JPH0757186B2 - サイレージ調製用乳酸菌製剤 - Google Patents
サイレージ調製用乳酸菌製剤Info
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- JPH0757186B2 JPH0757186B2 JP4355857A JP35585792A JPH0757186B2 JP H0757186 B2 JPH0757186 B2 JP H0757186B2 JP 4355857 A JP4355857 A JP 4355857A JP 35585792 A JP35585792 A JP 35585792A JP H0757186 B2 JPH0757186 B2 JP H0757186B2
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- lactic acid
- lactobacillus
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- silage
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、牧草、飼料作物のサイ
レージ調製用新規乳酸菌製剤に関する。更に詳しくは、
ラクトバチルス属細菌からなり、４５℃の高温時におい
ても高い乳酸生成能を有し、サイレージのｐＨを４．２
以下に保持することのできるサイレージ調製用乳酸菌製
剤に関する。
レージ調製用新規乳酸菌製剤に関する。更に詳しくは、
ラクトバチルス属細菌からなり、４５℃の高温時におい
ても高い乳酸生成能を有し、サイレージのｐＨを４．２
以下に保持することのできるサイレージ調製用乳酸菌製
剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】サイレージとは牧草、飼料作物を嫌気的
条件下で乳酸発酵させたもので、牧草、飼料作物の貯蔵
のために利用されている。良質のサイレージを調製する
上で重要なことは、好気発酵を抑制すること及び酪酸発
酵を阻止することである。前者を達成するには、サイレ
ージ原料をサイロに詰めたとき早期に嫌気状態にすれば
よく、これはサイロの密封を素早く完全に行うことによ
ってある程度解決できる。後者の酪酸発酵の抑制は、酪
酸発酵菌の増殖を抑制することによって行うことができ
る。酪酸菌はサイレージのｐＨが４．２以下ではその活
動が抑制されることから、サイレージの乳酸発酵が速や
かに進行しその生産する乳酸によってｐＨが速やかに下
がることが重要である。サイレージの乳酸発酵に与る乳
酸菌としては、トウモロコシサイレージから単離された
例としてラクトバチルス・プランタルム（Lactobacillu
s plantarum）、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacil
lus casei)、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillu
s brevis）などのラクトバチルス属細菌、ストレプトコ
ッカス・ラクチス（Streptococcus lactis）やストレプ
トコッカス・ボビス（Storeptococcus bovis）などのス
トレプトコッカス属細菌、ロイコノストック（Leuconos
toc）属細菌、ペディオコッカス(Pediococcus) 属細菌
などが知られている（ジャーナル・オブ・アプライド・
バクテリオロジー（Journal of Applied Bacteriology)
第６０巻、８３−９２頁、１９８６年）。これらの中で
も、乳酸菌発酵を優勢にし良質のサイレージを調製する
には、乳酸菌はホモ型発酵菌であることが好ましい。従
来、酪酸菌をはじめ、カビ、酵母など良質サイレージ調
製に好ましくない菌の増殖を阻止し、速やかに効率のよ
い乳酸発酵を促すために、サイレージ調製時に種々の乳
酸菌を添加することが行われている。例えば、特開平1-
211487号公報にはラクトバチルス・カゼイの添加が、特
公平1-18716号公報にはラクトバチルス・プランタルム
類縁菌が、特公平3-34909号公報にはラクトバチルス・
キシローサス（Lactobacillus xylosus）が、それぞれ
サイレージ調製用乳酸菌として開示されている。また、
ラクトバチルス属菌としては、特開平2-257875号、特開
平3-285674号および特開平3-285675号公報にも開示され
ている。
条件下で乳酸発酵させたもので、牧草、飼料作物の貯蔵
のために利用されている。良質のサイレージを調製する
上で重要なことは、好気発酵を抑制すること及び酪酸発
酵を阻止することである。前者を達成するには、サイレ
ージ原料をサイロに詰めたとき早期に嫌気状態にすれば
よく、これはサイロの密封を素早く完全に行うことによ
ってある程度解決できる。後者の酪酸発酵の抑制は、酪
酸発酵菌の増殖を抑制することによって行うことができ
る。酪酸菌はサイレージのｐＨが４．２以下ではその活
動が抑制されることから、サイレージの乳酸発酵が速や
かに進行しその生産する乳酸によってｐＨが速やかに下
がることが重要である。サイレージの乳酸発酵に与る乳
酸菌としては、トウモロコシサイレージから単離された
例としてラクトバチルス・プランタルム（Lactobacillu
s plantarum）、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacil
lus casei)、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillu
s brevis）などのラクトバチルス属細菌、ストレプトコ
ッカス・ラクチス（Streptococcus lactis）やストレプ
トコッカス・ボビス（Storeptococcus bovis）などのス
トレプトコッカス属細菌、ロイコノストック（Leuconos
toc）属細菌、ペディオコッカス(Pediococcus) 属細菌
などが知られている（ジャーナル・オブ・アプライド・
バクテリオロジー（Journal of Applied Bacteriology)
第６０巻、８３−９２頁、１９８６年）。これらの中で
も、乳酸菌発酵を優勢にし良質のサイレージを調製する
には、乳酸菌はホモ型発酵菌であることが好ましい。従
来、酪酸菌をはじめ、カビ、酵母など良質サイレージ調
製に好ましくない菌の増殖を阻止し、速やかに効率のよ
い乳酸発酵を促すために、サイレージ調製時に種々の乳
酸菌を添加することが行われている。例えば、特開平1-
211487号公報にはラクトバチルス・カゼイの添加が、特
公平1-18716号公報にはラクトバチルス・プランタルム
類縁菌が、特公平3-34909号公報にはラクトバチルス・
キシローサス（Lactobacillus xylosus）が、それぞれ
サイレージ調製用乳酸菌として開示されている。また、
ラクトバチルス属菌としては、特開平2-257875号、特開
平3-285674号および特開平3-285675号公報にも開示され
ている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】これらの乳酸菌を使用
しても、原料草の状態やサイロの密封状態などによって
は他の微生物を抑えられず必ずしも良質なサイレージ調
製がなされていない場合があり、もっと強力でより速や
かに増殖しｐＨを急速に下げるサイレージ調製用乳酸菌
が望まれていた。また、九州地方など夏場気温の高い酪
農地帯では現在の乳酸菌製剤ではその作用が十分発揮さ
れない場合もあり、高温でも活性を維持している乳酸菌
の添加が望まれている。本発明は、従来の乳酸菌よりも
非常に短時間で増殖し、しかも比較的高温環境下でも有
効に働くサイレージ用乳酸菌を提供することを目的とす
るものである。
しても、原料草の状態やサイロの密封状態などによって
は他の微生物を抑えられず必ずしも良質なサイレージ調
製がなされていない場合があり、もっと強力でより速や
かに増殖しｐＨを急速に下げるサイレージ調製用乳酸菌
が望まれていた。また、九州地方など夏場気温の高い酪
農地帯では現在の乳酸菌製剤ではその作用が十分発揮さ
れない場合もあり、高温でも活性を維持している乳酸菌
の添加が望まれている。本発明は、従来の乳酸菌よりも
非常に短時間で増殖し、しかも比較的高温環境下でも有
効に働くサイレージ用乳酸菌を提供することを目的とす
るものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記の問題
点を克服するべく鋭意研究を行った結果、ラクトバチル
ス属桿菌でホモ型乳酸発酵を行う細菌の中でも発酵乳な
どに含まれているラクトバチルス・カゼイ・サブスピー
シーズ・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ． ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、消
化管中などに見いだされるラクトバチルス・サリバリウ
ス・サブスピーシーズ・サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ ｓｕｂｓｐ．
ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）および発酵乳などに見いだされ
るラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ
・ラクチス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒ
ｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）のなかの
特定の乳酸菌の添加によって意外にも上記の目的が達成
されることを見いだし、本発明を完成するに至った。即
ち、本発明によれば、ラクトバチルス属のホモ型乳酸発
酵桿菌であるラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシー
ズ・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａ
ｓｅｉ ｓｕｂｓｐ． ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクト
バチルス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバリ
ウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｓａｌｉｖａｒｉｕ
ｓ ｓｕｂｓｐ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）及びラクトバ
チルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクチス
（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉ
ｉ ｓｕｂｃｐ． ｌａｃｔｉｓ）の少なくとも１種か
らなり、かつサイレージ調製時に、４５℃の高温条件に
おいても高い乳酸生成能を有し、サイレージのｐＨを
４．２以下に保持する性質をもつ乳酸菌からなるサイレ
ージ調製用乳酸菌製剤が提供される。本発明では、上記
乳酸菌は、各々単独で使用してもよいし、併用してもよ
い。本発明で使用できるラクトバチルス・カゼイ・サブ
スピーシーズ・ラムノーサスの菌株の好ましい例として
ＳＢＴ−２３００株（微工研菌寄第１３２４５号）が挙
げられる。また、本発明で使用できるラクトバチルス・
サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバリウスの菌株
の好ましい例としてＳＢＴ−２６７０株（微工研菌寄第
１３２４７号）が挙げられる。また、本発明で使用でき
るラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ
・ラクチスの菌株の好ましい例としてＳＢＴ−２６６４
株（微工研菌寄第１３２４６号）が挙げられる。これら
の菌株は、発酵乳及び乳児糞便から単離されたものであ
って、いずれも次の形態的性状を示す。 （１）巾０．５〜１．１μｍ、長さ２〜７μｍの桿菌 （２）グラム染色性；陽性 （３）芽胞の形成；なし （４）運 動 性；なし （５）好気性生育能及び嫌気性生育能を有する また、これらの菌株は、次の培地でよく生育し、ＢＬ寒
天培地で３５℃で、３日間嫌気培養するとコロニーを形
成する。また、これらの菌株の生理的性質を表１に示
す。
点を克服するべく鋭意研究を行った結果、ラクトバチル
ス属桿菌でホモ型乳酸発酵を行う細菌の中でも発酵乳な
どに含まれているラクトバチルス・カゼイ・サブスピー
シーズ・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ． ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、消
化管中などに見いだされるラクトバチルス・サリバリウ
ス・サブスピーシーズ・サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ ｓｕｂｓｐ．
ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）および発酵乳などに見いだされ
るラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ
・ラクチス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒ
ｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）のなかの
特定の乳酸菌の添加によって意外にも上記の目的が達成
されることを見いだし、本発明を完成するに至った。即
ち、本発明によれば、ラクトバチルス属のホモ型乳酸発
酵桿菌であるラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシー
ズ・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａ
ｓｅｉ ｓｕｂｓｐ． ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクト
バチルス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバリ
ウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｓａｌｉｖａｒｉｕ
ｓ ｓｕｂｓｐ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）及びラクトバ
チルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクチス
（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉ
ｉ ｓｕｂｃｐ． ｌａｃｔｉｓ）の少なくとも１種か
らなり、かつサイレージ調製時に、４５℃の高温条件に
おいても高い乳酸生成能を有し、サイレージのｐＨを
４．２以下に保持する性質をもつ乳酸菌からなるサイレ
ージ調製用乳酸菌製剤が提供される。本発明では、上記
乳酸菌は、各々単独で使用してもよいし、併用してもよ
い。本発明で使用できるラクトバチルス・カゼイ・サブ
スピーシーズ・ラムノーサスの菌株の好ましい例として
ＳＢＴ−２３００株（微工研菌寄第１３２４５号）が挙
げられる。また、本発明で使用できるラクトバチルス・
サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバリウスの菌株
の好ましい例としてＳＢＴ−２６７０株（微工研菌寄第
１３２４７号）が挙げられる。また、本発明で使用でき
るラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ
・ラクチスの菌株の好ましい例としてＳＢＴ−２６６４
株（微工研菌寄第１３２４６号）が挙げられる。これら
の菌株は、発酵乳及び乳児糞便から単離されたものであ
って、いずれも次の形態的性状を示す。 （１）巾０．５〜１．１μｍ、長さ２〜７μｍの桿菌 （２）グラム染色性；陽性 （３）芽胞の形成；なし （４）運 動 性；なし （５）好気性生育能及び嫌気性生育能を有する また、これらの菌株は、次の培地でよく生育し、ＢＬ寒
天培地で３５℃で、３日間嫌気培養するとコロニーを形
成する。また、これらの菌株の生理的性質を表１に示
す。
【０００５】
【表１】
【０００６】本発明の乳酸菌製剤は次のようにして製造
することができる。上記の乳酸菌の培養増殖は、通常の
乳酸菌用の培地を用いて行うことができる。培地として
は、通常乳酸菌の培養に用いられる培地であれば特に限
定されないが、例えばＧＹＰ培地（小崎道雄ら(1992)、
乳酸菌実験マニュアル、朝倉書店刊）、ＭＲＳ培地（de
Man, J.C. et al.(1960), Journal of Applied Bacte
riology, Vol.23, 130-135）や特公平4-49382号公報に
記載のルーサン煮汁培地を使用することができる。培養
条件については特に限定されないが、通常２５〜４５℃
で培養することができる。培養時間は増殖スケールによ
って左右されるが、本発明の乳酸菌は非常に増殖速度が
速く、通常１２〜２４時間で定常期に達するので、他の
乳酸菌製剤よりも比較的短時間で製造することができ
る。培養増殖した乳酸菌は、基材とともに凍結乾燥ある
いは基材に吸着乾燥して製剤化することができる。凍結
乾燥用基材としては、例えば、デキストリン、デンプ
ン、脱脂粉乳や炭酸カルシウムなどが挙げられ、吸着乾
燥用基材としてはブドウ糖などの糖類や炭酸カルシウ
ム、ゼオライト、小麦粉、ふすま、脱脂粉乳、ホエー、
デンプン、コーングリッツなどが挙げられるがこれらに
限定されるものではない。基材の量については特に限定
的ではないが、製剤中の菌数が極端に少ないとサイレー
ジ原料草に添加すべき製剤の量が多くなりすぎるし乳酸
菌の安定性の面からも好ましくない。通常、製剤１ｇあ
たり１０7 以上の乳酸菌を含有するようにするのが好ま
しい。菌数の上限は限定されないが、製造上吸着乾燥で
は通常１０9 個／ｇ、凍結乾燥では１０11個／ｇくらい
である。
することができる。上記の乳酸菌の培養増殖は、通常の
乳酸菌用の培地を用いて行うことができる。培地として
は、通常乳酸菌の培養に用いられる培地であれば特に限
定されないが、例えばＧＹＰ培地（小崎道雄ら(1992)、
乳酸菌実験マニュアル、朝倉書店刊）、ＭＲＳ培地（de
Man, J.C. et al.(1960), Journal of Applied Bacte
riology, Vol.23, 130-135）や特公平4-49382号公報に
記載のルーサン煮汁培地を使用することができる。培養
条件については特に限定されないが、通常２５〜４５℃
で培養することができる。培養時間は増殖スケールによ
って左右されるが、本発明の乳酸菌は非常に増殖速度が
速く、通常１２〜２４時間で定常期に達するので、他の
乳酸菌製剤よりも比較的短時間で製造することができ
る。培養増殖した乳酸菌は、基材とともに凍結乾燥ある
いは基材に吸着乾燥して製剤化することができる。凍結
乾燥用基材としては、例えば、デキストリン、デンプ
ン、脱脂粉乳や炭酸カルシウムなどが挙げられ、吸着乾
燥用基材としてはブドウ糖などの糖類や炭酸カルシウ
ム、ゼオライト、小麦粉、ふすま、脱脂粉乳、ホエー、
デンプン、コーングリッツなどが挙げられるがこれらに
限定されるものではない。基材の量については特に限定
的ではないが、製剤中の菌数が極端に少ないとサイレー
ジ原料草に添加すべき製剤の量が多くなりすぎるし乳酸
菌の安定性の面からも好ましくない。通常、製剤１ｇあ
たり１０7 以上の乳酸菌を含有するようにするのが好ま
しい。菌数の上限は限定されないが、製造上吸着乾燥で
は通常１０9 個／ｇ、凍結乾燥では１０11個／ｇくらい
である。
【０００７】本発明の乳酸菌製剤は、種々の牧草、飼料
作物のサイレージ調製に使用することができる。適用で
きる牧草、飼料作物の種類は特に限定されないが、オー
チャードグラス、チモシー、クローバ、アルファルフ
ァ、イタリアンライグラスなどの牧草、トウモロコシ、
ソルガムなどの飼料作物、稲わら、麦わらなどの藁類、
ビール粕、豆腐粕、酢粕などの食品製造残渣などが挙げ
られる。本発明の乳酸菌製剤は、これらのサイレージ材
料１ｇあたり菌数１０4 〜１０7 個になるように添加す
る。上述のように製剤１ｇあたり１０7 〜１０11個の乳
酸菌を含有するので、材料に添加する場合は上記の添加
量になるように加減して材料に散布すればよい。材料に
添加する場合は、粉状で、あるいは適当な容量の水に溶
解して散布することができる。必要に応じて、セルラー
ゼ、ヘミセルラーゼなどの酵素と併用することもでき
る。
作物のサイレージ調製に使用することができる。適用で
きる牧草、飼料作物の種類は特に限定されないが、オー
チャードグラス、チモシー、クローバ、アルファルフ
ァ、イタリアンライグラスなどの牧草、トウモロコシ、
ソルガムなどの飼料作物、稲わら、麦わらなどの藁類、
ビール粕、豆腐粕、酢粕などの食品製造残渣などが挙げ
られる。本発明の乳酸菌製剤は、これらのサイレージ材
料１ｇあたり菌数１０4 〜１０7 個になるように添加す
る。上述のように製剤１ｇあたり１０7 〜１０11個の乳
酸菌を含有するので、材料に添加する場合は上記の添加
量になるように加減して材料に散布すればよい。材料に
添加する場合は、粉状で、あるいは適当な容量の水に溶
解して散布することができる。必要に応じて、セルラー
ゼ、ヘミセルラーゼなどの酵素と併用することもでき
る。
【０００８】
製造例１ ラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノー
サスSBT-2300株及びラクトバチルス・サリバリウス・サ
ブスピーシーズ・サリバリウスSBT-2670株それぞれブリ
ックス リバー ブロス培地（以下、ＢＬＢ培地と略
す）に接種し、３５℃で１６時間培養を行った。得られ
た培養物のそれぞれ０．２ｍｌを２０ｍｌのルーサン煮
汁培地（特開昭６４−１０９８１号公報に記載の方法に
より調製）に接種し、２４時間、３５℃で培養後、更に
その全量を２ｌのルーサン煮汁培地に接種し同じ条件で
培養した。これに同量の２４％ショ糖溶液を混合後、流
動乾燥機（大河原製作所製、ＦＢＳ−５型）でコーング
リッツ又は小麦粉に吸着させて乾燥し、各々の乳酸菌製
剤を得た。
サスSBT-2300株及びラクトバチルス・サリバリウス・サ
ブスピーシーズ・サリバリウスSBT-2670株それぞれブリ
ックス リバー ブロス培地（以下、ＢＬＢ培地と略
す）に接種し、３５℃で１６時間培養を行った。得られ
た培養物のそれぞれ０．２ｍｌを２０ｍｌのルーサン煮
汁培地（特開昭６４−１０９８１号公報に記載の方法に
より調製）に接種し、２４時間、３５℃で培養後、更に
その全量を２ｌのルーサン煮汁培地に接種し同じ条件で
培養した。これに同量の２４％ショ糖溶液を混合後、流
動乾燥機（大河原製作所製、ＦＢＳ−５型）でコーング
リッツ又は小麦粉に吸着させて乾燥し、各々の乳酸菌製
剤を得た。
【０００９】製造例２ 製造例１で得られる培養物を更に３０ｌのルーサン煮汁
培地に接種して培養後、限外ろ過膜（アミコン社製、限
外分子量１０万）で３ｌまで濃縮し、同量の２４％ショ
糖溶液を混合後、製造例１と同様の方法でコーングリッ
ツ又は小麦粉に吸着乾燥させた。 製造例３ 製造例１で得られた培養物を特開昭６４−１０９８１号
公報記載の方法で乾燥させた。すなわち、製造例１で得
られた培養物を流動乾燥機を用い、吸入温度５０℃、排
気温度２５〜２８℃で５分間乾燥し、水分６．４％の乾
燥粉末を得た。
培地に接種して培養後、限外ろ過膜（アミコン社製、限
外分子量１０万）で３ｌまで濃縮し、同量の２４％ショ
糖溶液を混合後、製造例１と同様の方法でコーングリッ
ツ又は小麦粉に吸着乾燥させた。 製造例３ 製造例１で得られた培養物を特開昭６４−１０９８１号
公報記載の方法で乾燥させた。すなわち、製造例１で得
られた培養物を流動乾燥機を用い、吸入温度５０℃、排
気温度２５〜２８℃で５分間乾燥し、水分６．４％の乾
燥粉末を得た。
【００１０】
【実施例１】培養試験 ラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノー
サスＳＢＴ−２３００株、ラクトバチルス・サリバリウ
ス・サブスピーシーズ・サリバリウスＳＢＴ−２６７０
株、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシー
ズ・ラクチスＳＢＴ−２６６４株それぞれブリックス
リバー ブロス培地（以下、ＢＬＢ培地と略す）に接種
し、３５℃で１６時間培養を行った。培養物を特開昭６
４−１０９８１号公報に記載の２％ブドウ糖添加ルーサ
ン培地に１％（ｖ／ｖ）接種し、３８℃で１６時間前培
養した。得られた培養物を更に２％ブドウ糖添加ルーサ
ン培地に１％（ｖ／ｖ）接種し、３８℃で培養した。接
種直後（０時間後）、４、８、１２、１６、２０及び２
４時間後に培養試料を採取しｐＨ、酸度、生菌数を測定
した。ｐＨは１０℃下でガラス電極ｐＨメーターにより
測定した。酸度（％）は各試料９．０ｇを蒸留水で３倍
に希釈し、０．１Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ８．０
（ｐＨメーターによる確認）に滴定した量から乳酸等量
（％）を求めた。生菌数は生理食塩水を希釈液に用い、
平板希釈法により測定した。対照として市販のサイレー
ジ添加用乳酸菌スノーラクトＬ（雪印種苗株式会社製）
の成分であるラクトバチルス・カゼイＳＢＴ−２２３２
株を使用して同様に行った。結果を表２及び図１〜３に
示す。これらの結果から明らかなように本発明の乳酸菌
はいずれも従来のサイレージ用乳酸菌であるラクトバチ
ルス・カゼイよりも初期の増殖速度が早く、ｐＨの低下
及び乳酸の生成が速いことが判明した。
サスＳＢＴ−２３００株、ラクトバチルス・サリバリウ
ス・サブスピーシーズ・サリバリウスＳＢＴ−２６７０
株、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシー
ズ・ラクチスＳＢＴ−２６６４株それぞれブリックス
リバー ブロス培地（以下、ＢＬＢ培地と略す）に接種
し、３５℃で１６時間培養を行った。培養物を特開昭６
４−１０９８１号公報に記載の２％ブドウ糖添加ルーサ
ン培地に１％（ｖ／ｖ）接種し、３８℃で１６時間前培
養した。得られた培養物を更に２％ブドウ糖添加ルーサ
ン培地に１％（ｖ／ｖ）接種し、３８℃で培養した。接
種直後（０時間後）、４、８、１２、１６、２０及び２
４時間後に培養試料を採取しｐＨ、酸度、生菌数を測定
した。ｐＨは１０℃下でガラス電極ｐＨメーターにより
測定した。酸度（％）は各試料９．０ｇを蒸留水で３倍
に希釈し、０．１Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ８．０
（ｐＨメーターによる確認）に滴定した量から乳酸等量
（％）を求めた。生菌数は生理食塩水を希釈液に用い、
平板希釈法により測定した。対照として市販のサイレー
ジ添加用乳酸菌スノーラクトＬ（雪印種苗株式会社製）
の成分であるラクトバチルス・カゼイＳＢＴ−２２３２
株を使用して同様に行った。結果を表２及び図１〜３に
示す。これらの結果から明らかなように本発明の乳酸菌
はいずれも従来のサイレージ用乳酸菌であるラクトバチ
ルス・カゼイよりも初期の増殖速度が早く、ｐＨの低下
及び乳酸の生成が速いことが判明した。
【００１１】
【表２】
【００１２】
【実施例２】培養試験 実施例１と同様の方法で前培養したラクトバチルス・カ
ゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサスＳＢＴ−２３０
０株、ラクトバチルス・サリバリウス・サブスピーシー
ズ・サリバリウスＳＢＴ−２６７０株、ラクトバチルス
・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクチスＳＢＴ
−２６６４株それぞれを、培養温度を３５℃及び４５℃
の２つの条件に設定する以外は実施例１と同様の方法で
培養し、８、１６及び３２時間後に培養物試料を採取し
ｐＨと酸度（％）を測定した。対照として実施例１と同
じラクトバチルス・カゼイＳＢＴ−２２３２株を使用し
た。結果を表３に示す。結果から明らかなように本発明
の乳酸菌は４５℃の高温環境下でも菌の活性は高く、従
来のラクトバチルス・カゼイよりもｐＨが速やかに低下
し乳酸量（酸度）が増加した。
ゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサスＳＢＴ−２３０
０株、ラクトバチルス・サリバリウス・サブスピーシー
ズ・サリバリウスＳＢＴ−２６７０株、ラクトバチルス
・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクチスＳＢＴ
−２６６４株それぞれを、培養温度を３５℃及び４５℃
の２つの条件に設定する以外は実施例１と同様の方法で
培養し、８、１６及び３２時間後に培養物試料を採取し
ｐＨと酸度（％）を測定した。対照として実施例１と同
じラクトバチルス・カゼイＳＢＴ−２２３２株を使用し
た。結果を表３に示す。結果から明らかなように本発明
の乳酸菌は４５℃の高温環境下でも菌の活性は高く、従
来のラクトバチルス・カゼイよりもｐＨが速やかに低下
し乳酸量（酸度）が増加した。
【００１３】
【表３】
【００１４】
【実施例３】サイレージ添加試験（アルファルファ ） 収穫したアルファルファ材料草を軽く予乾し、マウント
カッターで１５〜２５ｍｍに切断後、製造例２で製造し
た乳酸菌製剤をそれぞれ下記の量添加しブドウ糖を０．
５５％加えて良く混合し、１ｌの実験ポリサイロに詰め
込んだ。同じサイレージ調製を複数行い、各乳酸菌製剤
について１５、２５、３５、４５℃の温度条件で３２日
間貯蔵した。貯蔵期間中、ラクトバチルス・カゼイ・サ
ブスピーシーズ・ラムノーサスSBT-2300株の製剤を貯蔵
温度３５℃の条件で使用したものについては貯蔵１、
２、４、８、１６日後に試料を採取しｐＨを測定した。
また、全ての試料について３２日後にｐＨを測定した。
対照として市販のサイレージ用乳酸菌製剤スノーラクト
Ｌ（雪印種苗株式会社製）を添加したもの（SBT-2232
区）、乳酸菌を吸着させていない基材とブドウ糖のみを
添加したもの（無接種区）および何も添加しないもの
（無添加区）を調製し同様の試験を行った。 乳酸菌製剤添加量 SBT-2300株 ６．９×１０5 ｃｆ
ｕ／材料草ｇ SBT-2232株 ２×１０5 ｃｆｕ／材料草ｇ 結果を表４及び５に示す。表４の結果から明らかなよう
に本発明の各乳酸菌製剤は１５℃の低温から４５℃の高
温まで広い温度域で有効に働く。また表４から明らかな
ように本発明の乳酸菌製剤は従来の乳酸菌製剤に比較し
てサイレージ調製後速やかにｐＨを下げるものである。
カッターで１５〜２５ｍｍに切断後、製造例２で製造し
た乳酸菌製剤をそれぞれ下記の量添加しブドウ糖を０．
５５％加えて良く混合し、１ｌの実験ポリサイロに詰め
込んだ。同じサイレージ調製を複数行い、各乳酸菌製剤
について１５、２５、３５、４５℃の温度条件で３２日
間貯蔵した。貯蔵期間中、ラクトバチルス・カゼイ・サ
ブスピーシーズ・ラムノーサスSBT-2300株の製剤を貯蔵
温度３５℃の条件で使用したものについては貯蔵１、
２、４、８、１６日後に試料を採取しｐＨを測定した。
また、全ての試料について３２日後にｐＨを測定した。
対照として市販のサイレージ用乳酸菌製剤スノーラクト
Ｌ（雪印種苗株式会社製）を添加したもの（SBT-2232
区）、乳酸菌を吸着させていない基材とブドウ糖のみを
添加したもの（無接種区）および何も添加しないもの
（無添加区）を調製し同様の試験を行った。 乳酸菌製剤添加量 SBT-2300株 ６．９×１０5 ｃｆ
ｕ／材料草ｇ SBT-2232株 ２×１０5 ｃｆｕ／材料草ｇ 結果を表４及び５に示す。表４の結果から明らかなよう
に本発明の各乳酸菌製剤は１５℃の低温から４５℃の高
温まで広い温度域で有効に働く。また表４から明らかな
ように本発明の乳酸菌製剤は従来の乳酸菌製剤に比較し
てサイレージ調製後速やかにｐＨを下げるものである。
【００１５】
【表４】
【００１６】
【表５】
【００１７】
【実施例４】サイレージ添加試験（イタリアンライグラス ） 材料草としてイタリアンライグラスを用い、乳酸菌製剤
として製造例１で調製したものを使用し、ブドウ糖は添
加しない以外は実施例３と同様の方法で材料草を実験ポ
リサイロに詰めた。それぞれの生菌数は１０5 ｃｆｕ／
材料草ｇに調製した。各ポリサイロを３０℃で貯蔵し貯
蔵直後（０日後）、１、３、３０日後に一部試料を採取
してｐＨを測定した。結果を表６に示す。表６から明ら
かなように本発明の乳酸菌製剤を用いると貯蔵後、速や
かにサイレージのｐＨを下げることができた。
として製造例１で調製したものを使用し、ブドウ糖は添
加しない以外は実施例３と同様の方法で材料草を実験ポ
リサイロに詰めた。それぞれの生菌数は１０5 ｃｆｕ／
材料草ｇに調製した。各ポリサイロを３０℃で貯蔵し貯
蔵直後（０日後）、１、３、３０日後に一部試料を採取
してｐＨを測定した。結果を表６に示す。表６から明ら
かなように本発明の乳酸菌製剤を用いると貯蔵後、速や
かにサイレージのｐＨを下げることができた。
【００１８】
【表６】
【００１９】
【実施例５】併用効果（培地試験） 実施例２と同様の方法でラクトバチルス・カゼイ・サブ
スピーシーズ・ラムノーサスＳＢＴ−２３００株、ラク
トバチルス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバ
リウスＳＢＴ−２６７０株及びラクトパチルス・デルブ
ルッキー・サブスピーシーズ・ラクチスＳＢＴ−２６６
４株を２種あるいは３種併用して培養を行い、貯蔵温度
３５℃及び４５℃において貯蔵し、貯蔵中のｐＨと酸度
（乳酸等量％）を経時的に測定した。結果を表７及び図
４〜７に示す。結果から明らかなように本発明の乳酸菌
ラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノー
サス、ラクトバチルス・サリバリウス・サブスピーシー
ズ・サリバリウスおよびラクトバチルス・デルブルッキ
ー・サブスピーシーズ・ラクチスを併用することによ
り、３５℃及び４５℃のいずれの貯蔵温度でもｐＨの低
下と酸度の上昇に関し単独使用と同等あるいはそれ以上
の効果を示した。
スピーシーズ・ラムノーサスＳＢＴ−２３００株、ラク
トバチルス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバ
リウスＳＢＴ−２６７０株及びラクトパチルス・デルブ
ルッキー・サブスピーシーズ・ラクチスＳＢＴ−２６６
４株を２種あるいは３種併用して培養を行い、貯蔵温度
３５℃及び４５℃において貯蔵し、貯蔵中のｐＨと酸度
（乳酸等量％）を経時的に測定した。結果を表７及び図
４〜７に示す。結果から明らかなように本発明の乳酸菌
ラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノー
サス、ラクトバチルス・サリバリウス・サブスピーシー
ズ・サリバリウスおよびラクトバチルス・デルブルッキ
ー・サブスピーシーズ・ラクチスを併用することによ
り、３５℃及び４５℃のいずれの貯蔵温度でもｐＨの低
下と酸度の上昇に関し単独使用と同等あるいはそれ以上
の効果を示した。
【００２０】
【表７】
【００２１】
【発明の効果】本発明のサイレージ調製用乳酸菌製剤
は、従来の乳酸菌に比較して非常に増殖が速く従来の乳
酸菌よりも速やかにサイレージのｐＨを下げて他の好ま
しくない菌の増殖を抑えることができ、それによって良
質のサイレージを調製することができる。また、この増
殖活性は環境温度が４５℃の高温でもほとんど変わら
ず、サイレージのｐＨを４．２以下に保持し、寒冷地か
ら高温地まで広い範囲でサイレージ調製に使用すること
ができる。
は、従来の乳酸菌に比較して非常に増殖が速く従来の乳
酸菌よりも速やかにサイレージのｐＨを下げて他の好ま
しくない菌の増殖を抑えることができ、それによって良
質のサイレージを調製することができる。また、この増
殖活性は環境温度が４５℃の高温でもほとんど変わら
ず、サイレージのｐＨを４．２以下に保持し、寒冷地か
ら高温地まで広い範囲でサイレージ調製に使用すること
ができる。
【図１】本発明の乳酸菌株SBT-2300株の３８℃での培養
によるｐＨの経時的変化を示す。
によるｐＨの経時的変化を示す。
【図２】本発明の乳酸菌株SBT-2670株の３８℃での培養
によるｐＨの経時的変化を示す。
によるｐＨの経時的変化を示す。
【図３】本発明の乳酸菌株SBT-2664株の３８℃での培養
によるｐＨの経時的変化を示す。
によるｐＨの経時的変化を示す。
【図４】本発明の乳酸菌株SBT-2300株とSBT-2670株とを
併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的変化を示す。
併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的変化を示す。
【図５】本発明の乳酸菌株SBT-2670株とSBT-2664株とを
併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的変化を示す。
併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的変化を示す。
【図６】本発明の乳酸菌株SBT-2300株とSBT-2664株とを
併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的変化を示す。
併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的変化を示す。
【図７】本発明の乳酸菌株SBT-2300株とSBT-2670株とSB
T-2664株とを併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的
変化を示す。
T-2664株とを併用し４５℃での培養によるｐＨの経時的
変化を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山下 征夫 北海道江別市野幌東町26番14号 (72)発明者 望月 英輔 埼玉県大宮市大字東新井710−50 東新井 団地３−201 (72)発明者 豊田 修次 埼玉県所沢市緑町３丁目12番５号 煉瓦館 11 202号室 (56)参考文献 特開 平１−211487（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−257875（ＪＰ，Ａ) 特開 昭64−16562（ＪＰ，Ａ) 特開 平５−336952（ＪＰ，Ａ) 欧州特許出願公開221499（ＥＰ，Ａ)
Claims (4)
- 【請求項１】 ラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシ
ーズ・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃ
ａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ． ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラク
トバチルス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サリバ
リウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒ
ｉｕｓ ｓｕｂｓｐ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）およびラ
クトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラ
クチス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅ
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）のうち少なく
とも１種から選択され、かつサイレージ調製時に、４５
℃の高温条件においても、高い乳酸生成能を有しサイレ
ージのｐＨを４．２以下に保持する性質を有する乳酸菌
よりなるサイレージ調製用乳酸菌製剤。 - 【請求項２】 ラクトバチルス・カゼイ・サブスピーシ
ーズ・ラムノーサスが、ＳＢＴ−２３００株（微工研菌
寄第１３２４５号）である請求項１記載の乳酸菌製剤。 - 【請求項３】 ラクトバチルス・デルブルッキー・サブ
スピーシーズ・ラクチスが、ＳＢＴ−２６６４株（微工
研菌寄第１３２４６号）である請求項１記載の乳酸菌製
剤。 - 【請求項４】 ラクトバチルス・サリバリウス・サブス
ピーシーズ・サリバリウスが、ＳＢＴ−２６７０株（微
工研菌寄第１３２４７号）である請求項１記載の乳酸菌
製剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4355857A JPH0757186B2 (ja) | 1992-12-18 | 1992-12-18 | サイレージ調製用乳酸菌製剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4355857A JPH0757186B2 (ja) | 1992-12-18 | 1992-12-18 | サイレージ調製用乳酸菌製剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06217713A JPH06217713A (ja) | 1994-08-09 |
| JPH0757186B2 true JPH0757186B2 (ja) | 1995-06-21 |
Family
ID=18446087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4355857A Expired - Lifetime JPH0757186B2 (ja) | 1992-12-18 | 1992-12-18 | サイレージ調製用乳酸菌製剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0757186B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110591987A (zh) * | 2019-11-01 | 2019-12-20 | 四川农业大学 | 唾液乳杆菌358及其应用、青贮饲料添加剂、青贮饲料 |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PT1274318E (pt) * | 2000-04-07 | 2011-09-07 | Nestec Sa | Hidrolisado de proteínas de cultura |
| JP2006042647A (ja) * | 2004-08-03 | 2006-02-16 | National Agriculture & Bio-Oriented Research Organization | 新規乳酸菌株および当該菌株によるサイレージ好気的変敗の抑制法 |
| JP4997467B2 (ja) * | 2006-08-02 | 2012-08-08 | 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 | サイレージ調製用添加剤及び該サイレージ調製用添加剤を用いるサイレージの調製方法並びにサイレージ調製用キット |
| JP7426820B2 (ja) * | 2019-12-27 | 2024-02-02 | 雪印メグミルク株式会社 | 食後血糖値上昇抑制用組成物及びその製造方法 |
| CN112553103B (zh) * | 2020-10-10 | 2022-09-20 | 重庆市畜牧科学院 | 牛鞭草青贮乳酸菌添加剂及其制备方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4956177A (en) * | 1985-11-04 | 1990-09-11 | Microlife Technics, Inc. | Method for inhibiting fungi |
| JPS6416562A (en) * | 1987-07-10 | 1989-01-20 | Kubota Ltd | Production of silage |
| JPH0763358B2 (ja) * | 1988-02-18 | 1995-07-12 | 全国酪農業協同組合連合会 | サイレージ調製用乳酸菌スターター |
| JPH06104059B2 (ja) * | 1989-03-30 | 1994-12-21 | 株式会社クボタ | 新規な乳酸菌 |
| JP3001338B2 (ja) * | 1992-06-10 | 2000-01-24 | ヴァリオ・マイイェリーン・ケスクソスースリーケ | 新規の微生物株、その菌株を含む細菌製剤、および酵母およびカビの制御のための上記菌株および製剤の使用 |
-
1992
- 1992-12-18 JP JP4355857A patent/JPH0757186B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110591987A (zh) * | 2019-11-01 | 2019-12-20 | 四川农业大学 | 唾液乳杆菌358及其应用、青贮饲料添加剂、青贮饲料 |
| CN110591987B (zh) * | 2019-11-01 | 2021-05-14 | 四川农业大学 | 唾液乳杆菌358及其应用、青贮饲料添加剂、青贮饲料 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH06217713A (ja) | 1994-08-09 |
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