ES2534652T3 - Anticuerpos contra la glicoproteína VI para el receptor de colágeno de plaquetas recombinante - Google Patents
Anticuerpos contra la glicoproteína VI para el receptor de colágeno de plaquetas recombinante Download PDFInfo
- Publication number
- ES2534652T3 ES2534652T3 ES11001216.8T ES11001216T ES2534652T3 ES 2534652 T3 ES2534652 T3 ES 2534652T3 ES 11001216 T ES11001216 T ES 11001216T ES 2534652 T3 ES2534652 T3 ES 2534652T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- gpvi
- antiserum
- collagen
- platelet
- sequence
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 title description 7
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 title description 7
- 101000777658 Homo sapiens Platelet glycoprotein 4 Proteins 0.000 title description 4
- 102100031574 Platelet glycoprotein 4 Human genes 0.000 title description 4
- 102100038394 Platelet glycoprotein VI Human genes 0.000 claims abstract 7
- 101710194982 Platelet glycoprotein VI Proteins 0.000 claims abstract 7
- 108010089485 convulxin Proteins 0.000 claims description 11
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 8
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 8
- 108010046516 Wheat Germ Agglutinins Proteins 0.000 claims description 5
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 claims description 3
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 claims description 3
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 claims description 3
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 claims description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 2
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 51
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 37
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 34
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 34
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 15
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 15
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 14
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 10
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 206010050245 Autoimmune thrombocytopenia Diseases 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 8
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 230000010118 platelet activation Effects 0.000 description 7
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 5
- -1 acetic Chemical class 0.000 description 5
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- GCRLIVCNZWDCDE-SJXGUFTOSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]nonanamide Chemical compound CCCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO GCRLIVCNZWDCDE-SJXGUFTOSA-N 0.000 description 5
- SBWGZAXBCCNRTM-CTHBEMJXSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]octanamide Chemical compound CCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO SBWGZAXBCCNRTM-CTHBEMJXSA-N 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 102100037872 Intercellular adhesion molecule 2 Human genes 0.000 description 4
- 101710148794 Intercellular adhesion molecule 2 Proteins 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=CC=C1OCCO IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010048623 Collagen Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000009268 Collagen Receptors Human genes 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000015795 Platelet Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108010010336 Platelet Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920004929 Triton X-114 Polymers 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- HVIBGVJOBJJPFB-OFQRNFBNSA-N Gly-Pro-Hyp Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)C(O)CC1 HVIBGVJOBJJPFB-OFQRNFBNSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 2
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 101000702488 Rattus norvegicus High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 108010017349 glycyl-prolyl-hydroxyproline Proteins 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 102000027596 immune receptors Human genes 0.000 description 2
- 108091008915 immune receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091023043 Alu Element Proteins 0.000 description 1
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000002110 C2 domains Human genes 0.000 description 1
- 108050009459 C2 domains Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000271538 Crotalus durissus Species 0.000 description 1
- 241000271533 Crotalus durissus terrificus Species 0.000 description 1
- 108020001019 DNA Primers Proteins 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N Dibenzylamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCC1=CC=CC=C1 BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007625 Hirudins Human genes 0.000 description 1
- 108010007267 Hirudins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 102000010648 Natural Killer Cell Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010077854 Natural Killer Cell Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 101150044441 PECAM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 108010003541 Platelet Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 102000002727 Protein Tyrosine Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000001332 SRC Human genes 0.000 description 1
- 108060006706 SRC Proteins 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 102000007365 Sialoglycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010032838 Sialoglycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 101000712605 Theromyzon tessulatum Theromin Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 229940122388 Thrombin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710099833 Venom protein Proteins 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 108010058966 bacteriophage T7 induced DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014759 blood platelet disease Diseases 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 238000007887 coronary angioplasty Methods 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- UYMKPFRHYYNDTL-UHFFFAOYSA-N ethenamine Chemical compound NC=C UYMKPFRHYYNDTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 108010005808 hementin Proteins 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 1
- WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N hirudin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(OS(O)(=O)=O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2)=O)CSSC1)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)O)CSSC1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N 0.000 description 1
- 229940006607 hirudin Drugs 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012133 immunoprecipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000011049 pearl Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 230000018127 platelet degranulation Effects 0.000 description 1
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000003805 procoagulant Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 108020000494 protein-tyrosine phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 108091006084 receptor activators Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 150000003870 salicylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M thiazole orange Chemical compound CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1.C1=CC=C2C(C=C3N(C4=CC=CC=C4S3)C)=CC=[N+](C)C2=C1 ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003868 thrombin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003628 tricarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000216 vascular lesion Toxicity 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 230000037314 wound repair Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/54—F(ab')2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
- G01N2015/018—Platelets
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4728—Details alpha-Glycoproteins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/22—Haematology
- G01N2800/222—Platelet disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
Abstract
Antisuero anti-GPVI policlonal, Fab anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, o F(ab')2 anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO:3.
Description
Anticuerpos contra la glicoproteína VI para el receptor de colágeno de plaquetas recombinante
La invención se refiere a la glicoproteína VI (GPVI), a su aislamiento, purificación, y a métodos para la producción recombinante. Especialmente, la invención se refiere al uso de GPVI, preferiblemente GPVI recombinante, en el
5 tratamiento de trastornos y sucesos patológicos correlacionados directa o indirectamente con trastornos de la coagulación sanguínea, tales como enfermedades trombóticas y cardiovasculares. La proteína recombinante extracelular también se puede usar para establecer ensayos de cribado para encontrar inhibidores potenciales de la GPVI unida a la membrana con el fin de inhibir la interacción de los trombocitos y el colágeno.
La glicoproteína VI es una glicoproteína de la membrana plaquetaria de 62/65 kDa (no reducida/reducida
10 respectivamente), que forma un complejo junto con la subunidad común Fc. La subunidad GPVI contiene el sitio de unión con el colágeno, y la subunidad Fc es responsable de la señalización. El complejo forma uno de los principales receptores de colágeno en la superficie de las plaquetas, crítico para la activación plaquetaria en respuesta al colágeno. La secuencia de reconocimiento en el colágeno consiste en secuencias de (GlyProHyp)n’. Se conocen pacientes de Japón que tienen una deficiencia genética de GPVI. Tienen leves problemas de hemorragia, y
15 sus plaquetas responden sólo débilmente al colágeno, presumiblemente mediante otros receptores. Se ha aprendido mucho acerca de las cascadas de señalización que se originan en la GPVI, las cuales se parecen mucho a las de receptores inmunitarios, incluyendo receptores de linfocitos T, receptores de células B y receptores de células asesinas naturales. Estas cascadas implican la familia src de tirosina cinasas tales como Fyn y Lyn, así como p72SYK y muchas otras tirosina cinasas y fosfatasas, y proteínas adaptadoras tales como LAT. Una diana principal de estas
20 cascadas es la activación de la fosfolipasa Cy2 que desdobla fosfolípidos para dar los segundos mensajeros diacilglicerol e IP3. Se piensa que la GPVI está implicada en la activación de la integrina plaquetaria 2B1, que tiene un papel principal en la adhesión de las plaquetas a la pared de los vasos dañados. Los ratones con la subunidad Fcy “eliminada genéticamente” tienen plaquetas que aún muestran respuestas al colágeno, implicando que el estado de reposo de 2B1 también puede ser regulado por el complejo GPVI/Fcy.
25 La GPVI del receptor de colágeno plaquetario está estrechamente relacionada con los receptores activadores asesinos naturales de la familia p58KAR.
La adhesión y activación de plaquetas en reposo, circulantes, en un sitio de lesión vascular es la primera etapa en un proceso que conduce a la formación de un trombo, que se convierte en un tapón hemostático. El colágeno es uno de los componentes principales de la pared de los vasos, responsable de la activación de las plaquetas. Existen 30 muchos tipos de colágeno, y siete de éstos se encuentran en las capas subendoteliales. Se han identificado en las plaquetas varios receptores diferentes para el colágeno, pero se considera ahora que los principales son la integrina 2B1 y la GPVI no integrina. Aunque la 2B1 está bien caracterizada y ambas subunidades se clonaron y secuenciaron hace varios años, la estructura de la GPVI ha permanecido difícil de averiguar, aunque se han identificado varios rasgos. Se determinó, hace aproximadamente veinte años, que la GPVI es una glicoproteína 35 plaquetaria importante con una masa molecular en el intervalo de 60-65 kDa y un pl ácido. Su papel como receptor de colágeno putativo fue establecido después de la identificación de un paciente en Japón con un trastorno de hemorragia leve cuyas plaquetas mostraban un defecto específico de respuesta al colágeno y carecían de este receptor. Este paciente había desarrollado también autoanticuerpos para el receptor deficiente, y se usaron éstos para caracterizar la molécula adicionalmente. Más recientemente, se estableció que la GPVI está asociada de 40 manera no covalente con la subunidad común Fcy, la cual actúa como la parte señalizadora del complejo. También se demostró que la secuencia de reconocimiento en el colágeno para la GPVI es un triplete Gly-Pro-Hyp repetido dentro de la estructura helicoidal triple del colágeno, y que se podrían usar péptidos sintéticos basados en esta estructura como agonistas específicos dirigidos a la GPVI. Se mostró que el complejo GPVI/Fcy señaliza hacia el interior de las plaquetas mediante un mecanismo similar a un receptor inmunitario, que implica la activación de 45 p72SYK y que conduce mediante una cascada de interacciones cinasa/fosfatasa/proteína adaptadora a la activación de PLCy2 y por tanto a la liberación de gránulos y agregación plaquetaria. Una etapa adicional en la caracterización de esta molécula fue la demostración de que la lectina de tipo C de serpiente, convulxina, de la Serpiente de Cascabel Tropical, Crotalus durissus terrificus, fue capaz de activar plaquetas agrupando GPVI mediante una interacción multimérica. Se mostró que la convulxina se une de manera específica a la GPVI, proporcionando un
50 método para la purificación de este receptor junto con los enfoques establecidos.
Sugiyama et al. (Blood 69 (1987) 1712-1720) describen un nuevo factor agregador de plaquetas. Este factor se ha encontrado en un paciente con trombocitopenia autoinmunitaria. El factor es el IgG del paciente o sus fragmentos Fab o F(ab)2. Los fragmentos F(ab)2 indujeron agregación irreversible en plasma normal rico en plaquetas. Además, los fragmentos Fab inhibieron específicamente la agregación inducida por colágeno y por el IgG del paciente. El
55 componente principal de un inmunoprecipitado obtenido con el IgG del paciente a partir de proteínas de membrana radiomarcadas de extracto plaquetario normal tuvo un peso molecular de 62 kDa.
Sugiyama et al. (International Journal of Hematology 58 (1993) 99-104) examinaron el papel funcional de P62, el antígeno reconocido por el fragmento Fab de IgG aislado del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria. Se describe que la plaqueta del paciente mostró adherencia normal a colágeno, y que el fragmento Fab inhibió la
60 adhesión plaquetaria normal a colágeno de una manera dependiente de la dosis.
Ichinohe et al. (The Journal of Biological Chemistry 270 (1995) 28029-28036) examinaron el papel de la proteína GPVI usando los fragmentos F(ab)2 del IgG del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria. El acoplamiento de GPVI se acopla a la activación de c-Src y Syk, insensible a cAMP, acompañado de fosforilación de tirosina de numerosos sustratos, incluyendo fosfolipasa C-2, de una manera similar a la estimulación de colágeno.
5 Gibbins et al. (FEBS Letters 413 (1997) 255-259) describen que GPVI es el receptor de colágeno en plaquetas que acopla la estimulación de plaquetas por colágeno a la fosforilación tirosínica de la cadena del receptor de Fc. Los autores usan fragmentos F(ab)2 anti-GPVI del IgG del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria.
Jandrot-Perrus et al. (The Journal of Biological Chemistry 272 (1997) 27035-27041) describen la adhesión y activación de plaquetas humanas inducidas por convulxina. La adhesión y activación implica GPVI e integrina
10 alfa2beta1. La exocitosis y agregación plaquetarias inducidas por convulxina se inhibieron por los fragmentos Fab del IgG del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria.
Ezumi et al. (The Journal of Experimental Medicine 188 (1998) 267-276) investigaron la implicación de la familia de Src en las señales proximales a través del complejo GPVI-FcR usando convulxina y fragmentos F(ab)2 anti-GPVI del IgG del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria. Los resultados indicaron que la familia de Src desempeña
15 un papel crítico en la activación plaquetaria vía el complejo del receptor de colágeno GPVI-FcRy.
Heemskerk et al. (Thrombosis and Haemostasis, Schattauer GmbH 81 (1999) 782-792) describen la función de GPVI e integrina alfa2beta1 en la respuesta procoagulante de plaquetas adherentes a colágeno individuales. Los autores usan IgG anti-GPVI y los fragmentos Fab correspondientes del IgG del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria.
20 Ishibashi et al. (International Journal of Hematoloy 62 (1995) 107-115) identificaron la molécula 2 de adhesión intercelular (ICAM-2) usando el anticuerpo del paciente con trombocitopenia autoinmunitaria en una técnica de inmunoprecipitación mejorada. La molécula ICAM-2 tiene un peso molecular de alrededor de 62 kDa.
El documento EP 0.896.002 se refiere a proteínas quiméricas que consisten en una integrina y una inmunoglobulina, a sus complejos heterodímeros, a un procedimiento de producción de las mismas y a sus aplicaciones como 25 fármacos y reactivos. Además, el documento EP 0.896.002 se refiere a la aplicación médica de la proteína quimérica integrina-inmunoglobulina como sustituto de las plaquetas. Las integrinas son moléculas que pertenecen a la superfamilia de integrinas. Las cadenas alfa incluyen 15 cadenas alfa, entre otras, alfa1. Las cadenas beta incluyen ocho cadenas beta, entre otras, beta1. Se encontró que un complejo heterodímero de proteína quimérica integrina alfa2beta1-inmunoglobulina tiene capacidad de unión a la matriz extracelular. Por lo tanto, se puede usar como
30 agente terapéutico o preventivo frente a la tendencia hemorrágica congénita y adquirida debido a anormalidad plaquetaria, y también ampliamente como sustituto de transfusión de plaquetas. Además, el complejo heterodímero de proteína quimérica integrina alfa2beta1-inmunoglobulina puede ser un agente terapéutico o preventivo para condiciones de enfermedades en las que el trastorno de células endoteliales vasculares es un problema.
Por tanto, está claro a partir de la técnica anterior que la GPVI parece ser un compuesto muy interesante en muchos 35 campos terapéuticos, sobre todo concernientes a aplicaciones que están relacionadas, hablando en general, directa
o indirectamente, con sucesos de coagulación sanguínea que dependen de la interacción colágeno -plaqueta. Fue, por tanto, una meta de la presente invención proporcionar GPVI en una forma recombinante y mostrar su eficacia como diana terapéutica directa o como herramienta para el cribado de compuestos cortos, especialmente compuestos sintetizados o sintetizables químicamente que tienen la capacidad de inhibir o bloquear la interacción
40 natural plaqueta-colágeno.
Fue otra meta de la presente invención proporcionar anticuerpos anti-GPVI.
En vista de esto, la presente invención se refiere a un antisuero anti-GPVI policlonal, a un Fab anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, o a un F(ab’)2 anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO:3.
45 La presente invención también se refiere a un antisuero anti-GPVI policlonal, a un Fab anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, o a un F(ab’)2 anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI como se describe anteriormente, en el que GPVI se puede obtener a partir de plaquetas usando aglutinina de germen de trigo y convulxina y aplicando electroforesis en gel sobre poliacrilamida de alrededor de 8,5%.
La presente invención se refiere además a un antisuero anti-GPVI policlonal, a un Fab anti-GPVI obtenible a partir
50 de dicho antisuero anti-GPVI, o a un F(ab’)2 anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI como se describe anteriormente, en el que el antisuero anti-GPVI policlonal se genera en conejos.
Además, la presente invención se refiere a un fragmento Fab anti-GPVI de anticuerpos monoclonales de ratón humanizados frente a GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO: 3.
La presente invención también se refiere a anticuerpos monoclonales o policlonales que reconocen la región N55 terminal de GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO: 3.
La invención describe porciones o fragmentos de la proteína GPVI que han mantenido su actividad biológica, la cual es la unión al colágeno.
La invención tuvo éxito en la purificación de cantidades adecuadas de GPVI para su caracterización preliminar y para la secuenciación peptídica. Las secuencias se usaron para diseñar cebadores para PCR para identificar una
5 secuencia positiva en una librería de ADN. Esta secuencia de ADN se usó después como sonda para aislar una secuencia de ADNc casi completa de la librería y se obtuvo la secuencia 5’ faltante usando un método RACE a partir de una librería de ADNc de plaquetas.
La invención también tuvo éxito en mostrar el uso de GPVI recombinante como compuesto terapéuticamente aplicable que es capaz, cuando se administra a un paciente con, por ejemplo, vasos sanguíneos dañados, de unirse 10 al colágeno, impidiendo así que los trombocitos que llevan GPVI unida a la membrana se unan a dicho colágeno. El dominio extracelular soluble recombinante de la GPVI contiene el sitio de unión con el colágeno y puede impedir la activación de las plaquetas por el colágeno. Podría, por lo tanto, ser aplicable al tratamiento de estados de enfermedad que impliquen una activación incrementada de las plaquetas con el colágeno, tal como la rotura de la placa aterosclerótica, en enfermedades tales como angina inestable o durante tratamiento quirúrgico, tal como la 15 Angioplastia Coronaria Transluminal Percutánea (PTCA), en la que las arterias son reabiertas por el inflado de un catéter de globo causando un daño considerable a la pared vascular y mucha activación plaquetaria, y dando como resultado a menudo el cierre nuevamente del vaso posteriormente. La ventaja de los fragmentos de GPVI recombinante en comparación con los métodos de tratamiento actuales es que actúan en una etapa más temprana impidiendo o reduciendo la activación plaquetaria en vez de suprimir los sucesos después de la activación 20 plaquetaria, tales como la agregación mediante antagonistas de GPIIb-IIIa. Así, se liberan cantidades más pequeñas de los contenidos de los gránulos plaquetarios, incluyendo factores de crecimiento y quimiocinas, que están implicados no sólo en la reparación de heridas sino en la remodelación de la pared vascular por migración del músculo liso y en la atracción de células fagocíticas tales como monocitos, que se sabe que contribuyen a la aterosclerosis. Se podría usar el fragmento Fab de anticuerpos monoclonales de ratón humanizados contra la GPVI
25 con un efecto similar para bloquear la GPVI en la superficie de las plaquetas con similares aplicaciones que las anteriores.
La GPVI recombinante como se describe aquí también se puede usar en un ensayo de unión al colágeno para cribar moléculas pequeñas (en librerías combinatorias por ejemplo) capaces de inhibir esta interacción y que se pueden usar para desarrollar compuestos terapéuticos que son inhibidores de la interacción colágeno-plaqueta. Mediante 30 una derivatización adecuada, estos compuestos se hacen disponibles por vía oral. De nuevo, el principal objetivo es preparar compuestos que reduzcan las interacciones GPVI-colágeno y por tanto la activación de las plaquetas en situaciones donde las plaquetas entran en contacto con el colágeno. La tecnología de cribado como tal usada en esta invención está bien establecida en la técnica anterior. Mediante tales ensayos de cribado, la invención permite encontrar y desarrollar nuevas dianas que pueden inhibir la GPVI natural unida a la membrana en la superficie de los
35 trombocitos como antagonista del colágeno. Tales dianas, las cuales pueden ser moléculas químicas cortas, pueden ser entonces la base para invenciones posteriores.
Otra aplicación principal de la GPVI y reactivos que reconocen dominios específicos de la GPVI es como marcadores de la edad y funcionalidad de las plaquetas. Se piensa generalmente que las plaquetas jóvenes son más activas y funcionales que las más viejas. Las plaquetas jóvenes se unen a y son activadas por la lectina de tipo 40 C de veneno de serpiente convulxina, que es específica para la GPVI, y según envejecen disminuyen tanto la unión como el grado de activación. Esto puede ser debido a cambios bien proteolíticos o bien conformacionales en la GPVI
o su asociación con Fcy debido a la activación de las plaquetas o un daño en la circulación. Este puede ser un parámetro útil para medir el perfil de edad y función de las plaquetas en pacientes, así como en personas normales, durante controles médicos. El perfil de edad de las plaquetas cambia en muchas enfermedades que afectan a la 45 médula ósea o al sistema inmunitario, y podría ser un criterio de diagnóstico importante si estuvieran disponibles métodos mejores para su determinación. Por ejemplo, los pacientes con enfermedades que implican un recambio de plaquetas incrementado mostrarán más plaquetas jóvenes, mientras que los pacientes en tratamiento de quimioterapia o radiación mostrarán una población que envejece continuamente. De este modo, se puede usar tal perfil de edad para una monitorización precisa del tratamiento. En una población sana normal se sabe muy poco 50 acerca de la distribución del perfil de edad y su papel como pronosticador de cambios en la salud. En la actualidad se usa el naranja de tiazol para detectar plaquetas reticuladas jóvenes que contienen ARNm. Este ARNm se descompone pronto, restringiendo el método solamente a las plaquetas más jóvenes. Los reactivos que se podrían usar en tal ensayo incluirían proteínas de veneno de serpiente específicas para la GPVI, tales como convulxina, o anticuerpos monoclonales o policlonales que reconozcen la región N-terminal de la GPVI, o anticuerpos 55 monoclonales que reconozcen nuevos sitios o conformaciones expuestas por proteolisis del dominio N-terminal o conformaciones específicas presentes bien en la molécula intacta y no en la envejecida o bien viceversa. Estos reactivos serían marcados con un marcador fluorescente, o junto con un segundo anticuerpo o reactivo de afinidad marcado fluorescente, y se usarían en citometría de flujo para medir el perfil de unión de las plaquetas. En una fase más tardía alternativa, se podrían adoptar técnicas de medición menos laboriosas basadas en una medición
60 automatizada de perfiles plaquetarios. Usar métodos de clasificación celular con citometría de flujo o perlas magnéticas, debe ser posible aislar plaquetas jóvenes y viejas para examinar los factores implicados en la eliminación de las plaquetas viejas de la circulación.
La presente invención describe un ADN que codifica la Glicoproteína VI o ss fragmentos biológicamente activos, especialmente la secuencia de la Fig. 2.
La presente invención describe además un ADN que codifica la Glicoproteína VI que comprende la secuencia de aminoácidos de la Fig. 1.
5 La presente invención describe una composición farmacéutica que comprende GPVI recombinante junto con un diluyente, vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable para ella, y su uso para la fabricación de un medicamento en el campo terapéutico de sucesos y trastornos trombóticos y cardiovasculares relacionados con interacciones plaqueta-colágeno.
La presente invención describe el uso de GPVI recombinante en una herramienta de cribado para detectar
10 inhibidores específicos de las interacciones plaqueta-colágeno. Las posibles indicaciones y aplicaciones médicas, respectivamente, son, por ejemplo, la angina de pecho inestable, la PTCA, el uso de endoprótesis vasculares en este campo, las operaciones en vasos coronarios, las operaciones generales en vasos sanguíneos, las operaciones que pueden dañar vasos sanguíneos más grandes, tales como operaciones de la articulación de la cadera. Además, están incluidas todas las indicaciones que se refieran a sucesos tromboembólicos causados por trastornos de la
15 interacción entre la pared del vaso y el sistema de coagulación con un alto riesgo de formación de trombos y bloqueo de vasos.
Como se indicó anteriormente, la proteína GPVI y los fragmentos de la misma son adecuados como compuestos farmacéuticamente eficaces en composiciones y combinaciones farmacéuticas.
Las formulaciones farmacéuticas pueden comprender opcionalmente ingredientes activos adicionales, como
20 anticoagulantes tales como hirudina o heparina, o agentes trombolíticos tales como activador del plasminógeno o hementina.
La nueva proteína, y sus fragmentos activos biológicos, respectivamente, pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con cualquier ácido orgánico o inorgánico no tóxico. Los ácidos inorgánicos son, por ejemplo, el ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico o fosfórico y sales ácidas de metales, tales como monohidrogenoortofosfato de 25 sodio e hidrogenosulfato de potasio. Los ejemplos para ácidos orgánicos son los ácidos mono-, di-y tricarboxílicos tales como acético, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, succínico, glutárico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico, benzoico, hidroxibenzoico, fenilacético, cinámico, salicílico, y ácidos sulfónicos tales como el ácido metanosulfónico. Las sales del resto de aminoácido carboxiterminal incluyen las sales no tóxicas de ácidos carboxílicos formadas con cualesquiera bases inorgánicas u orgánicas adecuadas. Estas sales incluyen, 30 por ejemplo, metales alcalinos tales como sodio y potasio, metales alcalino-térreos tales como calcio y magnesio, metales ligeros del Grupo IIIA, incluyendo aluminio, y aminas orgánicas primarias, secundarias y terciarias tales como trialquilaminas, incluyendo trietilamina, procaína, dibencilamina, 1-etenamina, N,N’-dibenciletilendiamina, dihidroabietilamina y N-alquilpiperidina. Como se usa aquí, la expresión “vehículo farmacéuticamente aceptable” significa un material de carga, diluyente o material encapsulante sólido o líquido, no tóxico, inerte, que no reacciona
35 de manera adversa con el compuesto activo o con el paciente. Se conocen bien en la técnica vehículos adecuados, preferiblemente líquidos, tales como agua estéril, disolución salina, dextrosa acuosa, disoluciones de azúcar, etanol, glicoles y aceites, incluyendo los de origen del petróleo, animal, vegetal o sintético, por ejemplo aceite de cacahuete, aceite de soja y aceite mineral.
Las formulaciones se pueden administrar como dosis unitarias que contienen los excipientes, diluyentes, adyuvantes
40 y vehículos farmacéuticamente aceptables, no tóxicos, convencionales, que son típicos para la administración parenteral.
El término “parenteral” incluye en la presente memoria técnicas de inyección e infusión subcutánea, intravenosa, intraarticular y intratraqueal. También son adecuadas otras administraciones, tales como administración oral y aplicación tópica. Las composiciones y combinaciones parenterales se administran de manera más preferible por vía
45 intravenosa, bien en una forma de bolo o bien como una fusión constante, según procedimientos conocidos. Los comprimidos y cápsulas para la administración oral contienen excipientes convencionales tales como agentes aglutinantes, cargas, diluyentes, agentes formadores de comprimidos, lubricantes, disgregrantes, y agentes humectantes. Los comprimidos se pueden revestir según métodos bien conocidos en la técnica.
Las preparaciones líquidas orales pueden estar en forma de suspensiones acuosas u oleosas, disoluciones,
50 emulsiones, jarabes o elixires, o se pueden presentar como un producto seco para su reconstitución con agua u otro vehículo adecuado antes del uso. Tales preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales, como agentes suspensores, agentes emulsionantes, vehículos no acuosos y conservantes.
Las aplicaciones tópicas pueden estar en la forma de suspensiones acuosas u oleosas, disoluciones, emulsiones, jaleas o preferiblemente pomadas en emulsión.
55 Las dosis unitarias pueden contener las cantidades requeridas diariamente de la proteína según la invención, o submúltiplos de las mismas para componer la dosis deseada. La dosis óptima terapéuticamente aceptable y la frecuencia de la dosis para un paciente dado (mamíferos, incluyendo seres humanos) dependen de una variedad de factores, tales como la actividad del material activo específico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo y vía de administración, velocidad de aclaramiento, el objeto del tratamiento, es decir, terapia o profilaxis, y la naturaleza de la enfermedad trombótica a tratar, la actividad antiplaquetaria o anticoagulante.
Por lo tanto, en composiciones y combinaciones útiles como anticoagulantes en un paciente tratado (in vivo), una
5 dosis diaria farmacéuticamente eficaz de los péptidos de esta invención está entre alrededor de 0,01 y 100 mg/kg de peso corporal, preferiblemente entre 0,1 y 10 mg/kg de peso corporal. Según la forma de aplicación, una dosis única puede contener entre 0,5 y 10 mg del inhibidor de trombina. Para conseguir un efecto anticoagulante en sangre extracorpórea, una cantidad farmacéuticamente eficaz de los péptidos inventivos está entre 0,2 y 150 mg/l, preferiblemente entre 1 mg y 20 mg/l de sangre extracorpórea.
10 Descripción detallada de la invención
Se eligieron dos secuencias de 7 aminoácidos que mostraban la degeneración mínima en el código genético para la síntesis de cebadores de ADN, con el fin de amplificar parte del ADNc de la GPVI por PCR. Como la ubicación de ambos péptidos en la proteína era totalmente desconocida, para cada uno de ellos, se prepararon dos cebadores degenerados, uno sentido y uno antisentido. Estos cebadores se usaron para amplificar una librería de médula ósea
15 humana. La combinación del cebador 5’TYA THC CNG CNA TGA ARMG 3’ sentido que codifica la secuencia PAMKRSL con el antisentido 5’TTR TAN ARN GCR AAY TGR TC 3’ que corresponde a DQFALYK amplificó un fragmento de ADN de 221 pb. Además de los péptidos seleccionados, el ADN amplificado codificó el péptido LysC/AspN DQLELVATGVFAKPSLSAQPGPAVSS, que enlaza claramente la secuencia al ADNc para la GPVI.
El cribado de 600.000 pfu de una librería de médula ósea con este fragmento de ADN de 221 pb produjo 4 pfu
20 positivas. Tres tenían insertos de 1350 pb ya fueran cortados por la enzima de restricción Sal I o por EcoR I y pertenecían a la superfamilia de IgG. El cuarto tenía un inserto de 4,6 kb por digestión con Sal I y dio dos fragmentos de 2300 pb y 1300 pb respectivamente cuando se trataron por EcoR I. Su ADN contuvo la secuencia para los 10 péptidos derivados de la secuenciación de aminoácidos de la GPVI pero se detuvo cerca del terminal amino. No se pudo encontrar metionina de partida o secuencia líder, pero estaban presentes más de 2000 pb de ADN no del
25 marco de lectura secuenciado previamente que terminaba en una secuencia Alu. El experimento RACE del extremo 5’ se completó en ARN poli A de plaqueta con cebadores ubicados en una parte de la secuencia de la GPVI que había sido corroborada por la de los péptidos. Un fragmento de 318 pb que incluye 70 bp nuevos y x pb en la secuencia de la cuarta pfu en pb 1987 correspondientes a 14 aminoácidos que incluyen la primera metionina se encontró antes de caer en la secuencia de GPVI establecida. De este modo, se pudo secuenciar un ADNC que
30 contenía un total de 1249 pb y que codifica una proteína con un marco de lectura abierto que incluye la secuencia líder con 339 aminoácidos.
Un ADNc que codifica GPVI de plaquetas se clonó y secuenció a partir de una librería de ADNc de médula ósea humana usando RACE con ARNm de plaquetas para suministrar la secuencia 5’ faltante. El marco de lectura abierto de 1017 pb codifica 339 aminoácidos y una región 3’ no traducida. El análisis de hidrofobicidad de la secuencia de 35 aminoácidos reveló la presencia de dos dominios transmembrana putativos, una secuencia señal de 23 aminoácidos putativa, y un dominio de 19 aminoácidos entre los restos 247 y 265 de la proteína madura. La secuencia y su traducción de aminoácidos se muestran en la Fig. 2 y la Fig. 1. Una comparación con la secuencia de aminoácidos de las moléculas más similares encontradas en una búsqueda de GenBank revela claramente que pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas, y el dominio extracelular contiene dos bucles de dominio C2 de Ig formados 40 por dos puentes de disulfuro. Es una molécula proteica que cruza la membrana de clase uno, con el término N en el exterior y atraviesa la membrana una vez. Las moléculas más estrechamente relacionadas pertenecen a la clase de los receptores asesinos naturales, que contiene tanto tipos inhibidores como activadores. La GPVI pertenece claramente a la subclase activadora, no sólo a través de su función sino también porque, a diferencia de la clase inhibidora, no contiene secuencias ITIM en su dominio citoplásmico. Tampoco contiene ningún resto de tirosina que 45 pudiera estar implicado en la fosforilación. Hay algunos restos de treonina y serina en este dominio, pero no concuerdan con ningún criterio para secuencias de consenso de cinasas. Al igual que la clase activadora de receptores NK, la GPVI contiene un resto de arginina como tercer aminoácido del dominio que cruza la membrana, que está implicado en la formación del complejo con la subunidad Fcy. El dominio citoplásmico contiene 51 aminoácidos, mostrando solamente una pequeña similitud (en la región justo por debajo de la membrana) a los 50 dominios citoplásmicos de otros miembros de esta familia. Esto sugiere que este dominio en la GPVI puede asociarse con diferentes tipos de molécula citoplásmica que los otros miembros de la familia. La GPVI contiene solamente un único sitio de N-glicosilación putativo en Asn69. El dominio justo por encima de la membrana antes de que comiencen las láminas beta del dominio Ig, sin embargo, es rico en restos de treonina y serina, los cuales podrían proporcionar sitios de O-glicosilación tales como los que se encuentran en la GPIb y GPV. La función
55 principal de esta O-glicosilación parece ser presentar las estructuras del receptor bien extendidas desde la superficie de las plaquetas para facilitar las interacciones con sus ligandos voluminosos. Dado que GPVI fue establecida anteriormente como una sialoglicoproteína, la diferencia en masa molecular entre la masa de aminoácidos teórica (37 kDa) y la masa determinada por electroforesis en gel (65 kDa reducida) debe ser debida a esta glicosilación.
La estructura de los receptores asesinos naturales de los dos tipos de dominio ha sido establecida por estudios
60 cristalográficos de rayos X, y se mostró que los dos dominios de Ig forman un ángulo agudo, encontrándose el sitio del receptor para los antígenos HLA que llevan péptidos en el exterior del codo. Una comparación directa de la
estructura del sitio de unión a los péptidos HLA con la del colágeno sugiere inmediatamente que estos receptores tienen un origen común, debido a que las estructuras alfa-helicoidales múltiples del sitio de unión a HLA y el péptido que contiene se asemejan mucho a la estructura de triple hélice del colágeno. Además, GPVI contiene múltiples secuencias de PGX, que podrían imitar una hebra de colágeno adicional en la interacción con una fibra de colágeno. 5 Se ha postulado que los receptores asesinos naturales funcionan por un mecanismo de dimerización con dos receptores que reconocen dos sitios de HLA independientes en la célula que está investigando la célula asesina natural. Posiblemente, esta dimerización es parte del mecanismo de activación o desactivación, dependiendo de la clase de receptor. En el caso de GPVI, puede haber también la posibilidad de que dos moléculas de GPVI se asocien con un Fcy, dado que cada monómero del dímero Fcy tiene una secuencia de reconocimiento. Sin embargo,
10 la estequiometría no es aún conocida, y en base a la estructura de colágenos, péptidos similares al colágeno que actúan mediante GPVI y convulxina, parece probable que la fuerza de la señal esté relacionada con el número de complejos GPVI/Fcy que están agrupados entre sí. Otros receptores plaquetarios que pertenecen a esa familia de Ig incluyen ICAM-2 (CD) y PECAM (CD31).
Todos los microorganismos, líneas celulares, sistemas de expresión, huéspedes de expresión, plásmidos,
15 promotores, marcadores de resistencia, orígenes de replicación, sitios de restricción u otros fragmentos o partes de vectores que se mencionan en la descripción no directamente relacionados con la invención reivindicada están generalmente disponibles comercialmente o de otro modo. A no ser que se den otras alusiones, se usan solamente como ejemplos y no son esenciales con respecto a la invención, y pueden ser sustituidos por otras herramientas adecuadas y materiales biológicos, respectivamente.
20 Las técnicas que son esenciales de acuerdo con la invención se describen en detalle a continuación y anteriormente. Otras técnicas que no se describen en detalle corresponden a métodos estándar conocidos que son bien conocidos por un experto en la técnica, o se describen con más detalle en las referencias y solicitudes de patente citadas y en la bibliografía estándar (por ejemplo Sambrook et al., 1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2a Edición, Cold Spring Harbor; Harlow, Lane, 1988, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor).
Ejemplo 1: Materiales – La Proteína A-Sepharose, los anticuerpos de cabra antirratón y anticonejo conjugados con peroxidasa, la albúmina de suero bovino, el veneno de Crotalus durissus terrificus, la aglutinina de germen de trigo (WGA), la agarosa en perlas al 4% reticulada activada con cloroformiato de N-hidroxilsuccinamidilo, y Triton X-114 fueron de Sigma Chemical Co. (St Louis, MO), octanoil-N-metil-glucamida (ONMG) y nonanoil-N-metil-glucamida
30 (NNMG) fueron de Oxyl Chemie (Bobingen, Alemania).
Ejemplo 2: Aislamiento de GPVI de las plaquetas -Las glicoproteínas de la membrana se aislaron de las plaquetas como se describe anteriormente. Brevemente, se lavaron plaquetas (de 40 capas leucoplaquetarias) y se lisaron en Triton X-114 al 2% en presencia de inhibidores de proteasa. El Triton X-114 y las fases acuosas se separaron, y la fase detergente se cargó en una columna de aglutinina de germen de trigo acoplada a Sepharose 4B. Las 35 glicoproteínas plaquetarias se eluyeron con Tris HCl 10 mM, pH 7,4, NaCl 30 mM, octanoil-N-metilglucamida al 0,2% (ONMG) y N-acetilglucosamina al 2%. Después de diálisis y concentración, la disolución de glicoproteínas se cargó en una columna de convulxina unida a agarosa en perlas al 4% reticulada activada con cloroformiato de Nhidroxilsuccinamidil-p-nitrofenilo (1 mg/ml). La columna se lavó con 4 volúmenes de Tris HCl 10 mM, pH 7,4, NaCl 30 mM, nonanoil-N-metilglucamida (NNMG) al 0,2%, y después con 4 volúmenes de Tris HCl 10 mM, pH 7,4, NaCl 30
40 mM y NNMG al 2%. La GPVI se eluyó con SDS al 0,08% en Tris/HCl 10 mM, pH 7,4. Se concentró la disolución y se cargó en un gel preparativo de 8,5% de poliacrilamida usando el Model 491 Prep Cell (BioRad, CA). La electroforesis preparativa se realizó en condiciones no reducidas siguiendo las instrucciones del fabricante. La GPVI eluyó como una única banda a 65 kDa. Se reunieron las fracciones, se concentraron en Centricon-30 (Amicon, Beverly, MA) y se resuspendieron en Tris/HCl 10 mM, pH 7,4 y ONMG al 0,1%.
45 Ejemplo 3: Análisis de aminoácidos de GPVI -Se digirió GPVI con las endoproteinasas LysC y AspN (Boehringer Mannheim, Alemania). Los 10 péptidos generados se separaron por HPLC de fase inversa y se secuenciaron en un secuenciador de proteínas de fase líquida pulsada Applied Biosystem modelo 477A con un analizador de aminoácidos de feniltiohidantoína en línea modelo 120A.
Ejemplo 4: Amplificación de un fragmento de 221 pb que codifica parte de GPVI a partir de una librería de ADNc gt 50 77-
Se amplificó una muestra (1010 pfu) (unidades formadoras de placa) a partir de una librería de médula ósea humana (Clonetech, Palo Alto, CA) usando 2 combinaciones de 4 cebadores degenerados. Las concentraciones finales de cebador fueron 2 M, la concentración de dNTP fue 200 M, y se usaron 2 U/100 l de AmpliTaq Gold (Perkin Elmer, Rotkreuz, Suiza) de reacción. Las condiciones de la PCR fueron 5 ciclos a 37ºC seguido de 30 ciclos a 44ºC.
55 El 19mer sentido 5’ TYATHCCNGCNATGAARMG 3’ y el 20mer antisentido 5’ TTRTANARNGCRAAYTGRTC 3’ amplificaron un fragmento de 221 pb que se subclonó en Bluescript KS+ (Stratagene, La Jolla, CA) y se secuenció usando el kit T7 Sequenase (Amersham, Suiza).
Claims (5)
-
imagen1 REIVINDICACIONES- 1.
- Antisuero anti-GPVI policlonal, Fab anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, o F(ab’)2 anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO:3.
-
- 2.
- Antisuero anti-GPVI policlonal, Fab anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, o F(ab’)2 anti-GPVI
5 obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI según la reivindicación 1, en el que GPVI se puede obtener a partir de plaquetas usando aglutinina de germen de trigo y convulxina y aplicando electroforesis en gel sobre poliacrilamida de alrededor de 8,5%. - 3. Antisuero anti-GPVI policlonal, Fab anti-GPVI obtenible a partir de dicho antisuero anti-GPVI, o F(ab’)2 obtenible apartir de dicho antisuero anti-GPVI según la reivindicación 1 ó 2, en el que el antisuero anti-GPVI policlonal se 10 genera en conejos.
-
- 4.
- Fragmento Fab anti-GPVI de anticuerpos monoclonales de ratón humanizados frente a GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO: 3.
-
- 5.
- Anticuerpos monoclonales o policlonales que reconocen la región N-terminal de GPVI, en el que GPVI tiene la secuencia de SEC ID NO: 3.
1512
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99109094 | 1999-05-07 | ||
| EP99109094 | 1999-05-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2534652T3 true ES2534652T3 (es) | 2015-04-27 |
Family
ID=8238132
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES11001216.8T Expired - Lifetime ES2534652T3 (es) | 1999-05-07 | 2000-04-25 | Anticuerpos contra la glicoproteína VI para el receptor de colágeno de plaquetas recombinante |
| ES00927035T Expired - Lifetime ES2304347T3 (es) | 1999-05-07 | 2000-04-25 | Glicoproteina vi para el receptor de colageno de plaquetas recombinante y su uso farmaceutico. |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00927035T Expired - Lifetime ES2304347T3 (es) | 1999-05-07 | 2000-04-25 | Glicoproteina vi para el receptor de colageno de plaquetas recombinante y su uso farmaceutico. |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US7928066B1 (es) |
| EP (3) | EP1177289B1 (es) |
| JP (2) | JP5480457B2 (es) |
| KR (1) | KR100703592B1 (es) |
| CN (1) | CN1253569C (es) |
| AR (1) | AR023848A1 (es) |
| AT (1) | ATE393223T1 (es) |
| AU (1) | AU775952B2 (es) |
| BR (1) | BRPI0010325B1 (es) |
| CA (1) | CA2372515C (es) |
| CY (2) | CY1108190T1 (es) |
| CZ (1) | CZ302693B6 (es) |
| DE (1) | DE60038675T2 (es) |
| DK (2) | DK2341141T3 (es) |
| ES (2) | ES2534652T3 (es) |
| HK (1) | HK1045714B (es) |
| HU (1) | HUP0201049A2 (es) |
| MX (1) | MXPA01011274A (es) |
| NO (1) | NO333408B1 (es) |
| PL (1) | PL204449B1 (es) |
| PT (2) | PT1177289E (es) |
| RU (1) | RU2287580C2 (es) |
| SI (1) | SI1177289T1 (es) |
| SK (1) | SK15762001A3 (es) |
| WO (1) | WO2000068377A1 (es) |
| ZA (1) | ZA200110071B (es) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU775952B2 (en) * | 1999-05-07 | 2004-08-19 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Recombinant platelet collagen receptor glycoprotein VI and its pharmaceutical use |
| US7291714B1 (en) | 1999-06-30 | 2007-11-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| US20040001826A1 (en) | 1999-06-30 | 2004-01-01 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| US6245527B1 (en) | 1999-06-30 | 2001-06-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid molecules encoding glycoprotein VI and recombinant uses thereof |
| AU7097400A (en) * | 1999-09-01 | 2001-03-26 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Platelet membrane glycoprotein vi (gpvi) dna and protein sequences, and uses thereof |
| EP1224942A1 (en) * | 2001-01-23 | 2002-07-24 | Bernhard Dr. Nieswandt | Use of JAQ1 (monoclonal antibody anti GPVI) as a medicament for the protection against thrombotic diseases |
| EP1406929A2 (en) | 2001-07-18 | 2004-04-14 | MERCK PATENT GmbH | Glycoprotein vi fusion proteins |
| US20070071744A1 (en) | 2002-06-07 | 2007-03-29 | Gotz Munch | Agents which bind to epitopes of glycoprotein VI |
| US7531178B2 (en) | 2002-06-07 | 2009-05-12 | Trigen Gmbh | Immunoadhesin comprising a glycoprotein VI domain |
| EP1369128A1 (en) | 2002-06-07 | 2003-12-10 | Procorde GmbH | Inhibitors of glycoprotein VI and their therapeutic use |
| DE102004017295A1 (de) * | 2004-04-05 | 2005-11-03 | Zlb Behring Gmbh | Verbindungen, welche die Entfernung von Rezeptoren von Zelllmembranen bewirken oder verhindern, und Verfahren zu ihrem Nachweis |
| US7645592B2 (en) | 2004-04-29 | 2010-01-12 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Glycoprotein VI antibodies and methods of use thereof |
| US7611707B2 (en) | 2004-04-29 | 2009-11-03 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Glycoprotein VI antibodies and methods thereof |
| WO2006117910A1 (ja) | 2005-04-28 | 2006-11-09 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | 抗血小板膜糖蛋白質ⅵモノクローナル抗体 |
| EP2212416A4 (en) * | 2007-10-31 | 2013-01-09 | Otsuka Pharma Co Ltd | USE OF A GLYCOPROTEIN VI (GPVI) INHIBITOR |
| US20120258871A1 (en) | 2011-04-08 | 2012-10-11 | Prognosys Biosciences, Inc. | Peptide constructs and assay systems |
| EP3184544A1 (en) * | 2015-12-23 | 2017-06-28 | Julius-Maximilians-Universität Würzburg | Glycoprotein v inhibitors for use as coagulants |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2143416C (en) | 1993-07-01 | 2003-06-10 | Jurgen Hemberger | Inhibitor of collagen-stimulated platelet aggregation |
| JP3720049B2 (ja) * | 1993-10-22 | 2005-11-24 | トライジェン・リミテッド | 血小板由来増殖因子アナログ |
| CA2278154A1 (en) * | 1997-01-21 | 1998-07-23 | Human Genome Sciences, Inc. | Fc receptors and polypeptides |
| WO1998032771A1 (fr) * | 1997-01-29 | 1998-07-30 | Toray Industries, Inc. | Proteines chimeres, complexes heterodimeres de ces proteines et substituant de plaquette |
| AU775952B2 (en) | 1999-05-07 | 2004-08-19 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Recombinant platelet collagen receptor glycoprotein VI and its pharmaceutical use |
| US6245527B1 (en) * | 1999-06-30 | 2001-06-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid molecules encoding glycoprotein VI and recombinant uses thereof |
| US7291714B1 (en) * | 1999-06-30 | 2007-11-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| US20040001826A1 (en) * | 1999-06-30 | 2004-01-01 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| AU7097400A (en) * | 1999-09-01 | 2001-03-26 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Platelet membrane glycoprotein vi (gpvi) dna and protein sequences, and uses thereof |
| EP1406929A2 (en) | 2001-07-18 | 2004-04-14 | MERCK PATENT GmbH | Glycoprotein vi fusion proteins |
| EP1538165A1 (en) | 2003-12-03 | 2005-06-08 | Procorde GmbH | Inhibitors of glycoprotein VI based on monoclonal antibody hgp 5c4 |
-
2000
- 2000-04-25 AU AU45555/00A patent/AU775952B2/en not_active Ceased
- 2000-04-25 HU HU0201049A patent/HUP0201049A2/hu unknown
- 2000-04-25 PT PT00927035T patent/PT1177289E/pt unknown
- 2000-04-25 DE DE60038675T patent/DE60038675T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 DK DK11001216T patent/DK2341141T3/en active
- 2000-04-25 CA CA2372515A patent/CA2372515C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 US US09/959,802 patent/US7928066B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 SK SK1576-2001A patent/SK15762001A3/sk unknown
- 2000-04-25 CN CNB008072922A patent/CN1253569C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 ES ES11001216.8T patent/ES2534652T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 AT AT00927035T patent/ATE393223T1/de active
- 2000-04-25 CZ CZ20013989A patent/CZ302693B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 BR BRPI0010325A patent/BRPI0010325B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 DK DK00927035T patent/DK1177289T3/da active
- 2000-04-25 RU RU2001132140/13A patent/RU2287580C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 ES ES00927035T patent/ES2304347T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 JP JP2000616343A patent/JP5480457B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 MX MXPA01011274A patent/MXPA01011274A/es active IP Right Grant
- 2000-04-25 WO PCT/EP2000/003683 patent/WO2000068377A1/en active IP Right Grant
- 2000-04-25 EP EP00927035A patent/EP1177289B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 KR KR1020017014164A patent/KR100703592B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 EP EP11001216.8A patent/EP2341141B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 SI SI200030996T patent/SI1177289T1/sl unknown
- 2000-04-25 PT PT110012168T patent/PT2341141E/pt unknown
- 2000-04-25 EP EP08004264.1A patent/EP1942186B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 PL PL351437A patent/PL204449B1/pl unknown
- 2000-05-04 AR ARP000102136A patent/AR023848A1/es unknown
-
2001
- 2001-11-06 NO NO20015420A patent/NO333408B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-12-06 ZA ZA200110071A patent/ZA200110071B/xx unknown
-
2002
- 2002-09-26 HK HK02107061.7A patent/HK1045714B/zh not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-03-21 US US11/689,392 patent/US20070172480A1/en not_active Abandoned
- 2007-03-21 US US11/689,385 patent/US8198030B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-07-11 CY CY20081100731T patent/CY1108190T1/el unknown
-
2010
- 2010-12-20 JP JP2010283409A patent/JP5554696B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-03-11 US US13/046,210 patent/US8278430B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2015
- 2015-04-09 CY CY20151100344T patent/CY1116336T1/el unknown
-
2016
- 2016-03-08 US US15/064,157 patent/US20160207976A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5554696B2 (ja) | 組換え血小板コラーゲン受容体糖タンパク質ｖｉおよびその薬学的使用 | |
| Varga-Szabo et al. | Cell adhesion mechanisms in platelets | |
| ES2240067T3 (es) | Proteina que permite bloquear la adhesion de plaquetas. | |
| ES2327604T3 (es) | Medicamento para proteccion contra las enfermedades tromboticas. | |
| Calzada et al. | Novel integrin antagonists derived from thrombospondins | |
| Sun et al. | Posttranslational modifications of platelet adhesion receptors | |
| ES2928791T3 (es) | Anticuerpos contra Mac-1 | |
| Wang et al. | A tetrameric glycoprotein Ib-binding protein, agglucetin, from Formosan pit viper: structure and interaction with human platelets | |
| WO2015085311A1 (en) | Compositions and methods of treating thrombosis | |
| WO1998016548A1 (en) | Thrombin receptor peptides and uses thereof | |
| CN109157654A (zh) | Tmx1的用途 | |
| AU2006208969A2 (en) | Therapeutic peptides derived from urokinase plasminogen activator receptor |