CN106376735A - 一种饲用合生素及其制备方法和其在畜禽养殖动物饲料中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种饲用合生素，为微囊结构，微囊结构的芯料主要由表乳糖和乳酸菌制备而成，微囊结构的包材主要由褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白制备而成。本发明的饲用合生素的制备方法为：将表乳糖和乳酸菌加入到包材溶液中，充分混合均匀；然后通过压缩空气挤压成液滴，并滴加到凝固剂溶液中凝固成微囊，最后进行干燥，即得到所述饲用合生素。本发明的饲用合生素添加在饲料中，既能促进动物生长，增加体重，又能促进肠道益生菌增殖，保障肠道健康发育，提高机体免疫力、安全无副作用、可长期使用。

Description

一种饲用合生素及其制备方法和其在畜禽养殖动物饲料中的 应用

技术领域

本发明属于饲料添加剂领域，尤其涉及一种饲用合生素及其制备方法和其在畜禽养殖动物饲料中的应用。

背景技术

饲料中长期添加饲用抗生素促生长剂，使得动物源性食品中的药物残留严重超标，对我国的国民健康和生态环境构成了极大的危害，已成为制约我国饲料工业健康和可持续发展的瓶颈问题。因此，开发和研制安全、高效和绿色的饲用抗生素促生长剂替代产品，具有重大的现实意义和长远的发展前景。

合生素(Synbiots)的概念由Gibson和Roberfroid于1995年提出，为益生菌和益生素的混合物，具有提高宿主肠道有益菌数量和定植能力，可通过选择性刺激益生菌生长或激活益生菌新陈代谢来改善宿主健康。合生素已成为目前用于替代饲用抗生素促生长剂的最佳产品。

表乳糖是乳糖的异构体，是一种还原性二糖，其分子式为C₁₂H₂₂O ₁₁，化学名为4-O-β-D-吡喃半乳糖基-D-吡喃甘露糖，CAS号为：50468-56-9。表乳糖是双歧杆菌和乳酸菌生长的选择性碳源，具有极强的益生效果，是一种新型的益生素，能给动物生长提供所需能量，尤其对断奶仔猪效果显著。相对于乳糖而言，表乳糖有较好的抗应激效果，避免了乳糖不耐症的出现，且适口性佳，能增加养殖动物采食量。目前，表乳糖主要是通过采用表乳糖酶将乳糖还原端的葡萄糖异构化为葡萄糖的方式制得的。

乳酸菌是饲料中普遍使用的一种益生菌。大量试验研究表明，乳酸菌黏附到胃肠道表面，产生抗菌肽，与病原菌竞争肠上皮的结合位点或调节宿主免疫系统等方式进行调节肠道环境，抑制或消灭胃肠道中的病原菌，平衡肠道微生物群，增强肠道黏膜免疫和维持肠道屏障功能，提高养殖动物的免疫能力和抗病能力，促进动物生长，有着替代饲用抗生素的良好功效。

尽管乳酸菌具有良好的替代饲用抗生素的性能，但是其不能耐受饲料加工过程的高温高湿条件，极大的制约了其在饲料中的应用。

如何将益生菌和益生素依据科学的方式结合起来，充分发挥两者特有的生物活性特性，提升作为饲用抗生素替代产品的功效和价值，是本领域技术人员面临的科学问题。

而目前，表乳糖在动物饲料中的应用尚未出现，同时也没有表乳糖和乳酸菌共同应用的研究报道。所以如何提供一种安全、有效，既能带给动物福利，又能提高表乳糖和乳酸菌应用价值的应用方法，对于本领域技术人员而言，具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种既能促进动物生长，增加体重，又能促进肠道益生菌增殖，保障肠道健康发育的饲用合生素及其制备方法和其在畜禽养殖动物饲料中的应用。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：

一种饲用合生素，为微囊结构，所述微囊结构的芯料主要由表乳糖和乳酸菌制备而成，所述微囊结构的包材主要由褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白制备而成。由于饲用合生素添加到饲料中使用需耐受挤压造粒的要求，再加上乳酸菌具有不耐高温的缺陷，所以本发明的创造性地将饲用合生素制备成微囊结构，同时采用褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白的混合物作为包材，将乳酸菌和表乳糖被微囊化，使得本发明的饲用合生素既可以满足饲料加工的需要，又不破坏芯料的效果，使得本发明的饲用合生素中充分发挥芯料的增值效果。

上述的饲用合生素，优选的，所述芯料和包材的重量比为(1:2)-(1:6)。

上述的饲用合生素，优选的，所述芯料中表乳糖和乳酸菌的重量比为(1:4)-(1:6)；所述包材中褐藻酸钠与乳清蛋白重量比为(1:6)-(1:10)，褐藻酸钠与大豆蛋白重量比在(1:6)-(1:10)。

上述的饲用合生素，优选的，所述饲用合生素采用共微囊化技术制备而成。

作为一个总的发明构思，本发明还提供一种上述的饲用合生素的制备方法，包括以下步骤：

将表乳糖和乳酸菌，加入到包材溶液中，充分混合均匀；然后通过压缩空气挤压成液滴，并滴加到凝固剂溶液中凝固成微囊，最后进行干燥，即得到所述饲用合生素。

上述的制备方法，优选的，所述表乳糖和乳酸菌的重量比为(1:4)-(1:6)；发明人通过研究发现，将表乳糖和乳酸菌的量控制在此范围内，乳酸菌的增值速度最合适，保证了乳酸菌的生长效果，而且不浪费表乳糖；所述乳酸菌选用乳酸菌粉，所述乳酸菌粉中的乳酸菌数量为1×10⁷～1×10¹⁰CFU/g。

上述的制备方法，优选的，所述包材溶液为褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白的混合溶液；所述包材溶液中褐藻酸钠与乳清蛋白重量比为(1:6)-(1:10)，褐藻酸钠与大豆蛋白重量比在(1:6)-(1:10)；所述凝固剂为氯化钙和吐温80的混合物；所述凝固剂的添加量占表乳糖、乳酸菌和包材溶液总重量的5％～7％。

上述的制备方法，优选的所述，液滴的平均粒径小于100um，最大粒径不超过350um。

上述的制备方法，优选的，所述干燥是指真空干燥，真空干燥的温度为22℃-26℃；真空度为0.095MPa-0.1MPa。

上述的制备方法，优选的，所述表乳糖是将表乳糖酶加入到乳清液或者乳糖水溶液中，在pH值为6-8的条件下反应24-48h，再经脱色、蒸发、冷却结晶得到的；其中所述表乳糖酶的用量为100-1000单位/千克乳糖。

上述的制备方法，优选的，所述表乳糖酶为文献(S,Taguchi H,Hamada S,etal.Enzymatic properties of cellobiose 2-epimerase from Ruminococcus albus andthe synthesis of rare oligosaccharides by the enzyme[J].Applied Microbiology&Biotechnology,2008,79(3):433-41.)中所述的表乳糖酶或者见序列表1所示的表乳糖酶；但是更优选的，是采用序列表1所示的表乳糖酶，该表乳糖酶的制备过程所用的质粒为pET21a，宿主为E.coli JM109(DE3)，制备得到的表乳糖酶的基因序列与文献中的表乳糖酶的基因序列存在5个碱基差异(5/1167)，使得采用序列表1中所示的表乳糖酶制备表乳糖的效果要优于文献中报道的表乳糖酶。

本发明的表乳糖酶的制备方法具体如下：

(1)选用E.coli JM109(DE3)作为菌株；该E.coli JM109(DE3)菌株可以市购；

(2)选用pET21a(Novagen，USA)作为表达载体；

(3)配制培养基：

LB培养基：先将10g胰蛋白胨、5g酵母粉和10g NaCl溶于1000mL去离子水中，用10MNaOH调pH至7.0，湿热灭菌30min；固体LB培养基中添加2％琼脂粉；

LB-Amp培养基：在上述LB培养基灭菌冷却后加入氨卞青霉素(Ampicillin)，使得最终浓度为100μg/mL；固体LB-Amp培养基添加2％琼脂粉；

(4)表乳糖酶在大肠杆菌重组表达

将表乳糖酶基因工程菌接入3mL LB-Amp培养液中，37℃，220rpm培养过夜；

次日，取1mL过夜菌至50mL LB-Amp培养液中，37℃，220rpm培养至菌液OD600为0.4-0.6，加入终浓度为1mM的IPTG，30℃，220rpm，培养5小时后，离心收集菌体(M)；

用PBS缓冲液重悬收集菌体，用超声仪破碎菌体细胞后，15,000rpm，4℃离心20min，得到的上清液即为粗酶液。

(5)表乳糖酶的纯化

用结合缓冲液(50mMNaCl，20mM Tris-HCl，5mM咪唑)重悬诱导表达后收集的菌体(M)，超声仪破碎菌体细胞后，15,000rpm，4℃离心20min，取上清液上样到结合缓冲液平衡好的Ni-NTA柱内，4℃结合30min，用5倍柱体积20mM咪唑的洗涤缓冲液过柱，洗出那些非特异性结合的蛋白，然后依次用1倍柱体积的250mM咪唑的洗脱缓冲液洗脱蛋白，收集洗脱液即为纯化的表乳糖酶；用SDS-PAGE电泳可以检测洗脱收集的蛋白质的纯度。

作为一个总的发明构思，本发明还提供一种上述的或上述的制备方法获得的饲用合生素在畜禽养殖动物饲料中的应用。

上述的应用，优选的，所述饲用合生素在每吨禽饲料中的添加量为0.2-1.0kg/t；在每吨猪饲料中的添加量为0.5-1.5kg/t；在每吨反刍动物饲料中的添加量为1-2kg/t。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

(1)本发明的饲用合生素，既能促进动物生长，增加体重，又能促进肠道益生菌增殖，保障肠道健康发育，提高机体免疫力、安全无副作用、可长期使用。

(2)本发明的饲用合生素添加在饲料中，使得饲料产品适口性佳，可提高动物采食量；有效促进促使动物肠管蠕动，改善便秘症状，促进肠胃发育；还能促进肠道中双歧杆菌、乳酸菌的增殖，抑制有害菌生长，使肠内产生较多的有机酸，调节肠道微生态平衡，提高机体免疫力，保障动物健康，同时还能处理肠内有害物质，对肝脏等内脏疾病有缓解作用。

(3)本发明的饲用合生素的制备过程的温度均不高，能确保乳酸菌的活菌数量，满足饲料加工的要求。

(4)本发明的饲用合生素采用共微囊化技术制备：采用褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白的混合物作为包材，将乳酸菌和表乳糖被微囊化，使得本发明的饲用合生素既可以满足饲料加工的需要，同时又不破坏芯料的效果，使得本发明的饲用合生素充分发挥芯料的增值效果。

(5)由于目前市面上仅能购买到表乳糖标准品，价格极高，将其应用在饲料中成本较高；而本发明的饲用合生素中的表乳糖不仅可以采用现有技术的表乳糖还可以采用是自制的，采用自制方法制备的表乳糖产量大，成本低，生产的表乳糖能够满足饲料的要求，从而使得本发明的饲用合生素的生产成本低。

附图说明

图1为本发明实施例1得到的粗产物的液相色谱图。

图2为混合标准样品液的液相色谱图。

图3为本发明实施例2得到的粗产物的液相色谱图。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下文将结合说明书附图和较佳的实施例对本文发明做更全面、细致地描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。

除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。

除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。

实施例1：

一种本发明的饲用合生素，为微囊结构，所微囊结构的芯料主要由0.2Kg表乳糖和1Kg含菌数为1×10⁸CFU/g的乳酸菌粉组成，包覆该芯料的包材主要由0.2Kg褐藻酸钠、1.2Kg乳清蛋白粉和1.2Kg大豆蛋白粉混合组成。

本实施例的饲用合生素的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备表乳糖酶粗酶液：

(a)选用市购的E.coli JM109(DE3)作为菌株；

(b)选用pET21a(Novagen，USA)作为表达载体；

(c)配制培养基：

LB培养基：先将10g胰蛋白胨、5g酵母粉和10g NaCl溶于1000mL去离子水中，用10MNaOH调pH至7.0，湿热灭菌30min；固体LB培养基中添加2％琼脂粉；

LB-Amp培养基：在上述LB培养基灭菌冷却后加入氨卞青霉素(Ampicillin)，使得最终浓度为100μg/mL；固体LB-Amp培养基添加2％琼脂粉；

(d)表乳糖酶在大肠杆菌重组表达

将表乳糖酶基因工程菌接入3mL LB-Amp培养液中，37℃，220rpm培养过夜；

次日，取1mL过夜菌至50ml LB-Amp培养液中，37℃，220rpm培养至菌液OD600为0.4-0.6，加入终浓度为1mM的IPTG，30℃，220rpm，培养5小时后，离心收集菌体(M)；再用PBS缓冲液重悬收集菌体，超声仪破碎菌体细胞后，15000rpm，4℃离心20min，得到的上清液即为表乳糖粗酶液。

(2)制备表乳糖粗产品：

用泵将2m³乳清液(源于分离乳清蛋白后的干酪副产物乳清)打入反应釜中，加入5L步骤(1)制备的表乳糖粗酶液，调整pH值至7.0，搅拌30分钟后让其充分混匀，再置于30±2℃下静置24小时。

静置后将反应混合液转移至浓缩结晶池中，加热，温度控制在80-85℃，蒸发浓缩除掉大部分水分，待总体积减少至约1m³时，停止加热，让其自然冷却结晶，得粗产品16kg。

该粗产品的液相色谱图如图1所示，混合标准样品液的液相色谱分析，如图2所示，由图1和图2可知，该表乳糖粗产品中含有表乳糖4kg。

(3)将0.2Kg褐藻酸钠、1.2Kg乳清蛋白粉和1.2Kg大豆蛋白粉加入100Kg去离子水中，搅拌直至形成均一的包材溶液。

(4)将0.8Kg表乳糖粗产品(含表乳糖0.2Kg)和1Kg含菌数为1×10⁸CFU/g的乳酸菌粉溶于包材混合溶液中，搅拌均匀；然后将得到的均一混合溶液通过压力注射器垂直连续滴入5％的氯化钙和1％的吐温-80的凝固剂溶液中，固化1h，过滤、25℃下真空干燥，0.095MPa获得35Kg平均粒径在100μm左右的饲用合生素产品。

实施例2：

一种本发明的饲用合生素，为微囊结构，微囊结构的芯料主要由0.4Kg表乳糖和1.6Kg含菌数为1×10⁸CFU/g的乳酸菌粉组成，包覆该芯料的包材主要由0.4Kg褐藻酸钠、3.2Kg乳清蛋白粉和2.8Kg大豆蛋白粉混合组成。

本实施例的饲用合生素的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备表乳糖酶：

其中，配制培养基和表乳糖酶在大肠杆菌重组表达的方式与实施例1相同，然后用结合缓冲液(50mMNaCl，20mM Tris-HCl，5mM咪唑)重悬诱导表达后收集的菌体，超声仪破碎菌体细胞后，15000rpm，4℃离心20min，取上清液上样到结合缓冲液平衡好的Ni-NTA柱内，4℃结合30min，用5倍柱体积20mM咪唑的洗涤缓冲液过柱，洗出那些非特异性结合的蛋白，然后依次用1倍柱体积的250mM咪唑的洗脱缓冲液洗脱蛋白，收集洗脱液即为纯化的表乳糖酶，该表乳糖酶的碱基序列见序列表1所示。

(2)制备表乳糖粗产品：

用泵将300Kg乳糖打入反应釜中，用计量罐计量打入1.5m³水，加入30000单位经过纯化的表乳糖酶，调整pH至7.5，搅拌30分钟后让其充分混匀后，置于30±2℃静置保持48小时。

静置后将反应混合液转移至浓缩结晶池中，加热，温度控制在80-85℃，蒸发浓缩除掉大部分水分，待总体积减少至约1m³时，停止加热，让其自然冷却结晶，得粗产品302kg。

该粗产品的液相色谱图如图3所示，由图2和图3可知，该表乳糖粗产品中含有表乳糖56.6kg。

(3)将0.4Kg褐藻酸钠、3.2Kg乳清蛋白粉和2.8Kg大豆蛋白粉加入100Kg去离子水中，搅拌直至形成均一的包材溶液。

(4)将2.13Kg表乳糖粗产品(含表乳糖0.4Kg)和1.6Kg含菌数为1×10⁸CFU/g的乳酸菌粉溶于包材混合溶液中，搅拌均匀；然后将得到的均一混合溶液通过压力注射器垂直连续滴入7％的氯化钙和1.5％的吐温-80的凝固剂溶液中，固化1.5h，过滤、22℃下真空干燥(真空度为0.098MPa)，获得42Kg平均粒径在100μm左右的饲用合生素产品。

按照0.8Kg/t的剂量将实施例1或实施例2中制备的饲用合生素产品添加到肉鸡饲料中，然后依据制备肉鸡颗粒饲料的方式和条件进行制粒，得到含有合生素微囊的颗粒饲料产品。采用液相色谱法和平板计数法分别检测颗粒饲料中表乳糖的含量以及乳酸菌的菌数。测定结果显示，经过挤压造粒后，表乳糖的数量没有任何变化，乳酸菌菌数降低10％，表明本技术制备生产的富含表乳糖的合生素产品完全能够符合饲料制粒加工的要求。

实施例3：

一种本发明的饲用合生素，为微囊结构，微囊结构的芯料主要由0.4Kg表乳糖(百灵威科技有限公司)和1.6Kg含菌数为1×10⁸CFU/g的乳酸菌粉组成，包覆该芯料的包材主要由0.4Kg褐藻酸钠、3.2Kg乳清蛋白粉和2.8Kg大豆蛋白粉混合组成。

本实施例的饲用合生素的制备方法：

(1)将0.4Kg褐藻酸钠、3.2Kg乳清蛋白粉和2.8Kg大豆蛋白粉加入100Kg去离子水中，搅拌直至形成均一的包材溶液；

(2)将百灵威科技有限公司生产的表乳糖0.4Kg和1.6Kg含菌数为1×10⁸CFU/g的乳酸菌粉溶于包材混合溶液中，搅拌均匀；然后将得到的均一混合溶液通过压力注射器垂直连续滴入7％的氯化钙和1.5％的吐温-80的凝固剂溶液中，固化1.5h，过滤、22℃下真空干燥(真空度为0.098MPa)，获得饲用合生素产品。

本实施例制备的饲用合生素产品制成品添加到肉鸡饲料中，其效果和实施例2相当，但是成本要高于实施例2。

具体应用实施例4：

将实施例1中制备的饲用合生素添加至艾维茵白羽肉鸡饲料中(饲用合生素在每吨鸡饲料中的添加量为0.8kg/t)，看其对白羽肉鸡的生长性能及死亡率的影响。

选取420只1日龄的白羽肉鸡随机分为3组，每组7个重复，每个重复20只鸡。一组为对照组，饲喂不添加饲用合生素与抗生素的基础日粮，其余两组为试验组，试验一组饲喂添加20ppm硫酸粘杆菌素，10ppm恩拉霉素，不添加饲用合生素的试验日粮，试验二组添加实施例1中的合生素，添加量为0.8Kg/T，不添加抗生素的试验日粮，42日龄称重，计算各组的日增重，采食量和料肉比，具体试验结果见表1。

表1饲用合生素对白羽肉鸡生长性能、死亡率的影响

从表1中的实验数据可知，添加抗生素或添加合生素能提高白羽肉鸡生产性能，试验组与对照组相比，日增重和采食量慢慢升高，而料肉比有下降的趋势；添加抗生素组与对照组相比，日增重提高9.32％，料肉比降低3.65％，添加合生素组与对照组相比，日增重提高14.89％，料肉比降低5.21％。添加合生素组与添加抗生素组相比日增重提高5.10％，料肉比降低1.62％。由此可见，本发明的饲用合生素对白羽肉鸡的促生长效果好于抗生素。

具体应用实施例5：

将实施例1中制备的合生素作为促生长饲料添加剂用于断奶仔猪饲料中(饲用合生素在每吨猪饲料中的添加量为1.5kg/t)。

选用品种一致(杜×长×大)、体重相近(10.0±0.5Kg)的健康断奶仔猪180头，随机分为对照组和两个试验组，每组6个重复，每个重复10头猪。对照组饲喂不添加合生素与抗生素的基础日粮，其余两组为试验组，试验一组饲喂添加20ppm硫酸粘杆菌素，20ppm恩拉霉素，不添加合生素的试验日粮；试验二组添加实施例1中的饲用合生素，添加量为1.5Kg/t，不添加抗生素的试验日粮，预饲期为5天，正式试验期为21天。试验过程记录投料量与试验始末体重，试验结束后计算各试验组的日增重，采食量和料肉比，效果如下表2所示。

表2合生素对断奶仔猪生长性能的影响

由表2的数据表明：添加合生素的试验二组与对照组相比，日采食量、日增重差异显著，其采食量和日增重分别提高1.63％、3.78％，高于添加抗生素试验一组，而且料肉比有下降趋势。由此可见，本发明的饲用合生素对断奶仔猪有良好的促生长效果。

具体应用实施例6：

将实施例1中制备的合生素作为促生长饲料添加剂用于反刍动物(羊)饲料中(添加量为2Kg/T)，研究本发明的饲用合生素对育肥羊的性能的影响，

选择品种相同，体重相近(38±0.5Kg)舍饲育肥羊90头，随机分为3组，每组3个重复，每个重复10头羊，一组为对照组，饲料为不添加抗生素及合生素的基础日粮；二组为试验一组，饲喂添加40ppm硫酸粘杆菌素，不添加合生素的试验日粮；三组为试验二组，饲喂添加饲用合生素的饲料，饲用合生素的添加量为2Kg/T，不添加抗生素的试验日粮，预饲期为7天，正式试验期为60天，试验结束后记录各组的日增重，采食量与料肉比数据，见表3。

表3合生素对肉羊生产性能的影响

从表3中可以看出，添加饲用合生素和抗生素均对育肥羊的日增重和料肉比有显著的改善。相比对照组，添加抗生素组日增重提高7.95％，料肉比降低10.02％；添加合生素组日增重提高20.14％，料肉比降低30.55％。由此可见，本发明的饲用合生素对育肥羊生产性能的改善效果要好于抗生素组。

Claims (10)

1.一种饲用合生素，其特征在于，所述饲用合生素为微囊结构，所述微囊结构的芯料主要由表乳糖和乳酸菌制备而成，所述微囊结构的包材主要由褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白制备而成。

2.如权利要求1所述的饲用合生素，其特征在于，所述芯料和包材的重量比为(1:2)-(1:6)。

3.如权利要求1所述的饲用合生素，其特征在于，所述芯料中表乳糖和乳酸菌的重量比为(1:4)-(1:6)；所述包材中褐藻酸钠与乳清蛋白重量比为(1:6)-(1:10)，褐藻酸钠与大豆蛋白重量比在(1:6)-(1:10)。

4.一种如权利要求1～3任一项所述的饲用合生素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将表乳糖和乳酸菌加入到包材溶液中，充分混合均匀；然后通过压缩空气挤压成液滴，并滴加到凝固剂溶液中凝固成微囊，最后进行干燥，即得到所述饲用合生素。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述乳酸菌选用乳酸菌粉，所述乳酸菌粉中的乳酸菌数量为1×10⁷～1×10¹⁰CFU/g。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述包材溶液为褐藻酸钠、乳清蛋白和大豆蛋白的混合溶液；所述凝固剂为氯化钙和吐温80的混合物；所述凝固剂中氯化钙和吐温80重量比为(4:1)-(6:1)；所述凝固剂的添加量占表乳糖、乳酸菌和包材溶液总重量的5％～7％。

7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述干燥是指真空干燥，真空干燥的温度为22℃-26℃；真空度为0.095MPa-0.1MPa。

8.如权利要求4～7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述表乳糖是将表乳糖酶加入到乳清液或者乳糖水溶液中，在pH值为6-8的条件下反应24-48h，再经脱色、蒸发、冷却结晶得到的；其中所述表乳糖酶的用量为100-1000单位/千克乳糖。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述表乳糖酶的基因见序列表1所示。

10.一种如权利要求1～3任一项所述的或如权利要求4～9任一项所述的制备方法获得的饲用合生素在畜禽养殖动物饲料中的应用；所述饲用合生素在每吨禽饲料中的添加量为0.2-1.0kg/t；在每吨猪饲料中的添加量为0.5-1.5kg/t；在每吨反刍动物饲料中的添加量为1-2kg/t。