CN107279467A - 一种微生物复合菌剂用于畜牧养殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种微生物复合菌剂用于畜牧养殖的方法,以由地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、巨大芽孢杆菌、酵母菌组成的微生物复合菌剂制备饲料添加剂,且所述微生物复合菌剂经小分子水发酵活化,可显著地有利于畜禽的增重和预防疾病。
Description
技术领域
本发明涉及一种微生物复合菌剂用于畜牧养殖的方法,属于畜牧养殖领域。
背景技术
现代养殖业中,抗生素作为饲料添加剂在饲料工业中大规模应用,虽然抗生素在预防畜禽疾病、促进动物生长、提高饲料转换率等方面发挥了积极作用,有益于畜牧养殖业的发展,创造了可观的经济效益。但抗生素也存在严重的滥用情况,据研究,中国每年生产抗生素原料大约21万吨,其中有9.7万吨用于畜牧养殖业,占年总产量的46.1%,抗生素的滥用在全世界的养殖业都是非常普遍的,但在中国显得更为严重。
欧洲及许多国家和地区已经或正在禁止抗生素在饲料中的使用,为了保持畜牧养殖业的健康发展,科学家正在需求无毒副作用、无残留、安全的抗生素替代品以取代抗生素。益生菌制剂主要通过维持动物肠道内的正常微生态平衡,利用微生物在肠道内的竞争排斥原理,形成优势益生菌群,起到促进畜禽生长、增强机体免疫力及防治疾病等作用。益生菌制剂作为新型的饲料添加剂是目前世界各国研究和应用的热点。
现有技术研究表明,水除以单分子形式存在外,还可形成分子团簇结构,即由若干水分子形成由氢键连起来的水的团簇,水的团簇结构引起粘度、表面张力、熔点和沸点的温度以及热容量等数值都很高的原因,更为重要的是,水的团簇结构可能对生物体具有重要的影响,如在奥地利,自然学家约翰.格兰特经过十多年苦心研究,发明了一种称之为“活水系统”的水质处理系统,利用物理学原理彻底解决水的团簇结构问题,据称“活水系统”所生产出的水具有增强人体健康,促进植物生长以及抑制细菌繁殖等神奇功能。本发明出人意料地发现,使用小分子水作为培养基溶剂有利于菌种活力的保持以及菌种密度的提升,饲喂动物含上述经小分子水“活化”的微生物的饲料更有利于畜禽生长、机体免疫力的提升。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术的不足,提供一种新的微生物复合菌剂用于畜牧养殖的用途,通过给予畜禽含有上述微生物复合菌剂的饲料能够大大提高畜禽的机体免疫力,并有利于畜禽的生长。
本发明采用的方案如下:
(1)微生物复合菌剂的制备
地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、巨大芽孢杆菌、酵母菌的培养:
A菌种活化:取斜面上菌种接种于装有培养基的试管内,恒温静置培养20-30小时,作为初始培养物;
B种子培养物的制备:将初始培养物接入种子液体培养基中,接种量为1-3%,置于摇床200rpm恒温培养20-30小时,作为种子培养物。其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌采用LB培养基,酵母用土豆培养基;植物乳杆菌用MRS培养基。
C单菌发酵培养:将种子培养物接入液体培养基中,在恒温条件下进行发酵罐高密度培养,发酵罐发酵条件为:培养基装液量占发酵罐体积的50-70%,接种占培养基体积的1-10%的摇瓶发酵液,发酵温度25-38℃,每升发酵液每分钟通气量为0.3-0.6L,搅拌转数150-200rpm,发酵时间20-40h。优选所述培养基以小分子水作为溶剂,更优选所述小分子水的半高宽为79.8(Hz);半高宽测试如下:取小分子水和普通自来水测试其17O核磁共振半高宽(NMRFWHM)来判断其分子团簇结构的大小,即:测试仪器为Bruker 400MHz超导核磁共振谱仪,依据JY/007-1996超导脉冲傅里叶变换核磁共振谱方法通则进行测定,测试结果显示小分子水的半高宽(Hz)为79.8,自来水的半高宽(Hz)为118.4。
D单菌发酵物收获:采用离心的方式收获发酵物,离心条件为4℃或室温下3000-5000rpm离心10-15min,沉淀用无菌水洗涤数次,取沉淀即为单菌发酵产物。
E微生物复合菌剂的获得:将上述各单菌发酵产物按照以下比例混合(重量比):枯草芽孢杆菌:地衣芽孢杆菌:巨大芽孢杆菌:酵母:植物乳杆菌为2-5:1-3:1-3:1-8:1-4,优选比例为2:1:2:5:1。
(2)含微生物复合菌剂的饲料添加剂的制备
将上述微生物复合菌剂与壳聚糖以8-15:2-5的比例进行混合配制,得到含微生物复合菌剂的饲料添加剂。
(3)将上述饲料添加剂以0.2-0.5%的量加入到饲料中,饲喂畜禽。
本发明微生物复合菌剂中采用的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌是常用的益生菌菌种,芽孢杆菌在肠道中主要通过生物夺氧维持肠道生态平衡,在肠道短时间定植后,可以消耗大量氧气,维持肠道厌氧环境,增强肠道对厌氧菌的定制能力;芽孢杆菌在肠道中能将淀粉转化为单糖,再由肠道中其他菌种将这些单糖转化为乳酸,降低肠道的pH,从而起到抑制病原菌的作用。芽孢杆菌可以在条件不利时形成芽孢,复活率高,具有耐酸、耐盐、耐高温和耐挤压等优点。
植物乳杆菌能够通过微生物夺氧及在消化道内附着定植和对营养素的竞争,调节肠道菌群趋于正常化,抑制致病菌和有毒菌的生长,其代谢可产生有机酸,降低动物肠道内pH,杀死不耐酸的有害菌,还可产生溶菌酶等物质,杀死潜在的病原菌;产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等消化酶,有益于物质的分解;合成B族维生素、氨基酸、未明促生长因子等营养物质;细胞壁上存在着肽聚糖等刺激肠道的免疫细胞从而增加局部免疫抗体,增强机体抗病力。
酵母菌含有丰富的营养物质,其中含有20多种氨基酸和多种维生素,所具有的丰富营养物质和生长因子,提供给了动物机体所需要的养分,促进动物的健康生长和发育,提高动物免疫力。
上述复合益生菌剂中的菌种经小分子水活化后能够更好地协同发挥作用,有益于对畜禽的增重、预防疾病的作用。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明,本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1:微生物复合菌剂的制备
A菌种活化:取斜面上菌种(即地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、巨大芽孢杆菌、酵母菌)接种于装有培养基的试管内,恒温静置培养30小时,作为初始培养物;其中枯草芽孢杆菌的恒温温度为35摄氏度,地衣芽孢杆菌和酵母菌的恒温温度为30摄氏度,巨大芽孢杆菌和植物乳杆菌的恒温温度为37摄氏度。
B种子培养物的制备:将初始培养物接入种子液体培养基中,接种量为1-3%,置于摇床200rpm恒温培养20-30小时,作为种子培养物。其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌采用LB培养基,酵母用土豆培养基;植物乳杆菌用MRS培养基;各菌种的恒温温度如上。
C单菌发酵培养:将种子培养物接入液体培养基中,在恒温条件下进行发酵罐高密度培养,发酵罐发酵条件为:培养基装液量占发酵罐体积的70%,接种占培养基体积的3%的摇瓶发酵液,各菌种的发酵温度如上,通气量1:0.6,搅拌转数200rmp/min,发酵时间35h。
其中所用发酵培养基中的溶剂为小分子水,即具有小分子团簇结构的水,所述小分子水的17O核磁共振半高宽(NMRFWHM)为79.8(Hz)。
D单菌发酵物收获:采用离心的方式收获发酵物,离心条件为4摄氏度下3500rpm离心10min,沉淀用无菌水洗涤数次,取沉淀即为单菌发酵产物。
E微生物复合菌剂的获得:将上述各单菌发酵产物按照以下比例混合(重量比):枯草芽孢杆菌:地衣芽孢杆菌:巨大芽孢杆菌:酵母:植物乳杆菌为2:1:2:5:1。
实施例2:含微生物复合菌剂的饲料添加剂的制备
壳聚糖及其衍生物具有抗菌、防腐和保鲜等功能,对金黄色葡萄菌、大肠杆菌等有较强的抑制功能,因此为了进一步增强微生物复合菌剂的有益作用,将上述微生物复合菌剂与壳聚糖以10:3的比例进行混合配制,得到含微生物复合菌剂的饲料添加剂。
对比例1微生物复合菌剂的制备及含微生物复合菌剂的饲料添加剂的制备
微生物复合菌剂的制备步骤、参数基本同实施例1的制备步骤、参数,与实施例1的唯一区别在于使用自来水代替小分子水;含微生物复合菌剂的饲料添加剂的制备方法同实施例2。
实施例4:含微生物复合菌剂的饲料添加剂对仔猪增重的作用
选用20-25kg的仔猪作为实验对象,分为三组,每组各30只,组一饲喂添加实施例2制备的含微生物复合菌剂的饲料添加剂的猪饲料,添加量为0.4%;组二饲喂添加对比例1制备的含微生物复合菌剂的饲料添加剂的猪饲料,添加量为0.4%;组三饲喂不含微生物复合菌剂的饲料添加剂的猪饲料。分别采用相同的投料量(1.8kg/头/天)饲喂15天,实验数据如下:
实验组别 | 组1 | 组2 | 组3 |
初始体重(kg) | 22.2 | 22.4 | 22.4 |
终末体重(kg) | 36.8 | 34.6 | 32.5 |
头平均增重(kg) | 14.6 | 12.2 | 10.1 |
平均日增重(kg) | 0.97 | 0.81 | 0.67 |
由以上实验数据可知,本申请实施例2制备的饲料添加剂相较于对比例1的饲料添加剂更有益于仔猪的增重。
实施例5:含微生物复合菌剂的饲料添加剂对仔猪腹泻的预防
选用10-20kg的仔猪作为实验对象,分组及饲喂方式同实施例4,不同在于每组仔猪各50只,投料量为1.6kg/头/天,饲喂30天。腹泻率=试验期腹泻仔猪头次/(实验仔猪头数*实验天数)*100%,实验数据如下:
实验组别 | 组1 | 组2 | 组3 |
腹泻率 | 3.23% | 5.15% | 7.01% |
由以上实验数据可知,本申请实施例2制备的饲料添加剂相较于对比例1的饲料添加剂更有益于对仔猪腹泻的预防。
不受理论束缚,本申请实施例2制备的饲料添加剂相较于对比例1的饲料添加剂在对仔猪的增重、腹泻的预防方面有更佳的效果,原因在于小分子水发酵能够大大提升微生物复合菌剂的菌群活力,并增强微生物复合菌剂中菌种分泌/产生的有益于禽畜增重的促生长因子、营养元素如维生素和氨基酸的量,从而有益于禽畜的增重和增强其机体免疫力从而有助于预防腹泻等疾病。
应当理解的是,本发明的上述具体实施方式仅仅用于示例性说明或解释本发明的原理,而不构成对本发明的限制。因此,在不偏离本发明的精神和范围的情况下所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的专利范围之内。此外,本发明所附权利要求旨在涵盖落入所附权利要求范围和边界、或者这种范围和边界的等同形式内的全部变化和修改例。
Claims (4)
1.一种饲料添加剂,其特征在于:所述饲料添加剂由微生物复合菌剂和壳聚糖组成,所述微生物复合菌剂由地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、巨大芽孢杆菌、酵母菌组成;且所述微生物复合菌剂与壳聚糖以8-15:2-5的比例进行混合配制;更优选地以10:3的比例进行配制。
2.按权利要求2所述的饲料添加剂在促进畜禽增重和预防疾病中的用途,其特征在于:所述饲料添加剂的制备步骤如下:
(1)微生物复合菌剂的制备
地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、巨大芽孢杆菌、酵母菌的培养:
A菌种活化:取斜面上菌种接种于装有培养基的试管内,恒温静置培养20-30小时,作为初始培养物;
B种子培养物的制备:将初始培养物接入种子液体培养基中,接种量为1-3%,置于摇床200rpm恒温培养20-30小时,作为种子培养物。其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌采用LB培养基,酵母用土豆培养基;植物乳杆菌用MRS培养基。
C单菌发酵培养:将种子培养物接入液体培养基中,在恒温条件下进行发酵罐高密度培养,发酵罐发酵条件为:培养基装液量占发酵罐体积的50-70%,以占发酵罐培养基体积1-10%的量接种前述种子培养物,发酵温度25-38℃,每升发酵液每分钟通气量为0.3-0.6L,搅拌转数150-200rpm,发酵时间20-40h。优选所述培养基以小分子水作为溶剂,更优选所述小分子水经17O核磁共振半高宽测定半高宽为79.8(Hz);
D单菌发酵物收获:采用离心的方式收获发酵物,离心条件为4℃或室温下3000-5000rpm离心10-15min,沉淀用无菌水洗涤数次,取沉淀即为单菌发酵产物。
E微生物复合菌剂的获得:将上述各单菌发酵产物按照以下比例混合(重量比):枯草芽孢杆菌:地衣芽孢杆菌:巨大芽孢杆菌:酵母:植物乳杆菌为2-5:1-3:1-3:1-8:1-4,优选比例为2:1:2:5:1。
(2)含微生物复合菌剂的饲料添加剂的制备
将上述微生物复合菌剂与壳聚糖以8-15:2-5的比例进行混合配制,得到含微生物复合菌剂的饲料添加剂。
3.如权利要求2所述的用途,其特征在于:所述畜禽为猪、肉鸡,优选为猪。
4.如权利要求2所述的用途,其特征在于:所述疾病为腹泻、大肠杆菌和或金黄色葡萄球菌引起的感染。
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