CN109486724A - 一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其制备工艺的步骤包括：（1）制备热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌的种子液；（2）种子液的磁场刺激处理；（3）连续补料发酵；（4）制备混合益生菌发酵剂。本发明的制备工艺能够实现多种益生菌的同步发酵，从而简化工艺流程，减少设备投入，降低生产成本，还能够实现多种益生菌的高密度发酵，大大提高发酵液中菌体数量。将该发酵剂应用于鸡饲料的发酵，能明显改善鸡饲料的营养结构，提高鸡饲料的营养价值，进而促进鸡的生长发育。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其在鸡饲料发酵上的应用。
背景技术
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是能够定植在动物消化系统内，产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。目前益生菌中最常被开发研究的菌属有芽孢杆菌属、乳酸杆菌属、双歧杆菌属和酵母菌属。芽孢杆菌是一类好氧菌，可以产生B族维生素、维生素C、蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等，可用于蛋白、能量饲料的发酵，可以将蛋白降解为小肽，将多糖降解为低一级的、易吸收的低分子糖，可以提高动物的生长速度和饲料利用率。乳酸杆菌和双歧杆菌都可以发酵碳水化合物并产生大量乳酸，因此都属于乳酸菌。乳酸菌通常为厌氧或者兼性厌氧菌，是饲料应用最早、最广泛的菌种，具有维持动物肠道微生态平衡、抑制病原菌、增强免疫力、促进消化等多种功能。酵母菌在厌氧、好氧环境下均可以生长，菌体含有非常丰富的蛋白质、B族维生素、脂肪、糖、酶等多种营养成分，适口性好，可促进动物采食，提高消化吸收率。
利用益生菌来发酵饲料是一种生态健康型饲料生产技术。饲料经益生菌发酵后含有更多的活性益生菌菌体、各种酶、各级代谢产物、多种维生素、蛋白质分解产物、活性小肽、氨基酸、抑菌物质、免疫增强因子、促生长因子等，起到促进动物生长、维持动物肠道菌群平衡、增强免疫力的作用。用发酵后的饲料饲喂动物，可以减少抗生素等药物的使用，从而提高食品的安全性。众多研究报道表明，用发酵饲料饲喂肉鸡，能显著促进肉鸡的平均日增重和平均日采食量，提高了肉鸡的生产性能；饲喂仔鸡可以调节肠道微生态的平衡，预防肠道疾病，提高免疫力；饲喂蛋鸡可以提高蛋鸡的产蛋率及蛋品质。最近几年发酵饲料的应用正在向家禽养殖业扩展，并且表现出良好的生产效果和经济效益，具有广阔的市场前景。
现有的益生菌发酵剂多为单一菌剂，但在长期的实践中，人们发现发酵过程中有很多重要的生化反应仅依靠一种微生物是不能完成的，必须利用多种微生物共同作用完成，因此实际使用时往往需要将不同的单一菌剂进行复配，操作较为繁琐。还有一类复配好的益生菌发酵剂，其生产方法是先将不同种的益生菌单独发酵，然后再混合复配制成成品，虽然为使用者提供了便利，但是对生产者来说，就需要多套工艺同时进行，所需设备较多，生产成本较高。
益生菌发酵剂制备工艺的关键是发酵的过程，目前生产上主要采用的发酵方法是液体发酵。液体发酵可分为多种方式，目前使用最广泛的是分批发酵，是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后，接入少量的微生物菌种进行培养，使微生物生长繁殖，在特定的条件下只完成一个生长周期的微生物培养方法，培养基的量一次性加入，产品一次性收获。补料发酵是液体发酵的另一种方式，是指在分批发酵基础上，间歇或连续地补加含有限制性营养成分的新鲜培养基，与分批发酵相比，具有以下优点：1）有利于菌体的高密度培养。要想实现高密度培养，需投入大量的菌体所需营养物质，如果将所有的营养物质一次性加到培养基中，过高浓度的营养物质势必造成菌体代谢的紊乱，反而不利于菌体生长。而采用补料的方式就能够始终为菌体提供适宜的营养物质浓度，从而促进菌体生长。2）维持有利的发酵条件。发酵过程中pH常常发生变化，直接加酸或加碱可以快速调整酸碱度，而通过补料的方式可以缓慢而根本地调节pH。此外补料还可调整发酵液粘度、氧传递系数等参数，改善发酵环境，有利于细胞生长和产物合成。3）解除某些代谢产物引起的阻遏作用。葡萄糖分解代谢物可阻遏包括纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、转化酶等酶的合成，还有些代谢产物如乙醇、甲酸等对不利于菌体生长，通过补料的方式可以控制菌体生长速率，减少这些代谢产物的合成。益生菌发酵剂制备的最终目的是获得更多的菌体数量，因此补料发酵的方式更具有优势。在相关的文献报道中，针对单独一种益生菌的补料发酵已经有了不少研究，但是对于多种益生菌混合补料发酵的研究较少，因此这也将是本发明着重解决的问题。
发明内容
本发明的一个目的是针对上述益生菌发酵剂制备工艺中存在的问题，提供一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺，实现多种益生菌的同步、高密度发酵。
本发明的另一个目的是将制备的益生菌发酵剂应用于鸡饲料的发酵，从而优化鸡饲料的营养结构，提高鸡饲料的营养价值，促进鸡的生长发育。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：
一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，该制备工艺的步骤包括：
（1）制备热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌的种子液
热带假丝酵母：热带假丝酵母菌种经PDA斜面活化后，接种至YPD液体培养基中，在摇床上于30℃、180r/min振荡培养24h；蜡样芽孢杆菌：蜡样芽孢杆菌经PDA斜面活化后，接种至LB液体培养基中，在摇床上于35℃、180r/min振荡培养12h；植物乳杆菌：植物乳杆菌经MRS斜面（含2%琼脂）活化后，接种至MRS液体培养基中，在培养箱中于37℃静置培养12h；
（2）种子液的磁场刺激处理
将制备好的种子液放入磁场处理器中，调节磁感应强度为0.8mT，处理15min后置于步骤（1）所述的对应培养条件下继续培养12h，再放入磁场处理器中处理15nin，然后可进行接种；
（3）连续补料发酵
将处理后的热带假丝酵母和蜡样芽孢杆菌种子液接入发酵培养基中，发酵参数为温度32~34℃，转速190~210r/min，通气比1.1~1.3，培养22~26h后停止搅拌和通气，接入处理后的植物乳杆菌种子液继续培养22~26h；当开始培养8h后，按照一定的速率流加补料培养基；
（4）制备混合益生菌发酵剂
发酵结束后，将发酵液以5000r/min的转速离心10min，收集菌体冷冻干燥，即得混合益生菌发酵剂。
所述步骤（3）中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌种子液的接种比例为3:4:3，总接种量为8~12%。
所述步骤（3）中发酵培养基的成分为：甘蔗糖蜜16~20g/L，玉米淀粉8~10g/L，豆粕粉13~15g/L，尿素10~13g/L，甘露寡糖2.0~2.8 g/L，醋酸钠3.6~4.0g/L，K2HPO4 1.7~2.1g/L，KH2PO4 0.2~0.4g/L，MgSO4·7H2O0.7~0.8g/L，FeSO4·7H2O 0.01~0.02g/L，CaCl2 0.1~0.2g/L，柠檬酸锌0.03~0.05g/L，茉莉酸甲酯40~50μmol/L，桑叶提取物2.7~3.5g/L，司盘-60 7.5~8.3g/L，余量为水，初始pH值为6.0~7.0。
步骤（3）所述发酵培养基的装液量为35~45%，优选为40%。
所述步骤（3）中补料培养基的成分为：甘蔗糖蜜5~7g/L，玉米淀粉3~4g/L，豆粕粉3.3~3.5g/L，尿素3.8~4.2g/L，甘露寡糖1.0~1.4g/L，余量为水，初始pH值为6.0~7.0。
所述步骤（3）中补料培养基的流加速率为每小时流加发酵培养基体积的2.0~3.0%，优选为2.5%。
所述饲料应用是指在鸡饲料发酵上的应用。
所述鸡饲料发酵的具体方法为：1）根据待发酵鸡饲料的重量确定混合益生菌发酵剂的使用量，使用量为鸡饲料重量的0.03~0.08%；2）称取所需发酵剂溶于适量糖水中，室温下放置2~3h，使菌种活化；3）向待发酵鸡饲料中加水，使含水率达到40~50%；4）将发酵剂溶液喷洒到待发酵鸡饲料上，搅拌均匀后装入发酵袋中，在温度30~35℃的条件下发酵6~8d。
所述桑叶提取物的制备方法为：取干燥的桑叶加水煎煮3h，桑叶与水的质量比为1 :10，然后过滤，浓缩，80℃减压干燥，得到粉末状固体，即得桑叶提取物。
本发明具有以下有益效果：
（1）本发明选择热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌作为益生菌菌种，三种菌种互利共生，无拮抗反应，进行混合发酵只采用一套工艺就能制备出混合益生菌发酵剂，与现有的几种益生菌先分别发酵再混合的工艺相比，能够简化工艺流程，减少设备投入，降低生产成本，提高生产效率。
（2）本发明优化了整个工艺流程，在种子液接种前进行磁场刺激处理，能够提高微生物的新陈代谢速率，促进微生物生长；在发酵培养时先进行有氧发酵，再进行厌氧发酵，对发酵参数进行调控，使三种益生菌都能较好的生长；采用连续补料发酵模式，实现了益生菌的高密度培养，与常规分批发酵模式相比，菌体数量在发酵结束时有了极大提高。
（3）本发明的益生菌发酵剂活菌量大，便于储存，使用时无需再复配，简单方便，应用于鸡饲料的发酵时，三种益生菌协同作用，能够优化原饲料的营养结构，利于鸡对营养物质的消化吸收，还能增强机体免疫力，调节肠道生态平衡，进而促进鸡的生长发育。
附图说明
图1磁场刺激处理方式对发酵液中菌体数量的影响；
图2种子液接种比例对发酵液中菌体数量的影响；
图3发酵温度对发酵液中菌体数量的影响；
图4初始补料时间对发酵液中菌体数量的影响；
图5发酵方式对发酵液中菌体数量的影响。
具体实施方式
下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。下述实施例中，如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用菌种、试剂等均可从正常渠道购买。
以下各实施例中，热带假丝酵母（Candida tropicalis），编号为1254，蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus），编号为21696，植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），编号为20261，均购于中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）。
实施例1
1. 一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，该制备工艺的步骤包括：
（1）制备热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌的种子液
热带假丝酵母：热带假丝酵母菌种经PDA斜面活化后，接种至YPD液体培养基中，在摇床上于30℃、180r/min振荡培养24h；蜡样芽孢杆菌：蜡样芽孢杆菌经PDA斜面活化后，接种至LB液体培养基中，在摇床上于35℃、180r/min振荡培养12h；植物乳杆菌：植物乳杆菌经MRS斜面（含2%琼脂）活化后，接种至MRS液体培养基中，在培养箱中于37℃静置培养12h。
（2）种子液的磁场刺激处理
将制备好的种子液放入磁场处理器中，调节磁感应强度为0.8mT，处理15min后置于步骤（1）所述的对应培养条件下继续培养12h，再放入磁场处理器中处理15nin，然后可进行接种。
（3）连续补料发酵
采用10L发酵罐，发酵培养基装液量为40%，即4L，将处理后的热带假丝酵母和蜡样芽孢杆菌种子液接入发酵培养基（该培养基成分为：甘蔗糖蜜18g/L，玉米淀粉9g/L，豆粕粉14g/L，尿素11.5g/L，甘露寡糖2.4g/L，醋酸钠3.8g/L，K2HPO4 1.9g/L，KH2PO4 0.3g/L，MgSO4·7H2O0.75g/L，FeSO4·7H2O 0.015g/L，CaCl2 0.15g/L，柠檬酸锌0.04g/L，茉莉酸甲酯45μmol/L，桑叶提取物3.1g/L，司盘-60 7.9g/L，余量为水，初始pH值为6.5）中，发酵参数为温度33℃，转速200r/min，通气比1.2，培养24h后停止搅拌和通气，接入处理后的植物乳杆菌种子液继续培养24h；当开始培养8h后，按照每小时流加发酵培养基体积的2.5%的速率流加补料培养基（该培养基成分为：甘蔗糖蜜6g/L，玉米淀粉3.5g/L，豆粕粉3.4g/L，尿素4.0g/L，甘露寡糖1.2g/L，余量为水，初始pH值为6.5），即每小时流加100ml补料培养基；其中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌种子液的接种比例为3:4:3，总接种量为10%。
发酵培养基中桑叶提取物的制备方法为：取干燥的桑叶加水煎煮3h，桑叶与水的质量比为1 :10，然后过滤，浓缩，80℃减压干燥，得到粉末状固体，即得桑叶提取物。
（4）制备混合益生菌发酵剂
发酵结束后，将发酵液在以5000r/min的转速离心10min，收集菌体冷冻干燥，即得混合益生菌发酵剂。
实施例2
本实施例研究磁场刺激处理方式对发酵液中菌体数量的影响，设置3种处理方式：方式1就是实施例步骤（2）描述的方式；方式2就是只进行1次磁场刺激处理，但种子液培养时间需与方式1保持一致，即热带假丝酵母种子液培养36h、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌种子液均培养24h后，分别放入磁场处理器中，调节磁感应强度为0.8mT，处理15min；方式3就是不进行磁场刺激处理，但种子液培养时间需与方式1保持一致，即热带假丝酵母种子液培养36h，蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌种子液均培养24h，然后直接进行发酵培养；发酵结束后，对发酵液进行取样，用无菌水进行梯度稀释，倾注法检测发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量（CFU/ml），结果见图1。
从图1可知，按照方式1进行磁场刺激处理，发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量均为最大值，说明该种方式处理效果最好。比较方式1、方式2与方式3，说明外加磁场刺激处理能够促进微生物生长，磁场刺激处理可能会影响细胞膜的通透性，从而影响微生物新陈代谢的速率；比较方式1与方式2，方式1对三种菌液进行了2次磁场刺激处理，对微生物生长的促进效果更好，并且间隔了12h，使微生物有一个适应生长时间，还能减少磁场刺激处理可能对微生物造成的损伤。
实施例3
本实施例研究种子液接种比例对发酵液中菌体数量的影响，将热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌种子液的接种比例设置为2:3:5、3:4:3、4:2:4、5:2:3，总接种量均为10%，按照实施例1步骤（3）的方法进行连续补料发酵，发酵结束后，对发酵液进行取样，用无菌水进行梯度稀释，倾注法检测发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量（CFU/ml），结果见图2。
从图2可知，当3种菌液的接种比例为3:4:3时，发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量均为最大值，说明在这个菌种比例下，3种益生菌之间达到一种良好的共生关系，菌体生长能够相互促进。热带假丝酵母和蜡样芽孢杆菌先接种进行有氧发酵，蜡样芽孢杆菌可产生蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等多种活性较高的酶类，降解培养基中的大分子营养物质，促进热带假丝酵母生长，停止通气和搅拌后再接种植物乳杆菌进行厌氧发酵，热带假丝酵母和蜡样芽孢杆菌可利用发酵液中的氧气继续生长，当氧气消耗完后植物乳杆菌就开始大量繁殖。
实施例4
本实施例研究发酵温度对发酵液中菌体数量的影响，将发酵温度设置为27℃、30℃、33℃、36℃，按照实施例1步骤（3）的方法进行连续补料发酵，发酵结束后，对发酵液进行取样，用无菌水进行梯度稀释，倾注法检测发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量（CFU/ml），结果见图3。
温度是影响微生物生长和存活的关键因素，微生物在最适的温度条件下才能生长得最好。温度过高会使微生物菌体中的蛋白质变性或受到不同程度的破坏，降低微生物的繁殖速度；温度过低又抑制了酶的活性，蛋白质的合成速度受到限制，也影响微生物的生长繁殖。从图3可知，当发酵温度为30~33℃时，热带假丝酵母菌体数量较高，当发酵温度为33~36℃时，蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌菌体数量较高，综合考虑3种菌生长的情况，在33℃时蜡样芽孢杆菌菌体数量最高，达到 8.5×109CFU/ml，热带假丝酵母达到5.3×109CFU/ml，植物乳杆菌达到6.3×109CFU/ml，因此，选择33℃为最佳发酵温度。
实施例5
本实施例研究初始补料时间对发酵液中菌体数量的影响，将初始补料时间设置为发酵培养的0h、4h、8h、12h、16h，按照实施例1步骤（3）的方法进行连续补料发酵，发酵结束后，对发酵液进行取样，用无菌水进行梯度稀释，倾注法检测发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量（CFU/ml），结果见图4。
从图4可知，当初始补料时间为发酵培养的8h时，发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量均为最大值，说明发酵培养8h后开始补料效果最好。微生物生长时期可分为迟滞期、对数期、稳定期和衰亡期，根据我们的研究发现，当微生物处于迟滞期以及对数生长初期，即使进行补料，菌体也不会大量增殖，这可能是由于菌体处于这个阶段时生长缓慢且对营养物质的需求与消耗很小，但进入对数生长期后，随着菌体大量繁殖，发酵液中的营养物质尤其是碳源和氮源也急剧下降，因此，为了保证菌体在对数期大量繁殖时可以有足够的营养物质供给，所以应在微生物进入对数生长期时进行补料，而发酵培养8h后热带假丝酵母和蜡样芽孢杆菌都进入了对数生长期，因此开始补料效果最好。
实施例6
本实施例比较不同发酵方式对发酵液中菌体数量的影响，方式1就是实施例1描述的连续补料发酵；方式2就是常规分批发酵，即不流加补料培养基，其它与实施例1相同，发酵结束后，对发酵液进行取样，用无菌水进行梯度稀释，倾注法检测发酵液中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌体数量（CFU/ml），结果见图5。
从图5可知，采用本发明的连续补料发酵，最终发酵液中3种益生菌的菌体数量与分批发酵相比有了极大地提高，热带假丝酵母菌体数量达到5.6×109CFU/ml，蜡样芽孢杆菌菌体数量达到8.7×109CFU/ml，植物乳杆菌菌体数量达到6.4×109CFU/ml，实现了益生菌的高密度培养。
实施例7
本实施例是混合益生菌发酵剂在鸡饲料发酵上的应用。以市面上购买的常规全价鸡饲料（配方为：玉米粉 64%、膨化豆粕 18%、麸皮13%、磷酸氢钙 1.5%、预混料 1.5%、豆油0.5%、食盐 0.3%、蔗糖0.7%、沸石粉 0.5%）作为试验用饲料，称取20kg，采用本发明制备的混合益生菌发酵剂进行发酵，具体方法为：1）根据待发酵饲料的重量确定混合益生菌发酵剂的使用量，使用量为待发酵饲料重量的0.05%；2）称取所需发酵剂10g溶于适量糖水中，室温下放置2~3h，使菌种活化；3）向待发酵鸡饲料中加水，使含水率达到45%；4）将发酵剂溶液喷洒到待发酵鸡饲料上，搅拌均匀后装入发酵袋中，在温度33℃的条件下发酵7d，检测发酵前后饲料的营养成分含量以及发酵饲料中益生菌的菌体数量，结果见下表1（均为风干后检测值）。
由上表可知，发酵前后饲料的营养价值发生了巨大的变化：相比于发酵前的饲料，发酵后饲料的粗蛋白提高了17.79%，粗脂肪提高了9.14%，粗灰分提高了 13.69%，有效磷提高了34.29%，粗纤维降低了34.00%，发酵饲料的热带假丝酵母数量达到2.85×109CFU/g，蜡样芽孢杆菌数量达到4.43×109CFU/g，植物乳杆菌数量达到3.26×109CFU/g。本发明的发酵剂是由热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌组成的复合益生菌发酵剂，用来发酵全价鸡饲料，发酵后的饲料中不仅含有大量的活益生菌，还含有益生菌的代谢产物如蛋白酶、纤维素酶，淀粉酶等。饲料的发酵过程不仅是益生菌生长繁殖的过程，同时这些益生菌的繁殖提高了饲料中蛋白质的含量，分解了饲料中难以被动物消化利用的物质，如粗纤维、植酸等，从而提高了饲料的消化吸收率，进而提高鸡的生长性能和经济效益。
本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (9)
1.一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，该制备工艺的步骤包括：
（1）制备热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌的种子液
热带假丝酵母：热带假丝酵母菌种经PDA斜面活化后，接种至YPD液体培养基中，在摇床上于30℃、180r/min振荡培养24h；蜡样芽孢杆菌：蜡样芽孢杆菌经PDA斜面活化后，接种至LB液体培养基中，在摇床上于35℃、180r/min振荡培养12h；植物乳杆菌：植物乳杆菌经MRS斜面（含2%琼脂）活化后，接种至MRS液体培养基中，在培养箱中于37℃静置培养12h；
（2）种子液的磁场刺激处理
将制备好的种子液放入磁场处理器中，调节磁感应强度为0.8mT，处理15min后置于步骤（1）所述的对应培养条件下继续培养12h，再放入磁场处理器中处理15nin，然后可进行接种；
（3）连续补料发酵
将处理后的热带假丝酵母和蜡样芽孢杆菌种子液接入发酵培养基中，发酵参数为温度32~34℃，转速190~210r/min，通气比1.1~1.3，培养22~26h后停止搅拌和通气，接入处理后的植物乳杆菌种子液继续培养22~26h；当开始培养8h后，按照一定的速率流加补料培养基；
（4）制备混合益生菌发酵剂
发酵结束后，将发酵液以5000r/min的转速离心10min，收集菌体冷冻干燥，即得混合益生菌发酵剂。
2.根据权利要求1所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述步骤（3）中热带假丝酵母、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌种子液的接种比例为3:4:3，总接种量为8~12%。
3.根据权利要求1所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述步骤（3）中发酵培养基的成分为：甘蔗糖蜜16~20g/L，玉米淀粉8~10g/L，豆粕粉13~15g/L，尿素10~13g/L，甘露寡糖2.0~2.8 g/L，醋酸钠3.6~4.0g/L，K2HPO4 1.7~2.1g/L，KH2PO4 0.2~0.4g/L，MgSO4·7H2O0.7~0.8g/L，FeSO4·7H2O 0.01~0.02g/L，CaCl2 0.1~0.2g/L，柠檬酸锌0.03~0.05g/L，茉莉酸甲酯40~50μmol/L，桑叶提取物2.7~3.5g/L，司盘-60 7.5~8.3g/L，余量为水，初始pH值为6.0~7.0。
4.根据权利要求1所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，步骤（3）所述发酵培养基的装液量为35~45%，优选为40%。
5.根据权利要求1所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述步骤（3）中补料培养基的成分为：甘蔗糖蜜5~7g/L，玉米淀粉3~4g/L，豆粕粉3.3~3.5g/L，尿素3.8~4.2g/L，甘露寡糖1.0~1.4g/L，余量为水，初始pH值为6.0~7.0。
6.根据权利要求1所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述步骤（3）中补料培养基的流加速率为每小时流加发酵培养基体积的2.0~3.0%，优选为2.5%。
7.根据权利要求1所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述饲料应用是指在鸡饲料发酵上的应用。
8.根据权利要求7所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述鸡饲料发酵的具体方法为：1）根据待发酵鸡饲料的重量确定混合益生菌发酵剂的使用量，使用量为鸡饲料重量的0.03~0.08%；2）称取所需发酵剂溶于适量糖水中，室温下放置2~3h，使菌种活化；3）向待发酵鸡饲料中加水，使含水率达到40~50%；4）将发酵剂溶液喷洒到待发酵鸡饲料上，搅拌均匀后装入发酵袋中，在温度30~35℃的条件下发酵6~8d。
9.根据权利要求3所述的一种混合益生菌发酵剂的同步制备工艺及其饲料应用，其特征在于，所述桑叶提取物的制备方法为：取干燥的桑叶加水煎煮3h，桑叶与水的质量比为1 :10，然后过滤，浓缩，80℃减压干燥，得到粉末状固体，即得桑叶提取物。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113424896A (zh) * | 2021-06-18 | 2021-09-24 | 北京爱蓝生物科技有限公司 | 一种菌酶饲料的发酵工艺 |
| CN116172192A (zh) * | 2023-03-30 | 2023-05-30 | 广州五科生物科技有限公司 | 一种高活性复合酵素粉及其制备方法 |
| CN116636577A (zh) * | 2023-06-06 | 2023-08-25 | 广东省科学院生物与医学工程研究所 | 一种利用复合益生菌群协同发酵甘蔗渣制备饲料的方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1146865A (zh) * | 1996-08-26 | 1997-04-09 | 吕青 | 微生态淡水鱼饲料 |
| CN1965674A (zh) * | 2006-05-12 | 2007-05-23 | 李季 | 一种复合微生物饲料添加剂及其生产方法和用途 |
| CN104996722A (zh) * | 2015-08-13 | 2015-10-28 | 江南大学 | 一种多菌种两步联合发酵饲料的方法 |
| US20160165924A1 (en) * | 2006-07-14 | 2016-06-16 | Lone Legarth | Homofermented products |
| CN106666075A (zh) * | 2016-12-26 | 2017-05-17 | 宣城市同鼎饲料科技有限公司 | 一种富含天然抗菌剂的磁场辅助发酵饲料生产技术 |
| CN107568415A (zh) * | 2017-10-24 | 2018-01-12 | 山西大禹生物工程股份有限公司 | 一种畜禽用生物发酵饲料 |
-
2018
- 2018-12-26 CN CN201811605370.2A patent/CN109486724A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1146865A (zh) * | 1996-08-26 | 1997-04-09 | 吕青 | 微生态淡水鱼饲料 |
| CN1965674A (zh) * | 2006-05-12 | 2007-05-23 | 李季 | 一种复合微生物饲料添加剂及其生产方法和用途 |
| US20160165924A1 (en) * | 2006-07-14 | 2016-06-16 | Lone Legarth | Homofermented products |
| CN104996722A (zh) * | 2015-08-13 | 2015-10-28 | 江南大学 | 一种多菌种两步联合发酵饲料的方法 |
| CN106666075A (zh) * | 2016-12-26 | 2017-05-17 | 宣城市同鼎饲料科技有限公司 | 一种富含天然抗菌剂的磁场辅助发酵饲料生产技术 |
| CN107568415A (zh) * | 2017-10-24 | 2018-01-12 | 山西大禹生物工程股份有限公司 | 一种畜禽用生物发酵饲料 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113424896A (zh) * | 2021-06-18 | 2021-09-24 | 北京爱蓝生物科技有限公司 | 一种菌酶饲料的发酵工艺 |
| CN113424896B (zh) * | 2021-06-18 | 2022-04-26 | 北京爱蓝生物科技有限公司 | 一种菌酶饲料的发酵工艺 |
| CN116172192A (zh) * | 2023-03-30 | 2023-05-30 | 广州五科生物科技有限公司 | 一种高活性复合酵素粉及其制备方法 |
| CN116172192B (zh) * | 2023-03-30 | 2024-07-26 | 广州五科生物科技有限公司 | 一种高活性复合酵素粉及其制备方法 |
| CN116636577A (zh) * | 2023-06-06 | 2023-08-25 | 广东省科学院生物与医学工程研究所 | 一种利用复合益生菌群协同发酵甘蔗渣制备饲料的方法 |
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