CN106333060A - 一种微生物发酵饲料及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种微生物发酵饲料及其制备方法与应用。所述的微生物发酵饲料的制备方法，包括以下步骤：将植物基料粉碎，然后加入复合酶制剂混合进行水解，得到酶解产物；酶解产物与瘤胃内容物混合进行厌氧液体发酵，得到发酵物1；发酵物1与复合微生物菌液1混合进行厌氧固体发酵，得到发酵物2；发酵物2与复合微生物菌液2混合进行有氧固体发酵，得到发酵物3；发酵物3干燥粉碎过筛，得到微生物发酵饲料。本发明采用固液结合发酵+有氧厌氧结合发酵，制得的饲料富含纤维素类营养物质，提高了食物营养利用率，蛋白质含量高，利于动物生长发育。本发明有助于全面降低畜牧业养殖成本、节约大量用于制作畜牧饲料的粮食。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种微生物发酵饲料及其制备方法与应用。
背景技术
人们一直探索如何解决动物生产产量偏低这一难题，直至20世纪50年代，人们发现在动物饲料中添加抗生素可以显著提高动物的生产率，这一发现对推进畜牧业的集约化发展做出了巨大贡献。近年来，饲喂含有抗生素饲料的危害受到社会各界的日益关注。2004年，世界贸易组织、联合国粮农组织和世界动物卫生组织联合召开非人用抗生素使用问题的专题讨论会。自2006年1月起，欧盟已全面禁止在畜禽饲料中添加抗生素，我国也在逐渐减少抗生素的使用，人们开始寻求其他方法来保证畜牧业生产的效率与效益。
我国畜牧业受耕地资源的制约，其发展使人畜共粮的矛盾日益突出，因此研究与开发新型饲料资源已成为畜牧业能否可持续发展的关键。开发新型饲料资源，对推动畜牧养殖业的可持续发展具有重要的意义。
微生物发酵饲料是利用微生物的新陈代谢和繁殖菌体来生产和调制的饲料，主要利用微生物的发酵作用以提高饲料的营养价值，增加饲料的吸收率，降低原料中的抗营养因子，提高饲料的附加值。微生物发酵饲料有益于畜禽动物的生长发育，提高防病抗病能力，生产天然有机绿色的肉蛋奶。
微生物发酵饲料不但具有质量好、安全性高和效果稳定的特点，而且具有原料来源广泛和生产成本较低的优势引起世界饲料行业的重视，深受养殖业和配合饲料厂家的欢迎，微生物发酵作为一种特殊的生物技术产品，为饲料工业和畜禽饲养业提供了一种天然健康、无毒的绿色选择，已开始产业化生产。
目前微生物发酵饲料关键的技术在于微生物优良菌株的选育、复合菌种的有效复配和发酵工艺的优化等。在这些方面，国内外学者均进行了大量的研究工作，但对于综合解决清楚饲料发酵过程中抑制腐败菌、防治二次发酵，有效控制有机酸和降解木质纤维素，降低成本，便于使用等方面仍然存在问题。
发明内容
为了克服现有技术中存在菌种落后、工艺欠佳、纤维素降解率低、发酵效率低等不足与缺点，本发明的首要目的在于提供一种微生物发酵饲料的制备方法。
本发明的另一目的在于提供上述制备方法制备得到的微生物发酵饲料。
本发明的再一目的在于提供上述微生物发酵饲料的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种微生物发酵饲料的制备方法，包含如下步骤：
(1)将植物基料粉碎，然后加入复合酶制剂混合均匀，在pH为4～5、温度为35℃～40℃的条件下进行水解，其中，固液比为(1:3)～(1:6)，得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与瘤胃内容物混合均匀，在35～45℃的条件下进行厌氧液体发酵12～20h，干燥，粉碎过筛，得到发酵物1；
(3)将步骤(2)制得的发酵物1与复合微生物菌液1混合均匀，在25～35℃的条件下进行厌氧固体发酵24～48h，得到发酵物2；
(4)将步骤(3)制得的发酵物2与复合微生物菌液2混合均匀，在25～45℃的条件下进行有氧固体发酵36～72h，每隔3～5小时翻拌一次，得到发酵物3；
(5)将步骤(3)制得的发酵物3进行干燥，然后粉碎过筛，得到微生物发酵饲料；
步骤(1)中所述的植物基料优选为秸秆和饼粕的混合物；
所述的秸秆和饼粕的质量比优选为(1～5):1；
所述的秸秆优选为玉米秸秆；
所述的饼粕优选为豆粕和菜粕的混合物；
所述的豆粕和菜粕的质量比优选为1:(1～3)；
步骤(1)中所述的植物基料优选还包括麸皮；
所述的麸皮与秸秆的质量比优选为(0.1～1)：1；
步骤(1)中所述的复合酶制剂为纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物；
所述的纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为300～400u/g植物基料、150～200u/g植物基料、150～200u/g植物基料、100～200u/g植物基料；
步骤(2)中所述的瘤胃内容物优选为新鲜牛胃中的瘤胃里取出瘤胃内容物；
步骤(1)中所述的植物基料与步骤(2)中所述的瘤胃内容物的质量比优选为(100～200):1；
步骤(2)中所述的干燥的条件优选为自然风干或或35～45℃烘干；
步骤(2)中所述的过筛优选为过20～60目筛；
步骤(3)中所述的复合微生物菌液1为嗜酸乳杆菌液、保加利亚乳杆菌液和双歧杆菌液的混合物；
所述的嗜酸乳杆菌优选为嗜酸乳杆菌(Leatobacillus acidophilus)ATCCNo.11073；
所述的保加利亚乳杆菌优选为保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)CGMCC1.1480；
所述的双歧杆菌优选为青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)ACCCNo.00215；
步骤(3)中所述的复合微生物菌液1的接种量为0.5～1％(w/w)；
步骤(3)中所述的复合微生物菌液1中各菌种活细胞数优选不少于108个/mL；
步骤(4)中所述的复合微生物菌液2为枯草芽孢杆菌液、纳豆芽孢杆菌液、酵母菌液、黑曲霉菌液的混合物；
所述的枯草芽孢杆菌优选为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633；
所述的纳豆芽孢杆菌优选为纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)CICC 10262；
所述的酵母菌优选为产朊假丝酵母(Candida utilis)ATCC No.22023；
所述的黑曲霉优选为黑曲霉(Aspergillus niger V.Tiegh)CGMCC 3.316；
步骤(4)中所述的复合微生物菌液2的接种量为1～15％(w/w)；
步骤(4)中所述的复合微生物菌液2中各菌种浓度优选不少于107个/mL；
步骤(5)中所述的干燥的条件优选为干燥温度45℃～65℃，含水量不高于10％；
步骤(5)中所述的过筛优选为过10～40目筛；
一种微生物发酵饲料，通过上述方法制备得到；
所述的微生物发酵饲料在畜牧业领域中的应用；
所述的微生物发酵饲料的饲喂对象优选为鸡、鸭或猪等；
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明选择秸秆和饼粕通过发酵作用改善了秸秆饲料的适口性，有助于全面降低畜牧业养殖成本、节约大量用于制作畜牧饲料的粮食，富含纤维素类营养物质，提高了食物营养利用率，蛋白质含量高，有利于动物生长发育。
(2)本发明选择特殊的复合酶制剂水解得到的水解活性氨基酸，明显提高了养殖体的免疫力、提高养殖体对营养物质的吸收，提高养殖体的成活率，促进生长。
(3)本发明将水解后的植物基料先通过廇胃内容物进行预厌氧预发酵发酵，然后采用独特的复合微生物菌液1进行进一步厌氧固体发酵，最后采用独特的复合微生物菌液2进行有氧固体发酵，整个发酵过程固液结合发酵+有氧厌氧结合发酵，在降解原料中的大分子物质同时生成菌体细胞、生以及更多的物酶类、小分子肽类物质、氨基酸和未知生长因子。
(4)本发明采用的复合微生物菌液1包含嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和双歧杆菌三种细菌，其中，嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌，可以产生细菌素和过氧化氢，可以抑制许多细菌的生长，尤其是革兰氏阴性病原菌。另外，双歧杆菌和乳酸杆菌产生的胞外糖苷酶可以阻止细菌毒素在上皮细胞的黏附和侵入。三种菌株之间具有很好的协同作用。
(5)复合微生物菌液2包含枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉菌，其中，，酵母菌体中含有非常丰富的蛋白质、B族维生素、脂肪、糖、酶等多种营养成分，酵母菌还可以促进植酸酶的产生，提高单胃动物对磷的利用率，芽孢杆菌能分泌多种消化酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等)促进营养物质的消化与吸收，黑霉菌则进一步分解饲料原料中一些动物难以消化的的纤维素、半纤维素、木质素和淀粉等大分子物质。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例中所述的嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌(Leatobacillus acidophilus)ATCCNo.11073；所述的保加利亚乳杆菌为保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)CGMCC1.1480；所述的双歧杆菌为青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)ACCCNo.00215；所述的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633；所述的纳豆芽孢杆菌为纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)CICC10262；所述的酵母菌为产朊假丝酵母(Candida utilis)ATCC No.22023；所述的黑曲霉为黑曲霉(Aspergillus nigerV.Tiegh)CGMCC 3.316；
本发明中细菌、真菌活化、培养及检测方法说明书中未提及的，均为本领域常规的方法。
实施例1
(1)将植物基料玉米秸秆和饼粕(豆粕和菜粕的混合物，质量比为1:1)按质量比5:1混合后粉碎，然后加入复合酶制剂(纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物)混合均匀，在pH为4.5、温度为35℃的条件下进行水解，其中，固液比为1:6，纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为400u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料；得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与新鲜牛胃中的瘤胃里取出的瘤胃内容物混合均匀，其中，植物基料与瘤胃内容物的质量比为200:1；然后在45℃的条件下厌氧液体发酵12h，35℃烘干，粉碎过60目筛，得到发酵物1；
(3)将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和双歧杆菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液1，其中，复合微生物菌液1中各菌种活细胞数优选不少于108个/mL；将复合微生物菌液1接种到步骤(2)制得的发酵物1中，接种量为1％；然后在25℃条件下进行厌氧固体发酵48h，得到发酵物2；
(4)将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液2，其中，复合微生物菌液2中各菌种浓度不少于107个/mL；将复合微生物菌液2接种到步骤(3)制得的发酵物2中，接种量为1％；然后在45℃条件下进行有氧固体发酵72h，每隔5小时翻拌一次，得到发酵物3；
(5)将步骤(3)制得的发酵物3进行干燥，干燥温度55℃，干燥至含水量不高于10％；然后粉碎过40目筛，得到微生物发酵饲料。
按照国标GB 478935-2010、GB/T 26428-2010对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中含有的微生态活菌、有益菌总数大于1×1010cfu/g；
按照国标GB/T 13092-2006，ELISA检测试剂盒对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中霉菌毒素含量低于国家限量标准，黄曲霉毒素10ppb，赭曲霉毒素30ppb，T-2毒素0.8ppb；
按照GB/T 22142-2008对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品富含乙酸、丙酸、丁酸、乳酸等有机酸，乙酸含量达3.2％，乳酸含量达3.8％；pH低于4.0，pH计测定结果为3.5；
按照GB/T 23881-2009对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中抗菌肽效价大于1200u/g，中性蛋白酶200u/g，α-淀粉酶350u/g，干重以上，且总蛋白酶大于700u/g。
实施例2
(1)将植物基料玉米秸秆和饼粕(豆粕和菜粕的混合物，质量比为1:3)按质量比2:1混合后粉碎，然后加入复合酶制剂(纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物)混合均匀，在pH为4、温度为37℃的条件下进行水解，其中，固液比为1:5，纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为350u/g植物基料、180u/g植物基料、170u/g植物基料、150u/g植物基料；得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与新鲜牛胃中的瘤胃里取出的瘤胃内容物混合均匀，其中，植物基料与瘤胃内容物的质量比为150:1；然后在37℃的条件下厌氧液体发酵18h，45℃烘干，粉碎过20目筛，得到发酵物1；
(3)将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和双歧杆菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液1，其中，复合微生物菌液1中各菌种活细胞数优选不少于108个/mL；将复合微生物菌液1接种到步骤(2)制得的发酵物1中，接种量为0.9％；然后在35℃条件下进行厌氧固体发酵24h，得到发酵物2；
(4)将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液2，其中，复合微生物菌液2中各菌种浓度不少于107个/mL；将复合微生物菌液2接种到步骤(3)制得的发酵物2中，接种量为2％；然后在37℃条件下进行有氧固体发酵60h，每隔4小时翻拌一次，得到发酵物3；
(5)将步骤(3)制得的发酵物3进行干燥，干燥温度45℃，干燥至含水量不高于10％；然后粉碎过20目筛，得到微生物发酵饲料。
按照国标GB 478935-2010、GB/T 26428-2010对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中含有的微生态活菌、有益菌总数大于8.05×109cfu/g；
按照国标GB/T 13092-2006，ELISA检测试剂盒对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中霉菌毒素含量低于国家限量标准，黄曲霉毒素9ppb，赭曲霉毒素32ppb，T-2毒素0.6ppb；
按照GB/T 22142-2008对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品富含乙酸、丙酸、丁酸、乳酸等有机酸，乙酸含量达3.0％，乳酸含量达3.5％；pH低于4.0，pH计测定结果为3.7；
按照GB/T 23881-2009对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中抗菌肽效价大于1200u/g，中性蛋白酶250u/g，α-淀粉酶380u/g，干重以上，且总蛋白酶大于720u/g。
实施例3
(1)将植物基料玉米秸秆、饼粕(豆粕和菜粕的混合物，质量比为1:2)和麸皮按质量比1:1:1混合后粉碎，然后加入复合酶制剂(纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物)混合均匀，在pH为5、温度为40℃的条件下进行水解，其中，固液比为1:3，纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为300u/g植物基料、150u/g植物基料、150u/g植物基料、180u/g植物基料；得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与新鲜牛胃中的瘤胃里取出的瘤胃内容物混合均匀，其中，植物基料与瘤胃内容物的质量比为100:1；然后在35℃的条件下厌氧液体发酵20h，37℃烘干，粉碎过40目筛，得到发酵物1；
(3)将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和双歧杆菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液1，其中，复合微生物菌液1中各菌种活细胞数优选不少于108个/mL；将复合微生物菌液1接种到步骤(2)制得的发酵物1中，接种量为0.5％；然后在30℃条件下进行厌氧固体发酵30h，得到发酵物2；
(4)将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液2，其中，复合微生物菌液2中各菌种浓度不少于107个/mL；将复合微生物菌液2接种到步骤(3)制得的发酵物2中，接种量为5％；然后在25℃条件下进行有氧固体发酵36h，每隔3小时翻拌一次，得到发酵物3；
(5)将步骤(3)制得的发酵物3进行干燥，干燥温度65℃，干燥至含水量不高于10％；然后粉碎过10目筛，得到微生物发酵饲料。
按照国标GB 478935-2010、GB/T 26428-2010对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中含有的微生态活菌、有益菌总数大于1.2×1010cfu/g；
按照国标GB/T 13092-2006，ELISA检测试剂盒对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中霉菌毒素含量低于国家限量标准，黄曲霉毒素10ppb，赭曲霉毒素28ppb，T-2毒素0.5ppb；
按照GB/T 22142-2008对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品富含乙酸、丙酸、丁酸、乳酸等有机酸，乙酸含量达3.1％，乳酸含量达3.2％；pH低于4.0，pH计测定结果为3.7；
按照GB/T 23881-2009对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中抗菌肽效价大于1210u/g，中性蛋白酶250u/g，α-淀粉酶330u/g，干重以上，且总蛋白酶大于710u/g。
对比实施例1
(1)将植物基料玉米秸秆和饼粕(豆粕和菜粕的混合物，质量比为1:1)按质量比5:1混合后粉碎，然后加入复合酶制剂(纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物)混合均匀，在pH为4.5、温度为35℃的条件下进行水解，其中，固液比为1:6，纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为400u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料；得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与新鲜牛胃中的瘤胃里取出的瘤胃内容物混合均匀，其中，植物基料与瘤胃内容物的质量比为200:1；然后在45℃的条件下厌氧液体发酵12h，35℃烘干，粉碎过60目筛，得到微生物发酵饲料。
按照国标GB 478935-2010、GB/T 26428-2010对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中含有的微生态活菌、有益菌总数小于1×108cfu/g；
按照国标GB/T 13092-2006，ELISA检测试剂盒对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中霉菌毒素含量低于国家限量标准，黄曲霉毒素12ppb，赭曲霉毒素32ppb，T-2毒素0.5ppb；
按照GB/T 22142-2008对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品含少量乙酸、乳酸等有机酸，乙酸含量0.9％，乳酸含量1.1％；pH高于4.0，pH计测定结果为6.5；
按照GB/T 23881-2009对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中抗菌肽效价低于700u/g，中性蛋白酶50u/g，α-淀粉酶150u/g，干重以上，且总蛋白酶低于300u/g。
对比实施例2
(1)将植物基料玉米秸秆和饼粕(豆粕和菜粕的混合物，质量比为1:1)按质量比5:1混合后粉碎，然后加入复合酶制剂(纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物)混合均匀，在pH为4.5、温度为35℃的条件下进行水解，其中，固液比为1:6，纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为400u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料；得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与新鲜牛胃中的瘤胃里取出的瘤胃内容物混合均匀，其中，植物基料与瘤胃内容物的质量比为200:1；然后在45℃的条件下厌氧液体发酵12h，35℃烘干，粉碎过60目筛，得到发酵物1；
(3)将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和双歧杆菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液1，其中，复合微生物菌液1中各菌种活细胞数优选不少于108个/mL；将复合微生物菌液1接种到步骤(2)制得的发酵物1中，接种量为1％；然后在25℃条件下进行厌氧固体发酵48h，然后粉碎过40目筛，得到微生物发酵饲料。
按照国标GB 478935-2010、GB/T 26428-2010对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中含有的微生态活菌、有益菌总数低于1×109cfu/g；
按照国标GB/T 13092-2006，ELISA检测试剂盒对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中霉菌毒素含量低于国家限量标准，黄曲霉毒素11ppb，赭曲霉毒素30ppb，T-2毒素0.8ppb；
按照GB/T 22142-2008对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品含乙酸、丙酸、丁酸、乳酸等有机酸，乙酸含量2.2％，乳酸含量2.6％；pH高于4.0，pH计测定结果为5.0；
按照GB/T 23881-2009对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中抗菌肽效价低于1000u/g，中性蛋白酶100u/g，α-淀粉酶150u/g，干重以上，且总蛋白酶低于400u/g。
对比实施例3
(1)将植物基料玉米秸秆和饼粕(豆粕和菜粕的混合物，质量比为1:1)按质量比5:1混合后粉碎，然后加入复合酶制剂(纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物)混合均匀，在pH为4.5、温度为35℃的条件下进行水解，其中，固液比为1:6，纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为400u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料、200u/g植物基料；得到酶解产物；
(2)将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉菌分别活化，并扩大培养，然后菌液混合，得到复合微生物菌液2，其中，复合微生物菌液2中各菌种浓度不少于107个/mL；将复合微生物菌液2接种到步骤(1)制得的酶解产物2中，接种量为1％；然后在45℃条件下进行有氧固体发酵72h，每隔5小时翻拌一次，得到发酵物1；
(3)将步骤(2)制得的发酵物1进行干燥，干燥温度65℃，干燥至含水量不高于10％；然后粉碎过40目筛，得到微生物发酵饲料。
按照国标GB 478935-2010、GB/T 26428-2010对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中含有的微生态活菌、有益菌总数小于1×109cfu/g；
按照国标GB/T 13092-2006，ELISA检测试剂盒对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中霉菌毒素含量低于国家限量标准，黄曲霉毒素15ppb，赭曲霉毒素33ppb，T-2毒素0.7ppb；
按照GB/T 22142-2008对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品含乙酸、丙酸、丁酸、乳酸等有机酸，乙酸含量2.1％，乳酸含量2.7％；pH高于4.0，pH计测定结果为5.5；
按照GB/T 23881-2009对所得微生物发酵饲料产品进行检测，可知，该发酵饲料产品中抗菌肽效价低于1000u/g，中性蛋白酶120u/g，α-淀粉酶200u/g，干重以上，且总蛋白酶低于500u/g。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)将植物基料粉碎，然后加入复合酶制剂混合均匀，在pH为4～5、温度为35℃～40℃的条件下进行水解，其中，固液比为(1:3)～(1:6)，得到酶解产物；
(2)将步骤(1)制得的酶解产物与瘤胃内容物混合均匀，在35～45℃的条件下进行厌氧液体发酵12～20h，干燥，粉碎过筛，得到发酵物1；
(3)将步骤(2)制得的发酵物1与复合微生物菌液1混合均匀，在25～35℃的条件下进行厌氧固体发酵24～48h，得到发酵物2；
(4)将步骤(3)制得的发酵物2与复合微生物菌液2混合均匀，在25～45℃的条件下进行有氧固体发酵36～72h，每隔3～5小时翻拌一次，得到发酵物3；
(5)将步骤(3)制得的发酵物3进行干燥，然后粉碎过筛，得到微生物发酵饲料；
步骤(1)中所述的复合酶制剂为纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的混合物；
步骤(3)中所述的复合微生物菌液1为嗜酸乳杆菌液、保加利亚乳杆菌液和双歧杆菌液的混合物；
步骤(4)中所述的复合微生物菌液2为枯草芽孢杆菌液、纳豆芽孢杆菌液、酵母菌液、黑曲霉菌液的混合物。
2.根据权利要求1所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的植物基料为秸秆和饼粕的混合物。
3.根据权利要求2所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
所述的秸秆和饼粕的质量比为(1～5):1；
所述的饼粕为豆粕和菜粕的混合物。
4.根据权利要求1所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的植物基料还包括麸皮。
5.根据权利要求1所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
所述的纤维素酶、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的用量分别为300～400u/g植物基料、150～200u/g植物基料、150～200u/g植物基料、100～200u/g植物基料。
6.根据权利要求1所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的植物基料与步骤(2)中所述的瘤胃内容物的质量比为(100～200):1。
7.根据权利要求1所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
所述的嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌ATCC No.11073；
所述的保加利亚乳杆菌为保加利亚乳杆菌CGMCC1.1480；
所述的双歧杆菌为青春双歧杆菌ACCC No.00215。
8.根据权利要求1所述的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：
所述的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ATCC No.6633；
所述的纳豆芽孢杆菌为纳豆芽孢杆菌CICC 10262；
所述的酵母菌为产朊假丝酵母ATCC No.22023；
所述的黑曲霉为黑曲霉CGMCC 3.316。
9.一种微生物发酵饲料，其特征在于通过权利要求1～8任一项所述的制备方法制备得到。
10.权利要求9所述的微生物发酵饲料在畜牧业领域中的应用。
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