HU207206B - Method for preserving fodder - Google Patents

Method for preserving fodder Download PDF

Info

Publication number
HU207206B
HU207206B HU895877A HU587789A HU207206B HU 207206 B HU207206 B HU 207206B HU 895877 A HU895877 A HU 895877A HU 587789 A HU587789 A HU 587789A HU 207206 B HU207206 B HU 207206B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
feed
silage
lactic acid
dsm
acid
Prior art date
Application number
HU895877A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT51467A (en
Inventor
Jouko Setaelae
Martin Suominen
Aino Rauramaa
Seppo Sivelae
Original Assignee
Valio Meijerien
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Valio Meijerien filed Critical Valio Meijerien
Publication of HUT51467A publication Critical patent/HUT51467A/hu
Publication of HU207206B publication Critical patent/HU207206B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K30/00—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs
    • A23K30/10—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder
    • A23K30/15—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging
    • A23K30/18—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging using microorganisms or enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/25—Lactobacillus plantarum
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00—Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/807—Poultry or ruminant feed
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus
    • Y10S435/857—Lactobacillus plantarum

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Liquid Crystal Substances (AREA)
  • Insulated Conductors (AREA)
  • Electrotherapy Devices (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás takarmány tartósítására Lactobacillus plantarum törzs alkalmazásával.
A takarmányok - például zöldtakarmány - tartósításakor a felaprított zöld takarmányt légmentesen silóba zárják, a zöld takarmányban lévő szénhidrátok főleg glükóz, fruktóz és fruktozánok - savaká való fermentálására. Kedvező körülmények között a fermentációs folyamatokban főleg tejsav képződik. így jó minőségű silótakarmány keletkezik, kevés fermentációs veszteséggel. Általában a fermentáció során illékony zsírsavak - például ecetsav - is képződik a takarmányban. Minden fermentáláskor keletkezett sav csökkenti a takarmány pH-értékét. Ismeretes, hogy a takarmány tartósítására a takarmány pH-ját 4-re, vagy annál alacsonyabb értékre kell csökkenteni, amelyhez kb. 100 savekvivalens/tonna takarmány szükséges.
A takarmányban végbemenő szabad fermentálódást nehéz a kívánt fermentációs terméket - azaz lehetőleg csak tejsavat - eredményező irányban tartani. Ezért próbálták a takarmány tartósítását tartósítószerek hozzáadásával javítani, A fenti ismert eljárások közül a legjobb A. I. Virtanen eljárása - amelyet AIV eljárásnak neveznek -, amelynek lényege, hogy a takarmányhoz vagy szerves, vagy szervetlen savakat adnak, külön-külön vagy elegy formájában. A sava(ka)t olyan mennyiségben adják a takarmányhoz, amennyi elegendő a takarmány pH-jának 4re, vagy annál alacsonyabb értékre való csökkentéséhez. Legtöbb esetben hangyasavat használnak erre a célra, tisztán, vagy más savakkal kombinálva. Egyéb tartósítószereket is használnak, például a Vanbelle és Berlin által ismertetett tartósítószereket (Ensilage - new biological aspects, Sanofi Sante Animale, 1985). A fermentációs folyamatra közvetlen gátló hatást gyakorló tartósítószerek közé tartoznak a formaiint tartalmazó tartósítószerek. Ezeket például a fent idézett irodalmi helyen, valamint a 68 949 számú finn szabadalmi leírásban ismertetik.
A savak és sav - formaiin elegyek alkalmazása azonban bizonyos problémákkal jár, ezek például a savakra jellemző maró hatás és a formalin-okozta allergiás tünetek. Ezért olyan tartósítószereket próbáltak keresni, amelyeknek nincsenek ilyen hátrányos tulajdonságaik. Tartósítószerként például növényi rostot lebontó enzimeket használnak a 66282 számú finn szabadalmi leírás szerint. Az ilyen enzimek tovább növelik a takarmány cukortartalmát, és ez a zöld takarmányban jelen lévő mikroflóra által végzett fermentáláshoz további nyersanyagot jelent. Mivel a zöld takarmányban lévő mikroflóra nagyon heterofermentatív, pusztán a cukor képződése nem elegendő a takarmány jó minőségének és a kis tárolási veszteségnek biztosítására (például Setala: Enzymes in the forefront of food and feed Industries, Espoo/Otaniemi-i Szeminárium, 1988. június 16-17.) A mikroflóra heterofermentatív voltából problémák kiküszöbölésére a takarmányhoz az enzimmel együtt lényegében homofermentatív tejsav-baktériumokat adnak. A fenti tejsav-baktériumok használatát és vizsgálatát például Woolford és Sawczyc ismerteti [Grass and Forage Science 39, 139— 158 (1984)]. A takarmány tartósítására bizonyos L. plantarum és Pediococcus baktériumtörzsek alkalmazását az A2 0250786 számú európai szabadalmi leírásban is javasolják. Azonban az általuk ismertetett eljárással nem kaphatók olyan jó tartósítási eredmények, mint a fenti célra kereskedelmi forgalomban lévő baktériumkészítménnyel, illetve AIV II savoldattal.
A legtöbb esetben a törzsek eredetét, silózási körülmények közötti viselkedését és a törzsek tulajdonságait csak homályosan és nem kielégítően tartalmazzák ezek a publikációk (lásd például a 194583 és 193678 számú magyar és 4822620 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokat), ezért a fenti publikációkból ismert adatok alapján a különböző törzsekkel végzett kísérletek a takarmány minőségét tekintve igen gyenge eredményekhez vezettek.
A HU 194583 számú szabadalmi leírás szerinti eljárásban takarmány és szemestermény silózására közelebbről meg nem határozott tejsavbaktériumok mellett glukóz-oxidázt és adott esetben egyéb adalékanyagokat adnak a kiindulási anyaghoz. Heikonen és munkatársai fenti eljárásának legfőbb hátránya, hogy a glukóz-oxidáz olyan reakciót katalizál, amelyben hidrogén-peroxid keletkezik. A hidrogén-poroxid közismerten toxikus, így nemkívánatos a mikrobiológiai eljárásokban.
A HU 193678 számú szabadalmi leírás eljárást ismertet friss vagy előfonnyasztott takarmányok és mezőgazdasági melléktermékek tejsavas erjedésének szabályozására tejsavbaktériumokat, szénhidrát-forrást, természetes növényi enzimrendszert és mikrobagátló szert tartalmazó elegy hozzáadásával. Az alkalmazott mikroorganizmusok azonban egyáltalán nincsenek ismertetve, és egyetlen nemzetséget vagy fajt sem említenek név szerint. Az idézett eljárásban a fermentációs folyamat javítására a takarmányhoz kötelező komponensként szénhidrátot és növényi enzimrendszert adnak a tejsavtermelő baktériumok mellett.
Az US 4822620 számú szabadalmi leírásban (Chamberlain és munkatársai) a szilázs-effluens viszszatartására vízzel duzzadó, vízelnyelő tulajdonságú szintetikus polimereket alkalmaznak. A fenti polimer hozzáadásával megakadályozzák, hogy a silózás folyamán az elfolyó effluenssel tápanyagok távozzanak a silóból. A polimer hozzadásától eltekintve a silózási eljárás teljesen hagyományos, azaz a polimer egyéb adalékokkal, például tejsavtermelő baktériumokkal vagy savas vegyületekkel együtt alkalmazható.
Különböző kutatók jelentősen eltérő kritériumokat írnak elő a takarmány tartósítására használt baktériumokkal szemben. Általában a legfontosabb követelmények az alábbiak:
- jó szaporodás széles hőmérséklet-tartományban, mind aerob, mind anaerob körülmények között;
- homofermentatív képesség;
- savtűrés;
- gyors savtermelés;
- proteolitikus aktivitás hiánya;
- glükózt, fruktózt és szacharózt fermentáló képesség;
- ne termeljen szacharózból dextránt, sem fruktózból mannitot;
- széles szárazanyag-tartományban aktív; és
- stabil tulajdonságok.
HU 207 206 Β
A silótakarmányban lejátszódó fermentációs mellékreakciókat olyan tartósítószer hozzáadásával próbálták megakadályozni, amelyek nem befolyásolják a homofermentatív tejsavbaktériumokat és tulajdonságaikat. A tartósítószerek közül legismertebb a hangyasav. Azonban a hangyasavat nem lehet a tejsav baktériumokkal együtt használni, mivel a sav csökkenti a bakteriális aktivitást.
Meglepő módon a silótakarmányból sikerült egy nagy aktivitású és formiát-toleráns homofermentatív tejsavbaktérium-törzset, a Lactobacillus plantarum (AIV 755) törzset izolálnunk, ezt a törzset a Német Mikroorganizmus és Sejttenyészet Gyűjteményben (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen) helyeztük letétbe 1988. október 20-án, a törzs letéti száma DSM 4904. A fenti törzset kedvező tartósítóhatása következtében takarmány tartósítására használhatjuk. A találmány szerinti eljárás takarmányok így különböző fűfélék, például réti csenkesz, réti komócsin és csomós ebír tartósítására alkalmazható.
A találmány szerinti eljárás értelmében a takarmány tartósítását úgy végezzük, hogy a takarmányhoz az alábbi I-IV. pontokban összefoglalt tulajdonságokkal azonosítható L. plantarum törzset adunk.
A takarmány tartósítására a baktériumot kb. 105107 telepképző egység/g takarmány mennyiségben adjuk a takarmányhoz, a baktérium mennyisége előnyösen 106 telepképző egység/g takarmány. A baktériumot előnyösen legalább egy másil tartósítószerrel, és lehetőleg legalább egy másik L. plantarum törzzsel vagy egyéb tejsav-baktérium törzzsel együtt adjuk a takarmányhoz. A baktériumokat és a tartósítószer(eke)t egyetlen oldat formájában adhatjuk a takarmányhoz.
Tartósítószerként például növényi rostot lebontó enzimeket (például cellulózt), formiátot, benzoátot, propionsavat és/vagy akrilsavat használhatunk. A formiátot előnyösen 1500 g/t takarmány koncentrációban alkalmazzuk.
A találmány szerinti eljárással előállított, és a találmány szerinti eljárásban használt baktériumtörzs jellemező tulajdonságait alább az I-IV. pontokban ismertetjük. A DSM 4904 törzs például ilyen tulajdonságokkal rendelkezik. A fenti baktériumokat a találmány szerinti eljárásban takarmány tartósítására használhatjuk.
A találmányt közelebbről az alábbiakban ismertetjük.
Az 1. és 2. ábra a baktériumtörzs jellemzőit mutatja.
Az 1. ábrán látható a DSM 4904 törzs plazmid-profilja.
A 2. ábrán látható a DSM 4904 törzs és a siló kiürítésekor izolált baktériumtenyészetek restrikciós BglII enzimmel hasított plazmid-DNS-ének elektroforetikus képe, (A BglII enzim a Boehringer Mannheim GmbH, Mannheim, Penzberg, NSZK terméke).
A %-os értékeket tömeg/térfogat%-ban (vegyes %bán) adjuk meg a tartósítószer-koncentrációkra, és tömeg/ tömeg%-ban (tömeg%-ban) a szárazanyag-tartalomra.
AzL. plantarum DSM 4904 törzs tulajdonságai
I. Az L. plantarum törzset silótakarmányból izoláltuk, és a következő tulajdonságokkal rendelkezik:
- Gram-pozitív
- egyenes, egyenletes vastagságú, különálló pálcika formájú
- kataláz-negatív
- homofermentatív
- 15 °C-on szaporodik, 45 °C-on nem szaporodik
- argininből nem termel ammóniát
- L- és D-tejsavat termel, vagy specifikus racemáz aktivitással rendelkezik; az L-tejsav mennyisége kb. 45% az összes tejsavnak, és a D-tejsav mennyisége kb. 55%-a az összes tejsavnak; MRS tápközegbn (Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA) 30 °C-on 17 órán keresztül tenyésztve az összes tejsav mennyisége kb. 2 g/100 ml MRS tápközeg.
II. A DSM 4904 törzs egyetlen plazmidot tartalmaz, amelynek móltömege viszonylag nagy (35-40 kilobázis) (1. ábra).
III. A DSM 4904 törzs az alábbi cukrokat és cukoralkoholokat fermentálja az API 50 CH (API System
S.A., Franciaország) szerint:
L-arabinóz, ribóz, galaktóz, D-glükóz, D-fruktóz, D-mannóz, mannit, α-metil-D-mannozid, N-acetilglükózamin, amigdalin, arbutin, eszkulin, szalicin, cellobióz, maltóz, laktóz, melibióz, szacharóz, trehalóz, melezitóz, D-raffinóz, β-gentiobióz, D-turanóz.
IV. A DSM 4904 törzs egyéb tulajdonságai
A) A törzs hangyasav-toleranciát, és legalább benzoesavval, akrilsavval és propionsavval szembeni toleranciát is mutat
- nátrium-formiát vizes oldatában (30%-os, pH 6,25) például a törzsből készült, fagyasztva szárított készítmény legalább 4 órán keresztül az eredeti szinten (109 telepképző egység/ml) marad
- igen jól szaporodik MRS tápközegben (pH 6,8), amely 0,3% benzoesavat tartalmaz, Klett-érték mérése alapján (Klett-Summerson fotoelektromos koloriméter, Arthur H. Thomas Comp. Philadelphia, P. A., USA). Ugyanebben a tápközegben, pH 4 értéken, 0,05% benzoesav-koncentráció mellett még mindig kielégítő mértékű a baktérium szaporodása. Az inkubálást 4 napon keresztül 30 °C-on végezzük, az eredményeket az
1. táblázatban foglaljuk össze:
I. táblázat
DSM 4904 törzs szaporodása MRS tápközegben, különböző benzoesav-koncentrációk mellett (inkubálás 30 °C-on 4 napon keresztül)
Benzoesav koncentrációja (%) Klett-érték
pH 6,8 pH 4,0
0 600 500
0,05 600 460
0,1 600 190
HU 207 206 B
Benzoesav koncentrációja (%) KIctt-érték
pH 6,8 pH 4,0
0,2 600 15
0,3 550 6
0,4 510 -
0,5 470 -
- propionsav-toleranciájára jellemző, hogy a DSM 4904 törzs MRS tápközegben, pH 4,0 értéken, 0,5% propionsav jelenlétében is jól szaporodik
- a fenti törzs akrilsavval szemben is toleranciát mutat, 0,1-0,15% koncentráció mellett (MRS tápközeg, pH 4,0)
- a törzs hexametilén-tetraminnal szemben nem toleráns.
B) A törzs antibiotikum-érzékenysége
- a DSM 4904 a következő antibiotikumokkal szemben teljesen rezisztens: gentamicin, kanamicin, neomicin. novobiocin, sztreptomicin, szulfonamidok, vankomicin);
- korlátozott mértékben, vagy erősen érzékeny az alábbi antibiotikumokra: ampicillin, bacitracin, kloramfenikol, eritromicin, G-penicillin, rifamicin, linkomicin, tetraciklin, virginiamicin, spektinomicin.
V. A DSM 4904 törzs retenciója a silótakarmányban
- A DSM retenciója a silótakarmányban jó. A silózás befejezése után 5 hónappal (2. példa) még mindig megtalálhatók a DSM 4904 törzzsel azonos jellemző tulajdonságokat mutató L. plantarum baktériumok a takarmányban. A fenti törzsek biokémiai reakciói és plazmid-profilja azonos, és a BglII estrikciós enzim is azonosan hasítja azokat (2. ábra).
- ha a törzset anaerob körülmények között, MRS tápközegben E. coli NB törzzsel (vízből izolált) együtt tenyésztjük, a DSM 4904 9 nap alatt elpusztítja a coli törzset, és a DSM 4904 törzs mennyisége 9 nap múlva is még mindig 9xl06 telepképző egység/ml.
VI. Sejtek fenntartása
- a törzset savó alapú tápközegben tenyésztjük.
- a törzset fagyasztva szárítjuk, és a fagyasztva szárított készítményt mélyhűtőben (-18 °C-on) legalább 6 hónapon keresztül tárolhatjuk.
VII. Felhasználás takarmány tartósítására
A fagyasztva szárított törzset a takarmány tartósítására használt egyéb anyagokkal - például egy enzimmel - együtt vízzel összekeverjük, és keveréstől számított 4 órán belül 1021—107 élő séjt/g dózisban a takarmányhoz keverjük. A dózis előnyösen 106 élő sejt/g takarmány.
A találmányt közelebbről az alábbi példákkal ismertetjük.
1. példa
16,5% szárazanyag-tartalmú, felaprított zöldtakarmányt - amely szárazanyag 16,2% nyers proteint, 24,2% nyers rostot és 12,4% cukrot tartalmaz 10 kg-os üvegsilóban silózunk. A takarmányt óvatosan tömörítjük, és a silót légmentesen zárjuk műanyaglap segítségével. A takarmány forgatásakor oldatban adjuk az adalékokat, az alábbiak szerint:
A tartósítószer nélkül
B AIV II oldat 5 1/t takarmány
C DSM 4904 106 telepképző egység/g takarmány, enzim 150 ml/t takarmány
D a C szerinti adalék + nátrium-formiát 1000 g/t takarmány
E és C szerinti adalék + nátrium-propionát 2000 g/t takarmány + Pediococcus pentosaceus 107 telepképző egység/g.
Az AIV II oldat 80% hangyasavat és 2% ortofoszforsavat tartalmaz.
Az enzim egy növényi rostot bontó enzimkészítmény, amely főleg cellulózt tartalmaz egyéb enzimek, például hemicellulóz mellett.
A kísérlet eredményei azt mutatják, hogy a C, D és E adalék igen kedvezően befolyásolja a silótakarmány tartósítását. A C, D és E silótakarmány több cukrot és kevesebb protein bomlási terméket (ammóniát) tartalmaz, mint az A és B silótakarmány. A C, D és E takarmányban a magas tejsav/ecetsav arány azt jelzi, hogy intenzív, erősen homofermentatív tejsavas erjedés megy végbe.
2. táblázat:
Silótakarmányok kémiai összetétele (silózási idő 60 nap)
Takar- mány jelzése PH Szárazanyagra vonatkoztatott % nh3 (g/D
tejsav ecetsav vajsav cukor
A 3,86 10,8 2,3 - 1,2 0,32
B 3,95 4.4 1,8 - 2,1 0,18
C 3,72 10,4 0,9 - 2,7 0,10
D 3,77 10,7 0,8 - 3,3 0,12
E 3,80 11,0 1,2 - 2,9 0,17
Ezenkívül a vizsgált silótakarmányok mikrobiológiai összetétele azt mutatja, hogy a DSM 4904 rezisztens a formiátra, és a tejsav-baktériumok összemennyisége ugyanazon a szinten van, mint formiát távollétében (3. táblázat).
HU 207 206 B
3. táblázat
Silótakarmányok mikrobiológiai összetétele (silózási idő 60 nap)
Takarmány jelzése LÁB* (XlO6) Élesztők (xlO3) Penészek CB Clostridiumok
telepképző egység/g takarmány
A 6 1,5-510 <100 <10 3-7
B 12 2-110 100-500 <10 3-15
C 11 11-100 100-3000 <10 4
D 7 17-100 400-1100 <10 3-40
E 10 1900-3900 <100 <10 3-30
*LAB - tejsav-baktériumok **CB - coliform baktériumok
2. példa
18,0% szárazanyag-tartalmú zöldtakarmányt amely 15,3% nyers proteint, 27,1% nyers rostot és 10,6% cukrot tartalmaz a szárazanyagra vonatkoztatva - szecskavágóval felaprítunk és 500 kg-os silókba silózunk. Minden egyes vizsgált takarmányösszetételre két 25 párhuzamos silót készítünk, és a takarmányt alaposan tömöritjük a silókban, majd a silókat műanyaglappal lezárjuk és vízzel töltött edényekkel lenyomatjuk (a nyomás kb. 2,5xl07 Pa).
A szecskágózépben az alábbi adalékokat adjuk a 30 takarmányhoz:
A tartósítószer nélkül
B AIVII oldat 5 1/tonna takarmány (lásd I. példa)
C DSM 4904 törzs 106 telepképző egység/g takarmány, enzim 300 ml/t takarmány D a C szerinti adalék + nátrium-formiát 1000 g/t takarmány
A vizsgált silótakarmányok összetételében az 1. példához hasonló különbségek tapasztalhatók (4. táblázat). Ha a C és D silótakarmányt összehasonlítjuk, azt tapasztaljuk, hogy a formiát kedvezően befolyásolja a mikrobiológiai összetételt, a takarmányban lévő élesztők és penészek tekintetében (5. táblázat).
4. táblázat
Silótakarmányok kémiai összetétele (silózási idő 140 nap)
Takarmány jelzése pH Szárazanyagra vonatkoztatott % nh3-n (%)
tejsav ecetsav vajsav cukor
A 3,92 11,2 2,6 - 0,2 10,9
B 4,15 5,2 2,0 0,9 0,5 8,7
C 3,71 10,3 1,0 - 3,3 1,8
D 3,69 10,5 1,0 - 3,7 1,8
5. táblázat
Silótakarmányok mikrobiológiai összetétele
Takarmány jelzése LÁB (xlO6 Élesztők (xlO3) Penészek CB Klostridiumok
telepképző egyég/g takarmány
A 67-110 35- 51 10- 100 <10 14- 45
B 12- 55 300- 440 100-200000 10-6700 450-45 000
C 1- 8 150-46000 10- 12000 10- 60 <3
D 1 25- 170 <10 <10 3- 20
HU 207 206 Β
A silótakarmányokat aerob rezisztenciájuk és eltarthatóságuk szempontjából is megvizsgáltuk úgy, hogy 24 °C-on tartottuk azokat, és mértük az egyes takarmányokban a hőmérséklet változását. A magas cukortartalom ellenére a C és D készítmény 2 napon keresztül stabil marad (6. táblázat).
6. táblázat
Hőmérséklet változása a silótakarmányokban (°C)
Takarmány jelzése Hőmcrséklcinövekedés (°C)
1. nap 2. nap 7. nap
A 14 18 30
B 10 18 20
C 11 18 34
D 10 18 31
A formiát fokozza a .silótakarmány stabilitását, és a hőmérséklet lassabban emelkedik a D készítményben, mint a C készítményben.
3. példa
20-22% szárazanyag-tartalmú zöldtakarmányt - a szárazanyag 17,3% nyers proteint, 24,3% nyers rostot és 12,2% cukrot tartalmaz - 90 tonnás bunker-silókban silózunk. A takarmányt szecskavágóval aprítjuk és az adalékolást az aprítás során végezzük. A takarmányt traktorral lenyomatva tömörítjűk, és légmentesen lezárjuk műanyaglap segítségével. Az adalékolást az alábbiak szerint végezzük:
A tartósítószer nélkül
B AIV oldat 5 l/t (lásd 1. példa)
C DSM 4904 törzs 106 telepképző egység/g takarmány, enzim 300 ml/t takarmány
D a C szerinti adalék + nátrium-formiát 1500 g/t takarmány
E a C szerinti adalék + Pediococcus pentosaceus 103 telepképző egység/g.
A silótakarmány minősége hasonló az 1. és 2. példák szerint előállított takarmányhoz (7. táblázat).
7. táblázat:
Silótakarmányok kémiai összetétele (silózási idő 56 nap)
Takar- mány jelzése PH Szárazanyagra vonatkoztatoit % NH,
lejsav ecetsav vajsav cukor (g/1)
A 3,89 10.1 1.6 0 1,8 0,51
B 4,05 1,9 0,8 0,1 10,2 0,16
C 3,87 10,7 1,6 0 4,5 0,37
D 3,84 10,4 1,2 0 4,0 0.30
E 3,78 10.8 0,8 0 5,3 0,21
4. példa
A 8. táblázatban ismertetjük a pH csökkenésének és az L- és D-tejsav termelődésének sebességét a 2. példa szerint előállított külöböző silótakarmányokban.
8. táblázat:
pH-csökkenés és tejsav-képzódés 0-14 napos silózási idő alatt (sav% szárazanyagra vonatkoztatva)
Takar- mány jelzése Vizsgálat Idő(nap)
0. 2. 3. 7. 14.
A PH 5,8 5,6 4,6 4,1 4.1
L-tejsav 0,1 1,4 2,7 3,9 4,7
D-tejsav 0,1 0,4 2,2 3,3 3,9
ecetsav 0,0 0,5 0,7 1,0 1,2
B PH 4,1 4,2 4,1 4,2 4,3
L-tejsav 0,1 0,0 0,1 0.1 0,1
D-tejsav 0,0 0,0 0,0 0,0 0,1
ecetsav 0,0 0,0 0,0 0,1 0,3
C pH 5,7 3,9 3,8 3,9 3,8
L-tejsav 0,1 3,1 4,1 4,4 4,7
D-tejsav 0,1 5,3 5,6 5,3 5,4
ecetsav 0,0 0,4 0,5 0,9 1,0
D PH 5.8 4,0 3,9 3,8 3,8
L-tejsav 0,1 2,5 2,8 3,9 4,0
D-tejsav 0,1 5,7 5,7 5,5 5,6
ccetsav 0,0 0,4 0,4 0,7 0,9
Két nap alatt a DSM 4904 törzs és az enzim formiát jelenlétében vagy anélkül, pH 4 alá csökkenti a silótakarmány pH-értékét, ami a takarmány tartósítása szempontjából a megfelelő szint. A tejsav-termelődés sebessége is nagy, mivel az össz-tejsav mennyisége 2 nap alatt eléri a 8%-ot, szárazanyag-tartalomra számítva.
A DSM 4904 törzsre jellemző módon a silótakarmányban végbemenő fermentáció már kezdettől fogva nagymértékben homofermentatív jellegű. Az ecetsav kis mennyisége a silótakarmányban jelzi a tiszta fermentációt. Ezenkívül, a formiát hozzáadása még tovább csökkenti az ecetsav-képződést a silótakarmányban.
5a példa
Főleg réti komócsinból álló zöldtakarmányt 10 kgos laboratóriumi silókban silózunk. Az adalékanyagokat kézi permetezővel permetezzük a takarmányra, és a silótakarmányt tömörítjűk, lenyomatjuk és levegőmentesen lezárjuk. A silózás ideje 60 nap. A kísérlet eredményeit a 9. táblázatban ismertetjük.
9. táblázat:
Takarmány tartósítása AIV II oldattal (5 l/t takarmány) és DSM 4904 törzzsel (106 telepképző egység/g takarmány)
Adalékanyag pH Szárazanyagra vonatkoztatott % NH3 (g/D
tejsav ecetsav vajsav cukor
adalék nélkül 4,0 8,3 1,8 0 1,3 0,39
AIV II oldat 4,1 3,6 0,9 0 7,1 0,24
DSM 4904 3,9 7,5 1,8 0 1.4 0,12
A 9. táblázat eredményei szerint a DSM 4904 törzzsel jó tartósítási eredményeket kapunk. A fermentációban keletkező savakat tekintve a tartósítószer nél1
HU 207 206 Β kül és DSM 4904 törzzsel kapott silótakarmányok összetétele nagyon hasonló, viszont a DSM 4904 adalékot tartalmazó silótakarmányban a kedvezőtlen ammónia koncentrációja lényegesen alacsonyabb.
5b példa
Főleg réti komócsinból álló zöldtakarmányt kb. 10 tonnás buner-silókban siklózunk. A takarmányt fűnyírőgéppel vágjuk le, és a tartósító adalékanyagokat a levágáskor adjuk a takarmányhoz. A silókat műanyaglapokkal légmentesen lezárjuk, és vízzel töltött nehezékekkel lenyomatjuk. Az eredményeket a 10. táblázatban ismertetjük.
10. táblázat:
Cellulóz enzim hatása zöldtakarmány fermentálására, 140 napos silózási idő alatt
Tartósítóadalék pH Szárazanyagra vonatkoztatott % nh3 (g/1)
tejsav ecetsav vajsav cukor
adalék nélkül 3,89 7,4 1,0 0 2,7 0,77
enzim 3,82 9,5 0,9 0 3,1 0,59
A10. táblázat eredményei szerint az enzimmel kapott silótakarmány nagyon hasonló az adalékanyag nélkülihez. Ha a 9. és 10. táblázat eredményeit öszehasonlítjuk, azt látjuk, hogy az enzimmel kapott takarmány az ammóniakoncentrációt tekintve sokkal kedvezőtlenebb, mint a DSM 4904 hozzáadásával előállított silótakarmány.
6. példa
Főleg réti komócsinból álló zöldtakarmányt 10 kgos laboratóriumi silókban silózunk, az 5. példa szerint. Az eredményeket a 11. táblázatban ismertetjük.
II. táblázat:
Nátrium-propionát hatása a silótakarmány fermentálására
Takar- mányadalék pH Szárazanyagra vonatkoztatott % LÁB’ xlO6, nh3 (g/1)
tejsav ecet- sav vaj- sav cukor
DSM 4904 + enzim 3,8 12,1 1,3 0 2,4 9,5 0,15
DSM 4904 + 0,2% Napropionát 3,8 12,6 U 0 2,9 160 0,13
*teleképző egység/g takarmány
A fenti eredmények azt mutatják, hogy a nátriumpropionát hozzáadása nem befolyásolja károsan a tejsav-baktériumok (LÁB) mennyiségét, ugyanakkor a fermentált takarmány minősége (tejsav/ecetsav arány, ammónia mennyisége) javul.
7. példa t, főleg réti komócsinból és réti csenkeszből álló zöldtakarmányt bunker-silóban silózunk. A füvet fűnyírógéppel vágjuk le, és az adalékanyagokat a nyírás közben adjuk a takarmányhoz. A takarmányt a silóban traktorral tömörítjük, levegőmentesen műanyaglapokkal lezárjuk és lenyomatjuk. Az eredményeket a 12. táblázatban ismertetjük.
12. táblázat
Nátrium-benzoát hatása a silótakarmány fermentálására (silózási idő 56 nap)
Takarmányadalék pH Szárazanyagra vonatkoztatott % nh3 (g/1)
tej- sav ecet- sav vaj- sav cukor
DSM 4904 + enzim 3,9 10,7 1.6 0 4,5 0,37
DSM 4904 + 0,05% SB* 3,9 10,3 1,5 0 3,0 0,37
DSM 4904 + 0,1% SB 3,8 11,1 1,1 0 4,7 0,24
*SB-nátrium-benzoát
A nátrium-benzoát hozzáadása nem hat károsan a tejsav-baktérimok mennyiségére. Minden takarmányban 106—108 telepképző egység/g a tejsav-baktériumok száma. A nátrium-benzoátos kezelés jelentősen csökkenti az élesztők mennyiségét, Benzoát nélkül az élesztők mennyisége 100 telepképző egység/g takarmány. A benzoáttal kezelt takarmány nem tartalmaz élesztőt. A fermentálás minősége még jobb 0,1% nátrium-benzoát-koncentráció esetén (12. táblázat).

Claims (8)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás takarmány tartósítására, azzal jellemezve, hogy a takarmányhoz 1 g takarmányra számítva előnyösen 105—107 telepkéző egység mennyiségben Lactobacillus plantarum DSM 4904 letéti számú törzset, vagy annak valamely mutánsát vagy variánsát és kívánt esetben tartósítószert és egy vagy több, a DSM 4904 törzstől eltérő tejsavbaktérium törzset adunk.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a baktériumot 1 g takarmányra számítva mintegy 106 telepképző egység mennyiségben adjuk.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a baktériumtörzs mellett tartósítószer(eke)t adunk a takarmányhoz.
  4. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a baktériumtörzset és a tartósítószer(eke)t egyetlen oldatban adjuk a takarmányhoz.
  5. 5. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy tartósítószerként növényi rostot bontó enzimet, előnyösen cellulázt adunk a takarmányhoz.
  6. 6. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy tartósítószerként szerves savakat vagy azok sóját, így formiátot, benzoátot, propionsavat vagy akrilsavat adunk a takarmányhoz,
  7. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a formiátot előnyösen 1500 g/t takarmány menynyiségben adjuk.
  8. 8. Az 1-7, igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy egy vagy több DSM 4904 törzstől eltérő tejsavbaktérium törzset adunk a takarmányhoz.
HU895877A 1988-11-14 1989-11-13 Method for preserving fodder HU207206B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI885252A FI82354C (fi) 1988-11-14 1988-11-14 Konservering av faerskfoder.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT51467A HUT51467A (en) 1990-05-28
HU207206B true HU207206B (en) 1993-03-29

Family

ID=8527382

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU895877A HU207206B (en) 1988-11-14 1989-11-13 Method for preserving fodder

Country Status (17)

Country Link
US (1) US5053233A (hu)
EP (1) EP0369198B1 (hu)
JP (1) JPH0361453A (hu)
AT (1) ATE95387T1 (hu)
AU (1) AU626341B2 (hu)
CA (1) CA2001579C (hu)
CZ (1) CZ280316B6 (hu)
DE (2) DE369198T1 (hu)
DK (1) DK525089A (hu)
ES (1) ES2047089T3 (hu)
FI (1) FI82354C (hu)
HU (1) HU207206B (hu)
IE (1) IE62850B1 (hu)
LV (1) LV10370B (hu)
NO (1) NO175344C (hu)
NZ (1) NZ231157A (hu)
PL (1) PL161142B1 (hu)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3916563A1 (de) * 1989-05-20 1990-11-22 Atochem Werke Gmbh Kombinationspraeparat und verfahren zum einsaeuern von gruenfutter und verhindern von aeroben abbauvorgaengen in gaerfutter
WO1991015966A1 (en) * 1990-04-18 1991-10-31 Ssv-Development Oy Enzyme treated forage for silage
DE4034749C2 (de) * 1990-11-01 2002-11-07 Addcon Agrar Gmbh Kombinationspräparat und Verfahren zum Einsäuern von Grünfutter und Verhindern von aeroben Abbauvorgängen in Gärfutter
EP0473126A1 (de) * 1990-08-29 1992-03-04 SANOFI-CEVA Gesellschaft mit beschränkter Haftung Kombinationspräparat und Verfahren zum Einsäuern von Grüfutter und Verhindern von aeroben Abbau-Vorgängen in Gärfutter
LT3208B (en) * 1992-04-10 1995-03-27 Ssv Dev Oy Enzyme products for use in the improvement of feed value and conservation of fibrous crops
EP0580236A3 (en) * 1992-07-24 1994-12-21 Duphar Int Res Vaccine for silage.
FI991435A (fi) * 1999-06-24 2000-12-25 Valtion Teknillinen Menetelmä maitohappobakteerikannan valitsemiseksi tuorerehun säilöntää varten ja tuorerehun säilöntä
US20060292205A1 (en) * 2002-10-08 2006-12-28 Robinson Leanne G Substitute for animal protein in cattle feed
KR100496022B1 (ko) * 2002-11-28 2005-06-16 대한민국 보리 사일리지 발효용 미생물 첨가제
KR100575522B1 (ko) * 2003-11-11 2006-05-03 대한민국 옥수수 사일리지 발효용 미생물 첨가제
JP4989056B2 (ja) * 2005-09-22 2012-08-01 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 飼料調製用微生物製剤とその利用
ES2578194T3 (es) * 2006-07-14 2016-07-21 Legarth, Lone Procedimiento de preparación de productos alimentarios para animales homofermentados
EP2584042A1 (en) 2011-10-17 2013-04-24 Nomad Bioscience GmbH Production, storage and use of cell wall-degrading enzymes
PL219782B1 (pl) 2012-11-22 2015-07-31 Inst Biotechnologii Przemysłu Rolno Spożywczego Im Prof Wacława Dąbrowskieg Nowy szczep bakterii Lactobacillus buchneri A oraz wieloskładnikowy preparat do konserwowania roślin wysokoskrobiowych
CN103053811B (zh) * 2013-01-31 2014-07-09 北海市翰华生物技术有限公司 一种经微生物发酵的螺旋藻泥混合鸡饲料的制备方法
ES2710435T3 (es) 2013-03-13 2019-04-25 Novozymes As Nuevas cepas de Lactobacillus y sus usos
EE05746B1 (et) 2013-07-30 2015-05-15 OÜ Tervisliku Piima Biotehnoloogiate Arenduskeskus Mikroorganism Lactobacillus plantarum TAK 59 NCIMB42150 ja selle kasutamine
CN109123087A (zh) * 2018-07-30 2019-01-04 开平市华声生物科技有限公司 一种纤维类养殖用料的发酵菌剂及禽畜饲料
CN110015512A (zh) * 2019-05-08 2019-07-16 贵州师范大学 一种喀斯特地区牧草堆放装置

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5811983A (ja) * 1981-07-16 1983-01-22 Canon Inc 画像形成装置
EP0071858A1 (en) * 1981-08-06 1983-02-16 Miles Laboratories, Inc. Silage preservation with propionic acid producing microorganisms
FI66282C (fi) * 1982-11-02 1984-10-10 Valio Meijerien Foerfarande foer ensilering av groenfoder eller fullsaed
US4528199A (en) * 1983-01-26 1985-07-09 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Silage production from fermentable forages
US4842871A (en) * 1985-08-01 1989-06-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Method and inoculant for preserving agricultural products for animal feed
DE3616181A1 (de) * 1986-05-14 1987-11-26 Atochem Werke Gmbh Verfahren zum einsaeuern von gruenfutter
AT385876B (de) * 1986-07-08 1988-05-25 Produktionsgemeinschaft F U H Produkt fuer die tierernaehrung und verfahren zu seiner herstellung
US4820531A (en) * 1987-10-22 1989-04-11 Pioneer Hi-Bred International Bacterial treatment to preserve hay quality by addition of microorganisms of the genus bacillus
JPH01255576A (ja) * 1988-04-06 1989-10-12 Brother Ind Ltd 印字装置

Also Published As

Publication number Publication date
US5053233A (en) 1991-10-01
DE68909743D1 (de) 1993-11-11
EP0369198B1 (en) 1993-10-06
NO175344B (no) 1994-06-27
PL161142B1 (pl) 1993-05-31
CZ280316B6 (cs) 1995-12-13
ES2047089T3 (es) 1994-02-16
JPH0547183B2 (hu) 1993-07-16
AU4457989A (en) 1990-05-17
FI885252A0 (fi) 1988-11-14
NO894520D0 (no) 1989-11-13
CA2001579A1 (en) 1990-05-14
FI885252A (fi) 1990-05-15
IE893568L (en) 1990-05-14
DE68909743T2 (de) 1994-02-17
DK525089D0 (da) 1989-10-23
EP0369198A3 (en) 1991-01-30
CZ641489A3 (en) 1993-01-13
ATE95387T1 (de) 1993-10-15
HUT51467A (en) 1990-05-28
EP0369198A2 (en) 1990-05-23
NZ231157A (en) 1991-12-23
JPH0361453A (ja) 1991-03-18
LV10370B (en) 1995-12-20
FI82354C (fi) 1991-03-11
AU626341B2 (en) 1992-07-30
LV10370A (lv) 1995-02-20
DE369198T1 (de) 1991-05-23
DK525089A (da) 1990-05-15
FI82354B (fi) 1990-11-30
IE62850B1 (en) 1995-03-08
NO894520L (no) 1990-05-15
CA2001579C (en) 1999-06-08
NO175344C (no) 1994-10-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU207206B (en) Method for preserving fodder
AU2002239449B2 (en) Mixed cultures for improved fermentation and aerobic stability of silage
Cai et al. Effect of NaCl‐tolerant lactic acid bacteria and NaCl on the fermentation characteristics and aerobic stability of silage
US20170208836A1 (en) Rapid acting lactobacillus strains and their use to improve aerobic stability of silage
AU2002239449A1 (en) Mixed cultures for improved fermentation and aerobic stability of silage
WO2008073848A1 (en) Lactobacillus buchneri strain ln5665 and its use to improve aerobic stability of silage
Fitzsimons et al. Assessment of Pediococcus acidilactici as a potential silage inoculant
EP2091354A1 (en) Lactobacillus buchneri strain ln1326 and its use to improve aerobic stability of silage
US4528199A (en) Silage production from fermentable forages
EP1089633A1 (en) Methods and compositions for improving aerobic stability of silage
Winters et al. Degradation of fructans by epiphytic and inoculant lactic acid bacteria during ensilage of grass
CA2378579C (en) Non-lactate-assimilating yeast for improving aerobic stability of silage
EP0071858A1 (en) Silage preservation with propionic acid producing microorganisms
CA1098364A (en) Process for fermentation of green fodder
Cai et al. Comparative studies of lactobacilli and enterococci associated with forage crops as silage inoculants
Rauramaa et al. The effect of inoculants and cellulase on the fermentation and microbiological composition of grass silage: II Microbiological changes in the silages
PL219782B1 (pl) Nowy szczep bakterii Lactobacillus buchneri A oraz wieloskładnikowy preparat do konserwowania roślin wysokoskrobiowych
OHMOMO et al. Evaluation of lactic acid bacteria isolates for silage fermentation inoculant in Thailand by using a modified pouch method
FI95724C (fi) Rehun homehtumisen esto
Wang et al. The effects of lactic acid bacteria strains isolated from various substrates on the fermentation quality of common vetch
Kamga et al. Isolation and identification of the predominant lactobacilli in elephant grass (Pennisetum purpureum) and Guatemala grass (Trypsacum laxum) silage from Bambui, Cameroon
HU193678B (en) Process for controlling the lactous fermentation

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee