CZ302693B6 - Rekombinantní lidský glykoprotein VI, DNA, která ho kóduje a farmaceutický prostredek, který ho obsahuje - Google Patents
Rekombinantní lidský glykoprotein VI, DNA, která ho kóduje a farmaceutický prostredek, který ho obsahuje Download PDFInfo
- Publication number
- CZ302693B6 CZ302693B6 CZ20013989A CZ20013989A CZ302693B6 CZ 302693 B6 CZ302693 B6 CZ 302693B6 CZ 20013989 A CZ20013989 A CZ 20013989A CZ 20013989 A CZ20013989 A CZ 20013989A CZ 302693 B6 CZ302693 B6 CZ 302693B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- glycoprotein
- collagen
- gpvi
- platelet
- amino acid
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 108010064773 platelet membrane glycoprotein VI Proteins 0.000 title claims abstract description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 43
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 32
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 32
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 25
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 19
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 102000007466 Purinergic P2 Receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 108010085249 Purinergic P2 Receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000719 purinergic P2Y receptor antagonist Substances 0.000 abstract description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 18
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 18
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 12
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 11
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 108010089485 convulxin Proteins 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000010118 platelet activation Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=CC=C1OCCO IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920004929 Triton X-114 Polymers 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- GCRLIVCNZWDCDE-SJXGUFTOSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]nonanamide Chemical compound CCCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO GCRLIVCNZWDCDE-SJXGUFTOSA-N 0.000 description 5
- SBWGZAXBCCNRTM-CTHBEMJXSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]octanamide Chemical compound CCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO SBWGZAXBCCNRTM-CTHBEMJXSA-N 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 4
- 108010010336 Platelet Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000015795 Platelet Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 4
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 4
- -1 acetic Chemical class 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 2
- 108010048623 Collagen Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- HVIBGVJOBJJPFB-OFQRNFBNSA-N Gly-Pro-Hyp Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)C(O)CC1 HVIBGVJOBJJPFB-OFQRNFBNSA-N 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 108010017349 glycyl-prolyl-hydroxyproline Proteins 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NVKZKCWZPSNZFD-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonochloridate Chemical compound ClC(=O)ON1C(=O)CCC1=O NVKZKCWZPSNZFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- PQMRRAQXKWFYQN-UHFFFAOYSA-N 1-phenyl-2-sulfanylideneimidazolidin-4-one Chemical compound S=C1NC(=O)CN1C1=CC=CC=C1 PQMRRAQXKWFYQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRWKNBPOGBTZMN-UHFFFAOYSA-N 2-benzyl-3-phenylpropane-1,2-diamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC(N)(CN)CC1=CC=CC=C1 GRWKNBPOGBTZMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710170920 62 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101710122462 65 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101710186708 Agglutinin Proteins 0.000 description 1
- 108091023043 Alu Element Proteins 0.000 description 1
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 241000796533 Arna Species 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000005552 B01AC04 - Clopidogrel Substances 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 102000009268 Collagen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 229940123228 Collagen inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 241000271538 Crotalus durissus Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 108020001019 DNA Primers Proteins 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N Dibenzylamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCC1=CC=CC=C1 BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 108010056764 Eptifibatide Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007625 Hirudins Human genes 0.000 description 1
- 108010007267 Hirudins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000777658 Homo sapiens Platelet glycoprotein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101710146024 Horcolin Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102100025305 Integrin alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100037872 Intercellular adhesion molecule 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710148794 Intercellular adhesion molecule 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710189395 Lectin Proteins 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 101710179758 Mannose-specific lectin Proteins 0.000 description 1
- 101710150763 Mannose-specific lectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710150745 Mannose-specific lectin 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 101150044441 PECAM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 102100031574 Platelet glycoprotein 4 Human genes 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 101710204410 Scaffold protein Proteins 0.000 description 1
- 101710146343 Scaffold protein D13 Proteins 0.000 description 1
- 102000007365 Sialoglycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010032838 Sialoglycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 101710099833 Venom protein Proteins 0.000 description 1
- 229960000446 abciximab Drugs 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 229940030225 antihemorrhagics Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 108010058966 bacteriophage T7 induced DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- GKTWGGQPFAXNFI-HNNXBMFYSA-N clopidogrel Chemical compound C1([C@H](N2CC=3C=CSC=3CC2)C(=O)OC)=CC=CC=C1Cl GKTWGGQPFAXNFI-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 229960003009 clopidogrel Drugs 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007887 coronary angioplasty Methods 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000012866 crystallographic experiment Methods 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- GLGOPUHVAZCPRB-LROMGURASA-N eptifibatide Chemical compound N1C(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCNC(=N)N)NC(=O)CCSSC[C@@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H]1CC1=CN=C2[C]1C=CC=C2 GLGOPUHVAZCPRB-LROMGURASA-N 0.000 description 1
- 229960004468 eptifibatide Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000000025 haemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 108010005808 hementin Proteins 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 1
- WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N hirudin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(OS(O)(=O)=O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2)=O)CSSC1)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)O)CSSC1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N 0.000 description 1
- 229940006607 hirudin Drugs 0.000 description 1
- 108091008915 immune receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000027596 immune receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001120 potassium sulphate Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 108091006084 receptor activators Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000003966 vascular damage Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 230000037314 wound repair Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/54—F(ab')2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
- G01N2015/018—Platelets
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4728—Details alpha-Glycoproteins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/22—Haematology
- G01N2800/222—Platelet disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
Abstract
Rešení se týká DNA kódující glykoprotein VI obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3, nebo jeho biologicky aktivní fragmenty, které se vážou ke kolagenu. Tato DNA prednostne obsahuje sekvenci SEQ ID NO: 1 nebo její fragmenty, které kódují biologicky aktivní fragmenty glykoproteinu VI, které se vážou ke kolagenu. Dále se rešení týká rekombinantního lidského glykoproteinu VI, obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3, farmaceutického prostredku s obsahem tohoto glykoproteinu VI, který poprípade dále obsahuje farmakologicky úcinnou látku zvolenou ze souboru sestávajícího z antikoagulantu, thrombolytických cinidel, antagonistu receptoru krevních desticek odlišných od glykoproteinu VI a antagonistu ADP-receptoru. Rovnež s týká použití tohoto rekombinantního glykoproteinu VI ve skríningovém prostredku pro detekci specifických inhibitoru interakcí desticka-kolagen, nebo pro výrobu léciva pro lécení thrombotických a kardiovaskulárních príhod a poruch se vztahem k interakcím desticka-kolagen.
Description
Oblast techniky
Vynález se týká DNA kódujícího glykoprotein VI (GPVI) nebo jeho biologicky aktivní fragmenty, které se vážou ke kolagenu, rekombinantního lidského glykoproteinů VI, farmaceutického prostředku s obsahem tohoto GPVI. Dále se vynález také týká použití tohoto GPVI ve skríningovém prostředku pro detekci specifických inhibitorů interakcí destička-kolagen, tj. při hledání potenciálních inhibitorů GPVI vázaných na membrány k zabránění interakcím destiček a kolagenu, a použití pro výrobu léčiva pro léčení poruch a patologických příhod souvisejících přímo nebo nepřímo s poruchami srážení krve, jako jsou trombotické a kardiovaskulární choroby.
Dosavadní stav techniky
Glykoprotein Vije 62/65 kDa (neredukovaný, případně redukovaný) glykoprotein destičkových membrán, který tvcn komplexy spolu s obecnou subjednetkvu Fcgama. PuujcdiiuLřCa vji v i obsahuje vazební místo pro kolagen a podjednotka Fcgama zodpovídá za signalizaci. Komplexy tvoří jeden z hlavních receptorů kolagenu na povrchu destičky, který je rozhodující pro aktivaci destičky v odezvě na kolagen. Rozeznávací sekvence kolagenu sestává ze sekvencí (GlyProHyp)n. Jsou známi pacienti v Japonsku, kteří mají vrozený nedostatek GPVI. Mají mírné problémy s krvácívostí a jejich destičky odpovídají jen slabě na kolagen, pravděpodobně prostřednictvím jiných receptorů. Mnoho poznatků se získalo o signalizačních kaskádách vznikajících na GPVI, které se silně podobají signalizačním kaskádám z imunitních receptorů včetně receptorů T-buněk, receptorů B-buněk a receptorů přírodních zabij ečů buněk. K těmto kaskádám patří obzvláště rodina tyrosinkináz, jako je Fyn a Lyn, stejně jako p72SYK a mnoho jiných tyrosinkináz a fosfatáz a adaptorů proteinů jako je LAT. Hlavním cílem těchto kaskád je aktivace fosfolipázy Cgama2, která štěpí fosfolipidy na sekundární mediátorový diacyglycerol a IP3. Má se zato, že GVPI se podílí na aktivaci destičkového integrinů α2β1, který má hlavní roli v ulpívání destiček na stěnách poškozených cév. Myši s vyřazenou („knocked-out“) podjednotkou Fcgama mají destičky, které stále vykazují odezvy na kolagen, což znamená, že zbytkový stav α2β1 může být také regulován komplexem GPVI/Fcgama. Destičkový kolagenový receptor GPVI je úzký vztah k přírodním zabíječům aktivátorů receptorů rodiny p58KAR stejně jako FcaR.
Adheze a aktivace zbytkových kolujících destiček v místě poškození cévy je prvním stupněm v procesu vedoucím k vytváření trombu, který se přemění v hemostatickou zátku. Kolagen je jednou z hlavních součástí cévní stěny zodpovědný za aktivaci destiček. Existuje mnoho typů kolagenu a sedm z nich se nachází v subendothelových vrstvách. Bylo identifikováno několik různých receptorů pro kolagen na destičkách, avšak za hlavní se dnes považuje integrin α2βι a neintegrovaný GPVI. Ačkoli α2βι je dobře charakterizován, a obě podjednotky byly klonovány a sekvencovány již před několika lety, zůstává struktura GPVI těžko postižitelnou, ačkoli bylo identifikováno několik význaků. Přibližně před dvaceti lety se zjistilo, že GPVI je hlavním destičkovým glykoproteinem s molekulovou hmotností v rozmezí 60 až 65 kDa a s kyselinou hodnotou pH. Jeho role jako domnělého receptoru kolagenu byla stanovena po identifikaci pacienta v Japonsku s mírnou poruchou krvácivosti, jehož destičky vykázaly specifický defekt odezvy na kolagen a postrádaly tento receptor. Tento pacient také vyvinul autoprotilátky proti deficitnímu receptoru a těch se použilo k dalšímu charakterizování molekuly. Nověji se zjistilo, že GPVI je spojen nekovalentně se známou podjednotkou Fcgama, která působí jako signalizační část komplexu. Ukázalo se také, že rozeznávací sekvenci kolagenu pro GPVI je opakující se triplet Gly-Pro-Hyp uvnitř trojité šroubovicové struktury kolagenu, a že syntetických peptidů založených na této struktuře by se mohlo použít jako specifických agonistů zaměřených na GPVI. Ukázalo se, že komplex GPVI/Fcgama signalizuje do vnitřku destiček mechanismem podobným imunitnímu receptoru, zahrnujícím aktivaci p72SYK a vedoucí kaskádou interakcí kináza/-1 CZ 302693 B6 fosfatáza/adaptor proteinu k aktivaci PLCgama2 a tedy k uvolňování granulí a agregaci destiček. Dalším stupněm v charakterizaci této molekuly bylo předvedení, že hadí lectin typu C, convulxin z tropického chřestýše Crotaius durrisus terrificus je schopen aktivovat destičky shlukováním GPV1 multiměrní interakcí. Ukázalo se, že konvulxin se váže specificky na GPVI, což umožňuje způsob čištění tohoto receptoru ve spojení se zavedenými přístupy.
Z dosavadního stavu techniky se jeví GPVI jako velmi zajímavá sloučenina v mnoha terapeutických oborech, týkajících se především aplikací, jež se vztahují přímo nebo nepřímo ke případům koagulace krve závislým na interakci kolagen -destičky. Úkolem vynálezu tedy je připravit GPVI io v rekombinantní formě a doložit jeho účinnost jako přímého terapeutického cíle nebo jako nástroje pro skrínink krátkých sloučenin, obzvláště chemicky syntetizovaných nebo syntetizovatelných sloučenin majících schopnost ínhibovat interakci přírodní destičky-kolagen. Vynález se týká také částí fragmentů proteinu GPVI, které si zachovaly svou biologickou aktivitu, kterou je vazba na kolagen.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je DNA kódující glykoprotein VI obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 nebojeho biologicky aktivní fragmenty, který se vážou ke kolagenu.
Přednostní provedení tohoto aspektu vynálezu zahrnují zejména DNA podle výše uvedeného základního provedení, která obsahuje sekvenci SEQ ID NO: 1 nebo její fragmenty, které kódují biologicky aktivní fragmenty glykoproteinů VI, které se vážou ke kolagenu;
- je tvořena sekvencí SEQ ID NO: 1;
kóduje glykoprotein VI obsahující aminokyselinou sekvenci SEQ ID NO: 2 a SEQ ID NO: 3.
Předmětem vynálezu je dále také rekombinantní lidský glykoprotein VI obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3.
Do rozsahu vynálezu také spadá farmaceutický prostředek, který obsahuje glykoprotein VI obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 a farmaceuticky přijatelné ředidlo, nosič nebo excipient. Tento farmaceutický prostředek popřípadě dále obsahuje farmakologicky účinnou látku zvolenou ze souboru sestávajícího z antikoagulantů, thrombolytických činidel, antagonistu receptoru krevních destiček odlišných od glykoproteinů VI a antagonistu ADP-receptoru.
Předmětem vynálezu je dále také použití rekombinantního glykoproteinů VI obsahujícího amino40 kyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 ve skríningovém prostředku pro detekci specifických inhibitorů interakcí destička-kolagen.
Konečně je předmětem vynálezu také použití rekombinantního glykoproteinů VI obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 pro výrobu léčiva pro léčení thrombotických a kardiovaskulárních příhod a poruch se vztahem k interakcím destička - kolagen.
V souvislosti s vynálezem byla s úspěchem purifikována přiměřená množství GPVI pro primární charakterizací a pro sekvencování peptidu. Sekvencí bylo použito ke konstrukci primerů pro PCR k identifikaci pozitivní sekvence v knihovně DNA. Této sekvence DNA bylo pak použito jako sondy k izolování téměř úplné sekvence cDNA z knihovny. Chybějící sekvence 5' byla získána s použitím metody RACE z knihovny cDNA destiček.
Vynález je také užitečný pro demonstraci použití rekombinantního GPVI jako terapeuticky aplikovatelné sloučeniny, kteráje schopna při podání pacientovi například s poškozenými krevní- 2 _ mi cévami, vázat kolagen a tak zabraňovat, aby se destičky, obsahující na membránu vázaný GPVI, vázaly na uvedený kolagen. Rekombinantní rozpustná mimobuněčná doména GPVI obsahuje kolagen vázající místa a může zabraňovat aktivaci destiček kolagenem. Mohla by tudíž být aplikovatelná k léčení chorobných stavů zahrnujících zvýšenou aktivaci destiček kolagenem, jako je atherosklerotické praskání plaků u chorob jako je nestabilní angina nebo během chirurgických zásahů jako je perkutánní transluminální koronární angioplastika (PTCA), kdy se arterie otevírají balónkovým katétrem, což způsobuje značné poškození stěny cév a velkou aktivaci destiček a Často vede k pozdějšímu opětnému ucpání cévy. Přednost rekombinantních fragmentů GPVI ve srovnání se současnými léčebnými metodami je v tom, že působí v ranném stavu prevenci nebo redukcí aktivace destiček spíše než že by potlačovaly příhody po aktivaci destiček, jako je agregace antagonisty GPIIb-IIIa. Uvolňují se tudíž menší množství obsahu destičkových granulí včetně růstových faktorů a chemokinů, které se podílejí nejenom na opravě ran ale i na přestavbě cévních stěn migraci hladkého svalstva a přitažením fagocytových buněk, jako jsou monocyty, o nichž je známo, že přispívají k atherosklerose. Fab fragment humanizovaných myších monoklonálních protilátek proti GPVI by se dalo použít s podobným efektem k blokování GPVI na povrchu destiček s podobnou aplikací jako shora uvedeno.
Rekombinantního GPVI podle vynálezu může být použito při vazební zkoušce na kolagen ke skríninkii malvch mnleknl ínanřtklad v knmhinatoríckvch knihnvnárh3 schnnnvrh inhihnvat tuto \ I j · - 7 - |- V · ·· · interakci a kterých by bylo možno použít k vyvinutí terapeutických sloučenin které jsou inhibitory interakcí kolagen-desticky. Vhodnou, derivatizaci se tyto sloučeniny stávají orálně dostupnými. Hlavním účelem je opět připravit sloučeniny redukující interakce GPVI-kolagen a tedy aktivace destiček v situacích, kdy přicházejí destičky do styku s kolagenem. Skrínovací technologie, použitá podle vynálezu, je dobře zavedená v dosavadním stavu techniky. Při takových skrinovacích zkouškách umožňuje vynález vyhledat a vyvinout nové cíle. které mohou inhibovat GPVI vázané na přírodní membrány na povrchu destiček jako kolagenový antagon i sta. Takovými cíly mohou být malé chemické molekuly, jež pak mohou být podkladem pro další výzkumy.
Jinou aplikací GPVI a reakčních Činidel, která rozeznávají specifické domény GPVI, je použití jako markérů věku a funkčnosti destiček. Tato aplikace nespadá do rozsahu vynálezu. Mladé destičky se obecně považují za aktivnější a funkčnější než starší. Mladé destičky se váží a jsou aktivovány hadím jedem lektin konvulxin C-typu, který je specifický pro GPVI a jak stárnou, klesá jejich vázání a stupeň aktivace. Může to být způsobeno buď proteolytiekými nebo konformačními změnami v GPVI nebo jejích spojením s Fc gama díky aktivaci destiček nebo poruch v jejich oběhu. To může být užitečným parametrem k měření věku a funkčního profilu destiček u pacientů stejně jako u normálních osob během lékařských kontrol. Věkový profil destiček se mění u mnoha chorob ovlivňujících kostní dřeň nebo imunitní systém a mohl by být významným diagnostickým kriteriem, kdyby byly dostupné lepší metody pro jeho stanovení. Například pacienti s chorobami zahrnujícími zvýšený obrat destiček vykazují více mladých destiček, zatímco pacienti po chemoterapii nebo ozařování vykazují stabilně stárnoucí populaci. Takový věkový profil může tedy sloužit k přesnému monitorování léčby. U normální zdravé populace je velmi málo známo o rozdělení věkového profilu a jeho úloze jako předvídače změn zdraví. Není známo, zda změny GPVI jsou způsobovány částečným zahrnutím destiček v hemostatických příhodách a zda změny mohou být výraznější u pacientů s rozsáhlou kardiovaskulární chorobou. V současné době se k detekci mladých réti kulovaných destiček obsahujících mRNA používá thiazol ové oranže. Tato mRNA se rychle rozkládá, což omezuje metodu na pouze nej mladší destičky. Léčiva, kterých by bylo možno použít v takové zkoušce, by obsahovala GPVI specifické proteiny hadího jedu, jako je konvulxin, nebo monoklonální nebo polyklonální protilátky rozeznávající N-koncovou oblast GPVI nebo monoklonální protilátky rozeznávající nová místa nebo konformace exponované proteolýzou N-koncových domén nebo specifické konformace přítomné buď v nedotčené molekule a nikoli ve staré a naopak nebo malé chemické jednotky k rozeznání specificky nedotčeného GPVI nebo jeho modifikované formy. Tato reakční Činidla by byla značena fluorescenčním markérem nebo spolu s fluorescenčně značenou druhou protilátkou nebo afinitním reakčním činidlem a použita v průtokové cytometrii ke změření vazebního profilu desti- j CZ 302693 B6 čck. V dalším stupni by bylo možno přijmout alternativní, méně pracné techniky založené na automatickém měření profilu destiček. S použitím způsobů třídění s průtočnou cytometrií nebo magnetickými kuličkami by mělo být možno oddělovat mladé destičky od starých destiček ke zkoumání faktorů účastnících se odstraňování destiček z oběhu, Reakční činidla rozeznávající specifické formy GPVI by byla klíčem k takovým studiím.
Možnými medicínskými indikacemi a aplikacemi jsou například nestabilní angína pectoris, PTCA, použití stentu v této oblasti, operace koronárních cév, obecně operace krevních cév, operace, které mohou poškodit větší krevní cévy jako jsou operace kyčelního kloubu. Kromě io toho jsou zahrnuty všechny indikace pocházející z tromboembolických příhod způsobených poruchami interakce mezi cévní stěnou a koagu lačním systémem s vysokým rizikem tvoření trombů a ucpání cév.
Jak shora uvedeno, hodí se protein GPVI a jeho fragmenty podle vynálezu jako farmaceuticky účinné sloučeniny ve farmaceutických prostředcích a kombinacích.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou popřípadě obsahovat přídavné aktivní přísady jako jsou antikoagulanty jako je hirudin nebo heparin nebo trombolytická činidla jako je plasminogenový aktivátor nebo hementin nebo antagonisty jiných receptorů destiček jako jsou anta2o gonisty GPIlb-llla jako je abciximab nebo eptifibatid nebo antagonisty ADP-receptoru jako je clopidogrel.
Nový protein a jeho biologicky aktivní fragmenty mohou podle vynálezu tvořit farmaceuticky přijatelné soli s kteroukoli farmaceuticky přijatelnou netoxickou organickou nebo anorganickou kyselinou. Anorganickými kyselinami jsou například kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová nebo fosforečná a kyselé kovové soli jako je natriummonohydrogenortofosfát a kaliumhydrogensíran. Příklady organických kyselin jsou monokarboxylové, dikarboxylové atrikarboxytové kyseliny, jako je kyselina octová, glykolová, mléčná, pyrohroznová, malonová, jantarová, glutarová, fumarová, jablečná, vinná, citrónová, askorbová, maleinová, hydroxymaleinová, su benzoová, hydroxybenzoová, fenyloctová, skořicová, sylicylová a sulfonová, jako je methansul tónová kyselina. Jakožto soli karboxylového koncového aminokyselinového podílu se příkladně uvádějí netoxické soli karboxylové kyseliny tvořené s kteroukoli vhodnou anorganickou nebo organickou, zásadou. Jakožto takové soli se příkladně uvádějí soli s alkalickými kovy jako je sodík a draslík, s kovy alkalických zemin jako je vápník a hořčík, s lehkými kovy skupiny II1A, včetně hliníku a s organickými primárními, sekundárními a terciárními aminy jako jsou trialkylaminy, včetně triethylaminu, prokainu, dibenzylaminu, l-ethenaminu, N,NP-díbenzylethylendiaminu, dihydroabiethylaminu a N-alkylpiperidinu.
Výrazem „farmaceuticky přijatelný nosič“ se vždy míní inertní, netoxické pevné nebo tekuté •to plnidlo, ředidlo nebo kapslovací materiál, nereagující škodlivě s účinnou složkou nebo s pacientem. Vhodné, s výhodou tekuté nosiče jsou v oboru známé, jako je sterilní voda, solanka, vodná dextróza, cukerné roztoky, ethanol, glykoly a oleje, včetně ropného, živočišného, rostlinného nebo syntetického původu, jako je například arašídový, sojový a minerální olej.
Prostředky podle vynálezu se mohou podávat v jednotkových dávkách obsahujících běžné netoxické farmaceuticky přijatelné nosiče, ředidla, adjuvanty a nosiče, které jsou typické pro parenterální podávání.
Pod označením „parenterální“ se míní subkutánní, intravenosní, intra-artikulámí a intratracheální injekční a ínfusní techniky. Vhodné jsou také jiné druhy podání, jako je orální a topické. Parenterální prostředky a kombinace se nejvhodněji podávají intravenózně bud’jako bohis nebo jako konstantní fúze o sobě známými způsoby. Tablety a kapsle k orálnímu podání obsahují běžné exeipienty jako jsou pojidla, plnidla, ředidla, tabletovací činidla, mazadla, desintegrátory a smáčedla. Tablety se mohou povlékat způsoby známými v oboru.
-4CZ 302693 B6
Kapalné orální prostředky mohou být ve formě vodných nebo olejových suspenzí, roztoků, emulzí, sirupů nebo elixírů nebo se mohou podávat jako sušený produkt pro smísení s vodou nebo s jiným vhodným nosičem před použitím. Takové kapalné prostředky mohou obsahovat běžné aditivy jako jsou suspenzační činidla, emulgátory, nevodné nosiče a konzervační činidla. Typické prostředky mohou být ve formě vodných nebo olejových suspenzí, roztoků, emulzí, želé nebo s výhodou emulzních mastí.
Jednotkové dávky podle vynálezu mohou obsahovat denní požadované množství proteinu pole vynálezu, nebo jejich podíly k vytvoření potřebné dávky. Optimální terapeuticky přijatelná dávka a míra dávkování pro daného pacienta (savce včetně lidí) závisí na mnoha činitelích, jako je aktivita použité specifické účinné látky, věk, hmotnost, celkový zdravotní stav, pohlaví, dieta, čas a cesta podání, rychlost, uvolňování, účel léčení, například terapie nebo profylaxe, a povaha léčení trombotické nemoci, protidestičková nebo protisrážlivá aktivita.
Proto je v prostředcích a kombinacích užitečných jako protisrážlivá činidla u léčeného pacienta (in vivo) farmaceuticky účinná denní dávka peptidů podle vynálezu přibližně 0,01 až 100 kg/kg tělesné hmotnosti, s výhodou 0,1 až 10 mg/kg tělesné hmotnosti. Podle formy podání může jednotková dávka obsahovat 0,5 až 10 mg inhibitoru kolagenu. K dosažení protisrážlivého účinku v mimotělní krvi ie farmaceuticky účinné množství peptidů podle vynálezu 0 2 λζ ISO mg/l. s výhodou 1 mg až 20 mg/l mimotělní krve.
Vynález blíže objasňuje následující podrobný popis.
Dvě sekvence 7 aminokyselin, vykazující nejmenší degeneraci v genetickém kódu, se volí pro syntesu DNA primerů k zesílení části GPVIcDNA pomocí PCR. Jelikož umístění obou peptidů v proteinu bylo zcela neznámé, připraví se pro každý z nich dva degenerační priméry jeden mající smysl, druhý nemající smysl („antisense“). Těchto primerů je použito k zesílení knihovny kostní dřeně. Kombinace smyslového 5'TYA THC CNG CNA TGA ARMG 3 příměru kódující sekvenci PAMKRSL s antismyslovým 5' TTR TAN ARN GCR AAY TGR TC 3' odpovídajícím DQFALYK zesílí fragment DNA 221 bp. Vedle vybraných peptidů kóduje zesílená DNA LysCIAspN peptid DQLELVATGVFAKPSLSAQPGPAVSS, zřetelně spojující sekvenci k cDNA pro GPVI.
Výsledkem skrínování 600 000 pu z knihovny kostní dřeně s tímto fragmentem 221 pbDNA jsou čtyři positivní pfu. Tři mají inzert 1350 bp byť vyříznutý restrikčním enzymem Sal I nebo EcoR l a patří do superrodiny IgG. Čtvrtý má inzert 4,5 kb d i gescí Sal I a dává dva fragmenty 2300 bp a 1300 bp při zpracování EcoRI. Jeho DNA kóduje sekvenci 10 peptidů odvozených z aminokyseliny sekvencující GPVI avšak končí těsně u aminozakončení. Nemohl být nalezen startovací methionin nebo vůdčí sekvence, je však přítomno více než 2000 bp předem sek věncovaného ečtecího rámce DNA končící v sekvenci Alu. Pokus 5' koncová RACE se ukončila na destičkové póly ARNA s priméry umístěnými v části sekvence GPVI, která byla zesílena sekvencí peptidů. Nalezl se fragment 348 bp včetně 278 bp na sekvenci čtvrtého klonu a 70 bp nové formy bp 1987 odpovídající 14 aminokyselinám včetně prvního methioninu před spadnutím zpět na ustavenou sekvenci GPVI. Bylo tedy možno sekvencovat cDNA obsahující celkem 1249 bp, 25 bp 5' sekvenci proti směru startovacího kodonu, otevřeného čtecího rámce 1017 bp kódujícího protein, včetně vůdčí sekvence, se 339 aminokyselinami a 3' oblastí 207 bp včetně stop kodonu.
cDNA kódující destičky GPVI se klonuje a sekvencuje z knihovny cDNA lidské kostní dřeně pomocí RACE s destičkou mRNA k nahrazení chybějící 5' sekvence. Otevřený čtecí rámec 1017 bp kóduje 339 aminokyselin a netrans lato vanou oblast 3'. Analýza hydrofobicity sekvence aminokyselin ukázala přítomnost dvou domnělých transmembránových domén, domnělé signální sekvence 20 aminokyselin a domén 19 aminokyselin mezi zbytky 247 a 265 zralého proteinu. Sekvence a její translace aminokyselin jsou znázorněny na obr. 2 a 1. Porovnání se sekvencí aminokyselin nejvíce podobných molekul nalezených v genové bance (GenBank) ukazuje zřetelně, že patří do superrodiny imunoglobulinu a extracelulámí doména obsahuje dvě lgC2-doméno- 5 CZ 302693 B6 vé smyčky tvořené dvěma d i sulfidový mi můstky. Je to membránou pronikající proteinová třída jedné molekuly s Ν-zakončením 11a vnějšku a traversuje membránu jednou. Nejtěsněji příbuzné molekuly patří k třídě receptoru přírodního zabíječe, která obsahuje jak inhibiční, tak aktivační typy. GPVI patři zřejmě do aktivační podtřídy nejenom svou funkcí, ale také, jelikož na rozdíl od inhibiční třídy, neobsahuje sekvence 1TIM ve své eytoplasmové doméně. Ani neobsahuje žádné tyrosinové zbytky, které by se mohly podílet na fosfory láci. V jeho doméně je několik zbytků threoninu a šeřinu, ty se však netýkají kriterií pro dohodnuté sekvence kinázy. Podobně jako aktivnější třída receptoru NK, obsahuje GPV1 zbytek argininu na třetí aminokyselině membránu pronikající domény, která se podílí na tvorbě komplexu s pod jednotkou Ec gama. Cytoplasmová doména obsahuje 51 aminokyselin, vykazujících jen malou podobnost (v oblasti těsně pod membránou) s cytoplasmovými doménami této rodiny. To naznačuje, že tato doména GPVI může být sdružena s různými typy eytoplasmové molekuly spíše než ostatní členy rodiny. GPVI obsahuje pouze samostatné domnělé N-glykolyzační místo u Asn69. Doména těsně nad membránou pod beta vrstvami Ig doménového ukončení, je však bohatá na threoninové a serinové zbytky, které by mohly poskytnout O-gly kosy lační místa, jako se zjistila u GPIba a GPV. Hlavní funkce této O-gly kosy láce spočívá pravděpodobně v poskytnutí receptorové struktury dobře rozšířené z povrchu destiček k usnadnění interakcí sjejich objemnými ligandy. Jelikož GPVI byl nověji stanoven jako sialoglykoprotein, rozdíl v molekulové hmotnosti mezi teoretickou hmotností aminokyselin (37 kDa) a hmotností stanovenou gelovou elektroforézou (65 kDa sníženou) musí být způsoben jeho glykosylací.
Struktura přírodních žabí jecích receptorů obou doménových typů se zjistila rentgenovými krystalografickými studiemi a ukázalo se, že obě Ig-domény tvoří ostrý úhel s místem receptoru pro peptid nesoucí antigeny HLA ležícími na vnější straně oblouku. Přímé porovnání struktury vazebního místa peptidu HLA s místem kolagenu bezprostředně naznačuje, proč mají tyto receptory stejný původ, jelikož několikanásobné α Šroubovicové struktury vazebního místa HLA a peptidu, který obsahuje, se silně podobají trojnásobné Šroubovicové struktuře kolagenu. Má se zato, že přírodní zabíjecí receptory pracují dimerizačním mechanismem se dvěma receptory rozeznávajícími dvě oddělená místa HLA na buňce kterou buňka přírodního zabíječe zkoumá.
Tato dimerizace je možná součástí aktivačního nebo deaktivačního mechanizmu, závisejícího na třídě receptoru. V případě GPVI může být také stejně možné, že se dvě molekuly GPVI spojí s jedním Fc gama, jelikož každý monomer dimeru Fc gama má rozlišovací sekvenci Stechiometrie není však dosud známa a záleží na struktuře kolagenů, kolagenu podobných peptidů, které působí cestou GPVI a konvulxinu, jeví se jako možné, že síla signálu se vztahuje k řadě kom35 plexů GPVI/Fc gama, které jsou spolu propleteny. Jinými receptory destiček patřícími do této Igrodinyjsou ICAM-2 (CD 102) a PECAM(CD31).
Všechny mikroorganismy, buněčné linie, expresní systémy, hostitelé expresí, plasmidy, promotory, resistanční markéry, replikační původy, restrikční místa nebo jiné fragmenty nebo části vektorů, o kterých je zmínka v popisu ne přímo ve spojení s nárokovaným vynálezem, jsou komerčně nebo jinak obecně dostupné. Za předpokladu, že neexistují jiné překážky, je jich použito pouze jako příkladů a nejsou nezbytné pro podstatu vynálezu a mohou být nahrazeny jinými vhodnými nástroji a biologickými materiály.
Způsoby, které jsou nezbytné podle vynálezu jsou zde podrobně popsány. Jiné způsoby, které nejsou podrobně popsány, jsou známými standardními způsoby pro pracovníky v oboru, nebo jsou popsány podrobněji v uvedených odkazech a v patentové a ve standardní literatuře (například Sambrook a kol., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. vydání, Colt Spring Harbor, 1989; Harlow Line (1989) Antibodies: Laboratory Manual, Colt Spring Harbor, 1988).
-6CZ 302693 B6
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. I je znázorněna proteinová sekvence GPVI (jednopísmenový kód), přičemž na obr. laje vedoucí sekvence SEQ ID NO: 2 a na obr. lb je sekvence maturovaného proteinu SEQ ID NO: 3: Otevřený čtecí rámec: 339 aminokyselin
Hvězdička: Dvojité podtržení: Podtržení:
glykosylační místo transmembránová doména sekvencované peptidy
Na obr. 2 je znázorněna nukleotidová DNA sekvence SEQ ID NO: 3, kódující glykoprotein VI. Tato sekvence zahrnuje otevřený volný čtecí rámec 1017 bp plus 3' a 5' oblasti celkem 1249 bp.
Vynález blíže objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Materiály
Protein A-Sefaróza, peroxidázou conjugované kozí anti-myší a anti-králičí protilátky, albumin hovězího séra, jed hada Crotalus durissus terrificus, glutinin pšeničných zrn (WGA), N-hydroxysukcinimidylchlorformiátem aktivovaná zesítěná 4% kuličková agaróza a Triton X-114 (obchodní produkt společnosti Sigma Chemical Co., St. Louis, MO), oktanoyl-N-methylglukamid (ONMG) a nonanoyl-N-methylglukamid (NNMG) (obchodní produkt společnosti Oxyl Chemie, Bobbingen, Německo).
Příklad 2
Izolace GPVI z destiček
Membránové glykoproteiny se izolují z destiček shora popsaným způsobem. V podstatě se destičky (ze 40 buffy-koz) promyjí a lisují se ve 2% Tritonu X-114 v přítomnosti inhibitorů proteázy. Triton X-114 a vodné fáze se oddělí a detergentová fáze se vnese na sloupec pšeničního aglutinu spojeného se Sepharózou 4B. Destičkové glykoproteiny se eluují za použití 10 mM Tris HCI, hodnota pH 7,4, 30 mM NaCI, 0,2 % oktanoyl-N-methylglukamidu (ONMG) a 2 % N—acetyl glukosám i nu. Po dialýze a zkoncentrování se vnese roztok glykoproteinů na sloupec konvulxinu vázaného na N-hydroxylsukcinamidyl-p-nitrofenylchlorformiát aktivovaný zesílenou 4% zrnitou agarózou (1 mg/ml). Sloupec se promyje 4 objemy 10 mM Tris HCI, hodnota pH 7,4, 30 mM NaCI, 0,2 % nonanoyl-N-methylglukamidu (NNMG) a pak 4 objemy 10 mM Tris HCI, hodnota pH 7,4, 30 mM NaCI a 2 % NNMG. GPVI se eluuje 0,08% SDS v 10 mM Tris HCI, hodnota pH 7,4. Roztok se zkoncentruje a vnese se na preparační gel 8,50% polyakrylamidu použitím modelu 491 PrepCell (BioRad, CA). Preparativní elektroforéza se provede za ne redukovaných podmínek podle instrukcí výrobce. GPVI se eluuje v jediném pásu při 65 kDa. Frakce se promyjí, zkoncentrují na Centricon-30 (Amicon, Beverly, MA) a resuspendují se v 10 mM Tris HCI, hodnota pH 7,4 a 0,1% ONMG.
-7CZ 302693 B6
Příklad 3
Aminokyselinová analýza GPVI s GPVI se dtgeruje s endoproteinázamí LysC a AspN (Boehringer Mannheim Německo). Deset vytvořených peptidů se oddělí reverzní fázovou chromatografii HPLC a sekvencuje se na pulzním kapalinovém proteinovém sekvenceru Applied Biosystem model 477A son-line analyzátorem aminokyseliny fenylthiohydantoin model 120A.
to
Příklad 4
Zesílení fragmentu 221 bp kódujícího část GPVI z knihovny lambdagtl IcDNA
Vzorek (101() pfu) (destičky vytvářejících jednotek) z knihovny lidské kostní dřeně (Clonetech, Palo Alto, CA) se zesílí pomocí dvou kombinací 4-degenerováných příměrů. Koncentrace konečného primeru je 2 μΜ, koncentrace dNTP je 200 μΜ a použije se 2U/100 μΐ reakce AmplíTaqCold (Perkin Elmer, Rotkreuz, Švýcarsko). Podmínky PCR jsou 5 cyklu při teplotě 37 °C následované 30 cykly při teplotě 44 °C. Smyslový 19 mer 5'TYATHCCNGCNATG2(i AARMG3' a antismyslový 20 mer 5 TTRTANARNGCRAAYTGRTC3' zesílí fragment 221 bp, který byl subklonován v Bluescript KS' (Stratagene, La Jolla, CA) a sekvencuje se použitím soupravy T7 Sequenase kit (Amerham, Švýcarsko).
2? Příklad 5
Skrínování knihovny lambdagt 11 cDNA sondou 221 bp GPVI
Fragment 221 bp se odřízne z plasmidu, vyčistí se a označí se ct32P-ATP (200MBq/50 μΐ jo Hartman Analytik, Braunschweig, Německo) pomocí soupravy High Primer Labelling kit (Boehringer Mannheim, Švýcarsko). Skrínuje se knihovna lidské kostní dřeně podle výrobcovy instrukce. Pozitivní fágy se nechají růst, jejich DNA se izoluje a subklonuje se v BlueScriptu pomocí míst ether EcoRl nebo Sáli a sekvencuje se. Sekvencování se provede pomocí systému ABS RACE. Destičkový póly A RNA se připraví shora popsaným způsobem (Power a kol.
Cytokine 7, str. 479 až 482, 1995). Reversní transkripce (30 μί se provede pomocí 5 μg polyARNA primerem 5 TGAATGAGAGCGGTCAGTTCAGC3' (20 μΜ) dNTP (1 mM), RNAsin (40 U), pufru IX AMV a 20 U AMV reversní transkriptázy po 20 minut při teplotě 45 °C, pak 20 minut při teplotě 52 °C. Reakční směs se zpracuje 2 μΙ 6N NaOH 30 minut při teplotě 65 °C, neutralizuje se 2 μΐ 6N octovou kyselinou a zkoncentruje se v zařízení Centricon 30 (Amicon).
Kotva se váže na první standardní DNA podle protokolu Aptes a Sibert (BioTechniques 15, str. 890 až 893, 1993). Provede se zahnízdění PCR pomocí primeru komplementárního ke kotvě a primeru 5 TTGTACAGAGCAAATTGGTC3' (35 cyklů, 55 °C a následovaný primerem 5 GACCAGAGGCTTCCGTTCTG3' (30 cyklů při teplotě 53 °C). Nejvyšší pruh (350 bp) se oddělí agarózovou elektroforézou od nižších, subklonuje se na BlueScriptu a sekvencuje se.
Příklad 6
Příprava anti-GPVIFab a F(ab')2
Polyklonální antiséra proti lidské GPVI se generují v králících. Podle popisu se čistí IgG z králičího anti-GPVI antiséra. Provede se digesce IgG i mobilizovaným papainem (Pierce) k vytvoření fragmentů. Fab podle standardního výrobcova protokolu. Fragmenty Fab se oddělí od nedigerovaného IgG a fragmentů Fc pomocí imobilizovaného sloupce Proteinu A (Sigma). Průtok se
-8CZ 302693 B6 zavede do dialyzační zkumavky, zkoncentruje se použitím pevného polyethylenglykolu 20 000, opatrně se dialyzuje proti 20 mM Hepes, 140 mM NaCl, 4 mM KCI, hodnota pH 7,4 a uloží se při teplotě 4 °C až do použití. Fragmenty F(ab')2 se připraví pepsinovou digescí IgG, hmotnostní poměr enzymu k substrátu 1:50, v 0,5M acetátového pufru, hodnota pH 4,0, 18 hodin při teplotě 37 °C. Hodnota pH se opraví na 7,4 zředěným roztokem hydroxidu sodného a vzorek se dialyzuje proti 20 mM fosfátu, hodnota pH 7,4. Fragmenty F(ab')2 se oddělí od nedigerováného IgG a fragmentů Fc použitím chromatografie Proteinu A. Proteklý produkt se zavede do dialyzační zkumavky, zkoncentruje se použitím pevného polyethylenglykolu 20 000, intenzivně se dialyzuje proti 20 mM Hepes, 140 mM NaCl, 4 mM KCI, hodnota pH 7,4 a uloží se v podílech při teplotě ~ 20 °C. Promyté destičky se lisují v Tritonu X-114 a oddělí fází se provede na rozpustném materiálu před izolováním membrány glykoproteinů spojených s fází Triton X-114 afinitní chromatografií na aglutinin Sefaróze 4B pšeničných klíčků, jak shora popsáno. Jelikož GPVI představuje jen velmi malý zlomek shromážděného glykoproteinů destičkových membrán, použije se specifičnosti hadího lektinového konvulxinu typu C k izolaci tohoto receptorů. Afinitní chromatografií na konvulxinu spojeného se Sefarózou 4B se získá protein 65 kDa jako hlavní produkt. Avšak necharakter izo váný materiál jak s vyšším, tak s nižším Mr koelugoval s GPVI a nemohl být odstraněn extenzivním promýváním sloupce. Jako konečný stupeň čištění se zařadila preparativní gelová elektroforéza na 8,5% polyakrylamidu. Frakce obsahující GPVI se shromáždí a dají samostatný prijh nři rcanadýze. Vyčištěný QPVT testuje ua schopnost blokovat shlukování destiček kolagenem. Pozoruje se mírný inhibiční účinek po přidání podílů roztoku GPVI do suspenze destiček. Předběžnou inkubací GPVI s kolagenem před přidáním směsi do suspenze destiček se však může agregaci zabránit způsobem závislým na dávce. Tyto destičky se dále agregovaly po přidání čerstvého kolagenu. Za neredukčních podmínek má izolovaný protein Mr 62 kDa s posunem směrem k mírně vyšší Mr (65 kDa) při redukčních podmínkách. Jelikož se zjistilo, že zakončení GPVI je blokováno, digeroval se protein s enzymy LysC a LysC/AspN, což vytvořilo 4 a 6 peptidů, za kterých byla sekvence získána. Peptidy se oddělí reverzní fázovou chromatografií HPLC na sloupci C4 a sekveneují se Edmanovým způsobem. Sekvence aminokyselin těchto peptidů jsou v translatované sekvenci cDNA podtrženy (obr. 1).
Průmyslová využitelnost
Glykoprotein VI (GPVI) zvláště rekombinantní GPVI pro výrobu farmaceutických prostředků k léčení poruch a patologických příhod souvisejících přímo nebo nepřímo s poruchami srážení krve a dále pro skríningové testy při hledání možných inhibitorů GPVI vázaných na membrány k zabránění interakcím destiček a kolagenu.
Claims (9)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. DNA kódující glykoprotein VI obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 nebo jeho biologicky aktivní fragmenty, který se vážou ke kolagenu.
- 2. DNA podle nároku I obsahující sekvenci SEQ ID NO: 1 nebo její fragmenty, které kódují biologicky aktivní fragmenty glykoproteinů VI, které se vážou ke kolagenu.
- 3. DNA podle nároku 1 nebo 2 tvořená sekvencí SEQ ID NO: 1.
- 4. DNA podle některého z nároků 1 až 3 kódující glykoprotein VI obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 2 a SEQ ID NO: 3,-9CZ 302693 B6
- 5. Rekombinantní lidský glykoprotein VI obsahující aminokyselinovou sekvenci SF5Q ID NO; 3.
- 6. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje glykoprotein VI 5 obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 podle nároku 5 a farmaceuticky přijatelné ředidlo, nosič nebo excipient.
- 7. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že dále obsahuje farmakologicky účinnou látku zvolenou zc souboru sestávajícího z antikoagulantu, thrombolo lytíekých činidel, antagonistů receptorů krevních destiček odlišných od glykoproteinů VI a antagonístu ADP-receptoru.
- 8. Použití rekombinantního glykoproteinů VI obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 podle nároku 5 ve skríningovém prostředku pro detekci specifických inhibitorů is interakcí destička-kolagen.
- 9. Použití rekombinantního glykoproteinů VI obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 3 podle nároku 5 pro výrobu léčiva pro léčení thrombotiekýeh a kardiovaskulárních příhod a poruch se vztahem k interakcím destička - kolagen.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99109094 | 1999-05-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20013989A3 CZ20013989A3 (cs) | 2002-02-13 |
| CZ302693B6 true CZ302693B6 (cs) | 2011-09-07 |
Family
ID=8238132
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20013989A CZ302693B6 (cs) | 1999-05-07 | 2000-04-25 | Rekombinantní lidský glykoprotein VI, DNA, která ho kóduje a farmaceutický prostredek, který ho obsahuje |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US7928066B1 (cs) |
| EP (3) | EP2341141B1 (cs) |
| JP (2) | JP5480457B2 (cs) |
| KR (1) | KR100703592B1 (cs) |
| CN (1) | CN1253569C (cs) |
| AR (1) | AR023848A1 (cs) |
| AT (1) | ATE393223T1 (cs) |
| AU (1) | AU775952B2 (cs) |
| BR (1) | BRPI0010325B1 (cs) |
| CA (1) | CA2372515C (cs) |
| CY (2) | CY1108190T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ302693B6 (cs) |
| DE (1) | DE60038675T2 (cs) |
| DK (2) | DK2341141T3 (cs) |
| ES (2) | ES2534652T3 (cs) |
| HK (1) | HK1045714B (cs) |
| HU (1) | HUP0201049A2 (cs) |
| MX (1) | MXPA01011274A (cs) |
| NO (1) | NO333408B1 (cs) |
| PL (1) | PL204449B1 (cs) |
| PT (2) | PT1177289E (cs) |
| RU (1) | RU2287580C2 (cs) |
| SI (1) | SI1177289T1 (cs) |
| SK (1) | SK15762001A3 (cs) |
| WO (1) | WO2000068377A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200110071B (cs) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2287580C2 (ru) | 1999-05-07 | 2006-11-20 | Авентис Фарма Дойчланд Гмбх | Рекомбинантный рецептор коллагена на тромбоцитах гликопротеин vi и его применение в фармацевтике |
| US6245527B1 (en) | 1999-06-30 | 2001-06-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid molecules encoding glycoprotein VI and recombinant uses thereof |
| US7291714B1 (en) * | 1999-06-30 | 2007-11-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| US20040001826A1 (en) | 1999-06-30 | 2004-01-01 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| WO2001016321A1 (en) * | 1999-09-01 | 2001-03-08 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Platelet membrane glycoprotein vi (gpvi) dna and protein sequences, and uses thereof |
| EP1224942A1 (en) * | 2001-01-23 | 2002-07-24 | Bernhard Dr. Nieswandt | Use of JAQ1 (monoclonal antibody anti GPVI) as a medicament for the protection against thrombotic diseases |
| AU2002333241B2 (en) * | 2001-07-18 | 2008-09-18 | Merck Patent Gmbh | Glycoprotein VI fusion proteins |
| US7531178B2 (en) | 2002-06-07 | 2009-05-12 | Trigen Gmbh | Immunoadhesin comprising a glycoprotein VI domain |
| EP1369128A1 (en) | 2002-06-07 | 2003-12-10 | Procorde GmbH | Inhibitors of glycoprotein VI and their therapeutic use |
| US20070071744A1 (en) | 2002-06-07 | 2007-03-29 | Gotz Munch | Agents which bind to epitopes of glycoprotein VI |
| DE102004017295A1 (de) * | 2004-04-05 | 2005-11-03 | Zlb Behring Gmbh | Verbindungen, welche die Entfernung von Rezeptoren von Zelllmembranen bewirken oder verhindern, und Verfahren zu ihrem Nachweis |
| WO2005111083A2 (en) | 2004-04-29 | 2005-11-24 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Antibodies specific for glycoprotein vi and methods of producing these antibodies |
| US7645592B2 (en) | 2004-04-29 | 2010-01-12 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Glycoprotein VI antibodies and methods of use thereof |
| US20090041783A1 (en) | 2005-04-28 | 2009-02-12 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | Anti-platelet membrane glycoprotein vi monoclonal antibody |
| US20100297116A1 (en) * | 2007-10-31 | 2010-11-25 | Yongge Liu | Uses of a glycoprotein vi (gpvi) inhibitor |
| EP3150750B1 (en) | 2011-04-08 | 2018-12-26 | Prognosys Biosciences, Inc. | Peptide constructs and assay systems |
| EP3184544A1 (en) * | 2015-12-23 | 2017-06-28 | Julius-Maximilians-Universität Würzburg | Glycoprotein v inhibitors for use as coagulants |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2143416C (en) | 1993-07-01 | 2003-06-10 | Jurgen Hemberger | Inhibitor of collagen-stimulated platelet aggregation |
| NZ275492A (en) * | 1993-10-22 | 1998-05-27 | Ellerman Pharm Ltd | Peptide analogues of platelet-derived growth factor |
| WO1998031806A2 (en) * | 1997-01-21 | 1998-07-23 | Human Genome Sciences, Inc. | Fc RECEPTORS AND POLYPEPTIDES |
| EP0896002A4 (en) * | 1997-01-29 | 2005-02-02 | Toray Industries | CHIMERIC PROTEINS, THEIR HETERODIMER COMPLEXES AND BLOOD PLATE REPLACEMENT |
| RU2287580C2 (ru) | 1999-05-07 | 2006-11-20 | Авентис Фарма Дойчланд Гмбх | Рекомбинантный рецептор коллагена на тромбоцитах гликопротеин vi и его применение в фармацевтике |
| US7291714B1 (en) * | 1999-06-30 | 2007-11-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| US20040001826A1 (en) * | 1999-06-30 | 2004-01-01 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Glycoprotein VI and uses thereof |
| US6245527B1 (en) * | 1999-06-30 | 2001-06-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid molecules encoding glycoprotein VI and recombinant uses thereof |
| WO2001016321A1 (en) * | 1999-09-01 | 2001-03-08 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Platelet membrane glycoprotein vi (gpvi) dna and protein sequences, and uses thereof |
| AU2002333241B2 (en) | 2001-07-18 | 2008-09-18 | Merck Patent Gmbh | Glycoprotein VI fusion proteins |
| EP1538165A1 (en) | 2003-12-03 | 2005-06-08 | Procorde GmbH | Inhibitors of glycoprotein VI based on monoclonal antibody hgp 5c4 |
-
2000
- 2000-04-25 RU RU2001132140/13A patent/RU2287580C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 AU AU45555/00A patent/AU775952B2/en not_active Ceased
- 2000-04-25 DK DK11001216T patent/DK2341141T3/en active
- 2000-04-25 DE DE60038675T patent/DE60038675T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 EP EP11001216.8A patent/EP2341141B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 MX MXPA01011274A patent/MXPA01011274A/es active IP Right Grant
- 2000-04-25 SK SK1576-2001A patent/SK15762001A3/sk unknown
- 2000-04-25 US US09/959,802 patent/US7928066B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 AT AT00927035T patent/ATE393223T1/de active
- 2000-04-25 ES ES11001216.8T patent/ES2534652T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 KR KR1020017014164A patent/KR100703592B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 ES ES00927035T patent/ES2304347T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 HU HU0201049A patent/HUP0201049A2/hu unknown
- 2000-04-25 EP EP08004264.1A patent/EP1942186B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 SI SI200030996T patent/SI1177289T1/sl unknown
- 2000-04-25 PL PL351437A patent/PL204449B1/pl unknown
- 2000-04-25 CA CA2372515A patent/CA2372515C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 JP JP2000616343A patent/JP5480457B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 PT PT00927035T patent/PT1177289E/pt unknown
- 2000-04-25 PT PT110012168T patent/PT2341141E/pt unknown
- 2000-04-25 EP EP00927035A patent/EP1177289B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-25 WO PCT/EP2000/003683 patent/WO2000068377A1/en active IP Right Grant
- 2000-04-25 BR BRPI0010325A patent/BRPI0010325B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 CN CNB008072922A patent/CN1253569C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-25 CZ CZ20013989A patent/CZ302693B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-04-25 DK DK00927035T patent/DK1177289T3/da active
- 2000-05-04 AR ARP000102136A patent/AR023848A1/es unknown
-
2001
- 2001-11-06 NO NO20015420A patent/NO333408B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-12-06 ZA ZA200110071A patent/ZA200110071B/xx unknown
-
2002
- 2002-09-26 HK HK02107061.7A patent/HK1045714B/zh not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-03-21 US US11/689,385 patent/US8198030B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2007-03-21 US US11/689,392 patent/US20070172480A1/en not_active Abandoned
-
2008
- 2008-07-11 CY CY20081100731T patent/CY1108190T1/el unknown
-
2010
- 2010-12-20 JP JP2010283409A patent/JP5554696B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-03-11 US US13/046,210 patent/US8278430B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2015
- 2015-04-09 CY CY20151100344T patent/CY1116336T1/el unknown
-
2016
- 2016-03-08 US US15/064,157 patent/US20160207976A1/en not_active Abandoned
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Gibbins J.M. et al.: " The p85 subunit of phosphatidylinositol 3-kinase associated with the Fc receptor gamma-chain and linker for activator of T cells (LAT) in plateletsà", J. Biol. Chem., Vol. 273(51), 34437-34443, 1998 * |
| Gibbins J.M. et al.: "Glycoprotein VI is the collagen receptor in platelets which underlies tyrosine phosphorylation of the Fc receptor gamma-chain", FEBS LETTERS, vol. 413(2), 255-259, 1997 * |
| Jandrot-Perrus M. et al.: "Adhesion and activation of human platelets induced by convulxin involve glycoprotein VI and integrin alpha-2-beta-1", J. Biol. Chem., Vol. 272(43), 27035-27041, 1997 * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8198030B2 (en) | Recombinant platelet collagen receptor glycoprotein VI and its pharmaceutical use | |
| US6998469B2 (en) | Platelet membrane glycoprotein VI (GPVI) DNA and protein sequences, and uses thereof | |
| AU2002333241B2 (en) | Glycoprotein VI fusion proteins | |
| PL200384B1 (pl) | Polipeptyd blokujący adhezję płytek krwi, sposób jego otrzymywania, zastosowanie i zawierający go preparat farmaceutyczny | |
| AU2002333241A1 (en) | Glycoprotein VI fusion proteins | |
| JP2002501201A (ja) | インテグリンアンタゴニスト／アゴニスト仲介性疾患のリスク評価 | |
| JP2010506930A (ja) | Ｔｌｒ１４の活性を変調するための組成物および方法 | |
| JPH1057060A (ja) | 第ＶＩＩＩ因子凝固活性およびｖＷＦ結合活性を示す医薬製剤 | |
| O'Brien | The role of protease activated receptors in vascular endothelial thrombin responses | |
| Perugini et al. | The Merozoite Surface Protein 1 complex is |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20180425 |