CN108264524A - 恩曲他滨膦酸酯化合物 - Google Patents
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Abstract
本发明属于有机化合物合成与医药领域，涉及一种恩曲他滨膦酸酯化合物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物、以及其在治疗抗病毒药物中的用途。本发明提供的核苷类似物的膦酸酯化合物在人血浆、人工胃液及人工肠液中的稳定性与恩曲他滨相当或者更优，可以显著降低动物体内乙肝病毒量，与恩曲他滨相比，抗HBV活性显著增加，而且具有肝脏靶向性，具有更低的毒副作用，是一种具有临床应用前景的HIV及HBV治疗剂。
Description
技术领域
本发明属于有机化合物合成与医药领域，涉及一种核苷类似物的膦酸酯化合物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物、以及其在治疗抗病毒药物中的用途。
背景技术
恩曲他滨是一种合成的胞苷(cytidine)类似物，其化学名为5-氟-1-(2R,5S)-[2-(羟甲基)-1,3-氧硫杂戊环-5-基]胞嘧啶，具有如下的结构式。
恩曲他滨在细胞内酶的磷酸化作用下形成恩曲他滨5’-三磷酸酯，恩曲他滨5’-三膦酸酯与天然底物脱氧胞苷5’-三膦酸酯相竞争，从而抑制HIV-1逆转录酶的活性。目前，FDA已批准恩曲他滨与其他的抗逆转录病毒药物联用来治疗HIV-1感染。已上市的固定剂量的恩曲他滨的联用药物包括ATRIPLA(依法韦仑、恩曲他滨和富马酸泰诺福韦)、COMPLERA(恩曲他滨、利匹韦林和富马酸泰诺福韦)、STRIBILD(埃替格韦、可比司他、恩曲他滨和富马酸泰诺福韦)和TRUVADA(恩曲他滨和富马酸泰诺福韦)。恩曲他滨除了治疗HIV感染外，临床上对HBV也显示出抑制活性。但是目前恩曲他滨尚未被FDA批准用于治疗乙型肝炎。
为了提高化合物的生物利用度、减少给药量、降低不良反应和提高病人服药的顺应性等等，人们对核苷类化合物进行了大量的修饰，例如做成膦酸酯前药。索氟布韦和泰诺福韦艾拉酚胺均是采用类似的方法，对体内几乎无活性母药进行结构修饰，活性等显著改善，并最终获批上市，但是对于本身在体内具有较强活性的化合物进行膦酸酯的修饰报道极少。Sekhar,K.C.等在Appl Biochem Biotechnol(2014)173:1303-1308.合成了一些恩曲他滨膦酰化的衍生物，并通过与人乳头状瘤病毒E2蛋白和新城疫病毒(NDV)的唾液酸苷酶蛋白的分子对接试验对化合物进行筛选，来预测亲和力和对接方向，体外试验表明对新城疫NDV病毒和人乳头瘤病毒(HPV)有抑制活性，可潜在作为NDV抑制剂和抗肿瘤药物。
本申请旨在提供一类新的恩曲他滨膦酸酯化合物，以提供一种具有临床应用前景的HIV及HBV治疗剂。
发明内容
本申请一方面提供了通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，
其中：
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CN、-OH、-COOH、-NH2、-N3、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷基、-SC1-10烷基、-COC1-10烷基、-NHCOC1-10烷基、-NHSO2C1-10烷基、-SO2C1-10烷基、-SO2NHC1-10烷基、-SO2N(C1-10烷基)2、-SO2NH2、-NHC1-10烷基、-N(C1-10烷基)2、-OC1-10烷基、-COOC1-10烷基、-CONHC1-10烷基、-CON(C1-10烷基)2、-CONH2；
R6选自H、C1-10烷基、C3-10环烷基、杂环基、苯基、杂芳基；
R7选自H、C1-10烷基、C1-10环烷基。
在本申请的一些实施方案中，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CN、-OH、-COOH、-NH2、-N3、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷基、-SC1-6烷基、-COC1-6烷基、-NHCOC1-6烷基、-NHSO2C1-6烷基、-SO2C1-6烷基、-SO2NHC1-6烷基、-SO2N(C1-6烷基)2、-SO2NH2、-NHC1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-OC1-6烷基、-COOC1-6烷基、-CONHC1-6烷基、-CON(C1-6烷基)2、-CONH2；在本申请的一些实施方案中，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CN、-OH、-COOH、-NH2、-N3、-SC1-6烷基、-COC1-6烷基、-NHC1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-OC1-6烷基；在本申请的一些实施方案中，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、-OC1-6烷基；在本申请的一些实施方案中，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、-OCH3；在一些实施方案中，R1、R2、R3、R4和R5均为H；在一些实施方案中，R1、R2、R4和R5均为H，R3为F或Cl；在一些实施方案中，R2、R4和R5均为H，R1为F或Cl，R3为-OCH3。
在本申请的一些实施方案中，R6选自C1-10烷基；在本申请的一些实施方案中，R6选自未取代的C1-10烷基和被1、2或3取代基取代的C1-10烷基，其中所述的取代基选自F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、-N3、-N(C1-6烷基)2、-NH(C1-6烷基)、-SH、C3-6环烷基、苯基、杂环基和杂芳基；在本申请的一些实施方案中，R6选自甲基、乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、戊基、辛基、苄基，和被1、2或3取代基取代的甲基、乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、戊基、辛基和苄基，其中所述的取代基选自F、Cl、-CN、-NO2、-OH、-NH2、苯基；在本申请的一些实施方案中，R6选自甲基、乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、戊基、庚基、辛基和苄基；本申请的一些实施方案中，R6选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、1,1-二甲基丙基、2-甲基-2-丁基、正庚基、正辛基和苄基。
在本申请的一些实施方案中，R7选自H、C1-6烷基；在本申请的一些实施方案中，R7选自甲基。
在一些优选的实施方案中，本申请的通式(I)的化合物具有如下的构型。
在一些实施方案中，本申请提供了以下化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体：
本申请通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体可按照下述路线进行制备；在一些实施方案中，中间体a’可以先进行拆分，得到手性磷原子的构型为(S)或者(R)构型的异构体，然后再转变为目标化合物。
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7的定义如上所述。
本申请另一方面提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体。在一些实施方案中，所述的药物组合物还包含至少一种药学上可接受的载体。在一些实施方案中，所述的药物组合物还包含一种或多种HIV和/或HBV治疗剂，其中HIV和/或HBV治疗剂可以是核苷类抗病毒药或非核苷类抗病毒药等，可以列举的实例包括但不限于依法韦仑、富马酸泰诺福韦、替诺福韦艾拉酚胺、利匹韦林、埃替格韦、可比司他。
所述的药物组合物可通过将本申请的化合物与适宜的药学上可接受的载体组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等。
给予本申请化合物或其盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、局部、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、眼内、腹膜内、肌内、皮下、静脉内给药。
本申请的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法、冷冻干燥法等等。
在优选的实施方案中，药物组合物为适合口服的药物组合物，可以通过将活性化合物与本领域熟知的药学上可接受的载体混合来配制。这些载体能使本申请的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂、悬浮剂等，用于对患者的口服给药。
本申请另一方面提供了治疗有效量的通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体在制备用于治疗HIV或HBV感染的药物的用途。在一些实施方案中，所述的用途还包含一种或多种HIV和/或HBV治疗剂，其中HIV和/或HBV治疗剂可以是核苷类抗病毒药或非核苷类抗病毒药等，可以列举的实例包括但不限于依法韦仑、富马酸泰诺福韦、替诺福韦艾拉酚胺、利匹韦林、埃替格韦、可比司他。
本申请另一方面提供了用于治疗哺乳动物HIV或HBV感染的方法，包括对需要治疗的哺乳动物，优选人类，给予治疗有效量的上述通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体。在一些实施方案中，所述的方法还包含对需要治疗的哺乳动物给予一种或多种HIV和/或HBV治疗剂，其中HIV和/或HBV治疗剂可以是核苷类抗病毒药或非核苷类抗病毒药等，可以列举的实例包括但不限于依法韦仑、富马酸泰诺福韦、替诺福韦艾拉酚胺、利匹韦林、埃替格韦、可比司他。在一些实施方案中，通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体和HIV和/或HBV治疗剂，可以按照同时、先后或者间隔给药的方法给药。
本文所述的通式(Ⅰ)化合物的施用方法中，每天给药的剂量为0.01到200mg/kg体重，优选为0.1到50mg/kg体重，更优选1到10mg/kg体重。
除非另有说明，本申请中所用的下列术语具有下列含义。
术语“被取代”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。
本文中的Cm-n，是该部分具有给定范围中的整数个碳原子。例如“C1-10”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子、6个碳原子、7个碳原子、8个碳原子、9个碳原子或10个碳原子。
术语“烷基”是指通式为CnH2n+1的烃基。该烷基可以是直链或支链的。例如，术语“C1-6烷基”指含有1至6个碳原子的烷基(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、新戊基、3,3-二甲基丙基、己基、2-甲基戊基等)。所述的“烷基”可以是未取代的烷基、或者被1、2或3个取代基取代的烷基，所述的取代基包括但不限于F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-COOH、-NH2、-N3、-N(C1-6烷基)2、-NH(C1-6烷基)、-CONH2、-SH、-SC1-6烷基、-OC1-6烷基、C3-6环烷基、苯基、杂环基、杂芳基。
术语“环烷基”指完全饱和的并且可以以呈单环、桥环或螺环存在的碳环。除非另有指示，该碳环通常为3至10元环，优选为3至8元环。环烷基非限制性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基(双环[2.2.1]庚基)、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基等。
术语“杂环基”是指完全饱和的或部分不饱和的(但不是完全不饱和的杂芳族)并且可以以单环、双环或螺环存在的非芳族环。除非另有指示，该杂环通常为含有1至3个独立地选自硫、氧和/或氮的杂原子(优选1或2个杂原子)的3至6元环。杂环基的非限制性实例包括但不限于环氧基、氮杂环丙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、4H-吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢噻吩基、四氢噻吩基1,1-二氧化物等。
术语“杂芳基”是指5-12个环原子的单环或稠合环，具有5、6、7、8、9、10、11或12个环原子，其中含有1、2、3或4个选自N、O、S的环原子，其余环原子为C，且具有完全共轭的π-电子体系。杂芳基可以是非取代的或取代的，所述的取代基包括但不限于F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-COOH、-NH2、-N3、-N(C1-6烷基)2、-NH(C1-6烷基)、-CONH2、-SH、-SC1-6烷基、-OC1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷基。非取代的杂芳基的非限制性实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、三嗪基。
术语“治疗”意为将本申请所述化合物或制剂进行给药以预防、改善或消除疾病或与所述疾病相关的一个或多个症状，且包括：
(i)预防疾病或疾病状态在哺乳动物中出现，特别是当这类哺乳动物易患有该疾病状态，但尚未被诊断为已患有该疾病状态时；
(ii)抑制疾病或疾病状态，即遏制其发展；
(iii)缓解疾病或疾病状态，即使该疾病或疾病状态消退。
术语“治疗有效量”意指(i)治疗或预防特定疾病、病况或障碍，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文中所述的特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状发作的本申请化合物的用量。构成“治疗有效量”的本申请化合物的量取决于该化合物、疾病状态及其严重性、给药方式以及待被治疗的哺乳动物的年龄而改变，但可例行性地由本领域技术人员根据其自身的知识及本申请公开内容而确定。
术语“药学上可接受的载体”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些载体。合适的载体是本领域技术人员熟知的，并且包括诸如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等原料。
词语“包括”或“包含”应理解为开放的、非排他性的意义，即“包括但不限于”。
本申请的中间体和化合物还可以以不同的互变异构体形式存在，并且所有这样的形式包含于本申请的范围内。术语“互变异构体”是指可经由低能垒互变的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子转移互变异构体)包括经由质子迁移的互变，如酮-烯醇及亚胺-烯胺异构化。
本申请化合物中一个或多个原子可被同位素标记。所述同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，诸如分别为2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、123I、125I和36Cl等。
本申请化合物可以是不对称的，例如，具有一个或多个立体异构体。除非另有说明，所有立体异构体都包括在内，如对映异构体、非对映异构体及其混合物。本申请的含有不对称碳原子的化合物可以以光学活性纯的形式或外消旋形式被分离出来。光学活性纯的形式可以从外消旋混合物拆分，或通过使用手性原料或手性试剂合成。
本申请中“Sp”表示磷原子为S构型，“Rp”表示磷原子为R构型。
本申请中“EDTA-K2”为乙二胺四乙酸二钾。
本申请的化合物，例如实施例化合物，在人血浆、人工胃液及人工肠液中的稳定性与恩曲他滨相当或者更优；可以显著降低鸭子体内乙肝病毒量，与恩曲他滨相比，抗HBV活性显著增加；而且具有肝脏靶向性，具有更低的毒副作用。
附图说明
图1：实施例26对鸭子分别灌胃给药恩曲他滨、实施例11化合物、实施例19化合物及实施例4化合物后，3h和6h的鸭肝脏中恩曲他滨分布情况
具体实施方式
下面以具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明内容不限于这些实施例。
实施例1：(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
步骤1：4-氯苯基二氯磷酸酯的制备
500ml三口瓶中依次加入15.0g对氯苯酚，18.78g POCl3，400ml无水甲基叔丁基醚，N2置换三次，乙醇-液氮体系下冷却到-80℃，1h内滴加三乙胺(122.5mmol)的甲基叔丁基醚溶液，控温1h后自然升温，0℃反应4h。
体系在N2保护下过滤，滤饼用甲叔醚20ml×2洗涤，滤液浓缩得淡黄色液体25g。
步骤2:(S)-2-(((2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
500ml三口瓶中依次加入10.0g L-丙氨酸异丙酯盐酸盐，15.37g 4-氯苯基二氯磷酸酯,400ml无水二氯甲烷，N2置换三次，乙醇-液氮体系下冷却到-80℃，0.5h内滴加三乙胺(12.68g)的二氯甲烷溶液，控温1h后自然升温，在0℃反应6h后，滴加五氟苯酚(6.64g)-三乙胺(12.68g)-二氯甲烷溶液，40min滴毕，0℃反应10h。
体系过滤，滤饼用二氯甲烷20ml×2洗涤，滤液依次用200ml的水、10％柠檬酸、水、10％碳酸钠、水和饱和食盐水洗涤3次，无水Na2SO4干燥过夜，过滤，滤液浓缩得白色固体20.4g，纯度99.01％，Sp/Rp为75:25。
步骤3:(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯制备
100ml三口瓶中依次加入恩曲他滨2.0g，20ml无水四氢呋喃，N2置换三次，冷却到-18℃滴加t-BuMgCl(1M/L in THF，10.5ml)，0.5h滴完,1h后滴加(S)-2-(((2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(5.12g)的无水THF溶液，0.5h滴毕，控温1h后升至-5℃反应6h。
体系加入50ml冰水，搅拌10min后加入40ml乙酸乙酯，分液，水层用乙酸乙酯10m×2反萃，合并乙酸乙酯层，3M/L HCl 60ml×3洗涤有机层；合并水层，加入60ml乙酸乙酯，冰浴下调PH至10左右；搅拌0.5h后分液，水层用乙酸乙酯20ml反萃，合并乙酸乙酯层，依次用水，饱和食盐水洗涤，粗品过柱纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)，15/1)得产品2.4g，纯度99.01％，Sp/Rp为76:24。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.31(s,1H),7.82(d,J＝6.5Hz,1H),7.28(s,1H),7.24(s,1H),7.21～7.15(m,2H),6.30～6.26(m,1H),5.94(s,1H),5.32(s,1H),4.98(dt,J＝12.5,6.3Hz,1H),4.90～4.83(m,1H),4.53(m,1H),4.37(m,1H),4.05～3.93(m,1H),3.49(dd,J＝12.1,5.3Hz,1H),3.03(dd,J＝12.1,4.3Hz,1H),1.42(d,J＝7.1Hz,3H),1.22(dd,J＝6.3,0.7Hz,6H).
ESI-MS(m/z):551.1[M+H]+。
实施例2
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
步骤1:(S)-2-(((S)-(2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
将实施例1步骤2粗产物(10g)溶解在异丙醚(100ml)中，加入3滴五氟苯酚，0.21g三乙胺后打浆，12h后抽滤，滤饼干燥，得白色固体7.5g(纯度99.10％，其中手性磷原子为S构型)。
步骤2:
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
参考实施例1的步骤3制备方法，不同点在于，用(S)-2-(((S)-(2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(Sp)代替(S)-2-(((2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(Sp和Rp的混合物)，得标题化合物1.4g(纯度99.19％，其中磷原子为S构型)。ESI-MS(m/z):551.1[M+H]+。
实施例3
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯的制备
参考实施例1的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸甲酯代替L-丙氨酸异丙酯，得标题化合物1.2g(纯度99.69％，Sp/Rp为52.3:47.7)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(s,1H),7.82(dd,J＝10.7,6.4Hz,1H),7.28(d,J＝5.9Hz,1H),7.16(m,2H),6.27(q,J＝4.9Hz,1H),5.85(s,1H),5.36～5.30(m,1H),4.42(m,3H),4.04(dt,J＝5.0,4.5Hz,2H),3.69(s,3H),3.54～3.46(m,1H),3.06～2.99(m,1H),1.39(dd,J＝16.0,6.7Hz,3H).ESI-MS(m/z):523.5[M+H]+。
实施例4
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯的制备
参考实施例1制备方法，不同点在于用L-丙氨酸乙酯代替L-丙氨酸异丙酯，得标题化合物1.8g(纯度99.5％，Sp/Rp为55.8:44.2)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,1H),7.81(dd,J＝13.9,6.4Hz,1H),7.33–7.24(m,2H),7.18(dd,J＝8.9,3.4Hz,2H),6.31–6.24(m,1H),6.04(s,1H),5.38–5.29(m,1H),4.75–4.67(m,1H),4.56–4.34(m,2H),4.20–4.11(m,2H),4.03(dt,J＝16.6,8.2Hz,1H),3.50(ddd,J＝15.1,10.1,6.6Hz,1H),3.07–2.98(m,1H),1.41(dd,J＝16.4,7.1Hz,3H),1.24(td,J＝7.1,2.8Hz,3H).ESI-MS(m/z):537.5[M+H]+。
实施例5
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸叔丁酯的制备
参考实施例1制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸叔丁酯代替L-丙氨酸异丙酯，得标题化合物2.9g(纯度99.39％，Sp/Rp为59.7:40.3)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),7.77(d,J＝6.5Hz,1H),7.20(d,J＝8.9Hz,2H),7.13(d,J＝9.0Hz,2H),6.23(t,J＝5.6Hz,1H),6.16(s,1H),5.28(s,1H),4.82～4.74(m,1H),4.49～4.42(m,1H),4.37～4.29(m,1H),3.92～3.81(m,1H),3.44(dd,J＝12.1,5.2Hz,1H),2.98(dd,J＝12.1,4.5Hz,1H),1.38(s,9H),1.34(d,J＝7.1Hz,3H).ESI-MS(m/z):565.1[M+H]+。
实施例6
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸苄酯的制备
参考实施例1的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸苄酯代替L-丙氨酸异丙酯，得标题化合物2.5g(纯度98.35％，Sp/Rp为78.8:21.2)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.82–7.76(m,1H),7.33(dd,J＝12.0,5.2Hz,5H),7.24(d,J＝8.9Hz,2H),7.14(t,J＝9.0Hz,2H),6.28–6.22(m,1H),5.86(s,1H),5.28(dt,J＝6.3,3.6Hz,1H),5.14(t,J＝6.4Hz,2H),4.66–4.58(m,1H),4.45–4.29(m,2H),4.18–4.01(m,1H),3.47(td,J＝11.8,5.2Hz,1H),3.02–2.95(m,1H),1.46–1.35(m,4H).ESI-MS(m/z)：599.0[M+H]+。
实施例7
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯的制备
参考实施例1的制备方法，不同点在于步骤2中用二氯化磷酸苯酯代替4-氯苯基二氯磷酸酯，用L-丙氨酸甲酯代替L-丙氨酸异丙酯，得标题化合物2.3g(纯度98.97％，Sp/Rp为59.6:40.4)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(dd,J＝9.3,6.4Hz,1H),7.34–7.28(m,2H),7.26–7.20(m,2H),7.15(dd,J＝13.1,6.6Hz,1H),6.30–6.25(m,1H),5.36–5.31(m,1H),4.52–4.43(m,1H),4.37–4.30(m,1H),4.05(dd,J＝15.1,9.8Hz,1H),3.70(dd,J＝5.1,2.6Hz,3H),3.53–3.46(m,1H),3.04–2.96(m,1H),1.40(dd,J＝12.6,7.1Hz,3H).ESI-MS(m/z)：489.0[M+H]+。
实施例8
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯的制备
参考实施例2的制备方法，(S)-2-(((2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯采用己烷/乙酸乙酯(4/1，v/v)打浆，重结晶三次，获得Sp异构体。
接着，参考实施例2步骤2的制备方法，制备得到标题化合物1.3g(纯度99.30％，其中手性磷原子为单一的S构型)。ESI-MS(m/z):489.0[M+H]+。
实施例9
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯的制备
参考实施例7的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸乙酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物2.6g(纯度99.26％，Sp/Rp为55.7:44.3)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),7.81(d,J＝6.4Hz,1H),7.32–7.26(m,2H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),7.13(t,J＝7.2Hz,1H),6.27(t,J＝4.2Hz,1H),6.17(s,1H),5.32(t,J＝3.2Hz,1H),4.82–4.74(m,1H),4.49(m,1H),4.37(m,1H),4.19–4.09(m,2H),4.02(dd,J＝15.6,8.4Hz,1H),3.46(dd,J＝12.0,5.2Hz,1H),2.99(dd,J＝12.0,4.7Hz,1H),1.41(d,J＝7.1Hz,3H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H).ESI-MS(m/z):503.1[M+H]+。
实施例10
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯的制备
参考实施例8制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸乙酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物3.7g(纯度99.03％，其中手性磷原子处为S构型)。ESI-MS(m/z):503.1[M+H]+。
实施例11
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
参考实施例8的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸异丙酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物2.6g(纯度99.48％，其中手性磷原子为S构型)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91–7.87(m,1H),7.74(s,1H),7.35–7.29(m,2H),7.27–7.23(m,2H),7.16(dd,J＝11.1,4.0Hz,1H),6.30(td,J＝5.0,1.7Hz,1H),5.62(s,1H),5.34(m,1H),4.53(m,1H),4.38(m,2H),4.22–4.12(m,2H),4.04(m,,1H),3.51(dd,J＝12.1,5.2Hz,1H),3.03(dd,J＝12.1,4.5Hz,1H),1.44(d,J＝7.1Hz,3H),1.27(dd,J＝9.4,4.9Hz,3H).
ESI-MS(m/z):517.2[M+H]+。
实施例12
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸叔丁酯的制备
参考实施例7的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸叔丁酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物1.6g(纯度99.83％，Sp/Rp为62.7:37.3)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(s,1H),7.88(d,J＝6.4Hz,1H),7.31(dd,J＝12.8,5.4Hz,2H),7.24(s,1H),7.15(t,J＝7.2Hz,1H),6.29(td,J＝5.0,1.2Hz,1H),5.70(s,1H),5.35(t,J＝2.9Hz,1H),4.52(m,1H),4.43～4.30(m,2H),4.14(q,J＝7.1Hz,1H),4.01～3.90(m,1H),3.50(dd,J＝12.1,5.2Hz,1H),3.03(dd,J＝12.1,4.5Hz,1H),1.47(d,J＝11.4Hz,9H),1.41(d,J＝7.1Hz,3H).
ESI-MS(m/z):531.1[M+H]+。
实施例13
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸叔丁酯的制备
参考实施例8制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸叔丁酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物2.8g(纯度99.15％，其中手性磷原子为S构型)。ESI-MS(m/z):531.1[M+H]+。
实施例14
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸苄酯的制备
参考实施例7的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸苄酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物4.0g(纯度99.24％，Sp/Rp为62.1:37.9)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(s,1H),7.78(t,J＝6.5Hz,1H),7.37–7.29(m,5H),7.26(d,J＝1.8Hz,1H),7.20(t,J＝8.3Hz,2H),7.13(t,J＝9.2Hz,1H),6.23(td,J＝6.5,1.4Hz,1H),6.05(s,1H),5.26(dt,J＝7.1,3.0Hz,1H),5.12(d,J＝6.1Hz,2H),4.62(t,J＝11.0Hz,1H),4.44–4.30(m,2H),4.30–4.15(m,1H),4.15–4.03(m,1H),3.43(td,J＝11.7,5.2Hz,1H),2.96–2.90(m,1H),1.44–1.37(m,3H).ESI-MS(m/z)：565.1[M+H]+。
实施例15
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸苄酯的制备
参考实施例8制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸苄酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物0.8g(纯度99.5％，其中手性磷原子为S构型)。ESI-MS(m/z)：565.1[M+H]+。
实施例16
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯的制备
参考实施例1制备方法，不同点在于，步骤1中用对氟苯酚代替对氯苯酚，步骤2中用L-丙氨酸甲酯代替L-丙氨酸异丙酯，得标题化合物2.0g(纯度98.42％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(s,1H),7.79(dd,J＝13.9,6.4Hz,1H),7.21–7.14(m,2H),7.01–6.92(m,2H),6.29–6.23(m,1H),5.99(s,1H),5.35–5.27(m,1H),4.71(t,J＝10.9Hz,1H),4.51–4.30(m,2H),4.02(m,1H),3.67(d,J＝1.9Hz,3H),3.47(dd,J＝12.0,5.3Hz,1H),3.01(dd,J＝12.1,4.4Hz,1H),1.38(dd,J＝19.3,7.1Hz,3H).ESI-MS(m/z):507.5[M+H]+。
实施例17
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯的制备
参考实施例16制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸乙酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物2.3g(纯度99.58％，Sp/Rp为90.9:9.1)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.87(d,J＝6.5Hz,1H),7.63(s,1H),7.19(m,2H),7.01～6.95(m,2H),6.31～6.27(m,1H),5.61(s,1H),4.56～4.44(m,2H),4.36(m,1H),4.21～4.11(m,2H),4.06～3.99(m,1H),3.74(t,J＝6.6Hz,1H),3.51(dd,J＝12.2,5.3Hz,1H),3.04(dd,J＝12.2,4.2Hz,1H),1.43(d,J＝6.9Hz,3H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H).ESI-MS(m/z):521.0[M+H]+。
实施例18
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯的制备
参考实施例17的制备方法，不同点在于，用(S)-2-(((S)-(2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯代替(S)-2-(((2,3,4,5,6-五氟-苯氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯(Sp和Rp的混合物)，得标题化合物0.8g(纯度99.74％，其中磷原子为S构型)。
ESI-MS(m/z):521.0[M+H]+。
实施例19
(S)-2-(((S)-(((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
参考实施例18的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸异丙酯代替L-丙氨酸乙酯，得标题化合物3.3g(纯度99.04％，其中磷原子为S构型)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(dd,J＝12.3,6.4Hz,1H),7.81–7.67(m,1H),7.19(dt,J＝8.2,4.1Hz,2H),6.99(dt,J＝14.7,7.3Hz,2H),5.67(s,1H),5.32(dt,J＝12.3,6.7Hz,1H),4.99(dt,J＝12.5,6.2Hz,1H),4.52–4.36(m,2H),4.04–3.94(m,1H),3.51(m,1H),3.02(m,,1H),1.38(dd,J＝18.7,7.1Hz,3H),1.24–1.19(m,6H).ESI-MS(m/z):535.5[M+H]+。
实施例20
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸叔丁酯的制备
参考实施例16的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸叔丁酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物2.0g(纯度99.77％)。ESI-MS(m/z):549.5[M+H]+。
实施例21
(S)-2-(((((2R,5S)-5-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-氧硫杂戊环-2-基)甲氧基)(4-氟苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸苄酯的制备
参考实施例16的制备方法，不同点在于，用L-丙氨酸苄酯代替L-丙氨酸甲酯，得标题化合物3.4g(纯度99.01％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(dd,J＝8.6,6.5Hz,1H),7.38–7.28(m,5H),7.17(dt,J＝9.9,6.1Hz,2H),6.97(td,J＝8.6,3.3Hz,2H),6.26(qd,J＝5.1,1.5Hz,1H),5.64(s,1H),5.28(dt,J＝6.1,3.6Hz,1H),5.14(s,2H),4.50–4.39(m,2H),4.38–4.29(m,1H),4.15–4.04(m,1H),3.48(m,J＝12.1,1H),2.99(m,,1H),1.88(s,1H),1.42(dd,J＝18.4,7.1Hz,3H).
ESI-MS(m/z):583.6[M+H]+。
实施例22体外人血浆稳定性评价
配制底物及人血浆的混匀基质液2份，每份300μL(受试化合物溶解于甲醇中作为底物，浓度为5μM，取15μL的底物加入285μL空白人血浆)，放置37℃温孵，分别于0h、1h、2h取出40μL用含内标(地西泮)的冰乙腈400μL终止反应，涡旋震荡5min后，离心(12000rpm，4℃)10min。吸取上清液50μL至96孔板中用100μL超纯水稀释混匀，取0.5μL于LC/MS/MS进样分析，相关化合物在人血浆中剩余百分比见表1。
表1
实施例23体外人工胃液稳定性评价
人工胃液配制：取浓盐酸234μL，加水稀释至1mL，即得稀盐酸。取稀盐酸820μL，加水约40mL，加入胃蛋白酶0.5g，震荡溶解后，加水稀释成50mL，即得。
配制底物及人工胃液的混匀液2份，每份300μL(受试化合物用甲醇溶解作为底物，浓度为10μM，取3μL的底物加入297μL)，放置37℃温孵，分别于0h、0.5h、2h取出40μL用含内标(地西泮)的冰乙腈400μL终止反应，涡旋震荡5min后，离心(12000rpm，4℃)10min。吸取上清液50μL至96孔板中用100μL超纯水稀释混匀，取0.5μL于LC/MS/MS进样分析，相关化合物在人工胃液中剩余百分比见表2。
表2
实施例24体外人工肠液稳定性评价
人工肠液配制：称取0.68g KH2PO4粉末，加水50mL，使其溶解完全，用0.1mol/LNaOH调节pH至6.80，加水稀释至100mL即得。
配制底物及人工肠液的混匀液2份，每份300μL(受试化合物溶解于甲醇中作为底物，浓度10μM，，取3μL底物加入297μL人工肠液)，放置37℃温孵，分别于0h、2h、4h取出40μL用含内标(地西泮)的冰乙腈400μL终止反应，涡旋震荡5min后，离心(12000rpm，4℃)10min，吸取上清液50μL至96孔板中用100μL超纯水稀释混匀，取0.5μL于LC/MS/MS进样分析，相关化合物在人工肠液中剩余百分比见表3。
表3
实施例25鸭乙肝模型中实施例化合物的药代动力学评价
雏鸭，体重200～220g，随机分为7组，每组6只，以恩曲他滨的量计，按50mg/kg的剂量灌胃给药，分别给予恩曲他滨、实施例12化合物、实施例5化合物、实施例11化合物、实施例19化合物、实施例4化合物及生理盐水。
受试动物(雏鸭)给药前禁食12h，给药后4h给食物，实验前后和实验过程中均自由饮水。
连续灌胃给药8天，第9天给药后分别于0min、15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、24h于足底静脉取血0.1mL左右，EDTA-K2抗凝，立即将血样放置冰中，30min内转移到4℃，4000rpm条件下离心分离血浆10min。24h后立即放血处死受试动物，取整个肝脏，冰冷生理盐水冲洗，吸干，称重，用冰冷生理盐水(W/V＝1：5)稀释匀浆。收集全部血浆和肝脏匀浆液后立即于-20℃保存待测。
吸取20μL待测血浆样品，加入200μL含内标(地西泮)的乙腈溶液，振荡混匀5min，12000rpm离心10min，吸取上清液50μL至96孔板中用100μL超纯水稀释混匀，吸取2μL用于LC/MS/MS测定，记录色谱图。
通过乙肝模型鸭体内药物动力学实验评估本发明化合物的体内药代动力学行为。受试化合物转变为恩曲他滨的药代参数如下表4所示。
表4
实施例26鸭肝脏组织分布评价
雏鸭，体重180～200g，随机分为4组，每组6只，每个时间点各3只，以恩曲他滨的量计，按40mg/kg的剂量灌胃给药，分别给予恩曲他滨、实施例11化合物、实施例19化合物、实施例4化合物。
受试动物(雏鸭)给药前禁食12h，给药后4h给食物，实验前后和实验过程中均自由饮水。
灌胃给药后，于3h、6h放血处死受试动物，取血1mL左右，EDTA-K2抗凝，立即将血样放置冰中，30min内转移到4℃，4000rpm条件下离心10min分离血浆。同时于各个时间点取整个肝脏，用冰冷的生理盐水冲洗，吸干，称重，生理盐水(W/V＝1：5)稀释匀浆。收集全部血浆和肝脏匀浆液后立即于-20℃保存待测。
吸取50μL待测样品，加入300μL含内标(地西泮)的乙腈溶液，振荡混匀5min，12000rpm离心10min，吸取上清液50μL至96孔板中用100μL超纯水稀释混匀，吸取2μL用于LC/MS/MS测定，记录色谱图。
通过鸭体内肝脏组织分布实验评估本发明化合物在肝脏中生成母药恩曲他滨的浓度。受试化合物的肝脏组织分布如图1所示。图1表明本发明化合物具有肝脏靶向性。
实施例27对鸭体内DHBV-DNA拷贝数的影响
DHBV-R:AGCTGGCCTAATCGGATTAC；DHBV-F:TGTCCGTCAGATACAGCAAG
实验使用健康1日龄雄性雏鸭，下肢静脉注射稀释的DHBV-DNA强阳性病毒血清0.2mL/只，接种7d后按体重及DHBV-DNA拷贝数随机分成8组。各组分别灌胃给药，以恩曲他滨计，以50mg/kg的剂量给药，连续给药8天，第9天，下肢静脉取血，离心分离雏鸭血清，采用病毒核酸提取试剂盒从200μL血清中分离DHBV-DNA，分离的病毒DNA使用50μL纯水洗脱。取各组病毒DNA作为荧光定量PCR反应模板，PCR级别水稀释100倍，取引物、PCR预混液冰上放置至融化，使用前混匀。荧光定量PCR反应体系为20μL，每个样品共3个复孔，其中PCR级水6μL，上游引物1μL(10uM)，下游引物1μL(10uM)，PCR预混反应液10μL，稀释后的模板2μL，将所有PCR反应管放入离心机中，短暂离心，放置PCR仪器中，按照以下参数运行，荧光定量PCR仪95℃预变性5min；再按下列条件95℃10秒，60℃10秒，72℃30秒进行40次循环，进行荧光定量PCR检测。给药前后鸭血清DHBV-DNA拷贝数变化的检测结果见下表5。
成对t检验，同一时间点同自身T0(给药前)相比。*p<0.05,**p<0.01
表5
Claims (10)
1.通式(Ⅰ)所示的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，
其中：
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CN、-OH、-COOH、-NH2、-N3、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷基、-SC1-10烷基、-COC1-10烷基、-NHCOC1-10烷基、-NHSO2C1-10烷基、-SO2C1-10烷基、-SO2NHC1-10烷基、-SO2N(C1-10烷基)2、-SO2NH2、-NHC1-10烷基、-N(C1-10烷基)2、-OC1-10烷基、-COOC1-10烷基、-CONHC1-10烷基、-CON(C1-10烷基)2、-CONH2；
R6选自H、C1-10烷基、C3-10环烷基、杂环基、苯基、杂芳基；
R7选自H、C1-10烷基、C1-10环烷基。
2.权利要求1所述的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，其中R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CN、-OH、-COOH、-NH2、-N3、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷基、-SC1-6烷基、-COC1-6烷基、-NHCOC1-6烷基、-NHSO2C1-6烷基、-SO2C1-6烷基、-SO2NHC1-6烷基、-SO2N(C1-6烷基)2、-SO2NH2、-NHC1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-OC1-6烷基、-COOC1-6烷基、-CONHC1-6烷基、-CON(C1-6烷基)2、-CONH2；
优选的，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CN、-OH、-COOH、-NH2、-N3、-SC1-6烷基、-COC1-6烷基、-NHC1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-OC1-6烷基；
优选的，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、-OC1-6烷基；
优选的，R1、R2、R3、R4和R5独立地选自H、F、Cl、-OCH3；
优选的，R1、R2、R3、R4和R5均为H；
优选的，R1、R2、R4和R5均为H，R3为F或Cl；
优选的，R2、R4和R5均为H，R1为F或Cl，R3为-OCH3。
3.权利要求1或2所述的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，其中R6选自C1-10烷基；优选的，R6选自未取代的C1-10烷基和被1、2或3取代基取代的C1-10烷基，其中所述的取代基选自F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、-N3、-N(C1-6烷基)2、-NH(C1-6烷基)、-SH、C3-6环烷基、苯基、杂环基和杂芳基；
优选的，R6选自甲基、乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、戊基、辛基、苄基，和被1、2或3取代基取代的甲基、乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、戊基、辛基和苄基，其中所述的取代基选自F、Cl、-CN、-NO2、-OH、-NH2、苯基；
优选的，R6选自甲基、乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、戊基、庚基、辛基和苄基；
优选的，R6选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、1,1-二甲基丙基、2-甲基-2-丁基、正庚基、正辛基和苄基。
4.权利要求1-3中任一项所述的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，其中R7选自H、C1-6烷基；优选的，R7选自甲基。
5.权利要求1所述的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，其具有如下的构型，
6.以下结构的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体，
7.一种药物组合物，包含治疗有效量的权利要求1-6中任一项所述的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体。
8.权利要求7所述的药物组合物，还包含一种或多种HIV和/或HBV治疗剂；优选地HIV和/或HBV治疗剂选自依法韦仑、富马酸泰诺福韦、替诺福韦艾拉酚胺、利匹韦林、埃替格韦和可比司他。
9.权利要求1-6中任一项的化合物、其盐、立体异构体或其互变异构体在制备治疗HIV或HBV感染的药物的用途。
10.权利要求9所述的用途，还包含一种或多种HIV和/或HBV治疗剂；优选地，所述HIV和/或HBV治疗剂选自依法韦仑、富马酸泰诺福韦、替诺福韦艾拉酚胺、利匹韦林、埃替格韦和可比司他。
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