ES2620605T3 - Benzoazepinas sustituidas como moduladores de receptores tipo Toll - Google Patents

Abstract

Un compuesto con la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: **Fórmula** en el que: es un doble enlace o un enlace sencillo; R2 y R3 se seleccionan independientemente de H y alquilo C1-C6 o R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado con 3 a 7 miembros del anillo; uno de R7 y R8 es y el otro es hidrógeno; R4 es -NRcRd u -OR10; Rc y Rd son alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido con uno o más -OH; R10 es alquilo C1-C12 opcionalmente sustituido con uno o más -OH; Z es C y es un enlace doble o Z es N y es un enlace sencillo; Ra y Rb se seleccionan independientemente de H, alquilo C1-C12, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C12 y Re, en los que el alquilo C1-C12 está opcionalmente sustituido con uno o más -OR10 o Re, Re se selecciona de -NH2, -NH(alquilo C1-C12) y -N(alquilo C1-C12)2; R1 está ausente cuando es un doble enlace o cuando es un enlace sencillo, N1-R1 y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb puede ser hidrógeno o estar ausente como sea necesario para satisfacer la insaturación del anillo y al menos se aplica uno de los A-D siguientes: A) R7 no es hidrógeno B) R8 no es hidrógeno y al menos uno de Ra y Rb no es hidrógeno; C) Z es N o D) N1-R1 y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo.

Description

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DESCRIPCION

Benzoazepinas sustituidas como moduladores de receptores tipo Toll Campo de la invencion

Esta invencion se refiere a metodos y composiciones para modular la funcion inmunitaria. Mas especfficamente, esta invencion se refiere a composiciones y metodos para modular la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8.

Antecedentes de la invencion

La estimulacion del sistema inmunitario, que incluye la estimulacion de la inmunidad innata o la inmunidad adaptativa o ambas, es un complejo fenomeno que puede dar lugar a resultados fisiologicos protectores o adversos para el huesped. En los ultimos anos, ha aumentado el interes por los mecanismos que subyacen a la inmunidad innata, que se cree que inicia y soporta la inmunidad adaptativa. Este interes ha sido impulsado en parte por el reciente descubrimiento de una familia de protefnas receptoras del reconocimiento del patron altamente conservado conocidas como receptores tipo Toll (los TLR, por sus siglas en ingles) que se cree que estan implicados en la inmunidad innata como receptores para patrones moleculares asociados a patogenos (los PAMP, por sus siglas en ingles). Las composiciones y los metodos utiles para modular la inmunidad innata son, por lo tanto, de gran interes ya que pueden afectar a propuestas terapeuticas para enfermedades que impliquen autoinmunidad, inflamacion, alergia, asma, rechazo de injertos, enfermedad del injerto contra el hospedador (GvHD, por sus siglas en ingles), infeccion, cancer e inmunodeficiencia.

Los receptores tipo Toll (los TLR) son protefnas transmembrana de tipo I que permiten a los organismos (incluyendo los mamfferos) detectar microbios e iniciar una respuesta inmunitaria innata (Beutler, B., Nature 2.004, 430: 257263). Contienen dominios citoplasmicos homologos y dominios extracelulares ricos en leucina y forman tfpicamente homodfmeros que detectan senales extracelulares (o internalizadas) e inician con posterioridad una cascada de transduccion de senales via moleculas adaptadoras tales como MyD88 (factor 88 de diferenciacion mieloide). Hay tal alta homologfa en los dominios citoplasmicos de los TLR que, inicialmente, se sugirio que existfan rutas de senalizacion similares para todos los TLR (Re, F., Strominger, J. L., Immunobiology 2.004, 209: 91-198). Por supuesto, todos los TLR pueden activar las cinasas NF-kB y MAP; sin embargo, los perfiles de liberacion de citocina/quimiocina procedentes de la activacion de TLR parecen unicos para cada TLR. Adicionalmente, la ruta de senalizacion que estimula los TLR es muy similar a la ruta que induce el receptor de citocina IL-1R. Esto puede ser debido a la homologfa que comparten estos receptores, es decir, los dominios TIR (homologfa Toll/1L-1R). Una vez que el dominio TIR se activa en los TLR y se consigue MyD88, resulta la activacion de la familia IRAK de las serina/treonina cinasas, que fomenta finalmente la degradacion de Ik-B y la activacion de NF-kB (Means T. K., et al. Life Sci. 2.000, 68: 241-258). Mientras parece que esta cascada se disena para permitir que los estfmulos extracelulares fomenten casos intracelulares, hay evidencia de que algunos TLR migran a endosomas donde tambien se puede iniciar senalizacion. Este procedimiento puede permitir el contacto fntimo con microbios fagocitados y encaja con la funcion que estos receptores desempenan en la respuesta inmunitaria innata (Underhill, D. M., et al., Nature 1.999, 401: 811-815). Este procedimiento tambien podia permitir acidos nucleicos huesped, liberados por tejidos danados (por ejemplo, en enfermedad inflamatoria) o muerte celular programada para provocar una respuesta via presentacion endosomal. Entre los mamfferos, estan los 11 TLR que coordinan esta respuesta rapida. Una hipotesis propuesta hace anos (Janeway, C. A., Jr., Cold Spring Harb. Syrup. Quant. Biol. 1.989, 54:113) de que la respuesta inmunitaria innata inicia la respuesta inmunitaria adaptativa a traves del patron de activacion de TLR producido por los microbios ahora ha sido corroborada. Asf, los patrones moleculares asociados a patogenos (los PAMP) presentados por un grupo diverso de organismos infecciosos da como resultado una respuesta inmunitaria innata que implica ciertas citocinas, quimiocinas y factores de crecimiento seguido por una respuesta inmunitaria adaptativa precisa adaptada al patogeno infeccioso via presentacion de antfgeno dando como resultado produccion de anticuerpos y generacion de celulas T citotoxicas.

Hace mucho que se aprecia el lipopolisacarido bacteriano gram-negativo (LPS, por sus siglas en ingles) como un adyuvante e inmunoestimulador y como una herramienta farmacologica para inducir una reaccion inflamatoria en mamfferos similar a choque septico. Usando una propuesta genetica, se identifico TLR4 como el receptor para LPS. El descubrimiento de que LPS es un agonista de tLR4 ilustra la utilidad de la modulacion de TLR para vacuna y tratamiento de enfermedades humanas (Aderem, A.; Ulevitch, R. J., Nature 2.000, 406: 782-787). Ahora se aprecia que varios agonistas de TLR pueden activar celulas B, neutrofilos, mastocitos, eosinofilos, celulas endoteliales y varios tipos de epitelios ademas de regular la proliferacion y la muerte celular programada de ciertos tipos de celulas.

De momento, TLR7 y TLR8, que son bastante similares, se han caracterizado como receptores para ARN monocatenario encontrado en compartimentos endosomales y asf se ha crefdo que son importantes para la respuesta inmunitaria para retos vfricos. Imiquimod, un farmaco antivfrico/contra el cancer, topico, homologado, se ha descrito recientemente como un agonista de TLR7 que ha demostrado eficacia clfnica en ciertos trastornos cutaneos (Miller R. L., et al., In. J. Immunopharm. 1.999, 21: 1-14). Este farmaco de moleculas pequenas se ha descrito como un mimetico estructural de ARNmc. TLR8 fue descrito primero en 2.000 (Du, X., et al., European Cytokine Network 2.000 (Sept.), 11 (3): 362-371) y se atribuyo rapidamente que estaba implicado en la respuesta

inmunitaria innata a infeccion vfrica (Miettinen, M., et al., Genes and Immunity 2.001 (Oct.), 2 (6): 349-355).

Recientemente, se ha indicado que algunos compuestos de imidazoquinolina que tienen actividad antivfrica son ligandos de TLR7 y TLR8 (Hemmi H., et al. (2.002) Nat. Immunol. 3: 196-200; Jurk M., et al. (2.002) Nat. Immunol. 3: 499). Las imidazoquinolinas son potentes activadores sinteticos de celulas inmunitarias con propiedades antivfricas y 5 antitumorales. Usando macrofagos de ratones naturales y deficientes en MyD88, Hemmi et al., indicaron recientemente que dos imidazoquinolinas, imiquimod y resiquimod (R848), inducen factor de necrosis tumoral (TNF, por sus siglas en ingles) e interleucina-12 (IL-12) y activan NF-icB solo en celulas naturales, consistentes con la activacion a traves de un TLR (Hemmi H., et al. (2.002) Nat. Immunol. 3: 196-200). Los macrofagos de ratones deficientes en TLR7 pero no otros TLR no produjeron citocinas detectables como respuesta a estas 10 imidazoquinolinas. Ademas, las imidazoquinolinas indujeron proliferacion dependiente de la dosis de celulas B esplenicas y la activacion de cascadas de senalizacion intracelular en celulas de ratones naturales, pero no de TLR7-/-. El analisis de luciferasa establecio que la expresion de TLR7 humano, pero no, TLR2 o TLR4, en celulas de rinon embrionico humano da como resultado activacion de NF-KB como respuesta a resiquimod. Los hallazgos de Hemmi et al., sugieren asf que estos compuestos de imidazoquinolina son ligandos no naturales de TLR7 que 15 pueden inducir senalizacion a traves de TLR7. Recientemente se ha indicado que R848 es tambien un ligando para TLR8 humano (Jurk M., et al. (2.002) Nat. Immunol. 3: 499).

Los derivados de benzazepina como moduladores de TLR se describen en la patente de EE.UU. 2010216989 y la patente de EE.UU. 2008234251.

A la vista del gran potencial terapeutico para los compuestos que modulan receptores tipo toll y a pesar del trabajo 20 que ya se ha realizado, continua existiendo una necesidad sustancial de extender su uso y los beneficios terapeuticos.

Resumen de la invencion

Las composiciones descritas en la presente memoria son utiles para modular las respuestas inmunitarias in vitro e in vivo. Tales composiciones encontraran uso en una serie de aplicaciones clfnicas, tal como en metodos para tratar y 25 evitar enfermedades que impliquen actividad inmunitaria no deseada, incluyendo enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias.

Especfficamente, la invencion se refiere a un compuesto con la formula I:

imagen1

o una sal del mismo, donde es un enlace doble o un enlace sencillo; R2 y R3 se seleccionan

30 independientemente de H y alquilo C1-C6 o R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado con 3 a 7 miembros de anillo; uno de R7 y Rs es

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y el otro es hidrogeno; R4 es -NRcRd u -OR10; Rc y Rd son alquilo C1-C6, donde el alquilo esta opcionalmente

sustituido con uno 0 mas -OH; R10 es alquilo C1-C12, donde el alquilo esta opcionalmente sustituido con uno 0 mas - i _j___

OH; Z es C y es un enlace doble 0 Z es N y --------es un enlace sencillo; Ra y Rb se seleccionan

independientemente de H, alquilo C1-C12, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C12 y Re, en los que el alquilo C1-C12 esta opcionalmente sustituido con uno 0 mas -OR10 0 Re, Re se selecciona de -NH2, -NH(alquilo C1-C12) y -N(alquilo C-i-

2 . 2 .

012)2; R1 esta ausente cuando es un doble enlace 0 cuando es un enlace sencillo, N1-R1 y uno de

Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb puede ser hidrogeno o estar ausente como sea necesario para satisfacer la insaturacion del anillo y al menos se aplica uno de los A-D siguientes: A) R7 no es hidrogeno B) Rs no es hidrogeno y al menos

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uno de Ra y Rb no es hidrogeno; C) Z es N o D) N1-R1 y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo.

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En una realizacion, R7 del compuesto de formula (I) es O 0 es • Adicionalmente, al

menos uno de Ra y Rb no es hidrogeno en el compuesto de formula (I) o, por ejemplo, uno de Ra y Rb es alquilo C1- C6 y el otro de Ra y Rb es hidrogeno. Ademas, el alquilo C1-C12 de formula (I) esta sustituido con Re. En una realizacion diferente, tanto Ra como Rb son alquilo C1-C12 o uno de Ra y Rb es Re y el otro Ra y Rb es hidrogeno. Por ejemplo, Re de formula (I) no es hidrogeno.

En una realizacion alternativa, N1 y uno de Ra o Rb de formula (I) se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb es hidrogeno, o esta ausente cuando sea necesario para satisfacer la insaturacion del anillo, donde el anillo es un anillo de 5 miembros 0, por

nOn nCn

ejemplo, el anillo es: 0

En una cierta realizacion, al menos uno de R2 y R3 en el compuesto de formula (I) no es hidrogeno o, por ejemplo, R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado, donde el carbociclo saturado es ciclopropilo. Alternativamente, Z es N en el compuesto de formula (I).

En una realizacion alternativa, R4 de formula (I) es -OR10, donde R10 es alquilo o es etilo. En otra realizacion, R4 de formula (I) es -NRcRd, donde ambos son alquilo 0 ambos son propilo. Por otra parte, en ciertas realizaciones, al

Of OH

menos uno de Rc 0 Rd es alquilo sustituido con un -OH y al menos uno de Rc y Rd es c y el Rc 0

Rd restante es propilo.

En algunas realizaciones, la invencion se refiere a un compuesto seleccionado de:

imagen5

imagen6

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y sales del mismo.

En algunas realizaciones, la sal de los compuestos de la invencion es una sal farmaceuticamente aceptable. Ademas, el compuesto es un antagonista de TLR8.

Tambien se describe un estuche para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 que comprende una primera

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composicion farmaceutica que comprende los compuestos de la invencion, describe supra e infra y opcionalmente instrucciones para uso. Adicionalmente, el estuche incluye una segunda composicion farmaceutica, donde la segunda composicion farmaceutica comprende un segundo compuesto para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8. El estuche tambien comprende instrucciones para la administracion simultanea, secuencial o separada de dichas primera y segunda composiciones farmaceuticas a un paciente con necesidad de las mismas.

La invencion descrita en la presente memoria tambien se refiere a una composicion farmaceutica, que comprende un compuesto o sal del mismo como se describe supra e infra junto con un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable. Adicionalmente, el compuesto de la invencion se usa como un medicamento para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 en un ser humano o animal, donde el metodo para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 incluye administrar a un paciente, con necesidad del mismo, una cantidad eficaz de un compuesto descrito en la presente memoria. Por otra parte, en algunas realizaciones, el compuesto se usa en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una afeccion autoinmunitaria en un ser humano o animal. Se describe en la presente memoria un metodo para modular el sistema inmunitario de un paciente que incluye administrar a un paciente con necesidad del mismo una cantidad eficaz de un compuesto supra e infra.

Por ejemplo, un compuesto de la invencion es un antagonista de TLR8. Un antagonista de TLR8 se caracteriza por la capacidad para inhibir la activacion de un receptor de TLR8 con un IC50 de 25 pM o menos. Por ejemplo, un antagonista de TLR8 inhibe la activacion de un receptor de TLR8 con un IC50 de aproximadamente 25 pM, 15 pM, 10 pM, 7,5 pM, 5 pM, 2,5 pM, 1,5 pM, 1 pM, 0,5 pM, 0,25 pM, 0,1 pM, 0,01 pM o aproximadamente 0,001 pM.

Por ejemplo, un compuesto de la invencion es un antagonista de TLR7. Un antagonista de TLR7 se caracteriza por la capacidad para inhibir la activacion de un receptor de TLR7 con un IC50 de 25 pM o menos. Por ejemplo, un antagonista de TLR7 inhibe la activacion de un receptor de TLR7 con un IC50 de aproximadamente 25 pM, 15 pM, 10 pM, 7,5 pM, 5 pM, 2,5 pM, 1,5 pM, 1 pM, 0,5 pM, 0,25 pM, 0,1 pM, 0,01 pM o aproximadamente 0,001 pM.

Por ejemplo, un compuesto de la invencion es un antagonista de TLR7/8. Un antagonista de TLR7/8 se caracteriza por la capacidad para inhibir, independientemente, la activacion de los receptores tanto TLR7 como TLR8 con un IC50 de 25 pM o menos. Por ejemplo, un antagonista de TLR7/8 inhibe la activacion de los receptores tanto TLR7 como TLR8, independientemente, con un IC50 de aproximadamente 25 pM, 15 pM, 10 pM, 7,5 pM, 5 pM, 2,5 pM, 1,5 pM, 1 pM, 0,5 pM, 0,25 pM, 0,1 pM, 0,01 pM o aproximadamente 0,001 pM.

Los compuestos de la invencion pueden usarse junto con otros agentes terapeuticos conocidos. De acuerdo con esto, esta invencion tambien se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion o una sal del mismo, junto con un segundo agente terapeutico.

Esta invencion describe ademas compuestos para uso en metodos para modular la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8, que comprenden poner en contacto una celula que exprese TLR7 y/o TLR8 con una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion o una sal del mismo. En un aspecto, el metodo inhibe la senalizacion inmunoestimuladora mediada por TLR7 y/o TLR8.

Esta invencion describe ademas compuestos para uso en metodos para modular inmunoestimulacion mediada por TLR7 y/o TLR8 en un individuo, que comprende administrar a un paciente con, o con riesgo de desarrollar, inmunoestimulacion mediada por TLR7 y/o TLR8, un compuesto de la invencion o una sal del mismo, en una cantidad eficaz para inhibir inmunoestimulacion mediada por TLR7 y/o TLR8 en el individuo.

Esta invencion describe ademas compuestos para uso en metodos para tratar o evitar una enfermedad o afeccion por modulacion de actividades celulares mediadas por TLR7 y/o TLR8, que comprenden administrar a un animal de sangre caliente, tal como un mamffero, por ejemplo, un ser humano, con, o con riesgo de, desarrollar dicha enfermedad o afeccion, un compuesto de la invencion o una sal del mismo.

Esta invencion describe ademas compuestos para uso en metodos para modular el sistema inmunitario de un mamffero, que comprende administrar a un mamffero un compuesto de la invencion, o una sal del mismo, en una cantidad eficaz para modular dicho sistema inmunitario.

Se proporciona ademas un compuesto de la invencion o una sal del mismo para uso como un medicamento en el tratamiento de las enfermedades o afecciones descritas en la presente memoria en un mamffero, por ejemplo, un ser humano, que padece dicha enfermedad o afeccion. Tambien se proporciona el uso de un compuesto de la invencion, una sal del mismo, en la preparacion de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades y afecciones descritas en la presente memoria en un mamffero, por ejemplo, un ser humano, que padece dicha enfermedad o afeccion.

Se proporciona ademas un compuesto de la invencion o una sal del mismo para uso como un medicamento en la prevencion de las enfermedades o afecciones descritas en la presente memoria en un mamffero, por ejemplo, un ser humano, expuesto a, o predispuesto a, la enfermedad o afeccion, pero el mamffero aun no experimenta o muestra sfntomas de dicha enfermedad o afeccion. Tambien se proporciona el uso de un compuesto de la invencion, una sal del mismo, en la preparacion de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades y afecciones descritas en

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la presente memoria en un mamffero, por ejemplo, un ser humano, que padece dicha enfermedad o afeccion.

La enfermedad o afeccion se selecciona de: cancer, enfermedad autoinmunitaria, enfermedad infecciosa, trastorno inflamatorio, rechazo de injerto y enfermedad del huesped contra el hospedador.

Tambien se describen estuches que comprenden uno o mas compuestos de la invencion o una sal del mismo. El estuche puede comprender ademas un segundo compuesto o una segunda formulacion que comprenda un segundo agente farmaceutico.

Se explicaran ventajas adicionales y caracterfsticas novedosas de esta invencion en parte en la descripcion que sigue y en parte seran evidentes para los expertos en la materia en el examen de la siguiente memoria descriptiva o pueden adquirirse por la practica de la invencion. Las ventajas de la invencion pueden realizarse y lograrse mediante los instrumentos, combinaciones, composiciones y metodos senalados en particular en las reivindicaciones adjuntas.

Breve descripcion de los dibujos

La Figura 1 es una grafica que representa la inhibicion dependiente de la dosis de la produccion de IL-8 en CMSP (celulas mononucleares de sangre periferica, por sus siglas en ingles) humanas estimuladas con CL075 siguiendo a administracion de ciertos compuestos descritos en la presente memoria.

La Figura 2 son once graficas que representan la inhibicion dependiente de la dosis de la produccion de IL-8 en CMSP humanas estimuladas con CL075 siguiendo a administracion de ciertos compuestos descritos en la presente memoria.

Descripcion detallada de la invencion

En algunos aspectos, la invencion proporciona composiciones y metodos utiles para modular la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8. Mas especfficamente, un aspecto de esta invencion proporciona un compuesto con la formula I:

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o una sal del mismo, donde -------- es un enlace doble o un enlace sencillo; R2 y R3 se seleccionan

independientemente de H y alquilo C1-C6 0 R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado con 3 a 7 miembros

imagen9

de anillo; uno de R7 y Rs es u o y el otro es hidrogeno; R4 es -NRcRd u -OR10; Rc y

Rd son alquilo C1-C6, donde el alquilo esta opcionalmente sustituido con uno 0 mas -OH; R10 es alquilo C1-C12, donde

imagen10

el alquilo esta opcionalmente sustituido con uno 0 mas -OH; Z es C y -------es un enlace doble 0 Z es N y

t

—es un en|ace sencillo; Ra y Rb se seleccionan independientemente de H, alquilo C1-C12, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C12 y Re, en los que el alquilo C1-C12 esta opcionalmente sustituido con uno 0 mas -OR10 0 Re, Re se

2

selecciona de -NH2, -NH(alquilo C1-C12) y -N(alquilo 01-012)2; R1 esta ausente cuando es un doble enlace 0

2

cuando es un enlace sencillo, N1-R1 y uno de Ra 0 Rb se unen para formar un heterociclo saturado,

parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb puede ser hidrogeno o estar ausente como sea necesario para satisfacer la insaturacion del anillo y al menos se aplica uno de los A-D siguientes: A) R7 no es hidrogeno; B) R8 no es hidrogeno y al menos uno de Ra y Rb no es hidrogeno; C) Z es N o D) N1-R1 y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo.

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imagen11

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En una realizacion, R7 del compuesto de formula (I) es O 0 es . Adicionalmente, al

menos uno de Ra y Rb no es hidrogeno en el compuesto de formula (I) o, por ejemplo, uno de Ra y Rb es alquilo y el otro de Ra y Rb es hidrogeno. Ademas, el alquilo de formula (I) esta sustituido con Re. En una realizacion diferente, tanto Ra como Rb son alquilo o uno de Ra y Rb es Re y el otro Ra y Rb es hidrogeno. Por ejemplo, Re de formula (I) no es hidrogeno.

En una realizacion alternativa, Ni y uno de Ra o Rb de formula (I) se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb es hidrogeno, o esta ausente cuando sea necesario para satisfacer la insaturacion del anillo, donde el anillo es un anillo de 5 miembros 0, por

Nc>

ejemplo, el anillo es: “ En una cierta realizacion, al menos uno de R2 y R3 en el compuesto de

formula (I) no es hidrogeno o, por ejemplo, R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado, donde el carbociclo saturado es ciclopropilo. Alternativamente, Z es N en el compuesto de formula (I).

En una realizacion alternativa, R4 de formula (I) es -OR10, donde R10 es alquilo o es etilo. En otra realizacion, R4 de formula (I) es -NRcRd, donde los dos son alquilo 0 los dos son propilo. Por otra parte, en ciertas realizaciones, al

...A ..-v. >6H

menos uno de Rc 0 Rd es alquilo sustituido con un -OH y al menos uno de Rc y Rd es Rd restante es propilo.

y el Rc 0

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto seleccionado de:

y sales del mismo.

Alternativamente, el compuesto se selecciona de

imagen13

imagen14

imagen15

y sales del mismo.

En una realizacion mas, el compuesto es

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y sales del mismo o

y sales del mismo.

En algunas realizaciones, la sal de los compuestos de la invencion es una sal farmaceuticamente aceptable. Ademas, el compuesto es un antagonista de TLR8.

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Tambien se describe en la presente memoria un estuche para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 que comprende una primera composicion farmaceutica que comprende los compuestos de la invencion, describe supra e infra y opcionalmente instrucciones para uso. Adicionalmente, el estuche incluye una segunda composicion farmaceutica, donde la segunda composicion farmaceutica comprende un segundo compuesto para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8. El estuche tambien comprende instrucciones para la administracion simultanea, secuencial o separada de dichas primera y segunda composiciones farmaceuticas a un paciente con necesidad de las mismas.

La invencion descrita en la presente memoria tambien se refiere a una composicion farmaceutica, que comprende un compuesto o sal del mismo como se describe supra e infra junto con un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable. Adicionalmente, el compuesto de la invencion se usa como un medicamento para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 en un ser humano o animal, donde el metodo para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 incluye administrar a un paciente, con necesidad del mismo, una cantidad eficaz de un compuesto descrito en la presente memoria. Por otra parte, en algunas realizaciones, el compuesto se usa en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una afeccion autoinmunitaria en un ser humano o animal. Se describe en la presente memoria un metodo para modular el sistema inmunitario de un paciente que incluye administrar a un paciente con necesidad del mismo una cantidad eficaz de un compuesto supra e infra.

Un aspecto de la invencion se refiere a una sal de un compuesto de la invencion, en el que la sal es una sal farmaceuticamente aceptable.

Por ejemplo, un compuesto de la invencion es un antagonista de TLR8. Un antagonista de TLR8 se caracteriza por la capacidad para inhibir la activacion de un receptor de TLR8 con un IC50 de 25 pM o menos. Por ejemplo, un antagonista de TLR8 inhibe la activacion de un receptor de TLR8 con un IC50 de aproximadamente 25 pM, 15 pM, 10 pM, 7,5 pM, 5 pM, 2,5 pM, 1,5 pM, 1 pM, 0,5 pM, 0,25 pM, 0,1 pM, 0,01 pM o aproximadamente 0,001 pM.

Por ejemplo, un compuesto de la invencion es un antagonista de TLR7. Un antagonista de TLR7 se caracteriza por la capacidad para inhibir la activacion de un receptor de TLR7 con un IC50 de 25 pM o menos. Por ejemplo, un antagonista de TLR7 inhibe la activacion de un receptor de TLR7 con un IC50 de aproximadamente 25 pM, 15 pM, 10 pM, 7,5 pM, 5 pM, 2,5 pM, 1,5 pM, 1 pM, 0,5 pM, 0,25 pM, 0,1 pM, 0,01 pM o aproximadamente 0,001 pM.

Por ejemplo, un compuesto de la invencion es un antagonista de TLR7/8. Un antagonista de TLR7/8 se caracteriza por la capacidad para inhibir, independientemente, la activacion de los receptores tanto TLR7 como TLR8 con un IC50 de 25 pM o menos. Por ejemplo, un antagonista de TLR7/8 inhibe la activacion de los receptores tanto TLR7 como TLR78, independientemente, con un IC50 de aproximadamente 25 pM, 15 pM, 10 pM, 7,5 pM, 5 pM, 2,5 pM, 1,5 pM, 1 pM, 0,5 pM, 0,25 pM, 0,1 pM, 0,01 pM o aproximadamente 0,001 pM.

Un aspecto descrito en la presente memoria es un estuche para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8, que comprende:

a) una primera composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion o sal del mismo y

b) opcionalmente instrucciones para uso.

En un aspecto, el estuche comprende ademas (c) una segunda composicion farmaceutica, en el que la segunda composicion farmaceutica comprende un segundo compuesto para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8. En un aspecto el estuche, comprende ademas instrucciones para la administracion simultanea, secuencial o separada de dichas primera y segunda composiciones farmaceuticas a un paciente con necesidad de las mismas.

Un aspecto de la invencion se refiere a una composicion farmaceutica, que comprende un compuesto de la invencion o sal del mismo, junto con un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.

Un aspecto de la invencion se refiere a un compuesto de la invencion para uso como un medicamento para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8 en un ser humano o animal. En una realizacion, la invencion se refiere a un compuesto de la invencion o sal del mismo, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una afeccion de crecimiento celular anormal en un ser humano o animal.

Un aspecto de la invencion se refiere a compuestos para uso en un metodo para tratar una afeccion mediada por TLR7 y/o TLR8, que comprende administrar a un paciente con necesidad del mismo, una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion o sal del mismo.

Un aspecto de la invencion se refiere a compuestos para uso en un metodo para modular el sistema inmunitario de un paciente, que comprende administrar a un paciente con necesidad del mismo, una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion o sal del mismo.

La invencion incluye un compuesto seleccionado de los compuestos enumerados en la Tabla 1. Los compuestos 76, 12, 65, 70 y 25 no son parte de la invencion.

Tabla 1.

Compuesto N°

Estructura

63

o N NHj

33

o. __/ 0

76

o M ;r" 0 Et NHS 0

12

0 o

65

o 0^0^^ NHj 0

74

C^^-- ° nh2

88

o ^jCC ^ vn^JU NHj 0

47

90

46

70

25

imagen17

imagen18

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imagen20

imagen21

3.173

3.348

3.260

imagen22

imagen23

imagen24

2.931

2.984

2.986

2.987

2.966

2.919

imagen25

imagen26

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o

imagen29

imagen30

2.976

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Compuesto N°

Estructura

3.000

O

2.922

O c/TD N-" H

2.929

O /S. A Q Cf N-' /

2.962

O Cr^CU^ 2-HCf H N-NH3 H

2.926

O N-'Nv H x

2.954

O crYi w- nh2

3.020

0 „ Jl ^ 0

5

En lo siguiente, invencion incluye invencion incluye invencion incluye invencion incluye invencion incluye invencion incluye invencion incluye invencion incluye invencion incluye

el termino "compuesto" se refiere al un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con un compuesto o sal del mismo con

termino "compuesto de la invencion". En un un valor de IC50 £ 25 pM para TLR8. En otro

un valor de IC50 £15 pM para TLR8. En otro

un valor de IC50 £10 pM para TLR8. En otro

un valor de IC50 £7,5 pM para TLR8. En otro

un valor de IC50 £5 pM para TLR8. En otro un valor de IC50 £2,5 pM para TLR8. En otro

un valor de IC50 £1,5 pM para TLR8. En otro

un valor de IC50 £1 pM para TLR8. En otro un valor de IC50 £0,5 pM para TLR8. En otro

aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la aspecto, la

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invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,25 pM para TLR8. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,1 pM para TLR8. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,01 pM para TLR8. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,001 pM para TLR8.

En un aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £ 25 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £15 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £10 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo, con un valor de IC50 £ 7,5 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £ 5 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £2,5 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £1,5 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £1 pM para TLR7. En otro aspecto, la invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,5 pM para TLR7. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,25 pM para TLR7. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,1 pM para TLR7. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,01 pM para TLR7. En otro aspecto, la

invencion incluye un compuesto o sal del mismo con un valor de IC50 £0,001 pM para TLR7.

En un aspecto, la invencion no incluye un compuesto o sal del mismo con un IC50 > 25 pM para TLR7. En un aspecto, la invencion no incluye un compuesto o sal del mismo con un IC50 > 25 pM para tLR8. En un aspecto, la invencion no incluye un compuesto o sal del mismo con un valor IC50 > 25 pM para TLR7 y para TLR8.

En una realizacion, la actividad antagonista de TLR7, TLR8 o TLR7/8 de un compuesto de la invencion se mide en relacion con la actividad de un agonista de TLR7, TLR8 o TLR7/8 conocido. Veanse, por ejemplo, los compuestos descritos en la publicacion de patente internacional PCT WO 2007/024612.

El termino "compuesto de la invencion" se refiere a compuestos ejemplificados y compuestos cubiertos bajo la formula descrita en la presente memoria.

El termino "sustituido", como se usa en la presente memoria, significa que uno o mas atomos de hidrogeno cualesquiera en el atomo designado es reemplazado con una seleccion del grupo indicado, siempre que no se exceda de la valencia normal del atomo designado y que la sustitucion de como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es ceto (es decir, =O), entonces de reemplazan 2 hidrogenos sobre el atomo. Dobles enlaces de anillo, como se usa en la presente memoria, son dobles enlaces que se forman entre dos atomos de anillo adyacentes (por ejemplo, C=C, C=N o N=N).

Una estructura qufmica que muestra una representacion de lfnea discontinua para un enlace qufmico indica que el enlace esta opcionalmente presente. Por ejemplo, una lfnea discontinua dibujada proxima a un enlace sencillo continuo indica que el enlace puede ser un enlace sencillo o un enlace doble.

El termino "alquilo" como se usa en la presente memoria se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente de cadena lineal o ramificada, saturado, que tiene uno a doce, incluyendo uno a diez atomos de carbono (C1-C10), uno a seis atomos de carbono (C1-C6) y uno a cuatro atomos de carbono (C1-C4), cuando el radical alquflico puede estar opcionalmente sustituido independientemente con uno o mas sustituyentes descritos a continuacion. Alquilo inferior significa un grupo alquilo que tiene uno a seis atomos de carbono (C1-C6). Los ejemplos de radicales alquflicos incluyen restos hidrocarbonados tales como, pero no limitado a: metilo (Me, -CH3), etilo (Et, -CH2CH3), 1 -propilo (n- Pr, n-propilo, -CH2CH2CH3), 2-propilo (i-Pr, i-propilo,-CH(CH3)2), 1-butilo (n-Bu, n-butilo, -CH2CH2CH2CH3), 2-metil-1- propilo (i-Bu, i-butilo,-CH2CH(CH3)2), 2-butilo (s-Bu, s-butilo, -CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propilo (t-Bu, t-butilo,- C(CH3)3), 1 -pentilo (n-pentilo, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentilo (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentilo (-CH(CH2CH3)2), 2- metil-2-butilo (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butilo (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-metil-1-butilo (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil- 1-butilo (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-hexilo (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-hexilo (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-hexilo (- CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-metil-2-pentilo (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentilo (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentilo (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-metil-3-pentilo (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-metil-3-pentilo (-

CH(CH2CHa)CH(CHa)2), 2,3-dimetil-2-butilo (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butilo (-CH(CH3)C(CH3)3, 1-heptilo y 1- octilo.

Los restos que reemplazan un atomo de hidrogeno en un radical "sustituido" incluyen, por ejemplo, halogeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, ceto, amino, alquilamino, dialquilamino, trifluorometilo, arilo, heteroarilo e hidroxilo.

El termino "alquenilo" se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente de cadena lineal o ramificada con dos a 10 atomos de carbono (C2-C10), incluyendo dos a seis atomos de carbono (C2-C6) y dos a cuatro atomos de carbono (C2-C4) y al menos un doble enlace e incluye, pero no se limita a, etenilo, propenilo, 1-but-3-enilo, 1-pent-3-enilo, 1- hex-5-enilo y similares, en los que el radical alquenilo puede estar sustituido opcionalmente independientemente con uno o mas sustituyentes descritos en la presente memoria e incluye radicales que tienen orientaciones "cis" y "trans", o alternativamente, orientaciones "E" y "Z". El termino "alquenilo" incluye alilo.

El termino "alquinilo" se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente lineal o ramificado de dos a doce atomos

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de carbono (C2-C12), incluyendo dos a 10 atomos de carbono (C2-C10), dos a seis atomos de carbono (C2-C6) y dos a cuatro atomos de carbono (C2-C4), conteniendo al menos un enlace triple. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, etinilo, propinilo, butinilo, pentin-2-ilo y similares, en los que el radical alquinilo puede estar opcionalmente sustituido independientemente con uno o mas sustituyentes descritos en la presente memoria.

Los terminos "carbociclo," "carbociclilo" o "cicloalquilo" se usan indistintamente en la presente memoria y se refieren a radical hidrocarbonado cfclico saturado o parcialmente insaturado que tiene de tres a doce atomos de carbono (C3- C12), incluyendo de tres a diez atomos de carbono (C3-C10) y de tres a seis atomos de carbono (C3-C6). El termino "cicloalquilo" incluye estructuras cicloalquflicas monocfclicas y policfclicas (por ejemplo, bicfclicas y tricfclicas) en las que las estructuras policfclicas incluyen opcionalmente un cicloalquilo saturado o parcialmente insaturado condensado a un anillo cicloalquflico o heterocicloalquflico saturado o parcialmente insaturado o un anillo arflico o heteroarflico. Ejemplos de grupos cicloalquflicos incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y similares. Los carbociclos bicfclicos presentan 7 a 12 atomos de anillo, por ejemplo, dispuestos como un sistema bicfclico [4.5], [5.5], [5.6] o [6.6] o 9 0 10 atomos de anillo dispuestos como un sistema bicfclico [5.6] o [6.6] o como sistemas de puente tales como biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[2.2.2]octano y biciclo[3.2.2]nonano. El cicloalquilo puede estar sustituido opcionalmente independientemente en una o mas posiciones sustituibles con uno o mas sustituyentes descritos en la presente memoria. Dichos grupos cicloalquflicos pueden estar opcionalmente sustituidos con, por ejemplo, uno o mas grupos independientemente seleccionados de: alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, halogeno, hidroxi, ciano, nitro, amino, monoalquil (C1 C6)amino, dialquil(C1-C6)amino, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, haloalquilo C1-C6, haloalcoxi C1-C6, aminoalquilo (C1-C6), monoalquil (C1- C6)aminoalquilo (C1-C6) y dialquil (C1C6)aminoalquilo (C1-C6).

Los terminos "heterocicloalquilo", "heterociclo" y "heterociclilo" se usan indistintamente en la presente memoria y se refieren a un radical carbocfclico saturado o parcialmente insaturado de 3 a 8 atomos de anillo en el que al menos un atomo del anillo es un heteroatomo seleccionado de nitrogeno, oxfgeno y azufre, siendo los atomos de anillo restantes C, donde uno o mas atomos de anillo pueden estar opcionalmente sustituidos independientemente con uno o mas sustituyentes descritos a continuacion. El radical puede ser un radical de carbono o radical heteroatomico. El termino "heterociclo" incluye heterocicloalcoxi. El termino incluye ademas sistemas de anillo condensado que incluyen un heterociclo condensado a un grupo aromatico. "Heterocicloalquilo" tambien incluye radicales en los que los radicales heterocfclicos se condensan con anillos aromaticos o heteroaromaticos. Los ejemplos de anillos heterocicloalquflicos incluyen, pero no se limitan a, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanilo, piperazinilo, homopiperazinilo, azetidinilo, oxetanilo, tietanilo, homopiperidinilo, oxepanilo, tiepanilo, oxazepinilo, diazepinilo, tiaxepinilo, 1,2,3,6-tetrahidropiridinilo, 2-pirrolinilo, 3-pirrolinilo, indolinilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, dioxanilo, 1,3-dioxolanilo, pirazolinilo, ditianilo, ditiolanilo, dihidropiranilo, dihidrotienilo, dihidrofuranilo, pirazolidinilimidazolinilo, imidazolidinilo, 3-azabicico[3,1,0]hexanilo, 3-azabiciclo[4.1.0]heptanilo,

azabiciclo[2.2.2]hexanilo, 3H-indolilquinolizinilo y N-piridilureas. Los restos espiro tambien se incluyen dentro del alcance de esta definicion. Los grupos anteriores, como derivados de los grupos enumerados anteriormente, pueden estar unidos a C o unidos a N en el caso de que lo mismo sea posible. Por ejemplo, un grupo procedente de pirrol puede ser pirrol-1-ilo (unido a N) o pirrol-3-ilo (unido a C). Ademas, un grupo procedente de imidazol puede ser imidazol-1-ilo (unido a N) o imidazol-3-ilo (unido a C). Un ejemplo de un grupo heterocfclico en el que 2 atomos de carbono del anillo se sustituyen con restos oxo (=O) es 1,1-dioxo-tiomorfolinilo. Los grupos heterocfclicos en la presente memoria son no sustituidos o, como se especifica, estan sustituidos en una o mas posiciones sustituibles con varios grupos. Por ejemplo, dichos grupos heterocfclicos pueden estar opcionalmente sustituidos con, por ejemplo, uno o mas grupos independientemente seleccionados de: alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, halogeno, hidroxi, ciano, nitro, amino, monoalquil (C1-C6)amino, dialquil(C1-C6)amino, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, haloalquilo C1- C6, haloalcoxi C1-C6, aminoalquilo (C1-C6), monoalquil (C1-C6)aminoalquilo (C1-C6) o dialquil (C1C6)aminoalquilo (C1- C6).

El termino "arilo" se refiere a un radical carbocfclico aromatico monovalente que tiene un unico anillo (por ej., fenilo), multiples anillos (por ej., bifenilo) o multiples anillos condensados en los que al menos uno es aromatico, (por ej., 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, naftilo, etc.), que esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente de, por ejemplo, halogeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, triflurometilo, arilo, heteroarilo e hidroxi.

El termino "heteroarilo" se refiere a un radical aromatico monovalente de anillos de 5, 6 o 7 miembros e incluye sistemas de anillo condensado (al menos uno de los cuales es aromatico) de 5-10 atomos que contiene al menos uno y hasta cuatro heteroatomos seleccionados de nitrogeno, oxfgeno y azufre. Ejemplos de grupos heteroarflicos son: piridinilo, imidazolilo, pirimidinilo, pirazolilo, triazolilo, pirazinilo, tetrazolilo, furilo, tienilo, isoxazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isotiazolilo, pirrolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, indolilo, benzimidazolilo, benzofuranilo, cinnolinilo, indazolilo, indolizinilo, ftalazinilo, piridazinilo, triazinilo, isoindolilo, pteridinilo, purinilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, tiadiazolilo, furazanilo, benzofurazanilo, benzotiofenilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, naftiridinilo, isobenzofuran-1(3H)-ona y furopiridinilo. Los restos espiro tambien se incluyen dentro del alcance de esta definicion. Los grupos heteroarflicos se sustituyen opcionalmente con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente de, por ejemplo, halogeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, haloalquilo, arilo, heteroarilo e hidroxi.

Los compuestos de esta invencion pueden poseer uno o mas centros asimetricos; dichos compuestos pueden

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producirse, por lo tanto, como estereoisomeros (R) o (S) individuales o como mezclas de los mismos. A menos que se indique de otro modo, la descripcion o nomenclatura de un compuesto particular en la memoria descriptiva y las reivindicaciones se destina a incluir ambos enantiomeros individuales, mezclas de diastereomeros, racemicos o de otro modo, de los mismos. De acuerdo con esto, esta invencion tambien incluye todos esos isomeros, incluyendo mezclas de diastereomeros, diastereomeros puros y enantiomeros puros de los compuestos.

Las mezclas de diastereomeros pueden separarse en sus diastereomeros individuales sobre la base de sus diferencias ffsicas y qufmicas por metodos conocidos para los expertos en la materia, por ejemplo, por cromatograffa o cristalizacion fraccionada. Los enantiomeros pueden separarse convirtiendo la mezcla de enantiomeros en una mezcla de diastereomeros por reaccion con un compuesto opticamente activo apropiado (por ejemplo, alcohol), separando los diastereomeros y convirtiendo (por ejemplo, hidrolizando) los diastereomeros individuales en los correspondientes enantiomeros puros. Los enantiomeros tambien se pueden separar por el uso de una columna HPLC quiral. Los metodos para la determinacion de la estereoqufmica y la separacion de estereoisomeros son conocidos en la tecnica (vease, la discusion en el Capftulo 4 de "Advanced Organic Chemistry", 4a edicion, J. March, John Wiley and Sons, Nueva York, 1.992).

En las estructuras mostradas en la presente memoria, en el caso de que no se especifique la estereoqufmica de cualquier atomo quiral particular, entonces se consideran todos los estereoisomeros y se incluyen como los compuestos de la invencion. Cuando se especifica la estereoqufmica mediante una cuna continua o lfnea discontinua que representa una configuracion particular, entonces ese estereoisomero se especifica y se define asf.

Un unico estereoisomero, por ejemplo, un enantiomero, sustancialmente exento de su estereoisomero puede obtenerse por resolucion de la mezcla racemica usando un metodo tal como formacion de diastereomeros usando agentes de resolucion opticamente activos (Eliel, E. y Wilen, S. Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 1.994; Lochmuller, C. H., (1.975) J. Chromatogr., 113 (3): 283-302). Las mezclas racemicas de compuestos quirales de la invencion pueden separarse y aislarse por cualquier metodo adecuado, incluyendo: (1) formacion de sales diastereomeras, ionicas, con compuestos quirales y separacion por cristalizacion fraccionada u otros metodos, (2) formacion de compuestos diastereomeros con reactivos de derivatizacion quirales, separacion de los diastereomeros y conversion en los estereoisomeros puros y (3) separacion de los estereoisomeros sustancialmente puros o enriquecidos directamente en condiciones quirales. Vease: Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology, Irving W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York (1.993).

En el metodo (1), las sales diastereomeras pueden formarse por reaccion de bases quirales enantiomericamente puras tales como brucina, quinina, efedrina, estrichnina, a-metil-13-feniletilamina (anfetamina) y similares con compuestos asimetricos que soportan funciones acidas, tales como acido carboxflico y acido sulfonico. Las sales diastereomeras pueden inducirse a separarse por cristalizacion fraccionada o cromatograffa ionica. Para la separacion de los isomeros opticos de aminocompuestos, la adicion de acidos carboxflicos o sulfonicos quirales, tales como acido canforsulfonico, acido tartarico, acido mandelico o acido lactico, puede dar como resultado la formacion de las sales diastereomeras.

Alternativamente, por el metodo (2), se hace reaccionar el sustrato que se tiene que resolver con un enantiomero de un compuesto quiral para formar un par diastereomero (E. y Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1.994, pag. 322). Los compuestos diastereomeros pueden formarse haciendo reaccionar compuestos asimetricos con reactivos de derivatizacion quirales, enantiomericamente puros, tales como derivados de mentilo, seguido por separacion de los diastereomeros e hidrolisis para proporcionar el enantiomero puro o enriquecido. Un metodo para determinar pureza optica implica preparar esteres quirales, por ejemplo, un ester mentflico tal como (-) cloroformiato de metilo, en presencia de base, o ester de Mosher, acetato de a-metoxi-a- (trifluorometil)fenilo (Jacob III, (1.982) J. Org. Chem. 47: 4.165), de la mezcla racemica y analizar en el espectro RMN la presencia de los dos enantiomeros o diastereomeros atropisomericos. Pueden separarse diastereomeros estables de compuestos atropisomericos y aislarse por cromatograffa normal y de fase inversa siguiendo metodos para separacion de naftil-isoquinolinas atropisomericas (patente internacional WO 96/15111). Por el metodo (3), puede separarse una mezcla racemica de dos enantiomeros por cromatograffa usando una fase estacionaria quiral (Chiral Liquid Chromatography (1.989) W. J. Lough, Ed., Chapman y Hall, Nueva York; Okamoto, (1.990) J. of Chromatogr. 513: 375-378). Se pueden distinguir enantiomeros enriquecidos o purificados por metodos usados para distinguir otras moleculas quirales con atomos de carbono asimetricos, tales como rotacion optica y dicrofsmo circular.

La presente descripcion se destina a incluir todos los isotopos de los atomos que se encuentran en los presentes compuestos. Los isotopos incluyen aquellos atomos con el mismo numero atomico pero diferentes numeros masicos. Como ejemplo general y sin limitacion, los isotopos de hidrogeno incluyen tritio y deuterio y los isotopos de carbono incluyen C-13 y C-14.

Ademas de los compuestos de la invencion, la invencion tambien incluye sales farmaceuticamente aceptables de dichos compuestos.

Una "sal farmaceuticamente aceptable", a menos que se indique de otro modo, incluye sales que retienen la eficacia

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biologica de los acidos y bases libres del compuesto especificado y que no son biologicamente o de otro modo indeseables. Un compuesto de la invencion puede poseer suficientes grupos acidos, suficientes grupos basicos o ambos grupos funcionales, y de acuerdo con esto reaccionar con cualquiera de una serie de bases inorganicas u organicas y acidos inorganicos y organicos, para formar una sal farmaceuticamente aceptable. Ejemplos de sales farmaceuticamente aceptables incluyen aquellas sales preparadas por reaccion de los compuestos de la presente invencion con un acido mineral u organico o una base inorganica, incluyendo tales sales: sulfatos, pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, monohidrogenofosfatos, dihidrogenofosfatos, metafosfatos, pirofosfatos, cloruros, bromuros, yoduros, acetatos, propionatos, decanoatos, caprilatos, acrilatos, formiatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butin-1,4-dioatos, hexin-1,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, sulfonatos, xilenosulfonatos, feilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, y-hidroxibutiratos, glicolatos, tartratos, metanosulfonatos, propanosulfonatos, naftaleno-1-sulfonatos, naftaleno-2- sulfonatos y mandelatos. Puesto que un unico compuesto de la presente invencion puede incluir mas de un resto acido o basico, los compuestos de la presente invencion pueden incluir mono, di o tri-sales de un unico compuesto.

Si el compuesto inventivo es una base, la sal farmaceuticamente aceptable deseada puede prepararse por cualquier metodo adecuado disponible en la tecnica, por ejemplo, tratamiento de la base libre con un compuesto acido, en particular un acido inorganico, tal como acido clorhfdrico, acido bromhfdrico, acido sulfurico, acido nftrico, acido fosforico y similares o con un acido organico, tal como acido acetico, acido maleico, acido succfnico, acido mandelico, acido fumarico, acido malonico, acido piruvico, acido oxalico, acido glicolico, acido salicflico, un acido piranosidflico tal como acido glucuronico o acido galacturonico, un alfa-hidroxiacido tal como acido cftrico o acido tartarico, un aminoacido tal como acido aspartico o acido glutamico, un acido aromatico tal como acido benzoico o acido cinamico, un acido sulfonico tal como acido p-toluenosulfonico o acido etanosulfonico o similares.

Si el compuesto inventivo es un acido, la sal farmaceuticamente aceptable deseada puede prepararse por cualquier metodo adecuado, por ejemplo, tratamiento del acido libre con una base inorganica u organica. Ejemplos de sales inorganicas adecuadas incluyen las formadas con metales alcalinos y alcalino-terreos tales como litio, sodio, potasio, bario y calcio. Ejemplos de sales de bases organicas adecuadas incluyen, por ejemplo, sales de amonio, dibencilamonio, bencilamonio, 2-hidroxietilamonio, bis(2-hidroxietil)amonio, feniletilbencilamina, dibenciletilendiamina y similares. Otras sales de restos acidos pueden incluir, por ejemplo, aquellas sales formadas con procafna, quinina y N-metilglucosamina, mas sales formadas con aminoacidos basicos tales como glicina, ornitina, histidina, fenilglicina, lisina y arginina.

La presente invencion tambien proporciona sales de compuestos de la invencion que no son necesariamente sales farmaceuticamente aceptables, pero que pueden ser utiles como compuestos intermedios para preparar y/o purificar compuestos de la invencion y/o para separar enantiomeros de compuestos de la invencion.

Cabe senalar que algunas de las preparaciones de los compuestos de la invencion descritos en la presente memoria pueden requerir la proteccion de funciones lejanas. La necesidad de dicha proteccion variara dependiendo de la naturaleza de la funcionalidad y las condiciones usadas en los metodos de preparacion y puede determinarse facilmente por los expertos en la materia. Dichos metodos de proteccion/desproteccion son conocidos para los expertos en la materia.

Los compuestos de la invencion encuentran uso en una variedad de aplicaciones. Por ejemplo, en ciertos aspectos la invencion proporciona metodos para modular la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8. Los metodos de la invencion son utiles, por ejemplo, cuando es deseable modificar la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8 como respuesta a un ligando de TLR7 y/o TLR8 adecuado o un agonista de senalizacion de TLR7 y/o TLR8.

Como se usa en la presente memoria, los terminos "ligando TLR7 y/o TLR8", "ligando para TLR7 y/o TLR8" y "agonista de senalizacion de TLR7 y/o TLR8" se refieren a una molecula, distinta de un compuesto de la invencion, que interactua directamente o indirectamente con TLR7 y/o TLR8 e induce senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8. En algunas realizaciones, un ligando TLR7 y/o TLR8 es un ligando natural, es decir, un ligando TLR7 y/o TLR8 que se encuentra en la naturaleza. En algunas realizaciones, un ligando TLR7 y/o TLR8 se refiere a una molecula distinta de un ligando natural de TLR7 y/o TLR8, por ejemplo, una molecula preparada por actividad humana.

El termino "modular" como se usa en la presente memoria con respecto a los receptores de TLR7 y/o TLR8 significa la mediacion de una respuesta farmaco-dinamica en un individuo (i) inhibiendo el receptor o (ii) afectando directa o indirectamente a la regulacion normal de la actividad del receptor.

El termino "agonista" se refiere a un compuesto que, junto con un receptor (por ejemplo, un TLR), puede producir una respuesta celular. Un agonista puede ser un ligando que se una directamente al receptor. Alternativamente, un agonista puede combinarse con un receptor de manera indirecta, por ejemplo, (a) formando un complejo con otra molecula que se una directamente al receptor o (b) dando como resultado de otro modo la modificacion de otro compuesto de manera que el otro compuesto se una directamente al receptor. Un agonista puede referirse como un agonista de un TLR particular (por ejemplo, un agonista de TLR7 y/o TLR8). El termino "agonista parcial" se refiere a un compuesto que produce una respuesta celular parcial pero no una completa.

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El termino "antagonista" como se usa en la presente memoria se refiere a un compuesto que compite con un agonista o agonista parcial para union a un receptor, bloqueandose de ese modo la accion de un agonista o agonista parcial sobre el receptor. Mas especfficamente, un antagonista es un compuesto que inhibe la actividad de un agonista de TRL7 o TLR8 en el receptor de TLR7 o TLR8, respectivamente. "Inhibir" se refiere a cualquier reduccion que se pueda medir de actividad biologica. Asf, como se usa en la presente memoria, "inhibir" o "inhibicion" pueden referirse como un porcentaje de un nivel normal de actividad.

En un aspecto de esta descripcion, un metodo para tratar o evitar una afeccion o trastorno tratable por modulacion de las actividades celulares mediadas por TLR7 y/o TLR8 en un individuo comprende administrar a dicho individuo una composicion que comprende un compuesto de la invencion en una cantidad eficaz para tratar o evitar la afeccion o trastorno. El termino "mediado por TLR7 y/o TLR8" se refiere a una actividad biologica o bioqufmica que resulta de la funcion de TLR7 y/o TLR8.

Las enfermedades y trastornos que pueden tratarse por los metodos de esta invencion incluyen, pero no se limitan a, cancer, enfermedades asociadas a inmunocomplejos, enfermedades o trastornos autoinmunitarios, trastornos inflamatorios, inmunodeficiencia, rechazo de injerto, enfermedad del injerto contra el hospedador, alergias, enfermedad cardiovascular, enfermedad fibrotica, asma, infeccion y sepsis. Mas especfficamente, los metodos utiles en el tratamiento de estas afecciones emplearan compuestos de la invencion que inhiban la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8. En algunos casos, las composiciones pueden usarse para inhibir la senalizacion mediada por TLR7 y/o TLR8 como respuesta a un ligando o agonista de senalizacion de TLR7 y/o TLR8. En otros casos, las composiciones pueden usarse para inhibir la inmunoestimulacion mediada por TLR7 y/o TLR8 en un individuo.

El termino "tratar' como se usa en la presente memoria, a menos que se indique de otro modo, significa al menos la mitigacion de una enfermedad o afeccion e incluye, pero no se limita a, modular y/o inhibir una enfermedad o afeccion existente y/o aliviar la enfermedad o afeccion a la que se aplica dicho termino o uno o mas sfntomas de dicha enfermedad o afeccion. El termino "tratamiento", como se usa en la presente memoria, a menos que se indique de otro modo, se refiere al acto de tratar como se define "tratar" inmediatamente anteriormente. El tratamiento terapeutico se refiere a tratamiento iniciado despues de observacion de los sfntomas y/o una presunta exposicion a un agente causante de la enfermedad o afeccion. En general, el tratamiento terapeutico puede reducir la importancia y/o duracion de los sfntomas asociados a la enfermedad o afeccion.

Como se usa en la presente memoria, "evitar" significa hacer que no se desarrollen los sfntomas clfnicos de una enfermedad o afeccion, es decir, inhibir el comienzo de una enfermedad o afeccion en un individuo que puede estar expuesto a, o estar predispuesto a, la enfermedad o afeccion, pero aun no experimenta o muestra sfntomas de la enfermedad o afeccion. Tratamiento profilactico significa que un compuesto de la invencion se administra a un individuo previamente a la observacion de sfntomas y/o una presunta exposicion a un agente causante de la afeccion (por ejemplo, un patogeno o carcinogeno). En general, el tratamiento profilactico puede reducir (a) la probabilidad de que un individuo que recibe el tratamiento desarrolle la afeccion y/o (b) la duracion y/o importancia de los sfntomas en el caso de que el individuo desarrolle la afeccion.

Como se usa en la presente memoria, los terminos "enfermedad autoinmunitaria", "trastorno autoinmunitario" y "autoinmunidad" se refieren a lesion aguda o cronica mediada de manera inmunologica a un tejido u organo derivado del huesped. Los terminos incluyen fenomenos autoinmunitarios tanto celulares como mediados por anticuerpos, asf como autoinmunidad especffica del organo y no especffica del organo. Las enfermedades autoinmunitarias incluyen diabetes sacarina dependiente de insulina, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistemico, esclerosis multiple, ateroesclerosis y enfermedad del intestino inflamado. Las enfermedades autoinmunitarias tambien incluyen, sin limitacion, espondilitis alquilosante, anemia hemolftica autoinmunitaria, sfndrome de Bechet, sfndrome de Goodpasture, enfermedad de Graves, sfndrome de Guillain Barre, tiroiditis de Hashimoto, trombocitopenia idiopatica, miastenia grave, anemia perniciosa, poliarteritis nodosa, polimiositis/dermatomiositis, esclerosis biliar primaria, soriasis, sarcoidosis, colangitis esclerosante, sfndrome de Sjogren, esclerosis sistemica (escleroderma y sfndrome de CREST), arteritis de Takayasu, arteritis temporal y granulomatosis de Wegener. Las enfermedades autoinmunitarias tambien incluyen algunas enfermedades asociadas a inmunocomplejos.

Como se usa en la presente en, el termino "enfermedad fibrotica" se refiere a enfermedades o trastornos que implican excesiva y persistente formacion de tejido cicatricial asociado a fallo de organos en una variedad de enfermedades cronicas que afectan a los pulmones, rinones, ojos, corazon, hfgado y piel. Aunque la remodelacion y cicatrizacion de tejidos es parte del procedimiento de curacion normal de las heridas, la lesion o agresion repetida puede conducir a cicatrizacion persistente y excesiva y, por ultimo, fallo de organos.

Las afecciones fibroticas incluyen: fibrosis pulmonar difusa, enfermedad renal cronica, incluyendo enfermedad renal diabetica; fibrosis hepatica (por ejemplo, enfermedad hepatica cronica (CLD, por sus siglas en ingles) ocasionada por agresiones continuas y repetidas al hfgado de causas tales como son hepatitis vfrica B y C, cirrosis alcoholica o enfermedad del hfgado graso no alcoholico (NAFLD, por sus siglas en ingles) o colangitis esclerosante primaria (PSC, por sus siglas en ingles), una enfermedad rara caracterizada por destruccion inflamatoria fibrosante de los conductos biliares en el interior y exterior del hfgado, conduciendo a estasis biliar, fibrosis hepatica y por ultimo a cirrosis, y enfermedad hepatica de fase terminal); fibrosis pulmonar (por ejemplo, fibrosis pulmonar idiopatica (IPF, por sus siglas en ingles)) y esclerosis sistemica (una enfermedad degenerativa en la que tiene lugar fibrosis excesiva

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en multiples sistemas organicos, incluyendo la piel, vasos sangufneos, corazon, pulmones y rinones).

Otros ejemplos incluyen fibrosis cfstica del pancreas y los pulmones; fibrosis por inyeccion, que puede tener lugar como una complicacion de las inyecciones intramusculares, especialmente en ninos; fibrosis endomiocardica; fibrosis mediastfnica, mielofibrosis; fibrosis retroperitoneal; fibrosis masiva y progresiva, una complicacion de la neumoconiosis en los trabajadores del carbon; fibrosis sistemica nefrogena y complicacion de ciertos tipos de implantes quirurgicos (por ejemplo, existencia en intentos para crear un pancreas artificial para el tratamiento de diabetes sacarina.

Como se usa en la presente memoria, el termino "enfermedad cardiovascular" se refiere a enfermedades o trastornos del sistema cardiovascular que implican un componente inflamatorio y/o la acumulacion de placa, incluyendo sin limitacion arteriopatfa coronaria, enfermedad cerebrovascular, enfermedad arterial periferica, ateroesclerosis y arterioesclerosis.

Como se usa en la presente memoria, los terminos '"cancer" y "tumor" se refieren a una afeccion en la que estan presentes celulas de replicacion anormal de origen del huesped en una cantidad detectable en un individuo. El cancer puede ser un cancer maligno o no maligno. Los tumores malignos o tumores incluyen, pero no se limitan a, cancer del tracto biliar, cancer de cerebro; cancer de mama; cancer cervical; coriocarcinoma; cancer de colon; cancer de endometrio; cancer esofagico; cancer gastrico (estomago); neoplasmas intraepiteliales; leucemias; linfomas; cancer hepatico; cancer de pulmon (por ejemplo, de celulas pequenas y de celulas no pequenas); melanoma; neuroblastomas; cancer oral; cancer de ovario; cancer pancreatico; cancer de prostata; cancer rectal; cancer renal (rinon); sarcomas; cancer de piel; cancer testicular; cancer de tiroides; asf como otros carcinomas y sarcomas. Los tumores malignos pueden ser primarios o metastasicos.

Como se usa en la presente memoria, los terminos "enfermedad inflamatoria" y "trastorno inflamatorio" se refieren a una afeccion caracterizada por inflamacion, por ejemplo, una reaccion protectora localizada de tejido a irritacion, lesion o infeccion, caracterizada por dolor, enrojecimiento, hinchazon y a veces perdida de funcion. Enfermedades o trastornos inflamatorios incluyen, por ejemplo, alergias, asma y erupcion alergica.

Como se usa en la presente memoria, el termino "enfermedad asociada a inmunocomplejo" se refiere a cualquier enfermedad caracterizada por la produccion y/o deposicion en tejido de inmunocomplejos (es decir, cualquier conjugado que incluya un anticuerpo y un antfgeno ligado de manera especffica por el anticuerpo), incluyendo, pero no limitandose a, lupus eritematoso sistemico (SLE, por sus siglas en ingles) y enfermedades del tejido conjuntivo relacionadas, artritis reumatoide, enfermedad de complejo inmunitario relacionada con hepatitis C y hepatitis B (por ejemplo, crioglobulinemia), sfndrome de Bechet, glomerulonefritis autoinmunitaria y vasculopatfa asociada a la presencia de inmunocomplejos de LDL/anti-LDL.

Como se usa en la presente memoria, "inmunodeficiencia" se refiere a una enfermedad o trastorno en el que el sistema inmunitario del individuo no esta funcionando en su capacidad normal o en el que serfa util reforzar la respuesta inmunitaria del individuo, por ejemplo, para eliminar un tumor o cancer (por ejemplo, tumores del cerebro, pulmon (por ejemplo, celulas pequenas y celulas no pequenas), ovario, mama, prostata, colon, asf como otros carcinomas y sarcomas) o una infeccion en un individuo. La inmunodeficiencia puede ser adquirida o puede ser congenita.

Como se usa en la presente memoria, "rechazo de injerto" se refiere a lesion hiperaguda, aguda o cronica, mediada de manera inmunologica, a un tejido u organo procedente de una fuente distinta del huesped. El termino incluye asf el rechazo tanto celular como mediado por anticuerpos, asf como rechazo de ambos, aloinjertos y xenoinjertos.

"Enfermedad del injerto contra el hospedador" (GvHD) es una reaccion de medula osea donada contra el propio tejido del paciente. La GVHD se observa lo mas frecuentemente en casos en los que el donador de medula de sangre no esta emparentado con el paciente o cuando el donador esta emparentado con el paciente pero no es una compatibilidad perfecta. Hay dos formas de GVHD: una forma temprana denominada GVHD aguda que tiene lugar pronto despues del trasplante cuando los globulos blancos estan en aumento y una forma tardfa denominada GVHD cronica.

Las enfermedades atopicas mediadas por Th2 incluyen, pero no se limitan a, dermatitis atopica o eczema, eosinofilia, asma, alergia, rinitis alergica y sfndrome de Ommen.

Como se usa en la presente memoria, "alergia" se refiere a hipersensibilidad adquirida a una sustancia (alergenos). Las condiciones alergicas incluyen eczema, rinitis alergica o coriza, fiebre del heno, asma, urticaria (ronchas) y alergias a alimentos y otras afecciones atopicas.

Como se usa en la presente memoria, "asma" se refiere a un trastorno del sistema respiratorio caracterizada por inflamacion, estrechamiento de las vfas respiratorias y reactividad aumentada de las vfas respiratorias a agentes inhalados. El asma se asocia con frecuencia, aunque no de manera exclusiva, a sfntomas atopicos o alergicos. Por ejemplo, el asma puede precipitarse por exposicion a un alergeno, exposicion a aire frfo, infeccion respiratoria y esfuerzo.

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Como se usa en la presente memoria, los terminos "infeccion" y, de manera equivalente, "enfermedad infecciosa" se refieren a una afeccion en la que un organismo o agente infeccioso esta presente en una cantidad detectable en la sangre o en un tejido normalmente esteril o compartimento normalmente esteril de un individuo. Los organismos y agentes infecciosos incluyen virus, bacterias, hongos y parasitos. Los terminos incluyen infecciones tanto agudas como cronicas, asf como sepsis.

Como se usa en la presente memoria, el termino "sepsis" se refiere a la presencia de bacterias (bacteriemia) u otros organismos infecciosos o sus toxinas en la sangre (septicemia) o en otro tejido del cuerpo.

Se proporciona ademas un compuesto de la invencion o una sal del mismo, para uso como un medicamento en el tratamiento de las enfermedades o afecciones descritas anteriormente en un mamffero, por ejemplo, un ser humano, que padece dicha enfermedad o afeccion. Tambien se proporciona el uso de un compuesto de la invencion, o una sal del mismo, en la preparacion de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades o afecciones descritas anteriormente en un mamffero, por ejemplo, un ser humano, que padece dicho trastorno.

Esta invencion tambien incluye composiciones farmaceuticas que contienen un compuesto de la invencion para uso en metodos para tratar o prevenir afecciones y trastornos por modulacion de actividades celulares mediadas por TLR7 y/o TLR8 por administracion de una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion, o una sal del mismo, a un paciente con necesidad del mismo.

Para usar un compuesto de la invencion, o una sal del mismo, para el tratamiento terapeutico (incluyendo tratamiento profilactico) de mamfferos incluyendo seres humanos, normalmente se formula segun la practica farmaceutica estandar como una composicion farmaceutica.

Segun este aspecto de la invencion, se proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion, o una sal del mismo, como se definio anteriormente junto con un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.

Para preparar las composiciones farmaceuticas segun esta invencion, se mezcla de manera fntima una cantidad terapeuticamente o profilacticamente eficaz de un compuesto de la invencion, o una sal del mismo, (solo o junto con un agente terapeutico adicional como se describe en la presente memoria), por ejemplo, con un portador farmaceuticamente aceptable segun las tecnicas de mezcla farmaceuticas convencionales para producir una dosis. Un portador puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparacion deseada para administracion, por ejemplo, oral o parenteral. Los ejemplos de portadores adecuados incluyen cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersion, adyuvantes, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos y de retardo de la absorcion, edulcorantes, estabilizantes (para fomentar el almacenamiento a largo plazo), emulsionantes, agentes aglutinantes, agentes espesantes, sales, conservantes, disolventes, medios de dispersion, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos y de retraso de la absorcion, agentes saborizantes y materiales varios tales como tampones y absorbentes que pueden requerirse para preparar una composicion terapeutica particular. El uso de tales medios y agentes con sustancias farmaceuticamente activas es conocido en la tecnica. Excepto siempre y cuando cualquier medio o agente convencional sea incompatible con un compuesto de la invencion, se considera su uso en las composiciones y preparaciones terapeuticas. Tambien se pueden incorporar principios activos suplementarios a las composiciones y preparaciones como se describe en la presente memoria.

Las composiciones de la invencion pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo, como comprimidos, rombos, capsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos o granulos dispersibles, jarabes o elixires), para uso topico (por ejemplo, como cremas, pomadas, geles o disoluciones o suspensiones acuosas u oleosas), para administracion por inhalacion (por ejemplo, como un polvo finamente dividido o un aerosol lfquido), para administracion por insuflacion (por ejemplo, como un polvo finamente dividido) o para administracion parenteral (por ejemplo, como una disolucion acuosa u oleosa esteril para dosificacion intravenosa, subcutanea o intramuscular o como un supositorio para dosificacion rectal). Por ejemplo, las composiciones destinadas a uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o mas colorantes, edulcorantes, saborizantes y/o agentes conservantes.

Los excipientes farmaceuticamente aceptables adecuados para una formulacion en comprimido incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes tales como lactosa, carbonato de sodio, fosfato de calcio o carbonato de calcio, agentes de granulacion y disgregacion tales como almidon de mafz o acido algenico; agentes de union tales como almidon; agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, acido estearico o talco; agentes conservantes tales como p- hidroxibenzoato de etilo o propilo y antioxidantes, tales como acido ascorbico. Las formulaciones de comprimidos pueden ser no recubiertas o recubiertas para modificar su disgregacion y la posterior absorcion del principio activo en el tubo digestivo o para mejorar su estabilidad y/o aspecto, en cualquier caso, usando agentes de recubrimiento convencionales y procedimientos conocidos en la tecnica.

Las composiciones para uso oral pueden estar en la forma de capsulas de gelatina dura en las que el principio activo se mezcla con un diluyente solido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolfn o como capsulas de gelatina blanda en las que el principio activo se mezcla con agua o un aceite tal como aceite de

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cacahuete, parafina liquida o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas contienen en general el principio activo en forma de polvo fino junto con uno o mas agentes de suspension, tales como carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arabiga; agentes de dispersion o humectantes tales como lecitina o productos de condensacion de un oxido de alquileno con acidos grasos (por ejemplo, estearato de polioxietileno) o productos de condensacion de oxido de etileno con alcoholes alifaticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol o productos de condensacion de oxido de etileno con esteres parciales derivados de acidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietilensorbitol o productos de condensacion de oxido de etileno con esteres parciales derivados de acidos grasos y anhfdridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de polietilensorbitan. Las suspensiones acuosas tambien pueden contener uno o mas conservantes (tales como p- hidroxilbenzoato de etilo o propilo, antioxidantes (tales como acido ascorbico), agentes colorantes, agentes saborizantes y/o edulcorantes (tales como sacarosa, sacarina o aspartamo).

Las suspensiones oleosas se pueden formular por suspension del principio activo en un aceite vegetal (tal como aceite de manf, aceite de oliva, aceite de sesamo o aceite de nuez de coco) o en un aceite de parafina (tal como parafina liquida). Las suspensiones oleosas tambien pueden contener un agente espesante tal como cera de abejas, parafina dura o alcohol cetflico. Pueden anadirse edulcorantes tales como los explicados anteriormente y agentes saborizantes para proporcionar una preparacion oral agradable. Estas composiciones pueden conservarse por la adicion de un antioxidante tal como acido ascorbico.

Los polvos y granulos dispersibles adecuados para preparacion de una suspension acuosa por la adicion de agua contienen en general el principio activo junto con un agente dispersante o humectante, agente de suspension y uno o mas conservantes. Agentes de dispersion o humectantes y agentes de suspension, adecuados, se ejemplifican por los ya mencionados anteriormente. Tambien pueden estar presentes excipientes adicionales tales como edulcorantes, agentes saborizantes y colorantes.

Las composiciones farmaceuticas de la invencion tambien pueden estar en la forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de manf o un aceite de parafina, tal como por ejemplo parafina liquida o una mezcla de cualquiera de estos. Agentes de emulsion adecuados pueden ser, por ejemplo, gomas que se encuentran en la naturaleza tales como goma arabiga o goma de tragacanto, fosfatidas que se encuentran en la naturaleza tales como granos de soja, lecitina, esteres o esteres parciales derivados de acidos grasos y anhfdridos de hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitan) y productos de condensacion de dichos esteres parciales con oxido de etileno tales como monooleato de polioxietilenosorbitan. Las emulsiones tambien pueden contener edulcorantes, agentes saborizantes y conservantes.

Se pueden formular jarabes y elixires con edulcorantes tales como glicerol, propilenglicol, sorbitol, aspartamo o sacarosa y tambien pueden contener un demulcente, conservante, agente saborizante y/o colorante.

Las composiciones farmaceuticas tambien pueden estar en la forma de suspension acuosa u oleosa inyectable esteril, que puede formularse segun procedimientos conocidos usando uno o mas de los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspension apropiados, que se han mencionado anteriormente. Para formulaciones parenterales, el portador comprendera normalmente agua esteril, disolucion acuosa de cloruro de sodio, 1,3- butanodiol o cualquier otro diluyente o disolvente parenteralmente aceptable, no toxico, adecuado. Pueden incluirse otros ingredientes incluyendo aquellos que ayudan a la dispersion. Por supuesto, cuando se tiene que usar agua esteril y mantenerse como esteril, las composiciones y los portadores tambien deben esterilizarse. Tambien se pueden preparar suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear portadores lfquidos apropiados, agentes de suspension y similares.

Las formulaciones de supositorios pueden prepararse mezclando el principio activo con un excipiente no irritante adecuado que sea solido a temperaturas ordinarias pero lfquido a la temperatura rectal y se fundira, por lo tanto, en el recto para liberar el farmaco. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicoles.

Las formulaciones topicas, tales como cremas, pomadas, geles y disoluciones o suspensiones acuosas u oleosas, pueden obtenerse en general por formulacion de un principio activo con un vehfculo o diluyente convencional, topicamente aceptable, usando procedimientos convencionales conocidos en la tecnica.

Las composiciones para administracion por insuflacion pueden estar en la forma de un polvo finamente dividido que contiene partfculas de diametro promedio de, por ejemplo, 30 micrometres o mucho menos, comprendiendo el propio polvo principio activo solo o diluido con uno o mas portadores fisiologicamente aceptables tales como lactosa. El polvo para insuflacion se retiene entonces convenientemente en una capsula que contiene, por ejemplo, 1 a 50 mg de principio activo para uso con un dispositivo turbo-inhalador, tal como se usa para insuflacion del agente conocido cromoglicato de sodio.

Las composiciones para administracion por inhalacion pueden estar en la forma de un aerosol presurizado convencional dispuesto para dispensar el principio activo como un aerosol que contiene gotitas solidas o lfquidas finamente divididas. Se pueden usar propelentes de aerosol convencionales tales como hidrocarburos fluorados o

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hidrocarburos, volatiles, y el dispositivo del aerosol se dispone convenientemente para dispensar una cantidad medida de principio activo.

Las composiciones para administracion transdermica pueden estar en la forma de esos parches cutaneos transdermicos que son conocidos para los expertos en la materia. Otros sistemas de suministro pueden incluir sistemas de suministro de liberacion prolongada, de liberacion retardada o de liberacion sostenida. Dichos sistemas pueden evitar administraciones repetidas de los compuestos, aumentando la conveniencia para el individuo y el medico. Estan disponibles muchos tipos de sistemas de suministro de liberacion y son conocidos para los expertos en la materia. Incluyen sistemas de base polimerica tales como poli(lactida-glicolida), copolioxalatos, policaprolactonas, poliesteramidas, poliortoesteres, poli(acido hidroxibutfrico) y polianhfdridos. Las microcapsulas de los farmacos anteriores que contienen polfmeros se describen en, por ejemplo, la patente de EE.UU. N° 5.075.109. Los sistemas de suministro tambien incluyen sistemas no polimericos que son: lfpidos incluyendo esteroles tales como colesterol, esteres de colesterol y acidos grasos o grasas neutras tales como mono-, di- y tri-gliceridos; sistemas de liberacion de hidrogel; sistemas silasticos; sistemas a base de peptidos; recubrimientos de cera; comprimidos usando aglutinantes y excipientes convencionales; implantes parcialmente fusionados y similares. Ejemplos especfficos incluyen, pero no se limitan a: (a) sistemas erosivos en los que un agente de la invencion esta contenido en una forma dentro de una matriz tal como las descritas en las patentes de EE.UU. N° 4.452.775, 4.675.189 y 5.736.152 y (b) sistemas difusionales en los que un componente activo permea a una velocidad controlada de un polfmero tal como se describe en las patentes de EE.UU. N° 3.854.480, 5.133.974 y 5.407.686. Ademas, pueden usarse sistemas de suministro de hardware con bomba, algunos de los cuales se adaptan para implante.

Las composiciones pueden administrarse en la forma de una disolucion, por ejemplo, agua o disolucion salina isotonica, tamponada o no tamponada, o como una suspension, para administracion intranasal como gotas o como un espray. Preferiblemente, tales disoluciones o suspensiones son isotonicas en relacion a secreciones nasales y de aproximadamente el mismo pH, oscilando, por ejemplo, de aproximadamente pH 4,0 a aproximadamente pH 7,4 o de pH 6,0 a pH 7,0. Los tampones deberfan ser fisiologicamente compatibles e incluir, simplemente como ejemplo, tampones de fosfato. Por ejemplo, un descongestionante nasal representativo se describe como que esta tamponado a un pH de aproximadamente 6,2 (Remington's Pharmaceutical Sciences, Ed. Por Arthur Osol, pag. 1.445 (1.980)). Por supuesto, el especialista comun puede determinar facilmente un contenido salino y pH adecuados para un portador acuoso inocuo para administracion nasal.

Otros ejemplos no limitantes de formas farmaceuticas intranasales que contienen la composicion incluyen geles nasales, cremas, pastas o pomadas con una viscosidad de, por ejemplo, de aproximadamente 1 a 300 kg/m.s (10 a aproximadamente 3.000 cps) o de aproximadamente 250 a 650 kg/m.s (2.500 a 6.500 cps), o mayor, que pueden proporcionar un contacto mas sostenido con las superficies de la mucosa nasal. Tales formulaciones viscosas de portador pueden estar basadas en, simplemente como ejemplo, portadores polimericos tales como alquilcelulosas y/u otros portadores biocompatibles de alta viscosidad conocidos en la tecnica (vease, por ej., Remington's, citado supra). El portador que contiene la composicion puede empaparse tambien en un material textil, tal como gasa, que pueda aplicarse a las superficies de la mucosa nasal para permitir que penetren en la mucosa las sustancias activas en la fraccion aislada.

Otros ingredientes, tales como conservantes, colorantes, aceites lubricantes o aceites de parafina o vegetales viscosos, perfumes, extractos de plantas naturales o sinteticos tales como aceites aromaticos y humectantes y potenciadores de la viscosidad tales como, por ejemplo, glicerol, conocidos en la tecnica, tambien pueden incluirse para proporcionar viscosidad adicional, retencion de humedad y una textura y olor agradables para la formulacion.

Ademas, para administracion nasal de disoluciones o suspensiones de la composicion, estan disponibles varios dispositivos en la tecnica para la generacion de gotas, gotitas y esprays. Por ejemplo, las disoluciones que comprenden la fraccion aislada pueden administrarse en los senos nasales mediante un cuentagotas simple (o pipeta) que incluye un tubo dispensador de vidrio, plastico o metal del que se expulsa el contenido gota a gota mediante presion de aire proporcionada por una bomba accionada de manera manual, por ej., un bulbo de caucho flexible, unido a un extremo. Pueden proporcionarse gotitas finas y esprays por un dispensador con bomba intranasal o botella exprimible, manuales o accionados de manera electrica, tambien conocidos en la tecnica, por ej., que se disene para insuflar una mezcla de aire y gotitas finas en los senos nasales.

La cantidad de un compuesto de esta invencion que se combina con uno o mas excipientes para producir una forma farmaceutica unica variara necesariamente dependiendo del individuo tratado, la importancia del trastorno o la afeccion, la tasa de administracion, la disposicion del compuesto y la discrecion del medico que lo prescriba. Sin embargo, una dosis eficaz esta en el intervalo de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal al dfa, por ejemplo, aproximadamente 0,05 a aproximadamente 35 mg/kg/dfa, en dosis unicas o divididas. Para un ser humano de 70 kg, una dosis es aproximadamente 0,0005 a 2,5 g/dfa. Por ejemplo, una dosis es aproximadamente 0,0005 a aproximadamente 1 g/dfa. En algunos casos, los niveles de dosificacion por debajo del lfmite inferior del intervalo mencionado pueden ser mas que adecuados, mientras que en otros casos se pueden emplear dosis aun mayores sin producir ningun efecto secundario perjudicial, siempre que dichas dosis mayores se dividan primero en varias dosis pequenas para administracion durante el dfa.

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Para mas informacion sobre vfas de administracion y pautas posologicas, vease el Capftulo 25.3 en el volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Director de Editorial Board), Pergamon Press 1.990.

El tamano de la dosis para fines terapeuticos o profilacticos de un compuesto de la invencion variara naturalmente de acuerdo con la naturaleza y la importancia de las afecciones, la edad y el sexo del animal o el paciente y la via de administracion, de acuerdo con principios de medicina conocidos. Se entendera que el nivel especffico de la dosis y la frecuencia de la dosis para cualquier individuo particular puede variarse y dependera de una variedad de factores incluyendo la actividad del compuesto especffico de la invencion, las especies, la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del individuo, el modo y el tiempo de administracion, la velocidad de excrecion, combinacion de farmacos e importancia de la afeccion particular, pero sin embargo pueden determinarse de manera rutinaria por un experto en la materia.

Un compuesto de la invencion o sal del mismo, es administrado en algunos aspectos a un individuo en asociacion (por ejemplo, en la misma formulacion o en formulaciones separadas) con otro agente terapeutico ("tratamiento asociado"). El compuesto de la invencion se administra en mezcla con otro agente terapeutico o se administra en una formulacion separada. Cuando se administra en formulaciones separadas, se administra un compuesto de la invencion y otro agente terapeutico sustancialmente de manera simultanea o de manera secuencial. En un aspecto, se administra un compuesto de la invencion a un individuo en asociacion con otro agente terapeutico para tratar una afeccion o enfermedad. En un aspecto, se administra un compuesto de la invencion a un individuo en asociacion con otro agente terapeutico para evitar una afeccion o enfermedad. En un aspecto, se administra un compuesto de la invencion a un individuo en asociacion con una vacuna para evitar una afeccion o enfermedad. En un aspecto, se administra un compuesto de la invencion a un individuo en asociacion con una vacuna contra enfermedad infecciosa. En un aspecto, se administra un compuesto de la invencion a un individuo en asociacion con una vacuna contra el cancer.

Tambien puede ser util un compuesto de la invencion en individuos con funcion inmunologica comprometida. Por ejemplo, se puede usar un compuesto de la invencion para tratar o evitar las infecciones oportunistas y los tumores que tienen lugar despues de la supresion de inmunidad mediada por celulas en, por ejemplo, pacientes de trasplantes, pacientes de cancer y pacientes de VIH.

Dicho tratamiento asociado puede implicar, ademas de un compuesto de la invencion, cirugfa convencional o radioterapia o quimioterapia. Dicha quimioterapia puede incluir una o mas de las siguientes categorfas de agentes antitumorales: (i) farmacos antiproliferativos/antineoplasicos y asociaciones de los mismos; (ii) agentes citostaticos; (iii) agentes que inhiben la invasion de las celulas cancerosas; (iv) inhibidores de la funcion del factor de crecimiento; (v) agentes antiangiogenicos; (vi) agentes que causan dano vascular; (vii) terapias antisentido; (viii) propuestas de terapias genicas; (ix) interferon y (x) propuestas de inmunoterapia.

Los agentes terapeuticos para tratar o evitar enfermedades respiratorias que pueden administrarse en asociacion con un compuesto de la invencion en un metodo objeto susceptible incluyen, pero no se limitan a, beta-adrenergicos que incluyen broncodilatadores incluyendo: albuterol, sulfato de isoproterenol, sulfato de metaproterenol, sulfato de terbutalina, acetato de pirbuterol y salmeterol formolorol; esteroides incluyendo dipropionato de beclometasona, flunisolida, fluticasona, budesonida y acetonido de triamcinolona. Farmacos antiinflamatorios usados en relacion con el tratamiento o la prevencion de enfermedades respiratorias incluyen esteroides tales como dipropionato de beclometasona, acetonido de triamcinolona, flunisolida y fluticasona. Otros farmacos antiinflamatorios incluyen cromoglicatos tales como cromolfn sodico. Otros farmacos respiratorios que se calificarfan como broncodilatadores incluyen anticolinergicos incluyendo bromuro de ipratropio. Las anti-histaminas incluyen, pero no se limitan a, difenhidramina, carbinoxamina, clemastina, dimenhidrinato, pirilamina, tripelenamina, clorfeniramina, bromfeniramina, hidroxizina, ciclizina, meclizina, clorciclizina, prometazina, doxilamina, loratadina y terfenadina. Anti- histaminas particulares incluyen rinolast (Astelin®), claratyne (Claritin®), claratyne D (Claritin D®), telfast (Allegra®), Zyrtec®) y beconase.

En algunas realizaciones, se administra un compuesto de la invencion como un tratamiento asociado con interferon- gamma (IFN-gamma), un corticosteroide tal como prednisona, prednisolona, metilprednisolona, hidrocortisona, cortisona, dexametasona, betametasona, etc., o una asociacion de los mismos, para el tratamiento o evitar enfermedad pulmonar intersticial, por ej., fibrosis pulmonar idiopatica.

En algunas realizaciones, se administra un compuesto de la invencion en tratamiento asociado con un agente terapeutico conocido usado en el tratamiento de fibrosis cfstica ("FC"). Los agentes terapeuticos usados en el tratamiento de la FC incluyen, pero no se limitan a, antibioticos; agentes antiinflamatorios; ADNasa (por ej., ADNasa recombinante humana; pulmozyme; dornasa alfa); agentes mucolfticos (por ej., N-acetilcistema; Mucomyst™; Mucosil™); descongestionantes; broncodilatadores (por ej., teofilina; bromuro de ipatropio) y similares.

En algunas realizaciones, se administra un compuesto de la invencion de manera profilactica para la prevencion de enfermedad cardiovascular, por ej., ateroesclerosis.

En otra realizacion de la descripcion, se proporciona un artfculo de fabricacion, o "estuche", que contiene materiales utiles para el tratamiento o la prevencion de las enfermedades descritas anteriormente.

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En una realizacion, el estuche comprende un contenedor que comprende una composicion de la invencion o sal farmaceuticamente aceptable de la misma. En una realizacion, la invencion proporciona un estuche para tratar o prevenir un trastorno mediado por TLR7 y/o TLR8. En otra realizacion, la invencion proporciona un estuche para una afeccion o trastorno que se pueda tratar por modulacion selectiva del sistema inmunitario en un individuo. El estuche puede comprender ademas una etiqueta o inserto de envase sobre, o asociado a, el contenedor. Contenedores adecuados incluyen, por ejemplo, botellas, viales, jeringas, paquetes de ampollas, etc. El contenedor puede formarse de una variedad de materiales tales como vidrio o plastico. El contenedor soporta un compuesto de la invencion o una formulacion farmaceutica del mismo en una cantidad eficaz para tratar o prevenir la afeccion y puede presentar un puerto de acceso esteril (por ejemplo, el contenedor puede ser una bolsa de disolucion intravenosa o un vial con tapon perforable por una aguja de inyeccion hipodermica). La etiqueta o inserto de envase indica que la composicion se usa para tratar o prevenir la afeccion de eleccion. En una realizacion, la etiqueta o los insertos de envase indican que la composicion que comprende un compuesto de la invencion puede usarse, por ejemplo, para tratar o evitar un trastorno tratable por modulacion de las actividades celulares mediadas por TLR7 y/o TLR8. La etiqueta o el inserto de envase puede indicar tambien que la composicion puede usarse para tratar o evitar otros trastornos. Alternativamente, o adicionalmente, el estuche puede comprender ademas un segundo contenedor que comprende un tampon farmaceuticamente aceptable, tal como agua bacteriostatica para inyeccion (ABPI), disolucion salina tamponada con fosfato, disolucion de Ringer y disolucion de dextrosa. Puede incluir ademas otros materiales deseables desde un punto de vista comercial y del usuario, incluyendo otros tampones, diluyentes, filtros, agujas y jeringas.

El estuche puede comprender ademas instrucciones para la administracion del compuesto de la invencion y, si hay, la segunda formulacion farmaceutica. Por ejemplo, si el estuche comprende una primera composicion que comprende un compuesto de la invencion y una segunda formulacion farmaceutica, el estuche puede comprender ademas instrucciones para la administracion simultanea, secuencial o separada de las composiciones farmaceuticas primera y segunda a un paciente con necesidad de las mismas.

En otra realizacion, los estuches son adecuados para el suministro de formas orales solidas de un compuesto de la invencion, tales como comprimidos o capsulas. Dicho estuche incluye, por ejemplo, una serie de dosis unitarias. Dichos estuches pueden incluir una tarjeta que tenga las dosis orientadas en el orden de uso deseado. Un ejemplo de dicho estuche es un "paquete de ampollas". Los paquetes de ampollas son conocidos en la industria de los envases y se usan extensamente para envasar formas farmaceuticas unitarias. Si se desea, se puede proporcionar una ayuda para la memoria, por ejemplo en forma de numeros, letras u otras marcas o con un inserto de calendario, designando los dfas en el programa de tratamiento en el que se pueden administrar las dosis.

Segun una realizacion, el estuche puede comprender: (a) un primer contenedor con un compuesto de la invencion contenido en el mismo y opcionalmente (b) un segundo contenedor con una segunda formulacion farmaceutica contenida en el mismo, en el que la segunda formulacion farmaceutica comprende un segundo compuesto que puede ser eficaz en el tratamiento o la prevencion de una afeccion o trastorno por modulacion selectiva de las actividades celulares mediadas por TLR7 y/o TLR8. Alternativamente, o adicionalmente, el estuche puede comprender ademas un tercer contenedor que comprenda un tampon farmaceuticamente aceptable, tal como agua bacteriostatica para inyeccion (ABPI), disolucion salina tamponada con fosfato, disolucion de Ringer y disolucion de dextrosa. Puede incluir ademas otros materiales deseables desde un punto de vista comercial y del usuario, incluyendo otros tampones, diluyentes, filtros, agujas y jeringas.

En algunas otras realizaciones en las que el estuche comprende una formulacion farmaceutica de un compuesto de la invencion y una segunda formulacion que comprende un segundo agente terapeutico, el estuche puede comprender un contenedor para contener las formulaciones separadas, tales como un frasco dividido o un paquete de lamina dividida; sin embargo, las composiciones separadas tambien pueden estar contenidas dentro de un unico contenedor, no dividido. Tfpicamente, el estuche comprende instrucciones para la administracion de los componentes separados. La forma del estuche es ventajosa en particular cuando los componentes separados se administran en diferentes formas farmaceuticas (por ej., oral y parenteral), se administran en intervalos de dosificacion diferentes o cuando se desea la valoracion de los componentes individuales de la asociacion por el medico que lo prescribe.

Por toda la descripcion, en el caso de que se describan las composiciones como que tienen, que incluyen, o que comprenden componentes especfficos, se considera que las composiciones tambien consisten esencialmente en, o consisten en, los componentes citados. De manera similar, en el caso de que se describan metodos o procedimientos como que tienen, que incluyen, o que comprenden etapas del procedimiento especfficas, los procedimientos tambien consisten esencialmente en, o consisten en, las etapas de tratamiento citadas. Ademas, se deberfa entender que el orden de las etapas o el orden para realizar ciertas acciones es irrelevante siempre que la invencion permanezca operable. Ademas, se pueden realizar simultaneamente dos o mas etapas o acciones.

Los procedimientos sinteticos de la invencion pueden tolerar una amplia variedad de grupos funcionales; por lo tanto, pueden usarse varios materiales de partida sustituidos. Los procedimientos proporcionan en general el compuesto final deseado en, o cerca de, el final del procedimiento completo, aunque puede ser deseable en ciertos casos convertir ademas el compuesto en una sal, ester o profarmaco, farmaceuticamente aceptable, del mismo.

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Los compuestos de la presente invencion pueden prepararse en una variedad de maneras usando materiales de partida comercialmente disponibles, compuestos conocidos en la bibliograffa, o a partir de compuestos intermedios preparados facilmente, empleando metodos y procedimientos sinteticos habituales conocidos para los expertos en la materia o que seran evidentes para el operario cualificado a la luz de las explicaciones en la presente memoria. Los metodos y procedimientos sinteticos habituales para la preparacion de moleculas organicas y transformaciones y manipulaciones de grupos funcionales pueden obtenerse de la bibliograffa cientffica relevante o de libros de texto habituales en el campo. Aunque no limitado a una o varias fuentes cualesquiera, los textos clasicos tales como Smith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, 5a edicion, John Wiley & Sons: Nueva York, 2.001 y Greene, T. W., Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edicion, John Wiley & Sons: Nueva York, 1.999, son libros de texto de referencia utiles y reconocidos de smtesis organica conocidos por aquellos en la tecnica. Las siguientes descripciones de metodos sinteticos se disenan para ilustrar, pero no limitar, procedimientos generales para la preparacion de compuestos de la presente invencion.

Los compuestos de la presente invencion pueden prepararse de manera conveniente por una variedad de metodos familiares para los expertos en la materia. Los compuestos de esta invencion con cada una de las formulas descritas en la presente memoria pueden prepararse segun los siguientes procedimientos a partir de materiales de partida comercialmente disponibles o materiales de partida que pueden prepararse usando procedimientos de la bibliograffa. Estos procedimientos muestran la preparacion de compuestos representativos de esta invencion.

Los compuestos designados, seleccionados y/u optimizados por metodos descritos anteriormente, una vez producidos, pueden caracterizarse usando una variedad de ensayos conocidos para los expertos en la materia para determinar si los compuestos presentan actividad biologica. Por ejemplo, las moleculas pueden caracterizarse por ensayos convencionales, incluyendo pero no limitandose a aquellos ensayos descritos a continuacion, para determinar si presentan una actividad esperada, actividad de union y/o especificidad de union.

Ademas, puede usarse identificacion sistematica de alto rendimiento para acelerar el analisis usando dichos ensayos. Como resultado, puede ser posible identificar sistematicamente de manera rapida la actividad de las moleculas descritas en la presente memoria, usando tecnicas conocidas en la tecnica. Se describen metodologfas generales para realizar identificacion sistematica de alto rendimiento, por ejemplo, en Devlin (1.998) High Throughput Screening, Marcel Dekker y la patente de EE.UU. N° 5.763.263. Los ensayos de alto rendimiento pueden usar una o mas tecnicas de ensayo diferentes incluyendo, pero no limitandose a, las descritas a continuacion.

Ejemplos

Para ilustrar la invencion, se incluyen los siguientes ejemplos. Sin embargo, se tiene que entender que estos ejemplos no limitan la invencion y solo se destinan a sugerir un metodo para poner en practica la invencion. Los compuestos 76, 12, 65, 70 y 25 no son parte de la invencion.

Ejemplo 1. Procedimientos sinteticos.

Smtesis de Compuesto 63

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(1E, 4E)-2-amino-7-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo.

Etapa A: Se anadio nitrato de potasio (49,2 g, 0,486 moles) a 240 g de acido sulfurico enfriado en un matraz de fondo redondo de tres bocas, manteniendo la temperatura por debajo de 25°C. Esto fue seguido por la adicion lenta de 3-bromobenzaldetffdo (30,0 g, 0,162 moles). Una vez completada la adicion, se permitio que la mezcla se calentara gradualmente a temperatura ambiente durante la noche. Despues se vertio la mezcla en 500 ml de agua de hielo, dando como resultado un precipitado amarillo palido. Se recogieron los solidos por filtracion y se secaron a vacm durante varias horas. Se realizo purificacion del producto bruto de la siguiente manera: Se dividieron los solidos recogidos en dos lotes y cada lote se purifico usando dos cartuchos Biotage Snap de 340 g en serie con Hexanos:EtOAc 3:1 como eluyente. Se obtuvieron 20 g de 5-bromo-2-nitrobenzaldehido (54%) como un solido amarillo palido. RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 6 10,42 (s, 1H), 8,07, (d, 1H), 8,03, (d, 1H), 7,89 (dd, 1H).

Etapa B: Se combinaron a-cianometilcarboetoxietilideno (37 g, 0,096 moles) y 5-bromo-2-nitrobehzaldetffdo (20 g, 0,087 moles) en 400 ml de tolueno seco y se llevo a reflujo. Despues de 10 horas, se permitio que la mezcla se enfriara a temperatura ambiente y despues se concentro a presion reducida. Se dividio el material bruto resultante en dos lotes y cada lote se purifico usando dos cartuchos Biotage Snap de 340 g en serie con Hexanos:EtOAc 3:1 como eluyente. Se obtuvieron 22,9 g (78%) de (E)-3-(5-bromo-2-nitrofenil)-2-(cianometil)acrilato de etilo como un solido amarillo palido. RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 6 8,13-8,16 (s, 2H), 7,77, (dd, 1H), 7,59, (d, 1H), 4,39 (c, 1H),

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Etapa C: Se absorbio (E)-3-(5-bromo-2-nitrofenil)-2-(cianometil)acrilato de etilo (22,0 g, 0,065 moles) en 250 ml de acido acetico y se calento la mezcla a 80°C, dando como resultado una disolucion. A esto se anadio polvo de hierro (21,7 g, 0,389 moles) y se agito la mezcla a 80°C durante dos horas, tiempo durante el cual la mezcla se convirtio en una suspension espesa. Despues se dejo enfriar la mezcla a temperatura ambiente y despues se filtro. Se enjuagaron los solidos recogidos con EtOAc y se concentro el lfquido filtrado a presion reducida. Se absorbio el material bruto oscuro resultante en IPA/DCM al 25% (~ 500 ml) y se enfrio rapidamente el acido acetico residual con carbonato de sodio ac., 1 M (~ 500 ml). Se transfirio este material a un embudo de decantacion de 2 litros y en la separacion de los compuestos organicos/material acuoso, se formo un precipitado amarillo en la capa organica. Se aislaron los compuestos organicos y se recogieron los solidos por filtracion y secado a alto vacfo durante la noche para proporcionar 13,6 g de (1 E,4E)-2-amino-7-bromo-3H-benzo[b1azepin-4-carboxilato de etilo como un solido amarillo palido (lote 1). Despues se seco el lfquido filtrado sobre sulfato de sodio y se concentro para proporcionar 6 g de un solido mas amarillo/naranja (lote 2 - no tan limpio como el lote 1 por HpLC/RMN). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 7,70 (m, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,39 (dd, 1H), 6,95-6,99 (m, 3H), 4,24 (c, 2H), 2,86 (s, 2H), 1,29 (t, 3H); mlz (APCI-pos) M+1 = 309,1; 311,1.

Etapa D: Se combinaron (1E, 4E)-2-amino-7-bromo-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (0,150 g, 0,485 mmoles), acido 4-(pirrolidin-1-carbonil)fenilboronico (0,181 g, 0,825 mmoles), Pd(PPh3)4 (0,056 g, 0,0458 mmoles) y carbonato de potasio acuoso 2 M (0,728 ml, 1,46 mmoles) en 4 ml de acetonitrilo en un vial de reaccion de microondas. Esto se calento a 100°C durante 45 minutos en el microondas. Se diluyo la mezcla con EtOAc, se lavo con salmuera, se seco y se concentro. Cartucho Snap Biotage de 100 g (MeOH al 7%/DCM/NH4OH al 0,5%) proporciono 80 mg (41%) de (1E, 4E)|-2-amino-7-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b1azepin-4-carboxilato de etilo como un solido naranja. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) 6 7,86-7,88 (m, 1H), 7,59-7,67 (m, 6H), 7,32-7,36 (m, 1H), 4,29-4,37 (m, 2H), 3,64-3,72 (m, 2H), 3,47-3,54 (m, 2H), 3,03 (s, 2H), 1,86-2,01 (m, 4H), 1,36-1,43 (m, 3H); m/z (APCI-pos) M+1 = 404,2.

Sfntesis de Compuesto 33

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(1E, 4E)-2-Hidrazinil-N,N-dipropil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida.

Etapa A: Preparacion de (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina: Se calento para hacer hervir a reflujo una disolucion de 4-bromo-2-nitrotolueno (100 g, 463 mmoles), pirrolidina (46,2 ml, 565 mmoles) y dimetilacetal de N,N- dimetilformamida (75,6 ml, 565 mmoles) durante 4 horas a 110°C. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para proporcionar la (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina bruta que se uso directamente sin purificacion adicional.

Etapa B: Preparacion de 4-bromo-2-nitrobenzaldehfdo: A una disolucion de peryodato de sodio (298 g, 1,40 moles) en THF-H2O (4 l, 1:1) a 0°C se anadio (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina (138 g, 464 mmoles). Se agito la mezcla durante 15 h y se filtro despues para retirar precipitados solidos. Se separo la capa acuosa del lfquido filtrado y se extrajo con EtOAc (4 x 200 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con H2O (2 x 200 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el producto bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (EtOAc al 5% en hexanos) para proporcionar 91 g (86%) de 4-bromo-2-nitrobenzaldehfdo.

Etapa C: Preparacion de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo: A una disolucion de 4-bromo-2- nitrobenzaldehfdo (20,2 g, 87,9 mmoles), acido 4-(pirrolidin-1-carbonil)fenilboronico (21,2 g, 96,7 mmoles) y Pd(PPh3)4 (508 mg, 0,440 mmoles) en tolueno (200 ml) se anadio EtOH (40 ml) seguido por Na2CO3 (70,0 ml, 140 mmoles, disolucion ac., 2 M) a temperatura ambiente. Se calento la mezcla resultante a 100°C durante 18 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se separo la capa organica. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc (300 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera (500 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se combino con otro lote del material bruto obtenido de un barrido adicional en la misma escala de reaccion. Se purifico el material bruto combinado por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (CH2Ch a MeOH al 1% en CH2Ch) para proporcionar 51 g (90%) de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo.

Etapa D: Preparacion de (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo: Se calento para hacer hervir a reflujo suavemente una mezcla de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo (20,0 g, 61,7 mmoles) y a-cianometilcarboetoxietilidenotrifenilfosforano (26,3 g, 67,8 mmoles) en tolueno (200 ml) durante 2,5 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para proporcionar el

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(E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo que se uso directamente sin mas purificacion.

Etapa E: Preparacion de (1E, 4E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b1azepin-4-carboxilato de etilo: A una disolucion del (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo bruto en AcOH (650 ml) se anadio hierro (29,1 g, 521 mmoles) a temperatura ambiente. Se calento la mezcla resultante a 85°C durante 4 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se diluyo con CH2Cl2 (250 ml). Se separaron por filtracion los solidos y se lavaron con CH2Cl2 (200 ml). Se concentro el lfquido filtrado a presion reducida para proporcionar el material bruto que se diluyo con CH2Cl2 (250 ml) de nuevo. A esta mezcla se anadio lentamente Na2CO3 ac., sat., (~330 ml) con agitacion vigorosa hasta que se hizo basica (pH —9-10). Se separo por filtracion la mezcla resultante y se lavo con CH2Ch (—250 ml). Se separo la capa acuosa y se extrajo con CH2Ch (2 x 150 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se filtraron para proporcionar el material bruto que se diluyo con EtOAc (70 ml). Se mantuvo la mezcla durante 16 h a temperatura ambiente. Se filtro la suspension. Se lavaron los solidos separados por filtracion con EtOAc (100 ml) para proporcionar el producto bruto que se lavo con una pequena cantidad de CH2Cl2 para proporcionar 20 g (62% basado en 95% de pureza) de (1E, 4E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo.

Etapa F: Preparacion de (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carboni)fenil-3H-benzo[b1azepin-4- carboxilato de etilo: A una mezcla de (1E, 4E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxilato de etilo (9,60 g, 23,8 mmoles) en CH2Cl2 (100 ml) se anadio Boc2O (5,97 mg, 27,4 mmoles) a temperatura ambiente. Se agito la mezcla de reaccion durante 3 dfas. Se lavo la mezcla resultante con NaHCO3 ac., sat., y salmuera. Se separo la capa organica y se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar 12,7 g del (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxilato de etilo bruto que se uso directamente sin mas purificacion. MS APCI(+) m/z 504 (M+1) detectado.

Etapa G: Preparacion de acido (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H- benzo[b1azepin-4-carboxilico: A una disolucion de (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (12,0 g, 23,8 mmoles) en THF-EtOH (60 ml/60 ml) se anadio LiOH ac. 4 N (23,8 ml, 95,3 mmoles) a 0°C. Se calento la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se agito durante 21 h. Se anadieron 6 ml adicionales de LiOH ac., 4 N dos veces despues de 21 h y 24 h. Despues de agitacion durante 6 h adicionales, se concentro la mezcla resultante a presion reducida para proporcionar el material bruto que se diluyo con agua (50 ml) y se acidifico a un pH de —3,5 con acido fosforico ac., 1 N (—450 ml). Se anadieron —250 ml de CH2Ch durante acidificacion para extraer el producto bruto de la suspension pegajosa. Se separaron por filtracion los solidos formados durante la acidificacion usando un filtro de vidrio empaquetado con Celite. Se separo la capa acuosa y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Se secaron las capas organicas combinadas sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presiones reducidas para proporcionar 10,2 g (90%) del acido (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxflico bruto que se uso directamente sin mas purificacion. MS APCI(+) m/z 476 (M+1) detectado.

Etapa H: Se absorbieron acido (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H- benzo[b]azepin-4-carboxflico (0,5 g, 1,05 mmoles), HoBT (0,213 g, 1,58 mmoles) y EdCi (0,213 g, 1,58 mmoles) en 10 ml de diclorometano y se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Despues se anadieron dipropilamina (0,216 ml, 1,58 mmoles) y trietilamina (0,293 ml, 2,103 mmoles) y se agito la mezcla durante una hora, despues se diluyo con diclorometano, se lavo con cloruro de amonio saturado, salmuera, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro. La purificacion con Biotage (Cartucho Snap de 50 g, EtOAc:Hexanos 1:1) proporciono 0,2 g (34%) de (1E, 4E)-4-(dipropilcarbamoil)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-2-ilcarbamato de terc-butilo. m/z (APCI-pos) M+1 = 558,9.

Etapa I: Se disolvio (1E, 4E)-4-(dipropilcarbamoil)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-2-ilcarbamato de terc-butilo (0,075 g, 0,134 mmoles) en 1,5 ml de etanol en un vial de reaccion. A esta disolucion se anadio hidrazina (0,0215 ml, 0,671 mmoles), se sello el vial y se calento la mezcla a 80°C durante 30 minutos. Despues se diluyo la mezcla con EtOAc, se lavo dos veces con carbonato sodico acuoso 1 M, agua, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a presion reducida. La cromatograffa de capa fina preparativa (placa de 0,5 mm, MeOH al 5%/DCM/NH4OH al 0,5%) proporciono (1E, 4E)-2-hidrazinil-N,N-dipropil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H- benzo[b]azepin-4-carboxamida (39%) como un solido amarillo. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d@) 5 7,59-7,66 (m, 5H), 7,28-7,31 (m, 2H), 6,76 (s, 1H), 3,63-3,71 (m, 4H), 3,47-3,52 (m, 2H), 3,29-3,42 (m, 4H), 1,87-2,02 (m, 4H), 1,56-1,68 (m, 4H), 0,80-0,97 (m, 6H); m/z (APCI-pos) M+1 = 474,2.

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(1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo.

Etapa A: A una disolucion de 4-(benciloxi)-3-metoxibenzaldehfdo (2,00 g, 8,090 mmoles) en 1,2-dicloroetano (8 ml) a -30°C se anadio lentamente acido nftrico fumante (4,00 ml, 88,21 mmoles) mientras se mantenfa la temperatura a - 15°C durante 3 horas. Se vertio la mezcla de reaccion en agua y se extrajo con EtOAc, (2 x 25 ml). Se secaron las capas organicas combinadas sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se trituro con disolventes de mezcla de EtOAc y hexanos para proporcionar 1,81 g (78%) de 4- (benciloxi)-5-metoxi-2-nitrobenzaldehfdo. Se concentro el lfquido filtrado de nuevo a presion reducida para proporcionar 615 mg adicionales (24% basado en 91% de pureza) del producto deseado. Se obtuvo un total de 2,37 g del producto despues de consideracion de la pureza. El producto parecio ser una mezcla del producto deseado y el producto sobrenitrado sobre el grupo O-bencflico. Los dos lotes se usaron directamente sin mas purificacion.

Etapa B: Se calento una mezcla de 4-(benciloxi)-5-metoxi-2-nitrobenzaldehfdo (1,81 g, 6,30 mmoles) en TFA (11 ml) a 60°C durante 20 horas, se calento para hacer hervir a reflujo despues durante 5 horas. Se concentro la mezcla de reaccion a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (MeOH al 0,5% en CH2Ch) para proporcionar 236 mg (19%) de 4-hidroxi-5- metoxi-2-nitrobenzaldehfdo.

Etapa C: A una disolucion de 4-hidroxi-5-metoxi-2-nitrobenzaldehfdo (0,2358 g, 1,196 mmoles) y 1,1,1 -trifluoro-N- fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (0,5341 g, 1,495 mmoles) en CH2Cl2 (2,5 ml) se anadio TEA (0,2513 ml, 1,794 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se volvio roja oscura y se agito durante 23 horas a temperatura ambiente. Se diluyo la mezcla de reaccion con CH2Ch (25 ml) y se lavo con NaHCO3 acuoso saturado (15 ml) seguido por salmuera (15 ml). Se seco la capa organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (EtOAc al 5 a 10% en hexanos) para proporcionar 224 mg (57%) de trifluorometanosulfonato de 4- formil-2-metoxi-5-nitrofenilo.

Etapa D: Se preparo 2-(cianometil)-3-(5-metoxi-2-nitro-4-(trifluorometilsulfoniloxi) fenil)acrilato de etilo (81%) segun la Sfntesis de Compuesto 47, Etapa D, sustituyendo 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo por trifluorometanosulfonato de 4-formil-2-metoxi-5-nitrofenilo.

Etapa E: Se preparo (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-8-(trifluorometilsulfoniloxi)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (49%) segun Sfntesis de Compuesto 47, Etapa E, sustituyendo (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil) bifenil-4-il)acrilato de etilo por 2-(cianometil)-3-(5-metoxi-2-nitro-4-(trifluorometilsulfoniloxi)fenil)acrilato de etilo. m/z (APCI-pos) M+1 = 409,0.

Etapa F: A un vial cargado con (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-8-(trifluorometilsulfoniloxi)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxilato de etilo (0,107 g, 0,262 mmoles), acido 4-(pirrolidin-1-carbonil)fenilboronico (0,117 g, 0,524 mmoles), Pd(OAc)2 (0,00600 g, 0,0262 mmoles), hidrato dipotasico de acido 4,4'-(fenilfosfinideno)bisbencenosulfonico (0,0289 g, 0,0524 mmoles), Na2CO3 (0,0842 g, 0,786 mmoles) y una barra de agitacion magnetica se anadio MeCN-H2O (2,5 ml/1,2 ml). Se burbujeo la mezcla de reaccion con N2 durante 1 min y se calento durante 2 horas a 65°C. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se separaron por filtracion los materiales solidos. Se extrajo el lfquido filtrado con EtOAc (3x15 ml). Se secaron las capas organicas combinadas sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (MeOH al 3 a 7% en CH2Cl2, gradiente) para proporcionar el producto deseado que aun contenfa el acido boronico. Se disolvio la mezcla en CH2Cl2 (15 ml) de nuevo, se lavo con Na2CO3 acuoso saturado (3 x 20 ml), se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar 59 mg (52%) de (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b] azepin-4-carboxilato de etilo. RMN de 1H (400 MHz, CDCfj 6 7,80 (s, 1H), 7,60-7,63 (m, 2H), 7,55-7,58 (m, 2H), 7,24 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 4,88 (s a, 2H), 4,29-4,37 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,64-3,69 (m, 2H), 3,50-3,55 (m, 2H), 2,97 (s, 2H), 1,85-2,01 (m, 4H), 1,36-1,42 (m, 3H); m/z (APCI-pos) M+1 = 434,2.

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(1E, 4E)-2-Amino-8-(4-(dipropilcarbamoil)fenil)-7-metoxi-N-N-dipropil-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida. y

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(1E, 4E)-2-Amino-7-metoxi-N,N-dipropil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida.

Etapa A: Se preparo (1E, 4E)-2-Amino-7-metoxi-N,N-dipropil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxamida (20%) segun la sfntesis de Compuesto 70, Etapa E, sustituyendo (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-3H- benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo por (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b] 10 azepin-4-carboxilato de etilo (Compuesto 76). RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 6 7,54-7,62 (m, 4H), 7,28 (s, 1H), 6,796,82 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,64-3,70 (m, 2H), 3,39-3,55 (m, 6H), 2,89 (s, 2H), 1,85-2,01 (m, 4H), 1,61-1,71 (m, 4H), 0,87-0,98 (m, 6H); m/z (APCI-pos) M+1 = 489,2. Tambien se aislo (1E, 4E)-2-Amino-8-(4-(dipropilcarbamoil)fenil)-7- metoxi-N,N-dipropil-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida (19%) de la mezcla de reaccion. RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 6 7,55-7,60 (m, 2H), 7,37-7,41 (m, 2H), 7,33 (s, 1H), 6,81-6,84 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,38-3,53 (m, 6H), 3,2015 3,29 (m, 2H), 2,98 (s, 2H), 1,52-1,77 (m, 8H), 0,75-1,03 (m, 12H); m/z (APCI-pos) M+1 = 519,3.

Sfntesis de Compuesto 74

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(1E, 4E)-2-amino-7-(piridin-2-ilmetoxi)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo.

Etapa A: Se disolvio 5-hidroxi-2-nitrobenzaldehfdo (7,44 g, 44,5 mmoles) en 60 ml de DMF. A esta disolucion se 20 anadio carbonato de potasio (13,0 g, 93,5 mmoles), dando como resultado una mezcla naranja-roja. Despues de agitacion a temperatura ambiente durante 5 minutos, se anadio despues hidrocloruro de 2-clorometilpiridina (6,25 g, 49,0 mmoles) y se calento la mezcla a 65°C durante 16 horas. Se concentro despues la mezcla de reaccion a presion reducida y se absorbio el material bruto resultante en diclorometano, se lavo con agua, disolucion saturada de bicarbonato de sodio, salmuera, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a presion reducida. Se obtuvieron 25 10,45 g (91%) de 2-nitro-5-(piridin-2-ilmetoxi)benzaldehfdo.

Etapa B: Se preparo (E)-2-(cianometil)-3-(2-nitro-5-(piridin-2-ilmetoxi)fenil)acrilato de etilo (99%) segun la Sfntesis de Compuesto 63, Etapa B, sustituyendo 5-bromo-2-nitrobenzaldehfdo por 2-nitro-5-(piridin-2-ilmetoxi)benzaldehfdo.

Etapa C: Se preparo (1E, 4E)-2-amino-7-(piridin-2-ilmetoxi)-3H-benza[b]azepin-4-carboxilato de etilo (19%) segun la sfntesis de Compuesto 63, Etapa C, sustituyendo (E)-3-(5-bromo-2-nitrofenil)-2-(cianometil)acrilato de etilo por (E)-2- 30 (cianometil)-3-(2-nitro-5-(piridin-2-ilmetoxi)fenil)acrilato de etilo. RMN de 1H (400 MHz, MeOH-d4) 6 8,55 (d, 1H), 7,88 (t, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,38 (t, 1H), 7,05-7,13 (m, 2H), 7,01-7,03 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,29 (c, 2H), 2,96 (s, 2H), 1,36 (t, 3H).

Sfntesis de Compuesto 88

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(E)-2-Amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)espiro[benzo[e][1,4]diazepin-3,1'-ciclopropano]-4(5H)-carboxilato de etilo.

Etapa A: Etapa A: Preparacion de (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina: Se calento para hacer hervir a reflujo una disolucion de 4-bromo-2-nitrotolueno (100 g, 463 mmoles), pirrolidina (46,2 ml, 565 mmoles) y dimetilacetal de N,N- dimetilformamida (75,6 ml, 565 mmoles) durante 4 horas a 110°C. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para proporcionar la (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina bruta que se uso directamente sin purificacion adicional.

Etapa B: Preparacion de 4-bromo-2-nitrobenzaldehido: A una disolucion de peryodato de sodio (298 g, 1,40 moles) en THF-H2O (4 l, 1:1) a 0°C se anadio (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina (138 g, 464 mmoles). Se agito la mezcla durante 15 h y se filtro despues para retirar precipitados solidos. Se separo la capa acuosa del lfquido filtrado y se extrajo con EtoAc (4 x 200 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con H2O (2 x 200 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el producto bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (EtOAc al 5% en hexanos) para proporcionar 91 g (86%) de 4-bromo-2-nitrobenzaldehfdo.

Etapa C: Preparacion de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehido: A una disolucion de 4-bromo-2- nitrobenzaldehfdo (20,2 g, 87,9 mmoles), acido 4-(pirrolidin-1-carbonil)fenilboronico (21,2 g, 96,7 mmoles) y Pd(PPh3)4 (508 mg, 0,440 mmoles) en tolueno (200 ml) se anadio EtOH (40 ml) seguido por Na2CO3 (70,0 ml, 140 mmoles, disolucion ac., 2 M) a temperatura ambiente. Se calento la mezcla resultante a 100°C durante 18 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se separo la capa organica. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc (300 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera (500 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se combino con otro lote del material bruto obtenido de un barrido adicional en la misma escala de reaccion. Se purifico el material bruto combinado por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (CH2Ch a MeOH al 1% en CH2Ch) para proporcionar 51 g (90%) de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo.

Etapa D: Se disolvio 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo (0,410 g, 1,27 mmoles) en 10 ml de metanol. A esto se anadio hidrocloruro de 1-aminociclopropanocarbonitrilo (0,150 g, 1,27 mmoles) seguido por cianoborohidruro de sodio (0,0954 g, 1,52 mmoles) y se agito la mezcla a temperatura ambiente durante 16 horas. Despues se concentro la mezcla a presion reducida y se absorbio el residuo resultante en EtOAc, se lavo dos veces con bicarbonato de sodio saturado, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a 0,145 g de 1-((3-nitro-4'- (pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)metilamino)ciclopropanocarbonitrilo bruto (29%). m/z (APCI-pos) M+1 = 391,2.

Etapa E: Se disolvio 1-((3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)metilamino)ciclopropanocarbonitrilo (0,100 g, 0,256 mmoles) en 3 ml de diclorometano seco y se enfrio a 0°C. A esto se anadio piridina (0,0518 ml, 0,640 mmoles) seguido por cloroformiato de etilo (0,0488 ml, 0,512 mmoles) y se dejo calentar la mezcla a temperatura ambiente durante 16 horas. Despues se diluyo la mezcla con DCM (50 ml), se lavo una vez con HCl acuoso 1 N, bicarbonato de sodio saturado, se seco sobre sulfato de sodio y se concentro. La cromatograffa rapida (cartucho Flash 40 Biotage 40 M, EtOac:Hexano 1:1 a EtOAc al 100%) proporciono 0,045 g (38%) de 1-cianociclopropil((3-nitro-4'- (pirrolidin-1 -carbonil)bifenil-4-il)metil)carbamato de etilo. m/z (APCI-pos) M+1 = 463,3.

Etapa F: Se disolvio 1-cianociclopropil((3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)metil)carbamato (0,040 g, 0,0865 mmoles) en 3 ml de acido acetico. A esto se anadio polvo de hierro (0,0241 g, 0,432 mmoles) y se calento la mezcla a 90°C durante 30 minutos. Se dejo enfriar la mezcla a temperatura ambiente y despues se vertio en disolucion saturada de bicarbonato de sodio (100 ml), seguido por la adicion de 50 ml de EtOAc. Despues se filtro esta mezcla por papel de filtro GF/F, se aislaron los compuestos organicos, se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a presion reducida. La cromatograffa de capa fina preparativa (placas de 2 x 0,5 mm, MeOH al 10%/DCM/NH4OH al 0,5%) proporciono 12 mg (32%) de (E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)espiro[benzo[e] [1,41diazepin-3,1'- ciclopropano]-4(5H)-carboxilato de etilo. RMN de 1H (400 MHz, EDCh) 6 7,56-7,66 (m, 4H), 7,21-7,29 (m, 3H), 4,56 (s, 2H), 4,21 (c, 2H), 3,64-3,70 (m, 2H), 3,46-3,53 (m, 2H), 1,86-2,01 (m, 4H), 4,31 (t, 3H), 1,08-1,12 (m, 2H), 0,951,00 (m, 2H); m/z (APCI-pos) M+1 = 433,2.

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(1E, 4E)-2-(2-(Dimetilamino)etilamino)-N-(3-hidroxipropil)-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin- 4-carboxamida.

Etapa A: Preparacion de (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina: Se calento para hacer hervir a reflujo una disolucion de 4-bromo-2-nitrotolueno (100 g, 463 mmoles), pirrolidina (46,2 ml, 565 mmoles) y dimetilacetal de N,N- dimetilformamida (75,6 ml, 565 mmoles) durante 4 horas a 110°C. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para proporcionar la (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina bruta que se uso directamente sin purificacion adicional.

Etapa B: Preparacion de 4-bromo-2-nitrobenzaldehido: A una disolucion de peryodato de sodio (298 g, 1,40 moles) en THF-H2O (4 l, 1:1) a 0°C se anadio (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina (138 g, 464 mmoles). Se agito la mezcla durante 15 h y se filtro despues para retirar precipitados solidos. Se separo la capa acuosa del lfquido filtrado y se extrajo con EtoAc (4 x 200 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con H2O (2 x 200 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el producto bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (EtOAc al 5% en hexanos) para proporcionar 91 g (86%) de 4-bromo-2-nitrobenzaldehfdo.

Etapa C: Preparacion de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehido: A una disolucion de 4-bromo-2- nitrobenzaldehfdo (20,2 g, 87,9 mmoles), acido 4-(pirrolidin-1-carbonil)fenilboronico (21,2 g, 96,7 mmoles) y Pd(PPh3)4 (508 mg, 0,440 mmoles) en tolueno (200 ml) se anadio EtOH (40 ml) seguido por Na2CO3 (70,0 ml, 140 mmoles, disolucion ac., 2 M) a temperatura ambiente. Se calento la mezcla resultante a 100°C durante 18 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se separo la capa organica. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc (300 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera (500 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se combino con otro lote del material bruto obtenido de un barrido adicional en la misma escala de reaccion. Se purifico el material bruto combinado por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (CH2Ch a MeOH al 1% en CH2Ch) para proporcionar 51 g (90%) de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo.

Etapa D: Preparacion de (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo: Se calento para hacer hervir a reflujo suavemente una mezcla de 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldehfdo (20,0 g, 61,7 mmoles) y a-cianometilcarboetoxietilidenotrifenilfosforano (26,3 g, 67,8 mmoles) en tolueno (200 ml) durante 2,5 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para proporcionar el (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1 -carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo bruto que se uso directamente sin mas purificacion.

Etapa E: Preparacion de (1E, 4E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo: A una disolucion del (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo bruto en AcOH (650 ml) se anadio hierro (29,1 g, 521 mmoles) a temperatura ambiente. Se calento la mezcla resultante a 85°C durante 4 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se diluyo con CH2Cl2 (250 ml). Se separaron por filtracion los solidos y se lavaron con CH2Cl2 (200 ml). Se concentro el lfquido filtrado a presion reducida para proporcionar el material bruto que se diluyo con CH2Cl2 (250 ml) de nuevo. A esta mezcla se anadio lentamente Na2CO3 ac., sat., (~330 ml) con agitacion vigorosa hasta que se hizo basica (pH —9-10). Se separo por filtracion la mezcla resultante y se lavo con CH2Ch (—250 ml). Se separo la capa acuosa y se extrajo con CH2Ch (2 x 150 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se filtraron para proporcionar el material bruto que se diluyo con EtOAc (70 ml). Se mantuvo la mezcla durante 16 h a temperatura ambiente. Se filtro la suspension. Se lavaron los solidos separados por filtracion con EtOAc (100 ml) para proporcionar el producto bruto que se lavo con una pequena cantidad de CH2Cl2 para proporcionar 20 g (62% basado en 95% de pureza) de (1E, 4E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo.

Etapa F: Preparacion de (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxilato de etilo: A una mezcla de (1E, 4E)-2-amino-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxilato de etilo (9,60 g, 23,8 mmoles) en CH2Cl2 (100 ml) se anadio Boc2O (5,97 mg, 27,4 mmoles) a temperatura ambiente. Se agito la mezcla de reaccion durante 3 dfas. Se lavo la mezcla resultante con NaHCO3 ac., sat., y salmuera. Se separo la capa organica y se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar 12,7 g del (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4- carboxilato de etilo bruto que se uso directamente sin mas purificacion. MS APCI(+) m/z 504 (M+1) detectado.

Etapa G: Preparacion de acido (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H- benzo[b1azepin-4-carboxflico: A una disolucion de (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (12,0 g, 23,8 mmoles) en THF-EtOH (60 ml/60 ml) se anadio LiOH ac. 4 N (23,8 ml, 95,3 mmoles) a 0°C. Se calento la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se agito durante 21 h. Se anadieron 6 ml adicionales de LiOH ac., 4 N dos veces despues de 21 h y 24 h. Despues de agitacion durante 6 h adicionales, se concentro la mezcla resultante a presion reducida para proporcionar el material bruto que se diluyo con agua (50 ml) y se acidifico a un pH de —3,5 con acido fosforico ac., 1 N (—450 ml). Se anadieron —250 ml de CH2Ch durante acidificacion para extraer el producto bruto de la suspension pegajosa. Se separaron por filtracion los solidos formados durante la acidificacion usando un filtro de vidrio empaquetado con Celite. Se separo la capa acuosa y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Se secaron las capas organicas combinadas

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sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presiones reducidas para proporcionar 10,2 g (90%) del acido (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carbox[lico bruto que se uso directamente sin mas purificacion. MS APCI(+) m/z 476 (M+1) detectado.

Etapa H: Se disolvieron 3-(propilamino)propan-1-ol (7,80 g, 66,6 mmoles) y trietilamina (11,1 ml, 79,9 mmoles) en 600 ml de diclorometano y se enfrio a 0°C. A esta mezcla se anadio TBDMSCl (11,0 g, 73,2 mmoles) y se dejo calentar gradualmente la mezcla a temperatura ambiente durante un periodo de 16 horas. Despues se lavo la mezcla con disolucion saturada de bicarbonato de sodio (X3), se seco sobre sulfato de sodio y se concentro a 16 g (cuantitativo) de 3-(terc-butildimetilsililoxi)-N-propilpropan-1-amina.

Etapa I: A una suspension de acido (1E, 4E)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H- benzo[b]azepin-4-carboxflico (0,100 g, 0,210 mmoles) y HOBT (0,0426 g, 0,315 mmoles) en CH2Cl2 (1 ml) se anadio EDCI (0,0605 g, 0,315 mmoles) a temperatura ambiente. Se agito la mezcla de reaccion durante 50 min. A esta mezcla se anadieron 3-(terc-butildimetilsililoxi)-N-propilpropan-1-amina (0,0690 ml, 0,252 mmoles) y TEA (0,0586 ml, 0,421 mmoles) a temperatura ambiente. Se agito la mezcla resultante durante 1,5 h. Se diluyo la mezcla de reaccion con EtOAc (10 ml) y se lavo con NH4Cl ac., sat., (5 ml). Se separo la capa organica. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc (10 ml) de nuevo. Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera (5 ml), NaHCO3 acuoso saturado (5 ml) y salmuera (5 ml). Se seco la capa organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar ~168 mg del (1E, 4E)-4-((3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)(propil)carbamoil)-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-2-ilcarbamato de terc-butilo bruto. m/z (ApCI-pos) M+1 = 689,1.

Etapa J: Se calento una mezcla de (1E, 4E)-4-((3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)(propil)carbamoil)-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-2-ilcarbamato de terc-butilo (0,075 g, 0,109 mmoles), N1,N1-dimetiletano-1,2- diamina (0,0250 ml, 0,218 mmoles) y TEA (0,040 ml, 0,286 mmoles) en DMF (2 ml) a 65°C durante 2,5 h en un vial sellado. Se anadieron 0,020 ml (0,17 mmoles) adicionales de N1,N1-dimetiletano-1,2-diamina. Se calento la mezcla resultante a 65°C durante 2,5 h adicionales. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente, se diluyo con EtOAc, (15 ml) y se lavo con salmuera (2 x 15 ml). Se seco la capa organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar la (1E, 4E)-N-(3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)-2-(2-(dimetilamino)etilamino)-N- propil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida bruta mlz (APCI-pos) M+1 = 660,4) que se uso directamente sin mas purificacion.

Etapa K: A una disolucion de (1E, 4E)-N-(3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)-2-(2-(dimetilamino)etilamino)-N-propil-8-(4- (pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida (0,0718 g, 0,109 mmoles) en THF (2 ml) se anadio HCl (4 M en dioxano) (0,0952 ml, 0,381 mmoles) a temperatura ambiente. Se agito la mezcla de reaccion durante 2 h a temperatura ambiente. Se diluyo la mezcla de reaccion con EtOAc (15 ml) y se lavo con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml). Se separo la capa acuosa y se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). Se lavaron las capas organicas combinadas con NaHCO3 ac., sat., (4 x 10 ml), se secaron sobre MgSO4 se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico mediante cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (MeOH al 5% en CH2Cl2 a una disolucion de mezcla de NH4H-MeOH-CH2Ch (1/5/95)) para proporcionar 21 mg (36% para dos etapas) de (1E, 4E)-2-(2-(dimetilamino)etilamino)-N-(3-hidroxipropil)-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida (36%). RMN de 1H (400 MHz, EDCh) 6 7,68-7,72 (m, 2H), 7,587,62 (m, 2H), 7,50-7,53 (m, 1H), 7,30-7,33 (m, 1H), 7,23-7,27 (m, 1H), 6,84 (s, 1H), 3,58-3,71 (m, 6H), 3,40-3,53 (m, 6H), 2,84 (s, 2H), 2,47-2,54 (m, 2H), 2,27 (s, 6H), 1,94-2,02 (m, 2H), 1,87-1,93 (m, 2H), 1,87-1,93 (m, 2H), 1,77-1,85 (m, 2H), 1,61-1,72 (m, 2H), 0,84-0,94 (m, 3H); mlz (APCI-pos) M+1 = 546,3.

Sfntesis de Compuesto 90

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(E)-9-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-2,4-dihidro-1H-benzo[f]imidazo[1,2-a]azepin-5-carboxilato de etilo.

Etapa A: A una disolucion de 4-bromo-1-metil-2-nitrobenceno (300 g, 1,38 moles) en anhfdrido acetico (2.400 ml) a 0°C, se anadio acido sulfurico concentrado lentamente (324 ml), seguido por una disolucion de trioxido de cromo (384 g, 3,84 moles) en anhfdrido acetico (2.160 ml). Se controlo la temperatura interna por debajo de 10°C. Despues de agitacion durante 1 h, se vertio el contenido en el matraz en una mezcla de hielo y agua. Se filtro el solido y se lavo con agua hasta que los lavados fueron incoloros. Se suspendio el producto en 1.800 ml de disolucion acuosa de carbonato de sodio al 2% con agitacion. Despues de mezclamiento minucioso, se filtro el solido y se lavo con agua y se seco a presion reducida.

Se calento para hacer hervir a reflujo una suspension del diacetato en una mezcla de 1.360 ml de acido clorhfdrico concentrado, 1.250 ml de agua y 480 ml de etanol durante 45 minutos. Despues se enfrio la mezcla a temperatura

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Etapa B: Se calento para hacer hervir a reflujo suavemente una mezcla del 4-bromo-2-nitrobenzaldehfdo (25,45 g, 0,l1 moles) y a-cianometilcarboetoxietilideno (50 g, 0,129 moles) en tolueno (800 ml) durante 2,5 horas. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para proporcionar el (E)-3-(4-bromo- 2-nitrofenil)-2-(cianometil)acrilato de etilo bruto que se uso directamente sin mas purificacion.

Etapa C: A una disolucion del (E)-3-(4-bromo-2-nitrofenil)-2-(cianometil)acrilato de etilo bruto en AcOH (500 ml) se anadio hierro (40 g, 0,716 moles) a temperatura ambiente. Se calento la mezcla resultante a 85°C durante 6 horas. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se diluyo con CH2Ch. Se filtro la mezcla resultante y se lavaron los solidos con CH2Ch. Se concentro el lfquido filtrado a presion reducida para proporcionar aceite viscoso. Se anadio al material bruto CH2Cl2 y se anadio lentamente Na2CO3 acuoso con agitacion hasta que su pH llego a ser 9-10. Se separo por filtracion la mezcla y se lavo con CH2Cl2. Se separo la capa organica. Se extrajo la capa acuosa con CH2Cl2. Se lavaron las capas organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Se concentro el disolvente a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico mediante cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de sflice (PE 100% a PE/AE 2/1) para proporcionar 20 g (58,8% para dos etapas) de (1E, 4E)-2-amino-8-bromo-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo y (E)- 8-bromo-2- oxo-2,3-dihidro-1H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (2 g).

Etapa D: Se calento para hacer hervir a reflujo una disolucion de (E)- 8-bromo-2-oxo-2,3-dihidro-1H-benzo[b]azepin- 4-carboxilato de etilo (0,25 g, 1,0 mmol) y reactivo de Lawesson (0,45 g, 1,1 mmoles) en dioxano (20 ml) durante 16 horas. Se concentro la mezcla de reaccion y se purifico por cromatograffa por desorcion subita (PE 100% a PET:AE =5:1) para proporcionar 0,149 g (58%) de (E)- 8-bromo-2-tioxo-2,3-dihidro-1H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo.

Etapa E: A la disolucion de (E)- 8-bromo-2-tioxo-2,3-dihidro-1H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (2 g, 8 mmoles) e hidrobromuro de 2-bromoetanamina (11,5 g, 88 mmoles) en 500 ml de THF se anadio HgCl2 (2,3 g, 8 mmoles) a 80°C. Se calento para hacer hervir a reflujo la mezcla durante 1 hora. Se retiro el THF a presion reducida y se suspendio el residuo en DCM. Se retiro el solido por filtro y despues se lavo la capa organica con Na2S2O3 acuoso 0,2 M para retirar el HgCl2 no reaccionado. Despues de secar sobre K2CO3, se evaporo la capa organica a presion reducida. Se purifico el compuesto bruto por cromatograffa sobre gel de sflice (de PET:AE 1:1 a DCM: MeOH 5:1) proporcionando 1,8 g (86,9%) de (E)-9-bromo-2,4-dihidro-1H-benzo[f]imidazo[1,2-a]azepin-5-carboxilato de etilo.

Etapa F: En la atmosfera de nitrogeno, se disolvieron (E)- 9-bromo-2,4-dihidro-1H-benzo[f]imidazo[1,2-a]azepin-5- carboxilato de etilo (0,41 g, 10 mmoles), acido 4-(pirrolidin-1-carbonil)fenilboronico (0,44 g, 20 mmoles), Cs2CO3 (0,61 g, 20 mmoles) y Pd(PPh3)4 (0,1 g, 10% en moles) en 50 ml de EtOH. Se calento para hacer hervir a reflujo la mezcla hasta terminacion indicada por TLC (normalmente 2 h). Despues de enfriar, se vertio la mezcla de reaccion en agua y se extrajo con EtOAc. Se seco la capa organica combinada sobre MgSO4, se concentro a vacfo, se purifico el producto bruto por gel de sflice cromatografico (AE 100% a MeOH:AE) 1:10 para proporcionar 0,3 g, (60%) de (E)-9-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-2,4-dihidro-1H-benzo[f]imidazo[1,2-a]azepin-5-carboxilato de etilo. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 6 7,79 (s, 1H), 7,62-7,64 (m, 4H), 7,38-7,41 (m, 1H), 7,14-7,16 (m, 1H), 4,28-4,34 (m, 2H), 3,97-4,03 (m, 2H), 3,85-3,91 (m, 2H), 3,65-3,70 (m, 2H), 3,47-3,52 (m, 4H), 1,87-2,02 (m, 4H), 1,35-1,40 (m, 3H); m/z (APCI-pos) M+1 = 430,3.

Sfntesis de Compuesto 46

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(1E, 4E)-N-(3-hidroxipropil)-2-(metilamino)-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-

carboxamida.

Etapa A: Se preparo (1E, 4E)-4-((3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)(propil)carbamoil)-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)- 3H-benzo[b]azepin-2-ilcarbamato de terc-butilo (59%) segun la sfntesis de Compuesto 33, Etapa H, sustituyendo dipropilamina por 3-(terc-butildimetilsililoxi)-N-propilpropan-1-amina. m/z (APCI-pos) M+1 = 689,0.

Etapa B: Se calento una mezcla de (1E, 4E)-4-((3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)-(propil)carbamoil)-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-2-ilcarbamato de terc-butilo (0,145 g, 0,210 mmoles), metanamina (2 M en THF) (0,210 ml, 0,421 mmoles) y tEa (0,0590 ml, 0,421 mmoles) en DMF (2 ml) a 65°C durante 1,5 h en un vial sellado. Se anadieron 0,11 ml (0,22 mmoles) adicionales de MeNH2 y se calento la mezcla resultante a 65°C durante 3 h adicionales. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente, se diluyo con EtOAc (15 ml) y se lavo con

NaHCO3 ac., sat., seguido por salmuera. Se seco la capa organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de silice (MeOH al 1 a 5% en CH2Ch) para proporcionar 48 mg (38% para dos etapas) de (1E, 4E)-N-(3-(terc- butildimetilsililoxi)propil)-2-(metilamino)-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida.

5 mlz (APCI-pos) M+1 = 603,3.

Etapa C: A una disolucion de (1E, 4E)-N-(3-(terc-butildimetilsililoxi)propil)-2-(metilamino)-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida (0,045 g, 0,0746 mmoles) en THF (2 ml) se anadio HCl (4 M en dioxano) (0,0467 ml, 0,187 mmoles) a temperatura ambiente. Se agito la mezcla de reaccion durante 1 h a temperatura ambiente. Se diluyo la mezcla de reaccion con eter (10 ml) y se lavo con NaHCO3 ac., sat., (3x10 ml). 10 Se seco la capa organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de silice (MeOH al 5 a 7% en CH2Cl2) para proporcionar 19 mg (53%) de (1E, 4E)-N-(3-(hidroxipropil)-2-(metilamino)-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1- carbonil)fenil)-3H-benzo[b1azepin-4-carboxamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCE) 5 7,71 (d, 2H).' 7,60 (d, 2H), 7,56 (m, 1H), 7,30-7,35 (m, 1H), 7,25-7,29 (m, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,92 (s a, 1H), 3,57-3,71 (m, 6H), 3,44-3,54 (m, 4H), 2,98 15 (s, 3H), 2,79 (s, 2H), 1,80-2,03 (m, 6H), 1,58 -1,75 (m, 2H), 0,89-0,96 (m, 3H); m/z (APCI-pos) M+1 = 489,2.

Smtesis de Compuesto 70

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(1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-N,N-dipropil-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida.

Etapa A: Se preparo (E)-1-(5-Metoxi-2-nitroestiril)pirrolidina (100%) segun Smtesis de Compuesto 47, Etapa A, 20 sustituyendo 4-bromo-2-nitrotolueno por 4-metoxi-2-metil-1-nitrobenceno y se uso sin mas purificacion.

Etapa B: Se preparo 5-metoxi-2-nitrobenzaldel'ffdo (97%) segun Smtesis de Compuesto 47, Etapa B, sustituyendo (E)-1-(4-bromo-2-nitroestiril)pirrolidina por (E)-1-(5-metoxi-2-nitroestiril)pirrolidina y se uso sin mas purificacion.

Etapa C: Se preparo (E)-2-(cianometil)-3-(5-metoxi-2-nitrofenil)acrilato de etilo (100%) segun la Smtesis de Compuesto 47, Etapa D, sustituyendo 3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-carbaldel'ffdo por 5-metoxi-2- 25 nitrobenzaldetffdo y se uso sin mas purificacion.

Etapa D: Se preparo (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (60%) segun la Smtesis de Compuesto 47, Etapa E, sustituyendo (E)-2-(cianometil)-3-(3-nitro-4'-(pirrolidin-1-carbonil)bifenil-4-il)acrilato de etilo por (E)-2-(cianometil)-3-(5-metoxi-2-nitrofenil)acrilato de etilo. m/z (APCl-pos) M+1 = 261,1.

Etapa E: A una disolucion de dipropilamina (0,105 ml, 0,768 mmoles) en tolueno (2 ml) a 0°C se anadio AlMe3 (2 M 30 en tolueno) (0,960 ml, 1,92 mmoles). Se calento la mezcla resultante a temperatura ambiente. A esta mezcla se anadio en pequenas porciones (1E, 4E)- 2-amino-7-metoxi-3H-benzo[b]azepin-4-carboxilato de etilo (0,100 g, 0,384 mmoles). Se calento la mezcla de reaccion a 100°C durante 21 h. Se enfrio la mezcla de reaccion a temperatura ambiente y se vertio sobre sal de Rochelle ac., 0,5 N. Se agito vigorosamente la mezcla resultante durante 20 min y se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Se secaron las capas organicas combinadas sobre MgSO4, se filtraron y se 35 concentraron a presion reducida para proporcionar el material bruto que se purifico por cromatograffa de resolucion rapida en columna sobre gel de silice (MeOH al 3 a 9% en CH2Ch, gradiente) para proporcionar 46 mg (38%) de (1E, 4E)-2-amino-7-metoxi-N,N-dipropil-3H-benzo[b]azepin-4-carboxamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 5 7,167,19 (m, 1H), 6,93-6,96 (m, 1H), 6,72-6,76 (m, 2H), 4,82 (s a, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,37-3,49 (m, 4H), 2,75 (s, 2H), 1,601,70 (m, 4H), 0,86-0,97 (m, 6H); mlz (APCI-pos) M+1 = 316,2.

40 Smtesis de Compuesto 25

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(1E, 4E)-2-Amino-N-(3-hidroxipropil)-7-metoxi-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepin-4-

carboxamida.

Etapa A: Se preparo (1E, 4E)-2-Amino-N-(3-hidroxipropil)-7-metoxi-N-propil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H- benzo[b]azepin-4-carboxamida (25%) segun la Sfntesis de Compuesto 70, Etapa E, sustituyendo dipropilamina por 3-(propilamino)propan-1-ol y (1E, 4E)- 2-amino-7-metoxi-3H-benza[b]azepin-4-carboxilato de etilo por (1E, 4E)-2- amino-7-metoxi-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b] azepin-4-carboxilato de etilo (Compuesto 76). RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 6 7,54-7,63 (m, 4H), 7,24 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,90 (s a, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,583,70 (m, 6H), 3,44-3,55 (m, 4H), 2,81 (s, 2H), 1,80-2,00 (m, 6H), 1,66-1,75 (m, 2H), 0,82-0,97 (m, 3H); mlz (APCI- pos) M+1 = 505,2.

Ejemplo 2

Ensayos de HEK/TLR

La actividad de los compuestos de esta invencion puede determinarse por los siguientes ensayos.

El ensayo de transinfeccion de hTLR HEK-293 emplea celulas HEK293 transinfectadas de manera estable con varios hTLR y cotransinfectadas de manera transitoria con un plasmido que contiene un gen indicador de fosfato alcalino embrionico segregado (FAES) conducido por NF-kB. La estimulacion de los TLR activa sus rutas de senalizacion aguas abajo e induce la translocacion nuclear del factor de transcripcion NF-kB. Despues se mide la actividad del gen indicador usando un ensayo espectrofotometrico.

Para medir la actividad agonista, se preparan celulas de rinon embrionico humano (HEK, por sus siglas en ingles) (por ej., celulas 293XL-hTLR8 disponibles en InvivoGen, San Diego, CA) segun las instrucciones del suministrador y se incubaron con varias concentraciones de compuesto de ensayo durante la noche. Se midio la cantidad de luciferasa inducida por lectura de la absorbancia a 650 mu. Los compuestos agonistas de la invencion presentan un MC50 de 25 pM o menor, en los que MC50 se define como la concentracion a la que se observa el 50% de la induccion maxima.

Para los ensayos antagonistas de TLR8, las celulas son transinfectadas de manera transitoria con el gen indicador el Dfa 1 por las instrucciones del suministrador. Se anaden compuestos antagonistas a los cultivos el Dfa 2 seguido por adicion de un agonista de TLR8 aproximadamente 2 horas mas tarde. Se incuban los cultivos durante la noche y se mide la actividad FAES el Dfa 3.

En un ensayo tfpico, se siembran 50.000 celulas hTLR8 HEK239 por pozo de cultivo y se transinfectan de manera transitoria con el gen indicador de FAES. Se anaden antagonistas a los cultivos en medio de cultivo y > 1% de DMSO por un intervalo de concentracion de 0,1 nanomolar a 10 micromolar. Se anaden agonistas TLR8 a cultivos 2 horas mas tarde a una concentracion fijada (por ej., 1 micromolar o 10 micromolar de Compuesto A) y se incuban despues los cultivos durante 16-24 h a 37°C en una incubadora de CO humidificada. Tambien se evaluo en los antagonistas la actividad en ausencia de agonista.

El agonista de TLR8 Compuesto A presenta la estructura:

imagen44

Vease la Patente internacional WO 2007/024612.

La actividad antagonista de TLR8 a 25 pM se presenta en la Tabla 2, donde + indica un % de inhibicion de 20-39, ++ indica un % de inhibicion de 40-59, +++ indica un % de inhibicion de 60-79 y ++++ indica un % de inhibicion de 8099. En algunos casos, se valora la actividad antagonista a concentraciones inferiores, por ejemplo, a 8,3; 2,8 o menor que 1 pM.

Tabla 2

Compuesto

% Inhibicion

47

+

88

+

90

+ + +

76

+ + +

33

+ + + +

63

+ + + +

74

+ + +

46

+ +

70

+ +

25

+

65

+ + +

76

+ + + +

Se midio la actividad antagonista de TLR8 en un formato de ensayo de hTLR8, midiendo los valores de IC50. Se incubaron los compuestos con celulas indicadoras de hTLR8 durante dos horas, despues se anadio Compuesto A 1 5 pM para inducir TLR8 durante la noche. Despues se calcularon los IC50.

Los resultados de IC50 se presentan a continuacion en la Tabla 3, donde + indica un IC50 mayor que o igual a 10 pM, ++ indica un valor de 5-10, +++ indica un valor de 1-5 y ++++ indica un valor menor que 1.

Tabla 3

Compuesto

IC50 (pM)

88

+ +

76

+

33

+ + +

63

+ + + +

74

+ + +

65

+ +

12

+ + +

10 Los resultados de IC50 se presentan a continuacion en la Tabla 4, donde + indica un IC50 (nM) mayor que o igual a

10.000, ++ indica un valor de 1.000-10.000, +++ indica un valor menor que 1.000. Tabla 4

IC50, nM, frente a

VTX-378 3M002

Compuesto N°

0,5 |JM 1 jM 10 jM 1 jM 10 jM

3.173

+ + + + + +

3.348

+ + + + + + + + +

3.260

+ + + + + + + + +

2.931

+ + + + +

2.984

+ + + + +

2.986

+ + + +

2.987

+ + + + +

2.966

+ +

2.919

+ +

2.976

+ +

3.000

+ +

2.922

+ + +

2.929

+ +

2.962

+ +

2.926

+ + +

2.954

+ +

3.020

+ +

Ejemplo 3

5 Ensayos de CMSP humanas.

La actividad antagonista de los compuestos de esta invencion se demostro ademas usando celulas mononucleares de sangre periferica humanas (CMSP). Las CMSP contienen una mezcla de celulas incluyendo monocitos y celulas dendrfticas mieloides (las CDm) que expresan TLR8. Cuando se estimulan con los agonistas de TLR8 de moleculas pequenas, las CMSP producen niveles aumentados de IL-8. Se evaluo la capacidad de los antagonistas de TLR8 10 para inhibir la produccion de TLR8 en las CMSP humanas. Se observo la inhibicion dependiente de la dosis cuando las celulas eran estimuladas con CL075, un agonista de TLR8 de tiazoquinolina estructuralmente distinto. La Figura 1 muestra inhibicion dependiente de la dosis de produccion de IL-8 en CMSP humanas estimuladas con CL075. Los datos mostrados en la Figura 1 son un experimento representativo de un donador evaluado en pozos de cultivo por duplicado. Se anadieron concentraciones crecientes (de 3 a 1.000 nM) de los Compuestos 3.348, 2.987, 3.261,

3.387 y 3.448 (etiquetados como VTX-3348, VTX-2987, VTX-3261, VTX-3387, VTX-3448 en la Figura 1) a CMSP humanas (50.000 celulas/pozo en RPMI) y se incubaron durante 2 horas en una incubadora de CO2 humidificada a 37°C. Se anadio CL075 (Invivogen) a una concentracion final de 100 ng/ml (400 nM) y se incubaron las celulas durante la noche. Al final de la incubacion, se centrifugaron las celulas y se analizo en los sobrenadantes del cultivo 5 celular IL-8 por ELISA (estuche eBiosciene) por las instrucciones del fabricante. La absorbancia (DO 450 nM) representativa de niveles de IL-8 se muestra en el eje y de la Figura 1. En ausencia de agonistas o antagonistas (NS) de TLR8 la DO fue 0,417 y la adicion de CL075 aumento la DO a 1,3777 (primeras dos barras a la izquierda de la Figura 1). Como se demuestra en la Figura 1, en presencia de concentraciones crecientes de antagonistas de TLR8, se redujeron los niveles de IL-8 de un modo dependiente de la dosis.

10 El experimento mostrado en la Figura 1 se repitio en multiples donadores y con moleculas de antagonista de TLR8 adicionales (vease la Figura 2). Se estimularon celulas con CL075 (100 ng/ml) y se midio la inhibicion de la produccion de IL-8 como se describe en la Figura 1. Se muestra el porcentaje de inhibicion en el eje y, y las concentraciones de los antagonistas de TLR8 (3-1.000 nM) en el eje x en la Figura 2. El compuesto 764 presenta la estructura:

15

La descripcion anterior se considera como ilustrativa solo de los principios de la invencion. Ademas, puesto que seran evidentes numerosas modificaciones y cambios para los expertos en la materia, no se desea limitar la invencion a la construccion exacta y al procedimiento mostrados como se describio anteriormente. De acuerdo con esto, se puede recurrir a todas las modificaciones y equivalentes adecuados que se encuentren dentro del alcance 20 de la invencion como se define por las reivindicaciones que siguen.

Las expresiones "comprenden", "que comprende", "incluyen", "que incluye" e "incluye" cuando se usan en esta memoria descriptiva y en las reivindicaciones siguientes se destinan a especificar la presencia de caracterfsticas, numeros enteros, componentes o etapas, indicados, pero no excluyen la presencia o la adicion de otra u otras caracterfsticas, numeros enteros, componentes, etapas o grupos, mas, de los mismos.

25

imagen45

Claims (13)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   1. Un compuesto con la formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo:

   imagen1

   en el que:

   es un doble enlace o un enlace sencillo;

   R2 y R3 se seleccionan independientemente de H y alquilo C1-C6 o R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado con 3 a 7 miembros del anillo;

   uno de R7 y R8 es

   imagen2

   y el otro es hidrogeno;

   R4 es -NRcRd u -OR10;

   Rc y Rd son alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido con uno o mas -OH; R10 es alquilo C1-C12 opcionalmente sustituido con uno o mas -OH;

   Z es C y es un enlace doble 0 Z es N y es un enlace sencillo; Ra y Rb se seleccionan

   independientemente de H, alquilo C1-C12, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C12 y Re, en los que el alquilo C1-C12 esta opcionalmente sustituido con uno 0 mas -OR10 0 Re, Re se selecciona de -NH2, -NH(alquilo C1-C12) y -N(alquilo C1-

   2 2

   Ci2)2; R1 esta ausente cuando es un doble enlace 0 cuando es un enlace sencillo, N1-R1 y uno de

   Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb puede ser hidrogeno o estar ausente como sea necesario para satisfacer la insaturacion del anillo y al menos se aplica uno de los A-D siguientes:

   A) R7 no es hidrogeno

   B) R8 no es hidrogeno y al menos uno de Ra y Rb no es hidrogeno;

   C) Z es N o

   D) N1-R1 y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 57 miembros del anillo.
2. 2. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que

   R7

   imagen3
3. 3. El compuesto segun la reivindicacion 1 o 2, en el que al menos uno de Ra y Rb no es hidrogeno o uno de Ra y Rb es alquilo C1-C12 y el otro de Ra y Rb es hidrogeno o uno de Ra y Rb es alquilo C1-C12 sustituido con Re o tanto Ra como Rb son alquilo C1-C12 o uno de Ra y Rb es Re y el otro de Ra y Rb es hidrogeno.
4. 4. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R8 no es hidrogeno.
5. 5. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que N1 y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo

   saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5-7 miembros del anillo y el otro de Ra o Rb es hidrogeno o esta ausente cuando sea necesario para satisfacer la insaturacion del anillo.
6. 6. El compuesto segun la reivindicacion 5, en el que Ni y uno de Ra o Rb se unen para formar un heterociclo saturado, parcialmente insaturado o insaturado con 5 miembros del anillo.
7. 7. El compuesto segun la reivindicacion 6, en el que Ni y uno de Ra o Rb se unen para formar

   imagen4

   imagen5
8. 8. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que al menos uno de R2 y R3 no es hidrogeno o R2 y R3 se unen para formar un carbociclo saturado.
9. 9. El compuesto segun la reivindicacion 8, en el que R2 y R3 se unen para formar ciclopropilo.
10. 10. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que Z es N.

    10 11. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R4 es -OR10 y R10 es alquilo o R4 es -NRcRd y Rc y Rd son los

    dos alquilo.
11. 12. El compuesto segun la reivindicacion 11, en el que R4 es -O-etilo o -N(propilo)2.
12. 13. El compuesto segun la reivindicacion 1, seleccionado de

    imagen6

    imagen7

    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
13. 14. Una composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-13 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.

    5 15. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-13 o una sal farmaceuticamente aceptable del

    mismo para uso en el tratamiento de una afeccion seleccionada de: cancer, enfermedad asociada a inmunocomplejos, enfermedad autoinmunitaria, enfermedad infecciosa, trastorno inflamatorio, inmunodeficiencia, rechazo de injerto, enfermedad del injerto contra el hospedador, alergia, enfermedad cardiovascular, enfermedad fibrotica, asma y sepsis.