CN114667134A - 苯并氮杂䓬缀合物的制剂及其用途 - Google Patents

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amino acid
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heavy chain
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肖恩·韦斯利·史密斯
萨提什·纳塔拉詹
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Abstract

提供了包含缀合物的水性制剂以及使用所述水性制剂进行治疗的方法，所述缀合物包含与多肽缀合的含有苯并氮杂
Figure DDA0003569925350000011
或苯并氮杂
Figure DDA0003569925350000012
样结构的化合物。还提供了包含缀合物的冻干组合物，所述缀合物包含与多肽缀合的含有苯并氮杂
Figure DDA0003569925350000014
或苯并氮杂

Description

苯并氮杂䓬缀合物的制剂及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求2019年8月15日提交的美国临时申请第62/887,335号的优先权的权益，将该申请出于任何目的通过引用以其整体并入本文。
序列表
本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表作为2020年8月12日创建的标题为“2020-08-12_01230-0008-00PCT_Seq_List_ST25.txt”的文件提供，其大小为65,536字节。序列表的电子格式的信息通过引用以其整体并入本文。
领域
本申请涉及苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000012
和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000013
样缀合物的制剂。在一些实施方案中，苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000014
和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000015
样缀合物是包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000016
化合物和多肽，如抗体的免疫刺激性缀合物。
背景
在美国，导致死亡的主要原因之一是癌症。常规的癌症治疗方法，如化学疗法、手术或放射疗法，往往对癌症具有高毒性和/或非特异性，导致有限的功效和有害的副作用。免疫系统具有成为对抗癌症的强大、特定工具的潜能。这一观察结果导致了免疫治疗剂作为临床试验的候选药物的发展。免疫治疗剂可以通过加强特异性免疫应答来发挥作用，并且具有成为强大的抗癌治疗的潜能。此类免疫治疗剂可以包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000017
化合物，其在一些情况下充当TLR8激动剂。
通过引用并入
本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请具体地且单独地表示为通过引用并入一样。
概述
在一些实施方案中，提供了水性制剂，其包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure BDA0003569925330000021
其中
Figure BDA0003569925330000022
是双键或单键；
其中当
Figure BDA0003569925330000023
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure BDA0003569925330000024
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
其中制剂的pH范围为约4.5至约5.2。在某些实施方案中，制剂的pH范围为4.4至5.4。在另外的实施方案中，制剂的pH为约4.9或是4.9。
在一些实施方案中，提供了冻干制剂，其包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure BDA0003569925330000025
其中
Figure BDA0003569925330000026
是双键或单键；
其中当
Figure BDA0003569925330000027
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure BDA0003569925330000028
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
其中在冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，水性制剂的pH范围为约4.5至约5.2。在某些实施方案中，制剂的pH范围为4.4至5.4。在另外的实施方案中，制剂的pH为约4.9或是4.9。
提供了控制与多肽缀合的化合物在水性制剂中的水解的方法，其中所述化合物包含以下结构：
Figure BDA0003569925330000031
其中
Figure BDA0003569925330000032
是双键或单键；
其中当
Figure BDA0003569925330000033
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure BDA0003569925330000034
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
所述方法包括配制缀合物以形成水性制剂，其中水性制剂的pH范围为约4.5至约5.2。在某些实施方案中，制剂的pH范围为4.4至5.4。在另外的实施方案中，制剂的pH为约4.9或是4.9。
还提供了治疗对象的疾病和病症的方法，其包括向所述对象施用治疗有效量的本文提供的水性制剂。在一些实施方案中，疾病或病症是癌症、纤维化或感染性疾病。
附图简述
本公开内容的某些特征在所附权利要求书中特别阐述。通过参考阐述其中利用本公开内容的原理的说明性方面的以下详述和及其附图，将获得对本公开内容的特征和优点的更好理解：
图1显示了在2-8℃、25℃和40℃下于来自表1的制剂1-5中的缀合物稳定性。
图2显示了在2-8℃、25℃和40℃下孵育2周之后来自表1的制剂1的疏水相互作用色谱(HIC)曲线。
图3显示了在零时和在25℃下储存2周之后来自表1的制剂1和3的HIC曲线。
图4显示了来自表1的制剂11和24的HIC曲线，所述制剂11和24在0时下和在25℃下孵育1周之后分别具有10mg/ml和80mg/ml的缀合物浓度。
图5显示了来自表1的制剂3和24的HIC曲线，所述制剂3和24的pH分别为6.5和4.5，并且在0时下和在25℃下孵育2周之后分别具有10mg/ml和80mg/ml的缀合物浓度。
图6A和6B显示了在25℃下孵育2周之后，来自表1的制剂24的通过HIC进行的药物抗体比(DAR)(图6A)和通过RP-HPLC进行的游离接头-有效载荷(％wt/wt)(图6B)的测量。有效载荷是苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000041
化合物，其缀合至HER2抗体，如实施例1所述。水平虚线表示针对测定预期的分析可变性窗口，并且虚线表示中心点。
图7显示了包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000042
化合物(顶部)、内酰胺化合物(底部)和已经在应力条件下(即，在40℃下于PBS(中性pH)中持续3天)孵育的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000043
缀合物的样品的经消化的抗体缀合物的RP-HPLC迹线。
详述
本公开内容提供了缀合物，其包含稳定缀合至多肽的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000044
化合物。尽管此类连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000045
化合物稳定地连接到蛋白质(如抗体)，但此类化合物在中性pH的水性制剂中，特别地当储存在应力条件(如，在温度25℃或更高下)下时，可经历化学转化(如脱氨基)。本申请的发明人惊奇地发现，在约4.5至约5.2的pH下配制缀合物减少了化学转化。因此，在本文的各个实施方案中，提供了包含与多肽(如抗体)连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000046
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000047
样化合物的缀合物的水性制剂，其中水性制剂的pH为约4.5至约5.2或pH为4.4至5.4或pH为约4.9。
根据以下详述，本公开内容的另外方面和优点对于本领域技术人员将变得显而易见，其中显示和描述了本公开内容的说明性方面。如将理解的，本公开内容能够具有其它和不同的方面，并且其若干细节能够在各个方面进行修改，所有这些都不背离本公开内容。因此，这些描述在本质上被认为是说明性的，而不是限制性的。
定义
如本文所用，“肿瘤相关抗原”或“肿瘤抗原”是指存在于癌细胞上的抗原，其能够被抗体识别并且与正常(非癌性)细胞相比优先存在于癌细胞上。
如本文所用，术语“抗体”是指特异性结合特定抗原或对特定抗原具有免疫反应性的免疫球蛋白分子。结合特定抗原的抗体部分可以被称为“抗原结合结构域”。术语“抗体”可以包括，例如，多克隆、单克隆、遗传工程化及其抗原结合片段。抗体可以是例如鼠的、嵌合的、人源化的、异源缀合物(heteroconjugate)、双特异性的、双链抗体、三链抗体或四链抗体。抗原结合片段可以包括例如Fab’、F(ab′)2、Fab、Fv、rIgG、scFv、hcAb(重链抗体)、单域抗体、VHH、VNAR、sdAb或纳米抗体。
如本文所用，“识别”是指抗原结合结构域与抗原之间的特异性缔合或特异性结合。特异性缔合或特异性结合不要求抗原结合结构域不与任何其它抗原缔合或结合，而是与不相关抗原缔合或结合相比，它优先与抗原缔合或结合。
如本文所用，“Fc结构域”是指能够特异性结合Fc受体，如Fc受体或FcRn受体的来自抗体的Fc部分的结构域。
如本文所用，“识别”是指抗原结合结构域与抗原之间的特异性缔合或特异性结合。特异性缔合或特异性结合不要求抗原结合结构域不与任何其它抗原缔合或结合，而是与不相关抗原缔合或结合相比，它优先与抗原缔合或结合。
如本文所用，“髓样细胞”是指树突细胞、巨噬细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、髓源性抑制细胞(MDSC)。
如本文所用，“抗原呈递细胞”或“APC”是指能够以生产性方式将抗原呈递给T细胞或B细胞的细胞，从而导致对所述抗原具有特异性的T-或B-细胞克隆的激活和/或扩增。非限制性示例性APC包括树突细胞、巨噬细胞、单核细胞和B细胞。在一些实施方案中，抗原呈递细胞是树突细胞、巨噬细胞或单核细胞。
如本文所用，“免疫刺激性化合物”是激活或刺激免疫细胞，如髓样细胞或APC的化合物。
如本文所用，“髓样细胞激动剂”是指由髓样细胞激活或刺激免疫应答的化合物。
如本文所用，术语“B-细胞耗竭剂”是指当施用至对象时导致对象中B细胞数量减少的试剂。在一些实施方案中，B-细胞耗竭剂结合B细胞表面分子，诸如例如CD20、CD22或CD19。在一些实施方案中，B-细胞耗竭剂抑制B细胞存活因子，诸如例如BLyS或APRIL。B-细胞耗竭剂包括但不限于抗CD20抗体、抗CD19抗体、抗CD22抗体、抗BLyS抗体、TACI-Ig、BR3-Fc和抗BR3抗体。非限制性示例性B-细胞耗竭剂包括利妥昔单抗、奥瑞珠单抗(ocrelizumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、依帕珠单抗、MEDI-51(抗CD19抗体)、贝利木单抗、BR3-Fc、AMG-623和阿塞西普。
如本文所用，术语“缀合物”是指任选地经由一个或多个接头连接至至少一种化合物的多肽。在一些实施方案中，多肽是抗体。
如本文所用，“免疫刺激性缀合物”是指激活或刺激免疫系统或其一部分的缀合物，如通过体外或体内测定法确定的。
如本文所用，“免疫细胞”是指T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞或抗原呈递细胞。在一些实施方案中，免疫细胞是T细胞、B细胞、NK细胞或NKT细胞。在一些实施方案中，免疫细胞是抗原呈递细胞。在一些实施方案中，免疫细胞不是抗原呈递细胞。
术语“盐”或“药学上可接受的盐”是指来源于本领域熟知的各种有机和无机抗衡离子的盐。药学上可接受的酸加成盐可以用无机酸和有机酸形成。可以衍生出盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。药学上可接受的碱加成盐可以用无机碱和有机碱形成。可以衍生出盐的无机碱包括例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝等。可以衍生出盐的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺，包括天然存在的取代的胺、环胺、碱性离子交换树脂等，具体地如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐选自铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。
术语“Cx-y”当结合化学部分，如烷基、烯基或炔基使用时意在包括在链中含有x至y个碳的基团。例如，术语“C1-6烷基”是指含有1至6个碳的取代的或未取代的饱和烃基团，包括直链烷基和支链烷基基团。术语–Cx-y亚烷基-是指在亚烷基链中含有x至y个碳的取代或未取代的亚烷基链。例如，–C1-6亚烷基-可选自亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基和亚己基，其中的任一个是任选取代的。
术语“Cx-y烯基”和“Cx-y炔基”是指取代或未取代的不饱和脂肪族基团，其长度和可能的取代类似于上述烷基，但分别含有至少一个双键或三键。术语“–Cx-y亚烯基-”是指亚烯基链中具有x至y个碳的取代或未取代的亚烯基链。例如，–C2-6亚烯基-可以选自亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基和亚己烯基，其中的任一个是任选取代的。亚烯基链可以在亚烯基链中具有一个双键或多于一个的双键。术语“–Cx-y亚炔基-”是指在亚烯基链中具有x至y个碳的取代或未取代的亚炔基链。例如，–C2-6亚烯基-可选自亚乙炔基、亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基和亚己炔基，其中的任一个是任选取代的。亚炔基链可以在亚炔基链中具有一个叁键或多于一个的叁键。
“亚烷基”是指二价烃链，其将分子的其余部分与基团连接，仅由碳和氢组成，不含不饱和度并且优选具有1至12个碳原子，例如，亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基等。亚烷基链通过单键与分子的其余部分连接，并且通过单键与基团连接。亚烷基链与分子的其余部分和与基团的连接点分别通过末端碳。在其它实施方案中，亚烷基包含一至五个碳原子(即，C1-C5亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含一至四个碳原子(即，C1-C4亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含一至三个碳原子(即，C1-C3亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含一至两个碳原子(即，C1-C2亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含一个碳原子(即，C1亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含五至八个碳原子(即，C5-C8亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含二至五个碳原子(即，C2-C5亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含三至五个碳原子(即，C3-C5亚烷基)。除非在说明书中另有特别说明，否则亚烷基链任选地被一种或多种取代基如本文所述的那些取代基取代。
“亚烯基”是指二价烃链，其将分子的其余部分与基团连接，仅由碳和氢组成，含有至少一个碳-碳双键，并且优选具有2至12个碳原子。亚烯基链通过单键与分子的其余部分连接，并且通过单键与基团连接。亚烯基链与分子的其余部分和与基团的连接点分别通过末端碳。在其它实施方案中，亚烯基包含二至五个碳原子(即，C2-C5亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含二至四个碳原子(即，C2-C4亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含二至三个碳原子(即，C2-C3亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含两个碳原子(即，C2亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含五至八个碳原子(即，C5-C8亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含三至五个碳原子(即，C3-C5亚烯基)。除非在说明书中另有特别说明，否则亚烯基链任选地被一种或多种取代基如本文所述的那些取代基取代。
“亚炔基”是指二价烃链，其将分子的其余部分与基团连接，仅由碳和氢组成，含有至少一个碳-碳叁键，并且优选具有2至12个碳原子。亚炔基链通过单键与分子的其余部分连接，并通过单键与基团连接。亚炔基链与分子的其余部分和与基团的连接点分别通过末端碳。在其它实施方案中，亚炔基包含二至五个碳原子(即，C2-C5亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含二至四个碳原子(即，C2-C4亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含二至三个碳原子(即，C2-C3亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含两个碳原子(即，C2亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含五至八个碳原子(即，C5-C8亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含三至五个碳原子(即，C3-C5亚炔基)。除非在说明书中另有特别说明，否则亚炔基链任选地被一种或多种取代基如本文所述的那些取代基取代。
“亚杂烷基”是指二价烃链，其在链中包含至少一个杂原子，不含不饱和度，并且优选具有1至12个碳原子和1至6个杂原子，如-O-、-NH-、-S。亚杂烷基链通过单键与分子的其余部分连接，并且通过单键与基团连接。亚杂烷基链与分子的其余部分和与基团的连接点通过链的末端原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含一至五个碳原子和一至三个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含一至四个碳原子和一至三个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含一至三个碳原子和一至两个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含一至两个碳原子和一至两个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含一个碳原子和一至两个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含五至八个碳原子和一至四个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含两至五个碳原子和一至三个杂原子。在其它实施方案中，亚杂烷基包含三至五个碳原子和一至三个杂原子。除非在说明书中另有特别说明，否则亚杂烷基链任选地被一种或多种取代基如本文所述的那些取代基取代。
如本文所用的术语“碳环”是指其中环的每个原子是碳的饱和的、不饱和的或芳族环。碳环包括3至10元单环、6至12元双环和6至12元桥接环。双环碳环的每个环可选自饱和的、不饱和的和芳族环。在一个示例性实施方案中，芳族环，例如苯基可稠合至饱和的或不饱和的环，例如环己烷、环戊烷或环己烯。当化合价允许时，双环碳环包括饱和的、不饱和的和芳族双环的任何组合。双环碳环包括环大小的任何组合，如4-5稠环体系、5-5稠环体系、5-6稠环体系、6-6稠环体系、5-7稠环体系、6-7稠环体系、5-8稠环体系和6-8稠环体系。示例性碳环包括环戊基、环己基、环己烯基、金刚烷基、苯基、二氢化茚基和萘基。术语“不饱和的碳环”是指具有至少一个不饱和度且不包括芳族碳环的碳环。不饱和碳环的实例包括环己二烯、环己烯和环戊烯。
如本文所用的术语“杂环”是指包含一个或多个杂原子的饱和的、不饱和的或芳族环。示例性杂原子包括N、O、Si、P、B和S原子。杂环包括3至10元单环、6至12元双环和6至12元桥接环。当化合价允许时，双环杂环包括饱和的、不饱和的和芳族双环状环的任何组合。在一个示例性实施方案中，芳族环，例如吡啶基，可稠合至饱和的或不饱和的环，例如环己烷、环戊烷、吗啉、哌啶或环己烯。双环杂环包括环大小的任何组合，如4-5稠环体系、5-5稠环体系、5-6稠环体系、6-6稠环体系、5-7稠环体系、6-7稠环体系、5-8稠环体系和6-8稠环体系。术语“不饱和的杂环”是指具有至少一个不饱和度且不包括芳族杂环的杂环。不饱和杂环的实例包括二氢吡咯、二氢呋喃、噁唑啉、吡唑啉和二氢吡啶。
术语“杂芳基”包括芳族单环结构，优选5至7元环，更优选5至6元环，其环结构包括至少一个杂原子，优选一至四个杂原子，更优选一个或两个杂原子。术语“杂芳基”还包括具有两个或更多个环状环的多环体系，其中两个或更多个碳对于两个相邻的环是共同的，其中至少一个环是杂芳族，如，其它环可以是芳族或非芳族的碳环或杂环。杂芳基基团包括，例如，吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等。
术语“取代的”是指具有替代一个或多个碳上的氢的取代基或可取代的杂原子的部分，例如结构的-NH-。应理解，“取代”或“被......取代”包括隐含的条件，即此类取代符合取代的原子和取代基的允许化合价并且取代产生稳定的化合物，即不会诸如通过重排、环化、消除等自发地经历转化的化合物。在某些实施方案中，取代是指具有替代同一碳原子上的两个氢原子的取代基的部分，如用氧代、亚氨基或硫代基团取代在单个碳上的两个氢原子。如本文所用，术语“取代”预期包括有机化合物的所有可允许的取代基。在广义方面，允许的取代基包括有机化合物的无环和环状、支链和无支链、碳环和杂环、芳族和非芳族取代基。对于适当的有机化合物，允许的取代基可以是一种或多种，并且可以相同或不同。出于本公开内容的目的，诸如氮的杂原子可以具有氢取代基和/或本文所述的有机化合物的任何允许的取代基，其满足杂原子的化合价。
在一些实施方案中，取代基可以包括本文所述的任何取代基，例如：卤素、羟基、氧代(＝O)、硫代(＝S)、氰基(-CN)、硝基(-NO2)、亚氨基(＝N-H)、肟基(＝N-OH)、肼基(＝N-NH2)、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)；以及烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基和杂芳基烷基，它们中的任何一个可以任选地被以下基团取代：烷基、烯基、炔基、卤素、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、氧代(＝O)、硫代(＝S)、氰基(-CN)、硝基(-NO2)、亚氨基(＝N-H)、肟基(＝N-OH)、肼基(＝N-NH2)、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)；其中每个Ra独立地选自氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基，其中每个Ra(化合价允许的话)可以任选地被以下基团取代：烷基、烯基、炔基、卤素、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、氧代(＝O)、硫代(＝S)、氰基(-CN)、硝基(-NO2)、亚氨基(＝N-H)、肟基(＝N-OH)、肼(＝N-NH2)、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)；以及其中每个Rb独立地选自直连键或者直链或支链的亚烷基、亚烯基或亚炔基链，并且每个Rc为直链或支链的亚烷基、亚烯基或亚炔基链。
本领域技术人员将理解，如果合适，取代基本身可以是取代的。除非特别说明为“未取代的”，否则本文对化学部分的提及应理解为包括取代的变型。例如，提及“杂芳基”基团或部分隐含地包括经取代和未取代的变型。
具有碳-碳双键或碳-氮双键的化学实体可以以Z-或E-形式(或顺式-或反式-形式)存在。此外，一些化学实体可以以各种互变异构形式存在。除非另有说明，否则本文所述的化合实体也意在包括所有Z-、E-和互变异构形式。
“互变异构体”是指其中质子从分子的一个原子转移到同一分子的另一个原子是可能的分子。在某些实施方案中，本文呈现的化合物以互变异构体存在。在可能发生互变异构化的情况下，将存在互变异构体的化学平衡。互变异构体的确切比例取决于几个因素，包括物理状态、温度、溶剂和pH。互变异构平衡的一些实例包括：
Figure BDA0003569925330000121
当结构包括与波浪线交叉的键如
Figure BDA0003569925330000122
时，波浪线指示该键与至少一个另外的部分共价连接。在一些方面，本文所述的缀合物包含与多肽连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000123
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000124
样化合物，并且苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000125
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000126
样化合物结构显示为具有悬垂波浪线/键的取代基，表明苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000127
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000128
样化合物经由所示键直接或间接连接至多肽。
如本文所用的短语“静脉内施用(intravenous administration)”和“静脉内施用(administered intravenously)”是指将缀合物注射或输注到对象的静脉中。
如本文所用的短语“静脉内缓慢输注”和“IV缓慢输注”是指导致Tmax为4小时或更久的静脉内输注。
短语“皮下施用(subcutaneous administration)”、“经皮下施用(subcutaneously administering)”等是指将缀合物施用至对象的皮下组织。为清楚起见，皮下施用不同于肿瘤内注射到位于皮下的肿瘤或癌性病变中。
短语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理的医学判断范围内适用于与人类和动物的组织接触、而没有过多的毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症、与合理的效益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
短语“靶向部分”是指相对于其它非靶分子而言对靶分子具有选择性亲和力的结构。靶向部分结合靶分子。靶向部分可以是多肽，诸如例如抗体、肽、配体、受体、或其结合部分。靶生物分子可以是细胞的生物受体或其它结构，如肿瘤抗原。靶向部分通常对特定的细胞表面抗原具有特异性，以便将免疫刺激性化合物靶向靶细胞或疾病部位。
如本文在数字的上下文中所用的术语“约”是指以该数字为中心并且跨越比此数字小10％和比此数字大10％的范围。在范围的上下中所用的术语“约”是指跨越比范围中列出的最小数字小10％并且比范围中列出的最大数字大10％的扩展范围。
短语“……中的至少一个/至少一种”当后面跟项目或要素的列表时是指列表中的一个或多个要素的开放式集合，其可以但不一定包括多于一个要素。
示例性多肽
在各个实施方案中，缀合物包含与多肽连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000131
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000132
样化合物。可包含于缀合物中的非限制性示例性多肽包括抗体、融合蛋白、肽等。在一些实施方案中，多肽是受体或受体胞外结构域、细胞因子(如免疫细胞因子)或配体。在一些实施方案中，多肽是包含例如与Fc结构域融合的受体胞外结构域的融合蛋白。在一些实施方案中，多肽是特异性结合抗原的非抗体分子，包括但不限于DARPin、阿菲默(affimer)、avimer、打结素(knottin)、单体(monobody)、脂质运载蛋白(lipocalin)、抗运载蛋白(anticalin)、‘T-体’、亲和体、肽体、亲和力夹或肽。在一些实施方案中，多肽是双环肽(如，
Figure BDA0003569925330000133
)，如在公开的国际申请号WO2014/140342、WO2013/050615、WO2013/050616和WO2013/050617(其结合多肽通过引用并入本文)中所述。
在一些实施方案中，如本文所述的缀合物包含抗体。在一些此类实施方案中，抗体包含一个或多个抗原结合结构域及Fc结构域，其中每个抗原结合结构域特异性结合抗原。抗体可具有例如特异性结合第一抗原的第一抗原结合结构域、特异性结合第二抗原的第二抗原结合结构域和Fc结构域。在各个实施方案中，抗体可包括两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域识别抗原上的相同表位。抗体可包括两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域识别相同抗原上的不同表位。抗体可包括两个抗原结合结构域，其中每个抗原结合结构域识别不同抗原。在各个实施方案中，抗体具有一个抗原结合结构域。在各个实施方案中，抗原结合结构域可包含例如重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)，或在仅重链抗体的情况下，包含VHH。
可由诸如抗体的多肽结合的非限制性示例性抗原包括CD5、CD25、CD37、CD33、CD45、BCMA、CS-1、PD-L1、B7-H3、B7-DC(PD-L2)、HLD-DR、癌胚抗原(CEA)、TAG-72、EpCAM、MUC1、叶酸结合蛋白(FOLR1)、A33、G250(碳酸酐酶IX)、前列腺特异性膜抗原(PSMA)、GD2、GD3、GM2、Ley、CA-125、CA19-9(MUC1 sLe(a))、表皮生长因子、HER2、IL-2受体、EGFRvIII(de2-7 EGFR)、成纤维细胞激活蛋白(FAP)、腱生蛋白、金属蛋白酶、内皮唾酸蛋白、avB3、LMP2、EphA2、PAP、AFP、ALK、多唾液酸、TRP-2、岩藻糖基GM1、间皮素(MSLN)、PSCA、sLe(a)、GM3、BORIS、Tn、TF、GloboH、STn、CSPG4、AKAP-4、SSX2、豆荚蛋白(Legumain)、Tie 2、Tim 3、VEGFR2、PDGFR-B、ROR2、TRAIL1、MUC16、EGFR、CMET、HER3、MUC1、MUC15、CA6、NAPI2B、TROP2、CLDN18.2、RON、LY6E、FRAlpha、DLL3、PTK7、LIV1、ROR1、CLDN6、GPC3、ADAM12、LRRC15、CDH6、TMEFF2、TMEM238、GPNMB、ALPPL2、UPK1B、UPK2、LAMP-1、LY6K、EphB2、STEAP、ENPP3、CDH3、粘连蛋白4、LYPD3、EFNA4、GPA33、SLITRK6和HAVCR1。
在某些实施方案中，诸如抗体的多肽特异性结合非蛋白质或糖抗原，如GD2、GD3、GM2、Ley、多唾液酸、岩藻糖基GM1、GM3、Tn、STn、sLe(动物)或GloboH。
在某些实施方案中，诸如抗体的多肽特异性结合实体瘤抗原。在一些实施方案中，实体瘤抗原优先存在于一种或多种肉瘤或癌细胞上。在一些实施方案中，实体瘤抗原优先存在于一种或多种肉瘤细胞上。在一些实施方案中，实体瘤抗原优先存在于一种或多种癌细胞上。
在一些实施方案中，实体瘤抗原存在于以下的细胞上：脑癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、肾癌、胰腺癌、结直肠癌、卵巢癌、头颈癌、骨癌、皮肤癌、间皮瘤、膀胱癌、食道癌、胃部(胃)癌、前列腺癌、甲状腺癌、子宫癌或宫颈癌/子宫内膜癌。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于乳腺癌上的抗原，如HER2、TROP2、LIV-1、CDH3(p-钙粘素)、MUC1、唾液酸-表位CA6、PTK7、GPNMB、LAMP-1、LRRC15、ADAM12、EPHA2、TNC、LYPD3、EFNA4和CLDN6。在某些实施方案中，乳腺癌抗原是HER2。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于脑癌上的抗原，如EGFRvIII、TNC和DLL-3。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于肺癌上的抗原，如间皮素、HER2、EGFR、PD-L1、MSLN、LY6K、CD56、PTK7、FOLR1、DLL3、SLC34A2、CECAM5、MUC16、LRRC15、ADAM12、EGFRvIII、LYPD3、EFNA4和MUC1。在某些实施方案中，肺癌抗原是HER2。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于肝癌上的抗原，如GPC3、EPCAM、CECAM5。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于肾癌上的抗原，如HAVCR1、ENPP3、CDH6、CD70和cMET。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于胰腺癌上的抗原，如PTK7、MUC16、MSLN、LRRC15、ADAM12、EFNA4、MUC5A和MUC1。在某些实施方案中，胰腺癌抗原是LRRC15。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于结直肠癌上的抗原，如EPHB2、TMEM238、CECAM5、LRRC15、ADAM12、EFNA4和GPA33。在某些实施方案中，结直肠癌抗原是HER2。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于卵巢癌上的抗原，如MUC16、MUC1、MSLN、FOLR1、sTN、VTCN1、HER2、PTK7、FAP、TMEM238、LRRC15、CLDN6、SLC34A2和EFNA4。在某些实施方案中，卵巢癌抗原是HER2。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于头颈癌上的抗原，如LY6K、PTK7、LRRC15、ADAM12、LYPD3、EFNA4和TNC。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于骨癌上的抗原，如EPHA2、LRRC15、ADAM12、GPNMB、TP-3和CD248。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于间皮瘤上的抗原，如MSLN。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于膀胱癌上的抗原，如LY6K、PTK7、UPK1B、UPK2、TNC、粘连蛋白4、SLITRK6、LYPD3、EFNA4和HER2。在某些实施方案中，膀胱癌抗原是粘连蛋白4。在某些其它实施方案中，膀胱癌抗原是HER2。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于食道癌或胃部(胃)癌上的抗原，如HER2、EPHB2、TMEM238、CECAM5和EFNA4。在某些实施方案中，食道癌抗原是HER2。在某些其它实施方案中，胃癌抗原是HER2。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于前列腺癌上的抗原，如PSMA、FOLH1、PTK7、STEAP、TMEFF2(TENB2)、OR51E2、SLC30A4和EFNA4。在某些实施方案中，前列腺癌抗原是PSMA。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于甲状腺癌上的抗原，如PTK7。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于子宫癌上的抗原，如存在于子宫癌上，如LY6K、PTK7、EPHB2、FOLR1、ALPPL2、MUC16和EFNA4。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于宫颈癌/子宫内膜癌上的抗原，如LY6K、PTK7、MUC16、LYPD3、EFNA4和MUC1。
在一些实施方案中，实体瘤抗原是存在于肉瘤上的抗原，如LRRC15。
在一些实施方案中，肿瘤抗原是HER2。在一些方面，HER2抗原在例如卵巢癌细胞、膀胱癌细胞、食道癌细胞、胃癌细胞或乳腺癌细胞上表达。
在一些方面，抗原是肝脏细胞抗原。在一些方面，肝脏细胞抗原在微管细胞、库普弗细胞(Kupffer cell)、肝细胞或其任何组合上表达。在一些方面，肝脏细胞抗原是肝细胞抗原。在一些方面，肝脏细胞抗原选自：ASGR1(脱唾液酸糖蛋白受体1)、ASGR2(脱唾液酸糖蛋白受体2)、TRF2、UGT1A1、SLC22A7、SLC13A5、SLC22A1和C9。在一些方面，肝脏细胞抗原选自：ASGR1、ASGR2和TRF2。在某些实施方案中，肝脏细胞抗原是ASGR1。在一些方面，肝脏细胞抗原在感染了选自HBV和HCV的病毒的肝脏细胞上表达。在某些实施方案中，肝脏细胞抗原是ASGR1并且肝脏细胞感染了HBV。
在一些方面，抗原是来自选自HBV和HCV的病毒的病毒抗原。在一些方面，病毒抗原是HBV抗原。在一些方面，病毒抗原是HBsAg、HBcAg或HBeAg。在一些方面，病毒抗原是HBsAg。
在一些实施方案中，抗体包含抗原结合结构域和Fc结构域。在一些实施方案中，抗体包含通过二硫键共价连接在一起的两条轻链多肽(轻链)和两条重链多肽(重链)。重链通常包含重链可变区(VH)和重链恒定区。重链恒定区包含三个结构域CH1、CH2和CH3。Fc结构域通常包含重链CH2和CH3结构域。轻链通常包含轻链可变区(VL)和轻链恒定区。抗体可变结构域的抗原识别区通常包含位于两条重链和轻链的N-端末端处的重链可变区和轻链可变区的框架内的六个互补决定区(CDR)或高变区。恒定结构域提供了抗体的一般框架，并且可能不直接参与抗体与抗原的结合，但可以参与各种效应子功能，如抗体参与抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)。
抗体可以是任何类别，如IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。某些类别还可进一步分为同种型，如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定区可以分别是α、δ、ε、γ和μ。轻链可以是卡帕(或κ)或者兰姆达(或λ)。
在一些实施方案中，抗原结合结构域包含轻链互补决定区1(LCDR1)、轻链互补决定区2(LCDR2)、轻链互补决定区3(LCDR3)、重链互补决定区1(HCDR1)、重链互补决定区2(HCDR2)和重链互补决定区3(HCDR3)。在一些实施方案中，抗体可为仅重链抗体，在这种情况下，抗原结合结构域包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且抗体缺乏轻链。除非另有说明，否则本文所述的CDR可根据IMGT(国际免疫遗传学信息(international ImMunoGeneTicsinformation))系统定义。
抗体可以是嵌合的或人源化的。非人(如鼠)抗体的嵌合和人源化形式可以是完整(全长)嵌合免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其抗原结合片段(如抗体的Fv、Fab、Fab'、F(ab')2或其它靶结合亚结构域)，其可以含有源自非人免疫球蛋白的序列。通常，人源化抗体可以包含至少一个并且通常是两个可变结构域中的基本上所有，其中所有或基本上所有的CDR区对应于非人免疫球蛋白的那些并且所有或基本上所有的框架(FR)区是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体还可包含至少一部分的免疫球蛋白恒定区(Fc)，Fc结构域，通常是人免疫球蛋白序列的那些。
本文所述的抗体可以是人抗体。如本文所用，“人抗体”可包括具有例如人免疫球蛋白的氨基酸序列的抗体，并且包括从人免疫球蛋白文库或者从对一种或多种人免疫球蛋白是转基因并且通常不表达内源性免疫球蛋白的动物分离的抗体。可以使用不能表达功能性内源性免疫球蛋白但可以表达人免疫球蛋白基因的转基因小鼠来生产人抗体。可以使用引导选择生成识别所选表位的完全人抗体。在这种方法中，选择的非人单克隆抗体，如小鼠抗体，用于指导选择识别相同表位的完全人抗体。
本文所述的抗体可以是双特异性抗体或双可变结构域抗体(DVD)。双特异性和DVD抗体是对至少两种不同的抗原具有结合特异性的单克隆抗体，通常是人或人源化抗体。
本文所述的抗体可以被衍生化或以其它方式修饰。例如，衍生化的抗体可以通过糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护/封闭基团的衍生化、蛋白水解裂解等进行修饰。
本文所述的抗体能够特异性结合肿瘤抗原。抗体能够特异性结合实体瘤抗原。
在一些实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：曲妥珠单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗、奥法木单抗、贝利木单抗、伊匹单抗、帕妥珠单抗、曲美木单抗、纳武单抗、帕博利珠单抗(pembrolizumab)、阿替利珠单抗、MDX-1105(WO2007/005874)、达沙珠单抗(dacetuzumab)、乌瑞芦单抗(urelumab)、MPDL3280A、兰布鲁珠单抗(lambrolizumab)、博纳吐单抗、尼妥珠单抗、扎鲁单抗(zalutumumab)、奥那妥珠单抗(onartuzumab)、帕曲妥单抗(patritumab)、克立妥单抗(clivatuzumab)、索非妥珠单抗(sofituzumab)、依决洛单抗(edrecolomab)、阿德木单抗(adecatumumab)、阿奈妥单抗(anetumab)、huDS6、利福妥珠单抗(lifastuzumab)、赛妥珠单抗(sacituzumab)、PR1A3、人源化PR1A3、人源化Ab2-3、克劳迪单抗(claudiximab)、AMG595、ABT806、西罗珠单抗(sibrotuzumab)、DS-8895a变体1、DS-8895a变体2、MEDI-547、那呐妥单抗(narnatumab)、RG7841、法妥珠单抗(farletuzumab)、米韦妥昔单抗(mirvetuximab)、J591变体1、J591变体2、洛伐妥珠单抗(rovalpituzumab)、PF-06647020、拉迪拉珠单抗(ladiratuzumab)、卡瑞利珠单抗(cirmtuzumab)、拉迪拉珠单抗(ladiratuzumab)、huLiv1-14(WO 2012078688)、Liv1-1.7A4(US 2011/0117013)、huLiv1-22(WO 2012078688)、4H11(US 2013/0171152)、4H5(US 2013/0171152)、格巴妥木单抗(glembatumumab)、莫奥珠单抗(oportuzumab)、恩诺单抗(enfortumab)、迪妥昔珠单抗(depatuxizumab)、ASG-15ME的抗体、huM25(WO2017/095808A1)和考曲妥珠单抗(codrituzumab)。
在一些实施方案中，抗体特异性结合乳腺癌抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、赛妥珠单抗、拉迪拉珠单抗、huLiv1-14(WO 2012078688)、Liv1-1.7A4(US 2011/0117013)、huLiv1-22(WO 2012078688)、huDS6、格巴妥木单抗、PF-0664720、MEDI-547、DS-8895a变体1和DS-08895a变体2。
在一些实施方案中，抗体特异性结合脑癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：AMG595、ABT806、洛伐妥珠单抗或迪妥昔珠单抗。
在一些实施方案中，抗体特异性结合肺癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：帕尼单抗、西妥昔单抗、帕博利珠单抗、纳武单抗、阿替利珠单抗和尼妥珠单抗、利福妥珠单抗、阿奈妥单抗、PF-0664720、法妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、利福妥珠单抗、索非妥珠单抗、huDS6、ABT806、AMG595和huM25(WO 2017/095808A1)。
在一些实施方案中，抗体特异性结合肝癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：考曲妥珠单抗、莫奥珠单抗和人源化PR1A3。
在一些实施方案中，抗体特异性结合肾癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：AGS-16M8F、AGS-16C3、CDX-014的抗体和奥那妥珠单抗。
在一些实施方案中，抗体特异性结合胰腺癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：PF-0664720、克立妥单抗、4H11(US2013/0171152)、4H5(US2013/0171152)、阿尼莫单抗(anetumumab)、huDS6、索非妥珠单抗、huM25(WO2017/095808A1)和RG7841。
在一些实施方案中，抗体特异性结合结直肠癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：huM25(WO2017/095808A1)、PR1A3、人源化PR1A3、pantumumab、西妥昔单抗、尼妥珠单抗和扎鲁单抗。
在一些实施方案中，抗体特异性结合卵巢癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：索非妥珠单抗、4H11(US 2013/0171152、4H5(US2013/0171152)、huDS6、法妥珠单抗、阿奈妥单抗、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、PF-0664720、西罗珠单抗、huM25(WO2017/095808)和利福妥珠单抗。
在一些实施方案中，抗体特异性结合头颈癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：西妥昔单抗、帕尼单抗、nimtuzumab、PF-0664720、pantumumab、西妥昔单抗、尼妥珠单抗和扎鲁单抗。
在一些实施方案中，抗体特异性结合骨癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：huM25(WO2017/095808A1)、DS-8895a变体1、DS-8895a变体2和glembatumab。
在一些实施方案中，抗体特异性结合皮肤癌上存在的抗原。
在一些实施方案中，抗体特异性结合间皮瘤上存在的抗原。
在一些实施方案中，抗体特异性结合宫颈癌/子宫内膜癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：PF-0664720、阿尼莫单抗、4H11(US2013/0171152)、4H5(US2013/0171152)、huDS6和索非妥珠单抗。
在一些实施方案中，抗体特异性结合膀胱癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：恩诺单抗、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和SLITRK6。
在一些实施方案中，抗体特异性结合胃癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：索非妥珠单抗、阿奈妥单抗、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和人源化PR1A3。
在一些实施方案中，抗体特异性结合前列腺癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：米韦妥昔单抗、J591变体1和J591变体2。
在一些实施方案中，抗体特异性结合甲状腺癌上存在的抗原。
在一些实施方案中，抗体特异性结合子宫癌上存在的抗原。在一些此类实施方案中，抗体可包含选自以下抗体的CDR(如根据IMGT系统的LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3)、可变区或整个重链和轻链：PF-0664720、法妥珠单抗、索非妥珠单抗、4H11(US2013/0171152和4H5(US2013/0171152)。
在一些实施方案中，抗体特异性结合肉瘤上存在的抗原。
在一些实施方案中，抗体特异性结合肝脏细胞上存在的抗原并且对象具有病毒感染(如，HBV或HCV)。抗体可以是例如结合ASGR1或ASGR2的抗体。
示例性Fc结构域
多肽，如融合蛋白或抗体，可包含Fc结构域。Fc结构域是能够结合一种或多种Fc受体(FcR)的结构。在各个实施方案中，Fc结构域来自IgG抗体，如IgG1、IgG2或IgG4抗体。Fc结构域通常包含重链恒定区的CH2和CH3结构域，但也可包含或多或少的重链恒定区。
Fc结构域可以是抗体的能够结合FcR的结构域。基于FcR识别的抗体类别，将FcR组织成类别(如，伽马(γ)、阿尔法(α)和伊普斯龙(ε))。FcαR类别结合IgA并且包括若干种同种型，FcαRI(CD89)和FcαμR。FcγR类别结合IgG并且包括若干种同种型，FcγRI(CD64)、FcγRIIA(CD32a)、FcγRIIB(CD32b)、FcγRIIIA(CD16a)和FcγRIIIB(CD16b)。FcγRIIIA(CD16a)可以是FcγRIIIA(CD16a)F158变体或V158变体。FcR还可以是FcRn受体。
每种FcγR同种型可在与IgG抗体的Fc结构域的结合亲和力方面不同。例如，FcγRI可以以比FcγRII或FcγRIII更高的亲和性结合IgG。特定FcγR同种型对IgG的亲和力可以部分地通过IgG抗体的位置CH2 84.4处的聚糖(如寡糖)来控制。例如，含有CH2 84.4聚糖的岩藻糖可以降低IgG对FcγRIIIA的亲和力。此外，由于缺乏半乳糖和末端GlcNAc部分，G0葡聚糖可以具有针对FcγRIIIA增加的亲和力。
Fc结构域与FcR的结合可增强免疫应答。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可导致免疫细胞成熟。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可导致树突细胞(DC)成熟。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可导致抗体依赖性细胞的细胞毒性。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可导致更有效的免疫细胞抗原摄取和加工。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可促进T细胞的扩增和激活。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可促进CD8+T细胞的扩增和激活。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可影响T细胞应答的免疫细胞调控。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可影响T细胞应答的免疫细胞调控。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可影响T细胞应答的树突细胞调控。可由Fc结构域结合FcR导致的FcR介导的信号传导可影响T细胞的功能极化(如，极化可以朝向TH1细胞应答)。
Fc结构域可诸如通过氨基酸序列的修饰进行修饰，以改变FcR对Fc结构域的识别。此类修饰可能仍允许FcR介导的信号传导，这取决于修饰。修饰可以是Fc结构域残基处的氨基酸取代为此残基处的不同氨基酸。修饰可以是在Fc结构域的残基处插入或缺失氨基酸。修饰可以允许FcR结合Fc结构域上的FcR可能不以其它方式结合的位点。修饰可以增加FcR对Fc结构域的结合亲和力。修饰可以降低FcR对Fc结构域的结合亲和力。
Fc结构域可以是天然存在的Fc结构域(如，野生型Fc结构域)的变体，并且可包含与野生型Fc结构域的序列相比至少一个氨基酸变化。Fc结构域中的氨基酸变化可允许抗体或缀合物以与野生型Fc结构域相比更高的亲和力结合至少一种Fc受体。Fc结构域中的氨基酸变化可允许抗体或缀合物以与野生型Fc结构域相比更低的亲和力结合至少一种Fc受体。
在一些实施方案中，Fc结构域表现出增加的与一种或多种Fc受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出增加的与一种或多种Fcγ受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出增加的与FcRn受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出增加的与Fcγ和FcRn受体的结合亲和力。在其它实施方案中，与来自IgG抗体(如IgG1抗体)的野生型Fc结构域相比，Fc结构域表现出相同或基本上类似的与Fcγ和/或FcRn受体的结合亲和力。
在一些实施方案中，Fc结构域表现出降低的与一种或多种Fc受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出降低的与一种或多种Fcγ受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出降低的与FcRn受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出降低的与Fcγ和FcRn受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域是Fc无效结构域。在一些实施方案中，与野生型Fc结构域相比，Fc结构域表现出降低的与FcRn受体的结合亲和力，但表现出相同或增加的与一种或多种Fcγ受体的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域表现出增加的与FcRn受体的结合亲和力，但表现出相同或降低的与一种或多种Fcγ受体的结合亲和力。
Fc结构域可具有一个或多个、两个或更多个、三个或更多个或者四个或更多个氨基酸取代，其降低Fc结构域与Fc受体的结合。在某些实施方案中，Fc结构域对FcγRI(CD64)、FcγRIIA(CD32)、FcγRIIIA(CD16a)、FcγRIIIB(CD16b)或其任何组合中的一种或多种具有降低的结合亲和力。为了降低Fc结构域与Fc受体的结合亲和力，Fc结构域可以包含降低Fc结构域与Fc受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸取代。在其它实施方案中，与来自IgG抗体(如IgG1抗体)的野生型Fc结构域相比，Fc结构域表现出相同或基本上类似的与FcγRI(CD64)、FcγRIIA(CD32)、FcγRIIIA(CD16a)、FcγRIIIB(CD16b)或其任何组合中的一种或多种的结合亲和力。在一些实施方案中，Fc结构域可包含已经从野生型IgG序列修饰的IgG同种型的序列。在一些实施方案中，Fc结构域可包含已从野生型IgG1序列修饰的IgG1同种型的序列。在一些实施方案中，修饰包含一个或多个氨基酸的取代，其降低IgG Fc结构域与所有Fcγ受体的结合亲和力。
修饰可以是根据Kabat的EU索引的E233、L234和L235，例如E233P/L234V/L235A或E233P/L234V/L235A/ΔG236的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的P238，例如P238A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的D265，例如D265A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的N297，例如N297A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的A327，例如A327Q的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的P329，例如P239A的取代。
在一些实施方案中，与野生型或参照IgG Fc结构域相比，IgG Fc结构域包含降低其与FcγR1的结合亲和力的至少一个氨基酸取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的F241，例如F241A处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的F243，例如F243A处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的V264，例如V264A处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的D265，例如D265A处的取代。
在一些实施方案中，与野生型或参照IgG Fc结构域相比，IgG Fc结构域包含增加其与FcγR1的结合亲和力的至少一个氨基酸取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的A327和P329，例如A327Q/P329A处的取代。
在一些实施方案中，修饰包含降低IgG Fc结构域与FcγRII和FcγRIIIA受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的D270，例如D270A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的Q295，例如Q295A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的A327，例如A237S的取代。
在一些实施方案中，修饰包含增加IgG Fc结构域与FcγRII和FcγRIIIA受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的T256，例如T256A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K290，例如K290A的取代。
在一些实施方案中，修饰包含增加IgG Fc结构域与FcγRII受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的R255，例如R255A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的E258，例如E258A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的S267，例如S267A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的E272，例如E272A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的N276，例如N276A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的D280，例如D280A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的H285，例如H285A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的N286，例如N286A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的T307，例如T307A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的L309，例如L309A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的N315，例如N315A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K326，例如K326A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的P331，例如P331A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的S337，例如S337A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的A378，例如A378A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的E430，例如E430的取代。
在一些实施方案中，修饰包含增加IgG Fc结构域与FcγRII受体的结合亲和力且降低与FcγRIIIA受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的H268，例如H268A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的R301，例如R301A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K322，例如K322A的取代。
在一些实施方案中，修饰包含降低IgG Fc结构域与FcγRII受体的结合亲和力但不影响与FcγRIIIA受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的R292，例如R292A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K414，例如K414A的取代。
在一些实施方案中，修饰包含降低IgG Fc结构域与FcγRII受体的结合亲和力且增加与FcγRIIIA受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的S298，例如S298A的取代。修饰可以是S239、I332和A330，例如S239D/I332E/A330L的取代。修饰可以是S239和I332，例如S239D/I332E的取代。
在一些实施方案中，修饰包含降低IgG Fc结构域与FcγRIIIA受体的结合亲和力的氨基酸的一个或多个取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的F241和F243，例如F241S/F243S或F241I/F243I的取代。
在一些实施方案中，修饰包含降低IgG Fc结构域与FcγRIIIA受体的结合亲和力且不影响与FcγRII受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的S239，例如S239A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的E269，例如E269A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的E293，例如E293A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的Y296，例如Y296F的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的V303，例如V303A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的A327，例如A327G的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K338，例如K338A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的D376，例如D376A的取代。
在一些实施方案中，修饰包含增加IgG Fc结构域与FcγRIIIA受体的结合亲和力且不影响与FcγRII受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的E333，例如E333A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K334，例如K334A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的A339，例如A339T的取代。修饰可以是S239和I332，例如S239D/I332E的取代。
在一些实施方案中，修饰包含增加IgG Fc结构域与FcγRIIIA受体的结合亲和力的一个或多个氨基酸的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的L235、F243、R292、Y300和P396，例如L235V/F243L/R292P/Y300L/P396L(IgG1VLPLL)的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的S298、E333和K334，例如S298A/E333A/K334A的取代。修饰可以是根据Kabat的EU索引的K246，例如K246F的取代。
在美国专利第7,317,091号和第8,969,526号(其公开内容通过引用并入本文)中公开了IgG Fc结构域中的影响其与一种或多种Fcγ受体的相互作用的其它取代。
在一些实施方案中，与野生型或参照IgG Fc结构域相比，IgG Fc结构域包含降低与FcRn的结合亲和力的至少一个氨基酸取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的H435，例如H435A处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的I253，例如I253A处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的H310，例如H310A处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的I253、H310和H435，例如I253A/H310A/H435A处的取代。
相对于野生型或参照IgG Fc结构域，修饰可以包含增加IgG Fc结构域与FcRn的结合亲和力的一个氨基酸残基的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的V308，例如V308P处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的M428，例如M428L处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的N434，例如N434A或者根据Kabat的EU索引的N434H处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的T250和M428，例如T250Q和M428L处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的M428和N434，例如M428L和N434S、N434A或N434H处的取代。修饰可以包含在根据Kabat的EU索引的M252、S254和T256，例如M252Y/S254T/T256E处的取代。修饰可以是选自P257L、P257N、P257I、V279E、V279Q、V279Y、A281S、E283F、V284E、L306Y、T307V、V308F、Q311V、D376V和N434H的一个或多个氨基酸的取代。在美国专利第9,803,023号(其公开内容通过引用并入本文)中公开了IgG Fc结构域中影响其与FcRn的相互作用的其它取代。
在一些实施方案中，抗体是人IgG2抗体，包括IgG2 Fc区。在一些实施方案中，人IgG2抗体的重链可在位置127、232或233处的半胱氨酸处突变。在一些实施方案中，人IgG2抗体的轻链可在位置214处的半胱氨酸处突变。人IgG2抗体的重链和轻链中的突变可以是从半胱氨酸残基到丝氨酸残基。
示例性缀合物和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000291
化合物
在一些方面，本文所述的缀合物包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000292
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000293
样化合物，如苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000294
免疫刺激性化合物，其可经由一个或多个接头连接以形成免疫刺激性缀合物。缀合物可包含一种或多种苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000295
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000296
样化合物，通常每个多肽，如每个抗体约1至约10个化合物。在一些实施方案中，缀合物的平均载药量(如，药物抗体比或DAR)为约2至约8、或1至约3、或约3至约5。
在一些实施方案中，免疫刺激性化合物激活人免疫细胞，包括但不限于树突细胞、巨噬细胞、单核细胞、髓源性抑制细胞、NK细胞、B细胞、T细胞或肿瘤细胞或其组合。在一些实施方案中，免疫刺激性化合物是髓样细胞激动剂。髓样细胞激动剂是由髓样细胞激活或刺激免疫应答的化合物。例如，髓样细胞激动剂可以通过导致髓样细胞释放细胞因子来刺激免疫应答，从而导致免疫细胞的激活。可以通过将免疫细胞(如，外周血单核细胞(PBMC))与缀合物所靶向的细胞共培养以及测量细胞因子释放、趋化因子释放、免疫细胞增殖、免疫细胞激活标志物的上调和/或ADCC而在体外测量髓样细胞激动剂对免疫应答的刺激。可以通过确定在施用缀合物与靶细胞和PBMC后共培养物中剩余靶细胞的百分比来测量ADCC。
缀合物通常包含共价结合至多肽，如靶向部分或抗体(其使得缀合物定位至靶组织、细胞群体或细胞)的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000297
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000298
样化合物，如免疫刺激性化合物。靶向部分可以包含抗体可变结构域的全部或部分，尽管也考虑了替代的靶向部分。多肽直接或通过将化合物拴系到多肽的接头共价连接至每种化合物。本文列出的抗体以及本文列出的或本领域技术人员以其它方式已知的针对抗原或其表位的抗体与如本文公开的缀合物一致。
如本文所述的免疫刺激性缀合物可以激活、刺激或增强针对疾病或病况的细胞的免疫应答。可以通过将免疫细胞(如髓样细胞)与缀合物靶向的细胞共培养以及测量细胞因子释放、趋化因子释放、免疫细胞增殖、免疫细胞激活标志物的上调和/或ADCC而在体外测量免疫刺激性缀合物，如髓样细胞激动剂对免疫应答的激活、刺激或增强。可以通过确定在施用缀合物与靶细胞、髓样细胞和其它免疫细胞后共培养物中剩余靶细胞的百分比来测量ADCC。在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物可以激活或刺激免疫细胞活性，如通过体外测定，如细胞因子释放测定，通过检测激活标志物(如MHC II类标志物)或本领域已知的其它测定所测定的。在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物的EC50为100nM或更小，如通过细胞因子释放测定所确定的。在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物的EC50为50nM或更小，如通过细胞因子释放测定所确定的。在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物的EC50为10nM或更小，如通过细胞因子释放测定所确定的。在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物的EC50为1mM或更小。
通常，免疫刺激性化合物作用于Toll样受体(TLR)、核苷酸-寡聚化结构域样受体(NOD)、RIG-I样受体(RLR)、c-型凝集素受体(CLR)或胞质DNA传感器(CDS)或其组合。在一些实施方案中，免疫刺激性化合物包含选自以下的一种或多种TLR的配体：TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8、TLR7/TLR8、TLR9和TLR10。
在一些实施方案中，免疫刺激性化合物是髓样细胞激动剂。在某些实施方案中，髓样细胞激动剂是TLR8激动剂。在某些实施方案中，TLR8激动剂是苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000301
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000302
样化合物。TLR8激动剂的实例包括莫托莫德(motolimod)、VTX-763、VTX-1463以及WO2017216054(Roche)、WO 2017190669(Shanghai De Novo Pharmatech)、WO 2017202704(Roche)、WO2017202703(Roche)、WO 2017/046112(Roche)、WO 2016/096778(Roche)、US20080234251(Array Biopharma)、US 20080306050(Array Biopharma)、US 20100029585(Ventirx Pharma)、US 20110092485(Ventirx Pharma)、US 20110118235(VentirxPharma)、US 20120082658(Ventirx Pharma)、US 20120219615(Ventirx Pharma)、US20140066432(Ventirx Pharma)、US 20140088085(Ventirx Pharma)和US 2019/0016808(Birdie Biopharmaceuticals)中公开的化合物。在一些实施方案中，TLR8激动剂的EC50值为约500nM或更小，通过测量TNFα产生的PBMC测定所确定的。在一些实施方案中，TLR8激动剂的EC50值为约100nM或更小，通过测量TNFα产生的PBMC测定所确定的。在一些实施方案中，TLR8激动剂的EC50值为约50nM或更小，通过测量TNFα产生的PBMC测定所确定的。在一些实施方案中，TLR8激动剂的EC50值为约10nM或更小，通过测量TNFα产生的PBMC测定所确定的。
本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure BDA0003569925330000311
其中
Figure BDA0003569925330000312
是双键或单键；
其中当
Figure BDA0003569925330000313
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure BDA0003569925330000314
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
该结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
其中制剂的pH范围为约4.5至约5.2。在某些实施方案中，制剂的pH范围为4.4至5.4。在另外的实施方案中，制剂的pH为约4.9或是4.9。在某些实施方案中，多肽是抗体。
在一些方面，化合物包含以下结构：
Figure BDA0003569925330000315
其中该结构在除了-NH2位置之外的任何位置处被任选取代。
在一些方面，水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含选自以下的结构：
3H-苯并[b]氮杂
Figure BDA0003569925330000329
-2-胺结构：
Figure BDA0003569925330000321
4,5-二氢-3H-苯并[b]氮杂
Figure BDA00035699253300003210
-2-胺：
Figure BDA0003569925330000322
2,3-二氢苯并[b][1,4]氧氮杂
Figure BDA00035699253300003211
-4-胺结构：
Figure BDA0003569925330000323
3,5-二氢苯并[e][1,4]氧氮杂
Figure BDA00035699253300003212
-2-胺结构：
Figure BDA0003569925330000324
2,3-二氢-1H-苯并[b][1,4]二氮杂
Figure BDA00035699253300003213
-4-胺：
Figure BDA0003569925330000325
和4,5-二氢-3H-苯并[e][1,4]二氮杂
Figure BDA00035699253300003214
-2-胺：
Figure BDA0003569925330000326
其中每个结构在除了2-氨基位置之外的任何位置处被任选取代。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含式(XI-A)的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000327
Figure BDA0003569925330000328
或其药学上可接受的盐，其中：
Figure BDA0003569925330000331
表示任选的双键；
L1选自-X1-、-X2-C1-6亚烷基-X2-C1-6亚烷基-、-X2-C2-6亚烯基-X2-和-X2-C2-6亚炔基-X2-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被一个或多个R12取代；
L2选自-X2-、-X2-C1-6亚烷基-X2-、-X2-C2-6亚烯基-X2-和-X2-C2-6亚炔基-X2-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被一个或多个R12取代；
X1选自-C(O)-、-C(O)N(R10)-*、-S-*、-N(R10)-*、-C(O)O-*、-OC(O)-*、-OC(O)O-*、-C(O)N(R10)C(O)-*、-C(O)N(R10)C(O)N(R10)*、-N(R10)C(O)-*、-CR10 2N(R10)C(O)-*、-N(R10)C(O)N(R10)-*、-N(R10)C(O)O-*、-OC(O)N(R10)-*、-C(NR10)-*、-N(R10)C(NR10)-*、-C(NR10)N(R10)-*、-N(R10)C(NR10)N(R10)-*、-S(O)2-*、-OS(O)-*、-S(O)O-*、-S(O)、-OS(O)2-*、-S(O)2O*、-N(R10)S(O)2-*、-S(O)2N(R10)-*、-N(R10)S(O)-*、-S(O)N(R10)-*、-N(R10)S(O)2N(R10)-*和-N(R10)S(O)N(R10)-*，其中*表示X1结合至R3的地方；
X2在每次出现时独立地选自-O-、-S-、-N(R10)-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)N(R10)-、-C(O)N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)C(O)N(R10)、-N(R10)C(O)-、-N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)O-、-OC(O)N(R10)-、-C(NR10)-、-N(R10)C(NR10)-、-C(NR10)N(R10)-、-N(R10)C(NR10)N(R10)-、-S(O)2-、-OS(O)-、-S(O)O-、-S(O)、-OS(O)2-、-S(O)2O、-N(R10)S(O)2-、-S(O)2N(R10)-、-N(R10)S(O)-、-S(O)N(R10)-、-N(R10)S(O)2N(R10)-和-N(R10)S(O)N(R10)-；
R1和R2各自是氢；
R3选自任选取代的C3-12碳环和任选取代的3至12元杂环，其中R3上的取代基在每次出现时独立地选自：-C(O)NHNH2、-C(O)NH-C1-3亚烷基-NH(R10)、-C1-3亚烷基-NHC(O)OR11、-C1-3亚烷基-NHC(O)-C1-3亚烷基-R10、卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中R3中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：R12、卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
R4选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中R4中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
R10在每次出现时独立地选自：氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
R11选自C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自R12的一个或多个取代基取代；
R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环；以及C3-10碳环和3至10元杂环，其中R12中的每个C3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；以及
其中苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000352
核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自R12的取代基取代，或者单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环。
在一些方面，式(XI-A)的结构是式(XI-B)的结构：
Figure BDA0003569925330000351
或其药学上可接受的盐，其中：
R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；以及
R24和R25独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；或R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-7碳环。
在本公开内容的缀合物中，式(XI-A)或(XI-B)的结构经由与可取代的氮原子、氧原子或硫原子的共价键连接到缀合物的其余部分。在一些实施方案中，缀合物的其余部分在式(XI-A)或(XI-B)的R3处连接。
在一些实施方案中，R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OH、-OR10、-NO2、-CN和C1-10烷基。在一些实施方案中，R20、R21、R22和R23各自是氢。在某些实施方案中，R21是卤素。在某些实施方案中，R21是氢。在某些实施方案中，R21是-OR10。在一些实施方案中，R21是–OCH3。
在一些实施方案中，R24和R25独立地选自氢、卤素、-OH、-NO2、-CN和C1-10烷基，或R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-7碳环。在某些实施方案中，R24和R25各自是氢。在其它实施方案中，R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-5碳环，其中取代基选自卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环。
在一些实施方案中，L1选自-N(R10)C(O)-*、-S(O)2N(R10)-*、-CR10 2N(R10)C(O)-*和-X2-C1-6亚烷基-X2-C1-6亚烷基-。在一些实施方案中，L1选自-N(R10)C(O)-*。在某些实施方案中，-N(R10)C(O)-*的R10选自氢和C1-6烷基。例如，L1可以是-NHC(O)-*。在一些实施方案中，L1选自-S(O)2N(R10)-*。在某些实施方案中，-S(O)2N(R10)-*的R10选自氢和C1-6烷基。例如，L1是-S(O)2NH-*。在一些实施方案中，L1是-CR10 2N(R10)C(O)-*。在某些实施方案中，L1选自-CH2N(H)C(O)-*和–CH(CH3)N(H)C(O)-*。在一些实施方案中，L1选自-C(O)N(R10)-*。在某些实施方案中，-C(O)N(R10)-*的R10选自氢和C1-6烷基。例如，L1可以是-C(O)NH-*。
在一些实施方案中，R3选自任选取代的C3-12碳环和任选取代的3至12元杂环，其中R3上的取代基在每次独立出现时独立地选自：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在某些实施方案中，R3选自任选取代的C3-12碳环和任选取代的3至12元杂环，其中R3上的取代基在每次独立出现时独立地选自：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环。
在一些实施方案中，R3选自任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。在一些实施方案中，R3是任选取代的杂芳基。R3可以是任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的取代的杂芳基：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在某些实施方案中，R3选自任选取代的6元杂芳基。例如，R3可以是任选取代的吡啶。在一些实施方案中，R3是任选取代的芳基。在某些实施方案中，R3是被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的芳基：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。R3可以是任选取代的苯基。在某些实施方案中，R3选自吡啶、苯基、四氢化萘、四氢喹啉、四氢异喹啉、二氢化茚、环丙基苯、环戊吡啶(cyclopentapyridine)和二氢苯并硼唑(dihydrobenzoxaborole)，其中的任一种是任选取代的。
在一些实施方案中，R3选自任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，R3是具有一个或多个独立地选自以下的取代基的任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环：-C(O)OR10、-N(R10)2、-OR10和任选取代的C1-10烷基。在某些实施方案中，R3是被-C(O)OR10取代的任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，R3是任选取代的稠合6-6双环杂环。例如，稠合6-6双环杂环可以是任选取代的吡啶-哌啶。在一些实施方案中，L1结合至稠合吡啶-哌啶的吡啶的碳原子。R3可以是任选取代的四氢萘啶。
在一些实施方案中，R3是任选取代的双环碳环。在某些实施方案中，R3是任选取代的8至12元双环碳环。R3可以是被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的8至12元双环碳环：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在某些实施方案中，R5是被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的任选取代的8至12元双环碳环：-OR10、-N(R10)2和＝O。在一些实施方案中，R3是任选取代的二氢化茚和任选取代的四氢化萘。
在一些实施方案中，R3是任选取代的不饱和C4-8碳环。在某些实施方案中，R3是任选取代的不饱和C4-6碳环。在某些实施方案中，R3是具有独立地选自任选取代的C3-12碳环和任选取代的3至12元杂环的一个或多个取代基的任选取代的不饱和C4-6碳环。R3可以是具有独立地选自以下的一个或多个取代基的任选取代的不饱和C4-6碳环：任选取代的苯基、任选取代的3-至12-杂环、任选取代的C1-10烷基、任选取代的C2-10烯基和卤素。
在一些实施方案中，R3选自被独立地选自R12的一个或多个取代基取代的5元和6元杂芳基。在某些实施方案中，R3选自被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的5元和6元杂芳基：-C(O)CH3、-C1-3亚烷基-NHC(O)OR10、-C1-3亚烷基-NHC(O)R10、-C1-3亚烷基-NHC(O)NHR10和-C1-3亚烷基-NHC(O)-C1-3亚烷基-(R10)；以及3至12元杂环，其任选地被选自以下的一个或多个取代基取代：–OH、-N(R10)2、–NHC(O)(R10)、–NHC(O)O(R10)、–NHC(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-C(O)2R10和-C1-3亚烷基-(R10)，并且R3任选地被独立地选自R12的一个或多个另外的取代基进一步取代。R3可以选自取代的吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、呋喃、吡喃、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、噁二唑、噁噻唑和三唑，并且R3任选地被独立地选自R12的一个或多个另外的取代基进一步取代。在一些实施方案中，R3是取代的吡啶并且R3任选地被独立地选自R12的一个或多个另外的取代基进一步取代。R3可以如下表示：
Figure BDA0003569925330000391
在一些实施方案中，R3是取代的吡啶，并且被-C1-3亚烷基-NHC(O)-C1-3亚烷基-R10或-C1亚烷基-NHC(O)-C1亚烷基-NH2取代。
R3可选自：
Figure BDA0003569925330000392
Figure BDA0003569925330000393
Figure BDA0003569925330000394
其中的任一个是任选取代的。在一些方面，R3可选自：
Figure BDA0003569925330000395
Figure BDA0003569925330000401
Figure BDA0003569925330000411
在一些实施方案中，当R3被取代时，R3上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在某些实施方案中，R3上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烷基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环。在某些实施方案中，R3上的取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O和-CN；以及任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代的C1-10烷基：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-NO2、＝O和–CN。在一些实施方案中，R3是未取代的。
在一些实施方案中，L2选自-C(O)-和-C(O)NR10-。在某些实施方案中，L2是-C(O)-。在某些实施方案中，L2选自-C(O)NR10-。-C(O)NR10-的R10可选自氢和C1-6烷基。例如，L2可以是-C(O)NH-。
在一些实施方案中，R4选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
在一些实施方案中，R4选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环。在一些实施方案中，R4选自：-OR10和-N(R10)2；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基。在某些实施方案中，R4是-N(R10)2。-N(R10)2的R10可以在每次出现时独立地选自任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，-N(R10)2的R10在每次出现时独立地选自甲基、乙基、丙基和丁基，其中的任一个是任选取代的。例如，R4可以是
Figure BDA0003569925330000431
在某些实施方案中，L2-R4是
Figure BDA0003569925330000432
在一些实施方案中，L11是–C(O)N(R10)-*。在一些实施方案中，-C(O)N(R10)-*的R10是氢或C1-6烷基。例如，L11可以是–C(O)NH-*。
在一些实施方案中，R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环；以及C3-10碳环和3至10元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基。在一些实施方案中，R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环。
在一些方面，化合物包含式(XIV)的结构：
Figure BDA0003569925330000441
或其药学上可接受的盐，
其中：
R10在每次出现时独立地选自氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OH、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、-C1-10卤代烷基、-O-C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；以及
R5是C3-12碳环或C3-12元杂环(优选地，稠合5-5、稠合5-6或稠合6-6双环杂环)；其中R5被任选取代并且其中取代基在每次出现时独立地选自：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
式(XIV)的结构包括：
Figure BDA0003569925330000451
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，R5选自任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，R5是具有一个或多个独立地选自以下的取代基的任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环：-C(O)OR10、-N(R10)2、-OR10和任选取代的C1-10烷基。在某些实施方案中，R5是被-C(O)OR10取代的任选取代的稠合5-5、稠合5-6和稠合6-6双环杂环。在某些实施方案中，R5是任选取代的稠合6-6双环杂环。例如，稠合6-6双环杂环可以是任选取代的吡啶-哌啶。在一些实施方案中，L10结合至稠合吡啶-哌啶的吡啶的碳原子。在某些实施方案中，R5选自四氢喹啉、四氢异喹啉、四氢萘啶、环戊吡啶和二氢苯并硼唑，其中的任一个是任选取代的。R5可以是任选取代的四氢萘啶。在一些实施方案中，R5是：
Figure BDA0003569925330000461
在一些优选的方面，化合物通过R5或R5上的取代基与接头连接。在一些方面，R5的接头的连接在用星号标记的位置处：
Figure BDA0003569925330000462
在一些实施方案中，化合物包含选自以下的结构：
Figure BDA0003569925330000463
Figure BDA0003569925330000471
Figure BDA0003569925330000481
Figure BDA0003569925330000491
Figure BDA0003569925330000501
Figure BDA0003569925330000502
及其盐，包括其药学上可接受的盐。
在一些方面，缀合物由式(I)表示：
Figure BDA0003569925330000503
其中：
A是多肽；
L是接头；
Dx是苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000512
化合物；
n选自1至20；以及
z选自1至20。
在式(I)的一些方面，n是1。
在式(I)中，载药量由z、每个多肽的化合物分子的数量或每个抗体的免疫刺激性化合物的数量表示，这取决于特定缀合物。根据上下文，z可以表示每个缀合物的平均化合物分子数，也称为平均载药量。z的范围可以是1至20、1至50或1至100。在一些缀合物中，z优选为1至8。在一些优选的实施方案中，当z表示平均载药量时，z的范围为约2至约5。在一些实施方案中，z为约2、约3、约4或约5。每个缀合物的平均化合物数量(如，药物抗体比，DAR)可以通过常规手段表征，如质谱法、液相色谱法/质谱法(LC/MS)、HIC、ELISA测定和HPLC。在一些方面，z是1至8。在一些方面，n是1并且z是1至8。
在一些方面，L是可裂解接头。在一些方面，L是不可裂解接头。
在式(I)的一些方面，Dx是式(XI-A)、(XI-B)或(XIV)的结构。
在式(I)的一些方面，L和Dx在一起是式IVB的化合物：
Figure BDA0003569925330000511
或其药学上可接受的盐，其中：
L12选自-X3-、-X3-C1-6亚烷基-X3-、-X3-C2-6亚烯基-X3-和-X3-C2-6亚炔基-X3-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R12的一个或多个取代基取代；
L22独立地选自-X4-、-X4-C1-6亚烷基-X4-、-X4-C2-6亚烯基-X4-和-X4-C2-6亚炔基-X4-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R10的一个或多个取代基取代；
X3和X4在每次出现时独立地选自键、-O-、-S-、-N(R10)-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)N(R10)-、-C(O)N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)O-、-OC(O)N(R10)-、-C(NR10)-、-N(R10)C(NR10)-、-C(NR10)N(R10)-、-N(R10)C(NR10)N(R10)-、-S(O)2-、-OS(O)-、-S(O)O-、-S(O)-、-OS(O)2-、-S(O)2O-、-N(R10)S(O)2-、-S(O)2N(R10)-、-N(R10)S(O)-、-S(O)N(R10)-、-N(R10)S(O)2N(R10)-和-N(R10)S(O)N(R10)-；
R1和R2各自是氢；
R4和R8独立地选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地结合至L3并且其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选结合至L3并且R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
R10在每次出现时独立地选自L3、氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L3是接头部分，其中存在至少一次出现的L3；
其中苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000532
核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自R12的取代基取代，或者单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环；
R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环；以及C3-10碳环和3至10元杂环，其中R12中的每个C3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基；以及
R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；以及
R24和R25独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；或R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-7碳环。
在式(I)的一些方面，L和Dx在一起是式(IVC)的化合物：
Figure BDA0003569925330000531
或其药学上可接受的盐，
其中：
R1和R2各自是氢；
L22是-C(O)-；
R4是-N(R10)2；
R10在每次出现时独立地选自氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L12是-C(O)N(R10)-*，其中*表示L12结合至R8的地方；
R8是结合至接头部分L3的任选取代的稠合5-5、稠合5-6或稠合6-6双环杂环，
并且其中任选的取代基在每次出现时独立地选自：
卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；
C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及
C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
在式(IVB)和式(IVC)的一些方面，L12是C(O)N(R10)-。在一些实施方案中，-C(O)N(R10)-的R10选自氢、C1-6烷基和L3。例如，L12可以是C(O)NH-。
在一些实施方案中，R8是任选取代的5元或6元杂芳基。R8可以是结合至L3的任选取代的5元或6元杂芳基。在一些实施方案中，R8是结合至L3的任选取代的吡啶。
在一些实施方案中，L22选自-C(O)-和-C(O)NR10-。在某些实施方案中，L22是-C(O)-。在某些实施方案中，L22是-C(O)NR10-。-C(O)NR10-的R10可选自氢、C1-6烷基和–L3。例如，L22可以是-C(O)NH-。
在一些实施方案中，R4选自：-OR10和-N(R10)2；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环、芳基和杂芳基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基，并且其中的每一个进一步任选地结合至L3。在一些实施方案中，R4是-N(R10)2并且-N(R10)2的R10选自L3和氢，并且其中-N(R10)2的至少一个R10是L3。在一些方面，R4是-N(C1-4烷基)2并且L12是-C(O)N(H)-*。在式(IVB)和(IVC)的一些方面，R4是
Figure BDA0003569925330000551
在某些实施方案中，-N(R10)2的R10在每次出现时独立地选自甲基、乙基、丙基和丁基，其中的任一个是任选取代的。在某些实施方案中，-C(O)N(R10)-*的R10是氢。
在一些实施方案中，L3是不可裂解接头。在一些实施方案中，L3是可裂解接头。L3可以被溶酶体酶裂解。在一些实施方案中，化合物共价连接至多肽，如抗体。在一些实施方案中，化合物任选地通过接头共价连接至多肽。在一些实施方案中，多肽是特异性结合肿瘤抗原的靶向部分或抗体。
在一些实施方案中，L3由下式表示：
Figure BDA0003569925330000552
其中
L4表示肽的C-末端；
L5选自键、亚烷基和亚杂烷基，
其中L5任选地被独立地选自R32的一个或多个基团取代；
RX*包含结合至多肽如抗体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure BDA0003569925330000561
表示与多肽的残基的连接点；以及，
R32在每次出现时独立地选自卤素、-OH、-CN、-O-烷基、-SH、＝O、＝S、-NH2、-NO2；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OH、-CN、-O-烷基、-SH、＝O、＝S、-NH2、-NO2。在一些实施方案中，L3的肽包含Val—Cit或Val—Ala或Glu-Val-Cit。
在式(I)的一些方面，L和Dx一起具有选自以下的结构：
Figure BDA0003569925330000562
Figure BDA0003569925330000571
Figure BDA0003569925330000581
Figure BDA0003569925330000591
其中RX*是结合至多肽如抗体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure BDA0003569925330000592
表示与多肽的残基的连接点。
在一些实施方案中，L3由下式表示：
Figure BDA0003569925330000593
其中RX包含反应性部分并且n＝0-9。在一些实施方案中，RX包含离去基团。在一些实施方案中，RX包含马来酰亚胺。在一些实施方案中，L3如下表示：
Figure BDA0003569925330000601
其中RX*包含结合至多肽、如抗体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中RX*上的
Figure BDA0003569925330000602
表示与多肽的残基的连接点，并且n＝0-9。
在一些方面，化合物包含选自以下的结构：
Figure BDA0003569925330000603
Figure BDA0003569925330000604
及其任一种的盐，其中RX*包含结合至多肽，如抗体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，其中RX*上的
Figure BDA0003569925330000605
表示与多肽的残基的连接点。
在一些实施方案中，RX*包含琥珀酰胺部分并且结合至多肽，如抗体的半胱氨酸残基。在一些实施方案中，RX*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至多肽的半胱氨酸残基。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000612
-4-甲酰胺化合物。在一些方面，苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000613
-4-甲酰胺化合物具有式X-1的结构：
Figure BDA0003569925330000611
其中：
R1是C3-7烷基；
R2是C3-7烷基或C3-7环烷基-C1-7烷基；
R3是氢；
R4选自：
C1-7烷基，所述C1-7烷基是未取代的或者被选自苯基和杂芳基的一个或两个基团取代，所述杂芳基是包含选自氮、氧和/或硫的一个、两个或三个原子的芳族5元或6元环；
C3-7环烷基，所述C3-7环烷基是未取代的或者被苯基或苯基氨基-C1-4烷基取代，以及
杂环基，所述杂环基是含有选自N和O的一个杂原子的饱和的3至7元环以及是未取代的或被苯基取代。
式X-1的结构例如描述于PCT公开号WO2017/202703中。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000614
-二甲酰胺化合物。在一些方面，苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000615
-二甲酰胺化合物具有式X-2的结构：
Figure BDA0003569925330000621
其中：
R1是C3-7烷基；
R2是C3-7烷基或C3-7环烷基-C1-7烷基；
R3是选自以下的杂环：
Figure BDA0003569925330000622
其中
X1是(CH2)m，其中m是1或2；
X2是(CH2)n，其中n是1或2；
X3是(CH2)o，其中o是1或2；
X4是(CH2)p，其中p是1或2；以及
Z1是苯基，其中苯基是未取代的或者被选自以下的一个或两个基团取代：C1-7烷基、卤素、卤素-C1-7烷基、C1-7烷氧基、羟基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷基、C1-7烷基-氨基-C1-7烷基和二-C1-7烷基-氨基-C1-7烷基；或者
Figure BDA0003569925330000623
其中
X5是(CH2)q，其中q是1或2；
X6是(CH2)r，其中r是1或2；
Y1是碳或氮原子；
Z2是氢；以及
Z3选自氢、C1-7烷氧基、C2-7烯基氧基、苯基、苯基-C1-7烷基、苯基-C1-7烷基氧基、苯基-C1-7烷基氨基、苯基氨基-C1-7烷基、苯基氨基，其中苯基是未取代的或者被选自以下的一个或两个基团取代：C1-7烷基、卤素、卤素-C1-7烷基、C1-7烷氧基、羟基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷基、C1-7烷基-氨基-C1-7烷基和二-C1-7烷基-氨基-C1-7烷基；或者
Figure BDA0003569925330000631
其中
X7是(CH2)s，其中s是1或2；以及
Z4是苯基，其中苯基是未取代的或者被选自以下的一个或两个基团取代：C1-7烷基、卤素、卤素-C1-7烷基、C1-7烷氧基、羟基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷基、C1-7烷基-氨基-C1-7烷基和二-C1-7烷基-氨基-C1-7烷基；或者
Figure BDA0003569925330000632
其中
X8是(CH2)t，其中t是1或2；以及
Z5是苯基，其中苯基是未取代的或者被选以下的一个或两个基团取代：C1-7烷基、卤素、卤素-C1-7烷基、C1-7烷氧基、羟基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷基、C1-7烷基-氨基-C1-7烷基和二-C1-7烷基-氨基-C1-7烷基。
式X-2的化合物例如描述于PCT公开号WO2017/202704中。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000633
磺酰胺化合物。在一些方面，苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000634
磺酰胺化合物具有式X-3的结构：
Figure BDA0003569925330000641
其中
R1和R2是相同的或不同的，并且选自C1-7烷基、羟基-C2-7烷基、氨基-C2-7烷基、C2-7烯基和C3-7炔基；
R3是氢或C1-7烷基；
R6是氢或C1-7烷基；
R4和R5中的一个选自氢、C1-7烷基、卤素-C1-7烷基和C1-7烷氧基，以及R4和R5中的另一个是
Figure BDA0003569925330000642
其中R7和R8是相同的或不同的，并且选自氢、C1-7烷基、卤素-C1-7烷基、羟基-C1-7烷基、羟基-C1-7烷氧基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷基、C1-7烷基-氨基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷氧基-C1-7烷基、C1-7烷基-氨基-C1-7烷氧基-C1-7烷基、氨基-C1-7烷基-羰基和C1-7烷基-x氨基-C1-7烷基-羰基；或
R7和R8与它们所连接的氮原子一起形成4至6元杂环，其是未取代的或被选自以下的基团取代：氨基、C1-7烷基-氨基、羟基和羟基-C1-7烷基，并且其可以含有另外的N-R10基团，其中R10选自氢、氨基-C1-7烷基和C1-7烷基-氨基-C1-7烷基；以及
Y是N或CR9；
其中R9选自氢、C1-7烷基和卤素-C1-7烷基。
式X-3的化合物例如描述于PCT公开号WO2016/096778中。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含二氢嘧啶基苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000643
甲酰胺化合物。在一些方面，二氢嘧啶基苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000644
甲酰胺化合物具有式X-4的结构：
Figure BDA0003569925330000651
其中
R1是C3-7烷基；
R2是C3-7烷基或C3-7环烷基-C1-7烷基；
R3是氢或C1-7烷基；
R4是氢或C1-7烷基；
R5选自氢、卤素、C1-7烷基和C1-7烷氧基；
R6选自氢、卤素、C1-7烷基和C1-7烷氧基；以及
X是N或CR7，其中R7选自氢、卤素、C1-7烷基和C1-7烷氧基。
式X-4的化合物例如描述于PCT公开号WO2017/216054中。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含亚磺酰基苯基或磺亚胺酰基苯基(sulfonimidoylphenyl)苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000653
化合物。在一些方面，亚磺酰基苯基或磺亚胺酰基苯基苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000654
化合物具有式X-5的结构：
Figure BDA0003569925330000652
其中
X是CR7或N；
R1是C3-7烷基或C3-7环烷基；
R2选自C3-7烷基、羟基-C1-7烷基、C3-7-炔基、氨基-C1-7烷氧基-C1-7烷氧基-C1-7烷基、卤素-C1-7烷基和C3-7环烷基-C1-7烷基；
R3和R4中的一个是
Figure BDA0003569925330000661
并且R3和R4中的另一个选自氢、C1-7烷基和卤素；
R5、R6和R7彼此独立地选自氢、C1-7烷基和卤素；
R8是C1-7烷基；以及
R9不存在或是＝N-R10，其中R10选自氢、C1-7烷基、卤素-C1-7烷基、羟基-C1-7烷基和羟基-C1-7烷氧基-C1-7烷基。
式X-5的化合物例如描述于PCT公开号WO2017/046112中。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含具有式X-6的结构的TLR调节子化合物：
Figure BDA0003569925330000662
其中
Figure BDA0003569925330000664
(1)是双键或单键；
Figure BDA0003569925330000665
(2)是双键并且R1不存在；
R2和R3独立地选自H和低级烷基，或R2和R3连接以形成具有3至7个环成员的碳环；
R7和R8中的一个是-NRfRg、
Figure BDA0003569925330000663
并且另一是氢；
其中Rf和Rg是低级烷基或者Rf和Rg与它们所连接的氮一起形成具有4至6个环成员的杂环状环；
R4是-NRcRd或-OR10；
Rc和Rd是低级烷基，其中烷基任选地被一个或多个-OH取代；
R10是烷基，其中烷基任选地被一个或多个-OH取代；
Z是C并且
Figure BDA0003569925330000672
(1)是双键，或Z是N并且
Figure BDA0003569925330000673
(1)是单键；
Ra和Rb各自是H。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含具有式X-7的结构的TLR调节子化合物：
Figure BDA0003569925330000671
其中
Y是CF2CF3、CF2CF7R6或芳基或杂芳基环，其中所述芳基和杂芳基环被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烯基、炔基、Br、CN、OH、NR6R7、C(═O)R8、NR6SO2R7、(C1-C6烷基)氨基、R6OC(═O)CH═CH2—、SR6和SO2R6，并且其中芳基和杂芳基环任选地被独立地选自以下的一个或多个基团进一步取代：F、Cl、CF3、CF3O-、HCF2O-、烷基、杂烷基和ArO-；
R1、R3和R4独立地选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6，
或R3和R4与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的碳环状环，其中碳环状环任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O—、R6OC(═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6；
R2和R8独立地选自H、OR6、NR6R7、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6；
R5a、R5b和R5c独立地为H、F、Cl、Br、I、OMe、CH3、CH2F、CHF2或CF3；以及
R6和R7独立地选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6，
或R6和R7与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂环状环，其中所述杂环状环任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6。
在一些方面，本文所述的水性制剂和冻干组合物包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含具有式X-8的结构的TLR调节子化合物：
Figure BDA0003569925330000681
其中
W是-C(O)-；
Z是H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、OR6或NR6R7，其中烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OCC═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6；
R1、R2、R3和R4独立地选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(C═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6，
或R1和R2与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的碳环状环，其中所述碳环状环任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O—、R6OC(═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6，
或R3和R4同时是氧代；
R5是H、F、Cl、Br、I、OMe、CH3、CH2F、CHF2、CF3或CF2CF3；
R6和R7独立地选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6；
或R6和R7与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂环状环，其中所述杂环状环任选地被独立地选自以下的一个或多个基团取代：烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(═O)R6、C(═O)OR6、OC(═O)R6、C(═O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(═O)CH═CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6；以及
n是0、1、2、3或4。
式X-6、X-7和X-8的化合物例如描述于美国公布号US2019/0016808和US2014/0088085中。
包含在本公开内容内的是本文所述的化合物的盐，特别是药学上可接受的盐。具有足够酸性、足够碱性或这两种官能团的本公开内容的化合物可以与多种无机碱以及无机酸和有机酸中的任一种反应以形成盐。可替代地，固有带电的化合物，例如具有季氮的那些，可以与适当的抗衡离子，如卤化物，诸如溴化物、氯化物或氟化物形成盐。
本文所述的化合物在一些情况下可以以非对映异构体、对映异构体或其它立体异构形式存在。本文呈现的化合物包含所有非对映异构体、对映异构体和差向异构体形式以及它们的适当混合物。立体异构体的分离可以通过色谱法或通过形成非对映异构体并通过重结晶或色谱法或它们的任何组合进行分离来进行。(Jean Jacques,Andre Collet,Samuel H.Wilen,“Enantiomers,Racemates and Resolutions”,John Wiley and Sons,Inc.,1981,为了本公开内容通过引用并入本文)。立体异构体也可以通过立体选择性合成获得。
本文所述的化合物可以以无定形形式或结晶形式(也称为多晶型物)存在。此外，本文所述的化合物可以以非溶剂化形式以及与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂化形式存在。本文呈现的化合物的溶剂化形式也被认为是本文所公开的。
本公开内容还包括本文所述的化合物的代谢物和前药。具有相同类型活性的这些化合物的代谢物包括在本公开内容的范围内。术语“前药”意在涵盖在生理条件下转化为活性化合物的化合物，如本文所述的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000701
和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000702
样化合物，包括但不限于免疫刺激性化合物或TLR8激动剂。一种用于制备前药的方法是包括一个或多个选定的部分，所述部分在生理条件下被水解或以其它方式裂解以显示所需的分子。在其它实施方案中，前药通过宿主动物，如宿主动物中的特定靶细胞的酶促活性转化。本文所述化合物的前药形式(其中前药在体内代谢以产生本文所述的化合物)包括在本公开内容的范围内。在一些情况下，本文所述的化合物中的一些可以是另一种衍生物或活性化合物的前药。
在某些实施方案中，苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000711
和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000712
样化合物，如免疫刺激性化合物或TLR8激动剂，被修饰为具有掩蔽基团的前药，使得该化合物具有有限的活性或在其到达其中去除掩蔽基团以显示活性化合物的环境之前是无活性。
可用于合成本文所述的化合物的合成化学转化和方法是本领域已知的并且包括例如在R.Larock,Comprehensive Organic Transformations(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,第2版(1991)；L.Fieser和M.Fieser,Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis(1994)；以及L.Paquette编辑,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis(1995)中所述的那些。
示例性接头
缀合物包含一个或多个接头，其将多肽连接至至少一种苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000713
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000714
样化合物，如至少一种免疫刺激性化合物，如髓样细胞激动剂。接头可以是例如可裂解接头或不可裂解接头。缀合物可包含多个接头。缀合物中的接头可以是相同接头或不同接头。
如技术人员将理解的，接头通过在一个位置处与化合物形成共价键和通过在另一位置处与多肽形成共价键，将苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000715
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000716
样化合物(如，一种或多种免疫刺激性化合物，如髓样细胞激动剂)与多肽(如抗体)连接。可通过接头上的官能团与免疫刺激性化合物上和多肽上的官能团之间的反应形成共价键。如本文所用，表述“接头”可包括(i)未连接形式的接头，其可包括能够将接头共价连接至化合物的官能团和能够将接头共价连接至多肽的官能团；(ii)部分连接形式的接头，其可包括能够将接头共价连接至多肽的官能团并且可以共价连接至化合物，或者反之亦然；以及(iii)可共价连接至化合物和多肽两者的完全连接形式的接头。在一些特定的实施方案中，接头上的官能团和接头与多肽如抗体之间形成的共价键可以分别具体地表示为Rx和Rx’。
接头可以是短的或长的、柔性的、刚性的、可裂解的、不可裂解的、亲水的或疏水的，或它们的组合。接头可以含有具有不同特征的区段，如柔性区段或刚性区段、亲水性区段和/或疏水性区段。接头可以含有多个区段，如一个或多个不可裂解区段和一个或多个可裂解区段。接头可包含亚烷基、亚烯基、亚炔基、聚醚、聚酯、聚酰胺、聚氨基酸、肽、多肽、可裂解肽和/或氨基苄基氨基甲酸酯(盐)基团。
在一些实施方案中，接头可包含在血流和细胞内环境中化学稳定的“不可裂解”区段。在一些实施方案中，接头包含“可裂解”区段，其包括一个或多个不稳定的连键，如经设计以在血流内和/或细胞内(即，在胞内环境中)特异性或非特异性裂解和/或消除(immolate)或以其它方式分解的连键。接头包含一个或多个可裂解区段、一个或多个不可裂解区段或其组合。
可裂解接头可在特定位点处对酶敏感(即，可由其裂解)。可裂解接头可由酶如蛋白酶裂解。可裂解接头可以是缬氨酸-瓜氨酸肽或缬氨酸-丙氨酸肽。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可以含有五氟苯基基团。含缬氨酸-瓜氨酸或缬氨酸-丙氨酸-的接头可以含有琥珀酰亚胺基团。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可以含有对氨基苯甲酸(PABA)基团。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可以含有PABA基团和五氟苯基基团。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可以含有PABA基团和琥珀酰亚胺基团。含缬氨酸-瓜氨酸-或缬氨酸-丙氨酸-的接头可以含有PABA基团和琥珀酰亚胺基团。
可裂解接头可在体外和体内裂解。可裂解接头可包含化学或酶促不稳定或可降解的连键。可裂解接头可以依靠细胞内的过程来释放免疫刺激性化合物，如细胞质的减少、暴露于溶酶体中的酸性条件或者被细胞内的特定蛋白酶或其它酶裂解。可裂解接头可以掺入一个或多个化学键，其是化学或酶促可裂解的而接头的其余部分可以是不可裂解的。
接头可以含有化学不稳定的基团，如腙和/或二硫化物基团。包含化学不稳定基团的接头可以利用血浆和一些胞质隔室之间的差异特性。可以促进化合物释放含肼的接头的胞内条件可以是内体和溶酶体的酸性环境，而含二硫化物的接头可以在可以含有高硫醇浓度，如谷胱甘肽的胞液中被还原。通过使用化学不稳定基团附近的取代基引入空间位阻，可以提高含有化学不稳定基团的接头的血浆稳定性。
酸不稳定基团，如腙，可以在血液的中性pH环境(pH 7.3-7.5)的全身循环过程中保持完整，并且一旦缀合物被内化到细胞的弱酸性内体(pH 5.0-6.5)和溶酶体(pH 4.5-5.0)隔室，就可经历水解作用并且可以释放免疫刺激性化合物。这种pH依赖性释放机制可能与免疫刺激性化合物的非特异性释放有关。为了增加接头的腙基团的稳定性，可以通过化学修饰(如取代)改变接头，从而允许调整以在溶酶体中实现更有效的释放，同时使循环中的损失最小化。
含腙的接头可以含有另外的裂解位点，如另外的酸不稳定的裂解位点和/或酶促不稳定的裂解位点。包括肼部分和二硫化物部分的示例性可裂解接头包括例如以下结构的部分：
Figure BDA0003569925330000731
在某些接头如接头(Ig)中，接头可包含两个可裂解基团——二硫化物和腙部分。对于此类接头，有效的裂解可能需要酸性pH或二硫化物还原和酸性pH。诸如(Ih)和(Ii)的接头可在有单个腙裂解位点的情况下是有效的。
可包含在接头中的其它酸不稳定基团包括含顺式-乌头酰基(aconityl)的接头。顺式-乌头酰基化学成分可以使用与酰胺键并置的羧酸来加速酸性条件下的酰胺水解。
可裂解接头还可包含二硫化物基团。二硫化物在生理pH下可以是热力学稳定的，并且可以被设计成在细胞内内化后释放，其中与细胞外环境相比，胞液可以提供显著更多还原的环境。二硫键的断裂可能需要存在细胞质硫醇辅因子，如(还原的)谷胱甘肽(GSH)，使得含二硫化物的接头可以在循环中相当稳定，从而在胞液中选择性地释放髓样细胞激动剂。胞内酶蛋白二硫化物异构酶或能够裂解二硫键的类似酶也可以促进细胞内二硫键的优先裂解。GSH可以以0.5-10mM的浓度范围存在于细胞中，相比之下GSH或半胱氨酸(最丰富的低分子量硫醇)在循环中的浓度显著更低，约为5μM。其中不规则血流可导致缺氧状态的肿瘤细胞可导致还原酶活性增强，因此谷胱甘肽浓度甚至更高。可以通过接头的化学修饰，如使用与二硫键相邻的空间位阻来增强含二硫化物的接头的体内稳定性。
包括二硫化物部分的示例性可裂解接头可包括以下结构：
Figure BDA0003569925330000741
其中R在每次出现时独立地选自例如氢或烷基。增加与二硫键相邻的空间位阻可以增加接头的稳定性。当一个或多个R基团选自低级烷基如甲基时，诸如(Ij)和(Il)的结构可显示增加的体内稳定性。
另一种类型的可裂解接头由酶特异性裂解。例如，接头可由溶酶体酶裂解。此类接头可以是基于肽的或可包括可作为酶底物的肽区域。基于肽的接头可在血浆和胞外环境中比化学不稳定接头更稳定。
肽键可以具有良好的血清稳定性，因为溶酶体蛋白水解酶在血液中的活性可能非常低，这是由于内源性抑制剂和与溶酶体相比血液的不利地高pH值导致。从缀合物释放髓样细胞激动剂可由于溶酶体蛋白酶(如组织蛋白酶和/或纤溶酶)的作用而发生。这些蛋白酶可以在某些肿瘤组织中以升高的水平存在。接头可被溶酶体酶裂解。溶酶体酶可以是例如组织蛋白酶B、β-葡糖醛酸酶或β-半乳糖苷酶。
在接头中，可裂解肽可选自四肽或二肽，如Val-Cit、Val-Ala和Phe-Lys。与较长的肽相比，二肽的疏水性可能较低，这取决于肽的组成。多种基于二肽的可裂解接头可用于本文所述的缀合物中。
在一些实施方案中，可裂解接头包括可裂解肽。在一些实施方案中，可裂解肽是二肽、三肽或四肽。在一些实施方案中，可裂解肽是Val-Cit；Cit-Val；Ala-Ala；Ala-Cit；Cit-Ala；Asn-Cit；Cit-Asn；Cit-Cit；Val-Glu；Glu-Val；Ser-Cit；Cit-Ser；Lys-Cit；Cit-Lys；Asp-Cit；Cit-Asp；Ala-Val；Val-Ala；Phe-Lys；Lys-Phe；Val-Lys；Lys-Val；Ala-Lys；Lys-Ala；Phe-Cit；Cit-Phe；Leu-Cit；Cit-Leu；Ile-Cit；Cit-Ile；Phe-Arg；Arg-Phe；Cit-Trp；Trp-Cit；Glu-Val-Cit；Ala-Ala-Asn；Glu-Glu-Val-Cit(SEQ ID NO:72)；Gly-Phe-Leu-Gly(SEQ ID NO:73)；Gly-Gly-Phe-Gly(SEQ ID NO:74)；或Ala-Leu-Ala-Leu(SEQ ID NO:75)。
在一些实施方案中，可裂解接头是下式的结构：
Figure BDA0003569925330000751
其中-AA1-AA2-是可裂解二肽并且AA1和AA2各自是氨基酸。
在一些实施方案中，可裂解二肽是Val-Cit。
酶促可裂解的接头可包括自消(self-immolative)间隔基以将髓样细胞激动剂与酶促裂解位点在空间上分开。髓样细胞激动剂与肽接头的直接连接可导致化合物(如苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000752
或髓样细胞激动剂)的氨基酸加合物的蛋白水解释放，从而损害其活性。自消间隔基的使用可以允许在酰胺键水解之后消除完全活性的化学上未修饰的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000753
或髓样细胞激动剂。
一种自消间隔基可以是双功能对氨基苄醇基团，它可以通过氨基基团与肽连接，从而形成酰胺键，而含胺的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000754
或髓样细胞激动剂可以通过氨基甲酸酯官能团与接头的苄基型羟基基团连接(以产生对酰氨基苄基氨基甲酸酯，PABC)。所得的前苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000755
或前髓样细胞激动剂可在蛋白酶介导的裂解后被激活，导致1,6-消除反应，从而释放未修饰的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000756
或髓样细胞激动剂、二氧化碳和接头基团的残余部分。
酶促可裂解接头可以是基于β-葡糖醛酸的接头。髓样细胞激动剂的轻松释放可以通过溶酶体酶β-葡糖醛酸酶裂解β-葡糖苷酸糖苷键来实现。这种酶可以大量存在于溶酶体中，并且可以在一些肿瘤类型中过表达，而细胞外的酶活性可能很低。由于β-葡糖苷酸的亲水性性质，基于β-葡糖醛酸的接头可用于避免缀合物发生聚集的趋势。在某些实施方案中，基于β-葡糖醛酸的接头可将ASGR配体和/或Fc结构域连接至疏水性髓样细胞激动剂。
已经描述了可用于将药物如奥瑞斯他汀(auristatins)、喜树碱和多柔比星类似物，CBI小沟结合剂和普赛博林(psymberin)连接至抗体的多种可裂解的基于β-葡糖醛酸的接头。所有这些基于β-葡糖醛酸的接头可用于包含本文所述的髓样细胞激动剂的缀合物中。在某些实施方案中，酶促可裂解接头是基于β-半乳糖苷的接头。β-半乳糖苷大量存在于溶酶体内，而细胞外的酶活性较低。
此外，可裂解接头可以包含苯酚和通过酚氧的连接。一个此类接头采用二氨基-乙烷单元结合传统的“基于PABO”的自消基团以递送苯酚。
含有芳族或脂肪族羟基基团的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330000761
或髓样细胞激动剂可使用依赖于氨基甲酸亚甲酯连键的方法，通过羟基基团共价键合至接头，如WO 2015/095755中所述。
可降解的连键可能存在于在其它方面不可裂解的接头中。例如，聚乙二醇(PEG)和相关聚合物可以在聚合物主链中包含可裂解基团。例如，聚乙二醇或聚合物接头可包含一个或多个可裂解基团如二硫化物、腙或二肽。可以包括在可裂解接头中的其它可降解连键包括通过PEG羧酸或激活的PEG羧酸与髓样细胞激动剂上的醇基团反应形成的酯连键，其中此类酯基团可以在生理条件下水解以释放髓样细胞激动剂。水解可降解的连键可以包括但不限于碳酸酯连键；由胺和醛反应产生的亚胺连键；通过使醇与磷酸基团反应形成的磷酸酯连键；作为醛和醇的反应产物的缩醛连键；作为甲酸酯和醇的反应产物的原酸酯连键；以及由亚磷酰胺基团(包括但不限于在聚合物末端)和寡核苷酸的5’羟基基团形成的寡核苷酸连键。
在一些实施方案中，可裂解接头是(琥珀酰亚氨基己酰基)-(缬氨酸-瓜氨酸)-(对氨基苄基氧基羰基)基团。在一些实施方案中，可裂解接头包含N-末端胺乙酰化的赖氨酸和缬氨酸-瓜氨酸裂解位点。
不可裂解接头可以是蛋白酶不敏感性的。不可裂解接头可以含有琥珀酰亚胺基团。不可裂解接头可以是琥珀酰亚氨基己酰基间隔基。琥珀酰亚氨基己酰基间隔基可包含N-琥珀酰亚氨基甲基环己烷-1-羧酸酯。琥珀酰亚氨基己酰基间隔基可以含有五氟苯基基团。
不可裂解接头可以是琥珀酰亚氨基己酰基基团和一个或多个乙二醇单元的组合。不可裂解接头可以是琥珀酰亚胺-PEG4接头。不可裂解接头可以是含有琥珀酰亚胺基团的琥珀酰亚氨基己酰基接头和一个或多个乙二醇单元的组合。不可裂解接头可以是琥珀酰亚氨基己酰基基团、五氟苯基基团和一个或多个乙二醇单元的组合。不可裂解接头可以含有与聚乙二醇单元连接的一个或多个琥珀酰亚氨基基团，其中聚乙二醇可以允许更多的接头灵活性或可以用于延长接头。
接头可以是多价的，使得其将多于一种化合物与多肽上的单个位点共价连接，或者是单价的，使得它将单一化合物与多肽上的单个位点共价连接。
示例性连接子区域或连接子区段包括
Figure BDA0003569925330000772
接头技术，所述技术具有能够实现具有良好物理化学特性的高-DAR缀合物的潜能。
Figure BDA0003569925330000773
接头技术基于经由一系列酯键将药物分子掺入增溶的聚缩醛主链中。该方法呈现了高负载的缀合物(DAR高达20)，同时保持良好的物理化学性质。
连接子区域可包含一个或多个不可裂解间隔基和/或一个或多个可裂解接头。在一些实施方案中，连接子区域包含含有可裂解肽的可裂解接头，例如包含结构式(IVa)、(IVb)、(IVc)或(IVd)或者其盐的接头：
Figure BDA0003569925330000774
Figure BDA0003569925330000781
其中：
肽表示如本文所述的可裂解肽(以从N→C说明，其中肽包括氨基和羧基“末端”)；
T表示包含一个或多个乙二醇单元或亚烷基链或其组合的聚合物；
Ra选自氢、烷基、磺酸酯和磺酸甲酯；
Ry是氢或C1-4烷基-(O)r-(C1-4亚烷基)s-G1或C1-4烷基-(N)-[(C1-4亚烷基)-G1]2；
Rz是C1-4烷基-(O)r-(C1-4亚烷基)s-G2；
G1是SO3H、CO2H、PEG 4-32或糖部分；
G2是SO3H、CO2H或PEG 4-32部分；
r是0或1；
s是0或1；
p是范围为0至5的整数；
q是0或1；
x是0或1；
y是0或1；
Figure BDA0003569925330000782
表示连接子与缀合物的其余部分的一个连接点；以及
*表示与缀合物的另一部分的连接点。
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(IVa)的二价连接子区域或连接子区段的示例性实施方案可以包括以下所示的结构：
Figure BDA0003569925330000791
Figure BDA0003569925330000801
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(IVb)、(IVc)或(IVd)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案可以包括以下所示的接头：
Figure BDA0003569925330000802
Figure BDA0003569925330000811
Figure BDA0003569925330000821
Figure BDA0003569925330000831
Figure BDA0003569925330000841
Figure BDA0003569925330000851
Figure BDA0003569925330000861
可裂解接头可以含有酶促可裂解的糖部分，例如包含结构式(Va)、(Vb)、(Vc)、(Vd)或(Ve)或者其盐的接头：
Figure BDA0003569925330000862
Figure BDA0003569925330000871
其中：q是0或1；r是0或1；X1是CH2、O或NH；
Figure BDA0003569925330000872
表示接头与髓样细胞激动剂的连接点；以及*表示与缀合物的其余部分的连接点。
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(Va)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案可以包括来自以下所示的结构的掺入部分，其中熟练的从业者将理解当在缀合物内连接时，每个结构中的马来酰亚胺将呈其连接形式，即每个结构中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330000873
-S-CH＝CH2将呈其连接形式，即，
Figure BDA0003569925330000874
和-SO2-CH＝CH2将呈其连接形式，即，
Figure BDA0003569925330000875
Figure BDA0003569925330000881
Figure BDA0003569925330000891
Figure BDA0003569925330000901
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(Vb)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案包括以下所示的结构，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330000902
替代：
Figure BDA0003569925330000903
Figure BDA0003569925330000911
Figure BDA0003569925330000921
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(Vc)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案包括以下所示的接头，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330000922
替代：
Figure BDA0003569925330000931
Figure BDA0003569925330000941
Figure BDA0003569925330000951
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(Vd)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案包括以下所示的结构，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330000952
替代：
Figure BDA0003569925330000953
Figure BDA0003569925330000961
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(Ve)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案包括以下所示的结构，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330000962
替代：
Figure BDA0003569925330000971
尽管可裂解接头可以提供某些优点，但本文所述的缀合物中的连接子区域不需要包含可裂解接头。对于不可裂解接头，化合物或髓样细胞激动剂释放可能不取决于血浆和一些细胞质隔室之间的差异特性。
接头可以是例如根据下式或其盐的体内不可裂解的接头：
Figure BDA0003569925330000972
Figure BDA0003569925330000981
其中：
Ra选自氢、烷基、磺酸酯和磺酸甲酯；
Rx是将连接子共价连接至缀合物的其余部分的部分，如键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分；以及
Figure BDA0003569925330000982
表示连接子区域或区段与缀合物的其余部分的连接点。
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(VIa)-(VId)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案包括以下所示的结构，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330000983
替代并且每个结构中的-SO2-CH＝CH2被缀合物中的
Figure BDA0003569925330000984
替代：
Figure BDA0003569925330000985
Figure BDA0003569925330000991
用于连接缀合物中的连接子的连接基团本质上可以是亲电子的并且包括例如马来酰亚胺基团、激活的二硫化物、活性酯如NHS酯和HOBt酯、卤代甲酸酯、酰基卤、烷基卤化物和苄基卤化物，如卤代乙酰胺。还有可以根据本公开内容使用的与“自稳定”马来酰亚胺和“桥接的二硫化物”相关的新兴技术。
马来酰亚胺基团经常用于缀合物的制备，因为它们对与例如缀合物的抗体的半胱氨酸基团中的硫醇基团反应具有特异性。也可发生导致从硫代取代的琥珀酰亚胺中消除马来酰亚胺的逆反应。这种逆反应是不希望的，因为马来酰亚胺基团随后可能与另一个可用的硫醇基团(如在体内具有可用半胱氨酸的其它蛋白质)反应。因此，逆反应可破坏缀合物的特异性。预防逆反应的一种方法是将碱性基团掺入到上述方案中所示的连接基团中。不希望受理论束缚，碱性基团的存在可以增加附近水分子的亲核性以促进琥珀酰亚胺基团的开环水解。在血浆蛋白的存在下，水解形式的连接基团对解缀合(deconjugation)具有抗性。所谓的“自稳定”接头提供具有改进的稳定性的缀合物。
自稳定接头的实例提供于如美国专利公布号2013/0309256中，其接头通过引用并入本文。应当理解，与免疫刺激性化合物结合使用的自稳定接头可以等效地描述为未取代的包含马来酰亚胺的接头、包含硫代取代的琥珀酰亚胺的接头或水解的开环的包含硫代取代的琥珀酰亚胺的接头。在某些实施方案中，接头包括选自以下的稳定接头部分：
Figure BDA0003569925330001001
已经公开了用于桥接源自天然铰链二硫键还原的一对巯基基团的方法，并在以下的示意图中进行了描绘。这种方法的一个优点可以是能够通过完全还原IgG(以得到4对巯基)，然后与4当量的烷化剂反应来合成同质的DAR4缀合物。类似地，如下所描绘，已经开发了可以桥接一对巯基基团的马来酰亚胺衍生物。
接头可以含有以下结构式(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)或者其盐，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330001002
替代：
Figure BDA0003569925330001011
其中：
Rq是H或–O-(CH2CH2O)11-CH3；
x是0或1；
y是0或1；
G2是–CH2CH2CH2SO3H或–CH2CH2O-(CH2CH2O)11-CH3；
Rw是–O-CH2CH2SO3H或–NH(CO)-CH2CH2O-(CH2CH2O)12-CH3；
以及
*表示与接头的其余部分的连接点。
可以包括在本文所述的缀合物中的接头的示例性实施方案可以包括以下所示的结构，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330001012
替代：
Figure BDA0003569925330001021
Figure BDA0003569925330001031
Figure BDA0003569925330001041
Figure BDA0003569925330001051
可以包括在本文所述的缀合物中的根据结构式(VIIc)的连接子区域或连接子区段的示例性实施方案可以包括以下所示的结构，其中每个结构中的马来酰亚胺被缀合物中的琥珀酰亚胺部分
Figure BDA0003569925330001052
替代：
Figure BDA0003569925330001053
Figure BDA0003569925330001061
Figure BDA0003569925330001071
接头可在任何适合的位置处连接至多肽。在选择连接位点时要考虑的因素包括接头是可裂解的还是不可裂解的、用于连接至多肽的接头的反应性基团、化合物的化学性质以及与接头和多肽上的反应性位点的相容性，以及连接位点对多肽功能活性的影响，如Fc结构域的功能活性。接头可连接至多肽的氨基酸序列的末端或可连接至多肽的氨基酸的侧链，如赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、非天然氨基酸残基或谷氨酸残基的侧链。接头可结合至抗体的Fc结构域或Fc区域的氨基酸序列的末端，或者可结合至抗体的Fc结构域的氨基酸的侧链，如赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、非天然氨基酸残基或谷氨酸残基的侧链。
在一些实施方案中，接头连接至抗体Fc结构域的铰链半胱氨酸。接头可在轻链恒定结构域赖氨酸处连接至抗体。接头可在轻链中的工程化的半胱氨酸处连接至抗体。接头可在工程化的轻链谷氨酰胺处连接至抗体。接头可在被工程化至轻链中的非天然氨基酸处连接至抗体。接头可在重链恒定结构域赖氨酸处连接至抗体。接头可在重链中的工程化的半胱氨酸处连接至抗体。接头可在工程化的重链谷氨酰胺处连接至抗体。接头可在被工程化至重链中的非天然氨基酸处连接至抗体。如本文所述或如本领域技术人员已知的，可以将氨基酸工程化到抗体的氨基酸序列中，并且可以连接至缀合物的接头。可以将工程化的氨基酸添加到现有氨基酸序列中。工程化的氨基酸可以取代氨基酸序列中的一个或多个现有氨基酸。
接头可经由巯基基团连接至多肽。接头可经由伯胺连接至抗体。接头可以是在抗体上的非天然氨基酸与肟键反应之间产生的连接，所述肟键是通过用免疫刺激性化合物上的烷氧基胺修饰酮基团而形成的。
苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001081
和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001082
样化合物可以使用本领域已知的技术和合成方法合成，包括例如在PCT公布号WO2018/170179、WO2017/202703、WO2017/202704、WO2016/096778、WO2017/216054、WO2017/046112和US 2019/0016808中描述的那些。化合物-接头单元和化合物-接头-多肽缀合物可以使用本领域已知的方法合成，包括例如在PCT公布号WO2018/170179、WO2017/202703、WO2017/202704、WO2016/096778、WO2017/216054、WO2017/046112和US 2019/0016808中描述的那些。
示例性药物制剂
本文提供了包含缀合物的水性制剂，其中缀合物包含与多肽连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001083
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001084
样化合物。本发明发现了包含与多肽(如抗体)连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001085
化合物药物的缀合物的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001086
化合物可在中性pH下和在升高的温度(如约25℃或更高)下在水性制剂中经历化学转化(如脱氨基)，而苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001091
化合物与多肽的连键不受影响(即，DAR基本上保持相同，因为化合物没有被释放)。本申请的发明人惊奇地发现，在低于约5.4的pH下配制苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001092
缀合物可减少、最小化或消除药物的化学转化(甚至在更高温度下，如25℃)。因此，在各个实施方案中，提供了包含与多肽(如抗体)连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001093
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001094
样化合物的缀合物的水性制剂，其中水性制剂的pH范围为约4.5至约5.2(如，pH为4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3或5.4)。在某些实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001095
缀合物的水性制剂的pH为4.5。在其它实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001096
缀合物的水性制剂的pH为4.6。在另外的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001097
缀合物的水性制剂的pH为4.7。在另外的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001098
缀合物的水性制剂的pH为4.8。在另外的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001099
缀合物的水性制剂的pH为4.9。在其它的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300010910
缀合物的水性制剂的pH为5.0。在其它的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300010911
缀合物的水性制剂的pH为5.1。在更多的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300010912
缀合物的水性制剂的pH为5.2。在更多的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300010913
缀合物的水性制剂的pH为5.3。在更多的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300010914
缀合物的水性制剂的pH为5.4。
本文提供的水性制剂和冻干组合物可包含一种或多种赋形剂，诸如例如一种或多种缓冲剂、一种或多种冻干保护剂等，如本文所述。在一些实施方案中，本文提供的缀合物的水性制剂包含至少一种缓冲剂。在一些实施方案中，本文提供的缀合物的水性制剂不包含缓冲剂。在一些此类实施方案中，缀合物的多肽部分可以是缓冲性的。不意在受任何特定理论的束缚，在一些此类实施方案中，缀合物的多肽部分包含足够的弱酸性和/或弱碱性氨基酸，如可电离的表面暴露氨基酸，以在不添加缓冲剂的情况下缓冲水性制剂。
如本文所用，术语“赋形剂”意指可包含在治疗剂的制剂中的治疗上无活性的物质。赋形剂可以包括在制剂中用于多种目的，包括例如作为稀释剂、媒介物、缓冲剂(也称为缓冲液)、稳定剂、张度剂、填充剂、表面活性剂、冷冻保护剂、冻干保护剂、抗氧化剂、金属离子源、螯合剂和/或防腐剂。赋形剂包括例如多元醇，如山梨糖醇或甘露糖醇；糖，如蔗糖、乳糖或右旋糖；聚合物，如聚乙二醇；盐，如NaCl、KCl或磷酸钙；氨基酸，如甘氨酸、甲硫氨酸或谷氨酸；表面活性剂；金属离子；缓冲盐，如丙酸盐、乙酸盐或琥珀酸盐；防腐剂和多肽如人血清白蛋白以及盐水和水。赋形剂是本领域已知的并且描述于例如Wang W.,Int.J.Pharm.185:129-88(1999)以及Wang W.,Int.J.Pharm.203:1-60(2000)中。
如本文所用的“缓冲液”或“缓冲剂”意指在水性溶液中抵抗pH变化的赋形剂。缓冲液通常是弱酸或弱碱及其共轭盐。非限制性示例性缓冲液包括组氨酸、柠檬酸盐、天冬氨酸、乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、氨丁三醇、葡糖酸盐、谷氨酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、延胡索酸盐和α-酮戊二酸盐。
非限制性示例性赋形剂还包括糖，如糖醇、还原糖、非还原糖和糖酸。
糖醇(也称为多元醇、多烃基醇或聚合醇)是具有被还原为伯羟基基团或仲羟基基团的羰基基团的碳水化合物的氢化形式。多元醇可用作液体和冻干制剂两者中的稳定赋形剂和/或等渗剂。多元醇可以保护多肽免受物理和化学降解途径两者的影响。优先排除的共溶剂增加了溶剂在蛋白质界面处的有效表面张力，因此能量上最有利的结构构象是具有最小表面积的那些。糖醇的特定实例包括山梨糖醇、甘油、甘露糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、赤藓糖醇和苏糖醇。
还原糖包括例如具有酮或醛基团并含有允许糖充当还原剂的反应性半缩醛基团的糖。还原糖的特定实例包括果糖、葡萄糖、甘油醛、乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、木糖、核糖、鼠李糖、半乳糖和麦芽糖。
非还原糖含有异头碳，其是一种缩醛并且基本上不与氨基酸或多肽反应以引发美拉德反应。还原费林溶液(Fehling's solution)或托伦试剂(Tollen's reagent)的糖也称为还原糖。非还原糖的特定实例包括蔗糖、海藻糖、山梨糖、三氯蔗糖、松三糖和棉子糖。
糖酸包括，例如，糖质酸(saccharic acid)、葡糖酸盐和其它多羟基糖及其盐。
例如，缓冲赋形剂在产品保质期内保持液体制剂的pH，并在冻干过程中和在复溶后保持冻干制剂的pH。
液体制剂中包含的张度剂和/或稳定剂可用于例如为制剂提供等张性、低张性或高张性，以使其适合施用。此类赋形剂还可用于，例如，促进多肽结构的维持和/或最小化静电、溶液蛋白质-蛋白质相互作用。张度剂和/或稳定剂的特定实例包括多元醇、盐和/或氨基酸。包含在冻干制剂中的张度剂和/或稳定剂可以用作例如保护多肽免受冷冻胁迫的冷冻保护剂或用作使多肽稳定在冷干状态的冻干保护剂。此类冷冻-和冻干保护剂的特定实例包括多元醇、糖和聚合物。
如本文所用的术语“冷冻保护剂”通常包括为治疗剂如含多肽的治疗剂提供稳定性以免受冷冻诱导的应力的试剂。冷冻保护剂的实例包括但不限于多元醇诸如例如甘露糖醇，并且包括糖类诸如例如蔗糖以及表面活性剂诸如例如聚山梨醇酯、泊洛沙姆、聚乙二醇等。冷冻保护剂也可有助于制剂的张力。
如本文所用的术语“冻干保护剂”通常包括为治疗剂(如含多肽的治疗剂)提供稳定性以免受冷冻干燥诱导的应力的试剂。
填充剂或结块剂可用于冻干制剂以例如提高产品美观性和防止爆裂。填充剂为冻干饼状物(lyo cake)提供结构强度并且包括例如甘露糖醇和甘氨酸。
抗氧化剂可用于液体制剂以控制蛋白质氧化，并且也可用于冻干制剂中以延缓氧化反应。
金属离子可以包含在液体制剂中，例如作为辅因子，二价阳离子如钙、锌、锰和镁可以用于悬浮液制剂中，例如作为如本文所述的防止异天冬氨酸形成的稳定剂。液体制剂中包含的螯合剂可用于例如抑制金属离子催化的反应。对于冻干制剂，也可以包含金属离子，例如作为辅因子或作为防止异天冬氨酸形成的稳定剂，如本文所述。虽然螯合剂通常从冻干制剂中省略，但也可以根据需要包含它们以减少冻干过程中和复溶后的催化反应。
液体和/或冻干制剂中包含的防腐剂可用于例如防止微生物生长，并且在多剂量制剂中是特别有益的。在冻干制剂中，防腐剂通常包含在复溶稀释剂中。苄醇是可用于本发明制剂的防腐剂的具体实例。
如本文所用，术语“表面活性剂”是指起到降低其中溶解有表面活性剂的液体的表面张力的作用的物质。表面活性剂可以包含在制剂中用于多种目的，包括例如防止或控制液体制剂中的聚集、颗粒形成和/或表面吸附，或者防止或控制冻干和/或复溶过程中冻干制剂中的这些现象。表面活性剂包括例如在有机溶剂和水溶液中均表现出部分溶解性的两亲性有机化合物。表面活性剂的一般特性包括它们降低水的表面张力、降低油和水之间的界面张力以及形成胶束的能力。本发明的表面活性剂包括非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂。表面活性剂是本领域中熟知的并且可见于例如Randolph T.W.和Jones L.S.,Surfactant-protein interactions.Pharm Biotechnol.13:159-75(2002)中。
简而言之，非离子型表面活性剂包括例如烷基聚(环氧乙烷)、烷基聚葡糖苷如辛基葡糖苷和癸基麦芽糖苷、脂肪醇如鲸蜡醇和油醇、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA和椰油酰胺TEA。非离子型表面活性剂的具体实例包括聚山梨醇酯，包括例如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯28、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯65、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯81、聚山梨醇酯85等；泊洛沙姆，包括例如泊洛沙姆188，也已知为普罗沙姆(poloxalkol)或聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)、泊洛沙姆407或聚乙-聚丙二醇等以及聚乙二醇(PEG)。聚山梨醇酯20与吐温20、失水山梨醇单月桂酸酯和聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯同义。
离子型表面活性剂包括例如阴离子型、阳离子型和两性离子型表面活性剂。阴离子型表面活性剂包括例如磺酸盐类或羧酸盐类表面活性剂如皂、脂肪酸盐、十二烷基硫酸钠(SDS)、月桂基硫酸铵和其它烷基硫酸盐。阳离子型表面活性剂包括例如季铵类表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、其它烷基三甲基铵盐、十六烷基氯化吡啶鎓、聚乙氧基化牛脂胺(POEA)和苯扎氯铵。两性离子型或两性表面活性剂包括例如十二烷基甜菜碱、十二烷基二甲胺氧化物、椰油酰胺丙基甜菜碱和椰油两性甘氨酸酯。
在一些实施方案中，本公开内容的水性制剂包含含有与多肽连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001135
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001136
样化合物的缀合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure BDA0003569925330001131
其中
Figure BDA0003569925330001132
是双键或单键；
其中当
Figure BDA0003569925330001133
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure BDA0003569925330001134
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代。在一些实施方案中，制剂的pH范围为约4.5至约5.2。在一些实施方案中，制剂的pH范围为4.4至5.4、4.5至5.3、4.6至5.2、4.7至5.1、4.8至5.1、4.9至5.1、4.4至5.0、4.5至5.0、4.6至5.0、4.7至5.0、4.8至5.0或4.9至5.0。在某些实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001137
缀合物的制剂的pH是4.5。在其它实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001138
缀合物的制剂的pH是4.6。在另外的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001139
缀合物的制剂的pH是4.7。在另外的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011310
缀合物的制剂的pH是4.8。在另外的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011311
缀合物的制剂的pH是4.9。在其它的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011312
缀合物的制剂的pH是5.0。在其它的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011313
缀合物的制剂的pH是5.1。在更多的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011314
缀合物的制剂的pH是5.2。在更多的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011315
缀合物的制剂的pH是5.3。在更多的实施方案中，本公开内容的苯并氮杂
Figure BDA00035699253300011316
缀合物的制剂的pH是5.4。在上述实施方案中的任一个中，多肽是抗体。
在另外的实施方案中，本公开内容的水性制剂包含由式(I)表示的缀合物：
Figure BDA0003569925330001141
其中A是多肽；L是接头；Dx是苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001143
化合物；n选自1至20；以及z选自1至20。
在式(I)缀合物制剂的一些实施方案中，n是1。在一些式(I)缀合物制剂中，z范围为1至8或范围为约2至约5，或为约2、约3、约4或约5。
在式(I)的任何上述制剂中，L和Dx一起具有选自以下的结构：
Figure BDA0003569925330001142
Figure BDA0003569925330001151
Figure BDA0003569925330001161
Figure BDA0003569925330001171
其中RX*是结合至多肽如抗体的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，并且其中RX*上的
Figure BDA0003569925330001172
表示与多肽的残基的连接点。在式(I)的某些制剂中，L和Dx一起具有以下的结构：
Figure BDA0003569925330001173
在式(I)的另外制剂中，L和Dx一起具有以下的结构：
Figure BDA0003569925330001181
在式(I)的另外制剂中，L和Dx一起具有以下的结构：
Figure BDA0003569925330001182
在上述制剂实施方案的任一个中，RX*包含琥珀酰胺部分并且结合至多肽如抗体的半胱氨酸残基。在一些实施方案中，RX*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至多肽的半胱氨酸残基。
在包含与多肽连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001183
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001184
样化合物的缀合物的或者由式(I)表示的缀合物的任何上述制剂中，多肽是抗体。在某些优选的实施方案中，缀合物的抗体对HER2、粘连蛋白-4、间皮素或PSMA具有特异性。
在一些实施方案中，制剂包含至少一种缓冲液。在各个实施方案中，缓冲液可选自组氨酸、柠檬酸盐、天冬氨酸、乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、氨丁三醇、葡糖酸盐、谷氨酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苹果酸、延胡索酸盐、α-酮戊二酸盐及其组合。在一些实施方案中，缓冲液是选自以下的至少一种缓冲液：组氨酸、柠檬酸盐、天冬氨酸、乙酸盐及其组合。在一些实施方案中，缓冲液是组氨酸和天冬氨酸的组合。在一些实施方案中，水性制剂中缓冲液的总浓度范围为约10mM至约40mM，如约15mM至约30mM、约15mM至约25mM或约20mM。在上述制剂实施方案的任一个中，缓冲液包含组氨酸和天冬氨酸，其总浓度范围为约15mM至约25mM或范围为15mM至25mM，或为约20mM，或是20mM。
在一些实施方案中，水性制剂包含至少一种冻干保护剂。在一些此类实施方案中，至少一种冻干保护剂选自蔗糖、精氨酸、甘氨酸、山梨糖醇、甘油、海藻糖、右旋糖、α-环糊精、羟丙基β-环糊精、羟丙基γ-环糊精、脯氨酸、甲硫氨酸、白蛋白、甘露糖醇、麦芽糖、右旋糖酐及其组合。在一些实施方案中，冻干保护剂是蔗糖。在一些实施方案中，水性制剂中冻干保护剂的总浓度范围为约5％至约12％，如约6％至约12％、约6％至约10％、约6％至约9％、约7％至约9％或约7％至约8％。在上述制剂实施方案的任一个中，冻干保护剂包含蔗糖，其总浓度范围为约7％至约8％、或范围为7％至8％，或为约8％，或是8％。
在一些实施方案中，水性制剂包含至少一种表面活性剂。示例性表面活性剂包括聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、泊洛沙姆88及其组合。在一些实施方案中，水性制剂包含聚山梨醇酯80。在一些实施方案中，至少一种表面活性剂的总浓度范围为约0.01％至约0.1％，如约0.01％至约0.05％、约0.01％至约0.08％、约0.01％至约0.06％、约0.01％至约0.04％、约0.01％至约0.03％、或约0.02％。在上述制剂实施方案的任一个中，至少一种表面活性剂包含聚山梨醇酯80，其总浓度范围为约0.01％至约0.03％、或范围为0.01％至0.03％，或为约0.02％，或是0.02％。
在一些实施方案中，水性制剂中缀合物的浓度范围为约1mg/mL至约200mg/mL，如约10mg/mL至约160mg/mL、约20mg/mL至约140mg/mL、约30mg/mL至约120mg/mL、约40mg/mL至约110mg/mL、约50mg/mL至约100mg/mL、约60mg/mL至约95mg/mL、约70mg/mL至约90mg/mL或约80mg/mL。在上述制剂实施方案的任一个中，水性制剂中缀合物的浓度范围为约70mg/mL至约90mg/mL、或范围为70mg/mL至90mg/mL，或为约80mg/mL，或是80mg/mL。
在一些实施方案中，本公开内容的水性制剂包含：
(a)缀合物，其总浓度范围为约50mg/mL至约100mg/mL并且由式(I)表示：
Figure BDA0003569925330001201
其中A是抗体；n是1；z范围为2至8；以及L是接头并且Dx是苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001203
化合物，其中L和Dx一起具有以下的结构：
Figure BDA0003569925330001202
其中RX*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至所述抗体的半胱氨酸残基；
(b)缓冲液，其由组氨酸和天冬氨酸组成，总浓度范围为约15mM至约25mM；
(c)冻干保护剂，其由蔗糖组成，总浓度范围为约7％至约8％；以及
(d)表面活性剂，其由聚山梨醇酯80组成，总浓度范围为约0.01％至约0.03％。
在某些实施方案中，缀合物的抗体对HER2、粘连蛋白-4、间皮素或PSMA具有特异性。
在具体的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含分别为SEQ ID NO:1-6的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:1-3的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含具有与SEQ ID NO:7的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的重链可变区(VH)；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:4-6的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:8的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列或由其组成。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ IDNO:1-3的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含与SEQ ID NO:9的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及(b)轻链包含分别为SEQ IDNO:4-6的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及与SEQ ID NO:10的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。在更多的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列或由其组成。
在具体的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗粘连蛋白-4抗体包含分别为SEQ ID NO:11-13的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，以及SEQ ID NO:14或15的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:16的LC-CDR2和SEQ ID NO:17的LC-CDR3。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:11-13的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含具有与SEQ IDNO:18的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的重链可变区(VH)；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:14、16和17或分别为SEQ ID NO:15、16和17的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:19或20的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗粘连蛋白-4抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ IDNO:18的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:19或20的氨基酸序列或者由其组成。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:11-13的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含与SEQ ID NO:21的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:14、16和17或分别为SEQ ID NO:15、16和17的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:22或23的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。在更多的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:22或23的氨基酸序列或者由其组成。
在具体的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含SEQID NO:24或25的重链(HC)-CDR1，SEQ ID NO:26、27或28的HC-CDR2和SEQ ID NO:29或30的HC-CDR3，以及SEQ ID NO:31或32的轻链(LC)-CDR1，SEQ ID NO:33、34、35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:37或38的LC-CDR3。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:24、26和29的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含具有与SEQ ID NO:39的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的重链可变区(VH)；以及(b)轻链包含分别为SEQID NO:31、33和37或分别为SEQ ID NO:31、34和37的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:42或43的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:25、27和30或分别为25、28和30的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含具有与SEQ ID NO:40或41的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的重链可变区(VH)；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:32、35和38或分别为SEQ ID NO:32、36和38的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:44或45的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:42或43的氨基酸序列或者由其组成。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQID NO:40或41的氨基酸序列或者由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:44或45的氨基酸序列或者由其组成。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:24、26和29的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含与SEQ ID NO:46的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:31、33和37或分别为SEQID NO:31、34和37的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:49或50的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。在更多的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQID NO:46的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:49或50的氨基酸序列或者由其组成。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:25、27和30或分别为SEQ ID NO:25、28和30的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含与SEQ ID NO:47或48的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:32、35和38或分别为32、36和38的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:51或52的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。在更多的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:47或48的氨基酸序列或者由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:51或52的氨基酸序列或者由其组成。
在具体的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗间皮素抗体包含分别为SEQ ID NO:53-58的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的抗间皮素抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:53-55的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含具有与SEQ ID NO:59的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的重链可变区(VH)；以及(b)轻链包含分别为SEQ ID NO:56-58的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及具有与SEQ ID NO:60的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗间皮素抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列或由其组成。在另外的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含重链和轻链，其中：(a)重链包含分别为SEQ ID NO:53-55的HC-CDR1、HC-CDR2和HC-CDR3，并且包含与SEQ ID NO:70的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及(b)轻链包含分别为SEQ IDNO:56-58的LC-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3，以及与SEQ ID NO:71的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。在更多的实施方案中，用于本公开内容的制剂中的缀合物的抗HER2抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:70的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列或由其组成。
在各个实施方案中，提供了包含本公开内容的缀合物的冻干组合物，其中冻干组合物于水中的复溶并且任选地用缓冲液、冻干保护剂和表面活性剂中的一种或多种复溶冻干组合物产生本文所述的水性制剂。在一些实施方案中，冻干组合物由冻干本文提供的水性制剂提供。
用于配制药物组合物的方法可以包括配制如本文所述的任何缀合物以形成水性组合物以用于肠胃外施用，如皮下或静脉内施用。如本文所论述的，本文所述的组合物可以被冻干或呈粉末形式用于在使用前用适合的媒介物如无菌无热原水复溶。
可以对药物组合物和制剂进行灭菌。灭菌可以经由通过无菌过滤的过滤来完成。
缀合物可以被配制成以与药学上可接受的媒介物缔合的单位剂型施用。此类媒介物可以是固有无毒的和非治疗性的。媒介物可以是水、盐水、林格氏溶液、右旋糖溶液和5％人血清白蛋白。也可以使用非水性媒介物，如不挥发油和油酸乙酯。媒介物可以含有少量的添加剂，如增强等渗性和化学稳定性的物质(如缓冲液和防腐剂)。
示例性治疗应用
包含含有与多肽连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001261
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001262
样化合物的缀合物的水性制剂可用于治疗多种不同的对象，包括但不限于哺乳动物、人类、非人类哺乳动物、驯养动物(如，实验室动物、家庭宠物或家畜)、非驯养动物(如野生动物)、狗、猫、啮齿动物、小鼠、仓鼠、牛、鸟、鸡、鱼、猪、马、山羊、绵羊、兔及其任何组合。在各个实施方案中，对象是人。
本公开内容提供了适用于肠胃外施用(如皮下或静脉内施用)的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001263
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001264
样化合物的缀合物的水性制剂或冻干组合物。在一些实施方案中，治疗方法包括通过缓慢输注进行皮下施用或静脉内施用。
缀合物及其药物组合物可用于本文所述的方法中作为治疗剂，例如，作为可在有效方案中施用至有需要的对象以实现治疗效果，同时减轻、免除或避免与大剂量(bolus)重复静脉内施用所述缀合物相关的一种或多种毒性的治疗。可以减轻、免除或避免的毒性包括过敏反应样毒性。治疗效果可以通过减少、抑制、缓解、减轻或根除疾病状态而在对象中获得，包括但不限于其一种或多种症状。在患有疾病或病况或者表现出其早期症状或者表现出或在其它方面疑似处于或接近疾病或病况的早期阶段的对象中的治疗效果可以通过减少、抑制、预防、延迟、缓解、减轻或根除病况或疾病或者病况前或疾病前状态而获得。在各个实施方案中，有效方案导致在每次施用缀合物后大于4小时的缀合物的Tmax。在一些实施方案中，有效方案导致每次施用缀合物后大于6小时、大于8小时、大于10小时、大于12小时或大于15小时的Tmax。在一些实施方案中，缀合物是免疫刺激性缀合物。
在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物或其药物组合物，以激活、刺激或增强针对用TLR激动剂可治疗的疾病(如，癌症、纤维化或病毒性疾病)的免疫应答。缀合物的多肽识别与疾病或疾病状态相关的抗原。
在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对疾病或病况的细胞的免疫应答。在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对癌细胞的免疫应答，其中癌细胞表达由缀合物的多肽识别的肿瘤抗原或肿瘤相关抗原。
在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对实体瘤(如肉瘤、癌或淋巴瘤)的肿瘤细胞的免疫应答。在一些此类实施方案中，缀合物的多肽识别靶细胞如肿瘤细胞上的抗原。在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对肉瘤的肿瘤细胞的免疫应答。在一些此类实施方案中，缀合物的多肽识别肉瘤细胞上的抗原。在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对癌的肿瘤细胞的免疫应答。在一些此类实施方案中，缀合物的多肽识别肿瘤细胞上的抗原。在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对淋巴瘤的肿瘤细胞的免疫应答。在一些此类实施方案中，缀合物的多肽识别肿瘤细胞上的抗原。
在某些实施方案中，该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对实体瘤的肿瘤细胞，如脑、乳腺、肺、肝、肾、胰腺、结直肠、卵巢、头颈部、骨、皮肤、间皮瘤、膀胱、胃、前列腺、甲状腺、子宫或宫颈/子宫内膜细胞的免疫应答。在一些此类实施方案中，缀合物的多肽识别肿瘤细胞上的抗原。
在某些实施方案中，癌症是表达HER2的癌症并且该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对表达HER2的癌症的细胞的免疫应答。在一些方面，表达HER2的癌症以如通过免疫组织化学所测定的2+或3+的水平表达HER2。在另外的实施方案中，癌症是表达粘连蛋白-4的癌症并且该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对表达粘连蛋白-4的癌症的细胞的免疫应答。在另外的实施方案中，癌症是表达间皮素的癌症并且该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对表达间皮素的癌症的细胞的免疫应答。在另外的实施方案中，癌症是表达PSMA的癌症并且该方法包括以有效方案向有需要的对象施用免疫刺激性缀合物以激活、刺激或增强针对表达PSMA的癌症的细胞的免疫应答。
在一些情况下，治疗包括减少的肿瘤生长。在一些情况下，治疗包括肿瘤停止。
在一些实施方案中，通过经由皮下或静脉内缓慢输注施用来施用免疫刺激性缀合物，可以免除、减轻或避免与静脉内施用免疫刺激性缀合物相关的毒性。在一些实施方案中，毒性是过敏反应样毒性。此类毒性可能与免疫刺激性缀合物的单次或多次静脉内施用相关。如本文所用，“减轻(alleviating)”或“减轻(to alleviate)”毒性是指使毒性不那么严重。术语“免除(sparing)”或“免除(to spare)”是指显著降低毒性并减少对对象的伤害。过敏反应样响应是指在显著细胞因子释放不存在的情况下诸如低血压、气道收缩、体温过低和/或血管渗漏综合征的症状。如本文所用，过敏反应样响应不同于由IgG或IgE响应引起的经典过敏反应。在一些实施方案中，免除、减轻或避免与反复大剂量静脉内施用免疫刺激性缀合物相关的1级或更高、2级或更高、3级或更高、或者4级或更高的过敏反应样不良事件。
本领域普通技术人员将理解，向有需要的对象施用本文所述的缀合物的水性制剂的量、持续时间和频率取决于若干因素，包括例如但不限于对象的健康、对象的具体疾病或病况、对象的具体疾病或病况的等级或水平、对象正在或已经施用的另外治疗剂等。
在实施本文所述方法的一些方面，缀合物以至少两个或至少三个周期的有效方案施用。每个周期可任选地包括周期之间的休息阶段。施用周期可以是任何适合的长度。在一些实施方案中，每个周期是一周(7天)、10天、每两周(14天或两周一次的)、每三周(21天)或每四周(28天)。在一些实施方案中，每个周期是一个月。在一些实施方案中，至少两个剂量的免疫刺激性缀合物间隔超过7天，或间隔超过10天施用。在一些实施方案中，至少一个剂量的缀合物在初始剂量的缀合物之后大于7天、或大于10天施用。
在某些实施方案中，一个周期内的本公开内容的缀合物的总剂量为约0.1mg/kg至约10mg/kg。在一些实施方案中，总剂量为约0.5mg/kg至约7.5mg/kg。在一些实施方案中，总剂量为约0.5mg/kg至约5mg/kg。在一些实施方案中，总剂量为约0.5mg/kg至约4mg/kg。在一些实施方案中，总剂量为约0.5mg/kg至约3.5mg/kg。在一些实施方案中，总剂量为约0.5mg/kg至约2mg/kg。在某些优选的实施方案中，一个周期内的本公开内容的缀合物的总剂量范围为约0.3mg/kg至约2.4mg/kg、或约0.6mg/kg至约1.2mg/kg、或约0.6mg/kg。
本文所述的免疫刺激性缀合物的应用在指导对象自身对疾病或病症的特定部位的细胞(如与疾病或病症相关的细胞)的免疫应答方面显示出显著的益处。激活或刺激针对靶向细胞的免疫应答促进了靶向细胞的减少、增殖抑制、生长抑制、进展抑制、转移抑制或在其它方面的抑制，直至并包括在一些情况下清除靶向细胞。因此，在一些情况下，靶向免疫应答活化或刺激导致患者中疾病进展的抑制或显化疾病的至少一种症状的减轻，直至并且在一些情况下包括从对象中的一种症状到整个疾病状态的完全消除。
在一些实施方案中，在施用免疫刺激性缀合物之前耗竭B细胞。在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物与B细胞耗竭剂一起施用。B细胞耗竭剂可以在免疫刺激性缀合物之前、与免疫刺激性缀合物同时或在免疫刺激性缀合物之后施用。B细胞耗竭剂可以例如在第一次施用免疫刺激性缀合物的14天内、7天内、1天内、24、12、6、4、3、2或1小时内施用。B细胞耗竭剂包括但不限于抗CD20抗体、抗CD19抗体、抗CD22抗体、抗BLyS抗体、TACI-Ig、BR3-Fc和抗BR3抗体。非限制性示例性B细胞耗竭剂包括利妥昔单抗、奥瑞珠单抗、奥法木单抗、依帕珠单抗、MEDI-51(抗CD19抗体)、贝利木单抗、BR3-Fc、AMG-623和阿塞西普。
在一些实施方案中，免疫刺激性缀合物与减轻过敏样毒性的试剂一起施用。减轻过敏样毒性的非限制性示例性试剂包括肾上腺素、抗组胺剂、可的松和β-激动剂。施用可以是，例如，在施用免疫刺激性缀合物的1小时内或几分钟内。
如本文所公开的施用方法与使用范围广泛的缀合物一致，所述缀合物包含与多肽如抗体连接的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001301
和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001302
样化合物。特别地，本文公开的方法非常适合与免疫刺激性缀合物，如指导对象体内对特定病症或疾病位置、细胞类型或细胞的免疫应答的免疫刺激性缀合物一起使用。因此，本文中的一些方法的实施包括选择适合的对象，如将经受或经历用缀合物治疗的对象，所述缀合物将缀合物的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001303
或苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001304
样化合物引导至特定病症或疾病部位、细胞类型或细胞。通常，由于具有疾病或病症的至少一种症状，或者预计会发展疾病或病症的至少一种症状(如处于缓解和有复发风险的对象)、适用于通过如本文公开的缀合物治疗，选择用于实施该方法的对象。一些疾病的选择不是基于或不仅仅基于疾病类型，而是基于肿瘤、细胞类型或特定细胞上促进免疫刺激性缀合物定位于表位的合适表位的检测或存在。
实施例
包括以下实施例以进一步描述本公开内容的一些实施方案，并且不应用于限制本公开内容的范围。实施例并不旨在表示以下实验是全部或唯一进行的实验。已努力确保就所用数字(例如，量、温度等)而言的准确性，但应考虑一些实验误差和偏差。除非另有说明，否则份数是重量份，分子量是平均分子量，温度以摄氏度计，并且压力是大气压或接近大气压。
尽管在本文中已经示出和描述了本公开内容的方面，但是对于本领域技术人员显而易见的是，此类方面仅以实例的方式提供。在不背离本公开内容的情况下，本领域技术人员现在将想到许多变化、改变和替代。应当理解，在实施本公开内容时可以采用对本文所述的公开内容的方面的各种替代。以下权利要求旨在限定本公开内容的范围，并且这些权利要求及其等同物范围内的方法和结构由此被覆盖。
实施例1：缀合物制剂的尺寸排阻色谱分析
针对外观、pH、渗透压、单体含量和浓度，测试了来自表1的缀合物制剂1-5的稳定性。用于本实施例中的缀合物是缀合至人源化抗HER2抗体的氨基-苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001312
化合物接头。缀合经由链间二硫化物进行，并且平均载药量为3至5。参见如美国专利第10,239,862号。化合物接头在缀合至抗体之前具有以下结构：
Figure BDA0003569925330001311
在研究开始时(零时)，制剂1-5中的缀合物是轻微乳白色的、无色的且无可见颗粒。在2-8℃、25℃和40℃下储存2周和4周后，制剂1-5中的缀合物保持轻微乳白色、无色且无可见物质。pH、渗透压和浓度测量在整个研究过程中基本保持恒定。
表1
Figure BDA0003569925330001321
1所有制剂含有0.02％聚山梨醇酯80
2缓冲液pH是在添加缀合物之前缓冲液的pH
还通过SEC-HPLC监测制剂1-5(每种制剂的pH为5.5、6.0或6.5)中缀合物的单体含量。在第2周和第4周标记时，当在2-8℃或25℃下储存时单体含量变化最小。只有在40℃的高热应力条件下，在2周时首次检测到单体含量下降，并在4周时观察到持续进展(图1)。单体含量的减少与高分子量(HMW)聚集物物质形成的增加相关，这通过尺寸排阻色谱法(SEC-HPLC)鉴定。HMW聚集物的形成是众所周知的蛋白质降解途径，并且其在40℃下储存≥2周后的增加对于蛋白质制剂来说并不意外。
来自这些SEC-HPLC研究的数据看起来表明缀合物在25℃下在制剂1-5中稳定至少4周，并且对于开发目的而言足够稳定。
实施例2：通过疏水相互作用色谱(HIC)分析缀合物制剂
当SEC柱按大小分离并提供一个mAb二聚体的峰时，HIC柱通过疏水性分离并拆分二聚体的不同异构形式。因此，进行了HIC曲线分析以获得存在的聚集物形式的另外信息(其未通过SEC提供)。HIC分析如下所述进行。简而言之，将10μL的6mg/mL缀合物溶液注射至HPLC系统中，所述HPLC系统设置有TOSOH TSKgel Butyl-NPRTM疏水相互作用色谱(HIC)柱(2.5μM粒度，4.6mm x 35mm)。在12分钟的进程中，流动相梯度从100％流动相A(1.5M硫酸铵、25mM磷酸钠(pH 7))运行至100％流动相B(25％异丙醇于25mM磷酸钠(pH 7)中)，然后在100％流动相A下再平衡6分钟。流速为0.8mL/min，并且检测器设置在280nm。以降低的盐浓度梯度洗脱导致最少缀合的(疏水性最低)形式首先洗脱，而最多缀合的(疏水性最高的药物)形式最后洗脱。来自HIC的峰面积百分比代表特定载药形式的相对比例。加权的平均药物抗体比(DAR)可以使用峰值百分比和载药量来计算。在25℃和40℃的2周时间段内，通过HIC分析观察到来自表1的制剂1-5(其是在pH 5.5、6.0或6.5下的制剂)中的缀合物发生了意想不到且显著的变化。
图2显示了在2-8℃、25℃和40℃下储存两周后制剂1中缀合物的HIC曲线。对于制剂2-5中的缀合物观察到类似的结果。(数据未显示)。箭头鉴定了归因于抗体药物缀合物变化的新峰，其变化幅度随着温度和储存持续时间而增加(即，当储存在25℃和40℃时与储存在2-8℃时相比)
图3显示了在零时和在25℃下储存2周之后来自表1的制剂1(pH 5.5)和3(pH 6.5)中的缀合物的HIC曲线。与在零时的相应曲线相比，在2周时在制剂1和制剂3两者中观察到抗体药物缀合物的新峰形成的增加。HIC曲线的变化程度在制剂3中更显著，这表明较高的pH可能影响新HIC峰的出现。
实施例3：较低pH制剂对缀合物的SEC测量和HIC曲线的影响
如实施例2中所述，制剂1-5中缀合物的HIC分析揭示了制剂的pH(与温度一样)有助于在HIC曲线中出现新峰的速率。通过在具有5.5、5.0或4.5的较低pH的制剂中制备缀合物来进一步检查这种潜在的pH效应(参见来自表1的制剂6-19)。测试了来自实施例1的含有缀合物的制剂6-19的外观、pH、渗透压、浓度和单体含量。在研究开始时(零时)，含有缀合物的制剂6-19是轻微乳白色的、无色的且无可见颗粒。在最后的时间点(1周)，当在2-8℃、25℃或40℃下储存时，所有缀合物制剂都保持轻微乳白色、无色且无可见物质。pH、渗透压和浓度测量在整个研究过程中基本保持恒定。一周时的SEC-HPLC测量显示当储存在2-8℃、25℃或40℃时，缀合物单体含量的变化很小。(数据未显示)。
与参考所有方法的其它制剂相比，含有20mM组氨酸(His)/天冬氨酸(Asp)缓冲液(pH 4.5)的制剂始终显示出等同或更好的行为，其中一个比较显示在图4中。通常，制剂的pH增加导致缀合物在25℃和40℃下随时间推移而改变的HIC曲线。
实施例4：缀合物浓度对HIC曲线的影响
改变来自表1的制剂11(20mM His/Asp、8％蔗糖、0.02％聚山梨醇酯80(PS800，pH4.5)中的来自实施例1的缀合物的浓度(50、70和90mg/ml)用于评价较高缀合物浓度下的分子间反应是否有助于改变的HIC曲线。通过使用酸或碱及其共轭盐和/或使用存在于多肽本身和其它实体上的可滴定基团进行缓冲，特别是在高浓度下，可用于控制制剂的pH。溶解度数据显示缀合物可溶解至至少130mg/mL(参见如来自表1的制剂20-27)。在高浓度(>50mg/ml)下，缀合物的蛋白质(在这种情况下为抗体)组分的缓冲贡献变得更加明显，其中制剂21、23和25的最终pH达到4.7至5.0。测试了制剂21、23和25的外观、pH、渗透压、浓度、单体含量和疏水性曲线。在3次冻/融循环后，样品的HIC曲线没有显著变化。在25℃下储存后，与10mg/ml缀合物样品相比，高缀合物浓度制剂显示出相似的物理和化学稳定性。
图4显示了来自表1的制剂11和24中实施例1的缀合物的HIC曲线，其缀合物浓度分别为10mg/ml和80mg/ml。在25℃下储存1周后，当与其各自的零时曲线相比时，在两种浓度下都观察到了类似的变化。不意在受任何特定理论的束缚，这些结果表明改变的HIC曲线可能是由部分依赖于pH的分子内反应引起的，这与通常依赖于缀合物浓度的分子间反应相反(这不是本文如图4所示的情况)。
图5比较了在表1中检查的最高和最低pH下配制的缀合物在零时和在25℃下储存2周后的HIC曲线。制剂3含有10mg/mL的缀合物、20mM组氨酸、6％蔗糖、0.02％PS80，pH 6.5。制剂24含有80mg/mL ADC和20mM His/Asp、8％蔗糖、0.02％PS80，pH 4.5。当受应力的(即在25℃下储存2周)样品与它们在零时的相应曲线进行比较时，在较低的pH(制剂24)下观察到新峰形成的减少。这种观察不依赖于缀合物的浓度；再次强调，缀合物的改变的HIC曲线可能是由部分依赖于pH但不依赖于缀合物浓度的令人惊讶的分子内反应引起的。
实施例5：化合物与抗体的缀合在所有制剂中是稳定的
通过反相高效液相色谱法(RP-HPLC)各自监测含有抗体-接头-化合物缀合物的制剂1-24的游离接头-化合物含量在评价的所有时间点和温度的变化。游离接头-化合物的量的增加将指示不稳定的缀合物结构。在这些实验中，对于任何时间点，未观察到游离接头-化合物含量随时间推移的显著变化(数据未显示)，这表明抗体-化合物缀合物在所有测试条件下都是稳定的。
进一步评估接头-化合物-抗体缀合物的稳定性，检查抗体缀合物的药物抗体比(DAR)的任何变化。简而言之，含有缀合物的制剂24(80mg/mL缀合物和20mM His/Asp、8％蔗糖、0.02％PS80，pH 4.5)的游离药物水平在25℃下受应力2周。在这些条件下DAR和游离-药物水平随时间保持不变，分别如图6A和6B所示，其中水平虚线代表对测定所预期的典型分析变异性窗口并且虚线代表中心点。因此，药物-抗体缀合物是稳定的。
实施例6：来自缀合的化合物的分子内转化的改变的HIC曲线结果
由于缀合物DAR是稳定的并且缀合物浓度的增加没有显示出分子间变化的迹象，因此来自HIC分析的结果表明正在发生缀合物组分的变化。该变化似乎是缀合药物的化学转化，它对缀合物的疏水性有影响，其中受应力的样品(如，在更高的温度下储存和在更高的pH下配制)比未受应力的对应物倾向于显著更疏水。不希望受到理论的束缚，对受应力的样品的系统研究表明缀合物的氨基-苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001362
化合物部分可能正在经历化学转化，如被水解成无活性的内酰胺化合物，如下所示：
Figure BDA0003569925330001361
令人惊讶的是，氨基-苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001363
化合物在其制备过程中或作为游离(未缀合)药物时并未表现出对水解的敏感性。
为了测试该理论，制备了内酰胺化合物-接头和包含内酰胺化合物-接头的缀合物以证实在较高pH下配制的缀合物的改变的HIC曲线导致氨基-苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001364
化合物化学转化为其内酰胺形式而不影响药物缀合物DAR。通过反相液相色谱法(RP-LC)分析具有氨基-苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001365
化合物接头和内酰胺化合物接头的缀合物，以检查向内酰胺的化学转化是否导致观察到的缀合物在受应力条件下改变的HIC曲线。
对于该分析，首先在其IgG1铰链下方酶促裂解缀合物并还原以生成三个片段：Fc、轻链(LC)和Fd，其包括重链可变区和CH1。虽然预期Fc没有任何缀合位点，但LC和Fd分别有一个和三个位点。因此，预期酶促裂解会产生七种不同的片段：Fc、LC-0、LC-1、Fd-0、Fd-1、Fd-2和Fd-3，其中数字指示缀合的化合物-接头的数量。片段上的缀合的化合物-接头的数量越高，它相对于其未修饰形式的疏水性越强。水解的化合物(内酰胺)比其未水解形式(氨基-苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001366
)更有疏水性。
使用
Figure BDA0003569925330001367
(IdeS酶)进行酶促裂解。简而言之，将25μL
Figure BDA0003569925330001368
(4单位/μL)添加到100μg缀合物中，并在37℃下允许进行30分钟的消化。然后将反应冷却至室温，并将等体积的100mM DTT添加到消化的混合物中以获得50mM DTT的最终浓度。将混合物轻轻混合，并将反应物在室温下孵育2小时。
然后经由RP-HPLC(柱：Agilent,Zorbax 300SB-CN,4.6mm x 250mm,5μm粒径)使用以下梯度分析消化且还原的混合物：
1.每次运行的加载量：15μg缀合物，片段化和经还原的2.0.750mL/min的流速，高压限值：400巴
3.缓冲液：
a.洗脱液A：ddH2O，0.05％(v/v)三氟乙酸(TFA)
b.洗脱液B：乙腈(ACN)，0.05％(v/v)三氟乙酸(TFA)
4.柱温：75-80℃
5.洗脱：
时间(min) 洗脱液B(％)
0.0 28
30.0 37
31.0 95
33.0 95
33.1 28
39.0 28
如图6所示，包含苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001371
化合物的抗体缀合物的LC-1(“L1”)片段比包含内酰胺缀合物的抗体的L1片段更早洗脱。苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001372
缀合物的受应力样品(40℃于PBS中，持续3天)显示了苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001373
缀合的L1片段的丢失和与内酰胺缀合的L1片段同时洗脱的缀合的L1片段出现。此外，由于琥珀酰亚胺环的打开，出现中间峰。这些结果表明，缀合至抗体的苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001374
药物(但不是作为游离药物)作为缀合物是稳定的(DAR不改变)，但当在更高的pH(高于5.4)下配制时并且当受应力(储存在25℃或更高下)时，药物本身会发生可检测的化学转化。当苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001375
-抗体缀合物在较低的pH(如范围为4.4至5.4的pH)下配制时，此类化学转化可在应力条件(25℃或更高)下最小化或消除。
实施例7：制造工艺
下文描述了制备包含含有抗体和苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001376
化合物的缀合物的制剂的方法。
用于合成苯并氮杂
Figure BDA0003569925330001382
缀合物的方法是本领域已知的。参见如美国专利第10,239,862号。通过加入乙酸将猝灭和过滤的包含缀合物的反应混合物的pH从中性pH(7.2-7.5)调节至pH 4.5，然后进行超滤/渗滤(UF/DF)。进行UF/DF以去除与小分子工艺相关的杂质，交换到DF缓冲剂(20mM组氨酸/天冬氨酸，pH 4.5)中，并将缀合物浓度提高到目标缀合物浓度。UF/DF之前的这个pH调节步骤可能会增加经猝灭的接头-药物的溶解度，从而使其在渗滤过程中更有效地去除，并在UF/DF过程的剩余过程中将化合物保持在用于稳定性的最佳pH下。
使用基于重量的测量制备20mM组氨酸/天冬氨酸pH 4.5DF缓冲液，以获得约9.2mML-组氨酸和10.8mM L-天冬氨酸溶液。使用超滤将具有约20mg/ml缀合物的反应混合物浓缩至30-40mg/mL，确定其对于后续渗滤步骤是最佳的。然后将浓缩的混合物使用针对DF的渗滤进行缓冲液交换，而无需超过12个渗滤体积(DV)的另外的赋形剂，根据经验确定这会导致接头-药物、相关杂质和残留溶剂的充分去除。随后使用第二个超滤步骤将工艺流浓缩至>95mg/mL缀合物。然后，实施调节步骤以将样品调整为其最终配方。为了进行调节，测量缀合物浓度，并使用蔗糖和聚山梨醇酯80(PS80)在20mM组氨酸/天冬氨酸(pH 4.5)缓冲液中的浓缩原液稀释，以获得含有缀合物和20mM组氨酸/天冬氨酸、8％蔗糖、0.02％PS80的最终制剂。如有必要，则用20mM组氨酸/天冬氨酸、8％蔗糖、0.02％PS80，pH 4.5进行进一步稀释，以达到目标缀合物浓度。
某些序列的表格
Figure BDA0003569925330001381
Figure BDA0003569925330001391
Figure BDA0003569925330001401
Figure BDA0003569925330001411
Figure BDA0003569925330001421
序列表
<110> 希沃尔拜克治疗公司(SILVERBACK THERAPEUTICS, INC.)
<120> 苯并氮杂卓缀合物的制剂及其用途
<130> 01230-0008-00PCT
<150> US 62/887,335
<151> 2019-08-15
<160> 75
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体重链(HC) CDR1
<400> 1
Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr Thr Met Asp
1 5 10
<210> 2
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体 HC CDR2
<400> 2
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 3
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体 HC CDR3
<400> 3
Asn Leu Gly Pro Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 4
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体轻链 (LC) CDR1
<400> 4
Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Ile Gly Val Ala
1 5 10
<210> 5
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体 LC CDR2
<400> 5
Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体 LC CDR3
<400> 6
Gln Gln Tyr Tyr Ile Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 7
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体重链可变区 (VH)
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Thr Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Val Asp Arg Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 8
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体轻链可变区 (VL)
<400> 8
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Ile Gly
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ile Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
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<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体重链
<400> 9
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Thr Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Val Asp Arg Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
<210> 10
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗HER2抗体轻链
<400> 10
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Ile Gly
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ile Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 11
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体重链(HC) CDR1
<400> 11
Asn Tyr Asp Met Ser
1 5
<210> 12
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体 HC CDR2
<400> 12
Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 13
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体 HC CDR3
<400> 13
Gln Glu Leu Gly Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 14
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体轻链 (LC) CDR1 v1
<400> 14
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 15
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体轻链 (LC) CDR1 v2
<400> 15
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 16
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体 LC CDR2
<400> 16
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 17
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体 LC CDR3
<400> 17
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Tyr Thr
1 5
<210> 18
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体重链可变区 (VH)
<400> 18
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Ala Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu His
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Lys Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Glu Leu Gly Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 19
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体轻链可变区 (VL) v1
<400> 19
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 20
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体轻链可变区 (VL) v2
<400> 20
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 21
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体重链
<400> 21
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Glu Leu Gly Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 22
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体轻链 v1
<400> 22
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 23
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗粘连蛋白-4抗体轻链 v2
<400> 23
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 24
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链(HC) CDR1 K2E
<400> 24
Ser Tyr Thr Met His
1 5
<210> 25
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链(HC) CDR1 G2D
<400> 25
Gly Tyr Tyr Met His
1 5
<210> 26
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 HC CDR2 K2E
<400> 26
Tyr Ile Ser Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 27
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 HC CDR2 G2D
<400> 27
Arg Ile Asn Pro Asn Asn Gly Ala Thr Asn Tyr Asn Gln Asn Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 28
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 HC CDR2 G2.2D
<400> 28
Arg Ile Asn Pro Asn Asn Ala Ala Thr Asn Tyr Asn Gln Asn Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 29
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 HC CDR3 K2E
<400> 29
Lys Phe Asp Tyr
1
<210> 30
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 HC CDR3 G2D
<400> 30
Val Asn Phe Tyr Tyr
1 5
<210> 31
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链 (LC) CDR1 K2E
<400> 31
Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 32
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链 (LC) CDR1 G2D
<400> 32
Lys Ala Ser Gln Val Ile Asn Ser Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 33
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 LC CDR2 K2E
<400> 33
Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp
1 5
<210> 34
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 LC CDR2 K2.1E
<400> 34
Arg Ala Asn Arg Leu Val Glu
1 5
<210> 35
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 LC CDR2 G2D
<400> 35
Arg Ala Asn Thr Leu Val Asp
1 5
<210> 36
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 LC CDR2 G2.1D
<400> 36
Arg Ala Asn Thr Leu Val Ser
1 5
<210> 37
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 LC CDR3 K2E
<400> 37
Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Phe Thr
1 5
<210> 38
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体 LC CDR3 G2D
<400> 38
Leu Gln Tyr Ala Glu Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 39
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链可变区 (VH) K2E
<400> 39
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Ser Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 40
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链可变区 (VH) G2.42D
<400> 40
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Pro Asn Asn Gly Ala Thr Asn Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Ser Leu Thr Val Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ser Val Asn Phe Tyr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 41
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链可变区 (VH) G2.35D
<400> 41
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Pro Asn Asn Ala Ala Thr Asn Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Ser Leu Thr Val Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ser Val Asn Phe Tyr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 42
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链可变区 (VL) K2E
<400> 42
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 43
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链可变区 (VL) K2.2E
<400> 43
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Arg Leu Val Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 44
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链可变区 (VL) G2D
<400> 44
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Val Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Thr Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Glu Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 45
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链可变区 (VL) G2.1D
<400> 45
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Val Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Thr Leu Val Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Glu Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 46
<211> 443
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链K2E
<400> 46
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Ser Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser
115 120 125
Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp
130 135 140
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
145 150 155 160
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr
165 170 175
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln
180 185 190
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
195 200 205
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
225 230 235 240
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
245 250 255
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
260 265 270
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
275 280 285
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
290 295 300
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
305 310 315 320
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
325 330 335
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu
340 345 350
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
355 360 365
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
370 375 380
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
385 390 395 400
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
405 410 415
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
420 425 430
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 47
<211> 444
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链G2.42D
<400> 47
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Pro Asn Asn Gly Ala Thr Asn Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Ser Leu Thr Val Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ser Val Asn Phe Tyr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val
100 105 110
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
115 120 125
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
130 135 140
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
145 150 155 160
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
180 185 190
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
195 200 205
Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 48
<211> 444
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体重链G2.35D
<400> 48
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Pro Asn Asn Ala Ala Thr Asn Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Ser Leu Thr Val Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ser Val Asn Phe Tyr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val
100 105 110
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
115 120 125
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
130 135 140
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
145 150 155 160
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
180 185 190
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
195 200 205
Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 49
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链 K2E
<400> 49
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 50
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链 K2.2E
<400> 50
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Arg Leu Val Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 51
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链 G2D
<400> 51
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Val Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Thr Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Glu Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 52
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗ASGR1抗体轻链 G2.1D
<400> 52
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Val Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Thr Leu Val Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Glu Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 53
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体重链(HC) CDR1
<400> 53
Gly Tyr Thr Met Asn
1 5
<210> 54
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体 HC CDR2
<400> 54
Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Ala Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 55
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体 HC CDR3
<400> 55
Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 56
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体轻链 (LC) CDR1
<400> 56
Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His
1 5 10
<210> 57
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体 LC CDR2
<400> 57
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser
1 5
<210> 58
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体 LC CDR3
<400> 58
Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr
1 5
<210> 59
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体重链可变区 (VH)
<400> 59
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Ala Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 60
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体轻链可变区 (VL)
<400> 60
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 61
<400> 61
000
<210> 62
<400> 62
000
<210> 63
<400> 63
000
<210> 64
<400> 64
000
<210> 65
<400> 65
000
<210> 66
<400> 66
000
<210> 67
<400> 67
000
<210> 68
<400> 68
000
<210> 69
<400> 69
000
<210> 70
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体重链
<400> 70
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Ala Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 71
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 抗间皮素抗体轻链
<400> 71
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 72
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 示例性可裂解接头
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> X = Cit
<400> 72
Glu Glu Val Xaa
1
<210> 73
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 示例性可裂解接头
<400> 73
Gly Phe Leu Gly
1
<210> 74
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 示例性可裂解接头
<400> 74
Gly Gly Phe Gly
1
<210> 75
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 示例性可裂解接头
<400> 75
Ala Leu Ala Leu
1

Claims (267)

1.水性制剂，其包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure FDA0003569925320000011
其中
Figure FDA0003569925320000012
是双键或单键；
其中当
Figure FDA0003569925320000013
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure FDA0003569925320000014
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
其中所述制剂的pH为4至5.2或4.4至5.4。
2.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.4至5.4、4.5至5.3、4.6至5.2、4.7至5.1、4.8至5.1、4.9至5.1、4.4至5.0、4.5至5.0、4.6至5.0、4.7至5.0、4.8至5.0或4.9至5.0。
3.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.4至5.4。
4.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.4至5.3。
5.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.4至5.2。
6.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.4至5.1。
7.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.5至5.1。
8.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.6至5.0。
9.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.7至4.9。
10.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.8。
11.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为4.9。
12.如权利要求1所述的水性制剂，其中所述制剂的pH为5.0。
13.如权利要求1-12中任一项所述的水性制剂，其中所述制剂包含至少一种缓冲剂。
14.如权利要求13所述的水性制剂，其中所述至少一种缓冲剂选自组氨酸、柠檬酸盐、天冬氨酸、乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、氨丁三醇、葡糖酸盐、谷氨酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苹果酸、延胡索酸盐、α-酮戊二酸盐及其组合。
15.如权利要求14所述的水性制剂，其中所述至少一种缓冲剂是组氨酸和天冬氨酸。
16.如权利要求13-15中任一项所述的水性制剂，其中所述制剂中缓冲剂的总浓度为约15mM至约25mM。
17.如权利要求1-16中任一项所述的水性制剂，其中所述水性制剂包含选自以下的至少一种冻干保护剂：蔗糖、精氨酸、甘氨酸、山梨糖醇、甘油、海藻糖、右旋糖、α-环糊精、羟丙基β-环糊精、羟丙基γ-环糊精、脯氨酸、甲硫氨酸、白蛋白、甘露糖醇、麦芽糖、右旋糖酐及其组合。
18.如权利要求17所述的水性制剂，其中所述至少一种冻干保护剂是蔗糖。
19.如权利要求17或权利要求18所述的水性制剂，其中所述至少一种冻干保护剂的总浓度为约7％至约9％。
20.如权利要求1-19中任一项所述的水性制剂，其中所述水性制剂包含至少一种表面活性剂。
21.如权利要求20所述的水性制剂，其中所述至少一种表面活性剂选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、泊洛沙姆88及其组合。
22.如权利要求21所述的水性制剂，其中所述至少一种表面活性剂是聚山梨醇酯80。
23.如权利要求20-22中任一项所述的水性制剂，其中所述至少一种表面活性剂的总浓度为约0.01％至约0.05％。
24.如权利要求1-23中任一项所述的水性制剂，其中所述水性制剂中所述缀合物的浓度为约70mg/mL至约100mg/mL。
25.如权利要求1-24中任一项所述的水性制剂，其中所述多肽是抗体。
26.如权利要求25所述的水性制剂，其中所述抗体包含抗原结合结构域和Fc结构域。
27.如权利要求26所述的水性制剂，其中与来自IgG1抗体的野生型Fc结构域相比，所述Fc结构域表现出相同或基本上类似的与Fcγ和/或FcRn受体的结合亲和力。
28.如权利要求25-27中任一项所述的水性制剂，其中所述抗体结合肿瘤相关抗原。
29.如权利要求28所述的水性制剂，其中所述肿瘤相关抗原选自HER2、粘连蛋白-4、ASGR1、间皮素、PSMA、rsPSMA、TROP2、LIV-1、MUC16、CEACAM1、CEACAM3、CEACAM4、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM7、CEACAM8、CEACAM16、CEACAM18、CEACAM19、CEACAM20、CEACAM21、URLC10、NY-ESO-1、GAA、OFA、细胞周期素B1、WT-1、CEF、VEGRR1、VEGFR2、TTK、MUC1、HPV16E7、CEA、IMA910、KOC1、SL-701、MART-1、gp100、酪氨酸酶、GSK2302050A、存活素、MAGE-3.1、MAGE-10.A2、OVA BiP、gp209-2M、黑色素-A、NA17.A2、KOC1、CO16、DEPDC1、MPHOSPH1、MAGE12、ONT-10、GD2L、GD3L、GSK2302032A、URLC10、CDCA1、TF、PSA、MUC-2、TERT、HPV16、HPV18、STF-II、G17DT、ICT-107、Dex2、hTERT、PAP、酪氨酸酶相关肽2(TRP2)和LRRC15。
30.如权利要求28所述的水性制剂，其中所述肿瘤相关抗原选自：
a)存在于肺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自间皮素、HER2、EGFR、PD-L1、MSLN、LY6K、CD56、PTK7、FOLR1、DLL3、SLC34A2、CECAM5、MUC16、LRRC15、ADAM12、EGFRvIII、LYPD3、EFNA4和MUC1；
b)存在于肝癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自GPC3、EPCAM和CECAM5；
c)存在于肾癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HAVCR1、ENPP3、CDH6、CD70和cMET；
d)存在于胰腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PTK7、MUC16、MSLN、LRRC15、ADAM12、EFNA4、MUC5A和MUC1；
e)存在于结直肠癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHB2、TMEM238、CECAM5、LRRC15、ADAM12、EFNA4和GPA33；
f)存在于卵巢癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自MUC16、MUC1、MSLN、FOLR1、sTN、VTCN1、HER2、PTK7、FAP、TMEM238、LRRC15、CLDN6、SLC34A2和EFNA4；
g)存在于头颈癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、LRRC15、ADAM12、LYPD3、EFNA4和TNC；
h)存在于骨癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHA2、LRRC15、ADAM12、GPNMB、TP-3和CD248；
i)存在于间皮瘤上的抗原，其中所述抗原任选为MSLN；
j)存在于膀胱癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、UPK1B、UPK2、TNC、粘连蛋白4、SLITRK6、LYPD3、EFNA4和HER2；
k)存在于胃癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、EPHB2、TMEM238、CECAM5和EFNA4；
l)存在于前列腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PSMA、FOLH1、PTK7、STEAP、TMEFF2(TENB2)、OR51E2、SLC30A4和EFNA4；
m)存在于甲状腺癌上的抗原，其中所述抗原任选为PTK7；
n)存在于子宫癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、EPHB2、FOLR1、ALPPL2、MUC16和EFNA4；
o)存在于宫颈癌/子宫内膜癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、MUC16、LYPD3、EFNA4和MUC1；以及
p)存在于乳腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、TROP2、LIV-1、CDH3(p-钙粘素)、MUC1、唾液酸-表位CA6、PTK7、GPNMB、LAMP-1、LRRC15、ADAM12、EPHA2、TNC、LYPD3、EFNA4和CLDN6。
31.如权利要求25-30中任一项所述的水性制剂，其中所述抗体是抗HER2抗体。
32.如权利要求31所述的水性制剂，其中所述抗HER2抗体包含分别为SEQ ID NO:1-6的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
33.如权利要求32所述的水性制剂，其中所述抗HER2抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:7的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:8的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
34.如权利要求31或权利要求32所述的水性制剂，其中所述抗HER2抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列或由其组成。
35.如权利要求32-34中任一项所述的水性制剂，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:9的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:10的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
36.如权利要求31或权利要求32所述的水性制剂，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列或由其组成。
37.如权利要求25-30中任一项所述的水性制剂，其中所述抗体是抗粘连蛋白-4抗体。
38.如权利要求37所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含分别为SEQ IDNO:11-13的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3，以及SEQ ID NO:14或15的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:16的LC-CDR2和SEQ ID NO:17的LC-CDR3。
39.如权利要求38所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:18的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:19或20的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
40.如权利要求37或权利要求38所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:19或20的氨基酸序列或者由其组成。
41.如权利要求38-40中任一项所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:21的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:22或23的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
42.如权利要求37或权利要求38所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:22或23的氨基酸序列或者由其组成。
43.如权利要求25-30中任一项所述的水性制剂，其中所述抗体是抗ASGR1抗体。
44.如权利要求43所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含SEQ ID NO:24或25的重链(HC)-CDR1，SEQ ID NO:26、27或28的HC-CDR2，SEQ ID NO:29或30的HC-CDR3，SEQ ID NO:31或32的轻链(LC)-CDR1，SEQ ID NO:33、34、35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:37或38的LC-CDR3。
45.如权利要求43所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含(a)SEQ ID NO:24的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:26的HC-CDR2、SEQ ID NO:29的HC-CDR3、SEQ ID NO:31的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:33或34的LC-CDR2和SEQ ID NO:37的LC-CDR3；或(b)SEQ ID NO:25的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:27或28的HC-CDR2、SEQ ID NO:30的HC-CDR3、SEQ ID NO:32的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:38的LC-CDR3。
46.如权利要求44或权利要求45所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:39的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQID NO:42或43的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
47.如权利要求44或权利要求45所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:40或41的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:44或45的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
48.如权利要求43-45中任一项所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:42或43的氨基酸序列或者由其组成。
49.如权利要求43-45中任一项所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:40或41的氨基酸序列或者由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:44或45的氨基酸序列或者由其组成。
50.如权利要求44-46和48中任一项所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:46的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:49或50的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
51.如权利要求43-45中任一项所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:49或50的氨基酸序列或者由其组成。
52.如权利要求44-45、47和49中任一项所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:47或48的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:51或52的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
53.如权利要求43-45中任一项所述的水性制剂，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:47或48的氨基酸序列或者由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:51或52的氨基酸序列或者由其组成。
54.如权利要求25-30中任一项所述的水性制剂，其中所述抗体是抗间皮素抗体。
55.如权利要求54所述的水性制剂，其中所述抗间皮素抗体包含分别为SEQ ID NO:53-58的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3，轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
56.如权利要求55所述的水性制剂，其中所述抗间皮素抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:59的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:60的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
57.如权利要求54或权利要求55所述的水性制剂，其中所述抗间皮素抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列或由其组成。
58.如权利要求55-57中任一项所述的水性制剂，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:70的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:71的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
59.如权利要求54或权利要求55所述的水性制剂，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:70的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列或由其组成。
60.如权利要求31所述的水性制剂，其中所述抗体是帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗，或者包含帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗的抗原结合片段。
61.如权利要求1-60中任一项所述的水性制剂，其中所述化合物是髓样激动剂。
62.如权利要求1-61中任一项所述的水性制剂，其中所述化合物是TLR8激动剂。
63.如权利要求1-62中任一项所述的水性制剂，其中所述化合物包含以下结构：
Figure FDA0003569925320000121
其中所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代。
64.如权利要求1-63中任一项所述的水性制剂，其中所述缀合物由式(I)表示：
Figure FDA0003569925320000122
其中：
A是所述多肽，
L是接头；
Dx是所述化合物；
n选自1至20；以及
z选自1至20。
65.如权利要求64所述的水性制剂，其中n是1并且z是1至8。
66.如权利要求1-63中任一项所述的水性制剂，其中所述缀合物包含通过接头与所述多肽连接的化合物，其中所述化合物和所述接头在一起是式(IVB)的化合物；或者如权利要求64或权利要求65所述的水性制剂，其中L和Dx在一起是式(IVB)的化合物：
Figure FDA0003569925320000131
其中：
L12选自-X3-、-X3-C1-6亚烷基-X3-、-X3-C2-6亚烯基-X3-和-X3-C2-6亚炔基-X3-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R12的一个或多个取代基取代；
L22独立地选自-X4-、-X4-C1-6亚烷基-X4-、-X4-C2-6亚烯基-X4-和-X4-C2-6亚炔基-X4-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R10的一个或多个取代基取代；
X3和X4在每次出现时独立地选自键、-O-、-S-、-N(R10)-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)N(R10)-、-C(O)N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)O-、-OC(O)N(R10)-、-C(NR10)-、-N(R10)C(NR10)-、-C(NR10)N(R10)-、-N(R10)C(NR10)N(R10)-、-S(O)2-、-OS(O)-、-S(O)O-、-S(O)-、-OS(O)2-、-S(O)2O-、-N(R10)S(O)2-、-S(O)2N(R10)-、-N(R10)S(O)-、-S(O)N(R10)-、-N(R10)S(O)2N(R10)-和-N(R10)S(O)N(R10)-；
R1和R2各自是氢；
R4和R8独立地选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地结合至L3并且其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选结合至L3并且R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
R10在每次出现时独立地选自L3、氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L3是接头部分，其中存在至少一次出现的L3；
R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环；以及C3-10碳环和3至10元杂环，其中R12中的每个C3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基；以及
其中苯并氮杂
Figure FDA0003569925320000141
核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自R12的取代基取代，或者单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环，
R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；以及
R24和R25独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；或R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-7碳环。
67.如权利要求1-63中任一项所述的水性制剂，其中所述缀合物包含通过接头与所述多肽连接的化合物，其中所述化合物和所述接头在一起是式(IVC)的化合物；或者如权利要求64-66中任一项所述的水性制剂，其中所述化合物和所述接头在一起或者L和Dx在一起是式(IVC)的化合物：
Figure FDA0003569925320000151
其中：
R1和R2各自是氢；
L22是-C(O)-；
R4是-N(R10)2；
R10在每次出现时独立地选自氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L12是-C(O)N(R10)-*，其中*表示L12结合至R8的地方；
R8是结合至接头部分L3的任选取代的稠合5-5、稠合5-6或稠合6-6双环杂环，
并且其中任选的取代基在每次出现时独立地选自：
卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；
C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及
C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
68.如权利要求66或权利要求67所述的水性制剂，其中：
R4是-N(C1-4烷基)2并且L12是-C(O)N(H)-*。
69.如权利要求66或权利要求67所述的水性制剂，其中：
R4是
Figure FDA0003569925320000161
70.如权利要求64-69中任一项所述的水性制剂，其中L和Dx在一起具有选自以下及其盐的结构：
Figure FDA0003569925320000162
Figure FDA0003569925320000171
Figure FDA0003569925320000181
Figure FDA0003569925320000191
Figure FDA0003569925320000201
其中所述RX*是结合至多肽的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure FDA0003569925320000202
表示与所述多肽的残基的连接点。
71.如权利要求70所述的水性制剂，其中L和Dx在一起具有选自以下及其盐的结构：
Figure FDA0003569925320000203
Figure FDA0003569925320000211
其中所述RX*是结合至多肽的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure FDA0003569925320000212
表示与所述多肽的残基的连接点。
72.如权利要求64所述的水性制剂，其包含：
a)缀合物，其总浓度范围为约50mg/mL至约100mg/mL并且由式(I)表示：
Figure FDA0003569925320000213
其中A是抗体；n是1；z范围为2至8；以及L是接头并且Dx是苯并氮杂
Figure FDA0003569925320000214
化合物，其中L和Dx在一起具有以下的结构：
Figure FDA0003569925320000221
其中RX*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至所述抗体的半胱氨酸残基；
b)缓冲液，其由组氨酸和天冬氨酸组成，总浓度范围为约15mM至约25mM；
c)冻干保护剂，其由蔗糖组成，总浓度范围为约7％至约8％；以及
d)表面活性剂，其由聚山梨醇酯80组成，总浓度范围为约0.01％至约0.03％。
73.冻干组合物，其包含含有与多肽连接的化合物的缀合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure FDA0003569925320000222
其中
Figure FDA0003569925320000223
是双键或单键；
其中当
Figure FDA0003569925320000224
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure FDA0003569925320000225
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
其中在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，所述水性制剂的pH为4至5.2或4.4至5.4。
74.如权利要求53所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.4、4.5至5.3、4.6至5.2、4.7至5.1、4.8至5.1、4.9至5.1、4.4至5.0、4.5至5.0、4.6至5.0、4.7至5.0、4.8至5.0或4.9至5.0。
75.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.4。
76.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.3。
77.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.2。
78.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.1。
79.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.5至5.1。
80.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.6至5.0。
81.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.7至4.9。
82.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.8。
83.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为4.9。
84.如权利要求73所述的冻干组合物，其中所述水性制剂的pH为5.0。
85.如权利要求73-84中任一项所述的冻干组合物，其中所述组合物包含至少一种缓冲剂。
86.如权利要求85所述的冻干组合物，其中所述至少一种缓冲剂选自组氨酸、柠檬酸盐、天冬氨酸、乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、氨丁三醇、葡糖酸盐、谷氨酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苹果酸、延胡索酸盐、α-酮戊二酸盐及其组合。
87.如权利要求86所述的冻干组合物，其中所述至少一种缓冲剂是组氨酸和天冬氨酸。
88.如权利要求73-87中任一项所述的冻干组合物，其中在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，所述水性制剂中缓冲剂的总浓度为约15mM至约25mM。
89.如权利要求73-88中任一项所述的冻干组合物，其中所述冻干组合物包含选自以下的至少一种冻干保护剂：蔗糖、精氨酸、甘氨酸、山梨糖醇、甘油、海藻糖、右旋糖、α-环糊精、羟丙基β-环糊精、羟丙基γ-环糊精、脯氨酸、甲硫氨酸、白蛋白、甘露糖醇、麦芽糖、右旋糖酐及其组合。
90.如权利要求89所述的冻干组合物，其中所述至少一种冻干保护剂是蔗糖。
91.如权利要求89或权利要求90所述的冻干组合物，其中在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，所述水性制剂中至少一种冻干保护剂的总浓度为约7％至约9％。
92.如权利要求73-91中任一项所述的冻干组合物，其中所述冻干组合物包含至少一种表面活性剂。
93.如权利要求92所述的冻干组合物，其中所述至少一种表面活性剂选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、泊洛沙姆88及其组合。
94.如权利要求93所述的冻干组合物，其中所述至少一种表面活性剂是聚山梨醇酯80。
95.如权利要求92-94中任一项所述的冻干组合物，其中在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，所述水性制剂中至少一种表面活性剂的总浓度为约0.01％至约0.05％。
96.如权利要求73-95中任一项所述的冻干组合物，其中在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，所述水性制剂中缀合物的浓度为约70mg/mL至约100mg/mL。
97.如权利要求73-96中任一项所述的冻干组合物，其中所述多肽是抗体。
98.如权利要求97所述的冻干组合物，其中所述抗体包含抗原结合结构域和Fc结构域。
99.如权利要求98所述的冻干组合物，其中与来自IgG1抗体的野生型Fc结构域相比，所述Fc结构域表现出相同或基本上类似的与Fcγ和/或FcRn受体的结合亲和力。
100.如权利要求97-99中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗体结合肿瘤相关抗原。
101.如权利要求100所述的冻干组合物，其中所述肿瘤相关抗原选自HER2、粘连蛋白-4、ASGR1、间皮素、PSMA、rsPSMA、TROP2、LIV-1、MUC16、CEACAM1、CEACAM3、CEACAM4、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM7、CEACAM8、CEACAM16、CEACAM18、CEACAM19、CEACAM20、CEACAM21、URLC10、NY-ESO-1、GAA、OFA、细胞周期素B1、WT-1、CEF、VEGRR1、VEGFR2、TTK、MUC1、HPV16E7、CEA、IMA910、KOC1、SL-701、MART-1、gp100、酪氨酸酶、GSK2302050A、存活素、MAGE-3.1、MAGE-10.A2、OVA BiP、gp209-2M、黑色素-A、NA17.A2、KOC1、CO16、DEPDC1、MPHOSPH1、MAGE12、ONT-10、GD2L、GD3L、GSK2302032A、URLC10、CDCA1、TF、rsPSMA、PSA、MUC-2、TERT、HPV16、HPV18、STF-II、G17DT、ICT-107、Dex2、hTERT、PAP、酪氨酸酶相关肽2(TRP2)和LRRC15。
102.如权利要求100所述的冻干组合物，其中所述肿瘤相关抗原选自：
a)存在于肺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自间皮素、HER2、EGFR、PD-L1、MSLN、LY6K、CD56、PTK7、FOLR1、DLL3、SLC34A2、CECAM5、MUC16、LRRC15、ADAM12、EGFRvIII、LYPD3、EFNA4和MUC1；
b)存在于肝癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自GPC3、EPCAM和CECAM5；
c)存在于肾癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HAVCR1、ENPP3、CDH6、CD70和cMET；
d)存在于胰腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PTK7、MUC16、MSLN、LRRC15、ADAM12、EFNA4、MUC5A和MUC1；
e)存在于结直肠癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHB2、TMEM238、CECAM5、LRRC15、ADAM12、EFNA4和GPA33；
f)存在于卵巢癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自MUC16、MUC1、MSLN、FOLR1、sTN、VTCN1、HER2、PTK7、FAP、TMEM238、LRRC15、CLDN6、SLC34A2和EFNA4；
g)存在于头颈癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、LRRC15、ADAM12、LYPD3、EFNA4和TNC；
h)存在于骨癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHA2、LRRC15、ADAM12、GPNMB、TP-3和CD248；
i)存在于间皮瘤上的抗原，其中所述抗原任选为MSLN；
j)存在于膀胱癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、UPK1B、UPK2、TNC、粘连蛋白4、SLITRK6、LYPD3、EFNA4和HER2；
k)存在于胃癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、EPHB2、TMEM238、CECAM5和EFNA4；
l)存在于前列腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PSMA、FOLH1、PTK7、STEAP、TMEFF2(TENB2)、OR51E2、SLC30A4和EFNA4；
m)存在于甲状腺癌上的抗原，其中所述抗原任选为PTK7；
n)存在于子宫癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、EPHB2、FOLR1、ALPPL2、MUC16和EFNA4；
o)存在于宫颈癌/子宫内膜癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、MUC16、LYPD3、EFNA4和MUC1；以及
p)存在于乳腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、TROP2、LIV-1、CDH3(p-钙粘素)、MUC1、唾液酸-表位CA6、PTK7、GPNMB、LAMP-1、LRRC15、ADAM12、EPHA2、TNC、LYPD3、EFNA4和CLDN6。
103.如权利要求97-102中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗体是抗HER2抗体。
104.如权利要求103所述的冻干组合物，其中所述抗HER2抗体包含分别为SEQ ID NO:1-6的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
105.如权利要求104所述的冻干组合物，其中所述抗HER2抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:7的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:8的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
106.如权利要求103或104所述的冻干组合物，其中所述抗HER2抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列或由其组成。
107.如权利要求104-106中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:9的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:10的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
108.如权利要求103或权利要求104所述的冻干组合物，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列或由其组成。
109.如权利要求97-102中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗体是抗粘连蛋白-4抗体。
110.如权利要求109所述的冻干组合物，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含分别为SEQID NO:11-13的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3，以及SEQ ID NO:14或15的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:16的LC-CDR2和SEQ ID NO:17的LC-CDR3。
111.如权利要求110所述的冻干组合物，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:18的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQID NO:19或20的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
112.如权利要求109或权利要求110所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:19或20的氨基酸序列或者由其组成。
113.如权利要求110-112中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:21的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:22或23的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
114.如权利要求109或权利要求110所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:22或23的氨基酸序列或者由其组成。
115.如权利要求97-102中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗体是抗ASGR1抗体。
116.如权利要求115所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含SEQ ID NO:24或25的重链(HC)-CDR1，SEQ ID NO:26、27或28的HC-CDR2，SEQ ID NO:29或30的HC-CDR3，SEQ IDNO:31或32的轻链(LC)-CDR1，SEQ ID NO:33、34、35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:37或38的LC-CDR3。
117.如权利要求116所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含(a)SEQ ID NO:24的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:26的HC-CDR2、SEQ ID NO:29的HC-CDR3、SEQ ID NO:31的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:33或34的LC-CDR2和SEQ ID NO:37的LC-CDR3；或(b)SEQ ID NO:25的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:27或28的HC-CDR2、SEQ ID NO:30的HC-CDR3、SEQ ID NO:32的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:38的LC-CDR3。
118.如权利要求116或权利要求117所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:39的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:42或43的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
119.如权利要求116或权利要求117所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:40或41的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:44或45的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
120.如权利要求115-117中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:42或43的氨基酸序列或者由其组成。
121.如权利要求115-117中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:40或41的氨基酸序列或者由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:44或45的氨基酸序列或者由其组成。
122.如权利要求116-118和120中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:46的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:49或50的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
123.如权利要求115-117中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:49或50的氨基酸序列或者由其组成。
124.如权利要求116-117、119和121中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:47或48的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:51或52的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
125.如权利要求115-117中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:47或48的氨基酸序列或者由其组成，所述轻链包含SEQID NO:51或52的氨基酸序列或者由其组成。
126.如权利要求97-102中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗体是抗间皮素抗体。
127.如权利要求126所述的冻干组合物，其中所述抗间皮素抗体包含分别为SEQ IDNO:53-58的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
128.如权利要求127所述的冻干组合物，其中所述抗间皮素抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:59的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:60的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
129.如权利要求126或权利要求127所述的冻干组合物，其中所述抗间皮素抗体包含VH和VL，所述VH包括SEQ ID NO:59的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列或由其组成。
130.如权利要求127-129中任一项所述的冻干组合物，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:70的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:71的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
131.如权利要求126或权利要求127所述的冻干组合物，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:70的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:71的氨基酸序列或由其组成。
132.如权利要求103所述的冻干组合物，其中所述抗体是帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗，或者包含帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗的抗原结合片段。
133.如权利要求73-132中任一项所述的冻干组合物，其中所述化合物是髓样激动剂。
134.如权利要求73-133中任一项所述的冻干组合物，其中所述化合物是TLR8激动剂。
135.如权利要求73-134中任一项所述的冻干组合物，其中所述化合物包含以下结构：
Figure FDA0003569925320000341
其中所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代。
136.如权利要求73-135中任一项所述的冻干组合物，其中所述缀合物由式(I)表示：
Figure FDA0003569925320000342
其中：
A是所述多肽，
L是接头；
Dx是所述化合物；
n选自1至20；以及
z选自1至20。
137.如权利要求136所述的冻干组合物，其中n是1并且z是1至8。
138.如权利要求73至135中任一项所述的冻干组合物，其中所述缀合物包含通过接头与所述多肽连接的化合物，其中所述化合物和所述接头在一起是式(IVB)的化合物，或者如权利要求136或权利要求137所述的冻干组合物，其中L和Dx在一起是式(IVB)的化合物：
Figure FDA0003569925320000351
或其药学上可接受的盐，其中：
L12选自-X3-、-X3-C1-6亚烷基-X3-、-X3-C2-6亚烯基-X3-和-X3-C2-6亚炔基-X3-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R12的一个或多个取代基取代；
L22独立地选自-X4-、-X4-C1-6亚烷基-X4-、-X4-C2-6亚烯基-X4-和-X4-C2-6亚炔基-X4-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R10的一个或多个取代基取代；
X3和X4在每次出现时独立地选自键、-O-、-S-、-N(R10)-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)N(R10)-、-C(O)N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)O-、-OC(O)N(R10)-、-C(NR10)-、-N(R10)C(NR10)-、-C(NR10)N(R10)-、-N(R10)C(NR10)N(R10)-、-S(O)2-、-OS(O)-、-S(O)O-、-S(O)-、-OS(O)2-、-S(O)2O-、-N(R10)S(O)2-、-S(O)2N(R10)-、-N(R10)S(O)-、-S(O)N(R10)-、-N(R10)S(O)2N(R10)-和-N(R10)S(O)N(R10)-；
R1和R2各自是氢；
R4和R8独立地选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地结合至L3并且其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选结合至L3并且R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
R10在每次出现时独立地选自L3、氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L3是接头部分，其中存在至少一次出现的L3；
R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环；以及C3-10碳环和3至10元杂环，其中R12中的每个C3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基；以及
其中苯并氮杂
Figure FDA0003569925320000361
核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自R12的取代基取代，或者单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环，
R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；以及
R24和R25独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；或R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-7碳环。
139.如权利要求73-135中任一项所述的冻干组合物，其中所述缀合物包含通过接头与所述多肽连接的化合物，其中所述化合物和所述接头在一起是式(IVB)的化合物；或者或如权利要求136-138中任一项所述的冻干组合物，其中L和Dx在一起是式(IVC)的化合物：
Figure FDA0003569925320000371
其中：
R1和R2各自是氢；
L22是-C(O)-；
R4是-N(R10)2；
R10在每次出现时独立地选自氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L12是-C(O)N(R10)-*，其中*表示L12结合至R8的地方；
R8是结合至接头部分L3的任选取代的稠合5-5、稠合5-6或稠合6-6双环杂环，
并且其中任选的取代基在每次出现时独立地选自：
卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；
C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及
C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
140.如权利要求138或权利要求139所述的冻干组合物，其中：
R4是-N(C1-4烷基)2并且L12是-C(O)N(H)-*。
141.如权利要求138或权利要求139所述的冻干组合物，其中：
R4是
Figure FDA0003569925320000381
142.如权利要求136-141中任一项所述的冻干组合物，其中L和Dx在一起具有选自以下及其盐的结构：
Figure FDA0003569925320000382
Figure FDA0003569925320000391
Figure FDA0003569925320000401
Figure FDA0003569925320000411
Figure FDA0003569925320000421
其中所述RX*是结合至多肽的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure FDA0003569925320000422
表示与所述多肽的残基的连接点。
143.如权利要求142所述的冻干组合物，其中L和Dx在一起具有选自以下及其盐的结构：
Figure FDA0003569925320000423
Figure FDA0003569925320000431
其中所述RX*是结合至多肽的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure FDA0003569925320000432
表示与所述多肽的残基的连接点。
144.如权利要求136所述的冻干组合物，其中在所述冻干组合物在水中复溶以形成水性制剂之后，所述水性制剂包含：
a)缀合物，其总浓度范围为约50mg/mL至约100mg/mL并且由式(I)表示：
Figure FDA0003569925320000433
其中A是抗体；n是1；z范围为2至8；以及L是接头并且Dx是苯并氮杂
Figure FDA0003569925320000442
化合物，其中L和Dx在一起具有以下的结构：
Figure FDA0003569925320000441
其中RX*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至所述抗体的半胱氨酸残基；
b)缓冲液，其由组氨酸和天冬氨酸组成，总浓度范围为约15mM至约25mM；
c)冻干保护剂，其由蔗糖组成，总浓度范围为约7％至约8％；以及
d)表面活性剂，其由聚山梨醇酯80组成，总浓度范围为约0.01％至约0.03％。
145.冻干组合物，其由冻干权利要求1-72中任一项所述的水性制剂形成。
146.水性制剂，其由复溶权利要求73-144中任一项所述的冻干组合物形成。
147.如权利要求146所述的水性制剂，其中所述冻干组合物已经复溶于水中。
148.治疗对象的疾病或病症的方法，其包括向有需要的对象施用治疗有效量的权利要求1-72、146和147中任一项所述的水性制剂。
149.治疗对象中的癌症的方法，其包括向有需要的对象施用治疗有效量的权利要求1-72、146和147中任一项所述的水性制剂。
150.如权利要求149所述的方法，其中所述癌症选自肺癌、肝癌、肾癌、胰腺癌、结直肠癌、卵巢癌、头颈癌、骨癌、间皮瘤、膀胱癌、胃癌、前列腺癌、甲状腺癌、子宫癌、宫颈癌/子宫内膜癌和乳腺癌。
151.如权利要求149或权利要求150所述的方法，其中所述多肽是抗体。
152.如权利要求151所述的方法，其中所述抗体包含抗原结合结构域和Fc结构域。
153.如权利要求152所述的方法，其中与来自IgG1抗体的野生型Fc结构域相比，所述Fc结构域表现出相同或基本上类似的与Fcγ和/或FcRn受体的结合亲和力。
154.如权利要求151-153中任一项所述的方法，其中所述抗体结合肿瘤相关抗原。
155.如权利要求154所述的方法，其中所述肿瘤相关抗原选自HER2、粘连蛋白-4、ASGR1、间皮素、PSMA、rsPSMA、TROP2、LIV-1、MUC16、CEACAM1、CEACAM3、CEACAM4、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM7、CEACAM8、CEACAM16、CEACAM18、CEACAM19、CEACAM20、CEACAM21、URLC10、NY-ESO-1、GAA、OFA、细胞周期素B1、WT-1、CEF、VEGRR1、VEGFR2、TTK、MUC1、HPV16E7、CEA、IMA910、KOC1、SL-701、MART-1、gp100、酪氨酸酶、GSK2302050A、存活素、MAGE-3.1、MAGE-10.A2、OVA BiP、gp209-2M、黑色素-A、NA17.A2、KOC1、CO16、DEPDC1、MPHOSPH1、MAGE12、ONT-10、GD2L、GD3L、GSK2302032A、URLC10、CDCA1、TF、rsPSMA、PSA、MUC-2、TERT、HPV16、HPV18、STF-II、G17DT、ICT-107、Dex2、hTERT、PAP、酪氨酸酶相关肽2(TRP2)和LRRC15。
156.如权利要求154所述的方法，其中所述肿瘤相关抗原选自：
a)存在于肺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自间皮素、HER2、EGFR、PD-L1、MSLN、LY6K、CD56、PTK7、FOLR1、DLL3、SLC34A2、CECAM5、MUC16、LRRC15、ADAM12、EGFRvIII、LYPD3、EFNA4和MUC1；
b)存在于肝癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自GPC3、EPCAM和CECAM5；
c)存在于肾癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HAVCR1、ENPP3、CDH6、CD70和cMET；
d)存在于胰腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PTK7、MUC16、MSLN、LRRC15、ADAM12、EFNA4、MUC5A和MUC1；
e)存在于结直肠癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHB2、TMEM238、CECAM5、LRRC15、ADAM12、EFNA4和GPA33；
f)存在于卵巢癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自MUC16、MUC1、MSLN、FOLR1、sTN、VTCN1、HER2、PTK7、FAP、TMEM238、LRRC15、CLDN6、SLC34A2和EFNA4；
g)存在于头颈癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、LRRC15、ADAM12、LYPD3、EFNA4和TNC；
h)存在于骨癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHA2、LRRC15、ADAM12、GPNMB、TP-3和CD248；
i)存在于间皮瘤上的抗原，其中所述抗原任选为MSLN；
j)存在于膀胱癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、UPK1B、UPK2、TNC、粘连蛋白4、SLITRK6、LYPD3、EFNA4和HER2；
k)存在于胃癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、EPHB2、TMEM238、CECAM5和EFNA4；
l)存在于前列腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PSMA、FOLH1、PTK7、STEAP、TMEFF2(TENB2)、OR51E2、SLC30A4和EFNA4；
m)存在于甲状腺癌上的抗原，其中所述抗原任选为PTK7；
n)存在于子宫癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、EPHB2、FOLR1、ALPPL2、MUC16和EFNA4；
o)存在于宫颈癌/子宫内膜癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、MUC16、LYPD3、EFNA4和MUC1；以及
p)存在于乳腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、TROP2、LIV-1、CDH3(p-钙粘素)、MUC1、唾液酸-表位CA6、PTK7、GPNMB、LAMP-1、LRRC15、ADAM12、EPHA2、TNC、LYPD3、EFNA4和CLDN6。
157.如权利要求151-154中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗表达HER2的癌症并且所述抗体是抗HER2抗体。
158.如权利要求157所述的方法，其中所述表达HER2的癌症以通过免疫组织化学所测定的2+或3+的水平表达HER2。
159.如权利要求157或权利要求158所述的方法，其中所述表达HER2的癌症是乳腺癌、肺癌、胃癌、膀胱癌或卵巢癌。
160.如权利要求159所述的方法，其中所述表达HER2的癌症是乳腺癌。
161.如权利要求157-160中任一项所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含分别为SEQID NO:1-6的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
162.如权利要求161所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:7的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL) 具有与SEQ ID NO:8的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
163.如权利要求157-162中任一项所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列或由其组成。
164.如权利要求161-163中任一项所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:9的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:10的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
165.如权利要求157-162中任一项所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列或由其组成。
166.如权利要求151-154中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗表达粘连蛋白-4的癌症，并且其中所述抗体是抗粘连蛋白-4抗体。
167.如权利要求166所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含分别为SEQ ID NO:11-13的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3，以及SEQ ID NO:14或15的轻链(LC)-CDR1、SEQID NO:16的LC-CDR2和SEQ ID NO:17的LC-CDR3。
168.如权利要求167所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:18的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:19或20的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
169.如权利要求166或权利要求167所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:19或20的氨基酸序列或者由其组成。
170.如权利要求167-169中任一项所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:21的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:22或23的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
171.如权利要求166或权利要求167所述的水性制剂，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:22或23的氨基酸序列或者由其组成。
172.如权利要求151-154中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗表达ASGR1的癌症，并且其中所述抗体是抗ASGR1抗体。
173.如权利要求172所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含SEQ ID NO:24或25的重链(HC)-CDR1，SEQ ID NO:26、27或28的HC-CDR2，SEQ ID NO:29或30的HC-CDR3，SEQ ID NO:31或32的轻链(LC)-CDR1，SEQ ID NO:33、34、35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:37或38的LC-CDR3。
174.如权利要求172所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含(a)SEQ ID NO:24的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:26的HC-CDR2、SEQ ID NO:29的HC-CDR3、SEQ ID NO:31的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:33或34的LC-CDR2和SEQ ID NO:37的LC-CDR3；或(b)SEQ ID NO:25的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:27或28的HC-CDR2、SEQ ID NO:30的HC-CDR3、SEQ ID NO:32的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:38的LC-CDR3。
175.如权利要求173或权利要求174所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:39的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQID NO:42或43的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
176.如权利要求173或权利要求174所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:40或41的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:44或45的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
177.如权利要求172-174中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:42或43的氨基酸序列或者由其组成。
178.如权利要求172-174中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:40或41的氨基酸序列或者由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:44或45的氨基酸序列或者由其组成。
179.如权利要求173-175和177中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:46的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:49或50的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
180.如权利要求172-174中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:49或50的氨基酸序列或者由其组成。
181.如权利要求173-174、176和178中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:47或48的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:51或52的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
182.如权利要求172-174中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:47或48的氨基酸序列或者由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:51或52的氨基酸序列或者由其组成。
183.如权利要求151-154中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗表达间皮素的癌症，并且其中所述抗体是抗间皮素抗体。
184.如权利要求184所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含分别为SEQ ID NO:53-58的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
185.如权利要求185所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:59的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:60的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
186.如权利要求183或权利要求184所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列或由其组成。
187.如权利要求184-186中任一项所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:70的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:71的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
188.如权利要求183或权利要求184所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:70的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列或由其组成。
189.如权利要求157-159中任一项所述的方法，其中所述抗体是帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗，或者包含帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗的抗原结合片段。
190.如权利要求148-189中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用有效方案的所述水性制剂，其中所述有效方案导致在每次施用所述水性制剂后所述对象中所述缀合物的Tmax大于4小时。
191.如权利要求148-190中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用有效方案的所述水性制剂，其中所述有效方案包括向所述对象施用所述缀合物的至少两个周期和每个周期大于0.4mg/kg的所述缀合物的总剂量。
192.如权利要求148-191中任一项所述的方法，其中皮下施用所述水性制剂。
193.如权利要求148-191中任一项所述的方法，其中通过缓慢输注静脉内施用所述水性制剂。
194.如权利要求148-193中任一项所述的方法，其还包括施用B-细胞耗竭剂。
195.如权利要求194所述的方法，其中所述B-细胞耗竭剂是抗CD19或抗CD20抗体。
196.控制与多肽缀合的化合物在水性制剂中的水解的方法，其中所述化合物包含以下结构：
Figure FDA0003569925320000541
其中
Figure FDA0003569925320000542
是双键或单键；
其中当
Figure FDA0003569925320000543
是双键时，X和Y各自是CH；以及
当
Figure FDA0003569925320000544
是单键时，X和Y中的一个是CH2并且另一个是CH2、O或NH；以及
所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代；
所述方法包括配制所述缀合物以形成水性制剂，其中所述水性制剂的pH为4至5.2或4.4至5.4。
197.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.4、4.5至5.3、4.6至5.2、4.7至5.1、4.8至5.1、4.9至5.1、4.4至5.0、4.5至5.0、4.6至5.0、4.7至5.0、4.8至5.0或4.9至5.0。
198.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.4。
199.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.3。
200.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.2。
201.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.4至5.1。
202.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.5至5.1。
203.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.6至5.0。
204.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.7至4.9。
205.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.8。
206.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为4.9。
207.如权利要求196所述的方法，其中所述水性制剂的pH为5.0。
208.如权利要求196-207中任一项所述的方法，其中所述水性制剂包含至少一种缓冲剂。
209.如权利要求208所述的方法，其中所述至少一种缓冲剂选自组氨酸、柠檬酸盐、天冬氨酸、乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、氨丁三醇、葡糖酸盐、谷氨酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苹果酸、延胡索酸盐、α-酮戊二酸盐及其组合。
210.如权利要求209所述的方法，其中所述至少一种缓冲剂是组氨酸和天冬氨酸。
211.如权利要求196-210中任一项所述的方法，其中所述水性制剂中缓冲剂的总浓度为约15mM至约25mM。
212.如权利要求196-211中任一项所述的方法，其中所述水性制剂包含选自以下的至少一种冻干保护剂：蔗糖、精氨酸、甘氨酸、山梨糖醇、甘油、海藻糖、右旋糖、α-环糊精、羟丙基β-环糊精、羟丙基γ-环糊精、脯氨酸、甲硫氨酸、白蛋白、甘露糖醇、麦芽糖、右旋糖酐及其组合。
213.如权利要求212所述的方法，其中所述至少一种冻干保护剂是蔗糖。
214.如权利要求212或权利要求213所述的方法，其中所述水性制剂中至少一种冻干保护剂的总浓度为约7％至约9％。
215.如权利要求196-214中任一项所述的方法，其中所述水性制剂包含至少一种表面活性剂。
216.如权利要求215所述的方法，其中所述至少一种表面活性剂选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、泊洛沙姆88及其组合。
217.如权利要求216所述的方法，其中所述至少一种表面活性剂是聚山梨醇酯80。
218.如权利要求215-217中任一项所述的方法，其中所述水性制剂中至少一种表面活性剂的总浓度为约0.01％至约0.05％。
219.如权利要求196-218中任一项所述的方法，其中所述水性制剂中缀合物的浓度为约70mg/mL至约100mg/mL。
220.如权利要求196-221中任一项所述的方法，其中所述多肽是抗体。
221.如权利要求220所述的方法，其中所述抗体包含抗原结合结构域和Fc结构域。
222.如权利要求221所述的方法，其中与来自IgG1抗体的野生型Fc结构域相比，所述Fc结构域表现出相同或基本上类似的与Fcγ和/或FcRn受体的结合亲和力。
223.如权利要求220-222中任一项所述的方法，其中所述抗体结合肿瘤相关抗原。
224.如权利要求223所述的方法，其中所述肿瘤相关抗原选自HER2、粘连蛋白-4、ASGR1、间皮素、PSMA、rsPSMA、TROP2、LIV-1、MUC16、CEACAM1、CEACAM3、CEACAM4、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM7、CEACAM8、CEACAM16、CEACAM18、CEACAM19、CEACAM20、CEACAM21、URLC10、NY-ESO-1、GAA、OFA、细胞周期素B1、WT-1、CEF、VEGRR1、VEGFR2、TTK、MUC1、HPV16E7、CEA、IMA910、KOC1、SL-701、MART-1、gp100、酪氨酸酶、GSK2302050A、存活素、MAGE-3.1、MAGE-10.A2、OVA BiP、gp209-2M、黑色素-A、NA17.A2、KOC1、CO16、DEPDC1、MPHOSPH1、MAGE12、ONT-10、GD2L、GD3L、GSK2302032A、URLC10、CDCA1、TF、rsPSMA、PSA、MUC-2、TERT、HPV16、HPV18、STF-II、G17DT、ICT-107、Dex2、hTERT、PAP、酪氨酸酶相关肽2(TRP2)和LRRC15。
225.如权利要求223所述的方法，其中所述肿瘤相关抗原选自：
a)存在于肺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自间皮素、HER2、EGFR、PD-L1、MSLN、LY6K、CD56、PTK7、FOLR1、DLL3、SLC34A2、CECAM5、MUC16、LRRC15、ADAM12、EGFRvIII、LYPD3、EFNA4和MUC1；
b)存在于肝癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自GPC3、EPCAM和CECAM5；
c)存在于肾癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HAVCR1、ENPP3、CDH6、CD70和cMET；
d)存在于胰腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PTK7、MUC16、MSLN、LRRC15、ADAM12、EFNA4、MUC5A和MUC1；
e)存在于结直肠癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHB2、TMEM238、CECAM5、LRRC15、ADAM12、EFNA4和GPA33；
f)存在于卵巢癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自MUC16、MUC1、MSLN、FOLR1、sTN、VTCN1、HER2、PTK7、FAP、TMEM238、LRRC15、CLDN6、SLC34A2和EFNA4；
g)存在于头颈癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、LRRC15、ADAM12、LYPD3、EFNA4和TNC；
h)存在于骨癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自EPHA2、LRRC15、ADAM12、GPNMB、TP-3和CD248；
i)存在于间皮瘤上的抗原，其中所述抗原任选为MSLN；
j)存在于膀胱癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、UPK1B、UPK2、TNC、粘连蛋白4、SLITRK6、LYPD3、EFNA4和HER2；
k)存在于胃癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、EPHB2、TMEM238、CECAM5和EFNA4；
l)存在于前列腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自PSMA、FOLH1、PTK7、STEAP、TMEFF2(TENB2)、OR51E2、SLC30A4和EFNA4；
m)存在于甲状腺癌上的抗原，其中所述抗原任选为PTK7；
n)存在于子宫癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、EPHB2、FOLR1、ALPPL2、MUC16和EFNA4；
o)存在于宫颈癌/子宫内膜癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自LY6K、PTK7、MUC16、LYPD3、EFNA4和MUC1；以及
p)存在于乳腺癌上的抗原，其中所述抗原任选地选自HER2、TROP2、LIV-1、CDH3(p-钙粘素)、MUC1、唾液酸-表位CA6、PTK7、GPNMB、LAMP-1、LRRC15、ADAM12、EPHA2、TNC、LYPD3、EFNA4和CLDN6。
226.如权利要求220-225中任一项所述的方法，其中所述抗体是抗HER2抗体。
227.如权利要求226所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含分别为SEQ ID NO:1-6的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
228.如权利要求227所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:7的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:8的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
229.如权利要求226或权利要求227所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列或由其组成。
230.如权利要求227-229中任一项所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:9的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:10的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
231.如权利要求226或权利要求227所述的方法，其中所述抗HER2抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列或由其组成。
232.如权利要求220-225中任一项所述的方法，其中所述抗体是抗粘连蛋白-4抗体。
233.如权利要求232所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含分别为SEQ ID NO:11-13的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3，以及SEQ ID NO:14或15的轻链(LC)-CDR1、SEQID NO:16的LC-CDR2和SEQ ID NO:17的LC-CDR3。
234.如权利要求233所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:18的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:19或20的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
235.如权利要求232或权利要求233所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:19或20的氨基酸序列或者由其组成。
236.如权利要求233-235中任一项所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:21的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:22或23的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
237.如权利要求232或权利要求233所述的方法，其中所述抗粘连蛋白-4抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:22或23的氨基酸序列或者由其组成。
238.如权利要求220-225中任一项所述的方法，其中所述抗体是抗ASGR1抗体。
239.如权利要求238所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含SEQ ID NO:24或25的重链(HC)-CDR1，SEQ ID NO:26、27或28的HC-CDR2，SEQ ID NO:29或30的HC-CDR3，SEQ ID NO:31或32的轻链(LC)-CDR1，SEQ ID NO:33、34、35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:37或38的LC-CDR3。
240.如权利要求239所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含(a)SEQ ID NO:24的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:26的HC-CDR2、SEQ ID NO:29的HC-CDR3、SEQ ID NO:31的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:33或34的LC-CDR2和SEQ ID NO:37的LC-CDR3；或(b)SEQ ID NO:25的重链(HC)-CDR1、SEQ ID NO:27或28的HC-CDR2、SEQ ID NO:30的HC-CDR3、SEQ ID NO:32的轻链(LC)-CDR1、SEQ ID NO:35或36的LC-CDR2和SEQ ID NO:38的LC-CDR3。
241.如权利要求239或权利要求240所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:39的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQID NO:42或43的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
242.如权利要求239或权利要求240所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:40或41的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:44或45的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
243.如权利要求238-240中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:42或43的氨基酸序列或者由其组成。
244.如权利要求238-240中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:40或41的氨基酸序列或者由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:44或45的氨基酸序列或者由其组成。
245.如权利要求239-241和243中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:46的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:49或50的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
246.如权利要求238-240中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:49或50的氨基酸序列或者由其组成。
247.如权利要求239-240、242和244中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:47或48的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:51或52的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
248.如权利要求240-242中任一项所述的方法，其中所述抗ASGR1抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:47或48的氨基酸序列或者由其组成，所述轻链包含SEQ IDNO:51或52的氨基酸序列或者由其组成。
249.如权利要求220-225中任一项所述的方法，其中所述抗体是抗间皮素抗体。
250.如权利要求249所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含分别为SEQ ID NO:53-58的重链(HC)-CDR1、HC-CDR2、HC-CDR3、轻链(LC)-CDR1、LC-CDR2和LC-CDR3。
251.如权利要求250所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区(VH)具有与SEQ ID NO:59的VH氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区(VL)具有与SEQ ID NO:60的VL氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
252.如权利要求249或权利要求250所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列或由其组成，所述VL包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列或由其组成。
253.如权利要求250-252中任一项所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO:70的重链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列；以及所述轻链包含与SEQ ID NO:71的轻链氨基酸序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或100％同一性的氨基酸序列。
254.如权利要求249或权利要求250所述的方法，其中所述抗间皮素抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:70的氨基酸序列或由其组成，所述轻链包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列或由其组成。
255.如权利要求226所述的方法，其中所述抗体是帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗，或者包含帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、赛妥珠单抗或拉迪拉珠单抗的抗原结合片段。
256.如权利要求196-255中任一项所述的方法，其中所述化合物是髓样激动剂。
257.如权利要求196-256中任一项所述的方法，其中所述化合物是TLR8激动剂。
258.如权利要求196-257中任一项所述的方法，其中所述化合物包含以下结构：
Figure FDA0003569925320000651
其中所述结构在除了-NH2之外的任何位置处被任选取代。
259.如权利要求196-258中任一项所述的方法，其中所述缀合物由式(I)表示：
Figure FDA0003569925320000652
其中：
A是所述多肽，
L是接头；
Dx是所述化合物；
n选自1至20；以及
z选自1至20。
260.如权利要求259所述的方法，其中n是1并且z是1至8。
261.如权利要求196-258中任一项所述的方法，其中所述缀合物包含通过接头与所述多肽连接的化合物，其中所述化合物和所述接头在一起是式(IVB)的化合物；或者如权利要求259或权利要求260所述的方法，其中L和Dx在一起是式(IVB)的化合物：
Figure FDA0003569925320000661
其中：
L12选自-X3-、-X3-C1-6亚烷基-X3-、-X3-C2-6亚烯基-X3-和-X3-C2-6亚炔基-X3-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R12的一个或多个取代基取代；
L22独立地选自-X4-、-X4-C1-6亚烷基-X4-、-X4-C2-6亚烯基-X4-和-X4-C2-6亚炔基-X4-，其中的每一个在亚烷基、亚烯基或亚炔基上任选地被独立地选自R10的一个或多个取代基取代；
X3和X4在每次出现时独立地选自键、-O-、-S-、-N(R10)-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)N(R10)-、-C(O)N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-N(R10)C(O)N(R10)-、-N(R10)C(O)O-、-OC(O)N(R10)-、-C(NR10)-、-N(R10)C(NR10)-、-C(NR10)N(R10)-、-N(R10)C(NR10)N(R10)-、-S(O)2-、-OS(O)-、-S(O)O-、-S(O)-、-OS(O)2-、-S(O)2O-、-N(R10)S(O)2-、-S(O)2N(R10)-、-N(R10)S(O)-、-S(O)N(R10)-、-N(R10)S(O)2N(R10)-和-N(R10)S(O)N(R10)-；
R1和R2各自是氢；
R4和R8独立地选自：-OR10、-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-S(O)R10和-S(O)2R10；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地结合至L3并且其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及C3-12碳环和3至12元杂环，其中R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地结合至L3并且R4和R8中的每个C3-12碳环和3至12元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
R10在每次出现时独立地选自L3、氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L3是接头部分，其中存在至少一次出现的L3；
R12在每次出现时独立地选自卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-10碳环和3至10元杂环；以及C3-10碳环和3至10元杂环，其中R12中的每个C3-10碳环和3至10元杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-S(O)R10、-S(O)2R10、-P(O)(OR10)2、-OP(O)(OR10)2、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基；以及
其中苯并氮杂
Figure FDA0003569925320000682
核上的任何可取代的碳任选地被独立地选自R12的取代基取代，或者单个碳原子上的两个取代基结合以形成3至7元碳环，
R20、R21、R22和R23独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；以及
R24和R25独立地选自氢、卤素、-OR10、-SR10、-N(R10)2、-S(O)R10、-S(O)2R10、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；或R24和R25在一起形成任选取代的饱和C3-7碳环。
262.如权利要求196-258中任一项所述的方法，其中所述缀合物包含通过接头与所述多肽连接的化合物，其中所述化合物和所述接头在一起是式(IVC)的化合物；或者如权利要求259-261中任一项所述的方法，其中所述化合物和所述接头在一起或者L和Dx在一起是式(IVC)的化合物：
Figure FDA0003569925320000681
其中：
R1和R2各自是氢；
L22是-C(O)-；
R4是-N(R10)2；
R10在每次出现时独立地选自氢、-NH2、-C(O)OCH2C6H5；以及C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-CN、-NO2、-NH2、＝O、＝S、-C(O)OCH2C6H5、-NHC(O)OCH2C6H5、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-12碳环、3至12元杂环和卤代烷基；
L12是-C(O)N(R10)-*，其中*表示L12结合至R8的地方；
R8是结合至接头部分L3的任选取代的稠合5-5、稠合5-6或稠合6-6双环杂环，
并且其中任选的取代基在每次出现时独立地选自：
卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)和-CN；
C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C3-12碳环和3至12元杂环；以及
C3-12碳环和3至12元杂环，其中的每一个任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、-OR10、-SR10、-C(O)N(R10)2、-N(R10)C(O)R10、-N(R10)C(O)N(R10)2、-N(R10)2、-C(O)R10、-C(O)OR10、-OC(O)R10、-NO2、＝O、＝S、＝N(R10)、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
263.如权利要求261或权利要求262所述的方法，其中：
R4是-N(C1-4烷基)2并且L12是-C(O)N(H)-*。
264.如权利要求261或权利要求262所述的方法，其中：
R4是
Figure FDA0003569925320000691
265.如权利要求259-264中任一项所述的方法，其中L和Dx在一起具有选自以下及其盐的结构：
Figure FDA0003569925320000701
Figure FDA0003569925320000711
Figure FDA0003569925320000721
Figure FDA0003569925320000731
其中所述RX*是结合至多肽的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure FDA0003569925320000732
表示与所述多肽的残基的连接点。
266.如权利要求265所述的方法，其中L和Dx在一起具有选自以下及其盐的结构：
Figure FDA0003569925320000733
Figure FDA0003569925320000741
其中所述RX*是结合至多肽的残基的键、琥珀酰亚胺部分或水解的琥珀酰亚胺部分，
其中RX*上的
Figure FDA0003569925320000742
表示与所述多肽的残基的连接点。
267.如权利要求259所述的方法，其中所述缀合物经配制以形成水性制剂，所述水性制剂包含：
a)缀合物，其总浓度范围为约50mg/mL至约100mg/mL并且由式(I)表示：
Figure FDA0003569925320000751
其中A是抗体；n是1；z范围为2至8；以及L是接头并且Dx是苯并氮杂
Figure FDA0003569925320000753
化合物，其中L和Dx在一起具有以下的结构：
Figure FDA0003569925320000752
其中RX*包含水解的琥珀酰胺部分并且结合至所述抗体的半胱氨酸残基；
b)缓冲液，其由组氨酸和天冬氨酸组成，总浓度范围为约15mM至约25mM；
c)冻干保护剂，其由蔗糖组成，总浓度范围为约7％至约8％；以及
d)表面活性剂，其由聚山梨醇酯80组成，总浓度范围为约0.01％至约0.03％。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018009916A1 (en) 2016-07-07 2018-01-11 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Antibody adjuvant conjugates
WO2020190725A1 (en) 2019-03-15 2020-09-24 Bolt Biotherapeutics, Inc. Immunoconjugates targeting her2
WO2021168274A1 (en) * 2020-02-21 2021-08-26 Silverback Therapeutics, Inc. Nectin-4 antibody conjugates and uses thereof
AU2021300362A1 (en) 2020-07-01 2023-02-23 ARS Pharmaceuticals, Inc. Anti-ASGR1 antibody conjugates and uses thereof
AU2022328753A1 (en) * 2021-08-20 2024-01-25 Tallac Therapeutics, Inc. Nectin-4 antibodies and conjugates

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106163567A (zh) * 2013-11-21 2016-11-23 根马布股份公司 抗体‑药物缀合物冻干制剂
US20180258048A1 (en) * 2017-03-15 2018-09-13 Silverback Therapeutics, Inc. Benzazepine compounds, conjugates, and uses thereof

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040141983A1 (en) 1999-03-15 2004-07-22 Protein Design Labs, Inc. Compositions against cancer antigen LIV-1 and uses thereof
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
DK1817340T3 (da) 2004-11-12 2012-08-13 Xencor Inc Fc-varianter med ændret binding til fcrn
CN104356236B (zh) 2005-07-01 2020-07-03 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
TWI382019B (zh) 2005-08-19 2013-01-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之胺基二氮雜呯
TWI404537B (zh) 2005-08-19 2013-08-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之８-經取代苯并氮雜呯
CA2638811A1 (en) * 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
EP3692988A3 (en) * 2008-03-18 2020-10-14 Genentech, Inc. Combinations of an anti-her2 antibody-drug conjugate and 5-fu, anti-vegf antibody, carboplatin or abt-869 and methods of use
JP5600104B2 (ja) 2008-08-01 2014-10-01 ベンティアールエックス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト処方物およびその使用
CN105669553A (zh) 2009-08-18 2016-06-15 文蒂雷克斯药品公司 作为toll样受体调节剂的取代的苯并氮杂*
EP2467380B1 (en) 2009-08-18 2016-11-30 Ventirx Pharmaceuticals, Inc. Substituted benzoazepines as toll-like receptor modulators
CA3188287A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Antibodies to muc16 and methods of use thereof
RU2587061C2 (ru) 2010-10-01 2016-06-10 Вентиркс Фармасьютикалз, Инк. Способы лечения аллергических заболеваний
SG10201601089UA (en) 2010-10-01 2016-03-30 Ventirx Pharmaceuticals Inc Therapeutic Use Of A TLR Agonist And Combination Therapy
WO2012078688A2 (en) 2010-12-06 2012-06-14 Seattle Genetics, Inc. Humanized antibodies to liv-1 and use of same to treat cancer
MX348935B (es) 2011-01-12 2017-07-03 Ventirx Pharmaceuticals Inc Benzoazepinas sustituidas como moduladores de receptores tipo toll.
MX346387B (es) 2011-01-12 2017-03-02 Ventirx Pharmaceuticals Inc Benzoazepinas sustituidas como moduladores de receptores tipo toll.
EP3590965A1 (en) 2011-03-29 2020-01-08 Roche Glycart AG Antibody fc variants
GB201117428D0 (en) 2011-10-07 2011-11-23 Bicycle Therapeutics Ltd Structured polypeptides with sarcosine linkers
CN103906865B (zh) 2011-10-07 2017-12-08 拜斯科医疗有限公司 结构化多肽特异性的调控
GB201122325D0 (en) * 2011-12-23 2012-02-01 Cytoguide As Novel formulations
US9504756B2 (en) 2012-05-15 2016-11-29 Seattle Genetics, Inc. Self-stabilizing linker conjugates
US20140274759A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Bicycle Therapeutics Limited Modification of polypeptides
AU2014369019B2 (en) 2013-12-19 2020-09-17 Seagen Inc. Methylene carbamate linkers for use with targeted-drug conjugates
EA201791050A1 (ru) * 2014-11-14 2017-09-29 Новартис Аг Конъюгаты антител и лекарственных средств
EP3233835B1 (en) 2014-12-18 2019-01-23 F.Hoffmann-La Roche Ag Benzazepine sulfonamide compounds
CR20170394A (es) * 2015-03-06 2017-09-25 Hoffmann La Roche Compuestos de dicarboxamida de benzazepinas
CN108055842B (zh) 2015-09-17 2021-06-29 豪夫迈·罗氏有限公司 亚磺酰基苯基或磺亚胺酰基苯基苯并氮杂䓬
RS65120B1 (sr) * 2015-11-25 2024-02-29 Immunogen Inc Farmaceutske formulacije i postupci za njihovu upotrebu
AU2016365117A1 (en) 2015-11-30 2018-05-31 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-huLRRC15 antibody drug conjugates and methods for their use
CN106943597A (zh) 2016-01-07 2017-07-14 博笛生物科技（北京）有限公司 用于治疗肿瘤的抗-egfr组合
CA3023154C (en) 2016-05-06 2021-01-12 Shanghai De Novo Pharmatech Co., Ltd. Benzazepine derivative, preparation method, pharmaceutical composition and use thereof
WO2017202703A1 (en) 2016-05-23 2017-11-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Benzazepine dicarboxamide compounds with secondary amide function
JP6918838B2 (ja) 2016-05-23 2021-08-11 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 第三級アミド基を有するベンズアゼピンジカルボキサミド化合物
WO2017216054A1 (en) 2016-06-12 2017-12-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Dihydropyrimidinyl benzazepine carboxamide compounds
WO2018140831A2 (en) * 2017-01-27 2018-08-02 Silverback Therapeutics, Inc. Tumor targeting conjugates and methods of use thereof
WO2019084060A1 (en) * 2017-10-24 2019-05-02 Silverback Therapeutics, Inc. CONJUGATES AND METHODS OF USE FOR THE SELECTIVE DELIVERY OF IMMUNOMODULATORY AGENTS
WO2019118884A1 (en) * 2017-12-15 2019-06-20 Silverback Therapeutics, Inc. Antibody construct-drug conjugate for the treatment of hepatitis
EP3849615A1 (en) * 2018-09-12 2021-07-21 Silverback Therapeutics, Inc. Compositions for the treatment of disease with immune stimulatory conjugates
AU2019337654A1 (en) * 2018-09-12 2021-04-08 Silverback Therapeutics, Inc. Substituted benzazepine compounds, conjugates, and uses thereof
WO2020056194A1 (en) * 2018-09-12 2020-03-19 Silverback Therapeutics, Inc. Benzazepine compounds, conjugates, and uses thereof
WO2021168274A1 (en) * 2020-02-21 2021-08-26 Silverback Therapeutics, Inc. Nectin-4 antibody conjugates and uses thereof

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106163567A (zh) * 2013-11-21 2016-11-23 根马布股份公司 抗体‑药物缀合物冻干制剂
US20180258048A1 (en) * 2017-03-15 2018-09-13 Silverback Therapeutics, Inc. Benzazepine compounds, conjugates, and uses thereof

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