ES2227203T3 - Metodos para tratar la infeccion por el virus de la hepatitis delta con beta-1-2'-desoxinucleosidos. - Google Patents
Metodos para tratar la infeccion por el virus de la hepatitis delta con beta-1-2'-desoxinucleosidos.Info
- Publication number
- ES2227203T3 ES2227203T3 ES01937785T ES01937785T ES2227203T3 ES 2227203 T3 ES2227203 T3 ES 2227203T3 ES 01937785 T ES01937785 T ES 01937785T ES 01937785 T ES01937785 T ES 01937785T ES 2227203 T3 ES2227203 T3 ES 2227203T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- alkyl
- deoxy
- formula
- erythro
- aryl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
- A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
- A61K31/708—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid having oxo groups directly attached to the purine ring system, e.g. guanosine, guanylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Uso de un 20-desoxi-beta-L-eritro-pentofuranonucleósido de la fórmula **(Fórmula)** o una de sus sales farmacéuticamente aceptable, en la manufactura de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis de un huésped infectado con el virus de la hepatitis D, fórmula en la que R1 se selecciona entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cíclico, CO-alquilo CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquil- sulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado fosfato; y BASE es una base purina o pirimidina que opcionalmente puede estar sustituida.
Description
Métodos para tratar la infección por el virus de
la hepatitis delta con
\beta-L-2'-desoxinucleósidos.
Esta solicitud reivindica la prioridad de la
solicitud provisional de patente U.S. nº. 60/207.538, presentada el
26 de mayo de 2.000.
Esta invención corresponde al área de
composiciones para el tratamiento de un huésped infectado con el
virus de la hepatitis delta (denominada también "HDV"), y a su
uso, que incluye administrar una cantidad efectiva de un
\beta-L-2'-desoxi-nucleósido definido o una de sus sales o prodroga farmacéuticamente aceptable.
\beta-L-2'-desoxi-nucleósido definido o una de sus sales o prodroga farmacéuticamente aceptable.
La hepatitis de tipo D, la forma más severa de la
hepatitis viral, está causada por la infección con el virus de la
hepatitis delta (HDV), un satélite subviral del virus de la
hepatitis B (HBV) (Smedile, A. y otros, Prog Liver Dis 1994, 12,
157-75). Comparada con otros agentes de la hepatitis
viral, la infección aguda con HDV está asociada, más
frecuentemente, con la hepatitis fulminante, una forma rápidamente
progresiva, a menudo fatal, de la enfermedad en la que se destruyen
cantidades masivas del hígado. Típicamente, la hepatitis crónica de
tipo D se caracteriza por lesiones necroinflamatorias, similares a
la HBV crónica, pero más severas, y frecuentemente progresa a
cirrosis y fallo hepático, siendo la causa de una asociación
desproporcionada de infección crónica por HDV con enfermedad
terminal hepática (Smedile, A. y otros, Prog Liver Dis 1994, 12,
157-75; Rizetto, M y otros, Ann Intern Med 1983, 98,
437-41). Aunque la infección con HDV afecta a menos
individuos que la de HBV sola, el fallo hepático agudo o crónico
resultante es una indicación común para el trasplante de higado en
Europa así como en Norteamérica (Smedile, A. y Rizetto, M, Int J
Clin Lab Res 1992, 22, 211-215; Wright, T.L. y
Pereira, B., Liver Transplant Suregery, 1995, 1,
30-42). La enfermedad crónica afecta a 15 millones
de personas en el mundo, de las que aproximadamente 70.000 están en
EE.UU. El Centro para Control de Enfermedades estima en 1.000
muertes al año por infección con HDV en EE.UU (Alter, M.J. y
Hadler, S.C., Prog Clin Bio Res 1993, 382, 243-250;
Alter, M.J. y Mast, E.E. Gastroenterol Clin North Am, 1994, 23,
437-55.)
Actualmente no hay una terapia efectiva,
generalmente aceptada, para la hepatitis de tipo D y el trasplante
de hígado es la única opción para la enfermedad hepática en la
etapa terminal. Aunque el interferón alfa ha tenido un éxito
moderado en el tratamiento de algunos casos de hepatitis de tipo D,
la necesidad de mejores opciones de tratamiento está indicada por
las dosis muy altas requeridas, las respuestas variables, las
frecuentes recividas al cesar el tratamiento y las dificultades en
la administración del fármaco (Thomas, H.C. y otros, Prog Clin Biol
Res, 1987, 234, 277-90; Hoofnagle, J. y otros, Prog
Clin Biol Res, 1987, 234, 291-8; Rosina, F. y
otros, Prog Clin Biol Res, 1987, 234, Rosina, F. y otros,
Hepatology, 1991, 13, 1052-6; Farci, P. y otros, N
Engl J Med, 1994, 330, 88-94; Hadziyannis, S.J., J
Hepatol 1991, 13 (Supl. 1) S21-6; Di Marco, V. y
otros, J. Viral Hepat 1996, 3, 123-8; Porres, J.C. y
otros, J Hepatol 1989, 9, 338-44).
El virión de HDV está compuesto por un núcleo de
ribonucleoproteína y una envoltura. El núcleo contiene RNA de HDV y
antígeno de hepatitis delta (HDAg), que es la única proteína
codificada por el virus (Wang, K.S. y otros, Nature, 1986, 323,
508-14). La envoltura está formada por la proteína
superficial del antígeno (antígeno superficial de la hepatitis B, o
HBsAg) del virus del favorecedor, hepatitis B (Bonino, F., Infect
Immun 1984, 43, 1000-5; Bonino, F. y otros,
Hepatology, 1981, 1, 127-31; Bonino, F. y otros, J.
Virology, 1986, 58, 945-50). La envoltura es la
única función de ayuda que tiene el HBV. El HDV es capaz de
replicar su RNA dentro de las células en ausencia de HBV (Kuo, M.Y.
y otros, J. Virol 1989, 63, 1945-50), pero requiere
el HBsAg para el empaquetado y liberación de los viriones de HDV
(Wu, J.C. y otros, J Virol 1991, 65, 1099-104; Ryu,
W.S. y otros, J Virol 1992, 66, 2310-2315) así como
para ser infectivo (Sureau, C. y otros, J Virol, 1992, 66,
1241-5). Como resultado de la dependencia de HDV
sobre el HBV el HDV infecta los individuos sólo en asociación con
el HBV.
La lamivudina
(\beta-L-2',3'-didesoxi-3'-tiacidina,
3TC) es un nucleósido sintético que han demostrado ser efectivo
para tratar la infección por HIV y HBV. Véase la patente U.S. nº.
5.539.116, expedida a Liotta y otros. Se sabe que la lamivudina
causa una supresión sostenida de la replicación de HBV durante el
tratamiento (Nevens, F. y otros, Gastroenterology, 1997, 113,
1258-1263). Sin embargo, la lamiduvina no mejora la
actividad de la enfermedad ni rebaja los niveles de
HDV-RNA en pacientes con hepatitis delta crónica
(Lau, D.T, y otros, Hepatology, 1999, 30, 546-9).
Recientemente se ha aprobado en EE.UU. y en varios otros países la
lamivudina para el tratamiento de la infección crónica por HBV. Un
tratamiento prolongado de vehículos crónicos de HBV con lamivudina
conduce a niveles rebajados de HBV en suero y una histología
mejorada del hígado (Lai, C.L. y otros, N Engl J Med, 1998, 339,
61-8; Tyrrell, D. y otros, Hepatology 1993, 18,
112A; Nevens, F. y otros, Gastroenterology, 1997, 113,
1258-63; Dienstag, J.L. y otros, N Engl J Med,
1995, 333, 1657-61). A pesar de los efectos
espectaculares sobre el HBV, el tratamiento con lamivudina de
pacientes con infección crónica con HBV y HDV tiene poco efecto
sobre los niveles de HDV en circulación; y, lo que es más
importante, no hay mejora de la actividad sobre la enfermedad aún
cuando se supriman los niveles de HBV (Honkoop, P. y otros,
Hepatology, 1997, 24 (Supl.), 1219 (resumen), Lau, D.T. y otros,
Hepatology, 1999, 30, 546-9).
Se han intentado formas adicionales de
tratamiento. Por ejemplo, la suramina in vitro bloquea la
entrada del virión en hepatocitos, pero es demasiado tóxica para
ser aceptable en tratamientos a largo plazo en el hombre (Smedile,
A. y otros, Prog Liver Dis 1994, 12, 157-75). El
aciclovir intensifica la replicación de HDV in vitro
(Smedile, A. y otros, Prog Liver Dis, 1994, 12,
157-75). La ribavirina no afectaba
significativamente a los parámetros virológicos o bioquímicos y
tenía varios efectos secundarios (Smedile, A. y otros, Prog. Liver
Dis, 1994, 12, 157-75). Los análogos sintéticos de
la timosina han sido también inefectivos en el tratamiento de la
infección por HDV (Smedile, A. y otros, Prog Liver Dis, 1994, 12,
157-75).
Ninguno de los tratamientos descritos para la
infección con HDV es generalmente aceptado como efectivo.
A causa de que el virus de la hepatitis de la
marmota america (WHV) está íntimamente relacionado con el HBV (una
homología de ácido nucleico de aprox. 85%), se ha usado ampliamente
como modelo para la infección y
enfermedad con HBV en su huésped natural, la marmota oriental (M. morax) (Gerin, J.L., Gastroenterol Jpn 1990, suplem. 25, 38-42; Tennant, B.C. y otros, Viral Hepatitis and Liver Disease, 1988, 462-464). Se han usado también extensamente marmotas infectadas experimentalmente para análisis y desarrollo de una terapia anti HBV (Zahm, F.E. y otros, Ital J Gastroenterol Hepatol, 1998, 30, 510-6; Tennant, B.C. y otros, Hepatology, 1998, 28, 179-91;
Mason, W.S. y otros, Virology, 1998, 245, 18-32; Korba, B.E. y otros, Hepatology, 1996, 23, 958-63; Hurwitz, S. y otros, Antimicrob Agents Chemother 1998, 42, 2804-2809; Block, T.M. y otros, Nat Med 1998, 4, 610-4; Cullen, J.M. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 1997, 41, 2076-82; Fourel, G. y otros, Nature, 1990, 347, 294-8; Gangemi, J. y otros, Antivir Therap, 1997, 1, 64-70; Genovesi, E.V. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 1998, 42, 3209-17; Korba, B.E. y otros, Antivir Res, 2000, 45, 19-32; Cote, P.J. y otros, Hepatology 2000, 31, 190-200; Korba, B.E. y otros, Antiviral Therapy, 2000, 5(2), 95-104; Korba, B.E. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(6), 1757-60; Korba B.E. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(7), 1964-1969). La eficacia de varios agentes anti HBV usados para tratar la infección crónica producida experimentalmente el marmotas (araAMP, ribavirina, AZT, ACV, 3TC, famciclovir, FTC) ha sido paralela a la eficacia de estos agentes administrados a pacientes con HBV tratados en el transcurso de ensayos clínicos. La similar eficacia observada en marmotas infectadas con WHV y personas infectadas con HBV tratadas con agentes anti HBV demuestra que el modelo animal de la marmota puede servir para diseñar terapias anti HBV en el hombre (Zahm, F.E. y otros, Ital J Gastroenterol Hepatol, 1998, 30, 510-6; Tennant, B.C. y otros, Hepatology, 1998, 28, 179-91; Mason, W.S. y otros, Virology, 1998, 245, 18-32; Hurwitz, S.J. y Otros, Antimicrob Agents, Chemother 1998, 42(11), 2004-2809); Fourel, G. y otros, Nature, 1990, 347, 294-8; Gangemi, J. y otros, Antivir Therap 1997, 1, 64-70; Genovesi, E.V. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 1998, 42, 3209-17; Korba, B.E. y otros, Antivir Res, 2000, 45(1), 19-32; Korba, B.E. y otros, Antiviral Therapy, 2000, 5(2), 95-104). Como el HBV, el WHV puede soportar la formación de partículas de HDV y la infección, y la marmota oriental ha sido un modelo útil para la infección con HDV (negro, F. y otros, J. Virol 1989, 63, 1612-8; Parana, R, Gerard, F., Lesbordes, J.L., Pichoud, C., Vivitski, L., Lyra, L.G. y Trepo, C., J. Hepatol 1995, 22, 468-73; Ciccaglione, A.T. y otros, Arch Virol 1993, Suplem. 8, 15-21; Bergmann, K.F. y otros, J Immunol 1989, 143, 3714-21; Ponzetto, A. y otros, Proc. Natl Acad Sci USA, 1984, 81, 2208-12; Ponzetto, A. y otros, Prog Cilin Biol Res 1987, 234, 37-46).
enfermedad con HBV en su huésped natural, la marmota oriental (M. morax) (Gerin, J.L., Gastroenterol Jpn 1990, suplem. 25, 38-42; Tennant, B.C. y otros, Viral Hepatitis and Liver Disease, 1988, 462-464). Se han usado también extensamente marmotas infectadas experimentalmente para análisis y desarrollo de una terapia anti HBV (Zahm, F.E. y otros, Ital J Gastroenterol Hepatol, 1998, 30, 510-6; Tennant, B.C. y otros, Hepatology, 1998, 28, 179-91;
Mason, W.S. y otros, Virology, 1998, 245, 18-32; Korba, B.E. y otros, Hepatology, 1996, 23, 958-63; Hurwitz, S. y otros, Antimicrob Agents Chemother 1998, 42, 2804-2809; Block, T.M. y otros, Nat Med 1998, 4, 610-4; Cullen, J.M. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 1997, 41, 2076-82; Fourel, G. y otros, Nature, 1990, 347, 294-8; Gangemi, J. y otros, Antivir Therap, 1997, 1, 64-70; Genovesi, E.V. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 1998, 42, 3209-17; Korba, B.E. y otros, Antivir Res, 2000, 45, 19-32; Cote, P.J. y otros, Hepatology 2000, 31, 190-200; Korba, B.E. y otros, Antiviral Therapy, 2000, 5(2), 95-104; Korba, B.E. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(6), 1757-60; Korba B.E. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(7), 1964-1969). La eficacia de varios agentes anti HBV usados para tratar la infección crónica producida experimentalmente el marmotas (araAMP, ribavirina, AZT, ACV, 3TC, famciclovir, FTC) ha sido paralela a la eficacia de estos agentes administrados a pacientes con HBV tratados en el transcurso de ensayos clínicos. La similar eficacia observada en marmotas infectadas con WHV y personas infectadas con HBV tratadas con agentes anti HBV demuestra que el modelo animal de la marmota puede servir para diseñar terapias anti HBV en el hombre (Zahm, F.E. y otros, Ital J Gastroenterol Hepatol, 1998, 30, 510-6; Tennant, B.C. y otros, Hepatology, 1998, 28, 179-91; Mason, W.S. y otros, Virology, 1998, 245, 18-32; Hurwitz, S.J. y Otros, Antimicrob Agents, Chemother 1998, 42(11), 2004-2809); Fourel, G. y otros, Nature, 1990, 347, 294-8; Gangemi, J. y otros, Antivir Therap 1997, 1, 64-70; Genovesi, E.V. y otros, Antimicrob Agents Chemother, 1998, 42, 3209-17; Korba, B.E. y otros, Antivir Res, 2000, 45(1), 19-32; Korba, B.E. y otros, Antiviral Therapy, 2000, 5(2), 95-104). Como el HBV, el WHV puede soportar la formación de partículas de HDV y la infección, y la marmota oriental ha sido un modelo útil para la infección con HDV (negro, F. y otros, J. Virol 1989, 63, 1612-8; Parana, R, Gerard, F., Lesbordes, J.L., Pichoud, C., Vivitski, L., Lyra, L.G. y Trepo, C., J. Hepatol 1995, 22, 468-73; Ciccaglione, A.T. y otros, Arch Virol 1993, Suplem. 8, 15-21; Bergmann, K.F. y otros, J Immunol 1989, 143, 3714-21; Ponzetto, A. y otros, Proc. Natl Acad Sci USA, 1984, 81, 2208-12; Ponzetto, A. y otros, Prog Cilin Biol Res 1987, 234, 37-46).
La dependencia del HDV de su virus favorecedor,
HBV, podría sugerir que al tratamiento con éxito de la infección
soporte por HBV seguiría un tratamiento con éxito de la infección
por HDV, aunque parece que éste no es el caso, como lo revelan
resultados obtenidos recientemente con el fármaco lamivudina
(Glaxo-Wellcome, Inc.) (Honkoop, P. y otros,
Hepatology, 1997, 24 (suplem.), 1219 (resumen); Lau y otros,
Hepatology, 1999, 30, 546-9). El que la lamivudina
no tenga efecto sobre pacientes infectados con
HBV-HDV subraya el papel directo del HDV en la
severidad de la enfermedad en tales pacientes. Aunque la lamivudina
inhibe la replicación de HBV y WHV, no afecta a la producción del
antígeno viral superficial (Lau, D.T., y otros, Hepatology 1999,
30, 546-9; Doong, S.L. y otros, Proc Natl Acad Sci
USA 1991, 88, 8495-9; Korba, B.E. y otros,
Hepatology 2000, 32(4 Pt 1), 807-817; Korba,
B.E. y otros, Hepatology 2000, 31(5),
1165-1175). El ciclo de vida de HBV y otros
representativos de esta familia de virus (por ejemplo, WHV) es
singular en cuanto a que el procedimiento de replicación de copias
genómicas del virus y la producción de proteínas virales (por
ejemplo, antígeno superficiales de HBV o WHV) está regulado
diferencialmente (Ganem, D., Hepadnaviridae, en Fields
Virology, Fields BN, Knipe D.M., Howlet P, ed.,
Lippincott-Raven, 1996, Philadelphia,
2703-2737). Por tanto, los agentes antivirales,
tales como nucleósidos sintéticos (por ejemplo, lamivudina) que
apuntan a dianas polimerasas virales, pueden inhibir
significativamente la replicación de HBV (por ejemplo, medida por
una reducción de viremia), pero no afectan al nivel de mRNA viral o
la producción de proteína viral (medida, por ejemplo, por los
niveles de antígeno superficial de HBV en plasma o suero). Puesto
que la formación de la envoltura viral por la proteína del antígeno
superficial es la única función importante de HBV o WHV para el HDV,
el fallo en la inhibición de la producción de HBsAg puede
desempeñar un papel en el fallo de la lamivudina para afectar a la
replicación de HDV y la enfermedad.
La patente U.S. nº. 5.747.044 describe
polipéptidos inmunógenos de HDV producidos recombinantemente, útiles
como vacunas.
La patente U.S. nº. 5.932.219, expedida a Chiron,
describe el genoma entero del virus de la hepatitis D, una familia
de réplicas de cDNA del genoma de HDV entero, y da cuenta de que
porciones de estas secuencias de cDNA son útiles como sondas para
diagnosticar la presencia de virus en muestras clínicas. La patente
describe también proteínas codificadas por el cDNA que son útiles en
la producción de vacunas. En particular, la patente. U.S. nº.
5.932.219 describe una vacuna para la hepatitis D que incorpora los
polipéptidos virales p24 y p27. La patente U.S. nº. 5.750.350,
expedida a Chiron, reivindica un kit útil para el análisis del
virus de la hepatitis D, que incluye un péptido codificado por ORF
5 del genoma de HDV. La patente U.S. nº. 5.747.044 reivindica una
partícula inmunógena, producida recombinantemente, que genera
anticuerpos contra el HDV, partícula que incluye un polipéptido
inmunógeno codificado dentro de ORF 5 de la secuencia de
nucleótidos de HDV o su complemento.
La patente U.S. nº. 6.020.167, cedida a Medeva
Holdings B.V., describe un método para tratar la hepatitis crónica
y, en particular, la hepatitis B, que incluye administrar una
composición que contiene HBsAg.
La patente U.S. nº. 5.770.584 describe un método
para tratar una infección con virus de hepatitis mediante
administración de lípidos o derivados alquílicos de lípidos.
La patente U.S. nº. 4.619.896 describe un
procedimiento para desenmascarar antígeno delta en la sangre de un
animal, que incluye tratar suero con un tensioactivo y,
opcionalmente, con un agente disociador de
anticuerpo-antígeno. El antígeno delta derivado de
la sangre se usa como agente diagnóstico en la detección y
determinación de diferentes clases de anticuerpos contra el virus de
la hepatitis D.
El registro estatutario H1.345 de invenciones de
EE.UU. describe un método para prevenir o tratar el virus de
hepatitis administrando un inhibidor de
proteína-prenila transferasa.
Sureau y otros, Production of Infectious
Hepatitis Delta Virus In Vitro and Neutralization with
Antibodies against Hepatitis B Virus Pre-S
Antigens, Journal of Virology, 1992, 1241-1245,
describen que partículas de HDV producidas en vitro son
infecciosas y que (i) las partículas infecciosas se revisten con
proteínas de la envoltura de HBV que contienen las regiones
pre-S1 y pre-S2, (ii) epítopos de
los dominios pre-S1 y pre-S2 de las
proteínas de la envoltura de HBV se exponen en la superficie de
partículas de HDV y (iii) que anticuerpos dirigidos frente a esos
epítopos tienen una actividad neutralizante frente al HDV.
Recientemente, se ha dado cuenta de que
L-FMAU es un inhibidor potente de HDV en animales
infectados crónicamente (Casey, J.L. y otros, Antiviral Therapy
2000, 5 (Suplem. 1), 32, resumen 057).
Los nucleósidos sintéticos
\beta-L-2'-desoxicitidina
(\beta-L-2'-dC),
\beta-L-2'-desoxitimidina
(\beta-L-dT) y
\beta-L-2'-desoxi-
adenosina
(\beta-L-2'-dA)
son también conocidos en la técnica. Antonin Holy describió en 1972
por vez primera
\beta-L-dC y \beta-L-dT \beta, Nucleic Acid Components and Their Analogs. CLIII. Preparation of 2'-deoxi-L-Ribonucleosides of the Pyrimidine Series, Collect Czech Chem Commun 1972, 37(12), 4072-87. Morris S. Zedeck y otros describieron por vez primera \beta-L-dA para la inhibición de la síntesis de enzimas inducidas en Pseudomonas testosteroni (Mol Phys 1967, 3(4), 386-95).
\beta-L-dC y \beta-L-dT \beta, Nucleic Acid Components and Their Analogs. CLIII. Preparation of 2'-deoxi-L-Ribonucleosides of the Pyrimidine Series, Collect Czech Chem Commun 1972, 37(12), 4072-87. Morris S. Zedeck y otros describieron por vez primera \beta-L-dA para la inhibición de la síntesis de enzimas inducidas en Pseudomonas testosteroni (Mol Phys 1967, 3(4), 386-95).
Es bien conocido que ciertos
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
tienen actividades antineoplásticas y antivirales seleccionadas.
Verri y otros describen el uso de
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
como agentes antineoplásticos y agentes antiherpes (Mol Pharmacol
1997, 51(1), 132-138 y Biochem J 1997,
328(1), 317-20. Saneyoshi y otros demuestran
el uso de
2'-desoxi-L-ribonucleósidos
como inhibidores inversos de transcriptasa (I) para el control de
retrovirus y para el tratamiento de AIDS, Japanese Kokai Tokyo Koho
JP 06293645 (1994).
Giovanni y otros probaron
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
contra virus parcialmente pseudorrabiosos (PRV) (Biochem J 1993,
294(2), 381-5).
Los usos quimioterapéuticos de
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
fueron estudiados por Tyrsted y otros, Biochem Biophys Acta 1968,
155(2), 612-22 y Bloch y otros, J. Med. Chem
1967, 10(5), 908-12.
La
\beta-L-2'-desoxitimidina
(\beta-L-dT) es conocida en la
técnica para inhibir la timidina quinasa (TK) del virus simple del
herpex tipo 1 (HSV-1). Iotti y otros, en el
documento WO 92/08727 dan cuenta de que
\beta-L-dT inhibe selectivamente
la fosforilación de D-timidina por la
HSV-1 TK, pero no por la TK humana. Spaldari y
otros señalan que la
L-timidina se fosforila por la timidina quinasa del virus de tipo 1 del herpes simple e inhibe el crecimiento viral, J Med Chem 1992, 35(22), 4214-20.
L-timidina se fosforila por la timidina quinasa del virus de tipo 1 del herpes simple e inhibe el crecimiento viral, J Med Chem 1992, 35(22), 4214-20.
Recientemente se han descrito en la técnica los
nucleósidos sintéticos
\beta-L-desoxicitidina
(\beta-L-2'-dC),
\beta-L-2'-desoxitimidina
(\beta-L-dT),
\beta-L-2'-desoxiinosina
(\beta-L-dI) y
\beta-L-2'-desoxiadenosina
(\beta-L-2'-dA)
para el tratamiento del virus de la hepatitis B. Gilles Gosselin y
otros han descrito el uso de
\beta-L-dT,
\beta-L-dA,
\beta-L-dC y
\beta-L-dI y sus sales y prodrogas
farmacéuticamente aceptables para el tratamiento del virus de la
hepatitis B (documento WO 00/09531, PCT/US99/18149).
El documento PCT/US01/09987, presentado por la
Universidad de Georgetown, Universidad Cornell y la Fundación de
Investigación de la Universidad de Georgia, describe que la
administración de un nucleósido o análogo de nucleósido que reduce
sustancialmente el nivel de antígeno superficial de la hepatitis B
(denominada HBsAg en el documento) en un huésped es útil en el
tratamiento de la hepatitis delta por infección viral en ese
huésped. En una realización, el documento PCT/US01/09987 describe
que la
2'-fluoro-5-metil-\beta-L-arabinofuranosiluridina
(L-FMAU) reduce significativamente el nivel de
antígeno superficial de la hepatitis B y es así útil en el
tratamiento de infecciones de hepatitis delta.
A causa del gran número de personas infectadas
con el virus de la hepatitis delta, los efectos devastadores de la
infección con virus delta sobre una persona y la falta de
tratamientos efectivos, hay una necesidad crítica de un medio nuevo
y efectivo para el tratamiento de la infección por el virus de la
hepatitis delta.
Por tanto, es un objetivo de la presente
invención proporcionar un medio para el tratamiento de un huésped,
incluida una persona, infectado con el virus de la hepatitis
delta.
Se describe un uso para el tratamiento de la
infección de la hepatitis delta en personas u otros huéspedes, que
incluye administrar una cantidad efectiva de un
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranucleósido
(denominado aquí
\beta-L-d-nucleósido
o un
\beta-L-2'-d-nucleósido,
alternativamente) o una de sus sales o fármacos farmacéuticamente
aceptable) administrado solo o en combinación o alternación,
opcionalmente en un vehículo farmacéuticamente aceptable. El
término 2'-desoxi, tal como se usa en esta memoria,
se refiere a un nucleósido que no tiene sustituyente en la posición
2'.
Los
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos,
o sus sales o fármacos farmacéuticamente aceptables, o las
formulaciones farmacéuticamente aceptables que contienen estos
compuestos, son útiles en la prevención o tratamiento de
infecciones de la hepatitis D y otras dolencias afines tales como
inflamación crónica del hígado por HDV, cirrosis, hepatitis aguda,
hepatitis fulminante, hepatitis crónica persistente y fatiga. Estos
compuestos o formulaciones se pueden usar también,
profilácticamente, para prevenir o retardar el progreso de una
enfermedad clínica en individuos que están infectados con HDV o que
han sido expuestos al HDV.
En una realización de la presente invención, el
derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es un compuesto de la fórmula
en la que cada R^{1} se
selecciona entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena
lineal, ramificada o cíclico,
CO-alquilo, CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de fosfato; y
CO-alquilo, CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de fosfato; y
BASE es una base purina o pirimidina que
opcionalmente puede estar sustituida.
En otra realización de la presente invención, el
derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxipurina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula
en la que R^{1} se selecciona
entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena lineal,
ramificada o cílico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato;
Y es OR^{3}, NR^{3}R^{4} o SR^{3};
X^{1} y X^{2} se seleccionan
independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo de
cadena lineal, ramificada o cíclico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
halógeno, OR^{5}, NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} son,
independientemente, H, alquilo de cadena lineal, ramificada o
cílico, CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato.
En una realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxiadenosina.
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En una realización preferente, R^{1} es H.
En otra realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxiguanosina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En otra realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxinosina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En otra realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxipirimidina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} se selecciona
entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena lineal,
ramificada o cílico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato;
Y es OR^{3}, NR^{3}R^{4} o SR^{3};
X^{1} se selecciona entre el grupo constituido
por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cíclico,
CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo, halógeno, OR^{5}, NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
CO-arilo, CO-alcoxialquilo, halógeno, OR^{5}, NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} son,
independientemente, H, alquilo de cadena lineal, ramificada o
cílico, CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato.
En una realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxicitidina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En una realización preferente, R^{1} es H.
En otra realización, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxiuridina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es mono-, di- o
trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado (para
formar un profármaco de nucleótido
estabilizado).
En otra realización, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es \beta-L-timidina, o una de sus
sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la fórmula:
en la que R^{1} es mono-, di- o
trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado (para
formar un profármaco nucleótido
estabilizado).
En una realización preferente, R^{1} es H.
En otra realización, el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido,
o su sal o profármaco farmacéuticamente aceptable, se administra
alternativamente o en combinación con uno o más
2'-desoxi-\beta-L-pentafuranonucleósidos,
o una o más de sus sales o profármacos farmacéuticamente
aceptables, o uno o más compuestos que exhiben actividad frente al
virus de la hepatitis D. Por lo general, durante la terapia de
alternación, se administra serialmente una cantidad efectiva de
cada agente, mientras que, en la terapia de combinación, se
administra junta una dosis de dos o más agentes. Las dosis
dependerán de las velocidades de absorción, inactivación o
excreción del fármaco así como de otros factores conocidos por los
expertos en la técnica. Ha de señalarse que los valores de la dosis
variarán también con la severidad de la dolencia a aliviar. Ha de
señalarse, además, que para cualquier sujeto particular, se deben
ajustar en el tiempo regímenes y programas específicos de
dosificación de acuerdo con la necesidad individual y el criterio
profesional de la persona que administra o supervisa la
administración de las composiciones.
En otra realización, la invención incluye un
método para el tratamiento de personas infectadas con HDV, que
incluye administrar una cantidad para tratar el HDV de una prodroga
de los derivados
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos.
Un profármaco, tal como se usa aquí, se refiere a un compuesto que
se convierte en el nucleósido al administrarlo in vivo. Entre
los ejemplos no limitativos están incluidos sales farmacéuticamente
aceptables (denominadas, alternativamente, "sales
fisiológicamente aceptables"), la 5',N^{4} (citidina) y/o
N^{6} (adenosina) acilada o derivados alquilados del compuesto
activo, el 5'-fosfolípido y/o los 5'-éter lípidos
del compuesto activo.
En una realización preferente, el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
está en forma de una prodroga farmacéuticamente aceptable en la que
el 5'-hidroxilo está aciclado con un aminoácido. En
una realización más preferente, el aminoácido es valina.
La Figura 1 ilustra un procedimiento general para
obtener
\beta-L-eritro-pentafuranonucleósidos(\beta-L-dN)
usando
L-ribosa o L-xilosa como material de partida.
L-ribosa o L-xilosa como material de partida.
La Figura 2 ilustra un ejemplo no limitativo de
la síntesis de L-desoxiadenosina usando
L-ribosa como material de partida.
La Figura 3 ilustra un ejemplo no limitativo de
la síntesis de
\beta-L-dC(3a) y
\beta-L-dT(3b) usando
L-arabinosa como material de partida.
La Figura 4 es un gráfico que ilustra el
metabolismo de L-dA, L-dC y
L-dT en células HepG2 humanas en términos de
acumulación y decaimiento. Las células se incubaron con 10 \muM de
compuesto.
La Figura 5 es un gráfico que ilustra el efecto
antiviral de \beta-L-dA,
\beta-L-dT y
\beta-L-dC en el modelo de
hepatitis crónica marmota.
Se describe el uso de un
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
para la manufactura de un medicamente para el tratamiento de la
infección hepatitis delta en seres humanos y otros huéspedes, que
comprende administrar una cantidad efectiva de un
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
(denominado alternativamente aquí
\beta-L-d-nucleósido
o
\beta-L-2'-d-nucleósido),
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable,
administrado solo o en combinación, opcionalmente en un vehículo
farmacéuticamente aceptable. El término 2'-desoxi,
tal como se usa en esta memoria, se refiere a un nucleósido que no
tiene sustituyente en la posición 2'.
Los
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
descritos, o sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptables, o
las formulaciones farmacéuticamente aceptables que contienen estos
compuestos, son útiles en la prevención y tratamiento de las
infecciones de hepatitis D y otras dolencias afines tales como
inflamación crónica del hígado causada pr el HVD, cirrosis,
hepatitis aguda, hepatitis fulminante, hepatitis crónica
persistente y fatiga. Estos compuestos o formulaciones pueden
usarse también para prevenir o retardar el progreso de una
enfermedad clínica en individuos infectados con HVD o que han sido
expuestos al HVD.
En una realización de la presente invención, el
derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es un compuesto de la fórmula:
en la que cada R^{1} se
selecciona entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena
lineal, ramificada o cílico,
CO-alquilo, CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de fosfato; y
CO-alquilo, CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de fosfato; y
BASE es una base purina o pirimidina que
opcionalmente puede ser sustituida.
En otra realización de la presente invención, el
derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxipurina
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} se selecciona
entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena lineal,
ramificada o cílico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato;
Y es OR^{3}, NR^{3}R^{4} o SR^{3};
X^{1} y X^{2} se seleccionan
independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo de
cadena lineal, ramificada o cíclico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
halógeno, OR^{5}, NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} son,
independientemente, H, alquilo de cadena lineal, ramificada o
cílico, CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato.
En una realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxiadenosina
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo, o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizada).
En una realización preferente, R^{1} es H.
En otra realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxiguanosina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} H, es mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En otra realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxinosina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En otra realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxipirimidina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
en la que R^{1} se selecciona
entre el grupo constituido por H, alquilo de cadena lineal,
ramificada o cílico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato;
Y es OR^{3}, NR^{3}R^{4} o SR^{3};
X^{1} y X^{2} se seleccionan
independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo de
cadena lineal, ramificada o cíclico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
halógeno, OR^{5}, NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} son,
independientemente, H, alquilo de cadena lineal, ramificada o
cílico, CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato.
En una realización particular, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxicitidina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar un fármaco nucleótido
estabilizado).
En una realización preferente, R^{1} es H.
En otra realización, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-desoxiuridina,
o una de sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar un profármaco de nucleótido
estabilizado).
En otra realización, el derivado
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es
\beta-L-2'-timidina,
o una de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptable, de la
fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{1} es H, mono-, di-
o trifosfato, acilo, alquilo o un derivado fosfato estabilizado
(para formar una prodroga de nucleótido
estabilizado).
En una realización preferente, R^{1} es H.
En otra realización, el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido,
o su sal o prodroga farmacéuticamente aceptable, se administra en
alternación o en combinación con uno o más
2'-desoxi-\beta-L-pentafuranonucleósidos,
o una o más de sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptables,
o uno o más compuestos que exhiben actividad frente al virus de la
hepatitis D. Por lo general, durante la terapia de alternación, se
administra serialmente una cantidad efectiva de cada agente,
mientras que, en la terapia de combinación, se administra junta una
dosis de dos o más agentes. Las dosis dependerán de las velocidades
de absorción, inactivación o excreción del fármaco así como de otros
factores conocidos por los expertos en la técnica. Ha de señalarse
que los valores de la dosis variarán también con la severidad de la
dolencia a aliviar. Ha de señalarse, además, que para cualquier
sujeto particular se deben ajustar en el tiempo regímenes y
programas específicos de dosificación de acuerdo con la necesidad
individual y el criterio profesional de la persona que administra o
supervisa la administración de las composiciones.
En otra realización, la invención incluye un
método para el tratamiento de personas infectadas con HDV, que
incluye administrar una cantidad para tratar el HDV de una prodroga
o de los derivados
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos.
Una prodroga, tal como se usa aquí el término, se refiere a un
compuesto que se convierte en el nucleósido al administrarlo in
vivo. Entre los ejemplos no limitativos están incluidos sales
farmacéuticamente aceptables (denominadas, alternativamente,
"sales fisiológicamente aceptables"), la 5',N^{4} (citidina)
y/o N^{6} (adenosina) acilada o derivados alquilados del
compuesto activo, el 5'-fosfolípido y/o los 5'-éter
lípidos del compuesto activo.
En una realización preferente, el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
está en forma de una prodroga farmacéuticamente aceptable en el que
el 5'-hidroxilo está aciclado con un aminoácido. En
una realización más preferente, el aminoácido es valina.
Como se muestra seguidamente, un nucleósido
contiene al menos dos átomos de carbono (*) quirales críticos.
Generalmente, los sustituyentes sobre los carbonos quirales [la
base purina o pirimidina especificada (designado como sustituyente
C1 cuando se usa la numeración del intermedio del anillo de azúcar)
y CH_{2}OH (designado sustituyente C4)] del nucleósido pueden ser
cis (en el mismo lado) o trans (en lados opuestos) con respecto al
sistema del anillo del azúcar. Tanto las modificaciones isómeras
cis como las trans constan de un par de isómeros ópticos. Por
tanto, cada compuesto tiene cuatro estereoisómeros individuales.
Los cuatro estereoisómeros están representados por las
configuraciones siguientes (cuando se orienta el resto de azúcar en
un plano horizontal de menera que el resto -O- esté en la parte
posterior): (1) cis, con ambos grupos "arriba", que se
denomina \beta-D; (2) imagen del espejo, esto es,
cis con ambos grupos "abajo", que es la imagen del espejo
denominada \beta-L; (3) trans, con el
sustituyente C4 "arriba" y el sustituyente C1 "abajo"
(denominado \alpha-D; y (4) trans, con el
sustituyente C4 "abajo" y el sustituyente C1 "arriba"
(denominado \alpha-L:). Los dos enantiómeros cis
juntos se denominan mezcla racémica de los enantiómeros \beta, y
los dos enantiómeros trans se denominan mezcla racémica de
enantiómeros \alpha.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Seguidamente se ilustran los cuatro
estereoisómeros posibles de los compuestos reivindicados.
Tal como se usa aquí, el término
"sustancialmente en forma de un isómero individual" o "en
forma aislada" se refiere a un
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
que está en al menos aproximadamente 95% y, preferiblemente, en al
menos 98% o 99% en la subconfiguración designada. En una
realización preferente, el compuesto activo se administra con al
menos este nivel de pureza al huésped necesitado de la terapia.
Tal como se usa aquí, el término hepatitis D y
dolencias afines se refiere a la infección de la hepatitis D,
inflamación crónica del hígado asociada con HDV, cirrosis,
hepatitis aguda, hepatitis fulminante, hepatitis crónica persistente
y fatiga. El método de la presente invención incluye el uso de
derivados
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos,
sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptables,
profilácticamente para prevenir o retardar el progreso de una
enfermedad clínica en individuos que están infectados con HBV o que
han sido expuestos al HBV.
Tal como se usa aquí, el término alquilo, a no
ser que se especifique lo contrario, se refiere a un hidrocarburo
saturado de cadena lineal, ramificada o cíclico, primario,
secundario o terciario, típicamente de C_{1-18},
preferiblemente C_{1-6} e incluye, específicamente
aunque no exclusivamente, metilo, trifluorometilo, etilo, propilo,
butilo, pentilo, hexilo, isopropilo, isobutilo,
s-butilo, t-butilo, isopentilo,
amilo, t-pentilo, ciclopentilo y ciclohexilo. El
grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido con uno o más
restos seleccionados entre el grupo constituido por hidroxilo,
amino, alquilamino, arilamino, alcoxi, ariloxi, nitro, ciano, ácido
sulfónico, sulfato, ácido fosfónico, fosfato o fosfonato, protegido
o no protegido según sea necesario, como lo conocen los expertos en
la técnica según se expone, por ejemplo, por Greene y otros en
Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons,
2ª edición, 1991, que se incorpora aquí por referencia.
Tal como se usa aquí, el término acilo se refiere
a un resto de fórmula -C(O)R', en la que R' es
alquilo, arilo, arilalquilo, heteroaromático, alcoxialquilo
(incluido metoximetilo), arilalquilo (incluido bencilo),
ariloxialquilo (tal como fenoximetilo) o arilo (incluido fenilo)
opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo
C_{1-4} o alcoxi C_{1-4}, o el
resto de un aminoácido. El término acilo incluye específicamente,
pero no exclusivamente, acetilo, propionilo, butirilo, pentanoílo,
3-metilbutirilo, hidrogenosuccinato,
3-clorobenzoato, benzoílo, acetilo, pivaloílo,
mesilato, propionilo, valerilo, caproico, caprílico, cáprico,
laúrico, mirístico, palmítico, esteárico y oleico, y también puede
ser un resto de aminoácido.
Tal como se usa aquí, el término base purina o
pirimidina incluye, aunque no únicamente, adenina,
N^{6}-alquilpurinas,
N^{6}-acilpurinas (en las que acilo es
C(O)(alquilo, arilo, alquilarilo o arilalquilo),
N^{6}-bencilpurina,
N^{6}-halopurina,
N^{6}-vinilpurina, N^{6}-purina
acetilénica, N^{6}-acilpurina,
N^{6}-hidroxialquilpurina,
N^{6}-tioalquilpurina,
N^{2}-alquilpurinas,
N^{2}-alquil-6-tiopurinas,
timina, cistosina, 5-fluorocistosina,
5-metilcistosina, 6-azapirimidina,
incluida 6-azacistosina, 2- y/o
4-mercaptopirimidina, uracilo,
5-halouracilo, incluido
5-fluorouracilo,
C^{5}-alquilpirimidinas,
C^{5}-bencilpirimidinas,
C^{5}-halopirimidinas,
C^{5}-vinilpirimidina,
C^{5}-pirimidina acetilénica,
C^{5}-acilpirimidina,
C^{5}-hidroxialquilpurina,
C^{5}-amidopirimidina,
C^{5}-cianopirimidina,
C^{5}-nitropirimidina,
C^{5}-aminopirimidina,
N^{2}-alquilpurinas,
N^{2}-alquil-6-tiopurinas,
5-azacitidinilo, 5-azauracililo,
triazolpiridinilo, imidazolopiridinilo,
pirrolo-pirimidinilo y pirazolopirimidinilo.
Entre los ejemplos de bases están incluidas
citosina, 5-fluorocistosina,
5-bromocistosina, 5-yodocistosina,
5-clorocitosina, uracil,
5-fluorouracil, 5-bromouracil,
5-yodouracil, 5-metiluracil, timina,
adenina, guanina, inosina, xantina,
2,6-diaminopurina, 6-aminopurina,
6-cloropurina y 2,6-dicloropurina,
6-bromopurina, 2,6-dibromopurina,
6-yodopurina, 2,6-diyodopurina,
hipoxantina, 2-(Br, Fl, Cl o I)-purina
opcionalmente con un sustituyente que incluye un grupo amino o
carboxilo en la posición 6, y 6-(Br, Cl o I) -purina opcionalmente
con un sustituyente que incluye un grupo amino o carbonilo en la
posición 2, 5-bromovinilcitosina,
5-bromoviniluracilo,
5-bromoetenilcitosina,
5-bromoeteniluracilo,
5-trifluorometilcitosina y
5-trifluorometiluracilo.
El término prodroga, tal como se usa aquí, se
refiere a un compuesto que se convierte en el nucleósido al
administrarlo in vivo. Son ejemplos no limitativos, sales
farmacéuticamente aceptables (alternativamente denominadas "sales
fisiológicamente aceptables"), los derivados 5' y/o los N^{4} o
N^{6} acilados o alquilados del compuesto activo y los derivados
5'-fosfolípido y 5'-eter lípido del
compuesto activo.
El término huésped, tal como se usa aquí, se
refiere a un organismo unicelular o multicelular en el que puede
replicar el virus, incluidas líneas celulares y animales,
preferiblemente personas. Alternativamente, el huésped puede portar
una parte del genoma viral de la hepatitis delta, cuya replicación o
función puede alterarse por los compuestos de la presente
invención. El término huésped se refiere específicamente a células
infectadas, células transfectadas con la totalidad o una parte del
genoma de HDV y animales, en particular, primates (incluidos
chimpancés) y seres humanos. En la mayor parte de las aplicaciones
de la presente invención en animales, el huésped es un paciente
humano. La presente invención, sin embargo, anticipa claramente
ciertas aplicaciones veterinarias, en ciertas indicaciones (como
chimpancés).
Tal como se usa aquí, el término sales o
complejos farmacéuticamente aceptables se refiere a sales o
complejos de los
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
que retienen la actividad biológica deseada del compuesto madre y
exhiben mínimos efectos tóxicos, si los ejercen. Entre los ejemplos
no limitativos de tales sales están (a) sales de adición de ácido
formadas con ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido clorhídrico,
ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico,
etc.) y sales formadas con ácidos orgánicos tales como ácido
acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido
málico, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido tánico, ácido
palmoico, ácido algínico, ácido poliglutámico, ácidos
naftalenosulfónicos, ácidos naftalenodisulfónicos y ácido
poligalacturónico; (b) sales de adición de base formadas con
cationes tales como sodio, potasio, zinc, calcio, bismuto, bario,
magnesio, aluminio, cobre, cobalto, níquel, cadmio, sodio potasio,
etc., o con un catión orgánico formado a partir de
N,N-dibenciletilendiamina, amonio o etilendiamina; o
(c) combinaciones de (a) y (b), por ejemplo, una sal tanato de
zinc, etc.
Los
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
se pueden proporcionar como un 5'-fosfolípido o
5'-eterlípido, según se describe en las siguientes
referencias: Kucera, L.S., Lyer, N, Leake, R., Raben, A., Modest,
E.J., D.L.W y Piantadosi, C., Novel membraneinteractive ether
lipid analogs that inhibit infectious HIV-1
production and induce defective virus formation, AIDS Res Hum
Retroviruses, 1990, 6, 491-501; Piantadosi, C.J.,
Marasco, C.J., S. L. Morris-Natschke, K.L. Meyer,
F. Gumus, J.R. Surles, K.S. Ishaq, L.S. Kucera, N. Lyer, C.A.
Wallen, S. Piantadosi y E.J.
Modest, Synthesis and evaluation of novel ether lipid nucleoside conjugates for anti-HIV activity, J. Med. Chem., 1991, 34, 1408-1414; Hostetler, K.Y., Richman, D.D., Carson, D.A., Stuhmiller, L.M., van Wijk, G.M.T. y van den Bosch, H, Greatly enhanced inhibition of human immunodificiency virus type 1 replication in CEM and HT-4-cells by 31-deoxithymidine diphosphate dimiristoil- glycerol, a lipid prodrug of 31-deoxythymidine, Antimicrob. Agents Chemoter, 1992, 36, 2025-2029; Hostetler, K.Y., Stuhmiller, L.M. Lenting, H.B., van den Bosch, H y Richman, D.D., Synthesis and antiretroviral activity of phospholipid analogs of azidothymidine and other antiviral nucleosides, J. Biol. Chem., 1990, 265, 6112-7.
Modest, Synthesis and evaluation of novel ether lipid nucleoside conjugates for anti-HIV activity, J. Med. Chem., 1991, 34, 1408-1414; Hostetler, K.Y., Richman, D.D., Carson, D.A., Stuhmiller, L.M., van Wijk, G.M.T. y van den Bosch, H, Greatly enhanced inhibition of human immunodificiency virus type 1 replication in CEM and HT-4-cells by 31-deoxithymidine diphosphate dimiristoil- glycerol, a lipid prodrug of 31-deoxythymidine, Antimicrob. Agents Chemoter, 1992, 36, 2025-2029; Hostetler, K.Y., Stuhmiller, L.M. Lenting, H.B., van den Bosch, H y Richman, D.D., Synthesis and antiretroviral activity of phospholipid analogs of azidothymidine and other antiviral nucleosides, J. Biol. Chem., 1990, 265, 6112-7.
El
2-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
se puede convertir en un éster farmacéuticamente aceptable por
reacción con un agente esterificante apropiado, por ejemplo, un
haluro de ácido o un anhídrido. El nucleósido o su profármaco
farmacéuticamente aceptable se puede convertir de manera
convencional en una de sus sales farmacéuticamente aceptable, por
ejemplo, por tratamiento con una base o un ácido apropiado. El
éster o la sal se puede convertir en el nucleósido madre mediante,
por ejemplo, hidrólisis.
Las modificaciones de los compuestos activos,
específicamente en las posiciones N^{4}, N^{6} y
5'-O, pueden afectar a la biodisponibilidad y la
velocidad de metabolismo de las especies activas, proporcionando
así un control del suministro de las especies activas.
Una realización preferente de la presente
invención es un método para el tratamiento de infecciones por HDV
en personas u otros animales huésped, que incluye administrar una
cantidad efectiva de uno o más derivados de
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos seleccionados entre el grupo constituido por \beta-L-2'-desoxiadenosina,
\beta-L-2'-desoxicitidina, \beta-L-2'-desoxiuridina, \beta-L-2'-guanosina, \beta-L-2'-desoxiinosina y \beta-L-2'-desoxitimidina, o una de sus prodrogas fisiológicamente aceptable, incluidos un fosfato, un derivado 5' y/o N^{4} o N^{6} alquilado o acilado, o una de sus sales fisiológicamente aceptable, opcionalmente en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de esta invención poseen una actividad anti HDV directa o se metabolizan a un compuesto o varios compuestos que
exhiben actividad anti HDV. En una realización preferente, el 2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido se administra sustancialmente en forma de un isómero único, esto es, con como mínimo 95% de la estereoconfiguración indicada.
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos seleccionados entre el grupo constituido por \beta-L-2'-desoxiadenosina,
\beta-L-2'-desoxicitidina, \beta-L-2'-desoxiuridina, \beta-L-2'-guanosina, \beta-L-2'-desoxiinosina y \beta-L-2'-desoxitimidina, o una de sus prodrogas fisiológicamente aceptable, incluidos un fosfato, un derivado 5' y/o N^{4} o N^{6} alquilado o acilado, o una de sus sales fisiológicamente aceptable, opcionalmente en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de esta invención poseen una actividad anti HDV directa o se metabolizan a un compuesto o varios compuestos que
exhiben actividad anti HDV. En una realización preferente, el 2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido se administra sustancialmente en forma de un isómero único, esto es, con como mínimo 95% de la estereoconfiguración indicada.
Cualquiera de los nucleósidos descritos aquí se
puede administrar como prodroga estabilizada para aumentar la
actividad, biodisponibilidad, estabilidad u otras propiedades que
alteran el nucleósido. Se conocen varios ligandos prodroga de
nucleótidos. Por lo general, la alquilación, acilación u otra
modificación lipófila del mono-, di- o trifosfato del nucleósido
aumentará la estabilidad del nucleósido. Son ejemplos de grupos
sustituyentes que pueden reemplazar uno o más hidrógenos en el
resto de fosfato, alquilo, arilo, esteroides, carbohidratos
(incluidos azúcares), 1,2-diacilglicerol y
alcoholes. Muchos han sido descritos por R. Jones y N.
Bischofberger, Antiviral Research, 1995, 27, 1-17.
Cualquiera de éstos se puede usar en combinación con los
nucleósidos descritos para conseguir el efecto deseado.
En una realización, el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
se proporciona como profármaco lipófilo
5'-hidroxilo. Entre los ejemplos no limitativos de patentes U.S. que describen sustituyentes lipófilos adecuados que se pueden incorporar covalentemente al nucleósido, preferiblemente en la posición 5'-OH del nucleósido o las preparaciones lipofílicas, están incluidas las patentes U.S. nos. 5.149.794 (2 sept. 1992, exped. a Yatvin y otros), 5.194.654 (16 marzo, 1993, exped. a Hostetler y otros,), 5.223.263, (29 junio 1993, exped. a Hostetler y otros), 5.256.641 (26 octubre 1993, exped. a Yatvin y otros); 5.411.957 (2 mayo 1995, exped. a Hostetler y otros), 5.463.092 (31 octubre 1995, exped. a Hostetler y otros), 5.543.389 (6 agosto 1996, exped. a Yatvin y otros), 5.543.390 (6 agosto 1996, exped. a Yatvin y otros), 5.543.391 (6 agosto 1996, exped. a Yatvin y otros) y 5.554.728 (10 septiembre 1996, exped. a Basava y otros).
5'-hidroxilo. Entre los ejemplos no limitativos de patentes U.S. que describen sustituyentes lipófilos adecuados que se pueden incorporar covalentemente al nucleósido, preferiblemente en la posición 5'-OH del nucleósido o las preparaciones lipofílicas, están incluidas las patentes U.S. nos. 5.149.794 (2 sept. 1992, exped. a Yatvin y otros), 5.194.654 (16 marzo, 1993, exped. a Hostetler y otros,), 5.223.263, (29 junio 1993, exped. a Hostetler y otros), 5.256.641 (26 octubre 1993, exped. a Yatvin y otros); 5.411.957 (2 mayo 1995, exped. a Hostetler y otros), 5.463.092 (31 octubre 1995, exped. a Hostetler y otros), 5.543.389 (6 agosto 1996, exped. a Yatvin y otros), 5.543.390 (6 agosto 1996, exped. a Yatvin y otros), 5.543.391 (6 agosto 1996, exped. a Yatvin y otros) y 5.554.728 (10 septiembre 1996, exped. a Basava y otros).
Entre las solicitudes de patentes extranjeras que
describen sustituyentes lipófilos que se pueden unir a los
derivados
2'-desoxi-\beta-L-eritro-
pentofuranonucleósido de la presente invención, o a preparaciones
lipófilas, están incluidos los documentos WO 89/02733, WO 90/00555,
WO/16920, WO 91/18914, WO 93/00910, WO 94/26273, WO 96/15132, EP 0
350 287, EP 93917054.4 y Wo 91/19721.
Son ejemplos adicionales no limitativos de
2'-desoxi-L-eritro-pentofuranonucleósidos
los que contienen sustituyentes descritos en las publicaciones
siguientes. Estos derivatizados de
2'-desoxi-L-eritro-pentofuranonucleósidos
se pueden usar para las indicaciones descritas en el texto o de
otra forma como agentes antivirales, incluido el uso como agentes
anti HBV (Ho, D.H.W., Distribution of kinase and deaminase of
1\beta-D-arabinofuranosylycytosine
in tissues of man and mouse, Cancer Res 1979,
2816-2820, Holy, A., Isopolar
phosphorous-modified nucleotide analogues, en
Advances in Antiviral Drug Design, De Clercq (Ed.), JAI
Press, 1993, vol I, 179-231; Hong, C.I., Nechaev,
A. y West, C.R., Synthesis and antitumor activity of
1\beta-D-arabinofuranosylcytosine
conjugates of cortisol and cortisone, Biochem Biophys Rs
Commun, 1979a, 88, 1223-1229; Hong, C.I., Nechaev,
A., Kirisits, A.J., Bucheit, D.J. y West, C.R., Nucleoside
conjugates as potential antitumor agents. 3. Synthesis and
antitumor activity of
1-(\beta-D-arabinofuranosyl)cytosine
conjugates of corticosteroides and selected lipophilic
alcohols, J.Med. Chem. 1980, 28, 171-172;
Hostetler, K.Y., Stuhmiller, L.M., Lenting. H.B.M., van den Bosch,
H y Richman, D.D., Synthesis and antiretroviral activity of
phospholipid analogs of azidothymidine and other antiviral
nucleosides, J. Biol Chem, 1990, 265, 6112-6117;
Hostetler, K.Y., Carson, D.A. y Richman, D.D.,
Phosphatidylazidothymidine: mechanism of antiretroviral action
in CEM cells, J Biol Chem 1991, 266,
11714-11717; Hostetler, K.Y., Korba, B., Sridhar,
C., Gardener, M. Antiviral activity of
phosphatidyl-dideoxycytidine im hepatitis
B-infected cells and enhanced hepatic unptake in
mice, Antiviral Res 1994a, 24, 59-69; Hostetler,
K.Y., Richman, DD., Sridhar, C.N., Felgner, P.L., Felgner, J.,
Ricci, J., Gardener, M.F., Selleseth, D.W. y Ellis, M.N.,
Phosphatidylazidothymidine and phosphatidyl-ddC:
Assesment of uptake in mouse lymphoid tissues and antiviral
activities in human immunodeficiency virus-infected
cells and in rauscher leukemia virus-infected
mice, Antimicrobial Agents, Chemother 1994b, 38,
2792-2797; Hunston, R.N., Jones, A.A., McGuigan, C.,
Walker, R.T., Balzarini, J. y De Clercq, E., Synthesis and
biological properties of some cyclic phosphotriesters derivde from
2'-deoxy-5-fluororidine,
J Med Chem 1984, 27, 440-444; Ji, Y.H., Moog, C.,
Schmitt, G., Bischoff, P. y Luu, B., Monophosphoric acid
diesters of
7\beta-hidroxi-cholesterol and of
pyrimidine nucleosides as potential antitumor agents; synthesis and
preliminary evaluation of antitumor activity, J Med Chem 1990,
33, 2264-2270; Jones, A.S., McGuigan, C., Walker,
R.T., Balzarini, J. y De Clercq, E., Synthesis, properties, and
biological activity of some nucleoside cyclic phosphoramidates,
J Chem Soc Perkin Trans I, 1984, 1471-1474; Juodka,
B.A. y Smart, J., Synthesis of di-ribonucleoside
a(P\rightarrowN) amino acid derivatives, Coll Czech
Chem Comm, 1974, 39, 363-968; Kataoka, S., Imasi,
J, Yamaji, N., Kato, M, Saito, M., Kawada, T. e Imai, S.,
Alkylated cAMP derivatives; Selective synthesis and biological
activities, Nucleic Acids Res Sym Ser, 1989, 21,
1-2; Kataoka, S., Uchida, R. y Yamaji, N., A
concenient synthesis of adenosine 3',5' cyclic
phosphate(cAMP) benzyl and methyl triesters,
Heterocycles, 1991, 32, 1351-1356; Kinchington, D.,
Harvey, J.J. O'Connor, T.J., Jones, B.C.N.M., Devine, K.G.,
Taylor-Robinson, D., Jeffries, D.J. y McGuigan, C.,
Comparison of antiviral effects of zidovudine phosphoramidate
and phosphordiamidate derivatives against HIV and MuLV in
vitro , Antiviral Chem Chemother, 1992, 3,
107-112; Kodama, K., Morozumi, M., Saitoh, K.I.,
Kuninaka, H., Yoshino, H. y Saneyoshi, M., Antitumor activity
and pharmacology of
1-\beta-D-arabinofuranosylcytosine-5'-sterailphosphate;
an orally active derivative of
1-\beta-D-arabinofuranosylcytosine,
Jpn J Cancer Res, 1989, 80, 679-685; Korty, M. y
Engels, J., The effects of adenosine- and guanosine
3',5'-phosphoric acid and acid benzyl esters on
guinea-pig vantricular myocardium,
Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol, 1979, 310,
103-111; Kumar, A., Goe, P.L., Jones, A.S., Walker,
R.T., Balzarini, J. y De Clercq, E., Synthesis and biological
evaluation of some cyclic phosphoramidates nucleoside
derivatives, J. Med. Chem, 1990, 33, 2368-2375;
LeBec, C. y Huynh-Dinh, T., Dsynthesis of
lipophilic phosphate triester derivatives of
5-fluoroudine and arabinocytidine as anticancer
prodrugs, Tetrahedron Lett, 1991, 32, 6553-6556;
Lichtenstein, J., Barner, H.D. y Cohen, S.S., The metabolism of
exogenously supplied nucleotides by Escherichia coli, J. Biol
Chem, 1960, 235, 457-465; Lucthy, J., Von Daeniken
A., Friederich, J., Manthey, B, Zweifel, J., Schlatter, C. y Benn,
M.H., Synthesis and toxicological properties of three naturally
occurring cyanoepithioalkanes, Mitt Geg Lebensmittelunters Hyg,
1981, 72, 131-133 (Chem Abstr, 95, 127093);
McGuigan, C., Tollerfield, S.M. y Riley, P.A., Synthesis and
biological evaluation of some phosphate triester derivatives of the
anti-viral drug Ara, Nucleic Acids Res, 1989,
17, 6065-6075; McGuigan, C., Devine, K.G.,
O'Connor, T.J., Galpin, S.A., Jeffries, D.J. y Kinchington, D.,
Synthesis and evaluation of some novel phosphoramidate
derivatives of
3'-azido-3'-deoxythymidine
(AZT) as anti-HIV compounds, Antiviral Chem
Chemother, 1990a, 1, 107-113; Mc Guigan, C.,
O'Connor, T.J, Nicholls, S.R., Nickson, C. y Kinchington, D.,
Synthesis and anti-HIV activity of some novel
sustituted dialkyl phosphate derivatives of AZT and
ddCyd, Antiviral Chem Chemother, 1990b, 1,
335-360; McGuigan, C., Nicholls, S.R., O'Connor,
T.J. y Kinchington, D., Synthesis of some novel dialkyl phosphate
derivatives of 3'-modified nucleosides as potential
anti-AIDS drugs, Antiviral Chem Chemother, 1990c,
i, 25-33; McGuigan, C., Devine, K.G., O'Connor,
T.J. y Kinchington, D., Synthesis and anti-HIV
activity of some haloalkyl phosphoramidate derivatives of
3'-azido-3'-deoxythymidine
(AZT); potent activity of the trichloroethyl methoxyalaninil
compound, Antiviral Res, 1991, 15, 255-363;
McGuigan, C., Pathirana, R.N., Mahmood, N., Devine, K.G. y Hay,
A.J., Aryl phosphate derivatives of AZT retain activity against
HIV-1 in cell lines which are resistant to the
action of AZT, Antiviral Res, 1992, 17,
311-321; M Guigan, C., Pathirana, R.N., Choi, S.M.,
Kinchington, D. y O'Connor, T.J., Phosphoramidate derivatives of
AZT as inhibitors of HIV; studies on the carboxyl terminus,
Antiviral Chem Chemother, 1993a, 4, 97-101;
McGuigan, C., Pathirana, R.N., Balzarini, J y De Clercq, E.,
Intracellular delivery of bioactive AZT nucleotides by aryl
phosphate derivatives of AZT, J. Med. Chem., 1993b, 36,
1048-1052.
La cuestión de equilibrios
asiento-torsión de los anillos de fosfato de
3',5'-monofosfatos cíclicos de nucleósido se analiza
por RMN ^{1}H y estudios cristalográficos con rayos X de los
diatereómeros de 3',5'-monofosfato cíclico de
timidinfenilo (J Am Chem Soc, 109, 4058-4064;
Nerbonne, J.M., Richard, S., Nargeot, J. y Lester, H.A.,
New photoactivatable cyclic nucleotides produce
intracellular jumps in cyclic AMP and cyclic GMP concentrations,
Nature, 1984, 301, 74-76; Neumann, J.M., Hervé, M.,
Debouzy, J.C., Guerra, F.L., Gouyette, C., Dupraz, B. y
Huynh-Dinh, T., Synthesis and transmembrane
transport studies by NMR of a glucosyl phospholipid of
thymidine, J Am Chem Soc, 1989, 111, 4270-4277;
Ohno, R., Tatsumi, N., Hirano, M., Imai, K., Mizoguchi, H.,
Nakamura, T., Kosaka, M., Takatuski, K., Yamaha, T., Toyama, K.,
Yoshida, T., Masaoka, T., Hashimoto, S., Ohshima, T., Kimura, I.,
Yamada, K. y Kimura, J., Treatment of myelodysplastic syndromes
with orally administered
1-\beta-D-rabinofuranosylcytosine-5'-stearilphosphate,
Oncology, 1991, 48, 451-455.
Palomino, E., Kessle, D. y Horwitz, J.P., A
dihydropyridine carrier systam for sustained delivery of
2',3'-dideoxynucleosides to the brain, J Med
Chem, 1989, 32, 622-625; Perkins, R.M., Barney, S.,
Wittrock, R., Clark, P.H., Levin, R., Lambert, D.M., Petteway,
S.R., Serafinowska, H.T., Bailey, S.M., Jackson, S., Harnden, M.R.,
Ashton, R., Sutton, D., Harvey, J.J. y Brown, A.G., Activity of
BRL47923 and its oral prodrug, SB203657A against a rauscher murine
leukemia virus infection in mice, Antiviral Res, 1993 20
(suplm. I), 84; Piantadosi, C., Marasco, C.J., Jr,
Morris-Natschke, S.L., Meyer, K.L., Gumus, F.,
Surles, J.R., Ishaq, K.S., Kucera, L.S., Iyer, N., Wallen, C.A.,
Piantadosi,S. y Modest, E.J., Synthesis and evaluation of novel
ether lipid nucleoside conjugates for
anti-HIV-1 activity, J Med Chem,
1991, 34, 1408-1414; Pompon, A., Lefebvre, I.,
Imbach, J.L., Kahn, S. y Farquhar, D., Decomposition pathways of
the mono-and bis(pivaloxymethyl) esters of
azidothymidine-5'-monophosphate in
cell extract and in tissue culture medium; an application of the
"on line ISRP-cleaning" HPLC technique,
Antiviral Chem Chemother, 1994, 5, 91-98;
Postemark, T., Cyclic AMP and cyclic GMP, Annu Rev Pharmacol,
1974, 14, 23-33; Prisbe, E.J., Martin, J.C.M.,
McGee, D.P.C., Barker, M.F., Smee, D.F., Duke, A.E., Matthews, T.R.
y Verheyden, J.P.J., Synthesis and anti-herpes
virus activity of phosphate and phosphonate derivaties of
9.[(1,3-dihydroxy-2-propoxy)metil]guanine,
J Med Chem, 1986, 29, 671-675; Puech, F., Gosselin,
G., Lefebvre, I., Pompon, A., Aubertin, A.M., Dirn, A. e Imbach,
J.L., Intracellular delivery of nucleoside monophosphate through
a reductase-mediated activation process,
Antiviral Res, 1993, 22, 155-174; Pugaeva, V.P.,
Klochkeva, S.L., Mashbits, F.D. y Eizengart, R.S. (1969) Robins,
R.K., The potential of nucleotide analogs as inhibitors of
retroviruses and tumors, Pharm Res, 1984, 11-18;
Rosowsky, A., Kim, S.H., Ross, J y Wick, M.M., Lipophilic
5'-(alkylphosphate) esters of
1-\beta-D-arabinofuranosylcytosine
and its N^{4}-acyl and
2,2'-anhydro-3'-O-acyl
derivatives as potential prodrugs, J Med Chem, 1982, 25,
171-178; Ross, W., Increased sensitivity of the
walker turnout towards aromatic nitrogen mustards carrying basic
side chains following glucose pretreatment, Biochem Pharm,
1961, 8, 235-240; Ryu, E.K., Ross, R.J.,
Matsushita, T. MacCoss, M., Hong, C.I. y West, C.R.,
Phospholipid-nucleoside conjugates. 3. Synthesis
and preliminary biological evaluation of
1-\beta-arabinofuranosylcytosine
5'diphosphate[-],2-diacylglycerols, J Med Chem,
1982, 25, 1322-1329; Saffhill, R. y Hume, W.J.,
The degradation of 5-iododeoxyuridine and
5-bromodeoxuyuridina by serum from different sources
and its consequences for the use of these compounds for
incorporation into DNA, Chem Biol Interact, 1986, 57,
347-355; Saneyoshi, M., Morozumi, M., Kodama, K.,
Machida, J., Kuninaka, A. y Yoshino, H, Synthetic nucleosides
and nucleotides. XVI. Synthesis and biological evaluations of a
series of
1-\beta-D-arabinofuranosylcystosine
5'-alkyl or arylphosphates, Chem Pharm Bull,
1980, 28, 2915-2993; Sastry, J.K., Nehete, P.N.,
Khan, S., Nowak, B.J., Plunkett, W., Arlinghaus, R.B. y Farquhar,
D., Membrane-permeable dideoxyuridine
5'-monophosphate analogue inhibits human
immunodeficiency virus infection, Mol Pharmacol, 1992, 41,
441-445; Shaw, J.P., Jones, R.J., Arimilli, M.N.,
Louie, M.S., Lee, W.A. y Cundy, K.C., Oral bioavailability of
PMEA from PMEA prodrugs in male Sprague-Dawley
rats, 9th Annual AAPS Meeting, San Diego, CA, 1994 (resumen).
Shuto, S., Ueda S., Imamura, S., Fukukawa, K., Matsuda, A. y Ueda,
T., A facil one-step synthesis of
5'-phosphatidylnuceosides by an enzimatic
two-phase reaction, Tetrahedron Lett, 1987, 28,
199-202; Shuto, S., Itoh, H., Ueda, S., Imamura, S.,
Kukukawa, K., Tsujino, M., Matsuda, A. y Ueda, T., A facil
enzimatic synthesis of
5'-(3-sn-phosphatidyl)-nucleosides
and their antileukemic activities, Chem Pharm Bull, 1988, 36,
209-217. Un grupo profármaco fosfato preferido es el
grupo
S-acil-2-tioetilo,
denominado también "SATE".
Las composiciones farmacéuticas basadas en
derivados de
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósico
de la presente invención se pueden preparar de manera que incluyan
el compuesto antes descrito, o una de sus sales o prodrogas, en una
cantidad terapéuticamente efectiva para tratar una infecciónn de
hepatitis D, opcionalmente en combinación con un aditivo, vehículo
o excipiente farmacéuticamente aceptable. La cantidad
terapéuticamente aceptable puede variar con la infección o dolencia
a tratar, su severidad, el régimen de tratamiento a emplear, la
farmococinética del agente usado así como el paciente tratado.
En un aspecto de acuerdo con la invención, el
compuesto de acuerdo con la presente invención se formula,
preferiblemente, mezclado con un vehículo farmacéuticamente
aceptable. Por lo general, es preferible administrar la
composición farmacéutica en forma oral, pero se pueden administrar
formulaciones por vía parenteral, intravenosa, intramuscular,
transdérmica, bucal subcutánea, con supositorios y por otras vías.
Preferiblemente, las formulaciones intravenosas e intramusculares
se administran en solución fisiológica. Un experto corriente en la
técnica puede modificar la formulación dentro de las directrices de
la memoria para disponer de numerosas formulaciones para una vía de
administración particular sin convertir en inestables las
composiciones de la presente invención ni comprometer su actividad
terapéutica. En particular, mediante una modificación rutinaria del
compuesto deseado (formación de una sal, esterificación, etc.) se
puede hacer fácilmente que sea más soluble en agua u otro vehículo,
por ejemplo.
En ciertas formas farmacéuticas de dosificación,
se prefiere la forma prodroga del compuesto, que incluye
especialmente derivados acilados (acetilados u otros) y éter,
ésteres fosfato y varias formas de sales de los presentes
compuestos. Un experto corriente en la técnica puede identificar
cómo modificar fácilmente el presente compuesto en una forma de
prodroga para facilitar el compuesto activo a una diana dentro del
organismo o paciente huésped. El experto aprovechará también la
ventaja de los favorables parámetros farmacocinéticos de la forma de
prodroga, cuando se pueda emplear, para suministrar el compuesto
deseado a un sitio diana dentro del organismo o paciente huésped
para maximizar el efecto deseado del compuesto en el tratamiento de
la infección de hepatitis D.
La cantidad de compuesto incluida en las
formulaciones terapéuticamente activas, de acuerdo con la presente
invención, es una cantidad efectiva para tratar la infección o
dolencia, en realizaciones preferentes, una infección de hepatitis
D. Generalmente, una cantidad terapéuticamente efectiva de la
presente invención en forma de dosificación farmacéutica está en el
intervalo de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg
o más, dependiendo del compuesto usado, la dolencia o infección que
se está tratando y la vía de administración. A los fines de la
presente invención, una cantidad profiláctica o preventivamente
efectiva de las composiciones de acuerdo con la presente invención,
está incluida en el mismo intervalo de composiciones que el dado
para una cantidad terapéuticamente efectiva y, usualmente, es la
misma que una cantidad terapéuticamente efectiva.
La administración del compuesto activo puede
variar de una administración continua (goteo intravenoso) a varias
administraciones al día (por ejemplo, 4 al día, 2 al día, etc.) y
puede hacerse por vía oral, tópica, parenteral, intramuscular,
intravenosa, subcutánea, transdérmica (que puede incluir un agente
que intensifique la penetración), bucal y rectal con supositorio,
entre otras. También se pueden usar comprimidos entéricos
revestidos para acrecentar la biodisponibilidad y estabilidad de
los compuestos administrados por vía oral. La forma de dosificación
más efectiva dependerá de la farmacocinética del agente particular
escogido, así como de la severidad de la enfermedad del paciente. Se
prefieren en particular las formas de dosificación oral a causa de
la facilidad de administración y la previsible acogida favorable
por el paciente.
Para preparar las composiciones farmacéuticas de
acuerdo con la presente invención, preferiblemente se mezcla una
cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más de los compuestos
de acuerdo con la presente invención con un vehículo
farmacéuticamente aceptable de conformidad con técnicas galénicas
convencionales para producir una dosis. El vehículo puede tener una
amplia variedad de formas dependiendo de la preparación deseada
para administración, por ejemplo, oral o parenteral. Al preparar
composiciones farmacéuticas en forma de dosis oral, se puede usar
cualquiera de los medios farmacéuticos usuales. Así, para preparados
líquidos orales tales como suspensiones, elixires y soluciones, el
grupo de vehículos y aditivos adecuados que se pueden usar incluye
agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saboreadores, agentes
colorantes, etc. Para preparados sólidos orales tales como polvos,
comprimidos, cápsulas, y para preparados sólidos tales como
supositorios, el grupo de vehículos y aditivos adecuados que se
pueden usar incluye almidones, azúcares tales como dextrosa,
manitol, lactosa y vehículos afines, diluyentes, agentes de
granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes desintegrantes,
etc. Si se desea, los comprimidos o cápsulas pueden ser entéricos
revestidos por técnicas estándar para una liberación sostenida. El
uso de estas formas de dosificación puede favorecer
significativamente la biodisponibilidad de los compuestos en el
paciente.
Para formulaciones parenterales, usualmente el
vehículo comprenderá agua estéril o solución acuosa de cloruro
sódico, aunque también se pueden incluir otros ingredientes como
los que coadyuvan a la dispersión. Cuando se ha de usar agua
estéril y mantenerla estéril, las composiciones y vehículos se
pueden esterilizar también. También pueden prepararse suspensiones
inyectables, en cuyo caso se pueden emplear vehículos líquidos
apropiados, agentes supensivos, etc.
También se pueden preparar por métodos
convencionales suspensiones liposomales (incluidos liposomas que
apuntan a dianas de antígenos virales) para producir vehículos
farmacéuticamente aceptables. Esto puede ser apropiado para aportar
nucleósidos libres, nucleósidos acilo o formas prodroga de éster
fosfato de los compuestos nucleósidos de acuerdo con la presente
invención.
En realizaciones particularmente preferentes de
acuerdo con la presente invención, los compuestos y composiciones
se usan para tratar, prevenir o retardar el inicio de las
infecciones de hepatitis D. Preferiblemente, para tratar, prevenir
o retrasar el inicio de la infección, las composiciones se
administrarán en forma de dosis orales en cantidades que varían de
aproximadamente 250 microgramos a aproximadamente 1 gramo o más al
menos una vez al día, preferiblemente hasta como máximo cuatro
veces al día. Los presentes compuestos preferiblemente se
administran por vía oral, pero se pueden administrar
parenteralmente, tópicamente o en forma de supositorios.
Los compuestos de la presente invención, a causa
de su baja toxicidad para las células huésped en ciertos casos,
pueden emplearse ventajosamente para prevenir profilácticamente la
infección de hepatitis D o para prevenir la presencia de síntomas
clínicos asociados con la infección viral. Así, La presente
invención abarca también métodos para tratamiento profiláctico de
una infección viral y, en particular, la infección de hepatitis D.
En este aspecto, de acuerdo con la presente invención, las
composiciones presentes se usan para prevenir o retrasar el inicio
de una infección de hepatitis D. El método profiláctico comprende la
administración a un paciente que necesita tal tratamiento, o que
tiene riesgo de desarrollar enfermedad por el HDV, una cantidad de
un compuesto de acuerdo con la presente invención efectiva para
aliviar, prevenir o demorar el inicio de la infección viral. En el
tratamiento profiláctico de acuerdo con la presente invención, se
prefiere que el compuesto viral empleado tenga una toxicidad baja
y, preferiblemente, no sea tóxica para el paciente. Se prefiere
particularmente en este aspecto de la presente invención, que el
compuesto que se emplea sea muy efectivo frente al virus y que la
toxicidad sea mínima para el paciente. Los compuestos de acuerdo
con la presente invención que se pueden usar para tratar estos
estados de enfermedad se pueden administrar en una cantidad dentro
del intervalo de dosificación dado para tratamiento terapéutico
(esto es, de aproximadamente 250 microgramos hasta 1 gramo o más de
una a cuatro veces al día para una forma oral de dosificación) como
agente profiláctico para prevenir la proliferación de la infección
de hepatitis D o, alternativamente, para demorar el inicio de la
infección de hepatitis D, que se manifiesta en sí por síntomas
clínicos.
Además, los compuestos de acuerdo con la presente
invención se pueden administrar en combinación o alternando con un
o más agentes antivirales, anti-HBV,
anti-HCV, anti-HDV o antiherpéticos
o interferón, agentes anticáncer o antibacterianos, incluidos otros
compuestos de la presente invención. Ciertos compuestos de acuerdo
con la presente invención pueden ser efectivos para intensificar la
actividad biológica de ciertos agentes de acuerdo con la presente
invención por reducir el metabolismo, el catabolismo o la
inactivación de otros compuestos y, como tales, se coadministran
para lograr este efecto.
Se ha conocido que las variantes de virus de
hepatitis resistentes a fármacos pueden emerger después de un
tratamiento prolongado con un agente antiviral. A causa del papel
esencial del virus de la hepatitis B en el ciclo de vida del virus
de la hepatitis D, los compuestos con actividad antivirus de la
hepatitis B se pueden administrar en combinación o alternando con
los
\beta-2'-L-desoxinucleósidos
descritos, y sus sales o prodrogas farmacéuticamente aceptables.
Típicamente, la resistencia ocurre por mutación de un gen que
codifica una enzima usada en el ciclo de vida viral y, muy
típicamente en el caso de HBV, la DNA polimerasa. Recientemente se
ha demostrado que la eficacia de un fármaco frente a la infección
con HBV puede prolongarse, aumentarse o restablecerse administrando
el compuesto en combinación o alternando con un segundo y, acaso,
un tercer compuesto antiviral que induce una mutación diferente de
la causada por el fármaco principal. Alternativamente, mediante tal
terapia de combinación o alternación se puede alterar la
farmacocinética, biodistribución u otro parámetro de tal fármaco. En
general, típicamente se prefiere la terapia de combinación a la
terapia de alternación porque induce múltiples tensiones
simultáneas en el virus.
La actividad viral anti-hepatitis
D de
\beta-L-2'-dA,
\beta-L-2'-dC,
\beta-L-2'-dU,
\beta-L-2'-dG,
\beta-L-2'-dT,
\beta-L-dI u otros
\beta-L-2'-nucleósidos proporcionados en esta memoria, o las prodrogas, fosfatos o sales de estos compuestos, se puede intensificar administrando uno o más de estos nucleósidos en combinación o alternación. Alternativamente, por ejemplo, uno o más \beta-L-2'-dA, \beta-L-2'-dC, \beta-L-2'-dU, \beta-L-2'-dG, \beta-L-2'-dT, \beta-L-dI u otros \beta-L-2'-nucleósidos proporcionados aquí se puede administrar en combinación o alternación con 3TC, FTC, L-FMAU, DAPD, famciclovir, penciclovir, BMS-200475, bis pom PMEA (adefovir, dipivoxil); lobucavir, ganciclovir o ribavirina.
\beta-L-2'-nucleósidos proporcionados en esta memoria, o las prodrogas, fosfatos o sales de estos compuestos, se puede intensificar administrando uno o más de estos nucleósidos en combinación o alternación. Alternativamente, por ejemplo, uno o más \beta-L-2'-dA, \beta-L-2'-dC, \beta-L-2'-dU, \beta-L-2'-dG, \beta-L-2'-dT, \beta-L-dI u otros \beta-L-2'-nucleósidos proporcionados aquí se puede administrar en combinación o alternación con 3TC, FTC, L-FMAU, DAPD, famciclovir, penciclovir, BMS-200475, bis pom PMEA (adefovir, dipivoxil); lobucavir, ganciclovir o ribavirina.
En cualquiera de las realizaciones descritas en
esta memoria, si el
\beta-L-2'-nucleósido
de la presente invención se administra en combinación o alternación
con un segundo inhibidor de polimerasa nucleósido o no nucleósido
que está fosforilado a una forma activa, se prefiere que el segundo
compuesto sea fosforilado por una enzima que es diferente de la que
fosforila el
\beta-L-2'-nucleósido
de la presente invención in vivo. Los ejemplos de enzimas
quinasa con timidina-quinasa,
citosina-quinasa, guanosina-quinasa,
adenosina-quinasa,
desoxicitidina-quinasa,
5'-nucleotidasa y
desoxiguanosina-quinasa.
Los derivados
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos
de la presente invención son conocidos en la técnica y se pueden
preparar de acuerdo con el método descrito por Holy en Collect
Czech Chem Commun, 1972, 37(12), 4072-87 y
Mol Phys, 1967, 3(4), 386-95.
En la Figura 1 se presenta un procedimiento
general para obtener
\beta-eritro-pentofuranonucleósidos
(\beta-L-dN) usando
L-ribosa o L-xilosa como material
de partida.
Los derivados mono-, di- y trifosfato de los
nucleósidos activos se pueden preparar como se describe de acuerdo
con métodos publicados. El monofosfato se puede preparar de acuerdo
con el procedimiento de Imai y otros, J Org Chem, 1969,
34(6), 1547-1550. El difosfato se puede
preparar de acuerdo con el procedimiento de Davisson y otros, en J
Org Chem, 1987, 52(9), 1794-1801. El
trifosfato se puede preparar de acuerdo con el procedimiento de
Hoard y otros, en J Am Chem Soc, 1965, 87(8),
1785-1788.
Los puntos de fusión se determinaron en tubos
capilares abiertos en un aparato Gallenkamp
MFB-595-010 M y son sin corregir.
Los espectros de absorción de rayos UV se registraron en etanol en
un espectrofotómetro Uvikon 931 (KONTRON). Los espectros de RMN
^{1}H se obtuvieron a temperatura ambiente en
DMSO-d_{6} con un espectrómetro Bruker AC 250 o
400. Los desplazamientos químicos se dan en ppm, fijándose
DMSO-d_{5} a 2,49 ppm como referencia. Los
experimentos de intercambio, de desacoplamiento o
2D-COSY se realizaron para confirmar las cesiones
de protones. Las multiplicidades de señales se representan por s
(singlete), d (doblete), dd (doblete de dobletes), t (triplete), q
(cuatriplete), anc (ancha), m (multiplete). Todos los valores de J
son en Hz. Los espectros de masas FAB se registraron al modo de ion
positivo (FAB>0) o negativo (FAB<0) en un espectrómetro de
masas JEOL DX 300. La matriz era alcohol
3-nitrobencílico (NBA) o una mezcla (50:50 v/v) de
glicerol y tioglicerol (GT). Las rotaciones específicas se midieron
en un espectropolarímetro Perkin-Elmer 241
(longitud de paso 1 cm) y se dan en unidades de 10^{-1} grados
cm^{2} g^{-1}. Los análisis químicos los hizo el Service de
Microanalyses du CNRS, Division de Vernaison (Francia). Los análisis
indicados por los símbolos de los elementos o funciones están
dentro de \pm 0,4% de los valores teóricos. La cromatografía en
capa delgada se hizo sobre hojas de eluminio revestidas de gel de
sílice 60 F_{254} (Merck, art. 5554), efectuándose la
visualización de productos por absorbancia de rayos UV y
carbonizando seguidamente con ácido sulfúrico al 10% en etanol y
calentando. La cromatografía en columna se hizo sobre gel de sílice
60 (Merck, art. 9385) a presión atmosférica.
Se agitó a temperatura ambiente durante 22 h una
solución de
9-(2-O-acetil-3,5-di-O-benzoil-\beta-L-xilofuranosil)adenina
2 [Ref: Gosselin, G., Bergogne, M.C., Imbach, J.L.,
Synthesis and Antiviral Evaluation of
\beta-L-Xylofuranosyl Nucleosides
of the Five Naturally Occurring Nucleic Acid Bases, Journal of
Heterocyclic Chemistry, 1993, 30, 1229-1233] (8,30
g, 16,05 mmol) e hidrato de hidrazina del 98% (234 ml, 48,5 mmol)
en una mezcla de piridina/ácido acético glacial (4/1 v/v, 170 ml).
La reacción se apagó añadiendo acetona (40 ml) y se continuó
agitando durante una hora más. La mezcla de reacción se redujo a la
mitad de su volumen, se diluyó con agua (250 ml) y se sometió a
extracción con cloroformo (2 x 150 ml). La capa orgánica se lavó
sucesivamente con solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (3
x 100 ml) y agua (3 x 100 ml), se secó, se filtró, se concentró y
se coevaporó con tolueno y metanol. El residuo se purificó por
cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH al 0,3% en
diclorometano), obteniéndose 3 (5,2 g, 68%) precipitado de
diisopropil éter.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 4,5-4,9 (m, 4H, H-2',
H-4', H-5' y H-5''),
5,64 (t, 1H, H-3', J_{2',3'} = 3,5 Hz), 6,3 s
anc, 1H, OH-2'), 6,45 (d, 1H, H-1',
J_{1',2'} = 4,6 Hz), 7,3 (s anc, 2H, NH_{2}-6),
7,4-7,9 (m, 10H, 2 benzoílos), 8,07 y 8,34 (2s, 2H,
H-2 y H-8); ms: matriz G/T,
(FAB^{+}) m/z 476 [M+H]^{+}, 136 [BH_{2}]^{+},
FAB^{-}) m/z 474 [M-H]^{-}, 134
[B]^{-}, UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 257 nm
(\varepsilon 16400), 230 nm (\varepsilon 29300),
\lambda_{min} 246 nm (\varepsilon 14800);
[\alpha]_{D}^{20}: -64 (c 1,07 CHCl_{3}).
| Análisis: | Calculado para C_{24}H_{21}N_{5}O_{4} (M = 475,45): | |
| \hskip-0.1cm C 60,43; H 4,45; N 14,73 | ||
| Hallado: | \hskip-0.1cm C 60,41; H 4,68; N 14,27. |
A una solución del compuesto 3 (1,00 g,
2,11 mmol) en acetonitrilo seco (65 ml) se añadió
4-(dimetilamino)piridina (0,77 g, 6,32 mmol) y cloruro de
fenoxitiocarbonilo (0,44 ml, 3,16 mmol). La mezcla se agitó a
temperatura ambiente durante 2 h. Después de concentrar, el residuo
se disolvió en diclorometano (50 ml) y se lavó sucesivamente con
agua (2 x 30 ml), solución acuosa 0,5 N de ácido clorhídrico (30
ml) y agua (3 x 30 ml). La capa orgánica se secó, se filtró y se
concentró a sequedad. El intermedio tiocarbonilado en bruto se trató
directamente con hidruro de tris-(trimetilsilil)silano (0,78
ml, 5,23 mmol) y
\alpha,\alpha'-azoisobutironitrilo (AIBN, 0,112
g, 0,69 mmol) en dioxano seco (17 ml) a reflujo durante 2 h. El
disolvente se eliminó en vacío y el residuo se purificó por
cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-5%
de MeOH en diclorometano), obteniéndose el compuesto 4 puro
(0,93 g, 96%) como una espuma.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 2,9-3,1 (m, 2H, H-2' y
H-2''), 4,6-4,7 (m, 3H,
H-4', H-5' y H-5''),
5,8 (s anc, 1H,
H-3'), 6,43 (dd, 1H, H-1', J_{1',2'} = 3,1 Hz, J_{1',2''} = 7,6 Hz), 7,3 (s anc, 2H, NH_{2}-6), 7,4-7,9 (m, 10H, 2 benzoílos), 8,05 y 8,33 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 460 [M+H]^{+}, 325[S]\pm, 136 [BH_{2}]^{+}, (FAB^{-}) m/z
458[M-H]^{-}, 134[B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 261 nm (\varepsilon 14400), 231 nm (\varepsilon 26300), \lambda_{min}249 nm (\varepsilon 12000);
[\alpha]_{D}^{20} = -38 (c 1,04, DMSO).
H-3'), 6,43 (dd, 1H, H-1', J_{1',2'} = 3,1 Hz, J_{1',2''} = 7,6 Hz), 7,3 (s anc, 2H, NH_{2}-6), 7,4-7,9 (m, 10H, 2 benzoílos), 8,05 y 8,33 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 460 [M+H]^{+}, 325[S]\pm, 136 [BH_{2}]^{+}, (FAB^{-}) m/z
458[M-H]^{-}, 134[B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 261 nm (\varepsilon 14400), 231 nm (\varepsilon 26300), \lambda_{min}249 nm (\varepsilon 12000);
[\alpha]_{D}^{20} = -38 (c 1,04, DMSO).
A una solución del compuesto 4 (0,88 g,
1,92 mmol) en piridina seca (40 ml) se añadió cloruro de
4-momometoxitritilo (1,18 g, 3,84 mmol). La mezcla
se agitó a 60ºC durante 24 h. Después de añadir metanol (5 ml), la
solución se concentró a sequedad, el residuo se disolvió en
diclorometano (50 ml) y se lavó sucesivamente con agua (30 ml),
solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (30 ml) y agua (30 ml). Se
secó la capa orgánica, se filtró, se concentró y se coevaporó con
tolueno, obteniéndose el compuesto 5 puro (1,01 g, 72%) como
una espuma.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}):
\delta2,9-3,0 (m, 2H, H-2' y
H-2''), 3,62 (s, 3H, OCH_{3}),
4,6-4,8 (m, 3H,
H-4'.H-5' y H-5''),
5,85 (pt, 1H, H-3'), 6,44 (dd, 1H,
H-1', J_{1',2'} = 3,1 Hz, J_{1',2''} = 7,3 Hz),
6,9 (s anc, 1H, NH-6), 6,7-6,8 y
7,2-7,4 (2m, 24H, 2 benzoílos y MMTr), 7,97 y 8,13
(2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz
G/T, (FAB^{+}) m/z 732 [M+H]^{+}, (FAB^{-}) m/z
730 [M-H]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 274 nm (\varepsilon 12100), 225 (\varepsilon 24200), \lambda_{min} 250 nm (\varepsilon 5900); [\alpha]_{D}^{20} = -16 (c 1,12, DMSO).
730 [M-H]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 274 nm (\varepsilon 12100), 225 (\varepsilon 24200), \lambda_{min} 250 nm (\varepsilon 5900); [\alpha]_{D}^{20} = -16 (c 1,12, DMSO).
El compuesto 5 (0,95 g, 1,30 mmol) se
trató con una solución (saturada, a -10ºC) de amoniaco en
metanol
(40 ml) a temperatura ambiente durante la noche. Después de concentrar, el residuo se disolvió en diclorometano (60 ml) y se lavó con agua (30 ml). La capa acuosa se sometió a extracción dos veces con diclorometano (10 ml). La combinación de las capas orgánicas se secó, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-5% de MeOH en diclorometano), obteniéndose el compuesto 6 puro (0,67 g, 98%) como una espuma.
(40 ml) a temperatura ambiente durante la noche. Después de concentrar, el residuo se disolvió en diclorometano (60 ml) y se lavó con agua (30 ml). La capa acuosa se sometió a extracción dos veces con diclorometano (10 ml). La combinación de las capas orgánicas se secó, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-5% de MeOH en diclorometano), obteniéndose el compuesto 6 puro (0,67 g, 98%) como una espuma.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta
2,6-2,9 (m, 2H, H-2' y
H-2''), 3,5 (s anc, 1H, OH-5'),
3,55 (s, 3H, OCH_{3}), 3,9-4,0 (m, 3H,
H-4', H-5' y H-5''), 4,5-4,6 (m, 1H, H-3'), 6,03 (dd, 1H, H-1', J_{1',2'} = 4,0 Hz, J_{1',2''}= 8,8 Hz), 7,0 (s anc, 1H, NH-6), 6,7-6,8 y 7,1-7,4 (2m, 14H, MMTr), 7,40 (d, 1H, OH-3', J_{H,OH} = 10,6 Hz), 7,80 y 7,99 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 524 [M+H]^{+}, 408 [BH_{2}]^{+}, (FAB^{-}) m/z 1045 [2M-H]^{-}, 406 [B]^{-}; UV (etanol al 95%: \lambda_{max} 275 nm
(\varepsilon 12300), \lambda_{min} 247 nm (\varepsilon 3600), [\alpha]_{D}^{20} = +28 (c 0) \delta, 94, DMSO).
H-4', H-5' y H-5''), 4,5-4,6 (m, 1H, H-3'), 6,03 (dd, 1H, H-1', J_{1',2'} = 4,0 Hz, J_{1',2''}= 8,8 Hz), 7,0 (s anc, 1H, NH-6), 6,7-6,8 y 7,1-7,4 (2m, 14H, MMTr), 7,40 (d, 1H, OH-3', J_{H,OH} = 10,6 Hz), 7,80 y 7,99 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 524 [M+H]^{+}, 408 [BH_{2}]^{+}, (FAB^{-}) m/z 1045 [2M-H]^{-}, 406 [B]^{-}; UV (etanol al 95%: \lambda_{max} 275 nm
(\varepsilon 12300), \lambda_{min} 247 nm (\varepsilon 3600), [\alpha]_{D}^{20} = +28 (c 0) \delta, 94, DMSO).
El compuesto 6 (0,62 g, 1,24 mmol) en
piridina seca (25 ml) se trató con cloruro de
4-monometoxitritilo (0,46 g, 1,49 mmol) a
temperatura ambiente durante 16 h. Después de añadir metanol (5
ml), la mezcla se concentró a sequedad. El residuo se disolvió en
diclorometano (60 ml) y se lavó sucesivamente con agua (40 ml),
solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (40 ml) y agua (40 ml). La
capa orgánica se secó, se filtró, se concentró y se coevaporó con
tolueno y metanol. El residuo se purificó por cromatografía en
columna sobre gel de sílice (MeOH al 0-10% en
diclorometano), obteniéndose el compuesto 7 (0,71 g, 72%)
como una espuma.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 2,21 (d, 1H, H-2', J_{2',2''} = 14,3 Hz),
2,6-2,7 (m, 1H, H-2''),
3,1-3,3 (2m, 2H, H-5' y
H-5''), 3,64 y 3,65 (2s, 6H, 2 x OCH_{3}),
4,1-4,2 (m, 1H, H-4'),
4,2-4,3 (m, 1H, H-3'), 5,68 (d, 1H,
OH-3', J_{H,OH} = 5,2 Hz), 6,24 (d, 1H,
H-1', J_{1',2''} = 7,0 Hz),
6,7-6,8 y 7,1-7,3 (2m, 29H, 2 MMTr
y NH-6), 7,83 y 8,21 (2s, 2H, H-2 y
H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 796
[M+H]^{+}, 408 [BH_{2}]^{\text{*}}, (FAB^{-})
m/z 794[M-H]^{-}, 406
[B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 275 nm
(\varepsilon 30900), \lambda_{min} 246 nm (\varepsilon
12800); [\alpha]_{D}^{20} = +14 (c 1,03, DMSO).
Una solución de azodicarboxilato de dietilo (0,38
ml, 2,49 mmol) en tetrahidrofurano seco (20 ml) se añadió a gotas a
un solución fría (0ºC) del nucleósido 7 (0,66 g, 0,83 mmol),
trifenilfosfina (0,66 g, 2,49 mmol) y ácido benzoico (0,30 g, 2,49
mmol) en THF seco (20 ml). La mezcla se agitó a temperatura
ambiente durante 18 h y se añadió metanol (1 ml). Se eliminaron los
disolventes a presión reducida y el material en bruto se purificó
por cromatografía en columna con gel de sílice (acetato de etilo al
0-5% en diclorometano), obteniéndose el compuesto
8 ligeramente contaminado con óxido de trifenilfosfina.
El compuesto 8 se trató con una solución
(saturada, a -10ºC) de amoniaco metanólico (20 ml) a temperatura
ambiente durante 24 h y luego la mezcla de reacción se concentró a
sequedad. El residuo se disolvió en diclorometano (30 ml) y se lavó
con agua (20 ml). La capa acuosa se sometió a extracción con
diclorometano (2 x 20 ml) y la combinación de fases orgánicas se
secó, se filtró y se concentró. Se obtuvo el compuesto 9
puro (0,50 g, 76% de 7) como una espuma después de
purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH
al 0-2% en diclorometano):
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 2,2-2,3 (m, 1H, H-2'),
2,8-2,9 (m, 1H, H-2''),
3,1-3,2 (m, 2H, H-5' y
H-5''), 3,64 y 3,65 (2s, 6H, 2 x OCH_{3}), 3,97
(pq, 1H, H-4'), 4,4-4,5 (m, 1H,
H-3'), 5,36 (d, 1H, OH-3',
J_{H,OH} = 4,5 Hz), 6,34 (t, 1H,
H-1', J_{1',2'} = J_{1',2''} = 6,4 Hz), 6,8-6,9 y 7,1-7,4 (2m, 29H, 2 MMTr y NH-6), 7,81 y 8,32 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 796 [M+H]^{+}, (FAB^{-}) m/z 794 [M-H]^{-}, 406 [B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 276 nm (\varepsilon 42600), \lambda_{min} 248 nm (\varepsilon 23300); [\alpha]_{D}^{20} = +29 (c 1,05, DMSO).
H-1', J_{1',2'} = J_{1',2''} = 6,4 Hz), 6,8-6,9 y 7,1-7,4 (2m, 29H, 2 MMTr y NH-6), 7,81 y 8,32 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB^{+}) m/z 796 [M+H]^{+}, (FAB^{-}) m/z 794 [M-H]^{-}, 406 [B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max} 276 nm (\varepsilon 42600), \lambda_{min} 248 nm (\varepsilon 23300); [\alpha]_{D}^{20} = +29 (c 1,05, DMSO).
El compuesto 9 (0,44 g, 0,56 mmol) se
trató con una solución acuosa de ácido acético al 80% (17 ml) a
temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se concentró a
sequedad, el residuo se disolvió en agua (20 ml) y se lavó con
dietil éter (2 x 15 ml). La capa acuosa se concentró y se coevaporó
con tolueno y metanol. La
2'-desoxi-\beta-L-adenosina
(\beta-L-dA) deseada (0,12 g, 83%)
se obtuvo después de purificación por cromatografía en columna
sobre gel de sílice (MeOH al 0-12% en
diclorometano) y filtración a través de una unidad Millex
HV-4 (0,45 \mum, Millipore): p.f.
193-194ºC (cristalizada en agua) (Lit.
184-185ºC para el enantiómero L [Ref.: Robins, M.J.,
Khwaja, T.A., Robins, R.K., J Org Chem 1970, 35,
636-639] y 187-189ºC para el
enantiómero D [Ref.: Ness, R.K., en Synthetic Procedures in
Nucleic Acid Chemistry; Zorbach, W.W., Tipson, R.S., Eds., John
Wiley and Sons, New York, 1968; vol. 1,
183-187].
RMN ^{1} H (DMSO-d_{6}):
\delta 2,2-2,3 y 2,6-2,7 (2m, 2H,
H-2' y H-2''),
3,4-3,6 (2m, 2H, H-5' y
H-5''), 3,86 (pq, 1H,
H-4'), 4,3-4,4 (m, 1H, H-3'), 5,24 (t, 1H, OH-5', J_{H,OH} = 5,8 Hz), 5,30 (d, 1H, OH-3', J_{H,OH} = 4,0 Hz), 6,32 (dd, 1H, H-1', J_{1',2'} = 6,2 Hz, J_{1',2''} = 7,8 Hz), 7,3 (s anc, 2H, NH_{2}-6), 8,11 y 8,32 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB)^{+} m/z 252 [M+H]^{+}, 136 [BH_{2}]^{+}, (FAB)^{-} m/z 250 [M-H]^{-}, 134 [B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max}226 nm (\varepsilon 14300), \lambda 226 nm (\varepsilon 2100); [\alpha]_{D}^{20} = +25 (c 1,03, H^{2}O), (lit. [\alpha]_{D}^{20} = +23 (c 1,0, H_{2}O) para el enantiómero L [Ref.: Robins, M.J., Khawaja, T.A., Robins, R.K. J Org Chem 1970, 35, 636-639] y [\alpha]_{D}^{20} = -25 (c 0,47, H_{2}O) para el enantiómero D [Ref.: Ness, R.K.,, en Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry; Zorbach, W.W., Tipson, R.S., Eds., John Wiley and Sons, New York, 1968; vol. 1, 183-187].
H-4'), 4,3-4,4 (m, 1H, H-3'), 5,24 (t, 1H, OH-5', J_{H,OH} = 5,8 Hz), 5,30 (d, 1H, OH-3', J_{H,OH} = 4,0 Hz), 6,32 (dd, 1H, H-1', J_{1',2'} = 6,2 Hz, J_{1',2''} = 7,8 Hz), 7,3 (s anc, 2H, NH_{2}-6), 8,11 y 8,32 (2s, 2H, H-2 y H-8); ms: matriz G/T, (FAB)^{+} m/z 252 [M+H]^{+}, 136 [BH_{2}]^{+}, (FAB)^{-} m/z 250 [M-H]^{-}, 134 [B]^{-}; UV (etanol al 95%): \lambda_{max}226 nm (\varepsilon 14300), \lambda 226 nm (\varepsilon 2100); [\alpha]_{D}^{20} = +25 (c 1,03, H^{2}O), (lit. [\alpha]_{D}^{20} = +23 (c 1,0, H_{2}O) para el enantiómero L [Ref.: Robins, M.J., Khawaja, T.A., Robins, R.K. J Org Chem 1970, 35, 636-639] y [\alpha]_{D}^{20} = -25 (c 0,47, H_{2}O) para el enantiómero D [Ref.: Ness, R.K.,, en Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry; Zorbach, W.W., Tipson, R.S., Eds., John Wiley and Sons, New York, 1968; vol. 1, 183-187].
| Análisis: | Calculado para C_{10}H_{13}N_{5}=_{3} + 1,5H_{2}O (M = 278,28) | |
| \hskip-0.1cm C 43,16; H 5,80; N 25,17 | ||
| Hallado: | \hskip-0.1cm C 43,63; H 5,45; N 25,33. |
Como se representa en el Esquema 1, una solución
de L-ribosa 140 (150 g, 1 mol; Cultor
Science Food, CAS [24559-59-4], lote
RIB9711013) en metanol (2 l; P.A. Prolabo, ref. 20847.295) se trató
con ácido sulfúrico del 95-97% (12 ml, Merck; ref.
1.00731.1000) y se dejó a +4ºC durante 12 h, luego se neutralizó con
piridina (180 ml, del 99% Acros; ref. 131780025). La evaporación
dio una mezcla \alpha+\beta de metil ribofuranósidos 141
como un líquido espeso. Una solución de esta mezcla anómera en
piridina (1,3 l) se trató con cloruro de benzoílo (580 ml, 5 mol;
Fluka, ref. 12930) mientras que se anfriaba y agitaba. La solución
se dejó a temperatura ambiente durante 12 h y luego se vertió en
hielo (aprox. 10 l) mientras que se agitaba continuamente. La mezcla
(aceite en agua) se filtró a través de un lecho de celita. El
aceite resultante que quedó sobre el lecho de celita se lavó con
agua (3 x 3 l) y luego se disolvió en acetato de etilo (3 l). La
fase orgánica se lavó con solución de NaHCO_{3} al 5% (2 l) y
agua (2 l), se secó sobre sulfato sódico (Prolabo; ref. 28111.365),
se filtró y se evaporó, obteniéndose
1-O-metil-2,3,5-tri-O-benzolil-\alpha/\beta-L-ribofuranosa
142 como un líquido espeso. El aceite se disolvió en
anhídrido acético (560 ml; Fluka, ref. 45830) y ácido acético (240
ml; P.A. Carlo Erba; ref. 20104298). La solución, después de añadir
a gotas ácido sulfúrico concentrado (80 ml), se mantuvo a +4ºC
agitando mecánicamente durante 10 h. La solución se vertió luego en
hielo (aprox. 10 l) mientras que se agitaba continuamente. La mezcla
(un compuesto oleoso en agua) se filtró a través de un lecho de
celita. El sólido gomoso resultante que quedó sobre el lecho de
celita se lavó con agua (3 x 3 l) y luego se disolvió en
diclorometano (2,5 l; P.A. Merck; ref. 1.06050.6025). La fase
orgánica se lavó con NaHCO_{3} al 5% (1 l) y agua (2 x 2 l), se
secó sobre sulfato sódico, se filtró y se evaporó, obteniéndose un
sólido gomoso 143 que se cristalizó en etanol 95 (Prolabo;
ref. 20823.293), obteniéndose 225 g de producto (44%). p.f.
129-130ºC (EtOH al 95%) (la referencia de
literatura de Recondo, E.F. y Rinderknecht, H. Eine neue,
Einfache Synthese des
1-O-Acetyl-2,3,5-tri-O-\beta-D-Ribofuranosides,
Helv. Chim. Acta, 1959, 1171-1173, indica un p.f.
de 130-131ºC).
RMN ^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta:
8,09-7,87 (m, 6H, H_{arom}),
7,62-7,31 (m, 9H, H_{arom}), 6,43 (s, 1H,
H_{1}), 5,91 (dd, 1H, H_{3}, J_{3,4} 6,7 Hz; J_{3,32} 4,9
Hz), 5,79 (pd, 1H, H_{2}, J_{2,3}, 4,9 Hz; J_{1,2}<1),
4,78 (m, 2H, H_{4} y H_{5}), 4,51 (dd, 1H, H_{5}, J_{5,5'}
13,1 Hz, J_{5',4} 5,5 Hz), 2,00 (s, 3H, CH_{3}CO); (idéntico a
la
1-O-acetil-2,3,5-tri-O-benzoil-\beta-D-ribofuranosa
comercial).
| Análisis de masas (^{FAB+}, GT) m/z 445 (M-OAc). | ||
| Análisis elemental para C_{28}H_{24}O_{9}: | ||
| Calculado: | C 66,66; H 4,79 | |
| Hallado: | C H. |
\newpage
Esquema
1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Como se representa en el Esquema 2, se preparó
una suspensión de adenina (19,6 g, 144 mmol;
Pharma-Waldhof, ref. 400134.001, lote 45276800) en
acetonitrilo (400 ml; Riedel de Hean, ref. 33019, destilado sobre
CaH_{2}) con
1-O-acetil-2,3,5-tri-O-benzoil-\beta-L-ribofuranosa
143 (60 g, 119 mmol). A esta suspensión se añadió cloruro
estánnico fumante (22 ml, 187 mmol; Fluka, ref. 96558). Después de
12 h, la mezcla de reacción se concentró a un volumen pequeño
(aprox. 100 ml) y se añadió bicarbonato sódico (110 g) y agua (120
ml). El sólido blanco resultante (sales de estaño) se sometió a
extracción con cloroformo caliente (5 x 200 ml; Across, ref.
22706463). La combinación de los extractos se filtró a través de un
lecho de celita. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa
al 5% de NaHCO_{3} y agua, se secó sobre sulfato sódico (Prolabo;
ref. 28111.365), se filtró y se evaporó, obteniéndose el compuesto
144 (60 g, espuma incolora). La espuma se trató con metanol
saturado con amoniaco (220 ml) en recipiente cerrado a temperatura
ambiente y se agitó durante 4 días. El disolvente se eliminó por
evaporación a presión reducida y el polvo resultante se puso en
suspensión en acetato de etilo (400 ml; Carlo Erba, ref. 528299) y
se mantuvo a reflujo durante 1 h. Después de filtrar, el polvo se
recristalizó en agua (220 ml), obteniéndose la
L-adenosina 145 (24 g, cristales, 75%). p.f.
233-234ºC (Saneyoshi, M. y Satoh, E., Synthetic
Nucleosides and Nucleotides. XIII. Stannic Chloride Ribosylation of
Several 6-Substituted Purines, Chem Pharm Bull,
1979, 27, 2518-2521; Nakayama, C. y Saneyoshi, M,
Synthetic Nucleosides and Nucleotides. XX. Synthesis of Various
1-\beta-Xylofuranosil-5-Alkiluracils
and Related Nucleosides, Nucleosides Nucleotides, 1982, 1,
139-146 dan p.f. de 235º-238ºC).
RMN ^{1}H (200 MHz,
DMSO-d_{6}): \delta 8,34 y 8,12 (2s, 2H, H_{2}
y H_{8}), 7,37 (1s, 2H, NH_{2}), 5,86 (d, 1H, H_{1'},
J_{1',2'} 6,2 Hz), 5,43 (m, 2H, OH_{2'} y OH_{5'}), 5,19 (d,
1H, OH_{3'}, J 3,7 Hz), 4,60 (m, H_{2'}), 4,13 (m, 1H,
H_{3'}), 3,94 (m, 1H, H_{4'}), 3,69-3,49 (m, 2H,
H_{5'a} y H_{5'b}), (idéntica a la adenosina D comercial).
Análisis de masas (FAB+, GT) m/z 268
(M+H)^{+}, 136 (BH_{2})^{+}.
(M+H)^{+}, 136 (BH_{2})^{+}.
Esquema
2
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Como se indica en el Esquema 3, el compuesto
145 (47,2 g, 177 mol) se puso en suspensión en piridina (320
ml; del 99%, de Acros, ref. 131780025) y se añadió
1,3-dicloro-1,1,3,3,tetraisopropildisiloxano
(63 ml, 201 mmol; Fluka, ref. 36520) y la mezcla se agitó a
temperatura ambiente durante 12 h. Se evaporó la piridina y el
residuo se repartió entre acetato de etilo (1 l, Carlo Erba, ref.
528299) y una solución al 5% de NaHCO_{3} (600 ml). La fase
orgánica se lavó con una solución 0,5 N de HCl (2 x 500 ml) y agua
(500 ml), se secó sobre sulfato sódico (Prolabo; ref. 28111.365),
se filtró y se evaporó a sequedad. El sólido resultante se
cristalizó en acetonitrilo (Riedel-de Haen; ref
33019), obteniéndose el compuesto 146 (81 g, 90%). p.f.
97-98ºC (Robins, M.J. y otros, Nucleic Acid
Related Compounds. 42. A general Precedure for the Efficient
Deoxygenetion of Secundary Alcohols. Regiospecific and
Stereoselective Conversion of Ribonucleosides to
2'-Deoxynucleosides, J Am Chem Soc, 1983, 105,
4059-4065, indican un p.f. de 98ºC para el
enantiómero D).
RMN ^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta 8,28
y 7,95 (2s, 2H, H_{2} y H_{8}), 5,96 (d, 1H, J_{1',2'} 1,1
Hz), 5,63 (s, 2H, NH_{2}), 5,10 (dd, 1H, H_{3'}, J_{3',4'}
7,6 Hz, J_{3',2'} 5,5 Hz), 4,57 (dd, 1H, H_{2'}, J_{2',1'}
1,2 Hz; J_{2',3'} 7,6 Hz), 4,15-3,99 (m, 3H,
H_{4'}, H_{5'a} y H_{5'b}), 3,31 (s1, 1H, OH_{2'}), 1,06
(m, 28H, protones de isopropilo). Análisis de masas (FAB-, GT) m/z
508 (M-H)^{-}, 134 (B)^{-}; (FAB+,
GT) m/z (M+H)^{+}, 136 (BH_{2})^{+}.
Esquema
3
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Al compuesto 146 (34 g, 67 mmol), se
añadió acetonitrilo (280 ml; Riedel-de Haen, ref
33019), DMAP (16,5 g, 73 mmol; del 99%, de Acros, ref. 1482702050) y
clorotiocarbonato de fenilo (10,2 ml, 73 mml; del 99%, de Acros, ref
215490050), como se representa en el Esquema 4. La solución se
agitó a temperatura ambiente durante 12 h. Se evaporó el disolvente
y el residuo se repartió entre acetato de etilo (400 ml; Carlo
Erba, ref 528299) y una solución 0,5 N de HCl (400 ml). La capa
orgánica se lavó con solución de HCl 0,5 N (400 ml) y agua (2 x 400
ml), se secó sobre sulfato sódico (Prolabo, ref 28111.365), se
filtró y se evaporó a sequedad, obteniéndose el intermedio como un
sólido de color amarillo pálido. El compuesto 147 en bruto
se disolvió en dioxano (Merck, ref 1.09671.1000) y se añadió AIBN
(3,3 g, 20 mmol;
\alpha,\alpha'-azoisobutironitrilo de Fluka,
ref 1630) y TTMSS (33 ml, 107 mmol;
tris(trimetilsilil)silano de Fluka, ref 93411). La
solución se calentó progresivamente hasta reflujo y se agitó durante
2 h. La mezcla de reacción se concentró a un aceite amarillo que se
cromatografió [eluyente, diclorometano (Merck, ref 1.06050 6025):
metanol (Carlo Erba, ref 309001) 95:2], obteniéndose el compuesto
148 (23 g, espuma incolora, 70%). Se cristalizó en
etanol/éter de petróleo una parte alícuota. p.f.
110-11ºC (Robins, M.J., Wilson, J.S. y Hansske, F.,
Nucleic Acid Related Compounds. 42. A General Procedure for the
Efficient Deoxygenation of Secundary Alcohols. Regiosepecific and
Stereoselective Conversión of Ribonucleosides to
2'-Deoxynucleosides, J Am Chem Soc, 1983, 105,
4059-4065 dan p.f. de
113-114ºC).
RMN ^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta 8,33
y 8,03 (2s, 2H, H_{2} y H_{8}), 6,30 (dd, 1H, H_{1'}, J 2,85
Hz, J 7,06 Hz), 5,63 (s1, 2H, NH_{2}), 4,96 (m, 1H, H_{3'}),
4,50 (m, 2H, H_{5'a} y H_{5'b}), 2,68 (m, 2H, H_{2'a} y
H_{2'b}), 1,08 (m, 28H, protones de isopropilo). Análisis de
masas (FAB+, GT) m/z 494 (M+H)^{+}, 136
(BH_{2})^{+}.
\newpage
Esquema
4
Como proponen Zhang, W. y Robins, M.J.,
Removal of Sylil Protecting Groups from Hydroxil Functions with
Ammonium Fluoride in Mehanol, Tetrahedron Lett, 1992, 33,
1177-1180, se agitó a reflujo durante 2 h una
solución de
3',5'-O-(1,1,3,3-tetraisopropil-1,3-disiloxanil)-2'-deoxy-L-adenosina
148 (32 g, 65 mmol) y fluoruro amónico (32 g, mml; Fluka,
ref 09742) en metanol (Prolabo, ref 20847.295) (Esquema 5). Se
añadió gel de sílice (Merck, ref 1.07734.2500)N y la mezcla
se evaporó cuidadosamente para obtener un polvo blanco. Este polvo
se añadió a la cabecera de una columna de sílice que se eluyó con
diclorometano (Merck, ref 1.06050.6025)/metanol 9/1. Se combinaron
las fracciones apropiadas y la combinación se evaporó, obteniéndose
un polvo blanco que se cristalizó en etanol 95 (Prolabo, ref
20823.293), obteniéndose 12,1 g de producto (75%). p.f.
189-190ºC (EtOH 95) (idéntica a la
2'-desoxi-D-adenosina
comercial).
RMN ^{1}H (200 MHz,
DMSO-d_{6}): \delta 8,35 y 8,14 (2s, 2H, H_{2}
y H_{8}), 7,34 (s1, 2H, NH_{2}), 6,35 (dd, 1H, H_{1'}, J 6,1
Hz, J 7,85 Hz), 5,33 (d, 1H, OH_{2'}, J 4,0 Hz), 5,28 (dd, 1H,
H_{3'}, J 5,95 Hz, J 6,6 Hz), 4,42 (m, 1H, OH5'), 3,88 (m, 1H,
H_{4'}), 3,63-3,52 (m, 2H, H_{5'a} y
H_{5'b}), 2,71 (m, 1H, H_{2'a}), 2,28 (m, 1H, H_{2'b})
(idéntica a la
2'-desoxi-D-adenosina
comercial). \alpha_{D} +26º (c 0,5 agua)
(2'-desoxi-D-adenosina
comercial -25º (c 0,5 agua). UV \lambda_{max}260 nm
(\varepsilon 14100) (H_{2}O). Análisis de masas (FAB+, GT) m/z
252 (M+H)^{+}, 136 (BH_{2})^{+}.
Esquema
5
Se añadió hidrato de hidrazina (1,4 ml, 28,7
mmol) a una solución de
1-(2-O-acetil-3,5-di-O-benzoil-\beta-L-xilofuranosil)uracilo
10 [Gosselin, G., Bergogne, M.C. e Imbach, J.L, Synthesis
and Antiviral Evaluation of
\beta-L-Xylofuranosyl Nucleosides
of the Five Naturally Occurring Nucleic Acid Bases, Journal of
Heterocyclic Chemistry, 1993, 30, 1229.1233] (4,79 g, 9,68 mml) en
piridina (60 ml) y ácido acético (15 ml). La solución se agitó a
temperatura ambiente durante la noche. Se añadió acetona (35 ml) y
la mezcla se agitó durante 30 min. La mezcla de reacción se evaporó
a presión reducida. El residuo resultante se purificó por
cromatografía en columna sobre gel de sílice [eluyente: gradiente
escalonado de metanol (0-4%) en diclorometano],
obteniéndose el compuesto 11 (3,0 g, 68%), que se cristalizó
en ciclohexano/diclorometano. p.f. 111-114ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 11,35 (s anc, 1H, NH), 7,9-7,4 (m, 11H, 2
C_{6}H_{5}CO, H-6), 6,38 (d, 1H,
OH-2', J_{OH-2'} = 4,2 Hz), 5,77
(d, 1H, H-1', J_{1',2'} = 1,9 Hz), 5,55 (d, 1H,
H-5, J_{5-6} = 8 Hz), 5,54 (dd,
1H, H-3', J_{3',2'} = 3,9 Hz y J_{3'4'} = 1,8
Hz), 4,8 (m, 1H, H-4'), 4,7 (m, 2H,
H-5' y H-5''), 4,3 (m, 1H,
H-2'). MS: FAB>0 (matriz GT) m/z 453
(M+H)^{+}, 105 (C_{6}H_{5}CO)^{+}: FAB<0
(matriz GT) m/z 451 (M-H)^{-}, 121
(C_{6}H_{5}CO_{2})^{-}, 111 (B)^{-}1.
| Análisis: | Calculado para C_{23}H_{20}N_{2}O_{8}\cdotH_{2}O: | |
| C 58,09; H 4,76; N 5,96 | ||
| Hallado | C 57,71; H 4,42; N 5,70. |
A una solución de
1-(3,5-di-O-benzoíl-\beta-L-xilofuranosil)uracilo
11 (8 g, 17,7 ml) en una mezcla de benceno anhidro/DMSO (265
ml, 6:4 v/v) se añadió piridina anhidra (1,4 ml),
diciclohexilcarbodiimida (10,9 g, 53 mmol) y ácido dicloroacético
(0,75 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente
durante 4 h, luego se diluyó con acetato de etilo (400 ml) y se
añadió una solución de ácido oxálico (4,8 g, 53 mmol) en metanol
(14 ml). Después de agitar durante 1 h, se filtró la solución. El
filtrado se lavó con una solución saturada de NaCl (2 x 500 ml),
solución de NaOH al 3% (2 x 500 ml) y agua (2 x 500 ml). La fase
orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y luego se evaporó a
presión reducida. El residuo resultante se disolvió en una mezcla de
EtOH absoluto/benceno (140 ml, 2:1 v/v). A esta solución a 0ºC se
añadió NaBH_{4} (0,96 g, 26,5 mmol). Después de agitar durante 1
h, la solución se diluyó con acetato de etilo (400 ml) y luego se
filtró. El filtrado se lavó con solución saturada de NaCl (400 ml)
y agua (400 ml). La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y
luego se evaporó a presión reducida. El material en bruto
resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de
sílice [eluyente: gradiente escalonado de metanol
(0-3%) en diclorometano], obteniéndose el compuesto
12 (5,3 g,66%) que se cristalizó en acetonitrilo. p.f.
182-183ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 11,35 (s anc, 1H, NH), 8,0-7,5 (m, 11H, 2
C_{6}H_{5}CO, H-6), 6,23 (s anc, 1H,
OH-2'), 6,15 (d, 1H, H-1',
J_{1'-2'} = 4 Hz), 5,54 (d, 1H,
H-5, J_{5-6} = 8,1 Hz), 5,37 (t,
1H, H-3', J_{3'-2'} =
J_{3'-4'} = 2,6 Hz), 4,7-4,6 (m,
2H, H-5' y H-5''), 4,5 (m, 1H,
H-4'), 4,4 (m, 1H, H-2'). MS:
FAB>0 (matriz GT) m/z 453 (M+H)^{+}, 341
(S)^{+}, 113 (BH_{2})_{+}, 105
(C_{6}H_{5}CO)^{+}; FAB<0 (matriz GT) m/z 451
(M-H)^{-}, 121
(C_{6}H_{5}CO_{2})^{-}, 111 (B)^{-}.
| Análisis: | Calculado para C_{23}H_{20}N_{2}O_{8}: | |
| \hskip-0.1cm C 61,06; H 4,46; N 6,19 | ||
| Hallado: | \hskip-0.1cm C 60,83; H 4,34; N 6,25. |
A una solución de
1-(3,5-di-O-benzoil-\beta-L-arabinofuranosil)uracilo
12 (5,2 g, 11,4 mmol) en 1,2-dicloroetano
anhidro (120 ml) se añadió cloruro de fenoxitiocarbonilo (4,7 ml,
34,3 mmol) y 4-(dimetilamino)piridina (DMAP, 12,5 g, 102,6
mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente bajo
atmósfera de argón durante 1 h y luego se evaporó a presión
reducida. El residuo se disolvió en diclorometano (300 ml) y la
solución orgánica se lavó sucesivamente con solución 0,2 N de
ácido clorhídrico enfriada con hielo (3 x 200 ml) y agua (2 x 200
ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y luego se evaporó a presión
reducida. El material en bruto se coevaporó varias veces con
dioxano anhidro y se disolvió en este disolvente (110 ml). A la
solución resultante se añadió, bajo argón, hidruro de
tris-(trimetilsilil)silano (4,2 ml, 13,7 mmol) y
\alpha,\alpha'-azobisisobutironitrilo (AIBN, 0,6
g, 3,76 mmol). La mezcla de reacción se calentó y agitó a 100ºC
durante 1 h bajo argón, luego se enfrió a temperatura ambiente y se
evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por
cromatografía en columna sobre gel de sílice [eluyente: gradiente
escalonado de metanol (0-5%)], obteniéndose
13 (2,78 g, 56%), que se cristalizó en EtOH. p.f.
223-225ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 11,4 (s an, 1H, NH), 8,0-7,5 (m, 11H,
2C_{6}H_{5}CO, H-6), 6,28 (t, 1H,
H-1', J = 7 Hz), 5,5 (m, 2H, H-1' y
H-5), 4,6-4,4 (m, 3H,
H-4', H-5' y H-5''),
2,6 (m, 2H, H-2' y H-2'').
MS:FAB>0 (matriz GT) m/z 437 (M+H)^{+}, 3325
(S)^{+}; FAB<0 (matriz GT) m/z
(M-H)^{-}, 111 (B)^{-}.
| Análisis: | Calculado para C_{23}H_{20}N_{2}O_{7}: | |
| \hskip-0.1cm C 63,30; H 4,62; N 6,42 | ||
| Hallado: | \hskip-0.1cm C 62,98; H 4,79; N 6,40. |
Se añadió bajo argón reactivo de Lawesson (1,72
g, 4,26 mmol) a una solución de
1-(3,5-di-O-benzoíl-2-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranosil)uracilo
(13) (2,66 g, 6,1 mmol) en 1,2-dicloroetano
anhidro (120 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante
2 h. Luego se evaporó el disolvente a presión reducida y el residuo
se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice
[eluyente: gradiente escalonado de acetato de etilo
(0-8%) en diclorometano], obteniéndose el
intermedio 4-tio como una espuma amarilla. Se
calentó a 100ºC durante 3 h, en una bomba de acero inoxidable, una
solución de este intermedio tio (1,5 g, 3,31 mmol) en amoniaco
metanólico (saturada previamente a -10ºC y herméticamente cerrada)
(50 ml) y luego se enfrió a 0ºC. La solución se evaporó a presión
reducida. El material en bruto resultante se purificó por
cromatografía en columna sobre gel de sílice [eluyente: gradiente
escalonado de metanol (0-20%) en diclorometano].
Finalmente, se combinaron las fracciones apropiadas, la combinación
se filtró a través de una unidad Millex HV-4
(Millipore, 0,45 \mum) y se evaporó a presión reducida,
obteniéndose la deseada
2'-desoxi-\beta-L-citidina (\beta-L-dC) como una espuma (0,8 g, 80%), que se cristalizó en EtOH absoluto. p.f. 198-199ºC.
2'-desoxi-\beta-L-citidina (\beta-L-dC) como una espuma (0,8 g, 80%), que se cristalizó en EtOH absoluto. p.f. 198-199ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta 7,77 (d, 1H, H-6, J_{6-5}
= 7,4 Hz), 7,10 (d anc, 2H, NH_{-2}), 6,13 (t, 1H,
H-1', J = 6,7 Hz), 5,69 (d, 1H, H-5,
J_{5-6} = 7,4 Hz), 5,19 (d, 1H,
OH-3', J_{OH-3'} = 4,1 Hz), 4,96
(t, 1H, OH-5', J_{OH-5'} =
J_{OH-5''} = 5,2 Hz), 4,1 (m, 1H,
H-3'), 3,75 (m, 1H, H-4'), 3,5 (m,
2H, H-5' y H-5''), 2,0 (m, 1H,
H-2'), 1,9 (m, 1H, H-2''). MS:
FAB> (matriz GT) m/z 228 (M+H)^{+}, 112
(BH_{2})^{+}; FAB<0 (matriz GT) m/z
(M-H)^{-}. [[\alpha]_{D}^{20}
= -69 (c 0,52, DMSO),
[[\alpha]_{D}^{20} = +76 (c 0,55, DMSO) para una sal comercial hidrocloruro del enantimero D].
[[\alpha]_{D}^{20} = +76 (c 0,55, DMSO) para una sal comercial hidrocloruro del enantimero D].
| Análisis: | Calculado para C_{9}H_{13}N_{3}O_{4}: | |
| C 47,57; H 5,77; N 18,49 | ||
| Hallado | C 47,35; H 5,68; N 18,29. |
Una mezcla de L-arabinosa (170 g,
1,13 mo; Fluka, >99,5%, ref 10839), cianamida (100 g, 2,38 mol;
Fluka, >98%, ref 28330), metanol (300 ml) y NH_{4}OH 6 M (50
ml) se agitó a temperatura ambiente durante 3 días y luego se
mantuvo a -10ºC durante la noche. El producto se recogió por
succión, se lavó sucesivamente con metanol y éter y se secó en
vacío. Se obtuvieron 130 g (66,0%) del compuesto analíticamente
puro 151. p.f. 170-172ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}):
\delta ppm 6,35 (s anc, 2H, NH_{2}), 5,15 (d, 1H,
H-1, J = 5,6 Hz), 5,45 (s anc, 1H,
OH-3), 4,70
(s anc, 1H, OH-5), 4,55 (d, 1H, H-2, J = 5,6 hz), 4,00 (s anc, 1H, H-3), 3,65 (m, 1H, h-4), 3,25 (m, 2H, H-5, H-5').
(s anc, 1H, OH-5), 4,55 (d, 1H, H-2, J = 5,6 hz), 4,00 (s anc, 1H, H-3), 3,65 (m, 1H, h-4), 3,25 (m, 2H, H-5, H-5').
Una solución del compuesto 151 (98,8 g,
0,57 mol) y propiolato de metilo (98 ml; Fluka, >97%, ref 81863)
en etanol acuoso al 50% (740 ml) se mantuvo a reflujo durante 5 h,
luego se enfrió y se concentró a presión reducida a la mitad del
volumen original. Después de precipitación con acetona (600 ml), se
recogió por succión el producto, se lavó con etanol y éter y se
secó. Se concentraron parcialmente las aguas madre, se añadió
acetona (100 ml) al concentrado, el sólido precipitado se recogió
por succión y se lavó con acetona y éter, obteniéndose otra cosecha
de producto. Se obtuvieron el total 80 g (62%) del compuesto
152. p.f. 236-240ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6})
\delta ppm 7,87 (d, 1H, H-6, J = 7,4 Hz), 6,35 (d,
1H, H-1', J = 5,7 Hz), 5,95 (d, 1H,
H-5, J = 7,4 Hz), 5,90 (d, 1H,
OH-3'), 5,20 (d, 1H, H-2', J = 5,7
Hz), 5,00 (m, 1H, OH-3'), 4,44 (s anc, 1H,
H-3'), 4,05 (m, 1H, H-4'), 3,25 (m,
2H, H-5, H-5').
A una solución del compuesto 152 (71,1 g,
0,31 mol) en piridina anhidra (1200 ml) se añadió cloruro de
benzoílo (80,4 ml; Fluka, p.a., ref 12930) a 0ºC bajo argón. La
mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h en
ausencia de humedad atmosférica y se apagó añadiendo etanol. Se
eliminaron los disolventes a presión reducida y el residuo
resultante se coevaporó con tolueno y etanol absoluto. La mezcla en
bruto se diluyó luego con etanol y el precipitado se recogió por
succión, se lavó sucesivamente con etanol y éter y se secó. Se
obtuvieron 129 g (95,8%) del compuesto 153. p.f. 254ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6})
\delta ppm 8,1-7,4 (m, 11H, C_{6}H_{5}CO,
H-6), 6,50 (d, 1H, H-1', J = 5,7
Hz), 5,90 (d, 1H, H-5,
J = 7,5 Hz), 5,80 (d, 1H, H-2', J = 5,8 Hz), 5,70 (d, 1H, H-3'), 4,90 (m, 1H, H-4'), 4,35 (m, 2H, H-5, H-5').
J = 7,5 Hz), 5,80 (d, 1H, H-2', J = 5,8 Hz), 5,70 (d, 1H, H-3'), 4,90 (m, 1H, H-4'), 4,35 (m, 2H, H-5, H-5').
A una solución del compuesto 153 (60,3 g,
0,139 mol) en dimetilformamida (460 ml) se añadió a 0ºC una
solución 3,2 N de HCl en DMF (208 ml, preparada in situ
añadiendo 47,2 ml de cloruro de acetilo (Fluka, p.a., ref 00990) a
una solución de 27,3 ml de metanol y 133,5 ml de dimetilformamida).
La mezcla de reacción se agitó a 100ºC durante 1 h en ausencia de
humedad atmosférica, se enfrió y se vertió en agua (4000 ml). El
precipitado del compuesto 154 se recogió por succión, se
lavó con agua y se recristalizó en etanol. Se recogieron los
cristales, se lavaron con etanol frío y éter y se secaron a presión
reducida. Se obtuvieron 60,6 g (92,6%) del compuesto 154.
p.f. 164-165ºC.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6})
\delta ppm 8,7 (s anc, 1H, NH), 8,1-7,3 (m, 11H,
C_{6}H_{5}CO, H-6), 6,15 (d, 1H,
H-1', J = 4,8 Hz), 5,5 (m, 2H, H-5,
H-2'), 4,65 (m, 4H, H-3',
H-4', H-5',
H-5'').
Se mantuvo a reflujo con agitación, durante 5 h,
una mezcla del compuesto 154 (60,28 g, 0,128 mol), hidruro
de tri-n-butilestaño (95 ml; Fluka,
>98%, ref 90915) y azabisisobutironitrilo (0,568 g; Fluka,
>98%, ref 11630) en tolueno seco (720 ml) y se enfrió luego. Se
recogió el sólido por succión y se lavó con tolueno frío y éter de
petróleo. El filtrado se concentró a presión reducida y se diluyó
con éter de petróleo para obtener una cosecha adicional del
compuesto 155. Se obtuvieron en total 54,28 g (97,2%) del
compuesto 155. p.f. 220-221ºC.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta ppm 8,91 (s
anc, 1H, NH), 8,1-7,5 (m, 11H, C_{6}H_{5}CO y
H-6), 6,43 (q, 1H, H-1', J_{1',2'}
= 5,7 Hz y J_{1',2''} = 8,3 Hz), 5,7-5,6 (m, 2H,
H-3' y H-5), 4,8-4,6
(m, 3H, H-5', H-5'' y
H-4'), 2,8-2,7 (m, 1H,
H-2'), 2,4-2,3 (m, 1H,
H-2'').
Se mantuvo a reflujo bajo argón durante la noche
una solución del compuesto 155 (69 g, 0,158 mol) y reactivo
de Lawesson (74 g; Fluka, >98%, ref 61750) en cloruro de
metileno anhidro (3900 ml). Después de evaporar el dispolvente, el
residuo en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel
de sílice [eluyente: gradiente de metanol (0-2%) en
cloruro de metileno], obteniéndose el compuesto 156 puro (73
g, 100%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta ppm 9,5 (s anc,
1H, NH), 8,1-7,4 (m, 10H, C_{6}H_{5}CO), 7,32
(d, 1H, H-6, J = 7,7 Hz), 6,30 (dd, 1H,
H-1', J = 5,6 Hz y J = 8,2 Hz), 6,22 (d, 1H,
H-5, J = 7,7 Hz), 5,6 (m, 1H, H-3'),
4,7 (m, 2H, H-5', H-5''), 4,5 (m,
1H, H-4'), 2,8 (m, 1H, H-2'), 2,3
(m, 1H, H-2'').
Una solución del compuesto 156 (7,3 g,
0,016 mol) en metanol saturado con amoniaco (73 ml) se calentó a
100ºC en un cilindro de acero inoxidable durante 3 h. Después de
enfriar cuidadosamente, se evaporó el disolvente a presión
reducida. Se lavó con acetato de etilo una solución acuosa del
residuo y se evaporó a sequedad. Este procedimiento se realizó en
otras 9 muestras (cada una de 7,3 g) del compuesto 156
(producto de
2'-desoxi-\beta-L-citosina:
73 g). Se combinaron los 10 residuos, se diluyó la combinación con
etanol absoluto y se enfrió, obteniéndose
2'-desoxi-\beta-citosina
como cristales. Se eliminaron trazas de benzamida de los cristales
de
2'-desoxi-\beta-citosina
por un procedimiento de extracción sólido-líquido
(a reflujo en acetato de etilo durante 1 h). Se obtuvieron 28,75 g
(78,6%) del compuesto
2'-desoxi-\beta-citosina.
p.f. 141-145ºC.
RMN ^{1}H (DMSO) \delta ppm 8,22 y 8,00 (2 s
anc, 2H, NH_{2}), 7,98 (d, 1H, H-6, J = 7,59 Hz),
6,12 (t, 1H, H-1', J = 6,5 Hz y J = 7,6 Hz), 5,89
(d, 1H, H-5, J = 7,59 Hz), 5,3 (s anc, 1H,
OH-3'), 5,1 (s anc, 1H, OH-5'), 4,2
(m, 1H, H-3'), 3,80 (q, 1H, H-4', J
= 3,6 Hz y J = 6,9 Hz), 3,6-3,5 (m, 2H,
H-5', H-5''),
2,2-2,0 (m, 2H, H-2',
H-2''). FAB<0 (GT) m/e (M'H)^{-}, 110
(B)^{-}; FAB>0 (GT) 228 (M+H)^{+}, 112
(B+2H)^{+}. [\alpha]_{D}^{20} -56,48 (c =
1,08 en DMSO); UV (pH 7) \lambda_{max} = 270 nm (\varepsilon
= 10000).
Una mezcla del compuesto 155 (105,8 g,
0,242 mol), yodo (76,8 g; Fluka, 9,8%, ref 57650), CAN (66,4 g;
nitrato amónico de cerio, de Aldrich, >98,5%, ref
21.547-3) y acetonitrilo (2550 ml) se agitó a 80ºC
durante 3 h y luego la mezcla de reacción se enfrió a temperatura
ambiente, con lo que cristalizó el compuesto 157 (86,6 g,
63,5%). p.f. 192-194ºC.
RMN ^{1}H (DMSO) \delta ppm: 8,34 (s, 1H,
NH), 8,2-7,2 (m, 11H, 2 C_{6}H_{5}CO,
H-6), 6,31 (q, 1H, H-1', J = 5,5 Hz
y
J = 8,7 Hz), 5,5 (m, 1H, H-3'), 4,7 (m, 2H, H-5', H-5''), 4,5 (m, 1H, H-4'), 2,7 (m, 1H, H-2'), 2,3 (m, 1H, H-2''). FAB<0 (GT) m/e 561 (M-H)^{-}, 237 (B)^{-}; FAB>0 (GT) 563 (M+H)^{+}. [\alpha]_{D}^{20} +39,05 (c = 1,05 en DMSO). UV (EtOH 95) \nu_{max} = 281 nm (\varepsilon = 9000), \nu_{min} = 254 nm (\varepsilon = 4000), \nu_{max} = 229 nm (\varepsilon = 31000).
J = 8,7 Hz), 5,5 (m, 1H, H-3'), 4,7 (m, 2H, H-5', H-5''), 4,5 (m, 1H, H-4'), 2,7 (m, 1H, H-2'), 2,3 (m, 1H, H-2''). FAB<0 (GT) m/e 561 (M-H)^{-}, 237 (B)^{-}; FAB>0 (GT) 563 (M+H)^{+}. [\alpha]_{D}^{20} +39,05 (c = 1,05 en DMSO). UV (EtOH 95) \nu_{max} = 281 nm (\varepsilon = 9000), \nu_{min} = 254 nm (\varepsilon = 4000), \nu_{max} = 229 nm (\varepsilon = 31000).
| Análisis: | Calculado para C_{23}H_{19}IN_{2}O_{7}: | |
| \hskip-0.1cm C 49,13; H 3,41; N 4,98; I 22,57 | ||
| Hallado: | \hskip-0.1cm C 49,31; H 3,53; N 5,05; I 22,36. |
A una solución del compuesto 157 (86,6 g,
0,154 mol) en piridina anhidra (1530 ml) que contenía
N-etildiisopropilamina (53,6 ml; Aldrich, >99,5%,
ref 38.764-9) ae añadió, en porciones a 0ºC,
cloruro de p-toluílo (40 ml, Aldrich, 98%, ref
10.663-1). La mezcla de reacción se agitó a
temperatura ambiente durante 2 h y luego se añadió agua para apagar
la reacción; la mezcla de reacción se sometió luego a extracción
con cloruro de metileno. La fase orgánica se lavó con agua, se secó
sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad, obteniéndose la
3',5'-di-O-benzoíl-2'-desoxi-3-N-toluoil-5-yodo-\beta-L-uridina
(158) que se puede usar en la etapa siguiente sin más
purificación.
Una solución de la mezcla en bruto de 158,
acetato de paladio (3,44 g; Aldrich, >99,98%, ref
37.987-5), trifenilfosfina (8,0 g; Fluka, > 99%,
ref 44.377-8) con trietilamina (4,3 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 45 min. Luego se añadió a gotas a 0ºC,
bajo argón, tetrametilestaño (42,4 ml); Aldrich, >99%, ref
14.647-1). Después de agitar a
100-110ºC durante la noche, la mezcla de reacción
se vertió en agua y se sometió a extracción con dietil éter. La
solución orgánica se secó sobre sulfato sódico y se concentró a
presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en
columna sobre gel de sílice [eluyente: gradiente escalonado de
acetato de etilo (0-10%) en tolueno], obteniéndose
el compuesto 159 (42,3 g, 48,3% para las dos etapas).
RMN ^{1}H (DMSO) \delta ppm,
8,3-7,2 (m, 15H, 2C_{6}H_{5}CO,
1CH_{3}C_{6}H_{4}CO, H-6), 6,29 (t, 1H,
H-1', J = 7,0 Hz), 5,7 (m, 1H,
H-3'), 4,7-4,5 (m, 3H,
H-5', H-5'', H-4'),
2,7-2,6 (m, 2H, H-2',
H-2''). FAB<0, (GT) m/e 567
(M-H)^{-}, 449
(M-CH_{3}C_{6}H_{4}CO)^{-}, 243
(B)^{-}, 121 (C_{6}H_{5}COO)^{-}; FAB>0
(GT) 1137 (2M+H)^{+}, 569 (M+H)^{+}, 325
(M-B)^{-}, 245 (B+2H)^{+}, 119
(CH_{3}C_{6}H_{5}CO)^{+}.
Una solución del compuesto 159 (42,3 g,
0,074 ml) en metanol saturado con amoniaco (1850 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 2 días. Después de evaporar el
disolvente, el residuo se diluyó con agua y se
lavó varias veces con acetato de etilo. Se separó la capa acuosa, se evaporó a presión reducida y el residuo se
purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [eluyente: gradiente escalonado de metanol (0-10%) en cloruro de metileno], obteniéndose 2'-desoxi-\beta-L-timidina pura (11,62 g, 64,8%) que se cristalizó en etanol. p.f.
185-188ºC.
lavó varias veces con acetato de etilo. Se separó la capa acuosa, se evaporó a presión reducida y el residuo se
purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [eluyente: gradiente escalonado de metanol (0-10%) en cloruro de metileno], obteniéndose 2'-desoxi-\beta-L-timidina pura (11,62 g, 64,8%) que se cristalizó en etanol. p.f.
185-188ºC.
RMN ^{1}H (DMSO) \delta ppm 11,3 (s, 1H, NH),
7,70 (s, 1H, H-6), 6,2 (pt, 1H,
H-1'), 5,24 (d, 1H, OH-3', J = 4,2
Hz), 5,08 (t, 1H, OH-5', J = 5,1 Hz), 4,2 (m, 1H,
H-3'), 3,7 (m, 1H, H-4'),
3,5-3,6 (m, 2H, H-5',
H-5''), 2,1-2,0 (m, 2H,
H-2', H-2''). FAB<0, (GT) m/e 483
(2M-H)^{-}, 349
(M+T-H)^{-}, 241
(M-H)^{-}, 125 (B)^{-}; FAB>0
(GT) 243 (M+H)^{+}, 127 (B+2H)^{+}.
[\alpha]_{D}^{20} -13,0 (c = 1,0 en DMSO); UV (pH 1)
\nu_{max} = 267 nm (\varepsilon = 9700), \nu_{min} = 234
nm (\varepsilon = 2000).
Se sintetizó
\beta-L-dI por desaminación de
2'-desoxi-\beta-L-adenosina
(\beta-L-dA) siguiendo el
procedimiento antes descrito en la serie de
9-D-glucopiranosilo (ref: I.Iwai, T.
Nishimura y B. Shimizu, Synthetic Procedures in Nucleic Acid
Chemistry, W.W. Aorbach y R.S. Tipson, eds., John Wiley &
Sons, Inc., New York, 1968, 1, 135-138).
\newpage
Esquema
6
Así, una solución de
\beta-L-dA (200 mg) en una mezcla
de ácido acético (0,61 ml) y agua (19 ml) se calentó con nitrito
sódico (495 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante
la noche. La solución se evaporó luego a sequedad a presión
reducida. Se aplicó a una columna IR-120
(H)^{+} de resina de intercambio iónico una solución
acuosa del residuo y la columna se eluyó con agua. Se recogieron
fracciones apropiadas y la combinación se evaporó a sequedad,
obteniéndose \beta-L-dI puro que
se cristalizó en metanol (106 mg, 53% de rendimiento no
optimizado). p.f. 209-211ºC. UV (H_{2}O),
\lambda_{max} = 247 nm.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) = 8,32
y 8,07 (2s, 1H cada una, H-2 y H-8),
6,32 (pt, 1H, H-1, J = 6,7 Hz), 4,4 (m, 1H,
H-3'), 3,9 (m, 1H, H-4'),
3,7-3,4 (m, 2H parcialmente oscurecida por HOD,
H-5',5''), 2,6 y 2,3 (2m, 1H cada una,
H-2' y H-2''). Espectro de masas
(maduro, glicerol-tioglicerol, 1:1, v/v), FAB>0:
253 (M+H)^{+}, 137 (base + 2H)^{\text{*}};
FAB<0: 251 (m-H)^{-}, 135 (base).
[\alpha]_{D}^{20} = -19,3 (c 0,88, H_{2}O).
Los análisis de toxicidad se realizaron para
estimar si cualesquier efectos antivirales observados son debidos a
un efecto general sobre la viabilidad de la célula. El método usado
es la medida del efecto de
\beta-L-dA,
\beta-L-dC y
\beta-L-dT sobre el crecimiento
celular en ensayos clorogénicos de médula ósea humana, en
comparación con la lamuvidina. Los resultados se presentan en la
Tabla 1.
Se determinó la capacidad de los derivados
trifosfato de \beta-L-dA,
\beta-L-dC,
\beta-L-dU,
\beta-L-2'-dG,
\beta-L-dI y
\beta-L-dT para inhibir la
hepatitis D. La Tabla 2 describe las actividades inhibidoras
comparativas de trifosfatos de
\beta-L-dT
(\beta-L-dT-TP),
\beta-L-dC
(\beta-L-dC-TP),
\beta-L-dU
(\beta-L-dU-TP) y
\beta-L-dA
(\beta-L-dA-TP)
sobre la DNA polimerasa del virus de la hepatitis de marmota (WHV)
y DNA polimerasas \alpha, \beta y \gamma humanas.
\vskip1.000000\baselineskip
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
IC _{50} : Concentración que inhibe 50%\cr
\begin{minipage}[t]{152mm}b. \hskip0.4cm El valor de K _{i}
se determinó usando DNA activado de timo de ternera como
cebador-plantilla y dATP como sustrato. Los
inhibidores se analizaron por análisis gráfico de Dixon. En estas
condiciones, la K _{m} media de la DNA polimerasa \alpha humana
para dATP es de aproximadamente 2,6 \mu M. La DNA polimerasa
\beta humana presentaba un estado estacionario K _{m} de 3,33
\mu M para dATP. La DNA polimerasa \gamma humana presentaba una
K _{m} estacionaria de 5,2
\mu M.\end{minipage} \cr}
Se determinó la actividad antivirus de la
hepatitis B de \beta-L-dA,
\beta-L-dC,
\beta-L-dU,
\beta-L-2'-dG y
\beta-L-dT en células Hep
G-2 (2.2.15) transfectadas. La Tabla 3 ilustra el
efecto de \beta-L-dA,
\beta-L-dC,
\beta-L-dU y
\beta-L-dT frente a la replicación
del virus de la hepatitis D en células Hep G-2
(2.2.15) transfectadas.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se midió en células 2.2.15 el efecto de
\beta-L-dA,
\beta-L-dC y
\beta-L-dT en combinación sobre el
crecimiento de la hepatitis B. Los resultados se presentan en la
Tabla 4.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Cada una de las combinaciones producía una
actividad anti-HBV, que era sinérgica. Además, la
combinación de L-dA
+L-dC+L-dT era también sinérgica en
este modelo.
Se midió la inhibición de la replicación de la
hepatitis B en células 2.2.15 por
\beta-L-dA y
\beta-L-dC solas o en combinación.
Los resultados se presentan en la Tabla 5.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
Se determinó la eficacia de L-dA,
L-dT y L-dC frente a la infección
por hepadnavirus en marmotas (Marmota monax) infectadas
crónicamente con el virus de la hepatitis de marmotas (WHV). Este
modelo animal de infección con HBV es ampliamente aceptado y ha
demostrado ser útil para la evaluación de agentes antivirales
dirigidos contra el HBV.
Había tres animales por grupo de fármaco y cuatro
animales para control. En el grupo 1, los animales recibieron un
control vehículo; el grupo 2 recibió lamivudina (3TC) (10
mg/kg/día); los grupos 3-6 recibieron
L-dA (0,01, 0,1, 1,0 y 10,0 mg/kg/día,
respectivamente); los grupos 7-10 recibieron
L-dT (0,01, 0,1, 1,0, 10 mg/kg/día,
respectivamente) y los grupos 11-14 recibieron
L-dC (0,01, 0,1, 1,0, 10 mg/kg/día,
respectivamente).
Los fármacos se administraron por vía oral una
vez al día y se tomaron muestras de sangre los días 0, 1, 3, 7, 14,
21, 28 y, después del tratamiento, los días +1, +3, +7, +14, +28 y
+56. La estimación de la actividad y la toxicidad se basó en las
reducciones de DNA de WHV en suero: PCR cuantitativa con
transferencia.
Los resultados se ilustran en la Figura 5 y la
Tabla 6.
Los datos revelan que L-dA, LdT y
L-dC son muy activas en este modelo in vivo.
Primero, la carga viral se reduce a niveles no detectables
(L-dT) o casi no detectables (L-dA,
L-dC). Segundo, L-dA y
L-dC han demostrado ser más activos que 3TC
(lamivudina) en este modelo. Tercero, no es detectable rebote viral
durante al menos dos semanas de retirar la L-dT.
Cuarto, las curvas de dosis-respuesta sugieren que
un aumento de la dosis de L-dA y
L-dC tendría una actividad antiviral similar a la
de L-dT. Quinto, todos los animales que recibieron
las fármacos ganaron peso y no se detectó toxicidad alguna
relacionada con las fármacos.
Se pueden tratar personas u otros huéspedes
infectados con hepatitis D administrando una cantidad efectiva de
un
\beta-2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido,
por ejemplo,
\beta-L-2'-desoxiadenosina,
\beta-L-2'-desoxicitidina,
\beta-L-2'-desoxiuridina,
\beta-L-1'-desoxiguanidina
o
\beta-L-2'-desoxitimidina,
o una de sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptable, en
presencia de un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Las sustancias activas se pueden administrar por una vía apropiada,
por ejemplo, oralmente, parenteralmente, intravenosamente,
intradérmicamente, subcutáneamente o tópicamente, en forma líquida
o sólida.
La sustancia activa se incluye en el vehículo o
diluyente farmacéuticamente aceptable en cantidad suficiente para
suministrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de
compuesto para inhibir la replicación viral in vivo, sin causar
efectos tóxicos en el paciente tratado. Por "cantidad
inhibidora" se entiende una cantidad de ingrediente activo
suficiente para ejercer un efecto inhibidor medido, por ejemplo,
mediante un ensayo de los descritos aquí.
Una dosis preferida del compuesto para todas las
dolencias mencionadas estará en el intervalo de aproximadamente 1 a
50 mg/kg, preferiblemente de 1 a 20 mg/kg de peso corporal por día
y, más en general, de 0,1 a aproximadamente 100 mg de peso corporal
del receptor por día. El intervalo de dosificación efectiva del
profármaco farmacéuticamente aceptable se puede calcular sobre la
base del peso del nucleótido madre a suministrar. Si el profármaco
exhibe actividad por sí, la dosis efectiva se puede estimar como se
ha indicado usando el peso del profármaco o por otros medios
conocidos por los expertos en la técnica.
El compuesto se administra convenientemente en
cualquier forma de dosificación adecuada, incluida, aunque no
únicamente, una forma que contiene de 7 a 3000 mg, preferiblemente
de 70 a 1400 mg de ingrediente activo por unidosis. Usualmente, una
dosificación de 50-1000 mg es conveniente.
Idealmente, el ingrediente activo se debe
administrar para conseguir concentraciones pico del ingrediente
activo en plasma de 0,2 a 70 \muM, preferiblemente de
aproximadamente 1,0 a 10 \muM. Esto puede conseguirse, por
ejemplo, por inyección intravenosa de una solución al
0,1-5% del ingrediente activo, opcionalmente en
solución fisiológica, o por administración de un bolus del
ingrediente activo.
La concentración del compuesto activo en la
composición del fármaco dependerá de las velocidades de absorción,
inactivación o excreción del fármaco así como de otros factores
conocidos por los expertos en la técnica. Ha de tenerse en cuenta
que los valores de la dosificación variarán también con la severidad
de la dolencia a aliviar. Ha de tenerse en cuenta, además, que para
cualquier sujeto particular, se deben ajustar regímenes de
dosificación específicos a lo largo del tiempo de conformidad con
la necesidad individual y el criterio profesional de la persona que
administra o supervisa la administración de las composiciones, y
que los intervalos de concentración que se han dado aquí son
meramente a modo de ejemplo y no limitan el ámbito o la práctica de
la composición reivindicada. El ingrediente activo se puede
administrar de una vez, o puede dividirse en dosis menores a
administrar a intervalos de tiempo variables.
Un modo preferente de administración del
ingrediente activo es la administración oral. Por lo general, las
composiciones orales incluyen un diluyente inerte o un vehículo
comestible. Pueden estar contenidas en cápsulas o comprimidos como
comprimidos. A los fines de administración terapéutica oral, el
compuesto activo se puede incorporar con excipientes y usarse en
forma de comprimidos, trociscos o cápsulas. Como parte de la
composición pueden incluirse agentes aglutinantes y/o materiales
coadyuvantes farmacéuticamente compatibles.
Los comprimidos, píldoras, cápsulas, trociscos,
etc. pueden contener cualquiera de los siguientes ingredientes o
compuestos de naturaleza similar: un aglutinante tal como celulosa
microcristalina, goma tragacanto o gelatina; un excipiente tal como
almidón o lactosa,; un agente desintegrante tal como ácido
algínico, primogel o almidón de maíz; un lubricante tal como
estearato magnésico o Sterotes; un agente deslizante tal como
dióxido de silicio coloidal; un edulcorante tal como sacarosa o
sacarina; o un agente saboreador tal como menta piperácea,
salicilato de metilo o agente saboreador de naranja. Cuando la forma
de unidosis es una cápsula, ésta puede contener, además de material
del tipo anterior, un vehículo líquido tal como un aceite graso.
Además, las formas de unidosis pueden contener otros varios
materiales que modifican la forma física de la unidosis, por
ejemplo, revestimientos de azúcar, goma laca u otros agentes
entéricos.
El compuesto se puede administrar como componente
de un elixir, una suspensión, un jarabe, una oblea, chicle, etc. Un
jarabe puede contener, además de los compuestos activos, sacarosa
como edulcorante y ciertos conservantes, colorantes y tintes y
agentes saboreadores.
El compuesto o un derivado de él, o sus sales
farmacéuticamente aceptables, se puede mezclar con otros materiales
activos que no empeoran la acción deseada, o con materiales que
suplementan la acción deseada, tales como antibióticos, agentes
antihongos, antiinflamatorios, inhibidores de proteasas, u otros
agentes antivirales nucleósidos o no nucleósidos. Las soluciones o
suspensiones usadas para aplicación parenteral, intradérmica,
subcutánea o tópica pueden incluir los componentes siguientes: un
diluyente estéril tal como agua para inyección, solución
fisiológica, aceites fijados, polietilenglicoles, glicerina,
propilenglicol u otros disolventes sintéticos; agentes
antibacterianos tales como alcohol bencílico o metilparabenos;
antioxidantes tales como ácido ascórbico o bisulfito sódico;
agentes quelatantes tales como ácido etilendiaminatetraacético;
tampones tales como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para el
ajuste de la tonicidad tales como cloruro sódico o dextrosa. La
preparación parenteral puede estar contenida en ampollas, jeringas
desechables o viales multidosis de vidrio o plástico.
Si el fármaco se administra por vía intravenosa,
los vehículos son solución salina fisiológica o solución salina
tamponada con fosfato (PBS).
En una realización preferente, los compuestos
activos se preparan con vehículos que protegerán el compuesto
contra una rápida eliminación del cuerpo, como puede ser una
formulación de liberación controlada, incluidos implantes y sistemas
microencapsulados de suministro. Se pueden usar polímeros
biodegradables, biocompatibles, tales como acetato de etilenvinilo,
polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y
ácido poliacético. Los métodos para la preparación de tales
formulaciones son conocidos por los expertos en la técnica. Los
materiales pueden adquirirse comercialmente de Alza Corporation.
Como vehículos farmacéuticamente aceptables se
prefieren también suspensiones liposomales (incluidos liposomas que
se dirigen a células infectadas diana con anticuerpos monoclonales
a antígenos virales). Éstas se pueden preparar de acuerdo con
métodos conocidos por los expertos en la técnica, por ejemplo,
según se describe en la patente U.S. nº. 4.522.811. Por ejemplo, se
pueden preparar formulaciones de liposomas disolviendo lípidos
apropiados (tales como estearoilfosfatidiletanolamina,
estearoilfosfatidilcolina, araquidoilfosfatidilcolina y colesterol)
en un disolvente inorgánico que luego se evapora, dejando una
película delgada de lípido seco sobre la superficie del recipiente.
Se introduce luego en el recipiente una solución acuosa del
compuesto activo o sus derivados monofosfato, difosfato y/o
trifosfato. El recipiente se agita luego a mano para liberar
material lipídico de los lados del recipiente y dispersar agregados
lipídicos, con lo que se forma la suspensión liposomal.
Claims (15)
1. Uso de un
20-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
de la fórmula
o una de sus sales
farmacéuticamente aceptable, en la manufactura de un medicamento
para el tratamiento o la profilaxis de un huésped infectado con el
virus de la hepatitis
D,
fórmula en la que
R^{1} se selecciona entre el grupo constituido
por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cíclico,
CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquil- sulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado
fosfato; y
BASE es una base purina o pirimidina que
opcionalmente puede estar sustituida.
2. El uso de la reivindicación 1, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxipurina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} se selecciona entre el grupo constituido
por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cílico,
CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado
fosfato;
Y es OR^{3}, NR^{3}R^{4} o SR^{3};
X^{1} y X^{2} se seleccionan
independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo de
cadena lineal, ramificada o cíclico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
halógeno, OR^{5}, NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} son,
independientemente, H, alquilo de cadena lineal, ramificada o
cílico, CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato.
3. El uso de la reivindicación 2, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxiadenosina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} es H, mono-, di- o trifosfato, acilo,
alquilo o un derivado fosfato estabilizado.
4. El uso de la reivindicación 2, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxiguanosina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} es H, mono-, di- o trifosfato, acilo,
alquilo o un derivado fosfato estabilizado.
5. El uso de la reivindicación 2, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxiinosina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} es H, mono-, di- o trifosfato, acilo,
alquilo o un derivado fosfato estabilizado.
6. El uso de la reivindicación 1, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxipirimidina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} se selecciona entre el grupo constituido
por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cílico,
CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de fosfato;
CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de fosfato;
Y es OR^{3}, NR^{3}R^{4} o SR^{3};
X^{1} se selecciona entre el grupo constituido
por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cíclico,
CO-alquilo, CO-arilo,
CO-alcoxialquilo, halógeno, OR^{5},
NR^{5}NR^{6} o SR^{5}, y
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} son,
independientemente, H, alquilo de
cadena
lineal, ramificada o cílico, CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo,
CO-ariloxialquilo, CO-arilo
sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo,
resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado de
fosfato.
7. El uso de la reivindicación 6, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxicitidina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} es H, mono-, di- o trifosfato, acilo,
alquilo o un derivado fosfato estabilizado.
8. El uso de la reivindicación 6, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una
\beta-L-2'-desoxiuridina
de la fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} es mono-, di- o trifosfato, acilo,
alquilo o un derivado fosfato estabilizado.
9. El uso de la reivindicación 6, en el que el
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es una \beta-L-timidina de la
fórmula:
o una de sus sales
farmacéuticamente
aceptable,
fórmula en la que
R^{1} es H, mono-, di- o trifosfato, acilo,
alquilo o un derivado fosfato estabilizado.
10. El uso de la reivindicación 3, la
reivindicación 7 o la reivindicación 9, en el que R^{1} es
hidrógeno.
11. El uso de la reivindicación 3, la
reivindicación 7 o la reivindicación 9, en el que R^{1} es
acilo.
12. El uso de la reivindicación 11, en el que el
acilo deriva de un aminoácido.
13. El uso de la reivindicación 12, en el que el
aminoácido es valina.
14. Uso de al menos dos
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósidos,
en el que cada
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
es, independientemente, de la fórmula
o una de sus sales
farmacéuticamente aceptable, en la manufactura de un medicamento
para el tratamiento o la profilaxis de un huésped infectado con el
virus de la hepatitis
D,
fórmula en la que
R^{1} se selecciona entre el grupo constituido
por H, alquilo de cadena lineal, ramificada o cíclico,
CO-alquilo,
CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado fosfato; y
CO-arilo, CO-alcoxialquilo, CO-ariloxialquilo, CO-arilo sustituido, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, arilalquilsulfonilo, resto de aminoácido, mono-, di- o trifosfato, o un derivado fosfato; y
BASE es una base purina o pirimidina que
opcionalmente puede estar sustituida.
15. Uso de un
2'-desoxi-\beta-L-eritro-pentofuranonucleósido
biológicamente activo, o una de sus sales farmacéuticamente
aceptable, con un agente antihepatitis B para la manufactura de un
medicamento para administración simultánea, separada o secuencial
en el tratamiento de un huésped infectado con el virus de la
hepatitis D, en el que el agente antihepatitis B se selecciona
entre el grupo constituido por FTC, L-FMAU, DAPD,
famciclovir, penciclovir, BMS-200475, bis pom PMEA
(adefovir, dipivoxil), lobucavir, ganciclovir o ribavirina.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US20753800P | 2000-05-26 | 2000-05-26 | |
| US207538P | 2000-05-26 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2227203T3 true ES2227203T3 (es) | 2005-04-01 |
Family
ID=22771005
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES01937785T Expired - Lifetime ES2227203T3 (es) | 2000-05-26 | 2001-05-29 | Metodos para tratar la infeccion por el virus de la hepatitis delta con beta-1-2'-desoxinucleosidos. |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6596700B2 (es) |
| EP (1) | EP1292313B1 (es) |
| JP (1) | JP2004513070A (es) |
| KR (1) | KR100854398B1 (es) |
| CN (1) | CN100490818C (es) |
| AT (1) | ATE275406T1 (es) |
| AU (3) | AU6348401A (es) |
| BR (1) | BR0111195A (es) |
| CA (1) | CA2410488C (es) |
| DE (1) | DE60105424T2 (es) |
| EA (1) | EA005890B1 (es) |
| ES (1) | ES2227203T3 (es) |
| HK (1) | HK1050999A1 (es) |
| IL (1) | IL153078A0 (es) |
| MX (1) | MXPA02011641A (es) |
| TR (1) | TR200402565T4 (es) |
| WO (1) | WO2001091737A2 (es) |
| ZA (2) | ZA200210100B (es) |
Families Citing this family (62)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA986614B (en) * | 1997-07-25 | 1999-01-27 | Gilead Sciences | Nucleotide analog composition |
| DK2415776T3 (en) * | 1998-08-10 | 2016-07-04 | Novartis Ag | Beta-L-2'-deoxy nucleosides for the treatment of Hepatitis B |
| US6444652B1 (en) | 1998-08-10 | 2002-09-03 | Novirio Pharmaceuticals Limited | β-L-2'-deoxy-nucleosides for the treatment of hepatitis B |
| US20020056123A1 (en) * | 2000-03-09 | 2002-05-09 | Gad Liwerant | Sharing a streaming video |
| JP2003532643A (ja) | 2000-04-13 | 2003-11-05 | フアーマセツト・リミテツド | 肝炎ウイルス感染症を治療するための３’−または２’−ヒドロキシメチル置換ヌクレオシド誘導体 |
| MY164523A (en) | 2000-05-23 | 2017-12-29 | Univ Degli Studi Cagliari | Methods and compositions for treating hepatitis c virus |
| KR20030036189A (ko) | 2000-05-26 | 2003-05-09 | 이데닉스(케이만)리미티드 | 플라비바이러스 및 페스티바이러스의 치료방법 및 조성물 |
| US6787526B1 (en) * | 2000-05-26 | 2004-09-07 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides |
| PT1411954E (pt) * | 2000-10-18 | 2011-03-16 | Pharmasset Inc | Nucleosídeos modificados para o tratamento de infecções virais e proliferação celular anormal |
| DE14169110T1 (de) * | 2002-06-28 | 2022-05-12 | Centre National De La Recherche Scientifique -Cnrs- | Modifizierte 2'- und 3'-Nukleosid-Prodrugs zur Behandlung von Flaviridae-Infektionen |
| US7608600B2 (en) | 2002-06-28 | 2009-10-27 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections |
| RS114104A (en) * | 2002-06-28 | 2007-02-05 | Idenix (Cayman) Limited, | 2' and 3'-nucleoside prodrugs for treating flaviviridae infections |
| AU2003248748A1 (en) * | 2002-06-28 | 2004-01-19 | Idenix (Cayman) Limited | 2'-c-methyl-3'-o-l-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections |
| CN101172993A (zh) * | 2002-06-28 | 2008-05-07 | 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 | 用于治疗黄病毒感染的2′－c－甲基－3′－o－l－缬氨酸酯核糖呋喃基胞苷 |
| BR0314259A (pt) * | 2002-09-13 | 2005-07-26 | Idenix Cayman Ltd | ß-l-2'-desoxinucleosìdeos para o tratamento de cepas de hbv resistentes e terapias combinadas |
| US7148349B2 (en) * | 2002-10-31 | 2006-12-12 | Metabasis Therapeutics, Inc. | Cyclic phosphate diesters of 1,3-propane-1-aryl diols and their use in preparing prodrugs |
| KR20050088079A (ko) | 2002-11-15 | 2005-09-01 | 이데닉스 (케이만) 리미티드 | 2'-분지형 뉴클레오시드 및 플라비비리다에 돌연변이 |
| CN1303089C (zh) * | 2002-11-19 | 2007-03-07 | 天津药物研究院 | 阿德福韦酯结晶形态及其制备方法 |
| CN1330373C (zh) * | 2002-12-02 | 2007-08-08 | 美德（江西）生物科技有限公司 | 含alfa－干扰素，阿地福韦和二脱氧氟硫代胞嘧啶的药物组合物 |
| EP2319853B1 (en) * | 2002-12-12 | 2014-03-12 | IDENIX Pharmaceuticals, Inc. | Process for the production of 2'-branched nucleosides |
| US7429572B2 (en) | 2003-05-30 | 2008-09-30 | Pharmasset, Inc. | Modified fluorinated nucleoside analogues |
| WO2006031725A2 (en) | 2004-09-14 | 2006-03-23 | Pharmasset, Inc. | Preparation of 2'fluoro-2'- alkyl- substituted or other optionally substituted ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives |
| CN101242842A (zh) | 2005-06-17 | 2008-08-13 | 诺瓦提斯公司 | Sanglifehrin在hcv中的用途 |
| US7781576B2 (en) * | 2005-12-23 | 2010-08-24 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Process for preparing a synthetic intermediate for preparation of branched nucleosides |
| GB0623493D0 (en) | 2006-11-24 | 2007-01-03 | Univ Cardiff | Chemical compounds |
| US7964580B2 (en) | 2007-03-30 | 2011-06-21 | Pharmasset, Inc. | Nucleoside phosphoramidate prodrugs |
| US8551973B2 (en) | 2008-12-23 | 2013-10-08 | Gilead Pharmasset Llc | Nucleoside analogs |
| EP2376088B1 (en) | 2008-12-23 | 2017-02-22 | Gilead Pharmasset LLC | 6-O-Substituted-2-amino-purine nucleoside phosphoramidates |
| EA019295B1 (ru) | 2008-12-23 | 2014-02-28 | Джилид Фармассет, Ллс. | Соединения пуриновых нуклеозидов и способ их получения |
| US8618076B2 (en) | 2009-05-20 | 2013-12-31 | Gilead Pharmasset Llc | Nucleoside phosphoramidates |
| TWI576352B (zh) | 2009-05-20 | 2017-04-01 | 基利法瑪席特有限責任公司 | 核苷磷醯胺 |
| JP2013527145A (ja) | 2010-03-31 | 2013-06-27 | ギリード・ファーマセット・エルエルシー | リン含有活性化剤の立体選択的合成 |
| BR112013005872A2 (pt) | 2010-09-22 | 2019-09-24 | Alios Biopharma Inc | compostos, composição farmacêutica e respectivos usos |
| AR084044A1 (es) | 2010-11-30 | 2013-04-17 | Pharmasset Inc | Compuestos 2’-espiro-nucleosidos |
| US9622967B2 (en) * | 2010-12-10 | 2017-04-18 | Sigmapharm Laboratories, Llc | Highly stable compositions of orally active nucleotide analogues or orally active nucleotide analogue prodrugs |
| JP6073897B2 (ja) | 2011-09-16 | 2017-02-01 | ギリアド ファーマセット エルエルシー | Ｈｃｖを処置するための方法 |
| US8889159B2 (en) | 2011-11-29 | 2014-11-18 | Gilead Pharmasset Llc | Compositions and methods for treating hepatitis C virus |
| AU2012358804B2 (en) | 2011-12-22 | 2018-04-19 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted phosphorothioate nucleotide analogs |
| US8916538B2 (en) | 2012-03-21 | 2014-12-23 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of a thiophosphoramidate nucleotide prodrug |
| EP2827876A4 (en) | 2012-03-22 | 2015-10-28 | Alios Biopharma Inc | PHARMACEUTICAL COMBINATIONS WITH A THIONUCLEOTIDE ANALOG |
| ES2771458T3 (es) | 2013-01-31 | 2020-07-06 | Gilead Pharmasset Llc | Formulación de combinación de dos compuestos antivirales |
| WO2015014442A1 (en) * | 2013-07-31 | 2015-02-05 | Merck Patent Gmbh | Oxoquinazolinyl-butanamide derivatives |
| PL3650014T3 (pl) | 2013-08-27 | 2022-01-31 | Gilead Pharmasset Llc | Preparat złożony dwóch związków przeciwwirusowych |
| EP3105238A4 (en) | 2014-02-13 | 2017-11-08 | Ligand Pharmaceuticals, Inc. | Prodrug compounds and their uses |
| EP3164136A4 (en) | 2014-07-02 | 2018-04-04 | Ligand Pharmaceuticals, Inc. | Prodrug compounds and uses therof |
| ES2808148T3 (es) | 2015-06-17 | 2021-02-25 | Univ Columbia | Terapia de desoxinucleósidos para enfermedades causadas por grupos de nucleótidos desequilibrados incluyendo síndromes de agotamiento de ADN mitocondrial |
| WO2017040766A1 (en) | 2015-09-02 | 2017-03-09 | Abbvie Inc. | Anti-viral tetrahydrofurane derivatives |
| CN108264524A (zh) * | 2016-12-31 | 2018-07-10 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 恩曲他滨膦酸酯化合物 |
| RU2644156C1 (ru) | 2017-02-28 | 2018-02-08 | Александр Васильевич Иващенко | Пролекарство ингибитора NS5B HCV полимеразы, способ его получения и применения |
| RU2662160C9 (ru) * | 2017-07-03 | 2018-10-22 | Александрович Иващенко Андрей | Комбинированный лекарственный препарат для терапии вирусных инфекций |
| EP3651734A1 (en) | 2017-07-11 | 2020-05-20 | Gilead Sciences, Inc. | Compositions comprising an rna polymerase inhibitor and cyclodextrin for treating viral infections |
| RU2662161C1 (ru) * | 2017-08-11 | 2018-07-24 | Васильевич Иващенко Александр | Ингибитор входа вируса гепатита и фармацевтическая композиция для лечения гепатита |
| CN111788196A (zh) | 2018-01-09 | 2020-10-16 | 配体药物公司 | 缩醛化合物及其治疗用途 |
| JP2023512656A (ja) | 2020-01-27 | 2023-03-28 | ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド | ＳＡＲＳ ＣｏＶ－２感染を治療するための方法 |
| TWI785528B (zh) | 2020-03-12 | 2022-12-01 | 美商基利科學股份有限公司 | 1’-氰基核苷之製備方法 |
| KR20220164784A (ko) | 2020-04-06 | 2022-12-13 | 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 | 1'-시아노 치환된 카르바뉴클레오시드 유사체의 흡입 제형 |
| EP4157272A1 (en) | 2020-05-29 | 2023-04-05 | Gilead Sciences, Inc. | Remdesivir treatment methods |
| TWI819321B (zh) | 2020-06-24 | 2023-10-21 | 美商基利科學股份有限公司 | 1'-氰基核苷類似物及其用途 |
| IL300412A (en) | 2020-08-24 | 2023-04-01 | Gilead Sciences Inc | Phospholipid compounds and their uses |
| TW202228722A (zh) | 2020-08-27 | 2022-08-01 | 美商基利科學股份有限公司 | 用於治療病毒感染之化合物及方法 |
| TWI811812B (zh) | 2020-10-16 | 2023-08-11 | 美商基利科學股份有限公司 | 磷脂化合物及其用途 |
| EP4320128A1 (en) | 2022-03-02 | 2024-02-14 | Gilead Sciences, Inc. | Compounds and methods for treatment of viral infections |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE8802687D0 (sv) | 1988-07-20 | 1988-07-20 | Astra Ab | Nucleoside derivatives |
| JP3693357B2 (ja) * | 1993-04-09 | 2005-09-07 | 峯郎 実吉 | 逆転写酵素阻害剤 |
| WO1996011204A1 (de) | 1994-10-07 | 1996-04-18 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin | NEUE β-L-NUCLEOSIDE UND IHRE VERWENDUNG |
| DK2415776T3 (en) | 1998-08-10 | 2016-07-04 | Novartis Ag | Beta-L-2'-deoxy nucleosides for the treatment of Hepatitis B |
-
2001
- 2001-05-29 KR KR1020027015985A patent/KR100854398B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-05-29 CN CNB018134297A patent/CN100490818C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-05-29 US US09/867,110 patent/US6596700B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-05-29 DE DE60105424T patent/DE60105424T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2001-05-29 BR BR0111195-7A patent/BR0111195A/pt not_active Application Discontinuation
- 2001-05-29 ES ES01937785T patent/ES2227203T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-29 AU AU6348401A patent/AU6348401A/xx active Pending
- 2001-05-29 EA EA200201263A patent/EA005890B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-05-29 CA CA002410488A patent/CA2410488C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-05-29 EP EP01937785A patent/EP1292313B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-29 TR TR2004/02565T patent/TR200402565T4/xx unknown
- 2001-05-29 IL IL15307801A patent/IL153078A0/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-05-29 MX MXPA02011641A patent/MXPA02011641A/es active IP Right Grant
- 2001-05-29 WO PCT/US2001/017301 patent/WO2001091737A2/en active IP Right Grant
- 2001-05-29 AU AU2001263484A patent/AU2001263484B2/en not_active Ceased
- 2001-05-29 JP JP2001587753A patent/JP2004513070A/ja active Pending
- 2001-05-29 AT AT01937785T patent/ATE275406T1/de not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-12-12 ZA ZA200210100A patent/ZA200210100B/en unknown
-
2003
- 2003-04-22 HK HK03102836A patent/HK1050999A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-06-01 ZA ZA200404304A patent/ZA200404304B/xx unknown
-
2006
- 2006-12-21 AU AU2006252214A patent/AU2006252214A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2001263484B2 (en) | 2006-12-14 |
| EP1292313B1 (en) | 2004-09-08 |
| ZA200404304B (en) | 2005-03-30 |
| HK1050999A1 (en) | 2003-07-18 |
| MXPA02011641A (es) | 2004-07-30 |
| ZA200210100B (en) | 2004-06-22 |
| WO2001091737A3 (en) | 2002-05-30 |
| EA200201263A1 (ru) | 2003-06-26 |
| EP1292313A2 (en) | 2003-03-19 |
| KR100854398B1 (ko) | 2008-08-26 |
| BR0111195A (pt) | 2004-07-20 |
| JP2004513070A (ja) | 2004-04-30 |
| EA005890B1 (ru) | 2005-06-30 |
| KR20030031487A (ko) | 2003-04-21 |
| ATE275406T1 (de) | 2004-09-15 |
| US6596700B2 (en) | 2003-07-22 |
| WO2001091737A2 (en) | 2001-12-06 |
| DE60105424D1 (de) | 2004-10-14 |
| TR200402565T4 (tr) | 2004-12-21 |
| CN1444483A (zh) | 2003-09-24 |
| AU6348401A (en) | 2001-12-11 |
| CN100490818C (zh) | 2009-05-27 |
| CA2410488A1 (en) | 2001-12-06 |
| IL153078A0 (en) | 2003-06-24 |
| DE60105424T2 (de) | 2005-09-22 |
| CA2410488C (en) | 2009-10-27 |
| AU2006252214A1 (en) | 2007-01-18 |
| US20020035085A1 (en) | 2002-03-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2227203T3 (es) | Metodos para tratar la infeccion por el virus de la hepatitis delta con beta-1-2'-desoxinucleosidos. | |
| ES2531928T3 (es) | Beta-L-2'-desoxi-nucleósidos para el tratamiento de la hepatitis B | |
| US6787526B1 (en) | Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides | |
| US9290533B2 (en) | β-L-2′-deoxy-nucleosides for the treatment of hepatitis B | |
| AU2001263484A1 (en) | Methods of treating hepatitis delta virus infection with beta-l-2'- deoxy-nucleosides | |
| RU2300381C2 (ru) | β-L-2'-ДЕЗОКСИНУКЛЕОЗИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕПАТИТА В | |
| EP1431304B1 (en) | Beta - L-2'-Deoxy-Nucleosides for the treatment of Hepatitis B |