JPH0361453A - 飼料保存方法 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は飼料の保存方法、この方法に用いる之h)<
)IyX 乙−’/ /)A(Lactoba′
cillus7)菌株、飼料保存へのこの菌株の利用及
び本発明によって保存された飼料に関する。
)IyX 乙−’/ /)A(Lactoba′
cillus7)菌株、飼料保存へのこの菌株の利用及
び本発明によって保存された飼料に関する。
草のような飼料(飼い葉)の保存では、草から製造した
チョップした飼料(chopped forage)
をサイロに気密に封入して、車中の炭水化物(主として
グルコース、フルクトース、フルクトサン〉を酸に発酵
させる。好ましい条件下では、このような発酵方法によ
って主として乳酸が生ずる。これは高品質のサイレージ
を生じ、発酵損失が小さい。
チョップした飼料(chopped forage)
をサイロに気密に封入して、車中の炭水化物(主として
グルコース、フルクトース、フルクトサン〉を酸に発酵
させる。好ましい条件下では、このような発酵方法によ
って主として乳酸が生ずる。これは高品質のサイレージ
を生じ、発酵損失が小さい。
一般に、発酵は例えば酢酸のような揮発性脂肪酸も飼料
中に生ずる0発酵酸の全てがサイレージ(silage
)のpHを減する0周知のように、飼料の保存はそのp
Hを4以下に減することを必要とし、このことは飼料1
トンにつき成約100当量を必要とする。
中に生ずる0発酵酸の全てがサイレージ(silage
)のpHを減する0周知のように、飼料の保存はそのp
Hを4以下に減することを必要とし、このことは飼料1
トンにつき成約100当量を必要とする。
飼料中で生ずる自由発酵は好ましい発酵方向すなわちで
きるかぎり純粋な乳酸発酵方向へ制御することが困難で
ある。この理由から、保存剤を用いて飼料保存を改良す
ることが試みられている。
きるかぎり純粋な乳酸発酵方向へ制御することが困難で
ある。この理由から、保存剤を用いて飼料保存を改良す
ることが試みられている。
これらの方法の中で最も良く知られた方法は、AIV法
と呼ばれる、エイ、アイ、ヴイルタネン(A、 I
、 Vertanen)が導入した方法であり、この方
法では、有機酸または無機酸のいずれかを飼料に別にま
たは混合物として加える。酸の飼料への添加量は飼料の
pHを4以下に減するほどの量である。現在、大ていの
場合にギ酸が単独でまたは他の酸と組合せて用いられて
いる。他の保存剤には例えばパンベル(Vanbell
e)とベルチン(Berin)が開示している保存剤が
ある[エンサイレージ−新しい生物学的観点(Ensi
!age−newbiological aspec
ts)、サノフイ サンタ アニマル(Sanofi
5ante AnimaleL 1985 ]。
と呼ばれる、エイ、アイ、ヴイルタネン(A、 I
、 Vertanen)が導入した方法であり、この方
法では、有機酸または無機酸のいずれかを飼料に別にま
たは混合物として加える。酸の飼料への添加量は飼料の
pHを4以下に減するほどの量である。現在、大ていの
場合にギ酸が単独でまたは他の酸と組合せて用いられて
いる。他の保存剤には例えばパンベル(Vanbell
e)とベルチン(Berin)が開示している保存剤が
ある[エンサイレージ−新しい生物学的観点(Ensi
!age−newbiological aspec
ts)、サノフイ サンタ アニマル(Sanofi
5ante AnimaleL 1985 ]。
発酵に直接の抑制効果を有する保存剤には、ホルマリン
を含む保存剤がある。これらの例は例えば上記文献なら
びにフィンランド特許明細書第68949号に存在する
。
を含む保存剤がある。これらの例は例えば上記文献なら
びにフィンランド特許明細書第68949号に存在する
。
しかし、酸と酸−ホルマリン混合物の使用は酸に典型的
なに食及びホルマリンによるアレルギー症状のような問
題を問題を含む、そのため、このような不利な性質を有
さない保存剤を導入することが試みられてきた。使用さ
れた代替保存剤には、植物繊維分解酵素(plant
fiber degradingenzyme)が
ある(例えば、フィンランド特許第66282号〉、こ
のような酵素は、車中に存在するミクロフローラによっ
て生ずる発酵に原料として用いられる、特別な糖を飼料
中に生成する。
なに食及びホルマリンによるアレルギー症状のような問
題を問題を含む、そのため、このような不利な性質を有
さない保存剤を導入することが試みられてきた。使用さ
れた代替保存剤には、植物繊維分解酵素(plant
fiber degradingenzyme)が
ある(例えば、フィンランド特許第66282号〉、こ
のような酵素は、車中に存在するミクロフローラによっ
て生ずる発酵に原料として用いられる、特別な糖を飼料
中に生成する。
車中に存在するミクロフローラは非常に異種発酵性であ
るので、糖生成だけでは高品質の飼料と低い貯蔵損失を
保証するために不充分である[例えば、セテレ(SeL
MIM)の「食料、飼料産業界の最先端の酵素(E n
zyIIes in the forefron
t offood and feed 1nd
ustry)」、ニスブー/オタ二エミにおけるセミナ
ー、1988年6月16日〜17日]、ミクロフローラ
の異種発酵性によるこの問題を回避しようと試みて、酵
素添加と同時に非常に異種発酵性の乳酸菌を飼料に加え
ている。
るので、糖生成だけでは高品質の飼料と低い貯蔵損失を
保証するために不充分である[例えば、セテレ(SeL
MIM)の「食料、飼料産業界の最先端の酵素(E n
zyIIes in the forefron
t offood and feed 1nd
ustry)」、ニスブー/オタ二エミにおけるセミナ
ー、1988年6月16日〜17日]、ミクロフローラ
の異種発酵性によるこの問題を回避しようと試みて、酵
素添加と同時に非常に異種発酵性の乳酸菌を飼料に加え
ている。
このような乳酸菌の使用と試験は例えばウールフォード
(Woolford)とツークジクー(S awczc
)[−ス ン ホー1ジ エンス(Grass
and Forage 5cience)39
巻(1984)、139−158)]参照、飼料保存へ
のある種の菌株の使用も示唆されている[ヨーロッパ特
許第A2−0250,786号り大ていの場合に、菌株
の系統、サイロ条件下での菌株の挙動、菌株の性質が問
題の刊行物の中で明確に述べられていす、そのため刊行
物からのデータに基づいて種々の菌株に対して実施した
試験は、サイレージの質に関しても、満足な結果を得て
いない。
(Woolford)とツークジクー(S awczc
)[−ス ン ホー1ジ エンス(Grass
and Forage 5cience)39
巻(1984)、139−158)]参照、飼料保存へ
のある種の菌株の使用も示唆されている[ヨーロッパ特
許第A2−0250,786号り大ていの場合に、菌株
の系統、サイロ条件下での菌株の挙動、菌株の性質が問
題の刊行物の中で明確に述べられていす、そのため刊行
物からのデータに基づいて種々の菌株に対して実施した
試験は、サイレージの質に関しても、満足な結果を得て
いない。
種々な研究者が飼料保存に用いる接種菌に対して非常に
種々な基準を適用している。一般に、最も重要な基準は
次の通りである: ・好気性条件下及び嫌気性条件下の両方での広い温度範
囲での良好な増殖 ・異種発酵性 ・耐酸性 ・迅速な酸産生 ・蛋白質分解活性の無いこと ・グルコース、フルクトース、スクロースを発酵させう
ろこと ・スクロースからデキストランを産生ぜず、フルクトー
スからマンニトールを産生しないこと・広範囲の乾燥物
質に対して活性であること・安定な性質 サイレージでの副発酵は使用する異種発酵性乳酸菌とそ
の性質に影響しないような保存剤によって阻止するよう
に試みられる。最もよく知られた保存剤はギ酸である。
種々な基準を適用している。一般に、最も重要な基準は
次の通りである: ・好気性条件下及び嫌気性条件下の両方での広い温度範
囲での良好な増殖 ・異種発酵性 ・耐酸性 ・迅速な酸産生 ・蛋白質分解活性の無いこと ・グルコース、フルクトース、スクロースを発酵させう
ろこと ・スクロースからデキストランを産生ぜず、フルクトー
スからマンニトールを産生しないこと・広範囲の乾燥物
質に対して活性であること・安定な性質 サイレージでの副発酵は使用する異種発酵性乳酸菌とそ
の性質に影響しないような保存剤によって阻止するよう
に試みられる。最もよく知られた保存剤はギ酸である。
しかし、ギ酸のような酸は細菌活性を制限するので、ギ
酸を乳酸菌と共に用いることは不可能であった。
酸を乳酸菌と共に用いることは不可能であった。
乳酸菌の高度に活性でかつホルミエート(formia
te)耐性異種発酵性菌株xk”、 −’ )k−
iLユ迫μ勺顧吐)(A I V755)がサイレージ
から単離されることが意外にも判明した。この菌株はド
イツ微生物細胞培養物寄託局(D eutscheSa
eu+Iung von Mikroorga
nis+*en undZellkulturen
)に受入れ番号DSM4904で1988年10月20
日に寄託されたものである。
te)耐性異種発酵性菌株xk”、 −’ )k−
iLユ迫μ勺顧吐)(A I V755)がサイレージ
から単離されることが意外にも判明した。この菌株はド
イツ微生物細胞培養物寄託局(D eutscheSa
eu+Iung von Mikroorga
nis+*en undZellkulturen
)に受入れ番号DSM4904で1988年10月20
日に寄託されたものである。
この菌株は保存に好ましい効果を有するので、飼料保存
に用いることができる0本発明の方法は例えばヒロハノ
ウシノケグサ、オオアワガエリ、カモガヤ等の牧草のよ
うな飼料の保存への使用に適している。
に用いることができる0本発明の方法は例えばヒロハノ
ウシノケグサ、オオアワガエリ、カモガヤ等の牧草のよ
うな飼料の保存への使用に適している。
本発明の飼料保存方法は本出願の第■項〜第■項に挙げ
た性質によって確認可能な1.7−’yムとL菌株を飼
料に加えることを特徴とする。
た性質によって確認可能な1.7−’yムとL菌株を飼
料に加えることを特徴とする。
飼料保存には、細菌を約107〜107cfu/飼料g
、好ましくは10 ”cfu/飼料9の量で加える。
、好ましくは10 ”cfu/飼料9の量で加える。
この菌を少なくとも1種類の他の保存剤と共に、また可
能ならば少なくとも1種類の他のエル、プiZL配り菌
株または他の乳酸菌種と共に加えることが好ましい0m
菌と保存剤は単独溶液として加えることができる。適当
な保存剤は植物繊維分解酵素(例えばセルラーゼ)、ギ
酸塩、安息香酸塩、プロピオン酸及び/またはアクリル
酸である。ギ酸塩を1.5oo、、/飼料をの量で用い
るのが好ましい0本発明の細菌菌株は本出願の第■〜■
項に述べた性質によって確認可能である0例えばDSM
4904はこのような性質を有している。
能ならば少なくとも1種類の他のエル、プiZL配り菌
株または他の乳酸菌種と共に加えることが好ましい0m
菌と保存剤は単独溶液として加えることができる。適当
な保存剤は植物繊維分解酵素(例えばセルラーゼ)、ギ
酸塩、安息香酸塩、プロピオン酸及び/またはアクリル
酸である。ギ酸塩を1.5oo、、/飼料をの量で用い
るのが好ましい0本発明の細菌菌株は本出願の第■〜■
項に述べた性質によって確認可能である0例えばDSM
4904はこのような性質を有している。
これらの細菌の飼料保存への使用及び本発明の方法によ
って保存された飼料も本発明の範囲内に入る。
って保存された飼料も本発明の範囲内に入る。
本発明を以下でさらに詳述する。
第1図及び第2図は菌株を説明する。
第1図はDSM4904菌株のプラスミドプロフィルを
示す。
示す。
第2図はBglI[制限酵素によって切断した、DSM
4904菌株とサイロをからにする段階で単離した培養
物とのプラスミドDNAの電気泳動ザ 図を示す[ベーリン品暉−マンハイム社(Boehri
nger Mannheim GmbH)、西ドイ
ツ、マンハイム、ペンズベルグ]。
4904菌株とサイロをからにする段階で単離した培養
物とのプラスミドDNAの電気泳動ザ 図を示す[ベーリン品暉−マンハイム社(Boehri
nger Mannheim GmbH)、西ドイ
ツ、マンハイム、ペンズベルグ]。
記載する%値は、保存剤ではW/V%であり、乾燥物質
含量ではW/V%である。
含量ではW/V%である。
エル、プーン ルム菌株DSM4904の性質■、 サ
イレージから単離したエル、プーンタル2仝−菌株は次
の性質を有する: ・ダラム陽性 ・厚さが均一のまっすぐなシングルロッド状・カタラー
ゼ陰性 ・異種発酵性 ・+15℃で増殖、+45℃で増殖せず・アルギニンか
らアンモニウムを発生させず・L乳酸とD乳酸または特
定のラセマーゼ活性(racemase activ
iLy)を産生ぜず;L乳酸量は乳酸全量の約45%で
あり、D乳酸量は乳酸全量の約55%であり:MRSブ
ロス[デイフコラボラトリーズ(D 1fco L
aboratories) 、米国ミシガン州デトロイ
ト]中、30℃で17時間増殖させた場合に、乳酸の全
量は約2g/MRSブロス100t1である。
イレージから単離したエル、プーンタル2仝−菌株は次
の性質を有する: ・ダラム陽性 ・厚さが均一のまっすぐなシングルロッド状・カタラー
ゼ陰性 ・異種発酵性 ・+15℃で増殖、+45℃で増殖せず・アルギニンか
らアンモニウムを発生させず・L乳酸とD乳酸または特
定のラセマーゼ活性(racemase activ
iLy)を産生ぜず;L乳酸量は乳酸全量の約45%で
あり、D乳酸量は乳酸全量の約55%であり:MRSブ
ロス[デイフコラボラトリーズ(D 1fco L
aboratories) 、米国ミシガン州デトロイ
ト]中、30℃で17時間増殖させた場合に、乳酸の全
量は約2g/MRSブロス100t1である。
U、 DSM4904菌株は高分子!(35〜40k
b)を有する単独プラスミドを含む(第1図〉。
b)を有する単独プラスミドを含む(第1図〉。
11[、DSM4904はAP I 50CH(AP
Iシステム(AP I System)S、 A、
、フランス)による下記の糖または糖アルコールを発酵
させる:L−アラビノース、リボース、ガラクトース、
D−グルコース、D−フルクトース、Dマンノース、マ
ンニトール、α−メチル−D−マンノシド、N−アセチ
ルグルコサミン、アミダリン、アルブチン、エスクリン
、サリシン、七ロビオース、マルトース、ラクトース、
メリビオース、スクロース、トレハロース、メレジトー
ス、D−ラフィノース、β−ゲンチオビオース、D−ツ
ラノース。
Iシステム(AP I System)S、 A、
、フランス)による下記の糖または糖アルコールを発酵
させる:L−アラビノース、リボース、ガラクトース、
D−グルコース、D−フルクトース、Dマンノース、マ
ンニトール、α−メチル−D−マンノシド、N−アセチ
ルグルコサミン、アミダリン、アルブチン、エスクリン
、サリシン、七ロビオース、マルトース、ラクトース、
メリビオース、スクロース、トレハロース、メレジトー
ス、D−ラフィノース、β−ゲンチオビオース、D−ツ
ラノース。
IV、 DSM4904菌株のその他の性質A、 こ
の菌株はギ酸耐性を有し、少なくとも安息香酸、アクリ
ル酸、プロピオン酸に対して耐性である、 ・例えば、ギ酸ナトリウムの水溶液(30%、pH6,
25)中で、この菌株の凍結乾燥製剤は少なくとも4時
間、初期レベルに留まる( 10 ”cfu/ s+f
)クレット(K 1eft)値[クレットーサマーソン
光電比色計(Klett−Summerson ph
otoelectriccolori+*eter)
、アーサー エッチ、トーマスコンブ、 (A rth
ur H、T homas comp。〉米国ペン
シルバニア州フィラデルフィア]で測定して、0.3z
安息香酸を含trMRsブロス(pH6,8)中で非常
に良好に増殖する。pi−14の同ブロス中o、oss
安息香酸濃度において、増殖はまだ充分である。30℃
において4日間インキュベーション。
の菌株はギ酸耐性を有し、少なくとも安息香酸、アクリ
ル酸、プロピオン酸に対して耐性である、 ・例えば、ギ酸ナトリウムの水溶液(30%、pH6,
25)中で、この菌株の凍結乾燥製剤は少なくとも4時
間、初期レベルに留まる( 10 ”cfu/ s+f
)クレット(K 1eft)値[クレットーサマーソン
光電比色計(Klett−Summerson ph
otoelectriccolori+*eter)
、アーサー エッチ、トーマスコンブ、 (A rth
ur H、T homas comp。〉米国ペン
シルバニア州フィラデルフィア]で測定して、0.3z
安息香酸を含trMRsブロス(pH6,8)中で非常
に良好に増殖する。pi−14の同ブロス中o、oss
安息香酸濃度において、増殖はまだ充分である。30℃
において4日間インキュベーション。
第」−去一
種々な安息香酸濃度におけるMRSブロス中でのDSM
4904 の 4 30℃安息香酸濃
度 社則」 吐は並 し ト 0 600 500 0.05 600 460 0.1 600 190 0.2 600 15 0.3 550 6 0.4 510 ・プロピオン酸耐性(MRSブロス、pi44.0)D
SM4904は前記酸0.5zを含有するプロス中で良
好に増殖する ・菌株はへキサメチルテトラミン不耐性であるB、 菌
株の抗生物質感受性 ・DSM4904は下記抗生物質に対して完全に耐性で
ある:ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、
ノボビオシン、ストレプトマイシン、スルホンアミド、
バンコマイシン・下記の抗生物質に対してはある程度ま
たは完全に感受性である:アンビシリン、バシトラシン
、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、ペニシリ
ンG、リファマイシン、リンコマイシン、テトラサイク
リン、パージニアマイシン、スペクチノマイシン ■、 サイレージ中の菌株の保持 ・サイレージ中でのDSM4904菌株の保持は良好で
あった。サイレージ形成の約5か月決程度でも(実施例
2参照)、DSM4904菌株と同じ特性を有する王に
一22L乙m菌株が検出された。これらは生化学反応と
プラスミドプロフィルにおいて同じであり、BglII
によって同様に切断された(第2図)。
4904 の 4 30℃安息香酸濃
度 社則」 吐は並 し ト 0 600 500 0.05 600 460 0.1 600 190 0.2 600 15 0.3 550 6 0.4 510 ・プロピオン酸耐性(MRSブロス、pi44.0)D
SM4904は前記酸0.5zを含有するプロス中で良
好に増殖する ・菌株はへキサメチルテトラミン不耐性であるB、 菌
株の抗生物質感受性 ・DSM4904は下記抗生物質に対して完全に耐性で
ある:ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、
ノボビオシン、ストレプトマイシン、スルホンアミド、
バンコマイシン・下記の抗生物質に対してはある程度ま
たは完全に感受性である:アンビシリン、バシトラシン
、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、ペニシリ
ンG、リファマイシン、リンコマイシン、テトラサイク
リン、パージニアマイシン、スペクチノマイシン ■、 サイレージ中の菌株の保持 ・サイレージ中でのDSM4904菌株の保持は良好で
あった。サイレージ形成の約5か月決程度でも(実施例
2参照)、DSM4904菌株と同じ特性を有する王に
一22L乙m菌株が検出された。これらは生化学反応と
プラスミドプロフィルにおいて同じであり、BglII
によって同様に切断された(第2図)。
、MRSブロス中で大腸菌(E 、 eoli)N B
菌株(水から単離〉と共に、この菌株を増殖させた場合
に、DSM4904は大腸菌を9日間内に破壊すること
ができ、DSM4904量は9日後にまだ9 X 10
’fcu/ mlであった。
菌株(水から単離〉と共に、この菌株を増殖させた場合
に、DSM4904は大腸菌を9日間内に破壊すること
ができ、DSM4904量は9日後にまだ9 X 10
’fcu/ mlであった。
■、 細胞の産生
・菌株はホエー主成分培地で増殖する。菌株を凍結乾燥
し、凍結乾燥製剤を冷凍庫(−18℃)内で少なくとも
6か月間貯蔵することができる。
し、凍結乾燥製剤を冷凍庫(−18℃)内で少なくとも
6か月間貯蔵することができる。
■、 飼料保存への使用
・凍結乾燥菌株を飼料保存に用いる、例えば酵素のよう
な他の薬剤(agent)と共に水と混合して、混きか
ら4時間以内に生活細胞105〜107/飼料gの用量
レベルで用いる。生活細胞107/飼料gの用量レベル
が好ましい。
な他の薬剤(agent)と共に水と混合して、混きか
ら4時間以内に生活細胞105〜107/飼料gの用量
レベルで用いる。生活細胞107/飼料gの用量レベル
が好ましい。
次の実施例によって、本発明を説明する。
夾角m
粗蛋白質16.2L粗繊維2.421糖12.41を含
む乾燥物質含量16.5gのチョップした草を10kf
Iガラスサイロに貯蔵した。飼料を注意深く圧縮して、
サイロをプラスチックシートで気密にシールした。
む乾燥物質含量16.5gのチョップした草を10kf
Iガラスサイロに貯蔵した。飼料を注意深く圧縮して、
サイロをプラスチックシートで気密にシールした。
添加は単独溶液として、飼料をひつくり返しながらスプ
レーすることによって行った。テストサイロに行った添
加は次の通りであった: A、保存剤含まず B、AIVn溶液51/飼料L C,DSM490410・cfu/飼料g、酵素150
aj!/飼料t D、Cで述べた他、さらにギ酸Nal、000g/飼料
t E、Cで述べた他、さらにプロピオン酸Na2.0OO
y/飼料を及びペジ コツ ス ベ’j h +
2 (P Idiococcus pentosac
eus)(107cfu/g) AIVI[溶液はギ酸80%とオルトリン酸2%を含む
。
レーすることによって行った。テストサイロに行った添
加は次の通りであった: A、保存剤含まず B、AIVn溶液51/飼料L C,DSM490410・cfu/飼料g、酵素150
aj!/飼料t D、Cで述べた他、さらにギ酸Nal、000g/飼料
t E、Cで述べた他、さらにプロピオン酸Na2.0OO
y/飼料を及びペジ コツ ス ベ’j h +
2 (P Idiococcus pentosac
eus)(107cfu/g) AIVI[溶液はギ酸80%とオルトリン酸2%を含む
。
酵素は植物繊維を分解する酵素製剤であり、主としてセ
ルラーゼと例えばヘミセルラーゼのような他の活性(a
ctivity)を含有する。
ルラーゼと例えばヘミセルラーゼのような他の活性(a
ctivity)を含有する。
保存試行からの結果は添加物C、D 、Eがサイレージ
の保存性に非常に好ましい効果を有することを示す、サ
イレージC、D 、EはサイレージA、Bよりも多くの
糖を含むが、蛋白質分解産物、アンモニアの含量は少な
い、サイレージC、D 、Eでの高い乳酸/酢酸比は極
度に高い同種発酵性乳酸発酵を示す。
の保存性に非常に好ましい効果を有することを示す、サ
イレージC、D 、EはサイレージA、Bよりも多くの
糖を含むが、蛋白質分解産物、アンモニアの含量は少な
い、サイレージC、D 、Eでの高い乳酸/酢酸比は極
度に高い同種発酵性乳酸発酵を示す。
サイト
乾量基準$ g/1
3.95
3.72
3.77
3.80
4.4
10.4
10.0
11.0
1.8
0.9
0.8
1.2
2.1
2.7
3.3
2.9
0.18
0.10
0.12
0.17
さらに、
試験サイレージの微生物組成は、
菌株
DSM4904がギ酸塩の添加に安定であり、乳酸菌の
全量がギ酸塩を添加しない場合と同じレベルであること
を示す。
全量がギ酸塩を添加しない場合と同じレベルであること
を示す。
試
験
AB
酵母
カビ
B
クロスト
八 6 1.5−510 <100
<10 3−78 12 2−110
100−500 <10 3−15C111
1−100100−3000<10 40
− 7 17−110 400−1100
<10 3−40E 10 1900
−3900 <100 <10 3−30(
LAB=乳酸菌、CB=腸内細菌) え隨燵i 粗蛋白質15.3$、粗繊維27.1$、糖10.6X
を含む乾燥物賞金ji18.o$を有する草をフレール
チョッパーでチョップし、500kyサイロに貯蔵した
。各試験飼料に対して2種類の並行サイロを用意し、飼
料をサイロ中で細心に圧縮し、その後サイロをプラスチ
ックシートでシールし、水を充てんした容器で重しをか
けたく圧力的250 kg/m”)。
<10 3−78 12 2−110
100−500 <10 3−15C111
1−100100−3000<10 40
− 7 17−110 400−1100
<10 3−40E 10 1900
−3900 <100 <10 3−30(
LAB=乳酸菌、CB=腸内細菌) え隨燵i 粗蛋白質15.3$、粗繊維27.1$、糖10.6X
を含む乾燥物賞金ji18.o$を有する草をフレール
チョッパーでチョップし、500kyサイロに貯蔵した
。各試験飼料に対して2種類の並行サイロを用意し、飼
料をサイロ中で細心に圧縮し、その後サイロをプラスチ
ックシートでシールし、水を充てんした容器で重しをか
けたく圧力的250 kg/m”)。
チョッパー内で飼料に対して次の添加を行った:
A、保存剤なし。
B、AIVI[溶液51/飼料t(実施例1参照)C,
DSM4904菌株10“cfu/飼料g、酵素300
mZ/飼料t。
DSM4904菌株10“cfu/飼料g、酵素300
mZ/飼料t。
D、Cで述べた他に、さらにギ酸ナトリウム1.0OO
y/飼料t。
y/飼料t。
試験サイレージ組成の相違は実施例1の相違と同じであ
る(第4表)、サイレージCとDを比較すると、ギ酸塩
がサイレージ中に存在する酵母とカビに関して微生物組
成に有利に影響することが認められる(第5表〉。
る(第4表)、サイレージCとDを比較すると、ギ酸塩
がサイレージ中に存在する酵母とカビに関して微生物組
成に有利に影響することが認められる(第5表〉。
筆」j覧
サイト
ーン
乾量基準2
3.92
4.15
3.71
3.69
11.2
5.2
10.3
10.5
2.6
2.0
1.0
1.0
0.9
0.2
0.5
3.3
3.7
10.9
8.7
1.8
1.8
試叡J3コミニ2塁屍ユ10I先
AB
酵母
カビ
クロスト
八 〇7−110 35−51 10−100
<10 14−45B 12−55 30
0−440100− 10−6700450−2
00000 45000CI−8150
−10−1200010−60(36000 D 1 25−170 <1
0−20 サイレージを24℃に保持し、 各サイレージ中 の温度展開を測定することによって、サイレージの好気
性耐性と保存性を調べた。糖含鳳が高いにも拘らず、サ
イレージCとDは2日間安定であった(第6表)。
<10 14−45B 12−55 30
0−440100− 10−6700450−2
00000 45000CI−8150
−10−1200010−60(36000 D 1 25−170 <1
0−20 サイレージを24℃に保持し、 各サイレージ中 の温度展開を測定することによって、サイレージの好気
性耐性と保存性を調べた。糖含鳳が高いにも拘らず、サ
イレージCとDは2日間安定であった(第6表)。
第6表
イレージの′声
^ 14 18
30B 10 18
20C111834 D 10 18
31ギ酸塩はサイレージの安定性を改良し、サイレー
ジDでの温度上昇はサイレージCよりも緩慢であった。
30B 10 18
20C111834 D 10 18
31ギ酸塩はサイレージの安定性を改良し、サイレー
ジDでの温度上昇はサイレージCよりも緩慢であった。
実」目殊」−
粗蛋白質17.3L粗m維24.3$糖12.2%を含
む乾燥物質含量20〜22%を有する草を90をのバン
カーサイロに貯蔵した。飼料をフレールチョツパーに回
収し、チョッピング工程に続いて添加を行つた。飼料を
トラクターでのトランプリング(trampl ing
)によって圧縮して、プラスチックシートで気密にカバ
ーした。添加は次の通りに行った: A、保存剤なし B、AIVn溶液5Z/l(実施例1参照)C,DSM
4904菌株]、O’cfu/飼料g、酵素300瑣e
/飼料t D、Cで述べた他に、さらにギ酸Na/1,500g/
ffl料t E、Cで述べた他に、さらに12土工り立大=さ、≧二
」ミニ9ニー+!’72 1 0 コcfu/yサイ
レージの品質に関して、結果は実施例1及び2に述べた
結果と一致する(第7表)。
む乾燥物質含量20〜22%を有する草を90をのバン
カーサイロに貯蔵した。飼料をフレールチョツパーに回
収し、チョッピング工程に続いて添加を行つた。飼料を
トラクターでのトランプリング(trampl ing
)によって圧縮して、プラスチックシートで気密にカバ
ーした。添加は次の通りに行った: A、保存剤なし B、AIVn溶液5Z/l(実施例1参照)C,DSM
4904菌株]、O’cfu/飼料g、酵素300瑣e
/飼料t D、Cで述べた他に、さらにギ酸Na/1,500g/
ffl料t E、Cで述べた他に、さらに12土工り立大=さ、≧二
」ミニ9ニー+!’72 1 0 コcfu/yサイ
レージの品質に関して、結果は実施例1及び2に述べた
結果と一致する(第7表)。
第1j覧
サイト pH
−ジ
^ 3,89
B 4.05
C3,87
D 3.84
E 3.78
乾量基準工
10、I L、S 0
1.9 0.8 0.1
10.7 L、S 0
10.4 1.2 0
10.8 0.8 0
g/1
1.8 0.51
10.2 0.16
4.5 0.37
4.0 0.30
5.3 0.21
犬遣m
第8表は実施例2に述べたように貯蔵した種マのサイレ
ージのpH低下速度とLtA酸とD乳酸の生成速度を示
す。
ージのpH低下速度とLtA酸とD乳酸の生成速度を示
す。
第」」覧
貯蔵時間0〜14日間後の種々のサイレージにおける試
験 サイト ージ ^ 分析 u L乳酸 り乳酸 時間9日数 2 pH L乳酸 り乳酸 pH L乳酸 り乳酸 pH し乳酸 り乳酸 5.8 0.1 0.1 0.0 4.1 0.1 0.0 0.0 5.7 0.1 0.1 0.0 5.8 0.1 0.1 0.0 5.6 1.4 0.4 0.5 4.2 0.0 0.0 Ooo 3.9 3.1 5.3 0.4 4.0 2.5 5.7 0.4 4.6 2.7 2.2 0.7 4.1 0.1 0.0 O90 3,8 4,1 5,6 0,5 3,9 2,8 5,7 0,4 4,1 3,9 3,3 1,0 4,2 0,1 0,0 0,1 3,9 4,4 5,3 0,9 3,8 3,9 5,7 0,7 4,1 4,7 3,9 1,2 4,3 0,4 0,1 0,3 3,8 4,7 5,4 1,0 3,8 4,0 5,6 0,9 2日後に、DSM4904菌株と酵素はギ酸塩の使用の
有無に拘らずサイレージのpHを、サイレージの保存に
好ましいレベルである4未満に低下させた。乳酸の生成
速度も高く、2日後の乳酸の全量は乾量基準で約8%程
度であった。
験 サイト ージ ^ 分析 u L乳酸 り乳酸 時間9日数 2 pH L乳酸 り乳酸 pH L乳酸 り乳酸 pH し乳酸 り乳酸 5.8 0.1 0.1 0.0 4.1 0.1 0.0 0.0 5.7 0.1 0.1 0.0 5.8 0.1 0.1 0.0 5.6 1.4 0.4 0.5 4.2 0.0 0.0 Ooo 3.9 3.1 5.3 0.4 4.0 2.5 5.7 0.4 4.6 2.7 2.2 0.7 4.1 0.1 0.0 O90 3,8 4,1 5,6 0,5 3,9 2,8 5,7 0,4 4,1 3,9 3,3 1,0 4,2 0,1 0,0 0,1 3,9 4,4 5,3 0,9 3,8 3,9 5,7 0,7 4,1 4,7 3,9 1,2 4,3 0,4 0,1 0,3 3,8 4,7 5,4 1,0 3,8 4,0 5,6 0,9 2日後に、DSM4904菌株と酵素はギ酸塩の使用の
有無に拘らずサイレージのpHを、サイレージの保存に
好ましいレベルである4未満に低下させた。乳酸の生成
速度も高く、2日後の乳酸の全量は乾量基準で約8%程
度であった。
DSM4904菌株に典型的であるように、サイレージ
内の発酵は開始時から非常に同種発酵性であった。サイ
レージ内の酢酸が少量であることは純粋な発酵を示唆す
る。さらに、ギ酸塩の添加はサイレージの酢酸生成発酵
を減じた。
内の発酵は開始時から非常に同種発酵性であった。サイ
レージ内の酢酸が少量であることは純粋な発酵を示唆す
る。さらに、ギ酸塩の添加はサイレージの酢酸生成発酵
を減じた。
犬益舅」1
主としてオオアワガエリから成る草を10kfIの実験
室用サイロで貯蔵した。添加物を手でスプレーしながら
飼料に散布し、サイレージを圧縮し、重しをかけ、気密
にシールした。貯蔵時間は60日間であった。第9表の
試験結果はDSM4904菌株が良好な保存結果を与え
ることを示す0発酵酸に関して、保存剤を添加しないサ
イレージはDSM4904サイレージと非常に類似して
いるが、DSM4904サイレージは好ましくないNH
コ濃度が明らかに低い。
室用サイロで貯蔵した。添加物を手でスプレーしながら
飼料に散布し、サイレージを圧縮し、重しをかけ、気密
にシールした。貯蔵時間は60日間であった。第9表の
試験結果はDSM4904菌株が良好な保存結果を与え
ることを示す0発酵酸に関して、保存剤を添加しないサ
イレージはDSM4904サイレージと非常に類似して
いるが、DSM4904サイレージは好ましくないNH
コ濃度が明らかに低い。
第1
牧草保存におけるAIV■溶液とDSM4904菌株(
AIVI[5N/飼料t、D 8M4904菌株添加物
なし 4.0 B、3 1.8 0 1.3 G
、39AIVII 4.1 3.6 0゜9
0 7.1 0.24DSM4904
3.9 7.5 1.8 0 1.4 0.12
叉」む生i上 主としてオオアワガエリから成る草を約Loをのバンカ
ーサイロに貯蔵した。飼料は飼料刈取り機で刈取って、
刈取りに続いて保存剤を加えたものである。サイロはプ
ラスチックシートで気密にシールし、水の重り(wat
er u+eight)で重しをかけた。
AIVI[5N/飼料t、D 8M4904菌株添加物
なし 4.0 B、3 1.8 0 1.3 G
、39AIVII 4.1 3.6 0゜9
0 7.1 0.24DSM4904
3.9 7.5 1.8 0 1.4 0.12
叉」む生i上 主としてオオアワガエリから成る草を約Loをのバンカ
ーサイロに貯蔵した。飼料は飼料刈取り機で刈取って、
刈取りに続いて保存剤を加えたものである。サイロはプ
ラスチックシートで気密にシールし、水の重り(wat
er u+eight)で重しをかけた。
第10表から明らかなように、酵素を添加した常に類似
していた。第9表と第10表に示す結果を比較すると、
酵素を添加したサイレージがDSM4904を添加した
サイレージよりもNH,濃度に関して明白に劣ることが
見られる。
していた。第9表と第10表に示す結果を比較すると、
酵素を添加したサイレージがDSM4904を添加した
サイレージよりもNH,濃度に関して明白に劣ることが
見られる。
第」」Σ勇。
草の発酵に対するセルラーゼ酵素の効果貯蔵時間保存剤
pH 保存剤 なし 3.89 7.4 1.0 2.7 0.77 3.82 9.5 0.9 3.1 0.59 夾角11[ 主としてオオアワガエリから成る草を実施例5に述べた
ような10kyの実験室用サイロに貯蔵した。
pH 保存剤 なし 3.89 7.4 1.0 2.7 0.77 3.82 9.5 0.9 3.1 0.59 夾角11[ 主としてオオアワガエリから成る草を実施例5に述べた
ような10kyの実験室用サイロに貯蔵した。
レージ
に
星ユlu
プロピ ン
Naの
への
乾量基準2
y/1 +Ju/g
×10G
DSM4904+
酵素 3.8 12.1 1.3
2.4
0.15
9.5
DSH4904+
酵素←
0.217 3.8 12.6 1.1 0 2.9
0.130ピオ ン Na 60 プロピオン酸Naは乳酸菌(L A B )量に不利な
影響を与えず、発酵の質(乳酸/酢酸比: N H3量
)は改善された(第11表)。
0.130ピオ ン Na 60 プロピオン酸Naは乳酸菌(L A B )量に不利な
影響を与えず、発酵の質(乳酸/酢酸比: N H3量
)は改善された(第11表)。
実−見透ユー
主としてオオアワガエリとヒロハノウシノケグサから成
る草約45tをバンカーサイロに貯蔵した。草を飼料刈
取り機でチョップして、刈取り機中に刈取り中に添加物
を添加した。サイロ中の草をトラクターで圧縮し、プラ
スチックシートで気密にカバーし、 重しをかけた。
る草約45tをバンカーサイロに貯蔵した。草を飼料刈
取り機でチョップして、刈取り機中に刈取り中に添加物
を添加した。サイロ中の草をトラクターで圧縮し、プラ
スチックシートで気密にカバーし、 重しをかけた。
への
pl+
乾量基準2
2/1
DS84904+
酵素
3.9
10.7
1.6
4.5
0.37
DSH4904+
酵素十
0.051SB
3.9
10.3
3.0
0.37
DSM4904+
酵素+ 3.8 11.1 1.1 0 4.7
0.240、I 5O (SB :安息香酸ナトリウム〉 安息香酸ナトリウムは乳酸菌(L A B )Jlに不
利な影響を与えなかった。全サイレージ中で、乳酸菌量
は10′〜10 ”afu/Hの範囲内であった。安息
香酸塩で処理したサイl/−ジは酵母を含まなかった0
発酵の質は0.1!安息香酸ナトリ巾ムの用量レベルで
まだ良好であった(第12表)。
0.240、I 5O (SB :安息香酸ナトリウム〉 安息香酸ナトリウムは乳酸菌(L A B )Jlに不
利な影響を与えなかった。全サイレージ中で、乳酸菌量
は10′〜10 ”afu/Hの範囲内であった。安息
香酸塩で処理したサイl/−ジは酵母を含まなかった0
発酵の質は0.1!安息香酸ナトリ巾ムの用量レベルで
まだ良好であった(第12表)。
第1図と第2図は菌株を説明するものであり、第1図は
DSM4904菌株のプラスミドプロフィルを示し、 第2図は8glll酵素によって切断したDSM490
4菌株とサイロをからにする段階で単離した培養物との
グラスミドDNAの電気泳動図を示す。 代 理 人 弁理士 湯 浅 恭 蚕−1第 回 ■
DSM4904菌株のプラスミドプロフィルを示し、 第2図は8glll酵素によって切断したDSM490
4菌株とサイロをからにする段階で単離した培養物との
グラスミドDNAの電気泳動図を示す。 代 理 人 弁理士 湯 浅 恭 蚕−1第 回 ■
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、本出願明細書中の第 I 項〜第IV項に列挙した性質
によって確認可能な、¥ラクトバチルスプランタルム¥
(¥Lactobacillusplantarum¥
)菌株を飼料に加えることを特徴とする飼料の保存方法
。 2、DSM4904菌株を飼料に加えることを特徴とす
る請求項1記載の方法。 3、約10^5〜10^7cfu/飼料g、好ましくは
10^6cfu/飼料gの量で細菌を加えることを特徴
とする請求項1または2記載の方法。 4、少なくとも1種類の他の保存剤の添加と共に菌株を
添加することを特徴とする請求項1〜3のいずれかに記
載の方法。 5、菌株と保存剤を好ましくは単独溶液として加えるこ
とを特徴とする請求項4記載の方法。 6、保存剤が例えばセルラーゼのような植物繊維分解酵
素であることを特徴とする請求項4記載の方法。 7、保存剤が例えばギ酸塩、安息香酸塩、プロピオン酸
またはアクリル酸のような有機酸またはそれらの塩を含
むことを特徴とする請求項4記載の方法。 8、ギ酸塩を好ましくは約1,500g/飼料をの量で
加えることを特徴とする請求項7記載の方法。 9、少なくとも1種類の他の¥エル、プランタルム¥菌
株または他の乳酸菌種を付加的に用いることを特徴とす
る請求項1〜8のいずれかに記載の方法。 10、¥エル、プランタルム¥であり、本出願明細書中
の第 I 項〜第IV項に列挙した性質によって確認可能で
あることを特徴とする、飼料保存剤として用いるための
乳酸菌の菌株。 11、¥エル、プランタルム¥DSM4904であるこ
とを特徴とする請求項10記載の菌株。 12、飼料保存剤としての請求項10または11記載の
菌株の使用。 13、請求項1〜9のいずれかの方法によって保存した
飼料。 14、本出願明細書中の第 I 項〜第IV項に記載した性
質によって確認可能な¥エル、プランタルム¥を含むこ
とを特徴とする飼料。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FI885252A FI82354C (fi) | 1988-11-14 | 1988-11-14 | Konservering av faerskfoder. |
FI885252 | 1988-11-14 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0361453A true JPH0361453A (ja) | 1991-03-18 |
JPH0547183B2 JPH0547183B2 (ja) | 1993-07-16 |
Family
ID=8527382
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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JP1296032A Granted JPH0361453A (ja) | 1988-11-14 | 1989-11-14 | 飼料保存方法 |
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EP (1) | EP0369198B1 (ja) |
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CZ (1) | CZ280316B6 (ja) |
DE (2) | DE68909743T2 (ja) |
DK (1) | DK525089A (ja) |
ES (1) | ES2047089T3 (ja) |
FI (1) | FI82354C (ja) |
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IE (1) | IE62850B1 (ja) |
LV (1) | LV10370B (ja) |
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NZ (1) | NZ231157A (ja) |
PL (1) | PL161142B1 (ja) |
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JP2016510985A (ja) * | 2013-03-13 | 2016-04-14 | オルガノバランス ゲーエムベーハー | 新規ラクトバチルス株及びその使用 |
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- 1988-11-14 FI FI885252A patent/FI82354C/fi not_active IP Right Cessation
-
1989
- 1989-10-23 ES ES89119608T patent/ES2047089T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-10-23 EP EP19890119608 patent/EP0369198B1/en not_active Expired - Lifetime
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- 1989-10-23 AT AT89119608T patent/ATE95387T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-10-23 DK DK525089A patent/DK525089A/da not_active Application Discontinuation
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- 1989-11-13 CZ CS896414A patent/CZ280316B6/cs not_active IP Right Cessation
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-
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