ１）、アスペルギルス ニガー（Ｌ２２）およびフ
サリウム（ＦＨ−１）の増殖が全体的に阻害された。ま
た酵母（Ｌ９）および（Ｌ１８）の増殖も全体的に阻害
された。濃縮した細胞懸濁液で処理したディッシュの
内、２つのディッシュにおいてカビ繁殖が、１つのディ
ッシュニおいて酵母の繁殖が見られた。細胞培養液の上
清（これより細胞は遠心により除かれている）（ＳＮ）
はカビおよび酵母の増殖に対して阻害効果を持たなかっ
た。
【００３７】
【実施例７】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株
（１：５）を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株の製剤
（ＬＣ７０５とＪＳ製剤，１：５）を実施例３のように
して産生した。細胞懸濁液および細胞懸濁液濃縮液の両
方について、本製剤の５％濃度での酵母およびカビに対
する阻害効果を、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株について実施例５で記載したのと同様
にして検定した。その結果を表３に示す。表に使われて
いるカビおよび酵母の種の略号および提示されている結
果の注釈および他の略号は上記実施例５および６と同様
である。
株とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株
（１：５）を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株の製剤
（ＬＣ７０５とＪＳ製剤，１：５）を実施例３のように
して産生した。細胞懸濁液および細胞懸濁液濃縮液の両
方について、本製剤の５％濃度での酵母およびカビに対
する阻害効果を、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株について実施例５で記載したのと同様
にして検定した。その結果を表３に示す。表に使われて
いるカビおよび酵母の種の略号および提示されている結
果の注釈および他の略号は上記実施例５および６と同様
である。
【００３８】
【表３】 細胞含有発酵培地（ＳＳ）について、カビアスペルギル
ス ニガー（Ｌ２２）、ペニシリウム種（ＭＺ１）、ク
ラドスポリウム種（Ｐ１）およびフサリウム種（ＦＨ−
１）の増殖が全体的に阻害された。また酵母カンジダ種
１（Ｌ９）の増殖も全体的に阻害された。カビペニシリ
ウム種２およびペニシリウム ディジタトゥム（１１４
およびＬ５）および酵母カンジダ ルシタニエー（Ｌ１
８）の増殖は明らかに減少した。細胞培養液の上清（そ
れからは細胞は遠心により除かれている）（ＳＮ）はカ
ビおよび酵母の増殖に対する阻害効果を持たなかった。
ス ニガー（Ｌ２２）、ペニシリウム種（ＭＺ１）、ク
ラドスポリウム種（Ｐ１）およびフサリウム種（ＦＨ−
１）の増殖が全体的に阻害された。また酵母カンジダ種
１（Ｌ９）の増殖も全体的に阻害された。カビペニシリ
ウム種２およびペニシリウム ディジタトゥム（１１４
およびＬ５）および酵母カンジダ ルシタニエー（Ｌ１
８）の増殖は明らかに減少した。細胞培養液の上清（そ
れからは細胞は遠心により除かれている）（ＳＮ）はカ
ビおよび酵母の増殖に対する阻害効果を持たなかった。
【００３９】
【実施例８】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株とプロピオニバクテリウム シェルマニー ＪＳ株
（１：１）を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株をそれ
ぞれ実施例１および実施例２のようにして培養し、その
後細胞を含む発酵培地を１：１の比率で混合した。本混
合物のカビおよび酵母に対する阻害効果を、ラクトバシ
ルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株について実
施例５で記載したのと同様にして検定した。その結果を
表４に示す。表に使われているカビおよび酵母の種の略
号および提示されている結果の注釈および他の略号は上
記実施例５と同様である。
株とプロピオニバクテリウム シェルマニー ＪＳ株
（１：１）を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株をそれ
ぞれ実施例１および実施例２のようにして培養し、その
後細胞を含む発酵培地を１：１の比率で混合した。本混
合物のカビおよび酵母に対する阻害効果を、ラクトバシ
ルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株について実
施例５で記載したのと同様にして検定した。その結果を
表４に示す。表に使われているカビおよび酵母の種の略
号および提示されている結果の注釈および他の略号は上
記実施例５と同様である。
【００４０】
【表４】 １０％添加の場合、本製剤はディッシュ検定において、
酵母カンジダ種１（Ｌ９）の増殖およびカビアスペルギ
ルス ニガー（Ｌ２２）、クラドスポリウム種（Ｐ１）
およびペニシリウム種３（ＭＺ１）の増殖を全体的に阻
害した。５％添加の場合、本製剤はカビＬ２２，Ｐ１お
よびＭＺの増殖を明らかに減少させた。
酵母カンジダ種１（Ｌ９）の増殖およびカビアスペルギ
ルス ニガー（Ｌ２２）、クラドスポリウム種（Ｐ１）
およびペニシリウム種３（ＭＺ１）の増殖を全体的に阻
害した。５％添加の場合、本製剤はカビＬ２２，Ｐ１お
よびＭＺの増殖を明らかに減少させた。
【００４１】
【実施例９】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタルム
１９３１株を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタルム１
９３１株の製剤（ＬＣ７０５と１９３１製剤，１：１）
を実施例４のようにして産生した。細胞懸濁液および細
胞懸濁液濃縮液の両方について、本製剤の１０％濃度で
の酵母およびカビに対する阻害効果を、ラクトバシルス
カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株について実施例
５で記載したのと同様にして検定した。その結果を表５
に示す。表に使われているカビおよび酵母の種の略号、
提示されている結果の注釈およびその他の略号は上記実
施例５および６と同様である。
株とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタルム
１９３１株を組み合わせたカビおよび酵母の阻害 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプランタルム１
９３１株の製剤（ＬＣ７０５と１９３１製剤，１：１）
を実施例４のようにして産生した。細胞懸濁液および細
胞懸濁液濃縮液の両方について、本製剤の１０％濃度で
の酵母およびカビに対する阻害効果を、ラクトバシルス
カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株について実施例
５で記載したのと同様にして検定した。その結果を表５
に示す。表に使われているカビおよび酵母の種の略号、
提示されている結果の注釈およびその他の略号は上記実
施例５および６と同様である。
【００４２】
【表５】 これらの製剤のうち、カビおよび酵母の阻害に最も有効
なのは濃縮した細胞含有発酵培地（細胞濃縮液）であっ
た。そのままの細胞含有発酵培地は濃縮液に比べ明らか
に弱い活性しか持っておらず、細胞培養液の上清（これ
より細胞は遠心により除かれている）（ＳＮ）はカビお
よび酵母の増殖に対して阻害効果を持たなかった。
なのは濃縮した細胞含有発酵培地（細胞濃縮液）であっ
た。そのままの細胞含有発酵培地は濃縮液に比べ明らか
に弱い活性しか持っておらず、細胞培養液の上清（これ
より細胞は遠心により除かれている）（ＳＮ）はカビお
よび酵母の増殖に対して阻害効果を持たなかった。
【００４３】
【実施例１０】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス ＬＣ−７０５
株を含む製剤のプレドライサイレージの産生における利
用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を発酵
槽内でｐＨ４．５、３０℃で３日間増殖させた。増殖培
地の組成は以下の通りであった：４％のホエーパーミエ
ート、１％のカゼイン水解物および１％の酵母エキスト
ラクト。ＬＣ−７０５については１．２×１０9／ｍ
ｌ、ＪＳについては１．１×１０9／ｍｌの細胞含有量
を持つ細胞懸濁液（細胞を含む発酵培地）を製剤として
使用した。
株を含む製剤のプレドライサイレージの産生における利
用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を発酵
槽内でｐＨ４．５、３０℃で３日間増殖させた。増殖培
地の組成は以下の通りであった：４％のホエーパーミエ
ート、１％のカゼイン水解物および１％の酵母エキスト
ラクト。ＬＣ−７０５については１．２×１０9／ｍ
ｌ、ＪＳについては１．１×１０9／ｍｌの細胞含有量
を持つ細胞懸濁液（細胞を含む発酵培地）を製剤として
使用した。
【００４４】ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬ
Ｃ−７０５株とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプ
ランタルム１９３１株をｐＨ４．５、３０℃で２日間発
酵槽内で培養し、総含有量約２×１０11ＣＦＵ／ｍｌま
で増殖させた。増殖培地の組成は以下の通りであった：
４％のホエーパーミエート、１％のカゼイン水解物、１
％の酵母エキストラクトおよび０．１％のツイーン（Ｔ
ｗｅｅｎ）８０。２×１０11ＣＦＵ／ｍｌの細胞含有量
を持つ細胞濃縮液を製剤として使用した。 ラクトバシ
ルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌ
ａｎｔａｒｕｍ） ＬＢ７．５−５株を、５％のホエー
パーミエート、０．５％のカゼイン水解物、０．２５％
の酵母エキストラクト、０．０５ｇ／ｌのＭｎＳＯ4お
よび１％のツイーン８０からなるＨ増殖培地を含む発酵
槽内で、ｐＨ５．４、３０℃で２０時間増殖させた。７
×１０10ＣＦＵ／ｍｌの細胞含有量を持つ細胞懸濁液を
製剤として使用した。
Ｃ−７０５株とラクトバシルス カゼイ亜種シュードプ
ランタルム１９３１株をｐＨ４．５、３０℃で２日間発
酵槽内で培養し、総含有量約２×１０11ＣＦＵ／ｍｌま
で増殖させた。増殖培地の組成は以下の通りであった：
４％のホエーパーミエート、１％のカゼイン水解物、１
％の酵母エキストラクトおよび０．１％のツイーン（Ｔ
ｗｅｅｎ）８０。２×１０11ＣＦＵ／ｍｌの細胞含有量
を持つ細胞濃縮液を製剤として使用した。 ラクトバシ
ルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌ
ａｎｔａｒｕｍ） ＬＢ７．５−５株を、５％のホエー
パーミエート、０．５％のカゼイン水解物、０．２５％
の酵母エキストラクト、０．０５ｇ／ｌのＭｎＳＯ4お
よび１％のツイーン８０からなるＨ増殖培地を含む発酵
槽内で、ｐＨ５．４、３０℃で２０時間増殖させた。７
×１０10ＣＦＵ／ｍｌの細胞含有量を持つ細胞懸濁液を
製剤として使用した。
【００４５】フサリウムカビ（Ｆ６７）をＰＤ寒天スロ
ープ上で２５℃で３日間増殖させ、その後、増殖したも
のを滅菌した０．９％塩化ナトリウム溶液に懸濁した。
懸濁液中のカビ含有量は約１０6ＣＦＵ／ｍｌであっ
た。サイレージには本含有量は約１０−１００ＣＦＵ／
ｇであった。
ープ上で２５℃で３日間増殖させ、その後、増殖したも
のを滅菌した０．９％塩化ナトリウム溶液に懸濁した。
懸濁液中のカビ含有量は約１０6ＣＦＵ／ｍｌであっ
た。サイレージには本含有量は約１０−１００ＣＦＵ／
ｇであった。
【００４６】スプレーにより本製剤をプレドライサイレ
ージ（１５ｋｇ）に混合し、その後、サイレージをサイ
ロにぎっしり詰めた。結果は下記の表６から８に示す。
サイロ１は接種していないコントロールサイロである。
サイロ２は製剤ＬＣ−７０５＋ＪＳ（２．５％）および
カビＦ６７で処理した試料である。サイロ３は製剤ＬＣ
７０５＋１９３１（２．５％）およびカビＦ６７で処理
した試料である。サイロ４は製剤ＬＢ７．５−５（２．
５％）およびいカビＦ６７で処理した試料である。サイ
ロ５はカビＦ６７（１０−１００ＣＦＵ／ｍｌ）で処理
した試料である。試料は、サイロを閉める前の添加直
後、および添加後１０週してからサイロから採取した。
ージ（１５ｋｇ）に混合し、その後、サイレージをサイ
ロにぎっしり詰めた。結果は下記の表６から８に示す。
サイロ１は接種していないコントロールサイロである。
サイロ２は製剤ＬＣ−７０５＋ＪＳ（２．５％）および
カビＦ６７で処理した試料である。サイロ３は製剤ＬＣ
７０５＋１９３１（２．５％）およびカビＦ６７で処理
した試料である。サイロ４は製剤ＬＢ７．５−５（２．
５％）およびいカビＦ６７で処理した試料である。サイ
ロ５はカビＦ６７（１０−１００ＣＦＵ／ｍｌ）で処理
した試料である。試料は、サイロを閉める前の添加直
後、および添加後１０週してからサイロから採取した。
【００４７】カビフサリウムを除き、酵母およびカビは
以下の組成を持つＨＤＫ増殖培地で決定した：０．５％
酵母エキストラクト、２％デキストロースおよび１００
ｍｇ／ｍｌクロラムフェニコール（１．５％寒天中）。
カビフサリウムはＰＤ寒天で決定した。Ｃｏｌｉｆｏｒ
ｍ細菌はＶＲＢ寒天（バイオレット レッド バイルア
ガー（Ｖｉｏｌｅｔ Ｒｅｄ Ｂｉｌｅ Ａｇａｒ），
ＬＡＢ Ｍ）で、乳酸菌はＭＲＳ寒天で、プロピオン細
菌は以下の組成を持つ乳酸ナトリウム増殖培地で決定し
た：０．５％トリプトン（Ｄｉｆｃｏ）、１．２５％の
３０％乳酸ナトリウムおよび１％酵母エキストラクト
（１．５％寒天中）。細菌全体はＰＣ寒天で決定した。
以下の組成を持つＨＤＫ増殖培地で決定した：０．５％
酵母エキストラクト、２％デキストロースおよび１００
ｍｇ／ｍｌクロラムフェニコール（１．５％寒天中）。
カビフサリウムはＰＤ寒天で決定した。Ｃｏｌｉｆｏｒ
ｍ細菌はＶＲＢ寒天（バイオレット レッド バイルア
ガー（Ｖｉｏｌｅｔ Ｒｅｄ Ｂｉｌｅ Ａｇａｒ），
ＬＡＢ Ｍ）で、乳酸菌はＭＲＳ寒天で、プロピオン細
菌は以下の組成を持つ乳酸ナトリウム増殖培地で決定し
た：０．５％トリプトン（Ｄｉｆｃｏ）、１．２５％の
３０％乳酸ナトリウムおよび１％酵母エキストラクト
（１．５％寒天中）。細菌全体はＰＣ寒天で決定した。
【００４８】
【表６】
【表７】
【表８】 貯蔵１０日後、開封したサイロの様相に相違が見られ
た。表面に見た目に白い増殖物がサイロ２を除くすべて
のサイロに生じていた（上記増殖物は明らかに酵母であ
る）。サイロ１および５は最も多くの酵母増殖物を含ん
でいた。微生物学的決定（決定感度＜１０００）から、
サイロ２とサイロ３は好気性細菌または酵母およびカビ
を含んでいなかった。サイロ１、４および５は開封時に
好気性微生物を持っていた。
た。表面に見た目に白い増殖物がサイロ２を除くすべて
のサイロに生じていた（上記増殖物は明らかに酵母であ
る）。サイロ１および５は最も多くの酵母増殖物を含ん
でいた。微生物学的決定（決定感度＜１０００）から、
サイロ２とサイロ３は好気性細菌または酵母およびカビ
を含んでいなかった。サイロ１、４および５は開封時に
好気性微生物を持っていた。
【００４９】更に１週間後（検定開始時から１１週間
後）のサイロから得られた決定から、酵母増殖はすべて
のサイロに及んでいた。酵母含有量はサイロ２で最も低
かった。カビ増殖はサイロ３、４および５に及んでい
た。サイロ２に添加された接種物はカビの増殖を阻害し
ていた。
後）のサイロから得られた決定から、酵母増殖はすべて
のサイロに及んでいた。酵母含有量はサイロ２で最も低
かった。カビ増殖はサイロ３、４および５に及んでい
た。サイロ２に添加された接種物はカビの増殖を阻害し
ていた。
【００５０】
【実施例１１】プレドライサイレージ（乾燥物含量２５−５０％）の産
生における、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬ
Ｃ−７０５株を含む製剤の使用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を発酵
槽内でｐＨ４．５、３０℃で３日間増殖させた。増殖培
地の組成は以下の通りであった：３．５％ホエーパーミ
エート、１．５％カゼイン水解物、１．０％酵母エクス
トラクトおよび０．５％クエン酸ナトリウム（Ｄｉｆｃ
ｏ）。ＬＣ−７０５について５×１０8、ＪＳについて
２×１０1 0／ｍｌの細胞含量を持つ細胞懸濁液を製剤と
して使用した。
生における、ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬ
Ｃ−７０５株を含む製剤の使用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を発酵
槽内でｐＨ４．５、３０℃で３日間増殖させた。増殖培
地の組成は以下の通りであった：３．５％ホエーパーミ
エート、１．５％カゼイン水解物、１．０％酵母エクス
トラクトおよび０．５％クエン酸ナトリウム（Ｄｉｆｃ
ｏ）。ＬＣ−７０５について５×１０8、ＪＳについて
２×１０1 0／ｍｌの細胞含量を持つ細胞懸濁液を製剤と
して使用した。
【００５１】２．５％本製剤をスプレーにより、乾燥物
含量４０％のプレドライ丸形バールサイレージに添加し
た。時間表にしたがって滅菌ボアで丸形バールから試料
を採取した。防腐剤なしで保存したサイレージを対照試
料として使用した。微生物学的結果を下記の表９および
１０に示す。
含量４０％のプレドライ丸形バールサイレージに添加し
た。時間表にしたがって滅菌ボアで丸形バールから試料
を採取した。防腐剤なしで保存したサイレージを対照試
料として使用した。微生物学的結果を下記の表９および
１０に示す。
【００５２】微生物学的決定は上記実施例１０に記載の
方法により行なわれた。
方法により行なわれた。
【００５３】
【表９】
【表１０】 最初の１週間では本製剤で処理したプレドライ丸形バー
ルサイレージにはカビも酵母も検出できなかったが、こ
の保存期間では対照サイレージにおける酵母含量は０か
ら７３００ＣＦＵ／ｇ、カビ含量は１０から１６００Ｃ
ＦＵ／ｇの間であった。ラクトバシルス カゼイ亜種ラ
ムノサスＬＣ−７０５株を含む製剤で処理したサイレー
ジの全体としての微生物学的品質は、防腐剤無しのサイ
レージのそれより優れたものであった。
ルサイレージにはカビも酵母も検出できなかったが、こ
の保存期間では対照サイレージにおける酵母含量は０か
ら７３００ＣＦＵ／ｇ、カビ含量は１０から１６００Ｃ
ＦＵ／ｇの間であった。ラクトバシルス カゼイ亜種ラ
ムノサスＬＣ−７０５株を含む製剤で処理したサイレー
ジの全体としての微生物学的品質は、防腐剤無しのサイ
レージのそれより優れたものであった。
【００５４】
【実施例１２】サワーブレッドのカビの阻害へのラクトバシルス カゼ
イ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む製剤の使用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を、
３．５％ホエーパーミエート、１．０％カゼイン水解
物、１．０％酵母エクストラクトおよび０．５％クエン
酸ナトリウム（Ｄｉｆｃｏ）を含むホエーベースの増殖
培地に１：５の比率で接種した。この菌株をｐＨ４．
５、３０℃で３日間増殖させた。細胞を含む発酵培地を
回収し、サワーブレッドの生地にそのまま加えた。本製
剤の細菌含量はＬＣ−７０５について３×１０9ＣＦＵ
／ｍｌ、ＪＳについて４×１０9ＣＦＵ／ｍｌであっ
た。
イ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む製剤の使用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を、
３．５％ホエーパーミエート、１．０％カゼイン水解
物、１．０％酵母エクストラクトおよび０．５％クエン
酸ナトリウム（Ｄｉｆｃｏ）を含むホエーベースの増殖
培地に１：５の比率で接種した。この菌株をｐＨ４．
５、３０℃で３日間増殖させた。細胞を含む発酵培地を
回収し、サワーブレッドの生地にそのまま加えた。本製
剤の細菌含量はＬＣ−７０５について３×１０9ＣＦＵ
／ｍｌ、ＪＳについて４×１０9ＣＦＵ／ｍｌであっ
た。
【００５５】本製剤を１０％量添加し、添加は生地の水
分量として計算に入れた。
分量として計算に入れた。
【００５６】業者の市販のサワーブレッドを対照パンと
して使用した。このパンをトーストパンに焼き上げた；
２４のパンの塊（ローフ）をすべて貯蔵し、８６のロー
フをスライスした。パンのローフのカビ繁殖が２１日で
視覚的に観察された。結果を表１１に示す。
して使用した。このパンをトーストパンに焼き上げた；
２４のパンの塊（ローフ）をすべて貯蔵し、８６のロー
フをスライスした。パンのローフのカビ繁殖が２１日で
視覚的に観察された。結果を表１１に示す。
【００５７】
【表１１】 対照ローフは、本製剤で処理したローフより早く腐敗し
た。最初のカビは６日後に対照ローフで検出され、試験
ローフでは１０日後にようやく検出された。すべての対
照ローフの内、ほぼ５０％が１０日後に腐敗し、一方本
製剤で処理したローフの５０％が腐敗したのは１７日後
であった。スライスしたローフの内、対照ローフは非常
に早く腐敗した。１日ごとに観察した対照ローフ５パッ
クの内、５パックすべてが１０日および１１日後に既に
腐敗し、従って対照ローフの観察はここで中断された。
本製剤を添加されたローフの内、初めは１３日後に５パ
ックすべてが腐敗したが、次の日のローフの内、３つし
か腐敗していなかった。
た。最初のカビは６日後に対照ローフで検出され、試験
ローフでは１０日後にようやく検出された。すべての対
照ローフの内、ほぼ５０％が１０日後に腐敗し、一方本
製剤で処理したローフの５０％が腐敗したのは１７日後
であった。スライスしたローフの内、対照ローフは非常
に早く腐敗した。１日ごとに観察した対照ローフ５パッ
クの内、５パックすべてが１０日および１１日後に既に
腐敗し、従って対照ローフの観察はここで中断された。
本製剤を添加されたローフの内、初めは１３日後に５パ
ックすべてが腐敗したが、次の日のローフの内、３つし
か腐敗していなかった。
【００５８】
【実施例１３】小麦パンのカビ繁殖の阻害への、ラクトバシルス カゼ
イ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む製剤の使用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を、
３．５％ホエーパーミエート、１．０％カゼイン水解
物、１．０％酵母エクストラクトおよび０．５％クエン
酸ナトリウムを含むホエーベースの増殖培地に１：５の
比率で接種した。この菌株をｐＨ４．５、３０℃で３日
間培養した。細胞を含む発酵培地を濃縮し凍結乾燥し
た。凍結乾燥した製剤の細菌含量はＬＣ−７０５および
ＪＳについて２×１０11ＣＦＵ／ｇであった。
イ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株を含む製剤の使用 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株
とプロピオニバクテリウム シェルマニーＪＳ株を、
３．５％ホエーパーミエート、１．０％カゼイン水解
物、１．０％酵母エクストラクトおよび０．５％クエン
酸ナトリウムを含むホエーベースの増殖培地に１：５の
比率で接種した。この菌株をｐＨ４．５、３０℃で３日
間培養した。細胞を含む発酵培地を濃縮し凍結乾燥し
た。凍結乾燥した製剤の細菌含量はＬＣ−７０５および
ＪＳについて２×１０11ＣＦＵ／ｇであった。
【００５９】本製剤を生地の総体積の０．１％、０．２
５％および０．５％量だけ生地に添加した。業者の市販
の類似小麦パンを対照パンとして使用した。パンをトー
ストパンに焼き上げた（１７ローフ）。パンローフのカ
ビ繁殖を視覚的に９日間観察した。パンの味も評価し
た。 結果を表１２に示す。
５％および０．５％量だけ生地に添加した。業者の市販
の類似小麦パンを対照パンとして使用した。パンをトー
ストパンに焼き上げた（１７ローフ）。パンローフのカ
ビ繁殖を視覚的に９日間観察した。パンの味も評価し
た。 結果を表１２に示す。
【００６０】
【表１２】 対照ローフは本製剤で処理した小麦ローフより早く腐敗
した。本製剤で処理した小麦ローフの内、０．２５％製
剤添加されたものが最もよく保存された。これらのロー
フの５０％以上が８日までカビに繁殖されなかったが、
対照ローフの５０％以上が６日後にカビ繁殖されてい
た。本製剤で処理したパンローフの総カビ含量もまた、
対照ローフより小さかった。本製剤は小麦パンの味、香
りも改善した。
した。本製剤で処理した小麦ローフの内、０．２５％製
剤添加されたものが最もよく保存された。これらのロー
フの５０％以上が８日までカビに繁殖されなかったが、
対照ローフの５０％以上が６日後にカビ繁殖されてい
た。本製剤で処理したパンローフの総カビ含量もまた、
対照ローフより小さかった。本製剤は小麦パンの味、香
りも改善した。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:245） (72)発明者 ターヤ・スウォワマライネン フィンランド共和国エスエフ−00950 ヘルシンキ，ヴァルケアランティー 10 アース１ (56)参考文献 特開 昭64−86883（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 1/20 A23K 3/02 A23L 3/3571 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (19)
- 【請求項１】 酵母及びカビ阻害効果を有するラクトバ
シルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳＭ
７０６１）の生物学的に純粋な培養物。 - 【請求項２】 酵母及びカビ阻害効果を有するラクトバ
シルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳＭ
７０６１）を含む細菌製剤。 - 【請求項３】 発酵培地中の細胞懸濁液として、ラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳ
Ｍ７０６１）を含む、請求項２に記載の細菌製剤。 - 【請求項４】 酵母及びカビ阻害効果を有するラクトバ
シルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳＭ
７０６１）とプロピオニバクテリウム属の細菌との組み
合わせを含む細菌製剤。 - 【請求項５】 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサス
ＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）をプロピオニバクテ
リウム シェルマニーＪＳ株（ＤＳＭ７０６７）と共に
含む請求項４に記載の細菌製剤。 - 【請求項６】 発酵培地中の細胞懸濁液として、酵母及
びカビ阻害効果を有するラクトバシルス カゼイ亜種ラ
ムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）をプロピオ
ニバクテリウム シェルマニーＪＳ株（ＤＳＭ７０６
７）と共に含む請求項５に記載の細菌製剤。 - 【請求項７】 ラクトバシルス カゼイ細菌の別の菌株
と組み合わせた、酵母及びカビ阻害効果を有するラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳ
Ｍ７０６１）を含む細菌製剤。 - 【請求項８】 ラクトバシルス カゼイ細菌の別の菌株
と組み合わせた、発酵培地中の細胞懸濁液として、酵母
及びカビ阻害効果を有するラクトバシルスカゼイ亜種ラ
ムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）を含む請求
項７に記載の細菌製剤。 - 【請求項９】 細胞懸濁液が濃縮された請求項３に記載
の細菌製剤。 - 【請求項１０】 細胞懸濁液が凍結乾燥された請求項３
に記載の細菌製剤。 - 【請求項１１】 プロピオン酸塩またはフェニルアラニ
ンなどの酵母およびカビ阻害に使われる伝統的な試薬を
更に含む、請求項２に記載の細菌製剤。 - 【請求項１２】 プロピオン酸塩またはフェニルアラニ
ンなどの酵母およびカビ阻害に使われる伝統的な試薬を
更に含む、請求項４に記載の細菌製剤。 - 【請求項１３】 プロピオン酸塩またはフェニルアラニ
ンなどの酵母およびカビ阻害に使われる伝統的な試薬を
更に含む、請求項７に記載の細菌製剤。 - 【請求項１４】 酵母及びカビ阻害効果を有するラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳ
Ｍ７０６１）を含む細菌製剤を使用する工程を含む、酵
母およびカビの増殖を阻害する方法。 - 【請求項１５】 酵母及びカビ阻害効果を有するラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳ
Ｍ７０６１）を細胞懸濁液として含む細菌製剤を使用す
る工程を含む、請求項１４に記載の酵母及びカビの増殖
を阻害する方法。 - 【請求項１６】 酵母及びカビ阻害効果を有するラクト
バシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（ＤＳ
Ｍ７０６１）とプロピオニバクテリウム属の細菌との組
み合わせを含む細菌製剤を使用する工程を含む、酵母お
よびカビの増殖を阻害する方法。 - 【請求項１７】 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）とプロピオニバク
テリウム シェルマニーＪＳ（ＤＳＭ７０６７）との組
み合わせを含む細菌製剤を使用する工程を含む、請求項
１６に記載の酵母およびカビの増殖を阻害する方法。 - 【請求項１８】 発酵培地中の細胞懸濁液として、ラク
トバシルス カゼイ亜種ラムノサスＬＣ−７０５株（Ｄ
ＳＭ７０６１）とプロピオニバクテリウムシェルマニー
ＪＳ（ＤＳＭ７０６７）との組み合わせを含む細菌製剤
を使用する工程含む、請求項１７に記載の酵母およびカ
ビの増殖を阻害する方法。 - 【請求項１９】 ラクトバシルス カゼイ亜種ラムノサ
スＬＣ−７０５株（ＤＳＭ７０６１）とラクトバシルス
カゼイ細菌の別の菌株との組み合わせを含む細菌製剤
を使用する工程を含む、酵母およびカビの増殖を阻害す
る方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US92269992A | 1992-06-10 | 1992-06-10 | |
| US922699 | 1992-06-10 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05336952A JPH05336952A (ja) | 1993-12-21 |
| JP3001338B2 true JP3001338B2 (ja) | 2000-01-24 |
Family
ID=25447455
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5017591A Expired - Lifetime JP3001338B2 (ja) | 1992-06-10 | 1993-02-04 | 新規の微生物株、その菌株を含む細菌製剤、および酵母およびカビの制御のための上記菌株および製剤の使用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3001338B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0757186B2 (ja) * | 1992-12-18 | 1995-06-21 | 雪印乳業株式会社 | サイレージ調製用乳酸菌製剤 |
| JP5270925B2 (ja) * | 2008-02-07 | 2013-08-21 | 雪印メグミルク株式会社 | 微生物保護剤及び微生物の凍結又は凍結乾燥菌体の製造方法 |
| WO2013153070A1 (en) | 2012-04-09 | 2013-10-17 | Chr. Hansen A/S | Bioprotection using lactobacillus paracasei strains |
| US9485992B2 (en) * | 2012-04-09 | 2016-11-08 | Chr. Hansen A/S | Bioprotection using Lactobacillus rhamnosus strains |
| WO2015161877A1 (en) * | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Molinos Rio De La Plata, S.A. | A synergistic composition comprising a mix of bacteria of the genera lactobacillus and propionobacterium freudenreichii ssp shermanii and uses thereof |
| JP2018100228A (ja) * | 2016-12-19 | 2018-06-28 | 国立大学法人広島大学 | 抗菌用組成物、食品、及び菌体若しくは菌体培養物又はこれらの抽出物の製造方法 |
-
1993
- 1993-02-04 JP JP5017591A patent/JP3001338B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05336952A (ja) | 1993-12-21 |
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