JP2009543545A - ホモ発酵生成物 - Google Patents

Abstract

本発明は、液体飼料の分野に関係し、発酵した飼料生成物、それらを調製するための方法並びにそれらの使用に関する。その上、本発明は、更に、動物の液体飼料及び乳酸菌を使用して液体飼料を調製する方法に関する。特に、（ａ）液体発酵生成物を準備するステップと、（ｂ）発酵すべき飼料生成物を準備するステップと、（ｃ）ステップ（ａ）及び（ｂ）による生成物を合わせ、接種材料としてステップ（ａ）の液体発酵生成物を用いてステップ（ｂ）の飼料生成物を発酵させるステップとを含む発酵混合飼料を調製する方法が提供される。

Description

本発明は、液体飼料の分野に関する。より詳しくは、本発明は、発酵した飼料生成物、それらを調製するための方法並びにそれらの使用を提供することに関する。

農業において、飼料はしばしば液体供給システムによって動物に供給される。これはいくつかの問題を引き起こす。潜在的有害細菌及び有機体は、土壌及び植物に自然に存在するものであり、従って、飼料成分及び動物の周りのあらゆる場所に見出される。存在する細菌及びその他の有機体は、例えば殺菌によって防止しない限り、発酵する。その発酵は、例えば、ビブリオ菌種（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐｐ．）、カンピロバクター菌種（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｐ．）、サルモネラ菌種（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐｐ．）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｏｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）等の病原菌の成長をもたらす。また、高含量のさまざまなタイプの酵母菌及びカビが存在し得る。液体飼料中のこの制御されない増殖は、動物の病気、栄養失調、下痢、又は死亡さえももたらし得る。また、カンピロバクター菌種（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｐ．）又はサルモネラ菌種（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐｐ．）に感染している動物は、その感染症をヒトに転移する可能性があり、それ故、動物におけるそのような感染症を回避することが望ましい。

病原微生物を含む高い微生物圧力（ｈｉｇｈ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｒｅｓｓｕｒｅ）のある環境における発酵混合飼料の生産は、非常に挑戦的であり、これまでに多くの試みが失敗している。一般に、スターターカルチャーによる飼料の従来の植菌は、細菌の殺菌操作を含む培養及び増殖ステップを必要とする。これは、一般的な微生物学的技術の訓練を受けておらず、養豚場における従来の給餌用調理場で見出されるような高い微生物圧力の環境に取り囲まれている畜産農家にとっては非常に挑戦的である。
別法の発酵飼料の一部を新しい発酵バッチのための接種材料として使用する「連続式」発酵は、酸耐性酵母菌などの望ましくない微生物の漸増に悩まされる。これらは発酵飼料に対して有害な影響を有することが知られているばかりでなく、それらは特に供給パイプ中から取り除くのが非常に困難なことがある。

液体飼料を飼料として使用する場合、上記の問題を回避することは、不可能ではないにしても、非常に困難であることが証明されている。従って乾燥飼料の使用が多くの場合代替の選択である。

つい最近まで、抗生物質に基づく成長促進物質が、例えば下痢を防止し、それによって体重増加を増すために（このため「成長促進物質」という）、例えばブタに日常的に提供された。畜産農家による抗生物質に基づく成長促進物質の使用は、ＥＵを含むいくつかの国において禁止された。これは一つには多耐性病原微生物を発生する恐れがあるためである。しかし、抗生物質の使用は停止されておらず、獣医は、多数のブタの治療のために抗生物質を毎日処方している。

本発明により、上記の問題が解決された。また、本発明は、非抗生物質の成長促進物質を提供する。

一の態様において、本発明は、（ａ）液体発酵生成物を準備するステップと、（ｂ）発酵させる飼料生成物を準備するステップと、（ｃ）ステップ（ａ）及び（ｂ）による生成物を合わせ、接種材料としてステップ（ａ）の液体発酵生成物を用いてステップ（ｂ）の飼料生成物を発酵させるステップとを含む発酵混合飼料を調製する方法に関する。

本発明の別の態様は、（ａ）液体発酵生成物を準備するステップと、（ｂ）発酵すべき飼料生成物を準備するステップと、（ｃ）ステップ（ａ）及び（ｂ）による生成物を合わせ、接種材料としてステップ（ａ）の液体発酵生成物を用いてステップ（ｂ）の飼料生成物を発酵させるステップとを含む方法によって提供される発酵混合飼料に関する。

本発明の更なる態様は、動物に給餌するための発酵混合飼料の使用であって、前記発酵混合飼料が、（ａ）液体発酵生成物を準備するステップと、（ｂ）発酵させる飼料生成物を準備するステップと、（ｃ）ステップ（ａ）及び（ｂ）による生成物を合わせ、接種材料としてステップ（ａ）の液体発酵生成物を用いてステップ（ｂ）の飼料生成物を発酵させるステップとを含む方法によって提供される、発酵混合試料の使用に関する。

本発明の更なる態様は、ｐＨを少なくとも４．２まで２４時間以内に低下させるのに十分な乳酸を産生することができる乳酸産生菌により液体生成物を発酵させることによって得ることができる発酵生成物に関する。

更なる態様において、本発明は、サイレージ、その調製及び使用に関する。

更なる態様において、本発明は、本発明による発酵生成物の直接液体飼料としての使用又は液体飼料を調製するための使用に関する。

更なる態様において、本発明は、発酵生成物を調製するための方法及びその成長促進物質としての使用に関する。その方法は、（ａ）液体生成物を準備するステップと、（ｂ）ｐＨを少なくとも４．２まで２４時間以内に低下させるのに十分な乳酸を産生することができる乳酸産生菌を準備するステップと、（ｃ）（ａ）と（ｂ）とを一緒にするステップと、（ｄ）前記発酵生成物を得るための適当な条件下で発酵が起こることを可能にするステップとを含む。

更なる態様において、本発明は、（ａ）本発明による発酵生成物を準備するステップと、（ｂ）発酵させる飼料生成物を準備するステップと、（ｃ）適当な条件下で発酵が起こることを可能にするステップとを含む液体飼料を調製する方法に関する。

へテロ発酵プロセスと比較したホモ発酵プロセスを示す図である。 乳酸産生菌が活性であるｐＨ、及びいくつかの好ましくない細菌が増殖できるｐＨを示す図である。 良く制御された自然発酵プロセスのグラフである。 不十分に制御された自然発酵プロセスのグラフである。 発酵プロセスが制御されているかいないかによるカダベリン産生（腐敗プロセス）に対する影響を示す図である。 本発明の１実施形態による発酵生成物又は工業的プロセスからの副産物を含む動物飼料を提供するステップを示すフローダイアグラムである。 本発明の１実施形態による発酵した液体動物飼料を提供するステップを示すフローダイアグラムである。 本発明の１実施形態による主成分及びステップを示して説明する図である。 本発明の別の実施形態による発酵飼料の生産を示す図である。 本発明の１実施形態による発酵及び混合タンクの配置の模式図である。 本発明の１実施形態による発酵タンクの配置の模式図である。 本発明の１実施形態によるいくつかの発酵タンクの配置の模式図である。

液体飼料の調製は、発酵プロセス又はサイロに貯蔵するプロセスを伴う。一般に、２つのタイプの発酵プロセス、即ち、発酵が、乳酸、酢酸、酪酸、酵母及びエタノールの形成をもたらす「ヘテロ発酵」、並びに発酵が乳酸の形成をもたらす「ホモ発酵」が起こり得る。

従って、本発明の目的は、ホモ発酵が主として起こることを確保し、望ましくない細菌、酵母菌、カビ、菌類及び乳酸産生菌の増殖を制御又はこれらを打ち負かすことを確保することによって発酵プロセスを制御することである。

異なる酸及び酵母菌は、異なる味を有しており、そのいくつかは動物が好み、そのいくつかは動物が好まない。

従って、本発明の更なる目的は、正しい成分が存在し、そのような成分がより高い嗜好性をもたらす適当な比率で存在することを確保することである。

本発明による乳酸菌は、乳酸を産生し、発酵の間にｐＨを少なくとも４．２まで２４時間以内に低下させることができる。１実施形態においては、その乳酸産生は、１５時間以内に起こるべきである。

１実施形態において、そのｐＨは、３．５から４．２の間、例えば３．８である。

１態様において、本発明は、ｐＨを少なくとも４．２まで２４時間以内に低下させるのに十分な乳酸を産生することができる乳酸産生菌により液体生成物を発酵させることによって得ることができる発酵生成物に関する。１実施形態において、そのｐＨは、４．２と３．５の間、例えば３．８などである。別の実施形態において、その望ましいｐＨは、１５時間以内に到達すべきである。

本文脈において、用語「発酵」及び「サイロに貯蔵する（ｅｎｓｉｌｉｎｇ）」は、互換的に使用され、同じ意味を有することを意図している。

用語「発酵槽」又は「発酵タンク」は、発酵が起こる容器、タンクなどを示す。普通、発酵槽の内容物を混合するための１つ又は複数の混合装置が備えられる。しかし、発酵又は発酵の一部は、発酵槽の外側、例えば、パイプ、混合タンク、貯蔵タンクなどの中でも起こり得る。

用語「タンク」又は「容器」は、互換的であり、（貯蔵）設備を表す。それらは、サイロ型のもの、ビッグバッグ、又は部屋若しくは区切られた区画等の貯蔵施設であり得る。

用語「流体生成物」又は「液体生成物」は、互換的に使用され、水分含量が２０容量％以上、特に２５容量％以上の生成物を表す。本文脈において、「容量％」は、容積パーセントを意味することを意図している。別段の断りのない限り、％は重量％を示す。

本発明による発酵に対して適切であるために、生成物は、一般に、２０容量％以上、特に２５容量％以上の水分含量を有する。本発明の１実施形態において、十分な水含量（即ち、２０容量％以上の水含量）は、適切な水含量の混合物をもたらすために、不十分な水含量（即ち、２０容量％より少ない水含量）の生成物を、十分な水含量の生成物と混合することによって提供する。更なる実施形態においては、水又は水性流体（ａ ｗａｔｅｒ−ｂａｓｅｄ ｆｌｅｉｄ）の添加を組み合わせた異なる水含量の生成物を混合する組合せによって発酵に対して適切な水含量の混合物を提供する。

本発明の別の実施形態において、効率的な発酵に対して含水量が低すぎる場合は水を発酵すべき飼料生成物に添加する。場合によって、その水は、処理することができ、化合物及び化学組成物、例えば、塩、ミネラル、ビタミン、緩衝物質、有機又は無機酸などを含むことができる。更に別の実施形態においては、その処理水は、発酵及び／又は動物の体重増加を改善する。

本発明による用語「生成物」は、その最も広い意味で理解すべきである。一般に、その生成物は、食物又は飼料に関係する。「生成物」及び「飼料生成物」は、乳業、農業、ワイン産業、蒸留酒産業、又はビール産業或いはそれらの組合せから適切に得ることができる。適当な「生成物」及び「飼料生成物」の例としては、１つ又は複数の成熟した及び／又は未成熟の植物並びにそれらの一部、穀物、例えば、コムギ、オオムギ、ライムギ、コメ、トウモロコシ（軸付きトウモロコシのサイレージ（ＣＣＭ）又は完熟品）、ライコムギ、カラスムギ；野菜類（例えば、ジャガイモ、マメ、エンドウマメ、トウモロコシ、ダイズ）；乳清、凝乳、スキムミルクなどを含む。

「副産物」又は「廃棄物」は、低価格又は無料で利用することができる工業的プロセスから派生する殆ど不要な生成物を表現するために用いられる用語である。一般に、それらは動物用の飼料として直接には使用されず、長時間の貯蔵は、分解と制御されない発酵及び損傷とによって問題点であり得る。かような「副産物」及び／又は「廃棄物」の例としては、乳清、（醸造、ワイン又はバイオエタノール産業からの）使用済み穀物、植物又はそれらの一部、ジャガイモ、植物類、酵母、細菌、菌類などを含む。

用語「発酵生成物」又は「発酵飼料」は、発酵が完了しているか発酵される過程にある何らかの生成物又は飼料を表す。

「液体発酵生成物」とは、発酵生成物が２０％を超える水／水分含量を有することを表す。本発明との関連において、それは発酵のための接種材料として用いられる。それは、直接、又は、別の発酵若しくは非発酵の飼料、組成物若しくは生成物との組合せで動物に供給することもできる。

「サイレージ」又は「エンシレージ」は、互換的に使用され、動物、普通はウシ及びヒツジのような反芻動物に供給される発酵植物生成物を指す。サイレージは、エンシレージと呼ばれる方法で、発酵され貯蔵される。通常、発酵は、発酵される植物生成物に存在する自然の微生物叢によって起こる。従って、酢酸を含むさまざまな異なる発酵生成物が生じ得る。発酵過程は、数日、数週間、又は１カ月はかかる可能性があり、得られる発酵生成物であるサイレージ又はエンシレージは、何カ月も貯蔵することができる。サイレージは、殆どの場合、トウモロコシ又はモロコシを含むイネ科の作物から調製される。サイレージは、多くの場合、通常根を除くが穀物だけではない植物全体から製造する。一般に、その植物は、多くの場合収穫中に直接切片に切り込む。サイレージは、多くのその他の農作物からも生産することができ、時々カラスムギ及びエンドウマメ等の混合物が使用される。ヘイレージは、イネ科植物、アルファルファ及びアルファルファ／イネ科植物混合物などで構成されているサイロに貯蔵した飼料を表現するために使用される用語である。それは、例えば酪農で給餌するために使用される。ベイレージはサイロでの発酵に代わるサイレージのもう１つの形態である。この場合は、例えば植物又はその一部を、未だかなり湿っておりしばしば梱包して干草として保存するには湿り過ぎている間に、切断して梱包する。乾物はおよそ６０〜７０％であり得る。その梱包物をプラスチックの包装材料中にきつく包み、その中で発酵させる。

用語「発酵混合飼料」は、本発明のプロセスにおける、即ち、接種材料として液体発酵生成物を使用することにより本発明に従って発酵させた飼料生成物を表す。追加成分、例えば、ミネラル、ビタミン、アミノ酸、非発酵飼料などが更に存在してもよい。

本明細書で用いられる用語「動物」は、哺乳類、例えば、ブタ、子ブタ、ウシ、及びウマなど、家禽、例えば、ニワトリ、シチメンチョウ、メンドリ、ガチョウ及びアヒルなど、並びに魚、例えば、サケ及びマスなどを含むことが意図されている。単胃動物、例えば、ヒト、ブタ、ウマ、イヌ、及びネコなどは、単純な単腔の胃を有する。それに対して、反芻する動物即ち反芻動物は、複数腔の複雑な胃を有する。反芻動物は、彼等の食物を、最初に原材料を食べて、食い戻しとして知られる消化半ばの形のものを吐き戻すことと、次にその食い戻しを食べる（咀嚼する）反芻と呼ばれるプロセスの２段階で消化する。反芻動物としては、例えば、ウシ、ヤギ、ヒツジ、シカなどが挙げられる。

用語「成長促進物質」は、動物にその成長又は体重増加を改善するために与える化合物又は生成物を表す。これは、獣医により処方されるか又は畜産農家によって予防的に加えられる飼料への抗生物質の添加を含む。一方で、本発明により提供される発酵混合飼料もまた、コントロールと比較して動物の体重増加を増大することができることが示されているので成長促進物質である。

一般に、発酵は、適当な温度において相応する量の時間がかかる。その温度は、乳酸産生菌の活性を確保するようなものでなければならず、即ちそれは１０℃未満又は５０℃を超えてはならない。１実施形態において、その温度は、約３０℃であり得る。発酵は少なくともｐＨが適当な水準、即ち、４．２以下、例えば、３．５又は３．８に到達するまで続けなければならない。つまり、発酵は、最大例えば２４時間又は１５時間続けなければならない。時には、発酵は、１０、９、８、５、６、４、３、又は２時間、或いは１時間、或いはある場合には３０分以内で完了し得る。

１態様において、本発明は、（ａ）液体発酵生成物を準備するステップと、（ｂ）発酵される飼料生成物を準備するステップと、（ｃ）ステップ（ａ）及び（ｂ）による生成物を合わせ、接種材料としてステップ（ａ）の液体発酵生成物を用いてステップ（ｂ）の飼料生成物を発酵させるステップとを含む、発酵混合飼料を調製する方法に関する。本発明の１実施形態において、その発酵混合飼料は、４．２より低いｐＨを有する。別の実施形態において、そのｐＨは、４．２と３．５の間である。更なる実施形態において、その発酵混合飼料のｐＨは、３．８前後である。

乳酸菌は、発酵可能な炭素源の発酵の間乳酸を産生し、それが周囲の酸性化をもたらす。使用される１つ又は複数のスターターカルチャー、並びに発酵可能な糖の利用可能性に応じて、発酵混合飼料は本発明によって提供され、前記発酵飼料は５０ｍＭを超える乳酸濃度を有する。別の実施形態において、乳酸濃度は１００ｍＭを超える。更なる実施形態において、乳酸濃度は、１５０ｍＭ又は２００ｍＭを超える。更に別の実施形態においては、２５０ｍＭを超え又は３００ｍＭを超える乳酸濃度が発酵生成物中に与えられる。

本発明に従う発酵のための接種材料として使用される液体発酵生成物、副産物又は廃棄物中の乳酸濃度は、該発酵混合飼料中の乳酸濃度より高くすることができる。本発明の別の実施形態においては、該発酵混合飼料中の乳酸濃度は、液体発酵（副）生成物中より高い。更なる実施形態において、接種材料及び発酵生成物の乳酸濃度はほぼ同じである。

同様に、接種材料及び発酵（混合）生成物のｐＨは、同じか、似ているか又は異なり得る。本発明の１実施形態において、接種材料として使用される液体発酵生成物のｐＨは、４．２より低い。別の実施形態において、そのｐＨは、４．２と３．５の間である。更なる実施形態においてそのｐＨは、３．８前後である。

本発明によれば、発酵混合飼料は、１日以内、又は１２〜２４時間以内に生産することができる。別の実施形態において、該発酵生成物は、８〜１２時間、又は６〜８時間の間に生産することができる。更なる実施形態において、該発酵は、４〜６時間の間、又は４時間未満で成し遂げられる。

本発明の別の態様において、発酵は、より遅い可能性があり、１日以上、数日、１週間、数週間、１カ月、又は数カ月かかることがあり得る。発酵は、活性な乳酸菌を含む接種材料として発酵液体生成物又は混合発酵飼料を加えることによって制御することができる。接種材料の発酵される飼料生成物に対する割合は、０．１〜１０容量％、又は０．５〜５容量％の範囲、又は１〜２容量％前後であり得る。発酵プロセスは、閉じたサイロ中で起こり得る。本発明の別の実施形態においては、発酵は、プラスチックの包装材料中にきつく包み込んだ梱包中で起こる。本発明の１つの特定的実施形態において、エンシレージは、発酵したＣＣＭトウモロコシに基づく。得られたエンシレージは、単胃動物に給餌するために使用することができる。更なる実施形態において、ＣＣＭトウモロコシのサイレージは、ブタに給餌するのに適している。更に別の実施形態において、ＣＣＭトウモロコシのサイレージは、単胃動物例えばブタなどに給餌するための成長促進物質として使用することができる。ＣＣＭトウモロコシに基づくエンシレージは、酢酸が少ない可能性がある。本発明の１実施形態において、酢酸の濃度は、２０ｍＭ以下、又は１５ｍＭ以下、又は１０ｍＭ以下、又は５ｍＭ以下である。本発明の更なる実施形態において、乳酸含量は、５０ｍＭ以上、１００ｍＭ以上、１５０ｍＭ以上、２００ｍＭ以上、２５０ｍＭ以上又は３００ｍＭより上である。

本発明による発酵は、さまざまな温度範囲で実施することができる。一般に発酵は、５℃と５０℃の間、又は１５℃と４０℃の間で実施する。本発明の別の実施形態においては、発酵温度は、１８℃と３０℃の間である。本発明の更なる実施形態においては、発酵は、室温又は室温前後、例えば、２０〜２５℃、又は２２〜２４℃或いは２３℃前後で行う。本発明の更に別の実施形態においては、温度を追跡して制御するための手段を備える。本発明のなお更なる実施形態においては、発酵ブロスの適切な含水量を提供するために加える水の温度が発酵温度を基本的に制御している。発酵温度は、一定であることができ、又は変動してもよい。

本発明に従う適当な発酵槽は、製造業者からの標準的な装置として多くの場合提供される混合手段を備えることができる。一般にそれらは、およそ１〜５００ｒｐｍで操作される。本発明の１実施形態において、混合スピードは１０〜３００ｒｐｍである。本発明の別の実施形態においては、その混合手段は、２０ｒｐｍと１００ｒｐｍの間で操作する。更なる実施形態においては、その混合装置は３５ｒｐｍ前後で操作される。

本発明によれば、発酵される生成物は、（活性な）乳酸菌を含む液体発酵生成物と合わせる。この接種材料は、０．１〜９９．９容量％、又は１〜９９容量％、又は５〜７０容量％の範囲で存在させることができる。本発明の別の実施形態において、その接種材料は、０．５〜１、１、１〜５、５、５〜１０、１０、１０〜２０、２０、２０〜３０、３０、３０〜４０、４０、４０〜５０又は５０容量％前後である。更なる実施形態において、その液体発酵生成物は２５〜３５容量％を含む。更に別の実施形態において、その接種材料は、３０容量％前後含む。

本発明によるスターターカルチャーにより提供される発酵プロセスは、本質的にホモ発酵プロセス（図１）である。「本質的にホモ発酵性の」とは、発酵を推進する主要な細菌叢が、ホモ発酵性であることを意味する。１実施形態においては細菌の９９％以上がホモ発酵性である。本発明の別の実施形態においては、細菌の９５％以上がホモ発酵性である。更に別の実施形態においては、細菌の９０％以上がホモ発酵性である。「本質的にホモ発酵性の」とはまた、主たる発酵生成物が乳酸であり、酢酸及びエタノールのレベルが味覚閾値より低いか、味覚閾値付近か、又は味覚閾値よりわずかに上であるかのいずれかであることを表す。或いは、「本質的にホモ発酵性の」とは、乳酸対酢酸又は乳酸対エタノールの比率（ｍＭ／ｍＭ）が、１０：１以上、２０：１以上、５０：１以上又は１００：１以上であることを示す。本発明によれば、両方の発酵共、即ち発酵（副）生成物の発酵も飼料生成物（オオムギ、コムギ、ダイズなど）の発酵も、本質的にホモ発酵性である。本発明の別の実施形態においては、その発酵プロセスはヘテロ発酵プロセスである（図１）。本発明の更なる実施形態においては、そのスターターカルチャーはホモ及びヘテロ発酵性の乳酸菌を含む。本発明の更に別の実施形態においては、そのスターターカルチャーは非乳酸菌の細菌を含む。

本発明によれば、発酵は、乳酸産生菌を含む。つまり、最も広範な態様においては、本発明は乳酸産生菌に関することになる。乳酸菌類は、それらの共通の代謝特性及び生理学的特性により関連付けられるグラム陽性、低ＧＣ、耐酸性、非胞子形成性、非呼吸性の杆体又は球菌の一群を含む。通常腐敗する植物及び乳製品中に見出されるこれらの細菌は、炭水化物発酵の主要な代謝最終生成物として乳酸を産生する。この特徴は、酸性化が腐敗作用物の増殖を阻止するので、乳酸菌を食品の発酵と歴史的に結び付けている。タンパク質性のバクテリオシンは、いくつかの乳酸菌株によって産生され、腐敗性及び病原性微生物に対する付加的なハードルを与える。その上、乳酸及びその他の代謝産物は、食品の感覚刺激性及び組織構造（ｔｅｘｔｕｒａｌ）の特性に寄与する。乳酸菌の産業上の重要性は、それらが食品中のいたるところに出現すること及びヒト粘膜面の健全なミクロフローラへのそれらの貢献によってそれらが一般に安全と認められた（ＧＲＡＳ）ことで更に証明される。乳酸菌を構成する属は、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）及びストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アエロコッカス属（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、カルノバクテリウム属（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、エノコッカス属（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）、テラゲノコッカス属（Ｔｅｒａｇｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）、バゴコッカス属（Ｖａｇｏｃｏｃｃｕｓ）、及びワイセラ属（Ｗｅｉｓｅｌｌａ）であり、これらの属は、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌａｌｅｓ）目に属する。

本発明において、発酵に使用される乳酸産生菌は、主に、但し排他的ではなく、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）又はラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、或いはそれらの組合せである。本発明によるスターターカルチャー又は接種材料は、エンテロコッカス菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、ラクトバチルス菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）、ラクトコッカス菌種（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、及びペディオコッカス菌種（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）の１つ又は複数からなる群から選択される乳酸菌を含むこともできる。本発明の別の実施形態においては、その乳酸菌は、エンテロコッカスフェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、ラクトバチルスラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ペディオコッカスアシディラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、及びペディオコッカスペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）の１つ又は複数からなる群から選択される。更なる実施形態において、その乳酸産生菌は、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌａｌｅｓ）目のものである。その乳酸産生菌は、また、ラクトバチルス菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）、ペディオコッカス菌種（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、エンテロコッカス菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、及びラクトコッカス菌種（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、或いはそれらの組合せからも選択することができる。更に別の実施形態においては、その乳酸産生菌は、ペディオコッカスペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）、ペディオコッカスアシディラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）及びラクトバチルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルスラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、並びにエンテロコッカスフェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）又はそれらの組合せを含む。更に別の実施形態においては、その乳酸菌は、エンテロコッカスフェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）及び／又はラクトバチルスラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）を含む。更なる実施形態において、その乳酸菌は、エンテロコッカスフェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）ＭＣＩＭＢ ３０１２２、ラクトバチルスラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）ＮＣＩＭＢ ３０１２１、ペディオコッカスペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）ＨＴＳ（ＬＭＧ Ｐ−２２５４９）、ペディオコッカスアシディラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）ＮＣＩＭＢ３００８６及び／又はラクトバチルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＬＳＩ（ＮＣＩＭＢ３００８３）の１つ又は複数を含む。

本発明の１態様によれば、生成物、副産物又は廃棄物を発酵させる。かかる生成物、副産物又は廃棄物は、飼料及び／又は食品の生産と関係してもしなくてもよいさまざまな産業から得ることができる。適当な産業としては、食品産業、飼料産業、乳業、農業、アルコール製造業、ビール産業、ワイン産業、蒸留酒産業、バイオエタノール産業、食肉加工業、水産業、医薬産業、石油化学産業、医薬産業及び鉱業を含み得る。

生成物、副産物又は廃棄物は、例えば、乳清、凝乳、使用済み穀物、酵母、カビ、細菌、成熟又は未成熟のコーン、ジャガイモ又はその一部、又は野菜類を含むことができる。本発明の１態様によれば、発酵すべき生成物は、１つ又は複数の製造規格に合格しそこなった生成物である。

本発明による飼料生成物は、穀物（成熟又は未成熟の）、例えば、オオムギ、コムギ、ライムギ、カラスムギ、トウモロコシ、コメ、マメ、エンドウマメ、モロコシ、ライコムギ及び／又はダイズなどを含むことができる。

本発明のもう１つの態様は、上で示した１方法又は複数の方法を用いる発酵混合飼料の提供に関わる。かかる発酵混合飼料は、飼料、例えば穀物類（成熟又は未成熟品）、成熟又は未成熟のオオムギ、コムギ、ライムギ、カラスムギ、トウモロコシ、コメ、マメ、エンドウマメ、モロコシ、ライコムギ及び／又はダイズなどを発酵させることによって提供することができる。一般に、その発酵すべき飼料は、いくつかの作物の混合物を含む。これらの飼料は、また、給餌する動物、並びにそれらの年齢によって異なる。また、経済上の事項も考慮する。通常の穀物は、メチオニン及びリシン等の必須アミノ酸の十分なレベルに欠ける。ダイズはこれらの必須アミノ酸が豊富であるが、それはより高価でもある。本発明の１実施形態によれば、発酵されるその飼料は、オオムギとコムギの混合物を含む。別の実施形態においては、その混合物は、ダイズ、オオムギ、及びコムギを含む。更なる実施形態においては、その飼料は、トウモロコシとダイズを含む。更に別の実施形態においては、その混合物は、オオムギとエンドウマメを含む。

本発明の別の態様は、動物に給餌するための上記のようにして提供される液体発酵飼料の使用に関する。本発明の１実施形態によれば、その動物は、単胃動物である。更なる実施形態によれば、その動物はブタである。

本発明の更なる態様は、成長促進物質としての液体発酵飼料の使用に関する。本発明の１態様によれば、その動物はブタである。

別の態様において、本発明は、本明細書に記載の発酵生成物の液体飼料としての直接の使用、又は飼料生成物及び液体飼料を調製するための流体などの他の成分との混合物における使用に関する。

更に別の態様において、本発明は、
（ａ）液体生成物を準備するステップと、
（ｂ）ｐＨを少なくとも４．２まで２４時間以内に低下させるのに十分な乳酸を産生することができる乳酸産生菌を準備するステップと、
（ｃ）（ａ）と（ｂ）とを一緒にするステップと、
（ｄ）適当な条件下で発酵が起こることを可能にするステップと
を含む発酵生成物を調製するための方法に関する。

かかる方法の１実施形態において、そのｐＨは、４．２と３．５の間である。別の実施形態においてそのｐＨは、３．８である。

本方法の１実施形態において、該液体生成物は、乳業、農業、ワイン産業、蒸留酒産業、又はビール産業、或いはそれらの組合せから得られる。１実施形態において、該液体生成物は、乳清、トウモロコシ、ＣＣＭ（軸付きトウモロコシのサイレージ）及び未成熟のコーン、並びにそれらの組合せである。

本発明の方法の１実施形態において、該乳酸産生菌は、ラクトバチルス菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）、ペディオコッカス菌種（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、及びラクトコッカス菌種（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｉ ｓｐｐ．）、並びにそれらの組合せから選択される。

本発明の方法の特別な実施形態においては、その方法は別の飼料生成物の添加を含み、発酵が適当な条件下でその後に起こるようにする。

更に別の態様において、本発明は、
（ａ）本発明による液体生成物を準備するステップと、
（ｂ）発酵すべき飼料生成物を準備するステップと、
（ｃ）発酵が適当な条件下で起こることを可能にするステップと
を含む液体飼料を調製する方法に関する。

その方法の１実施形態において、該液体生成物は、１容量％以上、例えば、１〜２容量％、又は１〜５容量％の濃度で存在する（又は添加される）。別の実施形態においては、その液体生成物は、５容量％を越えて添加される。本発明の方法の１実施形態において、その飼料生成物は、乳業、農業、ワイン産業、蒸留酒産業、又はビール産業、或いはそれらの組合せから選択される。例は、コーン、トウモロコシ、マメ、ダイズ、それらの混合物などである。

本発明は、驚くべきことに、飼料のより良い保存、抗生物質に基づく成長促進物質及び薬剤の必要性の減少をもたらす動物の健康の改善、液体飼料の嗜好性の改善、別のタイプの液体飼料を使用し得る可能性、より安価な飼料及び動物の環境に対する好ましい影響を含む多数の利点をもたらすことが見出されている。

本発明に従って、該発酵生成物は動物に（更なる前処理あり又はなしで）直接給餌することができ、或いはそれは液体飼料の更なる発酵のために使用することができる。後者の場合は、該発酵生成物は飼料の全体量に対して１容量％以上を構成すべきである。別の実施形態において、該発酵生成物は、５容量％を構成する。

本発明は、当該乳酸産生菌が、病原菌及び乳酸産生菌、酵母菌及びカビを含む細菌の自然発生により起こるであろう自然の発酵に競り勝つ乳酸を十分に速く且つ十分な量で産生することができるはずであるという認識に基づいている。４より低いｐＨにおいて多くの病原菌は増殖することができないが、当該乳酸産生菌による乳酸の産生が迅速且つ効率的に起こる場合もこれが発生しないことが認められている。また、殆どの酵母菌及びカビは、非常に酸性の条件下で確かに増殖することができるが、当該乳酸産生菌による乳酸の迅速且つ効率的な産生が、かかる酵母菌及びカビの増殖を非常に減少させ、又は排除さえすることが認められている。

本発明による発酵生成物は、その発酵が乳酸産生菌の選択によって強く影響されるために、任意のタイプの流動性生成物から調製することができるものと考えられる。同様に、本発明の発酵生成物は、任意の他のタイプの飼料生成物の更なる発酵のために使用することができる。本発明の発酵生成物の有利な特性のお陰で、その更なる発酵は、更に一層高い栄養価及び高いビタミン含量を有する安全でおいしい生成物に導く十分に制御された更なる発酵をもたらす。また、本発明の生成物を動物に給餌することによって、カンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）及びサルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）菌種による感染のリスクを減少させることができ、従って、本発明は、ヒトの食品の安全性を増大する。

水又は例えば乳清若しくはスキムミルクのようなその他の流体が当該発酵プロセスの間に加えられるとき、それは、緩衝能を有するその水の成分を除去又は少なくとも減少するように有利に処理することができる。特に、カルシウム、亜鉛、マンガン及び／又は鉄の含有量は、減少又は除去することができる。これは、場合によっては、その緩衝能の減少によって、乳酸産生菌による乳酸の効率的な産生を促進するものと考えられる。

上で述べたように、病原菌は、動物の周囲の自然の居住者であり、それらは環境中で増殖し、いわゆる「細菌圧力」、又は「微生物圧力」を増大する。両方の表現は、互換的に使用され、任意の微生物、例えば、細菌、酵母菌、カビ、アメーバ、胞子、ファージ、単細胞生物などを含む。本発明によれば、驚くべきことに、本発明の発酵生成物を動物に給餌することによって動物の環境が好ましい方向に修正されることが観察されている。

当該発酵は、無菌条件下で開始するのが望ましいときがある。それは、例えば、環境の細菌圧力が高い場合であり得る。
しかし、通常は乳酸産生菌、成長培地及び流体を一緒にして、予め混合した溶液として準備する。このシステムの深刻な欠点は、発酵が既に起こっており、従って周囲の細菌類が予め混合した溶液の乳酸産生菌を殆ど即座に打ち負かす可能性があることである。また、上記の予め混合した溶液は、顧客に届けるのが困難であり、それを届けた後限定された時間内に使用しなければならず、さもなければ、菌培養液は、成長培地を使い切ったときに死滅してしまう。

本発明により、発酵の無菌状態の開始に着手することの問題は、解決された。

従って、更なる態様において、本発明は、無菌の不活性な乳酸産生菌を有する容器、その乳酸産生菌のための無菌の成長培地を有する容器、及び無菌の流体を有する容器を含む無菌の閉ざされた包装システムに関する。その包装システムの１実施形態において、当該乳酸産生菌は、冷凍乾燥されている。別の実施形態において、当該成長培地は、ビタミン類、マルトデキストリン、及びデキストロースアンヒドロース（ａｎｈｙｄｒｏｓｅ）を含む。別の実施形態においては、更なる容器を含むことができる。

別の更なる態様において、本発明は、
（ａ）無菌の不活性な乳酸産生菌を有する容器、その乳酸産生菌のための無菌の成長培地を有する容器、及び容器中の無菌の流体を有する容器を含む無菌の閉ざされた包装システムを準備するステップと、
（ｂ）無菌の閉ざされた包装システム内で、菌、成長培地及び流体を互いに接触し、それによって発酵が開始するようにするステップと、
（ｃ）前記無菌の包装システムの内容物を発酵すべき飼料生成物と接触させるステップと
を含む所望の乳酸産生菌によるホモ発酵を開始させる方法に関する。

当該方法の１実施形態において、その乳酸産生菌は冷凍乾燥されている。

更に別の態様において、本発明は、本明細書に記載のホモ発酵を開始するための無菌の閉ざされた包装システムの使用に関する。

本発明の閉ざされた包装システムは、使用場所に届けることができる。その場所で、個々の容器を、開き（例えば、引裂くか、つついて穴を開けるか、１つ又は複数の容器を溶解させるか、バルブを開けるか、融解させるか、又は押圧する）、それらの成分を無菌状態の下で互いに接触するようにさせる。

上記方法の利点は、ホモ発酵過程が、細菌の干渉について心配しないで開始できることである。

その容器は、例えばポリマー材料、例えばプラスチック、及び金属製であり得る。その後、その容器は密閉式パッケージ中に並べて入れ、そのパッケージはシールすることができる。

図６は、本発明の１実施形態による発酵生成物又は工業的プロセスからの副産物を含む動物飼料を提供するステップを示すフローダイアグラムである。しばしば、副産物、廃棄物、又は規格に合わない生成物が工業的生産中又はその間に生産される（１）。ここでは副産物と称するこのような生成物は、乳酸菌を加えることによって液体発酵飼料とも呼ばれる発酵生成物に転化させることができる（２）。必要に応じて、糖、炭水化物又は炭水化物含有組成物を、乳酸菌の増殖を促進するために加えることができる。また、適切な含水量を提供するために水を加えることができる。必要なら、適当な発酵条件を提供する更なる要素、例えば、塩、緩衝液などを加えることができる。発酵（２）は、混合、撹拌及び温度制御を含み得る。発酵（２）によって、液体発酵飼料生成物が得られる。この液体発酵飼料生成物は、単独で、又は通常の飼料と一緒にサプリメントとして、或いは通常の飼料により補完される飼料（３）として動物に与えることができる。

本発明の別の実施形態において、発酵すべき生成物、副産物又は廃棄物は、乳清、使用済み穀物、ジャガイモ（又はジャガイモの一部（例えばジャガイモの皮））、酵母菌、細菌、又はカビを単独又は任意の組合せで含む。適切な場合は、本発明により発酵される生成物は、例えば、熱、低温、ｐＨ、化合物及び／又は組成物の添加の単独又は任意の組合せによる処理を含む化学的及び／又は物理的修飾をすることができる。発酵させる生成物の組成は、更なる生成物を加えることによって変更し、例えば、発酵生成物の栄養価、発酵性及び／又は保存性を改善することができる。本発明の更なる実施形態においては、工業的プロセスの副産物又は廃棄物ではない生成物を発酵生成物に変換する。本発明に照らした工業的プロセスとしては、エタノール生産（例えば、ビール、ワイン、バイオエタノール、蒸留酒など）、医薬産業（医薬組成物の生産）、化学産業、農業及び食品産業（例えば、乳業、漁業、畜産、食肉加工）などを含む。

図７に示すフローダイアグラムは、本発明の実施形態による発酵液体動物飼料を提供するステップを説明している。実施例４、図６と同じように、液体発酵飼料生成物が得られる。しかし、図６におけるように、液体発酵飼料生成物を直接１つ又は複数の動物に給餌する代わりに、その液体発酵飼料生成物を飼料を発酵するために使用して、発酵飼料生成物（「発酵混合飼料」）を提供する（４）。この発酵飼料生成物は、単独で、又は通常の飼料と一緒にサプリメントとして、或いは通常の飼料により補足される飼料として動物に与えられる（５）。

図８は、本発明の１実施形態による主要な成分及びステップについて説明している。Ａは、飼料を含む１つ又は複数の容器を示す。その容器（１つ以上）は、異なる飼料、飼料成分又は飼料混合物を含むことができる。更に、その容器は、水又は水性組成物を含むことができる。Ｂは、発酵生成物を含む容器又は発酵槽を示す。Ｃは、発酵槽を説明しており、ここで、Ａからの飼料が供給され、Ｂからの発酵生成物と混合される。Ｄは、発酵後のＣと同じ発酵槽か、又は少なくとも一部の飼料の発酵が起こる別の発酵槽のいずれかを示す。矢印１及び２は、発酵槽Ｃに、それぞれ、Ａからは飼料を、Ｂからは発酵生成物を供給することを示す。矢印３は、生成物Ｂの発酵が起こり、且つ／又は、Ｃの内容物又は内容物の一部の別の発酵槽又は容器への移動を示す。矢印４は、発酵飼料Ｄを動物に与えることを示す。生成物を混合する手段を、Ａ、Ｂ、Ｃ及び／又はＤに備えることができる。

本発明の１実施形態において、動物は、発酵飼料Ｄを、唯一のものとして又は主なものとして与えられる。
別の実施形態において、動物は、Ｄと別の飼料、Ａからの飼料混合物の飼料成分との混合物を与えられる。これは、例えば一部の飼料成分、例えばアミノ酸などに対する発酵の悪影響に対して埋め合わせをするために望ましいものであり得る。アミノ酸のレベルは、発酵によって減少する可能性があることが知られており、それは望ましくないであろう。

図９は、発酵飼料を生産する「連続」法を示す。「Ａ」は、飼料を含む１つ又は複数の容器を指す。その容器（１つ以上）は、さまざまな飼料、飼料成分又は飼料混合物を含むことができる。発酵槽Ｂに、容器Ａから飼料が供給され、発酵が起こる。この発酵は、発酵される飼料生成物中に存在する微生物によって促進されて自然発生的に、又は発酵を制御するためのスターターカルチャーを供給することによって起こり得る。Ｃは、発酵の少なくとも一部が起こる発酵の途中若しくは発酵後のＢか、又は発酵の少なくとも一部が起こる別の発酵槽のいずれかを指す。Ｃの底の矢印は、発酵飼料生成物を動物に与えることを指す。Ｄは、発酵飼料生成物の一部が普通は動物に給餌した結果除去された後の発酵槽Ｃを指す。Ｅは、発酵槽ＤがＡからの飼料で再び満たされていることを示し、Ｆは、発酵の途中若しくは発酵後のＥか、又は発酵の少なくとも一部が起こる別の発酵槽のいずれかを指す。Ｆの底の矢印は、発酵飼料生成物の一部を動物に与えることを指す。サイクルＤ、Ｅ、Ｆは繰り返される。これらの繰り返し、即ち「連続」発酵は、ステップＤのスターターカルチャーの組成が徐々に変化して、発酵飼料生成物の品質が、時間とともに変化することが知られているため望ましくない。これは、例えば微生物圧力、即ち、家畜小屋、動物、作業者、飼料調理場、容器、パイプ、機械、水などの中又は近くにいる細菌、酵母菌及び胞子を含めたカビによって、発酵を提供する微生物叢が時間と共に変化するためである。また、酵母菌、例えば酸耐性の酵母菌が「連続」式発酵において問題であることが知られている。酵母菌はゆっくり増殖するが、酵母菌のレベルはバッチ毎に上昇し得る。一般に、酵母菌は、それが、例えばブタが好まない異臭を与える可能性があるので好ましくない。酵母菌の感染は、また、洗浄が事実上不可能ではないにしても非常に困難である供給パイプにおいて非常によくある問題である。「連続」式発酵に伴なう更なる潜在的問題は、バクテリオファージによる感染のリスクである。この問題は、乳業から知られている。その他の可能性のある問題点は、発酵生成物の品質も低下する可能性のある自然変異の発生である。

本発明を、その利点を含めて、以下の非限定の実施例によって更に説明する。

（実施例１）
本発明による発酵生成物の調製
本発明を、発酵タンク中で８０％のコムギ及び２０％のオオムギを混合することによって実証した。その混合物中、穀物は、２８％を構成し、残りの７２％は水であった。更に、１０トンの液体飼料スープ当り１００部のＰｉｇ Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ ３１７（Ｍｅｄｉｐｈａｒｍ社製）を加えた。そのＰｉｇ Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ ３１７は、ビタミン、マルトデキストリン、デキストロースアンヒドロース並びに乳酸産生菌、ペディオコッカスペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）、ペディオコッカスアシディラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）及びラクトバチルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）を更に含んでいた。発酵タンクへの空気の取り込みは、発酵タンクが置かれている部屋の空気から直接取った。試料を民間の分析実験室に送り、酢とエタノール含量についての分析がその混合物中にはわずかに３ｍＭの酢が含まれエタノールはないことを明らかにしたため、その環境は殆ど無菌であることが示された。また、乳酸のレベルは、２０時間の発酵後約１４０ｍＭであった。この混合物は、従って、殆ど１００％ホモ発酵性と考えることができる。

結論として、乳酸産生菌を用いて発酵生成物を調整することが可能である。更に、発酵は、制御され、ホモ発酵様式で起こることが実証された。

（実施例２）
本発明による飼料生成物の調製
実施例１の発酵生成物の試料を取り、周囲の高い細菌圧力のためにそれまで液体飼料の生産に失敗していた液体試料調理室に持ち込んだ。

実験１
１リットルの該混合物を１００リットルの飼料生成物と調理場の発酵タンク中で混合した。その発酵プロセスは９時間後に完了し、その混合物のｐＨは、３．８であった。

実験２
もう１つの例においては、５０リットルの該混合物を２００リットルの飼料生成物と調理場の発酵タンク中で混合した。その発酵プロセスは５時間後に完了し、その混合物のｐＨは、３．８であった。

実験３
３番目の例においては、５０リットルの該混合物を５０００リットルの飼料生成物と調理場の発酵タンク中で混合した。その発酵プロセスは９時間後に完了し、その混合物のｐＨは、３．８であった。

結果
すべての場合において、得られた液体飼料は、殆どホモ発酵性であった。これまではホモ発酵性液体飼料を得るのは不可能であることが証明されていたので、本発明の発酵プロセスは優れた利点を有することが実証されたことになる。周囲の細菌圧力が極めて高い場合でさえ、発酵を制御することが実際に可能である。

（実施例３）
低い細菌圧力を有する飼料調理室における液体飼料の調製
実施例２に記載したものと類似の液体飼料を、周囲の細菌圧力がより低い別の飼料調理室において調製した。実施例２における発酵時間と比較してその発酵時間を、１時間以内で変化させた。

それにより、本発明による発酵は、非常に急速に且つ非常に効率よく起こり、細菌圧力がその発酵の結果に実質的に影響を及ぼさないことが実証された。

（実施例４）
ホームミキサー供給システムのさまざまな構成（システム１〜３）
図１０〜１２は、発酵混合飼料生成物を提供するために適する３つの異なるホームミキサー供給システムを図解したものである。通常、発酵すべき飼料生成物の発酵は２０〜２５℃、好ましくは約２３℃で約６時間後には終了する。ホームミキサー供給システムは、次の構成要素のいくつかを含むことができる。

Ａ）Ｃ、Ｆ及びＥからの任意の発酵生成物、飼料及び水のすりつぶした混合物を計量する発酵タンクＡ。一般に、Ｆから５〜７０％の発酵生成物が取り込まれる。２３℃前後で約６時間後、発酵は終了する。しかし、１５℃から４５℃までの範囲の温度も発酵を提供することができる。一般に、発酵タンクＡの大きさは、１，０００ｋｇ以上である。

Ｂ）Ａ（設置されている場合）、Ｃ、Ｄ及びＥからの内容物を混合する、混合、供給及び発酵タンクＢ。一般に、混合タンクＢの大きさは、５００ｋｇ〜１２０００ｋｇの範囲である。発酵された混合飼料は、新鮮なうち又は２４時間以内に使用するのがベストである。発酵した穀物が発酵後あまり長くそのままの場合（例えば２日以上）、その発酵した飼料生成物は、恐らく穀物中の高レベルのミネラル及びその他の化学反応のために苦くなる可能性がある。

Ｃ）発酵すべき飼料生成物を含有する１つ又は複数のタンクＣ。一般に、それらは穀物、例えば、コムギ及びオオムギ、並びにダイズなどを含む。多くの場合、その発酵される飼料生成物は、熱処理されておらず、殺菌されていない。

Ｄ）ビタミン及びミネラルの容器Ｄ。これらの成分は、１つ又は複数の混合物としてか、又は個別に提供することができる。それらは、ばらで、又は大きな袋に入れて供給することができる。大抵は乾燥した成分（粉末、ペレットなど）が用いられるが、それらは液体であってもよい。一般に、アミノ酸は、アミノ酸の劣化、分解及び／又は破壊を避けるために、発酵プロセスの後追加される。

Ｅ）２０〜２５℃、好ましくは２３℃前後の水を供給する清浄な軟水タンクＥ。水温は、室温とは異なる、例えば地表温度未満若しくはその付近であってもよい。これは、タンクＥからの水が発酵タンクＢに加えられる場合珍しいことではない。水は、ミネラル分についてチェックし、必要に応じて、乳酸菌の最良の発酵を得るために調節及び／又は浄化する。その水タンクＥは、非常に小から非常に大までの範囲の任意の容量を有することができる。別法では、水は蛇口から直接供給する。必要に応じてその水を温めるために熱交換器を設置することができる。

Ｆ）乳酸菌により発酵した生成物のためのタンク。多くの場合、発酵生成物タンクＦの容量は、１０００ｋｇ以上である。通常、その発酵生成物は、最大で２週間までの貯蔵時間の間は活性で使用可能のままである。一般に、そのタンクは、発酵生成物の新しいバッチを充填する前に空にして洗浄する。そのタンクは、空にすること及び洗浄することを容易にするジップシステム（ｚｉｐ ｓｙｓｔｅｍ）を備えることができる。別法では、そのタンクは、従来の方法によって空にされ、洗浄される。

Ｇ）豚舎の異なる区分に飼料を持ち込む供給パイプＧ。供給パイプＧは、数百メートルの長さであり得、それらは、１ｋｍ以上の長さに達することがある。ブタの年齢に応じてそれらは飼料中にさまざまなエネルギー及びミネラルのレベルを必要とする。それ故、異なるパイプのいくつかのライン、例えば、各区分用のもの、又はパイプ中の飼料が新しくブレンドした飼料と混合されており、そのためすべてのブタが同じタイプの飼料を摂取する１つの主なパイプが存在し得る。それはまた飼料が水で空になっているパイプでもあり得る。供給パイプＧは、飼料の一部を発酵タンクＢに返す返還パイプであり得る。それはまた１方向性のパイプであり得る。家畜小屋の異なる区分は、個別の供給パイプを有することができる。

システム１
図１０は、発酵タンクＡ及び発酵／混合タンクＢを含む液体供給システムを備えた本発明の実施形態を示す。供給パイプＧは、液体発酵混合飼料を発酵槽Ｂに戻すことができる。

システム２
図１１は、発酵／混合タンクＢを含むが発酵タンクＡのない液体供給システムを備えた本発明の別の実施形態を示す。供給パイプＧは、液体発酵混合飼料を発酵槽Ｂに戻すことができ、別法では、該混合飼料は、１方向のみに運ばれる。すべての飼料成分は、タンクＢ中で混合される。一般に、発酵の終わりに向けて、好ましくは給餌する前に、タンクＤからのアミノ酸を追加する。また水も（好ましくは２３℃であるが、冷たい地下水でもよい）、発酵槽Ｂに加えることができる。

システム３
図１２は、本発明の別の実施形態を示す。その液体供給システムは、Ｅからの水、Ｆからの発酵した液体発酵飼料及び発酵すべき飼料生成物（Ｃ）をいくつかの平行な発酵槽Ａに対して個別に供給することができるいくつかの発酵タンクＡを含む。

（実施例５）
液体発酵生成物の異なる比率による給餌試験：発酵すべき飼料生成物
異なる液体発酵生成物及び異なるホームミキサー供給システムを用いる給餌試験の結果を以下に示す。その結果は、ヨーロッパの１９の異なる養豚場で行った実験に基づいている。

１５の養豚農家は、ブタ生産のための飼料生成物の発酵のための接種材料として発酵したジャガイモを用いた。１４の場所は、デンマークのユトランドであり、１ヶ所は、フィンランドのＷａｓａに位置した。３つの場所は、ホームミキサー供給システム１（図１０）を有し、１１の場所は、ホームミキサー供給システム２（図１１）を有し、１ヶ所は、ホームミキサー供給システム３（図１２）を有した。

飼育試験を、雌ブタ、離乳したばかりの子豚及び成豚について実施し、大体、ブタの体重は、約７〜約２００ｋｇであった。
一般的に、その飼育場は、比較的大きく、１飼育場当り２５０以上の動物単位を有した（１動物単位は、１年当りほぼ３２頭の生体重３０〜１０７ｋｇの成豚に等しい）。

３つの飼育場については発酵した乳清を試験した。その場所は、それぞれ、英国の南部、フィンランドのＷａｓａ、及びデンマークのユトランドであった。３つの飼育場はすべて発酵タンクＡのないホームミキサー供給システム２（図１１）を所有した。

１つの場所デンマークのジーランド（ホームミキサー供給システム１、図１０）については、発酵したビール生産からの使用済み穀物及び発酵した糖蜜を試験した。この試験は、成豚についてのみ行った。

使用した液体発酵生成物は、ジャガイモ工場からの新鮮なジャガイモの皮を使用した。市販されている乳酸菌スターターカルチャー、「ＰＩＧ ｓｔａｂｉｌｉｓｅｒ ３１７」（スウェーデンＭｅｄｉｐｈａｒｍ社製）、又は「Ｐｉｇ Ｓｔａｂｉｌｉｓｅｒ ４００」（オーストリアＬａｃｔｏｓａｎ社製）のいずれかを、皮むき機械にかけた後、温度が約３８℃の工場内で加えた。ジャガイモの皮１０００ｋｇ当り約３ｇの乳酸菌を加えた。乾物含量は、約１２．５〜１６％であった。そのジャガイモの皮は、ファイバーグラス製の容量約５０ｍ^３の撹拌なしの貯蔵／発酵タンクにポンプで送り込んだ。乳酸菌をジャガイモの皮に吹き付けた工場内の温度は３８℃であった。その皮が、貯蔵タンクに到着したときその温度を約３５℃に低下させ、２４時間保った。貯蔵タンク中での発酵の後、ジャガイモからのソラニンは破壊された。更に、そのジャガイモの皮の消化率は、発酵させてないジャガイモの皮と比較して向上した（データは示されていない）。その発酵したジャガイモの皮（液体発酵生成物）は、タンクローリーに入れて当該場所に輸送し、別の試験場のタンクＦ中に移動／ポンプ注入した。

その発酵した混合飼料は、新たに発酵させ、発酵後２４時間以内に使用した。一般にそれは穀物及びダイズからなるものであった。すべての給餌用飼料は、主にコムギ、オオムギ及びダイズを含んだ。最大のダイズ含量は、全体の２３％であった。１４の飼料においては、コムギが全体の４０％〜７５％使用された主要な材料であった。１つの飼料においては、オオムギが主要な材料であった。

発酵タンク（タンクＡ）における乾物含量は、それをタンクＢにポンプで送り込む距離が常に１０メートル未満であるので２９〜３２％であった。タンクＢ中の乾物含量はその飼料を豚舎にポンプで送り込む距離に応じて２４％〜２７％であった。

一般的に、発酵混合飼料による飼育試験は、全体の豚のストックについて実施した。以下に示す結果は、ホームミキサー供給システムの導入前と、導入して発酵混合飼料を給餌した後の性能データの比較に基づいている。

結果
飼育試験の結果を、下の表Ｉにまとめる：
表Ｉ：飼育試験の結果

（＊）「満点」は、ブタが非常に迅速に食べており、それらは基本的にブタに与えられた飼料のすべてを以前（即ち、液体発酵飼料の条件のない従来の給餌）より速く食べていたことを示す。毎日の体重増加は、例えば、１日当り０〜５０ｇで従来どおりか又は増加した。飼育試験を開始する前に９００グラムの１日増体重が得られていた場合、毎日の体重増加は１日当り９００〜９５０ｇに増加したことになる。下痢は殆ど観察されず、薬剤／抗生物質を必要とすることはなかった。更に、飼料要求率（ＦＣＲ）は、飼育試験の前と比較して約０．２減少した。ＦＣＲは、飼料転換効率（ＦＣＥ）とも呼ばれ、飼料質量を体重増加に変換する動物の効率のものさしである。具体的には、ＦＣＲは、全指定期間中に食べられた飼料の質量を体重増加量で割ったものである。ＦＣＲは無次元である。低いＦＣＲを有する動物は、飼料の効率的なユーザーと考えられる。

（＊＊）「マイナス点」は、与えられた飼料の見積り量をブタが食べたがらなかったことを示す。目視検査により、ブタが下痢に罹ったこと（２０％を超えて）、及びブタが十分成長しなかった（見積りより１日当り２０〜６０ｇ少ない体重増加）ことを見ることができた。発酵混合飼料を給餌する前に９００グラムの１日増体重が得られていた場合、毎日の体重増加は１日当り８４０〜８８０グラムに減少したことになる。その結果、胃の疾患を治療するために抗生物質を使用しなければならなかった。それにより許容できる体重増加を回復することができた。

明らかなのは、発酵が行われる環境（小屋、飼育場など）のタイプ及び微生物圧力が、成功し信頼できる発酵を提供するために発酵すべき飼料生成物に加える必要のある液体発酵生成物の量に対して大きな影響力を持つことである。微生物圧力が高いほど、より高い水準の液体発酵生成物の接種材料を必要とする。

供給ラインＧが、適切に洗浄することができないという問題が知られている。その供給ラインは、手を挿入することが困難であり、洗浄するのが困難であり、且つしばしば酵母菌の感染及び増殖をもたらす例えば多くのゴム製のバルブを含む。このリスクは、供給パイプＧからの飼料が、酸耐性の（そして望ましくない）酵母菌を含み得る発酵槽に戻る供給ラインの中で増大する。しかし、接種材料として３０％以上の液体発酵生成物を使用する場合、この問題は、本発明による発酵混合生成物を給餌することによって成功することが立証されているため避けることができる。一般に、新たな家屋／家畜小屋においては酵母菌の蓄積は観察されず、飼育試験は成功した。

小型のブタほど飼料の味により敏感であった（データは示されていない）。

発酵タンクは、発酵に対して殆ど影響がなかった。異なる液体供給システム又はそのブランドの間で違いは見られなかった。

Ｆｕｎｋｙ社（デンマークのヘルニング近くのハメルン）、Ｓｋｉｏｌｄ社（デンマークのイカスト）及びＢｉｇ Ｄｕｔｃｈｍａｎ社（デンマークのＶｅｊｅｎ）により供給された発酵槽システムが首尾よく使用された。Ｆｕｎｋｙ社及びＢｉｇ Ｄｕｔｃｈｍａｎ社のタンクはグラスファイバー製である。Ｓｋｉｏｌｄ社製タンクの２つはステンレススチール製であり、１つはグラスファイバー製である。供給タンク（Ｂ）は、すべてグラスファイバー製でありその大きさは５〜８０００リットルの範囲で異なった。

同様に、発酵中に用いられた混合手段の回転速度は、重要ではないことが見出された。使用されたその混合／撹拌システムは、発酵タンクに備えられたものである。約３５ｒｐｍから約２５０ｒｐｍまで変化するさまざまな回転速度が使用されたが、最終結果には差異が見られなかった。

スターターカルチャー「ＰＩＧ ｓｔａｂｉｌｉｓｅｒ ３１７」及び「Ｐｉｇ Ｓｔａｂｉｌｉｓｅｒ ４００」は、短時間の間に多量の乳酸を産生することができる急速に酸性化する乳酸菌のホモ発酵性菌株（ペディオコッカスペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）ＨＴＳ（ＬＭＧ Ｐ−２２５４９）、ペディオコッカスアシディラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）ＮＣＩＭＢ ３００８６及びラクトバチルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＬＳＩ（ＮＣＩＭＢ ３００８３）、エンテロコッカスフェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）ＮＣＩＭＢ ３０１２２、ラクトバチルスラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）ＮＣＩＭＢ ３０１２１）を含んだ。該接種材料が１６０ｍＭを超える量の乳酸を産生することができることは以前から検証されている。ブタに対して嗜好性が良好な菌株を使用することも重要である。一般的に、ｐＨ４．０より下のｐＨの急速な低下を得るために適切な乳酸の菌株を使用することが重要であった。それによって飼料の防腐が得られ、アミノ酸の破壊が減少する。使用した２つのスターターカルチャーの間での違いは顕著ではなかった。

発酵した飼料生成物及びその組成は、あまり重要ではないことが見出された。オオムギ又はコムギが主要材料であることに関係なく、観察された結果に違いはなかった。しかし、飼料生成物中のダイズの量は、ｐＨ及び乳酸に対する影響を有した。ダイズの使用量が高いほど乳酸が増えた。興味深いことに、ダイズを含む発酵混合飼料を給餌する場合ダイズの消化率において１５％の増加が見られた。

結論として、発酵混合飼料によるブタの給餌は、以下の利点を提供する（このリストは、本発明に対し限定しているものと解釈してはならない）：
・ ブタについてのより高い飼料摂取
・ 飼料のより良好な嗜好性
・ ブタのより高い成長速度
・ 飼料の改良された栄養価−当該発酵混合飼料の栄養価は、液体発酵生成物及び発酵すべき飼料生成物（発酵されていない）の栄養価より高い。
・ 遊離アミノ酸の劣化を避けるアミノ酸の制御／保護。これは、１０％以上の発酵生成物が飼料中に加えられた場合にのみ得られた。
・ ダイズタンパク質の消化率が約１５％増加した。
・ 成長促進物質としての使用−改良された又は完ぺきな胃の健康状態が、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）及び／又はローソニア菌（Ｌａｗｓｏｎｉａ）による下痢に対する薬剤の必要性を減少又は排除した。
・ 発酵混合飼料によって改良された胃の健康状態−これによってより安価な穀物／飼料を選択及び使用することが可能となる。
・ 強健なブタ−ブタは飼料の変化に敏感に反応することがより少ない。
・ 金銭上の利得−減少した医療費、減少した飼料代、増加したブタの体重増加。
・ しっかりした信頼性のある液体供給システム−これまでのシステムが時々又は頻繁に失敗していた動物に発酵混合飼料を供給することが今や可能である。そのシステムは、畜産農家に扱いやすく、高い微生物及び／又は細菌圧力の環境においても管理できる。例えば供給パイプＧ中の望ましくない酵母菌の増殖を避けることができる。自然発酵システムとは対照的に、当該微生物叢は、制御することができる。更に、該システムは、無菌又は無菌に近い状態を必要とはせず、その信頼性と頑健性が増大する。接種材料として多数の活性細菌を含む液体発酵生成物を使用することによって、活性細菌が発酵すべき飼料生成物に加えられる。これによって発酵の誘導期間が短縮され、急速な乳酸の産生及びｐＨの低下がもたらされる。

（実施例６）
混合発酵ＣＣＭサイレージの調製
５０％のコムギ、４０％のオオムギと１０％のダイズとの混合物を発酵することによって得た実施例５により製造した混合発酵生成物を、１２１０００リットルのプラスチック製パレット容器にポンプで送り込んだ。そのパレット容器は、最大で１週間にわたって撹拌しないで周囲温度で保存した。２週間にわたって、新たに刈り取り脱穀したＣＣＭトウモロコシにその混合発酵生成物を、ＣＣＭトウモロコシがオーガによって貯蔵サイロ中に輸送される間に、その混合発酵生成物をポンプで汲み上げＣＣＭトウモロコシに吹き付けることによって植菌した。その貯蔵サイロは、恐らくコーティングを施したスチール製の従来型の直立している１２００ｔの気密サイロ（ブランドは不明）であった。そのオーガは、直径が約２００ｍｍで長さが約１５ｍであった。混合発酵生成物：ＣＣＭトウモロコシの割合は、おおよそ１〜２％であった。そのサイロは１４日以内に、発酵混合生成物で植菌したＣＣＭトウモロコシを充填し、閉じた。

おおよそ６カ月後そのサイロを開け、今や発酵したＣＣＭを、オーガを用いて空にした。０．５ｌ位の試料を取り出し、その試料を分析実験室に送った。分析により、低レベルの酢酸（１０．５ｍＭ）、及び１１０ｍＭの乳酸濃度が明らかとなった。

その発酵ＣＣＭは、実施例５に記載した飼育試験の１つにおいて使用し、「満点」がつけられた。ブタが酢酸を好まないのは既知の問題である。しかし、乳酸のレベルは、十分に低く、ブタ（３０ｋｇぐらいの体重）に発酵したＣＣＭを給餌することは可能であり、ブタが発酵ＣＣＭを食べるのを嫌がることはなかった。

従来のＣＣＭ系サイレージは、一般に、例えば２０〜２００ｍＭの間で変化するか又はそれ以上のさまざまなレベルの酢酸を有することが知られている。これらの変化は、収穫中のＣＣＭトウモロコシの含水量及び発酵中の微生物叢の存在によって引き起こされるものと推測される。

上に示した実施例は、発酵ＣＣＭトウモロコシに基づく混合発酵生成物を生産することができ、そのＣＣＭトウモロコシエンシレージがブタのような単胃動物に給餌するのに適していることを実証している。

Claims (34)

1. 発酵混合飼料を調製する方法であって、
   （ａ）液体発酵生成物を準備するステップと、
   （ｂ）発酵すべき飼料生成物を準備するステップと、
   （ｃ）ステップ（ａ）及び（ｂ）による生成物を合わせ、接種材料としてステップ（ａ）の液体発酵生成物を用いてステップ（ｂ）の飼料生成物を発酵させるステップと
   を含む方法。
2. 発酵混合飼料が、４．２以下、４．２と３．５の間又は３．８前後のｐＨで提供される、請求項１に記載の方法。
3. 前記発酵混合飼料が、５０〜１００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、１５０〜２００ｍＭ、２００〜２５０ｍＭ、２５０〜３００ｍＭ、又は３００ｍＭ以上の範囲の乳酸濃度を有する、請求項１又は２に記載の方法。
4. 前記発酵混合飼料が、１２〜２４時間、８〜１２時間、６〜８時間の間、又は４時間未満で調製される、請求項１から３までのいずれか一項に記載の方法。
5. 前記発酵ステップ（ｃ）が、１０〜５０℃、１５〜４０℃、１８〜３０℃、２０〜２５℃、又は２２〜２４℃或いは２３℃前後で実施される、請求項１から４までのいずれか一項に記載の方法。
6. 前記発酵ステップ（ｃ）の間に混合手段が提供され、前記混合手段は、１〜５００ｒｐｍ、１０〜３００ｒｐｍ、又は３５〜１００ｒｐｍで操作する、請求項１から５までのいずれか一項に記載の方法。
7. 前記発酵ステップ（ｃ）が、本質的に、ホモ発酵性発酵である、請求項１から６までのいずれか一項に記載の方法。
8. ステップ（ｃ）において提供される前記組み合わせた生成物中の液体発酵生成物の割合が、０．１〜９９．９容量％、１〜９９容量％、５〜７０容量％、１０〜５０容量％、又は２５〜３５容量％である、請求項１から７までのいずれか一項に記載の方法。
9. ステップ（ａ）において準備される前記液体発酵生成物のｐＨが、４．２以下、４．２と３．５の間又は３．８前後である、請求項１から８までのいずれか一項に記載の方法。
10. ステップ（ａ）において準備される前記液体発酵生成物が、本質的にホモ発酵性発酵により得られたものである、請求項１から９までのいずれか一項に記載の方法。
11. ステップ（ａ）において準備される前記液体発酵生成物が、乳酸産生菌を含む、請求項１から１０までのいずれか一項に記載の方法。
12. 前記乳酸産生菌が、エンテロコッカス菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、ラクトバチルス菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）、ラクトコッカス菌種（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、及びペディオコッカス菌種（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）の１つ又は複数からなる群から選択される乳酸菌を含む、請求項１１に記載の方法。
13. （ａ）で準備される前記液体発酵生成物が、エンテロコッカス菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、ラクトバチルス菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）、ラクトコッカス菌種（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）、及びペディオコッカス菌種（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．）の１つ又は複数からなる群から選択された乳酸菌を含む接種材料による発酵によって得られたものである、請求項１２に記載の方法。
14. 前記乳酸菌が、エンテロコッカスフェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、ラクトバチルスラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルスプランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ペディオコッカスアシディラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌｉｌａｃｔｉｃｉ）、及びペディオコッカスペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）の１つ又は複数からなる群から選択される、請求項１２又は１３に記載の方法。
15. （ａ）で準備される前記液体発酵生成物が、１つ又は複数の工業的生成物を発酵させることによって得られる、請求項１から１４までのいずれか一項に記載の方法。
16. 前記工業的生成物が、副産物又は廃棄物である、請求項１５に記載の方法。
17. 前記副産物又は廃棄物が、乳清、凝乳、使用済みの穀物、酵母、菌類、細菌、植物又はその一部、ジャガイモ又はその一部の１つ又は複数である、請求項１６に記載の方法。
18. ステップ（ａ）で準備する前記液体発酵生成物が、乳清、凝乳、使用済みの穀物、酵母、菌類、細菌、成熟又は未成熟のトウモロコシ、ジャガイモ又はその一部、或いは野菜類の１つ又は複数を含む生成物を発酵させることによって準備される、請求項１から１７までのいずれか一項に記載の方法。
19. ステップ（ｂ）で準備する前記飼料生成物が、腐っているか腐っていない植物又はその一部の１つ又は複数を含む、請求項１から１８までのいずれか一項に記載の方法。
20. ステップ（ｂ）で準備する前記飼料生成物が、オオムギ、コムギ、ライムギ、カラスムギ、トウモロコシ、コメ、マメ、エンドウマメ、モロコシ、ライコムギ及びダイズの１つ又は複数を含む、請求項１から１９までのいずれか一項に記載の方法。
21. 前記発酵混合飼料がサイレージである、請求項１に記載の方法。
22. 前記サイレージが、１日、１週間、１カ月、６カ月、又は１年で調製される、請求項２１に記載の方法。
23. ステップ（ｃ）で提供される前記液体発酵生成物の割合が、１〜２容量％の範囲である、請求項２１又は２２に記載の方法。
24. 発酵させる飼料生成物がＣＣＭトウモロコシである、請求項２１から２３までのいずれか一項に記載の方法。
25. 請求項２１から２４までのいずれか一項に記載の方法によって調製されるサイレージ。
26. 請求項１から２０までのいずれか一項に記載の方法によって調製される発酵混合飼料。
27. ステップ（ｂ）で準備する飼料が、腐っているか（ｒｉｐｅ）腐っていない（ｕｎｒｉｐｅ）植物又はその一部の１つ又は複数を含む、請求項２６に記載の発酵混合飼料。
28. ステップ（ｂ）で準備する前記飼料が、オオムギ、コムギ、ライムギ、カラスムギ、トウモロコシ、コメ、マメ、エンドウマメ、モロコシ、ライコムギ及びダイズの１つ又は複数を含む、請求項２７に記載の発酵混合飼料。
29. ステップ（ｂ）で準備する前記飼料が、
    （ｄ）オオムギとコムギ、
    （ｅ）ダイズとオオムギとコムギ、
    （ｆ）トウモロコシとダイズ、又は
    （ｇ）オオムギとエンドウマメ
    の混合物を含む、請求項２６又は２７に記載の発酵混合飼料。
30. 請求項２６から２９までのいずれか一項に従って調製した発酵混合飼料の動物への給餌のための使用。
31. 動物が単胃動物である、請求項３０に記載の発酵混合飼料の使用。
32. 請求項３０又は３１に記載の発酵混合飼料の成長促進物質としての使用。
33. 動物がブタである、請求項３１又は３２に記載の発酵混合飼料の使用。
34. 請求項２５に従って調製したサイレージのブタに供給するための使用。

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