CN102805209A

CN102805209A - 一种畜禽用合生素饲料添加剂及其应用

Info

Publication number: CN102805209A
Application number: CN2012103159275A
Authority: CN
Inventors: 吴胜莲; 胡新旭; 周映华; 周小玲; 高书锋; 孔利华; 靳磊; 缪东; 杨祎; 刘惠知
Original assignee: HUNAN INST OF MICROBE
Current assignee: HUNAN INST OF MICROBE
Priority date: 2012-08-30
Filing date: 2012-08-30
Publication date: 2012-12-05
Anticipated expiration: 2032-08-30
Also published as: CN102805209B

Abstract

本发明涉及一种畜禽用合生素饲料添加剂及其制备方法，其组分为：70%～80%的复合益生菌制剂和20%～30%的寡糖协同剂，复合益生菌为枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌和米曲霉的混合物，寡糖为壳聚糖。复制备方法为：先制备复合益生菌制剂，再将复合益生菌制剂和益生元—壳聚糖协同剂按比例混合均匀，从而制成畜禽用合生素饲料添加剂。

Description

一种畜禽用合生素饲料添加剂及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种畜禽用合生素及其应用。

背景技术

目前畜禽饲养中的养猪业已成为关系国计民生的重要产业，而养猪生产中乳仔猪饲养是关键。营养、生理、环境及病原微生物等因素可引起仔猪肠道微生物菌群失调，导致功能紊乱，引起消化不良、腹泻、生长抑制、死亡等。据统计，腹泻引起的仔猪死亡率平均为12%。每年因腹泻死亡的仔猪约2000多万头，造成直接经济损失约100多亿元。当前生产实际中迫切需要采取有效措施改善仔猪的肠道发育状况、维护和充分发挥肠道的功能，提高乳仔猪对腹泻的抗病能力，减少因腹泻而导致的死亡比例，进而提高仔猪生长性能、健康水平和经济效益。

而抗生素长期以来一直在动物生产中发挥着巨大作用，可有效地治疗和预防动物疾病发生，但是抗生素的持续使用会造成细菌耐药性和动物产品药物残留等诸多问题，寻求和开发绿色、无污染、低残留的饲料添加剂替代抗生素饲料添加剂日益为人们所重视。

发明内容

本发明的目的是提供一种畜禽用合生素饲料添加剂，该合生素添加剂适用于畜禽特别是仔猪的饲养。

本发明的另一目的在于提供这种合生素饲料添加剂在畜禽的增重和预防腹泻的应用。

本发明为研究出一种由枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌和米曲霉菌与壳聚糖组成的畜禽用合生素饲料添加剂。

本发明的技术方案是：该饲料添加剂是由组分重量比为70%～80%的复合益生菌制剂和20%～30%的壳聚糖协同剂组成;所述的复合益生菌制剂为重量比为20%～30%枯草芽孢杆菌、20%～30%纳豆芽孢杆菌、20%～30%酵母菌和20%～30%米曲霉菌的干粉剂的组合物；所述的复合益生菌制剂中含活菌数不低于100亿/g。

所述的畜禽用合生素饲料添加剂，混合益生菌剂的优选为：25%枯草芽孢杆菌＋25%纳豆芽孢杆菌＋25%酵母菌＋25%米曲霉的混合物。混合益生菌粉剂中含活菌数100亿/g。

所述的枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和酵母菌是分别经发酵培养制成，发酵方式为高密度液体发酵；米曲霉的分生孢子是经发酵培养制成，发酵方式为固体发酵。

所述的高密度液体发酵条件为：培养基装液量占发酵罐体积的40-60%，接种占培养基体积的1-5%的摇瓶发酵液，发酵温度28-35℃，通气量1:0.4～0.7，搅拌转数180～250r／min，发酵时间22～30h。

其中，纳豆芽孢杆菌发酵时间为22-24h，枯草芽孢杆菌发酵时间为24-26h，酵母菌发酵时间为28-30h。

枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌的干粉剂的制备包括：菌种活化，制备种子培养物后，将种子培养物接入液体培养基中进行高密度液体发酵培养；离心分离得到活性菌泥；将菌泥与麦麸吸附，吸附后50～60℃干燥，粉碎。

所述的菌泥与麦麸按1：10质量比吸附，粉碎到60～80目。

米曲霉菌干粉剂的制备包括：菌种活化后，将米曲霉稀释至10⁶个～10⁷/ml孢子数的菌悬液；将固体培养基灭菌后按接种量1ml～2ml/10g接入菌悬液，置30℃恒温培养48-52小时；将固体发酵培养物置50℃恒温干燥，粉碎。

本发明的应用在于，将所述的合生素饲料添加剂作为畜禽用增重、预防腹泻的饲料添加剂。

所述的饲料添加剂在全价饲料中添加重量比为0.1～0.3%。

所述的畜禽用合生素饲料添加剂的制备方法，其步骤为：先制备混合益生菌剂，再将70%～80%的混合益生菌剂和20%～30%壳聚糖协同剂按比例混合均匀，制成为畜禽用合生素饲料添加剂。具体包括以下步骤：

(1)枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌的培养：

A．菌种活化：取斜面上菌种一铂金耳接种于装有培养基（枯草和纳豆用LB培养基，酵母用土豆培养基）的试管内，恒温（枯草34℃、纳豆和酵母均30℃，下同）静置培养20小时（酵母为28小时），作为母培养物。

B．种子培养物的制备：将母培养物接入种子液体培养基中，接种量为1-3%，置摇床200rpm恒温培养22小时（酵母为30小时），作为种子培养物。

C．单菌发酵培养：将种子培养物接入液体培养基中，在恒温条件下进行发酵罐高密度培养，发酵罐发酵条件为：培养基装液量占发酵罐体积的40-60%，接种占培养基体积的1-5%的摇瓶发酵液，发酵温度28-35℃，通气量1:0.4～0.7，搅拌转数180～250r／min，发酵时间22～30h（纳豆22-24h、枯草24-26h、酵母28-30h）。

D．离心分离：取上述发酵液用离心机在4℃条件下4000rpm高速离心15min，用无菌水洗涤2-3次，取下层沉淀即为活性菌泥。

E．将菌泥与麦麸按1：10质量比吸附，吸附后50～60℃干燥1～6h，粉碎到60～80目。

(2)米曲霉菌的培养：

A．菌种活化：取斜面上菌种接种于装有土豆培养基的茄子瓶内，30℃恒温静置培养48小时，备用。

B、将米曲霉茄子瓶斜面稀释至10⁶个/ml孢子数的菌悬液；备用。

C、将固体培养基（麸皮：豆饼粉=9：1；含水量50%、PH自然）灭菌后按接种量1ml/10g接入菌悬液，置30℃恒温培养48-52小时。

D、将固体发酵培养物置50℃恒温干燥（至水分≤8%）。

E、将干燥后的米曲霉培养物粉碎到60～80目。

(3)合生素饲料添加剂的制备：将上述粉碎后的枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌的培养物、酵母菌和米曲霉菌的培养物与壳聚糖进行混合配比，制成合生素饲料添加剂。

4、所述的畜禽用合生素饲料添加剂用于制备家畜增重和预防腹泻的制剂。具体可将所述的菌制剂添加到饲料中，喂饲家畜（一般使用对象为猪，尤其是断奶仔猪）。在饲料中添加浓度为0.1～0.3%。

本发明采用的芽孢杆菌是益生菌常用的菌种之一,，材料来源广泛，由于其能形成芽孢，抗逆性强，因此比乳酸杆菌和链球菌稳定。芽孢杆菌可减少粪和消化道中的大肠杆菌数。芽孢杆菌与乳酸菌和酵母菌相比，具有以下优点和特性：耐高温、耐酸碱及耐压等，能耐受饲料加工过程中的影响；在贮藏过程中以芽孢形式存在，不消耗饲料中的养分，确保饲料质量稳定；进入肠道后，能在肠道前部快速复活，复活率接近100％；在动物肠道中，芽孢杆菌能产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及多种氨基酸和B族维生素；芽孢杆菌能消耗肠道中的氧，保持厌氧环境，抑制有害菌生长，维持肠道菌群平衡；促进肠道内乳酸杆菌和双歧杆菌增殖；枯草芽孢杆菌还能有效降解果胶、羧甲基纤维素及多聚半乳糖醛酸等复杂植物性碳水化合物。

酵母菌是动物肠道的有益微生物，酵母细胞含有蛋白质、核酸、维生素和消化酶，可加强动物消化和吸收功能。反刍动物日粮中添加酵母可促进瘤胃发酵菌数量上升。酵母细胞壁的主要成分是甘露寡糖和葡萄糖，其中前者可增强吞噬细胞活性。

米曲霉是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率。

壳聚糖具有抗微生物活性、提高机体免疫力、改善产品质量等生物学特性，饲料中添加壳聚糖，对促进动物生长、提高免疫力、改善动物品质等方面都有良好作用。

本发明的添加剂通过充分发挥了以上成分的协同作用，成功实现了对包括仔猪在内的畜禽的增重和预防腹泻的作用。本发明产品无毒无害功能性强，有效活性作用成分众多，具有多功能的内在因素，具备预防、保健、以及调节免疫等多重功效。

具体实施方式

以下结合实施例旨在进一步说明本发明，而非限制本发明。

实施例1

一、混合益生菌剂的制备：

(1)枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌的培养：

(2)米曲霉菌的培养：

D、将固体发酵培养物置50℃恒温干燥（至水分≤8%）。

E、将干燥后的米曲霉培养物粉碎到60～80目。

二、合生素饲料添加剂的制备：

(1)称重配料，称取益生菌75%，壳聚糖25%为原料；

(2)混合均匀；

(3)密闭包装，避光保存。

实施例2

混合益生菌剂的制备方法与实施例1相同。

(1)称重配料，称取益生菌70%，壳聚糖30%为原料；

(2)混合均匀；

(3)密闭包装，避光保存。

实施例3

混合益生菌剂的制备方法与实施例1相同。

(1)称重配料，称取益生菌80%，壳聚糖20%为原料；

(2)混合均匀；

(3)密闭包装，避光保存。

实施例4

畜禽用合生素饲料添加剂对保育猪生产性能的影响

按实施例1、实施例2、实施例3技术方案制备的终产品进行临床试验，具体方案为：试验地点：湖南新五丰股份有限公司永安分公司；试验动物：杜洛克×长白×大白原种断奶仔猪；试验分组：将300头7kg左右的杜洛克×长白×大白原种断奶仔猪随机分成10组，每组30头。

以猪场饲喂的常规日粮为基础日粮（见表1），对照组和试验组饲喂方案（见表2）；预试期5d，试验期28天，试验期间自由采食，自由饮水。计算试验起始平均体重，试验结束平均体重，平均日增重（ADG），平均日采食量（ADFI），饲料转化率（FCR），每日观察记录腹泻情况，计算腹泻率。

结果表明：十个处理组中，F（试验组，0.2％合生素，25%壳聚糖）的效果最好，其平均日增重0.478kg/d和平均日采食量0.762kg/d均大于对照组；腹泻率小于对照CK处理组腹泻率。因此本发明产品按0.2％浓度（其中合生素中壳聚糖比例为25%）添加到饲喂日粮对断奶仔猪具有增重和预防腹泻的作用，而且作用效果优于对照组和其他处理组。

表1基础饲粮原料组成及营养水平

表2试验设计

表3畜禽用合生素饲料添加剂对保育仔猪生产性能的影响

本发明研究出了一种畜禽用饲料添加剂及其使用方法，试验结果表明：本方法制备的合生素饲料添加剂对仔猪有增重和预防腹泻的作用。

应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进或变换都属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims

1.一种畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于：该饲料添加剂是由组分重量比为70%～80%的复合益生菌制剂和20%～30%的壳聚糖协同剂组成;所述的复合益生菌制剂为重量比为20%～30%枯草芽孢杆菌、20%～30%纳豆芽孢杆菌、20%～30%酵母菌和20%～30%米曲霉菌的干粉剂的组合物；所述的复合益生菌制剂中含活菌数不低于100亿/g。

2.根据权利要求1所述的畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于：所述的复合益生菌制剂为：25%枯草芽孢杆菌＋25%纳豆芽孢杆菌＋25%酵母菌＋25%米曲霉的干粉剂的组合物。

3.根据权利要求1所述的畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于：所述的枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和酵母菌是分别经发酵培养制成，发酵方式为高密度液体发酵；米曲霉的分生孢子是经发酵培养制成，发酵方式为固体发酵。

4.根据权利要求3所述的畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于：所述的高密度液体发酵条件为：培养基装液量占发酵罐体积的40-60%，接种占培养基体积的1-5%的摇瓶发酵液，发酵温度28-35℃，通气量1:0.4～0.7，搅拌转数180～250r／min，发酵时间22～30h。

5.根据权利要求4所述的畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于：其中，纳豆芽孢杆菌发酵时间为22-24h，枯草芽孢杆菌发酵时间为24-26h，酵母菌发酵时间为28-30h。

6.根据权利要求5所述的畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、酵母菌的干粉剂的制备包括：菌种活化，制备种子培养物后，将种子培养物接入液体培养基中进行高密度液体发酵培养；离心分离得到活性菌泥；将菌泥与麦麸吸附，吸附后50～60℃干燥，粉碎。

7.根据权利要求6所述的合生素饲料添加剂，其特征在于菌泥与麦麸按1：10质量比吸附，粉碎到60～80目。

8.根据权利要求3所述的畜禽用合生素饲料添加剂，其特征在于米曲霉菌干粉剂的制备包括：菌种活化后，将米曲霉稀释至10⁶个～10⁷/ml孢子数的菌悬液；将固体培养基灭菌后按接种量1ml～2ml/10g接入菌悬液，置30℃恒温培养48-52小时；将固体发酵培养物置50℃恒温干燥，粉碎。

9.权利要求1-8任一项所述的畜禽用合生素饲料添加剂的应用，其特征在于：将所述的合生素饲料添加剂作为畜禽用增重、预防腹泻的饲料添加剂。

10.根据权利要求9所述的畜禽用合生素饲料添加剂的应用，其特征在于：所述的饲料添加剂在全价饲料中添加重量比为0.1～0.3%。