RU2520840C2 - Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород - Google Patents

Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород Download PDF

Info

Publication number
RU2520840C2
RU2520840C2 RU2011153643/13A RU2011153643A RU2520840C2 RU 2520840 C2 RU2520840 C2 RU 2520840C2 RU 2011153643/13 A RU2011153643/13 A RU 2011153643/13A RU 2011153643 A RU2011153643 A RU 2011153643A RU 2520840 C2 RU2520840 C2 RU 2520840C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
zeolite
preparation
animals
probiotic
bifidobacterium longum
Prior art date
Application number
RU2011153643/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2011153643A (ru
Inventor
Баер Серекпаевич Нуржанов
Кристина Сергеевна Кондакова
Сергей Александрович Мирошников
Владимир Иванович Левахин
Александр Геннадьевич Мещеряков
Юрий Иванович Левахин
Сауле Серекпаевна Жаймышева
Мария Александровна Польшина
Original Assignee
Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт мясного скотоводства Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт мясного скотоводства Российской академии сельскохозяйственных наук filed Critical Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт мясного скотоводства Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority to RU2011153643/13A priority Critical patent/RU2520840C2/ru
Publication of RU2011153643A publication Critical patent/RU2011153643A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2520840C2 publication Critical patent/RU2520840C2/ru

Links

Landscapes

  • Fodder In General (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)

Abstract

Изобретение относится к отрасли сельского хозяйства и может быть использовано для повышения продуктивности жвачных животных. Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород включает иммобилизацию пробиотической культуры бактерий Bifidobacterium longum на цеолите. Препарат содержит 82 мас.% цеолита и 18 мас.% пробиотических бактерий Bifidobacterium longum с титром 5*108 КОЕ/мл. В качестве сорбента используется цеолит Нежинского происхождения. Препарат скармливается в виде добавки к корму в дозе 30,5 г в сутки. Скармливание препарата позволяет увеличить поедаемость кормов и повысить эффективность использования питательных веществ рациона, увеличивает интенсивность роста животных. 3 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к отрасли сельского хозяйства и может быть использовано для повышения продуктивности жвачных животных.
Известно, что цеолиты - гидратированные алюмосиликаты щелочных элементов, являются ценнейшими в промышленности минералами, обладающими открытой каркасно-полостной структурой типа [(Si, Al)O4], имеющей отрицательный заряд. Ионообменная емкость цеолитов - одно из основных параметров, характеризующих их сорбционные и технологические свойства. Максимальная ионообменная емкость соответствует полному замещению одного иона другим во всех кристаллических позициях, что соответствует максимальной сорбциоинной способности цеолита. По данным ВНИИгеолнеруд и ВостСибНИИГТиМНА [2] цеолиты отностятся к первой группе природных материалов по термо- и кислотоустойчивости (т.е. высокоустойчивы). Цеолиты признаны не токсичными, мутагенных действий не обнаружено, могут применяться без ограничений во всех областях народного хозяйства.
Известен корм для крупного рогатого скота [3], состоящий из компонентов в следующем соотношении (мас.%): дерть ячменя 68-70; метиленмочевина 10-12; меласса 8-10; гранулированный цеолит 6-8; премикс - остальное. Известны способы применения минеральных добавок цеолитов в кормлении [4, 5, 6] сельскохозяйственных животных. Известно использование природных цеолитов в витаминных составах для кормления молодняка сельскохозяйственных животных [7, 8, 9], в кормах для крупного рогатого скота [10, 11, 12]. Недостатком их является то, что они восполняют лишь недостаток минеральных веществ в рационе, не улучшают деятельность желудочно-кишечного тракта и слабо повышают обменные процессы в организме.
К представителям микрофлоры желудочно-кишечного тракта жвачных животных относятся бифидобактерии, лактобактерии, бактероиды, энтерококки, эшерихии, дрожжеподобные грибы. При этом основную ее часть у здоровых животных составляют бифидобактерии. В норме в 1 г содержимого толстых кишок животных находят 108-1012 бифидобактерий, снижение их количества менее 107/г свидетельствует о нарушениях в кишечном микробиоценозе.
Известна биологическая активная добавка бифидум - жидкий концентрат бифидобактерии видов B.bifidum №791/БАГ [13]. Данная добавка используется лишь для профилактики нарушений и коррекции дисбактериоза и иммунного статуса у детей и взрослых. Также для нормализации микробиоценоза широкое распространение получили препараты живых бактериальных клеток: бифидобактерии [14], лактобактерии [15].
Недостатком указанных препаратов является их относительно невысокая биологическая активность, связанная с процессом инактивации живых микроорганизмов при их прохождении через верхние отделы желудочно-кишечного тракта (желудок, двенадцатиперестная кишка), а также отсутствие стабильности их биологических свойств как при получении, так и при длительном храпении, что ведет к снижению их эффективности.
Известен комплексный бактериальный препарат, включающий адсорбент - активированный уголь и иммобилизованные на нем микробные клетки в концентрации на 1 мм2 - 2,1*103-1,0*105. Активированный уголь представлен в виде порошка с размером частиц менее 30 мкм, а в качестве микроорганизмов используют лактобактерии и кишечные палочки [16].
Известный способ не позволяет обеспечить достаточную сохранность микроорганизмов в средах с низкими значениями pH. Эти адсорбенты обладают в основном микропорами, в связи с чем работают преимущественно в верхних отделах желудочно-кишечного тракта.
Известен препарат «Бактистатин», содержащий (мас.%): стерильную культуральную жидкость, содержащую метаболиты - Bacillus subtilis 0,1-2,0; цеолит 68-85; гидролизат соевой муки 15-30; стеарат кальция 0,5-5,0. Однако препарат по прототипу [17] рекомендован в схемах терапии при лечении больных с дисбактериозом кишечника различного генеза. Также использованный в нем штамм Bacillus subtilis слабо участвует в восстановлении микрофлоры желудочно-кишечного тракта и может оказывать негативное действие из-за сорбции и последующего выведения из макроорганизма эссенциальных элементов.
Пример 1. Лабораторные исследования выполнялись в комплексной аналитической лаборатории ВНИИМС (аккредитация Госстандарта России - Росс. RU №0001/21 ПФ 59 от 29.08.2008 г.) с использованием газового хроматографа «Кристалл 4000», метода дифференцированного центрифугирования, метода Кьельдаля, метода определения пористости по ацетону, макродиффузионного метода и стандартного метода серийных разведений на питательной среде МРС [18].
В ходе лабораторных исследований определили пористость цеолита по ацетону и его сорбирующую способность для создания нового кормового средства. Установлено, что пористость (в объеме) по ацетону цеолита составляет 34,4%. Была определена сорбирующая способность исследуемого цеолита к штамму Bifidobacterium longum совместно с питательной средой МРС. В результате опыта установлено, что 100 г цеолита впитывает 34 мл питательной среды с бифидобактериями. Цеолиты - природные каркасные алюмосиликаты кристаллической структуры, содержащие каналы и пустоты. Размер пор исследуемого цеолита Нежинского происхождения составил 4-25 А. Химический состав цеолита (%): кальций - 1,9; калий - 2,4; натрий - 1,23; фосфор - 0,16; железо - 1,35; марганец - 0,04; алюминий - 13,45; кремний - 63,70; влага - 15,77.
Сущность разработки нового препарата заключается в иммобилизации цеолитом живой культуры Bifidobacterium longum (размером 0,5-1,3 мкм) с титром 5*108 КОЕ/мл (КОЕ - колониеобразующие единицы). Для этого 100 г сорбента вносят в жидкую питательную среду со штаммом Bifidobacterium longum объемом 34 мл и тщательно перемешивают. По истечении 1 ч образовавшуюся пасту подсушивают в сушильном шкафу до постоянной влажности 15% при температуре 25-30°C. Клетки эубиотиков используют совместно с компонентами питательной среды с биотитром 108-1010 КОЕ/мл
В оптимальной дозе скармливания комплексного пробиотического препарата (КПП) 30,5 г/сутки в его состав входило 82% цеолита и 18% пробиотического штамма Bifidobacterium longum.
Пример 2. Физиологический опыт проведен в хозяйстве ФГОУ СПО «Оренбургский аграрный колледж» Оренбургского района на 12 бычках казахской белоголовой породы, разделенных методом пар-аналогов на 4 группы (n=3) в возрасте 13 месяцев [1]. Схема исследований предусматривала скармливание контрольной группе основного рациона кормления (OP), I опытной - ОР+КПП в дозе 27,5 г/гол, II - ОР+КПП в дозе 30,5 г/гол, III - ОР+КПП в дозе 33,5 г/гол. В среднем при проведении физиологического опыта суточный рацион бычков состоял из сена суданкового 3 кг, силоса кукурузного 15 кг, концентрированных кормов 2,5 кг, соли поваренной 0,038 кг и премикса 0,025 кг.
В ходе физиологических исследований установлено, что скармливание изучаемого препарата улучшало поедаемость кормов. Наиболее высокая поедаемость кормов была отмечена в I, II и III опытных группах.
При равном потреблении концентрированных кормов бычки опытных групп по сравнению с аналогами из контрольной потребили сена суданкового и силоса кукурузного больше соответственно на 2,8, 7,1 и 5,5%; 5,9, 16,2 и 9,4%.
Подопытные бычки, получавшие изучаемый комплексный пробиотический препарат, лучше использовали питательные вещества рационов, чем аналоги из контрольной группы (табл.1).
Таблица 1
Коэффициенты переваримости питательных веществ рационов, %
Показатель Группа
контрольная I опытная II опытная III опытная
Сухое вещество 62,92±0,57 64,79±0,34 67,60±0,48* 66,50±0,66*
Органическое вещество 64,34±0,92 67,70±0,24 70,47±0,51 68,45±1,23
Сырой протеин 61,24±1,07 63,46±1,04 66,24±0,43** 64,72±0,60*
Сырой жир 66,41±0,75 69,13±0,83 69,67±0,79 68,83±0,57
Сырая клетчатка 53,28±0,42 55,76±0,56 58,32±0,36 57,87±0,88
БЭВ 69,3 0±1,04 70,54±0,45 72,49±0,61* 71,50±1,20*
Примечание: P<0,05; P<0,01
Коэффициенты переваримости питательных веществ были несколько выше у бычков из опытных групп по сравнению со сверстниками из контрольной. Так по сухому веществу соответственно на 1,87, 4,68 и 3,58%; сырому протеину на 2,22, 5,00 и 3,48%; БЭВ на 1,24, 3,19 и 2,20%.
Между группами более высокие показатели по переваримости питательных веществ имели животные из II опытной группы. Так разница между бычками из опытных групп составляла по сухому веществу на 2,81 и 1,10%, сырому протеину 2,78 и 1,52%, сырому жиру 0,54 и 0,84%, сырой клетчатке 2,56 и 0,45%, БЭВ 1,95 и 0,99%.
Бычки, получавшие испытуемый пробиотический препарат, лучше использовали принятый азот и больше его откладывали в теле (табл.2).
Баланс азота в организме животных всех групп был положительным. При этом потребление азота с кормом повышалось в опытных группах ввиду большего потребления ими кормов.
Контрольные животные меньше усваивали азот по сравнению с бычками I, II и III опытных групп па 14,52, 30,14 и 21,78%. По использованию азотистой части рационов животные опытных групп превосходили аналоги из контрольной соответственно на 2,13, 5,00 и 3,38%.
Таблица 2
Среднесуточный баланс азота у подопытных бычков, г/гол
Показатель Группа
контрольная I опытная II опытная III опытная
Принято с кормами 143,29±0,62 146,74±1,40 153,62±1,18* 149,3 0±1,31
Выделено с калом 60,56 59,40 56,68 57,45
Переварено 82,73±1,26 87,34±1,12 96,94±0,94** 91,85±0,55*
Выделено с мочой 61,36 62,34 66,35 64,53
Отложено в теле 21,37±0,67 25,00±1,05 30,59±0,17* 27,32±0,31*
Коэффициент использования, %
от принятого 14,91 17,04 19,91 18,29
от переваренного 25,83 28,59 31,56 29,74
Примечание: Р<0,05; Р<0,01
Включение в рацион бычков опытных групп пробиотика оказало определенное влияние на обменные процессы в их организме, в результате чего наблюдались различия в переваривании валовой энергии и преобразовании ее в обменную (табл.3).
Таблица 3
Потребление и характер использования энергии рационов подопытными животными, МДж
Показатель Группа
контрольная I II III
Энергия:
валовая 151,39 156,91 165,87 160,33
переваримая 93,68 99,66 108,31 103,65
обменная 77,41 82,26 89,34 85,48
Обменность валовой энергии, % 51,13 52,42 53,86 53,31
Обменная энергия:
на поддержание жизни 35,32 35,73 36,63 36,16
сверхподдержания 42,09 46,53 52,71 49,32
Энергия прироста 15,84 17,46 19,76 18,50
Коэффициент продуктивного использования энергии, %:
валовой (КПИВЭ) 10,46 11,13 11,91 11,54
обменной (КПИОЭ) 37,63 37,52 37,49 37,51
Так, бычки опытных групп по сравнению с контролем имели лучшие показатели по обеспеченности переваримой энергией соответственно на 6,38, 15,62 и 10,64% и обменной на 6,26, 15,41 и 10,43%.
Известно, что за счет тканевого метаболизма и теплообразования в процессе ферментации питательных веществ в преджелудках и толстом отделе кишечника жвачные животные используют тепло на обогрев поступающего корма и воды. Величина теплопродукции является показателем уровня жизнедеятельности животного, эффективности работы его организма на образование продукции.
На поддержание жизни животные контрольной и I опытной группы затрачивали примерно одинаковое количество обменной энергии. По этому показателю бычки из II и III опытной группы превосходили животных из контрольной группы па 3,71 и 2,38% соответственно.
На синтез продукции животные I, II и III групп расходовали больше обменной энергии, чем бычки из контрольной группы на 10,55, 25,23 и 17,18%.
Энергия приростов живой массы бычков опытных групп была выше по сравнении с контролем на 10,23, 24,75 и 16,79% соответственно.
На 1 МДж прироста живой массы бычки контрольной группы затрачивали 4,89 МДж обменной энергии рациона, I опытной - 4,71 МДж, II - 4,52 и III опытной - 4,62 МДж. Коэффициент продуктивного использования валовой энергии у животных опытных трупп был выше, чем у бычков из контрольной группы на 0,67, 1,45 и 1,08% соответственно.
Использование комплексного пробиотического препарата в кормлении мясного скота активизирует физиологические и защитные функции организма, что в конечном итоге способствует повышению продуктивности животных.
Отмеченные повышения переваримости и использования питательных веществ кормов рационов, интенсивности и направленности обменных процессов оказали положительное влияние на интенсивность роста бычков опытных групп. В начале опыта живая масса животных всех групп была практически одинаковая. В дальнейшем животные из контроля, получавшие основной рацион по живой массе, уступали сверстникам I, II и III. Установленная тенденция сохранилась до конца исследований и бычки из опытных групп превосходили аналоги из контрольной группы на 0,6, 5,7 и 2,4% соответственно.
В среднем за период опыта бычки I, II и III опытных групп имели превосходство над животными из контрольной группы по абсолютному приросту живой массы на 1,4, 14,9 и 6,7%, по среднесуточному - на 1,4, 14,8 и 6,7%. Самый высокий валовой прирост оказался во II группе и по сравнению с контрольной, I и III группой отличался на 12,9, 11,7 и 7,1%.
Таким образом, применение в кормлении бычков казахской белоголовой породы комплексного пробиотического препарата в дозе 30,5 г, состоящего из пробиотического штамма Bifidobacterium longum с титром 5*108 КОЕ/мл и цеолита Нежинского месторождения, способствует покрытию минеральной потребности, увеличению эффективности использования питательных веществ и продуктивности животных на 12,9%.
Источники информации
1. Овсянников А.И. Основы опытного дела в животноводстве / А.И. Овсянников. - М.: Колос, 1976. - 304 с.
2. www.promc.ru/ceolite (ссылка).
3. Патент РФ №2069956, А23К 1/100 «Корм для крупного рогатого скота» от 10.12.1996 г.
4. А.С. №1727771, А23К 1/00.
5. А.С. №1371146, А23К 1/175.
6. Патент РФ №1804304, А23 К 1/175.
7. Патент РФ №2088109, А23К 1/16, 1997 г.
8. Патент РФ №2053686, А23К 1/16, 1996 г.
9. Заявка №96109645, А23К 1/16, 1998 г.
10. Патент РФ №2038028, А23К 1/175, 1995 г.
11. Патент РФ №2069956, А23К 1/16, 1996 г.
12. Заявка №94004187, А23К 1/00, 1995 г.
13. Патент РФ №32165454 «Бифидум - жидкий концентрат бифидобактерий» от 20.04.2001 г.
14. Международная заявка (WO) №85/03848, МКИ А23с 9/12, от 12.09.1985 г.
15. Заявка ЕПВ №0154614, МКИ А23с 9/123 от 11.08.1994 г.
16. Патент РФ №2017486, МПК 5 А61К 31/00 от 15.08.1994 г. «Комплексный бактериальный препарат»
17. Патент РФ №2287335 А61К 35/74 от 15.12.2005 г. «Препарат для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта «Бактистатин»» (прототип).
18. ГОСТ 10444.11-89 / Продукты пищевые: методы определения молочнокислых микроорганизмов. - 118 с.

Claims (1)

  1. Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород, включающий иммобилизацию пробиотической культуры бактерий Bifidobacterium longum на цеолите, отличающийся тем, что препарат содержит 82 мас.% цеолита и 18 мас.% пробиотических бактерий Bifidobacterium longum с титром 5*108 КОЕ/мл, а в качестве сорбента используется цеолит Нежинского происхождения, препарат скармливается в виде добавки к корму в дозе 30,5 г в сутки.
RU2011153643/13A 2011-12-27 2011-12-27 Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород RU2520840C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011153643/13A RU2520840C2 (ru) 2011-12-27 2011-12-27 Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011153643/13A RU2520840C2 (ru) 2011-12-27 2011-12-27 Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2011153643A RU2011153643A (ru) 2013-07-10
RU2520840C2 true RU2520840C2 (ru) 2014-06-27

Family

ID=48787300

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011153643/13A RU2520840C2 (ru) 2011-12-27 2011-12-27 Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2520840C2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2719676C1 (ru) * 2019-02-05 2020-04-21 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени И.И. Иванова" Способ улучшения обмена веществ у сельскохозяйственных животных с использованием микрокапсулированного интестевита

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS57471B1 (sr) 2015-12-17 2018-09-28 Institut Za Molekularnu Genetiku I Geneticko Inzenjerstvo Univerzitet U Beogradu Nova probiotička starter kultura za humanu i animalnu primenu

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1493202A (zh) * 2003-08-29 2004-05-05 周青许 宠物除臭型饼干及其加工工艺
RU2290829C2 (ru) * 2004-10-13 2007-01-10 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Ставропольский государственный аграрный университет Кормовая добавка для поросят - гипотрофиков
RU2316225C2 (ru) * 2002-04-05 2008-02-10 Нестек С.А. Способ и диетическая композиция для улучшения перевариваемости липидов
CN101368165A (zh) * 2008-08-12 2009-02-18 辽宁医学院 一种用于畜禽的益生菌组合物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2316225C2 (ru) * 2002-04-05 2008-02-10 Нестек С.А. Способ и диетическая композиция для улучшения перевариваемости липидов
CN1493202A (zh) * 2003-08-29 2004-05-05 周青许 宠物除臭型饼干及其加工工艺
RU2290829C2 (ru) * 2004-10-13 2007-01-10 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Ставропольский государственный аграрный университет Кормовая добавка для поросят - гипотрофиков
CN101368165A (zh) * 2008-08-12 2009-02-18 辽宁医学院 一种用于畜禽的益生菌组合物

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2719676C1 (ru) * 2019-02-05 2020-04-21 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени И.И. Иванова" Способ улучшения обмена веществ у сельскохозяйственных животных с использованием микрокапсулированного интестевита

Also Published As

Publication number Publication date
RU2011153643A (ru) 2013-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20170033433A (ko) 동물 사료 조성물 및 사료 첨가제
WO2011115306A1 (ja) 反芻動物の飼料利用効率改善剤
RU2708161C1 (ru) Кормовая комплексная биологически активная добавка для животных и птиц
RU2458526C1 (ru) Пробиотическая кормовая добавка для сельскохозяйственных птиц и пушных зверей
CN105941870A (zh) 一种用于畜禽脱毒防泻的纳米蒙脱石饲料添加剂复合物
Iegorov et al. Probiotic feed additives in fattening of agricultural animals
RU2347807C1 (ru) Штамм escherichia coli - продуцент лизина, способ получения кормовой добавки, содержащей данный штамм, композиция, полученная этим способом, и способ кормления моногастричных животных и птиц
RU2366169C1 (ru) Способ выращивания ремонтного молодняка яичных кур
RU2520840C2 (ru) Комплексный пробиотический препарат для крупного рогатого скота мясных пород
RU2348174C1 (ru) Кормовая добавка для поросят подсосного периода
RU2402232C2 (ru) Биологически активная кормовая добавка для цыплят-бройлеров
RU2407400C2 (ru) Способ выращивания цыплят, телят и поросят
CN102754733A (zh) 一种新型猪用微生态制剂及其制备方法
RU2652155C1 (ru) Способ производства функционального кормового продукта для сельскохозяйственных животных
RU2739401C1 (ru) Фитосинбиотическая кормовая добавка для телят
CN113796465B (zh) 一种犬用营养粉及其制备方法和应用
RU2330412C1 (ru) Кормовая добавка для поросят-гипотрофиков
RU2719676C1 (ru) Способ улучшения обмена веществ у сельскохозяйственных животных с использованием микрокапсулированного интестевита
RU2706575C1 (ru) Способ кормления цыплят-бройлеров
Riva et al. The importance of early nutrition in broiler chickens: Hydrated gels enriched with nutrients, an innovative feeding system
RU2420089C2 (ru) Биологически активная кормовая добавка для цыплят бройлеров
CN112913984A (zh) 蛋鸡育成期饲料及其制备方法
RU2294113C2 (ru) Корм для свиноматок
RU2819790C1 (ru) Кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и птиц
RU2333664C1 (ru) Корм для свиноматок

Legal Events

Date Code Title Description
FZ9A Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal)

Effective date: 20131007

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140521