ES2620634T3 - Activadores de piruvato quinasa humana - Google Patents

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ES2620634T3
ES2620634T3 ES09740795.1T ES09740795T ES2620634T3 ES 2620634 T3 ES2620634 T3 ES 2620634T3 ES 09740795 T ES09740795 T ES 09740795T ES 2620634 T3 ES2620634 T3 ES 2620634T3
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Craig J. Thomas
Douglas S. Auld
James Inglese
Amanda P. Skoumbourdis
Jian-kang JIANG
Matthew Boxer
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Abstract

compuesto seleccionado del grupo que consiste en (i)-(iv) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en la que (i) es un compuesto de Fórmula I:**Fórmula** en la que L es N,N'-(etan-1,2-diílo), N,N'-(propan-5 1,3-diílo), N,N'-(butan-1,4-diílo), N,N'-(pentan-1,5-diílo), N,N'- (hexan-1,6-diílo), N,N'-((trans)-ciclohexan-1,4-diílo), N,N'-((cis)-ciclohexan-1,4-diílo),**Fórmula** o**Fórmula** y R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxinilo); (ii) es un compuesto de fórmula (Ia):**Fórmula** en la que R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 4- clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2-fluorofenilo, 4- trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-metoxifenilo, 2,5- difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3-metoxifenilo, 4- metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-óxido, 2-(ácido borónico)fenilo, 3-(ácido borónico)fenilo y 4-(ácido borónico)fenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2-naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1Hindolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo, R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F y CF3 o, R3 y R4, tomados conjuntamente, forman C>=O, R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10 o F, R6 es alquilo C1-C10, o cicloalquilo C3-C10 sustituido con alquilo o no sustituido, o cada uno de R7 y R8 y de R9 y R10, forman conjuntamente C>=O; n >= 1 a 3; y X es CH o N, (iii) es un compuesto de fórmula (Ia), en la que X es N, n >= 1, R3-R10 son H, y R1 y R2 son los siguientes: R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es p-acetilaminofenilo; R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es p-aminofenilo; R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; R1 es m-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es m-(etilamino)fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo; R1 es m-(N,N-dimetilamino)fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es p-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; R1 es m-hidroxifenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo; R1 es m-(metilamino)fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 2-tiofenilo; R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 2-furanilo; R1 es 2-amino-4-piridilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es p-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 y R2 son 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 4-cianofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 4-clorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 4-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 3-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,4,5-trifluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,5-difluoro-3-propilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,4-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 3-trifluorometilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 3-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2-piridilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2-piridil-1-óxido y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo; R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepinilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-benzo[d][1,4]dioxinilo; R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4]oxazinilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2-naftalenilo; R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,2-dimetilcromanilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-(1-metil-1H-indolilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo); o R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxinilo); (iv) es un compuesto de fórmula (Ia), en la que X es N, n >= 2, R3-R10 son H, y R1 y R2 son los siguientes: R1 es m-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es p-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo); R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; o R1 es p-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo.

Description

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DESCRIPCION
Activadores de piruvato quinasa humana Antecedentes de la invencion
La piruvato quinasa (PK) es una enzima metabolica fundamental que actua en la ultima etapa de la glicolisis, en la que cataliza la transferencia de un grupo fosfato de fosfoenolpiruvato a adenosina difosfato (ADP), produciendo una molecula de piruvato y una molecula de adenosina trifosfato (ATP). En los seres humanos, hay dos genes de piruvato quinasa, y cada uno produce dos productos genicos distintos mediante corte y empalme alternativo. El gen L produce dos ARNm diferentes que solo difieren en el primer exon para producir las isozimas espedficas L (espedfica del tftgado) y R (globulos rojos). El corte y empalme de un solo exon dentro del gen M produce la isozima M1, que se encuentra en la mayona de tejidos adultos, y la isozima M2 que esta presente en los tejidos fetales y ha resultado sobreexpresarse en los tumores. Por lo tanto, despues del desarrollo embrionario, los tejidos adultos cambian para expresar bien PK-M1 o las isozimas L o R espedficas del tejido. Sin embargo, en todos los tumores o lmeas celulares del linaje del cancer (incluyendo aquellos que normalmente expresan las isozimas L o R), la expresion del gen PK se invierte por completo a la isoforma M2.
La PK es una enzima tetramerica compuesta de cuatro monomeros identicos que forman un dfmero de dfmeros en la estructura tetramerica final. En los seres humanos, las isozimas M2, L y R son activadas por la fructosa-1,6- bis-fosfato (FBP) que se une a una region de bucle flexible en la superficie de contacto de los dos dfmeros. La activacion de PK desplaza la enzima a un estado que muestra alta afinidad por el fosfoenolpiruvato (PEP). Por el contrario, la isoforma M1 no esta regulada por FBP, y solo muestra union a PEP de alta afinidad similar al estado activado de PK.
Las celulas tumorales experimentan una transformacion metabolica que se requiere para suministrar los precursores bioqmmicos necesarios para un crecimiento y una proliferacion celulares rapidos.
Diversos peptidos fosfotirosina pueden unirse a PK-M2 cerca del bucle de activacion que da lugar a la eliminacion de FBP de la enzima que regula negativamente de manera eficaz la actividad de PK-M2. Cuando PK- M2 se activa, la glucosa se convierte en piruvato. Sin embargo, cuando PK-M2 se activa, se produce una acumulacion de productos intermedios glicolfticos, que pueden desviarse hacia la biosmtesis de nucleotidos y ftpidos necesaria para el crecimiento y la proliferacion celulares.
Ademas, la deficiencia de PK es la segunda causa mas comun de anemia hemolftica deficiente en enzimas, tras la deficiencia de G6PD. En pacientes con deficiencia de PK, se crea un bloqueo metabolico en la via al nivel de la enzima deficiente. Los subproductos intermedios y diversos metabolitos glicolfticos proximos al bloque metabolico se acumulan en los globulos rojos, mientras que dichas celulas se agotan de los productos distales de la via, tales como lactato y ATP. La falta de ATP perturba el gradiente de cationes a traves de la membrana de los globulos rojos, causando la perdida de potasio y agua, lo que provoca la deshidratacion, la contraccion y la crenacion celulares, y conduce a la destruccion prematura de los globulos rojos. La supervivencia de pacientes con deficiencia de PK grave depende de una expresion compensatoria de la isozima PK-M2, ampliamente distribuida en diversos tejidos, incluyendo globulos rojos, en los que la PK-M2 es la isozima R.
El documento WO 2002/095063 A1 desvela que el analogo de somatostatina antiproliferativo TT-232 se une a la isoforma M2 de la piruvato quinasa. La union de TT-232 a PK-M2 conduce a la translocacion nuclear y a una induccion de la apoptosis. La publicacion .063 ensena que este resultado demuestra que la piruvato quinasa participa en procesos apoptoticos y representa una molecula diana para el desarrollo de nuevos farmacos, en particular, de farmacos contra el cancer y enfermedades inflamatorias.
Por consiguiente, hay un deseo de nuevos activadores de PK-M2.
Breve sumario de la invencion
La presente invencion proporciona compuestos que son activadores de la isoforma M2 de la piruvato quinasa humana. Ademas, la presente invencion proporciona composiciones que comprenden estos compuestos, y estos compuestos para su uso como agentes terapeuticos en el tratamiento o la prevencion del cancer.
La invencion proporciona un compuesto
La invencion tambien proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto o una sal de la invencion y un vetftculo farmaceuticamente aceptable.
La invencion proporciona ademas un compuesto de la invencion para su uso en un procedimiento de tratamiento del cancer que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto a un mamfero afectado del mismo.
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Breve descripcion de varias vistas de las figuras
La Figura 1A ilustra que el compuesto 1 aumento la afinidad de PKM2 hacia PEP, de acuerdo con una realizacion de la invencion.
La Figura 1B ilustra el efecto reducido del compuesto 1 sobre la cinetica de ADP.
La Figura 2 ilustra la selectividad del compuesto 1 hacia PKM1, de acuerdo con otra realizacion de la invencion.
La Figura 3 ilustra los datos de qHTS y sus criterios de jerarquizacion del esquema de clasificacion seguidos en la presente solicitud.
La Figura 4A ilustra que el compuesto 66 aumento la afinidad de PKM2 hacia PEP, de acuerdo con otra realizacion de la invencion.
La Figura 4B ilustra el efecto reducido del compuesto 66 sobre la cinetica de ADP.
La Figura 5 ilustra la selectividad del compuesto 66 hacia PKM2, de acuerdo con una realizacion de la invencion.
Descripcion detallada de la invencion
De acuerdo con una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I:
imagen1
En una realizacion particular, el compuesto de formula I es un compuesto de formula (la):
imagen2
en la que n = 1 a 3, R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2- fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2- fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4- metoxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3-(acido boronicofenilo y 4-(acido boronicofenilo; y
R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2-naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1 H- indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F, y CF3 o, R3 y R4, tomados conjuntamente, forman C=O,
R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10 o F,
R6 es alquilo C1-C10 o cicloalquilo C3-C10 o
cada uno de R7 y R8 y de R9 y R10, forman conjuntamente C=O y
X es CH o N,
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realizacion espedfica el compuesto o la sal de acuerdo con las realizaciones descritas anteriormente es un compuesto en el que R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2-
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fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2- fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4- metoxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3- metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3- (acido boronicofenilo y 4-(acido boronicofenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro-2H- benzo[b][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2-
naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1 H-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10 y F, o, tomados conjuntamente, forman C=O, y R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10, o F.
En cualquiera de las realizaciones anteriores, R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2- metilfenilo, 2-fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo,
3- cloro-2-fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-
metoxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3- metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1 -oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3- (acido boronicofenilo y 4-(acido boronicofenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro-2H- benzo[b][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2-
naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1 H-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo, y R3 a R10 son H.
En una realizacion particular de los compuestos descritos anteriormente, X es N.
En una realizacion preferida de los compuestos descritos anteriormente, n es 1.
Los ejemplos espedficos de los compuestos descritos anteriormente incluyen aquellos en los que R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 4,2-difluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2-fluorofenilo, 4-
trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2, 6-difluoro-4-metoxifenilo, 2,5-difluoro-
4- propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 3- metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1 -oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3- (acido boronicofenilo, y 4-(acido boronicofenilo; preferentemente en los que R1 se selecciona del grupo que consiste en 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,6-difluoro-4-metoxifenilo, 2,6-difluoro-3- hidroxifenilo y 4-metoxi-fenilo.
En cualquiera de las realizaciones anteriores, R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro-2H- benzo[b][1,4]di-oxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2-
naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1 H-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
preferentemente 6-(2,3-dihIdrobenzo[b][1,4]dioxinilo).
De acuerdo con las realizaciones descritas anteriormente, los ejemplos espedficos de los compuestos incluyen los compuestos de formula (la), en la que X es N, n = 1, y R3 a R10 es H, y R1 y R2 son como se describe a continuacion:
R1 es 4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 y R2 son 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 y R2 son 4-metoxifenilo;
R es 4-cianofenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 4-clorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 4-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 3-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,4,5-trifluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,5-difluoro-3-propilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,4-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 3-trifluorometilfenilo y es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 3-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2-piridilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2-piridil-1-oxido y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4]dioxinilo);
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo;
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepinilo);
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-benzo[d][1,4]dioxinilo;
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4]oxazinilo);
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2-naftalenilo;
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R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,2-dimetilcromanilo);
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-(l-metil-1 W-indolilo);
R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo); o R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo).
De acuerdo con otra realizacion del compuesto de formula la, X es CH. En una realizacion preferida, n es 1. En cualquiera de estas realizaciones, preferentemente R3, R4 y R5 son H. Los ejemplos de dichos compuestos incluyen aquellos en los que R1 se selecciona del grupo que consiste en 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 4,2-difluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 4-cloro-2-fluoro, 3-cloro- 2-fluoro, 4-trifluorometilfenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 4-metoxifenilo y 2-nitrofenilo, en particular, en los que R1 se selecciona del grupo que consiste en 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluorofenilo y 4-metoxifenilo. En una realizacion de estos compuestos, R2 es 3,4-etilendioxifenilo.
En otra realizacion, el compuesto de formula la es el compuesto de formula (lb):
imagen3
En una realizacion adicional y el compuesto o la sal de la reivindicacion 12, en la que el compuesto es de formula (lc):
imagen4
en la que R3 a R10 son H o metilo, R3 a R6 y R9 y R10 son H o metilo y R7 forman C=O, o R3 a R8 son H o metilo, y R9 y R10 forman C=O.
De acuerdo con una realizacion del compuesto de formula (lc), (i) R5 es metilo y R3, R4 y R6 a R10 son H; (ii) R6 es metilo,y R3 a R5 y R7 a R10 son H; (iii) R3 es metilo y R4 a R19 son H; (iv) R4 es metilo, y R3 y R5 a R10 son H; (v) R3 a R8son H, y R9 y R10 forman C=O; o (vi) R3 a R6 y R7 y R8 son H, y R7 y R8 forman C=O.
De acuerdo con una realizacion del compuesto de formula I, L es N,N'-(etan-1,2-dnlo), N,N-(propan-1,3-dnlo), N,N'-(butan-1,4-dnlo), N,N'-(pentan-1,5-dnlo), N,N'-(hexan-1,6-dnlo), N,N-((trans)-ciclohexan-1,4-dnlo), N,N’- ((c/s)-ciclohexan-1,4-
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En una realizacion espedfica de los compuestos anteriores, R1 es 2,6-difluorofenMo y R2 es 6-(2,3- dihidrobenzo[6][1,4]dioxinilo).
Haciendo referencia ahora a la terminolog^a usada genericamente en el presente documento, para los compuestos de formula I, el termino "alquilo" significa un sustituyente alquilo de cadena lineal o ramificado que contiene, por ejemplo, de 1 a aproximadamente 6 atomos de carbono, preferentemente de 1 a aproximadamente 4 atomos de carbono, mas preferentemente de 1 a 2 atomos de carbono. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, ferc-butilo, pentilo, isoamilo, hexilo y similares.
El termino "cicloalquilo", como se usa en el presente documento, significa un sustituyente alquilo ciclico que contiene, por ejemplo, de aproximadamente 3 a aproximadamente 8 atomos de carbono, preferentemente de aproximadamente 4 a aproximadamente 7 atomos de carbono y mas preferentemente de aproximadamente 4 a aproximadamente 6 atomos de carbono. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo y similares. El termino "cicloalquenilo", como se usa en el presente documento, significa lo mismo que el termino "cicloalquilo", sin embargo, estan presentes uno o mas dobles enlaces. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen ciclopentenilo y ciclohexenilo. Los grupos alquilo dclicos pueden estar no sustituidos o sustituidos ademas con grupos alquilo tales como grupos metilo, grupos etilo y similares.
El termino "halo" o "halogeno", como se usa en el presente documento, significa un sustituyente seleccionado del Grupo VIIA, tal como, por ejemplo, fluor, bromo, cloro y yodo.
El termino “arilo” se refiere a un sustituyente carbodclico aromatico no sustituido o sustituido, como se entiende comunmente en la tecnica, y el termino "arilo C6-C10" incluye fenilo y naftilo. Se entiende que el termino arilo se aplica a sustituyentes dclicos que son planos y que comprenden 4n + 2 n electrones, de acuerdo con la Regla de Huckel.
La presente invencion tambien proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto o una sal de cualquiera de las realizaciones descritas anteriormente y un vehfculo farmaceuticamente aceptable.
La presente invencion proporciona ademas un compuesto de Formula I para su uso en un procedimiento de tratamiento de una enfermedad que responde a la activacion de la PK-M2 humana que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz del compuesto:
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De acuerdo con una realizacion del compuesto de formula I para su uso en el procedimiento, el compuesto es de formula Ia:
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en la que n = 1 a 3, R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2- fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2- fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-meth- oxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3- metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3- (acido boronicofenilo y 4-(acido boronicofenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro- 2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2- naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1 -metil-1 W-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F y CF3 o, R3 y R4, tomados conjuntamente, forman C=O,
R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10 o F,
R6 es alquilo C1-C10 o cicloalquilo C3-C10 o
cada uno de R7 y R8 y de R9 y R10, forman conjuntamente C=O
y
X es CH o N.
La invencion proporciona ademas el uso de un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo en la fabricacion de un medicamento para tratar una enfermedad que responde a la activacion de la PK-M2 humana de un paciente, en el que el compuesto es de formula I:
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un compuesto de formula Ia:
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en la que n = 1 a 3, R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2- fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2- fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2, 6-difluoro-4-meth- oxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3- metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3- (acido boronicofenilo y 4-(acido boronicofenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihy-dro- 2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2- naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1H-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F y CF3 o, R3 y R4, tomados conjuntamente, forman C=O,
R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10 o F,
R6 es alquilo C1-C10 o cicloalquilo C3-C10 o
cada uno de R7 y R8 y de R9 y R10, forman conjuntamente C=O
y
X es CH o N
En ciertas realizaciones preferidas de los compuestos de formula (la), la invencion proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 1-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-4-(2-
fluorofenilsulfonil)piperazina, 1-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-4-(3-fluorofenilsulfonil)piperazina, 1-
(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxin-6-il-sulfonil)-4-(2,4-difluorofenilsulfonil)piperazina, 1-(2,3-
dihidrobenzo[d][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-4-(2,6-difluorofenilsulfonil)piperazina, 1-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxin-6- ilsulfonil)-4-(2,4,5-trifluorofenilsulfonil)piperazina y 1-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-4-(4-
metoxifenilsulfonil)piperazina.
Se entendera que los terminos 2-(acido boronico)fenilo, 3-(acido boronico)fenilo y 4-(acido boronico)fenilo se refieren a un grupo de formula:
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en el que el grupo fenilo esta unido al grupo sulfonilo en la posicion 2, 3 o 4 del anillo fenilo.
La presente invencion proporciona ademas un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo en la fabricacion de un medicamento para tratar una enfermedad que responde a la activacion de la PK-M2 humana de un paciente, en el que el compuesto es de formula I:
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un compuesto de formula la:
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en la que n = 1 a 3, R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2- fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2- fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4- metoxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3-(acido boronicofenilo y 4-(acido boronico)fenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro- 2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2- naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1H-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F y CF3 o R3 y R4, tomados conjuntamente, forman C=O,
R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10 o F,
R6 es alquilo C1-C10 o cicloalquilo C3-C10, o
cada uno de R7 y R8 y de R9 y R10, forman conjuntamente C=O
y
X es CH o N.
La presente invencion proporciona ademas el uso de un compuesto o una sal como se ha descrito anteriormente en la fabricacion de un medicamento para tratar una enfermedad que responde a la activacion de la PKM2 humana.
La expresion "sal farmaceuticamente aceptable" pretende incluir sales no toxicas sintetizadas a partir del compuesto precursor que contiene una fraccion basica o acida mediante procedimientos qmmicos convencionales. En general, dichas sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de acido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiometrica de la base o del acido apropiado en agua o en un disolvente organico, o en una mezcla de los dos. En general, se prefieren medios no acuosos tales como eter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Las listas de sales adecuadas se encuentran en “Remington 's Pharmaceutical Sciences”, 18a ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990, pag. 1445 y Journal de Pharmaceutical Science, 66, 2-19 (1977).
Las bases adecuadas incluyen bases inorganicas tales como bases de metales alcalinos y alcalinoterreos, por ejemplo, aquellas que contienen cationes metalicos tales como sodio, potasio, magnesio, calcio y similares. Los ejemplos no limitantes de bases adecuadas incluyen hidroxido de sodio, hidroxido de potasio, carbonato de sodio y carbonato de potasio. Los acidos adecuados incluyen acidos inorganicos tales como acido clorhidrico, acido
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bromlddrico, acido yodlddrico, acido sulfurico, acido fosforico y similares, y acidos organicos tales como p- toluenosulfonico, acido metanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido oxalico, acido p-bromofenilsulfonico, acido carbonico, acido sucdnico, acido dtrico, acido benzoico, acido acetico, acido maleico, acido tartarico, acidos grasos, acidos grasos de cadena larga y similares. Las sales farmaceuticamente aceptables preferidas de los compuestos de la invencion que tienen una fraccion acida incluyen sales de sodio y potasio. Las sales farmaceuticamente aceptables preferidas de los compuestos de la invencion que tienen una fraccion basica (por ejemplo, un grupo piridilo) incluyen sales de clorhidrato y bromhidrato. Los compuestos de la presente invencion que contienen una fraccion acida o basica son utiles en forma de la base o del acido libre, o en forma de una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Se ha de reconocer la naturaleza del contraion particular que forma parte de cualquier sal de la presente invencion no suele ser relevante, siempre que la sal en su conjunto sea farmacologicamente aceptable y siempre que el contraion no aporte calidades no deseadas a la sal en su conjunto.
Se entiende ademas que los compuestos y las sales anteriores pueden formar solvatos o existir en una forma esencialmente no complejada, tal como la forma anhidra. Como se usa en el presente documento, el termino “solvato” se refiere a un complejo molecular en el que la molecula de disolvente, tal como el disolvente de cristalizacion, se incorpora a la red cristalina. Cuando el disolvente incorporado al solvato es agua, el complejo molecular se denomina hidrato. Los solvatos farmaceuticamente aceptables incluyen hidratos, alcoholatos tales como metanolatos y etanolatos, acetonitrilatos y similares. Estos compuestos tambien pueden existir en formas polimorficas.
La presente invencion se refiere ademas a una composicion farmaceutica que comprende un veldculo farmaceuticamente aceptable y al menos un compuesto o una sal que se describe en el presente documento.
Se prefiere que el veldculo farmaceuticamente aceptable sea aquel que sea qmmicamente inerte a los compuestos activos y que no tenga efectos secundarios perjudiciales ni toxicidad en las condiciones de uso.
La eleccion del veldculo estara determinada en parte por el compuesto de la presente invencion seleccionado en particular, asf como por el procedimiento usado en particular para administrar la composicion. Por consiguiente, existe una amplia variedad de formulaciones adecuadas de la composicion farmaceutica de la presente invencion. Las siguientes formulaciones para administracion oral, en aerosol, parenteral, subcutanea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intratecal, rectal y vaginal son meramente ilustrativas, y, en modo alguno, limitantes.
La composicion farmaceutica se puede administrar por via parenteral, por ejemplo, por via intravenosa, subcutanea, intradermica o intramuscular. Por lo tanto, la invencion proporciona composiciones para administracion parenteral que comprenden una solucion del compuesto de la invencion, o una sal disuelta o suspendida en un vehfculo aceptable adecuado para la administracion parenteral, incluyendo soluciones de inyeccion esteriles isotonicas acuosas y no acuosas.
En general, los requisitos para los vehfculos farmaceuticos eficaces para composiciones parenterales son bien conocidos por los expertos en la materia. Vease, por ejemplo, Banker y Chalmers, eds. “Pharmaceutics and Pharmacy Practice”, J. B. Lippincott Company, Filadelfia, pag. 238-250 (1982) y Toissel, “ASHP Handbook on Injectable Drugs”, 4a ed. 622-630 (1986). Dichas soluciones pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostaticos y solutos que hacen que la formulacion sea isotonica con la sangre del receptor deseado, y suspensiones esteriles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspension, solubilizantes, agentes espesantes, estabilizantes y conservantes. El compuesto o la sal de la presente invencion se puede administrar en un diluyente fisiologicamente aceptable en un vehfculo farmaceutico, tal como un lfquido esteril o una mezcla de lfquidos, incluyendo agua, solucion salina, dextrosa acuosa y soluciones de azucar relacionadas, un alcohol tal como etanol, isopropanol o alcohol hexadedlico, glicoles, tales como propilenglicol o polietilenglicol, sulfoxido de dimetilo, cetales de glicerol, tales como 2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol, eteres, tales como poli(etilenglicol) 400, un aceite, un acido graso, un ester de acido graso o glicerido, o un glicerido de acido graso acetilado con o sin adicion de un tensioactivo farmaceuticamente aceptable, tal como un jabon o un detergente, agente de suspension, tal como pectina, carbomeros, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa o carboximetilcelulosa, o agentes emulsionantes y otros adyuvantes farmaceuticos.
Los aceites utiles en las formulaciones parenterales incluyen aceites de petroleo, animales, vegetales o sinteticos. Los ejemplos espedficos de aceites utiles en dichas formulaciones incluyen aceite de cacahuete, de soja, de sesamo, de semilla de algodon, de mafz, de oliva, vaselina y mineral. Los acidos grasos adecuados para su uso en formulaciones parenterales incluyen acido oleico, acido estearico y acido isoestearico. El oleato de etilo y el miristato de isopropilo son ejemplos de esteres de acidos grasos adecuados.
Los jabones adecuados para su uso en las formulaciones parenterales incluyen sales grasas de metal alcalino, de amonio y de trietanolamina, y los detergentes adecuados incluyen (a) detergentes cationicos tales como, por ejemplo, haluros de dimetildialquilamonio y haluros de alquilpiridinio; (b) detergentes anionicos tales como, por ejemplo, sulfonatos de alquilo, arilo y olefina, sulfatos y sulfoccinatos de alquilo, olefina, eter y monoglicerido; (c) detergentes no ionicos tales como, por ejemplo, oxidos de amina grasa, alcanolamidas de acidos grasos y
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copoKmeros de polioxietilenpolipropileno; (d) detergentes anfoteros tales como, por ejemplo, alquil-beta- aminopropionatos y sales de amonio cuaternario de 2-alquil-imidazolina; y (e) mezclas de los mismos.
Las formulaciones parenterales pueden contener conservantes y tampones. Para reducir al mmimo o eliminar la irritacion del sitio de inyeccion, dichas composiciones pueden contener uno o mas tensioactivos no ionicos que tienen un balance hidrofilo-lipofilo (HLB) de aproximadamente 12 a aproximadamente 17. La cantidad de tensioactivo de dichas formulaciones normalmente variara del aproximadamente 5 al aproximadamente 15 % en peso. Los tensioactivos adecuados incluyen esteres de acido graso de polietilensorbitan, tales como monooleato de sorbitan y los aductos de alto peso molecular de oxido de etileno con una base hidrofoba, formados por la condensacion de oxido de propileno con propilenglicol. Las formulaciones parenterales pueden presentarse en recipientes sellados monodosis y multidosis, tales como ampollas y viales, y pueden almacenarse en un estado liofilizado que solo requiere la adicion del excipiente lfquido esteril, por ejemplo, agua, para inyecciones, inmediatamente antes del uso. Pueden prepararse soluciones y suspensiones inyectables extemporaneas a partir de polvos, granulos y comprimidos esteriles del tipo anteriormente descrito.
Las formulaciones topicas, incluyendo aquellas que son utiles para la liberacion transdermica de farmacos, son bien conocidas por los expertos en la materia, y son adecuadas en el contexto de la invencion para su aplicacion en la piel.
Las formulaciones adecuadas para la administracion oral pueden consistir en (a) soluciones lfquidas, tales como una cantidad terapeuticamente eficaz del compuesto de la invencion disuelto en diluyentes, tales como agua, solucion salina o zumo de naranja; (b) capsulas, sobres, comprimidos, pastilla para chupar y trociscos, conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del principio activo, en forma de solidos o granulos; (c) polvos; (d) suspensiones en un lfquido apropiado y (e) emulsiones adecuadas. Las formulaciones lfquidas pueden incluir diluyentes, tales como agua y alcoholes, por ejemplo, etanol, alcohol bendlico y los alcoholes polietilenicos, con o sin la adicion de un tensioactivo, un agente de suspension o un agente emulsionante farmaceuticamente aceptables. Las formas en capsulas pueden ser del tipo habitual de gelatina dura o blanda que contiene, por ejemplo, tensioactivos, lubricantes y cargas inertes, tales como lactosa, sacarosa, fosfato calcico y almidon de mafz. Las formas en comprimidos pueden incluir uno o mas de lactosa, sacarosa, manitol, almidon de mafz, almidon de patata, acido algmico, celulosa microcristalina, goma arabiga, gelatina, goma guar, dioxido de silicio coloidal, croscarmelosa sodica, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, estearato de cinc, acido estearico y otros excipientes, colorantes, diluyentes, agentes tamponantes, agentes desintegrantes, agentes humectantes, conservantes, agentes aromatizantes y excipientes farmacologicamente compatibles. Las formas en pastillas para chupar pueden comprender el principio activo en un aromatizante, normalmente sacarosa y goma arabiga o tragacanto, asf como pastillas que comprenden el principio activo en una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y goma arabiga, emulsiones, geles y similares que contienen, ademas del principio activo, dichos excipientes que son conocidos en la materia.
El compuesto o la sal de la presente invencion, solo o en combinacion con otros componentes adecuados, puede prepararse en formulaciones de aerosol para administrarse por inhalacion. Los compuestos se suministran preferentemente en forma finamente dividida junto con un tensioactivo y propulsor. Los porcentajes tfpicos de compuesto activo son del 0,01 % al 20% en peso, preferentemente del 1 % al 10%. Como es evidente, el tensioactivo no debe ser toxico y, preferentemente, debe ser soluble en el propulsor. Son representativos de dichos tensioactivos los esteres o esteres parciales de acidos grasos que contienen de 6 a 22 atomos de carbono, tales como acidos caproico, octanoico, laurico, palmftico, estearico, linoleico, linolenico, olesterico y oleico con un alcohol polihfdrico alifatico o su anhfdrido dclico. Se pueden emplear esteres mixtos tales como gliceridos mixtos o naturales. El tensioactivo puede constituir del 0,1 % al 20% en peso de la composicion, preferentemente del 0,25 % al 5 %. El resto de la composicion habitualmente es propulsor. Tambien se puede incluir un vehfculo cuando se desee, por ejemplo, lecitina para la administracion intranasal. Estas formulaciones en aerosol pueden colocarse en propulsores presurizados aceptables, tales como diclorodifluorometano, propano, nitrogeno y similares. Tambien pueden formularse como productos farmaceuticos para preparaciones no presurizadas, tales como en un nebulizador o un atomizador. Dichas formulaciones de pulverizacion se pueden usar para pulverizar una mucosa.
Ademas, el compuesto o la sal de la presente invencion se pueden preparar en supositorios mezclando con una variedad de bases, tales como bases emulsionantes o bases hidrosolubles. Las formulaciones adecuadas para la administracion vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulas de pulverizacion que contienen, ademas del principio activo, los vehfculos que son conocidos en la materia como apropiados.
Un experto en la materia apreciara que, ademas de las composiciones farmaceuticas descritas anteriormente, el compuesto o la sal de la presente invencion se pueden formular como complejos de inclusion, tales como complejos de inclusion de ciclodextrina o liposomas. Los liposomas sirven para dirigir los compuestos a un determinado tejido, tal como tejido linfoide o celulas hepaticas cancerosas. Los liposomas tambien se pueden usar para aumentar la semivida del compuesto de la invencion. Los liposomas utiles en la presente invencion incluyen emulsiones, espumas, micelas, monocapas insolubles, cristales lfquidos, dispersiones de fosfolfpidos, capas laminares y similares. En estas preparaciones, el agente activo que se va a administrar se incorpora como
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parte de un liposoma, solo o en combinacion con un agente quimioterapeutico adecuado. Asf pues, los liposomas rellenos con un compuesto deseado de la invencion o una sal del mismo, pueden dirigirse al sitio de un tipo de tejido espedfico, celulas hepaticas, por ejemplo, en las que los liposomas suministren luego las composiciones seleccionadas. Los liposomas para su uso en la invencion se forman a partir de lfpidos formadores de vesfculas convencionales, que incluyen, en general, fosfolfpidos neutros y cargados negativamente y un esterol, tal como colesterol. La seleccion de lfpidos se gma, en general, teniendo en cuenta, por ejemplo, el tamano de los liposomas y la estabilidad de los liposomas en la corriente sangumea. Se dispone de una variedad de procedimientos de preparacion de liposomas, como se describe, por ejemplo, en Szoka y col., Ann. Rev. Biophys. Bioeng, 9, 467 (1980) y las patentes EE.UU. n.° 4.235.871, 4.501.728, 4.837.028 y 5.019.369. Para dirigirse a las celulas de un determinado tipo de tejido, un ligando que se vaya a incorporar en el liposoma puede incluir, por ejemplo, anticuerpos o fragmentos del mismo espedficos de los determinantes de la superficie celular del tipo de tejido diana. Una suspension de liposomas que contiene un compuesto o una sal de la presente invencion puede administrarse por via intravenosa, local, topica, etc. en una dosis que vana de acuerdo con el modo de administracion, el agente que se este administrando y la etapa de la enfermedad que se este tratando.
Las dosis y las pautas posologicas adecuadas pueden determinarse mediante tecnicas convencionales de determinacion de intervalos conocidas por los expertos en la materia. En general, el tratamiento se inicia con dosis mas pequenas que son inferiores a la dosis optima del compuesto. Tras ello, se aumenta la dosis en pequenos incrementos hasta que se alcanza el efecto optimo en las circunstancias. El presente procedimiento normalmente implicara la administracion de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 300 mg de uno o mas de los compuestos descritos anteriormente por kg de peso corporal del individuo.
La invencion proporciona ademas un compuesto de la invencion para su uso en un procedimiento de tratamiento de una enfermedad que responde a la activacion de PK-M2 en un mamffero que comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto de la invencion a un mamffero afectado de la misma. De acuerdo con una realizacion, la invencion proporciona un compuesto representado por la Formula la para su uso en un procedimiento de tratamiento de una enfermedad que responde a la activacion de PK-M2 que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz del compuesto:
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en la que n = 1 a 3, R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2- fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2- fluorofenilo, 4-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4- metoxifenilo, 2,5-difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo,
3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronicofenilo, 3-(acido boronicofenilo y 4-(acido boronico)fenilo; y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro- 2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2- naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1H-indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F y CF3 o tomados conjuntamente, forman C=O,
R5 es H alquilo C1-C10 o F,
R6 a R10 son H, y X es CH o N.
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
La enfermedad que responde a la activacion de PK-M2 puede ser cancer o anemia. El cancer puede ser cualquier cancer adecuado, por ejemplo, cancer renal, cancer de ovario, cancer de mama, cancer del SNC, leucemia, cancer de prostata, cancer de pulmon no microdtico, cancer de colon o melanoma, en particular, cancer renal, cancer del SNC, cancer de mama y cancer de ovario. La anemia puede ser cualquier anemia adecuada, por ejemplo, anemia hemolftica tal como la deficiencia de piruvato quinasa de tipo R de eritrocitos humanos.
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La invencion proporciona ademas un uso de un compuesto o una sal de la invencion en la fabricacion de un medicamento para tratar una enfermedad que responde a la activacion de PK-M2. El medicamento es normalmente una composicion farmaceutica como se describe en el presente documento.
La dosis administrada a un ser humano de acuerdo con la presente invencion debe ser suficiente para efectuar la respuesta deseada. Dichas respuestas incluyen la inversion o la prevencion de los malos efectos de la enfermedad que responde a la activacion de PK-M2 para la que se desea el tratamiento o para obtener el beneficio deseado. Un experto en la materia reconocera que la dosis dependera de una variedad de factores, incluyendo la edad, el estado y el peso corporal del ser humano, asf como la fuente, el tipo particular de cancer y el grado del cancer en el ser humano. El tamano de la dosis tambien estara determinado por la via, el momento y la frecuencia de administracion, asf como la existencia, la naturaleza y el grado de cualquier efecto secundario adverso que pudiera acompanar a la administracion de un determinado compuesto y el efecto fisiologico deseado. Un experto en la materia apreciara que varias afecciones o estados patologicos pueden requerir un tratamiento prolongado que implica multiples administraciones.
Los compuestos de la invencion pueden prepararse mediante cualquier procedimiento adecuado. Por ejemplo, las W,W'-diarilsulfonamidas se prepararon mediante una secuencia de reaccion de acoplamiento, desproteccion y una segunda reaccion de acoplamiento como se detalla en el Esquema 1. En concreto, se acoplo la piperazina protegida con mono-boc en cloruro de metileno a 0 °C en presencia de trietilamina a numerosos cloruros de arilsulfonilo para proporcionar las W-arilsulfonamidas protegidas con boc necesarias. Estos productos intermedios se desprotegieron con TFA en cloruro de metileno a 0 °C y, posteriormente, se acoplaron a un segundo cloruro de arilsulfonilo para proporcionar los analogos de W,W'-diarilsulfonamida. Todos los compuestos finales se purificaron por HPLC a escala preparativa y los rendimientos para estos procedimientos normalmente fueron altos. Se utilizo el mismo procedimiento para explorar las ligaduras alternativas entre cada fraccion aril- sulfonamida que inclma diaminas dclicas de diferente tamano de anillo (analogo 31), diaminas lineales (analogo 32-36), sistemas de anillos con una amina secundaria interna y una amina exodclica (analogos 37-44) y analogos con diversas piperazinas sustituidas (analogos 45-47) (esquema no mostrado). Se fabricaron varios de los derivados de sulfona relacionados similares a la estructura candidata de acuerdo con el Esquema 2. Para sintetizar estos derivados, se trato W-boc-4-bromopiperidina con varios sulfuros de arilo en DMF basica para proporcionar los tiol-eteres sustituidos apropiadamente. La oxidacion a la sulfona se realizo mediante la reaccion con mCPBA en cloruro de metileno a 0 °C. Despues de la desproteccion de boc, se acoplo la amina secundaria a diversos cloruros de arilsulfonilo para proporcionar los analogos de 4-(arilsulfonil)-1 -(arilsulfonil)piperidina (representados por los analogos 20 y 30). Se prepararon analogos de W,W'-diarilsulfonamida que teman el nucleo de piperazin-2-ona de acuerdo con el Esquema 3. Estos derivados se obtuvieron mediante el tratamiento de piperazin-2-ona con 1 equivalente de diversos cloruros de arilsulfonilo que se acoplaron preferentemente a la fraccion amina libre. El producto intermedio resultante se convirtio en 1,4-bis(arilsulfonil)piperazin-2-onas mediante la desprotonacion de la amida con LHMDS en THF a -78 °C seguido por la adicion de diversos cloruros de arilsulfonilo para generar los productos deseados en buenos rendimientos (representados por los analogos 49 y 50).
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Los siguientes ejemplos ilustran mejor la invencion pero, como es evidente, no se deben interpretar en modo alguno como limitantes de su alcance.
A menos que se indique lo contrario, todas las reacciones se llevaron a cabo bajo una atmosfera de argon seco o 5 nitrogeno en cristalena seca. Las temperatures de reaccion indicadas se refieren a las del bano de reaccion, mientras que la temperature ambiente (TA) se indica como 25 °C. Todos los disolventes eran de calidad anhidra, adquiridos en Aldrich Chemical Co., y se usaron como se recibieron. Se adquirieron materiales de partida y reactivos disponibles en el mercado, en Aldrich, TCI y Acros, y se usaron como se recibieron.
Ejemplo 1
10 El presente ejemplo ilustra procedimientos generales en la preparacion de compuestos de la invencion de acuerdo con una realizacion.
Todas las reacciones sensibles al aire o a la humedad se realizaron bajo presion positiva de nitrogeno con cristalena secada al horno. Se obtuvieron disolventes anhidros tales como tetrahidrofurano (THF), tolueno, diclorometano, W,A/-dimetilformamida (DMF), acetonitrilo, metanol y trietilamina adquiriendolos en Sigma-Aldrich.
15 La purificacion preparativa se realizo en una HPLC semi-preparativa de Waters. La columna usada fue una Phenomenex Luna C18 (5 micrometros, 30 x 75 mm) a un caudal de 45 ml/min. La fase movil consistio en acetonitrilo y agua (conteniendo cada uno acido trifluoroacetico al 0,1 %). Durante la purificacion, se uso un gradiente de acetonitrilo del 10% al 50% durante 8 minutos. La recoleccion de fracciones se desencadeno mediante deteccion UV (220 nM). El analisis analttico se realizo en un EMCL de Agilent (Agilent Technologies,
20 Santa Clara, CA). Procedimiento 1: se uso un gradiente de 7 minutos de acetonitrilo del 4% al 100% (que
contema acido trifluoroacetico al 0,025 %) en agua (que contema acido trifluoroacetico al 0,05 %) con un tiempo de procesamiento de 8 minutos a un caudal de 1 ml/min. Se uso una columna Phenomenex Luna C18 (3 micrometros, 3 x 75 mm) a una temperatura de 50 °C. Procedimiento 2: se uso un gradiente de 3 minutos de acetonitrilo del 4% al 100% (que contema acido trifluoroacetico al 0,025 %) en agua (que contema acido 5 trifluoroacetico al 0,05 %) con un tiempo de procesamiento de 4,5 minutos a un caudal de 1 ml/min. Se uso una columna de fenilo Phenomenex Gemini (3 micrometros, 3 x 100 mm) a una temperatura de 50 °C. La determinacion de pureza se realizo usando un detector de matriz de diodos Agilent. La determinacion de la masa se realizo usando un espectrometro de masas Agilent 6130 con ionizacion por electronebulizacion en el modo positivo. Los espectros de RMN de 1H se registraron en espectrometros Varian de 400 MHz. Los 10 desplazamientos qmmicos se indican en ppm con tetrametilsilano (TMS) como patron interno (0 ppm) para soluciones de CDCh o disolvente no deuterado (DMSO-h6 a 2,49 ppm) para soluciones de DMSO-d6. Todos los analogos para el ensayo tienen una pureza superior al 95 % basada en ambos procedimientos analfticos. La espectrometna de masas de alta resolucion se registro en el sistema de EMCL de tiempo de vuelo Agilent 6210. La confirmacion de la formula molecular se realizo mediante ionizacion por electronebulizacion en el modo 15 positivo con el software Masshunter de Agilent (version B.02).
La mayoria de las bis-sulfonamidas se sintetizaron mediante un procedimiento de dos recipientes en tres etapas (Procedimiento A y Procedimiento B) ilustrado por la smtesis de 1, mostrada en los Esquemas 1-3.
Procedimiento A:
Se disolvio 1-Boc-piperazina (250 mg, 1,34 mmol, 1 equiv.) en diclorometano (2,5 ml) y se enfrio en un bano de 20 hielo bajo atmosfera de nitrogeno. Se anadio trietilamina (375 pl, 2,68 mmol, 2,0 equiv.), seguida de la adicion en porciones de cloruro de 2,3-dihidrobenzo[8][1,4]dioxina-6-sulfonilo (346 mg, 1,48 mmol, 1,1 equiv.). Se agito la reaccion en el bano de hielo durante una hora, despues se inactivo con solucion acuosa saturada de cloruro de amonio (~3 ml). Se lavo la capa organica dos veces con solucion saturada de cloruro de amonio, una vez con salmuera, se seco sobre sulfato sodico y se concentro al vado y despues se purifico mediante cromatograffa en 25 gel de sflice usando un gradiente de hexano/EtOAc (v/v) 95/5-5/95, dando 1-boc-4-(2,3-
dihidrobenzo[8][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)piperazina en forma de un polvo blanco (516 mg, 89 % de rendimiento).
Procedimiento B:
Se disolvio 1-Boc-4-(2,3-dihidrobenzo[8][1,4]dioxina-6-sulfonil)piperazina (400 mg, 1,04 mmol) en diclorometano (1 ml) y se enfrio en un bano de hielo. Despues, se anadio acido trifluoroacetico (1 ml), y la solucion se agito en 30 el bano de hielo. Se controlo la reaccion mediante CCF, mostrandose que se habfa completado tras una hora. Se retiro la solucion del bano de hielo y se eliminaron los disolventes al vado, produciendo la sal de TFA de 1-(2,3- dihidrobenzo[8][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)piperazina, que se llevo a la siguiente etapa sin purificacion. Se disolvio el residuo oleoso en diclorometano (2 ml) y se enfrio en un bano de hielo. Se anadio trietilamina (580 pl, 4,16 mmol, 4 equiv.) seguida de la adicion en porciones de cloruro de 4-metoxibenceno-1-sulfonilo (236 mg, 1,14 mmol, 35 1,1 equiv.). Se controlo el progreso mediante CCF, mostrandose la finalizacion tras 1 hora. Se inactivo la
reaccion con solucion acuosa saturada de cloruro de amonio (~3 ml). Se lavo la capa organica dos veces con solucion saturada de cloruro de amonio, una vez con salmuera, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro al vado, y luego se disolvio en DMSO y se purifico por HPLC de fase inversa.
40 Smtesis de la sulfona 30
Se disolvieron 4-bromo-1-bocpiperidina (500 mg, 1,89 mmol, 1 equiv.) y 2,3-dihidrobenzo[8][1,4]dioxina-6-tiol (318 mg, 1,89 mmol, 1 equiv.) en DMF (4 ml). Despues, se anadio carbonato de potasio (392 mg, 2,84 mmol, 1,5 equiv.) y se agito la solucion a 80 °C durante 5 horas. Se enfrio la reaccion hasta la temperatura ambiente, y se diluyo con acetato de etilo (~10 ml) y agua (~10 ml). Se lavo la capa organica con solucion acuosa saturada 45 de bicarbonato sodico y salmuera, se seco sobre sulfato sodico y se eliminaron los disolventes. Se disolvio el sulfuro bruto en diclorometano (6 ml) y se enfrio hasta 0 °C. Entonces, se anadio m-CPAB solido (720 mg, 4,16 mmol, 2,2 equiv. basado en el tiol inicial), y se agito la suspension a 0 °C durante 2 horas. A continuacion, se filtro la suspension y se lavo el filtrado con solucion acuosa de tiosulfato de sodio al 10 %, solucion acuosa de bicarbonato sodico y salmuera, y se seco sobre sulfato sodico. Se elimino el disolvente y se purifico el residuo 50 por cromatograffa en gel de sflice usando un gradiente de hexano/EtOAc (v/v) de 95/5-5/95, dando la sulfona deseada. Entonces, se uso el procedimiento B (vease mas arriba) para escindir el grupo boc e introducir la fraccion sulfonamida (usando cloruro de 2,6-difluorobencenosulfonilo), dando el producto 30, que se disolvio en DMSO y se purifico mediante HPLC de fase inversa.
1-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxm-6-Nsulfoml)-4-(4-metoxifemlsulfoml)piperazma (1). RMN de 1H (400 MHz, 55 DMSO-de) 8: 7,67-7,57 (m, 2H), 7,19-7,08 (m, 4H), 7,08-7,01 (m, 1H), 4,45-4,23 (m, 4H), 3,86 (s, 3H), 2,94 (m,
8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,744 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,889 min. EMAR: m/z (M+) = 454,0872 (Calculado para C19H22N2O7S2 = 454,0868).
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1.4- bis(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazma (2). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,707,61 (m, 2H), 7,61-7,52 (m, 1H), 7,22-7,12 (m, 2H), 7,12-7,05 (m, 1H), 4,35 (m, 8H), 3,44-3,36 (m, 4H), 3,00-2,88 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 6,114 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,961 min. EMAR: m/z (M+) = 482,0816 (Calculado para C20H22N2O8S2 = 482,0818).
1.4- bis(4-metoxifenilsulfonil)piperazina (3). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,58 (d, 4H, J = 6,9 Hz), 7,08 (d, 4H, J = 8,4 Hz), 3,82 (s, 6h), 2,91 (s, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,828 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,895 min.
4-(4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazm-1-ilsulfoml)benzomtrilo (4). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 8,07 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,84 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,10 (m, 2H), 7,00 (m, 1H), 4,31 (m, 4H), 3,032,91 (m, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,671 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,879 min. EMAR: m/z (M+) = 449,0716 (Calculado para C19H19N3O6S2 = 449,0715).
1-(4-clorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazma (5). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,67 (b, 4H), 7,12 (m, 2H), 7,03 (m, 1H), 4,32 (m, 4H), 2,95 (m, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 6,114 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,959 min. EMAR: m/z (M+) = 458,0380 (Calculado para C1sH19ClN2O6S2 = 458,0373).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(4-fluorofemlsulfoml)piperazma (6). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,72 (m, 2H), 7,43 (m, 2H), 7,18-7,09 (m, 2H), 7,09-7,01 (m, 1H), 4,32 (m, 4H), 2,93 (m, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,813 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,893 min. EMAR: m/z (M+) = 442,0677 (Calculado para C18H19FN2O6S2 = 442,0669).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(3-fluorofemlsulfoml)piperazma (7). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,75-7,64 (m, 1H), 7,64-7,49 (m, 3H), 7,18-7,09 (m, 2H), 7,09-7,01 (m, 1H), 4,43-4,25 (m, 4 H), 3,12-3,00 (m, 4H), 2,99-2,82 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,853 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,911 min. EMAR; m/z (M+) = 442,0662 (Calculado para C18H19FN2O6S2 = 442,0669).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(2-fluorofemlsulfoml)piperazma (8). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,84-7,68 (m, 2H), 7,52-7,36 (m, 2H), 7,21-7,11 (m, 2H), 7,10-7,02 (m, 1H), 4,44-4,25 (m, 4H), 3,233,07 (m, 4H), 3,04-2,87 (m, 4h), EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,775 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,891 min. EMAR; m/z (M+) = 442,0664 (Calculado para C18H19FN2O6S2 = 442,0669).
1-(2,6-difluorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazma (9). RMN de 1H
(400 MHz, CDCla) 8: 7,55 (m, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,00 (m, 3H), 4,33 (m, 4H), 3,38 (m, 4H), 3,13 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,781 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,889 min. EMAR: m/z (M+) = 460,0570 (Calculado para C18H18F2N2O6S2 = 460,0574).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(2,4,5-tnfluorofemlsulfoml)piperazma (10). RMN de 1H
(400 MHz, DMSO-de) 8: 8,00-7,76 (m, 2H), 7,22-7,12 (m, 2H), 7,11-7,04 (m, 1H), 4,34 (dd, 4H, J = 12,13; 5,09 Hz), 3,24-3,14 (m, 4H), 3,04-2,87 (m, 4H). EMcL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 6,076 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: EmAr; m/z (M+) = 478,0495 (Calculado para C18H17F3N2O6S2 = 478,0480).
1-(2,6-difluoro-4-metoxifenilsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazma (11). RMN de
1H (400 MHz, CDCla) 8: 7,22 (m, 2H), 6,97 (m, 1H), 6,53 (d, 2H, J = 10,56 Hz), 4,26 (m, 4H), 3,87 (s, 3H), 3,31 (m, 4H), 3,11 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,922 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,911 min. EmAR; m/z (M+) = 490,0698 (Calculado para C19H20F2N2O7S2 = 490,0680).
1-(2,5-difluoro-4-propilfemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazma (12). RMN de
1H (400 MHz, CDCl3) 8: 7,44 (dd, 1H, J = 8,41; 5,67 Hz), 7,23 (m, 2H), 7,06 (dd, 1H, J = 10,17; 5,48 Hz), 6,98 (d, 1H, J = 8,22 Hz), 4,32 (m, 4H), 3,30 (m, 4H), 3,11 (m, 4H), 2,66 (t, 2H, J = 7,43 Hz), 1,66 (m, 2H), 0,98 (t, 3H, J = 7,43 Hz). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 6,737 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 4,055 min. EMAR: m/z (M+) = 502,1057 (Calculado para C21H24F2N2O6S2 = 502,1044).
3-(4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazm-1-ilsulfoml)-2,4-difluorofenol (13). RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,25 (m, 3H), 7,05 (m, 2H), 4,33 (m, 4H), 3,37 (m, 4H), 3,13 (m, 4H), 1,84 (b, 1H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,783 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,888 min. EMAR: m/z (M+) = 476,0542 (Calculado para C18H18F2N2O7S2 = 476,0523).
1-(2,4-difluorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazma (14). RMN de 1H,
DMSO-de) 8: 7,81 (m, 1H), 7,57 (ddd, 1H, J = 10,96; 9,00; 2,3 5 Hz) 7,32 (td, 1H, J = 8,51; 2,15 Hz), 7,23-7,11 (m, 2H), 7,11-7,01 (m, 1H), 4,40-4,27 (m, 4H), 3,22-3,08 (m, 4H), 3,03-2,80 (m, 4H), EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,910 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,910 min. EMAR: m/z (M+) = 460,0585 (Calculado para C18H18F2N2O6S2 = 460,0574).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(femlsulfoml)piperazma (15). RMN de 1H (400 MHz, DMSO- de) 8: 7,73-7,64 (m, 3H), 7,59 (m, 2H), 7,13-7,07 (m, 2H), 7,01 (m, 1H) 4,30 (m, 4H), 2,98-2,88 (m, 8H). EMCL:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,706 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,883 min. EMAR: m/z (M+) = 424,0769 (Calculado para C18H202OS2 = 424,0763).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(3-(trifluorometil)femlsulfoml)piperazma (16). RMN de 1H
(400 MHz, CDCI3) 8: 7,96 (s, 1H), 7,89 (m, 2H), 7,70 (m, 1H), 7,20 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 4,31 (m, 4H), 3,11 (m, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 6,249 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,920 min. EMAR: m/z (M+) = 492,0654 (Calculado para C19H19F3N2O6S2 = 492,0637).
1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(3-metoxifemlsulfoml)piperazma (17). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 7,50 (m, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,09 (m, 3H), 7,01 (m, 1H) 4,31 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 2,99 (m, 4H), 2,89 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,819 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,902 min. eMaR: m/z (M+) = 454,0878 (Calculado para C19H22N2O7S2 = 454,0868).
1- (2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-4-(pmdm-2-ilsulfoml)piperazma (18). RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 8: 8,68 (d, 1H, J = 4,7 Hz), 7,92 (m, 2H), 7,51 (m, 1H), 7,24 (m, 2H), 6,99 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 4,3 (m, 4H), 3,44 (m, 4H), 3,09 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,205 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,772 min. EMAR: m/z (M+) = 425,0720 (Calculado para C17H19N3O6S2 = 425,0715).
2- (4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazm-1-ilsulfoml)pmdm-1-6xido (19). RMN de 1H
(400 MHz, DMSO-de) 8: 8,27 (m, 1H), 7,90 (m, 1H), 7,57 (m, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,06 (m, 3H), 4,30 (m, 4H), 3,40 (m, 4H), 2,87 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 4,618 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,630 min. EmAR: m/z (M+) = 441,0669 (Calculado para C17H19N3O7S2 = 441,0664).
1-(2,6-difluorofenilsulfonil)-4-(4-metoxifenilsulfonil)piperazina (21). RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 8: 7,66 (m, 2H), 7,54 (m, 2H), 7,02 (m, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,35 (m, 4H), 3,09 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,829 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,904 min. EMAR: m/z (M+) = 432,0633 (Calculado para C17H18F2N2O5S2 = 432,0625).
1,4-bis(2,6-difluorofenilsulfonil)piperazina (22). RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,54 (m, 2H), 7,04 (t, 4H, J = 12 Hz), 3,40 (s, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,851 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,911 min. EMAR: m/z (M+) = 438,0331 (Calculado para C16H14F4N2O4S2 = 438,034).
1-(2,6-difluorofemlsulfoml)-4-(3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepm-7-ilsulfoml)piperazma (23). RMN de 1H
(400 MHz, DMSO-de) 8: 7,72 (m, 1H), 7,31-7,18 (m, 4H), 7,11 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,22 (dt, J = 17,8 Hz, 4 Hz), 3,18 (m, 4H), 2,98 (m, 4H), 2,14 (m, 2h). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,973 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,925 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0747 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-ilsulfonil)-4-(2,6-difluorofenilsulfonil)piperazina (24). RMN de 1H (400 MHz, DMSO- de) 8: 7,75 (m, 1H), 7,29 (m, 2H), 7,22 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), 7,07 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,17 (s, 2H), 3,17 (m, 4H), 2,99 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,741 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,879 min. EMAR: m/z (M+) = Calculado para C17H16F2N2O6S2 = 446,0418).
1-(2,6-difluorofenilsulfonil)-4-(naftalen-2-ilsulfonil)piperazina (26). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 8,39 (s, 1H), 8,18-8,03 (m, 3H), 7,76-7,56 (m, 4H), 7,14 (m, 2H), 3,20-3,17 (m, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,532 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,814 min. EmAR: m/z (M+) = 452,0673 (Calculado para C20H18F2N2O4S2 = 452,0676).
1-(2,6-difluorofenilsulfonil)-4-(2,2-dimetilcroman-6-ilsulfonil)piperazina (27). RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,54 (m, 1H), 7,43 (m, 2H), 7,03 (m, 2H), 6,5 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 3,36 (m, 4H), 3,11 (m, 4H), 2,81 (m, 2H), 1,84 (m, 2H), 1,36 (s, 6H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,514 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,811 min. EMAR: m/z (M+) = 486,1100 (Calculado para C21H24F2N2O5S2 = 486,1095).
5-(4-(2,6-difluorofenilsulfonil)piperazin-1-ilsulfonil)-1-methil-1H-indol (28). RMN de 1H (400 MHz, DM-SO-de) 8: 7,94 (s, 1H), 7,62 (m, 2H), 7,54 (d, 1H, J = 3,1 Hz), 7,42 (m, 1H), 7,19 (t, 2H, J = 9,0 Hz), 6,63 (d, 1H, J = 2,9 Hz), 3,85 (s, 3H), 3,15 (m, 4H), 2,95 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,893 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,914 min. EMAR: m/z (M+) = 455,0793 (Calculado para C19H19F2N3O4S2 = 455,0785).
5-(4-(2,6-difluorofenilsulfonil)piperazin-1-ilsulfonil)-2-metilbenzo[d]tiazol (29). RMN de 1H (400 MHz, DMSO- de) 8: 8,51 (s, 1H), 8,07 (m, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,64 (m, 1H), 7,20 (m, 2H), 3,09 (m, 8H), 2,86 (s, 3H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,729 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,882 min; EMAR: m/z (M+) = 473,0353 (Calculado para C18H17F2N3O4S3 = 473,0349).
1-(2,6-difluorofenilsulfonil)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)piperidina (30). RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,52 (m, 1H), 7,35-7,26 (m, 2H), 7,07-6,97 (m, 3H), 4,40-4,28 (m, 4H), 4,08-4,00 (m, 2H), 2,92 (m, 1H), 2,66 (t, 2H, J = 11,93 Hz), 2,17-2,08 (m, 2H), 1,80-1,67 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,584 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,853 min; EmAR: m/z (M+) = 459,0631 (Calculado para C19H19F2NO6S2 = 459,0622).
5
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50
55
1-(2,6-difluorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-1,4-diazepano (31). RMN de 1H
(400 MHz, CDCI3) 8: 7,50 (m, 1H), 7,28 (m, 2H), 7,02 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 4,32 (m, 4H), 3,56 (m, 4h), 3,41 (m, 4H), 2,05 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,8l2 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,891 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0731 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
N-(2-(2,6-difluorofemlsulfonamido)etil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (32). RMN de 1H
(400 MHz, CDCI3) 8: 7,54 (m, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,06 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 5,37 (b, 1H), 4,73 (b, 1H), 4,31 (m, 4H), 3,25 (m, 2H), 3,14 (m, 2H). EMcL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 4,986 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,711 min. EMAR: m/z (M+) = 434,0434 (Calculado para C16H16F2N2O6S2 = 434,0418).
N-(3-(2,6-difluorofemlsulfonamido)propil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (33). RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,52 (m, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,04 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,22 Hz), 5,43 (t, 1H, J = 6,46 Hz), 4,85 (b, 1H), 4,31 (m, 4H), 3,21 (c, 2H, J = 6,26 Hz), 3,05 (t, 2H, J = 6,06 Hz), 1,74 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,115 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,730 min. EMAR: m/z (M+) = 448,0571 (Calculado para C17H18F2N2O6S2 = 448,0574).
N-(4-(2,6-difluorofemlsulfonamido)butil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (34). RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,49 (m, 1H), 7,31 (m, 2H), 7,02 (m, 2H), 6,91 (d, 1H, J = 8,22 Hz), 5,03 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,28 (m, 4H), 3,06 (m, 2H), 2,89 (m, 2H), 1,54 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,238 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,757 min. EMAR: m/z (M+) = 462,0739 (Calculado para C18H20F2N2O6S2 = 462,0731).
N-(5-(2,6-difluorofemlsulfonamido)pentil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (35). RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,52 (m, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,04 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 5,00 (b, 1H), 4,32 (m, 4H), 3,07 [0103] (c, 1H, J = 6,65 Hz), 2,91 (t, 1H, J = 6,85 Hz), 2,70 (b, 1H), 1,50 (m, 4H), 1,32 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,450 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,798 min. EMAR: m/z (M+) = 476,0899 (Calculado para C19H22F2N2O6S2 = 476,0877).
N-(6-(2,6-difluorofemlsulfonamido)hexil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (36) RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,52 (m, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,04 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 4,99 (b, 1H), 4,32 (m, 4H), 3,08 (m, 2H), 2,91 (m, 2H), 1,72 (b, 1H), 1,47 (m, 4H), 1,27 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,629 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,836 min. eMaR: m/z (M+) = 490,1056 (Calculado para C20H24F2N2O6S2 = 490,1044).
N-((frans)-4-(2,6-difluorofemlsulfonamido)ciclohexil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (37).
RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,49 (m, 1 H), 7,30 (m, 2H), 7,00 (m, 2H), 6,91 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 4,95 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,28 (m, 4H), 3,25 (b, 1H), 3,00 (b, 1H), 1,84 (m, 4H), 1,24 (m, 4H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,290 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,760 min. EMAR: m/z (M+) = 488,0895 (Calculado para C20H22F2N2O6S2 = 488,0887).
N-((c/s)-4-(2,6-difluorofemlsulfonamido)ciclohexil)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (38). RMN
de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,49 (m, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,00 (m, 2H), 6,90 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 5,21 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 4,29 (m, 4H), 3,42 (b, 1H), 3,20 (b, 1H), 1,45-1,65 (m, 8H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,507 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,803 min. EmAR: m/z (M+) = 488,0885 (Calculado para C20H22F2N2O6S2 = 488,0887).
N-(1-(2,6-difluorofemlsulfoml)piperidm-4-il)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (39). RMN de 1H
(CDCl3) 8: 7,50 (m, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,00 (m, 2H), 6,93 (d, 1H, J = 8,61 Hz), 4,86 (d, 1H, J = 6,65 Hz), 4,30 (m, 4H), 3,67 (m, 2H), 3,22 (m, 1H), 2,83 (t, 2H, J = 10,37 Hz), 1,86 (m, 2H), 1,56 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,514 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,825 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0744 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
N-(1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperidm-4-il)-2,6-difluorobencenosulfonamida (40). RMN
de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,50 (m, 1H), 7,31 (m, 2H), 7,01 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 4,96 (d, 1H, J = 6,65 Hz), 4,37 (m, 4H), 3,64 (m, 2H), 3,20 (m, 1H), 2,80 (t, 2H, J = 10,4 Hz), 1,89 (m, 2H), 1,55 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,511 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,825 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0733 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
N-(1-(2,6-difluorofemlsulfoml)pirrolidm-3-il)-2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-sulfonamida (41). RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) 8: 7,52 (m, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,03 (m, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 4,85 (b, 1H), 4,32 (m, 4H), 3,84 (m, 1H), 3,53 (m, 2H), 3,42 (m, 1H), 3,19 (c, 1H, J = 4,7 Hz), 2,11 (m, 1H), 1,87 (m, 1H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,339 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,789 min. EMAR: m/z (M+) = 460,0578 (Calculado para C18H18F2N2O6S2 = 460,0574).
N-(1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)pirrolidm-3-il)-2,6-difluorobencenosulfonamida (42). RMN
de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,51 (m, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,03 (m, 2H), 6,95 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 5,02 (b, 1H), 4,31 (m, 4H), 3,88 (m, 1H), 3,59 (m, 2H), 3,44 (m, 1H), 3,16 (c, 1H, J = 4,7 Hz), 2,08 (m, 1H), 1,88 (m, 1H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,339 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,792 min. EMAR: m/z
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
(M+) = 460,0587 (Calculado para C18H18F2N2O6S2 = 460,0574).
N-((1-(2,6-difluorofemlsulfoml)azetidm-3-il)methil)-2,3-dihidrobenzo[8][1,4]dioxme-6-sulfona-mide (43).
RMN de 1H (400 MHz, CDCI3) 8: 7,53 (m, 1), 7,30 (m, 2H), 7,05 (m, 2H), 6,94 (d, 1 H, J = 8,6 Hz), 4,40 (m, 1H) 4,30 (m, 4H), 4,04 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 3,66 (dd, 2H, J = 8,4; 5,65 Hz), 3,08 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 2,69 (m, 1H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,295 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,780 min. EMAR: m/z (M+) = 460,0582 (Calculado para C18H18F2N2O6S2 = 460,0574).
N-((1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)azetidm-3-il)metil)-2,6-difluorobencenosulfonamida (44).
RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 8: 7,51 (m, 1H), 7,27 (m, 2H), 7,00 (m, 3H), 5,23 (t, 1H, J = 6,06 Hz), 4,31 (m, 4H), 3,78 (t, 2H, J = 8,22 Hz), 3,47 (dd, 2H, J = 8,41; 5,67 Hz), 3,10 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 2,62 (m, 1H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,234 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,767 min. EMAR: m/z (M+) = 460,0583 (Calculado para C18H18F2N2O6S2 = 460,0574).
(S)-4-(2,6-difluorofemlsulfoml)-1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-2-methilpiperazma (45). RMN
de 1H (400 Hz, CDCh) 8: 7,55 (m, 1H), 7,26 (m, 2H), 7,04 (m, 2H), 6,92 (m, 1H), 4,30 (m, 4H), 4,21 (m, 1H), 3,84 (d, 1H, J = 12,1 Hz), 3,72 (d, 1H, J = 12,9 Hz), 3,61 (d, 1H, J = 12,1 Hz), 3,24 (td, J = 12,5, 3,13 Hz), 2,86 (dd,
IH, J = 12,1; 2,74 Hz), 2,72 (td, 1H, J = 11,9; 3,1 Hz), 1,13 (d, 3H, J = 6,7 Hz). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,873 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,905 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0736 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
(S)-1-(2,6-difluorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-2-metilpiperazma (48). RMN
de 1H (400 MHz, CDCla) 8: 7,50 (m, 1H), 7,22 (m, 2H), 7,00 (m, 3H), 4,33 (m, 5H), 3,92 (d, 1H, J = 13,7 Hz), 3,70 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 3,50 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 3,38 (m, 1H), 2,53 (dd, 1H, J = 11,4; 3,5 Hz), 2,39 (td, J = 11,8; 3,3 Hz),1,22 (d, 3H, J = 7,0 Hz). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,912 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,910 min. EMaR: m/z (M+) = 474,0726 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
(R)-1-(2,6-difluorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)-2-metilpiperazma (47). RMN
de 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,50 (m, 1H), 7,22 (m, 2H), 7,00 (m, 3H), 4,33 (m, 5H), 3,92 (d, 1H, J = 13,7 Hz), 3,70 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 3,50 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 3,38 (m, 1H), 2,53 (dd, 1H, J = 11,4; 3,5 Hz), 2,39 (td, 1H, J =
II, 8; 3,3 Hz), 1,22 (d, 3H, J = 7,0 Hz). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,910 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,912 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0727 (Calculado para C19H20F2N2O6S2 = 474,0731).
Smtesis de derivados de oxo-piperazina 49 y 50
Ilustrados por 49
Se uso el Procedimiento A para introducir el grupo 2,6-difluorosulfonilo.
Se disolvio 4-(2,6-difluorofenilsulfonil)piperazin-2-ona (500 mg, 1,81 mmol, 1 equiv.) en THF (5 ml) y se enfrio hasta -78 °C. A continuacion, se anadio LHMDS (1,85 ml de solucion de THF 1,0 M, 1,9 mmol, 1,05 equiv.) gota a gota, y se agito la solucion a -78 °C durante 1 h. Luego, se anadio una solucion de cloruro de 2,3- dihidrobenzo[8][1,4]dioxin-6-sulfonilo (510 mg, 2,17 mmol, 1,2 equiv.) en THF (2 ml) gota a gota a la solucion fria. Se agito la reaccion a -78 °C durante 15 minutos, luego se dejo calentar hasta la temperatura ambiente y se agito 1 h mas. Se inactivo cuidadosamente la reaccion con solucion acuosa saturada de cloruro de amonio (~5 ml) y se diluyo con acetato de etilo (~15 ml). Se lavo la capa organica dos veces con solucion acuosa saturada de cloruro de amonio, y una vez con salmuera, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro. Se disolvio el residuo en DMSO y se purifico mediante HPLC de fase inversa.
4-(2,6-difluorofemlsulfoml)-1-(2,3-dihidrobenzo[8][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazm-2-ona (49). RMN de 1H
(400 Hz, CDCh) 8: 7,58 (m, 1H), 7,29 (m, 3H), 7,03 (m, 2H), 4,31 (m, 4H), 4,07 (m, 2H), 3,81 (s, 2H), 3,47 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,631 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,858 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0372 (Calculado para C1aH16F2N2OyS2= 474,0367).
1-(2,6-difluorofemlsulfoml)-4-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxm-6-ilsulfoml)piperazm-2-ona (50). RMN de 1H
(400 MHz, CDCh) 8: 7,58 (m, 1H), 7,29 (m, 3H), 7,03 (m, 2H), 4,33 (m, 4H), 4,07 (m, 2H), 3,78 (s, 2H), 3,44 (m, 2H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion: 5,612 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion: 3,849 min. EMAR: m/z (M+) = 474,0366 (Calculado para C1aH16F2N2OyS2= 474,0367).
Ejemplo 2
El presente ejemplo ilustra realizaciones adicionales de los compuestos de Formula la:
Compuesto 122: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 10,35 (s, 1 H), 7,76 (d, J = 8,80 Hz, 3 H), 7,60 (d, J = 8,80 Hz, 2 H), 7,18-7,30 (m, 2 H), 3,14-3,20 (m, 4 H), 2,91-3,01 (m, 4 H), 2,08 (s, 3 H).
Compuesto 123: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 7,75 (s, 1 H), 7,19-7,37 (m, 4 H), 6,60 (d, J = 8,80 Hz, 2 H), 3,16 (d, J = 4,50 Hz, 4 H), 2,79-2,95 (m, 4 H); EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion, 5,128 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,748 min; EMAR: m/z (M+H+) = 417,0634 (Calculado para C16H-,yN3O4S2 = 417,0629).
5
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35
Compuesto 124: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 7,18 (m, 3 H), 6,98-7,09 (m, 2 H), 6,81-6,97 (m, 2 H), 4,18-4,36 (m, 4 H), 3,08-3,21 (m, 8 H), 1,66-1,83 (m, 2 H); EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion,
5.017 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,704 min; EmAR: m/z (M+H+) = 453,1035 (Calculado para C19H23N3O6S2 = 453,1028).
Compuesto 125: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 7,30-7,40 (m, 2 H), 7,13-7,23 (m, 2 H), 6,95-7,09 (m, 1 H), 6,52-6,65 (m, 2 H), 4,19-4,36 (m, 4 H), 3,20-3,28 (m, 2 H), 3,15 (m, 4 H), 3,02-3,12 (m, 2 H), 1,621,79 (m, 2 H). Procedimiento 1, tiempo de retencion, 5,100 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,741 min; EMAR: m/z (M+H+) = 453,1036 (Calculado para C17H15FN3OS = 453,1028).
Compuesto 126: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,16-10,29 (m, 1 H), 7,99-8,15 (m, 1 H), 7,76 (dd, J = 8,12; 0,88 Hz, 1 H), 7,50 (t, J = 8,02 Hz, 1 H), 7,39 (d, J = 8,02 Hz, 1 H), 6,81-6,99 (m, 2 H), 3,75 (s, 3 H), 3,35-3,44 (m, 2 H), 3,30 (m, 4 H), 3,23 (t, J = 5,77 Hz, 2 H), 2,04 (s, 3 H), 1,69-1,89 (m, 2 H); EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,907 min; EMAR: m/z (M+H+) = 503,1004 (Calculado para C20H23N3O6S2 = 503,0996).
Compuesto 127: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,31 (s, 1 H), 7,71 (m, 4 H), 6,76-7,00 (m, 2 H), 3,82 (s, 3 H), 3,16-3,32 (m, 8 H), 2,05 (s, 3 H), 1,78 (m, 2 H).
Compuesto 128: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 7,16-7,30 (m, 2 H), 6,99-7,10 (m, 1 H), 6,85-6,96 (m, 2 H), 4,29 (c, J = 5,09 Hz, 4 H), 3,82 (s, 3 H), 3,30-3,49 (m, 4 H), 3,14-3,25 (m, 4 H), 1,75 (m, 2 H). EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion, 5,897 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,782 min; EMAR: m/z (M+H+) = 504,0851 (Calculado para C20H22N2O7F2S2 = 504,0836).
Compuesto 129: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,17-10,35 (s, 1 H), 7,92-8,09 (m, 1 H), 7,71-7,85 (m, 1 H), 7,44-7,57 (m, 1 H), 7,24-7,39 (m, 1 H), 6,95-7,17 (m, 3 H), 4,15-4,41 (m, 4 H), 2,82-3,03 (m, 8 H), 2,04 (s, 3 H).
Compuesto 130: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,35 (s, 1 H), 7,76 (d, J = 8,80 Hz, 2 H), 7,58 (d, J = 8,80 Hz, 2 H), 7,08 (dd, J = 4,30; 2,35 Hz, 2 H), 6,98 (d, J = 9,00 Hz, 1 H), 4,29 (d, J = 3,72 Hz, 4 H), 2,91 (m, 8 H), 2,07 (s, 3 H).
Compuesto 131: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,24 (s, 1 H), 7,98-8,13 (m, 1 H), 7,72-7,79 (m, 1 H), (s, 1 H), 7,34-7,40 (m, 1 H), 7,18 (m, 2 H), 6,96-7,03 (m, 1 H), 4,20-4,35 (m, 4 H), 3,37-3,45 (m, 4 H), 3,093,22 (m, 4 H), 2,04 (s, 3 H), 1,70-1,82 (m, 2 H); EMcL: Procedimiento 1, tiempo de retencion, 5,131 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,744 min; EMAR: m/z (M+H+) = 495,1133 (Calculado para C21H25N3O7S2 = 495,1134).
Compuesto 132: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,25-10,36 (m, 1 H), 7,73 (m, 2 H), 7,67 (m, 2 H),
7.17 (m, 2 H), 7,01 (m, 1 H) 4,28 (d, J = 4,11 Hz, 4 H), 3,16 (m, 8 H), 2,05 (s, 3 H), 1,74 (m, 2 H).
Compuesto 133: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10,27 (s, 1 H), 7,94-8,08 (m, 1 H), 7,73-7,88 (m, 1 H), 7,51 (t, J = 8,02 Hz, 1 H), 7,32 (d, J = 8,02 Hz, 1 H), 6,89 (d, J = 11,54 Hz, 2 H), 3,84 (s, 3 H), 2,88-3,21 (m, 8 H), 2,04 (s, 3 H); EMCL: Procedimiento 1, tiempo de retencion, 5,296 min; Procedimiento 2, tiempo de retencion 3,773 min; EMAR: m/z (M+H+) = 489,0845 (Calculado para C19H21N3O6F2S2 = 489,0840).
imagen17
imagen18
Ejemplo 3
El presente ejemplo ilustra algunas de las propiedades de los compuestos de la invencion.
5 Reactivos: Kinase-Glo se obtuvo en Promega (Madison, Wi). ATP, PEP, LDH y NADH procedfan de Sigma. Los reactivos y disolventes se adquirieron en Sigma, Alfa Aesar, Acros, Enamine, Oakwood Products, Matrix Scientific o Chem-Impex International.
Ensayo acoplado a luciferasa de la piruvato quinasa luminiscente. Se determino la produccion de una senal luminiscente basada en la generacion de ATP por la piruvato quinasa usando la luciferasa de luciernaga de la 10 enzima dependiente de ATP. Se distribuyeron tres pl de mezcla de sustrato (a temperatura ambiente) en tampon de ensayo (imidazol 50 mM, pH 7,2, KCl 50 mM, MgCh 7 mM, Tween 20 al 0,01 %, BSA al 0,05 %) en placas de microtitulacion de 1.536 pocillos de fondo solido blanco de Kalypsys usando un dispensador a base de solenoide de valvula de frasco (Kalypsys). Las concentraciones finales de los sustratos del ensayo fueron ADP 0,1 mM y PEP 0,5 mM. Se suministraron 23 pl de compuesto con una herramienta de matriz de 1.536 alfileres, y se anadio 15 1 pl de mezcla de enzimas en tampon de ensayo (concentracion final, piruvato quinasa 0,1 nM, imidazol 50 mM,
pH 7,2, BSA al 0,05 %, 4 °C). Se incubaron las placas de microtitulacion a t.a. durante 1 hora y se anadieron 2 ul de mezcla de deteccion de luciferasa (Kinase-Glo, Promega a 4 °C protegida de la luz), y se leyo la luminiscencia con un ViewLux (Perkin Elmer) usando una exposicion de 5 segundos/placa. Los datos se normalizaron para los valores de AC50 para controlar las columnas que conteman la enzima no inhibida (n) y la inhibicion de AC100 (i) de 20 acuerdo con la siguiente ecuacion: Activacion (%) = [(c-n)/(n-i)] * 100, en la que c = compuesto; n = DMSO
5
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55
60
neutro; i = control sin enzima. Un % de actividad del 100% es aproximadamente un aumento del doble con respecto a la senal de ensayo basal (el % de activacion por FBP fue variable, pero la media fue del 100 %). El control de la activacion se realizo usando enzima al triple de la concentracion final. Los datos primarios de qHTS y los datos de confirmacion estan disponibles en PubChem (AID: 1.631, 1.634 y 1.751). El seguimiento de los analogos sintetizados se determino usando el mismo protocolo a excepcion de que las concentraciones de enzima para las isoformas PKM1, L y R fueron de 1 nM, 0,1 nM y 0,1 nM respectivamente (los AID de PubChem para los ensayos de bioluminiscencia de M1, L y R son 1.780, 1.781 y 1.782).
Ensayo secundario acoplado a lactato deshidrogenasa de piruvato quinasa fluorescente. Todos los compuestos tambien se ensayaron en un modo cinetico mediante el acoplamiento de la generacion de piruvato por la piruvato quinasa hasta el agotamiento de NADH a traves de la lactato deshidrogenasa. Para la pKM2, se dispensaron 3 pl de mezcla de sustrato (concentracion final, Tris-Cl 50 mM, pH 8,0, KCl 200 mM, MgCh 15 mM, PEP 0,1 mM, ADP 4,0 mM y NADH 0,2 mM) en placas de 1.536 pocillos de fondo solido negro de Kalypsys usando el dispensador de reactivos BioRAPTR Flying de Aurora Discovery (FRD; Beckton-Dickenson, Franklin Lakes, NJ) y se suministraron 23 nl de los compuestos usando una herramienta de alfileres de Kalypsys, y luego se anadio 1 pl de mezcla de enzimas (concentraciones finales, hPK-M2 10 nM y 1 pM de LDH). Las placas se colocaron inmediatamente en ViewLux (Perkin Elmer) y se determino la fluorescencia de NADH a intervalos de exposicion de 30 segundos durante entre 3 y 6 minutos. Los datos se normalizaron con respecto a la activacion no inhibida y CE100 usando activadores conocidos tales como fructosa-1,6-bis-fosfato. Los datos se han depositado en PubChem (AID: 1.540). El seguimiento de los analogos sintetizados se determino usando el mismo protocolo (los AID de PubChem para los ensayos de bioluminiscencia de L, M1 y R son 1.541, 1.542 y 1.543). Este ensayo tambien se uso para determinar los KM para PEP y ADP en presencia y ausencia de activador. La conversion de unidades fluorescentes a pmoles de NADH se realizo usando una curva patron de concentraciones conocidas de NADH. Los datos se recogieron en el Viewlux de Perkin Elmer.
Modo de accion. Se examino el modo de accion para cada uno de estos quimiotipos del candidato a traves del analisis de los activadores sobre la cinetica de la utilizacion de PEP y ADP por la enzima. Como se ha comentado, se sabe que la FBP activa de forma alosterica PKM2 mediante la induccion de un estado enzimatico con una alta afinidad hacia PEP. En ausencia de activador, hPK muestra una baja afinidad hacia PEP (Km ~1,5 mM). En presencia de 1 o FBP, el Km por PEP se redujo hasta 0,26 ± 0,08 mM o 0,1 ± 0,02 mM, respectivamente. La comparacion de la titulacion de ADP en presencia y ausencia de activadores muestra que estas cineticas no se ven afectadas significativamente (Km por ADP ~0,1 mM en cualquiera de las condiciones, Valores de Vmax en el 20 % entre sf). Por lo tanto, el candidato principal NCGC00030335 (la N,N- diarilsulfonamida 1 sustituida) aumento la afinidad de PKM2 hacia PEP (Figura 1A) aunque tuvo menos efecto sobre la cinetica de ADP (Figura 1B).
Identificacion de NCGC00030355 (1): siguiendo el qHTS, se sometieron los datos de CRC a un esquema de clasificacion para jerarquizar la calidad de los CRC segun lo descrito por Inglese y colaboradores (Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU. 2006, 103, 11473-11478) (vease la Figura 3). Los agentes, incluyendo NCGC00030335 (1), se seleccionaron para el seguimiento basandose en su jerarquizacion de las clases de curva. En resumen, se distribuyeron los CRC en cuatro clases. La Clase 1 contiene los CRC completos que muestran asmtotas superior e inferior, y valores de r2 > 0,9, La Clase 2 contiene los CRC incompletos que carecen de la asmtota inferior, y muestra valores de r2 superiores a 0,9, Las curvas de la Clase 3 son de la mas baja confianza, porque estan definidas por un unico punto de concentracion en el que la actividad minima aceptable se fija en 3 DT de la actividad media calculada a partir de la concentracion mas baja ensayada. Finalmente, la Clase 4 contiene compuestos que no muestran ningun CRC y, por lo tanto, se clasifican como inactivos.
La Figura 3 muestra un ejemplo de datos qHTS y un esquema de clasificacion para la asignacion de los datos de ajuste de curva resultantes en clases. En la parte superior, los datos de ajuste de curva de qHTS de AID 361 se reunieron en los criterios de clasificacion basados en las clasificaciones de curva 1-4. Debajo, se muestran ejemplos de curvas que se ajustan a los siguientes criterios de clasificacion: las curvas de la Clase 1 muestran dos asmtotas, un punto de inflexion y r2 > 0,9; las subclases 1a (azul) frente a 1b (naranja) se diferencian en la respuesta completa (> 80 %) frente a la respuesta parcial (< 80 %). Las curvas de la Clase 2 muestran una sola asmtota de mano izquierda y un punto de inflexion; las subclases 2a (azul) y 2b (naranja) se diferencian por una respuesta maxima y r2, >80 % y >0,9 o <80 % y <0,9, respectivamente. Las curvas de la Clase 3 tienen una sola asmtota de mano izquierda, sin punto de inflexion, y una respuesta >3DT de la actividad media del campo de la muestra. La Clase 4 define aquellas muestras que no presentan actividad a lo largo del intervalo de concentracion.
SAR de N,N’-diarilsulfonamidas sustituidas y analogos seleccionados. Se descubrio que la estructura candidata 1 identificada en la pantalla primaria posefa valores de AC50 frente a PKM2 de 0,063 ± 0,02 pM y 0,111 ± 0,03 pM y respuestas maximas frente a PKM2 (respecto a la activacion por FBP) del 122,1 % y 92,2%, respectivamente (Tabla 1). En el ensayo de LDH, que uso altos niveles de ADP de saturacion y bajos niveles de PEP (0,1 mM), se descubrio una mayor eficacia media, pero una potencia menor para el compuesto 1 que mostraba un valor de AC50 de 0,3 ± 0,1 pM, pero con una respuesta maxima del 224%. El enfoque inicial consistio en versiones simetricas de las N,N-diarilsulfonamidas. Como tal, se examino la simetna utilizando el heterociclo de 6-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxina (analogo 2) y el anillo de 4-metoxibenceno (analogo 3). Cada
5
10
15
20
25
30
35
40
45
analogo tema valores ligeramente reducidos de AC50 (270 nM y 171 nM, respectivamente). A partir de aqm, se mantuvo constante una unidad de aril-sulfonamida mientras se exploraba la SAR de la otra aril-sulfonamida. Los compuestos 6-18 son ejemplos representativos de esta estrategia, por lo que el heterociclo de 6-(2,3- dihidrobenzo[b][1,4]dioxina permanecio constante y el anillo de 4-metoxibenceno se cambio utilizando analogos de anillo de fenilo convencionales. Aunque hubo tendencias selectivas asociadas con los sustituyentes aceptores de electrones y donantes de electrones, en general, no hubo tendencia discernible asociada con ninguna de las estrategias. Las sustituciones de tamano pequeno y modesto fueron aceptadas en las posiciones orto, meta y para. Sin embargo, las sustituciones de moderadas a grandes no fueron toleradas en la posicion para. Esto se demostro comparando los analogos 11 y 12 en los que el reemplazo del sustituyente para-metoxi en 11 con el enlace para-n-propilo en 12 muestra una reduccion de la actividad (se observo esta tendencia general con numerosos analogos, no se muestran los datos). Las sustituciones mas eficaces incluyeron grupos aceptores de electrones en las posiciones 2 y 6 del anillo de fenilo [por ejemplo, 2,6-difluorobenceno (analogo 9, AC50 = 65 ± 25 nM, respuesta maxima = 94,4%), 2,6-difluoro-4-metoxibenceno (analogo 11, AC50 = 28 ± 9 nM, respuesta maxima = 91,8 %) y 2,6-difluoro-3-fenol (analogo 13, AC50 = 52 ± 14 nM, respuesta maxima = 95,3 %)]. En un intento de colocar una densidad de electrones adicional en la posicion orto de este anillo de fenilo, se sintetizo un analogo de piridina colocando el nitrogeno en la posicion 2 del anillo aromatico (analogo 18) y ademas se oxido al N-oxido 19. Este diseno no tuvo exito, ya que 19 mostro tanto una potencia reducida como una respuesta maxima (AC50 >10 pM en ambos ensayos). Dada la ventaja establecida de los analogos de di-fluoro, los presentes inventores siguieron realizando la seleccion para mantener constante el anillo de 2,6-difluorobenceno y variaron el lado opuesto con ambos anillos de fenilo sustituidos y diversos heterociclos. Se sintetizaron y se ensayaron numerosos analogos de esta clase, y los compuestos 21-29 son buenas representaciones de estas SAR de los analogos. Los diversos anillos de fenilo sustituidos, en general, dieron lugar a compuestos activos segun lo representado por 21 (AC50 = 90 ± 16 nM, respuesta maxima = 102,0%) y 22 (AC50 = 66 ± nM, respuesta maxima = 74,3%). Tanto el compuesto 21 como el 22 mostraron una actividad comparable en el ensayo de LDH acoplado con AC50 = 211 ± 50 nM (respuesta maxima = 124 ± 30) y 172 ± 29 nM (respuesta maxima = 85 ± 8 %), respectivamente. Sin embargo, ninguno proporciono mejoras significativas en la potencia o la respuesta maxima. La alteracion del heterociclo de la fraccion 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxina tuvo consecuencias variables. Se toleraron varios heterociclos incluyendo la fraccion 7-3,4-dihidro-2H- benzo[b][1,4]dioxepina) (analogo 23, AC50 = 103 ± 30 nM, respuesta maxima = 100,4%) y la fraccion 6-(2- metilbenzo[d]tiazol) (analogo 29, AC50 = 86 ±6 nM, respuesta maxima = 103,6 %). Ademas, en el ensayo de LDH, 23 y 29 mostraron potencias de ~0,5 pM con respuestas maximas de 109 ± 1 % y 156 ± 11 %. Los derivados de 2-naftilo y 6-(2,2-dimetilcromano) proporcionaron una mejora significativa en terminos de respuesta maxima (analogos 26 y 27, AC50 = 66 ± 4 nM y 93 ± 12 nM, respuesta maxima = 138,0 % y 119,3 % respectivamente). El compuesto 26 tambien mostro una buena respuesta en el ensayo de LDH con una AC50 = 220 ±53 nM y una respuesta maxima de 161 ± 29 %. Los derivados de sulfona que se exploraron mostraron una perdida de potencia. Curiosamente, esta perdida fue mas grave cuando la fraccion sulfona unio el sistema de anillo de piperidina al sistema de 6-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxina en relacion con los anillos de fenilo sustituidos (es decir, 2,6-difluorofenilo) segun lo ilustrado por los analogos 19 y 30 (AC50 = 254 ± 47 nM y 863 ± 56 nM, respuesta maxima = 104,3 % y 110,0 %, respectivamente, tambien se observaron valores similares en el ensayo de LDH).
TABLA 1
imagen19
en la que n = 1 para los compuestos 1-30; n = 2 para el compuesto 31; R3-R10
= H para los compuestos 1-31.
0 +■» in <a CL C E 0 0
X 'o' CM O' TO n n >0 n CM >< Q_ (/) £ O a:
1
N 4-metoxifenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,111 ± 0,03 92,2 ± 12,0
2
N 6-(2,3-dihidro- benzo[bl[1,41dioxinilo) 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,270 ± 0,08 89,7 ± 2,2
3
N 4-metoxifenilo 4-metoxifenilo 0,171 ± 0,01 87,6 ± 16,2
4
N 4-cianofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,029 ± 0,02 44,1 ± 6,1
5
N 4-clorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,154 ± 0,08 99,6 ± 2,5
6
N 4-fluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,094 ± 0,03 99,7 ± 4,2
7
N 3-fluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,316 ± 0 106,7 ± 8,8
8
N 2-fluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,089 ± 0,03 114,4 ± 4,0
9
N 2,6-difluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,065 ± 0,03 94,4 ± 2,8
10
N 2,4,5-trifluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,090 ± 0,01 104,9 ± 7,6
11
N 2,6-difluoro-4-metoxifenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,028 ± 0,01 91,8 ± 9,6
12
N 2,5-difluoro-3-propilfenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,757 ± 0,22 69,2 ± 10,4
13
N 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,052 ± 0,01 95,3 ± 8,4
14
N 2,4-difluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,124 ± 0,03 112,9 ± 6,3
15
N Fenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,202 ± 0,04 108,2 ±4,3
16
N 3-(trifluorometil)fenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,209 ± 0,07 39,3 ± 6,2
17
N 3-metoxifenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,113 ± 0,04 90,0 ± 4,5
18
N 2-piridilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,542 ± 0,04 103,1 ± 6,6
19
N 2-piridil-1-oxido 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) >10 81,5 ± 3,2
21
N 4-metoxifenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,090 ± 0,02 102,0 ± 9,2
22
N 2,6-difluorofenilo 2,6-difluorofenilo 0,066 ± 0,01 74,3 ± 9,8
23
N 2,6-difluorofenilo 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4] dioxepina 0,103 ± 0,03 100,4 ± 6,6
24
N 2,6-difluorofenilo 5-benzo[d][1,3]dioxinilo 0,191 ± 0,06 61,0 ± 1,2
26
N 2,6-difluorofenilo 2-naftalenilo 0,066 ± 0 138,0 ± 11,3
27
N 2,6-difluorofenilo 6-(2,2-dimetilcroman)ilo 0,093 ± 0,01 119,3 ± 5,4
28
N 2,6-difluorofenilo 5-(1-metil-1 H-indolilo) 0,387 ± 0,07 91,1 ± 4,7
29
N 2,6-difluorofenilo 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) 0,086 ± 0,01 103,6 ± 5,8
30
CH 2,6-difluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,863 ± 0,12 110,0 ± 5,4
31
N 2,6-difluorofenilo 6-(2,3-dihidro-benzo[b][1,4] dioxinilo) 0,866 ± 0,15 119,9 ± 7,3
aLos valores de AC50 se determinaron utilizando el ensayo acoplado a la luciferasa de la piruvato quinasa luminiscente, y los datos representan los resultados de tres experimentos separados. bRes. Max. (Respuesta maxima) es el % de actividad que representa el % de activacion a 57 pM de compuesto.
En la Tabla 2, se exponen compuestos adicionales de Formula la y sus propiedades.
TABLA 2
KinaseGlo LDH
0 c 0 (/> O 3 Q. E 0 0
CM E 5 3 •£ S a. 0 ■c < TO cm£ 5 E *f <0 Q_ <D £ O' CM E 5 3 *f 8 a. 0 ■c < TO cm£ 5 E *f <0 CL V £ O'
X
'0' CM O'
122
N 2,6-difluorofenilo p-acetilaminofenilo
123
N 2,6-difluorofenilo p-aminofenilo 0,6506 82,61 0,4105 170,98
*124
N m-aminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[6][1,4] dioxinilo) 0,0326 88,94 0,0919 169,71
*125
N p-aminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 0,1031 86,64 0,1634 131,59
*126
N m-acetilaminofenilo 2,6-difluoro-4- metoxifenilo 2 6-difluoro-4- 2,9063 83,79 2,9063 114,61
*127
N p-acetilaminofenilo metoxifenilo
*128
N 2 6-difluoro-4- 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 0,0366 96,67 0,058 159,85
metoxifenilo
129
N m-acetilaminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo)
130
N p-acetilaminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo)
*131
N m-acetilaminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 0,8191 91,11 0,8191 123,67
*132
N p-acetilaminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 4,1053 81,07 2,5902 123,97
133
N m-acetilaminofenilo 2,6-difluoro-4- metoxifenilo 1,63 60,00 1,0312 94,88
134
N m-aminofenilo 2,6-difluoro-4- metoxifenilo 0,0231 87,00 0,073 141,67
135
N m-aminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 0,0411 82,08 0,1457 98,13
136
N m-(etilamino)fenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 0,081 63,00 nd nd
137
N p-aminofenilo 2,6-diflruorofenilo 0,0919 81,51 0,2058 154,42
138
N m-(N,N- 6-(2,3-dihidro- 0,092 54,00 nd nd
dimetilamino)fenilo
benzo[b][1,4]dioxinilo)
139
N p-aminofenilo 2,6-difluoro-4- metoxifenilo 0,1298 92,46 0,1834 166,00
140
N m-hidroxifenilo 2,6-difluorofenilo 0,1834 89,61 0,1834 148,41
2 6-difluoro-4-
*141
N m-aminofenilo metoxifenilo 0,2058 93,20 0,1457 157,96
142
N m-(metilamino)fenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 0,29 67,00 nd nd
*143
N p-aminofenilo 2,6-difluoro-4- metoxifenilo 1,2982 89,36 1,2982 150,25
2 6-difluoro-4-
144
N metoxifenilo 2 6-difluoro-4- 2-tiofenilo 0,0366 95,08 0,0517 125,28
145
N metoxifenilo 2-furanilo 0,1834 82,49 0,1157 106,13
146
N 2-amino-4-piridilo 6-(2,3-dihidro- benzo[b][1,4]dioxinilo) 1,6 81,00 nd nd
151
N p-aminofenilo 6-(2,3-dihidro- benzo[6][1,4]dioxinilo) 0,4105 91,84 0,3659 174,46
*n = 2; otros n = 1; R3-R10 = H.
aRes. Max. (respuesta maxima) es el % de actividad que representa el % de activacion a 57 pM de compuesto.
5 Se examinaron varias diaminas lineales y varios sistemas de anillo de nucleo de diamina alternativos. Para estos estudios, se mantuvo el heterociclo 2,6-difluorofenilo y 6-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxina) como los dos sustituyentes arilo para proporcionar una uniformidad comparativa. Los resultados se muestran en la Tabla 1, y demuestran que la piperazina y el 1,4-diazepano relacionado (analogo 31, AC50 = 866 nM, respuesta maxima =
119,9 %) teman claras ventajas frente a otras fracciones diamina. Se descubrio que las ligaciones con diaminas lineales que vanan de 2 a 6 atomos de carbono de longitud (analogos 32-36) tienen potencias reducidas, como se muestra en la Tabla 3. Las versiones cis y trans de la ligacion de ciclohexano-1,4-diamina confirieron una perdida similar en la potencia de activacion. Curiosamente, la version trans de este analogo fue 5 significativamente mejor que la version cis (analogos 37 y 38, AC50 = 2,11 ± 0,64 jM y 37,1 ± 5 jM, respuesta maxima del 90,8 % y 60,7 % respectivamente, AC50 de 7 ± 1,5 jM y 56 ± 11 % para ambos compuestos en el ensayo de LDH). Se examinaron numerosos analogos con una amina secundaria contenida en anillos de 4, 5 y 6 miembros y una amina primaria exodclica (analogos 39-44) y resultaron ser menos activos que los compuestos candidatos originales en ambos ensayos. Ademas de los derivados mostrados en la Tabla 3, se examinaron 10 numerosas diaminas biciclicas y espirodclicas (por ejemplo, 2,6-diazabiciclo[3.2.2]nonano y 2,7- diazaspiro[4.4]nonano), y resultaron ser menos activas que los correspondientes analogos de piperazina y 1,4- diazepano (datos no mostrados).
TABLA 3
imagen20
en la que R1 = 2,6-difluorofenilo; R2 = 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo).
Compuesto
n.°
L
hPK, M2 AC50 (HM)a
hPK, M2 Res. Max.
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
N,N’-(etan-1,2-dnlo)
N,N’-(propan-1,3-dMlo)
N,N’-(butan-1,4-dnlo)
N,N’-(pentan-1,5-dnlo)
N,N’-(hexan-1,6-dnlo)
N,N’-((trans)-ciclohexan-1,4-dMlo)
N,N’-((cis)- ciclohexan-1,4-diilo)
imagen21
>15 3,85 ± 0,53 7,97 ± 4,05 2,33 ± 0,16 4,83 ± 0,31 2,11 ± 0,48 >35
60,3 ± 20,6 105.7 ± 5,1 113,0 ± 14,6 113,9 ± 1,4 110,4 ± 3,0 90,8 ± 12,4 60.7 ± 5,6
3,69 ± 1,26
100,9 ± 1,9
9,00 ± 4,5
99,6 ± 3,1
>15
82,4 ± 18
>10
83,7 ± 24,2
4,47 ± 0
93,3 ± 9
3,05 ± 0,2
108,3 ± 5,3
Los valores de AC50 se determinaron utilizando el ensayo acoplado a luciferasa de piruvato quinasa luminiscente, y los datos representan los resultados de tres experimentos separados. bRes. Max. (respuesta maxima) es el % de actividad que representa el % de activacion a 57 jM de compuesto.________________
15 Se realizaron investigaciones adicionales en sustituciones directamente sobre el anillo de piperazina. Con este fin, se sintetizaron varios anillos de piperazina y se evaluaron con una sola adicion de metilo proximal a bien el heterociclo 2,6-difluorofenilo o 6-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxina). Se dio una consideracion adicional a la estereoqmmica absoluta del grupo metilo. Los resultados se detallan en la Tabla 43, y muestran que estos
analogos eran menos potentes que los sistemas de anillos sin modificar. Otra modificacion del anillo de piperazina fue la incorporacion de una fraccion carbonilo alfa a los nitrogenos del anillo. En este caso, la conversion de amina a lactama proximal al heterociclo de 6-(2,3-dihidrobenzo[5][1,4]dioxina) dio lugar a un derivado activo (analogo 49, AC50 = 114 ± 10 nM, respuesta maxima = 105,1 %; el ensayo de LDH mostro AC50 = 5 0,44 ± 0,24 |jM, respuesta maxima = 87 ± 37 %). La misma conversion de amina a lactama adyacente al 2,6-
difluorobenceno dio lugar a una perdida de potencia (analogo 50, AC50 = 2,42 ± 0,94 jM, respuesta maxima = 96,9 %; el analisis de LDH mostro AC50 = 3,16 jM, respuesta maxima = 82 %). Las actividades de estos agentes demuestran una vez mas la falta de SAR simetrica para este quimiotipo.
TABLA 4
a
Compuesto
n.° hPK, M2 AC50 (MM)a hPK, M2 Res. Max.b
45
4,34 ± 0,74 109,0 ± 9,4
47
9,18 ± 2,56 107,6 ± 9,9
48
2,96 ± 0,2 107,9 ± 8,4
49
0,114 ± 0,02 105,1 ± 9
50
2,42 ± 0,16 96,9 ± 5,6
aLos valores de AC50 se determinaron utilizando el ensayo acoplado a luciferasa de piruvato quinasa luminiscente, y los datos representan los resultados de tres experimentos separados. bRes. Max. (respuesta maxima) es el % de actividad que representa el % de activacion a 57 jM de compuesto.
10 Selectividad de los analogos de W,W’-diarilsulfonamida seleccionados. Con una mejor comprension de la SAR para este quimiotipo, los presentes inventores se ocuparon de la activacion selectiva de PKM2 frente a PKM1, PKR y PKL. Un compuesto de herramienta apropiado dirigido a delimitar ademas el papel de PKM2 como contribuyente fundamental en el efecto de Warburg requiere un alto grado de activacion selectiva de PKM2 con respecto a otras dianas de PK, prestando especial atencion a PKM1. Se ensayaron los miembros de cada 15 quimiotipo frente a PKM1, PKR y PKL. Se descubrio que todos los analogos de la clase de N,N’- diarilsulfonamidas eran inactivos frente a PKM1. Esto coincide con la falta de regulacion alosterica para la isoforma de PKM1. Los datos variaron de un compuesto a otro, sin embargo todos los compuestos mostraron una respuesta debil o nula frente a PKR (<32 % en ambos formatos de ensayo) y se observo una selectividad similar hacia PKL (respuesta maxima <30 %, ambos formatos de ensayo). La selectividad para NCGC00030335 20 (1) se muestra en la Figura 2; PKM2 (drculos vados), PKM1 (cuadrados rellenos), PKL (cuadrados vados) y
PKR (drculos rellenos).
Ejemplo 4
El presente ejemplo ilustra algunas de las propiedades de un compuesto de Formula III:
25 TABLA 8
imagen22
Se ha de interpretar que el uso de los terminos "un" y "una", y "el" y “ella”, y referentes similares en el contexto de la descripcion de la invencion (en especial, en el contexto de las siguientes reivindicaciones) engloba tanto el singular como el plural, a menos que se indique lo contrario en el presente documento o este claramente 30 contradicho por el contexto. Las expresiones "que comprende", "que tiene", "que incluye" y "que contiene" deben interpretarse como expresiones abiertas (es decir, que significan "incluyendo, pero sin limitacion") a menos que
se indique lo contrario. La mencion de los intervalos de valores en el presente documento pretende servir simplemente como un procedimiento abreviado para referirse individualmente a cada valor separado que este dentro del intervalo, a menos que se indique de otro modo en el presente documento, y cada valor separado se incorpora en la memoria descriptiva como si se citara individualmente en el presente documento. Todos los 5 procedimientos descritos en el presente documento pueden realizarse en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario en el presente documento o que este claramente contradicho por el contexto. El uso de todos y cada uno de los ejemplos o una expresion ilustrativa (por ejemplo, "tal como") proporcionado en el presente documento solo tiene por objeto ilustrar mejor la invencion, y no plantea una limitacion en el alcance de la invencion a menos que se reivindique lo contrario. Ninguna expresion de la memoria descriptiva debe 10 interpretarse como indicativo de un elemento no reivindicado como esencial para la practica de la invencion.
En el presente documento, se describen realizaciones preferidas de la presente invencion, incluyendo el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invencion. Las variaciones de esas realizaciones preferidas pueden resultar evidentes para los expertos en la materia al leer la descripcion anterior. Ademas, cualquier combinacion de los elementos descritos anteriormente en todas sus posibles variaciones esta 15 comprendida en la invencion, a menos que se indique de otro modo en el presente documento o este claramente contradicho por el contexto.

Claims (9)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en (i)-(iv) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; en la que (i) es un compuesto de Formula I:
    imagen1
    5 en la que L es N,N'-(etan-1,2-dnlo), N,N-(propan-1,3-dnlo), N,N'-(butan-1,4-dnlo), N,N'-(pentan-1,5-dnlo), N,N- (hexan-1,6-dnlo), N,N-((trans)-ciclohexan-1,4-dnlo), N,N'-((c/s)-ciclohexan-1,4-dnlo),
    imagen2
    10
    y R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo);
    (ii) es un compuesto de formula (la):
    imagen3
    15 en la que R1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, 4-metilfenilo, 2-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 4-
    clorofenilo, 4-fluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,4,5-trifluorofenilo, 4-cloro-2-fluorofenilo, 3-cloro-2-fluorofenilo, 4- trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-trifluorometilfenilo, 2,6-difluoro-4-metoxifenilo, 2,5- difluoro-4-propilfenilo, 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo, 2,4-difluorofenilo, 4-bromo-2-fluorofenilo, 3-metoxifenilo, 4- metoxifenilo, 4-cianofenilo, 2-nitrofenilo, 2-piridilo, 2-piridil-1-oxido, 2-(acido boronico)fenilo, 3-(acido 20 boronico)fenilo y 4-(acido boronico)fenilo; y
    R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo), 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo), 5-benzo[d][1,4]dioxinilo, 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4-oxazinilo), 2-naftalenilo, 6-(2,2-dimetilcromanilo), 5-(1-metil-1 H- indolilo), 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo) o 4-metoxifenilo,
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, cicloalquilo C3-C10, cicloalquenilo C3-C10, COR6, F y CF3 o, R3 y R4, tomados conjuntamente, forman C=O,
    R5 y R7 a R10 son independientemente H, alquilo C1-C10 o F,
    R6 es alquilo C1-C10, o cicloalquilo C3-C10 sustituido con alquilo o no sustituido, o cada uno de R7 y R8 y de R9 y R10, forman conjuntamente C=O; n = 1 a 3;
    y
    X es CH o N,
    (iii) es un compuesto de formula (la), en la que
    X es N, n = 1, R3-R10 son H, y R1 y R2 son los siguientes:
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es p-acetilaminofenilo;
    R es 2,6-difluorofenilo y R es p-aminofenilo;
    R es m-acetilaminofenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es m-aminofenilo y R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es m-aminofenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-(etilamino)fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo;
    R es m-(N,N-dimetilamino)fenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    12 R es m-hidroxifenilo y R es 2,6-difluorofenilo;
    12
    R es m-(metilamino)fenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 2-tiofenilo; 12 R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R es 2-furanilo;
    R es 2-amino-4-piridilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-aminofenilo y R2es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 y R2 son 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-cianofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-clorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 3-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4jdioxinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,4,5-trifluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,5-difluoro-3-propilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,4-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 3-trifluorometilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 3-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2-piridilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2-piridil-1-oxido y R^ es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo;
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-benzo[d][1,4]dioxinilo;
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pirido[3,2-d][1,4]oxazinilo); R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2-naftalenilo;
    R es 2,6-difluorofenilo y R es 6-(2,2-dimetilcromanilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-(1-metil-1H-indolilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo); o R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo);
    (iv) es un compuesto de formula (la), en la que
    X es N, n = 2, R3-R10 son H, y R1 y R2 son los siguientes:
    R1 es m-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es p-acetilaminofenilo y R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    12
    R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[d][1,4]dioxinilo);
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; o
    12
    R es p-aminofenilo y R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo.
  2. 2. El compuesto o una sal de la reivindicacion 1, en la que el compuesto es (ii) y se selecciona del grupo que
    consiste en (S)-4-(2,6-difluorofenilsulfonil)-1-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-2-metilpiperazina, (R)-4- (2,6-difluorofenilsulfonil)-1-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-2-metilpiperazina, (R)-1-(2,6-
    difluorofenilsulfonil)-4-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-2-metilpiperazina, (S)-1-(2,6-difluorofenilsulfonil)- 4-(2,3-dihidrobenzo[6][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)-2-metilpiperazina, 4-(2,6-difluorofenilsulfonil)-1-(2,3-
    dihidrobenzo[6][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)piperazin-2-ona, y 1-(2,6-difluorofenilsulfonil)-4-(2,3-
    dihidrobenzo[6][1,4]dioxin-6-ilsulfonil)piperazin-2-ona.
  3. 3. El compuesto o la sal de la reivindicacion 1, en el que el compuesto es (iii), en el que X es N, n = 1, R3-R10 son H, y R1 y R2 son los siguientes:
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es p-acetilaminofenilo;
    12 R es 2,6-difluorofenilo y R es p-aminofenilo;
    R es m-acetilaminofenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es m-aminofenilo y R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es m-aminofenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-(etilamino)fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo;
    R es m-(N,N-dimetilamino)fenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R1 es m-hidroxifenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo;
    R es m-(metilamin)fenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 2-tiofenilo;
    12 R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R es 2-furanilo;
    12
    R es 2-amino-4-piridilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo); o R1 es p-aminofenilo y R2es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo).
  4. 4. El compuesto o la sal de la reivindicacion 1, en el que el compuesto es (iv), en el que X es N, n = 2, R3-R10 son H, y R1 y R2 son los siguientes:
    R1 es m-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-aminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es p-acetilaminofenilo y R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo;
    R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es p-acetilaminofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es m-aminofenilo y R2 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo; o
    12
    R es p-aminofenilo y R es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo
  5. 5. El compuesto o la sal de la reivindicacion 1, en el que el compuesto es (iii), en el que X es N, n = 1, R3-R10 es H, y R1 y R2 son los siguientes:
    R1 es 4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 y R2 son 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-cianofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-clorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 4-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 3-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[^][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2-fluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[^][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,4,5-trifluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluoro-4-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,5-difluoro-3-propilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluoro-3-hidroxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,4-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es fenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 3-trifluorometilfenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 3-metoxifenilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2-piridilo y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2-piridil-1-oxido y R2 es 6-(2,3-dihidro-benzo[6][1,4]dioxinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2,6-difluorofenilo;
    10
    15
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(3,4-dihidro-2H-benzo[d][1,4]dioxepinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-benzo[d][1,4]dioxinilo;
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 7-(4-metil-3,4-dihidro-2H-pyrido[3,2-b][1,4]oxazinilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 2-naftalenilo;
    R es 2,6-difluorofenilo y R es 6-(2,2-dimetilcromanilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 5-(1-metil-1H-indolilo);
    R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2-metilbenzo[d]tiazolilo); o R1 es 2,6-difluorofenilo y R2 es 6-(2,3-dihidrobenzo[d][1,4]dioxinilo).
  6. 6. Una composicion farmaceutica que comprende un compuesto o una sal de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, y un vehnculo farmaceuticamente aceptable.
  7. 7. El compuesto o la sal de cualquiera de las reivindicaciones 1-5 o la composicion farmaceutica de la reivindicacion 6 para su uso en el tratamiento de una enfermedad que responde a la activacion de la PK-M2 humana.
  8. 8. El compuesto, la sal o la composicion farmaceutica de la reivindicacion 7, en la que la enfermedad que responde a la activacion de la PK-M2 humana es cancer.
  9. 9. El compuesto, la sal o la composicion farmaceutica de la reivindicacion 8, en la que el cancer es cancer renal, cancer de ovario, cancer de mama, cancer del SNC, leucemia, cancer de prostata, cancer de pulmon no microcftico, cancer de colon o melanoma.
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