ES2235171T3 - Dipeptidos que promueven la liberacion de la hormona de crecimiento. - Google Patents

Dipeptidos que promueven la liberacion de la hormona de crecimiento.

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ES2235171T3 ES95918123T ES95918123T ES2235171T3 ES 2235171 T3 ES2235171 T3 ES 2235171T3 ES 95918123 T ES95918123 T ES 95918123T ES 95918123 T ES95918123 T ES 95918123T ES 2235171 T3 ES2235171 T3 ES 2235171T3
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Abstract

COMPUESTOS DE FORMULA (I) SON MIMETICOS DEL PEPTIDO LIBERADOR DE LA HORMONA DEL CRECIMIENTO QUE SON UTILES PARA EL TRATAMIENTO Y PREVENCION DE LA OSTEOPOROSIS.

Description

Dipéptidos que promueven la liberación de la hormona de crecimiento.
Esta invención se refiere a compuestos de dipéptido que son miméticos de péptidos de liberación de la hormona de crecimiento (GHRP) y son útiles para el tratamiento y la prevención de la osteoporosis.
Antecedentes de la invención
La hormona de crecimiento, que se segrega desde la pituitaria, estimula el crecimiento de todos los tejidos del cuerpo que son capaces de crecer. Además, se sabe que la hormona de crecimiento tiene los siguientes efectos básicos sobre el procedimiento metabólico del cuerpo:
1. Aumento de la velocidad de la síntesis proteica en todas las células del cuerpo;
2. disminución de la velocidad de la utilización de hidratos de carbono en células de todo el cuerpo;
3. aumento de la movilización de los ácidos grasos libres y uso de ácidos grasos para la energía.
Una deficiencia en la secreción de la hormona de crecimiento puede dar como resultado diversos trastornos médicos, tales como enanismo.
Actualmente se reconoce ampliamente que la mayoría de las deficiencias del crecimiento humano se deben a defectos hipotalámicos que impiden la liberación de la hormona de crecimiento desde la pituitaria y no son el resultado de un déficit primario en la producción de la hormona de crecimiento por la pituitaria. Como resultado, el desarrollo de agentes sintéticos que liberan la hormona de crecimiento y el uso de fármacos que actúan a través de los sistemas neurotransmisores establecidos en el cerebro para estimular la liberación de la hormona de crecimiento se están considerando como alternativas a la tan cara terapia de reemplazamiento de la hormona de crecimiento para la restauración de los niveles normales de la hormona de crecimiento en suero. Strobel y Thomas, Pharm. Rev. 46, Nº 1, págs. 1-34 (1994).
Se conocen diversas maneras de liberar la hormona de crecimiento. Por ejemplo, los compuestos químicos tales como arginina, L-3,4-dihidroxifenilalanina (L-DOPA), glucagón, vasopresina e hipoglucemia inducida por insulina, así como actividades tales como el sueño y el ejercicio, hacen, indirectamente, que la hormona de crecimiento se libere desde la pituitaria actuando de alguna manera sobre el hipotálamo quizás para disminuir la secreción de somatostatina o para aumentar la secreción de secretagogos como el factor de liberación de la hormona de crecimiento (GRF) conocidos o una hormona de liberación de la hormona de crecimiento endógena desconocida o todos ellos.
En los casos en los que se deseaba un aumento de los niveles de la hormona de crecimiento, el problema generalmente se solucionó proporcionando la hormona de crecimiento exógena o administrando un agente que estimula la producción de la hormona de crecimiento y/o su liberación. En cualquier caso la naturaleza del peptidilo del compuesto necesitado que se administrará por inyección. Inicialmente, la fuente de la hormona de crecimiento era la extracción de las glándulas pituitarias de cadáveres. Esto dio como resultado un producto muy caro y conlleva el riesgo de que una enfermedad asociada con la fuente de la glándula pituitaria pueda transmitirse al receptor de la hormona de crecimiento. Recientemente, está disponible la hormona de crecimiento recombinante, que aunque ya no tiene ningún riesgo de transmisión de enfermedades, sigue siendo un producto muy caro que debe administrarse por inyección o mediante un pulverizador nasal.
Se han desarrollado otros compuestos que estimulan la liberación de la hormona de crecimiento endógena tales como compuestos peptidilo análogos relacionados con GRF o los péptidos de la Patente de Estados Unidos 4.411.890. Estos péptidos, aunque son considerablemente más pequeños que las hormonas de crecimiento, siguen siendo susceptibles a diversas proteasas. Como con la mayoría de los péptidos, su potencial para biodisponibilidad oral es bajo.
El documento WO 94/13696 se refiere a ciertas espiropiperidinas y homólogos que promueven la liberación de la hormona de crecimiento. Los compuestos preferidos son de la estructura general mostrada a continuación:
1
El documento WO 94/11012 se refiere a ciertos dipéptidos que promueven la liberación de la hormona de crecimiento. Estos dipéptidos tienen la estructura general
2
en la que L es
3
Se dice que los compuestos de los documentos WO 94/11012 y WO 94/13696 son útiles en el tratamiento de la osteoporosis en combinación con la hormona paratiroidea o un bisfosfonato.
El documento WO 95/11029 describe una combinación para el tratamiento y la prevención de enfermedades que implican reabsorción ósea, especialmente osteoporosis en pacientes ancianos, que comprende un compuesto bisfosfonato y secretagogos de la hormona de crecimiento.
El documento WO 95/09633 describe compuestos de lactama benzo-condensada que tienen la capacidad de estimular la liberación de la hormona de crecimiento natural o endógena.
Sumario de la invención
Los compuestos de la invención están dentro del alcance de la fórmula I mostrada a continuación:
4
en la que
Z es -COC*R^{1}R^{2c}LCOANR^{4}R^{5};
L es NR^{6}, O o CH_{2};
W es hidrógeno o en combinación con X es una benzo condensación en la que W y X se unen para formar un anillo fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente entre R^{3a}, T-R^{3b} y R^{12};
Y es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{4}-C_{10} o aril-K-, fenil-(alquil C_{1}-C_{6})-K o tienil-(alquil C_{1}-C_{6})-K, cada anillo opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre R^{3a}, R^{3b} y R^{12}, donde K es un enlace, O, S(O)_{m} o NR^{2a},
X es OR^{2}, R^{2},
5
6
o en combinación con W es una benzo condensación en la que W y X se unen para formar un anillo fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente entre R^{3a}, -T-R^{3b} y R^{12};
R^{1} es alquilo C_{1}-C_{10}, arilo, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}) y cicloalquil C_{3}-C_{7}-(alquilo C_{1}-C_{6}) o alquil C_{1}-C_{5}-K^{1}-alquilo C_{1}-C_{5}, aril-(alquil C_{0}-C_{5})-K^{1}-(alquilo C_{1}-C_{5}), cicloalquil (C_{3}-C_{7})-(alquil C_{1}-C_{5})-K^{1}-(alquilo C_{1}-C_{5}) donde K^{1} es O, S(O)_{m},
N(R^{2})C(O), C(O)N(R^{2}), OC(O), C(O)O, CR^{2}=CR^{2}- o -C\equivC- donde los grupos arilo se definen más adelante y R^{2} y los grupos alquilo pueden estar sustituidos además con 1-5 halógenos, S(O)_{m}R^{2a}, 1 a 3 de OR^{2a} o C(O)OR^{2a} y los grupos arilo pueden estar sustituidos además con fenilo, fenoxi, arilalquiloxi, halofenilo, 1 a 3 de alquilo C_{1}-C_{6}, 1 a 3 de halógeno, 1 a 2 de OR^{2}, metilendioxi, S(O)_{m}R^{2}, 1 a 2 de CF_{3}, OCF_{3}, nitro, N(R^{2})(R^{2}), N(R^{2})C(O)(R^{2}), C(O)OR^{2}, C(O)N(R^{2})(R^{2}), SO_{2}N(R^{2})(R^{2}), N(R^{2})SO_{2} arilo o N(R^{2})SO_{2}R^{2};
R^{2c} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7} y puede unirse con R^{1} para formar un anillo C_{3}-C_{8} que incluye opcionalmente oxígeno, azufre o NR^{2a};
R^{2} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquilo C_{1}-C_{6} halogenado;
R^{2a} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};
R^{2b} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8}, alquilo C_{1}-C_{8} halogenado, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, alquilarilo o arilo;
R^{3a} es H, F, Cl, Br, I, CH_{3}, OCF_{3}, OCF_{2}H, OCH_{3} o CF_{3};
R^{12} es H, F, Cl, Br, I, CH_{3}, OCF_{3}, OCF_{2}H, OCH_{3} o CF_{3};
T es un enlace o es fenilo o un heterociclo de 5 ó 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, azufre u oxígeno, cada uno opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre F, Cl, Br, I, CH_{3}, OCH_{3}, OCF_{3} y CF_{3};
R^{3b} es hidrógeno, CONR^{8}R^{9}, SO_{2}NR^{8}R^{9}, COOH, COO-alquilo (C_{1}-C_{6}), NR^{2}SO_{2}R^{9}, NR^{2}CONR^{8}R^{9}, ÑR^{2}SO_{2}
NR^{8}R^{9}, NR^{2}C(O)R^{9}, imidazolilo, tiazolilo o tetrazolilo;
R^{4} y R^{5} son independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilo C_{1}-C_{6} sustituido donde los sustituyentes pueden ser de 1 a 5 halo, de 1 a 3 hidoxi, de 1 a 3 alcanoiloxi C_{1}-C_{10}, de 1 a 3 alcoxi C_{1}C_{6}, fenilo, fenoxi, 2-furilo, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{6}, S(O)_{m}(alquilo C_{1}-C_{6}); o R^{4} y R^{5} pueden tomarse juntos para formar -(CH_{2})_{r}L_{a}(CH_{2})_{s}- donde L_{a} es C(R^{2})_{2}, O, S(O)_{m} o N(R^{2}), r y s son independientemente de 1 a 3 y R^{2} es como se ha definido anteriormente;
R^{6} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6}, y puede unirse con R^{2c} para formar un anillo C_{3}-C_{8};
R^{50} es 4-morfolino, 4-(1-metilpiperazinilo), cicloalquilo C_{3}-C_{7} o alquilo C_{1}-C_{6}, cada uno opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados individualmente entre F, OH, OCH_{3}, OCF_{3}, CF_{3} y cicloalquilo C_{3}-C_{7};
M es -C(O)- o -SO_{2}-;
A^{1} es un enlace, alquileno C_{1}-C_{6}, haloalquilenilo C_{1}-C_{6} o hidroxialquilenilo C_{1}-C_{6};
A es un enlace o es
--- Z^{1} --- (CH_{2})_{x} --- 
\melm{\delm{\para}{R ^{7a} }}{C}{\uelm{\para}{R ^{7} }}
--- (CH_{2})_{y} ---
donde x e y son independientemente 0-3;
Z^{1} es N-R^{2} u O; o Z^{1} es un enlace;
R^{7} y R^{7a} son independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, trifluorometilo, fenilo, alquilo C_{1}-C_{6} sustituido donde los sustituyentes son imidazolilo, fenilo, indolilo, p-hidroxifenilo, OR^{2}, S(O)_{m}R^{2}, C(O)OR^{2}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, N(R^{2})(R^{2}), C(O)N(R^{2})(R^{2}); o R^{7} y R^{7a} pueden unirse independientemente a uno o ambos de los grupos R^{4} y R^{5} para formar enlaces alquileno entre el nitrógeno terminal y la porción alquilo de los grupos R^{7} y R^{7a}, donde el enlace contiene de 1 a 5 átomos de carbono; o R^{7} y R^{7a} pueden unirse para formar un anillo de 3 a 7 miembros.
R^{9} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, fenilo, tiazolilo, imidazolilo, furilo o tienilo cada uno opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre Cl, F, CH_{3}, OCH_{3}, OCF_{3} y CF_{3};
R^{8} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilo C_{1}-C_{6} sustituido donde los sustituyentes pueden ser de 1 a 5 halo, de 1 a 3 hidroxi, de 1 a 3 alcanoiloxi C_{1}-C_{10}, de 1 a 3 alcoxi C_{1}-C_{6}, fenilo, fenoxi, alcoxi C_{1}-C_{6}-carbonilo, S(O)_{m}(alquilo C_{1}-C_{6}); o R^{8} y R^{9} pueden tomarse juntos para formar -(CH_{2})_{r}L_{a}(CH_{2})_{s}- donde L_{a} es C(R^{2})_{2}, O, S(O)_{m} o N(R^{2}), r y s son independientemente de 1 a 3;
F^{1}, B, D y E son carbono, nitrógeno, uno de los cuales se une a A^{1} y cada uno de los restantes de F^{1}, B, D y E puede estar opcionalmente sustituido con R^{aa}, R^{bb}; de F^{1}, B, D y E, si no se une a A^{1} también puede ser azufre, oxígeno o carbonilo; F^{1}, B, D y E pueden formar un anillo saturado o insaturado; y uno de F^{1}, B, D y E puede estar opcionalmente ausente para producir un anillo saturado o insaturado de cinco miembros;
R^{aa} es H, alquilo C_{1}-C_{8} opcionalmente sustituido con uno a tres halógenos; o fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno, CH_{3}, OCH_{3}, OCF_{3}, CF_{3} y alquil C_{1}-C_{8}-arilo;
R^{bb} es alquilo C_{1}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}, tioalquilo C_{1}-C_{8}, cada uno opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno, CH_{3}, OCH_{3}, OCF_{3}, CF_{3}; cicloalquilo C_{3}-C_{8}; fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente entre halo, CH_{3}, OCH_{3}, OCF_{3} o CF_{3}; -O-alquilo C_{1}-C_{8}; o -S-alquilo C_{1}-C_{8};
G, H^{1}, I y J son átomos de carbono, nitrógeno, azufre u oxígeno que forman un anillo aromático, un anillo parcialmente saturado o un anillo saturado; uno de G, H^{1}, I o J puede estar opcionalmente ausente para producir un anillo de cinco miembros;
Arilo es fenilo, naftilo o un anillo de 5 ó 6 miembros con 1 a 3 heteroátomos seleccionados entre oxígeno, azufre y nitrógeno; o un sistema de anillos bicíclicos que está opcional e independientemente sustituido con hasta tres sustituyentes seleccionados entre R^{3a}, R^{3b} y R^{12};
m es de 0 a 2;
n es de 0 a 2;
q es de 0 a 3;
y sales farmacéuticamente aceptables y diastereómeros individuales de los mismos.
La invención proporciona compuestos seleccionados entre el grupo compuesto por:
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-[6-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il}-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
Clorhidrato de fenilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-1-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil}-etil)-isobutiramida;
(R)-2-Amino-N-{2-(1H-indol-3-il}-1-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
(R)-N-{2-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida;
(R)-2-Amino-N-{1-benciloximetil-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
(R)-N-[1-[4-(Acetil-fenil-amino)-piperidin-1-carbonil]-2-(1H-indol-3-il)-etil]-2-amino-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilo}-;
2-Amino-N-{1-(R)-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
(R)-2-Amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(2-metil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-[4-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,2-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
(R)-2-Amino-N-[2-[4-(5-cloro-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-benzo[b]tiofen-3-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[5-(tolueno-4-sulfonilamino)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-4-(pirrolidin-1-carbonil)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de (4-hidroxi-butil)-amida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico;
Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(5-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(1-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
Clorhidrato de (R)-3-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida; y
Clorhidrato de {2-[4-(3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico.
Otros compuestos preferidos son:
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benciloxi-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[4-(4-trifluorometil-fenil)-piperidin-1-carbonil]-etil}-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-[4-(4-fluoro-fenil)-piperidin-1-carbonil]-2-{1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)-1-[4-(4-fluoro-fenil)-piperidin-1-carbonil]-etil}-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-bencilsulfanil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-naftalen-1-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(4-tiofen-2-il-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida,
(R)-2-Amino-N-[3-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-propil]-isobutiramida,
Clorhidrato de {2-naftalen-1-il-1-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-carbonil]-etil}-amida del ácido (R)-2-piperidin-4-carboxílico,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-(4-fenoxi-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida,
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida, y
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[4-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-butil]-isobutiramida.
Otros compuestos más preferidos son:
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(4-fenoxi-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida o
Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(4-bencil-piperidin-1-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida.
Esta invención también proporciona:
Un procedimiento para aumentar los niveles de hormona de crecimiento endógena en un ser humano o animal que comprende administrar a tal ser humano o animal una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I;
Un compuesto útil para aumentar la producción endógena o liberación de la hormona de crecimiento en un ser humano o en un animal que comprende un vehículo inerte y una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I;
Un compuesto útil para aumentar la producción endógena o liberación de la hormona de crecimiento en un ser humano o en un animal que comprende un vehículo inerte y una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I usado en combinación con otros secretagogos de la hormona de crecimiento tales como GHRP-6, Hexorelan, GHRP-1, factor de liberación de la hormona de crecimiento (GRF) o uno de sus análogos o IGF-1 o IGF-2, o B-HT920; y
un procedimiento para el tratamiento de la osteoporosis que comprende administrar a un paciente con osteoporosis una combinación de un compuesto de bisfosfonato tal como alendronato, y un compuesto de Fórmula I.
Esta invención proporciona además un procedimiento para tratar o prevenir enfermedades o afecciones que pueden tratarse o prevenirse mediante la hormona de crecimiento que comprende administrar a un mamífero en necesidad de tal tratamiento o prevención una cantidad de un compuesto de Fórmula I que sea eficaz para promover al liberación de dicha hormona de crecimiento.
En otro aspecto, esta invención proporciona composiciones y procedimientos que son útiles para tratar la obesidad, debilidad asociada con la edad y caquexia asociada con SIDA y cáncer.
Los presentes compuestos son análogos de dipéptidos altamente sustituidos para promover la liberación de la hormona de crecimiento que son estables en diversas condiciones fisiológicas y que pueden administrarse por vía parenteral, nasal o por vía oral.
Descripción detallada de la invención
Un especialista normal reconocerá que ciertos sustituyentes indicados en esta invención pueden tener una estabilidad química reducida cuando se combinan con otro o con heteroátomos en los compuestos. Tales compuestos con estabilidad química reducida no se prefieren.
En general, los compuestos de Fórmula I pueden fabricarse mediante procedimientos que incluyen procedimientos conocidos en las técnicas químicas para la producción de compuestos estructuralmente análogos. Ciertos procedimientos para la fabricación de compuestos de Fórmula I se proporcionan como características adicionales de la invención y se ilustran mediante los esquemas de reacción mostrados más adelante.
En las fórmulas estructurales anteriores y a lo largo de esta memoria descriptiva, los siguientes términos tienen los significados indicados:
Los grupos alquilo especificados anteriormente pretenden incluir aquellos grupos alquilo de la longitud indicada en una configuración lineal o ramificada que puede contener opcionalmente dobles o triples enlaces. Son ejemplos de tales grupos alquilo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, butilo terciario, pentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo, alilo, etinilo, propenilo, butadienilo, hexenilo y similares.
Los grupos alcoxi especificados anteriormente pretenden incluir aquellos grupos alcoxi de la longitud indicada en una configuración lineal o ramificada que puede contener opcionalmente dobles o triples enlaces. Son ejemplos de tales grupos alcoxi metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, butoxi terciario, pentiloxi, isopentiloxi, hexiloxi, isohexiloxi, aliloxi, 2-propioniloxi, isobuteniloxi, hexeniloxi y similares.
El término "halógeno" o "halo" pretende incluir los átomos de halógeno flúor, cloro, bromo y yodo.
El término "arilo" pretende incluir fenilo y naftilo y anillos aromáticos de 5 y 6 miembros con 1 a 3 heteroátomos o anillos bicíclicos condensados de 5 ó 6 miembros con 1 a 3 heteroátomos de nitrógeno, azufre u oxígeno. Son ejemplos de tales anillos aromáticos heterocíclicos piridina, tiofeno, furano, benzotiofeno, tetrazol, indol, N-metilindol, dihidroindol, indazol, N-formilindol, bencimidazol, tiazol, pirimidina y tiadiazol.
Algunos de los términos definidos anteriormente pueden aparecer más de una vez en la fórmula anterior y tras tal aparición cada término debe definirse independientemente de la anterior.
A lo largo de la presente solicitud se usan las siguientes abreviaturas con los siguientes significados:
BOC
t-butiloxicarbonilo
BOP
Hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio
CBZ
Benciloxicarbonilo
CDI
N,N'-carbonildiimidazol
CH_{2}Cl_{2}
Cloruro de metileno
CHCl_{3}
Cloroformo
DCC
Diciclohexilcarbodiimida
DMF
Dimetilformamida
EDC
Clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
EtOAc
Acetato de etilo
FMOC
9-Fluorenilmetoxicarbonilo
Hex
Hexano
HOBT
Hidroxibenzotriazol hidrato
HPLC
Cromatografía líquida de alta presión
MHz
Megahercios
EM
Espectro de masas
RMN
Resonancia magnética nuclear
PTH
Hormona paratiroidea
TFA
Ácido trifluoroacético
THF
Tetrahidrofurano
CCF
Cromatografía de capa fina
TRH
Hormona de liberación de tirotropina
Todos los compuestos de la presente invención tienen al menos un centro asimétrico que se indica mediante el asterisco en la Fórmula estructural I, grupo Z anterior. Pueden estar presentes centros asimétricos adicionales en la molécula dependiendo de la naturaleza de los diversos sustituyentes en la molécula. Cada uno de tales centros asimétricos producirá dos isómeros ópticos y se pretende que todos los isómeros ópticos, tales como isómeros ópticos separados, puros o parcialmente purificados, mezclas racémicas o mezclas diastereoméricas de los mismos, se incluyan dentro del ámbito de la presente invención. En el caso del centro asimétrico representado por el asterisco, se ha descubierto que la estereoquímica absoluta del isómero más activo y de esta formar más preferido se muestra en la Fórmula IA. Esta configuración absoluta preferida también se aplica a la Fórmula I. Con el sustituyente R_{2} como hidrógeno, la configuración espacial del centro asimétrico corresponde con la de un D-aminoácido. En la mayoría de los casos también se designa una configuración R aunque esto variará de acuerdo con los valores de R_{1} y R_{2} usados en la realización de las asignaciones estereoquímicas R o S.
Los presentes compuestos generalmente se aíslan en forma de sus sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables, tales como las sales derivadas del uso de ácidos inorgánicos y orgánicos. Son ejemplos de tales ácidos clorhídrico, nítrico, sulfúrico, fosfórico, fórmico, acético, trifluoroacético, propiónico, maleico, succínico, malónico, metanosulfónico y similares. Además, ciertos compuestos que contienen una función ácida tales como un carboxi pueden aislarse en forma de su sal inorgánica en la que el contraión puede seleccionarse entre sodio, potasio, litio, calcio, magnesio y similares, así como entre bases orgánicas.
Los compuestos de Fórmula I que liberan la hormona de crecimiento son útiles in vitro como herramientas únicas para entender cómo se regula la secreción de la hormona de crecimiento en el nivel de la pituitaria. Esto incluye el uso en la evaluación de muchos factores que se cree o se sabe que influyen en la secreción de la hormona de crecimiento tales como la edad, el sexo, factores nutricionales, glucosa, aminoácidos, ácidos grasos, así como estados de ayuno y no ayuno. Además, los compuestos de esta invención pueden usarse en la evaluación de cómo otras hormonas modifican la actividad liberadora de la hormona de crecimiento. Por ejemplo, ya se ha establecido que la somatostatina inhibe la liberación de la hormona de crecimiento. Otras hormonas que son importantes y que necesitan estudiarse con respecto a sus efectos en la liberación de la hormona de crecimiento incluyen las hormonas gonadales, por ejemplo, testosterona, estradiol y progesterona; las hormonas adrenales, por ejemplo, cortisol y otros corticoides, epinefrina y norepinefrina; las hormonas pancreática y gastrointestinal, por ejemplo, insulina, glucagón, gastrina, secretina; los péptidos vasoactivos, por ejemplo, bombesina, las neuroquininas; y las hormonas tiroideas, por ejemplo, tiroxina y triyodotironina. Los compuestos de Fórmula I también pueden emplearse para investigar los posibles efectos de retroalimentación positiva o negativa de algunas de las hormonas de la pituitaria, por ejemplo, hormona de crecimiento y péptidos de endorfina, en la pituitaria para modificar la liberación de la hormona de crecimiento. De importancia científica particular es el uso de estos compuestos para elucidar los mecanismos subcelulares que median en la liberación de la hormona de crecimiento.
Los compuestos de Fórmula I pueden administrarse a animales, incluyendo seres humanos, para liberar la hormona de crecimiento in vivo. Por ejemplo, los compuestos pueden administrarse a animales comercialmente importantes tales como cerdos, ganado, ovejas y similares para acelerar y aumentar su velocidad y grado de crecimiento, para mejorar la eficacia alimentaria y para aumentar la producción de leche en tales animales. Además, estos compuestos pueden administrarse a seres humanos in vivo como herramienta de diagnóstico para determinar directamente si la pituitaria puede liberar la hormona de crecimiento. Por ejemplo, los compuestos de Fórmula I pueden administrarse in vivo a niños. Las muestras de suero tomadas antes y después de tal administración pueden ensayarse con respecto a la hormona de crecimiento. La comparación de las cantidades de la hormona de crecimiento en cada una de estas muestras será un medio para determinar directamente la capacidad de la pituitaria del paciente para liberar la hormona de crecimiento.
Por consiguiente, la presente invención incluye dentro de su alcance composiciones farmacéuticas que comprenden, como ingrediente activo, al menos uno de los compuestos de Fórmula I conjuntamente con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Opcionalmente, el ingrediente activo de las composiciones farmacéuticas puede comprender un agente anabólico además de al menos uno de los compuestos de Fórmula I u otra composición que muestre una actividad diferente, por ejemplo, antibiótico, un agente que permite el crecimiento o un agente para tratar la osteoporosis en combinación con un corticoesteroide para minimizar los efectos secundarios catabólicos o con otros materiales farmacéuticamente activos donde la combinación mejora la eficacia y minimiza los efectos secundarios.
Los agentes anabólicos y que promueven el crecimiento incluyen, pero sin limitación, TRH, PTH, dietilestibesterol, estrógenos, \beta-agonistas, teofilina, esteroides anabólicos, encefalinas, prostaglandinas de la serie E, los compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos Nº 3.239.345, por ejemplo, zeranol y los compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos Nº 4.036.979, por ejemplo, sulbenox o los péptidos descritos en la Patente de Estados Unidos Nº 4.411.890.
Otro uso más de los secretagogos de la hormona de crecimiento de esta invención es en combinación con otros secretagogos de la hormona de crecimiento tales como péptidos de liberación de la hormona de crecimiento GHRP-6, GHRP-1 que se describen en la Patente de Estados Unidos Nº 4.411.890 y len as publicaciones WO 89/07110, WO 89/07111 y B-HT920 así como hexarelina y el recientemente descubierto GHRP-2 que se describe en el documento WO 93/04081 o en la hormona de liberación de la hormona de crecimiento (GHRH, también denominada GRF) y sus análogos o la hormona de crecimiento y sus análogos o las somatomedinas que incluyen IGF-1 e IGF-2 o agonistas \mu-adrenérgicos tales como clonidina o agonistas 5HTID de serotonina tales como sumitriptan o agentes que inhiben la somatostatina o su liberación tales como fisostigmina y piridoestigmina.
Como es bien sabido para los especialistas en la técnica, los usos conocidos y potenciales de la hormona de crecimiento son diversos y multitudinarios. Véase "Human Growth Hormone", Strobel and Thomas, Pharmacological Reviews 46, págs. 1-34 (1994) que describe el posible uso de la hormona de crecimiento. De esta manera, la administración de los compuestos de esta invención para propósitos de estimulación de la liberación de la hormona de crecimiento endógena puede tener los mismos efectos o usos que la propia hormona de crecimiento. Estos usos variados de la hormona de crecimiento pueden resumirse como se indica a continuación: estimulación de la liberación de la hormona de crecimiento en seres humanos ancianos; tratamiento de la deficiencias de la hormona de crecimiento en adultos; prevención de los efectos secundarios catabólicos de glucocorticoides, tratamiento de osteoporosis, estimulación del sistema inmune, aceleración de la curación de heridas, aceleración de la reparación de fracturas óseas, tratamiento del retraso de crecimiento, tratamiento de insuficiencia o fallo renal agudo o crónico, tratamiento de una corta estatura fisiológica, incluyendo niños con falta de hormona de crecimiento, tratamiento de la estatura corta asociada con enfermedad crónica, tratamiento de la obesidad, tratamiento del retraso del crecimiento asociado con el síndrome de Prader-Willi y síndrome de Turner; aceleración de la recuperación y reducción de la hospitalización de pacientes con quemaduras o después de cirugía mayor tal como cirugía gastrointestinal; tratamiento del retraso de crecimiento intrauterino; displasia esquelética, hipercortisonismo y síndrome de Cushings; reemplazamiento de la hormona de crecimiento en pacientes estresados; tratamiento de osteocondrodisplasias, síndrome de Noonans, trastornos de sueño, enfermedad de Alzheimer, retraso en la curación de heridas y privación psicosocial; tratamiento de la disfunción pulmonar y dependencia del ventilador; atenuación de la respuesta catabólica proteica después de una operación mayor; tratamiento de síndromes de malabsorción, reducción de caquexia y pérdida proteica debida a una enfermedad crónica tal como cáncer o SIDA; aceleración de la ganancia de peso y acreción proteica en pacientes en TPN (nutrición parenteral total); tratamiento de hiperinsulinemia incluyendo nesidoblastosis; tratamiento auxiliar para la inducción de la ovulación y para prevenir y tratar úlceras gástricas y duodenales; para estimular el desarrollo tímico y prevenir la disminución de la función tímica relacionada con la edad; terapia auxiliar para pacientes en hemodiálisis crónica; tratamiento de pacientes inmunosuprimidos y para mejorar la respuesta de los anticuerpos después de la vacunación; mejora de la resistencia muscular, movilidad, mantenimiento del grosor de la piel, homeostasis metabólica, hemostasis renal en ancianos débiles; estimulación de osteoblastos, remodelación ósea y crecimiento de cartílagos; tratamiento de enfermedades neurológicas tales como neuropatía periférica e inducida por fármacos, Síndrome de Guillian-Barre, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, accidentes cerebrovasculares y enfermedades desmielinizantes; estimulación del sistema inmune en animales de compañía y tratamiento de trastornos de envejecimiento en animales de compañía; promoción del crecimiento en ganado; y estimulación del crecimiento de lana en
ovejas.
Los especialistas en la técnica sabrán que hay muchos compuestos que se usan actualmente en un esfuerzo para tratar las enfermedades o indicaciones terapéuticas enumeradas anteriormente. Las combinaciones de estos agentes terapéuticos, algunos de los cuales también se han mencionado anteriormente con la promoción del crecimiento..., propiedades anabólicas y deseables de estos diversos agentes terapéuticos. En estas combinaciones, los agentes terapéuticos y los secretagogos de la hormona de crecimiento de esta invención pueden presentarse independientemente en intervalos de dosificación de una centésima parte a una cantidad igual a los niveles de dosificación que son eficaces cuando se usan por separado estos compuestos y secretagogos.
La terapia combinada para inhibir la reabsorción ósea, prevenir la osteoporosis y mejorar la curación de fracturas óseas puede ilustrarse mediante combinaciones de bisfosfonatos y los secretagogos de la hormona de crecimiento de esta invención. El uso de bisfosfonatos para estas utilidades lo ha analizado, por ejemplo, Hamdy, N. A. T., Role of Bisphosphonates in Metabolic Bone Diseases. Trends in Endocrinol. Metab., 1993, 4, 19-25. Los bisfosfonatos con estas utilidades incluyen alendronato, tiludronato, dimetil-APD, risedronato, etidronato, YM-175, clodronato, pamidronato y BM-210995. De acuerdo con su potencia, los niveles de dosificación diaria oral del bisfosfonato de entre 0,1 mg y 5 mg y los niveles de dosificación diaria de los secretagogos de la hormona de crecimiento de esta invención de entre 0,01 mg/kg a 20 mg/kg de peso corporal se administran a pacientes para obtener un tratamiento eficaz de la osteoporosis.
Los compuestos que tienen la capacidad de estimular la secreción de GH a partir de células cultivadas de pituitaria de rata se identifican usando el siguiente protocolo. Este ensayo también es útil para comparar los patrones para determinar los niveles de dosificación. Las células se aíslan a partir de pituitarias anteriores de ratas Wistar macho de 6 semanas de edad seguido de decapitación. Los tejidos se pican finamente, después se someten a dispersión mecánica y enzimática usando 10 U/ml de proteasa bacteriana (EC 3.4.24.4, Sigma P-6141) en solución salina equilibrada de Hank sin calcio o magnesio. La suspensión celular se cultiva en placas a 5 x 10^{4} células por cm cuadrado en placas Costar de 24 pocillos y se cultivan durante 3 días en Medio de Eagles Modificado por Dulbecco (D-MEM) suplementado con 4,5 g/l de glucosa, suero de caballo al 10%, suero bovino fetal al 2,5%, aminoácidos no esenciales, 10 U/ml de nistatina y 50 mg/ml de sulfato de gentamicina.
Justo antes de comenzar el ensayo, las células de cultivo se aclaran dos veces, después se equilibran durante 30 minutos en medio de liberación (D-MEM tamponado con Hepes 25 mM, pH 7,4 y que contenía albúmina de suero bovino al 0,5% a 35ºC. Los compuestos de ensayo se disuelven en DMSO y después se diluyen en medio de liberación pre-calentado. El ensayo se inicia añadiendo 1 ml de medio de liberación (con compuestos de ensayo) a cada pocillo de cultivo. La incubación se realiza a 37ºC durante 15 minutos y después se finaliza mediante la retirada del medio de cultivo, que se centrifuga a 2000 x g durante 15 minutos para retirar el material celular antes de ensayarse con respecto a la hormona de crecimiento de rata mediante un procedimiento de radioinmunoensayo usando reactivos proporcionados por A. F. Parlow (Harbor-UCLA Medical Center, Torrance, CA). Los compuestos activos estimulan típicamente la liberación de la hormona de crecimiento en 3-4 veces.
Se demuestra que los secretagogos de GH no peptidilo imitan péptidos de liberación de la hormona de crecimiento basados en uno o más de los siguientes criterios: estimulación sinergística de la liberación de GH cuando se añade junto con GHRH, incapacidad para aumentar más la secreción de GH por GHRP-6, sensibilidad a inhibidores de la proteína quinasa C y estimulación selectiva del flujo de calcio bifásico en células que contienen GH.
Los compuestos de esta invención pueden administrarse por vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa o inyección subcutánea, o implante), nasal, vaginal, rectal, sublingual o tópica y pueden formularse con vehículos farmacéuticamente aceptables para proporcionar formas de dosificación apropiadas para cada vía de administración.
Las formas de dosificación sólidas para administración oral incluyen cápsulas, comprimidos, píldoras, polvos y gránulos. En tales formas de dosificación sólidas, el compuesto activo se mezcla con al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable inerte tal como sacarosa, lactosa o almidón. Tales formas de dosificación también pueden comprender, como es normal en la práctica, sustancias adicionales distintas de tales diluyentes inertes, por ejemplo, agentes de lubricación tales como estearato de magnesio. En el caso de cápsulas, comprimidos y píldoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes tamponantes. Los comprimidos y píldoras pueden prepararse adicionalmente con recubrimientos entéricos.
Las formas de dosificación líquidas para administración oral incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones y jarabes farmacéuticamente aceptables, conteniendo los elixires diluyentes inertes usados comúnmente en la técnica, tales como agua. Además de tales diluyentes inertes, las composiciones también pueden incluir adyuvantes, tales como agentes humectantes, emulsionantes y agentes de suspensión y agentes edulcorantes, aromatizantes y de perfume.
Las preparaciones de acuerdo con esta invención para administración parenteral incluyen soluciones, suspensiones o emulsiones estériles acuosas o no acuosas. Son ejemplos de disolventes o vehículos no acuosos propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y aceite de maíz, gelatina y ésteres orgánicos inyectables tales como oleato de etilo. Tales formas de dosificación también pueden contener adyuvantes tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes y dispersantes. Pueden esterilizarse, por ejemplo, por filtración a través de un filtro de retención de bacterias, incorporando agentes esterilizantes en las composiciones, irradiando las composiciones o calentando las composiciones. También pueden fabricarse en forma de composiciones sólidas estériles que pueden disolverse en agua estéril, o en algún otro medio inyectable estéril inmediatamente antes del uso.
Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferiblemente supositorios que pueden contener, además de la sustancia activa, excipientes tales como manteca de cacao o una cera de supositorio.
Las composiciones para administración nasal o sublingual también se preparan con excipientes convencionales bien conocidos en la técnica.
La dosificación del ingrediente activo en las composiciones de esta invención puede variar; sin embargo, es necesario que la cantidad del ingrediente activo sea tal que se obtenga una forma de dosificación adecuada. La dosificación seleccionada depende del efecto terapéutico deseado, de la vía de administración y de la duración del tratamiento. Generalmente, los niveles de dosificación de entre 0,0001 y 100 mg/kg de peso corporal al día se administran a pacientes y a animales, por ejemplo, mamíferos, para obtener la liberación eficaz de la hormona de crecimiento.
Un intervalo de dosificación preferido es de 0,01 a 5,0 mg/kg de peso corporal al día.
Las siguientes estructuras preparadas en los Ejemplos indicados ilustran la nomenclatura usada en este documento.
Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico Ejemplo 26 
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7 
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{1-Naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[5-(tolueno-4-sulfonilamino)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico Ejemplo 83 
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8
(R)-N-[1-[4-{Acetil-fenil-amino)-piperidin-1-carbonil]-2-(1H-indol-3-il)-etil)-2-amino-isobutiramida Ejemplo 34 
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9
(R)-2-Amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-4-(pirrolidin-1-carbonil)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida Ejemplo 46 
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10
2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etil}-isobutiramida Ejemplo 1 
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11
(R)-2-Amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-1-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil}-etil)-isobutiramida Ejemplo 29 
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12
(R)-3-Amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida Ejemplo 91 
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13
La preparación de los compuestos de Fórmula I de la presente invención puede realizarse mediante vías sintéticas secuenciales o convergentes. Las síntesis que detallan la preparación de los compuestos de Fórmula I de manera secuencial se presentan en los siguientes esquemas de reacción.
Muchos derivados de aminoácidos protegidos están disponibles en el mercado, donde los grupos protectores P son, por ejemplo, grupos BOC, CBZ, FMOC, bencilo o etoxicarbonilo. Otros derivados de aminoácidos protegidos pueden repararse mediante procedimientos bibliográficos. Algunas pirrolidinas sustituidas, piridinas y tetrahidroisoquinolinas están disponibles en el mercado, y muchas otras pirrolidinas, piperidinas 4-sustituidas y 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinas se conocen en la bibliografía. Varias piperidinas y 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinas sustituidas con fenilo o heteroarilo pueden prepararse siguiendo procedimientos bibliográficos usando intermedios de fenilo y heteroarilo derivados. Como alternativa, los anillos fenilo o heteroarilo de tales compuestos pueden derivarse por medios convencionales, tales como halogenación, nitración, sulfonilación, etc.
Muchos de los esquemas ilustrados a continuación describen compuestos que contienen grupos protectores P. Los grupos benciloxicarbonilo pueden retirarse mediante un número de procedimientos que incluyen hidrogenación catalítica con hidrógeno en presencia de un catalizador de paladio o de platino en un disolvente prótico tal como metanol. Los catalizadores preferidos son hidróxido de paladio sobre carbono o paladio sobre carbono. Pueden emplearse presiones de hidrógeno de 6,894-6894 kPa (1-1000 psi); se prefieren presiones de 68,94 a 482,63 kPa (10 a 70 psi). Como alternativa, el grupo benciloxicarbonilo puede retirarse por hidrogenación de transferencia.
La retirada de los grupos protectores de BOC puede realizarse usando un ácido fuerte tal como ácido trifluoroacético o ácido clorhídrico con o sin la presencia de un codisolvente tal como diclorometano o metanol a una temperatura de aproximadamente -30 a 70ºC, preferiblemente de aproximadamente -5 a aproximadamente 35ºC.
Los ésteres de bencilo de aminas pueden retirarse mediante un número de procedimientos que incluyen hidrogenación catalítica con hidrógeno en presencia de un catalizador de paladio en un disolvente prótico tal como metanol. Pueden emplearse presiones de hidrógeno de 6,894-6894 kPa (1-1000 psi); se prefieren presiones de 68,94 a 482,63 kPa (10 a 70 psi). La adición y la retirada de estos y de otros grupos protectores se analiza por T. Greene en Protective Groups en Organic Synthesis, John Wiley y Sons, Nueva York, 1981.
Esquema 1
14
Los derivados de aminoácidos protegidos 1 en muchos casos están disponibles en el mercado, donde el grupo protector P es, por ejemplo, los grupos BOC o CBZ. Otros aminoácidos pueden prepararse mediante procedimientos bibliográficos.
Como se ilustra en el Esquema 1, el acoplamiento de aminas de fórmula 2 con aminoácidos protegidos de fórmula 1, donde P es un grupo protector adecuado, se realiza convenientemente en un disolvente inerte tal como diclorometano o DMF mediante un reactivo de acoplamiento tal como EDC o DCC en presencia de HOBT. En el caso de el que la amina esté presente en forma de la sal clorhidrato, es preferible añadir a la mezcla de reacción un equivalente de una base adecuada tal como trietilamina. Como alternativa, el acoplamiento puede realizarse con un reactivo de acoplamiento tal como BOP en un disolvente inerte tal como metanol. Tales reacciones de acoplamiento se realizan generalmente a temperaturas de entre -30 a aproximadamente 80ºC, preferiblemente de 0 a aproximadamente 25ºC. Para un análisis de otras condiciones usadas para el acoplamiento de péptidos véase Houben-Weil, Vol. XV, parte II, E. Wunsch, Ed., George Theime Verlag, 1974, Stuttgart. La separación de los productos secundarios no deseados y la purificación de los intermedios se realiza por cromatografía sobre gel de sílice, empleando cromatografía ultrarrápida (W. C. Still, M. Kahn y A. Mitra, J. Org. Chem. 43 2923, 1978), por cristalización o por trituración.
La transformación de 3 en los intermedios de fórmula 4 puede realizarse mediante la retirada del grupo protector P como se ha descrito anteriormente. El acoplamiento de los intermedios de fórmula 4 a aminoácidos de fórmula 5 puede realizarse como se ha descrito anteriormente para dar intermedios de fórmula 6. La desprotección de la amina 6 da los compuestos de fórmula 7.
Esquema 2
15
Como alternativa, los compuestos de fórmula 7 pueden prepararse mediante una vía convergente como se ha mostrado en el Esquema 2. Los ésteres intermedios de fórmula 8 pueden prepararse tratando los aminoácidos 1, donde P es un grupo protector adecuado, con una base tal como carbonato potásico seguido de un haluro de alquilo tal como yodometano en un disolvente adecuado tal como DMF. Desprotección de las transformaciones de amina 8 en 9. Como alternativa, muchos aminoácidos de fórmula 9 están disponibles en el mercado. El intermedio 10 se genera acoplando 9 al aminoácido 5. El éster del intermedio 10 puede convertirse en el ácido intermedio 11 mediante diversos procedimientos conocidos en la técnica; por ejemplo, los ésteres de metilo y etilo pueden hidrolizarse con hidróxido de litio en un disolvente prótico tal como metanol acuoso o THF acuoso a una temperatura de aproximadamente -20 a 120ºC, preferiblemente de aproximadamente 20 a 70ºC. Además, la retirada de un grupo bencilo puede realizarse mediante diversos procedimientos reductivos que incluyen hidrogenación en presencia de un catalizador de platino o paladio en un disolvente prótico tal como metanol. Después, el ácido 11 puede acoplarse con la amina 2 para dar intermedios de fórmula 6. La transformación de 6 en 7 puede realizarse mediante la retirada del grupo protector P.
Esquema 3
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16
Los compuestos de fórmula 6 en la que R = CH_{2}COOR pueden convertirse en los ácidos intermedios de fórmula 13 mediante cualquiera de los procedimientos indicados en el Esquema 2. El acoplamiento del ácido 13 a la amina 147 genera los intermedios de fórmula 14 que se ilustran en el Esquema 3. La transformación de 14 en 15 puede realizarse mediante la retirada del grupo protector P.
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Esquema 4
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17
Como se muestra en el Esquema 4, los compuestos de fórmula 18 pueden prepararse tratando 2-nitrobenzaldehídos de fórmula 16 con aminas de fórmula 17 en presencia de un agente reductor adecuado que incluye borohidruros y cianoborohidruros de metales alcalinos. También pueden usarse borohidruro sódico y triacetoxiborohidruro sódico. Para una revisión general de las aminaciones reductivas véase R. F. Borch, Aldrichimica Acta, 8,3-10 (1975). El grupo nitro del compuesto 18 puede reducirse mediante diversos procedimientos que incluyen hidrogenación con un catalizador tal como paladio en un disolvente prótico tal como metanol para dar compuestos de fórmula 19. La ciclación de la diamina con N,N'-carbonildiimidazol (CDI) u otros equivalentes de fosgeno genera los compuestos de fórmula 20. La retirada del grupo protector transforma 20 en 12.
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Esquema 5
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18
Como se muestra en el Esquema 5, los compuestos de fórmula 23 pueden prepararse tratando 2-nitroanilinas de fórmula 21, en la que X = N o C, con piperidonas N-protegidas de fórmula 22 en presencia de un agente reductor de hidruro tal como borohidruro sódico. Como alternativa, los intermedios de fórmula 23 pueden prepararse calentando una 4-aminopiperidina protegida 17 y un compuesto de fórmula 30, en la que X = N o C, en un disolvente tal como etanol o DMF en presencia de un aceptor de ácido tal como trietilamina o carbonato potásico. El grupo nitro de fórmula 23 puede reducirse mediante diversos procedimientos que incluyen hidrogenación con un catalizador tal como paladio en un disolvente tal como HCl metanólico para dar compuestos de fórmula 24. La ciclación con CDI u otros equivalentes de fosgeno produce las bencimidazolinonas de fórmula 25. La transformación de 25 en 26 puede realizarse mediante la retirada del grupo protector P.
Esquema 6
19
Como se muestra en el Esquema 6, las bencimidazolinonas de fórmula 26 también pueden prepararse tratando ácidos 2-antranílicos de fórmula 27 con piperidonas N-protegidas de fórmula 22 en presencia de un agente reductor de hidruro tal como cianoborohidruro sódico para dar compuestos de fórmula 28. Después, el ácido de fórmula 28 puede tratarse con difenilfosforilazida para dar la azida de aroílo de fórmula 29. El calentamiento de 29 en xileno produce las bencimidazolinonas de fórmula 30. La transformación de 30 en 26 puede realizarse retirando el grupo protector P.
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(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 7
20
Los compuestos de fórmula 33 pueden prepararse tratando una 4-piperidona de fórmula 22, en la que P es un grupo protector tal como bencilo, con una amina primaria (R_{2} = H) o secundaria de fórmula 147 en presencia de un agente reductor de hidruro tal como cinoborohidruro sódico como se muestra en el Esquema 7. Los compuestos de fórmula 33 pueden desprotegerse por medios convencionales para dar compuestos de fórmula 34, o en el caso de que R_{2a} = H, la amina puede acoplarse a un ácido carboxílico de fórmula 35 usando un agente de acoplamiento tal como EDC en presencia de HOBT en un disolvente inerte tal como diclorometano para dar compuestos de fórmula 36. La posterior retirada del grupo protector genera compuestos de fórmula 37. Como alternativa, 33 puede tratarse con un cloruro de aril o alquilsulfonilo 38 en presencia de un eliminador de ácido para generar la sulfonamida 39. La transformación de 39 en 40 se realiza mediante la retirada del grupo protector.
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Esquema 8
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21
Como se ilustra en el Esquema 8, los piperidinoles de fórmula 41 pueden prepararse tratando una 4-piperidona protegida adecuadamente de fórmula 22 con organometálicos de fórmula YLi o YMgX o YZnX donde X = Cl, Br o I en disolventes apróticos tales comotetrahidrofurano o éter dietílico a temperaturas a o por debajo de 0ºC. Los intermedios de fórmula 41 pueden desprotegerse para dar compuestos de fórmula 42.
Esquema 9
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22
Tratando un arilacetato de metilo 43 y una bis(cloroetil)amina protegida 44 (Bercz e Ice; J. Pharm. Sci. 1972 61 págs 1316-1317) con dos equivalentes de una base tal como diisopropilamida de litio en un disolvente tal como THF se genera el éster de piperidina 45 que se ha mostrado en el Esquema 9. Después, el éster puede hidrolizarse en condiciones básicas medias para dar intermedios de fórmula 46. Después, el ácido resultante puede acoplarse a aminas de fórmula 147 para dar piperidinas 4,4'-disustituidas de fórmula 47. La desprotección de la amina genera compuestos de fórmula 48.
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Esquema 10
23
Como se ha ilustrado en el Esquema 10, los compuestos de fórmula 50 pueden prepararse tratando una 4-piperidona de fórmula 22 con cantidades equimolares de cianuro de potasio y un clorhidrato de amina primaria o secundaria en etanol acuoso para dar intermedios de fórmula 49. Después, los intermedios de fórmula 49 pueden desprotegerse para dar compuestos de fórmula 50.
Esquema 11
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24
Tratando un arilnitrilo de fórmula 51 con el intermedio 44 con dos equivalentes de una base tal como amida sódica en un disolvente adecuado tal como DMSO se generan las piperidinas 4,4'-disustituidas de fórmula 52. La posterior desprotección de la piperidinamina da lugar a compuestos de fórmula 53 que se han mostrado en el Esquema 11.
Esquema 12
25
El grupo nitrilo de 52 puede reducirse mediante un número de procedimientos (March, J., Advanced Org. Chem.; Reactions, Mechanisms and Structure, John Wiley y Sons, Nueva York, 1985), incluyendo hidruro de litio y aluminio para dar la amina primaria del compuesto 54. Después, el intermedio 54 puede acoplarse a ácidos de fórmula 35 como se ha indicado en el Esquema 12 para dar compuestos de fórmula 55. La posterior desprotección de la piperidinamina da compuestos de fórmula 56.
Esquema 13
26
El nitrilo 52 también pueden convertirse en un éster como se ha descrito en el Esquema 13 calentando el intermedio 52 con ácido sulfúrico concentrado y una pequeña cantidad de agua a temperaturas alrededor de 150ºC, seguido del calentamiento de la mezcla en un disolvente alcohólico a temperaturas alrededor de 125ºC. La desprotección de la piperidinamina 57 genera compuestos de fórmula 58. Como alternativa, el nitrilo puede hidrolizarse en la amida 161 usando diversos procedimientos conocidos en la bibliografía (March, J., Advanced Org. Chem.; Reactions, Mechanisms, and Structure, pág. 788, John Wiley y Sons, Nueva York, 1985); por ejemplo, calentando la amina en ácido sulfúrico concentrado a temperaturas alrededor de 100-150ºC se convertirá el nitrilo en la amida de forma que se tratará el nitrilo con peróxido de hidrógeno e hidróxido sódico en acetona acuosa. La transformación de 161 en 162 se realiza mediante la retirada del grupo protector.
Esquema 14
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27
Pueden prepararse muchas 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinas y 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinas sustituidas mediante los procedimientos descritos en la bibliografía (R. Adams, Org. Reactions vol. VI; págs. 74-206, John Wiley y Sons, Nueva York, NY 1964). Como se ha ilustrado en el Esquema 14, el tratamiento de una amina de fórmula 59, tal como 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina, con nitrato potásico en ácido sulfúrico concentrado a temperaturas por debajo de 5ºC genera la nitroamina de fórmula 60. La reducción de la funcionalidad nitro en la amina correspondiente usando polvo de hierro y cloruro amónico en etanol acuoso a reflujo es uno de los muchos procedimientos bibliográficos adecuados (véase March, J., pág. 1103-4, Advanced Org. Chem.; Reactions, Mechanisms, and Structure, John Wiley y Sons, Nueva York, 1985) para realizar esta transformación para generar compuestos de fórmula 61.
Esquema 15
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28
Como se describe en el Esquema 15, la \beta-fenetilamida del compuesto 63 puede prepararse tratando 4-bromofenetilamina, 62, con formiato de etilo. El tratamiento del intermedio 63 con ácido polifosfórico y pentóxido de fósforo en una ciclodeshidratación de Bischler-Napieralski produce la 7-bromo-3,4-dihidroisoquinolina 64. La reducción con borohidruro sódico de la sal clorhidrato del compuesto 64 en agua produce la 7-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina 65. Siguiendo el procedimiento indicado en el Esquema 14, la nitración de 7-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina genera el intermedio 66. La protección de la amina de tetrahidroisoquinolina 66 con un grupo protector adecuado P, tal como terc-butoxicarbonilo, puede realizarse mediante procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica y produce intermedios de fórmula 67. La reducción del grupo nitro y la deshalogenación pueden realizarse por hidrogenación usando un catalizador tal como paladio en un disolvente tal como ácido acético con acetato amónico como tampón y da compuestos de fórmula 68.
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Esquema 16
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29
El tratamiento de las aminas de fórmula 68 con un isocianato de fórmula 69 da la urea de fórmula 70 que se ilustra en el Esquema 16. Como alternativa, la amina 68 puede funcionalizarse con un cloruro de ácido o ácido para dar la amida de fórmula 72, un cloruro de sulfonilo de fórmula 38 para dar la sulfonamida 74 o una cetona de fórmula 154 para dar un agente reductor para dar la amina de fórmula 155. Las aminas resultantes pueden desprotegerse para dar los intermedios 71, 73, 75 y 156, respectivamente.
Esquema 17
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30
La síntesis de 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinas 6-, 7- y 8-metoxi-sustituidas se describe por Sail y Grunewald en J. Med. Chem. 30, 1987 págs. 2208-2216. El grupo metoxi puede retirarse mediante diversos procedimientos; por ejemplo, el calentamiento a reflujo de los compuestos de fórmula 76 con HBr al 48% genera compuestos de fórmula 77 como se muestra en el Esquema 17.
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Esquema 18
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31 
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El tratamiento de compuestos de fórmula 78, en la que P es un grupo protector adecuado, con piridina y anhídrido tríflico en un disolvente adecuado tal como diclorometano genera el triflato de fórmula 79 que se muestra en el Esquema 18. Después, el triflato puede carbonilarse con monóxido de carbono y un catalizador tal como acetato de paladio en presencia de una base tal como trietilamina y un ligando tal como 1,3-bis(difenilfosfina)propano en un disolvente alcohólico tal como metanol para generar el éster de fórmula 80. Después, el éster puede hidrolizarse mediante diversos procedimientos diferentes para dar el ácido de fórmula 81. Después, el ácido puede acoplarse con las aminas de fórmula 147 para dar compuestos de fórmula 82. La posterior desprotección de la amina genera compuestos de fórmula 83. Como alternativa, el compuesto de fórmula 80 puede desprotegerse para dar el intermedio 165. Después, la amina puede acoplarse a ácidos de fórmula 11 para dar compuestos de fórmula 166. La posterior desprotección de la amina genera el intermedio 167. La hidrólisis del éster transforma 167 en 168.
Esquema 19
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32 
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Como alternativa, como se muestra en el Esquema 19, el triflato de fórmula 79 puede experimentar una reacción de acoplamiento cruzado de biarilo con un nucleófilo adecuado tal como un ácido arilbórico o cincato de arilo 86 (donde M = metal) en presencia de un catalizador tal como tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) y carbonato potásico en tolueno y etanol acuoso para dar el intermedio de fórmula 84. La desprotección de la isoquinolinamina transforma 84 en 85.
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(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 20
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33
Como se muestra en el Esquema 20, el ácido bórico de fórmula 88 puede prepararse tratando una anilina protegida adecuadamente 87 con t-butillitio y borato de trimetilo a temperaturas cerca de -78ºC. Después, el intermedio 88 puede acoplarse al triflato 79usando las condiciones definidas en el Esquema 19 para dar el compuesto 89. Después, el grupo protegido con anilina puede retirarse selectivamente y la amina resultante 90 tratarse con un isocianato 69 y una base adecuada para dar la urea de fórmula 91. La desprotección de la amina transforma 91 en 92. Como alternativa, la amina de fórmula 90 también puede sulfonilarse con un cloruro de sulfonilo en presencia de un eliminador de ácido para dar compuestos de fórmula 93. La desprotección de la amina transforma 93 en 94. La acilación de 90 con un ácido carboxílico 35 usando un agente de acoplamiento tal como EDC en presencia de HOBT en un disolvente inerte tal como DMF da el compuesto de fórmula 95. La desprotección de la amina transforma 95 en 96.
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Esquema 21
34
Como se ilustra en el Esquema 21, las ftalimidas de fórmula 99 pueden prepararse a partir de 4-aminopiridinas 97 y anhídrido ftálico 98 como se describe por Ciganek y col., Solicitud de Patente de Estados Unidos 92/876542. El anillo piridina de 99 puede reducirse mediante diversos procedimientos que incluyen hidrogenación en presencia de un catalizador de platino en un disolvente tal como HCl metanólico para dar el anillo piperidina de fórmula 157. Como alternativa, la cuaternización del anillo piridina con bromuro de bencilo en etanol lleva a la sal cuaternaria 100. Después, el anillo piridina puede reducirse mediante diversos procedimientos que incluyen hidrogenación en presencia de un catalizador de platino en ácido acético glacial o metanol para dar 101. En el mercado están disponibles muchos otros anhídridos y un especialista en la técnica puede aplicar tal química a estos compuestos.
La adición de organometálicos tales como RLi o RMgX donde X = Cl, Br o I a los compuestos de fórmula 101 seguido de la hidrólisis produce compuestos de fórmula 102. La desprotección de la piperidinamina transforma 102 en 103.
Los compuestos de fórmula 101 pueden convertirse en compuestos de fórmula 104 con agentes reductores de hidruro tales como borohidruro sódico en metanol, o borohidruro de litio en un disolvente aprótico tal como THF. Las ftalimidas también pueden reducirse en compuestos de tipo 104 con cinc en ácido acético. La desprotección del anillo piperidina transforma 104 en 105.
Los compuestos de fórmula 104 pueden tratarse con una base tal como hidruro sódico en disolventes apropiados tales como tetrahidrofurano o alcóxidos metálicos tales como metóxido sódico en disolventes alcohólicos tales como metanol, seguido de la adición de una gente alquilante para dar compuestos de fórmula 106. Como alternativa, tales compuestos pueden prepararse tratando compuestos de fórmula 104 con un alcohol en presencia de un ácido tal como clorhídrico o metanosulfónico a temperaturas de aproximadamente 0-100ºC. La desprotección del anillo piperidina transforma 106 en 107.
El tratamiento de los compuestos de fórmula 101 ó 104 con cinc en ácido acético o estaño en ácido acético en presencia de ácido clorhídrico genera los intermedios de fórmula 108. La desprotección de la amina transforma 108 en 109.
Esquema 22
35
El tratamiento de 110 con un equivalente de una base tal como terc-butóxido potásico en un disolvente tal como THF, seguido de la adición de 111 y después de un segundo equivalente de una base genera el intermedio de fórmula 112 que se ilustra en el Esquema 22. La conversión de 112 en 113 puede realizarse mediante un número de procedimientos que incluyen hidrogenación con un catalizador tal como paladio en una mezcla de etanol y HCl acuoso. Como alternativa, el éster de 112 puede desprotegerse para dar el ácido intermedio 158. El ácido 158 puede acoplarse a la amina 147 para dar la amida de fórmula 159. La conversión de 159 en 160 puede realizarse mediante diversos procedimientos que incluyen hidrogenación con un catalizador tal como platino en HCl metanólico.
Esquema 23
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36
Como se ilustra en el Esquema 23, una 3-aminopirrolidina diferencialmente protegida de fórmula 114 se desprotege selectivamente en la posición 3-amino para dar el intermedio 115. Después, la amina puede sulfonilarse con un cloruro de sulfonilo 38 en presencia de un eliminador de ácido en un disolvente tal como diclorometano para dar 116. Como alternativa, la amina puede acoplarse al ácido 35 como antes para dar 117. La desprotección del nitrógeno de la pirrolidina de 116 y 117 genera compuestos de fórmula 118 y 119 respectivamente.
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Esquema 25
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37
Como se muestra en el Esquema 25, las isoindolinas de fórmula 129 pueden prepararse a partir de 126 por bromación radical usando una fuente adecuada de radical bromo tal como N-bromosuccinimida y un iniciador de radical adecuado tal como AIBN (2,2'-azobis(isobutironitrilo)) en un disolvente inerte tal como tetracloruro de carbono para producir los intermedios 127. Después, el dibromuro puede tratarse con una amina primaria protegida adecuadamente tal como bencilamina en acetona acuosa usando una base tal como carbonato sódico para dar compuestos de fórmula 128. La desprotección de la amina y la reducción de nitro para dar 129 pueden realizarse por hidrogenación con hidrógeno en un disolvente prótico tal como etanol usando un catalizador tal como paladio. El acoplamiento del intermedio 129 con el ácido 11 da 130. Después, la amina libre puede acilarse o sulfonilarse mediante los procedimientos mencionados anteriormente para dar 131 y 132. La transformación de 131 en 133 y 132 en 134 puede realizarse retirando el grupo protector P.
Esquema 26
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38
Como se muestra en el Esquema 26, una 4-hidroxipiperidina N-protegida 142 puede tratarse con cloruro de metanosulfonilo en presencia de una base tal como trietilamina en un disolvente inerte tal como cloruro de metileno para dar el mesilato intermedio de fórmula 143. Después, el mesilato puede desplazarse con una imidazo[4,5-b]piridina de fórmula 135 (por ejemplo, véase Carpino y col., Biorg. & Med. Chem. Lett. 1194 4, págs 93-98 y las referencias citadas en el mismo) usando una base tal como hidruro sódico en un disolvente tal como DMF o dioxano para dar 144. La desprotección de la amina transforma 144 en 145.
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(Esquema pasa a página siguiente)
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Esquema 27
39
Los bencisoxazoles de fórmula 136 pueden prepararse como se describe por Villabolos y col., J. Med. Chem. 1994 37 págs 2721-2724. La amina 136 puede acoplarse con ácidos de fórmula 35 como se ilustra en el Esquema 27 para dar los intermedios 137. La desprotección de la piperidinamina da 138. Como alternativa, la amina 136 puede sulfonilarse para dar 139. La desprotección de la amina genera compuestos de fórmula 140.
Esquema 28
40
Los ésteres de fórmula 146 pueden prepararse tratando un ácido de fórmula 5 con hidroxisuccinimida en presencia de un agente de acoplamiento tal como EDC en un disolvente inerte tal como cloruro de metileno como se ilustra en el Esquema 28. El tratamiento del éster con un aminoácido de fórmula 1 en un disolvente tal como DMF en presencia de una base tal como diisopropiletilamina produce el compuesto 11.
Esquema 29
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41
La preparación de compuestos de fórmula 148 se ha descrito por Blank y col., J. Med. Chem. 1980 23 págs. 837-840. El tratamiento del cloruro de sulfonilo 148 con un fenol de fórmula 149 y una base tal como carbonato potásico en un disolvente polar tal como acetonitrilo o acetona genera los intermedios de fórmula 15. La desprotección de la amina transforma 150 en 151. Como alternativa, el cloruro de sulfonilo puede tratarse con una amina 147 en presencia de un eliminador de ácido tal como trietilamina en un disolvente inerte tal como diclorometano para dar la sulfonamida de fórmula 152. La desprotección de tetrahidroisoquinolinamina transforma 152 en 153.
Esquema 30
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42
Como se ilustra en el Esquema 30, el tratamiento de un indol de fórmula 169 con una base tal como ión metóxido en un disolvente tal como metanol, seguido de la adición de una cetona de fórmula 170 produce los intermedios de fórmula 171. La conversión de 171 en 172 puede realizarse mediante diversos procedimientos reductivos que incluyen hidrogenación en presencia de un disolvente prótico tal como etanol usando un catalizador tal como paladio.
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Esquema 31
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43
Como se muestra en el Esquema 31, el tratamiento de una amina de fórmula 24 con tres equivalentes de anhídrido 173, neto, a temperaturas cerca o alrededor de 160ºC durante una noche, seguido de la descomposición del exceso de anhídrido con una base tal como hidróxido sódico genera compuestos de fórmula 174. La desprotección de la amina transforma 174 en 190.
Esquema 32
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44
Como se ilustra en el Esquema 32, la alquilación de la difeniloxazinona de fórmula 175 con bromuro de cinnamilo en presencia de bis(trimetilsilil)amida sódica genera 176 que después se convierte en el ácido (D)-2-amino-5-fenilpentanoico 177 deseado retirando el grupo protector e hidrogenando sobre un catalizador de PdCl_{2}.
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Esquema 33
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45
Los compuestos de fórmula 179 pueden prepararse tratando un indol de fórmula 178 con cloruro de benzoílo en piridina como se ilustra en el Esquema 33. El posterior calentamiento de 179 con dibencilamina y un catalizador tal como paladio sobre carbono a temperaturas a o cerca de 210ºC en un disolvente tal como difeniléter genera el intermedio de fórmula 180. El nitrógeno del indol puede alquilarse tratando 180 con bromuro de cobre y bromobenceno en presencia de una base tal como carbonato potásico en un disolvente adecuado tal como N-metilpirrolidinona a temperatura de reflujo durante una noche para dar intermedios de fórmula 181. La cuaternización del nitrógeno de piridina puede realizarse tratando 181 con bromuro de bencilo en un disolvente tal como benceno a temperaturas de reflujo para dar intermedios de fórmula 192. El tratamiento del compuesto 192 con exceso de borohidruro sódico en metanol genera la tetrahidropiridina 182. La hidrogenación del compuesto 182 con hidrógeno en un disolvente tal como etanol usando un catalizador tal como paladio produce la piperidina de fórmula 183.
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Esquema 34
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46
El compuesto de fórmula 185 se prepara calentando a reflujo una mezcla de 184 en anhídrido acético durante varias horas. El cloruro de ácido puede prepararse tratando 185 con cloruro de tionilo o cloruro de oxalilo para dar intermedios de fórmula 191. La acilación de Friedel-Crafts de m-difluorobenceno con 191 en presencia de cloruro de aluminio como catalizador produce el compuesto 186. La retirada del grupo protector de acetilo puede realizarse calentando 186 en una mezcla de HCl concentrado y ácido acético glacial para dar intermedios de fórmula 187. Después, la oxima 188 puede prepararse calentando a reflujo 187 con trietilamina y clorhidrato de hidroxilamina en etanol durante varias horas. El calentamiento a reflujo de la oxima en NaOH al 50% produce el benzoisoxazol 189.
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Esquema 35
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47
Como se muestra en el Esquema 35, los compuestos de fórmula 193 pueden prepararse tratando anilinas de fórmula 94 con piperidonas N-protegidas de fórmula 22 en presencia de un agente reductor e hidruro tal como triacetoxiborohidruro sódico en un disolvente tal como ácido acético que contiene un exceso de sulfato sódico. El tratamiento de los compuestos de fórmula 193 con cloroacetonitrilo a temperaturas a o cerca de 0ºC en presencia de un ácido de Lewis tal como tricloruro de boro seguido del calentamiento a reflujo de la mezcla durante una noche y después el tratamiento de la solución con HCl al 10% y el calentamiento a reflujo de nuevo durante 0,5 h produce el intermedio de fórmula 195. El tratamiento del compuesto 195 con borohidruro sódico en un disolvente tal como etanol genera el indol de fórmula 196. La desprotección de la amina transforma 196 en 197.
Los siguientes ejemplos se proporcionan sólo para el propósito de ilustración y no pretenden ser limitaciones de la descripción de la invención.
Procedimientos experimentales generales
Se usó sílice Amicon 30 \muM, tamaño del poro de 60 \ring{A}, para la cromatografía en columna. Los puntos de fusión se tomaron en un aparato Buchi 510 y están sin corregir. Los espectros de RMN de protones y carbono se registraron en un Varian XL-300, Bruker AC-300 o Bruker AC-250 a 25ºC. Los desplazamientos químicos se expresan en partes por millón campo abajo en trimetilsilano. El espectro de masas (EM) de haz de partículas se obtuvo en un espectrómetro Hewlett-Packard 5989A usando amoniaco como fuente de ionización química. Para la disolución de la muestra inicial se emplearon cloroformo o metanol. El espectro de masas de ión secundario líquido (EMISL) se obtuvo en un espectrómetro de resolución Kratos Concept-1S de alta resolución usando bombardeo de iones de cesio sobre la muestra disuelta en una mezcla 1:5 de ditioeritritol y ditiotreitol o en una matriz de tioglicerol. Para la disolución de la muestra inicial se emplearon cloroformo o metanol. Los datos informados son sumas de 3-20 exploraciones calibradas contra yoduro de cesio. Los análisis de CCF se realizaron usando placas de sílice E. Merck Kieselgel 60 F254 visualizadas (después de la elución con el/los disolvente(s) indicado(s)) por UV, yodo o estañando con ácido fosfomolíbdico etanólico al 15% o sulfato cérico/molibdato amónico y calentando sobre una placa caliente. Los términos "concentrado" y "coevaporado" se refieren a la retirada del disolvente a presión de aspirador de agua sobre un rotovapor con una temperatura del baño de menos de 40ºC.
Procedimiento general A
Acoplamiento de péptidos usando EDC
Una solución 0,2-0,5 M de la amina primaria (1,0 equivalente) en diclorometano (o un clorhidrato de amina primaria y 1,0-1,3 equivalentes de trietilamina) se trató secuencialmente con 1,0-1,2 equivalentes de la pareja de acoplamiento de ácido carboxílico, 1,5-1,8 equivalentes de hidroxibenzotriazol hidrato (HOBT) y 1,0-1,2 equivalentes (estequiométricamente equivalente a la cantidad de ácido carboxílico) de clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC) y la mezcla se agitó durante una noche en un baño de hielo (el baño de hielo se dejó calentar, de forma que la mezcla de reacción se mantuvo típicamente a 0-20ºC durante 4-6 h y a 20-25ºC durante el período restante). La mezcla se diluyó con acetato de etilo u otro disolvente que se especifique y la mezcla resultante se lavó dos veces con NaOH 1 N, dos veces con HCl 1 N (si el producto no es básico) y una vez con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró dando el producto bruto que se purificó según se especifica. El componente de ácido carboxílico puede usarse como la sal diciclohexilamina en el acoplamiento a la amina primaria o el clorhidrato del último; el este caso no se empleó trietilamina.
Procedimiento general B
Escisión de una amina protegida con t-Boc usando TFA
Se añadió ácido tifluoroacético frío (normalmente 0-10ºC) a la t-Boc-amina (típicamente 10 ml por mmol de amina) neta o disuelta en un volumen mínimo de CH_{2}Cl_{2} y la solución resultante se agitó a 0ºC durante 0,25-2 h (el tiempo requerido para la desaparición completa del material de partida hasta un producto polar como se juzga por CCF). La solución o suspensión resultante se concentró y el residuo se co-evaporó varias veces con cloruro de metileno añadido. Después, el residuo resultante se disolvió en acetato de etilo y se lavó dos veces con NaOH 1 N y una vez con salmuera. Después, la fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó, dando la amina libre que se usó sin purificación adicional o se purificó según se especifique.
Procedimiento general C
Escisión de una amina protegida con t-Boc e intercambio de la sal HCl
Se añadió ácido trifluoroacético frío (normalmente 0-10ºC) a la t-Boc-amina (típicamente 10 ml por mmol de amina) y la solución resultante se agitó a 0ºC durante 0,25-2 h (el tiempo requerido para la completa desaparición del material de partida hasta un producto más polar que se juzgó por CCF). La solución o suspensión resultante se concentró, el residuo se co-evaporó varias veces con cloruro de metileno añadido y después se secó al vacío. La sal trifluoroacetato se disolvió en etanol (típicamente 5 ml por mmol de sal) y se enfrió a 0ºC. A la solución fría se le añadieron dos equivalentes de HCl 1 N o HCl 1 M acuoso en éter y la mezcla se agitó durante 10 min a 0ºC. Después, la mezcla se concentró y el residuo se co-evaporó varias veces con etanol y después se secó al vacío. El aceite resultante en la mayoría de los casos podría triturarse hasta un sólido con éter dietílico.
Procedimiento general D
Hidrólisis con hidróxido de litio de los ésteres
A una solución 0,20-0,50 M de éster disuelta en THF, se le añadieron 3,5 equivalentes de hidróxido de litio hidrato disueltos en un volumen de agua igual al 25% del volumen del THF. La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. El exceso de THF se retiró por evaporación y la mezcla acuosa básica se extrajo tres veces con acetato de etilo y después se acidificó a pH 4 con ácido acético o clorhídrico diluido. El producto se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se evaporaron, dando el ácido deseado que se usó sin purificación adicional, o se trituró hasta un sólido según se especifique.
Ejemplo 1 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido {1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 420 mg (1,94 mmol) de N-t-BOC-O-bencil-D-serina y 571 mg (1,94 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidino y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de EtOAc/hexanos), produciendo 630 mg de 1A.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,18-7,44 (m, 5H), 6,85-7,10 (m, 4H), 4,16-4,84 (m, 6H), 3,60-3,74 (m, 2H), 2,73-2,90 (m, 1H), 2,25-2,67 (m, 2H), 1,71-1,90 (m, 3H), 1,45-1,55 (m, 9H).
B. (R)-1-[1-[(2-Amino-3-benciloxi-propionil)]-piperidin-4-il]-1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 630 mg (1,27 mmol) del producto de 1A, produciendo 550 mg de 1B.
C. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 44 mg (0-22 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina y 78 mg (0,20 mmol) de 1B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (10:1,5 v/v de EtOAc:hexanos), dando 24 mg de 1C.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 9,25-9,40 (d, 1H), 6,78-7,41 (m, 9H), 4,79-5,30 (m, 3H), 4,45-4,65 (m, 3H), 4,17-4,42 (m, 1H), 3,58-3,79 (m, 2H), 2,62-3,45 (m, 2H), 2,19-2,47 (m, 2H), 1,75-1,98 (m, 3H), 1,38-1,55 (m, 15H).
D. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
El producto de 1C se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 15 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,39-7,41 (m, 7H), 6,93-7,15 (m, 4H), 5,12-5,22 (m, 1H), 4,42-4,76 (m, 5H), 4,20-4,30 (m, 1H), 3,70-3,86 (m, 2H), 3,28-3,25 (m, 1H), 2,22-2,49 (m, 1H), 1,75-1,92 (m, 2H), 1,53-1,61 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 480 (MH+).
Ejemplo 2 Clorhidrato de 3-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida A. Éster terc-butílico del ácido (2-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1,1-dimetil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 78 mg (0,20 mmol) de 1B y 48 mg (0,22 mmol) de ácido S-terc-butoxicarbonilamino-S-metil-butírico y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (10:1,5 v/v de EtOAc/hexanos), dando 108 mg de 2A en forma de un aceite transparente.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 7,19-7,38 (m, 5H), 6,79-7,17 (m, 5H), 5,22-5,52 (m, 2H), 4,82-4,97 (m, 1H), 4,49-4,63 (m, 3H), 4,20-4,38 (m, 1H), 3,60-3,72 (m, 2H), 3,03-3,32 (m, 1H), 2,50-2,82 (m, 3H), 2,11-2,49 (m, 3H), 1,77-1,98 (m, 2H), 1,35-1,53 (m, 15H).
B. Clorhidrato de 3-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 94 mg (0,16 mmol) de 2A, dando 58 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,20-7,44 (m, 6H), 6,88-7,24 (m, 4H),5,13-5,23 (m, 1H), 4,20-4,83 (m, 6H), 3,65-3,82 (m, 2H), 2,21-2,90 (m, 6H), 1,78-1,91 (m, 2H), 1,32-1,40 (s a, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 494 (MH+).
Ejemplo 3 Ácido (R)-benciloxi-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propiónico
A 1,83 g (6,2 mmol) de N-t-BOC-O-bencil-D-serina en 35 ml de DMF se le añadieron 1,02 g (7,4 mmol) de carbonato potásico seguido de 0,92 g (6,5 mmol) de yodometano. La mezcla se agitó durante una noche a 24ºC en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se diluyó con 200 ml de agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron cinco veces con agua y una vez con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. Después, el éster metílico del ácido (R)-3-benciloxi-2-terc-butoxicarbonilamino-propiónico bruto se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General B y 0,84 g (4,02 mmol) del éster metílico del ácido (R)-2-amino-3-benciloxi-propiónico resultante se acoplaron a 0,81 g (4,02 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina, dando 1,80 g de éster metílico del ácido (R)-3-benciloxi-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propiónico. El producto bruto se hidrolizó de acuerdo con el procedimiento indicado en el Procedimiento General D y se recuperaron 1,60 g del compuesto del título en forma de un aceite que solidificó tras el reposo.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 300 MHz) \delta 7,30 (m, 5H), 7,10 (d, 1H), 5,07 (s a, 1H), 4,68 (m, 1H). 4,53 (c, 2H) 4,09 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 1,3-1,5 (m, 15H).
Ejemplo 4 2-Amino-N-{1-(R)-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster metílico del ácido (R)-2-amino-3-[(1H-indol-3-il)-propiónico
A 4,92 g (16,2 mmol) de N-\alpha-t-BOC-D-triptofano en 100 ml de DMF se le añadieron 2,46 g (17,8 mmol) de carbonato potásico seguido de 2,41 g (17,0 mmol) de yodometano y la mezcla se agitó durante una noche a 24ºC en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron cinco veces con 500 ml de agua y una vez con salmuera, se secaron MgSO_{4} y se concentraron, dando 4,67 g de un sólido blanco. El éster metílico del ácido (R)-2-terc-butoxicarbonilamino-3-(1H-indol-3-il)-propiónico bruto se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General B, dando 4A en forma de un aceite naranja con rendimiento cuantitativo.
B. Éster metílico del ácido (R)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propiónico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 1,55 g (7,1 mmol) de 4A a 1,44 g (7,1 mmol) de N-t-BOC-metilalanina, dando un aceite que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 10%, 20%, 30%, 40% y 50% en hexano, produciendo 1,32 g de éster metílico del ácido (R)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propiónico.
C. Ácido (R)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propiónico
El producto de 4B se hidrolizó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General D, dando 1,03 g de 4C en forma de una espuma naranja.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 300 MHz) \delta 7,61 (d, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,27 (t, 1H), 7,10 (t, 1H), 4,81 (s a, 1H), 3,35 (m, 1H), 1,49 (s, 6H), 1,32 (s, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 390 (MH+).
D. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 75 mg (0,19 mmol) de 4C a 39 mg (0,18 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (99:0,5 v/v de CHCl_{3}:MeOH), dando 90 mg de 4D en forma de una espuma blanca.
E. 2-Amino-N-{1-(R)-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 90 mg (0,15 mmol) de 4D, dando 70 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 8,80 (s a, 0,5H), 8,58 (s a, 0,5H), 8,48-8,52 (dd, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,34-7,40 (m, 1,5H), 6,93-7,12 (m, 7H), 6,65-6,71 (m, 1H), 4,70-4,88 (m, 1H), 4,39-4,45 (m, 0,5H), 4,08-4,39 (m, 0,5H), 3,72-3,92 (m, 1H), 2,80-2,99 (0,5H), 2,50-2,66 (m, 0,5H), 1,92-2,41 (m, 3H), 1,30-1,82 (m, 11H). EM (Cl, NH_{3}) 489 (MH+).
Ejemplo 5 Clorhidrato de éster metílico del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido 6-hidroxi-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
A 4,75 g (20,7 mmol) de bromhidrato de 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-ol (véase 7D) en 150 ml de 1:1 de agua:dioxano a 0ºC se le añadieron 4,95 g (22,7 mmol) de dicarbonato de di-terc-butilo y suficiente NaOH 1 N para mantener el pH de la solución entre 10 y 10,5. El baño de hielo se retiró después de 30 min y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h más. La solución se concentró, se diluyó con agua y se acidificó con HCl 1 N. La mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo y la fase orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 5,24 g de producto bruto. El producto se cristalizó en hexano/éter, dando 3,99 g de 5A en forma de un sólido.
B. Éster terc-butílico del ácido 6-(4-trifluoro-metanosulfoniloxi)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
A 3,97 g (15,94 mmol) de 5A en 13 ml de cloruro de metileno se le añadieron 8,2 ml (101,4 mmol) de piridina y la mezcla se enfrió a 0ºC. Después, a la mezcla en agitación se le añadió gota a gota una solución de 3,16 ml (18,81 mmol) de anhídrido tríflico en 26 ml de cloruro de metileno durante 20 min. La mezcla se agitó durante 30 min a 0ºC y después se vertió en salmuera saturada y se extrajo con éter. La fase de éter se lavó tres veces con HCl 1 N y una vez con agua y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 6,08 g de 5B en forma de un aceite que cristalizó tras el reposo.
C. 6-Metil-éster de 2-terc-butil-éster del ácido 3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2,6-dicarboxílico
Una botella Parr que contenía 381 mg (1,0 mmol) de 5B, 6 mg (0,03 mmol) de acetato de paladio, 25 mg (0,06 mmol) de 1,3-bis(difenilfosfino)propano, 0,28 ml (2,0 mmol) de trietilamina en 4 ml de dimetilformamida y 1,8 ml de metanol se cargó a 34,47 kPa (5 psi) con monóxido de carbono y la mezcla se agitó durante 0,5 h. Después, la mezcla se calentó a 60ºC y la presión se aumentó a 206,84 kPa (30 psi) de monóxido de carbono y la mezcla se agitó durante una noche. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se disolvió en éter y se lavó tres veces con agua y una vez con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 365 mg de 5C en forma de un aceite.
D. Éster metílico del ácido 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 563 mg (1,93 mmol) de 5C, dando 370 mg de 5D en forma de un aceite.
E. Éster metílico del ácido (R)-2-[2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 303 mg (1,59 mmol) de 5D a 617 mg (1,59 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 866 mg de 5E.
F. Clorhidrato de éster metílico del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 60 mg (0,107 mmol) de 5E, dando 41 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta (mezcla 1:1 de rotámeros) 7,79 (d, 0,5H). 7,54-7,65 (m, 2,5H), 7,29 (d, 0,5H), 7,17 (d, 0,5H), 6,95-7,10 (m, 3,5H), 6,61 (d, 0,5H), 5,28-5,30 (m, 1H), 4,61-4,70 (d, 0,5H), 4,42-4,51 (m, 1H), 4,10-4,19 (d, 0,5H), 3,87 (d, 3H), 3,54-3,12 (m, 1H), 3,17-3,34 (m, 3H), 2,53-2,74 (m, 1H), 2,36-2,51 (m, 0,5H), 2,08-2,21 (m, 0,5H), 1,56 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 463 (MH+).
Ejemplo 6 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[7-(3-metil-ureido)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. 7-Nitro-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina
A 43,1 g (324 mmol) de 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina se le añadieron 160 ml de ácido sulfúrico concentrado con refrigeración con un baño de hielo. A la mezcla en agitación se le añadió en porciones nitrato potásico 35,2 g (348 mmol), mientras se mantenía una temperatura interna por debajo de 5ºC. La mezcla se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 72 h y después se basificó con amoniaco acuoso y se extrajo cuatro veces con cloroformo. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando un aceite pardo oscuro. El aceite se disolvió en 240 ml de etanol y a la mezcla se le añadieron 40 ml de ácido clorhídrico concentrado con refrigeración. El material precipitado se recogió por filtración y se lavó con etanol frío, dando 25,0 g de un sólido castaño. El material bruto se repartió entre NaOH 1 N y acetato de etilo. La fase de acetato de etilo se lavó una vez con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La tetrahidroisoquinolina dinitrada se retiró por cristalización en éter/hexanos. El agua madre se concentró, dando 2,19 g de 7-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina.
B. Éster terc-butílico del ácido {1-[1-(R)-benciloximetil-2-(7-nitro-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 100 mg (0,57 mmol) de 6A y 228 mg (0,60 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (99:1 v/v de CH_{2}Cl_{2}:MeOH), dando 220 mg de 6B en forma de una espuma blanca.
C. Éster terc-butílico del ácido (1-[2-(7-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
A una solución de 222 mg (0,41 mmol) de 6B en 2,5 ml de etanol y 1,5 ml de agua se le añadieron 110 mg (1,96 mmol) de polvo de hierro y 12 mg (0,22 mmol) de cloruro amónico. La mezcla se calentó a reflujo durante 45 min y a la mezcla de reacción se le añadieron otros 110 mg de polvo de hierro y 24 mg de cloruro amónico y el calentamiento a reflujo continuó durante 1 h más. La solución caliente se filtró a través de celite y se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó una vez con agua y salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (98:2 v/v de CH_{2}Cl_{2}:MeOH), dando 147 mg de 6C en forma de una espuma blanca. EM (Cl, NH_{3}) 511 (MH+).
D. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-[7-(3-metil-ureido)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
A una solución de 68 mg (0,13 mmol) de 6C en 3 ml de cloruro de metileno se le añadieron 0,40 ml (6,67 mmol) de isocianato de metilo y la mezcla se agitó durante 17 h en una atmósfera de nitrógeno a 24ºC. La mezcla se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (98:2 v/v de CHCl_{3}:MeOH), dando 55 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
E. 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[7-(3-metil-ureido)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 55 mg (0,097 mmol) de 6D, dando 41 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) (mezcla 2:1 de rotámeros) \delta 8,37-8,52 (m, 1H), 7,54 (s a, 0,67H), 7,41 (s a, 0,33H), 7,11-7,31 (m, 7H), 6,89-7,03 (m, 2H), 5,52-5,60 (m, 0,67H), 5,42-5,50 (m, 0,33H), 4,64 (s a, 1H), 4,59 (s a, 1H), 4,50 (d, 2H), 4,42 (s a, 1H), 3,61-3,90 (m, 4H), 2,62-2,77 (m, 4H), 1,55-1,72 (s a, 2H), 1,32 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 468 (MH+).
Ejemplo 7 2-Amino-N-(1-(R)-benciloximetil-2-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il}-2-oxo-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido fenil-carbámico
A una solución de 21,8 g (100 mmol) de dicarbonato de di-terc-butilo en 1 l de cloruro de metileno se le añadieron 10,0 g (100 mmol) de anilina. La mezcla se agitó a 24ºC durante una noche y después se concentró. El residuo se disolvió en éter y se lavó diez veces con ácido acético acuoso diluido, una vez con NaOH 1 N y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 8,6 g de 7A en forma de un sólido blanco.
B. Ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-fenilbórico
A 8,00 g (41,4 mmol) de éster terc-butílico del ácido fenil-carbámico en 103 ml de tetrahidrofurano a -78ºC se le añadieron gota a gota 58,5 ml (99,5 mmol) de terc-butillitio 1,7 M en pentano. La mezcla se calentó a -20ºC y se agitó a esa temperatura durante 1 h, después de lo cual la reacción se enfrió a -78ºC y se le añadieron gota a gota 12,2 ml (107,7 mmol) de borato de trimetilo. La mezcla se concentró y se le añadieron 500 ml de éter y 125 ml de HCl 1 N. La mezcla se agitó a 24ºC durante 10 min. Las fases se separaron y la porción etérea se lavó una vez con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (50:50 v/v de EtOAc:hexanos), dando 4,49 g de 7B en forma de una espuma.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 300 MHz) \delta 9,16 (s, 1H), 8,85 (d, 1H), 7,37 (t, 1H), 7,06 (t, 1H), 1,48 (s, 9H).
C. 6-Metoxi-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina
A 20,0 g (132 mmol) de \beta-(m-metoxi)feniletilamina se le añadieron 20,4 g (140 mmol) de una solución al 20% de formaldehído y la mezcla se calentó a 85ºC durante 1 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se extrajo con benceno. La fase orgánica se lavó tres veces con agua y una vez con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró, dando 26,8 g de un aceite. Al aceite resultante se le añadieron 26,0 g de una solución al 20% de ácido clorhídrico acuoso y la mezcla se calentó a 85ºC durante 45 min. La mezcla se basificó con NaOH 1 N a pH 11 y se extrajo con éter. La fase de éter se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se evaporó. El producto bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de metanol al 5%, 10% y 20% en cloroformo, dando 8,00 g de 7C en forma de un aceite.
D. Éster bencílico del ácido 6-hidroxi-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
Una solución de 8,00 g (49 mmol) de 6-metoxi-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina en 196 ml de ácido bromhídrico al 48% se calentó a reflujo durante 3 h. Después, la mezcla se concentró y se coevaporó varias veces con etanol. La suspensión resultante se filtró y se secó al vacío, dando 7,43 g de bromhidrato de 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-ol en forma de un sólido. A 7,38 g del bromhidrato bruto disuelto en 117 ml de dioxano y agua se le añadieron 6,34 g (35,3 mmol) de cloroformiato de bencilo con refrigeración con un baño de hielo. Se añadió lentamente una solución 1 M de carbonato potásico hasta que se mantuvo un pH de 10. La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. El exceso de dioxano se retiró por evaporación y la mezcla acuosa resultante se acidificó con HCl 1 N y el producto se extrajo con acetato de etilo. La porción orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró, dando 10,4 g de un aceite que se cristalizó en éter/hexano, dando 7,05 g de 7D en forma de un
sólido.
E. Éster bencílico del ácido 6-(2-terc-butoxicarbonilamino-fenil)-3,4-dihidro-1H-lsoquinolin-2-carboxílico
A una solución de 4,00 g (14,1 mmol) de 7D en 11 ml de cloruro de metileno se le añadieron 7,09 g (89,7 mmol) de piridina. La mezcla se enfrió en un baño de hielo y a la solución en agitación se le añadieron 4,70 g (16,7 mmol) de anhídrido tríflico durante 20 min. Cuando se completó la adición, la mezcla se agitó a 0ºC durante 30 min. Después, la mezcla de reacción se vertió en salmuera y el producto se extrajo con éter. Después, la fase de éter se lavó tres veces con HCl 1 N, una vez con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se evaporó, dando el éster bencílico del ácido 6-(trifluoro-metanosulfoniloxi)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico en forma de un aceite que cristalizó tras el reposo.
Una mezcla de 4,10 g (10,3 mmol) de éster bencílico del ácido 6-(trifluoro-metanosulfoniloxi)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico bruto, 3,25 g (13,7 mmol) de 7B, 1,0 g de tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0), 3,77 g (27,3 mmol) de carbonato potásico, 45 ml de tolueno, 28 ml de etanol y 18 ml de agua se calentaron a 90ºC durante una noche. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con bicarbonato sódico saturado acuoso y una vez con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando un aceite que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (85:15 v/v de hexanos:EtOAc), dando 3,80 g de 7E.
F. Éster bencílico del ácido 6-(2-amino-fenil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
El producto de 7E 3,80 g (8,3 mmol) se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General B, dando 2,63 g de 7F en forma de un vidrio.
G. Éster bencílico del ácido 6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
A una solución de 1,36 g (3,8 mmol) de 7F en 45 ml de cloruro de metileno y 0,403 g (3,99 mmol) de trietilamina se le añadió gota a gota una solución de 0,376 g (1,27 mmol) trifosgeno en 8 ml de cloruro de metileno. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se purgó con nitrógeno durante 25 min y después se concentró. El residuo se disolvió en 21 ml de metanol y a la solución en agitación se le añadieron 15,8 ml de metilamina acuosa al 40%. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 72 h y después se concentró. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando una espuma que se cristalizó en acetato de etilo/hexanos, dando 0,711 g de 7G en forma de un sólido
blanco.
H. 1-Metil-3-[2-(1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-il)-fenil]-urea
A 0,70 g (1,69 mmol) de 7G en 10 ml etanol se le añadieron 0,350 g de paladio al 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó a 379,211 kPa (55 psi) durante 1,5 h. El catalizador se retiró por filtración a través de celite y la mezcla se concentró. Se obtuvo 7H con rendimiento cuantitativo y se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
I. Éster terc-butílico del ácido (1-(R)-benciloximetil-2-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il}-2-oxo-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 150 mg (0,53 mmol) de 7H y 157 mg (0,53 mmol) de N-t-BOC-O-bencil-D-serina. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (60:40 v/v de EtOAc:hexanos), dando 211 mg de 7I en forma de una espuma.
J. 1-{2-[2-(2-Amino-3-benciloxi-propionil)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-il]-fenil}-3-metil-urea
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General B, se desprotegieron 205 mg (0,367 mmol) de 7I, dando 132 mg de 7J.
K. Éster terc-butílico del ácido [1-(1-(R)-benciloximetil-2-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquino-lin-2-il}-2-oxo-etilcarbamoil)-1-metil-etil]-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 130 mg (0,28 mmol) de 7J y 58 mg (0,28 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina y el producto resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (7555 v/v de EtOAc:hexanos), dando 142 mg de 7K en forma de una espuma.
L. 2-Amino-N-(1-(R)-benciloximetil-2-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il}-2-oxo-etil)-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 142 mg (0,22 mmol) de 7K, dando 96 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 300 MHz) \delta 8,32 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,01-7,45 (m, 12H), 6,10-6,33 (m, 1H), 5,09-5,27 (m, 1H), 4,43-4,84 (m, 5H), 3,60-3,85 (m, 3H), 2,62-2,96 (m, 5H), 1,32 (s a, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 544 (MH+).
Ejemplo 8 (R)-N-[3-(2-{1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil)-piperidin-4-il}-etil)-benzo[d]isoxazol-6-il]-benzamida A.N-{3-(2-Piperidin-4-il}-etil)-benzo[d]isoxazol-6-il)-benzamida
Se preparó éster terc-butílico del ácido 4-[2-(6-benzoilamino-benzo[d]isoxazol-3-il)-etil]-piperidin-1-carboxílico como se describe por Villabolos y col. en J. Med. Chem. 1994 37 págs 2721-24 (ejemplo 2h). De acuerdo con el Procedimiento General B, después se desprotegieron 200 mg (0,44 mmol) de este material, dando 8A con rendimiento cuantitativo.
B. Éster terc-butílico del ácido [1-(2-{4-[2-(6-benzoilamino-benzo[d]isoxazol-3-il)-etil]-piperidin-1-il}-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil)-1-metil-etil]-carbámico
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General A, se acoplaron 55 mg (0,16 mmol) de 8A y 60 mg (0,16 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (60:40 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 8B en forma de una espuma.
C. (R)-N-[3-(2-{1-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-piperidin-4-il}-etil)-benzo[d]isoxazol-6-il]-benzamida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 29 mg (0,04 mmol) de 8B, dando 20 mg del compuesto del título en forma de una espuma.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 8,19-8,31 (m, 2H), 8,09 (m, 1H), 7,93 (d, 2H) 7,38-7,52 (m, 5H), 7,20-7,38 (m, 4H). 5,01-5,16 (m, 1H), 4,54-4,67 (m, 1H), 4,42-4,53 (c, 2H), 3,90-4,03 (m, 1H), 3,54-3,68 (m, 2H), 2,84-3,01 (m, 3H), 2,37-2,70 (m, 6H). 1,49-1,88 (m, 5H), 1,40 (s, 6H).
Ejemplo 9 N-[2-(7-Acetilamino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil)-2-amino-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido {1-[2-(7-acetilamino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
A una mezcla de 75 mg (0,15 mmol) de 6C y 36 mg (0,44 mmol) de acetato sódico en 2 ml de cloruro de metileno se le añadieron 12 ml (0,16 mmol) de cloruro de metanosulfonilo y la mezcla resultante se agitó durante una noche a 24ºC. La mezcla se diluyó con 20 ml de acetato de etilo y se lavó tres veces con NaOH 1 N y una vez con HCl 1 N y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 52 mg de 9A en forma de un aceite transparente.
B.N-[2-(7-Acetilamino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil]-2-amino-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 52 mg (0,091 mmol) de 9A y se obtuvieron 26 mg del compuesto del título en forma de un aceite transparente.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) (mezcla 2:1 de rotámeros) \delta 8,33 (d, 1H), 7,65 (s, 0,67H), 7,56 (s, 0,33H), 7,15-7,38 (m, 7H), 6,99-7,19 (m, 1H), 5,10-5,23 (m, 1H), 4,65-4,72 (m, 2H), 4,42-4,50 (m, 2H), 3,55-3,87 (m, 5H), 2,65-2,82 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 1,34 (S. 6H). EM (Cl, NH_{3}) 453 (MH+).
Ejemplo 10 Clorhidrato de 2-amino-N-(1-(R)-benciloximetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,4-dihidro-2H-quinazolin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,4-dihidro-2H-quinazolin-3-il)-piperidin-1-il)-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General A, se acoplaron 14 mg (0,052 mmol) de 3,4-dihidro-1H-quinazolin-2-ona y 21 mg (0,055 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (99:0,75 v/v de CHCl_{3}:MeOH), dando 27 mg de 10A en forma de un aceite transparente.
B. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,4-dihidro-2H-quinazolin-3-il)-piperidin-1-il]-etil)-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 27 mg (0,045 mmol) de 10A, dando 21 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,20-7,41 (m, 6H), 7,03-7,20 (m, 2H), 6,73-7,01 (m, 1H), 5,11-5,22 (m, 1H), 3,98-4,79 (m, 8H), 3,70-3,84 (m, 2H), 3,10-3,26 (m, 1H), 2,61-2,90 (m, 1H), 1,85-2,32 (m, 2H), 1,55-1,78 (m, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 494 (MH+).
Ejemplo 11 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[6-(2-metanosulfonilamino-fenil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 6-(2-metanosulfonilamino-fenil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
A 249 mg (0,695 mmol) de 7F y 84 mg (0,083 mmol) de trietilamina en 3,5 ml de cloruro de metileno se le añadieron 87 mg (0,765 mmol) de cloruro de metanosulfonilo y la mezcla se agitó durante una noche a 24ºC. Se añadieron 16 mg más de trietilamina y 18 mg de cloruro de metanosulfonilo y la mezcla se agitó durante 6 h más. La mezcla de reacción se vertió en una solución acuosa de bicarbonato sódico y el producto se extrajo dos veces con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (2:1 v/v de hexanos:EtOAc), dando 291 mg de 11A en forma de un aceite.
B.N-[2-(1,2,3,4-Tetrahidro-isoquinolin-6-il)-fenil]-metanosulfonamida
Una mezcla de 280 mg (0,642 mmol) de 11A y 160 mg de paladio al 10% sobre carbono en 20 ml de etanol se hidrogenó a 344,737 kPa (50 psi) durante 2 h. Se añadieron 100 mg más de catalizador y la hidrogenación se continuó durante 1,5 h más. El catalizador se retiró por filtración a través de celite y la solución se concentró, dando 120 mg de un sólido blanco que se recristalizó en metanol/hexano, dando 61 mg de 11B en forma de un sólido blanco.
C. Éster terc-butílico del ácido (1-(1-(R)-benciloximetil-2-[6-(2-metanosulfonilamino-fenil)-3,4-dihidro-1H-iso-quinolin-2-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 55 mg (0,18 mmol) de 11B y 68 mg (0,18 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de hexanos:acetato de etilo), dando 15 mg de 11C en forma de una espuma.
D. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[6-(2-metanosulfonilamino-fenil)-3,4-dihidro-1H-isoquino-lin-2-il)-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 15 mg (0,02 mmol) de 11C, dando 10 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 8,28 (d, 1H), 7,14-7,52 (m, 12H), 5,14-5,37 (m, 1H), 4,69-4,82 (m, 3H), 4,46-4,56 (m, 2H), 3,70-3,93 (m, 4H), 2,75-3,06 (m, 2H), 2,72 (s, 3H), 1,52 (s a, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 565 (MH+).
Ejemplo 12 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-fenil-propionil-amino)-piperidin-1-il)-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 30 mg (0,13 mmol) de 4-(N-propionilanilino)-piperidina y 48 mg (0,13 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de hexanos:acetato de etilo), dando 67 mg de 12A en forma de un aceite.
B. Clorhidrato de 2-amino-N-(1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 67 mg (0,11 mmol) de 12A, dando 50 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,11-7,47 (m, 12H), 5,00-5,10 (m, 1H), 4,63-4,81 (m, 2H), 4,49-4,62 (m, 2H), 4,27-4,38 (m, 1H), 3,94-4,21 (m, 1H), 3,45-3,68 (m, 2H), 2,99-3,23 (m, 1H), 2,62-2,80 (m, 1H), 1,81-2,00 (m, 4H), 1,52 (s, 6H), 1,07-1,38 (m, 3H), 0,97 (t, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 495 (MH+).
Ejemplo 13 Clorhidrato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil)-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il)-benzamida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-[1-(5-amino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 330 mg (2,46 mmol) de 43C y 960 mg (2,46 mmol) de 4C y se recuperaron 1,10 g de 13A en forma de un sólido amarillo.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-(5-benzoilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
Una mezcla de 300 mg (0,59 mmol) de 13A, 98 mg (0,69 mmol) de cloruro de benzoílo y 85 mg (0,69 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 5 ml de cloruro de metileno se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con ácido clorhídrico al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 75%\hexano a acetato de etilo al 100%, dando 60 mg de 13B en forma de un sólido blanco.
C. Clorhidrato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)3- (1H-indol-3-il)-propionil]-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il}-benzamida
A 60 mg (0,10 mmol) de 13B en 2 ml de etanol se le añadieron 2 ml de ácido clorhídrico concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se concentró y se disolvió en una cantidad restante de metanol. Se añadió cloruro de metileno hasta que el producto precipitó de la solución, dando 50 mg de 13C en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) \delta 10,12 (d, 1H), 8,45 (d, 1H), 7,93 (d, 2H), 7,49-7,72 (m, 7H), 7,04-7,35 (m, 5H), 4,98-5,08 (m, 1H), 4,65-4,81 (m, 1H), 4,46-4,60 (m, 1H), 3,34-3,52 (m, 2H), 1,62 (s, 6H). EMISL-EM 533 (M+Na).
Ejemplo 14 N-{2-[4-(acetilamino-metil)-4-fenil-piperidin-1-il]-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil)-2-amino-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (1-{2-[4-(acetilamino-metil)-4-fenil-piperidin-1-il]-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 46 mg (0,21 mmol) de N-(4-fenil-piperidin-4-ilmetil)-acetamida y 85 mg (0,22 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (95:5 v/v de cloroformo:metanol), dando 111 mg de 14A en forma de un aceite transparente.
B.N-(2-[4-(Acetilamino-metil)-4-fenil-piperidin-1-il]-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil}-2-amino-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 110 mg (0,18 mmol) de 14A, dando 72 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 7,16-7,40 (m, 10H), 5,92-6,03 (t, 0,5H), 5,61-5,68 (t, 0,5H), 4,93-5,04 (m, 1H), 4,43-4,58 (c, 1H), 4,30-4,43 (c, 1H), 3,84-4,0 (m, 1H), 3,46-3,78 (m, 3H), 3,00-3,42 (m, 6H), 1,87-2,17 (m, 2H), 1,83 (d, 3H), 1,61-1,82 (m, 1H), 1,28 (d, 3H), 1,24 (d, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 495 (MH+).
Ejemplo 15 Clorhidrato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida A. Éster terc-butílico del ácido {1-[2-(7-benzoilamino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil-metil-etil)-carbámico
A una mezcla de 50 mg (0,10 mmol) de 6C en 1 ml de cloruro de metileno se le añadieron 14 mg (0,14 mmol) de trietilamina. La mezcla se enfrió a 0ºC y se le añadieron 17 mg (0,12 mmol) de cloruro de benzoílo. La mezcla en agitación se dejó calentar a temperatura ambiente durante 1,5 h y después la mezcla se vertió en una solución saturada de bicarbonato sódico y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó una vez con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando cloroformo al 100% seguido de metanol al 5% en cloroformo para eluir. Se recuperaron 48 mg de 15A en forma de una espuma.
B. Clorhidrato de (R)-N-(2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 48 mg (0,08 mmol) de 15A, dando 44 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,78-7,92 (m, 2H), 7,41-7,22 (m, 5H), 7,04-7,38 (m, 8H), 5,22-5,40 (m, 1H), 4,41-4,72 (m. 4H), 3,62-3,90 (m, 5H), 2,71-2,90 (m, 2H), 1,60 (s a, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 515 (MH+).
Ejemplo 16 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-ilmetil)-piperidin-1-il)-2-oxo-etil}-isobutiramida A. Clorhidrato de 2-piperidin-4-ilmetil-isoindol-1,3-diona
A una mezcla de 148,0 g (1,0 mol) de anhídrido ftálico y 15 ml de trietilamina en 1,5 l de xileno se le añadieron lentamente 108,0 g (1,0 mol) de 4-(aminometil)piridina con agitación mecánica. El sólido resultante se recogió por filtración. Después, el ácido N-Piridin-4-ilmetil-ftalámico se cicló, calentando 235 g (0,68 mol) a la fase de fusión durante 15 min. La mezcla se dejó enfriar ligeramente, a la mezcla de reacción caliente se le añadieron 2,5 l de etanol y la solución se filtró. Después de la refrigeración, la mezcla cristalizó, dando 188,0 g de 2-piridin-4-ilmetil-isoindol-1,3-diona (p.f. 166-167,5ºC). Una mezcla de 23,8 g (0,1 mol) de 2-piridin-4-ilmetil-isoindol-1,3-diona y 1,3 g de óxido de platino 400 ml de HCl metanólico se redujo a 344,737 kPa (50 psi) hasta que no pudo detectarse material de partida por CCF. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 22,0 g de clorhidrato de 2-piperidin-4-ilmetil-isoindol-1,3-diona en forma de un sólido blanco. Una pequeña muestra se recristalizó en etanol, dando una muestra analíticamente pura de 16A (p.f. 241-242,5ºC).
B. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-ilmetil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 83 mg (0,21 mmol) de 3 y 53 mg (0,21 mmol) de clorhidrato de 2-piperidin-4-ilmetil-isoindol-1,3-diona y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (95:5 v/v de cloroformo:metanol), dando 14 mg de 16B en forma de un aceite transparente.
C. 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-ilmetil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 10 mg (0,016 mmol) de 16B, dando 7 mg del compuesto del título en forma de un aceite transparente.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 7,75-7,89 (m, 4H), 7,20-7,39 (m, 6H), 4,98-5,09 (m, 1H), 4,41-4,59 (m, 4H), 3,94-4,07 (m, 1H), 3,60-3,78 (m, 2H), 3,57-3,60 (d, 1H), 2,96-3,12 (m, 1H), 2,57-2,74 (m, 1H), 2,00-2,12 (m a, 1H), 1,60-1,78 (m, 2H), 1,26-1,37 (m, 8H). EM (Cl, NH_{3}) 507 (MH+).
Ejemplo 17 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido {1-(1-(R)-benciloximetil-2-[4(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 26 mg (0,068 mmol) de clorhidrato de morfolin-4-il-(4-fenil-piperidin-4-il)-metanona y 20 mg (0,065 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (99:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 42 mg de 17A en forma de un aceite transparente.
B. 2-Amino-N-{1-(R)benciloximetil-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 42 mg (0,66 mmol) de 17A, dando 27 mg del compuesto del título en forma de un aceite transparente.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 7,13-7,39 (m, 10H), 6,97-7,02 (d, 1H), 5,00-5,12 (m, 1H), 4,38-4,52 (m, 3H), 3,82-4,00 (m, 1H), 3,51-3,67 (m, 3H). 2,96-3,50 (m, 9H), 2,20-2,34 (m, 1H), 1,57-2,11 (m a, 3H), 1,29 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 537 (MH+).
Ejemplo 18 Clorhidrato de amida del ácido (R)-1'-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-[1,4']bipiperi-dinil-4'-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido {1-[1-(R)-benciloximetil-2-(4'-carbamoil-[1,4']bipiperidinil-1'-il)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 21 mg (0,055 mmol) de 3 y 11 mg (0,052 mmol) de 4-carbamil-4-piperidinopiperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (99:0,75 v/v de cloroformo:metanol), dando 25 mg de 18A en forma de un vidrio.
B. Clorhidrato de amida del ácido (R)-1'-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino-1,3-benciloxi-propionil]-[1,4']bipiperidinil-4'-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 25 mg (0,044 mmol) de 18A, dando 19 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 8,32 (d, 0,5H), 8,27 (d, 0,5H), 7,26-7,42 (m, 5H), 5,06-5,19 (m, 1H), 4,48-4,70 (m, 3H), 4,21-4,34 (m, 1H), 3,64-3,79 (m, 3H), 3,38-3,50 (m, 1H), 2,91 3,18 (m, 2H), 2,48-2,91 (m, 4H), 1,76-2,12 (m, 8H), 1,57 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 474 (MH+).
Ejemplo 19 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-difenilacetilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil)-isobutiramida A. Ácido (R)-{1-[2-(5-difenilacetilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
Una mezcla de 300 mg (0,59 mmol) de 13A, 160 mg (0,68 mmol) de cloruro de difenilacetilo y 83 mg (0,68 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 5 ml de cloruro de metileno se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con ácido clorhídrico al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 75% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 150 mg de 19A en forma de un sólido blanco.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-difenilacetilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida
A 150 mg (0,20 mmol) de 19B en 2 ml de etanol se le añadieron 2 ml de ácido clorhídrico concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se concentró, dando 140 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) \delta 7,60 (d, 1H), 7,52 (s, 0,5H), 7,41 (s, 0,5H), 7,21-7,34 (m, 12H), 6,93-7,13 (m, 4H), 5,13 (s, 1H), 4,92-5,00 (m, 1H), 4,06-4,18 (m, 1H), 4,40-4,51 (m, 1H), 4,01-4,19 (m, 2H), 3,20-3,42 (m, 2H), 1,59 (s, 3H), 1,51 (s, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 600 (MH+).
Ejemplo 20 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 6-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
A una mezcla de 275 mg (1,10 mmol) de éster terc-butílico del ácido 6-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico y 134 mg (1,33 mmol) de trietilamina en 6 ml de cloruro de metileno a 0ºC se le añadieron en una porción 233 mg (12 mmol) de cloruro de toluenosulfonilo. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. Se añadieron 62 mg (0,61 mmol) más de trietilamina y 105 mg (0,55 mmol) de cloruro de toluenosulfonilo y la agitación se continuó durante 4 h más. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La porción orgánica se lavó dos veces con NaOH 1 N y salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:3 v/v de acetato de etilo:hexano), dando 274 mg de 20A en forma de una espuma.
B. 4-Metil-N-(1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-il)-bencenosulfonamida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 253 mg (0,63 mmol) de 20A, dando 175 mg de 20B en forma de una espuma.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoqui-nolin-2-carbonil]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 84 mg (0,278 mmol) de 20B a 108 mg (0,278 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (70:30 v/v de acetato de etilo:hexano), dando 114 mg de 20C.
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-[6-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil)-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 114 mg (0,17 mmol) de 20C, dando 68 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) (mezcla de rotámeros) \delta 8,41 (d, 0,5H), 8,33 (d, 0,5H), 8,15 (s a, 0,5H), 7,75 (d, 2H), 7,67 (d, 2H), 7,53 (s a, 0,5H), 6,51-7,31 (m, 8,5H), 6,07 (d, 0,5H), 5,13-5,32 (m, 1H), 4,38-4,61 (c, 1H), 4,04-4,19 (m, 1H), 3,77-4,04 (m, 1H), 2,98-3,44 (m, 3H), 2,46-2,62 (m, 5H), 1,30 (s a, 6H).
Ejemplo 21 Clorhidrato de {1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-(1-carboxi-2-fenil-etilcarbamoil)-piperidin-1-carboxílico
Una mezcla de 1,00 g (6,05 mmol) de D-fenilalanina, 1,98 g (6,05 mmol) de 77A y 1,84 g (18,2 mmol) de trietilamina en 10 ml de agua y 40 ml de dioxano se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La mezcla se diluyó con cloroformo y se acidificó a pH 4 con ácido acético. Las fases se separaron y la porción orgánica se lavó tres veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 2,16 g de 21A en forma de un sólido blanco.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 80 mg (0,29 mmol) de 50D y 109 mg de 96A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 140 mg de 21B.
C. Clorhidrato de {1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil)-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A una solución de 140 mg (0,22 mmol) de 21B en 5 ml de etanol se le añadieron 5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en metanol/acetato de etilo, dando 107 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,32 (m, 0,5H), 7,66-7,89 (m, 8,5H), 7,19-7,40 (m, 5H), 5,13-5,21 (m, 0,33H), 5,02-5,10 (m, 0,67H), 4,15-4,27 (m, 0,33H), 4,03-4,14 (m, 0,67H). EM (Cl, NH_{3}) 536 (MH+).
Ejemplo 22 Clorhidrato de N-[2-(4-acetil-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil)-2-amino-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 3,15 mg (13,1 mmol) de clorhidrato de 4-acetil-4-fenilpiperidina y 5,0 mg (13,1 mmol) de 3, dando éster terc-butílico del ácido {1-[2-(4-acetil-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico. El producto bruto se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 5,09 mg del compuesto del título.
EM (Cl, NH_{3}) 508 (MH+).
Ejemplo 23 Clorhidrato de éster etílico del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico A. Clorhidrato de éster etílico del ácido 4-fenil-piperidin-4-carboxílico
Una mezcla de 10,0 g (45 mmol) de clorhidrato de 4-ciano-4-fenilpiperidina, 10 g de ácido sulfúrico y 2,5 ml de agua se calentó a 150ºC durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar a 110ºC y se le añadieron 10 ml de etanol. Después, el etanol se retiró por filtración. Esta adición/destilación de etanol se repitió cuatro veces más. Después de la última adición, la mezcla se calentó a 125ºC, se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en hielo. La mezcla se basificó con NaOH al 10% y se extrajo dos veces con éter. Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 2,3 g de un aceite amarillo. Una solución de 2,0 g de la base libre en 100 ml de éter se trató con una solución saturada de éter con HCl. El precipitado blanco se filtró y se recristalizó en EtOAc/hexanos, dando 1,73 g de 23A.
B. Clorhidrato de éster etílico del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 3,55 mg (13,1 mmol) de 23A y 5,0 mg (13,1 mmol) de 3, dando éster etílico del ácido 1-[3-benciloxi-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico. Después, el producto bruto se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 6,97 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
EM (Cl, NH_{3}) 496 (MH+).
Ejemplo 24 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-hidroxi-4-(4-trifluorometil-fenil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. Éster bencílico del ácido 4-oxo-piperidin-1-carboxílico
A una mezcla de 50,0 g (0,325 mol) de clorhidrato de 4-piperidona hidrato y 181,9 g (1,82 mol) de bicarbonato potásico en 750 ml de EtOAc y 75 ml de agua se le añadieron 49 ml (0,343 mol) de cloroformiato de bencilo durante 10 min con agitación. La mezcla se agitó a 24ºC durante 2,5 h y después se diluyó con agua. Las fases se separaron y la porción acuosa se extrajo con 500 ml de acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron una vez con agua y salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 81,41 g de 24A en forma de un aceite amarillo. El producto bruto se usó sin purificación adicional.
B. Éster bencílico del ácido 4-hidroxi-4-trifluorometil-fenil-piperidin-1-carboxílico
A 1,25 g (51,4 mmol) de magnesio en 10 ml de éter se le añadió una solución de 4-bromobenzotrifluoruro en 10 ml de éter. La reacción se inició pronto después de que se completara la adición. La mezcla se agitó durante 1,5 h a 24ºC y después se enfrió a 0ºC. Se añadió una solución de 10,0 g (42,87 mmol) de 24A en 50 ml de éter y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 17 h. La mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de 150 ml de cloruro amónico saturado acuoso. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con éter. Los extractos orgánicos combinados se lavaron una vez con agua y salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. El material bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (3:7 v/v de EtOAc:hexanos), dando 12,48 g de 24B en forma de un aceite naranja que solidificó tras el reposo.
C. 4-(4-Trifluorometil-fenil)-piperidin-4-ol
A 12,3 g (32,4 mmol) de 24B en 150 ml de etanol se le añadieron 1,4 g de paladio al 10% sobre carbono. La mezcla se hidrogenó en un agitador Parr a 325,668 kPa (48 psi) 2,5 h. La solución se filtró a través de celite y se concentró. El sólido resultante se trituró con éter/hexano, dando 4,98 g de 24C en forma de un sólido blanco.
D. Clorhidrato de 2-amino-N-(1-(R)-benciloximetil-2-[4-hidroxi-4-[4-trifluorometil-fenil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 3,22 mg (13,1 mmol) de 24C y 5 mg (13,1 mmol) de 3, dando éster terc-butílico del ácido {1-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-hidroxi-4-(4-trifluorometil-fenil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico. El producto bruto se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 7,35 mg del compuesto del título.
EM (Cl, NH_{3}) 466 (MH+).
Ejemplo 25 Clorhidrato de (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-piperidin-4-carboxílico A. Éster monobencílico del ácido piperidin-1,4-dicarboxílico
A una suspensión de 66,4 g (0,50 mol) de ácido isonipecótico y 145 ml (0,50 mol) de trietilamina en 600 ml de cloruro de metileno se le añadió una solución de 72 ml (0,50 mol) de cloroformiato de bencilo en 200 ml de tolueno a 10ºC. La suspensión se dejó calentar a temperatura ambiente y después de agitar durante 17 h se trató con 1 l de una solución acuosa al 10% de carbonato sódico. Las fases se separaron y la porción acuosa se extrajo una vez con éter y después se acidificó a pH 3. Después, la porción acuosa se extrajo con cloruro de metileno. El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 35,2 g del compuesto del título en forma de un aceite que se usó sin purificación adicional.
B. Éster bencílico del ácido 4-ciclohexilcarbamoil-piperidin-1-carboxílico
A 3,82 g (14,3 mmol) de 25A se le añadieron 1,2 ml (15,7 mmol) de cloruro de tionilo en 50 ml de cloruro de metileno que contenía 1 gota de DMF. La suspensión se calentó a reflujo en un baño de vapor durante 10 min, dando una solución transparente. La mezcla se concentró y el aceite resultante se disolvió en 30 ml de THF y se añadió a una solución de 3,54 g (35,8 mmol) de ciclohexilamina en 20 ml de THF a 0ºC. La mezcla se agitó a 24ºC durante 0,5 h y después se filtró. El filtrado se concentró y después se disolvió en cloruro de metileno. La solución orgánica se lavó una vez con agua, HCl 1 N, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 3,46 g de 25B en forma de un sólido.
C. Ciclohexilamida del ácido piperidin-4-carboxílico
A 3,46 g (10 mmol) de 25B se le añadieron 30 ml de metanol y la mezcla se calentó a reflujo en NaOH al 20% durante 8 h. El metanol se retiró y la fase acuosa se extrajo con cloruro de metileno. La solución acuosa se acidificó a pH 5 con ácido acético y se extrajo con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 1,81 g del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino.
D. Clorhidrato de ciclohexilamida del ácido (R)-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-piperidin-4-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 2,76 mg (13,1 mmol) de 25C y 5 mg (13,1 mmol) de 3, dando éster terc-butílico del ácido {1-[1-(R)-benciloximetil-2-(4-ciclohexilcarbamoil-piperidin-1-il)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil)-carbámico. El producto bruto se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 6,60 mg del compuesto del título.
EM (Cl, NH_{3}) 473 (MH+).
Ejemplo 26 Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico A. Ácido (R)-2-[2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
A 756 mg (1,35 mmol) de 5E en 10,8 ml de THF se le añadió una solución de 97 mg (4,04 mmol) de hidróxido de litio en 2,7 ml de agua. La mezcla se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y se disolvió en 100 ml de agua. La solución acuosa se extrajo dos veces con cloruro de metileno, se acidificó con ácido acético y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos de acetato de etilo se lavaron dos veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron, dando 632 mg de 26A en forma de un sólido blanco.
B. Ácido (R)-{1-[1-(6-etilcarbamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 60 mg (0,11 mmol) de 26A y 13,4 mg (0,16 mmol) de clorhidrato de etilamina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al 100%), dando 47 mg de 26B en forma de una espuma.
C. Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 47 mg (0,081 mmol) de 26B, dando 39 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,32 (d, 1H), 7,53-7,64 (m, 1,5H), 7,40-7,50 (m. 1,5H), 7,30 (d, 0,5H), 6,91-7,18 (m, 4H), 6,61 (d, 0,5H), 5,14-5,32 (m, 1H), 4,63-4,74 (d, 0,5H), 4,39-4,54 (m, 1H), 4,07-4,18 (d, 0,5H), 3,80-3,91 (m, 0,5H), 3,54-3,16 (m, 0,5H), 1,57 (s, 6H), 1,06-1,27 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 476 (MH+).
Ejemplo 27 Clorhidrato de fenilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(1H-indol-3-il)-1-(6-fenilcarbamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
A 60 mg (0,11 mmol) de 26A en 0,6 ml de cloruro de metileno se le añadieron 11,4 mg (0,112 mmol) de trietilamina. La mezcla se enfrió a 0ºC y se le añadieron en una porción 13,5 mg (0,112 mmol) de cloruro de pivaloílo. La mezcla se agitó durante 1,5 h a 0ºC y después se le añadieron 10 mg (0,107 mmol) de anilina y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 17 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con NaOH 1 N y salmuera. La solución se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (2:1 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 39 mg de 27A en forma de una espuma.
B. Clorhidrato de fenilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General C, se desprotegieron 37 mg (0,06 mmol) de 27A, dando 32 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,53-7,79 (m, 6H), 7,37-7,42 (m, 3H), 6,95-7,22 (m, 5,5H), 6,67 (d, 0,5H), 5,29-5,32 (m, 1H), 4,63-4,79 (m, 0,5H), 4,43-4,59 (m, 1H), 4,09-4,19 (m, 0,5H), 3,78-3,92 (m, 0,5H), 3,39-3,63 (m, 2,5H), 1,59 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 524 (MH+).
Ejemplo 28 Clorhidrato del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico A. Clorhidrato del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 40 mg (0,073 mmol) de 26A, dando 25 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,78 (d, 0,5H), 7,52-7,68 (m, 2,5H), 7,39 (d, 0,5H), 7,23 (d, 0,5H), 6,95-7,19 (m, 3,5H), 6,58 (d, 0,5H), 5,17-5,31 (m, 1H), 4,63-4,74 (d, 0,5H), 4,42-4,53 (c, 1H), 4,09-4,20 (d, 1H), 1,58 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 449 (MH+).
Ejemplo 29 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-1-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil}-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-[1-(2-(1H-indol-3-il)-1-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-H-isoquino-lin-2-carbonil}-etilcarbamoil)-1-metil-etil]-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 72 mg (0,26 mmol) de 7H y 100 mg (0,26 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando cloroformo al 100%, seguido de metanol al 2% en cloroformo, dando 130 mg de 29A en forma de una espuma.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-1-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil}-etil)-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 130 mg (0,20 mmol) de 29A, dando 120 mg del compuesto del título en forma de un sólido castaño.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 7,57-7,72 (m, 2H), 6,99-7,37 (m, 10,5H), 6,68 (d, 0,5H), 5,18-5,32 (m, 1H), 4,37-4,75 (m, 2H), 3,58-3,81 (m, 0,5H), 3,53-3,68 (m, 0,5H), 3,17-3,32 (m, 2H), 2,62-2,80 (m, 4H), 2,41-2,60 (m, 0,5H), 2,14-2,39 (m, 0,5H), 1,58 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 552 (MH+).
Ejemplo 30 Trifluoroacetato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[3-(tolueno-4-sulfonilamino)-pirrolidin-1-il)-etil}-isobutiramida A. Éster del ácido 3-terc-butoxicarbonilamino-pirrolidin-1-carboxílico
A una mezcla de 19,0 g (102 mmol) de 3-(t-butoxicarbonilamino)-pirrolidina y 14,28 g (117 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 115 ml de cloruro de metileno a 0ºC se le añadieron gota a gota 20,0 g (117 mmol) de cloroformiato de bencilo. La mezcla se dejó calentar a 24ºC y se agitó durante una noche. La mezcla se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con HCl al 10%, dos veces con bicarbonato sódico saturado acuoso y una vez con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 36A con rendimiento cuantitativo. El material bruto se usó sin purificación adicional.
B. Trifluoroacetato de éster bencílico del ácido S-amino-pirrolidin-1-carboxílico
A 9,4 g (29,3 mmol) de 30A a 0ºC se le añadieron 100 ml de ácido trifluoroacético y la mezcla se agitó a 24ºC durante 1 h. La mezcla se concentró y se co-evaporó tres veces en acetato de etilo/heptano, dando 11,0 g de 30B en forma de un aceite naranja.
C. Éster bencílico del ácido 3-(tolueno-4-sulfonilamino)-pirrolidin-1-carboxílico
A una mezcla de 2,0 g (6,0 mmol) de 30B, 0,84 g (6,9 mmol) de 4-dimetilaminopiridina y 0,61 g (6,0 mmol) de trietilamina en 10 ml de cloruro de metileno se le añadieron 1,32 g (6,9 mmol) de cloruro de toluenosulfonilo y la mezcla se agitó durante una noche. La mezcla se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con HCl al 10%, bicarbonato saturado acuoso y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 35% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 30C en forma de un sólido blanco (700 mg).
D. 4-Metil-N-pirrolidin-3-il-bencenosulfonamida
A 0,70 g (1,9 mmol) de 30C en 20 ml de etanol se le añadieron 0,40 g de paladio al 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó sobre un agitador Parr durante 17 h a 210,264 kPa (45 psi). La mezcla se diluyó con 110 ml de una mezcla (9:1:1) de etanol:agua:hidróxido amónico y se agitó durante 20 min. La solución se filtró a través de celite y se concentró, dando 300 mg de 30D en forma de un sólido amarillo.
E. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[3-(tolueno-4-sulfonilamino)-pirrolidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 94 mg (0,39 mmol) de 30D y 100 mg (0,26 mmol) de 3 y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 50% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 100 mg de 30E.
F. Trifluoroacetato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[3-(tolueno-4-sulfonilamino)-pirrolidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 100 mg (0,16 mmol) de 30E se le añadieron 2 ml de ácido trifluoroacético a 0ºC y la mezcla se agitó durante 1,5 h a 24ºC. La mezcla se concentró y se co-evaporó una vez con acetato de etilo y hexano. El producto se precipitó en cloruro de metileno/hexano, se recogió por filtración y se secó al vacío, dando 95 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta (rotámeros) 7,75-7,84 (m, 2H), 7,29-7,50 (m, 7H), 4,76-4,93 (m, 1H), 4,57 (d, 2H), 3,69-3,80 (m, 5H), 3,39-3,65 (m, 2,5H), 3,22-3,31 (m, 0,5H), 2,45 (m, 3H), 1,62 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 503 (MH+).
Ejemplo 31 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 60 mg (0,154 mmol) de 4C y 26 mg (0,154 mmol) de 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (40:60 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 71 mg de 31A.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General C, se desprotegieron 57 mg (0,106 mmol) de 31B, dando 49 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (mezcla de rotámeros) \delta 8,32 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,32 (d, 0,5H), 6,96-7,22 (m, 7H), 6,61 (d, 0,5H), 5,17-5,32 (m, 1H), 4,61-4,73 (d, 0,5H), 4,45-4,58 (d, 0,5H), 4,29-4,41 (d, 0,5H), 3,96-4,05 (d, 0,5H), 3,37-3,72 (m, 2H), 3,13-3,26 (m, 2H), 2,54-2,74 (m, 1H), 2,39-2,55 (m, 0,5H), 2,11-2,25 (m, 0,5H), 1,49-1,62 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 405 (MH+).
Ejemplo 32 Trifluoroacetato de (R)-N-{1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil-pirrolidin-3-il}-benzamida A. Éster bencílico del ácido 3-benzoilamino-pirrolidin-1-carboxílico
A una mezcla de 2,00 g (6,0 mmol) de 30B, 0,84 g (6,9 mmol) de 4-dimetilaminopiridina y 0,610 g (6,9 mmol) de trietilamina en 10 ml de cloruro de metileno se le añadieron 0,97 g (6,9 mmol) de cloruro de benzoílo y la mezcla se agitó durante 72 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con HCl al 10%, dos veces con una solución saturada de bicarbonato sódico y una vez con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo/hexanos), dando 690 mg de 32A.
B.N-Pirrolidin-3-il-benzamida
A 0,69 g (2,1 mmol) de 32A en 20 ml de etanol se le añadieron 0,30 g de paladio al 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó en un agitador Parr durante 17 h a 310,264 kPa (45 psi). La mezcla se diluyó con 110 ml de una mezcla (9:1:1) de etanol:agua:hidróxido amónico y se agitó durante 15 min. La solución se filtró a través de celite y se concentró, dando 265 mg de 32B.
C. Éster terc-butílico del ácido {1-[2-(3-benzoilamino-pirrolidin-1-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 100 mg (0,52 mmol) de 32B y 75 mg (0,20 mmol) de 3 y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 75% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 50 mg de 32C.
D. Trifluoroacetato de (R)-N-{1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-pirrolidin-3-il}-benzamida
A 50 mg (0,10 mmol) de 32C a 0ºC se le añadieron 2 ml de ácido trifluoroacético. La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a 24ºC y el residuo se diluyó con acetato de etilo y se co-evaporó con heptano y acetato de etilo/hexano. El residuo se diluyó con cloroformo mediante la adición de hexano, dando 22 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,86-7,99 (m, 2H), 7,46-7,65 (m, 3H), 7,23-7,45 (m, 5H), 4,52-4,74 (m, 3H), 3,39-4,26 (m, 7H), 1,59 (s a, 6H). EMISL-EM 453 (MH+).
Ejemplo 33 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(5-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. 2,5-Dioxo-pirrolidin-1-il-éster del ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propiónico
A una suspensión de 5,0 g (24,6 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina en 13,5 ml de cloruro de metileno se le añadieron 3,40 g (29,6 mmol) de N-hidroxisuccinimida y 5,65 g (29,6 mmol) de EDC. La suspensión se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con agua, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. Se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 5,2 g de 33A en forma de un sólido blanco.
B. Ácido 2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(5-fluoro-1H-indol-3-il)-propiónico
Una mezcla de 100 mg (0,33 mmol) de 33A, 62 mg (0,278 mmol) de 5-fluoro-DL-triptofano y 79 mg (0,611 mmol) de diisopropiletilamina en 1,0 ml de DMF se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Al acetato de etilo se le añadió un volumen igual de hexano y la mezcla se lavó tres veces con agua y una vez con salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (9:1 v/v de CHCl_{3}:MeOH), dando 52 mg de 33B.
C. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(5-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 44 mg (0,11 mmol) de 33B y 23,5 mg (0,11 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al 100%), dando 39 mg de 33C en forma de un sólido amorfo.
D. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(5-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 39 mg (0,064 mmol) de 33C, dando 32 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) (parcial) (mezcla 1:1 de diastereómeros) \delta 8,36 (d, 1H), 7,03-7,39 (m, 7,5H), 6,89 (t, 1H), 6,76 (d, 0,5H). 5,14-5,35 (m, 1H), 4,59-4,71 (m, 1H), 4,23-4,46 (m, 1H), 3,94-4,11 (m. 1H), 2,45-2,72 (m, 2H), 1,50-1,64 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 507 (MH+).
Ejemplo 34 (R)-N-[1-[4-(Acetil-fenil-amino)-piperidin-1-carbamoil]-2-(1H-indol-3-il)-etil-2-amino-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-[4-(acetil-fenil-amino)-piperidin-1-carbonil]-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 45 mg (0,116 mmol) de 4C y 27 mg (0,124 mmol) de N-fenil-N-piperidin-4-il-acetamida y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de metanol del 1% al 5% en cloruro de metileno, dando 63 mg de 34A.
B. (R)-N-[1-[4-(Acetil-fenil-amino)-piperidin-1-carbonil]-2-(1H-indol-3-il)-etil]-2-amino-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 63 mg (0,107 mmol) de 34A, dando 33 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 300 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) \delta 7,31-7,62 (m, 4H), 6,89-7,23 (m, 5H), 5,11-5,20 (t, 1H), 4,99-5,19 (t, 1H), 4,40-4,63 (m, 2H), 3,68-3,83 (m, 2H), 3,02-3,17 (t, 2H), 2,90-3,01 (t, 0,5H), 2,50-2,60 (t, 0,5H), 2,32-2,41 (m, 1H), 1,64-1,82 (m, 1H), 1,69 (s, 3H), 1,32 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 490 (MH+).
Ejemplo 35 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 605 mg (1,92 mmol) de BOC-D-3-2-(naftil)alanina y 417 mg (1,92 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina, dando 890 mg de 35A en forma de un sólido que se usó sin purificación adicional.
B. 1-[1-(2-Amino-3-naftalen-2-il-propionil)-piperidin-4-il)-1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 830 mg (1,61 mmol) de 35A, dando 582 mg de 35B en forma de un sólido castaño.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-metil-1-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil)-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 570 mg (1,38 mmol) de 35B y 266 mg (1,31 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina, dando 63 mg de 35C después de la cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de metanol del 1% al 3% en cloruro de metileno.
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 620 mg (1,03 mmol) de 35C, dando 404 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo claro.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,73-7,87 (m, 4H), 7,40-7,50 (m, 3H), 7,19-7,28 (m, 0,5H), 6,91-7,05 (m, 3H), 6,74-6,79 (d, 0,5H), 5,26-5,48 (m, 1H), 4,67-4,71 (m, 1H), 4,33-4,50 (m, 1H), 4,10-4,32 (m, 1H), 3,12-3,39 (m, 2H), 1,55-1,61 (d, 3H), 1,38 (s, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 500 (MH+).
Ejemplo 36 (R)-2-Amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-1-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(1H-indol-3-il)-1-(7-nitro-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 750 mg (4,21 mmol) de 6A y 1,64 g (4,21 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (30:70 v/v de EtOAc:hexanos), dando 1,50 g de 36A en forma de una espuma.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-{1-(7-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil)-carbámico
A 800 mg (1,46 mmol) de 36A en 10 ml de metanol se le añadieron 300 mg de hidróxido de paladio al 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó a 344,737 kPa (50 psi) durante 17 h. La mezcla se filtró a través de cefite y se concentró, dando 700 mg de 36B en forma de un polvo pardo.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{2-(1H-indol-3-il)-1-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoqui-nolin-2-carbonil)-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
A 71 mg (0,14 mmol) de 36B en 10 ml de cloruro de metileno a 0ºC se le añadieron 17 mg (0,165 mmol) de trietilamina, seguido de 29 mg (0,15 mmol) de cloruro de toluenosulfonilo. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con NaOH 1 N y una vez con salmuera. La solución se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:2 v/v de EtOAc:hexanos), dando 90 mg de 36C en forma de una espuma.
D. (R)-2-Amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 50 mg (0,74 mmol) de 36C, dando 20 mg del compuesto del título en forma de un polvo blanco.
EM (Cl, NH_{3}) 574 (MH+).
Ejemplo 37 (R)-N-{2-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-(7-benzoilamino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil)-1-metil-etil)-carbámico
A 86 mg (0,17 mmol) de 36B en 10 ml de cloruro de metileno a 0ºC se le añadieron 20 mg (0,20 mmol) de trietilamina y 26 mg (0,18 mmol) de cloruro de benzoílo. La mezcla se calentó a temperatura ambiente durante 2 h, se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con NaOH 1 N y una vez con salmuera. La solución se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de EtOAc/hexanos), dando 95 mg de 37A en forma de una espuma.
B. (R)-N-{2-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 95 mg (0,15 mmol) de 37A, dando 65 mg del compuesto del título.
EM (Cl, NH_{3}) 524 (MH^{+}).
Ejemplo 38 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(2-ciclopropil-5,7-dimetil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 4-(2-ciclopropil-5,7-dimetil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-carboxílico
Se desprotegió 2-ciclopropil-5,7-dimetil-3H-imidazo[4,5-b]piridina de acuerdo con procedimientos bibliográficos (para la preparación véase Carpino y col., Bioorg. & Med. Chem. Lett 4, págs. 93-98 1994 (ref. 13)). A 625 mg (2,4 mmol) de trifenilfosfina en 10 ml de tolueno se le añadieron 460 mg (2,0 mmol) de azodicarboxilato de di-terc-butilo y la mezcla se agitó durante 15 min. A la solución en agitación se le añadió una mezcla de 430 mg (2,3 mmol) de 2-ciclopropil-5,7-dimetil-3H-imidazo[4,5-b]piridina y 325 mg (1,62 mmol) de éster terc-butílico del ácido 4-hidroxi-piperidin-1-carboxílico y la mezcla se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (50:50 v/v de hexanos: acetato de etilo), dando 150 mg de
38A.
B. 2-Ciclopropil-5,7-dimetil-3-piperidin-4-il-3H-imidazo[4,5-piridina
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 150 mg (0,39 mmol) de 38A, dando 60 mg de 38B.
C. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-(4-(2-ciclopropil-5,7-dimetil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 60 mg (0,22 mmol) de 38B a 84 mg (0,22 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (9:1 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 37 mg de 38C.
D. 2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(2-ciclopropil-5,7-dimetil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 37 mg de 38C, dando 25 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,29-7,37 (m, 3H); 7,16-7,24 (m, 2H), 6,87-6,89 (s, 1H), 5,13-5,21 (m, 1H), 4,92-5,03 (m, 1H), 4,68-4,82 (m, 1H) 4,50-4,67 (m, 3H)_{t} 4,71-4,89 (m, 1H), 3,66-3,77 (m, 2H), 2,73-2,92 (m, 3H), 2,51 (s, 5H), 2,43 (s, 1H), 2,10-2,30 (m, 1H),1,86-2,94 (m, 2H), 1,32 (d, 6H), 1,02-1,26 (m, 4H). EM (Cl, NH_{3}) 533 (MH+).
Ejemplo 39 (R)-2-Amino-N-[2-(4-ciano-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(4-ciano-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 53 mg (0,24 mmol) de clorhidrato de 4-fenil-piperidin-4-ciano y 92 mg (0,24 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 124 mg de 39A.
B. (R)-2-Amino-N-[2-[4-ciano-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 105 mg (0,19 mmol) de 39C, dando 82 mg del compuesto del título en forma de una espuma.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 250 MHz) (60:40 mezcla de rotámeros) \delta 8,13-8,34 (m, 2H), 7,75 (d, 0,6H), 7,68 (d, 0,4H), 7,28-7,41 (m, 4H), 7,08-7,27 (m, 3H), 6,94-7,01 (m, 1H), 5,13-5,33 (m, 1H), 4,62-4,78 (m, 1H), 3,73-3,90 (m, 1H), 3,20-3,31 (m, 2H)_{t} 2,64-2,93 (m, 2H), 1,66-2,43 (m a, 6H), 1,43 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 458 (MH+).
Ejemplo 40 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 27 mg (0,087 mmol) de clorhidrato de morfolin-4-il-(4-fenil-piperidin-4-il)-metanona y 32 mg (0,081 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 50% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 24 mg de 40A en forma de una espuma.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General C, se desprotegieron 36 mg de 40A, dando 17 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (rotámeros) \delta 7,52-7,67 (m, 1H), 6,99-7,40 (m, 8H), 6,87 (d, 1H), 5,07-5,21 (m, 1H), 4,03-4,30 (m, 1H), 3,52-3,68 (m, 1H), 2,74-3,39 (m, 13H), 1,94-2,18 (m, 1H), 1,74-1,90 (m, 1H), 1,58-1,66 (m, 1H), 1,30-1,47 (d, 6H), 1,25-1,30 (m, 2H). EM (Cl, NH_{3}) 546 (MH+).
Ejemplo 41 Trifluoroacetato de {1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido 1-amino-ciclopentanocarboxílico A. Ácido 1-terc-butoxicarbonilamino-ciclopentanocarboxílico
A 1,66 g (12,88 mmol) de ácido 1-amino-1-ciclopentano-carboxílico en 12,5 ml de NaOH 2 N se le añadieron 283 mg (13,0 mmol) de dicarbonato de di-terc-butilo y la mezcla se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla se acidificó con HCl al 10% y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 1,71 g de 41A.
B. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil)-ciclopentil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 20 mg (0,05 mmol) de 1B y 11,6 mg (0,05 mmol) de 41A y se recuperaron 23 mg de 41B. El material bruto se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa.
C. Trifluoroacetato de {1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil)-amida del ácido 1-amino-ciclopentanocarboxílico
A 23 mg (0,04 mmol) de 41B se le añadieron 2 ml de ácido trifluoroacético a 0ºC. El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 2,5 h y después se diluyó con acetato de etilo y se concentró. El residuo se co-evaporó una vez en heptano, se disolvió en cloruro de metileno y el producto se precipitó con hexano, dando 10 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) \delta 7,29-7,45 (m, 7H), 7,06-7,28 (m, 4H), 5,17-5,36 (m, 1H), 4,04-4,31 (m, 4H), 4,19-4,38 (m, 1H), 3,72-3,87 (m, 2H), 2,25-2,44 (m, 3H), 1,80-2,12 (m, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 506 (MH+).
Ejemplo 42 Trifluoroacetato de 2-amino-N-[1-(R)-benciloximetil-2-(3-difenilacetilamino-pirrolidin-1-il)-2-oxo-etil)-isobutiramida A. Éster bencílico del ácido 3-difenilacetilamino-pirrolidin-1-carboxílico
A una mezcla de 2,40 g (7,19 mmol) de 30B, 1,10 g (9,02 mmol) de 4-dimetilaminopiridina, y 0,73 g (7,19 mmol) de trietilamina en 10 ml de cloruro de metileno se le añadieron 1,91 g (8,26 mmol) de cloruro de difenilacetilo y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con HCl al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 2,43 g de 42A en forma de un sólido blanco.
B. 2,2-Difenil-N-pirrolidin-3-il-acetamida
A 2,40 g (5,8 mmol) de 42A en 40 ml de etanol se le añadieron 1,20 g de paladioal 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó a 310,264 kPa (45 psi) durante 17 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y se concentró, dando 1,67 g de 42B en forma de un aceite amarillo.
C. Éster terc-butílico del ácido {1-[1-(R)-benciloximetil-2-(3-difenilacetilamino-pirrolidin-1-il)-2-oxo-etilcarbamoil)-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 150 mg (0,53 mmol) de 42B y 200 mg (0,53 mmol) de 3 y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 50% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 100 mg de 42C en forma de un sólido blanco.
D. Trifluoroacetato de 2-amino-N-[1-(R)-benciloximetil-2-(3-difenilacetilamino-pirrolidin-1-il)-2-oxo-etil]-isobutiramida
A 100 mg (0,16 mmol) de 42C se le añadieron 3 ml de ácido trifluoroacético a 0ºC. El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 3 h, se diluyó con acetato de etilo y se concentró. El residuo se co-evaporó una vez con heptano. Al residuo se le añadieron hexano y cloroformo y el producto precipitado se recogió por filtración. Se recuperaron 55 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (parcial) \delta 7,22-7,40 (m, 15H), 4,95-5,00 (m, 1H), 4,38-4,57 (m, 3H), 1,60 (s, 6H). EMISL-EM 543 (MH+).
Ejemplo 43 Trifluoroacetato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il}-benzamida A. 1,2-Bis-bromometil-4-nitro-benceno
A 8,00 g (53,0 mmol) de 4-nitro-o-xileno en 80 ml de tetracloruro de carbono se le añadieron 18,8 g (106 mmol) de N-bromosuccinimida seguido de 100 mg (0,60 mmol) de 2,2'-azo-bis(isobutironitrilo) y la mezcla se calentó a reflujo durante una noche. El sólido precipitado se retiró por filtración y se lavó sobre tetracloruro de carbono y el filtrado se concentró, dando 15,4 g de 43A en forma de un aceite amarillo. El producto bruto se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa.
B. 2-Bencil-5-nitro-2,3-dihidro-1H-isoindol
A una mezcla de 15,4 g (50,5 mmol) de 43A y 35,4 g (430 mmol) de carbonato sódico en 160 ml de acetona y 35 ml de agua se le añadieron 5,68 g (53 mmol) de bencilamina en 10 ml de acetona durante 3 h. Después, la mezcla se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se retiraron por filtración y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó tres veces con HCl 1 N. Los lavados de HCl combinados se neutralizaron con una solución de carbonato sódico y se extrajeron tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (15:85 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 2,55 g de 43B en forma de un sólido amarillo.
C. 5-Amino-2,3-dihidro-1H-isoindol
A 1,50 g (5,9 mmol) de 43B en 50 ml de etanol se le añadieron 1,25 g de paladio al 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó a 40ºC y 34,47 kPa (5 psi) durante 17 h. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 600 mg de 43C en forma de un sólido púrpura pálido.
D. Éster terc-butílico del ácido {1-[2-(5-amino-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 300 mg (2,2 mmol) de 43C y 850 mg (2,2 mmol) de 3, dando 950 mg de 43D en forma de un sólido amarillo. El producto bruto se usó sin purificación adicional.
E. Éster terc-butílico del ácido {1-[2-(5-benzoilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
A una mezcla de 300 mg (0,60 mmol) de 43D y 85 mg (0,69 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 5 ml de cloruro de metileno se le añadieron 98 mg (0,69 mmol) de cloruro de benzoílo y la mezcla se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con HCl al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (87:13 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 120 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
F. Trifluoroacetato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il}-benzamida
A 120 mg (0,20 mmol) de 43D se le añadieron 3 ml de ácido trifluoroacético a 0ºC. El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se concentró. El producto cristalizó después de la adición de hexano y cloroformo. La filtración del precipitado proporcionó 50 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) \delta 7,82-8,00 (d, 2H), 7,78-7,85 (m, 1H), 7,00-7,17 (m, 4H), 7,37-7,42 (m, 6H), 5,08-5,32 (m, 1H), 4,99-5,10 (m, 2H), 4,75-4,80 (d, 2H), 4,61 (s, 2H), 3,82-3,90 (m, 2H), 1,62 (s, 6H) EM (Cl, NH_{3}) 501 (MH+).
Ejemplo 44 (R)-2-Amino-N-{1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[4-(2-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster metílico del ácido (R)-3-(4-benciloxi-fenil)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiónico
A una mezcla de 2,00 g (5,38 mmol) de N-t-BOC-O-bencil-D-tirosina y 0,819 g (5,92 mmol) de carbonato potásico en 30 ml de DMF se le añadieron 0,802 g (5,65 mmol) de yodometano y la mezcla se agitó durante 17 h a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con 150 ml agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron cuatro veces con agua y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron 2,27 g de 44A en forma de un aceite amarillo.
B. Éster metílico del ácido (R)-2-amino-3-(4-benciloxi-fenil)-propiónico
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General B, se desprotegieron 2,27 g (5,4 mmol) de 44A, dando 1,00 g de 44B en forma de un aceite amarillo.
C. Éster metílico del ácido (R)-3-(4-benciloxifenil)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propiónico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 1,00 g (3,5 mmol) de 44B y 0,72 g (3,9 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (25:75 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 1,00 g de 44C en forma de un sólido blanco.
D. Ácido (R)-3-(4-benciloxi-fenil)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propiónico
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General D, se hidrolizó 1,00 g (2,2 mmol) de 44C, dando 1,00 g de 44D.
E. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 150 mg (0,34 mmol) de 44D y 75 mg (0,34 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos) a (5:95 v/v de metanol:acetato de etilo), dando 100 mg de 44E en forma de un sólido blanco.
F. (R)-2-Amino-N-{1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[4-(2-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 100 mg (0,15 mmol) de 44E, dando 60 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (rotámeros) \delta 7,26-7,52 (m, 6H), 6,91-7,22 (m, 7H), 5,04-5,18 (m, 2H), 4,96-5,01 (m, 1H), 4,60-4,81 (m, 1H), 4,36-4,60 (m, 1H), 3,95-4,14 (m, 1H), 2,94-3,10 (m, 2H), 2,45-2,80 (m, 2H), 2,08-2,40 (m, 1H), 1,69-1,92 (m, 2H), 1,55-1,68 (m, 1H), 1,28-1,40 (m, 8H). EM (Cl, NH_{3}) 556 (MH+).
Ejemplo 45 (R)-2-Amino-N-{3-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-3-oxo-1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-propil}-isobutiramida A. Éster bencílico del ácido (R)-3-terc-butoxicarbonilamino-4-oxo-4-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-butírico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 2,33 g (7,21 mmol) de N-\alpha-t-BOC-D-aspartic-b-bencil-éster y 1,49 g (6,86 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol del 2% al 4% en cloruro de metileno, proporcionando 2,56 g de 45A.
B. Éster bencílico del ácido (R)-3-amino-4-oxo-4-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-butírico
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General B, se desprotegieron 2,49 g (4,78 mmol) de 45A, dando 1,77 g de 45B.
C. Éster bencílico del ácido (R)-3-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-4-oxo-4-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-butírico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 1,60 g (3,8 mmol) de 45B y 0,77 g (3,8 mmol) de N-t-BOC-\alpha-metilalanina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol del 2% al 4% en cloruro de metileno, proporcionando 2,46 g de 45C.
D. Ácido (R)-3-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-4-oxo-4-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-butírico
A 2,44 g (4,0 mmol) de 45C en 40 ml de etanol se le añadieron 250 mg de paladio al 10% sobre carbono y la mezcla se hidrogenó a 344,737 kPa (50 psi) durante 2 h. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 2,00 g de 45D.
E. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{3-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-3-oxo-1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-propilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 80 mg (0,19 mmol) de 45D y 22 mg (0,20 mmol) de 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol del 2% al 4% en cloruro de metileno, proporcionando 52 mg de 45E.
F. (R)-2-Amino-N-{3-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-3-oxo-1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-propil}-isobutiramida
Siguiendo el procedimiento indicado en el Procedimiento General B, se desprotegieron 45 mg (0,07 mmol) de 45E, dando 22 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 7,54-7,62 (m, 0,5H), 7,20-7,32 (m, 0,5H), 7,10-7,21 (m, 4H), 7,01-7,19 (m, 3H), 5,33-5,49 (m, 1H), 3,67-3,92 (m, 2H), 2,58-3,01 (m, 5H), 1,74-1,89 (m, 2H), 1,39-1,42 (m, 8H). EM (Cl, NH_{3}) 533 (MH+).
Ejemplo 46 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-4-(pirrolidin-1-carbonil)-piperidin-1-il)-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-4-(pirrolidin-1-carbonil)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 71 mg (0,24 mmol) de clorhidrato de (4-fenil-piperidin-4-il)-pirrolidin-1-il-metanona y 94 mg (0,24 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando acetato de etilo al 100% para eluir, dando 142 mg de 46A.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-4-(pirrolidin-1-carbonil)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 133 mg (0,21 mmol) de 46A, dando 119 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) \delta 7,52-7,63 (m, 1H), 7,00-7,37 (m, 8H), 6,80-6,91 (m, 1H), 5,02-5,26 (m, 1H), 3,99-4,27 (m, 1H), 3,04-3,72 (m, 6H), 2,61-3,02 (m, 3H), 1,44-2,28 (m, 13H). EM (Cl, NH_{3}) 530 (MH+).
Ejemplo 47 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(1-fenil-1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. [4-(1H-indol-3-il)-4H-piridin-1-il]-fenil-metanona
A una solución de 23,4 g (0,20 mol) de indol en 250 ml de piridina se le añadieron 23,2 ml (0,20 mol) de cloruro de benzoílo con agitación mecánica y la mezcla se agitó durante 48 h. Después de la dilución con 100 ml de agua y la acidificación con HCl 6 N, la mezcla se extrajo dos veces con éter y el éter se lavó una vez con HCl 6 N. El secado sobre MgSO_{4} y la filtración a través de celite proporcionaron un aceite que se trituró con metanol, dando 18,4 g de 47A en forma de un sólido amarillo pálido.
B. 3-Piridin-4-il-1H-indol
Una mezcla de 12,0 g (0,04 mol) de 47A, 0,6 g de paladio al 10% sobre carbono, 8 ml de dibencilamina y 70 ml de difeniléter se calentó a 210ºC durante 7,5 h. Precipitaron agujas blancas de la tras la refrigeración y estas agujas se filtraron y se lavaron con éter. Los sólidos se suspendieron en 50 ml de HCl 1 N y se lavaron una vez con éter. La solución acuosa se filtró a través de celite y se concentró. Al residuo se le añadieron 10 ml de NaOH 5 N y el sólido resultante se filtró y se lavó con agua, proporcionando 4,02 g de 47B.
C. 1-Fenil-3-piridin-4-il-1H-indol
A una mezcla de 4,0 g (20,6 mmol) de 47B, 5,91 g (20,6 mmol) de bromuro de cobre y 2,84 g (20,6 mmol) de carbonato potásico en 40 ml de N-metilpirrolidina se le añadieron 9,1 ml (86,5 mmol) de bromobenceno y la mezcla se calentó a 190ºC durante 20 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y la torta de filtro se lavó con acetato de etilo. La solución se filtró de nuevo y se lavó con una solución 5 N de hidróxido amónico hasta que dejó de aparecer un color azul en la fase acuosa. La porción orgánica se lavó dos veces con agua y una vez con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 3,3 g de 47C en forma de un sólido pardo
claro.
D. Bromuro de 3-(1-bencil-piridin-4-il)-1-fenil-1H-indol
Una mezcla de 2,7 g (10,0 mmol) de 47C y 1,18 ml (10,0 mmol) de bromuro de bencilo en 50 ml de benceno se calentó en un baño de vapor durante 3 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, el sólido amarillo precipitado se retiró por filtración y se lavó con benceno, dando 3,03 g de 47D.
E. 3-(1-bencil-1,2,3,6-tetrahidro-piridin-4-il)-1-fenil-1H-indol
A 3,0 g (6,8 mmol) de 47D en 100 ml de metanol se le añadieron 18,5 g (490 mmol) de borohidruro sódico durante 40 min. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y después se calentó en un baño de vapor durante 1,5 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua y éter y se le añadió carbonato potásico hasta que la capa se hizo turbia. La mezcla se filtró y la fase de éter se secó sobre MgSO_{4} y carbonato potásico. La filtración y la concentración proporcionaron 2,13 g de 47E en forma de un aceite amarillo.
F. Clorhidrato de 1-fenil-3-piperidin-4-il-1H-indol
Una mezcla de 1,7 g (6,21 mmol) de 47E y 1,0 g de paladio al 10% sobre carbono en 200 ml de etanol se hidrogenó a 50ºC durante 5 h. Se añadieron 0,78 ml de HCl concentrado y la hidrogenación se continuó a 50ºC durante 17 h más. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 1,26 g de 47F en forma de un sólido castaño.
G. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(1-fenil-1H-indol-3-il)-piperidin-1-il)-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 70 mg (0,21 mmol) de 47F y 83 mg de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (65:35 v/v de acetato de etilo:hexano), dando 90 mg de 47G en forma de un sólido blanco.
H. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(1-fenil-1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A una solución de 90 mg (0,14 mmol) de 47G en 4 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en cloroformo/hexano, dando 72 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) \delta (parcial) 7,34-7,74 (m, 8H), 7,01-7,29 (m, 6H), 6,78 (s, 1H), 5,22-5,39 (m, 1H)_{t} 4,45-4,69 (m, 1H), 3,93-4,06 (m, 1H), 1,68 (s, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 548 (MH+).
Ejemplo 48 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. 3-(1,2,3,6-Tetrahidro-piridin-4-il)-1H-indol
Se trataron 50 ml de metanol con 3,45 g (150 mmol) de metal sódico con agitación hasta que el sodio se disolvió completamente. A la solución de metóxido se le añadieron 3,00 g (25,6 mmol) de indol y 10,23 g (66,6 mmol) de clorhidrato de 4-piperidona monohidrato. La mezcla se calentó a reflujo durante 16 h y después se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó una vez con agua. La fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron una vez con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron, dando 2,85 g de 48A en forma de un sólido amarillo.
B. 3-Piperidin-4-il-1H-indol
Una mezcla de 400 mg (2,0 mmol) de 48A en 100 ml de etanol se hidrogenó a 310,264 kPa (45 psi) durante 17 h. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 400 mg de 48B en forma de un sólido blanco.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 100 mg (0,50 mmol) de 48B y 195 mg (0,50 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 75% en hexano a acetato de etilo al 87,5% en hexano, dando 220 mg de 48C en forma de un sólido blanco.
D. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil)-isobutiramida
A 220 mg (0,39 mmol) de 48C en 3 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y después se concentró. Se añadieron metanol y una pequeña cantidad de cloruro de metileno y la mezcla se concentró, dando 200 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 8,32-8,45 (m, 1H), 7,53-7,69 (m, 1H), 7,30-7,43 (m, 3H), 6,94-7,29 (m, 6H), 5,23-5,37 (m, 1H), 4,46-4,63 (m, 1H), 3,90-4,04 (m, 1H), 1,62-1,68 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 471 (MH+).
Ejemplo 49 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(2-metil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 4-(2-metil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carboxílico
A 325 mg (3,00 mmol) de 2-metilbencimidazol en 12 ml de DMSO se le añadieron 100 mg (3,00 mmol) de hidruro sódico (dispersión al 60% en aceite) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se calentó a 70ºC durante 15 min y después se enfrió a temperatura ambiente. A la solución de imidazol se le añadió una solución de 520 mg (3,00 mmol) de éster terc-butílico del ácido 4-metanosulfoniloxi-piperidin-1-carboxílico (Yoon y col., documento WO9204342) en 3 ml de DMSO y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con una solución de bicarbonato sódico saturado y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (95:5 v/v de cloroformo:metanol), dando 89 mg de 49A en forma de un sólido blanco.
B. Trifluoroacetato de 2-metil-1-piperidin-4-il-1H-benzoimidazol
A 89 mg (0,28 mmol) de 49A a 0ºC se le añadieron 3 ml de ácido trifluoroacético y la mezcla se agitó durante 30 min. La dilución con acetato de etilo y la concentración proporcionaron 92 mg de 49B en forma de un jarabe amarillo.
C. Ester terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(2-metil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 90 mg (0,42 mmol) de 49B y 163 mg (0,42 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos) seguido de (95:5 v/v de CH_{2}Cl_{2}:MeOH), dando 126 mg de 49C en forma de un sólido blanco.
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(2-metil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
A 126 mg (0,21 mmol) de 49C en 6 ml de etanol se le añadieron 6 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 80 min. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió de nuevo en una pequeña cantidad de metanol. Se añadió acetato de etilo hasta que el producto precipitó de la solución y el material precipitado se recogió por filtración, dando 85 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 7,53-7,81 (m, 4H), 7,19-7,40 (m, 2H), 7,00-7,19 (m, 3H), 2,91 (s, 1,5H), 2,81 (s, 1,5H), 1,59-1,68 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 487 (MH+).
Ejemplo 50 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. (1-Bencil-piperidin-4-il)-(2-nitro-fenil)-amina
Una mezcla de 22,0 g (116 mmol) de 4-amino-1-bencilpiperidina, 16,31 g (116 mmol) de 1-fluoro-2-nitrobenceno, 19,17 g (116 mmol) de yoduro potásico y 16,00 g (116 mmol) de carbonato potásico en 200 ml de DMSO se calentó a 150ºC durante 16 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó cuatro veces con agua y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron el producto bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (30:70 v/v de acetato de etilo:hexanos) y se cristalizó en acetato de etilo al 10% en hexano, dando 27,0 g de 50A en forma de cristales amarillos.
B.N-(1-Bencil-piperidin-4-il)-benceno-1,2-diamina
Una mezcla de 10,0 g (32,2 mmol) de 50A y 1,00 g de paladio al 10% sobre carbono en 50 ml de etanol se hidrogenó a 344,737 kPa (50 psi) durante 3 h. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 9,00 g de 50B en forma de un sólido oscuro.
C. 1-(1-Bencil-piperidin-4-il)-2-fenil-1H-benzoimidazol
Una mezcla de 1,00 g (3,56 mmol) de 50B y 1,89 g (17,8 mmol) de benzaldehído en 4 ml de nitrobenceno se calentó a 110ºC durante 16 h. La mezcla se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (30:70 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 550 mg de 50C en forma de una espuma amarilla.
D. 2-Fenil-1-piperidin-4-il-1H-benzoimidazol
A 540 mg (1,47 mmol) de 50C en 2 ml de cloruro de metileno a -10ºC se le añadieron 294 mg (2,06 mmol) de cloroformiato de \alpha-cloroetilo y la mezcla se agitó durante 20 min y después se concentró. El residuo se disolvió en 4 ml metanol y se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró, dando 400 mg de 50D.
E. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 70 mg (0,25 mmol) de 50D y 98 mg (0,25 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 50% en hexano a acetato de etilo al 100%. Se obtuvieron 30 mg de 50E en forma de un sólido blanco.
F. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 30 mg (0,046 mmol) de 50E en 2 ml de etanol se le añadieron lentamente 2 ml de HCl concentrado con agitación. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 75 min y después se concentró. La cristalización en acetato de etilo/hexano proporcionó 22 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 8,29 (d, 0,5H), 7,63-7,80 (m, 8,5H), 7,26-7,54 (m, 2,5H), 6,98-7,18 (m, 2,5H), 5,29-5,40 (m, 0,5H), 5,00-5,10 (m, 0,5H), 4,48-4,78 (m, 2H), 2,36-2,61 (m, 2H), 1,56-1,72 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 549 (MH+).
Ejemplo 51 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-[4-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida A. Ácido 1-acetil-piperidin-4-carboxílico
Una mezcla de 129,2 g (1,00 mmol) de ácido isonipecótico y 400 ml de anhídrido acético se calentó a reflujo durante 2,5 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agitó durante 17 h. Los sólidos precipitados se filtraron, se lavaron con éter dietílico y se secaron al vacío, dando 150,1 g de 51A en forma de un sólido blanco.
B. Cloruro de 1-acetil-piperidin-4-carbonilo
A 250 ml de cloruro de tionilo se le añadieron 50,0 g (292 mmol) de 51A con agitación mecánica. La mezcla se agitó durante 1 h y después se añadieron 200 ml de éter de petróleo. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con éter de petróleo frío. Los sólidos se secaron al vacío, dando 53,97 g de 51B.
C. 1-[4-(2,4-Difluoro-benzoil)-piperidin-1-il]-etanona
A una suspensión de 75,0 g (562 mmol) de cloruro de aluminio en 95 ml de m-difluorobenceno se le añadió 51B durante 10 min. La mezcla se calentó a reflujo durante 3 h en una atmósfera de nitrógeno y después de la refrigeración a temperatura ambiente la mezcla se vertió lentamente en hielo. El producto se extrajo con cloruro de metileno y los extractos orgánicos combinados se lavaron dos veces con agua y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} proporcionó 63,21 g de 51C en forma de un sólido amarillo.
D. Clorhidrato de (2,4-difluoro-fenil)-piperidin-4-il-metanona
Una mezcla de 10,0 g (37,4 mmol) de 51C en 40 ml de HCl concentrado y ácido acético glacial se calentó a reflujo durante 7 h. A la mezcla de reacción se le añadieron 20 ml más de HCl concentrado y el calentamiento a reflujo se continuó durante 6 h más. La mezcla se concentró y el residuo se trituró con 2-propanol, dando 8,0 g de 51D en forma de un sólido blanco.
E. Oxima de (2,4-difluoro-fenil)-piperidin-4-il-metanona
Una mezcla de 10,0 g (38,21 mmol) de 51D, 2,66 g (38,2 mmol) de clorhidrato de hidroxilamina y 4,6 ml (33,0 mmol) de trietilamina en 150 ml de etanol se agitó a temperatura ambiente durante 30 min y después se calentó a reflujo durante 2,5 h. Durante el calentamiento a reflujo, el producto comenzó a precipitar de la solución. Después de enfriar a temperatura ambiente, la filtración proporcionó 6,7 g de 51E.
F. 6-Fluoro-3-piperidin-4-il-benzo[b])isoxazol
Una mezcla de 10,0 g (41,62 mmol) de 51E y 250 ml de NaOH al 50% se calentó a reflujo durante 5 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con tolueno y se lavó una vez con agua y salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, proporcionando un residuo que se trituró con acetato de etilo y éter de petróleo, dando 0,56 g de 51F en forma de un sólido.
G. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-[4-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 11 mg (0,045 mmol) de 51F y 18 mg (0,045 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (95:5 v/v de CH_{2}Cl_{2}:MeOH), dando 16 mg de 51G en forma de un sólido blanco.
H. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-[4-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida
A 16 mg (0,027 mmol) de 51G en 2 ml de etanol a temperatura ambiente se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en acetato de etilo/hexanos, dando 11 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 8,21-8,29 (m, 1H), 7,51-7,63 (m, 2H), 7,26-7,34 (m, 2H), 6,90-7,21 (m, 5H), 5,07-5,24 (m, 1H), 4,43-4,49 (m, 1H), 3,79-3,92 (m, 1H), 2,58-2,74 (m, 2H), 1,44-1,53 (d, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 492 (MH+).
Ejemplo 52 Clorhidrato de mono-terc-butil-éster del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil-4-fenil-piperidin-4-carboxílico A. Mono-terc-butil-éster del ácido 4-fenil-piperidin-1,4-dicarboxílico
A una suspensión de 42,84 g (114 mmol) de 4-metilbencenosulfonato del ácido 4-fenil-4-piperidin-carboxílico en 250 ml de dioxano y 50 ml de agua se le añadieron 200 ml de NaOH 1 N y la mezcla se agitó hasta que se hizo homogénea. A la mezcla en agitación se le añadieron 27,3 g (125 mmol) de dicarbonato de di-terc-butilo durante 15 min. Se le añadieron 200 ml más de NaOH 1 N y la mezcla se agitó hasta que se mantuvo un pH de 10-11. La agitación se continuó durante 17 h más a temperatura ambiente y después la solución se diluyó con 350 ml de agua y se extrajo tres veces con éter dietílico. La fase acuosa se acidificó a pH 4-5 con ácido acético glacial y después se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron tres veces con agua y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron un aceite transparente que se trituró con éter dietílico, dando 32,3 g de 52A en forma de un sólido blanco.
B. Éster terc-butílico del ácido 4-fenil-piperidin-1,4-dicarboxílico
A 14,39 g (47 mmol) de 52A en 200 ml de DMF se le añadieron 7,2 g (52
mmol) de carbonato potásico seguido de 8,22 g (48 mmol) de bromuro de bencilo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 17 h en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se diluyó con 600 ml de acetato de etilo y se lavó cinco veces con agua y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron 15,95 g de 52B en forma de un aceite transparente que cristalizó tras el reposo.
C. Trifluoroacetato de éster bencílico del ácido 4-fenil-piperidin-4-carboxílico
A 4,5 g (11,4 mmol) de 52B a 0ºC se le añadieron 50 ml de ácido trifluoroacético frío y la mezcla se agitó durante 1,5 h. La mezcla se concentró, dando 5,10 g de 52C.
D. Éster bencílico del ácido (R)-1-[2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 1,09 g (2,8 mmol) de 4C y 885 mg (3,0 mmol) de 52C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol del 0% al 3% en cloruro de metileno. Se aislaron 1,04 g de 52D en forma de un sólido rosa claro.
E. Ácido (R)-1-(2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico
Una mezcla de 1,0 g (1,5 mmol) de 52D y 200 mg de hidróxido de paladio al 20% sobre carbono en 30 ml de metanol se hidrogenó durante 17 h a 344,737 kPa (50 psi). La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 772 mg de 52E en forma de un sólido naranja.
F. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-[4-(4-hidroxi-butilcarbamoil)-4-fenil-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil)-carbámico
A una mezcla de 66 mg (0,114 mmol) de 52E 9,4 mg (0,105 mmol) de 4-amino-1-butanol y 27 mg (0,210 mmol) de diisopropiletilamina en 1,5 ml de cloruro de metileno se le añadieron 56 mg (0,126 mmol) de hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio (BOP) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La concentración proporcionó un residuo que se disolvió en acetato de etilo y se lavó dos veces con NaOH 1 N y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron el producto bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol del 0% al 5% en cloruro de metileno. Se aislaron 50 mg de 52F en forma de un sólido blanco.
G. Clorhidrato de (4-hidroxi-butil)-amida del ácido (R)-1-[2-[2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil}-4-fenil-piperidin-4-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 44 mg (0,068 mmol) de 52F, dando 30 mg del compuesto del título en forma de un sólido rosa claro.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,52-7,61 (m, 1H), 7,08-7,49 (m, 4H), 7,09-7,20 (m, 2H), 6,97-7,08 (m, 3H), 5,19-5,24 (m, 1H), 3,39-3,51 (m, 3H), 2,90-3,27 (m, 5H), 1,50-1,61 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 548 (MH+).
Ejemplo 53 Clorhidrato de amida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(4-carbamoil-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
A una mezcla de 255 mg (0,44 mmol) de 52E, 118 mg (2,21 mmol) de cloruro amónico y 400 mg (3,09 mmol) de diisopropiletilamina en 4 ml de cloruro de metileno se le añadieron 235 mg (0,53 mmol) de BOP y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La porción orgánica se lavó dos veces con NaOH 1 N y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron un producto bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 50% en hexano a acetato de etilo al 100%. Se aislaron 128 mg de 53A en forma de un sólido blanco.
B. Clorhidrato de amida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 118 mg (0,20 mmol) de 53A, dando 90 mg del compuesto del título en forma de un sólido rosa.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,52-7,63 (m, 1H), 7,19-7,47 (m, 4H), 6,98-7,17 (m, 5H), 5,13-5,25 (m, 1H), 3,82-4,21 (m, 1H), 3,98-3,27 (m, 3H), 1,50-1,65 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 476 (MH+).
Ejemplo 54 Clorhidrato de (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(4-etilcarbamoil-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
A una mezcla de 255 mg (0,44 mmol) de 52E, 180 mg (2,21 mmol) de clorhidrato de etilamina y 400 mg (3,09 mmol) de diisopropiletilamina en 4 ml de cloruro de metileno se le añadieron 235 mg (0,53 mmol) de BOP y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó dos veces con NaOH 1 N y una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron un producto bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 167 mg de 54A en forma de una espuma blanca.
B. Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 167 mg (0,28 mmol) de 54A, dando 132 mg del compuesto del título en forma de un sólido rosa.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,50-7,65 (m, 1H), 6,95-7,32 (m, 9H), 5,07-5,22 (m, 1H), 4,11-4,22 (m, 1H), 3,56-3,67 (m, 1H), 2,88-3,30 (m, 5H), 2,61-2,79 (m, 1H), 1,52-1,61 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 504 (MH+).
Ejemplo 55 Trifluoroacetato de {1-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etil}-amida del ácido (R)-1-amino-ciclopropanocarboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-ciclopropil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 20 mg (0,05 mmol) de 1B y 20 mg (0,10 mmol) de ácido 1-terc-butoxicarbonilamino-ciclopropanocarboxílico (Kienzler y col., Helv. Chim. Acta (1992), 75 (4) págs. 1078-84) y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 45% en hexano a acetato de etilo al 100% a metanol al 2% en acetato de etilo, dando 10 mg de 55A.
B. Trifluoroacetato de 2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-1-amino-ciclopropanocarboxílico
A 10 mg (0,017 mmol) de 55A a 0ºC se le añadieron 2 ml de ácido trifluoroacético frío y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla se concentró y después se diluyó con heptano y se concentró de nuevo. El producto se cristalizó en cloruro de metileno/hexano, dando 7 mg de 55B en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) \delta 7,19-7,40 (m, 5H), 6,89-7,12 (m, 4H), 5,16-5,24 (m, 1H), 4,45-4,78 (m, 4H), 4,17-4,30 (d, 1H), 3,64-3,81 (m, 2H), 3,15-3,30 (m, 1H), 2,72-2,99 (m, 1H), 2,50-2,67 (m, 0,5H), 2,37-2,45 (m, 1,5H), 1,74-1,89 (m, 2H), 1,50-1,74 (m, 2H), 1,26-1,45 (m, 2H). EM (Cl, NH_{3}) 478 (MH+).
Ejemplo 56 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,2-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. (1-Bencil-piperidin-4-il)-(3-nitro-piridin-2-il)-amina
Una mezcla de 1,66 g (10,5 mmol) de 2-cloro-3-nitropiridina, 2,00 g (10,5 mmol) de 4-amino-1-bencilpiperidina, 1,74 g (10,5 mmol) de yoduro potásico y 1,44 g (10,5 mmol) de carbonato potásico en 10 ml de DMSO se calentó a 100ºC durante 17 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con una solución saturada de bicarbonato sódico y salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron 1,25 g de 56A.
B.N2-(1-Bencil-piperidin-4-il)-piridin-2,3-diamina
Una mezcla de 1,25 g (4,16 mmol) de 56A y 200 mg de paladio al 10% sobre carbono en 150 ml de etanol y 50 ml de acetato de etilo se hidrogenó a 344,737 kPa (50 psi) durante 3 h. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 1,07 g de 56B.
C. 3-(1-Bencil-piperidin-4-il)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-2-ona
Una mezcla de 1,07 g (3,74 mmol) de 56B, 2,43 g (15,0 mmol) de N,N'-carbonildiimidazol y 760 mg (7,52 mmol) de trietilamina en 10 ml de éter dimetílico de etilenglicol se calentó a 80ºC durante 17 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con una soluciónsaturada de bicarbonato sódico y salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron un producto bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 75% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 270 mg de 56C.
D. 3-Piperidin-4-il-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-2-ona
A una solución de 270 mg (6,88 mmol) de 56C en 1 ml de 1,2-dicloroetano a 0ºC se le añadieron 286 mg (2,0 mmol) de cloroformiato de \alpha-cloroetilo. El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en 10 ml de metanol y se calentó a 60ºC durante 3 h. La mezcla se diluyó con NaOH 2 N y salmuera y se extrajo cinco veces con cloroformo. Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 70 mg de 56D.
E. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,2-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 70 mg (0,32 mmol) de 56D y 125 mg (0,32 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 70% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 100 mg de 56E.
F. Clorhidrato de (R)-2-Amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,2-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 100 mg (0,28 mmol) de 56E en 3 ml de etanol a 0ºC se le añadieron 1,5 ml de HCl concentrado, el baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 2 h. La mezcla se concentró varias veces en etanol. El residuo se diluyó con acetato de etilo/hexanos y el sólido precipitado se recogió por filtración, dando 52 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,97-8,06 (m, 1H), 7,53-7,69 (m, 2H), 7,25-7,38 (m, 2H), 7,09-7,21 (m, 3H), 5,22-5,33 (m, 1H), 4,49-4,74 (m, 2H), 1,48-1,64 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 490 (MH+).
Ejemplo 57 (R)-2-Amino-N-[2-[4-(5-cloro-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida A.n-Bencil-piperidin-4-il)-(4-cloro-2-nitro-fenil)-amina
Una mezcla de 10,0 g (53,0 mmol) de 4-amino-1-bencilpiperidina, 10,0 g (53,0 mmol) de 2,5-dicloronitrobenceno, 8,80 g (53,0 mmol) de yoduro potásico y 7,30 g (53 mmol) de carbonato potásico en 60 ml de DMSO se calentó a 140ºC durante 48 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó cinco veces con agua y una vez con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El residuo se trituró con acetato de etilo al 30% en hexano, dando 8,3 g de 57A en forma de un sólido rojo.
B.N1-(1-Bencil-piperidin-4-il)-4-cloro-benceno-1,2-diamina
Una mezcla de 8,30 g (26,28 mmol) de 57A se hidrogenó durante 3 h a 310,264 kPa (45 psi). La mezcla se filtró a través de celite y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 100% a dietilamina al 10% en acetato de etilo, dando 6,41 g del compuesto del título.
C. 1-(1-Bencil-piperidin-4-il)-5-cloro-1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona
Una mezcla de 1,00 g (3,50 mmol) de 57B, 2,84 g (17,5 mmol) de N,N'-carbonildiimidazol y 764 mg (7,0 mmol) de trietilamina en 3 ml de éter dimetílico de etilenglicol se calentó a 92ºC durante 5 h. La mezcla se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 680 mg de 57C en forma de un sólido rosa.
D. 5-Cloro-1-piperidin-4-il-1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona
A una solución de 680 mg (2,18 mmol) de 57C en 3 ml de cloruro de metileno a -10ºC se le añadieron 468 mg (3,27 mmol) de cloroformiato de \alpha-cloroetilo y la mezcla se agitó durante 40 min. La concentración proporcionó un residuo disuelto que estaba en 10 ml de metanol y se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró y al residuo se le añadieron 50 ml de cloroformo seguido de una solución de 90 mg de hidróxido sódico en 10 ml de agua. La mezcla se agitó durante 15 min. Las fases se separaron y la porción orgánica se lavó una vez con salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y las concentraciones proporcionaron 510 mg de 57D en forma de un sólido rosa.
E. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-[4-(5-cloro-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 40 mg (0,16 mmol) de 57D y 62 mg (0,16 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 50% en hexano seguido de metanol al 5% en cloruro de metileno, dando 31 mg de 57E en forma de un sólido blanco.
F. (R)-2-amino-N-[2-[4-(5-cloro-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida
A una mezcla de 31 mg (0,05 mmol) de 57E en 3 ml de etanol se le añadieron 3 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 80 min. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en acetato de etilo/hexano, dando 26 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,19-8,30 (m, 1H), 7,42-7,64 (m, 1H), 6,94-7,37 (m, 8H), 5,05-5,30 (m, 1H), 4,12-4,54 (m, 3H), 2,37-2,61 (m, 2H), 1,48-1,64 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 523, 525 (MH+).
Ejemplo 58 (R)-2-Amino-N-{1-benciloximetil-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-benciloximetil-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
A una mezcla de 42 mg (0,846 mmol) de 6C y 10,3 mg (0,102 mmol) de trietilamina en 5 ml de cloruro de metileno a 0ºC se le añadieron 18 mg (0,93 mmol) de cloruro de toluenosulfonilo y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó una vez con NaOH 1 N y salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (60:40 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 19 mg de 58A en forma de una espuma.
B. (R)-2-Amino-N-(1-benciloximetil-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 19 mg (0,029 mmol) de 58A, dando 12 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 7,46-7,67 (m, 2H), 6,79-7,29 (m, 11H), 5,06-5,21 (m, 1H), 2,29-2,32 (d. 3H), 1,48-1,60 (s a, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 565 (MH+).
Ejemplo 59 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-benzo[b]tiofen-3-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-3-benzo[b]tiofen-3-il-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propilamino)-propiónico
Una mezcla de 193 mg (0,64 mmol) de trifluoroacetato de D-3-(3-benzotienil)alanina, 180 mg (0,53 mmol) de 33A y 219 mg (1,70 mmol) de diisopropiletilamina en 10 ml de DMF se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se acidificó con HCl 1 N y se diluyó con acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron cinco veces con agua, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con cloroformo al 100%, seguido de metanol al 5% en cloroformo, seguido de (9:1:0,1 v/v/v de cloroformo:metanol:ácido acético), dando 110 mg de 59A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{benzo[b]tiofen-3-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 58 mg (0,27 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y 105 mg (0,27 mmol) de 59A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de hexano al 20% en acetato de etilo a acetato de etilo al 100%. Se aislaron 95 mg de 59B en forma de una espuma.
C. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-benzo[b]tiofen-3-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 85 mg (0,14 mmol) de 59B, dando 55 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 7,83-7,99 (m, 2H), 7,30-7,48 (m. 3H), 7,20-7,28 (m, 0,5H)* 7,51-7,26 (m, 3H), 6,86-6,92 (m, 0,5H), 5,29-5,45 (m, 1H), 4,57-4,71 (m, 1H), 4,29-4,44 (m, 1H), 3,96-4;09 (m, 1H), 2,20-2,83 (m, 3H), 1,55-1,64 (d, 3H), 1,44-1,51 (d, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 506 (MH+).
Ejemplo 60 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoqui-nolin-2-il]-etil}-isobutiramida A. 1,2,3,4-Tetrahidro-isoquinolin-7-ilamina
Una mezcla de 500 mg (2,8 mmol) de 6A y 500 mg de paladio al 10% sobre carbono se hidrogenó a 310,264 kPa (45 psi) durante una noche. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró, dando 350 mg de 60A en forma de un sólido blanco.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(7-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 300 mg (0,68 mmol) de 44D y 100 mg (0,68 mmol) de 60A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 230 mg de 60B en forma de un sólido blanco.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
Una mezcla de 220 mg (0,39 mmol) de 60B, 85 mg (0,44 mmol) de cloruro de p-toluenosulfonilo y 55 mg (0,44 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 5 ml de cloruro de metileno se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con cloroformo y se lavó dos veces con una solución al 10% de HCl, una solución saturada de bicarbonato sódico y salmuera. El secado sobre MgSO_{4} y la concentración proporcionaron un producto bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 200 mg de 60C.
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-[4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida
A una solución de 150 mg (0,21 mmol) de 60C en 3 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en cloruro de metileno/hexano, dando 112 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 7,64 (d, 2H), 7,17-7,39 (m, 7H), 7,04-7,10 (m, 1H), 6,79-6,92 (m, 5H), 4,90-5,12 (m, 2H), 4,29-4,57 (m, 1,5H), 4,11-4,20 (m, 0,5H), 2,82-2,97 (m, 2H), 2,34 (d, 3H), 1,46-1,52 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 641 (MH+).
Ejemplo 61 Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(7-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida A. Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(7-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 29 mg (0,056 mmol) de 36B, dando 14 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla 1:1 de rotámeros) (parcial) \delta 7,51-7,60 (m, 1H), 7,24-7,31 (d, 0,5H), 6,91-7,18 (m, 6,5H), 5,14-5,33 (m, 1H), 4,42-4,68 (m, 1,5H), 4,12-4,23 (m, 0,5H), 2,53-2,75 (m, 1H), 2,35-2,51 (m, 0,5H), 2,08-2,22 (m, 0,5H), 1,52-1,63 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 420 (MH+).
Ejemplo 62 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il]-piperidin-1-carbonil]-4-fenil-butil}-isobutiramida A. Ácido 2-oxo-5,6-difenil-3-(3-fenil-alil)-morfolin-4-carboxílico
A una solución a -78ºC de 13,8 g (70,0 mmol) de bromuro de cinnamilo y 4,94 g (14,0 mmol) de carboxilato de t-butil-(2S,3R)-(+)-6-oxo-2,3-difenil-4-morfolina en 350 ml de THF anhidro se le añadieron 28 ml (28 mmol) de bis-trimetilsililamida sódica 1 M en THF. La mezcla se agitó a -78ºC durante 1,5 h y después se vertió en 750 ml de acetato de etilo. La mezcla se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando un aceite amarillo. El aceite se agitó en 150 ml de hexano durante una noche y después el sólido precipitado se recogió por filtración, dando 3,2 g de 62A en forma de un sólido blanco.
B. 5,6-Difenil-3-(3-fenil-alil)-morfolin-2-ona
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 2,97 g (6,33 mmol) de 62A, dando un aceite naranja que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (10:90 v/v de acetato de etilo:hexano), dando 880 mg de 62B en forma de un sólido blanco.
C. Ácido 2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-5-fenil-pentanoico
Una mezcla de 440 mg (1,19 mmol) de 62B y 120 mg de cloruro de paladio en 20 ml de etanol y 10 ml de THF se hidrogenó a 310,264 kPa (45 psi) durante 16 h. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró y el residuo se trituró con éter, dando 240 mg de 62C en forma de un sólido blanco.
D. Ácido (R)-2-(2-terc-buboxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-5-fenil-pentanoico
Una mezcla de 203 mg (1,05 mmol) de 33A, 378 mg (1,26 mmol) de 62C y 434 mg (3,36 mmol) de diisopropiletilamina en 2 ml de DMF se agitó durante una noche. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se extrajo dos veces con HCl 1 N. La fase acuosa se extrajo una vez con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron tres veces con agua y una vez con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando cloroformo al 80% en hexano seguido de cloroformo al 100% seguido de metanol al 10% en cloroformo, dando 127 mg de 62D.
E. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-metil-1-{1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-4-fenil-butilcarbamoil}-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 45 mg (0,12 mmol) de 62D y 26 mg (0,12 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de cloruro de metileno al 100% a metanol al 3% en cloruro de metileno, dando 39 mg de 62E en forma de una espuma amarilla.
F. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-4-fenil-butil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 36 mg (0,062 mmol) de 62E, dando 28 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,03-7,36 (m, 9H), 4,62-4,73 (m, 1H), 4,43-4,59 (m, 1H), 3,97-4,19 (m, 1H), 2,52-2,87 (m, 3H), 1,60 (S.6H). EM (Cl, NH_{3}) 578 (MH+).
Ejemplo 63 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(1-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Ácido 2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(1-metil-1H-indol-3-il)-propiónico
Una mezcla de 1,00 g (4,58 mmol) de 1-metil-dl-triptofano, 1,65 g (5,5 mmol) de 33A y 1,30 g (10,0 mmol) de diisopropiletilamina en 2 ml de DMF se calentó durante una noche a 50ºC. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó una vez con HCl al 10% y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró y el producto se purificó usando un gradiente de metanol del 2% al 5% en cloruro de metileno, dando 173 mg de 63A.
B. Éster terc-butílico del ácido (1-metil-1-{1-(1-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il]-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 173 mg (0,42 mmol) de 63A y 131 mg (0,42 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice en acetato de etilo al 100%, dando 210 mg de 63B.
C. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(1-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 209 mg (0,35 mmol) de 63B, dando 166 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) (mezcla 1:1 de diastereómeros) \delta 7,67 (d, 0,5H), 7,55 (d, 0,5H), 7,31-7,39 (m, 1H), 6,99-7,26 (m, 6,5H), 6,74 (d, 0,5H), 5,12-5,33 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 1,49-1,63 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 503 (MH+).
Ejemplo 64 Trifluoroacetato de (R)-2-amino-N-{1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Ácido (R)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-naftalen-1-il-propiónico
Una mezcla de 500 mg (1,52 mmol) de D-3-(1-naftil)alanina, 547 mg (1,82 mmol) de 33A y 0,80 ml (4,56 mmol) de diisopropilamina en 5 ml de DMF se calentó a 50ºC durante una noche. La mezcla se concentró y el residuo se diluyó con cloruro de metileno. La porción orgánica se lavó una vez con agua, dos veces con HCl 1 N y una vez con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0,1:5:95 v/v/v ácido acético:metanol:cloruro de metileno), dando 484 mg de 64A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-metil-1-{1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 100 mg (0,25 mmol) de 64A y 50 mg (0,23 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de cloruro de metileno al 100% a metanol al 4% en cloruro de metileno, dando 97 mg de 64B.
C. Trifluoroacetato de (R)-2-amino-N-{1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etil}-isobutiramida
A 91 mg (0,15 mmol) de 64B a 0ºC se le añadieron 2 ml de TFA frío y la mezcla se agitó a 0ºC durante 2 h. La mezcla se concentró y después se co-evaporó dos veces en cloruro de metileno y tolueno, dando 99 mg del compuesto del título en forma de un polvo blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,22 (d, 0,5H), 8,17 (d, 0,5 H), 7,79-7,94 (m, 2H), 7,39-7,67 (m, 4H), 7,01-7,26 (m, 3,5H), 6,75 (d, 0,5H), 5,42-5,51 (m, 1H), 5,29-5,40 (m, 1H), 4,54-4,67 (m, 1H), 4,19-4,37 (m, 2H), 3,51-3,82 (m, 3H), 2,29-2,72 (m, 3H), 1,49-1,68 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 500 (MH+).
Ejemplo 65 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(morfolin-4-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(morfolin-4-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A, se acoplaron 121 mg (0,22 mmol) de 26A y 19 mg (0,33 mmol) de morfolina, dando 140 mg de 65A en forma de un aceite amarillo.
B. Clorhidrato de (R)-2-Amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(morfolin-4-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida
A 86 mg (0,14 mmol) de 65A en 6 ml de etanol se le añadieron 2,0 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó durante 1,5 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró, dando 68 mg del compuesto del título en forma de un sólido castaño.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,51-7,61 (m, 1H), 6,92-7,30 (m, 6,5H), 6,58 (d, 0,5H), 5,14-5,39 (m, 1H), 4,56-4,66 (d, 0,5H), 4,41-4,50 (d, 1H), 4,09-4,18 (d, 0,5H).
Ejemplo 66 Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. 1-Piperidin-4-il-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]piridin-2-ona
Se preparó 66A mediante la misma vía ilustrada en el Ejemplo 56 usando 4-cloro-3-nitro-piridina y 4-amino-1-bencilpiperidina como materiales de partida. La 4-cloro-3-nitro-piridina se preparó añadiendo 3,00 g (23,8 mmol) de 4-hidroxi-3-nitropiridina a 10 ml de oxicloruro de fósforo y calentando la mezcla a 130ºC durante 3 h. La mezcla se vertió en agua enfriada con hielo, se neutralizó con NaOH 2 N y se dejó en reposo durante 1 h. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera. La solución se secó y se concentró, dando 2,92 g de 4-cloro-3-nitro-piridina.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 90 mg (0,29 mmol) de 66A y 113 mg (0,29 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol al 1% en cloruro de metileno a metanol al 5% en cloruro de metileno seguido de metanol al 5% más ácido acético al 1% en cloruro de metileno, dando 80 mg de 66B.
C. Diclorhidrato de éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-midazo[4,5-c]piridin-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
A 80 mg (0,14 mmol) de 66B en 3 ml de etanol se le añadieron 3 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se concentró y después se co-evaporó tres veces con etanol. El residuo se cristalizó en acetato de etilo/hexano, dando 60 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,41-8,57 (m, 2H), 7,87 (d, 0,5H), 7,58 (d, 0,5H), 7,21-7,39 (m. 2H), 7,07-7,13 (m, 3H), 5,24-5,34 (m, 0,5H), 5,12-5,20 (m, 1H), 4,60-4,71 (m, 1H), 1,52-1,67 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 491 (MH+).
Ejemplo 67 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-bifenil-4-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Trifluoroacetato del ácido (R)-2-amino-3-bifenil-4-il-propiónico
A 1,50 g (4,4 mmol) de BOC-D-4-4'-fenilalanina a 0ºC se le añadieron 25 ml de TFA frío y la mezcla se agitó durante 2 h. La mezcla se concentró y después al residuo se le añadió heptano y la mezcla se concentró de nuevo y se secó al vacío, dando 1,59 g de 67A en forma de un sólido rojo pálido.
B. Ácido (R)-3-bifenil-4-il-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propiónico
Una mezcla de 1,59 g (4,4 mmol) de 67A, 1,59 g (5,3 mmol) de 33A y 1,82 g (14,1 mmol) de diisopropiletilamina en 50 ml de DMF se agitó a 0ºC durante 6 días. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con HCl al 10%, una vez con agua y dos veces con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 100% a metanol al 10% en acetato de etilo, dando 900 mg de 67B.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-bifenil-4-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 250 mg (0,59 mmol) de 67B y 127 mg (0,059 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina, dando 270 mg de 67C en forma de un sólido blanco que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(1-bifenil-4-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 270 mg (0,43 mmol) de 67C en 3 ml de etanol se le añadieron 3 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla se concentró a sequedad y el residuo se trituró con hexano/etanol, dando 200 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,52-7,70 (m, 4H), 7,28-7,51 (m, 6H), 6,91-7,11 (m, 3H), 5,25-5,33 (m, 1H), 4,67-4,80 (m, 1H), 4,43-4,58 (m, 1H), 4,16-4,27 (m, 1H), 1,53-1,66 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 527 (MH+).
Ejemplo 68 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-[7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[2-(1H-indol-3-il)-1-(7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
La preparación de amida del ácido 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfónico se describe por Pendleton y col., J. Pharmacol. Exp. Ther., 208 (1979) pág. 24. De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 83 mg (0,39 mmol) de amida del ácido 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfónico y 150 mg (0,39 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (19:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 206 mg de 68A.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-etil]-isobutiramida
A 144 mg (0,25 mmol) de 68A en 12 ml de etanol se le añadieron 4 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla de reacción se concentró, dando 118 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,48-7,53 (m, 2H), 7,21-7,30 (m, 1H), 6,92-7,13 (m, 4H), 5,11-5,25 (m, 1H), 4,41-4,62 (m, 2H), 4,11-4,22 (d, 0,5H), 3,75-3,86 (m, 1H), 3,50-3,63 (m, 1H), 2,53-2,72 (m, 1H), 2,26-2,42 (m, 0,5H), 2,06-2,19 (m, 0,5H), 1,57 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 519(MH+).
Ejemplo 69 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Ácido 2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(6-fluoro-1H-indol-3-il)-propiónico
Una mezcla de 150 mg (0,50 mmol) de 33A, 100 mg (0,45 mmol) de 6-fluorotriptofano y 128 mg (1,0 mmol) de diisopropiletilamina se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se acidificó a pH 1 con HCl 1 N, se diluyó con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron cuatro veces con agua y una vez con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 154 mg de 69A.
B. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 79 mg (0,194 mmol) de 69A y 42 mg (0,194 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de metanol al 1% en cloruro de metileno a metanol al 3% en cloruro de metileno, dando 84 mg de 69B en forma de una espuma blanca.
C. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 78 mg (0,129 mmol) de 69B, dando 54 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) (mezcla 1:1 de diastereómeros) \delta 7,56-7,62 (m, 0,5H), 7,46-7,53 (m, 0,5H), 7,01-7,26 (m, 6H), 6,70-6,88 (m, 1H), 5,17-5,37 (m, 1H), 4,60-4,69 (m, 1H), 4,25-4,41 (m, 1H), 3,94-4,12 (m, 1H), 3,04-3,24 (m, 2H), 2,45-2,62 (m, 2H), 1,48-1,65 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 519 (MH+).
Ejemplo 70 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-indol-1-il-piperidin-1-il)-2-oxo-etil]-isobutiramida A. (1-Bencil-piperidin-4-il)-fenil-amina
A una mezcla de 10,9 g (57,6 mmol) de 1-bencil-4-piperidona, 100,0 g (576 mmol) de sulfato sódico y 175 ml de ácido acético en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron 7,00 g (74,9 mmol) de anilina mediante una jeringa y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. A la solución en agitación se le añadieron 61,0 g (288 mmol) de triacetoxiborohidruro sódico y la mezcla se agitó durante una noche. La mezcla se concentró y el residuo se vertió en hielo y se neutralizó con NaOH 2 N a pH 7,5. La mezcla se extrajo cuatro veces con cloroformo y los extractos orgánicos se lavaron una vez con salmuera. La solución se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se trituró con éter, dando 4,2 g de 70A en forma de un sólido blanco.
B. Clorhidrato de 1-[2-(1-bencil-piperidin-4-ilamino)-fenil]-2-cloro-etanona
A un matraz secado a la llama que contenía 2,50 g (9,4 mmol) de 70A y 40 ml de dicloroetano a 0ºC se le añadieron 11,3 ml (11,3 mmol) de tricloruro de boro 1 M en cloruro de metileno durante 5 min, seguido de 1,2 ml (18,8 mmol) de cloroacetonitrilo durante 3 min. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 10 min. La mezcla se calentó a reflujo durante una noche y después se dejó enfriar a temperatura ambiente. A la solución en agitación se le añadió hielo seguido de 10 ml de HCl al 10% y la mezcla se calentó a 100ºC durante 0,5 h. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con cloruro de metileno. La porción orgánica se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 1,50 g de 70B.
C. 1-(1-Bencil-piperidin-4-il)-1H-indol
A 1,50 g (4,0 mmol) de 70B disueltos en 11 ml de etanol a 0ºC se le añadieron 2,0 ml (4,0 mmol) de NaOH 2 N y la mezcla se agitó durante 10 min. A la solución en agitación se le añadieron 80 mg (2,1 mmol) de borohidruro sódico y la mezcla se agitó a 0ºC durante 1 h. A la solución se le añadió hielo y la mezcla se extrajo tres veces con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y se secaron sobre MgSO_{4} y el residuo se disolvió en 1,4-dioxano y se calentó a reflujo durante 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, a la mezcla de reacción se le añadieron hielo y una solución saturada acuosa de carbonato sódico, la solución se extrajo tres veces con cloruro de metileno y los extractos orgánicos combinados se lavaron dos veces con agua. La solución se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (80:20 v/v de hexanos:acetato de etilo), dando 350 mg de 70C en forma de una espuma blanca.
D. Éster etílico del ácido 4-indol-1-il-piperidin-1-carboxílico
A una solución a temperatura de reflujo de 350 mg (1,2 mmol) de 70C en 40 ml de dicloroetano se le añadieron 0,28 ml (3,6 mmol) de cloroformiato de etilo y la mezcla se calentó a reflujo durante 2,5 h. La mezcla se concentró, dando 330 mg de 70D en forma de un sólido amarillo.
E. 1-Piperidin-4-il-1H-indol
Una mezcla de 325 mg (1,2 mmol) de 70D, 440 mg (15,7 mmol) de hidróxido sódico, 1 ml de agua y 2 ml de etilenglicol se calentó a 150ºC durante 17 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, a la mezcla se le añadieron hielo y HCl concentrado y la solución se agitó durante 30 min. A la mezcla se le añadieron hielo y una solución saturada acuosa de carbonato sódico hasta que la solución se hizo básica. La mezcla se extrajo dos veces con éter y los extractos orgánicos combinados se lavaron dos veces con agua. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 150 mg de 70E en forma de un aceite incoloro.
F. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-(4-indol-1-il-piperidin-1-il)-2-oxo-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 150 mg (0,75 mmol) de 70E y 291 mg (0,75 mmol) de 4C, dando 260 mg de 70F en forma de un sólido blanco.
G. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-(4-indol-1-il-piperidin-1-il)-2-oxo-etil]-isobutiramida
A 250 mg (0,44 mmol) de 70F en 5 ml de etanol se le añadieron 3 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró y al residuo se le añadieron etanol y hexano. El sólido blanquecino precipitado se filtró y se secó, dando 10 mg del compuesto del título.
EM (Cl, NH_{3}) 473 (MH+).
Ejemplo 71 Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. 2-Fenil-3-piperidin-4-il-3H-imidazo[4,5-b]piridina
Se preparó 71A de acuerdo con el procedimiento indicado en Ejemplo 50 usando 4-amino-1-bencilpiperidina y 2-cloro-3-nitro-piridina como materiales de partida.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etilcarbonil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 90 mg (0,32 mmol) de 71A y 161 mg (0,41 mmol) de 4C y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al 100%), dando 45 mg de 71B.
C. Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 45 mg (0,069 mmol) de 71B en 2 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró y se co-evaporó dos veces con etanol. Al residuo se le añadieron acetato de etilo y hasta que cristalizó el producto. El sólido se recogió por filtración, dando 20 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,74 (d, 0,5H), 8,56 (d, 0,5H), 8,06-8,23 (m, 1H), 7,43-7,79 (m, 8H), 7,18-7,28 (m, 2H), 6,87-7,02 (m, 3H), 5,14-5,28 (m, 1H), 4,52-4,63 (m, 1H), 3,93-4,08 (m, 1H), 1,37-1,49 (d, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 551 (MH+).
Ejemplo 72 Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-bencimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (1-{6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-{4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 101 mg (0,25 mmol) de 69A y 70 mg (0,25 mmol) de 50D y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (90:10 v/v cloroformo:metanol), dando 84 mg de 72A.
B. Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-bencimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etil}-isobutiramida
De acuerdo con el Procedimiento General C, se desprotegieron 76 mg (0,114 mmol) de 72A, dando 58 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta (mezcla de rotámeros) (parcial) (mezcla 1:1 de diastereómeros) 8,21-8,30 (m, 0,5H), 7,65-7,88 (m, 8,5H), 7,44-7,51 (m, 0,5H), 7,27-7,33 (m, 1H), 6,99-7,14 (m, 1,5H), 6,72-6,95 (m, 1H), 5,27-5,35 (m, 0,5H), 5,02-5,10 (m, 0,5H), 4,52-4,79 (m, 2H), 2,34-2,69 (m, 2H), 1,94-2,16 (m,2H), 1,51-1,71 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 568 (MH+).
Ejemplo 73 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{4-fenil-1-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-butil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-metil-1-{4-fenil-1-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-butilcarbamoil}-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 112 mg (0,30 mmol) de 62D y 84 mg (0,30 mmol) de 50D y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de metanol del 1% al 10% en cloruro de metileno, proporcionando 55 mg de 73A en forma de una espuma blanca.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{4-fenil-1-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-butil}-isobutiramida
A 50 mg (0,08 mmol) de 73A en 1 ml de etanol se le añadieron 0,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró y se co-evaporó dos veces en etanol. El residuo se trituró dos veces con éter, dando 38 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,78-7,98 (m, 0,5H), 7,54-7,74 (m, 6,5H), 7,29-7,42 (m, 2H), 7,02-7,29 (m, 5H), 4,58-4,80 (m, 2H), 3,80-4,17 (m, 1H), 1,56-1,71 (m,6H). EM (Cl, NH_{3}) 538 (MH+).
Ejemplo 74 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-1-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 121 mg (0,22 mmol) de 26A y 47 mg (0,22 mmol) de amida del ácido 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfónico, dando 165 mg de 74A.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida
A 107 mg (0,14 mmol) de 74A en 8 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. Se añadió 1 ml más de HCl concentrado se le añadieron y la mezcla de reacción se agitó durante 3 h. La mezcla se concentró y después se co-evaporó varias veces con etanol, dando 61 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,57-7,80 (m, 2H), 7,43-7,62 (m, 1,5H), 6,96-7,41 (m, 7,5H), 1,51-1,67 (d, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 643 (MH+).
Ejemplo 75 Clorhidrato de (1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-(4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido {2-(1H-indol-3-il)-1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-piperidin-1-carbonil]-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 2,82 g (13,0 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina y 3,95 g (13,0 mmol) de N-t-BOC-D-triptofano y el producto se trituró con éter, dando 2,5 g de 75A.
B. 1-{1-[2-Amino-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-piperidin-4-il}-1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 2,50 g (4,97 mmol) de 75A, dando 1,70 g de 75B.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
A una solución de 150 mg (0,372 mmol) de mono-terc-butil-éster del ácido piperidin-1,4-dicarboxílico, 87 mg (0,216 mmol) de 75B y 96 mg (0,744 mmol) de diisopropiletilamina en 4 ml de cloruro de metileno se le añadieron 197 mg (0,446 mmol) de reactivo de BOP y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con 20 ml de acetato de etilo y se lavó dos veces con ácido cítrico al 10% y bicarbonato sódico saturado acuoso y una vez con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando una espuma blanca que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de cloruro de metileno al 100% seguido de metanol al 1% en cloruro de metileno, dando 52 mg de 75C en forma de un aceite transparente.
D. Clorhidrato de {1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 20 mg (0,032 mmol) de 75C en 2 ml de etanol se le añadió 1 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La solución se concentró y se co-evaporó dos veces en etanol, una vez en cloruro de metileno y dos veces en éter, dando el compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,19 (d, 0,5H), 7,63-7,69 (m, 0,5H), 7,55-7,61 (m, 0,5H), 7,30-7,39 (m, 1,5H), 7,00-7,31 (m, 5,5H), 5,26-5,37 (m, 0,5H), 5,01-5,24 (m, 0,5H). EM (Cl, NH_{3}) 516 (MH+).
Ejemplo 76 Trifluoroacetato de (R)-2-amino-N-{1-(2-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Ácido (R)-2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(2-metil-1H-indol-3-il)-propiónico
A 1,00 g (4,58 mmol) de 2-D-metiltriptofano en 37 ml de dioxano y 9,2 ml de agua se le añadieron 1,4 ml (10,0 mmol) de trietilamina y 1,51 g (5,08 mmol) de 33A y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se concentró para retirar el exceso de dioxano y se acidificó a pH 5 con ácido acético. La fase acuosa se extrajo tres veces con cloruro de metileno y los extractos orgánicos combinados se lavaron dos veces con agua y una vez con salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgSO_{4} y se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (98:2:0,1 v/v/v de CH_{2}Cl_{2}: MeOH:ácido acético), dando 1,98 g de 76A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-metil-1-{1-(2-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 107 mg (0,49 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina y 200 mg (0,49 mmol) de 76A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (94:6 v/v de CH_{2}Cl_{2}:MeOH), dando 1,87 g de 76B.
C. Trifluoroacetato de (R)-2-amino-N-{1-(2-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 187 mg (0,31 mmol) de 76B a 0ºC se le añadieron 2 ml de TFA frío y la mezcla se agitó durante 1 h a 0ºC. La mezcla se concentró y se co-evaporó una vez en cloruro de metileno y dos veces en tolueno, dando 180 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD. 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,32 (d, 0,5H), 7,50-7,57 (m, 0,5H), 7,44 (d, 0,5H), 5,23-5,35 (m, 0,5H), 5,18-5,20 (m, 0,5H), 2,42 (s, 1,5H), 2,32 (s, 1,5H), 1,58-1,66 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 503 (MH+).
Ejemplo 77 Clorhidrato de {1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. 2,5-Dioxo-pirrolidin-1-il de éster terc-butílico del ácido piperidin-1,4-dicarboxílico
A 15,0 g (65,4 mmol) de mono-terc-butil-éster del ácido piperidin-1,4-dicarboxílico se le añadieron 150 ml de cloruro de metileno y 20 ml de DMF. A la solución en agitación se le añadieron 9,30 g (78,5 mmol) de N-hidroxisuccinimida seguido de 15,0 g (78,5 mmol) de DEC y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con ácido cítrico al 10%, cuatro veces con bicarbonato sódico saturado acuoso y una vez con agua y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 20,4 g de 77A en forma de un sólido blanco.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-[1-carboxi-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
Una mezcla de 2,04 g (6,28 mmol) de 77A, 2,00 g (6,28 mmol) de trifluoroacetato de D-triptofano y 1,16 g (11,5 mmol) de trietilamina en 120 ml de dioxano y 30 ml de agua se agitó a temperatura ambiente durante 17 h. La mezcla de reacción se concentró para retirar el exceso de dioxano y después se diluyó con agua. La porción acuosa se extrajo cuatro veces con cloroformo y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (9:1 v/v de CHCl_{3}:MeOH) seguido de (36:4:1 v/v de CHCl_{3}:MeOH:ácido acético), dando 0,87 g de 77B.
C. Ácido (R)-4-(1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil)-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 100 mg (0,36 mmol) de 50D y 150 mg (0,36 mmol) de 77B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 75% en hexano a acetato de etilo al 100% y se aislaron 144 mg de 77C en forma de un sólido blanco.
D. Clorhidrato de (1-{1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-(4-[2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 144 mg (0,21 mmol) de 77C en 2 ml de etanol se le añadieron 4 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La solución se concentró y después se co-evaporó varias veces en etanol. El residuo se cristalizó en metanol/acetato de etilo y el producto precipitado se recogió por filtración, dando 140 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
EM (Cl, NH_{3}) 576 (MH+).
Ejemplo 78 Clorhidrato de (1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido 4-(1-carboxi-2-naftalen-1-il-etilamino)-piperidin-1-carboxílico
A 200 mg (0,607 mmol) de mono-terc-butil-éster del ácido piperidin-1,4-dicarboxílico en 5 ml de dioxano y 1,2 ml de agua se le añadieron 0,186 ml (1,33 mmol) de trietilamina y 198 mg (0,607 mmol) de D-3-(1'-naftil)alanina y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. El exceso de disolvente se retiró por concentración y el residuo se diluyó con agua y se acidificó a pH 5 con ácido acético. La solución se extrajo tres veces con cloruro de metileno y los extractos orgánicos combinados se lavaron dos veces con agua y una vez con salmuera. La porción orgánica se secó sobre MgSO_{4} y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (96:4:0,1 v/v/v cloruro de metileno:metanol:ácido acético), dando 132 mg de 78A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 132 mg (0,32 mmol) de 78A y 70 mg (0,32 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (96:4 v/v cloruro de metileno:metanol), dando 132 mg de 78B.
C. Clorhidrato de (1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 132 mg (0,21 mmol) de 78B disueltos en 2,5 ml de etanol se le añadieron 0,25ml de HCl concentrado a 0ºC. El baño de hielo se retiró y la solución se agitó durante 1 h. La mezcla se co-evaporó en metanol y después en cloruro de metileno, dando 102 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,23 (d, 0,5H), 8,18 (d, 0,5H), 7,79-7,92 (m, 2H), 7,46-7,68 (m, 3H), 7,37-7,44 (m, 1H), 7,14-7,27 (m, 1H), 7,02-7,13 (m, 2,5H), 6,73 (d, 0,5H), 5,38-5,48 (m, 0,5H), 5,26-5,36 (m, 0,5H). EM (Cl, NH_{3}) 527 (MH+).
Ejemplo 79 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indo}-3-ilmetil)-2-[7-(morfolin-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida A. 2,2,2-Trifluoro-1-[7-(morfolin-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etanona
Puede prepararse cloruro de 2-trifluoroacetil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-sulfonilo de acuerdo con el procedimiento indicado por Pendleton y col., J. Pharmacol. Exp. Ther., 208 (1979) pág. 24. Una mezcla de 250 mg (0,76 mmol) de cloruro de 2-trifluoroacetil-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfonilo, 86 mg (0,99 mmol) de morfolina y 0,3 ml de piridina anhidra en 10 ml de acetona se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en cloroformo y se lavó una vez con agua. La porción orgánica se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (6:4 v/v hexano:acetato de etilo), dando 289 mg de
79A.
B. 7-(Morfolin-4-sulfonil)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina
Una mezcla de 218 mg (0,58 mmol) de 79A y 90 mg (0,65 mmol) de carbonato potásico en 10 ml de metanol se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (18:2:1 v/v/v de acetato de etilo:metanol:trietilamina), dando 163 mg de 79B.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-[(1H-indol-3-ilmetil)-2-[7-(morfolin-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1H-iso-quinolin-2-il]-2-oxo-etilcarbamoil)-1-metil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 136 mg (0,35 mmol) de 4C y 100 mg (0,35 mmol) de 79B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (39:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 194 mg de 79C.
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[7-(morfolin-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida
A 141 mg (0,22 mmol) de 79C en 12 ml de etanol se le añadieron 5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró, dando 123 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,98-8,07 (s a, 1H), 7,43-7,61 (m, 2,5H), 6,91-7,37 (m, 5H), 5,14-5,29 (m, 1H), 4,48-4,70 (m, 1H), 3,66-3,78 (m, 4H), 3,29-3,46 (m, 4H), 2,84-3,07 (m, 7H), 1,56-1,67 (m, 6H). EM (Cl, NH_{3}) 554 (MH+).
Ejemplo 80 Clorhidrato de [2-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-(1-carboxi-2-naftalen-2-il-etilcarbamoil)-piperidin-1-carboxílico
Una mezcla de 3,08 g (9,4 mmol) de 77A, 2,03 g (9,4 mmol) de D-3-(2-naftil)-alanina y 2,9 g (28,7 mmol) de trietilamina en 40 ml de dioxano y 10 ml de agua se agitó durante 72 h a temperatura ambiente. El exceso de dioxano se retiró por concentración y la solución acuosa restante se diluyó con 200 ml de agua y se acidificó a pH 5 con ácido cítrico al 10%. La porción acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron dos veces con bicarbonato sódico saturado acuoso. El aceite naranja se separó de los extractos acuosos y se acidificó con ácido acético al 10%. La porción acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron tres veces con agua y una vez con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron, dando 3,7 g de un aceite amarillo que se recogió en 200 ml de éter. Precipitó un sólido blanco cristalino de la solución y se recogió por filtración, dando 3,31 g de 80A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-[2-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 95 mg (0,22 mmol) de 80A y 29,6 mg (0,22 mmol) de 1,2,3,4,-tetrahidroisoquinolina y el aceite resultante se trituró con acetato de etilo/hexano, dando 70 mg de 80B en forma de un sólido blanco.
C. Clorhidrato de [2-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 70 mg (0,13 mmol) de 80B en 6 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 1,5 h. La mezcla se concentró y se co-evaporó dos veces en cloruro de metileno, dando 50 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,62-7,80 (m, 4H), 7,34-7,48 (m, 3H), 7,05-7,19 (m, 1,5H), 6,82-7,00 (m, 2,5H), 5,18-5,21 (m, 1H), 4,51-4,73 (m, 1,5H), 4,29-4,39 (m, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 442 (MH+).
Ejemplo 81 Clorhidrato de {2-[4-(2-ciclopropil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. 1-(1-Bencil-piperidin-4-il)-2-ciclopropil-1H-benzoimidazol
Una mezcla de 530 mg (1,90 mmol) de 50B y 651 mg (7,56 mmol) de ácido ciclopropanocarboxílico se calentó a 160ºC durante 16 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, a la mezcla de reacción se le añadieron 10 ml de etanol, seguido de la lenta adición de 20 ml de NaOH 2 N en 90 ml de etanol. La mezcla se agitó durante 30 min a temperatura ambiente y después se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó una vez con bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 75% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 340 mg de 81A.
B. Clorhidrato de 2-ciclopropil-1-piperidin-4-il-1H-benzoimidazol
A 340 mg (1,03 mmol) de 81A en 3 ml de cloruro de metileno a -10ºC se le añadieron 220 mg (1,54 mmol) de cloroformiato de a-cloroetilo y la mezcla se agitó a -10ºC durante 50 min. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en metanol y se calentó a 70ºC durante 1 h. La mezcla se concentró y se secó al vacío, dando 230 mg de 81B en forma de un sólido púrpura claro.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{2-[4-(2-ciclopropil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 80 mg (0,29 mmol) de 81B y 123 mg (0,29 mmol) de 80A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo:hexano), dando 50 mg de 81C en forma de un sólido rojo.
D. Clorhidrato de {2-[4-(2-ciclopropil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 42 mg (0,065 mmol) de 81C en 2 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 30 min. La mezcla se concentró, dando 40 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
EM (Cl, NH_{3}) 550 (MH+).
Ejemplo 82 Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il]-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Ácido (R)-4-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 95 mg (0,34 mmol) de 50D y 100 mg (0,23 mmol) de 80A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 55% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 97 mg de 82A en forma de un sólido blanco.
B. Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 97 mg (0,14 mmol) de 82A en 4 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró, dando 70 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,77-8,00 (m, 12H), 7,32-7,77 (m, 4H), 5,18-5,38 (m, 1H), 4,68-4,89 (m, 2H), 4,10-4,36 (m, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 587 (MH+).
Ejemplo 83 Clorhidrato de (1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[-(tolueno-4-sulfonilamino)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-etil)-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-[2-(5-amino-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 47 mg (0,35 mmol) de 43C y 150 mg (0,35 mmol) de 80A, dando 150 mg de 83A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[5-(tolueno-4-sulfonilamino)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
Una mezcla de 150 mg (0,28 mmol) de 83A, 61 mg (0,32 mmol) de cloruro de p-toluenosulfonilo y 39 mg (0,32 mmol) de 4-dimetilaminopiridina se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno y se lavó dos veces con HCl al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 75% en hexano a metanol al 2% en acetato de etilo, dando 50 mg de 83B.
C. Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[5-(tolueno-4-sulfonilamino)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-etil)-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 50 mg (0,07 mmol) de 83B en 4 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en etanol/hexano, dando 25 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,56 (d, 1H), 7,72-7,89 (m, 5H), 7,57-7,68 (m, 2H), 7,39-7,52 (m, 5H), 7,24-7,31 (m, 2H), 6,91-7,16 (m, 3H), 4,49-4,73 (m, 2H), 4,36-4,47 (m, 1H), 2,47-2,68 (m, 2H), 2,39 (s, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 598 (MH+).
Ejemplo 84 Clorhidrato de [1-(5-benzoilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-[1-(5-amino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 40 mg (0,30 mmol) de 43C y 125 mg (0,30 mmol) de 77B, dando 170 mg de 84A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-[1-(5-benzoilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
Una mezcla de 170 mg (0,32 mmol) de 84A, 52 mg (0,37 mmol) de cloruro de benzoílo y 45 mg (0,37 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 15 ml de cloruro de metileno se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó dos veces con HCl al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. La porción orgánica se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 90% etilo en hexano a metanol al 2% en acetato de etilo, dando 100 mg de 84B.
C. Clorhidrato de [1-(5-benzoilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 100 mg (0,16 mmol) de 84B en 4 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con etanol y se concentró. El residuo se cristalizó en etanol/hexano, dando 50 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) 5 7,91-7,99 (m, 2H), 7,48-7,70 (m, 6H), 7,03-7,38 (m, 5H),4,68-4,80 (m, 1H), 4,45-4,59 (m, 1H), 4,03-4,16 (dd, 1H), 2,98-3,13 (m, 2H), 2,59-2,76 (m, 1H), 1,76-2,10 (m, 4H). EM (Cl, NH_{3}) 537 (MH+).
Ejemplo 85 Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il)-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 225 mg (0,53 mmol) de 80A y 117 mg (0,54 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)piperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de adición de metanol del 1% al 3% en cloruro de metileno, dando 178 mg de 85A.
B. Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 165 mg (0,26 mmol) de 85A en 3 ml de etanol se le añadieron 1,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se concentró, dando 117 mg del compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,70-7,89 (m, 4H), 7,37-7,50 (m, 3H), 7,22-7,29 (m, 0,5H), 6,90-7,04 (m, 3H), 6,68 (d, 0,5H), 5,25-5,36 (m, 1H), 4,67-4,74 (m, 1H), 4,38-4,50 (m, 1H), 4,11-4,32 (m, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 527 (MH+).
Ejemplo 86 Clorhidrato de [1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Ácido 2-trifluoroacetil-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfónico
Puede prepararse cloruro de 2-trifluoroacetil-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfonilo de acuerdo con el procedimiento indicado por Pendleton y col., J. Pharmacol. Exp. Ther., 208 (1979) pág. 24. Una mezcla de 295 mg (0,90 mmol) de cloruro de 2-trifluoroacetil-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfonilo, 95 mg (1,17 mmol) de clorhidrato de etilamina y 0,3 ml (2,15 mmol) de trietilamina en 10 ml de acetona se calentó a reflujo durante 1,5 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (6:4 v/v hexano:acetato de etilo), dando 283 mg de 86A.
B. Etilamida del ácido 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-sulfónico
A 225 mg (0,67 mmol) de 86A y 104 mg (0,75 mmol) de carbonato potásico en 10 ml de metanol y 0,5 ml de agua se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se concentró, dando 335 mg de 86B.
C. Éter terc-butílico del ácido (R)-4-[1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 145 mg (0,35 mmol) de 86B y 85 mg (0,35 mmol) de 77B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (39:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 68 mg de 86C.
D. Clorhidrato de [1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil)-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 68 mg (0,11 mmol) de 86C en 6 ml de etanol se le añadieron 2,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla de reacción se concentró, dando 62 mg del compuesto del título en forma de un sólido castaño.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,96-8,02 (s a, 0,5H), 7,62-7,53 (m, 0,5H), 7,52-7,61 (m, 2H), 6,91-7,37 (m,5H), 5,09-5,20 (m, 1H), 4,42-4,70 (m, 1H), 1,00-1,11 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 538 (MH+).
Ejemplo 87 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 136 mg (0,35 mmol) de 4C y 85 mg (0,35 mmol) de 86B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (39:1 v/v de cloroformo:metanol) seguido de (9:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 0,73 mg de 87A.
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida
A 62 mg (0,10 mmol) de 87A en 6 ml de etanol se le añadieron 2,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h y después se concentró, dando 56 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,28-8,41 (s a, 0,5H), 7,42-7,59 (m, 2H), 6,85-7,07 (m, 5H), 5,19-5,25 (m, 1H), 4,39-4,68 (m, 2H), 2,71-2,87 (m, 2H), 1,40-1,63 (m, 6H), 0,92-1,06 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 513 (MH+).
Ejemplo 88 Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-(1H-indol-3-il)-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido 3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2,6-dicarboxílico
A 1,20 g (4,1 mmol) de 5C en 36 ml de metanol se le añadieron 0,62 g (4,5 mmol) de carbonato potásico y la mezcla se calentó a reflujo durante 7 h. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (9:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 1,49 g de 88A.
B. Éster terc-butílico del ácido 6-etilcarbamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 650 mg (2,34 mmol) de 88A y 191 mg (2,34 mmol) de clorhidrato de etilamina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (39:1 v/v de cloroformo:metanol) seguido de (1:1 v/v de acetato de etilo:metanol), dando 566 mg de 88B.
C. Clorhidrato de etilamida del ácido 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
A 493 mg (1,62 mmol) de 88B en 30 ml de etanol se le añadieron 12,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se concentró, dando 384 mg de 88C en forma de un sólido blanco.
D. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-[1-(6-etilcarbamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 99 mg (0,41 mmol) de 88C y 170 mg (0,41 mmol) de 77B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (39:1 v/v de cloroformo:metanol) seguido de (9:1 v/v cloroformo:metanol), dando 107 mg de 88D.
E. Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-(1H-indol-3-il)-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
A 66 mg (0,11 mmol) de 88D en 6 ml de etanol se le añadieron 2,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se concentró, dando 56 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,52-7,60 (m, 1,5H), 7,38-7,45 (m, 1H), 7,24 (d, 0,5H), 5,11-5,24 (m, 1H), 4,40-4,69 (m, 1,5H), 4,04-4,13 (m, 0,5H), 1,13-1,24 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 502 (MH+).
Ejemplo 89 Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-naftalen-2-il-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico A. Ácido 4-[2-(6-etilcarbamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 96 mg (0,40 mmol) de 88C y 170 mg (0,40 mmol) de 80A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (39:1 v/v de cloroformo:metanol), dando 88 mg de 89A.
B. Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-naftalen-2-il-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico
A 61 mg (0,10 mmol) de 89B en 6 ml de etanol se le añadieron 2,5 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla de reacción se concentró, dando 58 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,46-7,76 (m, 4,5H), 7,09-7,43 (m, 5,5H), 5,08-5,32 (m, 1H), 1,09-1,24 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 513 (MH+).
Ejemplo 90 Clorhidrato de (R)-2-dimetilamino-N-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Clorhidrato de (R)-2-dimetilamino-N-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A una solución de 92 mg (0,17 mmol) de 35D en 2 ml de metanol se le añadieron 127 mg de tamices 3 \ring{A} en polvo, 12 mg (0,40 mmol) de formaldehído al 37% p/p, 27 mg (0,43 mmol) de cianoborohidruro sódico y 103 mg (1,72 mmol) de ácido acético. La mezcla se agitó durante 60 h a temperatura ambiente y después se filtró a través de celite y se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó tres veces con NaOH 1 N, una vez con agua y una vez con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El aceite resultante se trituró, dando 39 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,68-7,89 (m, 4H), 7,42-7,54 (m, 4H), 6,90-7,08 (m, 3H), 5,32-5,47 (m, 1H), 4,68-4,77 (m, 1H), 4,33-4,51 (m, 1H), 4,16-4,28 (m, 1H), 2,64 (d, 3H), 2,34 (d, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 529 (MH+).
Ejemplo 91 Clorhidrato de (R)-3-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida A. Éster metílico del ácido (R)-2-amino-3-(1H-indol-3-il)-propiónico
A 9,65 g (30,3 mmol) de 4A en 40 ml de etanol se le añadieron 20 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h. La mezcla se concentró y el residuo se diluyó con acetato de etilo. La mezcla se lavó dos veces con bicarbonato sódico saturado acuoso y una vez con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 5,12 g de 91A en forma de un aceite amarillo.
B. Ácido (R)-2-(3-terc-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propiónico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 2,01 g (9,2 mmol) de 91A y 2,00 g (9,2 mmol) de ácido 3-terc-butoxicarbonilamino-3-metil-butírico, dando éster metílico del ácido (R)-2-(3-terc-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propiónico. El éter bruto se hidrolizó de acuerdo con el Procedimiento General D, dando 3,53 g de 91B en forma de un sólido blanco.
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-2-{2-(1H-indol-3-il)-1-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-etilcarbamoil)-1,1-dimetil-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 350 mg (1,3 mmol) de 91B y 510 mg (1,3 mmol) de 50D y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 60% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 180 mg de 91C.
D. Clorhidrato de (R)-3-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida
A 100 mg (0,27 mmol) de 91C en 3 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró y precipitó en etanol/hexano, dando 125 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
EM (Cl, NH_{3}) 564 (MH+).
Ejemplo 92 Clorhidrato de {2-[4-(3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido 4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carboxílico
A una mezcla de 1,00 g (4,6 mmol) de 4-(2-ceto-1-bencimidazolinil)-piperidina y 1,00 g (4,6 mmol) de 4-dimetilaminopiridina en 20 ml de cloruro de metileno a 0ºC se le añadieron gota a gota 80 ml de dicarbonato de di-terc-butilo en 80 ml de cloruro de metileno durante 30 min. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La mezcla se lavó tres veces con HCl al 10%, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 50% en hexano a acetato de etilo al 100%, dando 1,16 g de 92A.
B. Éster terc-butílico del ácido 4-{3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carboxílico
A 390 mg (1,2 mmol) de 92A en 3 ml de DMF se le añadieron 47 mg (1,2 mmol) de hidruro sódico (dispersión al 60% en aceite mineral), seguido de 520 mg (3,7 mmol) de yodometano y la mezcla se agitó durante 72 h a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se filtró. El filtrado se lavó dos veces con salmuera y se concentró, dando 400 mg de 92B.
C. Clorhidrato de 1-metil-3-piperidin-4-il-1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona
A 400 mg (1,2 mmol) de 92B en 6 ml de etanol se le añadieron 3 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla se concentró, dando 330 mg de 92C en forma de un sólido blanco.
D. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{2-[4-(3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 100 mg (0,37 mmol) de 92C y 159 mg (0,37 mmol) de 80A y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 100% a metanol al 4% en acetato de etilo, dando 120 mg de 92D.
E. Clorhidrato de {2-[4-(3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
A 120 mg (0,19 mmol) de 92D en 5 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla se diluyó con etanol y se concentró y el residuo se cristalizó en etanol/hexano, dando 45 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,79-7,99 (m, 4H), 7,43-7,78 (m, 3,5H), 7,30-7,39 (m, 0,5H), 7,01-7,19 (m, 3H), 5,26-5,39 (m, 1H), 4,68-4,79 (m, 1H), 4,41-4,60 (m, 1H), 4,13-4,32 (m, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 540 (MH+).
Ejemplo 93 Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-naftalen-2-il-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil)-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico A. Éster etílico del ácido 3,4-dimetil-benzoico
Una mezcla de 10,00 g (66,6 mmol) de ácido 3,4-dimetilbenzoico y 3 ml de ácido sulfúrico concentrado en 200 ml de etanol se calentó a 50ºC durante 2 h y a 65ºC durante 6 h. La mezcla se concentró y el residuo se diluyó con acetato de etilo y se lavó dos veces con salmuera, bicarbonato sódico saturado acuoso y salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 12,0 g de 93A.
B. Éster etílico del ácido 3,4-bis-bromometil-benzoico
Una mezcla de 12,0 g (67,3 mmol) de 93A, 26,10 g (146,6 mmol) de N-bromosuccinimida y 130 mg (0,79 mmol) de 2,2'-azo-bis(isobutironitrilo) en 130 ml de tetracloruro de carbono se calentó a reflujo durante 17 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y se concentró, dando 22,0 g de 93B en forma de un aceite amarillo.
C. Éster etílico del ácido 2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico
A 22,0 g (65,4 mmol) de 93B en 150 ml de benceno se le añadió gota a gota una solución de 7,87 g (73,4 mmol) de bencilamina y 15,27 g (151 mmol) de trietilamina en 50 ml de benceno durante 30 min y después la mezcla se calentó a reflujo durante 18 h. Después de reposar a temperatura ambiente durante 24 h, la mezcla se filtró y el filtrado se lavó una vez con bicarbonato sódico saturado acuoso y agua. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El éster etílico del ácido 2-bencil-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico bruto se disolvió en 100 ml de etanol y se le añadieron 20 ml de agua y 2,00 g de paladio al 10% sobre carbono. La mezcla se hidrogenó durante 18 h a 310,264 kPa (45 psi), se filtró y se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de acetato de etilo al 100% a dietilamina al 10% en acetato de etilo, dando 220 mg de 93C.
D. Éster etílico del ácido 2-{2-[(1-terc-butoxicarbonil-piperidin-4-carbonil)-amino]-3-naftalen-2-il-propionil)-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 200 mg (1,05 mmol) de 93C y 446 mg (1,05 mmol) de 80A, dando 460 mg de 93D en forma de un sólido pardo.
E. Ácido (R)-2-{2-[(1-terc-butoxicarbonil-piperidin-4-carbonil)-amino]-3-naftalen-2-il-propionil}-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico
Se agitaron 410 mg (0,68 mmol) de 93D en 50 ml de etanol que contenían 1,05 ml de NaOH 2 N durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y el residuo se repartió entre cloroformo y HCl al 10%. Las fases se separaron y la porción acuosa se extrajo dos veces con cloroformo. Los extractos orgánicos combinados se concentraron, dando 350 mg de 93E.
F. Éster terc-butílico del ácido 4-[2-(5-etilcarbamoil-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etilcarbamoil]-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 350 mg (0,61 mmol) de 93E y 50 mg (0,61 mmol) de clorhidrato de etilamina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo al 100% a metanol al 4% en acetato de etilo, dando 40 mg de 93F.
G. Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-naftalen-2-il-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico
A 40 mg (0,07 mmol) de 93F en 5 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró y el residuo se cristalizó en etanol/hexano, dando 16 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,63 (d, 1H), 7,71-7,90 (m, 6H), 7,39-7,65 (m, 4H), 5,01-5,20 (m, 2H), 4,67-4,93 (c, 2H), 4,48-4,59 (m, 1H).
EM (Cl, NH_{3}) 499 (MH+).
Ejemplo 94 Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-1-metil-piperidin-4-carboxílico A Clorhidrato de (1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-metil-piperidin-4-carboxílico
A 40 mg (0,06 mmol) de 82B en 4 ml de metanol se le añadieron 40 ml (0,64 mmol) de ácido acético, 0,16 ml (0,16 mmol) de cianoborohidruro sódico 1 M en THF, 12 ml (0,15 mmol) de formaldehído y 40 mg de tamices moleculares 3 \ring{A} y la mezcla se agitó durante 72 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó dos veces con NaOH 2 N y una vez con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. El sólido se recristalizó en etanol/hexano, dando 24 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 7,81-7,98 (m, 4H), 7,40-7,76 (m, 10H), 7,27-7,39 (m, 2H), 5,24-5,38 (m, 1H), 2,37 (s, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 600 (MH+).
Ejemplo 95 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida A. Ácido (R)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-fenil-propiónico
A una mezcla de 500 mg (3,03 mmol) de D-fenilalanina y 910 mg (3,03 mmol) de 33A en 10 ml de agua y 40 ml de dioxano se le añadieron 1,26 ml (9,08 mmol) de trietilamina y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min y después se calentó a 30ºC durante 16 h. La mezcla se diluyó con cloroformo y la porción acuosa se acidificó a pH 4 con ácido acético. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó tres veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 488 mg de 95A.
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-{1-Bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etilcarbamoil)-1-metil}-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 76 mg (0,22 mmol) de 95A y 60 mg (0,22 mmol) de 50D y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (75:25 v/v de acetato de etilo:hexanos), dando 120 mg de 95B.
C. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il]-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida
A 120 mg (0,20 mmol) de 95B en 5 ml de etanol se le añadieron 5 ml de HClconcentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 min. La mezcla se diluyó con etanol y se concentró y el residuo se cristalizó en metanol/hexanos, dando 65 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (mezcla de rotámeros) (parcial) \delta 8,24 (d, 0,5H), 7,64-7,90 (m, 8,5H), 7,21-7,43 (m, 5H), 5,17-5,27 (m, 0,33H), 5,02-5,09 (m, 0,67H), 4,18-4,26 (m, 0,33H), 3,94-4,06 (m, 0,67H), 1,71 (s, 2H)_{t} 1,56 (s, 3H), 1,48 (s, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 510 (MH+).
Ejemplo 96 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida A. Ácido (R)-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-3-(2-metil-1H-indol-3-il)-propiónico
A una mezcla de 1 g de D-2-metiltriptofano (4,6 mmol) y 1,51 g (5 mmol) de 33A en 9,2 ml de agua y 57 ml de dioxano se le añadieron 1,4 ml (10 mmol) de trietilamina y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se diluyó con cloroformo y la porción acuosa se acidificó a pH 4 con ácido acético. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó tres veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró, dando 1,9 g de 96A.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 250 MHz) (parcial): \delta 2,4 (s, 3H), 3,2 (dd, 2H), 4,6 (m, 1H), 6,9 (m, 2H), 7,18 (m, 1H), 7,35 (d a, 1H), 7,45 (m, 1H) EM (Cl, NH_{3}) 404 (MH+).
B. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-metil-1-[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etilcarbamoil]-etil)-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 250 mg (0,62 mmol) de 96A a 109 mg (0,68 mmol) de 4-fenilpiperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (MeOH al 2%-CH_{2}Cl_{2}), dando 140 mg de 96B en forma de un aceite pardo.
C. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida
A 140 mg de 96B en 4 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró, dando 85 mg del compuesto del título después del tratamiento con carbono activado y la trituración del sólido rosa con éter.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (parcial) (mezcla de rotámeros): \delta 1,65 (6H), 2,35 (s, 3H), 3,8 (d a, 1H), 4,45 (d a, 1H), 5,7 (m, 1H), 6,8 (d, 2H). EM (Cl, NH_{3}) 447 (MH+).
Ejemplo 97 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(4-bencil-piperidin-1-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-(4-bencil-piperidin-1-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 122 mg (0,03 mmol) de 4C a 50 mg (0,028 mmol) de 4-bencilpiperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (MeOH al 2%-CH_{2}Cl_{2}), dando 145 mg de 96A en forma de un aceite pardo. ^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (parcial): \delta 1,4 H (15H), 3,1 (t, 2H), 3,55 (d a, 1H), 4,3 (d a, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,6 (d, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 547 (MH+).
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(4-bencil-piperidin-1-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida
A 135 mg de 96A en 3 ml de etanol se le añadieron 1 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró, dando 95 mg del compuesto del título.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) (parcial): \delta 1,6 H (6H), 3,7 (d a, 1H), 4,3 (d a, 1H), 5,1 (m, 1H), 7,4 (d, 1H), 7,55 (d, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 447 (MH+).
Ejemplo 98 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-(4-fenilpiperidin-1-carbonil)-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 1-{1-(R)-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-piperidin-1-il]-etilcarbamoil)-1-metil-etil)-carbámico
Usando el Procedimiento General A, se acopló 4-fenilpiperidina (150 mg, 0,93 mmol) con 4C (362 mg, 0,93 mmol) y el producto se purificó sobre gel de sílice usando un gradiente de EtOAc al 50%/hexanos a EtOAC al 75%/hexanos, dando 530 mg de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 250 MHz) (mezcla de rotámeros): \delta 8,15 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,78 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,25 (m, 14 H), 6,80 (d, 2 H), 5,26 (m, 2 H), 5,0 (s a, 2 H), 4,52 (m, 2 H),4,35 (m, 2 H), 3,18 (m, 4 H), 2,4 (m, 4 H), 1,68 (s, 6 H), 1,58 (s, 3 H), 1,55 (s, 3 H), 1,50 (s, 18 H); EM (Cl, NH_{3}): 534 (MH+).
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-[4-fenilpiperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida
El producto de la etapa A (514 mg) se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 430 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz): \delta 7,55 (m, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,05 (m, 7H, 6,75 (d,* H), 5,18 (m, 1H), 5,18 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,12 (m, 2 H), 2,4 (m, 2 H), 1,55 (s, 12 H), 1,4 (s, H); EM (Cl, NH_{3}): 434 (MH+).
Ejemplo 99 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)-1-[4-fenilpiperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (1-{1-(R)-5-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-piperidin-1-il]-etilcarbamoil}-1-metil-etil)-carbámico
Usando el Procedimiento General A, se acopló 4-fenilpiperidina (20 mg, 0,123 mmol) con 33B (50 mg, 0,123 mmol) y el producto se purificó sobre gel de sílice usando un gradiente de EtOAc al 75%/hexanos a EtOAc al 100%, dando 60 mg de 99A en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CDCl_{3},250 MHz): \delta 8,55 (m, 1H), 7,45 (m, 6 H), 7,0 (m, 1H), 6,9 (d, 1H), 5,3 (m, 1H), 5,1 (m, 1H), 4,7 (m, 1H), 3,78 (d, 1H), 3,2 (m, 2 H), 2,5 (m, 2 H), 1,55 (s, 3 H), 1,50 (s, 9 H), 1,35 (s, 3 H); EM (Cl, NH_{3}): 552 (MH+).
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)-(4-fenilpiperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida
El producto de 99A (60 mg), se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C, dando 50 mg de la sal clorhidrato del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (d_{4}-MeOH, 300 MHz): \delta 7,25 (m, 7 H), 6,85 (m, 2 H), 5,2 (m, 1H), 4,5 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 3,1 (m, 1H), 2,94 (t, 1H), 2,5 (m, 2 H), 1,59 (s, 12 H), 1,45 (s, 3 H); EM (Cl, NH_{3}): 452 (MH+).
Ejemplo 100 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-bencilsulfanil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido [1-(R)-bencilsulfanilmetil-2-oxo-2-(4-fenil-piperidin-1-il)-etil]-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 400 mg (1,28 mmol) de N-t-BOC-S-bencil-D-cisteína y 206 mg (1,28 mmol) de 4-fenilpiperidina y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (9:1 v/v de CHCl_{3}/MeOH), produciendo 572 mg de 100A.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 7,37-7,13 (m, 10H), 5,49 (dd, 1H), 4,81 (dd, 1H), 4,73 (d, 1H), 3,91-3,71 (m, 3H), 3,14-2,92 (m, 1H), 2,80-2,55 (m, 4H), 1,91-1,53 (m, 4H), 1,46 (s, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 456 (MH^{+}).
B. (R)-2-Amino-3-bencilsulfanil-1-(4-fenil-piperidin-1-il)-propan-1-ona
De acuerdo con el Procedimiento General B, se desprotegieron 514 mg (1,13 mmol) del producto de 100A, produciendo 445 mg de 100B.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,44-7,14 (m, 10H), 4,60 (d, 1H), 4,48 (dd, 1H), 3,89 (d, 1H), 3,87 (s, 1H), 3,68-3,63 (m, 1H), 3,21-3,01 (m, 1H), 2,96-2,73 (m, 4H), 1,88-1,73 (m, 2H), 1,67-1,34 (m, 2H). EM (Cl, NH_{3}) 355 (MH+).
C. Éster terc-butílico del ácido {1-[1-(R)-bencilsulfanilmetil-2-oxo-2-[4-fenil-piperidin-1-il-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 78 mg (0,38 mmol) de N-t-Boc-a-metilalanina y 150 mg (0,38 mmol) de 100B y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (19:1 v/v de CHCl_{2}/MeOH), produciendo 212 mg de 100C.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 7,37-7,04 (m, 10H), 5,06 (dd, 1H), 4,96 (s, 1H), 4,70 (d, 1H), 3,85-3,69 (m, 3H), 3,11-2,88 (m, 1H), 2,85-2,77 (m, 1H), 2,74-2,58 (m, 3H), 1,89-1,74 (m, 3H), 1,63-1,54 (m, 2H), 1,50 (s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 540 (MH^{+}).
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-bencilsulfanilmetil-2-oxo-2-(4-fenil-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida
El producto de 100C (153 mg, 0,28 mmol) se disolvió In 4 ml de etanol, se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró, se destiló azeotrópicamente con 3 x MeOH y con 2 x cloruro de metileno, dando 124 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,37-7,19 (m, 10H), 4,97-4,95 (m. 2H), 4,58 (d, 1H), 3,81-3,78 (m, 3H), 3,12-3,01 (m, 1H), 2,86-2,66 (m, 4H), 1,82-1,74 (m, 2H), 1,63 (s, 3H), 1,60 (d, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 440 (MH+).
Ejemplo 101 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[4-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-butil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido {1-metil-1-[4-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-butilcarbamoil]-etil}-carbámico
Se acopló el producto de 62D (116 mg, 0,307 mmol) a 4-fenilpiperidina (49 mg, 0,307 mmol) usando el Procedimiento General A, dando 135 mg de 101A en forma de un aceite. EM (Cl, NH_{3}): 522 (MH+).
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[4-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-butil]-isobutiramida
El producto de 101A (109 mg, 0,209 mmol) se desprotegió de acuerdo con el Procedimiento General C y el producto se purificó sobre gel de sílice (cromatotrón) usando un gradiente de MeOH al 0%/CH_{2}Cl_{2} a MeOH al 100%. El producto se concentró al vacío, se disolvió en 5 ml de MeOH y se le añadieron 0,2 ml de HCl 0,98 N. La solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, se concentró, se destiló azeotrópicamente con 3 x metanol y con 2 x cloruro de metileno y se secó, dando 63 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
^{1}H RMN (d_{4}-MeOH, 300 MHz) (parcial) \delta 7,2 (m, 10H), 4,6 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 2,78 (m, 4H); EM (Cl, NH_{3}): 422 (MH^{+}).
Ejemplo 102 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benciloxi-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-[1-benciloximetil-2-oxo-2-(4-fenil-piperidin-1-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acopló 4-fenilpiperidina (237 mg, 1,47 mmol) con 559 mg (1,47 mmol) del producto de Ejemplo 3. La purificación sobre gel de sílice usando un gradiente de MeOH al 0%/CH_{2}Cl_{2} a MeOH al 1%/CH_{2}Cl_{2} dio 500 mg de un aceite. EM (Cl, NH_{3}): 524 (MH+).
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benciloxi-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil)-isobutiramida
El producto de 102A (480 mg, 0,917 mmol) se disolvió en 12 ml de etanol y se le añadieron 6 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró, se destiló azeotrópicamente con 3 x MeOH y con 2 x cloruro de metileno, dando 369 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca.
^{1}H RMN (d_{4}-MeOH, 300 MHz): \delta 7,25 (m, 9H), 7,05 (d, 1H), 5,15 (t, 1H), 4,6 (d a, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,18 (m, 1H), 2,8 (m, 2H), 1,6 (m, 11H); EM (Cl, NH_{3}): 424 (MH+).
Ejemplo 103 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benzo[b]tiofen-3-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-[2-benzo[b]tiofen-3-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-carbámico
De acuerdo con el Procedimiento General A, se acoplaron 534 mg de ácido (R)-3-benzo[b]tiofen-3-il-2-terc-butoxicarbonilamino-propiónico con 4-fenilpiperidina (268 mg), dando 700 mg de 103A en forma de una espuma incolora.
EM (Cl, NH_{3}): 465 (MH+).
B. (R)-2-Amino-3-benzo[b]tiofen-3-il-1-(4-fenil-piperidin-1-il)-propan-1-ona
El producto del Ejemplo 103A, (740 mg, 1,59 mmol) se disolvió en 12 ml de etanol y se le añadieron 6 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró, se destiló azeotrópicamente con 3 x MeOH y con 2 x cloruro de metileno, dando 528 mg de 103B en forma de un sólido blanco. EM (Cl, NH_{3}): 365 (MH+).
C. Éster terc-butílico del ácido {1-]2-benzo[b]tiofen-3-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
Usando el Procedimiento General A, se acopló N-t-BOC-a-metilalanina (118 mg, 0,581 mmol) con el producto de 103B (233 mg, 0,581 mmol), dando 100 mg de 103C en forma de un aceite.
EM (Cl, NH_{3}): 550 (MH+).
D. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benzo[b]tiofen-3-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida
El producto de 103C (95 mg, 0,173 mmol) se disolvió en 4 ml de etanol y se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentró, se destiló azeotrópicamente con 3 x MeOH y con 2 x cloruro de metileno, dando el compuesto del título en forma de un sólido amarillo claro (67 mg).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) (parcial) \delta 7,9 (m, 2H), 7,41 (m, 3H), 7,19 (m, 4H), 6,9 (d, 1H), 5,35 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 3,9 (t a, 1H), 3,45 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,65 (t a, 1H), 2,49 (m, 2H); EM (Cl, NH_{3}): 450 (MH+).
Ejemplo 104 Clorhidrato de (2-naftalen-1-il-1-[4-(fenil-propionil-amino):piperidin-1-carbonil]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico A. Éster terc-butílico del ácido (R)-4-{2-naftalen-1-il-1-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-carbonil]-etilcarbamoil}-piperidin-1-carboxílico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A (sustituyendo DMF como disolvente en lugar de CH_{2}Cl_{2}), se acoplaron 54 mg (0,23 mmol) de 4-(N-propionilanilino)-piperidina y 99 mg (0,23 mmol) de 78A, dando 165 mg de 104A en forma de un aceite amarillo pálido.
^{1}H RMN (CDCl_{3},250 MHz, parcial) \delta 8,25-8,21 (m, 1H), 7,74-7,71 (m, 1H), 7,50-7,08 (m, 7H), 6,92-6,69 (m, 3H), 5,20-5,12 (m, 1H), 4,50-4,32 (m, 2H), 4,18-4,02 (m, 2H), 3,09-2,85 (m, 2H), 2,72-2,60 (m, 2H), 2,30-2,08 (m, 2H), 1,82-1,73 (m, 2H), 1,41 (s, 9H), 0,92-0,84 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 641 (MH+).
B. Clorhidrato de {2-naftalen-1-il-1-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-carbonil]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico
Se trataron 165 mg (0,23 mmol) de 104A con 2 ml de HCl-dioxano saturado durante 17 horas. La concentración al vacío, seguido de tres concentraciones de 1:5 de MeOH-tolueno proporcionó 108 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz, parcial) \delta 8,13-8,08 (m, 1H), 7,88-6,85 (m, 11H), 5,27-5,19 (m, 1H), 1,88-1,80 (m, 2H), 0,93-0,88 (m, 3H). EM (Cl, NH_{3}) 541 (MH+).
Ejemplo 105 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-naftalen-1-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido (R)-{1-metil-1-[2-naftalen-1-il-1-[4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etilcarbamoil]-etil}-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A (sustituyendo DMF como disolvente en lugar de CH_{2}Cl_{2}), 88 mg (0,55 mmol) de 4-fenilpiperidina y 219 mg (0,55 mmol) de 64A y el producto resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (de 2:1 a 1:1 a 1:2 de hexano-EtOAc), dando 183 mg de 105A en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 250 MHz) \delta 8,46-8,40 (m, 1H), 7,84-7,75 (m, 2H), 7,65-7,59 (m, 1H), 7,51-7,14 (m, 7H), 6,83-6,82 (m, 1H), 5,52-5,47 (m, 1H), 5,05 (s a, 1H), 4,65-4,53 (m, 1H), 3,86-3,75 (m, 1H), 3,34-3,06 (m, 2H), 2,71-2,63 (m, 1H), 2,46-2,18 (m, 2H), 1,91-1,63 (m, 2H), 1,58 (s, 3H), 1,53 (S, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,29-1,26 (m, 2H), 0,83-0,75 (m, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 544 (MH+).
B. Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-naftalen-1-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida
Se trataron 120 mg (0,22 mmol) de 105A con 2 ml de HCl-dioxano saturado durante 17 horas. La concentración al vacío, seguido de tres concentraciones en 1:5 de MeOH-tolueno proporcionó 60 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz, parcial) \delta 8,24-8,12 (m, 1H), 7,91-7,83 (m, 2H), 7,57-7,40 (m, 3H), 7,26-7,10 (m, 5H), 6,81 (d, J = 7,3, 1H), 5,42-5,38 (m, 1H), 4,48-4,40 (m, 1H), 3,68-3,48 (m, 2H), 2,89-2,78 (m, 1H), 2,48-2,39 (m, 2H), 1,63 (s, 6H), 0,98-0,91 (m, 1H), 0,71-0,54 (m, 1H). EM (Cl, NH_{3}) 444 (MH+).
Ejemplo 106 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-(4-fenoxi-piperidin-1-il)-etil)-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 4-fenoxi-piperidin-1-carboxílico
A una solución de 403 mg (2,0 mmol) de N-terc-butoxicarbonil-4-hidroxipiperidina,188 mg (2,0 mmol) de fenol y 525 mg (2,0 mmol) de trifenilfosfina en 50 ml de THF se le añadieron 0,315 ml de azodicarboxilato de dietilo. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. La concentración al vacío y la purificación por cromatografía sobre gel de sílice (10:1 de hexano-EtOAc) proporcionaron 366 mg del compuesto del título en forma de un aceite incoloro.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 7,31-7,21 (m, 2H), 6,97-6,83 (m, 3H), 4,49-4,44 (m, 1H), 3,75-3,66 (m, 2H), 3,38-3,30 (m, 2H), 2,05-1,91 (m, 2H), 1,81-1,72 (m, 2H), 1,47 (s, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 278 (MH+).
B. 4-Fenoxipiperidina
Se trataron 355 mg (1,28 mmol) de 106A con 5 ml de HCl-dioxano saturado durante 16 horas. La concentración al vacío, seguido de la trituración con éter proporcionó 196 mg del compuesto 106B en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD 250 MHz) \delta 7,31-7,26 (m, 2H), 7,00-6,93 (m, 3H), 4,72-4,68 (m, 1H), 3,43-3,35 (m, 2H), 3,25-3,17 (m. 2H), 2,19-2,10 (m, 2H), 2,07-1,99 (m, 2H). EM (Cl, NH_{3}) 178 (MH+).
C. Éster terc-butílico del ácido (R)-(1-metil-1-[1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-(4-fenoxi-piperidin-1-il)-etilcarbamoil]-etil}-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A (sustituyendo DMF como disolvente en lugar de CH_{2}Cl_{2}), se acoplaron 57 mg (0,32 mmol) de 106B y 117 mg (0,29 mmol) de 64A y el producto resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1:1 hexano-EtOAc), dando 126 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CDCl_{3} 250 MHz) \delta 8,46-8,37 (m, 1H), 7,87-7,76 (m, 2H), 7,63-7,59 (m, 1H), 7,53-7,48 (m, 1H), 7,41-7,17 (m, 4H). 6,93-6,89 (m, 1H), 6,76-6,69 (m, 2H), 5,38-5,35 (m, 1H), 4,99 (s a, 1H), 3,78-3,72 (m, 2H), 1,64 (s, 3H), 1,52 (s, 3H), 1,47 (s, 9H). EM (Cl, NH_{3}) 560 (MH+).
D. 2-Amino-N-[1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-(4-fenoxi-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida
A 135 mg de 106C en 2 ml de etanol se le añadieron 2 ml de HCl concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se concentró, se destiló azeotrópicamente con acetonitrilo, se trituró con éter, se filtró y se secó, dando 57 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco. EM (Cl, NH_{3}) 460 (MH+).
Ejemplo 107 Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-(4-fenilamino-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida A. Éster terc-butílico del ácido 4-fenilamino-piperidin-1-carboxílico
Se trataron 1,53 g (7,68 mmol) de BOC-piperidona y 13,4 g (77 mmol) de sulfato sódico en 28 ml de ácido acético con 0,78 ml (8,6 mmol) de anilina. Después de 10 min, se añadieron 8,2 g (39 mmol) de triacetoxiborohidruro sódico. Después de 45 min, la solución se vertió en hielo y se neutralizó mediante la adición en porciones de bicarbonato sódico sólido (aprox. 45 g). La solución resultante se extrajo con cinco porciones de CHCl_{3}; Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (de 10:1 a 5:1 a 2:1 de hexano-EtOAc), proporcionando 1,703 g del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 250 MHz) \delta 7,19-7,13 (m, 2H), 6,73-6,58 (m, 3H), 4,11-4,02 (m, 2H), 3,52-3,40 (m, 2H), 2,98-2,90 (m, 2H), 2,10-2,02 (m, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,42-1,28 (m, 2H).
B. Fenil-piperidin-4-il-amina
Se trataron 124 mg (0,45 mmol) de 107A con 3 ml de HCl-dioxano saturado durante 15 horas. La concentración al vacío, seguido de tres concentraciones en 1:5 de MeOH-tolueno proporcionó 105 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz) \delta 7,66-7,52 (m, 5H), 3,97-3,86 (m, 1H), 3,62-3,50 (m, 2H), 3,16-3,05 (m, 2H), 2,30-2,22 (m, 2H), 2,15-1,98 (m, 2H). EM (Cl, NH_{3})177(MH+).
C. Éster terc-butílico del ácido {1-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-(4-fenilamino-piperidin-1-il)-etilcarbamoil]-1-metil-etil}-carbámico
De acuerdo con el procedimiento descrito en el Procedimiento General A (sustituyendo DMF como disolvente en lugar de CH_{2}Cl_{2}), se acoplaron 100 mg (0,40 mmol) de 107B y 134 mg (0,36 mmol) de 64A y el producto resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (MeOH al 0-2% en CHCl_{3}), dando 205 mg de 107C en forma de un sólido blanco.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 250 MHz, parcial) \delta 8,22-8,14 (m, 1H), 7,71-7,60 (m, 1H), 7,39-7,06 (m, 7H), 6,60-6,52 (m, 1H), 6,52-6,44 (m, 2H), 5,27-5,19 (m, 1H), 4,93 (s a, 1H), 4,38-4,24 (m, 1H), 3,52-3,47 (m, 1H), 3,30-3,08 (m, 3H), 2,68-2,50 (m, 1H), 1,52 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 1,46 (2,9H). EM (Cl, NH_{3}) 548 (MH+).
D. 2-Amino-N-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-(4-fenilamino-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida
Se trataron 197 mg (0,36 mmol) de 107C con 2 ml de HCl-dioxano saturadodurante 15 horas. La concentración al vacío, seguido de tres concentraciones en 1:5 de MeOH-tolueno proporcionó 141 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
1H RMN (CD_{3}OD, 250 MHz, parcial) \delta 7,52-7,30 (m, 8H), 7,15-6,97 (m, 4H), 5,23-5,12 (m, 1H), 4,60-4,52 (m, 1H), 4,00-3,82 (m, 1H), 3,24-3,12 (m, 2H), 1,59 (S.3H), 1,48 (S.3H). EM (Cl, NH_{3}) 448 (MH+).

Claims (8)

  1. \global\parskip0.950000\baselineskip
    1. Un compuesto seleccionado entre el grupo constituido por:
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il}-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
    Clorhidrato de fenilamida del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-(2-(1H-indol-3-il)-1-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil}-etil)-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-{2-(1H-indol-3-il}-1-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
    (R)-N-{2-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida;
    (R)-2-Amino-N-{1-benciloximetil-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-{1-benciloximetil-2-oxo-2-[7-(tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[5-(tolueno-4-sulfonilamino)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    (R)-N-[1-[4-(Acetil-fenil-amino)-piperidin-1-carbonil]-2-(1H-indol-3-il)-etil]-2-amino-isobutiramida;
    Clorhidrato de {2-naftalen-1-il-1-[4-(fenil-propionil-amino)-piperidin-1-carbonil]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(morfolin-4-carbonil)-4-fenil-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-fenil-4-(pirrolidin-1-carbonil)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (4-hidroxi-butil)-amida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    2-Amino-N-{1-(R)-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[4-(2-metil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-[4-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,2-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-[2-[4-(5-cloro-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-benzo[b]tiofen-3-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(5-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(1-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-3-amino-N-{1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida;
    Clorhidrato de {2-[4-(3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-nafatalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benciloxi-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[4-(4-trifluorometil-fenil)-piperidin-1-carbonil]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-[4-(4-fluoro-fenil)-piperidin-1-carbonil]-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(5-fluoro-1H-imdol-3-il)-1-[4-(4-fluoro-fenil)-piperidin-1-carbonil]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-bencilsulfanil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-naftalen-1-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(4-tiofen-2-il-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-[3-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-propil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[4-fenil-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-butil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(4-fenoxi-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(4-bencil-piperidin-1-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida; y
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-(4-fenoxi-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida.
    Clorhidrato de 3-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-3-metil-butiramida;
    Ácido (R)-3-benciloxi-2-(2-terc-butoxicarbonilamino-2-metil-propionilamino)-propiónico;
    Clorhidrato de éster metílico del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
    2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[7-(3-metil-ureido)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    2-Amino-N-(1-(R)-benciloximetil-2-{6-[2-(3-metil-ureido)-fenil]-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il}-2-oxo-etil)-isobutiramida;
    (R)-N-[3-(2-{1-[2-(2-Amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-piperidin-4-il}-etil)-benzo[d]isoxazol-6-il]-benzamida;
    N-[2-(7-Acetilamino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil]-2-amino-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-1,4-dihidro-2H-quinazolin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[6-(2-metanosulfonilamino-fenil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il}-benzamida;
    N-{2-[4-(Acetilamino-metil)-4-fenil-piperidin-1-il]-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil}-2-amino-isobutiramida;
    Clorhidrato (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-il}-benzamida;
    2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-ilmetil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de amida del ácido (R)-1'-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-[1,4']bipipe-
    ridinil-4'-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(5-difenilacetilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de {1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de N-[2-(4-acetil-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(R)-benciloximetil-2-oxo-etil]-2-amino-isobutiramida;
    Clorhidrato de éster etílico del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-hidroxi-4-(4-trifluorometil-fenil)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de ciclohexilamida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato del ácido (R)-2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
    Trifluoroacetato de 2-amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[3-(tolueno-4-sulfonilamino)-pirrolidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida;
    Trifluoroacetato de (R)-N-{1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-benciloxi-propionil]-pirrolidin-3-il}-benzamida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    2-Amino-N-{1-(R)-benciloximetil-2-[4-(2-ciclopropil-5,7-dimetil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-[2-(4-ciano-4-fenil-piperidin-1-il)-1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
    Trifluoroacetato de {1-(R)-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido 1-amino-ciclopentanocarboxílico;
    Trifluoroacetato de 2-amino-N-[1-(R)-benciloximetil-2-(3-difenilacetilamino-pirrolidin-1-il)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
    Trifluoroacetato de (R)-N-{2-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-benciloxi-propionil]-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il}-benzamida;
    (R)-2-Amino-N-{1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[4-(2-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-{3-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-3-oxo-1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-propil}-isobutiramida;
    (R)-2-Amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(1-fenil-1H-indol-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de amida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-1-[2-(2-amino-2-metil-propionilamino)-3-(1H-indol-3-il)-propionil]-4-fenil-piperidin-4-carboxílico;
    Trifluoroacetato de {1-benciloximetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-1-amino-ciclopropanocarboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(4-benciloxi-bencil)-2-oxo-2-[7-tolueno-4-sulfonilamino)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-etil}-isobutiramida;
    Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-(7-amino-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-carbonil]-4-fenil-butil}-isobutiramida;
    Trifluoroacetato de (R)-2-amino-N-{1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-morfolin-4-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
    Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-bifenil-4-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-(1H-indol-3-il)-1-(7-sulfamoil-3,4.dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-(4-indol-1-il-piperidin-1-il)-2-oxo-etil]-isobutiramida;
    Diclorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de 2-amino-N-{1-(6-fluoro-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-bencimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{2-(1H-indol-3-il)-1-[6-(7-sulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de {1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Trifluoroacetato de (R)-2-amino-N-{1-(2-metil-1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de {1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-[4-(2-fenil-bencilimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de {1-naftalen-1-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido de (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-[7-(morfolin-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-oxo-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de [2-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de {2-[4-(2-ciclopropil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-etil}-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de [1-(5-benzoilamino-1,3-dihidro-isoindol-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de [1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-amida del ácido (R)-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[1-(7-etilsulfamoil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carbonil)-2-(1H-indol-3-il)-etil]-isobutiramida;
    Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-(1H.indol-3-il)-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
    Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-naftalen-2-il-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-6-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-dimetilamino-N-{1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de etilamida del ácido (R)-2-{3-naftalen-2-il-2-[(piperidin-4-carbonil)-amino]-propionil}-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-carboxílico;
    Clorhidrato de {1-naftalen-2-ilmetil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-amida del ácido (R)-1-metil-piperidin-4-carboxílico;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-{1-bencil-2-oxo-2-[4-(2-fenil-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-etil}-isobutiramida;
    Clorhidrato de (R)-2-amino-N-[2-benzo[b]tiofen-3-il-1-(4-fenil-piperidin-1-carbonil)-etil]-isobutiramida; y
    (R)-2-Amino-N-[1-(1H-indol-3-ilmetil)-2-oxo-2-(4-fenilamino-piperidin-1-il)-etil]-isobutiramida.
  2. 2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para usar como medicamento.
  3. 3. Uso de una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para aumentar los niveles de la hormona de crecimiento endógena en un ser humano o en un animal.
  4. 4. Una composición útil para aumentar la producción endógena o liberación de la hormona del crecimiento en un ser humano o en un animal, que comprende un vehículo inerte y una cantidad eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.
  5. 5. Una composición útil para aumentar la producción endógena o liberación de la hormona del crecimiento en un ser humano o en un animal, que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 y un secretagogo de la hormona del crecimiento seleccionado entre GHRP-6, hexarelina, GHRP-1, factor de liberación de la hormona del crecimiento (GRF), IGF-1 o IGF-2, o B-HT920.
  6. 6. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir la osteoporosis. 7. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir enfermedades o afecciones que pueden tratarse o prevenirse por la hormona del crecimiento.
  7. 8. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en combinación con un compuesto de bifosfonato para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la osteoporosis.
  8. 9. Un uso de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el compuesto de bifosfonato es alendronato.
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