ES2315377T3 - Inhibidores de la dna-pk. - Google Patents

Abstract

Compuesto de la fórmula Ia: (Ver fórmula) o su isómero, su sal o su forma protegida químicamente, donde, R 1 y R 2 son independientemente hidrógeno, un grupo alquilo C1 - 7, un grupo cicloalquilo C3 - 7, un grupo alquenilo C2 - 7, un grupo cicloalquenilo C3 - 7, un grupo alquinilo C2 - 7, un grupo heterociclilo C3 - 20 o un grupo arilo C5 - 20 o bien pueden formar junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos un anillo heterocíclico con 4 a 8 átomos en el anillo; R 3 y R 4 son juntos -A-B, los cuales representan colectivamente un anillo benceno fusionado substituido en la posición 8 por un grupo heterocíclico tricíclico C3 - 20 o en la posición 6-, 7- u 8- con un grupo fenilo sustituido por fenilo.

Description

Inhibidores de la ADN-PK.

La presente invención hace referencia a compuestos que actúan como inhibidores de la ADN-PK, su uso y su síntesis.

La proteína quinasa dependiente de ADN (ADN-PK, del inglés: ADN-dependent protein kinase) es una serina/treonina proteín-quinasa nuclear que se activa mediante la asociación con el ADN. Los datos bioquímicos y genéticos han revelado que esta quinasa está compuesta de una gran subunidad catalítica, denominada ADN-PKcs, y un componente regulador, denominado Ku. La ADN-PK ha demostrado ser un componente crucial para la maquinaria de reparación de la rotura de doble cadena de ADN y del aparato de recombinación V(D)J. Además, un trabajo reciente involucraba a los componentes de la ADN-PK en otros procesos distintos, en donde se incluía la modulación de la estructura de la cromatina y el mantenimiento del telómero. (Smith, G. C. M. y Jackson, S.P., Genes and Dev. 13: 916-934 (1999)).

El ADN humano se encuentra constantemente bajo el ataque de productos intermedios de oxígeno reactivo, principalmente procedentes de subproductos del metabolismo oxidativo que hemos desarrollado para el suministro energético. Las especies reactivas de oxígeno son capaces de producir roturas de cadena simple en el ADN y, si dos de éstas se generan en lugares próximos, roturas de cadena doble del ADN (DSBs, del inglés double strande breaks). Además, las roturas de cadena simple y doble pueden inducirse cuando una horquilla de replicación de ADN encuentra un molde dañado, y son generadas mediante agentes exógenos tales como la radiación ionizante (RI) y ciertos medicamentos anti-cancerígenos (por ejemplo, la bleomicina). Las DSBs también ocurren como productos intermedios de la recombinación específica de sitio V(D)J, un proceso que es crítico para la generación del sistema inmune funcional de vertebrados. Si las DSBs de ADN no se reparan o se reparan incorrectamente, se inducen mutaciones y/o aberraciones cromosómicas, que a su vez conducen a la muerte celular. Para combatir la seria amenaza planteada por las DSBs de ADN, las células eucariotas han desarrollado varios mecanismos para facilitar su reparación. En eucariotas superiores, el mecanismo predominante es la unión de extremos no homólogos de ADN (NHEJ, del inglés: non-homologous end-joining) también conocida como recombinación ilegítima. La ADN-PK juega un papel clave en este mecanismo.

Los estudios bioquímicos sobre la ADN-PK revelaron que ésta se activa más fuertemente por las DSBs de ADN, lo que sugiere que podría jugar un papel en el reconocimiento de las lesiones del ADN. Esto estimuló las investigaciones sobre el papel potencial de ADN-PKcs y de Ku en la reparación del ADN, y llevó a la identificación de líneas celulares que eran radiosensibles debido a mutaciones en los componentes de la ADN-PK (Smith y Jackson, 1999). El clonaje del ADN-c de la subunidad ADN-PKcs reveló que ésta corresponde a un polipéptido de \sim470 kDa, cuyo extremo amino libre, de \sim3500 residuos de aminoácidos, no parece tener una homología significativa con otras proteínas caracterizadas (Hartley, K.O., et al., Cell 82: 849-856 (1995)). Más significativamente, los \sim500 residuos de aminoácidos del extremo carboxilo libre de la subunidad ADN-PKcs comprenden un dominio catalítico que entra dentro de la familia de la PI3-quinasa. Aunque este hecho inicialmente sugería que la ADN-PK podría ser capaz de fosforilar los fosfolípidos de inositol, como ciertos miembros bien caracterizados de la familia de la PI3-quinasa (Toker, A. y Cantley, L.C., Nature 387: 673-676 (1997)), la evidencia muestra que la ADN-PK posee actividad proteín-quinasa, pero no lípido-quinasa (Hartley y col. 1995; Smith y col., 1999). Aproximadamente por la misma fecha que el clonaje del ADN-c de la subunidad ADN-PKcs, se identificaron y clonaron los genes y los ADNs-c de otras proteínas grandes parecidas a la PI 3-quinasa (PIKL, del inglés: PI 3-kinase like) (Jackson, S.P., Cancer Surv. 28: 261-279 (1996)). Se ha demostrado que estas proteínas están implicadas en el control de la transcripción, el ciclo celular y/o la estabilidad del genoma en organismos desde la levadura al hombre. La subunidad ADN-PKcs parece estar restringida a eucariotas superiores.

Además de la subunidad ADN-PKcs, probablemente el miembro mejor caracterizado de la familia PIKL es la ATM, la proteína deficiente en el trastorno humano ataxia-telangiectasia con predisposición a la neurodegeneración y el cáncer (A-T; Lavin, M.F. y Shiloh, Y., Annu. Rev. Immunol. 15: 177-202 (1997)). La ATM se ha relacionado estrechamente con la detección y señalización de lesiones en el ADN.

Anteriormente, también se había hallado que el inhibidor se la PI 3-quinasa, LY294002:

1

era capaz de inhibir la función de la ADN-PK in vitro (Izzard, R.A., et al., Cancer Res. 59: 2581-2586 (1999)). CI_{50} (concentración a la que se pierde el 50% de la actividad enzimática) para el LY294002 frente a la ADN-PK es \sim1 \muM, la misma que para la PI 3-quinasa. Además, se ha demostrado que el LY294002 también es capaz de sensibilizar débilmente las células al efecto de la IR (Rosenzweig, K.E., y col., Clin. Cancer Res. 3: 1149-1156 (1999)).

Dada la implicación de la ADN-PK en los procesos de reparación del ADN, y que el LY294002 ha demostrado radiosensibilizar a células de mamífero en cultivo, una aplicación (específica) de los fármacos inhibidores de la ADN-PK podría ser actuar como agentes que puedan aumentar la eficacia de tanto la quimioterapia como la radioterapia. Los inhibidores de la ADN-PK podrían también resultar útiles en el tratamiento de las enfermedades retrovirales. Por ejemplo, se ha demostrado que la pérdida de la actividad de la ADN-PK reprime severamente los procesos de integración retroviral (Daniel R, et al., Science, 284:644-7 (1999)). Los inhibidores de la ADN-PK también pueden tener potencial como moduladores del sistema inmune. La ADN-PK también ha demostrado jugar un papel importante en el mantenimiento del telómero, y por tanto, los inhibidores de la ADN-PK pueden jugar un papel en la modulación de las funciones del telómero (Goytisolo, y col., Mol. Cell. Biol., 21:3642-3651 (2001)).

Los presentes inventores han descubierto ahora compuestos que presentan inhibición de la ADN-PK; estos compuestos también presentan inhibición selectiva de la ADN-PK respecto a la familia de las PI 3-quinasas y la ATM.

De esta manera, el primer aspecto de la invención proporciona compuestos de acuerdo con la reivindicación 1.

Un segundo aspecto de la invención, proporciona el uso de compuestos tal como se definen en el primer aspecto de la invención en la preparación de un medicamento para su uso de ayuda en la terapia contra el cáncer o para potenciar las células tumorales para el tratamiento con radiación ionizante o agentes quimioterapeúticos.

Un tercer aspecto de la invención proporciona el uso de los compuestos tal como se definen en el primer aspecto de la invención en la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades retrovirales o enfermedades que mejoran con la inhibición de la ADN-PK.

Otro aspecto más de la invención proporciona un compuesto activo tal como se describe en la presente invención para su uso en un procedimiento de tratamiento del cuerpo humano o animal, preferentemente en la forma de una composición farmaceútica.

Otro aspecto más de la invención proporciona composiciones farmaceúticas que comprenden compuestos tal como se definen en el primer aspecto de la invención.

Definiciones

El término "anillo aromático" se utiliza aquí en el sentido convencional para referirse a anillos aromáticos cíclicos, esto es, estructuras cíclicas que tienen de 5 a 7 átomos en el anillo con orbitales de electrones-\pi deslocalizados. Preferentemente, los anillos aromáticos son aquellos que cumplen las regla de Hückel 4n+2, es decir, donde el número se electrones-\pi es 4n+2, donde n representa el número de átomos en el anillo. Es preferible que el anillo aromático tenga seis átomos.

El anillo de benceno fusionado representado por -A-B- puede estar substituido en la posición 8 por el grupo heterocíclico C_{3-20} tricíclico o en las posiciones 6-, 7- u 8- por un grupo fenilo substituido por un fenilo.

El término anillo carbocíclico hace referencia a un anillo formado de 5 a 7 átomos de carbono unidos covalentemente. El anillo puede contener uno o más enlaces dobles carbono-carbono. Ejemplos de anillos carbocíclicos incluyen al ciclopentano, ciclohexano, cicloheptano, ciclopenteno, ciclohexeno y ciclohepteno.

Alquilo C_{1-7}: El término "alquilo C_{1-7}", tal como se usa aquí, hace referencia a una fracción monovalente obtenida al eliminar un átomo de hidrógeno de un compuesto hidrocarburo C_{1-7} que contiene de 1 a 7 átomos de carbono, que puede ser alifático o alicíclico, o una combinación de los mismos, y que puede ser saturado, parcialmente insaturado, o totalmente insaturado.

Ejemplos de grupos alquilo C_{1-7} lineales saturados incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, n-butilo y n-pentilo (amilo).

Ejemplos de grupos alquilo C_{1-7} ramificados saturados incluyen, pero no se limitan a, isopropilo, isobutilo, sec-butilo, tert-butilo, y neo-pentilo.

Ejemplos de grupos alquilo C_{1-7} alicíclicos saturados (también referidos como grupos "cicloalquilo C_{3-7}") incluyen, pero no se limitan a, grupos tales como ciclopropilo, cicobutilo, ciclopentilo, y ciclohexilo, al igual que grupos substituidos (por ejemplo, grupos que comprenden tales grupos), tales como metilciclopropilo, dimetilciclopropilo, metilciclobutilo, dimetilciclobutilo, metilciclopentilo, dimetilciclopentilo, metilciclohexilo, dimetilciclohexilo, ciclopropilmetilo y ciclohexilmetilo.

Ejemplos de grupos alquilo C_{1-7} insaturados que contienen uno o más enlaces dobles carbono-carbono (también referidos como grupos "alquinilo C_{2-7}") incluyen, pero no se limitan a, etenilo (vinilo -CH=CH_{2}), 2-propenilo (alilo, -CH-CH=CH_{2}), isopropenilo (-C(CH_{3})=CH_{2}), butenilo, pentenilo, y hexenilo.

Ejemplos de grupos alquilo C_{1-7} insaturados que tienen uno o más enlaces triples carbono-carbono (también conocidos como grupos "alquinilos C_{2-7}" incluyen, pero no se limitan a, etinilo (etilo) y 2-propinilo (propargilo).

Ejemplos de grupos alquilo C_{1-7} alicíclicos (carbocíclicos) insaturados que tienen uno o varios enlaces dobles carbono-carbono (también conocidos como grupos "cicloalquenilo C_{3-7}") incluyen, pero no se limitan a, grupos no substituidos como el ciclopropenilo, ciclobutenilo, ciclopentenil, y ciclohexenilo, y también grupos substituidos (por ejemplo, grupos que comprenden dichos grupos) tales como ciclopropenilmetilo y ciclohexenilmetilo.

Heterociclilo C_{3-20}: El término "heterociclilo C_{3-20}", tal como se usa aquí, hace referencia a una fracción monovalente obtenida por la eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo del anillo de un compuesto heterocíclico C_{3-20}, dicho compuesto tiene un solo anillo, o dos o más anillos (por ejemplo spiro, fusionado, o con puente) y que tienen de 3 a 20 átomos en el anillo, átomos de los cuales de 1 a 10 son heteroátomos anulares, y en donde al menos uno de los anillos mencionados es un anillo heterocíclico. Preferentemente, cada anillo tiene de 3 a 7 átomos en el anillo, de los que de 1 a 4 son heteroátomos anulares. "C_{3-20}" se refiere a los átomos en el anillo, tanto a átomos de carbono como heteroátomos.

Ejemplos de grupos heterociclilo C_{3-20} que tengan un átomo de nitrógeno en el anillo incluyen, pero no se limitan a, aquellos que derivan de la aziridina, la azetidina, las pirrolidinas (tetrahidropirrol), la pirrolina (por ejemplo, 3-pirrolina, 2,5-dihidropirrol), 2H-pirrol o 3H-pirrol (isopirrol, isoazol), piperidina, dihidropiridina, tetrahidropiridina, y azepina.

Ejemplos de grupos heterocíclicos C_{3-20} que tienen un átomo de oxígeno en el anillo incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados del oxirano, oxetano, oxolano (tetrahidrofurano), oxol (dihidrofurano), oxano (tetrahidropirano), dihidropirano, pirano (C_{6}), y la oxepina. Los ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} substituídos, incluyen azúcares, en forma cíclica, por ejemplo, furanosas y piranosas, incluyendo, por ejemplo, ribosa, lixosa, xilosa, galactosa, sacarosa, fructosa, y arabinosa.

Ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} que tienen un único anillo de azufre incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados del tiirano, tietano, tiolano (tetrahidrotiofeno), tiano (tetrahidrotiopirano), y tiepano.

Ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} que tienen dos átomos de oxígeno en el anillo incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados del dioxolano, dioxano, y del dioxepano.

Ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} que tienen dos átomos de nitrógeno en el anillo incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de la imidazolina, pirazolidina (diazolidina), imidazolina, pirazolina (dihidropirazol), y piperazina.

Ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} que tienen un átomo de nitrógeno en el anillo y un átomo de oxígeno en el anillo incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de tetrahidroxazol, dihidroxazol, tetrahidroisoxazol, dihidroisoxazol, morfolina, tetrahidroxazina, dihidrooxazina, y oxazina.

Ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} que tienen un átomo de oxígeno en el anillo y un átomo de azufre en el anillo incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados del oxatiolano y oxatiano (tioxano).

Ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} que tienen un átomo de nitrógeno en el anillo y un átomo de azufre en el anillo incluyen pero no se limitan a, aquellos derivados de la tiazolina, tiazolidina, y tiomorfolina.

Otros ejemplos de grupos heterociclilos C_{3-20} incluyen, pero no se limitan a, oxadiazina y oxatiazina.

Ejemplos de grupos de heterociclilos que adicionalmente llevan uno o más grupos oxo (=O), incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de:

heterociclos C_{5}, como furanona, pirona, pirrolidona (pirrolidona), pirazolona (pirazolinona), imidazolidona, tiazolona, isotiazolona;

heterociclos C_{6}, como piperidinona (piperidona), piperidinediona, piperazinona, piperazinadiona, piridazinona, y pirimidinona (por ejemplo, citosina, timina, uracilo), y ácido barbitúrico;

heterociclos fusionados, como oxindol, purinona (por ejemplo guanina), benzoxazolinona, benzopirona (por ejemplo cumarina);

anhídridos cíclicos (-C(=O)-O-C(=O)- en un anillo), que incluyen pero no se limitan a, anhídrido maléico, anhídrido succínico, y anhídrido glutárico;

carbonatos cíclicos (-O-C(=O)-O- en un anillo) como el cabonato de etileno y el carbonato de 1,2-propileno;

imidas (-C(=O)-NR-C(=O)- en un anillo), que incluyen pero no se limitan a, succinimida, maleimida, ftalimida, y glutarimida;

lactonas (ésteres cíclicos, -O-C(=O)- en un anillo), que incluyen pero no se limitan a, \beta-propiolactona, \gamma-butirolactona, \delta-valerolactona (2-piperidona), y \varepsilon-caprolactona;

lactamas (amidas cíclicas, -NR-C(=O)- en un anillo), que incluyen, pero no se limitan a, \beta-propiolactama, \gamma-butirolactama (2-pirrolidona), \delta-valerolactama, y \varepsilon-caprolactama;

carbamatos cíclicos (-O-C(=O)-NR- en un anillo), tales como la 2-oxazolidona;

ureas cíclicas (-NR-C(=O)-NR- en un anillo), tal como la 2-imidazolidona y la pirimidin-2,4-diona (por ejemplo, la timina y el uracilo).

Arilo C_{5-20}: El término "arilo C_{5-20}" tal como se usa aquí, se refiere a una fracción monovalente obtenida por eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo del anillo aromático de un compuesto aromático C_{5-20}, sea un compuesto con un anillo, o dos o más anillos (por ejemplo fusionados), y que tiene de 5 a 20 átomos en el anillo, y en donde al menos uno de los anillos mencionados es un anillo aromático. Preferentemente, cada anillo tiene de 5 a 7 átomos en el anillo.

Los átomos en el anillo pueden ser todos átomos de carbono, como en los "grupos carboarilo", en cuyo caso el grupo se referirá como un grupo "carboarilo C_{5-20}".

Ejemplos de grupos arilo C_{5-20} que no tienen heteroátomos en el anillo (es decir, grupos carboarilo C_{5-20}) incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados del benceno (es decir, fenilo)(C_{6}), naftaleno (C_{10}), antraceno (C_{14}), fenantreno (C_{14}), naftaceno (C_{18}), y pireno (C_{16}).

Ejemplos de grupos arilo que comprenden anillos fusionados, uno de los cuales no es un anillo aromático, incluyen, pero no se limitan a, grupos derivados del indeno y el fluoreno.

Alternativamente, los átomos del anillo pueden incluir uno o más heteroátomos, incluyendo, pero no se limitan a, oxígeno, nitrógeno y azufre, como en los "grupos heteroarilo". En este caso, el grupo puede ser referido convenientemente como un grupo "heteroarilo C_{5-20}", en donde "C_{5-20}" se refiere a los átomos del anillo, tanto a átomos de carbono como heteroátomos. Preferentemente, cada anillo tiene de 5 a 7 átomos en el anillo, de los cuales de 0 a 4 son heteroátomos anulares.

Ejemplos de grupos heteroarilo C_{5-20} incluyen, pero no se limitan a grupos heteroarilo C_{5} derivados del urano (oxol), tiofeno (tiol), pirrol (azol), imidazol (1,3-diazol), pirazol (1,2-diazol), triazol, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, oxadiazol, y oxatriazol; y grupos heteroarilo C_{6} derivados de la isoxazina, piridina (azina), piridazina (1,2-diazina), pirimidina (1,3-diazina; por ejemplo, citosina, timina, uracilo), pirazina (1,4-diazina), triazina, tetrazol, y oxadiazol (furazano).

Ejemplos de grupos heterocíclicos C_{5-20} (algunos de los cuales son grupos heteroarilo C_{5-20}) que comprenden anillos fusionados, incluyen pero no se limitan a, grupos heterocíclicos C_{9} derivados del benzofurano, isobenzofurano, indol, isoindol, purina (por ejemplo, adenina, guanina), benzotiofeno, bencimidazol; grupos C_{10} heterocíclicos derivados de la quinolina, isoquinolina, benzodiazina, piridopiridina, quinoxalina; grupos C_{13} heterocíclicos derivados del carbazol, dibenzotiofeno, dibenzofurano; grupos C_{14} heterocíclicos derivados de la acridina, el xantano, fenoxatina, fenazina, fenoxazina, fenotiazina.

Los grupos alquilo C_{1-7}, heterociclilos C_{3-20} y arilos C_{5-20} de más arriba, tanto solos como formando parte de otro substituyente, podrían ellos mismos ser substituidos opcionalmente con uno o más grupos seleccionados de ellos mismos y los substituyentes adicionales que se mencionan más abajo.

Halo: -F, -Cl, -Br, e -I.

Hidroxi: -OH.

Éter: -OR, en donde R es un substituyente éter, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7} (al que también se refiere como un grupo alcoxi C_{1-7}, discutido más abajo), un grupo heterociclilo C_{3-20} (también referido como un grupo heterocicliloxilo C_{3-20}), o un grupo arilo C_{5-20} (también referido como grupo ariloxi C_{5-20}), preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}.

Alcoxi C_{1-7}: -OR, en donde R es un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos alcoxi C_{1-7} incluyen, pero no se limitan a, -OCH_{3} (metoxi), -OCH_{2}CH_{3} (etoxi) y -OC(CH_{3})_{3} (tert-butoxi).

Oxo (ceto, -ona): =O. Ejemplos de compuestos cíclicos y/o compuestos que tienen, como substituyente, un grupo oxo (=O) incluyen, pero no se limitan a, carbociclos tales como la ciclopentanona y la ciclohexanona; heterociclos, tales como la pirona, pirrolidona, pirazolona, pirazolinona, piperidona, piperidindiona, piperazindiona, e imidazolidona; anhídridos cíclicos, incluyendo pero no limitándose a, anhídrido maléico y anhídrido succínico; carbonatos cíclicos, tales como carbonato de propileno; imidas, incluyendo, pero no limitándose a, succinimida y maleimida; lactonas (ésteres cíclicos, -O-C(=O)- en un anillo), incluyendo, pero no limitándose a, \beta-propiolactona, \gamma-butirolactona, \delta-valerolactona, y \varepsilon-caprolactona; y lactamas (amidas cíclicas, -NH-C(=O)- en un anillo), incluyendo, pero no se limitan a, \beta-propiolactama, \gamma-butirolactama (2-pirrolidona), \delta-valerolactama, y \varepsilon-caprolactama.

Imino (imina): =NR, en donde R es un substituyente imino, por ejemplo hidrógeno, grupo alquilo C_{1-7}, grupo heterocíclico C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente hidrógeno o un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos ésteres incluyen, pero no se limitan a, =NH, =NMe, =NEt, and =NPh.

Formilo (carbaldehido, carboxaldehido): -C(=O)H.

Acilo (ceto): -C(=O)R, en donde R es un substituyente acilo, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7} (también referido como alquilacilo C_{1-7} o alcanoilo C_{1-7}) un grupo heterociclilo C_{3-20} (también referido como heterociclilacilo C_{3-20}), o un grupo arilo C_{5-20} (también referido como arilacilo C_{5-20}), preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos acilo incluyen, pero no se limitan a, -C(=O)CH_{3} (acetilo), -C(=O)CH_{2}CH_{3} (propionilo), -C(=O)C(CH_{3})_{3} (butirilo), y -C(=O)Ph (benzoilo, fenona).

Carboxi (ácido carboxílico): -COOH.

Éster (carboxilato, éster de ácido carboxílico, oxicarbonilo): -C(=O)OR, en donde R es un substituyente éster, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos éster incluyen, pero no se limitan a, -C(=O)OCH_{3}, -C(=O)OCH_{2}CH_{3}, -C(=O)OC(CH_{3})_{3}, y -C(=O)OPh.

Aciloxi (éster reverso): -OC(=O)R, en donde R es un substitutente aciloxi, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos aciloxilo incluyen pero no se limitan a, -OC(=O)CH_{3} (acetoxi), -OC(=O)CH_{2}CH_{3}, -OC(=O)C(CH_{3})_{3}, -OC(=O)Ph, y -OC(=O)CH_{2}Ph.

Amido (carbamoilo, carbamilo, aminocarbonilo, carboxamida): -C(=O)NR^{1}R^{2}, en donde R^{1} y R^{2} son independientemente substituyentes amino, tal como se definen para los grupos amino. Ejemplos de grupos amido incluyen, pero no se limitan a, -C(=O)NH_{2}, -C(=O)NHCH_{3}, -C(=O)N(CH_{3})_{2}, -C(=O)NHCH_{2}CH_{3}, y -C(=O)N(CH_{2}CH_{3})_{2}, al igual que grupos amido en los que R^{1} y R^{2}, junto con el átomo de nitrógeno al que se encuentran unidos, forman una estructura heterocíclica como en, por ejemplo, piperidinocarbonilo, morfolinocarbonilo, tiomorfolinocarbonilo, y piperazinocarbonilo.

Acilamido (acilamino) -NR^{1}C(=O)R^{2}, donde R^{1} es un substituyente amida, por ejemplo, hidrógeno, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un hidógeno o un grupo alquilo C_{1-7} y R^{2} es un substituyente acilo, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterocicliclo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, hidrógeno o preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos acilamida incluyen, pero no se limitan a, -NHC(=O)CH_{3}, -NHC(=O)CH_{2}CH_{3}, y

-NHC(=O)Ph. R^{1} y R^{2} juntos pueden formar una estructura cíclica, como en, por ejemplo, succinimidilo, maleimidilo y ftalimidilo:

2

Acilureido: -N(R^{1})C(O)NR^{2}C(O)R^{3} donde R1 y R2 son independientemente substituyentes ureido, por ejemplo, hidrógeno, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferiblemente hidrógeno o un grupo alquilo C_{1-7}. R^{3} es un grupo acilo según lo definido para los grupos acilo. Ejemplos de grupos acilureido incluyen, pero no se limitan a, -NHCONHC (O)H, -NHCONMeC(O)H, -NHCONEtC(O)H, -NHCONMeC(O)Me, NHCONEtC(O)Et, -NMeCONHC(O)Et, -NMeCONHC( O)Me, -NMeCONHC(O)Et, -NMeCONMeC(O)Me,
-NMeCONEtC(O)Et, y -NMeCONHC(O)Ph.

Carbamato: -NR^{1}-C(O)-OR^{2} donde R^{1} es un substituyente amino según la definición para los grupos amino y R^{2} es un grupo éster según lo definido para los grupos éster. Ejemplos de grupos carbamato incluyen aunque no se limitan a, -NH-C(O)-O-Me,-NMe-C(O)-O-Me, -NH-C(O)-O-Et, -NMe-C(O)-O-t-butilo, y-NH-C(O)-O-Ph.

Tioamido (tiocarbamilo): -C(=S)NR^{1}R^{2}, donde R^{1} y R^{2} son independientemente substituyentes amino, según lo definido para los grupos amino. Ejemplos de los grupos amido incluyen, pero no se limitan a, -C(=S)NH_{2}, -C(=S)NHCH_{3}, -C(=S)N(CH_{3})_{2}, y -C(=S)NHCH_{2}CH_{3}.

Tetrazolilo: un anillo aromático de cinco miembros con cuatro átomos de nitrógeno y un átomo de carbono,

3

Amino: -NR^{1}R^{2}, donde R^{1} y R^{2} son independientemente substituyentes amino, por ejemplo, hidrógeno, un grupo alquilo C_{1-7} (también referido como C_{1-7} alquilamino o di-C_{1-7} alquilamino), un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferiblemente H o un grupo alquilo C_{1-7}, o, en el caso de un grupo amino "cíclico", R^{1} y R^{2}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman un anillo heterocíclico que tiene de 4 a 8 átomos en el anillo. Ejemplos de grupos amino incluyen, aunque no están limitados a, -NH_{2}, -NHCH_{3}, -NHC(CH_{3})_{2}, -N(CH_{3})_{2}, -N(CH_{2}CH_{3})_{2}, y
-NHPh. Ejemplos de grupos amino cíclicos incluyen aunque no se limitan a, aziridino, azetidino, pirrolidino, piperidino, piperazino, morfolino, y tiomorfolino.

Imino: =NR, donde R es un substituyente imino, por ejemplo, hidrógeno, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferiblemente H o un grupo alquilo C_{1-7}.

Amidina: -C(=NR)NR^{2}, donde cada R es un substituyente amidina, por ejemplo, hidrógeno, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferiblemente H o un grupo alquilo C_{1-7}.Un ejemplo de un grupo amidina es -C(=NH)NH_{2}.

Carbazoilo (hidrazincarbonilo): -C(O)-NN-R^{1} donde R^{1} es un substituyente amino según lo definido para los grupos amino. Ejemplos de los grupos azino incluyen, aunque no se limitan a, C(O)-NN-H, - C(O)-NN-Me, -C(O)-NN-Et, -C(O)-NN-Ph, y -C(O)-NN-CH_{2}-Ph.

Nitro: -NO_{2}.

Nitroso: -NO.

Azido: -N_{3}.

Ciano (nitrilo, carbonitrilo): -CN.

Isociano: -NC.

Cianato: -OCN.

Isocianato: -NCO.

Tiociano (tiocianato): -SCN.

Isotiociano (isotiocianato): -NCS.

Sulfidrilo (tiol, mercapto): -SH.

Tioéter (sulfuro): -SR, en donde R es un substituyente de tioéter, por ejemplo. Un grupo alquilo C_{1-7} (también denominado grupo alquiltio C_{1-7}) un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos alquiltio C_{1-7} incluyen, pero no se limitan a, -SCH_{3} y -SCH_{2}CH_{3}.

Disulfuro: -SS-R, en donde R es un substituyente disulfuro, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7} (también referido aquí como alquil disulfuro C_{1-7}). Ejemplos de grupos alquildisulfuro C_{1-7} incluyen pero no se limitan a, -SSCH_{3} and -SSCH_{2}CH_{3}.

Sulfona (sulfonilo): -S(=O)_{2}R, donde R es un substituyente sulfona, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos sulfona incluyen, aunque no están limitados a, -S(=O)_{2}CH_{3} (metanosulfonilo, mesilo), -S(=O)_{2}CF_{3} (triflilo), -S(=O)_{2}CH_{2}CH_{3}, -S(=O)_{2}C_{4}F_{9} (nonaflilo), -S (=O)_{2}CH_{2}CF_{3} (tresilo), -S(=O)_{2}Ph (fenilsulfonilo), 4-metilfenilsulfonilo (tosilo), 4-bromofenilsulfonilo (brosilo), y 4-nitrofenilo (nosilo).

Sulfina (sulfinilo, sulfóxido): -S(=O)R, donde R es un substituyente sulfina, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos sulfina incluyen, aunque no se limitan a, -S(=O)CH_{3} y -S(=O)CH_{2}CH_{3}.

Sulfoniloxi: -OS(=O)_{2}R, donde R es un substituyente sulfoniloxi, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos sulfoniloxi incluyen, aunque no se limitan a, -OS(=O)_{2}CH_{3} y -OS(=O)_{2}CH_{2}CH_{3}.

Sulfiniloxi: -OS(=O)R, donde R es un substituyente sulfiniloxi, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos sulfiniloxi incluyen, aunque no se limitan a, -OS(=O)CH_{3} y -OS(=O)CH_{2}CH_{3}.

Sulfamino: -NR^{1}S(=O)_{2}OH, donde R^{1} es un substituyente amino, según lo definido para los grupos amino. Ejemplos de grupos sulfamino incluyen, aunque no se limitan a, -NHS(=O)_{2}OH y -N(CH_{3})S(=O)_{2}OH.

Sulfonamino: -NR^{1}S(=O)_{2}R, donde R^{1} es un substituyente amino, según lo definido para los grupos amino, y R es un substituyente sulfonamino, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos sulfonamino incluyen, aunque no se limitan a, -NHS
(=O)_{2}CH_{3} y -N(CH_{3})S(=O)_{2}C_{6}H_{5}.

Sulfinamino: -NR^{1}S(=O)R, donde R^{1} es un substituyente amino, según lo definido para grupos amino, y R es un substituyente sulfinamino, por ejemplo un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de grupos sulfinamino incluyen, aunque no se limitan a, -NHS(=O)CH_{3} y -N(CH_{3})S(=O)C_{6}H_{5}.

Sulfamilo: -S(=O)NR^{1}R^{2}, donde R^{1} y R^{2} son independientemente substituyentes amino, según lo definido para grupos amino. Ejemplos de grupos sulfamilo incluyen, aunque no se limitan a, -S(=O)NH_{2}, -S(=O)NH(CH_{3}), -S(=O)N(CH_{3})_{2}, -S(=O)NH (CH_{2}CH_{3}), -S(=O)N(CH_{2}CH_{3})_{2}, y -S(=O)NHPh.

Sulfonamino: -NR^{1}S(=O)_{2}R, donde R^{1} es un substituyente amino, según lo definido para grupos amino, y R es un substituyente sulfonamino, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente un grupo alquilo C_{1-7}._{ }Ejemplos de grupos sulfonamino incluyen, aunque no se limitan a, -NHS(=O)_{2}
CH_{3} y -N(CH_{3}) (=O)_{2}C_{6}H_{5}. Una clase especial de grupos sulfonamino son aquellos derivados de sultamas- en estos grupos uno de los R^{1} y R es un grupo arilo C_{5-20}, preferiblemente fenilo, mientras que el otro de R^{1} y R es un grupo bidentado que une al grupo arilo C_{5-20}, tal como un grupo bidentado derivado de un grupo alquilo C_{1-7}. Ejemplos de tales grupos incluyen, aunque no se limitan a:

4

2,3-dihidro-tenzo[d]isotiazol-1,1-dióxido-2-ilo

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

5

1,3-dihidro-benzo[c]isotiazol-2,2-dióxido-1-ilo

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

6

3,4-dihidro-2H-benzo[e][1,2]tiazina-1,1-dióxido-2-ilo.

Fosforamidita: -OP(OR^{1})-NRR^{2}_{2,} donde R^{1} y R^{2} son substituyentes fosforamidita, por ejemplo, -H, un grupo alquilo C_{1-7} (opcionalmente substituido), un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente -H, un grupo alquilo C_{1-7}, o un grupo arilo C_{5-20}. Ejemplos de grupos fosforamidita incluyen, pero no se limitan a, -OP(OCH_{2}CH_{3})-N(CH_{3})_{2}, -OP(OCH_{2}CH_{3})-N(i-Pr)_{2}, y -OP(OCH_{2}CH_{2}CN)-N(i-Pr)_{2}.

Fosforamidato: -OP(=O) (OR^{1})-NR^{2}_{2}, en donde R^{1} y R^{2} son substituyentes fosforamidatos, por ejemplo, -H, un grupo alquilo C_{1-7} (opcionalmente substituido), un grupo heterociclilo C_{3-20}, o un grupo arilo C_{5-20}, preferentemente -H, un grupo alquilo C_{1-7}, o un grupo arilo C_{5-20}. Ejemplos de grupos fosforamidato incluyen, pero no se limitan a, -OP(=O)(OCH_{2}CH_{3})-N(CH_{3})_{2}, -OP(=O) (OCH_{2}CH_{3})-N(i-Pr)_{2}, y -OP(=O)(OCH_{2}CH_{2}CN)-N (i-Pr)_{2}.

En muchos casos, los substituyentes, pueden estar substituidos. Por ejemplo, un grupo alcoxi C_{1-7} puede estar substituido con, por ejemplo, un grupo alquilo C_{1-7} (también referido como grupo alquilo C_{1-7}-alcoxi C_{1-7}), por ejemplo, ciclohexilmetoxi, un grupo heterociclilo C_{3-20} (también referido como grupo arilo C_{5-20}-alcoxi C_{1-7}), por ejemplo ftalimidoetoxi, o un grupo arilo C_{5-20} (también referido como grupo arilo C_{5-20}-alcoxi C_{1-7}), por ejemplo, benciloxi.

Otras formas incluidas

Incluidos más arriba, se encuentran las formas iónicas, salinas, solvatadas y protegidas bien conocidas de estos substituyentes. Por ejemplo, una referencia a ácido carboxílico (-COOH) también incluye la forma aniónica (carboxilato) (-COO^{-}), una sal o una forma solvatada del mismo, como también las formas protegidas convencionales. Similarmente, una referencia a un grupo amino incluye la forma protonada (-N^{+}HR^{1}R^{2}), una sal o la forma solvatada del grupo amino, por ejemplo, una sal hidrocloruro, como también las formas protegidas convencionales del grupo amino. Similarmente, una referencia a un grupo hidroxilo también incluye la forma aniónica (-O^{-}), una sal, o un solvato del mismo, así como las formas protegidas de un grupo hidroxilo.

Isómeros, Sales, Solvatos, Formas Protegidas, y Profármacos

Ciertos compuestos pueden existir en una o más formas geométricas, ópticas, enantioméricas, diasterioméricas, epiméricas, éstereoisoméricas, tautoméricas, conformacionales, o anoméricas particulares, incluyendo, pero no limitándose a, formas cis- y trans-; formas E- y Z-; formas c-, t- y r-; formas endo- y exo-; formas R-, S- y meso-; formas D- y L-; formas d- y l-; formas (+)- y (-)-; formas ceto-, enol- y enolato-; formas syn- y anti-; formas sinclinal- y anticli-
nal-; formas \alpha- y \beta-; formas unaxial- y ecuatorial-; formas bote-, silla-, torsionada-, sobre-, y semisilla-; y combinaciones de las mismas, referidas en la presente invención colectivamente como "isómeros" (o "formas isoméricas").

Se advierte que, excepto como se indica más abajo para las formas tautoméricas, se excluyen específicamente del término "isómeros", tal como se utiliza aquí, los isómeros estructurales (o constitucionales) (es decir, los isómeros que difieren en las conexiones entre los átomos en lugar de simplemente la posición de los átomos en el espacio). Por ejemplo, una referencia a un grupo metoxi, -OCH_{3}, no se ha de interpretar como una referencia a su isómero estructural, un grupo hidroximetilo, -OCH_{2}OH. Similarmente, una referencia a ortoclorofenilo no se ha de interpretar como una referencia a su isómero estructural, metaclorofenilo. Sin embargo, una referencia a una clase de estructuras bien puede incluir formas isoméricas estructurales que se incluyen en esta clase (por ejemplo alquilo C_{1-7} incluye a n-propilo e isopropilo; butilo incluye a n-, iso-, sec-, y tert-butilo; metoxifenilo incluye orto-, meta- y para-metoxifenilo).

La exclusión de más arriba no se refiere a formas tautoméricas, por ejemplo, las formas ceto-, enol-, y enolato-, como en, por ejemplo, las parejas siguientes tautoméricos: ceto/enol (ilustrado más abajo), imina/enamina, amida/imino alcohol, amidina/amidina, nitroso/oxima, tiocetona/enotiol, N-nitroso/hidroxiazo, y nitro/aci-nitro.

7

Se advierte que se incluyen específicamente en el término "isómero" compuestos con uno o más substituyentes isotópicos. Por ejemplo, El H puede estar en cualquier forma isotópica, incluyendo H^{1}, H^{2}(D), y H^{3}(T); el C puede estar en cualquiera de las formas isotópicas, incluyendo C^{12}, C^{13}, y C^{14}; el oxígeno puede estar en cualquier forma isotópica, incluyendo O^{16} y O^{18}; y similares.

A menos que se especifique lo contrario, una referencia a un compuesto particular incluye todas las formas isoméricas, incluyendo (total o parcialmente) las racémicas y otras mezclas de los mismos. Los procedimientos de preparación (por ejemplo, síntesis asimétrica) y de separación (por ejemplo, cristalización fraccionada y medios cromatográficos) de tales formas isoméricas son conocidos en la materia o bien se obtienen fácilmente adaptando los procedimientos que se enseñan en la presente invención, o procedimientos bien conocidos en la materia.

A menos que se especifique lo contrario, una referencia a un compuesto particular también incluye las formas iónicas, sales, formas solvatadas y protegidas del mismo, por ejemplo, tal como se describe más abajo.

Sería deseable o conveniente preparar, purificar, y/o manipular una sal correspondiente del compuesto activo, por ejemplo, una sal aceptable farmacéuticamente. Ejemplos de sales aceptables farmacéuticamente se describen en Berge y col., 1977, "Pharmaceutically Acceptable Salts", J. Pharm. Sci., Vol 66, pp. 1-19.

Por ejemplo, si el compuesto es aniónico, o tiene un grupo funcional que pueda ser aniónico (por ejemplo, -COOH, puede ser -COO^{-}), entonces la sal puede formarse con el catión adecuado. Ejemplos de cationes inorgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, iones de metales alcalinos tales como Na^{+} y K^{+}, cationes alcalinotérreos tales como Ca^{2+} y Mg^{2+}, y otros cationes como el Al^{3+}. Ejemplos de cationes orgánicos aceptables incluyen, pero no se limitan a, ión amonio (es decir NH_{4}^{+}) e iones amonio substituidos (por ejemplo, NH_{3}R^{+}, NH_{2}R_{2}^{+}, NHR_{3}^{+}, NR_{4}^{+}). Ejemplos de algunos iones amonio substituidos adecuados son aquellos derivados de: etilamina, dietilamina, diciclhexilamina, trietilamina, butilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, colina, meglumina, y trometamina, así como aminoácidos, tales como la lisina y la arginina. Un ejemplo de un ión amonio cuaternario común es N(CH_{3})_{4}^{+}.

Si el compuesto es catiónico, o tiene un grupo funcional que pueda ser catiónico (por ejemplo -NH_{2} puede ser -NH_{3}^{+}), entonces la sal puede formarse con el anión apropiado. Ejemplos de aniones inorgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de los siguientes ácidos inorgánicos: clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, sulfúrico, sulfuroso, nítrico, nitroso, fosfórico y fosforoso. Ejemplos de aniones orgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de los siguientes ácidos orgánicos: acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, palmítico, láctico, málico, pamóico, tartárico, cítrico, glucónico, ascórbico, maléico, hidroximaléico, fenilacético, glutámico, aspártico, benzóico, cinámico, pirúvico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, fenilsulfónico, toluensulfónico, metanosulfónico, etanosulfónico, etano disulfónico, oxálico, pantoténico, isetiónico, valérico, lactobiónico, y glucónico. Ejemplos de aniones poliméricos adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de los siguientes ácidos poliméricos: ácido tánico, carboximetilcelulosa.

Sería conveniente o deseable preparar, purificar y/o manipular un solvato correspondiente del compuesto activo. El término "solvato" se utiliza en la presente invención en sentido convencional para referirse a un complejo de soluto (por ejemplo, el compuesto activo, sal del compuesto activo) y disolvente. Si el disolvente es agua, el solvato puede referirse convenientemente como hidrato, por ejemplo, un monohidrato, un dihidrato, un trihidrato, etc.

Sería conveniente o deseable preparar, purificar, y/o manipular el compuesto activo en una forma químicamente protegida. El término "forma químicamente protegida", tal como se utiliza en la presente invención, hace referencia a un compuesto en el que uno o más grupos funcionales reactivos están protegidos de reacciones químicas no deseadas, esto es, están en la forma de un grupo protector o protegido (también conocido como grupo enmascarado o enmascarador o un grupo bloqueado o bloqueante). Mediante la protección de un grupo funcional reactivo, se pueden llevar a cabo reacciones que involucran otros grupos funcionales reactivos sin proteger, sin afectar al grupo protegido; el grupo protector puede eliminarse, normalmente en un paso posterior, sin afectar substancialmente al resto de la molécula. Véase, por ejemplo, Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green and P. Wuts, Wiley, 1999).

Por ejemplo, un grupo hidroxilo puede protegerse como un éter (-OR) o un éster (-OC(=O)R), por ejemplo, como: un t-butil éter, un bencil, bencidril (difenilmetilo), o tritil (trifenilmetilo) éter; un trimetilsilil o t-bituldimetilsilil éter; o un acetil éster (-OC(=O)CH_{3}, -OAc).

Por ejemplo, un grupo aldehído o cetona puede protegerse como un acetal o cetal, respectivamente, en los que el grupo carbonilo (>C=O) se convierte en un diéter (>C(OR)_{2}), mediante reacción con, por ejemplo, un alcohol primario. El grupo aldehído o cetona son fácilmente regenerados mediante hidrólisis usando un gran exceso de agua en presencia de un ácido.

Por ejemplo, un grupo amino puede protegerse, por ejemplo, como una amida o un uretano, como por ejemplo: una metilamida (-NHCO-CH_{3}); una benciloxiamida (-NHCO-OCH_{2}C_{6}H_{5}, -NH-Cbz); como una t-butoxiamida (-NHCO-OC(CH_{3})_{3}, -NH-Boc); una 2-bifenil-2-propoxiamida (-NHCO-OC(CH_{3})_{2}C_{6}H_{4}C_{6}H_{5}, -NH-Bpoc), como una 9-fluorenilmetoxiamida (-NH-Fmoc), como un 6-nitroveratriloxiamida (-NH-Nvoc), como una 2-trimetilsililetiloxi amida (-NH-Teoc), como una 2,2,2-tricloroetiloxi amida (-NH-Troc), como una aliloxi amida (-NH-Alloc), como una 2(-fenilsulfonil)etiloxi amida (-NH-Psec); o, en los casos adecuados, como un N-óxido (>NO).

Por ejemplo, un grupo ácido carboxílico podría protegerse como un éster, como: un alquil C_{1-7} éster (por ejemplo, un metil éster; un t-butil éster); un haloalquil C_{1-7} éster (por ejemplo, un trihaloalquil éster C_{1-7}); un triC_{1-7} alquilsilil-C_{1-7} alquil éster; o un C_{5-20} aril-C_{1-7} alquil éster (por ejemplo, un bencil éster; un nitrobencil éster); o como una amida, por ejemplo, como una metil amida.

Por ejemplo, un grupo tiol puede protegerse como un tioéter (-SR), por ejemplo, como: un benciltioéter; un acetamidometiléter (-S-CH_{2}NHC(=O)CH_{3}).

Podría ser conveniente o deseable preparar, purificar, y/o manipular el compuesto activo en la forma de un profármaco. El término "profármaco", tal como se utiliza en la presente invención, hace referencia a un compuesto que, cuando se metaboliza (por ejemplo, in vivo) resulta en el compuesto activo deseado. Típicamente, el profármaco es inactivo, o menos activo que el compuesto activo, pero puede proporcionar una manipulación, administración o propiedades metabólicas ventajosas.

Por ejemplo, algunos profármacos son ésteres del compuesto activo (por ejemplo, algunos profármacos son ésteres del compuesto activo (por ejemplo, un éster metabólicamente lábil y fisiológicamente aceptable). Durante el metabolismo, el grupo éster (-C(=O)OR) se rompe para resultar en el compuesto activo. Tales ésteres pueden formarse mediante esterificación, por ejemplo, de cualquiera de los grupos ácido carboxílico (-C(=O)OH) en el compuesto de partida, junto con, cuando sea apropiado, una protección previa de cualquier otro grupo reactivo presente en el compuesto de partida, seguido de la desprotección si se requiere. Ejemplos de tales ésteres metabólicamente lábiles incluyen aquellos en los que R es un alquilo C_{1-7} (por ejemplo, -Me, -Et); aminoalquilo C_{1-7} (por ejemplo, aminoetilo; 2-(N,N-dietilamino)etilo; 2-(4-morfolino)etilo); y aciloxi-alquilo C_{1-7} (por ejemplo, aciloximetilo; aciloxietilo; por ejemplo, pivaloiloximetilo; acetoximetilo; 1-acetoxietilo; 1-(1-metoxi-1-metil)etil-carboxiloxietilo; 1-(benzoiloxi)etilo; isopropoxicarboniloximetilo; 1-isopropoxi-carboniloxietilo; ciclohexil-carboniloximetilo; 1-ciclohexil-carboniloxietilo; ciclohexiloxi-carboniloximetilo; 1-ciclohexiloxicarboniloxietilo; (4-tetrahidropiraniloxi)carboniloximetilo; 1-(4-tetrahidropiraniloxi)carboniloxietilo; (4-tetrahidropiranil)carboniloximetilo; y 1-(4-tetrahidropiranil)carbonilo-
xietilo).

También, algunos profármacos se activan enzimáticamente para resultar en el compuesto activo, o un compuesto que, tras otra reacción química, resulte en el compuesto activo. Por ejemplo, el profármaco puede ser un azúcar derivado u otro conjugado glicosilado, o puede ser un derivado éster de un aminoácido.

\vskip1.000000\baselineskip

Inhibición selectiva

El término "Inhibición selectiva" se refiere a la inhibición de una enzima en mayor medida que la inhibición de una o más enzimas distintas. Esta selectividad se mide comparando la concentración del mismo compuesto necesaria para inhibir el 50% de la actividad (CI_{50}) de una enzima frente a la concentración del mismo compuesto necesaria para inhibir el 50% de la actividad (CI_{50}) de otra enzima (véase más abajo). El resultado se expresa como un cociente. Si el cociente es mayor que 1, entonces el compuesto de prueba muestra algo de selectividad en su acción inhibidora.

Los compuestos de la presente invención preferiblemente muestran una inhibición selectiva superior a 3, 10, 20 o 50 para la ADN-PK respecto a la PI la 3-quinasa.

Los compuestos de la presente invención preferiblemente muestran una inhibición selectiva superior a 3, 10, 50 o 100 para la ADN-PK respecto a la ATM.

Se prefiere que los CI_{50} usados para determinar la inhibición selectiva sean determinados mediante los procedimientos descritos aquí.

\vskip1.000000\baselineskip

Otras preferencias

En la formula I, cuando R^{1} y R^{2} forman, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, un anillo heterocíclico que contiene de 4 a 8 átomos, éste puede formar parte de un grupo heterociclilo C_{4-20} definido más arriba (excepto con un número mínimo de 4 átomos anulares), que puede contener al menos un átomo de nitrógeno en el anillo. Se prefiere que los R^{1} y R^{2} formen, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, un anillo heterocíclico con 5, 6 o 7 átomos, más preferiblemente anillos de 6 átomos.

Los anillos sencillos que tengan un átomo de nitrógeno incluyen la acetidina, pirrolidina (tetrahidropirrol), pirrolina (por ejemplo 3-pirrolina, 2,5-dihidropirrol), 2H-pirrol o 3H-pirrol (isopirrol, isoazol), piperidina, dihidropiridina, tetrahidropiridina, y azepina; dos átomos de nitrógeno incluyen imidazolidina, pirazolidina (diazolidina), imidazolina, pirazolina (dihidropirazol), y piperazina; un oxígeno y un nitrógeno que incluye tetrahidrooxazol, dihidroosoxazol, tetrahidroisoxazol, dihidroisoxazol, morfolina, tetrahidrooxazina, dihidrooxazina y oxazina; un nitrógeno y un azufre que incluye tiazolina, tiazolidina, y tiomorfolina.

Se prefieren anillos que contengan un heteroátomo además del nitrógeno y en particular, los heteroátomos preferidos son el oxígeno y el azufre. Así, los grupos preferidos incluyen, morfolino, tiomorfolino, tiazolinilo. Los grupos preferidos sin un heteroátomo adicional incluyen al pirrolidino.

Los grupos más preferidos son morfolino y tiomorfolino.

Tal como se menciona más arriba, estos grupos heterocíclicos pueden estar substituidos; una clase preferida de substituyente es un grupo alquilo C_{1-7}. Cuando el grupo heterocíclico es morfolino, el grupo o grupos substituyentes son preferentemente metilo o etilo, y más preferentemente metilo. Un único sustituyente metilo es preferido en la segunda posición.

\newpage

Además de los grupos de anillos sencillos listados arriba, se contemplan también anillos con puentes o enlaces cruzados. Algunos ejemplos de este tipo de anillos, donde el grupo contiene un átomo de nitrógeno y uno de oxígeno, son:

\vskip1.000000\baselineskip

8

Éstos se nombran como 8-oxa-3-aza biciclo[3.2.1]oct-3-ilo, 6-oxa-3-aza-biciclo[3.1.0]hex-3-ilo, 2-oxa-5-aza-biciclo[2.2.1]hept-5-ilo, y 7-oxa-3-aza-biciclo[4.1.0]hepta-3-ilo, respectivamente.

Aspectos preferidos de los compuestos de fórmula Ia

Se prefiere que R^{1} y R^{2} en la fórmula Ia formen conjuntamente un grupo morfolino.

Otras substituciones

R^{3} y R^{4} conjuntamente son A-B-, lo cual colectivamente representa un anillo aromático fusionado que es un benceno. Se prefiere que una o dos de las posiciones 6,7 u 8 se substituyan. Preferiblemente se substituye sólo una de las posiciones 6,7 y 8. Si el anillo de benceno fusionado se sustituye por un grupo fenilo sustituido por fenilo, preferentemente se sustituye la posición 7.

En otra clase de compuestos en este aspecto de compuestos de fórmula Ia, el anillo de benceno fusionado (es decir -A-B-) se substituye en la posición 8 con un grupo heterociclilo C_{3-20} tricíclico. Preferentemente el grupo comprende heteroátomos de oxígeno y/o de azufre y se basa en los sistemas carbazol o antraceno. Preferiblemente un átomo de azufre y/o de oxígeno se presenta en el anillo central de los sistemas carbazol o antraceno.

En el grupo de compuestos donde el substituyente 6,7 y 8 es fenilo, el fenilo se sustituye, a su vez, por otro fenilo.

En otro grupo preferido de compuestos, las posiciones 5,6 u 8 permanecen sin sustituir (es decir, R^{5}, R^{6} y R^{8}= H), y la posición 7 se sustituye por fenilo substituido por fenilo (es decir R^{7} no es H).

Se prefiere generalmente que en compuestos de fórmula Ia, donde R^{3} y R^{4} conjuntamente forman -A-B-, que representa un anillo fusionado, que el grupo amino en la segunda posición (es decir, NR^{1}R^{2}) se seleccione del grupo formado por dimetilmorfolino (en concreto 3-5-dimetilmorfolino), metilmorfolino (en particular 3-metilmorfolino), 3,4-dihidro-2H-benzo[1,4]oxacin-4-ilo, di(2-hidroxietil)amino, 2-(2-Hidroxi-etoxi)-etilamino o 2-(2-Bromo-fenoxi)-etilamino.

Acrónimos

Por conveniencia, muchas fracciones químicas se representan empleando abreviaturas bien conocidas, incluyendo aunque no limitándose a, metilo(Me), etilo(Et), iso-propilo(iPr), n-butilo(nBu), n-hexilo(nHex), ciclohexilo(cHex), fenilo(Ph), bifenilo(biPh), benzilo(Bn), naftilo(naph), metoxi (MeO), etoxi (EtO), benzoilo (Bz), y acetilo (Ac).

Por conveniencia, muchos compuestos químicos se representan usando abreviaturas bien conocidas, incluyendo aunque no limitándose a, metanol(MeOH), etanol(EtOH), iso-propanol (i-PrOH), metil etil cetona (MEK), éter o dietil éter (Et_{2}O), ácido acético (AcOH), diclorometano (cloruro de metileno, DCM), ácido trifluoro acético (TFA), dimetilformamida (DMF), tetrahidrofurano (THF) y dimetilsulfóxido (DMSO).

Rutas de síntesis

Los compuestos tal y como se describen en el primer aspecto de la invención pueden ser sintetizados mediante varios procedimientos, algunos de los cuales se describen más abajo.

A grandes rasgos, la estrategia de síntesis implica la realización de la formación de un ciclo para generar la estructura central, seguida de una reacción de acoplamiento, como la reacción de Suzuki, para añadir substituyentes a la estructura central.

El paso clave en muchas de estas rutas de síntesis es la formación del anillo central aromático; esto puede conseguirse de numerosas formas, tal como se muestra más abajo, e incluyen la formación de un ciclo por condensación.

En muchos casos la sustitución apropiada puede encontrarse presente en los materiales de partida, no obstante se dan ejemplos de derivaciones adicionales de los productos finales.

Ruta de síntesis 1: Síntesis de 2-amino-cromen-4-onas (primer método)

9

(a) Ésteres de salicilato

Una disolución del ácido apropiado en metanol (150 ml) se trató con ácido sulfúrico concentrado (3 ml). La disolución se calentó a reflujo durante 40 horas, y entonces se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se evaporó en vacío y fue resuspendida en acetato de etilo (200 ml). La disolución se lavó con una disolución de bicarbonato de sodio saturada al 50% (4x150 ml). Los extractos acuosos se combinaron y lavaron con acetato de etilo (150 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron al vacío para dar el producto, que se cristalizó entonces a partir de metanol para proporcionar el compuesto deseado.

(b)\beta-cetoamidas

Una solución de diisopropilamina (5,1 ml, 3,0 mmol) en THF (30 ml) se enfrió a -70º C y se trató lentamente con una solución de n-butil litio 2,5 M en hexano (14,0 ml, 35 mmol), posteriormente se calentó hasta 0 grados y se agitó durante 15 minutos. La solución se enfrió hasta -10ºC y lentamente se trató con una solución de N-acetil morfolina, N-acetil piperidina, o N-acetil tiomorfolina en THF (25 ml), manteniendo la temperatura por debajo de -10ºC. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 90 minutos, seguidamente se trató con una disolución del éster de sacilato relevante en THF (25 ml), seguido de adición de THF (5 ml). La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta alcanzar la temperatura ambiente y posteriormente se agitó durante 16 horas. La reacción se paró con agua (5 ml) y ácido clorhídrico 2 M (50 ml) y se extrajo en DCM (3x80 ml). Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron al vacío para dar un residuo aceitoso. El producto crudo se agitó vigorosamente en éter caliente, causando el precipitado de un sólido blanco. Después de enfriarse en hielo, se recogió mediante filtración y se lavó con éter frío, para proporcionar el compuesto deseado.

(c) 2-amino-cromen-4-onas

Una solución con las \beta-cetoamidas adecuadas en DCM (35 ml) se trató con anhídrido tríflico (3,8 ml, 23 mmol) y se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. La mezcla se evaporó al vacío y se redisolvió en metanol (80 ml). La solución se agitó durante 4 horas, se trató con agua (80 ml) y se agitó una hora más. La mezcla se evaporó al vacío para eliminar el metanol. La mezcla acuosa se ajustó a pH 8 mediante tratamiento con bicarbonato de sodio saturado y se extrajo en DMC (3x150 ml). Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron al vacío para dar un sólido. El producto crudo se disolvió parcialmente en DCM y se cargó en una columna de sílice, eluyéndose con DCM seguido de metanol en DCM (1%, 2%; 5%). Todas las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y evaporaron al vacío para dar un sólido naranja. El producto crudo se disolvió en metanol caliente, se trató con carbón activo, se filtró con zelita y se recristalizó a partir del metanol para proporcionar el compuesto deseado.

Variaciones

Si se desea que el grupo amino en el producto final no sea el morfolino, la acetilamina relevante puede ser usada en el paso (b) en lugar de acetil morfolina.

Ruta de síntesis 2: Síntesis de derivados de 2-(morfolin-4-il)-cromen-4-onas

11

(a) Aril substituido 2-(morfolin-4-ilo)-cromen-4-onas

A un tubo de reacción, se añadió un compuesto organoborano (0,058 mmol), éster 2-morfolín-4-il-4-oxo-4H-cromenílico del ácido trifluorometanosulfónico (compuesto 305/306) (20 mg, 0,053 mmol y carbonato potásico pulverizado (14,6 mg, 0,106 mmol), se purgó con nitrógeno y se selló. Se desgasificó dioxano en un matraz con una purga de nitrógeno y sonicación durante 5 minutos, antes de añadirlo al tubo de reacción (0,5 ml). A esto se le añadió una disolución de tetraquis-(trifenilfosfina)-paladio (0) (3,1 mg) en dioxano desgasificado (0,3 mL) y la mezcla de reacción se calentó hasta 90ºC con reflujo bajo una atmósfera de nitrógeno durante 18 horas. La reacción se enfrió y se pasó a través de una columna de sílice (cartucho ISOLUTE de Si 500 mg) y se eluyó con Metanol/DCM al 30% (8 mL). La disolución se analizó mediante LCMS y se purificó mediante una HPLC preparativa.

Uso de Compuestos de la invención

La presente invención proporciona compuestos activos.

El término "activo" tal y como se usa aquí, se refiere a compuestos que son capaces de inhibir la actividad de la ADN-PK, y especialmente incluye asimismo compuestos con actividad intrínseca (fármacos) así como profármacos de dichos compuestos; tales profármacos pueden mostrar o no una actividad intrínseca pequeña.

Un ensayo que se puede emplear para evaluar el nivel de inhibición de la ADN-PK por un compuesto particular se describe en los ejemplo de más abajo.

La invención proporciona además compuestos activos para su uso en un procedimiento para el tratamiento del cuerpo humano y animal. Dicho procedimiento puede incluir la administración a los sujetos de una cantidad del compuesto activo terapéuticamente efectiva, preferiblemente en forma de composición farmacéutica.

El término "tratamiento", tal y como se usa aquí en el contexto del tratamiento de una condición, pertenece generalmente al tratamiento y terapia, sea de un humano o un animal (por ejemplo en aplicaciones veterinarias), en el cual se obtiene algún efecto terapéutico deseado, por ejemplo, la inhibición del progreso de la condición, e incluye una reducción en la tasa de progreso, una parada en la tasa de progreso, una mejora de la condición, y cura de la condición. Se incluye también el tratamiento como medida profiláctica (es decir, profilaxis).

El término "cantidad terapéuticamente efectiva", tal y como se usa aquí, se refiere a la cantidad de un compuesto activo o material, la composición o la dosificación que se contiene de un compuesto activo, que es efectiva para producir algún efecto terapéutico deseado, de acuerdo con una relación riesgo/beneficio razonable.

Administración

El compuesto activo o la composición farmacéutica que incluye al compuesto activo, pueden ser administrados a un sujeto mediante cualquier ruta de administración conveniente, ya sea por vía sistémica/periférica o directamente en el lugar de acción deseada, e incluyendo aunque sin limitarse a, la vía oral (por ejemplo mediante ingestión); tópica (incluyendo por ejemplo la vía transdémica, la intranasal, la ocular, la bucal, y la sublingual); la pulmonar (por ejemplo mediante terapia de inhalación o insuflación empleando por ejemplo un aerosol, por ejemplos a través de la boca o la nariz); rectal; vaginal; parenteral, por ejemplo, mediante inyección, incluyendo la vía subcutánea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intraarterial, intracardiaca, intratecal, intraespinal, intracapsular, subcapsular, intraorbital, intraperitoneal, intratraqueal, subcuticular, intraarticular, subaracnoidal e intraesternal; mediante implante de un depósito, por ejemplo subcutánea o intramuscularmente.

El sujeto puede ser un eucariota, un animal, un animal vertebrado, un mamífero, un roedor (por ejemplo una cobaya, un hámster, una rata, un ratón), murino (por ejemplo un ratón), canino (por ejemplo un perro), felino (por ejemplo un gato), equino (por ejemplo un caballo), un primate, un simio (por ejemplo, un mono o un gran simio), un mono (por ejemplo un tití, un babuino), un gran simio (por ejemplo un gorila, un chimpancé, un orangután, un gibón), o un humano.

Formulaciones

Mientras sea posible administrar el compuesto activo solo, es preferible presentarlo como una composición farmacológica (por ejemplo formulación) que comprenda al menos un compuesto activo, tal como se definió más arriba, junto con uno o más vehículos, adjuvantes, excipientes, diluyentes, rellenos, tampones, estabilizantes, conservantes, lubricantes, todos farmacológicamente aceptables, u otros materiales bien conocidos para aquellos expertos en la materia, y opcionalmente otros agentes terapéuticos o profilácticos.

De este modo la presente invención proporciona además composiciones farmacológicas, tal como se definió más arriba, y procedimientos de fabricación de las composiciones farmacológicas incluyendo la mezcla de al menos un compuesto activo, tal como se definió más arriba, junto con uno o más vehículos, excipientes, tampones, adjuvantes, estabilizantes, u otros materiales, todos farmacológicamente aceptables, tal como se describe aquí.

El término "farmacológicamente aceptable" tal y como se emplea aquí incluye compuestos, materiales, composiciones, y/o formas de dosificación que son, dentro del ámbito clínico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de un sujeto (por ejemplo un humano) sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación, de acuerdo con una relación riesgo/beneficio razonable. Cada vehículo, excipiente, etc. debe ser también "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación.

Los vehículos, excipientes, etc., adecuados pueden encontrarse en los textos farmacéuticos estándar, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ª edición, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1990.

Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en forma de dosis unitarias y se pueden preparar mediante cualquiera de los procedimientos bien conocidos en el campo farmacéutico. Tales procedimientos incluyen el paso de asociar el compuesto activo con el vehículo que constituye uno o más ingredientes. En general, las formulaciones se preparan llevando a una asociación uniforme y estrecha el compuesto activo con los vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos o ambos, y cuando sea necesario dando forma al producto.

Las formulaciones pueden estar en forma de líquidos, disoluciones, suspensiones, emulsiones, elixires, jarabes, comprimidos, losanges, granulados, polvos, cápsulas, píldoras, pastillas, ampollas, supositorios, pesarios, ungüentos, geles, pastas, cremas, pulverizadores, vapores, espumas, lociones, aceites, bolos, electuarios o aerosoles.

Las formulaciones adecuadas para la administración por vía oral (por ejemplo mediante ingestión), pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas, píldoras o comprimidos, conteniendo cada uno de ellos una cantidad predeterminada de compuesto activo; como polvo o gránulos; como disolución o suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión líquida de tipo aceite-en-agua o como una emulsión líquida de tipo agua-en-aceite; como un bolo; como un electuario; o como una pasta.

Un comprimido puede fabricarse mediante procedimientos convencionales, por ejemplo, compresión o modelado, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos por compresión pueden prepararse mediante compresión en una máquina adecuada del compuesto activo tanto en forma suelta como en polvo o gránulos, opcionalmente mezclado con uno o más aglutinantes (por ejemplo, povidona, gelatina, acacia, sorbitol, tragacanto, celulosa de hidroxipropilmetilo); rellenadores o diluyentes (por ejemplo lactosa, celulosa microcristalina, hidrogenofosfato de calcio); lubricantes (por ejemplo estearato de magnesio, talco, sílice); desintegrantes (por ejemplo glicolato sódico de almidón, povidona entrecruzada, carboximetilo sódico de celulosa entrecruzada);agentes de superficie activa o dispersantes o humectantes (por ejemplo sulfato sódico de laurilo); y conservantes (por ejemplo P-hidroxibenzoato de metilo, P-hidroxibenzoato de propilo, ácido sórbico). Los comprimidos pueden fabricarse modelando en una máquina adecuada una mezcla del compuesto pulverizado mojado con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos pueden estar opcionalmente recubiertos o marcados y pueden ser formulados de modo que proporcionen una liberación lenta y controlada del compuesto activo utilizando por ejemplo, celulosa de hidroxipropilmetilo en diferentes proporciones para proporcionar el perfil de liberación deseado. Los comprimidos pueden opcionalmente suministrarse con un recubrimiento intestinal para facilitar la liberación en los intestinos en lugar de en el estómago.

Las formulaciones adecuadas para su administración tópica (por ejemplo transdérmica, intranasal, ocular, bucal, y sublingual) se deben formular como ungüento, crema, suspensión, loción, polvo, disolución, pasta, gel, pulverizador, aerosol, o aceite. Alternativamente, una formulación puede incluir un parche o apósito tales como vendajes, o tira emplástica impregnada con los compuestos activos y opcionalmente uno o más excipientes o diluyentes.

Las formulaciones adecuadas para su administración tópica en la boca incluyen grageas que contienen el compuesto activo en una base saborizante, normalmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que incluyen el compuesto activo en una base inerte como gelatina y glicerina, o sacarosa o acacia; y lavados bucales incluyendo el compuesto activo en un vehículo líquido adecuado.

Las formulaciones adecuadas para su administración tópica en el ojo incluyen colirios donde el compuesto activo está disuelto o resuspendido en un vehículo adecuado, especialmente un disolvente acuoso para el compuesto activo.

Las formulaciones adecuadas para su administración nasal donde el vehículo es sólido, incluyen polvo grueso con un tamaño de partícula, por ejemplo, en el intervalo de entre unas 20 hasta aproximadamente 500 micras, que se administran al aspirar por la nariz, es decir mediante una rápida inhalación a través del paso nasal desde el contenedor del polvo que se mantiene cerca de la nariz. Las formulaciones adecuadas donde el vehículo es un líquido para su administración como, por ejemplo un pulverizador nasal, colirios nasales o mediante administración con aerosol por nebulizador, incluyen soluciones acuosas o aceitosas del compuesto activo.

Las soluciones adecuadas para la administración mediante inhalación incluyen aquellas presentadas como pulverizador en aerosol procedente de un recipiente presurizado, con el uso de un propelente adecuado, como el diclorodifluorometano, triclorofluorometano, dióxido de carbono, diclorotetrafluoroetano, u otros gases adecuados.

Las formulaciones adecuadas para la administración tópica en la piel incluyen ungüentos, cremas, y emulsiones. Cuando se formule como ungüento, el compuesto activo puede opcionalmente emplearse con una base de ungüento tanto parafínica como miscible en agua. Alternativamente, los compuestos activos pueden ser formulados en una crema con base de crema de aceite-en-agua. Si se desea, la fase acuosa de la base de crema puede incluir, por ejemplo, al menos aproximadamente 30% (p/p) de un alcohol polihídrico, es decir, un alcohol que tenga dos o más grupos hidroxilo como el glicol de propileno, butano-1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol, y glicol de polietileno y sus mezclas. Las formulaciones tópicas pueden deseablemente incluir un compuesto que mejore la absorción o la penetración del compuesto activo a través de la piel u otras áreas afectadas. Ejemplos de dichos compuestos que incrementan la penetración en la piel incluyen el dimetilsulfóxido y sustancias análogas.

Cuando se formule como emulsión tópica, la fase aceitosa puede opcionalmente incluir meramente un emulsionante (conocido también como emulgente), o puede incluir una mezcla de al menos un emulsionante con una grasa o con un aceite o ambos (grasa y aceite). Preferentemente, un emulsionante hidrofílico se incluye junto con un emulsionante lipofílico que actúa como estabilizante. Juntos, el(los) emulsionante(s) con o sin estabilizador(es) forman la llamada cera emulsionante, y la cera junto con el aceite y/o la grasa forman la llamada base de ungüento emulsionante la cual forma la fase dispersa aceitosa de las formulaciones en crema.

Los emulsionantes adecuados y los estabilizantes de la emulsión incluyen Tween 60, Span 80, alcohol cetoestearílico, alcohol miristílico, monoestearato de glicerilo, sulfato laurilo de sodio. La elección de aceites o grasas adecuadas para la formulación se basa en conseguir las propiedades cosméticas deseadas, dado que la solubilidad del compuesto activo en la mayoría de aceites que se usan en formulaciones como emulsiones farmacéuticas puede ser muy baja. De este modo la crema deberá ser preferiblemente un producto no-graso, que no manche y que sea lavable con una consistencia adecuada para evitar la pérdida de los tubos y otros recipientes. Se pueden utilizar los ésteres de alquilo de cadena lineal o ramificada, mono- o di- básicos como el di-isoadipato, isocetil estearato, diéster de propilén glicol de ácidos grasos de coco, isopropil miristato, decil oleato, isopropil palmitato, butil estearato, 2-etilhexil palmitato o una mezcla de ésteres de cadena ramificada conocida como Crodamol CAP, siendo los tres últimos ésteres los preferidos. Éstos se pueden usar solos o en combinación, dependiendo de las propiedades requeridas.

Alternativamente, se pueden usar lípidos de alto punto de fusión como la parafina blanca blanda y/u otros aceites minerales.

Las formulaciones adecuadas para la administración rectal pueden presentarse como supositorios con una base adecuada incluyendo, por ejemplo, manteca de cacao o un salicilato.

Las formulaciones adecuadas para su administración vaginal se pueden presentar como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones de pulverización que contengan además del compuesto activo, tantos vehículos como se conozcan en la materia como apropiados.

Las formulaciones adecuadas para su administración parenteral (por ejemplo mediante inyección, incluyendo inyecciones cutáneas, subcutáneas, intramusculares, intravenosas e intradérmicas), incluyen las soluciones isotónicos acuosos y no acuosos, apirógenas, soluciones para inyección estériles que pueden contener antioxidantes, tampones, conservantes, estabilizantes, bacteriostáticos y solutos que convierten la formulación en isotónica con la sangre del receptor pretendido; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de resuspensión y espesantes, y liposomas u otros sistemas de micropartículas que se diseñen para dirigir el compuesto a los componentes sanguíneos o a uno o más órganos. Ejemplos de vehículos isotónicos adecuados para su uso en dichas formulaciones incluyen la Inyección de Cloruro de Sodio, la Solución de Ringer, o la inyección de Lactato Ringer. Típicamente, la concentración del compuesto activo en la disolución es de aproximadamente 1 ng/ml hasta aproximadamente 10 \mug/ml, por ejemplo desde aproximadamente 10 ng/ml hasta aproximadamente 1 \mug/ml. Las formulaciones pueden presentarse en dosis unitarias o recipientes multidosis, por ejemplo, ampollas y frascos, y pueden ser almacenadas en condiciones de secado al frío (liofilizadas) requiriendo únicamente la adicción del vehículo estéril líquido, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de su utilización. Las disoluciones y suspensiones extemporáneas inyectables pueden preparase a partir de polvos estériles, granulados y comprimidos. Las formulaciones pueden estar en forma de liposomas y otros sistemas de micropartículas diseñados para dirigir el compuesto a los componentes sanguíneos o a uno o más órganos.

Dosificación

Se tendrá en cuenta que las dosis adecuadas de los compuestos activos, y composiciones, incluyendo los compuestos activos, pueden variar de un paciente a otro. La determinación de la dosis óptima implicará generalmente el balance entre el nivel de beneficio terapéutico frente a cualquier riesgo o efectos colaterales deletéreos de los tratamientos de la presente invención. El nivel de dosificación elegido dependerá de una serie de factores que incluyen, pero no se limitan a, la actividad del compuesto en particular, la vía de administración, el momento de administración, la tasa de excreción del compuesto, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/u otros materiales usados en combinación, y la edad, peso, sexo, condición general de salud, e historial médico previo del paciente. La cantidad del compuesto y la vía de administración dependerán en último término del criterio médico, aunque en general la dosis adecuada será aquella que alcance las concentraciones locales en el lugar de la acción para lograr el efecto deseado sin causar daños importantes o efectos secundarios perniciosos.

La administración in vivo puede realizarse en una sola dosis, continua o intermitentemente (por ejemplo en dosis divididas en intervalos adecuados) durante el transcurso del tratamiento. Los procedimientos para la determinación de los medios y dosis de administración más efectivos son bien conocidos por los expertos en la materia y variarán dependiendo de la formulación usada en la terapia, el propósito de la terapia, la célula concreta que está siendo tratada, y el sujeto que está siendo tratado. Pueden llevarse a cabo administraciones simples o múltiples con el nivel de dosis y patrón seleccionado por el médico que esté llevando a cabo el tratamiento.

En general, la dosis adecuada del compuesto activo se halla en un intervalo de entre aproximadamente 100 \mug hasta aproximadamente 250 mg por kilogramo de peso corporal del sujeto y día. Cuando el compuesto activo sea una sal, un éster, profármaco, o similar, la cantidad administrada se calcula sobre la base del compuesto patrón y así el peso real a utilizar se incrementa proporcionalmente.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplos

A continuación se proporcionan ejemplos exclusivamente para ilustrar la presente invención y no están destinados a limitar el objetivo de la invención, tal y como se describe aquí.

Cuando el peso molecular (PM) se cita como confirmación de que el compuesto deseado se ha sintetizado, este es el peso molecular del compuesto protonado detectado empleando LC-MS, y es, por tanto una unidad mayor que el actual peso molecular del compuesto, es decir, PM +1.

\newpage

Ruta 1

Compuesto 305 y 306

\vskip1.000000\baselineskip

12

\vskip1.000000\baselineskip

13

\vskip1.000000\baselineskip

14

\vskip1.000000\baselineskip

Síntesis del material de partida 2,3-dihidrobenzoato de metilo

Se prepara a partir de ácido 2,3-dihidroxibenzóico (1 g, 7,25 mmol), proporcionando un sólido marrón pálido (0,29 g, 1,73 mmol, 23% de rendimiento); pf 81,1-81,9ºC.; Rf = 0,78 (disolvente 95% DCM: 5% metanol); H^{1} RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,35 (H1, d, Ar4), 7,15 (H1, d, Ar6), 6,85 (H1, dd, Ar5), 4,00 (H3, d, CH_{3}).

Preparación del éster metílico del ácido 2-Hidroxi-3-trifluorometanosulfoniloxibenzóico

A una muestra de 2,3-dihidroxibenzoato de metilo (4,00 g, 23,8 mmol) disuelta en diclorometano (25 ml), se añadió piridina (0,96 ml, 11,9 mmol) y dimetilaminopiridina (0,07 g, 0,58 mmol). La mezcla se enfrió a 0ºC y se añadió gota a gota mediante una jeringuilla anhídrido sulfónico de trifluorometano (4,40 ml, 26,18 mmol). La mezcla de reacción se llevó a temperatura ambiente y se dejó agitando durante 60 h. La fase orgánica se lavó con HCl 1M (40 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró hasta sequedad al vacío. El sólido se recristalizó a partir de acetato de etilo resultando unos cristales blancos. (2,62 g, 8,73 mmol, 37% de rendimiento), pf 91,8-92,3ºC; Rf = 0,89 (disolvente; 95% DCM : 5% metanol); ES_{+}(m/e) 300,00 (M+1); tiempo de retención en HPLC = 7,47 min (largo); H^{1} RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta7,85 (H1, d, Ar4), 7,45 (H1, d, Ar6), 6,95 (H1, t, Ar5), 4,00 (H3, d, CH_{3}).

Preparación del éster metílico del ácido 2-Hidroxi-4-trifluorometanosulfoniloxibenzoico

Se preparó al igual que para el éster metílico del ácido 2-Hidroxi-3-trifluorometanosulfoniloxibenzóico, a partir de 2,4-dihidroxibenzoato de metilo resultando un sólido cristalino blanco. ES_{+}(m/e) 300,00 (M+1).

(b) Éster 2-hidroxi-3-(3-morfolino-4-ilo-3-oxopropionilo)-fenílico del ácido trifluorometanosulfónico

Se preparó a partir del éster metílico del ácido 2-hidroxi-3-trifluorometanosulfoniloxibenzóico (2,10 g, 7 mmol), resultando en un sólido marrón pálido (1,10 g, 2,54 mmol, 36% rendimiento). ES_{+}(m/e) 398,25; H^{1} RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta7,85 (H^{1}, d, Ar4), 7,35 (H1, d, Ar6), 6,90 (H1, dd, Ar5), 4,05 (H2, s, CH_{2}O), 3,50 (H8, m, CH_{2}N, CH_{2}O).

(c) Éster 2-morfolin-4-il-4-oxo-4H-cromen-8-ilico del ácido trifluoro metanosulfónico (compuesto 305)

Se preparó a partir del éster 2-hidroxi-3-(3-morfolin-4-il-3-oxo-propionil)-fenílico del ácido trifluorometanosulfónico (0,91 g, 2,3 mmol), resultando en sólido blanco (0,25 g, 0,662 mmol, 28,79% rendimiento) pf 177,8-178, 9ºC. Rf = 0,30 (5% MeOH:95% DCM). ES_{+} (m/e) 380,16 (M+1), H1 RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta3,50 (H4, m, CH_{2}N); 3,78 (H4, m, CH_{2}O); 5,46 (H1, s, Ar3); 7,40 (H2, m, Ar6, 7); 8,09 (H1, m, Ar5).

Éster 2-morfolin-4-il-4-oxo-4H-cromen-7-ilico del ácido trifluorometanosulfónico (Compuesto 306)

Se preparó a partir del éster 3-hidroxi-4-(3-morfolin-4-il-3-oxo-propionil)fenílico del ácido trifluorometanosulfónico (1,50 g, 3,80 mmol), resultando un sólido blanco (0,69 g, 1,83 mmol, 48% rendimiento) pf 143-145ºC; ES_{+}(m/e) = 380,21 (M_{+}1); H^{1} RMN (300MHz, CDCl_{3}) \delta3,45(H4, m, CH_{2}N); \delta3,77(H4, m, CH_{2}O); \delta5,36(H1, s, CH); \delta7,32(H2, m); \delta8,01(H1, m).

Ruta 2

Ejemplos de compuestos formados utilizando la ruta sintética 2 se presentan en las tablas siguientes.

15

16

160

17

\vskip1.000000\baselineskip

170

18

Ejemplos Biológicos Inhibición de la ADN-PK

Para establecer la acción inhibidora de los compuestos frente a la ADN-PK in vitro, se utilizaron los siguientes ensayos para determinar los valores de CI_{50}.

La ADN-PK de mamífero, aislada del extracto nuclear de células Hela (Gell, D. y Jackson S.P., Nucleic Acids Res. 27:3494-3502 (1999)) se incubó con el tampón Z (Hepes 25 mM (Sigma); MgCl_{2} 12,5 mM (Sigma); KCl 50 mM (Sigma); DDT 1mM (Sigma); Glicerol al 10% (sigma); NP-40 al 0,1% (Sigma=; pH 7,4) en placas de polipropileno de 96 pocillos y concentraciones variables de inhibidor añadido. Todos los compuestos se diluyeron en DMSO para dar una concentración final de ensayo entre 10 y 0,001 \muM, con el DMSO a una concentración final del 1% por pocillo. El volumen total de ensayo por pocillo fue de 40 \mul.

Tras 10 minutos de incubación a 30ºC las reacciones se iniciaron con la adición de Na-ATP (50 \muM final), P^{33}-\gammaATP y un oligonucleótido de 30meros de ADN de doble cadena (10 ng/\mul) en un volumen de 10 \mul. Las reacciones en los pocillos designadas como positivas y negativas se hicieron en combinación con los compuestos en los pocillos (desconocidos) para calcular el% de actividad enzimática. Las placas se agitaron entonces durante 2 minutos y se incubaron a 30ºC durante 45 minutos.

Después de la incubación, las reacciones se interrumpieron mediante adición de 50 \mul de ácido acético al 30% a cada pocillo. Las placas se agitaron entonces durante 5 minutos y el contenido de cada placa (80 \mul de cada pocillo) se transfirió a una placa de filtración de 96 pocillos Polyfiltronics, que contenía una membrana de fosfocelulosa P81 (marca registrada) (Whatman, UK). Las soluciones se pasaron a través de la membrana mediante vacío y las membranas de cada pocillo se lavaron cuatro veces empleando 300 \mul de ácido acético al 15%. Las membranas de cada pocillo se secaron entonces al aire y se añadieron 20 \mul de un líquido de centelleo a cada pocillo.

Las placas fueron transferidas a un TopCountNXT (Marca Registrada) (Packard, UK) para el conteo por centelleo. Los valores registrados son cuentas por minuto (cpm) siguiendo un conteo de 1 minuto para cada pocillo.

La actividad de cada enzima para cada compuesto se calcula entonces utilizando la siguiente ecuación:

\vskip1.000000\baselineskip

19

Los resultados se detallan más abajo, en la tabla 1 como valores de CI_{50} (concentración a la cual se inhibe el 50% de la actividad enzimática). Estos valores se determinan en un intervalo de diferentes concentraciones, normalmente entre 10 \muM y 0,01 \muM. Tales valores de CI_{50} se usan como valores comparativos para identificar potencias aumentadas del compuesto. LY294002 mostró una CI_{50} de 1,5 \muM.

Índices de Aumento

El índice de Aumento (IA) es un índice del aumento de la inhibición del crecimiento celular provocado por el inhibidor de la ADN-PK tras 2 Grays de irradiación, comparado con las células sin tratar como control.

Los inhibidores de la ADN-PK se emplearon a una concentración fija de 25 micromolar. La radiación se aplicó usando un sistema de rayos-X Faxitron 43855D a una tasa de dosis de 1 Gy por minuto. El Índice de Aumento a 2 Gy de irradiación se calculó a partir de la fórmula:

20

El crecimiento celular se determinó utilizando el ensayo de la sulforodamina B (SRB) (Skehan, P., Storung, R., Scudiero, R., Monks, A., McMahon, J., Vistica, D., Warren, J. T., Bokesch, H., Kenny, S. y Boyd, M. R. (1990) New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer-drug screening. J. Natl. Cancer Inst. 82:1107-1112). Se sembraron 400 células HeLa en cada pocillo de una placa de microtitulación de 48 pocillos de fondo plano en un volumen de 200 \mul y se incubaron durante 6 h a 37ºC. Las células se incubaron tanto con medio sólo como con medio que contenía inhibidor de ADN-PK a una concentración final de 25 \muM. Las células se dejaron crecer durante 1 hora antes de la irradiación o la simulación de irradiación. Las células sin tratar con el inhibidor de ADN-PK o sin irradiar, se utilizaron como control. Las células tratadas con el inhibidor de ADN-PK sólo se utilizaron para determinar la inhibición del crecimiento por el inhibidor de la ADN-PK.

Las células se dejaron durante 16 h más antes de cambiar el medio y se dejó crecer las células durante 6 días a 37ºC. Entonces, se eliminó el medio y las células se fijaron con 200 \mul de ácido tricloroacético al 10% (p/v) enfriado con hielo. Las placas se incubaron a 4ºC durante 20 minutos y se lavaron entonces cuatro veces con agua. Cada pocillo de células se tiñó entonces con 200 \mul de SRB al 0,4% (p/v) en ácido acético al 1% durante 20 minutos antes de lavar cuatro veces con ácido acético al 1%. Las placas se secaron entonces durante 2 h a temperatura ambiente. El colorante de las células teñidas se solubilizó mediante la adición de 100 \mul de Tris Base 10 mM en cada pocillo. Las placas se agitaron cuidadosamente y se dejaron a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de medir a densidad óptica a 564 nM en un lector de placas de microtitulación Microquant.

El LY294002 mostró un Índice de Aumento de 1,09.

Inhibición de la quinasa PI3

Para determinar la acción inhibidora de los compuestos sobre la quinasa PI3 in vitro, se emplearon los siguientes ensayos para determinar los valores de CI_{50}.

La quinasa PI3 fusionada con GST recombinante de baculovirus (p110\alpha/p85\alpha) se purificó a partir de células de insectos Sf9 usando cromatografía de afinidad de Sepharose-GSH tal como está descrito (Wymann, M. T. y col., (1996) Wortmannin inactivates phosphoinositide 3-kinase by covalent modification of Lys-802, a residue involved in the phosphate transfer reaction. Mol. Cell Biol. 16:1722-1733). La PI3-quinasa (1 \mul) se diluyó en el tampón de reacción (89 \mul de Hepes 20 mM, pH 7,5, NaCl 150 mM, Ortovanadato de sodio 0,1 mM, que contiene 20 \mug de fosfatidilinositol) y se añadieron concentraciones variables del compuesto inhibidor. Todos los compuestos se diluyeron en DMSO para dar una concentración de ensayo final entre 100 y 0,1 \muM, con DMSO a una concentración final del 1%. Tras 10 minutos de incubación a 37ºC las reacciones se iniciaron mediante adición de 10 \mul de Na-ATP 50 \muM, MgCl_{2} 20 mM y P^{33}-\gammaATP 2,5 \muCi. Las reacciones se incubaron durante 20 minutos más a 37ºC, antes de ser interrumpidas con la adición de 400 \mul de cloroformo/metanol (1:1). Las reacciones se acidificaron mediante la adición de 200 \mul de HCl 1M, antes de la separación de las fases orgánicas y acuosas mediante centrifugación a 10.000 g durante 30 segundos. La fase orgánica se transfirió a un tubo nuevo y se lavó dos veces con 150 \mul de ácido clorhídrico 1M/metanol (1:1), eliminándose la fase acuosa. El producto de reacción lavado se colocó entonces en una placa de 96 pocillos blanca con 100 \mul de líquido de centelleo y se transfirió a un TopCount NXT para el conteo de centelleo. Se recogieron las cuentas por minuto, siguiendo un minuto de conteo, para cada reacción. La inhibición de la actividad de la PI3-quinasa por los compuestos se calculó tal como se describió más arriba para el ensayo de la ADN-PK.

La inhibición selectiva se determinó siguiendo la siguiente ecuación:

21

El compuesto LY294002 mostró un CI_{50} de 1,5 \muM, y un \Delta(ADN-PK/PI3-K) de 1.

Inhibición de la ATM

Para establecer la acción inhibidora de los compuestos sobre la ATM in vitro, se utilizaron los siguientes ensayos para determinar los valores de CI_{50}.

La proteína ATM se inmunoprecipitó de los extractos nucleares de las células HeLa, utilizando antisuero policlonal de conejo que se une a los residuos del extremo carboxilo libre de \sim500 aminoácidos de la proteína ATM humana. La inmunoprecipitación se llevó a cabo de acuerdo con la metodología descrita por Banin, S. y col. (1998) Enhanced phosphorylation of p53 by ATM in response to ADN damage. Science 281:1674-1677. Se añadieron 10 \mul de la ATM inmunoprecipitada en el tampón C (Hepes 50 mM, pH 7,4, MgCl_{2} 4,6 mM, NaCl 150 mM, ortovanadato de sodio 0,1 mM, MnCl_{2} 4 mM, ditiotreitol 0,1 mM, 10% glicerol) a 32,5 \mul de tampón C que contenía 1 \mug del substrato de la ATM GSTp53N66 en una placa de propileno de 96 pocillos con el fondo en V. El substrato GSTp53N66 son los 66 residuos de aminoácido del extremo amino libre de la p53 de tipo silvestre humana fusionada a la glutatión S-transferasa. La ATM fosforila a la p53 en el residuo serina 15 (Banin, S. y col. (1998) Enhanced phosphorylation of p53 by ATM in response to ADN damage. Science 281:1674-1677). Se añadieron entonces concentraciones variables de inhibidor. Todos los compuestos se diluyeron en DMSO para dar una concentración de ensayo final entre 100 y 1 \muM, con el DMSO a una concentración final del 1%. Tras 10 minutos de incubación a 37ºC, las reacciones se iniciaron mediante la adición de 5 \mul de Na-ATP 50 \muM. Tras 1 hora con agitación a 37ºC, se añadieron 150 \mul de tampón fosfato salino (PBS) a la reacción y se centrifugó la placa a 1500 rpm durante 10 minutos. Se transfirieron entonces 5 \mul de la reacción a una placa blanca opaca de 96 pocillos que contenía 45 \mul de PBS para permitir la unión del substrato GSTp53N66 a los pocillos de la placa. Se cubrió la placa y se incubó a temperatura ambiente durante 1 h con agitación antes de eliminar el contenido. Los pocillos de la placa se lavaron dos veces mediante la adición de PBS con albúmina de suero bovino (BSA) al 3% (p/v) en PBS. La placa se incubó a temperatura ambiente durante 1 hora con agitación antes de eliminar el contenido y de lavar dos veces con PBS. En los pocillos se añadieron 50 \mul de una dilución 1:10.000 de anticuerpo primario de la fosfoserina-15 (Cell signaling Technology, #9284L) en un 3% de BSA/PBS para detectar el evento de la fosforilación en el residuo 15 de serina de la p53 provocado por la ATM-quinasa. Tras 1 hora de incubación a temperatura ambiente con agitación, los pocillos se lavaron cuatro veces con PBS antes de la adición del anticuerpo secundario de conejo conjugado con HRP (Pierce, 31462) y se incubaron en agitación 1 h a temperatura ambiente. Los pocillos se lavaron entonces cuatro veces con PBS antes de la adición del reactivo quimioluminiscente (NEN Renaissance, NEL105). La placa se agitó brevemente, se selló con un precinto transparente y se transfirió a un TopCount NXT para el conteo quimioluminiscente. Las cuentas por segundo, siguiendo un tiempo de conteo de un segundo, se registraron para cada reacción. La inhibición de la actividad de la ATM por los compuestos se calculó tal como se describe más arriba para el ensayo de la ADN-PK.

\vskip1.000000\baselineskip

La selectividad se determinó siguiendo la siguiente ecuación:

\vskip1.000000\baselineskip

22

\vskip1.000000\baselineskip

el compuesto mostró un CI_{50} >100 \muM, y un \Delta(ADN-PK/ATM) >67.

Todos los compuestos mostraron una actividad en la inhibición de la ADN-PK, mostrando un CI_{50} de menos de 12 \muM y/o un % de inhibición a 1 \muM o más de aproximadamente el 22%.

Todos los compuestos mostraron una actividad en la inhibición de la ADN-PK, mostrando un CI_{50} de menos de 1 \muM y/o un % inhibición de más de unos 50 a 1 \muM, incluyendo los compuestos 410, 389 y 413.

\vskip1.000000\baselineskip

Referencias citadas en la descripción

Esta lista de referencias citadas por el solicitante es sólo para la conveniencia del lector. Ésta no forma parte del documento de la patente Europea. Aunque se ha tenido mucho cuidado al compilar las referencias, no se pueden excluir errores u omisiones, por lo que la EPO declina cualquier responsabilidad a este respecto.

Bibliografía no referente a patentes citada en la descripción

\bulletSMITH, G. C. M.; JACKSON, S.P. Genes and Dev., 1999, vol. 13, 916-934 [0002].

\bulletHARTLEY, K.O. et al. Cell, 1995, vol. 82, 849-856 [0004].

\bulletTOKER, A.; CANTLEY, L.C. Nature, 1997, vol. 387, 673-676 [0004].

\bulletJACKSON, S.P. Cancer Surv., 1996, vol. 28, 261-279 [0004].

\bulletLAVIN, M.F.; SHILOH, Y. Annu. Rev. Immunol., 1997, vol. 15, 177-202 [0005].

\bulletIZZARD, R.A. et al. Cancer Res., 1999, vol. 59, 2581-2586 [0006].

\bulletROSENZWEIG, K.E. et al. Clin. Cancer Res., 1999, vol. 3, 1149-1156 [0006].

\bulletDANIEL R et al. Science, 1999, vol. 284, 644-7 [0007].

\bulletGOYTISOLO et al. Mol. Cell. Biol., 2001, vol. 21, 3642-3651 [0007].

\bulletBERGE et al. Pharmaceutically Acceptable Salts. J. Pharm. Sci., 1977, vol. 66, 1-19 [0095].

\bullet T. GREEN; P. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1999 [0099].

\bullet Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Company, 1990 [0149].

\bulletGELL, D.; JACKSON S.P. Nucleic Acids Res., 1999, vol. 27, 3494-3502 [0180].

\bulletSKEHAN, P.; STORUNG, R.; SCUDIERO, R.; MONKS, A.; MCMAHON, J.; VISTICA, D.; WARREN, J. T.; BOKESCH, H.; KENNY, S.; BOYD, M. R. New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer-drug screening. J. Natl. Cancer Inst., 1990, vol. 82, 1107-1112 [0188].

\bulletWYMANN, M. T et al. Wortmannin inactivates phosphoinositide 3-kinase by covalent modification of Lys-802, a residue involved in the phosphate transfer reaction. Mol. Cell Biol., 1996, vol. 16, 1722-1733 [0192].

\bulletBANIN, S. et al. Enhanced phosphorylation of p53 by ATM in response to DNA damage. Science, 1998, vol. 281, 1674-1677 [0195] [0195].

Claims (10)

1. Compuesto de la fórmula Ia:

\vskip1.000000\baselineskip

23

\vskip1.000000\baselineskip

\quad

o su isómero, su sal o su forma protegida químicamente, donde, R^{1} y R^{2} son independientemente hidrógeno, un grupo alquilo C_{1-7}, un grupo cicloalquilo C_{3-7}, un grupo alquenilo C_{2-7}, un grupo cicloalquenilo C_{3-7}, un grupo alquinilo C_{2-7}, un grupo heterociclilo C_{3-20} o un grupo arilo C_{5-20} o bien pueden formar junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos un anillo heterocíclico con 4 a 8 átomos en el anillo;

\quad

R^{3} y R^{4} son juntos -A-B, los cuales representan colectivamente un anillo benceno fusionado substituido en la posición 8 por un grupo heterocíclico tricíclico C_{3-20} o en la posición 6-, 7- u 8- con un grupo fenilo sustituido por fenilo.

2. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R^{1} y R^{2} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo morfolino.

3. Compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en donde el anillo de benceno se sustituye en la posición 8 por un grupo heterocíclico C_{3-20} tricíclico derivado de un sistema carbazol o antraceno con un átomo de azufre y/o oxígeno presente en el anillo central.

4. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en donde el grupo heterocíclico C_{3-20} se deriva del dibenzofurano o dibenzotifeno.

5. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, de fórmula:

\vskip1.000000\baselineskip

24

25

6. Compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, de fórmula:

26

7. Composición farmacéutica que comprende un compuesto tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, y un vehículo o diluyente aceptable farmacéuticamente.

8. Compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para utilizar en un procedimiento de tratamiento del cuerpo humano o de un animal.

9. Utilización de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en la preparación de un medicamento para utilizar como un adyuvante en la terapia contra el cáncer o para la potenciación de las células tumorales para el tratamiento con radiación ionizante o agentes quimioterapéuticos.

10. Utilización de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades retrovirales o enfermedades que mejoran con la inhibición de la ADN-PK.