ES2255017T3 - Procedimiento para producir aceites que contienen acidos grasos insaturados. - Google Patents

Procedimiento para producir aceites que contienen acidos grasos insaturados.

Info

Publication number
ES2255017T3
ES2255017T3 ES04012292T ES04012292T ES2255017T3 ES 2255017 T3 ES2255017 T3 ES 2255017T3 ES 04012292 T ES04012292 T ES 04012292T ES 04012292 T ES04012292 T ES 04012292T ES 2255017 T3 ES2255017 T3 ES 2255017T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
acid
oil
proportion
mortierella
arachidonic acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES04012292T
Other languages
English (en)
Other versions
ES2255017T5 (es
Inventor
Kenichi Higashiyama
Kengo Akimoto
Sakayu Shimizu
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suntory Ltd
Original Assignee
Suntory Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=16904303&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2255017(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Suntory Ltd filed Critical Suntory Ltd
Publication of ES2255017T3 publication Critical patent/ES2255017T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Application granted granted Critical
Publication of ES2255017T5 publication Critical patent/ES2255017T5/es
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00—Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/801—Pediatric
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00—Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/807—Poultry or ruminant feed

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Edible Oils And Fats (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

Un aceite que contiene ácido araquidónico, que tiene una proporción en la composición de 24, 25- metilencolest-5-en-3â-ol en una proporción de 1, 2 o menor con respecto a la proporción en la composición de demosterol, y un contenido de ácido araquidónico de 20 a 54%.

Description

Procedimiento para producir aceites que contienen ácidos grasos insaturados.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a un procedimiento para producir aceites que contienen ácidos grasos insaturados con un bajo contenido de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol, usando microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella.
Técnica relacionada
Los microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella son conocidos como microorganismos que producen ácidos grasos insaturados tales como el ácido araquidónico, ácido dihomo-\gamma-linolénico y ácido eicosapentanoico, y se han desarrollado procedimientos para la producción eficaz de ácido araquidónico, ácido dihomo-\gamma-linolénico y ácido eicosapentanoico por fermentación usando estos microorganismos (Publicaciones de Patentes Japonesas sin examinar Nº 63-44891, Nº 63-12290, Nº 63-14696, Nº 5-91887, Nº 63-14697). Adicionalmente también es conocido un procedimiento para producir ácido mead (ácido 5,8,11-eicosatrienoico) usando cepas mutantes que tienen reducida o defectuosa la actividad desaturante en \Delta12, las cuales se obtienen por mutación de microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella (Publicación de Patente Japonesa sin examinar Nº 5-91888).
Los ácidos grasos insaturados tales como el ácido dihomo-\gamma-linolénico, ácido araquidónico, ácido eicosapentanoico y ácido mead (ácido 5,8,11-eicosatrienoico) son precursores de las prostaglandinas, tromboxanos, prostaciclinas y leucotrienos y similares, que tienen una actividad fisiológica potente y versátil, y por tanto se está dirigiendo mucha atención hacia los alimentos y piensos animales donde se añaden.
Por ejemplo, el ácido araquidónico se dice que es un precursor de las prostaglandinas, tromboxanos, prostaciclinas y leucotrienos que presentan actividad fisiológica que incluye los efectos de contracción y relajación del músculo uterino, los efectos vasodilatador y antihipertensivo, etc., y las investigaciones recientes han progresado rápidamente sobre el ácido docosahexanoico (de aquí en adelante abreviado también "DHA") como un componente esencial particularmente para el desarrollo infantil.
Específicamente, Lanting et al. (LANCET, Vol. 344, 1319-1322 (1994)) han examinado niños desarrollados con leche materna y niños desarrollados con leche en polvo infantil durante 3 semanas o más después de su nacimiento, con un seguimiento hasta los 9 años de edad, estudiando la incidencia de daño menor en los nervios craneales desde una perspectiva del comportamiento, y han publicado que la incidencia de daño cerebral en los niños desarrollados con leche en polvo infantil es dos veces la de los niños desarrollados con leche materna. Este asombroso resultado sugiere que los ácidos grasos insaturados superiores tales como DHA y ácido araquidónico que están presentes en la leche materna pero que están virtualmente ausentes en la leche en polvo infantil juegan un papel en el desarrollo del cerebro. Las subsiguientes publicaciones han mostrado también resultados que sugieren que los ácidos grasos insaturados superiores están conectados con el desarrollo del cerebro y la retina.
No obstante, aunque se considera que los aceites que contiene ácidos grasos insaturados son muy seguros, la cuestión de sus fuentes microbianas ha impedido un amplio uso a lo largo del mundo; mientras tanto, en LIPIDS, Vol. 27, Nº 6, 481-483 (1992), se publicó que la Mortierella alpina 1S-4 produce 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol, lo cual en aquel momento no se conocía que sucediera de forma natural. Por tanto, se han querido desarrollar aceites que contienen ácidos grasos insaturados obtenidos a partir de microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella, que se puedan utilizar de forma más segura para los alimentos y los piensos animales.
Descripción de la invención
Es por tanto un objetivo de la presente invención proporcionar un aceite microorgánico que se pueda usar de forma segura en alimentos y piensos animales y que pueda proporcionar económica y establemente ácidos grasos insaturados.
Para resolver el problema descrito antes, en la presente invención se ha buscado un procedimiento para la producción eficaz de aceites con ácidos grasos insaturados con un bajo contenido de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol, cuyo uso como alimentos es todavía desconocido, y se ha estudiado en detalle la relación entre los diferentes componentes del medio y composiciones de esteroles, como resultado se ha completado la presente invención con el hallazgo de que es posible obtener aceites con una baja proporción en la composición de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol usando una fuente de nitrógeno derivada de la soja para el cultivo de microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella.
En otras palabras, la presente invención proporciona un procedimiento para la producción de aceites que contienen ácidos grasos insaturados, que comprende el cultivo de un microorganismo que pertenece al género Mortierella, subgénero Mortierella en un medio que contiene una fuente de nitrógeno derivada de soja y la recogida de dicho aceite que contiene ácidos grasos insaturados del producto cultivado.
Realización para llevar a cabo la invención
Según la invención, los ácidos grasos insaturados son ácidos grasos con al menos 16 átomos de carbono y al menos un doble enlace, entre los cuales los ácidos grasos insaturados superiores son ácidos grasos generalmente con al menos 18 átomos de carbono y al menos dos dobles enlaces, y como ejemplos se pueden mencionar el ácido \gamma-linolénico, ácido dihomo-\gamma -linolénico, ácido araquidónico, ácido eicosapentanoico y ácido mead (ácido 5,8, 11-eicosatrienoico).
Como ejemplos de microorganismos que pertenecen género Mortierella, subgénero Mortierella según la invención se pueden mencionar Mortierella elongata, Mortierella exigua, Mortierella hygrophila, Mortierella alpina, etc., y específicamente se pueden mencionar Mortierella elongata IFO8570, Mortierella exigua IFO8571, Mortierella hygrophila IFO5941, Mortierella alpina IFO8568, ATCC16266, ATCC32221, ATCC42430, CBS219,35, CBS224,37, CBS250,53, CBS343,66, CBS527,72, CBS529,72, CBS608,70, CBS754,68 y otras líneas celulares.
Estas cepas son todas obtenibles sin restricción del instituto de fermentación, Osaka (IFO), American Type Culture Collection (ATCC) y Centraalbureau voor Schimmelcultures (CBS). También se puede usar la Mortierella elongata SAM0219 (FERM P-8703) (FERM-BP 1239) que se aisló de la suciedad por el grupo de investigación de la presente invención. Estos tipos de líneas celulares de cultivo o las líneas celulares aisladas de origen natural se pueden usar directamente, pero es posible obtener mediante el crecimiento y/o el aislamiento al menos una vez un mutante natural con diferentes propiedades que la línea celular original.
Los microorganismos usados según la invención incluyen cepas mutantes o cepas recombinantes de microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella (cepas salvajes), es decir, las diseñadas para dar o bien un contenido de ácido graso insaturado superior en el aceite, o bien un contenido de aceite total superior, o ambos, comparado con la cantidad producida por la cepa salvaje original, cuando se cultiva usando el mismo sustrato.
También están incluidos los microorganismos diseñados para producir la misma cantidad de ácidos grasos insaturados que la cepa salvaje por medio del uso eficiente de un sustrato con un excelente efecto sobre el coste. Como ejemplos se pueden mencionar Mortierella alpina SAM1861 (FERM BP-3590) como una cepa mutante defectuosa en la actividad desaturante de \Delta12 y la Mortierella alpina SAM1860 (FERM BP-3589) como una cepa mutante defectuosa en la actividad desaturante en \Delta5.
Los microorganismos mencionados antes que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella en la forma de esporas, hifa o un precultivo obtenido mediante el cultivo previo se inoculan en un medio líquido o medio sólido y se cultivan. La fuente de carbono usada puede ser glucosa, fructosa, xilosa, sacarosa, maltosa, almidón soluble, molasas, glicerol, manitol, ácido cítrico, almidón de maíz o cualquier otro convencional, pero son particularmente preferidos la glucosa, maltosa, fructosa, almidón de maíz, glicerol y ácido cítrico.
Según la invención, usando una fuente de nutrientes obtenida de la soja como fuente de nitrógeno es posible bajar la proporción en la composición del 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol en el aceite.
La fuente de nitrógeno derivada de la soja usada en la invención tiene un contenido de nitrógeno de al menos 2% en peso, preferiblemente al menos 3% en peso y más preferiblemente al menos 5% con respecto a los componentes totales excepto el agua. La fuente de nitrógeno derivada de la soja puede ser una o una combinación de diferentes tipos de soja desgrasada o soja sometida a tratamiento con calor; tratamiento ácido; tratamiento con álcalis; tratamiento enzimático; modificación química; desnaturalización y/o renaturalización por procedimientos químicos y/o físicos que incluyen tratamiento con calor, tratamiento ácido, tratamiento con álcalis, tratamiento enzimático, modificación química, etc; separación de una parte de los componentes con agua y/o disolventes orgánicos; separación de una parte de los componentes por filtración y/o centrifugación; congelación; trituración; secado; tamizado; etc, o un producto de procesado de la misma manera que la soja no desgrasada; como candidatos comunes se pueden mencionar soja, soja desgrasada, copos de soja, proteína de soja comestible, okara, leche de soja y harina de soja tostada (kinako), entre los cuales son particularmente preferidos la soja desgrasada desnaturalizada con calor, y especialmente la soja desgrasada desnaturalizada con calor de la que se han eliminado además los componentes solubles en etanol.
Cuando sea necesario se pueden añadir también una o más fuentes diferentes de nitrógeno adicionales ya que la composición de esteroles no se ve notablemente afectada, y ejemplos incluyen fuentes de nitrógeno orgánicas tales como peptona, extracto de levadura, extracto de malta, extracto de carne, ácido casamínico, licor de maíz macerado y urea, y fuentes de nitrógeno inorgánicas tales como nitrato de sodio, nitrato de amonio y sulfato de amonio.
Se pueden usar también, cuando sean necesarias, fuentes de nutrientes en trazas, que incluyen sales inorgánicas tales como fosfato de potasio, dihidrógenofostato de potasio y otras sales de fosfato, sulfato de amonio, sulfato de sodio, sulfato de magnesio, sulfato de hierro, sulfato de cobre, cloruro de magnesio, cloruro de calcio, etc., y vitaminas.
Según la invención, la acumulación del ácido graso insaturado de interés se puede acelerar realizando el cultivo con adición de un sustrato para el ácido graso insaturado en el medio. El sustrato usado para el ácido graso insaturado puede ser, por ejemplo, un hidrocarburo tal como hexadecano u octadecano, un ácido graso tal como ácido oleico o ácido linólico o una sal, por ejemplo una de sus sales de sodio o potasio, o un éster de ácido graso tal como un éster etílico, éster de ácido graso y glicerol o un éster de ácido graso y sorbitano; o un aceite tal como aceite de oliva, aceite de soja, aceite de colza, aceite de semilla de algodón o aceite de cacahuete, y éstos se pueden usar solos o en combinaciones. La cantidad total del sustrato añadido es de 0,001 a 10% en peso, y preferiblemente de 0,5 a 10% en peso, con respecto al medio. Cualquiera de estos sustratos se puede usar también como la única fuente de carbono para el cultivo.
Las fuentes de carbono, fuentes de nitrógeno, sales inorgánicas, vitaminas y/o aditivos mencionados antes se pueden añadir al medio antes de comenzar el cultivo o al caldo de cultivo durante el mismo. Los componentes del medio se pueden añadir de una vez, o de forma continua o periódica con unas pocas adiciones. Los componentes del medio se pueden añadir cada uno sólo o como una mezcla. No hay restricciones particulares en las concentraciones de los componentes del medio ya que el crecimiento de las células no se inhibe. En la práctica, la fuente de carbono debe estar a una concentración de 0,1 a 30% en peso, preferiblemente de 1 a 15% en peso, y la fuente de nitrógeno debe estar a una concentración de 0,01 a 10% en peso, y preferiblemente de 0,1 a 5% en peso.
La temperatura del cultivo es de 5 a 40ºC, y preferiblemente de 20 a 30ºC, y el ácido graso insaturado se puede producir también por crecimiento de células cultivando de 20 a 30ºC seguido por cultivo continuado de 5 a 20ºC. Esta forma de control de la temperatura se puede emplear también para aumentar el rendimiento del contenido en los ácidos grasos insaturados superiores que se producen. El pH del medio es de 4 a 10, y preferiblemente de 5 a 8, y se cultiva con aireación y agitación, se puede emplear cultivo con agitación o cultivo estático. El cultivo se lleva a cabo normalmente durante de 2 a 20 días, preferiblemente de 5 a 20 días, y más preferiblemente de 5 a 15 días.
Se puede usar un fermentador, especialmente un fermentador de cultivos con aireación y agitación o un fermentador de cultivos de inyección de aire para cultivos sumergidos con aireación para posibilitar la producción con rendimientos convenientes de aceites que contienen ácidos grasos insaturados como productos comerciales. En tales casos, el aceite que contiene ácidos grasos insaturados puede ser incluso más eficazmente producido manteniendo durante el cultivo una concentración de glucosa de al menos 0,3% en peso y/o una concentración media de glucosa de al menos 0,5% en peso, preferiblemente una concentración de glucosa de al menos 0,5% en peso y/o una concentración media de glucosa de al menos 0,7% en peso, y más preferiblemente una concentración de glucosa de 0,5-5% en peso y/o una concentración media de glucosa de 0,7-3% en peso, durante al menos 3 días después del comienzo del cultivo. Por ejemplo, se pueden producir 100 mg o más de ácido araquidónico, y preferiblemente 120 mg o más por cada gramo de células secas.
Por tanto, un aceite que es rico en el ácido graso insaturado deseado y pobre en 24, 25-metilencolest-5-en-3\beta-ol, se acumula en grandes cantidades en las células.
El aceite deseado se puede obtener según un método convencional a partir del caldo de cultivo tomado durante la producción del aceite mediante el cultivo de células o después de su esterilización, del caldo de cultivo obtenido al final del cultivo o después de su esterilización, o de las células cultivadas de cualquiera de ellos, alternativamente en forma seca.
El aceite deseado se puede recoger de las células cultivadas por el siguiente método, por ejemplo.
Después de que se completa el cultivo, las células cultivadas se obtienen del caldo de cultivo por un medio de separación sólido/líquido convencional tal como centrifugación y/o filtración. Las células cultivadas preferiblemente se lavan, se rompen y se secan. El secado se puede lograr por secado por congelación o secado al aire, o similares. Las células secas se someten preferiblemente a extracción con un disolvente orgánico preferiblemente bajo una corriente de nitrógeno. El disolvente orgánico usado puede ser éter, hexano, metanol, etanol, cloroformo, diclorometano, éter de petróleo o similares, y se pueden obtener también resultados satisfactorios por extracción alternada con metanol y éter de petróleo o por extracción usando un sistema monocapa de cloroformo-metanol-agua.
Por separación del disolvente orgánico del extracto bajo presión reducida, es posible obtener un aceite que contiene ácidos grasos insaturados en una alta concentración. La extracción se puede lograr también usando células húmedas, en su lugar o por el método descrito antes. En este caso se usa un disolvente compatible con agua tal como metanol o etanol, o un disolvente mezclado compatible con agua que incluye uno de estos disolventes con agua y/o otro disolvente. Los otros procedimientos son los mismos que los descritos antes.
El aceite obtenido de esta manera contiene los ácidos grasos insaturados en un estado de triglicéridos y fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina o fosfatidilinositol, pero la mayoría del aceite está en la forma de triglicéridos. Para separar y purificar los triglicéridos que contienen ácidos grasos insaturados del aceite que contiene ácidos grasos insaturados recogido del producto cultivado, se puede usar un método convencional para la extracción con hexano seguido de tratamiento de desacidificación, decoloración, desodorización y desgomado, o separación por enfriamiento.
Según la invención, la proporción en la composición del 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol se determina por el siguiente método basado en el análisis de la composición de esteroles.
Se explicará primero el análisis de la composición de esteroles. Una porción de 30 a 80 mg del aceite se pesa dentro de un tubo de ensayo con un tapón, se añaden 4 ml de metanol y 1 ml de solución de hidróxido de potasio acuoso al 33%, y se ajusta el tapón. Después de reacción durante una hora mientras se agita suavemente a 80ºC, la mezcla se deja enfriar y se extraen los componentes solubles en aceite con hexano. La solución de hexano resultante se lava con agua hasta que el indicador de fenoftaleína no colorea la capa acuosa, y después se concentra a presión reducida para obtener una muestra analítica. La muestra analítica se disuelve en una pequeña cantidad de hexano y se somete a cromatografía de gases en las condiciones listadas en la tabla dada posteriormente. Comparando el cromatograma de gases con un desmosterol estándar comercialmente disponible, se identifican los picos del desmosterol.
Los componentes que se detectan de 0,8 a 2,0 veces el tiempo de retención del desmosterol son los componentes esteroles, y las áreas de los picos de los cromatogramas de gas para todos los componentes de esteroles dentro del tiempo de retención se determinan por un método convencional. La proporción del área del pico de cada componente a la suma de las áreas totales de los picos de los componentes se toma como la proporción en la composición de cada componente. Por ejemplo, la proporción del área del pico detectada para el desmosterol con respecto a la suma del área total del esterol es la proporción en la composición del desmosterol. El 24, 25-metilencolest-5-en-3\beta-ol se detecta en un tiempo de retención de 1,07 a 1,12 veces el tiempo de retención del desmosterol. La proporción del área del pico detectada para el 24, 25-metilencolest-5-en-3\beta-ol con respecto a la suma de todas las áreas de los picos es la proporción en la composición del 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol.
Columna usada: ULBON HR-1 (diámetro interno: 0,25 mm, longitud: 25 m)
Temperatura de la columna: 280ºC
Temperatura de entrada y del detector: 300ºC
Vehículo del gas y presión del indicador, helio: 1,2 kg/cm^{2}
Composición del gas y caudal, nitrógeno: 70 ml/minuto
Detector FID
Proporción de separación: 20
El aceite que contiene ácidos grasos insaturados de la invención tiene una proporción en la composición de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol de 35% o menor, preferiblemente 33% o menor, y más preferiblemente 30% o menor, y/o la proporción de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol es 1,2 o inferior, preferiblemente 0,9 o inferior y más preferiblemente 0,6 o inferior con respecto al desmosterol presente en el aceite. El desmosterol es un componente incluido con el 24, 25-metilencolest-5-en-3\beta-ol en aceites obtenidos por cultivo de microorganismos que pertenecen al género Mortierella, subgénero Mortierella, y se sabe que está presente en la leche materna.
Como ejemplo de un aceite que contiene ácidos grasos insaturados según la invención se puede mencionar un aceite que contiene ácido araquidónico de 20 a 54% en peso y preferiblemente de 30 a 50% en peso de ácido araquidónico con respecto al total de los ácidos grasos en el aceite, y una proporción en la composición de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol de 35% o inferior, preferiblemente 33% o inferior y más preferiblemente 30% o inferior y/o una proporción de 24, 25-metilencolest-5-en-3\beta-ol de 1,2 o inferior, preferiblemente 0,9 o inferior y más preferiblemente 0,6 o inferior con respecto al desmosterol presente en el aceite.
Las propiedades del aceite que contiene ácido araquidónico son tales que el contenido de triglicérido es 90% o superior, el contenido de humedad es 0,1% o inferior, el valor ácido es 0,5 o inferior y el valor de peróxido es 5 o inferior, mientras que el color es \leq50 amarillo y \leq10 por el método de Lovibond en una célula de 133,4 mm, y la composición del ácido graso es de 20 a 54%, preferiblemente con 30 a 50% de ácido araquidónico, 0,2 a 0,7% de ácido mirístico, 10 a 16% de ácido palmítico, 4 a 10% de ácido esteárico, 5 a 15% de ácido oleico, 5 a 15% de ácido linólico, 1 a 5% de ácido \gamma-linolénico, 0,1 a 2% de ácido \alpha-linolénico, 1 a 6% de ácido dihomo-\gamma-linolénico, 0 a 1% de ácidoeicosapentanoico y 2 a 7% de ácido lignocérico.
El aceite es rico en la forma de triglicérido del ácido araquidónico, y o bien no contiene ácido eicosapentanoico o bien lo contiene sólo en una cantidad en trazas, y es por tanto deseable como material para alimentos, y especialmente para fórmulas para niños prematuros, fórmulas infantiles, alimentos para bebés y alimentos para gestantes. El aceite que contiene ácidos grasos insaturados de la invención se puede usar también de forma segura en alimentos y piensos animales debido a su bajo contenido de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol, cuya uso como alimento todavía no se ha establecido.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos
La presente invención se explicará ahora en más detalle por medio de Ejemplos
Ejemplo 1
Usando la Mortierella elongata IFO8570 como la línea celular para producir ácido araquidónico, se colocaron 1400 l de un medio que contenía glucosa al 2%, proteína de soja comestible al 1% (nombre comercial: Esusan Meat, producto de Ajinomoto Co.) y aceite de colza al 0,1% en un equipo fermentador de 2000 l equipado con un agitador y un aireador y el cultivó con aireación y agitación se inició en condiciones de 28ºC de temperatura, 1,0 vvm de aireación, 80 rpm de agitación y 1,0 kg/cm^{2}G de presión en el espacio de cabeza. La concentración de glucosa se mantuvo a 1,5% por alimentación con glucosa, y después de cultivo durante 7 días se recuperaron las células por filtración y se sometieron a extracción del aceite. Como Ejemplo comparativo, el cultivo y la extracción del aceite se llevaron a cabo de la misma manera usando extracto de levadura al 1% en vez de proteína de soja
comestible.
Al analizar la composición de esteroles del aceite resultante según el procedimiento descrito antes, se detectó desmosterol a un tiempo de retención de aproximadamente 9,6 minutos y el 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol se detectó a un tiempo de retención de aproximadamente 10,5 minutos. En el Ejemplo comparativo, se detectó desmosterol a un tiempo de retención de aproximadamente 6,5 minutos y el 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol se detectó a un tiempo de retención de aproximadamente 7,2 minutos. Los resultados se muestran en la Tabla 1. Por tanto, se obtuvo un aceite que contiene ácido araquidónico con una baja proporción en la composición de 24,25-metilencolest-
5-en-3\beta-ol.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 1
Proporción en la compo- Proporción en la A/B Contenido Contenido
sición de 24,25-metilen- composición del total de de ácido
colest-5-3\beta-ol (A) desmosterol (B) esteroles* araquidónico**
Ejemplo 30% 65% 0,46 1% 8%
Ejemplo comparativo 65% 27% 2,41 1% 9%
* contenido de esteroles en el aceite
** contenido de ácido araquidónico con respecto al total de ácidos grasos en el aceite 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 2
Se usó la Mortierella alpina CBS754,68 como la línea celular para producir ácido araquidónico, se colocaron
600 l de un medio que contenía glucosa al 4%, harina de soja tostada al 1,3% (kinako), extracto de levadura al 0,2% y aceite de oliva al 0,1% en un equipo fermentador de 1000 l equipado con un agitador y un aireador para el cultivó con aireación y agitación durante 5 días en condiciones de 24ºC de temperatura, 1,0 vvm de aireación, 100 rpm de agitación y 0,5 kg/cm^{2}G de presión en el espacio de cabeza, seguido de filtración y secado para recuperar las células y extracción con hexano para obtener un aceite. Como ejemplo comparativo, el cultivo se llevó a cabo de la misma manera usando un medio de glucosa al 4%, extracto de levadura al 1,5% y aceite de oliva al 0,1% para obtener un aceite. Tanto en el Ejemplo como en el Ejemplo comparativo se añadió glucosa al 1% en el segundo día de
cultivo.
Al analizar la composición de esteroles del aceite resultante según el procedimiento descrito antes, se detectó desmosterol a un tiempo de retención de aproximadamente 10,2 minutos y el 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol se detectó a un tiempo de retención de aproximadamente 11,2 minutos. En el Ejemplo comparativo, se detectó desmosterol a un tiempo de retención de aproximadamente 6,4 minutos y el 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol se detectó a un tiempo de retención de aproximadamente 7,1 minutos. Los resultados se muestran en la Tabla 2. Por tanto, se obtuvo un aceite que contiene ácido araquidónico con una baja proporción en la composición de 24,25-metilencolest-
5-en-3\beta-ol.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2
Proporción en la compo- Proporción en la A/B Contenido Contenido
sición de 24,25-metilen- composición del total de de ácido
colest-5-3\beta-ol (A) desmosterol (B) esteroles* araquidónico**
Ejemplo 25% 53% 0,47 1,2% 48%
Ejemplo comparativo 68% 16% 4,25 1,1% 46%
* contenido de esteroles en el aceite
** contenido de ácido araquidónico con respecto al total de ácidos grasos en el aceite
Ejemplo 3
Se usó la Mortierella alpina ATCC32221 y la Mortierella alpina ATCC42430 como las líneas celulares para producir ácido araquidónico, y se cultivó cada una. Después de colocar 25 l de un medio que contenía glucosa al 4%, polvo de soja desgrasada al 1,2%, hidrogenofosfato de potasio al 0,2% y aceite de soja al 0,1% en un equipo fermentador de 50 l equipado con un agitador y un aireador, se llevó a cabo el cultivó con aireación y agitación durante 5 días en condiciones de 28ºC de temperatura, 1,0 vvm de aireación, 300 rpm de agitación y 1,0 kg/cm^{2}G de presión en el espacio de cabeza, seguido de filtración y secado para recuperar las células y extracción con hexano para obtener un aceite de las células recuperadas.
Como Ejemplo comparativo, el cultivo se llevó a cabo de la misma manera usando un medio de glucosa al 4%, polvo de levadura de cerveza al 1,2%, hidrogenofosfato de potasio al 0,2% y aceite de colza al 0,1% para obtener un aceite. Tanto en el Ejemplo como en el Ejemplo comparativo se añadió glucosa al 1% en el segundo día de cultivo. La composición de esteroles del aceite resultante se analizó según el procedimiento descrito antes. Los resultados se muestran en la Tabla 3. Por tanto, se obtuvo un aceite que contiene ácido araquidónico con una baja proporción en la composición de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 3
Proporción en la compo- Proporción en la A/B Contenido Contenido
sición de 24,25-metilen- composición del total de de ácido
colest-5-3\beta-ol (A) desmosterol (B) esteroles* araquidónico**
Mortierella alpina 5% 67% 0,07 0,9% 25%
ATCC32221
Ejemplo comparativo 37% 28% 1,32 0,8% 20%
Mortierella alpina 5% 35% 0,14 0,9% 18%
ATCC42430
Ejemplo comparativo 40% 25% 1,60 1,0% 18%
* contenido de esteroles en el aceite
** contenido de ácido araquidónico con respecto al total de ácidos grasos en el aceite 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 4
Se usó la Mortierella alpina CBS754,68 como la línea celular para producir ácido araquidónico, se colocaron 1400 l de un medio que contenía glucosa al 2%, proteína de soja al 1,5% y aceite de soja al 0,1% en un equipo fermentador de 2000 l equipado con agitación y aireación, y se inició el cultivó con aireación y agitación en condiciones de 24ºC de temperatura, 1 vvm de aireación, 80 rpm de agitación y 200 kPa de presión en el espacio de cabeza. La concentración de glucosa se mantuvo de 0,5 a 1,5% por alimentación con glucosa, y después de cultivo durante 7 días se recuperaron las células por filtración. Después de secar las células, se extrajeron con hexano, el aceite extraído se sometió a desacidificación, decoloración y desodoración, y se añadió tocoferol al 0,05% como antioxidante. El aceite resultante se analizó y se encontró que tenía la siguiente composición.
\vskip1.000000\baselineskip
Resultados del análisis
Contenido de triglicéridos: 95,6%
Humedad: 0,04%
Valor ácido: 0,08
Valor de peróxido: 2,16
Color (método de Lovibond, células de 133,4 mm): amarillo: 20,1, rojo: 1,4
Composición de ácidos grasos:
ácido araquidónico 44,4%
ácido mirístico 0,6%
ácido palmítico 14,6%
ácido esteárico 8,8%
ácido oleico 6,3%
ácido linólico 10,2%
ácido \gamma-linolénico 3,2%
ácido \alpha-linolénico 0,8%
ácido dihomo-\gamma-linolénico 5,2%
ácido eicosapentanoico 0,2%
ácido lignocérico 4,8%
Contenido total de esteroles: 1,0%
Proporción en la composición del 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol: 24%
Proporción en la composición del desmosterol: 67%
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 5
El aceite que contiene ácido araquidónico obtenido en el Ejemplo 4 se mezcló apropiadamente con aceite de pescado y aceite vegetal para obtener un aceite esencial ajustado con ácidos grasos. Adicionalmente al aceite esencial ajustado con ácidos grasos, se prepararon los materiales crudos y los componentes listados a continuación para la formulación de 100 kg de fórmula infantil en polvo. Después de disolver, mezclar y refinar los materiales crudos según métodos convencionales, se esterilizaron, se concentraron y se homogeneizaron, y después se secaron por pulverización para obtener la fórmula infantil en polvo.
\vskip1.000000\baselineskip
Materiales crudos y componentes
caseína 5,6 kg
concentrado de proteína del suero de la leche 24,0 kg
aceite esencial ajustado con ácidos grasos 25,0 g
\hskip1cm compuesto principalmente por ácido linólico, ácido \alpha-linolénico)
\hskip1cm contenido de ácido araquidónico 80 g
\hskip1cm contenido de ácido docosahexanoico 25 g
\hskip1cm contenido de ácido eicosapentanoico 10 g
sacáridos (lactosa y oligosacáridos) 43,4 kg
minerales y vitaminas 2 kg
TOTAL 100 kg

Claims (5)

1. Un aceite que contiene ácido araquidónico, que tiene una proporción en la composición de 24,25-metilencolest-5-en-3\beta-ol en una proporción de 1,2 o menor con respecto a la proporción en la composición de demosterol, y un contenido de ácido araquidónico de 20 a 54%.
2. Un aceite que contiene ácido araquidónico según la reivindicación 1, que es un aceite microbiano obtenido de un microorganismo del género Mortierella subgénero Mortierella
3. Un suplemento nutritivo de la dieta, que comprende un aceite que contiene ácido araquidónico según una cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2.
4. Una fórmula para niños prematuros, fórmula infantil, alimento para bebés o productos para la alimentación de gestantes, que comprende un aceite que contiene ácido araquidónico según una cualquiera de las reivindicacio-
nes 1 ó 2.
5. Un pienso animal que comprende un aceite que contiene ácido araquidónico según una cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2.
ES04012292.1T 1996-08-30 1997-08-27 Procedimiento para producir aceites que contienen ácidos grasos insaturados Expired - Lifetime ES2255017T5 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP8-230210 1996-08-30
JP23021096 1996-08-30
JP23021096A JP3792309B2 (ja) 1996-08-30 1996-08-30 不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
ES2255017T3 true ES2255017T3 (es) 2006-06-16
ES2255017T5 ES2255017T5 (es) 2018-02-09

Family

ID=16904303

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES04012292.1T Expired - Lifetime ES2255017T5 (es) 1996-08-30 1997-08-27 Procedimiento para producir aceites que contienen ácidos grasos insaturados
ES97937813.0T Expired - Lifetime ES2224264T5 (es) 1996-08-30 1997-08-27 Procedimiento para preparar grasa o aceite que contiene ácidos grasos insaturados

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES97937813.0T Expired - Lifetime ES2224264T5 (es) 1996-08-30 1997-08-27 Procedimiento para preparar grasa o aceite que contiene ácidos grasos insaturados

Country Status (13)

Country Link
US (4) US7091244B1 (es)
EP (2) EP1454990B2 (es)
JP (1) JP3792309B2 (es)
KR (8) KR101194595B1 (es)
CN (4) CN100502675C (es)
AT (2) ATE277195T2 (es)
AU (1) AU759623C (es)
CA (1) CA2264276C (es)
DE (2) DE69730867T3 (es)
DK (2) DK0957173T3 (es)
ES (2) ES2255017T5 (es)
PT (2) PT1454990E (es)
WO (1) WO1998008967A1 (es)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3792309B2 (ja) 1996-08-30 2006-07-05 サントリー株式会社 不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法
DK1087669T4 (da) 1998-06-17 2010-11-29 Dsm Ip Assets Bv Havdyrfodersammensætning omfattende mikrobielt afledt arachidonsyre
DE19836339B4 (de) 1998-08-11 2011-12-22 N.V. Nutricia Kohlenhydratmischung
US6403349B1 (en) 1998-09-02 2002-06-11 Abbott Laboratories Elongase gene and uses thereof
DE69935995T3 (de) * 1998-10-15 2011-02-10 Dsm Ip Assets B.V. Polyungesättigen fettsäuren nährungsergänzung
KR20010010268A (ko) * 1999-07-19 2001-02-05 유병택 아라키돈산이 강화된 사료 조성물
US7070970B2 (en) 1999-08-23 2006-07-04 Abbott Laboratories Elongase genes and uses thereof
HUP0300081A3 (en) * 2000-02-09 2005-11-28 Basf Ag Novel elongase gene and method for producing multiple-unsaturated fatty acids
US6596302B2 (en) * 2000-04-13 2003-07-22 Abbott Laboratories Infant formulas containing long-chain polyunsaturated fatty acids and uses thereof
US20030060509A1 (en) 2001-08-24 2003-03-27 Elswyk Mary Van Products containing highly unsaturated fatty acids for use by women and their children during stages of preconception, pregnancy and lactation/post-partum
JP3729272B2 (ja) * 2002-05-14 2005-12-21 株式会社Ｊ−オイルミルズ 長鎖高度不飽和脂肪酸及び／又はそのエステル体から成るコク味向上剤、及びこれを含む植物油脂組成物
JP2005529621A (ja) * 2002-06-19 2005-10-06 デーエスエム イーペー アセッツ ベスローテン フェンノートシャップ 微生物細胞及び微生物油の低温殺菌方法
CN112176006A (zh) 2002-10-11 2021-01-05 日本水产株式会社 制备具有不可皂化物含量降低的微生物油脂的方法和所述油脂
KR101206865B1 (ko) * 2003-07-09 2012-11-30 제이-오일 밀스, 인코포레이티드 장쇄의 고도로 불포화된 지방산의 분해 생성물 또는 이의 추출물을 함유하는 감칠맛 향상제
TWI356681B (en) * 2003-11-12 2012-01-21 J Oil Mills Inc Body taste improver comprising long-chain highly u
TW200526131A (en) * 2003-11-12 2005-08-16 J Oil Mills Inc Method of application of body taste enhancer comprising long-chain highly unsaturated fatty acid and/or its ester
EP1597978A1 (en) 2004-05-17 2005-11-23 Nutricia N.V. Synergism of GOS and polyfructose
US8252769B2 (en) 2004-06-22 2012-08-28 N. V. Nutricia Intestinal barrier integrity
MXPA06015071A (es) * 2004-06-22 2007-08-06 Nutricia Nv Mejoramiento de la integridad de barrera con acidos grasos en pacientes con vih.
JP4624040B2 (ja) * 2004-09-06 2011-02-02 日本水産株式会社 菌体培養方法
US7588931B2 (en) * 2004-11-04 2009-09-15 E. I. Du Pont De Nemours And Company High arachidonic acid producing strains of Yarrowia lipolytica
JP2009284859A (ja) * 2008-05-30 2009-12-10 J-Oil Mills Inc 飲食品の甘味増強剤および甘味増強方法
DK2493325T3 (da) * 2009-10-28 2021-02-15 Valio Ltd Valleproteinprodukt og en fremgangsmåde til dets fremstilling
WO2012118173A1 (ja) * 2011-03-03 2012-09-07 日本水産株式会社 リパーゼによる高度不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法
CN108771240A (zh) * 2011-07-21 2018-11-09 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 脂肪酸组合物
EP2826384A1 (de) 2013-07-16 2015-01-21 Evonik Industries AG Verfahren zur Trocknung von Biomasse
US11324234B2 (en) 2014-10-02 2022-05-10 Evonik Operations Gmbh Method for raising animals
DK180016B1 (da) 2014-10-02 2020-01-22 Evonik Degussa Gmbh Feedstuff of high abrasion resistance and good stability in water, containing PUFAs
CA2958460C (en) 2014-10-02 2022-09-13 Evonik Industries Ag Process for producing a pufa-containing feedstuff by extruding a pufa-containing biomass
CA2958457C (en) 2014-10-02 2022-10-25 Evonik Industries Ag Process for producing a pufa-containing biomass which has high cell stability
CN109266698B (zh) * 2018-05-17 2022-10-28 梁云 被孢霉属微生物油脂中脂肪酸组合物成分调整的方法
CN117730810A (zh) * 2024-01-24 2024-03-22 广东海洋大学 橄榄油在提高东风螺幼虫变态率和/或存活率中的应用

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0155420B1 (en) 1984-02-09 1988-03-23 The Agency of Industrial Science and Technology A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom
JPH0716424B2 (ja) * 1985-10-01 1995-03-01 ライオン株式会社 アラキドン酸含有脂質の製造方法
JPH0734752B2 (ja) 1986-03-31 1995-04-19 サントリー株式会社 アラキドン酸及びこれを含有する脂質の製造方法
US5204250A (en) 1986-03-31 1993-04-20 Suntory Limited Process for production of arachidonic acid
EP0252716B1 (en) * 1986-07-08 1993-01-07 Suntory Limited Process for production of bishomo- gamma-linolenic acid and eicosapentaenoic acid
JPS63116643A (ja) 1986-11-04 1988-05-20 Kazumitsu Maruta γ―リノレン酸含有食用組成物
JPS63133994A (ja) 1986-11-21 1988-06-06 Lion Corp γ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法
JPS63133944A (ja) 1986-11-25 1988-06-06 Kawanishi Shoji:Kk 生あんの保存方法
JP2520118B2 (ja) 1986-12-09 1996-07-31 株式会社 ニホンゲンマ クリ−ムはんだ
EP0276541B2 (en) 1987-01-28 1998-08-26 Suntory Limited Process for production of arachidonic acid
JPS6438007A (en) 1987-04-28 1989-02-08 Lion Corp Skin external preparation
JP2697834B2 (ja) 1988-02-02 1998-01-14 サントリー株式会社 高度不飽和脂肪酸成分添加人工乳
JPH01304892A (ja) 1988-02-03 1989-12-08 Suntory Ltd 高度不飽和脂肪酸強化油脂の製造方法
JP2723243B2 (ja) 1988-02-25 1998-03-09 サントリー株式会社 高度不飽和脂肪酸添加動物飼料
US5093249A (en) 1989-05-24 1992-03-03 Idemitsu Petrochemical Co., Ltd. Process for production of dihomo-γ-linolenic acid and inhibitor for unsaturation reaction at Δ5-position of fatty acid
JP2958361B2 (ja) 1989-05-24 1999-10-06 出光石油化学株式会社 ジホモ―γ―リノレン酸の製造法および脂肪酸の△５位不飽和化反応抑制剤
GB9002048D0 (en) 1990-01-30 1990-03-28 Efamol Holdings Essential fatty acid compositions and treatments
US5407957A (en) 1990-02-13 1995-04-18 Martek Corporation Production of docosahexaenoic acid by dinoflagellates
JP2944132B2 (ja) 1990-03-23 1999-08-30 サントリー株式会社 新規高度不飽和脂肪酸並びに該脂肪酸又はこれを含有する脂質の製造方法
US5658767A (en) 1991-01-24 1997-08-19 Martek Corporation Arachidonic acid and methods for the production and use thereof
PH11992043811B1 (en) * 1991-01-24 2002-08-22 Martek Corp Arachidonic acid and methods for the production and use thereof
EP0522470B1 (en) 1991-07-11 1996-05-22 Idemitsu Petrochemical Co., Ltd. Triglyceride-containing dry cell fragments and method of preparing them
JPH05308979A (ja) 1992-05-01 1993-11-22 Idemitsu Petrochem Co Ltd トリグリセリド含有乾燥菌体破砕物とその製造法
JPH0517796A (ja) 1991-07-11 1993-01-26 Idemitsu Petrochem Co Ltd トリグリセリドの回収方法
JP3354581B2 (ja) 1991-09-30 2002-12-09 サントリー株式会社 ジホモ−γ−リノレン酸及びこれを含有する脂質の製造方法
JP3354582B2 (ja) * 1991-09-30 2002-12-09 サントリー株式会社 オメガ９系高度不飽和脂肪酸およびこれを含有する脂質の製造方法
JPH06172263A (ja) 1992-08-14 1994-06-21 Agency Of Ind Science & Technol 高純度アラキドン酸トリグリセリド及びその製造方法
US5487817A (en) * 1993-02-11 1996-01-30 Hoffmann-La Roche Inc. Process for tocopherols and sterols from natural sources
JPH0741421A (ja) * 1993-05-28 1995-02-10 Suntory Ltd ロイコトリエンｂ４ （ｌｔｂ４ ）による医学的症状の予防及び改善剤
ATE264099T1 (de) 1993-06-09 2004-04-15 Martek Biosciences Corp Für die behandlung neurologischer erkrankungen nützliche methoden und pharmazeutische zusammensetzungen
JP2677949B2 (ja) 1993-08-26 1997-11-17 常盤薬品工業株式会社 アラキドン酸含有健康食品
US5583019A (en) * 1995-01-24 1996-12-10 Omegatech Inc. Method for production of arachidonic acid
CA2627832C (en) 1996-03-28 2012-12-11 Dsm Ip Assets B.V. Preparation of microbial polyunsaturated fatty acid containing oil from pasteurised biomass
ATE215120T1 (de) 1996-05-15 2002-04-15 Dsm Nv Verfahren zum extrahieren von sterol mit einem polaren lösungsmittel zur herstellung eines mikrobiellen öles mit niedrigem sterolgehalt
JP3792309B2 (ja) 1996-08-30 2006-07-05 サントリー株式会社 不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法
JP4633204B2 (ja) * 1996-10-11 2011-02-16 サントリーホールディングス株式会社 アラキドン酸含有食用油脂およびそれを含有する食品

Also Published As

Publication number Publication date
CN1507789A (zh) 2004-06-30
DK0957173T4 (en) 2017-07-17
JP3792309B2 (ja) 2006-07-05
EP0957173B1 (en) 2004-09-22
CA2264276C (en) 2011-04-19
ATE277195T2 (de) 2004-10-15
CN101268828A (zh) 2008-09-24
DE69730867D1 (de) 2004-10-28
CN1232507A (zh) 1999-10-20
AU759623B2 (en) 2003-04-17
KR101475713B1 (ko) 2014-12-23
KR20080069715A (ko) 2008-07-28
CN1200109C (zh) 2005-05-04
KR20140035533A (ko) 2014-03-21
CN100502675C (zh) 2009-06-24
ES2255017T5 (es) 2018-02-09
AU4031197A (en) 1998-03-19
DK1454990T3 (da) 2006-04-10
WO1998008967A1 (en) 1998-03-05
DK1454990T4 (en) 2018-01-02
ES2224264T3 (es) 2005-03-01
KR101475711B1 (ko) 2014-12-23
EP0957173A1 (en) 1999-11-17
CN1806644A (zh) 2006-07-26
KR20140012196A (ko) 2014-01-29
AU719123B2 (en) 2000-05-04
DE69735278T3 (de) 2018-02-08
EP1454990B2 (en) 2017-09-27
US7091244B1 (en) 2006-08-15
CA2264276A1 (en) 1998-03-05
AU759623C (en) 2007-01-04
EP0957173B2 (en) 2017-04-12
DK0957173T3 (da) 2017-07-17
KR20090132646A (ko) 2009-12-30
US9464305B2 (en) 2016-10-11
CN101268828B (zh) 2013-10-23
US20060252736A1 (en) 2006-11-09
US8841097B2 (en) 2014-09-23
DE69730867T3 (de) 2017-08-31
PT1454990E (pt) 2006-05-31
KR101391880B1 (ko) 2014-05-07
EP1454990B1 (en) 2006-02-22
DE69730867T2 (de) 2005-09-22
EP0957173A4 (en) 2000-02-02
KR20000035882A (ko) 2000-06-26
US9493798B2 (en) 2016-11-15
AU5053700A (en) 2001-03-29
DE69735278T2 (de) 2006-08-03
CN1806644B (zh) 2010-12-01
KR20100082380A (ko) 2010-07-16
PT957173E (pt) 2005-01-31
KR20140023445A (ko) 2014-02-26
JPH1070992A (ja) 1998-03-17
ES2224264T5 (es) 2017-08-30
KR20120047922A (ko) 2012-05-14
EP1454990A1 (en) 2004-09-08
KR101194595B1 (ko) 2012-10-25
US20060189588A1 (en) 2006-08-24
ATE318323T2 (de) 2006-03-15
US20060073578A1 (en) 2006-04-06
DE69735278D1 (de) 2006-04-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2255017T3 (es) Procedimiento para producir aceites que contienen acidos grasos insaturados.
ES2804757T3 (es) Métodos para producir ácido graso poliinsaturado y lípido que contiene ácido graso poliinsaturado
ES2300115T3 (es) Grasas comestibles que contienen acido arachidonico y alimentos que contienen las mismas.
ES2661674T3 (es) Procedimiento de producción de grasa o aceite microbiano que tiene un contenido rebajado de materia no saponificable y dicha grasa o aceite
PT935667E (pt) Processo para a preparação de áçido docosa-hexaenóico e de áçido docosapentaenóico
JP2004215668A (ja) ドコサヘキサエン酸およびドコサヘキサエン酸を含む化合物
Shahidi Nutraceutical and specialty lipids