EA022530B1

EA022530B1 - Бис-(фторалкил)-1,4-бензодиазепиноновые соединения

Info

Publication number: EA022530B1
Application number: EA201391324A
Authority: EA
Inventors: Клод Кеснелль; Сун-Хунь Ким; Фрэнсис Ли; Ашвиникумар Гаваи
Original assignee: Бристол-Майерс Сквибб Компани
Priority date: 2011-03-22
Filing date: 2012-03-22
Publication date: 2016-01-29
Also published as: AR085471A1; KR101948347B1; US8629136B2; CO6771446A2; PL2688873T3; DK2688873T3; JP5873923B2; US20120245151A1; ES2534080T3; AU2012230904A1; JP2014511840A; TN2013000372A1; SI2688873T1; SMT201500091B; CA2830902C; BR112013024059B1; SG193555A1; TWI530489B; TW201309656A; CL2013002690A1

Abstract

Описаны соединения формулы (I) или их пролекарствагде Rпредставляет собой -CHCFили -CHCHCF; Rпредставляет собой -CHCF, -CHCHCFили -CHCHCHCF; Rпредставляет собой H или -CH; каждый Rнезависимо представляет собой F, Cl, -CN, -OCHи/или -NHCHCHOCHи z равно 0, 1 или 2. Описаны также способы применения таких соединений для ингибирования Notch-рецепторов и фармацевтические композиции, содержащие такие соединения. Эти соединения являются полезными для лечения, предотвращения или замедления прогрессирования заболевания или нарушения в различных терапевтических областях, таких как рак.

Description

Настоящее изобретение в целом относится к бензодиазепиноновым соединениям, полезным в качестве ингибиторов Νοίοΐι. Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение в соответствии с настоящим изобретением, которое является полезным для лечения состояний, связанных с Νοίοΐι путем, таких как рак и другими пролиферативными заболеваниями.

Νοίοΐι сигнализация вовлечена в различные клеточные процессы, такие как определение судьбы клетки, дифференцировка, пролиферация, апоптоз и ангиогенез (Вгау, Ыа!иге Ре\'1е\У8 Мо1еси1аг Се11 Вюкду, 7:678-689 (2006); Ροήίηί, Пеуе1оршеи1а1 Се11, 16:633-647 (2009)). ΝοίΗι белки представляют собой один раз пронизывающие гетеродимерные трансмембранные молекулы. Семейство ΝοίΗι включает в себя четыре рецептора ΝοίΗι 1-4, которые активируются при связывании лигандов из семейства ЭЗЬ (ЭеИа-Нке 1, 3, 4 и 1аддей 1 и 2).

Активация и созревание ΝοίΗι требует серию стадий процессинга, в том числе стадии протеолитического расщепления, опосредованного гамма-секретазой, мультибелкового комплекса, содержащего пресенилин 1 или пресенилин 2, никастрин, АРН1 и ΡΕΝ2. После того как ΝοίΗι расщепляется, внутриклеточный домен ΝοίΗι (ΝΙί'Ό) освобождается из мембраны. Высвободившийся ΝΙί'Ό транслоцируется в ядро, где он функционирует как активатор транскрипции совместно с членами семейства С8Ь (ΡΒΡδυΗ, 5ΐιρρΐΌ55οΓ οΓ Ьа1г1е88 и ЬАС1). Гены NοΐсЬ-мишеней включают членов семейства ΗΕδ, таких как ΗΕδ-1. ΗΕδ-1 функционирует в качестве транскрипционных репрессоров генов, таких как ΗΕΚΡ1 (также известного как ΗΕΥ2), ΗΕΡΡ2 (также известного как ΗΕΥ1) и НАТН1 (также известного как АТОН1). Аберрантная активация пути ΝοΝίι способствует онкогенезу. Активация сигнализации ΝοΝίι вовлекается в патогенез различных солидных опухолей, включая опухоли яичников, поджелудочной железы, а также рака молочной железы и гематологических опухолей, таких как лейкозы, лимфомы, и множественной миеломы. Роль ингибирования ΝοΝίι и его применение при лечении различных солидных и гематологических опухолей описаны в М1е1е, Ь. е! а1., Сиггеи! Саисег Эгид Тагде!8, 6:313-323 (2006); Βο1οδ, V. е! а1., Εηάοαιηο Реу1еУ8, 28:339-363 (2007); δΐιίΐι, Ι.-М. е! а1., Саисег Ре8еагсй, 67:1879-1882 (2007); ΥатадисЫ, Ν. е! а1., Саисег Ре8еагсЬ, 68:1881-1888 (2008); М1е1е, Ь., БуреП Реу1еу АиЕ-саисег Тйегару, 8:1197-1201 (2008); ΡιΠΌλΜ В., Сштеи! ΡЬа^тасеиί^са1 Β^ο!есЬηο1οду, 10:154-160 (2009); ПеРе^уа, Υ. е! а1., Эгид Ке818!аисе ирйа!е8, 11:210-218 (2008); ЭиГгаше, 1. е! а1., Оитодеие, 27:5132-5137 (2008) и 1ии, Η.Τ. е! а1., Эгид ЭеуеКртеШ Ре8еагсЬ, 69:319-328 (2008).

Остается потребность в соединениях, которые являются полезными в качестве ингибиторов ΝοΝίι и которые имеют достаточную метаболическую стабильность, чтобы обеспечить эффективные уровни лекарственного воздействия. Кроме того, существует потребность в соединениях, полезных в качестве ингибиторов ΝοΚΚ которые могут быть введены пациенту перорально или внутривенно. Патент США № 7053084 В1 раскрывает сукциноиламинобензодиазепиновые соединения, полезные для лечения неврологических расстройств, таких как болезнь Альцгеймера. Ссылка раскрывает, что эти сукциноиламинобензодиазепиновые соединения ингибируют активность гамма-секретазы и процессинг белкапредшественника амилоида, связанного с формированием неврологических отложений амилоидного белка. Ссылка не раскрывает использование этих соединений для лечения пролиферативных заболеваний, таких как рак.

Заявители обнаружили эффективные соединения, которые обладают активностью в качестве ингибиторов ΝοΝίι и достаточно высокой метаболической стабильностью, чтобы обеспечить эффективные уровни воздействия лекарственного средства при внутривенном или пероральном введении. Эти соединения предназначены быть полезными в качестве фармацевтических средств с желательными стабильностью, биодоступностью, терапевтическим индексом и значениями токсичности, которые являются важными для их способности стать лекарственными препаратами.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение удовлетворяет вышеупомянутым потребностям посредством обеспечения бис-(фторалкил)-1,4-бензодиазепиноновых соединений, которые являются полезными в качестве селективных ингибиторов сигнального пути ΝοΚΕ, включая пролекарства.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно соединение формулы (Ι) или его пролекарство.

Настоящее изобретение также обеспечивает способ лечения заболевания или расстройства, связанного с активностью Nο!сЬ-рецептора, включающий введение пациенту-млекопитающему соединения формулы (Ι) или его фармацевтически приемлемых пролекарств.

Настоящее изобретение также обеспечивает способы и промежуточные соединения для получения соединений формулы (I) или его пролекарства.

Настоящее изобретение также обеспечивает соединения формулы (Ι) или его пролекарства для применения в терапии.

Настоящее изобретение также обеспечивает применение соединений формулы (Ι) или его пролекарства для производства лекарственного средства для лечения рака.

- 1 022530

Соединения формулы (I) и композиции, содержащие эти соединения, являются ингибиторами Νοίαίι. которые могут быть использованы в лечении, профилактике или исцелении различных состояний, связанных с №1сй-рецептором. Фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, полезны для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболеваний или расстройств в различных терапевтических областях, таких как рак.

Эти и другие отличительные признаки изобретения будут изложены в развернутом виде по мере продолжения раскрытия.

Краткое описание чертежей

Настоящее изобретение проиллюстрировано посредством ссылки на прилагаемые чертежи, описанные ниже.

Фиг. 1 показывает экспериментальные (при температуре около 25°С) и симулированные (приблизительно при 25°С) дифрактограммы ΡΧΚΌ (СиКа λ=1,5418 А) из Ν-1 формы соединения примера 1.

Фиг. 2 показывает экспериментальные (при температуре около 25°С) и симулированные (приблизительно при 25°С) дифрактограммы ΡΧΚΌ (СиКа λ=1,5418 А) А-2 формы соединения примера 1.

Фиг. 3 показывает экспериментальные (при температуре около 25°С) и симулированные (приблизительно при 25°С) дифрактограммы ΡΧΚΌ (СиКа λ=1,5418 А) ЕА-3 формы соединения примера 1.

Фиг. 4 показывает экспериментальные (при температуре около 25°С) и симулированные (приблизительно при 50°С) дифрактограммы ΡΧΚΌ (СиКа λ=1,5418 А) в ТГФ 2 форма соединение примера 1.

Фиг. 5 показаны экспериментальные (при температуре около 25°С) и симулированные (приблизительно при 25°С) дифрактограммы ΡΧΚΌ (СиКа λ=1,5418 А) М2-1 формы соединения примера 2.

Фиг. 6 показывает противоопухолевую эффективность соединения примера 1 против человеческого Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза ТЛЕЬ 1. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; () пример 1, 5 мг/кг/введение, ОЭ/3, IV.

Фиг. 7 показывает ίη νίνο противоопухолевую активность соединения примера 2 в клеточной линии Т-клеточной острой лимфобластной лейкемии ТЛЬЫ. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(*) контроль; (Δ) пример 2, 12 мг/кг, ОЭ/15; () пример 2, 6 мг/кг, ОЭ/15; (□) пример 2, 3 мг/кг, 0Ό/15; (А) пример 2, 1,5 мг/кг, 0Ό/15; (о) пример 2, 0,75 мг/кг, 0Ό/15.

Фиг. 8 показывает ίη νίνο противоопухолевая активность соединения примера 2 в линии клеток карциномы молочной железы человека ΜΌΑ-ΜΒ-157. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; (А) пример 2, 24 мг/кг, () пример 2, 18 мг/кг; () пример 2, 12 мг/кг.

Фиг. 9 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и дазатиниба в Т-клеточной лимфобластной лейкемии ЛЬЕ-МЬ. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; (♦) пример 1, 3,75 мг/кг/введение, ОЭ/3, раз в неделю в течение 7 недель, РО, () дазатиниб, 10 мг/кг/введение, ОЭ/49, РО, <О) пример 1, 3,75 мг/кг/введение, ОЭ/3, раз в неделю в течение 7 недель, РО + дазатиниб 10 мг/кг/введение, ОЭ/49, РО. При приеме в тот же день два агента давали более или менее одновременно (соединение примера 1 предшествовало дазатинибу менее чем на 1 ч).

Фиг. 10 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и дазатиниба в Т-клеточной лимфобластной лейкемии ЛЬЕ-МЬ. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; (♦) пример 1, 7,5 мг/кг/введение ОЭ/3, раз в неделю в течение 7 недель, РО, (^н) дазатиниб, 10 мг/кг/введение, ОЭ/49, РО, О пример 1, 7,5 мг/кг/введение, ОЭ/3, раз в неделю в течение 7 недель, РО + дазатиниб 10 мг/кг/введение, ОЭ/49, РО. При приеме в тот же день два агента давали более или менее одновременно (соединение примера 1 предшествовало дазатинибу менее чем на 1 ч).

Фиг. 11 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и паклитаксела в карциноме молочной железы человека ΜΌΑ-ΜΒ-468. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; (♦) паклитаксел, 12 мг/кг/введение, Ο7Ω/6, IV; (А) пример 1, 3,75 мг/кг/введение, ОЭ/3, раз в неделю в течение 7 недель, РО, О комбинация соединения примера 1 и паклитаксела.

Фиг. 12 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и паклитаксела в карциноме молочной железы человека ΜΌΑ-ΜΒ-468. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

- 2 022530 (·) контроль; (♦) паклитаксел, 12 мг/кг/введение, 070/6, IV; (4) пример 1, 7,5 мг/кг/введение, 00/3, раз в неделю в течение 7 недель, РО, (□) комбинация соединения примера 1 и паклитаксела.

Фиг. 13 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и тамоксифена в карциноме молочной железы человека МСР7. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; () тамоксифен, 20 мг/кг/введение, 020/12, ΙΡ; (♦) пример 1, 3,75 мг/кг/введение, 00/3, еженедельно в течение 3 недель, РО; О комбинация соединения примера 1 и тамоксифена.

Фиг. 14 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и тамоксифена в карциноме молочной железы человека МСР7. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; () тимоксифен, 20 мг/кг/введение, 020/12, ΙΡ; (♦) пример 1, 7,5 мг/кг/введение, 00/3, еженедельно в течение 3 недель, РО (^н) комбинация соединения примера 1 и тамоксифена.

Фиг. 15 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и дексаметазона (Цеха) в ксенотрансплантатах человеческой Т-ЛЬЬ лейкемии Т ΗΡΒ-ЛЬЬ. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы по 6-8 мышей:

(·) контроль; (♦) дексаметазон, 7,5 мг/кг/введение, 00/14, ΙΡ; (·) пример 1, 3,75 мг/кг/введение, 00/3, еженедельно в течение 3 недель, РО, (□) комбинация соединения примера 1 и дексаметазона.

Фиг. 16 показывает синергетическую противоопухолевую эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и карбоплатина в тератокарциноме яичников человека РА-1. Каждый символ представляет среднее опухолевой массы группы из 8 мышей:

(·) контроль; (О) карбоплатин, 90 мг/кг/введение, 070/3, IV; (()) пример 1, 1 мг/кг/введение, 00/21, РО; О комбинация соединения примера 1 и карбоплатина.

Подробное описание изобретения

Согласно первому аспекту настоящее изобретение относится к соединениям формулы(1)

или его пролекарства, где Κι представляет собой -СН₂СР₃ или -СН₂СН₂СР₃;

К₂ представляет собой -СН₂СР₃, -СН₂СН₂СР₃ или -СН₂СН₂СН₂СР₃;

К₃ представляет собой Н или -СН₃;

каждый К_а независимо представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃; ζ равно 0, 1 или 2.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (Ι) или его пролекарствам, в которых К₁ представляет собой -СН₂СР₃; а Κ₂, Κ₃, К_а и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, в которых К₂ представляет собой -СН₂СР₃ или -СН2СН2СР3.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (Ι) или его пролекарствам, в которых Κι представляет собой -СН₂СН₂СР₃; а Κ₂, Κ₃, К_а и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, в которых К₂ представляет собой -СН₂СР₃ или -СН2СН2СР3.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (Ι) или его пролекарствам, в которых К₂ представляет собой -СН₂СР₃; а К₂, К₃, К_а и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, в которых К! представляет собой -СН₂СН₂СР₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (Ι) или его пролекарствам, в которых К₂ представляет собой -СН₂СН₂СР₃; а К₂, К₃, К_а и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, где К! представляет собой -СН₂СН₂СР₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (Ι) или его пролекарствам, в которых К₂ представляет собой -СН₂СН₂СН₂СР₃; а К₁, К₃, К_а и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, где К1 представляет собой -СН2СН2СР3.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (Ι) или его пролекарствам, в которых К3 представляет собой Н; а К1, К2, Ка и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, где К1 представляет собой дейтерий (ϋ) или тритий (Т). Кроме того, в данном варианте осуществления включаются соединения, в которых К1 представляет собой -СН2СН2СР3 и К2 представляет собой -СН2СН2СР3.

- 3 022530

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, в которых К₃ представляет собой -СН₃; а Κι, К₂ и ζ определяются в соответствии с первым аспектом. К₃ включает метильные группы, в которых один или несколько атомов водорода изотопно замещены дейтерием (Ό) и/или тритием (Т). В одном примере этого варианта К₃ представляет собой -СЭ₃. Кроме того, в данном варианте осуществления включаются соединения, в которых К₁ представляет собой -СН₂СН₂СР₃ и К₂ представляет собой -СН₂СН₂СР₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где ζ равно 2, и каждый К_а независимо представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃, и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃ и К_ьΚ₂, и К₃ имеют значения, определенные в первом аспекте. В этом варианте осуществления включаются соединения, где Κι представляет собой -СН₂СН₂СР₃ и К₂ представляет собой -СН₂СН₂СР₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃ и Κι, К₂ и К₃ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, где К₁ представляет собой -СН₂СН₂СР₃ и К₂ представляет собой -СН₂СН₂СР₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где ζ равно 0, и К₁, К₂ и К₃ определяются в соответствии с первым аспектом. В этом варианте осуществления включаются соединения, где К₁ представляет собой -СН₂СН₂СР₃ и К₂ представляет собой -СН₂СР₃ или -СН2СН2СР3.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН₂СР₃, К₂ представляет собой -СН₂СР₃, К₃ представляет собой Н или -СН₃ и ζ равно 0.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3 и ζ равно 0.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3 и ζ равно 0.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3 и ζ равно 0.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3 и ζ равно 0.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3 и ζ равно 0.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3; ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3; ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3; ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3; ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН3; ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃.

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I) или его пролекарствам, где К₁представляет собой -СН2СН2СР3, К2 представляет собой -СН2СН2СН2СР3, К3 представляет собой Н или -СН₃; ζ равно 1 и К_а представляет собой Р, С1, -СЫ, -ОСН₃ и/или -ЫНСН₂СН₂ОСН₃.

- 4 022530

Один из ным из:

вариантов осуществления относится к соединению по п. 1 или его пролекарствам, выбран-

Один из ным из:

вариантов осуществления относится к соединению по п.1 или его пролекарствам, выбран-

- 5 022530

Один вариант осуществления относится к соединению формулы (I), выбранному из:

(2К,3§)-Ы-((3§)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (1);

(2К,3§)-Ы-((3§)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (2);

(2К,3§)-Ы-((3§)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2-(2,2,2трифторэтил)-3 -(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамида (3);

(2К,3§)-Ы-((3§)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(2,2,2трифторэтил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (4);

(2К,3 δ)-Ν-((3 §)-1-(²Н₃)метил-2-оксо-5 -фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (5);

(2К,3§)-^((3§)-7-хлор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (6);

(2К,3§)-^((3§)-8-метокси-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (7);

(2К,3§)-^((3§)-8-фтор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (8);

(2К,3§)-^((3§)-7-метокси-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (9);

(2К,3§)-^((3§)-7-фтор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (10);

(2К,3§)-^((3§)-8-хлор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (11);

(2К,3§)-^((3§)-9-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (12);

(2К,3§)-^((3§)-8-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (13);

(2К,3§)-^((3§)-7-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1, 4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (14);

(2К,3§)-^((3§)-8-циано-9-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (15);

(2К,3§)-^((3§)-8,9-дихлор-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (16);

(2К,3§)-^((3§)-9-фтор-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (17);

(2К,3§)-^((3§)-9-хлор-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (18);

(2К,3§)-^((3§)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (19);

(2К,3§)-М-((3§)-8-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (20) и (2К,3§)-^((3§)-9-((2-метоксиэтил)амино)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)2,3-бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (21) и пролекарства из одного или нескольких из указанных выше соединений.

Настоящее изобретение может быть осуществлено в других конкретных формах без отхода от сущности или его существенных признаков. Настоящее изобретение включает все комбинации аспектов и/или вариантов осуществления изобретения, отмеченных в настоящем описании. Следует понимать, что все и любые варианты осуществления настоящего изобретения могут быть приняты в сочетании с любыми другими вариантами осуществления или вариантами осуществления для описания других дополнительных вариантов осуществления. Кроме того, следует понимать, что каждый отдельный элемент из вариантов осуществления предназначен для объединения с любыми другими элементами из любого варианта осуществления для описания дополнительного варианта осуществления.

- 6 022530

Определения.

Отличительные признаки и преимущества изобретения могут быть более легко понятны специалистами в данной области техники при чтении следующего подробного описания. Следует отметить, что некоторые отличительные признаки изобретения, которые для прояснения обоснований, описанных выше и ниже в контексте отдельных вариантов осуществлений, также могут быть объединены в одном осуществлении. Наоборот, различные отличительные признаки изобретения, которые для краткости обоснований описываются в контексте одного осуществления, также могут быть объединены так, чтобы сформировать их подкомбинации. Варианты осуществления, определенные в настоящем изобретении как иллюстративные или предпочтительные, являются иллюстративными, а не ограничивающими.

Если специально указано иное, упоминание в единственном числе может также включать в себя множественное число.

Если не указано иначе, что для любого гетероатома с ненасыщенными валентностями предполагается, что он имеет достаточно атомов водорода для насыщения валентностей.

Определения, изложенные в настоящем изобретении, имеют преимущество перед определениями, изложенными в любом патенте, патентной заявке и/или опубликованной патентной заявке, включенной в настоящее описание посредством ссылки.

Ниже приведены определения различных терминов, используемых для описания настоящего изобретения. Эти определения относятся к терминам, которые используются в описании (если они не ограничены на других основаниях в определенных случаях) либо индивидуально, либо в составе более крупной группы. По всему описанию группы и их заместители могут быть выбраны специалистом в данной области техники, чтобы обеспечить стабильные остатки и соединения.

В соответствии с соглашением, используемым в данной области техники, используется в структурных формулах, представленных в настоящем изобретении, чтобы изобразить связь, которая является точкой присоединения остатка или заместителя к структуре скелета или структуре основной цепи.

Термины гало и галоген, используемые в настоящем изобретении, относятся к Р, С1, Вг или I.

Термин алкил, используемый в настоящем изобретении, относится как к разветвленной, так и неразветвленной цепи насыщенных алифатических углеводородных групп, содержащих, например, от 1 до 12 атомов углерода, от 1 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются этим, метил (Ме), этил (Е!), пропил (например, н-пропил и изопропил), бутил (например, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил), а также пентил (например, н-пентил, изопентил, неопентил), н-гексил, 2-метилпентил, 2-этилбутил, 3-метилпентил и 4-метилпентил. Когда номера появляются в индексе после символа С, индекс определяет более конкретное количество атомов углерода, которое определенная группа может содержать. Например, С1_-6алкил означает прямую или разветвленную алкильную группу с 1-6 атомами углерода. Термин фармацевтически приемлемый используется в настоящем изобретении для ссылки на те соединения, материалы, композиции и/или лекарственные формы, которые с медицинской точки зрения являются пригодными для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемой или осложнениями, соразмерными с разумным соотношением польза/риск.

Соединения формулы (I) могут обеспечиваться в виде аморфных твердых веществ или кристаллических твердых веществ. Лиофилизация может использоваться для обеспечения соединений формулы (I) в виде твердого вещества.

Любое соединение, которое может превращаться ίη νίνο с обеспечением биологически активного агента (т.е. соединения формулы (I)), является пролекарством в пределах объема и сущности настоящего изобретения.

Различные формы пролекарств хорошо известны в данной области техники и описаны в:

a) ХУегтшН. С.О. е! а1., Тйе Ргасбсе о£ Мебкша1 СНепщЦу. СЬар!ег 31, Асабетк Рге88 (1996);

b) Випбдаагб, Н. еб., Эе81дп о£ Ргобгид8, Ε^νκτ (1985);

c) Випбдаагб, Н., Сйар1ег 5, Эемдп апб Аррйсабоп о£ Ргобгид8, Кго8даатб-Ьаг8еп, Р. е! а1., еб8., А Тех!Ьоок о£ Эгид Эе81дп апб ^еνе1οртеη!, р. 113-191, Натуооб Асабетк РиЬНзЬегв (1991); а также

б) Те8!а, В. е! а1., Нубго1у818 ш Эгид апб РгобгидМе!аЬо118т, ХУбеу-УСН (2003).

Кроме того, соединения формулы (I) после их получения предпочтительно выделяются и очищаются для получения композиции, содержащей количество по массе равное или большее чем 99% соединения формулы (I) (по существу, чистое), которое затем используется или формулируется, как описано в настоящем изобретении. Такие по существу, чистые соединения формулы (I) также рассматриваются в настоящем изобретении как часть настоящего изобретения.

Стабильное соединение и стабильная структура предназначаются, чтобы указывать на соединение, которое достаточно устойчиво, чтобы выдержать выделение до нужной степени чистоты из реакционной смеси и превращение в эффективный терапевтический агент. Настоящее изобретение предназначено для воплощения стабильных соединений.

Выражение терапевтически эффективное количество предназначается для включения количества соединения в соответствии с настоящим изобретением одно или количество комбинации заявленных

- 7 022530 соединений или количества соединения в соответствии с настоящим изобретением в комбинации с другими активными ингредиентами для эффективного действия в качестве ингибитора для Ыо1еЬ-рецептора или эффективного для лечения или профилактики пролиферативных заболеваний, таких как рак.

В настоящем изобретении врачевание или лечение охватывает лечение болезненного состояния у млекопитающего, в частности человека, и включает (а) предупреждение наступления болезненного состояния у млекопитающего, в частности, если указанное млекопитающее предрасположено к болезненному состоянию, но еще не диагностировано, что имеет его; (Ь) ингибирование болезненного состояния, т.е. прекращение его развития; и/или (с) облегчение болезненного состояния, т.е. регрессию болезненного состояния.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением включают в себя все изотопы атомов в соответствии с настоящим изобретением. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковый атомный номер, но разные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения, изотопы водорода включают дейтерий (И) и тритий (Т). Изотопы углерода включают ¹³С и ¹⁴С. Меченные изотопами соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными описанным в настоящем изобретении, с использованием соответствующего изотопно-меченого реагента вместо немеченного реагента, который обычно используется.

Кристаллические формы соединение примера 1.

В одном варианте осуществления соединение примера 1

обеспечивается в виде кристаллического вещества, содержащего одну или несколько кристаллических форм.

Примеры подходящих кристаллических форм соединения примера 1 включают формы N-1, А-2 и ЕА-3.

В одном варианте осуществления соединение примера 1 обеспечивается в виде кристаллического вещества, содержащего первую кристаллическую форму. Первая кристаллическая форма соединения примера 1 содержит чистую кристаллическую форму, называемую в настоящем изобретении форма N-1 или N-1 форма.

В одном варианте осуществления N-1 форма соединения примера 1 характеризуется параметрами элементарной ячейки, приблизительно равными следующим.

Размеры ячейки: а = 9,41 А,

Ь = 17,74 А, с = 31,94 А, α = 90,0°, β = 98,4°, γ = 90,0°.

Пространственная группа: Ρ2ι.

Молекулы примера 1/асимметричная ячейка: 4.

Объем/число молекул в элементарной ячейке = 659 А³.

Плотность (расчетная) = 1,402 г/см³, где параметры элементарной ячейки формы N-1 измеряются при температуре около -10°С.

В другом варианте N-1 форма соединения примера 1 характеризуется симулированной дифрактограммой порошковой рентгеновской дифракции (ΡΧΚΠ), по существу, в соответствии с дифрактограммой, показанной на фиг. 1, и/или наблюдаемой дифрактограммой ΡΧΚΠ, по существу, в соответствии с дифрактограммой, показанной на фиг. 1

В еще одном варианте осуществления N-1 форма соединения примера 1 характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой (СиКа λ=1,5418 А при температуре около 25°С), содержащей четыре или более, предпочтительно пять или более, значений 2θ, выбранных из 5,7±0,2, 7,5±0,2, 10,3±0,2, 10,7±0,2, 15,2±0,2, 16,8±0,2, 20,2±0,2 и 20,7±0,2, где порошковая рентгеновская дифрактограмма формы N-1 измеряется при температуре около 20°С.

В еще одном варианте осуществления N-1 форма примера 1 характеризуется относительными координатами атомов, по существу, перечисленными в табл. 1.

- 8 022530

Таблица 1

Относительные координаты атомов формы N-1 примера 1, рассчитанные при температуре около 25°С; координаты атомов (х 10⁴) и эквивалентные параметры изотропного замещения (А²х10³)

	X	У	Ζ	и (экв.)*
N(7)	10824(5)	7415(3)	1732(1)	39(1)
N(3)	4985(5)	565(2)	1293(1)	33(1)
0(3)	7152(4)	45(2)	1509(1)	45(1)
N(8)	9981(6)	10557(3)	1329(2)	60(2)
0(7)	12033(5)	10000(2)	1229(1)	55(1)
0(6)	8697(5)	7992(2)	1768(1)	53(1)
Р(4)	11039(5)	8541(3)	79(1)	76(1)
С(17)	5836(7)	8(3)	1469(1)	30(1)
N(11)	3979(5)	1500(3)	3735(1)	35(1)
N(2)	5338(6)	2530(3)	994(1)	41(1)
С(8)	7012(6)	1237(3)	77(2)	35(1)
N(15)	9277(5)	4606(3)	3230(1)	37(1)
С(39)	9990(7)	8020(3)	1739(2)	36(1)
0(2)	3365(5)	1827(2)	1076(1)	49(1)
N(6)	10513(6)	5383(3)	1910(2)	46(1)
С(41)	10028(6)	9204(3)	1300(2)	36(1)
С(18)	5094(6)	-692(3)	1616(2)	33(1)
С(22)	5502(6)	-1369(3)	1360(2)	34(1)
С(23)	4828(7)	-2081(3)	1501(2)	35(1)
С(2)	6832(7)	2584(3)	978(2)	44(2)
С(14)	5639(7)	1198(3)	1113(2)	37(1)
С(36)	10130(7)	6682(3)	1698(2)	37(1)
С(15)	4647(7)	1875(3)	1071(2)	37(1)
0(14)	3524(5)	-2130(3)	1484(2)	63(1)
0(9)	5867(5)	1970(2)	3461(1)	46(1)
С(64)	4608(7)	2008(3)	3517(2)	35(1)
С(49)	7025(7)	893(4)	5004(2)	47(2)
0(12)	7212(5)	3943(2)	3143(1)	57(1)
Р(5)	8960(5)	8082(2)	93(1)	73(1)
С(33)	8030(8)	6274(4)	-21(2)	55(2)
N(5)	9704(5)	6528(3)	1249(1)	36(1)
С(42)	10783(8)	9965(4)	1287(2)	46(2)
0(5)	12472(5)	6155(3)	1945(1)	62(1)
С(37)	11163(8)	6062(4)	1872(2)	46(2)

- 9 022530

Р(7)	9290(6)	2987(3)	5202(1)	94(2)
С(65)	3707(6)	2688(3)	3341(2)	33(1)
N(4)	5716(6)	-2636(3)	1628(2)	53(1)
С(7)	6778(6)	1429(3)	518(2)	34(1)
0(8)	2612(5)	231(2)	3943(1)	53(1)
0(11)	10584(6)	5864(3)	3001(1)	61(1)
С(89)	8963(6)	2807(3)	3658(2)	41(1)
С(70)	4269(7)	3355(4)	4041(2)	47(2)
N(13)	8438(5)	5493(3)	3689(1)	37(1)
С(20)	5588(7)	-808(3)	2089(2)	38(1)
С(85)	9369(8)	5946(4)	3070(2)	46(2)
N(14)	8611(7)	6593(3)	3016(2)	55(1)
N(16)	8948(7)	1437(3)	3656(2)	68(2)
N(9)	5416(5)	1109(3)	4375(1)	37(1)
С(71)	4930(8)	4055(3)	4280(2)	51(2)
N(12)	4314(6)	4592(3)	3189(2)	68(2)
С(1)	7546(7)	2068(3)	746(2)	41(2)
0(13)	11084(5)	2050(3)	3796(2)	67(1)
С(73)	7471(7)	6206(4)	4209(2)	46(2)
С(6)	9033(7)	2147(4)	744(2)	51(2)
С(88)	9391(7)	3239(3)	3270(2)	44(2)
С(40)	10716(7)	8794(3)	1708(2)	41(1)
С(54)	7871(7)	381(4)	5261(2)	47(2)
С(67)	3574(8)	4095(4)	3382(2)	51(2)
Р(6)	8838(6)	3995(2)	4842(1)	84(1)
С(79)	7137(9)	6649(4)	3054(2)	56(2)
С(24)	8991(7)	5283(3)	1841(2)	45(2)
С(31)	8282(6)	5837(3)	703(2)	37(1)
С(47)	9570(7)	9167(4)	501(2)	46(2)
С(63)	4839(6)	898(3)	3940(2)	34(1)
С (90)	9762(7)	2060(3)	3707(2)	45(2)

- 10 022530

С(55)	6443(6)	715(3)	4559(2)	39(1)
С(68)	3723(8)	2732(4)	2864(2)	60(2)
С(59)	8345(10)	-1056(5)	3924(2)	70(2)
С(75)	7821(8)	5880(5)	4945(2)	68(2)
С(32>	8425(7)	6417(3)	405(2)	50(2)
0(10)	2312(5)	4203(3)	3420(2)	75(2)
С(48)	9694(8)	8740(4)	112(2)	57(2)
N(10)	4682(6)	-430(3)	4071(1)	46(1)
С(60)	9196(10)	-525(5)	4132(3)	78(3)
С(72)	7560(6)	5996(3)	3766(2)	38(1)
С(11)	7228(8)	906(5)	-774(2)	65(2)
С(95)	9510(8)	3334(4)	4845(2)	56(2)
С(86)	8534(6)	5301(3)	3249(2)	36(1)
С(16)	4463(10)	3237(4)	980(2)	75(3)
С(62)	3917(7)	205(4)	3981(2)	43(2)
С(46)	10181(7)	8747(4)	901(2)	44(2)
С(57)	6210(8)	-445(3)	4106(2)	51(2)
С(30)	8759(6)	5995(3)	1157(2)	35(1)
С(66)	4345(6)	3404(3)	3568(2)	37(1)
С(87)	8540(6)	3940(3)	3212(2)	40(1)
С(93)	9371(7)	3266(3)	4063(2)	46(2)
С(58)	6870(9)	-1041(4)	3907(2)	60(2)
Р(2)	11777(9)	10008(4)	2879(2)	151(3)
С(74)	7871(7)	5699(4)	4528(2)	55(2)
С(25)	8132(7)	5566(3)	1483(2)	41(1)
С(4)	9061(10)	3259(5)	1173(2)	76(2)
С(26)	6645(7)	5450(3)	1443(2)	48(2)
С(12)	7727(9)	1590(5)	-595(2)	66(2)
С(56)	7085(7)	83(4)	4344(2)	45(2)
С(34)	7488(7)	5600(4)	-167(2)	55(2)
С(9)	6519(7)	574(4)	-101(2)	49(2)

- 11 022530

С(3)	7607(10)	3182(4)	1190(2)	66(2)
С(81)	5158(10)	6468(4)	3438(2)	76(2)
С(45)	11099(16)	9317(7)	2895(3)	121(4)
С(43)	10543(9)	9268(4)	2103(2)	64(2)
Г(3)	9787(11)	9550(9)	2938(2)	245(7)
С(53)	8327(8)	558(5)	5683(2)	66(2)
С(29)	8344(10)	4873(4)	2138(2)	61(2)
С(5)	9774(10)	2734(5)	964(2)	76(2)
С(80)	6621(7)	6399(3)	3417(2)	53(2)
С(94)	9050(7)	2877(4)	4460(2)	51(2)
С(38)	11435(9)	4768(4)	2102(2)	71(2)
С(13)	7606(7)	1760(3)	-179(2)	48(2)
С(61)	3913(9)	-1147(4)	4095(2)	71(2)
С(52)	8010(10)	1214(6)	5841(2)	79(2)
С(10)	6633(9)	406(4)	-526(2)	68(2)
С(35)	7696(8)	5160(4)	553(2)	57(2)
С(84)	9357(12)	7262(4)	2869(3)	91(3)
С(91)	9330(8)	2785(4)	2864(2)	59(2)
С(27)	6019(9)	5060(4)	1739(2)	69(2)
С(44)	11196(10)	8906(4)	2495(2)	78(2)
С(69)	3191(8)	2018(4)	2628(2)	61(2)
С(78)	7034(8)	6922(4)	4311(2)	64(2)
С(83)	6199(12)	7012(5)	2740(3)	87(3)
С(82)	4221(10)	6784(6)	3121(4)	100(3)
С(51)	7187(10)	1748(5)	5591(2)	79(2)
С(76)	7428(9)	6592(6)	5047(2)	80(3)
Р(1)	11661(10)	8983(5)	3228(2)	186(4)
С(50)	6711(8)	1571(4)	5174(2)	58(2)
С(77)	7057(9)	7114(5)	4734(3)	85(3)
N(1)	5875(5)	999(2)	684(1)	34(1)
С(102)	5582(7)	-1953(3)	630(2)	49(2)

- 12 022530

С(101)	5084(7)	-1277(3)	879(2)	44(2)
С{100)	5214(10)	-152(4)	2344(2)	73(2)
С(104)	7326(8)	5036(4)	И5(2)	70(2)
С(28)	6897(11)	4774(4)	2086(3)	75(2)
Р(40)	9173(5)	9112(2)	-241(1)	74(1)
С(105)	8587(8)	41(4)	4352(2)	60(2)
С(124)	2922(10)	2104(6)	2165(3)	82(3)
Р(42)	4029(8)	2397(5)	2012(2)	142(3)
Р(43)	1850(8)	2595(5)	2046(2)	134(2)
Р(41)	2570(8)	1475(4)	1965(2)	139(2)
С(122)	5045(7)	3962(4)	4744(2)	51(2)
Р(44)	5920(5)	3370(2)	4887(1)	74(1)
Р(45)	5616(5)	4563(2)	4959(1)	75(1)
Р(46)	3833(5)	3823(2)	4879(1)	75(1)
С(108)	4748(13)	7054(5)	2773(3)	100(3)
Р(47)	8547(9)	2143(4)	2026(2)	152(3)
Р(48)	6731(8)	1653(4)	2180(2)	145(2)
Р(49)	10919(5)	3510(3)	4901(1)	81(1)
С(123)	7913(9)	2494(5)	2683(2)	73(2)
С<121)	7997(12)	1902(6)	2341(3)	89(3)
С(120)	5377(8)	-1834(4)	184(2)	53(2)
С(109)	5564(11)	-282(5)	2811(2)	79(3)
Р(55)	3970(4)	-1704(2)	15(1)	70(1)
Р(54)	6048(5)	-1235(2)	59(1)	67(1)
Р(56)	5748(5)	-2425(2)	-34(1)	69(1)
Р(53)	4868(7)	-845(3)	2948(1)	100(2)
Р(51)	5179(13)	300(4)	3035(2)	189(4)
Р(52)	6924(8)	-420(6)	2920(2)	181(4)
Р(60)	8732(11)	1307(3)	2477(2)	192(4)

* и(экв.) определяется как одна треть следа ортогонализованного тензора ϋ^π

В еще одном варианте осуществления N-1 форма соединения примера 1 является, по существу, чистой.

В еще одном варианте осуществления N-1 форма соединения примера 1 содержит по меньшей мере около 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу формы N-1 соединения примера 1.

В еще одном варианте осуществления, по существу, чистая форма N-1 соединения примера 1 имеет, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем около с 10%, предпочтительно менее чем около 5% и более предпочтительно менее чем около 2% общей площади пика экспериментально измеренной дифрактограммы ΡΧΚΌ, вытекающие из пиков, которые отсутствуют в симулированной дифрактограмме ΡΧΡΌ. Наиболее предпочтительно, чтобы, по существу, чистая кристаллическая форма N-1 имела, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем примерно с 1% от общей площади пика экспериментально измеренной дифрактограммы порошковой рентгеновской дифракции, вытекающей из пиков, которые отсутствуют в симулированной порошковой рентгеновской дифрактограммы.

В другом варианте осуществления изобретения кристаллическая форма соединения примера 1 в основном состоит из формы N-1. Кристаллическая форма этого варианта осуществления может содержать по меньшей мере примерно 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу кристаллической формы, форму N-1 соединения примера 1.

- 13 022530

В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция обеспечивает форму N-1 соединения примера 1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель и/или разбавитель.

В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит, по существу, чистую форму N-1 соединения примера 1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель и/или разбавитель.

В еще одном варианте терапевтически эффективное количество формы N-1 соединения примера 1 комбинируется по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем и/или разбавителем, чтобы обеспечить по меньшей мере одну фармацевтическую композицию.

В одном варианте осуществления соединение примера 1 обеспечивает вторую кристаллическую форму. Вторая кристаллическая форма представляет собой кристаллическую форму ацетонового сольвата, называемую в настоящем изобретении форма А-2 или А-2 форма. А-2-форма содержит приблизительно одну молекулу ацетона на каждую молекулу примера 1.

В одном варианте А-2 форма характеризуется параметрами элементарной ячейки, приблизительно составляющими следующее.

размеры ячейки: а = 9,25 А,

Ь= 17,11 А, с= 19,63 А, а = 90,0°, β = 99,2°, γ = 90,0°.

Пространственная группа: Р2!.

Молекулы примера 1/асимметричная ячейка: 2.

Объем/число молекул в элементарной ячейке = 767 А³.

Плотность (расчетная) = 1,331 г/см³, где параметры элементарной ячейки формы А-2 измеряются при температуре около -50°С.

В другом варианте осуществления А-2 форма характеризуется симулированной картиной порошковой рентгеновской дифракции (РХКП), по существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 2, и/или наблюдаемой дифрактограммой РХКП, по существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 2.

В еще одном варианте осуществления форма А-2 примера 1 характеризуется относительными координатами атомов, по существу, перечисленными в табл. 2.

- 14 022530

Таблица 2

Относительные координаты атомов формы А-2 примера 1, рассчитанные при температуре около 25°С; координаты атомов (х 10⁴) и эквивалентные параметры изотропного замещения (А²х10³)

С(7)	6904(4)	4997(2)	5292(2)	48(1)
С(1)	8004(4)	5982(2)	6174(2)	54(1)
С(2)	6800(4)	5545(2)	5859(2)	54(1)
С(8)	6141(4)	4232(2)	5284(2)	54(1)
С(3)	5457(5)	5651(3)	6082(2)	76(1)
С(11)	4844(6)	2766(3)	5230(3)	85(2)
С(6)	7848(6)	6490(3)	6720(2)	71(1)
С(13)	6027(5)	3824(3)	5876(2)	70(1)
С<9)	5582(5)	3890(3)	4653(2)	71(1)
С(12)	5401(6)	3097(3)	5850(3)	83(2)
С(10)	4917(6)	3170(3)	4628(3)	90(2)
С(5)	6489(7)	6573(3)	6912(3)	90(2)
С(4)	5305(7)	6149(4)	6600(3)	97(2)
N(1)	9412(3)	5900(2)	5975(2)	51(1)
N(2)	7595(3)	5151(2)	4788(2)	44(1)
С(14)	10740(5)	5965(3)	6513(2)	74(1)
0(2)	10864(3)	5937(2)	5145(1)	55(1)
С(16)	8251(3)	5933(2)	4786(2)	40(1)
С(15)	9646(4)	5938(2)	5311(2)	44(1)
N(3)	8562(3)	6099(2)	4109(1)	41(1)
С(17)	7467(4)	6272(2)	3606(2)	39(1)
0(3)	6194(2)	6341(2)	3715(1)	51(0
С(18)	7818(4)	6368(2)	2879(2)	42(1)
С(19)	7150(4)	5692(2)	2427(2)	43(1)
С(20)	7742(4)	5710(2)	1743(2)	47(1)
С<21)	7295(4)	7162(2)	2603(2)	53(1)
С(22)	7920(6)	7834(3)	3079(2)	71(1)
С(23)	7430(10)	8614(3)	2824(3)	107(2)
С(24)	7536(4)	4901(2)	2785(2)	52(1)
С(25)	7093(6)	4206(3)	2330(2)	71(1)
С(26)	7241(8)	3455(3)	2704(3)	94(2)

- 15 022530

Р(6)	6297(5)	3386(2)	3134(2)	129(1)
Р(1)	7959(8)	9176(2)	3262(2)	185(3)
Р(5)	8543(6)	3362(2)	3105(3)	150(2)
Р(3)	7942(5)	8794(2)	2229(2)	126(1)
Р(4)	7086(8)	2841(2)	2316(3)	195(3)
Р(2)	5988(6)	8693(2)	2664(3)	144(2)
0(4)	9043(3)	5579(2)	1739(1)	64(1)
N(4)	6801(3)	5840(2)	1174(2)	58(1)
С(28)	3228(5)	5219(2)	-666(2)	58(1)
С(27)	2067(5)	5688(2)	-980(2)	58(1)
С(34)	3784(6)	3921(3)	-46(2)	72(1)
С(33)	3100(5)	4701(2)	-78(2)	58(1)
С(35)	4203(7)	3574(3)	594(3)	97(2)
С(39)	3986(6)	3507(3)	-636(3)	83(2)
С(32)	2285(6)	6154(3)	-1536(2)	75(1)
С(30)	4731(7)	5711(3)	-1475(3)	91(2)
С(38)	4583(7)	2762(3)	-576(3)	98(2)
С(29)	4568(6)	5253(3)	-917(2)	72(1)
С(31)	3577(7)	6155(3)	-1784(3)	87(2)
С(37)	4968(9)	2422(4)	54(4)	118(2)
С(36)	4771(9)	2808(4)	624(4)	128(3)
N(5)	661(4)	5680(2)	-773(2)	60(1)
N(6)	2443(4)	4911(2)	431(2)	54(1)
С(40)	-651(6)	5774(3)	-1302(2)	86(2)
0(5)	-740(3)	5772(2)	72(2)	68(1)
С(41)	469(4)	5735(2)	-103(2)	53(1)
С(42)	1863(4)	5705(2)	419(2)	46(1)
N(7)	1560(3)	5910(2)	1090(1)	45(1)
С(43)	2620(4)	6162(2)	1576(2)	46(1)
0(6)	3897(3)	6255(2)	1483(1)	57(1)
0(44)	2172(4)	6353(3)	2271(2)	52(1)

- 16 022530

С(46)	2395(4)	5950(4)	3504(2)	74(1)
С(45)	3085(4)	5884(3)	2850(2)	62(1)
С(48)	1358(6)	7707(3)	1848(3)	83(1)
С(47)	2339(5)	7234(3)	2392(2)	67(1)
С(51)	1858(6)	4543(4)	2518(4)	107(2)
С(50)	3255(4)	5013(3)	2687(2)	70(1)
С(49)	1563(10)	8561(4)	1908(5)	124(2)
С(52)	2084(6)	3715(4)	2468(4)	99(2)
Р(12)	3031(5)	3498(3)	2086(3)	142(2)
Р(10)	2663(6)	3415(3)	3096(2)	163(2)
Р(9)	1342(6)	8818(3)	2530(3)	163(2)
Р(11)	888(5)	3295(3)	2278(4)	183(3)
Р(8)	2877(7)	8787(3)	1859(4)	207(3)
Р(7)	614(7)	8955(3)	1439(3)	173(2)
0(7)	3291(3)	5999(2)	4102(2)	84(1)
N(8)	1075(3)	5907(4)	3480(2)	127(3)
0(18)	8859(5)	7601(2)	5406(3)	125(2)
С(25)	9451(6)	8179(2)	5220(3)	93(2)
С(18)	8949(12)	8987(3)	5332(6)	178(4)
С(35)	10720(8)	8060(6)	4852(5)	170(4)
С(58)	894(7)	8038(3)	9719(4)	П4(2)
С(68)	1519(16)	8821(4)	9622(7)	237(7)
С(45)	-672(9)	7980(10)	9801(11)	366(14)
0(28)	1390(8)	7390(3)	9852(6)	226(4)

* и (экв.) определяется как одна треть следа ортогонализованного тензора И¹·¹.

В еще одном варианте осуществления А-2 форма соединения примера 1, по существу, является чистой.

В еще одном варианте осуществления А-2 форма соединения примера 1 содержит по меньшей мере примерно 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в пересчете на массу второй кристаллической формы, формы А-2.

В еще одном варианте осуществления, по существу, чистая вторая кристаллическая форма имеет, по существу, однородную гомогенную фазу менее чем около с 10%, предпочтительно менее чем около 5% и более предпочтительно менее чем около 2% от общей площади пика экспериментально измеренных картин РХКН, вытекающих из пиков, которые отсутствуют в симулированной картине РХКН. Наиболее предпочтительно, чтобы, по существу, чистая вторая кристаллическая форма имела, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем около с 1% от общей площади пика экспериментально измеренной порошковой рентгенограммы, вытекающей из пиков, которые отсутствуют в симулированной порошковой рентгенограмме.

В другом варианте осуществления вторая кристаллическая форма соединения примера 1 в основном состоит из формы А-2. Вторая кристаллическая форма этого варианта осуществления может содержать по меньшей мере около 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в пересчете на массу второй кристаллической формы, формы А-2.

В одном варианте осуществления соединение примера 1 обеспечивает третью кристаллическую форму. Третья кристаллическая форма представляет собой кристаллическую форму этилацетатного сольвата, называемом в настоящем изобретении форма ЕА-3 или ЕА-3 форма. ЕА-3 форма содержит примерно одну молекулу этилацетата на каждую молекулу примера 1.

В одном варианте осуществления ЕА-3 форма характеризуется параметрами элементарной ячейки, приблизительно равными следующему:

размеры ячейки: а = 8,84 А,

Ь = 15,95 А, с = 22,38 А, α = 90,0°,

- 17 022530 β = 90,0°, γ = 90,0°;

пространственная группа: Ρ212121; молекулы примера 1/асимметричная ячейка: 1; объем/число молекул в элементарной ячейке = 789 А³; плотность (расчетная) = 1,357 г/см³, где параметры элементарной ячейки формы ЕА-3 измеряются при температуре около -50°С.

В другом варианте осуществления ЕА-3 форма характеризуется симулированной картиной порошковой рентгеновской дифракции (ΡΧΡΌ), по существу, в соответствии со схемой показано на фиг. 3, и/или наблюдаемой картиной ΡΧΡΩ, по существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 3.

В еще одном варианте осуществления ЕА-3 форма соединения примера 1 характеризуется порошковой рентгенограммой (СиКа λ=1,5418 А при температуре около 25°С), содержащей четыре или более, предпочтительно пять или более значений 2θ, выбранных из 6,8±0,2, 9,6±0,2, 10,6±0,2, 15,4±0,2, 20,5±0,2, 21,0±0,2 и 24,8±0,2, где порошковая рентгенограмма формы N-1 измеряется при температуре около 20°С.

В еще одном варианте осуществления ЕА-3 форма соединения примера 1 характеризуется относительными координатами атомов, по существу, перечисленными в табл. 3.

Таблица 3

Относительные координаты атомов формы ЕА-3 примера 1, рассчитанные при температуре около 25°С; координаты атомов (/10⁴) и эквивалентные параметры изотропного замещения (А²/10³)

	X	У	Ζ	и (экв.)
Р(1)	10284(3)	-324(1)	8889(1)	1Ю(1)
Р(2)	8491(2)	-284(1)	9520(1)	93(1)
Р(3)	10700(3)	44(1)	9784(1)	П3(1)
Р(4)	10501(3)	5623(1)	9310(1)	130(1)
Р(5)	8241(3)	5391(1)	9141(1)	115(1)
Р(6)	8839(3)	5780(1)	9997(1)	105(1)
0(1)	11040(2)	2804(1)	6756(1)	47(1)
0(2)	7956(1)	2449(1)	8498(1)	36(1)

- 18 022530

0(3)	12740(2)	2982(1)	9716(1)	40(1)
N(1)	8842(2)	2728(1)	6240(1)	33(1)
N(2)	8089(2)	3668(1)	7331(1)	33(1)
N(3)	9769(2)	2708(1)	7813(1)	33(1)
N(4)	10970(2)	2584(1)	10384(1)	35(1)
С(1)	7242(2)	2620(1)	6240(1)	31(1)
С(2)	6305(2)	3136(1)	6588(1)	32(1)
С(3)	4744(2)	2988(1)	6568(1)	41(1)
С(4)	4146(3)	2361(2)	6218(1)	46(1)
С(5)	5082(2)	1865(2)	5875(1)	45(1)
С(6)	6619(2)	1993(2)	5884(1)	41(1)
С(7)	6958(2)	3796(1)	6978(1)	32(1)
С(8)	6335(2)	4667(1)	6961(1)	38(1)
С(9)	6764(3)	5243(2)	7398(1)	49(1)
С(Ю)	6266(3)	6066(2)	7374(1)	62(1)
С(11)	5332(3)	6325(2)	6919(1)	65(1)
С(12)	4902(3)	5765(2)	6489(1)	61(1)
С(13)	5402(3)	4943(2)	6502(1)	49(1)
С(14)	9661(2)	2771(1)	6748(1)	33(1)
С(15)	8737(2)	2828(1)	7322(1)	31(1)
С(16)	9646(3)	2733(1)	5664(1)	42(1)
С(17)	9303(2)	2523(1)	8366(1)	28(1)
С(18)	10560(2)	2404(1)	8823(1)	28(1)
С(19)	10812(2)	1469(1)	8954(1)	33(1)
С(20)	9417(3)	1000(1)	9175(1)	40(1)
С(21)	9715(3)	119(2)	9337(1)	56(1)
С(22)	10180(2)	2934(1)	9377(1)	28(1)
С(23)	10038(2)	3867(1)	9211(1)	35(1)
С(24)	9480(3)	4403(1)	9721(1)	53(1)
С(25)	9272(3)	5289(2)	9554(1)	62(1)

С(26)	11411(2)	2830(1)	9845(1)	28(1)
0(18)	3231(2)	3405(1)	7982(1)	68(1)
0(28)	2969(2)	4783(1)	8077(1)	64(1)
С(18)	4926(3)	4166(2)	8613(1)	78(1)
С(28)	3651(3)	4066(2)	8192(1)	54(1)
С(33)	1698(3)	4746(2)	7661(1)	70(1)
С(43)	1132(4)	5596(2)	7579(2)	85(1)

* и (экв) определяется как одна треть следа ортогонализованного тензора ϋ¹¹.

В еще одном варианте осуществления ЕА-3 форма соединения примера 1 является, по существу, чистой.

В еще одном варианте осуществления ЕА-3 форма соединения примера 1 содержит по меньшей мере около 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу третьей кристаллической формы, формы ЕА-3.

В еще одном варианте, по существу, чистая форма ЕА-3 имеет, по существу значительную фазовую гомогенность менее чем около с 10%, предпочтительно менее чем около 5% и более предпочтительно менее чем около 2% от общей площади пика экспериментально измеренных ΡΧΚΌ, вытекающие из пиков, которые отсутствуют в симулированной картине ΡΧΚΌ. Наиболее предпочтительно, чтобы, по существу кристаллическая форма ЕА-3 имела, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем около с 1% от общей площади пика экспериментально измеренной порошковой рентгенограммы,

- 19 022530 вытекающей из пиков, которые отсутствуют в симулированной порошковой рентгенограмме.

В другом варианте осуществления третья кристаллическая форма соединения примера 1 в основном состоит из формы ЕА-3. Третья кристаллическая форма этого варианта осуществления может содержать по меньшей мере около 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.%, в расчете на массу третьей кристаллической формы, формы ЕА-3.

В одном варианте осуществления соединение примера 1 обеспечивает четвертую кристаллическую форму. Четвертая кристаллическая форма обеспечивает кристаллическую форму тетрагидрофуранового сольвата, называемой в настоящем изобретении форма ТНР-2 или ТНР-2 форма. ТНР-2 форма содержит примерно одну молекулу тетрагидрофурана на каждую молекулу примера 1.

В одном варианте осуществления ТНР-2 форма характеризуется параметрами элементарной ячейки, приблизительно равными следующим:

размеры ячейки: а = 9,34 А,

Ь = 16,44 А, с = 20,60 А, α = 90,0°, β = 102,8°, γ = 90,0°;

пространственная группа: Ρ2β молекулы примера 1/асимметричная ячейка: 2; молекулы тетрагидрофурана/асимметричная ячейка: 2; объем = 3082 А³, где параметры элементарной ячейки формы ТНР-2 измеряются при температуре около -50°С.

В другом варианте осуществления ТНР-2 форма характеризуется картиной симулированной порошковой рентгеновской дифракции (ΡΧΡΌ) ,существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 4, и/или наблюдаемой картиной ΡΧΚΌ, существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 4.

В еще одном варианте осуществления ТНР-2 форма соединения примера 1 характеризуется порошковой рентгенограммой (СиКа λ=1,5418 А при температуре около 25°С), содержащий четыре или более, предпочтительно пять или более, значений 2θ, выбранных из 6,9±0,2, 9,6±0,2, 11,2±0,2, 12,6±0,2, 16,6±0,2, 21,4±0,2 и 24,2±0,2, где дифрактограмма ΡΧΡΌ формы N-1 измеряется при температуре около 20°С.

В еще одном варианте осуществления ТНР-2 форма примера 1 характеризуется относительными координатами атомов, по существу, перечисленными в табл. 4.

- 20 022530

Таблица 4

Относительные координаты атомов формы ТНР-2 соединения примера 1 (не включая молекулы растворителя), рассчитанные при температуре около -50°С; координаты атомов (х 10⁴) и эквивалентные параметры изотропного замещения (А²х10³)

	X	У	Ζ	и (экв.)*
С(15)	5518(8)	5421(5)	-198(4)	40(2)
С(7)	8183(7)	4416(4)	-230(3)	37(2)
С(1)	6912(8)	5409(5)	-1086(3)	40(2)
С(14)	7026(7)	5430(4)	285(3)	33(2)
С(8)	8844(8)	3587(5)	-216(4)	43(2)
С(10)	9968(13)	2433(7)	425(5)	77(3)
С(3)	9384(9)	5015(5)	-1084(4)	53(2)
С(13)	8784(8)	3143(5)	-809(4)	48(2)
С(9)	9434(11)	3222(6)	378(4)	63(2)
С(2)	8146(8)	4952(5)	-811(3)	39(2)
С(16)	4171(9)	5392(7)	-1345(4)	67(2)
С(11)	9807(11)	1985(6)	-145(5)	65(2)
С(4)	9404(10)	5497(6)	-1633(4)	57(2)
С(12)	9264(9)	2348(5)	-782(4)	53(2)
С(6)	6924(11)	5907(5)	-1633(4)	54(2)
С(5)	8182(12)	5952(6)	-1902(4)	64(3)
N(1)	5578(6)	5360(4)	-848(3)	42(1)
N(3)	6888(6)	5605(4)	938(3)	36(1)
N(2)	7672(6)	4610(4)	275(3)	35(1)
0(1)	4390(5)	5416(4)	-2(3)	52(1)
0(2)	9346(5)	5736(3)	1309(2)	39(1)
С(18)	7891(7)	5843(4)	2128(3)	34(2)
С(19)	8603(6)	5146(4)	2580(3)	32(2)
С(17)	8107(7)	5722(4)	1427(3)	31(2)
С(24)	8791(9)	3596(5)	2706(4)	48(2)
0(23)	8173(8)	4312(5)	2258(3)	39(2)

- 21 022530

С(22)	8487(11)	8173(5)	2261(5)	62(2)
С(20)	8557(8)	6655(5)	2400(3)	39(2)
С(21>	7907(9)	7385(5)	1964(4)	49(2)
С(25)	8741(10)	2810(5)	2355(4)	52(2)
С(26)	8152(8)	5186(4)	3247(3)	37(2)
Р(1)	9955(6)	8219(4)	2328(4)	93(2)
Р(2)	7946(8)	8805(4)	1891(4)	99(2)
Р(3)	8223(9)	8310(4)	2860(3)	95(2)
Р(6)	9312(8)	2189(3)	2738(3)	85(2)
Р(4)	9544(10)	2827(4)	1887(3)	107(3)
Р(5)	7371(8)	2601(4)	2055(4)	99(2)
0(3)	6868(5)	5095(4)	3269(2)	53(2)
N(4)	9201(7)	5323(5)	3773(3)	50(2)
С(41)	5606(8)	5376(5)	5015(4)	44(2)
С(33)	2941(8)	4383(5)	5034(4)	44(2)
С(40)	4123(8)	5383(5)	4524(3)	40(2)
С(34)	2252(8)	3558(5)	5001(3)	43(2)
С(35)	1639(9)	3211(5)	4394(4)	50(2)
С(28)	2933(9)	4914(5)	5586(4)	46(2)
С(39)	2268(11)	3105(6)	5556(4)	64(2)
С(36)	1122(10)	2419(6)	4377(4)	63(2)
С(27)	4177(9)	5378(5)	5892(4)	49(2)
С(29)	1675(10)	4985(6)	5845(4)	57(2)
С(30)	1676(13)	5507(7)	6397(5)	73(3)
С(38)	1829(14)	2307(7)	5543(5)	87(3)
С(32)	4177(12)	5857(6)	6447(4)	62(2)
С(37)	1212(13)	1993(6)	4941(5)	78(3)
С(31)	2903(15)	5910(7)	6692(5)	82(3)
N(7)	4371(6)	5572(4)	3879(3)	39(1)
N(5)	3496(6)	4583(4)	4522(3)	40(1)

- 22 022530

N(6)	5540(8)	5326(4)	5672(3)	52(2)
С(42)	6922(10)	5333(7)	6176(4)	70(3)
0(4)	6769(6)	5366(4)	4854(3)	61(2)
0(5)	1990(5)	5881(3)	3468(2)	47(1)
С(43)	3254(7)	5799(5)	3385(3)	37(2)
С(44)	3604(7)	5919(5)	2715(3)	38(2)
С(48)	2633(7)	5381(5)	2189(3)	39(2)
С(45)	3372(8)	6832(5)	2508(3)	42(2)
С(47)	4193(9)	8255(6)	2732(6)	68(3)
С(49)	2530(8)	4500(5)	2392(4)	47(2)
0(46)	4402(9)	7411(5)	2964(4)	48(2)
С(50)	3935(11)	4011(6)	2526(5)	64(2)
Р(7)	5101(7)	8786(4)	3126(4)	96(2)
Р(8)	2886(6)	8555(4)	2680(4)	93(2)
Р(9)	4504(7)	8366(4)	2111(3)	82(2)
С(51)	3205(7)	5393(5)	1551(3)	43(2)
N(8)	2237(6)	5343(5)	980(3)	50(2)
0(6)	4529(6)	5406(6)	1582(3)	84(2)
С(52)	3758(13)	3148(6)	2623(6)	75(3)
Р(12)	4965(9)	2712(5)	2742(5)	121(3)
Р(11)	2916(13)	2808(5)	2068(5)	146(4)
Р(10)	3056(12)	2973(5)	3096(5)	148(4)

* и (экв) определяется как одна треть следа ортогонализованного тензора И¹¹.

В еще одном варианте осуществления ТНР-2 форма соединения примера 1 является, по существу, чистой.

В еще одном варианте осуществления ТНР-2 форма соединения примера 1 содержит по меньшей мере около 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу четвертой кристаллической формы, формы ТНР-2.

В еще одном варианте, по существу, чистая форма ТНР-2 имела, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем примерно с 10%, предпочтительно менее чем приблизительно 5% и более предпочтительно менее чем примерно 2% от общей площади пика экспериментально измеренной дифрактограммы РХКЭ, вытекающие из пиков, которые отсутствуют в симулированной картине РХКЭ. Наиболее предпочтительно, чтобы, по существу, кристаллическая форма ТНР-2 имела, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем около с 1% от общей площади пика экспериментально измеренной порошковой рентгенограммы, вытекающей из пиков, которые отсутствуют в симулированной порошковой рентгенограмме.

В другом варианте четвертая кристаллическая форма соединения примера 1 в основном состоит из формы ТНР-2. Четвертая кристаллическая форма этого варианта осуществления может содержать по меньшей мере около 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу четвертой кристаллической формы, формы ТНР-2.

Кристаллическая форма соединения примера 2.

В одном варианте осуществления соединение примера 2

обеспечивается в виде кристаллического вещества, содержащего кристаллическую форму.

Примером подходящей кристаллической формы соединения примера 2 является форма М2-1. М2-1 форма содержит около двух молекул метанола на каждую молекулу соединения примера 2.

В одном варианте осуществления М2-1 форма соединения примера 2 характеризуется параметрами элементарной ячейки, приблизительно равными следующим:

- 23 022530 размеры ячейки: а = 8,44 А,

Ь = 21,02 А, с = 17,52 А, α = 90,0°, β = 90,88°, γ = 90,0°;

пространственная группа: Р2у молекулы примера 2/асимметричная ячейка: 2; объем/число молекул в элементарной ячейке = 777 А^3;плотность (расчетная) = 1,297 г/см³, где параметры элементарной ячейки формы М-1 измеряются при температуре около -50°С.

В другом варианте осуществления М2-1 форма характеризуется картиной симулированной порошковой рентгеновской дифракции (ΡΧΚΌ), существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 5, и/или наблюдаемой картиной ΡΧΚΌ, существу, в соответствии со схемой, показанной на фиг. 5.

В еще одном варианте осуществления М2-1 форма соединения примера 2 характеризуется порошковой рентгенограммой (СиКа λ=1,5418 А при температуре около 25°С), содержащий четыре или более, предпочтительно пять или более, значений 2θ, выбранных из 8,2±0,2, 12,2±0,2, 14,2±0,2, 15,1±0,2, 16,8±0,2, 17,3±0,2 и 23,0±0,2, где порошковая рентгенограмма формы М2-1 измеряется при температуре около 20°С.

В еще одном варианте осуществления М2-1 форма соединения примера 2 характеризуется относительными координатами атомов, по существу, перечисленными в табл. 5.

- 24 022530

Таблица 5

Относительные координаты атомов формы М2-1, рассчитанные при температуре около 25°С; координаты атомов (х 10⁴) и эквивалентные параметры изотропного замещения (А²х 10³) примера 2, форма М2-1

	X	У	Ζ	и (экв.)
Р(1)	2613(2)	-212(1)	2456(1)	77(1)
Р(2)	4541(3)	-625(1)	3070(2)	96(1)
Р(3)	4934(3)	-161(1)	2004(1)	96(1)
Р(4)	7167(3)	3758(1)	3848(1)	77(1)
Р(5)	6914(3)	3210(1)	4862(1)	90(1)
Р(6)	9215(3)	3403(1)	4441(1)	85(1)
Р(7)	7591(2)	3726(1)	11734(2)	Н9(1)
Р(8)	9635(3)	4107(1)	11204(1)	86(1)
Р(9)	9848(3)	3673(1)	12297(1)	79(1)
Р(10)	12277(3)	-275(1)	10384(1)	91(1)
Р(11)	11834(6)	315(1)	9441(2)	176(2)
Р(12)	14222(4)	122(1)	9816(2)	133(1)
0(1)	1635(2)	931(1)	4421(1)	37(1)
0(2)	5968(2)	825(1)	4908(1)	47(1)
0(3)	8139(2)	1682(1)	2398(1)	35(1)
0(4)	6559(2)	2497(1)	9963(1)	39(1)
0(5)	10872(2)	2663(1)	9445(1)	39(1)
0(6)	13114(2)	1784(1)	11956(1)	34(1)
N(1)	2751(2)	2232(1)	5319(1)	34(1)
N(2)	1067(2)	1032(1)	5670(1)	33(1)
N(3)	4363(2)	1622(1)	4536(1)	30(1)
N(4)	10420(2)	1368(1)	2964(1)	37(1)
N(5)	7664(2)	1284(1)	8920(1)	33(1)
N(6)	5929(2)	2493(1)	8710(1)	31(1)
N(7)	9312(2)	1845(1)	9778(1)	31(1)
N(8)	15396(2)	2076(1)	11411(1)	40(1)
С(1)	1345(3)	1256(1)	6422(1)	35(1)
С(2)	1849(3)	1874(1)	6578(1)	36(1)
С(3)	2048(3)	2059(2)	7348(2)	45(1)
С(4)	1720(3)	1644(2)	7931(2)	55(1)
С(5)	1161(3)	1038(2)	7766(2)	56(1)

- 25 022530

С(6)	981(3)	842(2)	7018(2)	44(1)
С(7)	2098(3)	2347(1)	5969(1)	35(1)
С(8)	1531(3)	3012(1)	6086(2)	40(1)
С(9)	2312(4)	3514(2)	5740(2)	51(1)
С(10)	1764(5)	4131(2)	5823(2)	65(1)
С(11)	428(5)	4245(2)	6243(3)	80(1)
С(12)	-352(5)	3754(2)	6580(3)	80(1)
С(13)	191(4)	3139(2)	6513(2)	56(1)
С(14)	1961(3)	1152(1)	5056(1)	30(1)
С(15)	3364(3)	1594(1)	5200(1)	31(1)
С(16)	5555(3)	1219(1)	4426(1)	30(1)
С(17)	6342(3)	1256(1)	3652(1)	28(1)
С(18)	8095(3)	1450(1)	3748(1)	31(1)
С(19)	8887(3)	1501(1)	2979(1)	29(1)
С(20)	6151(3)	613(1)	3254(2)	36(1)
С(21)	4416(3)	482(1)	3060(2)	39(1)
С(22)	4138(4)	-124(2)	2655(2)	56(1)
С(23)	8335(3)	2081(1)	4176(1)	34(1)
С(24)	7670(3)	2664(1)	3763(2)	39(1)
С(25)	7738(4)	3248(2)	4225(2)	50(1)
С(26)	6216(3)	2346(1)	7935(1)	29(1)
С(27)	6745(3)	1743(1)	7708(1)	29(1)
С(28)	6963(3)	1642(1)	6922(1)	37(1)
С(29)	6629(3)	2113(2)	6398(2)	46(1)
С(30)	6065(3)	2691(2)	6633(2)	46(1)
С(31)	5856(3)	2812(1)	7399(2)	39(1)
С(32)	6994(3)	1217(1)	8261(1)	30(1)
С(33)	6421(3)	571(1)	8051(2)	35(1)
С(34)	7176(4)	43(1)	8360(2)	49(1)
С(35)	6628(4)	-563(2)	8178(2)	62(1)

- 26 022530

С(36)	5318(4)	-640(2)	7705(2)	63(1)
С(37)	4561(4)	-123(2)	7405(2)	59(1)
С(38)	5104(3)	486(1)	7577(2)	45(1)
С(39)	6856(3)	2328(1)	9310(1)	30(1)
С(40)	8266(3)	1907(1)	9119(1)	30(1)
С(41)	10484(3)	2259(1)	9915(1)	30(1)
С(42)	11305(3)	2212(1)	10692(1)	29(1)
С(43)	13053(3)	2027(1)	10608(1)	28(1)
С(44)	13850(3)	1958(1)	11389(1)	27(1)
С(45)	11115(3)	2854(1)	11089(1)	33(1)
С(46)	9380(3)	2999(2)	11248(2)	44(1)
С(47)	9111(4)	3620(2)	11616(2)	59(1)
С(48)	13303(3)	1408(1)	10152(1)	37(1)
С(49)	12699(4)	817(1)	10535(2)	46(1)
С(50)	12765(6)	249(2)	10046(2)	71(1)
0(18)	3445(3)	3322(1)	8972(1)	65(1)
0(28)	3658(2)	2451(1)	3295(1)	43(1)
0(38)	8681(2)	1043(1)	1039(1)	51(1)
С(48)	2039(4)	4719(2)	3916(2)	64(1)
С(13)	3853(6)	3821(2)	9485(3)	123(2)
С(28)	2594(4)	2953(2)	3435(2)	59(1)
С(38)	7938(7)	447(2)	954(3)	107(2)
0(48)	1606(03)	5269(1)	4324(2)	63(1)

и (экв) определяется как одна треть следа ортогонализованного тензора ϋ¹¹.

В еще одном варианте осуществления М2-1 форма соединения примера 2 является, по существу, чистой.

В еще одном варианте осуществления М2-1 форма соединения примера 2 содержит по меньшей мере примерно 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу кристаллической формы, формы М2-1.

В еще одном варианте, по существу, чистая кристаллическая форма М2-1 имеет, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем примерно с 10%, предпочтительно менее чем приблизительно 5% и более предпочтительно менее чем примерно 2% от общей площади пика экспериментально измеренной ΡΧΡΌ, вытекающие из пиков, которые отсутствуют в симулированной картине ΡΧΚΌ. Наиболее предпочтительно, чтобы, по существу, чистая кристаллическая форма М2-1 имела, по существу, значительную фазовую гомогенность менее чем примерно с 1% от общей площади пика экспериментально измеренной порошковой рентгенограммы, вытекающей из пиков, которые отсутствуют в симулированной порошковой рентгенограмме.

В другом варианте осуществления изобретения кристаллическая форма соединения примера 2, по существу, состоит из формы М2-1. Кристаллическая форма этого варианта осуществления может содержать по меньшей мере примерно 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере около 95 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере около 99 мас.% в расчете на массу кристаллической формы, формы М2-1.

Соединения в соответствии с формулой (I) могут быть введены любым способом, пригодным для состояния, подлежащего лечению, которое может зависеть от необходимости сайт-специфического лечения или количества соединения формулы (I), которое должно быть доставлено.

Кроме того, настоящим изобретением охватывается класс фармацевтических композиций, содержащих соединение формулы (I) или его пролекарство и один или несколько нетоксичных фармацевтически приемлемых носителей, и/или разбавителей, и/или вспомогательных веществ (совместно именуемых в настоящем изобретении как носители) и, при желании, другие активные ингредиенты. Соединения формулы (I) могут быть введены любым подходящим путем, предпочтительно в форме фармацевтической композиции, адаптированной к такому пути, и в дозе, эффективной для предназначенного лечения. Соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением могут, например, быть введены перорально, через слизистые оболочки, или парентерально, в том числе внутривенно, внутривенно, внут- 27 022530 рибрюшинно, подкожно, внутримышечно, внутригрудинно и в виде стандартных доз, содержащих обычные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители. Например, фармацевтический носитель может содержать смесь маннита или лактозы и микрокристаллическую целлюлозу. Смесь может содержать дополнительные компоненты, такие как смазывающее вещество, например стеарат магния, и дезинтегрирующий агент, такой как кросповидон. Смесь носителей может быть загружена в желатиновую капсулу или спрессована в виде таблетки. Фармацевтическая композиция может быть введена в виде пероральной лекарственной формы или инфузии, например.

Для перорального введения фармацевтическая композиция может находиться в форме, например, таблетки, капсулы, суспензии или жидкости. Фармацевтическая композиция предпочтительно изготовляется в виде единичной дозы, содержащей конкретное количество активного ингредиента. Например, фармацевтическая композиция может быть представлена в виде таблетки или капсулы, содержащей количество активного ингредиента в интервале от около 1 до 2000 мг, предпочтительно от около 1 до 500 мг и более предпочтительно от около 5 до 150 мг. Подходящая суточная доза для человека или другого млекопитающего может широко варьироваться в зависимости от состояния пациента и других факторов, но может быть определена с помощью стандартных методов.

Любую фармацевтическую композицию, рассматриваемую в настоящем изобретении, можно, например, вводить перорально через любые приемлемые и удобные пероральные препараты. Типичные препараты для перорального введения включают, но не ограничиваются этим, например, таблетки, пастилки, леденцы, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые и мягкие капсулы, сиропы и эликсиры. Фармацевтические композиции, предназначенные для перорального введения, могут быть получены в соответствии с любыми способами, известными в данной области техники для производства фармацевтических композиций, предназначенных для перорального введения. Для того чтобы обеспечить препараты с фармацевтически привлекательным вкусом, фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может содержать по меньшей мере один агент, выбранный из подсластителей, ароматизаторов, красителей, мягчительных средств, антиоксидантов и консервантов. Таблетка может, например, быть получена посредством смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним нетоксичным фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, подходящим для изготовления таблеток. Типичные вспомогательные вещества включают, но не ограничиваются этим, например, инертные разбавители, такие как, например, карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция и фосфат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, такие как, например, микрокристаллическая целлюлоза, кроскармеллоза натрия, кукурузный крахмал и альгиновая кислота, связующие агенты, такие как, например, крахмал, желатин, поливинилпирролидон и гуммиарабик, и смазывающие агенты, такие как, например, стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Кроме того, таблетки могут быть либо без покрытия, либо с покрытием с помощью известных методик, чтобы замаскировать плохой вкус неприятного вкуса лекарственной субстанции либо чтобы задержать дезинтеграцию и абсорбцию активного ингредиента в желудочнокишечном тракте, поддерживая тем самым эффект активного ингредиента в течение длительного периода. Примеры растворимых в воде материалов, маскирующих вкус, включают, но не ограничиваются этим, гидроксипропилметилцеллюлозу и гидроксипропилцеллюлозу. Примеры материалов для задержки дезинтеграции включают, но не ограничиваются этим, этилцеллюлозу и ацетат бутират целлюлозы.

Твердые желатиновые капсулы могут, например, быть приготовлены посредством смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним инертным твердым разбавителем, таким как, например, карбонат кальция, фосфат кальция и каолин.

Мягкие желатиновые капсулы могут, например, быть приготовлены посредством смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним водорастворимым носителем, таким как, например, полиэтиленгликоль и по меньшей мере с одной масляной средой, такой как, например, арахисовое масло, жидкий парафин и оливковое масло.

Водная суспензия может быть приготовлена, например, посредством смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним вспомогательным веществом, пригодным для изготовления водных суспензий. Примеры вспомогательных веществ, пригодных для изготовления водных суспензий, включают, но не ограничиваются этим, например, суспендирующие агенты, такие как, например, натрий карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, альгиновая кислота, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующие или смачивающие агенты, такие как, например, природные фосфатиды, например лецитин, продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, такие как, например, стеарат полиоксиэтилена, продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, такие как, например, гептадекаэтиленоксиэтанол; продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гекситола, такие как, например, полиоксиэтилен-сорбитмоноолеат, и продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гекситола, такие как, например, полиэтилен-сорбитан-моноолеат. Водная суспензия может также содержать по меньшей мере один консервант, такой как, например, этил- и н-пропил- п-гидроксибензоат, по меньшей мере одно окрашивающее вещество, по меньшей мере один

- 28 022530 ароматизатор и/или по меньшей мере один подсластитель, включая, но не ограничиваясь этим, например, сахарозу, сахарин и аспартам. Масляные суспензии могут, например, быть получены посредством суспендирования по меньшей мере одного соединения формулы (Ι), в либо растительном масле, таком как, например, арахисовое масло, оливковое масло, кунжутное масло и кокосовое масло или в минеральном масле, таком как, например, жидкий парафин. Масляная суспензия может также содержать по меньшей мере один загуститель, такой как, например, пчелиный воск, твердый парафин и цетиловый спирт. Для того чтобы обеспечить масляной суспензии приемлемый вкус можно добавить к масляной суспензии по меньшей мере один из подсластителей, уже описанных выше, и/или по меньшей мере один ароматизатор. Масляная суспензия может дополнительно содержать по меньшей мере один консервант, включая, но не ограничиваясь этим, например, антиоксидант, такой как, например, бутилированный гидроксианизол и альфа-токоферол.

Диспергируемые порошки и гранулы, могут, например, быть получены посредством смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (Ι) по меньшей мере с одним диспергирующим и/или смачивающим агентом; по меньшей мере с одним суспендирующим агентом и/или по меньшей мере с одним консервантом. Подходящие диспергирующие агенты, смачивающие агенты и суспендирующие агенты являются теми, которые уже описаны выше. Типичные консерванты включают, но не ограничиваются этим, например, антиоксиданты, например аскорбиновую кислоту. Кроме того, диспергируемые порошки и гранулы могут также содержать по меньшей мере одно вспомогательное вещество, включая, но не ограничиваясь этим, например, подсластители, ароматизаторы и красители.

Эмульсия по меньшей мере одного соединения формулы (I) может, например, быть получена в виде эмульсии масло-в-воде. Масляная фаза эмульсий, содержащая соединения формулы (Ι), может быть составлена из известных ингредиентов известным способом. Масляная фаза может быть предоставлена, но не ограничивается этим, например, растительным маслом, таким как, например, оливковое масло и арахисовое масло, минеральным маслом, таким как, например, жидкий парафин, а также их смесями. В то время как фаза может содержать только эмульгатор, она может содержать смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром или маслом или как с жиром, так и маслом. Подходящие эмульгаторы включают, но не ограничиваются этим, например, природные фосфатиды, например соевый лецитин, сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гекситола, такие как, например, моноолеат сорбитана, и продукты конденсации неполных эфиров с этиленоксидом, такие как, например, моноолеат полиоксиэтиленсорбитана. Предпочтительно гидрофильный эмульгатор включается вместе с липофильным эмульгатором, который действует в качестве стабилизатора. Кроме того, предпочтительно включать как масло, так и жир. Вместе эмульгатор(ы) с или без стабилизатора(ов) готовят так называемый эмульгирующий воск, и воск вместе с маслом и жиром образуют так называемую эмульгирующую мазевую основу, которая образует масляную дисперсную фазу кремовых составов. Эмульсия может также содержать подсластитель, ароматизирующий агент, консервант и/или антиоксидант. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, пригодные для использования в композиции в соответствии с настоящим изобретением, включают Тетееи 60, §раи 80, цетостеариловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат, лаурилсульфат натрия, глицерилдистеарат, один или вместе с воском, или другими материалами, хорошо известными в данной области техники.

Соединения формулы (I) могут, например, также доставляться внутривенно, подкожно и/или внутримышечно посредством любой фармацевтически приемлемой и пригодной инъекционной формы. Типичные формы для инъекций включают, но не ограничиваются этим, например, стерильные водные растворы, содержащие приемлемые носители и растворители, такие как, например, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия; стерильные микроэмульсии масло-в-воде и водные или масляные суспензии.

Композиции для парентерального введения могут быть в виде водных или неводных изотонических стерильных инъекционных растворов или суспензий. Эти растворы и суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков или гранул с использованием одного или нескольких носителей или разбавителей, упоминающихся для использования в композициях для перорального введения или посредством использования других подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Эти соединения могут быть растворены в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия, трагакантовой камеди и/или в различных буферах. Другие адъюванты и способы введения хорошо и широко известны в фармацевтической области. Активный ингредиент может также вводиться посредством инъекции в виде композиции с подходящими носителями, включая физиологический раствор, декстрозу, или воду, или с циклодекстрином (т.е. СΑΡТI§О^®), сорастворителем солюбилизации (например, пропиленгликолем) или мицеллярной солюбилизации (например, Т\уееп 80).

Стерильный инъецируемый препарат может также представлять собой стерильный инъецируемый раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, можно указать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или суспендирующей сре- 29 022530 ды. Для этой цели может быть использовано любое нелетучее масло, не имеющее вкуса, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, находят применение в инъецируемых препаратах.

Стерильные инъекционные микроэмульсии масло-в-воде могут, например, быть получены посредством 1) растворения по меньшей мере одного соединения формулы (I) в масляной фазе, такой как, например, смесь соевого масла и лецитина; 2) объединения масляной фазы, содержащей соединения формулы (I), со смесью воды и глицерина и 3) обработки комбинации с образованием микроэмульсии.

Стерильная водная или масляная суспензия может быть приготовлена в соответствии со способами, уже известными в данной области техники. Так, например, стерильные водные растворы или суспензии могут быть приготовлены с нетоксичным парентерально приемлемым разбавителем или растворителем, таким как, например, 1,3-бутандиол, и стерильная масляная суспензия может быть приготовлена со стерильным нетоксичным приемлемым растворителем или суспендирующей средой, такими как, например, стерильные жирные масла, например синтетические моно- или диглицериды, и жирными кислотами, такими как, например, олеиновая кислота. Фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются этим, ионообменники, окись алюминия, стеарат алюминия, лецитин, самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственного средства (8ΕΌΌΒ), такие как ά-альфатокоферол полиэтиленгликоль 1000 сукцинат, поверхностно-активные вещества, используемые в фармацевтических лекарственных формах, таких как Т\уссп5. полиэтоксилированное касторовое масло, такое как поверхностно-активное вещество СΚΕΜΟΡНΟΚ (ВЛ8Р), или другие аналогичные полимерные матрицы для доставки, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, вода, соли или электролиты, такие как сульфат протамина, гидрофосфат натрия, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный оксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-блок-полимеры, полиэтиленгликоль и ланолин. Циклодекстрины, такие как альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины, или химически модифицированные производные, такие как гидроксиалкилциклодекстрины, в том числе 2- и 3-гидроксипропилциклодекстрины или другие солюбилизирующие производные также могут быть с успехом использованы для улучшения доставки соединений по формуле, описанной в настоящем изобретении.

Фармацевтически активные соединения настоящего изобретения могут быть обработаны в соответствии с обычными методами фармации для получения лекарственных средств для введения пациентам, включая людей и других млекопитающих. Фармацевтические композиции могут быть подвергнуты обычным фармацевтическим операциям, таким как стерилизация, и/или могут содержать обычные адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, буферы и т.д. Таблетки и пилюли могут быть дополнительно покрыты кишечно-растворимым покрытием. Такие композиции могут также включать адъюванты, такие как смачивающие, подслащивающие, вкусовые и ароматизирующие агенты.

Количества соединений, которые вводятся, и схема приема лекарственного средства для лечения болезненного состояния с помощью соединений и/или композиций в соответствии с настоящим изобретением зависит от ряда факторов, включая возраст, массу, пол, состояние здоровья субъекта, от типа заболевания, тяжести болезни, способа и частоты введения и конкретно используемого соединения. Таким образом, схема приема лекарственного средства может широко варьироваться, но может быть определена обычно с использованием стандартных методов. Суточная доза от около 0,001 до 100 мг/кг веса тела, предпочтительно от около 0,005 до около 50 мг/кг веса тела и наиболее предпочтительна от около 0,01 до 10 мг/кг веса тела может быть целесообразной. Суточную дозу можно вводить от одной до четырех доз в день. Для терапевтических целей активные соединения в соответствии с настоящим изобретением обычно комбинируют с одним или несколькими адъювантами, соответствующими указанному пути введения. При пероральном введении соединения могут быть смешаны с лактозой, сахарозой, порошком крахмала, сложными эфирами целлюлозы и алкановыми кислотами, алкиловыми эфирами целлюлозы, тальком, стеариновой кислотой, стеаратом магния, оксидом магния, натрия и кальция, солями фосфорной и серной кислот, желатином, аравийской камедью, альгинатом натрия, поливинилпирролидоном и/или поливиниловым спиртом, а затем таблетированы или инкапсулированы для удобного введения. Такие капсулы или таблетки могут содержать состав контролируемого высвобождения, что может обеспечиваться в дисперсии активного соединения в гидроксипропилметилцеллюлозе. Фармацевтические композиции настоящего изобретения содержат соединение формулы (I) или его пролекарство и, при необходимости, дополнительный агент, выбранный из любого фармацевтически приемлемого носителя, адъюванта и наполнителя. Альтернативные композиции настоящего изобретения содержат соединение формулы (I), описанное в настоящем изобретении, или его пролекарство и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель.

- 30 022530

Полезность.

Соединения формулы (I) являются полезными для лечения рака, например рака, зависимого от №1с11 активации. Активация №1с11 вовлекается в патогенез различных солидных опухолей, включая рак яичников, поджелудочной железы, а также рак молочной железы и гематологические опухоли, такие как лейкозы, лимфомы и множественная миелома.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства. Способ согласно данному варианту осуществления может быть использован для лечения различных видов рака, включая, но не ограничиваясь ими, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, колоректальный рак, рак желудка, рак головы и шеи, рак почки, рак печени, рак легких, включая немелкоклеточный рак легких (НМРЛ), рак яичников, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря, рак предстательной железы, рак щитовидной железы, остеосаркому, рабдомиосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому (ЗФГ), фибросаркому, глиобластому/астроцитому, нейробластому, меланому, Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз (Т-ОЛЛ) и мезотелиому. Например, способ в соответствии с этим вариантом осуществления применяется для лечения рака молочной железы, рака толстой кишки или рака поджелудочной железы. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человек. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Способ по данному варианту осуществления включает введение соединения, имеющего структуру

Способ в соответствии с этим вариантом осуществления также включает в себя введение соединения, имеющего структуру

Пути введения в настоящем варианте осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства, где указанный рак представляет собой рак толстой кишки. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Пути введения в настоящем варианте включают парентеральное введение и пероральное введение. В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства, где указанный рак представляет собой трижды негативный рак молочной железы. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Пути введения в настоящем варианте осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства, где указанный рак представляет собой немелкоклеточный рак легких. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Пути введения в настоящем варианте включают парентеральное введение и пероральное введение. В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства, где указанный рак представляет собой рак поджелудочной железы.

Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Пути введения в настоящем варианте включают парентеральное введение и пероральное введение. В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства, где указанный рак представляет собой рак яичников. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в

- 31 022530 соответствии с этим вариантом осуществления. Пути введения в настоящем варианте включают парентеральное введение и пероральное введение.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства, где указанный рак представляет собой меланому. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Пути введения в настоящем варианте включают парентеральное введение и пероральное введение.

В одном варианте обеспечивается применение соединения формулы (I) или его пролекарства в изготовлении лекарственного средства для лечения рака. Предпочтительно в настоящем варианте осуществления виды рака, подлежащие лечению, включают один или более из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, колоректального рака, рака желудка, рака головы и шеи, рака почки, рака печени, рака легких, включая немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), рака яичника, рака поджелудочной железы, рака желчного пузыря, рака предстательной железы, рака щитовидной железы, остеосаркомы, рабдомиосаркомы, злокачественной фиброзной гистиоцитомы (ЗФГ), саркомы, глиобластомы/астроцитомы, нейробластомы, меланомы, Т-клеточного острого лимф областного лейкоза (Т-ОЛЛ) и мезотелиомы. Подходящие лекарственные средства в соответствии с этим вариантом осуществления включают лекарственные средства для парентерального введения, такие как, например, растворы и суспензии и лекарственные средства для перорального введения, такие как, например, таблетки, капсулы, растворы и суспензии.

Один вариант осуществления обеспечивает соединение формулы (I) или его пролекарство для применения в терапии при лечении рака. В настоящем варианте осуществления виды рака, подлежащие лечению, включают один или более из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, колоректального рака, рака желудка, рака головы и шеи, рака почки, рака печени, рака легких, включая немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желчного пузыря, рака предстательной железы, рака щитовидной железы, остеосаркомы, рабдомиосаркомы, злокачественной фиброзной гистиоцитомы (ЗФГ), саркомы, глиобластомы/астроцитомы, нейробластомы, меланомы, Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза (Т-ОЛЛ) и мезотелиомы.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака у млекопитающего, где рак зависит от активация Ыо!сЬ, включающий введение указанному пациенту соединения формулы (I) или его пролекарства. Способ в соответствии с данным вариантом осуществления может быть использован для лечения различных видов рака, включая, но не ограничиваясь ими, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, колоректальный рак, рак желудка, рак головы и шеи, рак почки, рак печени, рак легких, включая немелкоклеточный рак легких (НМРЛ), рак яичников, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря, рак предстательной железы, рак щитовидной железы, остеосаркому, рабдомиосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому (ЗФГ), фибросаркому, глиобластому/астроцитому, нейробластому, меланому, Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз (Т-ОЛЛ) и мезотелиому. Предпочтительно способ в соответствии с этим вариантом осуществления применяется для лечения рака молочной железы, рака толстой кишки или рака поджелудочной железы. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в способе в соответствии с этим вариантом осуществления. Подходящие способы введения включают парентеральное введение и пероральное введение.

При лечении рака часто дает преимущество комбинация химиотерапевтических агентов и/или других процедур (например, лучевая терапия). Второй (или третий) агент может иметь одинаковый или отличный механизмом действия по сравнению первым терапевтическим агентом. Например, можно применять комбинации лекарственных средств, в которых два или более вводимых лекарственных средства действуют различными способами и в разных фазах клеточного цикла, и/или два или более препарата имеют неперекрывающиеся токсичности и побочные эффекты, и/или лекарственные препараты, будучи комбинированными, каждый из них имеет демонстрированную эффективность, проявляющуюся у пациента при лечении конкретного заболевания.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) или его пролекарства и введение одного или нескольких дополнительных противоопухолевых агентов.

Выражение дополнительный противоопухолевый агент относится к лекарственным средствам, выбранным из любого одного или нескольких из следующего: алкилирующие агенты (в том числе азотистый иприт, алкилсульфонаты, нитрозомочевины, производные этиленимина и триазены), антиангиогенные препараты (в том числе ингибиторы матриксных металлопротеиназ), антиметаболиты (включая ингибиторы аденозиндезаминазы, антагонисты фолиевой кислоты, аналоги пурина и аналоги пиримидина); антибиотики или антитела (в том числе моноклональные антитела, СТЬА-4 антитела, антрациклины), ингибиторы ароматазы; модификаторы клеточного цикла; ферменты; ингибиторы фарнезилпротеинтрансферазы, гормональные и антигормональные агенты и стероиды (включая синтетические аналоги, глюкокортикоиды, эстрогены/антиэстрогены [например, 8ЕКМ8 (селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов, СМЭР)], андрогены/антиандрогены, прогестины, агонисты рецептора прогесте- 32 022530 рона и агонисты и антагонисты лютеинизирующего гормона рилизинг-гормона [ЛГРГ]), инсулиноподобный фактор роста (ИФР)/система модуляторов рецептора инсулин-подобного фактора роста (ИФРР) (в том числе ингибиторы ИФРР1); ингибиторы интегрин-сигнализации, ингибиторы киназы (включая мультикиназные ингибиторы и/или ингибиторы §гс киназы или §гс/аЫ, циклинзависимые киназы [СОК] ингибиторы, антитела (против) раиИег, Иег-1 и Иег-2, ингибитора νΕΟΡ, в том числе анти-νΕΟΡантитела, ингибиторы ΕΟΡΚ, ингибиторы митоген-активируемого белка [МАГ], ингибиторы МЕТ, ингибиторы МРК, ингибиторы Аврора-киназы, ингибиторы ΡΌΟΡ и другие ингибиторы тирозинкиназы или серин/треонин киназы; агенты, дезинтегрирующие микротрубочки, такие как эктеинасцидины или их аналоги, и производные; стабилизирующие микротрубочки, такие как таксаны и природные эпотилоны и их синтетические и полусинтетические аналоги; связывающие микротрубочки дестабилизирующие агенты (в том числе алкалоиды барвинка), ингибиторы топоизомеразы; ингибиторы пренилпротеинтрансферазы, координационные комплексы платины, ингибиторы сигнальной трансдукции и другие агенты, используемые в качестве противоопухолевых и цитотоксических агентов, такие как модификаторы биологического ответа, факторы роста и иммуномодуляторы.

Соответственно, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут вводиться в комбинации с другими противоопухолевыми процедурами, полезными при лечении рака или других пролиферативных заболеваний. Настоящее изобретение дополнительно включает применение соединения формулы (Ι) или его пролекарства при получении лекарственных средств для лечения рака и/или оно включает упаковку соединение формулы (Ι) вместе с инструкциями, как соединение должно использоваться в комбинации с другими противоопухолевыми и цитотоксическими агентами и процедурами для лечения рака. Настоящее изобретение дополнительно включает комбинации соединения формулы (Ι) и одного или более дополнительных агентов в форме набора, например, когда они упакованы вместе или помещены в отдельные упаковки для продажи вместе в виде набора или когда они упакованы как составленные вместе.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (Ι) или его пролекарства; введение дазатиниба и, при необходимости, одного или нескольких дополнительных противоопухолевых агентов.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (Ι) или его пролекарства; введение паклитаксела и, при необходимости, одного или нескольких дополнительных противоопухолевых агентов.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (Ι) или его пролекарства; введение тамоксифена и, при необходимости, одного или нескольких дополнительных противоопухолевых агентов.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (Ι) или его пролекарства; введение глюкокортикоида и, при необходимости, одного или нескольких дополнительных противоопухолевых агентов. Пример подходящего глюкокортикоида представляет собой дексаметазон.

В одном варианте осуществления обеспечивается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (Ι) или его пролекарства; введение карбоплатина и, при необходимости, одного или нескольких дополнительных противоопухолевых агентов.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть составлены или совместно вводиться с другими терапевтическими агентами, которые выбираются с точки зрения их конкретной полезности, касающейся побочных эффектов, связанных с вышеупомянутым состояниями. Например, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть составлены с агентами для профилактики тошноты, гиперчувствительности и раздражения желудка, такими как противорвотные средства, а Η₁ и Н₂ антигистаминные средства.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит соединение формулы (I) или его пролекарство; один или несколько дополнительных средств, выбранных из агента для ингибирования киназы (низкомолекулярное соединение, полипептид, и антитело), иммунодепрессанта, противоопухолевого препарата, противовирусного агента, противовоспалительного средства, противогрибкового средства, антибиотика или соединения, предотвращающее гиперпролиферацию сосудов, а также любой фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель.

Вышеуказанные другие терапевтические агенты при использовании в комбинации с соединениями в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы, например, в количествах, указанных в Пиыаащ 'Эе8к КеГегеисе (ΡΌΚ) или в противном случае определяемых специалистом в данной области техники. В способах в соответствии с настоящим изобретением такой другой(ие) терапевтический(ие) агент(ы) может быть введен до, одновременно с или после введения соединения в соответствии с настоящим изобретением.

Конкретный уровень дозы и частота дозирования для любого конкретного субъекта, однако, могут изменяться и, как правило, зависят от ряда факторов, включая, но не ограничиваясь этим, например, биодоступность конкретного применяемого соединения формулы (I) в вводимой форме, метаболическую стабильность и продолжительность действия конкретно используемого соединения формулы (I), вида,

- 33 022530 массы тела, общего состояния здоровья, пола, диеты субъекта, способа и времени введения, скорости экскреции, комбинации лекарств и тяжести конкретного состояния. Например, может быть целесообразной суточная доза от около 0,001 до 100 мг/кг веса тела, предпочтительно от около 0,005 до около 50 мг/кг веса тела и наиболее предпочтительно от около 0,01 до 10 мг/кг веса тела. Суточную дозу можно разбить от одной до четырех доз в день.

Введение может быть непрерывным, т.е. каждый день, или периодическим. Термины прерывистый или прерывисто, используемые в настоящем изобретении, означают остановку и начало с любыми регулярными или нерегулярными интервалами. Например, прерывистое введение включает введение от одного до шести дней в неделю; введение в циклах (например, ежедневное введение в течение от двух до восьми последовательных недель с последующим периодом отдыха, без введения на срок до одной недели) или введение через день.

В одном варианте осуществления соединения формулы (I) вводят непрерывно пациенту, нуждающемуся в этом, один или нескольких раз в день. Например, терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) вводят пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз в день в течение календарных дней подряд.

В одном варианте осуществления соединения формулы (I) вводят с перерывами пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз ежедневно. Например, терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) вводят пациенту, нуждающемуся в этом, один или более раз ежедневно в соответствии с прерывистым графиком.

В одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз ежедневно в течение календарных дней подряд, за которым следует один или более дней без введения. Предпочтительно вводится терапевтически эффективное количество соединения формулы (I). Примерами непрерывного дозирования с лекарственными каникулами являются циклы: 7 дней лечения с последующими 7 днями без лечения; 14 дней лечения с последующими 7 днями без лечения и 7 дней лечения с последующими 14 днями без лечения. Цикл лечение/отсутствие лечения можно повторить несколько раз, как это требуется для лечения пациента.

В одном варианте осуществления соединения формулы (I) вводят пациенту, нуждающемуся в этом, в соответствии с прерывистым режимом дозирования. Прерывистые режимы введения являются повторяющимися режимами, включающими дни, в которые пациенту вводят соединения формулы (I), и дни, в которые пациенту не вводят соединение формулы (I). Примерами прерывистых режимов дозирования являются дозирование четыре дня в неделю в течение трех последовательных недель с последующей неделей без введения и повторение с четырехнедельным интервалом; дозирование пять дней каждую неделю в течение двух непрерывных недель с последующей неделей без введения и повторение с трехнедельным интервалом и дозирование четыре дня в неделю в течение одной недели с последующими двумя неделями без введения и повторение с трехнедельным интервалом. Предпочтительно вводится терапевтически эффективное количество соединения формулы (I). В одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в один день с последующими шестью днями отдыха и повторяют с еженедельным графиком. В одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в течение двух последовательных дней с последующими 5 днями отдыха и повторяют с еженедельным графиком.

В одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в течение трех последовательных дней с последующими четырьмя днями отдых, и повторяется с еженедельным графиком.

В одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в один день с последующими от 10 до 13 дней отдыха.

Способы получения.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены различными способами, хорошо известными специалистам в области органического синтеза. Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть синтезированы с использованием способов, описанных ниже, наряду с синтетическими способами, известными в области синтетической органической химии, или их вариантами, как понятно специалистам в данной области техники. Предпочтительные способы включают, но не ограничиваются этим, способы, описанные ниже. Все ссылки, цитированные в настоящем изобретении, включены во всей своей полноте посредством ссылки.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены с использованием реакций и методик, описанных в этом разделе. Реакции проводят в растворителях, подходящих для используемых реагентов, и материалов и удобных для осуществления превращений. Кроме того, в описании способов синтеза, описанных ниже, следует понимать, что все предложенные условия реакции, включая выбор растворителя, атмосферы реакции, температуру реакции, продолжительность эксперимента и методики обработки выбираются таким образом, чтобы они были стандартными условиями для данной реакции, которые могли бы быть легко определены специалистом в данной области техники. Как понятно специалисту в области органического синтеза, функциональные группы, присутствующие в различных частях молекулы, должны быть совместимы с предложенными реагентами и реакциями. Такие ограничения к заместителям, которые совместимы с условиями реакции, будут очевидны специалистам в данной области техники, и должны быть использованы альтернативные методы. Иногда требуется решение из- 34 022530 менить порядок стадий синтеза или предпочесть одну конкретную схему процесса перед другой для того, чтобы получить желаемое соединение в соответствии с настоящим изобретением. Следует также признать, что еще одним важным соображением при планировании любого синтетического пути в этой области является разумный выбор защитной группы, используемой для защиты реакционноспособных функциональных групп, присутствующих в соединениях, описанных в данном изобретении. Авторитетным описанием множества альтернатив для обученного специалиста является Стееие с1 а1. (РгоЮсйус Сгоирк ίη Отдашс 8уййе818, ΤΗίτά Εάίίίοη, \УПеу & δοηδ (1999)). Соединения формулы (I) могут быть получены посредством ссылки на способы, показанные на следующих схемах. Как показано здесь, конечный продукт представляет собой соединение, имеющее ту же структурную формулу, как формула (I). Следует понимать, что любое соединение формулы (I) может быть получено по схемам при соответствующем выборе реагентов с соответствующими заместителями. Растворители, температуры, давления и другие условия реакции могут быть легко выбраны обычным специалистом в данной области техники. Исходные вещества являются коммерчески доступными или легко получаемыми специалистом в данной области техники. Компоненты соединения являются тем, как определено в настоящем изобретении или в другом месте в описании.

Синтез соединений формулы (I) может быть осуществлен с использованием методов, представленных на схемах 1 до 5.

Стадия 1. Получение бензодиазепинона (ίν) может быть выполнено множеством способов, известных специалистам в данной области. Например, как показано на схеме 1, соответствующим образом замещенный 2-аминобензофенон (ί) (например, из ХУаЫт Ό.Ά., 8уййе818, 677 (1980) и приведенных там ссылок или другими методами, известными специалистам в данной области техники) можно присоединить к защищенному производному глицина (ίί) (РС = защитная группа, например РС = СВ/ см. Ка1п1/ку. Л.К, I. Огд. Сйет., 55:2206-2214 (1990)), обработать реагентом, таким как аммиак, и подвергнуть циклизации с получением бензодиазепинона (ш) в соответствии с процедурой, описанной в литературе (например 8Ьет11, К.С. е1 а1., I. Огд. Сйет., 60:730 (1995); или другими путями, известными специалистам в данной области техники). Полученная рацемическая смесь может быть разделена (с использованием процедур, известных специалистам в данной области техники), чтобы получить индивидуальные энантиомеры, или использоваться в виде рацемата. Кроме того, если К₃=Н, (ίίί) может быть, например, обработана реагентом, таким как МеЕ и основанием, таким как К₂СО₃, в растворителе, таком как ДМФА, для получения К₃=Ме.

Стадия 2. Удаление защиты с (ίίί) может быть осуществлено несколькими способами, известными специалистам в данной области техники. Например, при РС = СВ/ соединение (ίίί) может быть обработано реагентом, таким как НВг, в растворителе, таком как уксусная кислота. Соединение (ίν) может быть использовано в виде рацемата. Альтернативно, соединение (ίν) может быть подвергнуто разделению на энантиомеры с использованием стандартных методов (например, хиральной препаративной хроматографии).

- 35 022530

Стадия 1. Первая стадия по схеме 2 осуществляется посредством превращения соединения (ν) в сложный эфир (νίί) с помощью одного из множества способов, известных специалистам в данной области техники, таких как обработка замещенным ацетимидатом, таким как соединение (νί), в присутствии реагента, такого как эфират трифторида бора при соответствующей температуре в растворителе, таком как ТГФ.

Стадия 2. Кислота (νίίί) может быть превращена в соединение (ίχ) различными способами, известными специалистам в данной области техники. Например, обработка кислоты (νίίί) реагентом, таким как оксалилхлорид, в растворителе, таком как ДХМ, дает хлорангидрид кислоты (ίχ). Соединение (ίχ) может быть обработано оксазолидиноном (х) в стандартных условиях с получением соединения (χί) (Εναηδ, ϋ.Ά. е1 а1., I. Ат. Сйет. 8ос., 112:4011 (1990)).

Стадия 3. Соединение (χί) может быть превращено в соединение (χίί) различными способами (Вагап, Р. е1 а1., Г Ат. Сйет. 8ос., 130(34): 11546 (2008)). Например, соединение (νίί) обрабатывают основанием, таким как ЬНА, в растворителе, таком как толуол, при низкой температуре, такой как 78°С в инертной атмосфере, такой как Ν₂. Полученную смесь добавляют к раствору соединения (χί), обрабатывают хлоридом лития и основанием, таким как ЬНА, в растворителе, таком как толуол, в инертной атмосфере, такой как Ν₂. К полученной смеси енолятов соединения (νίί) и (χί) добавляют соединение, такое как бис-(2-этилгексаноилокси)медь, при низкой температуре, такой как -78°С в инертной атмосфере, такой как Ν₂ и нагревают до комнатной температуры с получением соединения (χίί).

Стадия 4. Превращение соединения (χίί) в (χίίί) может быть осуществлено посредством обработки его реагентами, такими как пероксид водорода и гидроксид лития, при соответствующей температуре, с использованием смеси растворителей, таких как ТГФ/вода. Если необходимо, диастереоизомеры могут быть разделены на этой стадии с помощью хроматографии на силикагеле или препаративной ВЭЖХ. Альтернативно, смесь может быть подвергнута условиям эпимеризации, например, посредством обработки ЬНА и диэтилалюминийхлоридом с последующей остановкой реакции метанолом или уксусной

- 36 022530 кислотой, чтобы обогатить нужным диастереомером.

Стадия 5. Соединение (χΐΐΐ) может быть соединено с бензодиазепиноном (ίν) в присутствии конденсирующего реагента, такого как ТВТи и основания, такого как ТЭА, в растворителе, таком как ДМФА, с получением соединения (χν).

Стадия 6. Обработка соединения (χν) кислотой, такой как ТФУ, при соответствующей температуре, например 0°С, в растворителе, таком как ДХМ, дает соединение (χν).

Стадия 7. Превращение соединения (χν) в соединение (χνί) может быть осуществлено с помощью сочетания соединения (χν) с соответствующим источником амина, таким как хлорид аммония, карбодиимидом, таким как БОС, НОВТ и основанием, таким как ТЭА в растворителе, таком как ДМФА. При необходимости, смесь диастереоизомеров может быть разделена с использованием соответствующего метода разделения, такого как хиральная препаративная хроматография.

Стадия 1. Препарат бензодиазепинона (ш) может быть также получен посредством кросс-сочетания бензодиазепинона (χνίί), содержащего атом галогена, такой как хлор (Х=С1) и защитную группу (РС), такую как Вое, с подходящим партнером по сочетанию, такому как бороновая кислота в условиях, известных специалистам в данной области техники. Например, сочетание галогенсодержащего остатка с бороновой кислотой происходит в присутствии катализатора, такого как тетракис(трифенилфосфин)палладий(0), основанием, таким как карбонат натрия, и растворителем, таким как ДМЭ в инертной атмосфере, такой как Ν₂.

Стадия 1. Первая стадия на схеме 4 включает обработку соединения (χνίί) карбоновой кислотой (χίχ) в присутствии карбодиимида, такого как ДЦК, основания, такого как ТЭА, и катализатора, такого как ДМАП, в растворителе, таком как ДХМ, обеспечивает соединение (хх).

Стадия 2. Превращение соединения (хх) в соединение (χχί) может быть осуществлено посредством обработки реагентом, таким как цианоборгидрид натрия в присутствии кислоты, такой как НС1, при атмосферных условий, которая может быть инертной, например в атмосфере Ν₂.

Стадия 3. Превращение соединения (χχί) в соединение (χχίίί) может протекать через соединение (χχί), несущее соответствующую уходящую группу (ЬС). Например, обработка соединения (χχί) основанием, таким как 2,6-лутидин, и реагентом, таким как ангидрид трифторметансульфоновой кислоты, в

- 37 022530 растворителе, таком как ДХМ при соответствующей температуре, такой как -78°С, обеспечивает трифлат соединения (χχίί). Соединение (χχίί) может теперь быть подвергнуто условиям реакции кросс-сочетания с получением соединения (χχίίί). Например, обработка соединения (χχίί) соответствующим образом замещенным партнером по сочетанию, например бороновой кислотой, в присутствии катализатора, такого как тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0), основания, такого как фосфат калия, в растворителе, таком как диоксан, при атмосферных условиях, которая может быть инертной, например в атмосфере Ы₂, обеспечивает соединение (χχίίί).

Стадия 4. Превращение соединения (χχίίί) в соединение (χχίν) может быть осуществлено с помощью стандартных процедур, известных специалистам в данной области техники. Например, обработка соединения (χχίίί) в присутствии катализатора, такого как Ρά/С. в растворителе, таком как метанол, дает соединение (χχίν).

Стадия 5. Соединение (χχν) может быть получено сочетанием соединения (χχίν) с соединением (ίν). Например, превращение может быть осуществлено с использованием такого реагента, как А1Ме₃ в растворителе, таком как ДХМ, в инертной атмосфере, такой как Ы2. В этом случае полученная смесь диастереоизомеров может быть использована в виде смеси или может быть разделена с помощью соответствующих методов, таких как хиральная хроматография.

Стадия 6. Соединение (χχν) окисляется с использованием окисляющего агента, такого как реагент Джонса, в растворителе, таком как ацетон, давая соединение (χχνί). Если соединение представляет собой смесь диастереоизомеров, то оно может быть использовано в виде смеси или диастереоизомеры могут быть разделены с использованием соответствующих методов, таких как хиральная хроматография.

Стадия 7. Превращение соединения (χχνί) в соединение (χχνίί) может быть осуществлено с помощью стандартных процедур, известных специалистам в данной области техники. Например, сочетание соединения (χχνί) с соответствующим источником амина, таким как хлорид аммония, карбодиимидом, таким как ЕЭС, НОВТ, и основанием, таким как ТЭА, в растворителе, таком как ДМФА, обеспечивает соединение (χχνίί). В этом случае соединение может быть энантиомером или, если необходимо, смесь диастереоизомеров может быть разделена с использованием соответствующего метода разделения, такого как хиральная хроматография.

- 38 022530

Стадия 1. Первую стадию схемы 5 осуществляют посредством обработки соединения (χχνίίί) реагентом, таким как нитрит натрия, в кислоте, такой как Н₂§0₄, и растворителем, таким как вода, с получением соединения (χχίχ).

Стадия 2. Кислоту (χχίχ) превращают в соединение (ххх) (ΡΟ = защитная группа). Например, кислоту (χχίχ) обрабатывают спиртом, таким как бензиловый спирт, в растворителе, таком как толуол, и кислотой, такой как Н₂§0₄, с получением соединения (χχχ).

Стадия 3. Соединение (χχχί), несущее подходящую уходящую группу, может быть получено посредством обработки соединения (ххх) основанием, таким как 2,6-лутидин, и реагентом, таким как ангидрид трифторметансульфокислоты, в растворителе, таком как ДХМ, при соответствующей температуре.

Стадия 4. Соединение (χχχίί) может быть превращено в соединение (χχχίν) различными способами, известными специалистам в данной области техники. Например, хлорангидрид кислоты (χχχίί), либо полученный из соответствующей карбоновой кислотыс помощью агента, такого как оксалилхлорид, в растворителе, таком как ДХМ, либо полученный коммерчески, может быть обработан с помощью оксазолидинона (χχχίίί) в стандартных условиях с получением соединения (χχχίν) (Έναηδ, Ό.Ά. с1 а1., ί. Ат. СЬет. 8ос., 112:4011 (1990)).

Стадия 5. Получение соединения (χχχν) может быть осуществлено посредством обработки соединения (χχχίν) основанием, таким как ΕίΗΜΌδ, в растворителе, таком как ТГФ, при соответствующей температуре, такой как -78°С, и добавлением к полученной смеси соединения (χχχί) в растворителе, таком как ТГФ.

Стадия 6. Защитная группа соединения (χχχν) может быть удалена с помощью многих методов, известных специалистам в данной области техники. Например, бензильная группа может быть удалена посредством воздействия на нее условий гидрирования с использованием палладиевого катализатора, такого как катализатор Перельмана в растворителе, таком как метанол, с получением соединения (χχχνί).

Стадия 7. Соединение (ίν) сочетается с соединением (χχχνί) в присутствии конденсирующего реагента, такого как ТВТИ, и основания, такого как ТЭА, в растворителе, таком как ДМФА, с получением соединения (χχχνίί). Если необходимо, диастереоизомеры могут быть разделены с использованием соответствующего способа, такого как хиральная препаративная хроматография.

Стадия 8. Гидролиз соединения (χχχνίί) может быть осуществлен посредством его обработки перекисью водорода и гидроксидом лития при соответствующей температуре с использованием смеси растворителей, таких как ТГФ/вода, с получением соединения (χν). Если необходимо, диастереоизомеры могут быть разделены с использованием соответствующего способа, такого как хиральная препаративная хроматография.

Соединение (χϊϊΐ) на схеме 2 может быть также получено из соединения (χί) по синтетической последовательности, представленной на схеме 6.

Стадия 1. Первую стадию на схеме 6 осуществляют посредством обработки соединением (χί) основанием, таким как бис-(триметилсилил)амид лития, в растворителе, таком как ТГФ, при низкой температуре, такой как -78°С, в инертной атмосфере. Полученный енолят (χί) обрабатывают реагентом, таким как трет-бутиловый эфир бромуксусной кислоты, с получением соединения (χχχνίίί).

Стадия 2. Превращение соединения (χχχνίίί) в (χχχίχ) может быть осуществлено посредством взаимодействия соединения формулы (χχχνίίί) с реагентами, такими как пероксид водорода и гидроксид лития, при соответствующей температуре с использованием смеси растворителей, таких как ТГФ/вода.

Стадия 3. Соединение (χχχίχ) может быть превращено в соединение (χΐΐϊ) посредством генерации енолята (χχχίχ) основанием, таким как ΕΌΑ, в растворителе, таком как ТГФ, при низкой температуре, такой как -78°С, в инертной атмосфере и дальнейшей обработкой реагентом (Κ₂-ΕΟ), несущим соответствующую уходящую группу (например, ЬС = трифлат).

- 39 022530

Примеры

Настоящее изобретение дополнительно характеризуется в следующих примерах. Следует понимать, что примеры приведены только с целью иллюстрации. Из приведенного выше обсуждения и примеров специалист в данной области техники может установить существенные характеристики настоящего изобретения и без отклонения от сущности и объема изобретения может сделать различные изменения и модификации, чтобы адаптировать настоящее изобретение для различных применений и условий. В результате изобретение не ограничивается иллюстративными примерами, приведенными ниже, а определяется прилагаемой формулой изобретения.

Сокращения:

АсОН - уксусная кислота;

АСИ - ацетонитрил;

А1Ме₃ - триметилалюминий;

Вос - трет-бутилоксикарбонил;

ДЦК - 1,3-дициклогексилкарбодиимид;

ДХМ - дихлорметан;

ДЭА - диэтиламин;

ДМАП - диметиламинопиридин;

ΌΜΕ - диметиловый эфир;

ДМФА - диметилформамид;

ДМСО - диметилсульфоксид;

ЕИС - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид;

ΕΌί'Ί - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид;

Е1₂А1С1 - диэтилалюминийхлорид;

Е(ОАс - этилацетат;

Н₂§О₄ - серная кислота;

НС1 - соляная кислота;

НОВТ - гидроксибензотриазол;

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография; ч - час(ы);

ИПС - изопропиловый спирт;

ЖХ-МС - жидкостная хроматография - масс-спектрометрия;

ЬИА - литийдиизопропиламид;

ЫНМЭБ - литий бис-(триметилсилил)амид;

Ме - метил;

МеОН - метанол; мин - минута(ы);

МТВЕ - метил-трет-бутиловый эфир;

Ν₂ - азот;

ИаНМОБ - натрий бис-(триметилсилил)амид;

Ρά/С - палладий на угле;

РЬ - фенил;

КТ - время удерживания; нас. - насыщенный;

ТВТи - О-(1Н-бензотриазол-1-ил)-И,И,№,№-тетраметилуроний;

ТЭА - триэтиламин;

ТГ₂О - ангидрид трифторметилсульфокислоты;

ТФУ - трифторуксусная кислота;

ТГФ - тетрагидрофуран.

Пример 1.

(2К,3§)-И-((3§)-1-Метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамид

- 40 022530

Препарат 1А. трет-Бутил 5,5,5-трифторпентоноат сн₃ ^СН3 (_1А)

К перемешиваемому раствору 5,5,5-трифторпентановой кислоты (5 г, 32,0 ммоль) в ТГФ (30 мл) и гексане (30 мл) при 0°С добавляли трет-бутил-2,2,2-трихлорацетимидат (11,46 мл, 64,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С. Добавляли эфират трифторида бора (0,406 мл, 3,20 ммоль) и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. К прозрачной реакционной смеси добавляли твердый NаΗСΟз (5 г) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали через М§§0₄ и промывали гексаном (200 мл). Раствор оставляли на 45 мин и образовавшееся твердое вещество удаляли фильтрацией на том же фильтре М§§0₄, снова промывали гексаном (100 мл) и концентрировали при пониженном давлении без нагревания. Объем уменьшали до 30 мл, фильтровали через воронку с чистой фритой, промывали гексаном (5 мл) и затем концентрировали при пониженном давлении без нагревания. Полученное чистое масло фильтровали через 0,45 мкм найлоновый мембранный фильтрующий диск, что давало трет-бутил-5,5,5-трифторпентоноат (6,6 г, 31,4 ммоль, выход 98%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 1,38 (с, 9Н), 1,74-1,83 (м, 2Н), 2,00-2,13 (м, 2Н), 2,24 (т, 1=7,28 Гц,

2Н).

Препарат 1В. (4§)-4-(Пропан-2-ил)-3-(5,5,5-трифторпентаноил)-1,3-оксазолидин-2-он о о _ОА_МЛ^СР₃

н₃с

К перемешиваемому раствору 5,5,5-трифторпентановой кислоты (5,04 г, 32,3 ммоль) в ДХМ (50 мл) и ДМФА (3 капли) добавляли оксалилхлорид (3,4 мл, 38,8 ммоль) в течение 5 мин и раствор перемешивали до тех пор, пока не перестали выделяться пузырьки. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением бледно-желтого масла. В отдельную колбу, загруженную раствором (4§)-4-(пропан-2-ил)-1,3-оксазолидин-2-она (4,18 г, 32,4 ммоль) в ТГФ (100 мл) при -78°С, добавляли н-ВиЫ (2,5 М в гексане) (13,0 мл, 32,5 ммоль) по каплям через шприц в течение 5 мин. После перемешивания в течение 10 мин добавляли через канюлю в течение 15 мин вышеназванный хлорангидрид, растворенный в ТГФ (20 мл). Реакционную смесь нагревали до 0°С и давали нагреться до комнатной температуры, так как баню нагревали и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси добавляли насыщенный ИН₄С1, а затем экстрагировали ЕЮЛс (2х). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (№₂80₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (Те1ейуие ^С0 СотЫИакЬ Κί, от 5 до 60% растворителя А/В = гексан/ЕЮЛс, Кей18ер® δί0₂ 120 г). Концентрирование соответствующих фракций обеспечивало препарат соединения 1В (7,39 г, 86%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СГОСЕ) δ м.д. 4,44 (1Н, дт, 1=8,31,3,53 Гц), 4,30 (1Н, т, 1=8,69 Гц), 4,23 (1Н, дд, 1=9,06, 3,02 Гц), 2,98-3,08 (2Н, м), 2,32-2,44 (1Н, м, 1=13,91, 7,02, 7,02, 4,03 Гц), 2,13-2,25 (2Н, м), 1,882,00 (2Н, м), 0,93 (3Н, д, 1=7,05 Гц), 0,88 (3Н, д, 1=6,80 Гц).

Препарат 1С. (2§,3К)-трет-Бутил-6,6,6-трифтор-3-((§)-4-изопропил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноат.

Препарат ГО. (2К,3К)-трет-Бутил-6,6,6-трифтор-3-((§)-4-изопропил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноат

К холодному (-78°С) перемешиваемому раствору диизопропиламина (5,3 мл, 37,2 ммоль) в ТГФ (59 мл) в атмосфере азота добавляли н-ВиЫ (2,5 М в гексане) (14,7 мл, 36,8 ммоль), затем нагревали до 0°С с получением 0,5 М раствора БЭЛ. В отдельный сосуд загружали препарат 1В (2,45 г, 9,17 ммоль), материал дважды подвергали азеотропной перегонке с бензолом (входное отверстие роторного испарителя оснащали впускным отверстием для азота, чтобы полностью исключить попадание влаги), затем добавляли толуол (15,3 мл). Этот раствор добавляли в колбу, содержащую сухой хлорид лития (1,96 г, 46,2 ммоль). К полученной смеси, охлажденной до -78°С, добавляли раствор БЭЛ (21,0 мл, 10,5 ммоль) и

- 41 022530 перемешивали при -78°С в течение 10 мин, нагревали до 0°С в течение 10 мин, затем охлаждали до -78°С. В отдельный реакционный сосуд, содержащий препарат 1А (3,41 г, 16,07 ммоль), также дважды подвергшийся азеотропной перегонке с бензолом, добавляли толуол (15,3 мл), охлажденный до -78°С, и добавляли БЭЛ (37,0 мл, 18,5 ммоль), полученный в результате раствор перемешивали при -78°С в течение 25 мин. В это время енолят, полученный из сложного эфира, переносили с помощью канюли в раствор енолята оксазолидинона, перемешивали при -78°С в течение еще 5 мин, после чего мембрану удаляли и быстро добавляли твердую порошкообразную бис-(2-этилгексаноилокси)медь (9,02 г, 25,8 ммоль) в реакционный сосуд и перегородки заменяли. Сосуд немедленно удаляли из охлаждающей бани и погружали в теплую водяную баню (40°С) с быстрым вращением с сопутствующим изменением цвета от начального бирюзового к коричневому. Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, выливали в 5% водный раствор ΝΗ₄ΟΗ (360 мл) и экстрагировали ЕЮЛс (2х). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (Να₂§Ο₄). фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (Тс1сйунс ПСО СотЫИакБ КТ от 0 до 60% растворителя А/В = гексан/ЕЮЛс, КеФ8ер® δίΟ₂ 120 г). Концентрирование соответствующих фракций обеспечивало препарат 1С (2,87 г, 66%) в виде бледно-желтого вязкого масла. ¹Н ЯМР показал, что продукт представляет собой смесь 1,6:1 диастереоизомеров 1С:1Э. как это определено посредством интегрирования мультиплетов при 2,74 и 2,84 м.д.

Ή ЯМР (400 МГц, СЮСЬ) δ м.д. 4,43-4,54 (2Н, м), 4,23-4,35 (5Н, м), 4,01 (1Η, ддд, 1=9,54, 6,27, 3,51 Гц), 2,84 (1Η, ддд, 1=9,41, 7,28, 3,64 Гц), 2,74 (1Η, ддд, 1=10,29, 6,27, 4,02 Гц), 2,37-2,48 (2Н, м, 1=10,38, 6,98, 6,98, 3,51, 3,51 Гц), 2,20-2,37 (3Н, м), 1,92-2,20 (8Н, м), 1,64-1,91 (5Н, м), 1,47 (18Н, с), 0,880,98 (12Н, м).

Препарат 1Е. (2К,3§)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота.

Препарат 1Р. (2К,3К)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота

К охлаждаемому (0°С) раствору препарата 1С и 1Ό (4,54 г, 9,51 ммоль) в ТГФ (140 мл) и воде (42 мл) последовательно добавляли перекись водорода (30% в воде) (10,3 г, 91 ммоль) и ПОН (685,3 мг, 28,6 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч. В это время реакционный сосуд удаляли из охлаждающей бани и затем перемешивали в течение 1,5 ч. Окончание реакции контролировали с помощью ВЭЖХ. К реакционной смеси добавляли насыщенный NаΗСΟз (45 мл) и насыщенный №ь8О₃, (15 мл) и затем частично концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный раствор экстрагировали ДХМ (3х). Водную фазу подкисляли до рН~1-2 с помощью 1н. НС1, экстрагировали ДХМ (3х) и ЕЮЛс (1х). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением смеси препарата 1Е и 1Р (3,00 г, 86%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 2,76-2,84 (1Н, м, диастереоизомер 2), 2,64-2,76 (3Н, м), 2,04-2,35 (8Н, м), 1,88-2,00 (4Н, м), 1,71-1,83 (4Н, м), 1,48 (9Н, с, диастереоизомер 1), 1,46 (9Н, с, диастереоизомер 2);

¹Н ЯМР показал 1,7:1 смесь 1Е:1Р посредством интегрирования сигналов для трет-бутильной группы.

- 42 022530

К холодному (-78°С) перемешиваемому раствору диизопропиламина (1,7 мл, 11,93 ммоль) в ТГФ (19 мл) в атмосфере азота добавляли н-ВиЫ (2,5 М в гексане) (4,8 мл, 12,00 ммоль). Смесь перемешивали в течение 5 мин, а затем нагревали до 0°С. В отдельном сосуде к холодному (-78°С) перемешиваемому раствору смеси препарата 1Е и 1Р (1,99 г, 5,43 ммоль) в ТГФ (18 мл) добавляли раствор БОА, полученный выше, через канюлю медленно в течение 25 мин. Смесь перемешивали в течение 15 мин, затем нагревали до комнатной температуры (помещали в водяную баню при 24°С) в течение 15 мин, а затем снова охлаждали до -78°С в течение 15 мин. К реакционной смеси добавляли Е1₂А1С1 (1 М в гексане) (11,4 мл, 11,40 ммоль) с помощью шприца, перемешивали в течение 10 мин, нагревали до комнатной температуры в течение 15 мин, а затем охлаждали до -78°С в течение 15 мин. Быстро добавляли метанол (25 мл), энергично вращая при нагревании до комнатной температуры, затем концентрировали до ~1/4 первоначального объема. Смесь растворяли в ЕЮАс и промывали 1н. НС1 (50 мл) и льда (75 г). Водную фазу отделяли и экстрагировали ЕЮАс (2х). Объединенные органические слои промывали смесью КГ (2,85 г в 75 мл воды) и 1н. НС1 (13 мл) [результирующий рН раствора 3-4], затем насыщенным раствором соли, сушили Ща₂8О₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, что давало обогащенную диастереомерную смесь 9:1 (1Е:1Г) (по данным ¹Н ЯМР) препарата 1Е и препарата 1Г (2,13 г, >99%) в виде бледно-желтого вязкого масла.

^!Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 2,64-2,76 (2Н, м), 2,04-2,35 (4Н, м), 1,88-2,00 (2Н, м), 1,71-1,83 (2Н, м), 1,48 (9Н, с).

Препарат 1 С. (3 8)-3 -Амино-1 -метил-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он.

Препарат 1Н. (3К)-3-Амино-1-метил-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он

Рацемический 3-амино-1-метил-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он (Кш1е, К.Е. с1 а1., Тс1гаНс0гоп Ьейег8, 28(5):521-522 (1987)) получали в соответствии с литературной методикой. Энантиомеры разделяли в условиях хиральной 8ГС (сверхкритическая флюидная хроматография) с использованием следующего метода: СШКАЬРАК® А8-Н 5х25; подвижная фаза: 30% МеОН + 0,1% ДЭА в СО₂; скорость потока: 280 мл/мин; давление: 100 бар; температура: 35°С.

Полученный 8-энантиомер (препарат 1С): ВЭЖХ: КТ = 1,75 мин (30% МеОН + 0,1% ДЭА в СО₂ на СШКАЬРАК® А8-Н 4,6x250 мм, 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, 230 нм, 10 мкл инъекция).

^!Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 7,58-7,63 (2Н, м), 7,55 (1Н, ддд, 1=8,50, 7,11, 1,76 Гц), 7,40-7,47 (1Н, м), 7,34-7,40 (3Н, м), 7,31 (1Н, дд, 1=7,81, 1,51 Гц), 7,14-7,22 (1Н, м), 4,46 (1Н, с), 3,44 (3Н, с), 3,42 (2Н, с), [α]_η=+155° (с=1,9, МеОН) (лит. КйНе, К.Е. е1 а1., ТейаРеатоп Ьейетк, 28(5):521-522 (1987): [а]_с=-236°).

Кроме того, получили К-энантиомер (препарат 1Н): ВЭЖХ: КТ = 1,71 мин, [а]_с=+165° (с=2,1, МеОН) (лит. [а]_п=+227°).

Альтернативная методика для получения препарата 1С.

Препарат 1С-С8А соль. (38)-3-Амино-1-метил-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он, (18)-(+)-10-камфорсульфоновая кислота

Препарат 1С-С8А получали из рацемического 3-амино-1-метил-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4бензодиазепин-2-она (9.98 г, 37,6 ммоль) (полученного в соответствии в литературой, как показано выше) в соответствии с литературной методикой (Ке1ает, Р.1. е1 а1., 1 Огд. СРет., 52:955-957 (1987)). Препарат 1С-С8А (16,91 г, 99%) получали в виде бесцветного твердого вещества: оптическое вращение: [а]_п=+26,99°(с=1, Н₂О) (лит. [а]_п=-27,8° (с=1, Н₂О)).

- 43 022530

Препарат Н. трет-Бутил-(28,3К)-6,6,6-трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноат.

Препарат и. трет-Бутил (2К,3К)-6,6,6-трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н1,4-бензод иазепин-3 -ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноат

К перемешиваемому раствору препарата 1С (1,45 г, 5,47 ммоль) и смеси 9:1 препаратов 1Е и 1Р (1,989 г, 5,43 ммоль) в ДМФА (19 мл) добавляли О-бензотриазол-1-ил-Ы,Ы,Ы',Ы'-тетраметилуроний тетрафторборат (1,79 г, 5,57 ммоль) и триэтиламин (3,0 мл, 21,52 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Реакцию считали завершенной по данным ЬСМ8. Реакционную смесь выливали в воду (125 мл) и выпавшее в осадок твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили на воздухе, получая смесь 8:1 препарата П и препарата и (2,95 г, 89%) в виде твердого вещества кремового цвета.

МС (Е8): т/ζ = 614 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ м.д. 7,55-7,65 (3Н, м), 7,44-7,52 (2Н, м), 7,35-7,45 (4Н, м), 5,52 (1Н, д, 1=8,03 Гц), 3,48 (3Н, с), 2,63 (2Н, ддд, 1=9,35, 3,95, 3,76 Гц), 2,14-2,25 (4Н, м), 1,90-2,03 (3Н, м), 1,69-1,82 (1Н, м), 1,51 (9Н, с).

Препарат 1К. (28,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота.

Препарат 1Ь. (2К,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2 -(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота

К холодному (0°С) перемешиваемому раствору полученной выше смеси препарата II и препарата и (2,95 г, 4,81 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли ТФУ (20 мл, 260 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, а затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2,5 ч. О завершении реакции судили по данным ЬСМ8. Реакционную смесь разбавляли толуолом (50 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Оставшуюся смесь снова растворяли в толуоле (50 мл) и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили в высоком вакууме. Неочищенный продукт растворяли в ДХМ, добавляли 8Ю₂ (15 г) и полученную смесь концентрировали, затем очищали с помощью флэшхроматографии (Те1ебупе КСО СотЫИакБ КТ от 0 до 45% растворителя А/В = ДХМ/ЕЮАс, КеФ8ер® 8Ю₂ 80 г). Концентрирование соответствующих фракций обеспечивало смесь препарата 1К и препарата 1Ь (2,00 г, 75%) в виде кремового твердого вещества: ВЭЖХ: КТ = 2,770 мин (СЬтотоШБ® 8реебКОЭ 4,6x50 мм (4 мин градиент), элюирование 10-90% водным МеОН, содержащим 0,1% ТФУ в течение 4 мин, 4 мл/мин, контроль на длине волны 254 нм),

МС (Е8): т/ζ = 558 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, СИСЬ) δ м.д. 8,32 (1Н, д, 1=8,03 Гц), 7,65-7,71 (1Н, м), 7,50-7,60 (3Н, м), 7,417,49 (2Н, м), 7,39 (1Н, дд, 1=7,91, 1,63 Гц), 7,23-7,35 (2Н, м), 5,59 (1Н, д, 1=8,03 Гц), 3,51 (3Н, с), 2,81 (1Н, ддд, 1=10,54, 6,90, 3,64 Гц), 2,67-2,76 (1Н, м), 2,22-2,33 (3Н, м), 1,99-2,12 (3Н, м), 1,85-1,94 (1Н, м), 1,79 (1Н, ддд, 1=13,87, 7,84, 3,64 Гц).

Пример 1.

К перемешиваемому раствору смеси 8:1 препарата 1К и препарата 1Ь (3,46 г, 6,21 ммоль) в ДМФА (25 мл) в атмосфере азота добавляли хлорид аммония (3,32 г, 62,1 ммоль), ЕЭС (3,55 г, 18,52 ммоль), НОВТ (2,85 г, 18,61 ммоль) и триэтиламин (16 мл, 115 ммоль) и перемешивали в течение ночи. О завершении реакции судили по данным ЬСМЗ. Реакционную смесь выливали в воду (200 мл) при энергичном вращении, а затем оставляли стоять. Твердое вещество собирали фильтрацией, промывали водой, высушивали, получая 3,6 г бесцветного твердого вещества. Твердое вещество очищали с помощью препаративной хроматографии 8РС (Ьи.\-Се11и1о5е-2 (3x25 см), 8% метанола в СО₂, 140 мл/мин @220 нм и 35°С;

- 44 022530 образец: 3,6 г в 50 см метанола, конц. = 70 мг/мл, перекрывающийся ввод пробы: 0,5 см³/9,2 мин). Фракции, содержащие продукт, концентрировали, сушили в течение ночи под вакуумом. Получали соединение примера 1 (2,74 г, 79%) в виде бесцветного твердого вещества (кристаллическая форма Ν-1): ВЭЖХ: КТ = 9,601 мин (Η₂Ο/СΗзСN с ТФУ, §ипйге С18 3,5 мкм, 4,6x150 мм, градиент = 15 мин при длине волны 220 и 254 нм).

МС (Е8): т/ζ = 557 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 9,54 (1Н, д, 1=7,28 Гц), 7,71-7,80 (1Н, м), 7,68 (2Н, д, 1=8,78 Гц), 7,50-7,62 (3Н, м), 7,45 (2Н, т, 1=7,28 Гц), 7,29-7,40 (2Н, м), 7,15 (1Н, шир. с), 5,30 (1Н, д, 1=7,28 Гц), 3,39 (3Н, с), 2,74-2,86 (1Н, м), 2,02-2,32 (3 Н, м), 1,45-1,79 (4Н, м), [α]_η=-107,0°(5,73 мг/мл ДМСО).

Кристаллическую форму А-2 получали посредством добавления приблизительно 1 мг соединения примера 1 к приблизительно 0,7 мл смеси ацетон/ацетонитрил/вода (2:2:1). Смесь бесцветных игольчатых кристаллов и тонких пластин получали после одного дня медленного испарения раствора при комнатной температуре. Тонкие пластинчатые кристаллы отделяли, чтобы получить кристаллы формы А-2.

Кристаллическую форму ЕА-3 получали посредством добавления приблизительно 1 мг соединения примера 1 к приблизительно 0,7 мл смеси этилацетат/гептан (1:1).

Бесцветные пластинчатые кристаллы получали после трех дней медленного испарения раствора при комнатной температуре.

Кристаллическую форму ТНР-2 получали посредством добавления приблизительно 5 мг соединения примера 1 к приблизительно 0,7 мл смеси ТГФ/вода (4:1). Бесцветные пластинчатые кристаллы получали после одного дня испарения растворителя при комнатной температуре.

Альтернативная методика получения соединения примера 1.

Препарат 1М. 3,3,3-Трифторпропилтрифторметансульфонат

о (1М)

К холодному (25°С) перемешиваемому раствору 2,6-лутидина (18,38 мл, 158 ммоль) в СН₂С1₂(120 мл) добавляли Т£₂О (24,88 мл, 147 ммоль) в течение 3 мин и перемешивали в течение 5 мин. К реакционной смеси добавляли 3,3,3-трифторпропан-1-ол (12 г, 105 ммоль) в течение 3 мин. Через 2 ч реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали до половины объема, затем очищали посредством загрузки непосредственно на колонку с силикагелем (330 г 1§СО) и элюировали СН₂С1₂. Получали препарат 1 М (13,74 г, 53%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 4,71 (2Н, т, 1=6,15 Гц), 2,49-2,86 (2Н, м).

Препарат 1Ν. (4§)-4-Бензил-3-(5,5,5-трифторпентаноил)-1,3-оксазолидин-2-он

Препарат 1Ν получали из 5,5,5-трифторпентановой кислоты (3,35 г, 21,46 ммоль) и (4§)-4-бензил1,3-оксазолидин-2-она (3,80 г, 21,46 ммоль) с помощью общего способа, показанного для препарата 1В. Препарат 1Ν (5,67 г, 84%) получали в виде бесцветного вязкого масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 7,32-7,39 (2Н, м), 7,30 (1Н, д, 1=7,05 Гц), 7,18-7,25 (2Н, м), 4,644,74 (1Н, м), 4,17-4,27 (2Н, м), 3,31 (1Н, дд, 1=13,35, 3,27 Гц), 3,00-3,11 (2Н, м), 2,79 (1Н, дд, 1=13,35, 9,57 Гц), 2,16-2,28 (2Н, м), 1,93-2,04 (2Н, м).

Препарат 1О. трет-Бутил (3К)-3-(((4§)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил)карбонил)-6,6,6трифторгексаноат

К холодному (-78°С) раствору препарата 1н. (3,03 г, 9,61 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли №НМЭ8 (1,0 М в ТГФ) (10,6 мл, 10,60 ммоль) в атмосфере азота. Через 2 ч добавляли трет-бутил-2-бромацетат (5,62 г, 28,8 ммоль) при помощи шприца при -78°С и перемешивание продолжали при той же температуре. Через 6 ч реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь распределяли между насыщенным раствором ЯН₄С1 и ЕЮАс. Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили (№₂8О₄), фильт- 45 022530 ровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэшхроматографии (Те1ебуие КСО СотЫИакЬ Κί, от 5 до 100% растворитель А/В = гексан/ЕЮАс, КеФ8ер® δίϋ₂ 120 г). Концентрирование соответствующих фракций обеспечивало препарат 10 (2,79 г, 67,6%) в виде бесцветного вязкого масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ м.д. 7,34 (2Н, д, 1=7,30 Гц), 7,24-7,32 (3Н, м), 4,62-4,75 (1Н, м, 1=10,17, 6,89, 3,43, 3,43 Гц), 4,15-4,25 (3Н, м), 3,35 (1Н, дд, 1=13,60, 3,27 Гц), 2,84 (1Н, дд, 1=16,62, 9,57 Гц), 2,75 (1Н, дд, 1=13,35, 10,07 Гц), 2,47 (1Н, дд, 1=16,62, 4,78 Гц), 2,11-2,23 (2Н, м), 1,90-2,02 (1Н, м), 1,72-1,84 (1Н, м), 1,44 (9Н, с).

Препарат 1Ρ. (2К)-2-(2-трет-Бутокси-2-оксоэтил)-5,5,5-трифторпентановая кислота

Препарат 1Ρ получали из препарата 10 (2,79 г, 6,50 ммоль) с помощью общих способов, показанных для препарата 1Е. Препарат 1Ρ (1,45 г, 83%) получали в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ м.д. 2,83-2,95 (1Н, м), 2,62-2,74 (1Н, м), 2,45 (1Н, дд, 1=16,62, 5,79 Гц), 2,15-2,27 (2Н, м), 1,88-2,00 (1Н, м), 1,75-1,88 (1Н, м), 1,45 (9Н, с).

К холодному (-78°С) раствору препарата 1Ρ (5,44 г, 20,13 ммоль) в ТГФ (60 мл) медленно добавляли БЭЛ (24,60 мл, 44,3 ммоль) в течение 7 мин. После перемешивания в течение 2 ч препарат 1 М (6,44 г, 26,2 ммоль) добавляли к реакционной смеси в течение 3 мин. Через 45 мин реакционную смесь нагревали до -25°С в бане (лед/МеОН/сухой лед) в течение 1 ч, а затем нагревали до 0°С. Через 45 мин добавляли препарат 1 М (1 г) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин. Реакционную смесь гасили водой и 1н. ЫаОН и экстрагировали СН₂С1₂. Органический слой снова экстрагировали 1н. ЫаОН (2х) и водные слои объединяли. Водный слой охлаждали на бане лед/вода и затем подкисляли концентрированной НС1 до рН 2. Затем водный слой экстрагировали ЕЮЛс. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили в высоком вакууме, что обеспечивало смесь 1:5 (1Е:1Е) (как было определено посредством 'Н ЯМР) препарата ¹Е и препарата ¹Е (5,925 г, 80%) в виде бледно-желтого твердого вещества.

Ή ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 2,81 (1Н, ддд, 1=10,17, 6,32, 3,85 Гц), 2,63-2,76 (1Н, м), 2,02-2,33 (4Н, м), 1,86-1,99 (2Н, м), 1,68-1,85 (2Н, м), 1,47 (9Н, с).

Препарат 1Е. (2К,3К)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота

Смесь препарата 1Е и препарата 1Е (64 мг, 1,758 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл), что давало бесцветный раствор, который охлаждали до -78°С. Затем медленно добавляли БЭЛ (2,149 мл, 3,87 ммоль) (1,8 М в смеси гептан/ТГФ/этилбензол) к реакционной смеси в течение 10 мин. После перемешивания в течение 15 мин реакционную смесь помещали в баню с водой при комнатной температуре. Через 15 мин реакционную смесь помещали обратно в баню с -78°С и затем медленно добавляли диэтилалюминийхло- 46 022530 рид (3,87 мл, 3,87 ммоль) (1 М в гексане) в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при температуре -78°С. Через 15 мин реакционную смесь помещали в баню с водой при комнатной температуре на 10 мин, а затем охлаждали в бане до -78°С. Через 15 мин реакционную смесь гасили МеОН (8 мл, 198 ммоль), удаляли из бани -78°С и концентрировали. К реакционной смеси добавляли лед и НС1 (16 мл, 16,00 ммоль) с последующей экстракцией ЕЮЛс (2/). Органический слой промывали фторидом калия (920 мг, 15,84 ммоль) (в 25 мл Н₂О) и НС1 (4,5 мл, 4,50 ммоль). Органический слой сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении с получением обогащенной смеси 9:1 (1Е:1Р) препарата 1Е и препарата 1Р (540 мг, 1,583 ммоль, 90% выход) в виде светложелтого/оранжевого твердого вещества.

¹Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 2,64-2,76 (2Н, м), 2,04-2,35 (4Н, м), 1,88-2,00 (2Н, м), 1,71-1,83 (2Н, м), 1,48 (9Н, с).

Его превращали в соединение примера 1 посредством последовательности реакций, как описано выше.

Альтернативные методики для получения препарата 1Е.

Препарат 10. (2К,3§)-1-Бензил-4-трет-бутил 2,3-бис-(3,3,3-трифторпропил) сукцинат

Чистую и сухую 5-литровую четырехгорлую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, гнездом для термометра и барботером азота при комнатной температуре загружали Ν,Ν-диметилформамидом (2,07 л), 1,2:1 смесью препарата 1Е и препарата 1Р (207 г, 0,5651 моль), карбонатом калия (117,1 г, 0,8476 моль) с последующим добавлением бензилбромида (116 г, 0,6781 моль) в течение 15-20 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 2-3 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали досуха при 50-55°С в вакууме. Добавляли этилацетат (3,1 л, 30 об.) загружали в сконцентрированную реакционную массу, а затем промывали водой (2,07 л), рассолом (0,6 л), затем сушили над безводным сульфатом натрия (207 г), фильтровали и концентрировали досуха при 4045°С под вакуумом. Остаток растворяли в дихлорметане (1,035 л, 5 об.) и затем абсорбировали на силикагель (60-120) (607 г, 3,0 мас./мас.), затем очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием петролейного эфира и этилацетата в качестве растворителей. После объединения нескольких партий получали препарат 10 (235 г). Чистота по ВЭЖХ: 99,77%.

Препарат 1Е. (2К,3§)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота

В сухой чистый 2-литровый автоклав загружали метанол (540 мл) и продували азотом в течение 510 мин. В автоклав добавляли 10% палладий на угле (12 г, 20%), продували азотом еще раз в течение 510 мин, затем загружали препарат 10 (60 г, 0,1315 моль), автоклав промывали метанолом (60 мл) и перемешивали в течение 4-6 ч при 20-25°С при давлении водорода 5 кг. После завершения реакции реакционную массу фильтровали через СЕПТЕ®, промывали метанолом (180 мл), сушили над безводным сульфатом натрия (60 г), фильтровали и концентрировали досуха при 45-50°С в вакууме. Получали препарат 1Е (45,8 г, 95%) в виде бесцветного твердого вещества: чистота по ВЭЖХ: 98,9%.

Препарат 1Е получали по методике, идентичной той, которая описана выше, из смеси препаратов 1Е и 1Р (200 г, 0,5460 моль), используя ЬОЛ (1,8 М раствор в ТГФ, этилбензоле и гептане) (698 мл, 2,3 экв.) и диэтилалюминий хлорид (1,0 М раствор в гексане) (1256 мл, 2,3 экв.) в ТГФ (2,0 л). После обработки, как описано выше, получающийся остаток обрабатывали следующим образом: неочищенный

- 47 022530 материал добавляли в 2-литровую четырехгорлую круглодонную колбу с последующим добавлением МТВЕ (1,0 л), загружаемой ниже 30°С. Полученную смесь перемешивали в течение 5-10 мин, чтобы получить прозрачный раствор. Гексан (600 мл) загружали в реакционную смесь при температуре ниже 30°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. Далее загружали трет-бутиламин (43,8 г, 1,1 экв.) медленно в течение 15 мин при температуре ниже 30°С. Это добавление, как было обнаружено, было экзотермичным. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при температуре ниже 30°С и фильтровали. Твердое вещество промывали смесью 5:03 МТВЕ:гексан (200 мл), фильтрат концентрировали и переносили в бутылку янтарного цвета. Отфильтрованный твердый продукт растворяли в дихлорметане (2,0 л), промывали 1н. НС1 (2,0), органический слой промывали насыщенным раствором соли (2х 1,0 л), затем концентрировали при пониженном давлении при температуре ниже 45°С. Это вещество, как было найдено, обладало 91,12% чистотой. Вещество повторно очищали с помощью описанной выше методики кристаллизации из трет-бутиламина. Получали препарат 1Ε (78 г, 39%): чистота согласно ВЭЖХ: 99,54%. Альтернативная методика для получения соединения примера 1.

Препарат Н. трет-Бутил-(28,3К)-6,6,6-трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2 -(3,3,3-трифторпропил)гексаноат

Чистую и сухую 2-литровую четырехгорлую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, гнездом для термометра и барботером азота загружали Ν,Ν-диметилформамид (457 мл), препарат 1Ε (45 г, 0,1248 моль) и препарат 1С · С8А (62,08 г, 0,1248 моль) в атмосфере азота при температуре 20-25°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 15-20 мин, что приводило к прозрачному раствору при температуре 20-25°С. К реакционной смеси добавляли ТВТИ (48,16 г, 0,1498 моль) при 20-25°С с последующим добавлением триэтиламина (50,51 г, 0,4992 моль) в течение 15-20 мин при температуре 2025°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 60-120 мин при температуре 20-25°С в атмосфере азота. После завершения реакции, реакционную смесь выливали в воду (1,37 л, 30 об.) при 20-25°С при перемешивании. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 20-25°С. Реакционную смесь фильтровали и промывали водой (228 мл). Полученное твердое вещество растворяли в этилацетате (457 мл), промывали водой (2х 137 мл), рассолом (137 мл) и затем сушили над безводным сульфатом натрия (45,7 г). Активированный уголь (9,14 г, 20%) загружали в реакционную смесь и перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали через слой СЕЫТЕ® и фильтровальную ткань с порами 1 мкм, промывали слой угля этилацетатом (137 мл), концентрировали до 1,0 об. стадии и затем загружали петролейный эфир (457 мл, 10 об.) и перемешивали в течение 30 мин при температуре 20-25°С. Твердое вещество собирали посредством фильтрации, промывали петролейным эфиром (137 мл) и затем сушили в вакууме при 40-45°С в течение 8 ч до тех пор, пока потери при сушке не стали менее 3,0%. Получали препарат Н (65,2 г, 85%): чистота согласно ВЭЖХ: 98,26%.

Препарат 1К. (28,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2 -(3,3,3-трифторпропил) гексановая кислота

Чистую и сухую 2-литровую четырехгорлую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, гнездом для термометра и барботером азота загружали дихлорметан (980 мл) в атмосфере азота и затем препарат II (140 г, 0,2282 моль) при 20-25°С. Реакционную смесь охлаждали до 0-5°С и трифторуксусную кислоту (980 мл) загружали медленно в течение 30-40 мин. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0-5°С в атмосфере азота. Температуру реакции повышали от 20 до 25°С и реакционную смесь перемешивали в течение 1-2 ч при температуре от 20 до 25°С. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали досуха при от 50 до 55°С под вакуумом. Толуол (3 х700 мл) загружали в сконцентрированную реакционную массу, а затем отгоняли при температуре от 50 до 55°С под вакуумом. После полного концентрирования из толуола, загружали этилацетат (280 мл) в реакционную массу при температуре от 20 до 25°С, перемешивали в течение 60 мин, затем твердое вещество собирали фильтрованием, промывали этилацетатом (140 мл), сушили в вакууме при температуре от 50 до 55°С в течение 12 ч до тех пор, пока потери при сушке не стали менее 2%. Получали препарат

- 48 022530

1К (106 г, 84%): чистота согласно ВЭЖХ: 98,43%.

Пример 1.

В реакционный сосуд загружали препарат 1К (30 г, 53,81 ммоль), НОВ! (8,7 г, 64,38 ммоль) и ТГФ (150 мл) при комнатной температуре. К гомогенному раствору прибавили ΕΩίΊ (12,4 г, 64,68 ммоль), перемешивали в течение 15 мин, затем охлаждали до 8°С. К реакционной смеси добавляли раствор аммиака (2 М в ИПС) (81 мл, 162 ммоль) в течение 5 мин с тем, чтобы поддерживать температуру ниже 10°С.

Полученную тяжелую густую суспензию перемешивали в течение 10 мин, нагревали до комнатной температуры в течение 30 мин, затем перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции медленно добавляли воду (230 мл) в течение 15 мин, чтобы поддерживать температуру ниже 20°С и затем перемешивали в течение 2 ч. Твердое вещество собирали фильтрацией, промывали водой (3x60 мл), затем сушили в вакууме 48 ч при 55°С. Полученный сырой продукт загружали в 1-литровую 3-горлую круглодонную колбу. Добавляли ИПС (200 мл), затем нагревали до 80°С, что приводило к гомогенному раствору. Воду (170 мл) медленно добавляли (15 мин), чтобы поддерживать внутреннюю температуру >75°С. Полученную густую суспензию перемешивали и охлаждали до комнатной температуры в течение 2 ч. Твердое вещество собирали фильтрацией, промывали водой (2x50 мл), затем сушили в вакууме (55°С в течение 24 ч и 30°С в течение 48 ч). Получали соединение примера 1 (23,4 г, выход 78%): чистота согласно ВЭЖХ: 99,43%.

Пример 2.

(2Р,38)-^((38)-2-Оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамид

Препарат 2А. (38)-3-Амино-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он. Препарат 2В. (3Р)-3 -Амино-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он

Рацемический 3-амино-5-фенил-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он (1. Мей. СНст., 49:23112319 (2006), соединение № 5) получали в соответствии с литературной методикой. Энантиомеры разделяли на колонке Вегдег 8РС МОШ: Ьих 25X3 см, 5 см; Подвижная фаза: 30% метанол + 0,1% ДЭА в СО₂; скорость потока: 150 мл/мин, температура: 40°С; длина волны детектора: 250 нм. Получали 8-энантиомер препарата 2А виде белого твердого вещества.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 10,67 (1Н, шир. с), 7,58 (1Н, тд, 1=7,65, 1,76 Гц), 7,37-7,53 (5Н, м), 7,23-7,30 (2Н, м), 7,14-7,22 (1Н, м), 4,23 (1Н, с), 2,60 (2Н, шир. с);

ВЭЖХ: РТ = 3,0625 мин (30% МеОН +0,1% ДЭА в СО₂ на колонке ΟΌ-Н, 3 мл/мин, 35°С, 96 бар, 230 нм, 10 мкл на инъекцию), [а]_с=-208,3° (5,05 мг/мл, МеОН).

Также получали Р-энантиомер препарата 2В в виде не совсем белого твердого вещества: ВЭЖХ: РТ = 3,970 мин, [а]_о = +182,1°(2,01 мг/мл, МеОН).

Препарат 2С. трет-Бутил-(28,3Р)-6,6,6-трифтор-3-(((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2 -(3,3,3-трифторпропил)гексаноат.

Препарат 2Ό. трет-Бутил-(2Р,3Р)-6,6,6-трифтор-3-(((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2 -(3,3,3-трифторпропил)гексаноат

- 49 022530

Препарат 2С получали из препарата 2А (564 мг, 2,244 ммоль) и смеси препарата 1Е и препарата 1Р (822 мг, 2,244 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для препарата П. Получали препарат 2С и препарат 2Ό (1,31 г, 97%): ВЭЖХ: КТ = 3,443 мин (СЬготоШБ® ΘΌ8 4,6x50 мм (4 мин градиент), элюирование 10-90% водным метанолом при содержании 0,1% ТФУ в течение 4 мин, 4 мл/мин, контроль на длине волны 220 нм).

МС (Е8): т/ζ = 600,3 [М+Н]+.

Препарат 2Е. (28,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота.

Препарат 2Р. (2К,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексановая кислота

Смесь препарата 2Е и препарата 2Р получали из смеси препарата 2С и препарата 2Ό (1,31 г, 2,185 ммоль), с помощью общих способов, показанных для препарата 1К. Получали смесь препарата 2Е и препарата 2Р (1,18 г, 99%): ВЭЖХ: КТ = 2,885 мин (СЬготоШБ® ΘΌ8 4,6x50 мм (4 мин градиент), элюирование 10-90% водным метанолом, содержащим 0,1% ТФУ, в течение 4 мин, 4 мл/мин, контроль на длине волны 220 нм). МС (Е8): т/ζ = 544,2 [М+Н]+.

Пример 2.

Соединение примера 2 получали из смеси препарата 2Е и препарата 2Р (354 мг, 0,651 ммоль) с помощью общих способов, показанных в примере 1. После разделения диастереоизомеров получали соединение примера 2 (188 мг, 52%) в виде белого твердого вещества: ВЭЖХ: КТ = 9,063 мин (Н₂О/СН₃СЫ с ТФУ, §ипйге С18 3,5 мкм, 4,6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны 220 и 254 нм),

МС (Е8): т/ζ = 543 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 10,87 (1Н, ш. с), 9,50-9,55 (1Н, м), 7,62-7,69 (2Н, м), 7,40-7,57 (5Н, м), 7,29-7,36 (2Н, м), 7,22-7,28 (1Н, м), 7,16 (1Н, ш. с), 5,25 (1Н, д), 3,30-3,32 (1Н, м), 2,75-2,86 (1Н, м), 2,44-2,48 (1Н, м), 2,06-2,34 (3Н, м), 1,51-1,77 (4Н, м), [α]_ο=-114,4° (8,04 мг/мл ДМСО).

Кристаллическую форму М2-1 получали добавлением от приблизительно 1 мг соединения примера 2 к приблизительно 0,7 мл раствора МеОН/фторбензол (3:1). Бесцветные пластинчатые кристаллы получали после 2 дней испарения растворителя при комнатной температуре.

Пример 3.

(2К,38)-Х-((3§)-1-Метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2-(2,2,2трифторэтил)-3 -(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид

Препарат 3А. (48)-4-(Пропан-2-ил)-3-(4,4,4-трифторбутаноил)-1,3-оксазолидин-2-он

Препарат 3А получали из (48)-4-(пропан-2-ил)-1,3-оксазолидин-2-она (4,66 г, 36,1 ммоль) и

4,4,4-трифторбутановой кислоты (5,02 г, 35,3 ммоль) с помощью общих способов, показанных для препарата 1В. Препарат 3А получали в виде бесцветного масла (3,64 г, 40%).

Ή ЯМР (400 МГц, СИСЬ) δ м.д. 4,44 (1Н, дд, 1=8,41, 3,51, 3,39 Гц), 4,31 (1Н, т, 1=8,66 Гц), 4,25 (1Н, дд, 1=9,03, 3,26 Гц), 3,13-3,32 (2Н, м), 2,47-2,59 (2Н, м), 2,38 (1Н, дддд, 1=13,96, 7,01, 3,89 Гц), 0,93 (3Н, д, 1=7,28 Гц), 0,88 (3Н, д, 1=6,78 Гц).

- 50 022530

Препарат 3В. трет-Бутил-(3К)-5,5,5-трифтор-3-(((4§)-2-оксо-4-(пропан-2-ил)-1,3-оксазолидин-3ил)карбонил)-2 -(3,3,3-трифторпропил)пентаноат

Препарат 3В получали из препарата 3А (1,04 г, 4,12 ммоль) и трет-бутил-5,5,5-трифторпентоноата (препарат 1А) (1,55 г, 7,28 ммоль) общими способами, показанными для препарата 1С. Препарат 3В (528,3 мг, 28%) получали в виде бледно-желтого вязкого масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СГОС’Ь) δ м.д. 4,57 (1Н, дд, 1=10,54, 5,02, 1,76 Гц), 4,41-4,50 (2Н, м), 4,20-4,32 (4Н, м), 2,77-2,88 (3Н, м), 2,70 (1Н, д, 1=9,79, 4,89 Гц), 2,38 (1Н, дддд, 1=10,38, 6,87, 3,64, 3,45 Гц), 2,232,34 (4Н, м), 2,06-2,18 (2Н, м), 1,93-2,05 (2Н, м), 1,69-1,81 (4Н, м), 1,46 (9Н, с), 1,43 (9Н, с), 0,85-0,97 (12Н, м).

Препарат 3С. (2К)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)гексановая кислота

Препарат 3С получали из препарата 3В (528,3 мг, 1,140 ммоль) общими способами, показанными для препарата ГО. Препарат 3С (306,7 мг, 76%) получали в виде бесцветного воскообразного твердого вещества (306,7 мг, 76%).

Ή ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 3,08 (1Н, дд, 1=8,72, 4,20, 3,89 Гц), 3,00 (1Н, дд, 1=9,66, 7,03, 2,89 Гц), 2,70-2,82 (4Н, м), 2,36 (1Н, дд, 1=15,25, 10,73, 3,64 Гц), 2,18-2,30 (2Н, м), 2,12 (2Н, дд, 1=10,16, 5,65 Гц), 1,90-2,02 (2 Н, м), 1,70-1,81 (3Н, м), 1,45-1,51 (18Н, м).

Препарат 3Ό. (2К,3§)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)гексановая кислота

Препарат 3Ό получали из препарата 3С (306,7 мг, 0,871 ммоль) общими способами, показанными для обогащения смеси препарата 1Е и препарата 1Р. Препарат 3Ό (297,0 мг, 97%) получали в виде желтого воскообразного твердого вещества (297,0 мг, 97%).

Ή ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 2,99 (1Н, дд, 1=9,47, 6,96, 2,89 Гц), 2,69-2,82 (2Н, м), 2,18-2,31 (2Н, м), 2,06-2,18 (1Н, м), 1,91-2,03 (1Н, м), 1,68-1,80 (1Н, м), 1,46-1,51 (9Н, м).

Препарат 3Е. трет-Бутил-(2§,3К)-5,5,5-трифтор-3-(((3§)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н1,4-бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)пентаноат

Препарат 3Е получали из препарата 3Ό (297,0 мг, 0,843 ммоль) и препарата 10 (212,0 мг, 0,799 ммоль) общими способами, показанными для препарата 11. Препарат 3Е (471,7 мг, 98%) получали в виде желтовато-коричневого твердого вещества (471,7 мг, 98%).

МС (Е8): т/ζ = 600 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 7,75 (1Н, д, 1=7,78 Гц), 7,54-7,64 (3Н, м); 7,43-7,51 (1Н, м), 7,347,43 (4Н, м), 7,22-7,31 (1Н, м), 5,50 (1Н, д, 1=7,53 Гц), 3,48 (3Н, с), 2,87-2,96 (1Н, м), 2,73-2,83 (1Н, м), 2,60 (1Н, тд, 1=10,10, 3,89 Гц), 2,13-2,25 (3Н, м), 1,86-2,05 (2 Н, м), 1,52 (9Н, с).

- 51 022530

Препарат 3Р. (2§,3К)-5,5,5-Трифтор-3-(((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2 -(3,3,3-трифторпропил)пентановая кислота

Препарат 3Р получали из препарата 3Е (466,1 мг, 0,777 ммоль) общими способами, показанными для препарата 1Н. Препарат 3Р (451 мг, > 99%) получали в виде желтовато-коричневого твердого продукта.

МС (Е8): т/ζ = 544 [М+Н]+, ¹Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ м.д. 8,29 (1Н, д, 1=7,53 Гц), 7,64 (1Н, тд, 1=7,84, 1,63 Гц), 7,53-7,60 (2Н, м), 7,49 (1Н, т, 1=7,40 Гц), 7,33-7,46 (4Н, м), 7,22-7,33 (2Н, м), 5,53 (1Н, д, 1=7,53 Гц), 3,49 (3Н, с), 3,043,21 (2Н, м), 2,69-2,81 (2Н, м), 2,23-2,33 (2Н, м), 2,07-2,19 (2Н, м).

Пример 3.

Соединение примера 3 получали из препарата 3Р (446 мг, 0,821 ммоль) общими способами, показанными в примере 1. После разделения диастереоизомеров получали соединения примера 3: ВЭЖХ:КТ=3,17 мин (Н₂Ο/СН₃СN с ТФУ, 8ипйге С18 3,5 мкм, 4,6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм).

МС (Е8): т/ζ = 543,3 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 9,72 (1Н, д, 1=8,53 Гц), 7,71-7,77 (1Н, м), 7,66-7,71 (1Н, м), 7,64 (1Н, д, 1=1,25 Гц), 7,48-7,57 (3Н, м), 7,39-7,47 (2Н, м), 7,30-7,39 (2Н, м), 7,23 (1Н, с), 5,36 (1Н, д, 1=8,53 Гц), 3,39 (3Н, с), 3,12-3,23 (1Н, м), 2,53-2,61 (1Н, м), 2,43 (1Н, тд, 1=10,10, 3,89 Гц), 2,16-2,28 (1Н, м), 2,02-2,16 (1Н, м), 1,82-1,96 (1Н, м), 1,68 -1,82 (1Н, м).

Пример 4.

(2К,38)-И-((38)-1-Метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(2,2,2трифторэтил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид

Препарат 4А. трет-Бутил 4,4,4-трифторбутоноат

Препарат 4А получали из 4,4,4-трифторбутановой кислоты (4,99 г, 35,1 ммоль), используя способ, показанный для препарата 1 А. Препарат 4А (5,58 г, 80%) получали в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СОСЪ) δ м.д. 2,47-2,52 (2Н, м), 2,37-2,45 (2Н, м), 1,46 (9Н, с).

Препарат 4В. трет-Бутил (3К)-6,6,6-трифтор-3-(((48)-2-оксо-4-(пропан-2-ил)-1,3-оксазолидин-3ил)карбонил)-2-(2,2,2-трифторэтил)гексаноат

Препарат 4В получали из препарата 4А (1058,3 мг, 5,34 ммоль) и препарата 1В (809,2 мг, 3,03 ммоль) в соответствии с общей методикой, показанной для препарата 1С. Препарат 4В (690,1 мг, 49%) получали в виде бледно-желтого вязкого масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СОСЪ) δ м.д. 4,45-4,52 (1Н, м), 4,23-4,40 (1Н, м), 4,05-4,12 (1Н, м), 3,70 (1Н, т, 1=6,7 Гц), 3,05 (1Н, дд, 1=9,9, 5,0, 2,3 Гц), 2,99 (1Н, дд, 1=11,2, 5,8, 1,8 Гц), 2,58-2,91 (2Н, м), 2,38-2,49 (1Н, м), 2,27-2,36 (1Н, м), 2.07-2.26 (1Н, м), 1,96-2,04 (1Н, м), 1,85-1,94 (1Н, м), 1,72-1,82 (1Н, м), 1,46 (3Н, с), 0,88-0,98 (3Н, м),

ВЭЖХ: КТ = 3,36 мин (МеОН/Н₂О/0,1% ТФУ, СНКОМОЫТН® ^реейНОО 4,6x50 мм, 4 мин градиент, длина волны = 220 нм).

- 52 022530

Препарат 4С. (2К)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-5,5,5-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)пентановая кислота

Препарат 4С получали из препарата 4В (690,1 мг, 1,489 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для препарата 1Е. Препарат 4С (335,9 мг, 64%) получали в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СОС1_;) δ м.д. 2,91-3,03 (1Н, м), 2,63-2,88 (2Н, м), 2,50 (1Н, т, 1=7,3 Гц), 2,07-2,43 (4Н, м), 1,89-2,05 (2Н, м), 1,73-1,88 (1Н, м), 1,47 (5Н, с), 1,47 (4Н, с).

Препарат 4Ό. (2К,3Б)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-5,5,5-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)пентановая кислота

Препарат 4Ό получали из препарата 4С (335,9 мг, 0,954 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для обогащения смеси препарата 1Е и препарата 1Р. Препарат 4Ό (277,8 мг, 83%) получали в виде коричневого масла.

Ή ЯМР (400 МГц, СОС1_;) δ м.д. 2,90-3,03 (1Н, м), 2,64-2,88 (2Н, м), 2,50 (1Н, т, 1=7,3 Гц), 2,06-2,43 (3Н, м), 1,89-2,03 (1Н, м), 1,73-1,88 (1Н, м), 1,47 (9Н, с).

Препарат 4Е. трет-Бутил-(2Б,3К)-6,6,6-трифтор-3-(((3Б)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(2,2,2-трифторэтил)гексаноат

Препарат 4Е получали из препарата 4Ό (277,8 мг, 0,789 ммоль) и препарата 1С (210,2 мг, 0,792 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для препарата 11. Препарат 4Е получали в виде твердого вещества кремового цвета (420,2 мг, 89%).

Ή ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ м.д. 7,55-7,65 (3Н, м), 7,48 (1Н, д, 1=7,5 Гц), 7,36-7,45 (4Н, м), 5,51 (1Н, д, 1=7,8 Гц), 3,49 (3Н, с), 2,87-2,92 (1Н, м), 2,63 (1Н, с), 2,47-2,58 (1Н, м), 2,16-2,36 (2Н, м), 1,93-2,06 (1Н, м), 1,80 (1Н, с), 1,51 (9Н, с),

ЖХ-МС: КТ = 4,02 мин (МеОН/Н₂О/0,1% ТФУ, СНКОМОЫТН® КР-18е 2,0x50 мм, 4-минутный градиент, длина волны = 254 нм),

МС (ЕБ): т/ζ = 600 [М+Н]+.

Препарат 4Р. (2Б,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((3Б)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(2,2,2-трифторэтил)гексановая кислота

Препарат 4Р получали из препарата 4Е (417,2 мг, 0,696 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для препарата 1К. Препарат 4Р получали в виде ТФУ сольвата в виде янтарного твердого вещества (476,0 мг, 96%).

Ή ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ м.д. 8,25 (1Н, д, 1=8,0 Гц), 7,73-7,82 (1Н, м), 7,56-7,67 (2Н, м), 7,34-7,54 (3Н, м), 5,67 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 3,49-3,60 (2Н, м), 3,05-3,13 (1Н, м), 2,81-2,97 (1Н, м), 2,39-2,60 (1Н, м), 2,18-2,33 (1Н, м), 1,95-2,13 (1Н, м),

ЖХ-МС: КТ = 3,43 мин (МеОН/Н₂О/0,1% ТФУ, СНКОМОЫТН® КР-18е 2,0x50 мм, 4-минутный градиент, длина волны = 254 нм),

МС (ЕБ): т/ζ = 544 [М+Н+].

Пример 4.

Соединения примера 4 получали из препарата 4Р (476,3 мг, 0,667 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной в примере 1. После разделения диастереоизомеров соединение примера 4 получали в виде твердого вещества кремового цвета (120,3 мг, 32%).

- 53 022530

ВЭЖХ: РТ = 9,446 мин (Η₂0/СΗзСN с ТФУ, §ипйге С18 3,5 мкм, 4,6/150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм),

МС (Е8): т/ζ = 543 [М+Н+],

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 9,56 (1Н, д, 6=7,03 Гц), 7,82 (1Н, с), 7,70-7,78 (1Н, м), 7,64-7,70 (1Н, м), 7,50-7,63 (3Н, м), 7,47 (2Н, д, 1=7,78 Гц), 7,30-7,42 (2Н, м), 7,21 (1Н, с), 5,30 (1Н, д, 1=7,03 Гц), 3,39 (3Н, с), 2,67-2,80 (2Н, м), 2,51-2,62 (2Н, м), 2,19-2,29 (1Н, м), 2,07-2,21 (1Н, м), 1,60-1,72 (2Н, м).

Пример 5.

(2Κ,3§)-N-((3§)-1-(²Нз)-Метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Η-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид

В 5-миллилитровый флакон с завинчивающейся крышкой добавляли соединение примера 2 (50 мг, 0,092 ммоль), карбонат цезия (60,1 мг, 0,184 ммоль) и йодистый метил-63 (6,88 мкл, 0,111 ммоль) в ДМФА (2 мл), что давало суспензию. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. ЖХ-МС показала завершение реакции. Реакционную смесь растворяли в 2 мл смеси 1:1 ДМФА/АсОН и очищали с помощью препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на 0Ό8 Ьипа 5 мкм 21,2/100 мм, элюирование проводили 7 мин градиента от 10 до 100% АСНвода 0,1% ТФУ до 100%. Соответствующие фракции концентрировали с получением соединения примера 5 (35 мг, 65%).

ВЭЖХ: ИТ = 3,04 мин (^ΚΟΜΟΕΙ^® §5 0Ό8 колонка 4,6/50 мм, 10-90% водного метанола, содержащего 0,1% ТФУ, в течение 4 мин, 4 мл/мин, контроль на длине волны 220 нм),

МС (Е§): т/ζ = 599 [М+Н]+,

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-6₆) δ м.д. 9,55 (1Н, д, 1=7,5 Гц), 7,71-7,80 (1Н, м), 7,67 (2Н, д, 1=8,3 Гц), 7,51-7,60 (3Н, м), 7,42-7,49 (2Н, м), 7,30-7,39 (2Н, м), 7,15 (1Н, с), 5,30 (1Н, д, 1=7,3 Гц), 2,75-2,87 (1Н, м), 2,40-2,48 (1Н, м), 2,04-2,31 (4 Н, м), 1,46-1,76 (4 Н, м).

Примеры 6-11

Соединения, перечисленные ниже, получали в соответствии с общей синтетической процедурой, описанной в примере 1, с использованием соответствующего бензодиазепинона, полученного способами, известными специалистам в данной области техники, например, Сайег, Μ.Ο е1 а1., Е Μеά. СЬет., 49:2311-2319 (2006).

- 54 022530

Таблица 6

№ примера	Υ	Ζ	Название соединения	[М+Н]⁺	ВЭЖХ Время удержив. (мин)
6	н	С1	(2К,3 8)-Ν-((3 8)-7-хлор-1 -метил-2-оксо-5- фенил-2,3-дигидро-1Н-1, 4- бензодиазепин-3-ил)-2 3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	591	17,21 “
7	ОСНз	н	(2К,3 8)-Ν-((3 8)-8-метокси-1 -метил-2- оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1 Η-1,4- бензодиазепин-3-ил)-2 3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	[М-Н]=585	15,86“
8	Р	н	(2Κ,3δ)-Ν-((3 8)-8-фтор-1 -метил-2-оксо-5- фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4- бензодиазепин-3-ил)-2 3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	575	10,317 ^ь
9	н	ОСНз	(2В,3 8 )-Ν-((3 8)-7-метокси-1 -метил-2- оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1 Η-1, 4- 6ензодиазепин-3-ил)-2 3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	587	15,92 “
10	н	Р	(2К,3 δ )-Ν-((3 3)-7-фтор-1 -метил-2-оксо-5- фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4- бензодиазепин-3-ил)-2 3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	575	16,15 ^а
11	С1	н	(2К,3 8 )-Ν-((3 8)-8-хлор-1 -метил-2-оксо-5- фенил-2,3-дигидро-1Н-1, 4- 6ензодиазепин-3-ил)-2 3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	591	17,58“

^а ХЪпйде ННеих! (4,6x150 мм), 3,5 мкм; 1 мл/мин скорость потока; градиент 10-100% В в течение 30 мин (А: 0,05% ТФУ в ВОАн/СЦСН (95:5), В: 0,05% ТФУ в воде/С^СЫ (5:95) при 220 и 250 нм); 30 мин анализ.

^Ъ ХЪпйде ННеих! (4,6x150 мм), 3,5 мкм; 1 мл/мин скорость потока; градиент 10-100% В в течение 15 мин (А: 0,05% ТФУ в ΒОАа/СΗ₃СN (95:5), В: 0,05% ТФУ в воде/С ΙΓΝ (5:95) при 220 и 250 нм); 15 мин анализ.

Примеры 12-18.

Соединения, перечисленные ниже, получали в соответствии с общей синтетической процедурой, описанной в примере 1, с использованием соответствующего бензодиазепинона, полученного способами, известными специалистам в данной области техники, например, Сайег, М.С. е! а1., 1. Мей. СЬет., 49:2311-2319 (2006).

- 55 022530

Таблица 7

№ примера	X	Υ	Ζ	Название соединения	[М+Н]⁺	ВЭЖХ Время удержив. (мин)
12	ОСН₃	Н	н	(2К,33)-14-((33)-9-метокси-2- оксо-5-фенил-2,3 -дигидро-1 Η-1, 4-бензодиазепин-З-ил )-2,3- бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	573	14,741 ^а
13	Н	ОСН₃	н	(2К,33)-14-((33)-8-метокси-2- оксо-5-фенил-2,3 -дигидро-1 Η-1, 4-бензодиазепин-З-ил )-2,3- бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	[М-Н]=571	9,38 ^ь
14	Н	Н	ОСНз	(2К,3 3)-Ν-((3 3)-7-метокси-2- оксо-5-фенил-2,3 -дигидро-1 Η-1, 4-бензодиазепин-З-ил )-2,3- бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	[М-Н]=571	9,14^ь
15	ОСНз	0Ν	н	(2К,3 3)-Ν-((3 3)-8-циано-9- метокси-2-оксо-5-фенил-2,3- дигидро-1Н-1, 4-бензодиазепин- З-ил )-2,3-бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	598	0,95^е

16	С1	С1	н	(2К,33)-Т4-((33)-8,9-дихлор-2- оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н- 1,4-бензодиазепин-З-ил )-2,3- бис(3,3,3- трнфторпропнл)сукцинамнд	611	2,095^а
17	Р	н	н	(2Κ,3δ)-Ν-((3δ)-9-φτορ-2-οκοο-5- фенил-2,3-дигидро-1 Η-1,4- бензодиазепин-3-ил)-2,3- бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	561	2,698^е
18	С1	н	н	(2К,33)-Т4-((33)-9-хлор-2-оксо-5- фе нил-2,3-дигидро-1 Η-1,4- бензодиазепин-3-ил)-2,3- бис(3,3,3- трифторпропил)сукцинамид	577	1,982^е1

^а ХЪпдде Ρ^ηγΐ (4,6/150 мм), 3,5 мкм; 1 мл/мин расхода; градиент 10-100% В в течение 12 мин (А: 0,05% ТФУ в вода/СН₃СЫ (95:5), В: 0,05% ТФУ в вода/СН₃СЫ (5:95), при 220 и 250 нм); в течение 25 мин.

^Ъ ХЪпдде Ρ^ηγΐ (4,6/150 мм), 3,5 мкм; 1 мл/мин расхода; градиент 10-100% В в течение 12 мин (А: 0,05% ТФУ в вода/СН₃СЫ (95:5), В: 0,05% ТФУ в вода/СН₃СЫ (5:95), при 220 и 250 нм); в течение 15 мин.

^с ЖХ-МС: МеОН/ЩО/0,1% ТФУ, ВЕН С18 2,1/50 мм 1,7 мкм, 2 мин градиент, длина волны = 254 нм.

^ά МеОН/Н2О/0,1% ТФУ, №а!ег§ 8ипйге С18 2,1/30 мм, 2 мин градиент, длина волны = 254 нм.

^е СНКОМОЫТН® ΟΏ8 4,6/50 мм (4 мин градиент), элюируя 10-90% водным метанолом, содержащим 0,1% ТФУ, в течение 4 мин, 4 мл/мин, контроль на длине волны 220 нм.

- 56 022530

Пример 19.

(2К,38)-Ч((38)-2-Оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид

Препарат 19А. (2К,3К)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-7,7,7-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гептановая кислота

Препарат 19А получали из препарата 9А (674 мг, 2,59 ммоль) и препарата 1Ρ (500 мг, 1,850 ммоль) в соответствии с альтернативной процедурой, показанной для препарата 1Е. Получали препарат 19А (521 мг, 28%).

МС (Е8): т/ζ = 379 [М-Н]^-.

Препарат 19В. (2К,3 8)-3 -(трет-Бутоксикарбонил)-7,7,7-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гептановая кислота

Препарат 19В получали из препарата 19А (198 мг, 0,521 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для обогащения смеси препарата 1Е и препарата 1Р. Получали препарат 19В (192 мг, 98%).

МС (Е8): т/ζ = 379 [М-Н]^-,

Ή ЯМР (500 МГц, С1)С1_;) δ м.д. 2,65-2,72 (1Н, м), 2,60 (1Н, дд, 1=10,33, 8,81, 3,61 Гц), 2,19-2,30 (2Н, м), 2,06-2,16 (3Н, м), 1,85-1,96 (1Н, м), 1,70-1,81 (2Н, м), 1,51-1,67 (3Н, м), 1,47 (7Н, с).

Препарат 19С. трет-Бутил-(23,3К)-6,6,6-трифтор-3-(((33)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(4,4,4-трифторбутил)гексаноат

Препарат 19С получали из препарата 19В (45,4 мг, 0,119 ммоль) и препарата 2А (30 мг, 0,119 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для препарата П. Получали препарат 19С (82 мг, 100%).

ВЭЖХ: КТ = 3,475 мин ((СНКОМОПТН® 5 мкм С18 4,6х30 мм (4 мин градиент), элюирование проводили 10-90% водным метанолом, содержащим 0,1% ТФУ, в течение 4 мин, контролируя на длине волны 220 нм),

МС (Е8): т/ζ = 614 [М+Н]+.

- 57 022530

Препарат 19Ό. (28,3К)-6,6,6-Трифтор-3-(((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3ил)карбамоил)-2-(4,4,4-трифторбутил)гексановая кислота

Препарат 19Ό получали из препарата 19С (73 мг, 0,119 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной для препарата 1К. Получали препарат 19Ό (80 мг, 100%) в виде ТФУ-сольвата.

ВЭЖХ: КТ = 2,926 мин (СНКОМОЫТН® 5 мкм С18 4,6x30 мм (4 мин градиента), элюируя 10-90% водным метанолом, содержащим 0,1% ТФУ, в течение 4 мин, контролируя при 220 нм).

Пример 19.

Соединение примера 19 получали из препарата 19Ό (80 мг, 0,119 ммоль) в соответствии с общей процедурой, показанной в примере 1. После разделения диастереоизомеров получали соединение примера 19 (35 мг, 49%).

ВЭЖХ: КТ = 2,731 мин (СНКОМОЫТН® 5 мкм С18 4,6x30 мм (4 мин градиента), элюируя 10-90% водным метанолом, содержащим 0,1% ТФУ, в течение 4 мин, контролирую на длине волны 220 нм),

МС (Е8): т/ζ = 557 [М+Н]+,

Ή ЯМР (500 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 10,82 (1Н, с), 9,42 (1Н, д, 1=7,21 Гц), 7,65 (1Н, дд, 1=8,32, 7,07, 1,53 Гц), 7,60 (1Н, д, 1=2,22 Гц), 7,49-7,57 (3Н, м), 7,42-7,49 (2Н, м), 7,29-7,35 (2Н, м), 7,20-7,28 (1Н, м), 7,03 (1Н, с), 5,23 (1Н, д, 1=7,21 Гц), 2,70-2,79 (1Н, м), 2,57-2,69 (1Н, м), 2,39-2,47 (1Н, м), 2,05-2,32 (3Н, м), 1,50-1,67 (3Н, м), 1,40-1,49 (1Н, м), 1,24-1,39 (2Н, м).

Пример 20.

(2К,38)-И-((38)-8-Метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4трифторбутил) -2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид

Соединение примера 20 получали с использованием последовательности реакций, описанных в примере 19, используя препарат 19В вместо препарата 1Ε. Полученную смесь диастереоизомеров отделяли с помощью хиральной ВЭЖХ, обеспечивая соединение примера 20. ВЭЖХ КТ = 0,89 мин. (ВЕН С18 2,1x50 мм, 1,7 мкм, В от 0 до 100 в течение 1 мин с 0,5 мин времени временем задержки, скорость потока = 1 мл/мин, детектирование при 254 нм, растворитель А: 100% вода/0,1% ТФУ, растворитель В: 100% АСМ/0,1% ТФУ).

МС (Е8): т/ζ = 587,2 [М+Н]+.

Пример 21.

(2К,38)-И-((38)-9-((2-Метоксиэтил)амино)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3ил)-2,3-бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид

Препарат 21А. (3-((4-Метоксибензил)(2-метоксиэтил)амино)-2-нитрофенил)(фенил)метанон

Смесь (3-хлор-2-нитрофенил)(фенил)метанона (850 мг, 3,25 ммоль) и 2-метокси-Ы-(4метоксибензил)этанамина (3171 мг, 16,24 ммоль) нагревали при 100°С в течение 16 ч. Реакционную

- 58 022530 смесь распределяли между водой (50 мл) и ДХМ (50 мл), экстрагировали ДХМ (3x50 мл), сушили над Ыа₂8О₄ и очищали с использованием хроматографии на силикагеле (ступенчатый градиент: от 30 до 50% этилацетат/гексан) для выделения препарата 21А (780 мг, 57,1% выход) в виде коричневого масла.

ЖХ/МС (РНЕЫОМЕЫЕХ® Ьипа 5 мкм С18 4,6x30 мм, от 0 до 100 В в 2 мин с 1 мин временем задержки, скорость потока = 5 мл/мин, детектирование при 254 нм, растворитель А: 10% метанол/90% вода/0,1% ТфУ, растворитель В: 10% вода/90% метанол/0,1% ТФУ),

КТ = 2,32, МС (Е8) т/ζ = 443,10 [М+Ыа]+.

Препарат 21В. (2-Амино-3-((4-метоксибензил)(2-метоксиэтил)амино)фенил)(фенил)метанон

Препарат 21А (700 мг, 1,665 ммоль), цинк (1089 мг, 16,65 ммоль) и хлорид аммония (891 мг, 16,65 ммоль) в ЕЮН (40 мл) и воду (20 мл) нагревали до 90°С течение 5 мин. Реакционную смесь фильтровали через СЕЫТЕ®, распределяли между водой/ДХМ и экстрагировали 3x10 мл ДХМ, сушили над Ыа₂ЗО₄ и концентрировали, чтобы выделить препарат 21В (580 мг, выход 89%).

ЖХ/МС (РНЕЫОМЕЫЕХ® Ьипа 5 мкм С18 4,6x30 мм, от 30 до 100 В за 4 мин с 1 мин временем задержки, скорость потока = 5 мл/мин, детектирование при 254 нм, растворитель А: 10% метанол/90% вода/0,1% ТФУ, растворитель В: 10% вода/90% метанол/0,1% ТФУ),

КТ = 2,47 мин; МС (Е8): т/ζ = 391,16 [М+Н]+.

Препарат 21С. Бензил 9-((4-метоксибензил) (2-метоксиэтил)амино)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-

Препарат 21С получали из препарата 21В в соответствии с общей процедурой для препарата 50Ό (38,6% выход).

ЖХ/МС (РНЕЫОМЕЫЕХ® Ьипа 5 мкм С18 4,6x30 мм, от 30 до 100 В за 4 мин с 1 мин временем задержки, скорость потока = 5 мл/мин, детектирование при 254 нм, растворитель А: 10% метанол/90% вода/0,1% ТФУ, растворитель В: 10% вода/90% метанол/0,1% ТФУ).

КТ = 2,42 мин; МС (Е8): т/ζ = 579,22 [М+Н]+.

Пример 21.

Соединение примера 21 получали из препарата 21С с помощью общей последовательности реакций, как описано в примере 1. Полученные смеси диастереоизомеров разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ, обеспечивая соединение примера 21.

КТ = 2,13 мин; МС (Е8): т/ζ = 616,22 [М+Н]+.

Соединения сравнения от 22 до 25.

Соединения сравнения 22-25 могут быть получены в соответствии с процедурами, описанными в патенте США № 7053084 для примеров 8, 12а, 38 и 45а соответственно.

- 59 022530

Таблица 8

Соединения сравнения	υδ 7,053,084	Структура
22	Пример 8		сн·,
		^Нз? .0 о οχ-

		^Нзс^	СН₃
23	Пример 12а	о - Ы-хЧ	о )
		гт н	Λ Α νη₂
			ΤΪ
		ХХ н,с'сн,

24	Пример 38		_ХСН,
		^НА /> о
		οχ	гУ¹
		Чх	'СН₃
		С1
25	Пример 45а	н,с
		Я ΧγΝ ^н	1 о
		^НзС Чх	'СН₃

Пример 26. Фармацевтическая композиция, содержащая (2К,38)-Ы-((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид.

Составляли инъекционную форму лекарственного препарата, содержащую (2К,38)-Ы-((38)-1-метил2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид, пример 1, в качестве одноразового, готового к употреблению (КТи) стерильного раствора для внутривенного (IV) введения с использованием комбинации 50:50 (об./об.) очищенного полиоксиэтилированного касторового масла (ПАВ) и абсолютного спирта (растворитель). Лекарственный препарат был прозрачным, слегка мутным (опалесцирующим), от бесцветного до светло-желтого цвета стерильным раствором, хранится в 5-мл флаконах из свинцового стекла (тип I), закрытых 20 мм пробками, запечатанных 20-миллиметровыми алюминиевыми крышками. Концентрированная композиция может быть разбавлена перед введением с помощью обычно используемых внутривенных разбавителей, таких как физиологический раствор (N8) или 5% глюкоза, чтобы обеспечить физиологически приемлемый разбавленный продукт.

Таблица 11

Концентрированная фармацевтическая композиция

Компонент		Количество (мг/мл)
Пример 1	Активный фармацевтический ингредиент	1,2
Очищенное полиоксиэтилированное касторовое масло	солюбилизатор	0,5
Абсолютный спирт	растворитель	0,5

Концентрированная фармацевтическая композиция, как было обнаружено, является стабильной при хранении при 25°С/60% относительной влажности, 40°С/75% относительной влажности и 50°С в течение трех месяцев. Кроме того, исследования фотостабильности (ШЬ/υνΑ) показали, что продукт не нужда- 60 022530 ется в защите от света. Концентрированная композиция примера 1 обладала долгосрочной стабильностью при хранении, в том числе химической и физической стабильностью.

Перед внутривенным введением концентрированную фармацевтическую композицию разбавляли физиологическим раствором (N8) или 5% глюкозой в воде (Ό5ν) в концентрации между 0,01 и 0,06 мг/мл. Результаты исследований, касающиеся времени использования/совместимости показали, что продукт, разбавленный в N8 или Ω5\ν в концентрации в диапазоне от 0,01 мг/мл до 0,06 мг/мл, был совместим с мешками для инфузии из материалов, отличающихся от ПВХ и ДЭГФ. Результаты не показали никаких изменений, по существу, через 24 ч хранения при температуре от 2 до 8°С или комнатной температуре/комнатное освещение (25°С и около 5000 люкс).

Биологические исследования.

Фармакологические свойства соединений в соответствии с настоящим изобретением могут быть подтверждены рядом биологических исследований. Иллюстративные биологические исследования, которые следуют далее, осуществлялись с соединениями в соответствии с настоящим изобретением.

Исследования трансактивации №1ск-СВЕЕ

Исследования на основе клеток трансактивации №1сН-СВЕ1 (С-ргото1ег ЬиЛтд ГасЮг 1) основаны на способности высвобождающихся ΝοΚίι фрагментов внутриклеточного домена (ΝΚ'Όδ) функционировать в качестве транскрипционных факторов в сочетании с СВЕ1 и другими ядерными факторами. Люциферазные анализы использовали для измерения антагонизма №1ск-СВЕ1 транскрипционной активности. Клетки рака шейки матки НеЬа транзиентно котрансфицировали плазмидами рС^NА3.1/Ну§^ο, содержащими усеченные №Юк 1, №1ск 2, ΝοΐΛ 3 или №Юк 4 рецепторами и репортерным вектором люциферазы ΡΟΕ3, содержащим 4 копии СВЕ1-связывающего сайта. Затем клетки тестировали на ΝοΐΛСВЕ1 активность в отсутствие или в присутствии тестируемых соединений. НеЬа клетки, поддерживаемые в ИМЕМ (с высоким содержанием глюкозы с НЕΡЕ8), 1х глутамин/пенициллин/стрептомицин и 10% фетальной бычьей сыворотки, транзиентно трансфицировали в Т175 колбе (4,5х10⁶ клеток/колбу) с использованием набора для трансфекции ΜοηκίΌΓ Тгап8Гес1юп ΚίΙ (Μίηίκ #МIΚ2906) в соответствии с спецификациями завода-изготовителя. Табл. 9 показывает соответствующее количество ДНК для трансфекции.

Таблица 9

	ϋΝΑ (мкг)	СВР1 (мкг)	УесЮг (мкг)	То1а1 ϋΝΑ (мкг)
человеческий Νοίοΐι 1	6	14,4	15,6	36,0
человеческий 1\о[сН 2	2	14,4	19,6	36,0

	ΟΝΑ (мкг)	СВР1 (мкг)	УесЮг (мкг)	То1а1 ΟΝΑ (мкг)
человеческий Νοίοΐι 3	0,3	14,4	21,3	36,0
человеческий ΝοίοΙι 4	4	14,4	17,6	36,0

Через 6 ч после трансфекции клетки обрабатывали трипсином и высевали в 384-луночный черный покрытый поли-Э-лизином планшет для тканевых культур с плотностью 5х10³ клеток/лунку в 95 мкл среды для анализа (ИМЕМ (с высоким содержанием глюкозы с НЕΡЕ8), 1х глутамин/пенициллин/стрептомицин, 0,0125% БСА, 1х заменимых аминокислот). Среду для анализа (5 мкл), содержащую тестируемые соединения в конечной концентрации в диапазоне от 5 до 8,4х10^-5 мкМ (3-кратные серийные разведения), добавляли к клеткам и клеточные планшеты затем инкубировали в течение 18 ч при температуре 37°С и 5% СО₂. Контрольные лунки, содержащие ДМСО в качестве носителя (общий счет) или 0,5 мкМ внутрилабораторный низкомолекулярный ингибитор (фоновый счет). Для каждого образца использовали дубли. Активность люциферазы измеряли после 20-минутной инкубации с 50 мкл реагентов для люциферазного анализа 8ТЕАОУ-ОЬО® в соответствии со спецификацией производителя (Тготеда. Са1. # Е2550) и анализировали с помощью планшетного ридера ЕпЛкюп (ТегктЕНпег. Вο8ΐοη, МА). Антагонистическое действие соединений выражали как 100 х [1 - (средний образец - средний фон)/(среднее общее - средний фон)], где образец представляет собой люциферазную активность в присутствии тестируемого соединения, фон равен люциферазной активности в присутствии низкомолекулярного ингибитора контроля, общее представляет собой сигнал, индуцированный в ячейках ДМСО. Данные были нанесены использованием 4-параметрического логистического эмпирического уравнения, и значение Κ.'₅₀ определяли как концентрацию соединения, которая ингибирует 50% активности люциферазы.

В табл. 10 перечисляются ΝοΐΛ 1 и ΝοΐΛ 3 Κ'₅₀ для примеров 1-21 в соответствии с настоящим изобретением и соединений сравнения 22-25, измеренных в исследовании №1ск-СВЕ1 трансактивации, описанном выше. Результаты, приведенные в табл. 10, округляли до 2 цифр. Соединения в соответствии с настоящим изобретением на примере примеров 1-21 показали значения Κ'₅₀ для ΝοΐΛ 1 6,6 нМ или меньше и для ΝοΚίι 3 13 нМ или меньше.

- 61 022530

Таблица 10

Пример	Νοίοΐι 1 (1С₅о, нМ)	ΝοΙιίι 3 (1С₅₀, нМ)
1	1,6	3,4
2	1,7	3,3
3	3,1	4,7
4	1,5	2,5
5	1,2	5,9
6	6,5	10
7	1,5	2,8
8	4,9	8,1
9	4,4	8,2
10	2,9	4,6
11	1,3	2,0
12	2,5	4,2
13	2,1	3,8
14	5,2	13
15	12	16
16	4,2	6,4
17	3,6	7,1
18	0,53	2,3
19	1,3	3,8
20	2,9	4,2
21	1,5	4,2
соединения сравнения 22	64	48
соединения сравнения 23	42	75
соединения сравнения 24	5,1	13
соединения сравнения 25	12	12

Высокопроизводительная (НТ) панель метаболической стабильности.

Соединения, вводимые парентерально, попадают в кровоток и подвергаются одному или нескольким проходам через печень. Соединения, которые не легко метаболизируются в печени, можно вводить при терапевтически эффективных уровнях в плазме в течение терапевтически эффективного периода времени.

Перорально введенные соединения обычно всасываются через стенки кишечника в кровь и подвергаются первому проходу через печень. Соединения, которые не легко метаболизируются в этом первом прохождении через печень, могут распределяться в другие области тела в терапевтически эффективных количествах.

Анализ метаболической стабильности оценивал СУБ-опосредованную метаболическую стабильность ίη νίίΓΟ с использованием человеческих, крысиных, мышиных, собачьих, и/или обезьяних микросом после 10-минутной инкубации.

Каждое соединение тестировали в двух повторах.

Результаты этих анализов выражали как доля исходного соединения, оставшаяся в реакционной смеси после 10 мин инкубации (в процентах оставшегося). В целом эти результаты использовали для оценки только степени СΥΡ-опосредованного или NΑ^ΡН-зависимого метаболизма исследуемого соединения. Если соединение метаболизируется значительно (<40-50% оставшегося), это показывает высокий клиренс соединения ίη νίνο вследствие СУГ-опосредованного метаболизма. Однако, если соединение показало умеренный (50-80%) или низкий (>85%) метаболизм в этих анализах ίη νίίτο, высокий клиренс еще является возможным ίη νίνο через другие метаболические пути и пути выведения.

Процент результатов оставшегося в этих анализах прогнозировал клиренс соединения ίη νίνο при условии, что СΥΡ-опосредованный метаболизм был преобладающим путем элиминирования. В микросомальных образцах различных видов результаты находились приблизительно в диапазонах, как показано в табл. 11.

- 62 022530

Таблица 11

Метаболическая стабильность - руководящие принципы по интерпретации результатов

СУР- опосредованный клиренс	Процент оставшегося после 10 минут
Человек	Крыса	Мышь	Собака	Обязъяна
Низкий	>90	>85	>85	>90	>85
Средний	60-90	40-85	50-85	55-90	40-85
Высокий	<60	<40	<50	<55	<40

Табл. 12 представляет СУР-опосредованную метаболическую стабильность в примерах 1-21 в соответствии с настоящим изобретением и соединений сравнения от 22 до 25, измеренная в образцах человека и мышей анализов на метаболическую стабильность. Результаты, приведенные в табл. 12, округлены до 2 цифр. В анализах в микросомах печени значение 0% оставшегося указывала на полный СУРопосредованный метаболизм исследуемого соединения, а значение 100% указывает на отсутствие обнаруживаемого СУР-опосредованного метаболизма исследуемого соединения. Соединения настоящего изобретения, как проиллюстрировано в примерах 1-21, имели значения метаболической стабильности 80% или более оставшегося в микросомах печени человека (НЬМ) и 72% или более оставшегося для микросомах печени мыши (МкЬМ). В противоположность, соединения сравнения 22-25 имели значения метаболической стабильности 39% или менее оставшегося для микросом печени человека и 15% или менее оставшегося для микросом печени мышей.

Таблица 12

Пример	0,5 мкМ НЬМ (% оставшегося)	0,5 мкМ М4М (% оставшегося)
1	97	91
2	88	86
3	84	91
4	100	91
5	100	98
6	100	100
7	93	72
8	96	100
9	100	87
10	96	98
11	97	98
12	100	100
13	100	97
14	100	95
15	100	93

- 63 022530

16	80	91
17	100	96
18	100	100
19	96	97
20	100	100
21	98	82
соединение сравнения 22	39	15
соединение сравнения 23	19	9,0
соединение сравнения 24	21	13
соединение сравнения 25	2,7	0,18

Соединения в соответствии с настоящим изобретением (примеры 1-21) сравнивали с соединениями сравнения 22-25, раскрытыми в патенте США № 7456172, и, как было обнаружено, обладают особенным преимуществом. Соединения в соответствии с настоящим изобретением обладают неожиданным преимуществом комбинации активности в качестве ингибиторов Νοίαΐι 1 и Νοίαΐι 3 и превосходную метаболическую стабильность в микросомах печени. Как показано в табл. 10 и 12, доложенных исследованиях, примеры 1-21 в соответствии с настоящим изобретением имели значения 1С₅₀ Νοίαΐι 1 6,6 нМ или менее и значения 1С₅₀ Νοίαΐι 3 13 нМ или менее, а значения метаболической стабильности 80% или более оставшегося для микросом печени человека (НЬМ) и 72% или более оставшегося для микросом печени мыши (МкЬМ). В противоположность этому, в аналогичных исследованиях соединений сравнения 22-25 значения 1С₅₀ были для Νοίαΐι 1 5,1 нМ или больше и значения 1С₅₀ для Νοίαΐι 3 были 13 нм или больше, и величины метаболической стабильности были 39% или менее оставшегося в микросомах печени человека и 15% или менее оставшегося в микросомах печени мышей.

Материалы и методы.

Инкубация с микросомами печени.

Исследуемое соединение получали в виде 3,5 мМ сток-раствора в 100% ДМСО. Исследуемое соединение разбавляли, чтобы получить 50 мкМ раствор в ацетонитриле (ΛΟΝ), содержащий 1,4% ДМСО, который затем использовали в качестве 100х сток-раствора для инкубации с микросомами. Каждое соединение исследовали на метаболическую стабильность в двух повторах отдельно в наборах для исследования в каждом из трех видов - человеке, крысе и мыши или для отдельных видов в качестве наборов на метаболическую стабильность-собака или метаболическая стабильность-обезьяна. Соединение, ΝΑΩΡΒ и растворы микросом печени объединяли для инкубации в три стадии:

1) 152 мкл суспензии микросом печени, концентрация белка 1,1 мг/мл в 100 мМ ΝαΡι, рН 7,4, 5 мМ МдС1₂ буфер, предварительно нагревали при 37°С;

2) 1,7 мкл 50 мкМ соединения (98,6% ΑίΝ, 1,4% ДМСО) добавляли к той же пробирке и предварительно инкубировали при 37°С в течение 5 мин);

3) реакцию инициировали добавлением 17 мкл подогретого раствора 10 мМ ΝΑΩΡΒ в 100ММ ΝαΡ], рН 7,4.

Реакционные компоненты тщательно перемешивали и 75 мкл реакционной смеси немедленно переносили в 150 мкл гасителя/стоп-реагента (нулевой момент времени Т₀). Реакции инкубировали при 37°С в течение 10 мин и затем дополнительные 75 мкл аликвоты переносили в 150 мкл стоп-реагента. Ацетонитрил, содержащий 100 мкМ ИМИ (УФ стандарт для контроля качества инъекций), использовали в качестве стоп-раствора для прекращения метаболических реакций.

Смеси после добавления стоп-реагента центрифугировали при 1500 об/мин (~500х§) в центрифуге А11едга® Х-12 с ротором 8X4750 (Весктап С'ои11ег 1пс., РиПсгЮп. СА) в течение 15 мин, чтобы осадить денатурированные микросомы. Объем 90 мкл экстракта супернатанта, содержащего смесь исходного соединения и его метаболитов, затем переносили в отдельный 96-луночный планшет для анализа ИУЬС/М8-М8, чтобы определить процент исходного соединения, которое оставалось в смеси.

- 64 022530

Таблица 13

Анализ на метаболическую стабильность - реакционные компоненты

Реакционные компоненты	Конечная концентрация в анализе на метаболическую стабильность
Соединение (субстрат)	0,5 мкМ
ЧаР' буфер, рН 7,4	100 мМ
ДМСО	0,014%
Ацетонитрил	0,986%
Микросомы (человеческие, крысиные, мышиные) (Βϋ/Οβηΐβ5ΐ)	1 мг/мл белка
ΝΑΓ1ΡΗ	1,0 мМ
м_ёС1₂	5,0 мМ
37°С Время инкубации	0 минут и 10 минут
гасителя/стоп реагент (АСК-100 мкМ ПМЧ)	150 мкл
Образец реакции	75 мкл
Осаждение денатурированных микросом	15 минут
иУ-ЬС/МЗ анализ супернатанта	0,17 мкМ

Анализ образцов - приборы.

ВЭЖХ: насос - ТЬегто 8итуеуот; автосамплер - СТС/ЬЕАГ НТ§;

УФ-детектор - ТЬегто 8игуеуог ΡΌΑ р1и§;

колонка - νοΓίηη С18, 3 мкм, 2/20 мм с 0,5 мкм встроенным фильтром;

подвижная фаза для предварительного анализа целостности структуры: (А) 98% воды, 2% ацетонитрила в 10 мМ ацетата аммония, (В) 10% воды, 90% ацетонитрила с 10 мМ ацетата аммония;

подвижная фаза для анализа реакционных образцов: (А) 98% воды, 2% ацетонитрила с 0,1% муравьиной кислоты; (В) 2% воды, 98% ацетонитрила с 0,1% муравьиной кислоты; (С), 0,1% гидроксида аммония в воде; (Ό) 0,1% гидроксида аммония в ацетонитриле.

Масс-спектрометр: ТЬегто Т§0 ОнаШит иИта йтр1е-циа6гаро1е та§8 5рес1готе1ег.

Анализ образцов: предварительный анализ целостности структуры.

Предварительный анализ метаболической стабильности целостности структуры использовали для оценки чистоты соединения, которые собирались анализировать.

Соединения получали в 96-луночных планшетах в виде 57 мкл 3,5 мМ раствора в ДМСО. 3,5 мМ сток-растворы соединений в ДМСО разбавляли в 18 раз раствором, содержащим равные объемы ацетонитрила, изопропанола и ΜίΙΙίρ-^0. Полученные растворы (200 мкМ) анализировали на целостность структуры с помощью ЬС-υν/Μδ на ТЬегто ЬС’О Веса ΧΡ Ρ1ιΐ5 юп 1гар та88 5рес1готе1ег, используя колонку \Уа1ег5 ΧΒτίά^ С18, 5 мкм, 2/50 мм с предколонкой \Уа1ег5 §еп1гу 2,1 мм и ЬС условиях, описанных в табл. 14, используя 5 мкл инъекции и скорости потока 1 мл/мин. Полученные данные отражали чистоту по УФ-поглощению при 220 нм. Приведены только результаты для соединений с чистотой более 50%.

Таблица 14

Метаболическая стабильность - градиент при определении структурной целостности

Время градиента (мин)	А%	В%
0,00	100	0
4,00	0	100
5,00	0	100
5,10	100	0
6,00	100	0

Анализ образцов - инкубированные образцы.

Оптимизацию условий Μ§/Μ§ проводили на тройном квадрупольном масс-спектрометре ТЬегто Т§0 ОиаШит, оснащенном источником ионизации нагреваемого электрораспыления (Н-Е§1) посредст- 65 022530 вом автоматизированного введения образца для получения 8КМ (селективного мониторинга реакций) переходов и соответствующих им значений энергии столкновения. Растворы соединения при концентрации 20 мкМ в смеси 1:1 метанол:вода вводили со скоростью потока 90 мкл/мин, затем комбинировали с подвижной фазой при скорости потока 50 мкл/мин перед введением в источник. Все соединения оптимизировали сначала с использованием подвижной фазы А и В (50% А и 50% В) и, если необходимо, с использованием подвижных фаз С и И (также в соотношении 50:50). Оптимизированные параметры, в том числе полярность, 8КМ-переход и энергия столкновения, сохраняли в базе данных Мютокой Лссе88. Условия для масс-спектрометрии, полученные из автоматической инфузии, использовали для анализа образцов инкубации из анализа метаболической стабильности. Вводимый объем составлял 5 мкл, и скорость потока была 0,8 мл/мин. Используемый градиент показан в табл. 18. Все образцы вводили с градиентом подвижной фазы А и В в первую очередь. При необходимости (например, по хроматографическим причинам) образцы вводили повторно с тем же градиентом, но с использованием подвижной фазы С и И. Все параметры БС-М8/М8 анализа собирали данные в электронном виде в файлы необработанных данных.

Таблица 15

Метаболическая стабильность - СгаФей. Анализ образцов

Время градиента (мин)	А% (или С%)	В% (или ϋ%)
0,00	95	5
0,20	95	5
0,30	0	100
1,05	0	100
1,10	95	5
1,50	95	5

Анализ данных.

Интеграцию пиков осуществляли с помощью программного обеспечения ХсаРЬиг®. Расчет процента оставшегося осуществляли посредством сравнения площадей пиков в БС-М8/М8 от образцов Т_10т1пи1е с образцами от образцов Т_0т1тц1е для каждого соединения.

Контроль качества.

Набор из трех соединений тестировали вместе с испытываемым соединением в каждом планшете для анализа. Данные считались приемлемыми и загружались, только если результаты для этих контрольных соединений попадали в ожидаемые пределы, указанные ниже.

Таблица 16

Исследования метаболической стабильности - значения для контрольного соединения от микросом различных видов

Соединение	Средний процент оставшегося ± 8ϋ
Человек	Крыса	Мышь	Собака	Обязъяна
Нефазодон	0,4 + 0,4	0,7 ±0,6	0,4 ± 0,3	0,4 ± 0,4	0,6 ±0,5
Верапамил	13,3 ±3,5	4,4 ±2,1	13,0 ±4,2	5,6 ± 1,8	0,5 ±0,5
Карбамезепин	96 ±6	84 ±9	90 ± 10	81 ±7	89 ± 13

8Б = стандартное отклонение.

Метаболическая стабильность - панель периода полувыведения.

Скорость обмена веществ и период полувыведения, определенные ίη νίίτο в микросомах печени человека или животного, использовали для определения собственного клиренса (СЬ_1п1) и печеночного клиренс (СЬР,Ь) соединения. Эти параметры были полезны для прогнозирования клиренса у человека ίη νίνο, что определяет уровень воздействия лекарственного препарата ίη νίνο (ОЬасР е! а1., Г РРагтасо1. Еxр. ТРег., 283:46-58 (1997); ОЬасР, Итцд Ме1аЬ. И15ро5., 27:1350-1359 (1999)).

Панель периода полувыведения - метаболическую стабильность оценивали как временную зависимость и скорость СУР-опосредованного ЩАИРН-зависимого) метаболизма ίη \Рго в микросомах у человека, крысы, мыши, собаки и обезьяны. Временная зависимость охватывает 45-минутную инкубацию и включает 0, 5, 10, 15, 30 и 45-минутные моменты времени, в каждом из которых измеряли количество испытуемого соединения, остающегося в смеси.

Руководящие принципы по интерпретации результатов.

Результаты этих анализов выражали как период полувыведения (Т_1/2, мин) и фракция исходного соединения, остающегося в реакционной смеси в каждой временной точке (в процентах оставшегося) так- 66 022530 же доложены. В целом эти результаты должны быть использованы для оценки только степени СУР-опосредованного или НЛЭРН-зависимого метаболизма исследуемого соединения. Когда соединение значительно метаболизируется (Т_1/2<8-14 мин), это показывает высокий клиренс ίη νίνο вследствие СУР-опосредованного метаболизма. Однако, если соединения показали умеренный (50-80%) или низкий (>85%) метаболизм в этих анализов ίη νίίτο, высокий клиренс еще возможен ίη νίνο через другие виды метаболизма и пути выведения. Результаты этих анализов были предсказаны посредством клиренса соединения ίη νίνο при условии, что СУР-опосредованный метаболизм был преобладающим путем элиминирования. В микросомах разных видов, диапазоны результаты были примерно такие, как показано в табл. 17.

Таблица 17

Метаболическая стабильность - время полувыведения - руководящие принципы по интерпретации результатов

СУР- опосредованный клиренс	Τι/г, мин
Человек	Крыса	Мышь	Собака	Обязъяна
Низкий	>70	>40	>50	>65	>40
Средний	14-70	8-40	10-50	12-65	8-40
Высокий	<14	<8	<10	<12	<8

Материалы и методы.

Микросомы печени получали от ΒΌ Β^οδс^еηсеδ-(^οЬи^η, МА) и УЛЭРН от АррПС’Нет Фс; все другие реагенты получали от фирмы §1§та.

Инкубация с микросомами печени.

Тестируемые соединения получали в виде 3,5 мМ сток-раствора в 100% ДМСО. Испытуемое соединение разбавляли до получения 50 мкМ раствора в ацетонитриле (АСЦ), содержащем 1,4% ДМСО, который затем использовали в качестве 100-кратного сток-раствора для инкубации с микросомами. Каждое соединение испытывали в микросомах печени человека, крысы, мыши, собаки и обезьяны. Растворы соединения, УЛЭРН и микросомы печени объединяли для инкубации в три стадии:

1) 450 мкл суспензии микросом печени, концентрации белка 1,1 мг/мл в 100 мМ NаΡ_Ь рН 7,4, 5 мМ МдС1₂ буфер, предварительно нагретый до 37°С;

2) 5 мкл 50 мкМ соединения (98,6% АСХ 1,4% ДМСО) добавляли к той же пробирке и предварительно инкубировали при 37°С в течение 5 мин;

3) реакцию инициировали добавлением 50 мкл подогретого 10 мМ раствора УАЭРН в 100 мМ NаΡ1, рН 7,4.

Компоненты реакции хорошо перемешивали и 65 мкл немедленно переносили в 130 мкл гасителя/стоп-раствора (нулевой момент времени Т₀). Реакционные смеси инкубировали при 37°С в течение 5, 10, 15, 30 и 45 мин и в каждой временной точке аликвоты по 65 мкл переносили в 130 мкл остановочного раствора. Ацетонитрил, содержащий внутренний стандарт (100 нг/мл), использовали в качестве остановочного раствора для прекращения метаболических реакций.

Остановленные (загашенные) смеси центрифугировали при 1500 об/мин (~500 г) в центрифуге АЬЬЕОКА® Х-12 с ротором 8X4750 (Βесктаη СоиПег Фс.. РиНеПон. СА) в течение 15 мин, чтобы осадить денатурированные микросомы. Объем 90 мкл супернатантного экстракта, содержащего смесь исходного соединения и его метаболитов, затем переносили в отдельный 96-луночный планшет для анализа ЖХ/МС-МС для определения процента исходного соединения, которое осталось в смеси.

- 67 022530

Таблица 18

Метаболическая стабильность - анализы времени полувыведения - реакционные компоненты

Реакционные компоненты	Конечная анализе стабильности	концентрация метаболической
Соединение (субстрат)	0,5 мкМ
КаР, буфер, рН 7,4	100 мМ
ДМСО	0,014%
Ацетонитрил	0,986%
Микросомы (человеческие, крысиные, мышиные) (ВО/ОеШел)	1 мг/мл белка
ΝΑΟΡΗ	1,0 мМ
М§С1₂	5,0 мМ
37°С Время инкубации	0, 5, 10, 15, 30 и 45 минут
гаситель/стоп реагент (АСМ+100 мкМ ΏΜΝ)	130 мкл
Образец реакции	65 мкл
Осаждение денатурированных микросом	15 минут

Анализ образцов - приборы.

ВЭЖХ: насос - δΐιίιηαύζιι ЬС-20 АО 5епе5 Ыпагу рцтрз; автосамплер - СТС/ЬЕАР НТ§.

Соединения примеров в соответствии с настоящим изобретением показали удивительные преимущества низкого клиренсе вследствие СУР-опосредованного метаболизма в анализах метаболической стабильности как у человека (НЬМ), так и мыши (МБЬМ). Соединения настоящего изобретения, как проиллюстрировано в примерах 1-2, 5-7, 9-14, 16, 18, 21-23 и 26, имели значения процента оставшегося в диапазоне от 60 до 100% для анализа микросом печени человека и от 25 до 100% для анализа микросом печени мыши. В отличие от этого соединения сравнения 60-61 имели значения процента оставшегося 7% или менее в анализах микросом печени человека и мыши. Сравнительных соединений 61-62 показали высокий клиренс как у человека, так и мыши в анализах метаболической стабильности, указывающий, что соединения удаляются посредством СУР-опосредованного метаболизма в печени.

Ксенотрансплантатные модели опухолей человека в мышах.

Всех грызунов получали из Наг1ап Бргадие Оа\\1еу Со. (Ιηάίαηαροΐίδ. Ιηάίαηα). и поддерживали среде свободной от аммиака в определенной и свободной от патогенов колонии. Всех мышей держали на карантине приблизительно 1 неделю перед их использованием для выращивания опухоли и определения эффективности лекарственной субстанции. Мышам давали корм и воду без ограничений. Программа ухода за животными из Вп51о1-Муег5 БцшЬЬ РЬагтасеиИса1 КезеагсЬ 1п5Йи1е полностью аккредитована Американской ассоциацией по аккредитации лабораторий Ашта1 Саге (АААЬАС). Все эксперименты проводились в соответствии с методами испытаний на животных и руководящих принципов Βή5ΐο1Муег5 БцшЬЬ (ВМ§). Ксенотрансплантаты выращивали и поддерживали подкожно (8С) в Ьа1Ь/с пи/пи пнДе или ИОЭ-БСШ мышах (Наг1ап Бргадие Оа\\1еу) с иммунной недостаточностью. Опухоли выращивали в виде подкожного трансплантата в соответствующей линии мышей (табл. 19) с использованием опухолевых фрагментов, полученных от донорных мышей.

- 68 022530

Таблица 22

Гистологические типы и линий мышей-хозяев/гендерные требования по размножению различных ксенотрансплантатов человеческих опухолевых у мышей

Тип опухоли	Г истология	Линия мышей	Пол
ТАЬЬ-1	АЬЬ	ΝΟϋ-ЗСГО	женский

НРВ-АЬЬ	АЬЬ	ΝΟΟ-ЗСЮ	женский
АЬЬ-51Ь	АЬЬ	КСЮ-ЗСГО	женский
ΜΏΑ-ΜΒ-157	грудная железа	ΝΟΟ-80ΙΏ	женский
МЛА-МВ-468	грудная железа	ΝΟΟ-ЗСГО	женский
РАТ-34	яичников	бестимусная	женский
РАТ-50	яичников	бестимусная	женский
РАТ-26	поджелудочная железа	бестимусная	женский
РАТ-27	поджелудочная железа	бестимусная	женский

Доклинические испытания по химиотерапии.

Требуемое количество животных, необходимое для получения значимого ответа, объединяли в начале эксперимента и каждому вводили подкожный имплантат фрагмента опухоли (~20 мг) с помощью 13-троакара. Опухоли позволяли расти до заранее определенного размера окна (опухоли за пределами этого диапазона исключались) и животных равномерно распределяли в различные группы лечения и контрольные группы. Типично брали по 8 мышей в каждой лечебной и контрольной группы, за исключением экспериментов, проведенных в 8АЬ-ЮР (они не включены в табл. 22) опухолевой модели, в которой типично было 5 мышей на лечебной и контрольной группе. Лечение каждого животного основывалось на индивидуальной массе тела. Леченные животные проверялись ежедневно на токсичность/смертность, связанную с лечением. Каждую группу животных взвешивали до начала лечения (^!ι), а затем снова после последней лечебной дозы (^!₂). Разница в массе тела (^!₂-^Т) представляет собой меру, связанную с токсичностью, связанную с лечением.

Ответ опухоли определяли посредством измерения опухоли с помощью кронциркуля два раза в неделю, пока опухоль не достигала заданного целевого размера 0,5 или 1 г в зависимости от типа опухоли. Масса опухоли (мг) оценивали по следующей формуле:

Масса опухоли = (длина х ширина²) 2.

Критерий ответа опухоли выражали через ингибирование роста опухоли (%ТСГ). Задержку роста опухоли определяли как разница во времени (дни), необходимого для леченных опухолей (Т), чтобы достичь заданного целевого размера по сравнению с контрольной группой (С). Для этой цели массу опухоли в группе выражали в виде средней массы опухоли (МТ^). Ингибирование роста опухоли рассчитывали следующим образом:

% ингибирования роста Опухоли =

То с,)

где С_! = средний размер опухоли в контроле в конце лечения;

С₀ = средний размер опухоли в контроле в начале лечения;

Т_! = средний размер опухоли в лечебной группе в конце лечения;

Т₀ = средний размер опухоли в лечебной группе в начале лечения.

Активность определяли как достижение длительного ингибирования роста опухоли на 50% или более (т.е. ТОШ50%) в течение периода, эквивалентного не менее 1 времени удвоения объема опухоли и медикаментозное лечение должно быть на срок, эквивалентный не менее 2 временам удвоения объема опухоли.

Ответ опухоли также выражали в терминах замедления роста опухоли (значение ТОЙ), определяемого как разница во времени (дни), необходимом для леченых опухолей (Т), чтобы достичь заданного целевого размера, по сравнению с контрольной группой (С).

Когда это возможно, противоопухолевую активность определяли в диапазоне уровней дозы до максимально переносимой дозы (МПД), которые определяли как уровень дозы непосредственно ниже тако- 69 022530 го, который вызывает чрезмерную токсичность (например, более чем одна смерть). Когда наступила смерть, день смерти записывали. Леченые мыши, умершие до того как опухоли, достигли целевого размера, считались умершими от токсичности препарата. Ни одной контрольной мышей с опухолями меньше целевого размера не умерло. Лечебные группы с более чем одной смертью, вызванной токсичностью препарата, рассматривались как имеющие чрезмерно токсичное лечение, и их данные не включали в оценки противоопухолевой эффективности соединения.

Потенциальное взаимодействие токсичности лекарственного препарата, влияющее на переносимость лечения, является важным фактором в испытаниях комбинированной химиотерапии. Интерпретация результатов комбинированной терапии должна быть основана на сравнении противоопухолевой активности наилучшего возможного ответа для отдельных агентов по сравнению с комбинацией при сравнительно переносимых дозах. Таким образом, терапевтический синергизм определяли как терапевтический эффект, достигаемый с помощью переносимого режима комбинированного средства, который превысил оптимальный эффект, достигаемый при любой переносимой дозы монотерапии. Статистический анализ данных проводили с использованием критерия Вилкоксона, обобщенного Геханом. 3а статистическую значимость принимали р<0,05.

Введение лекарственного препарата.

В ίη νίίτο исследованиях все агенты растворяли в 100%-ном ДМСО и серийно разводили в среда/10% фетальная бычья сыворотка. Для введения грызунам ΝοίεΗ ингибиторов использовали два различных вспомогательных состава: [1] 94% ЬаЪгаИ/5% ЕЮН/1% Т\А80 или [2] ЕЮН/ТРС8/РЕС300 (10:10:80). ΝοίΗι ингибиторы, как правило, вводят перорально по схеме: ОЭх 15, 10 дней введения, 2 дня без введения, хотя другие схемы также была оценены и было показано, что они эффективны. Например, режим дозирования, состоящий из ОЭх 12, 4 дня введения, 3 дня без введения, как было показано, является в равной степени эффективным, как рОх 15, дней введения, 2 дня без введения.

Противоопухолевая активность ίη νίνο.

Противоопухолевую активность соединения примера 1, введенного внутривенно (IV), оценивали в ксенотрансплантатах опухолей человека, имплантированных мышам. Как показано на фиг. 6, соединение примера 1 демонстрирует противоопухолевую активность.

Табл. 20 показывает противоопухолевую активность соединений примеров настоящего изобретения, измеренную в ксенотрансплантатах опухолей человека, имплантированных мышам. Соединения настоящего изобретения, как проиллюстрировано в примерах 1 и 2, показали противоопухолевую активность при пероральном введении (РО).

Таблица 20

Схема: ОЭх 15, 10 дней введения, 2 дня без введения; пероральное введение

Пример	Доза (мг/кг)	Противоопухолевая активность
ТАЫЛ (ЬСК)	МОА-МВ-157 (%ТС1)	МЛА-МВ-468 (%ТС1)
1	7,5-10	>4,7	89	78
2	24	2,4	85	87

(,)1) - один раз в день;

ЬСК - I ,ο« убитых клеток.

Пример 1 показывает широкий спектр противоопухолевой активности против широкого спектра человеческих ксенотрансплантатов рака, выращенных в мышах. Значительная противоопухолевая активность была продемонстрирована в 16 человеческих ксенотрансплантатах рака, включая человеческий Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак яичника, глиобластому, немелкоклеточный рак легкого, рак толстой кишки, остеогенную саркому и нейробластому (табл. 21).

- 70 022530

Таблица 21

Опухоль	Г истология	Противоопухолевая активность (% ТС1)^а
ТАЬЫ	Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз	112
Ра(-24	рак поджелудочной железы	111
ВТ-474	НЕВ2+ рак грудной железы	96
Ра(-26	рак поджелудочной железы	93
МПА-МВ468	ΤΝ рак грудной железы	91
Ра(-50	рак яичников	91
Ра(-34	рак яичников	89
и-87	мультиформная глиобластома (СВМ)	82
МВА-МВ157	ΤΝ рак грудной железы	81
Са1и-6	Немелкоклеточный рак легкого	81
НСТ116	рак толстой кишки	75

0292	остеогенная саркома	75
Ра(-21/АЬхК.	ΤΝ рак грудной железы (аЬх К.)	73
МСР7	эстроген-зависимый рак грудной железы	73
8Κ-Ν-Α5	нейробластома	67
МСР71	эстроген-независимый рак грудной железы	63

^а Все обработки были РО, ЦБх15, 10 дней введения, 2 дня без введения, в дозах в пределах от 5-10 мг/кг/введение.

Комбинированная химиотерапия.

В ряде исследований проводили оценку сочетаемости соединения примера 1 с рядом противоопухолевых агентов, включая дазатиниб, паклитаксел, тамоксифен, дексаметазон и карбоплатин.

I. Соединение примера 1 и дазатиниб.

Т-клеточный лимфобластный лейкоз человека использовали для оценки эффективности комбинации соединения примера 1 и дазатиниба. Лечение только дазатинибом производило противоопухолевый эффект 1,7 ЬСК (10 мг/кг/введение, ОЭх49, РО). Соединение примера 1 только производило умеренную активность 0,1-0,5 ЬСК в диапазоне дозы 3,75-7,5 мг/кг. Однако комбинация этих двух агентов производила синергетическую противоопухолевую активность, давая противоопухолевую эффективность >>2,6 ЬСК, что значительно превосходило один препарат дазатиниб в отдельности (Р<0,05). Кроме того, комбинация препаратов давала полный ответ (СК) у 100% мышей, в то время как ни один из агентов по отдельности производил СК (фиг. 7, 8 и табл. 22).

- 71 022530

Таблица 22

Противоопухолевая эффективность комбинированной химиотерапии при комбинации соединения примера 1 и дазатиниба при АЬЬ (Аси!е ЬутрЬоЫ1а8Йс Ьенкаепиа'Ц-МЬ (Екщатот, !п1гаер11Не11а1 Ьекюп?) Т-клеточном лимфобластном лейкозе

Лечение	Эффективность
Пример 1 Доза³ (мг/кг)	Дазатиниб Доза^ь (мг/кг)	Задержка роста опухоли³	РК (%)	СК (%)	Р
(ЬСК)	(дни)
7,5	-	0,1	1,9	0	0	-
3,75	-	0,5	8,7	0	0	-
-	10	1,7	30,2	0	0	1
7,5	10	»2,6	44	0	100	<0,05
3,75	10	»2,6	44	0	100	<0,05

^а Схема приема лекарств = РО, (,)1)/3- еженедельно /7.

^Ы Схема приема лекарств = РО, (,)Ι)ζ49. ^с Целевой размер опухоли = 1000 мг.

II. Соединение примера 1 и паклитаксел.

Противоопухолевую эффективность соединения примера 1 в комбинации с паклитакселом оценивали в карциноме молочной железы МЭА-МВ-468. Соединение примера 1 в качестве монотерапии производило 0,5-1,4 ЬСК в диапазоне дозы 3,75-7,5 мг/кг/введение. Паклитаксел, вводимый еженедельно в дозе 12 мг/кг/введение, давал 0,5 ЬСК (фиг. 9, 10 и табл. 23). Комбинация соединения примера 1 в дозовом диапазоне 3,75-7,5 мг/кг/введение и паклитаксела производила 3,4-4,1 ЬСК противоопухолевых эффектов, которые значительно превосходили эффекты одного агента и соединения примера 1 по отдельности (р=0,0006 и 0,0002 соответственно).

Таблица 23

Противоопухолевая эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и паклитаксела в карциноме молочной железы человека МОА-МВ-468

Лечение	Эффективность
Пример 1 Доза³ (мг/кг)	Паклитаксел Доза^ь (мг/кг)	Задержка опухоли³	роста	РК (%)	СК (%)	Р
(ЬСК)	(дни)
7,5	-	Ь4	21,2	0	0	1
3,75	-	0,5	7,8	0	0	-
-	12	0,5	7,8	0	0	-
7,5	12	4,1	61,8	50	0	0,0002
3,75	12	3,4	51,2	0	0	0,0006

^а Схема приема лекарств = РО, ^^χ3. еженедельно ж3.

^Ы Схема приема лекарств = IV, 070x6. ^с Целевой размер опухоли = 500 мг.

III. Соединение примера 1 и тамоксифен.

Противоопухолевую эффективность соединения примера 1 в комбинации с тамоксифеном оценивали в эстроген-рецептор положительных ксенотрансплантатах карциномы молочной железы человека МСР7, выращенных в женских особях ии/ии мышей. Соединение примера 1 в качестве монотерапии производило ингибирование роста опухоли (ТСЕ) на 43-58% в дозовом диапазоне 3,75-7,5 мг/кг/введение, без полной или частичной ремиссии. Тамоксифен, вводимый в дозе МПД 20 мг/кг/введение, ГР, 02 ОХ12, производил % ТΟI равный 78%, без полной или частичной ремиссии. Комбинации соединения примера 1 и тамоксифена давали выраженный синергетический эффект с % ТΟI равным 101 и 99 соответственно для соединения примера 1 в дозах 7,5 и 3,75 мг/кг/введение. Кроме того, приблизительно 50% мышей, получавших комбинации, испытали уменьшение размеров опухоли в виде РК или СК (фиг. 11, 12 и табл. 24).

- 72 022530

Таблица 24

Противоопухолевая эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и тамоксифена в карциноме молочной железы человека МСР7

Лечение	Эффективность
Пример 1 Доза³ (мг/кг)	Тамоксифен Доза” (мг/кг)	Задержка роста опухоли ТСГ	РК (%)	СК (%)	Р
7,5	-	58	0	0	0
3,75	-	43	0	0	-
-	20	78	0	0	1
7,5	20	101	43	0	0,0012
3,75	20	99	43	14	0,0087

^а Схема приема лекарств = РО, ЦБх3, еженедельно х3.

^Ь Схема приема лекарств = ΓΡ, (,)21)/10. ^с Целевой размер опухоли = 500 мг.

IV. Соединение примера 1 и дексаметазон.

Противоопухолевую эффективность соединения примера 1 в комбинации с глюкокортикоидом дексаметазоном оценивали в ксенотрансплантатах ^Β-ΛΕΡ лейкемии Т-ЛЬЬ человека, выращенной в ΝΟΌ-8ί'ΊΌ мышах. Соединение примера 1 в качестве монотерапии было активно в этой модели, давая 1,1 ЬСК при 7,5 трк (МПНдгатк кег КДодгатк?). Дексаметазон проявлял умеренную активность качестве монотерапии, производя 0,7 ЬСК при своем МТЭ равным 7,5 трк. Комбинация соединения примера 1 и дексаметазона производила 1,9 ЬСК, что значительно превосходило любую отдельную монотерапию по отдельности (фиг. 13 и табл. 25).

Таблица 25

Противоопухолевая эффективность комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и дексаметазона в остром лимфобластном лейкозе человека ΕΡΒ-ΛΓΕ

Лечение	Эффективность
Пример 1 Доза³ (мг/кг)	Дексаметазон Доза^ь (мг/кг)	Задержка роста опухоли^с ΙΡ, φ2ϋχ 10	РК (%)	СК (%)	Р
(ЬСК)	(дни)
7,5	-	1,1	9,5	0	0	0,0007
3,75	-	0,9	7,8	0	0	0,0007
-	7,5	0,7	5,8	0	0	0,0007
-	3,75	0,6	5,6	0	0	0,0007
3,75	7,5	1,9	16,5	0	0	1

^а Схема приема лекарств = РО, ΟΌ/3. еженедельно х3.

^Ь Схема приема лекарств = = Ρ. Ο2Ό/14. ^с Целевой размер опухоли = 3000 мг.

V. Соединение примера 1 и карбоплатин.

Противоопухолевая эффективность соединения примера 1 в комбинации с карбоплатином оценивали в ксенотрансплантате тератокарциномы яичников человека РА-1, выращенных в женской особи мышей пи/пи. Соединение примера 1 в качестве монотерапии производило 0,2 ЬСК в дозе 1 мг/кг/введение. Карбоплатин, вводимый еженедельно в дозе 90 мг/кг/введение, давал 2,1 ЬСК (фиг. 14 и табл. 26). Комбинация по примеру 1 в дозе 1 мг/кг/введение и карбоплатин производства>3,1 ЬСК противоопухолевых эффектов, которые значительно превосходили одного агента примера 1 соединения по отдельности (р=0,004).

- 73 022530

Таблица 26

Противоопухолевой эффективности комбинированной химиотерапии соединения примера 1 и карбоплатина в в тератокарциноме яичников человека РА-1

Лечение	Эффективность
Пример 1 Доза^а (мг/кг)	Дексаметазон Доза” (мг/кг)	Задержка роста опухоли⁰	СК (%)	РЕ. (%)	Вылеченные (%)	Р
(ЬСК)	(дни)
1	-	0,2	4	0	0	0	-
-	90	2,1	34,7	13	71	13	1
1	90	>3,1	>51,4	67	33	67	0,004

^а Схема приема лекарств = РО, ОЭх21 (1 мг/кг).

^ь Схема приема лекарств = IV, О7Эх3. ^с Целевой размер опухоли = 500 мг.

Рентгеновская дифрактометрия монокристаллов.

Данные по монокристаллу собирали на системе Вгикег АХ8-АРЕХ2 ССЭ с использованием СиКа излучения (λ=1,5418 А). Индицирование и обработки данных измерений интенсивности проводились с комплект программного обеспечения АРЕХ2. Когда это указывается, кристаллы охлаждают в холодной струе О.\Гога сгуо хуПет во время сбора данных. Структуры разрешали прямым методом и уточняли на основе наблюдаемых отражений с использованием 8НЕЬХТЬ. Полученные атомные параметры (координаты и температурные факторы) уточняли на основе полной матрицы наименьших квадратов. Функция, минимизированная в уточнениях, была Е»(|Р₀-|Р_с|)². К определяли как Е||Р0|-|Рс||/Е|Р0|, в то время как К„=[Е»(|Р0-|Рс|)²/Е»Р0|²]^1/2, где является соответствующей весовой функцией в зависимости от ошибок в наблюдаемой интенсивности. Как правило, все неводородные атомы уточняли анизотропно и все атомы Н, отличные от тех, которые прикреплены к Ν и О атомам, рассчитывали с помощью геометрических методов и уточняли с использованием πύίη§ тойе1.

Рентгеновская порошковая дифрактометрия.

Данные рентгеновской порошковой дифракции (РХКЭ) получали с использованием Вгикег СЛОО8 (Сепега1 Агеа Эе1ес1ог ОШтасВоп 8у51ет) с х-гониометром. Образцы порошка помещали в тонкостенные стеклянные капилляры 0,7 мм в диаметре; капилляры вращались во время сбора данных. Расстояние от образца до детектора поддерживали на уровне 17 см. Данные собирали с СиКа излучением (λ=1,5418 А) в диапазоне 2,5<2θ<35° с временем экспозиции образца 600 с.

Claims

1. Соединение формулы (I)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ где К! представляет собой -СН₂СР₃ или -СН₂СН₂СР₃;

К₃ представляет собой Н или -СН₃;

каждый К_а независимо представляет собой Р, С1, -СИ, -ОСН₃ и/или -МНСН₂СН₂ОСН₃; ζ равно 0, 1 или 2.

2. Соединение по п.1, в котором Κι представляет собой -СН₂СР₃ или -СН₂СН₂СР₃ и К₂ представляет собой -СН2СР3 или -СН2СН2СР3.

3. Соединение по п.1, в котором ζ равно 0 или 1.

4. Соединение по п.1, в котором Κι представляет собой -СН₂СН₂СР₃ и К₂ представляет собой -СН2СН2СР3.

5. Соединение по п.4, в котором ζ равно 0 или 1.

6. Соединение по п.1, в котором ζ равно 1 или 2.

7. Соединение по п.1, выбранное из (2Κ,38)-N-((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (1);

(2Κ,38)-N-((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (2);

(2Κ,38)-N-((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2-(2,2,2трифторэтил)-3 -(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамида (3);

(2Κ,38)-N-((38)-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(2,2,2трифторэтил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (4);

(2К,3 8)-Ν-((3 8)-1-(²Н₃)метил-2-оксо-5 -фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (5);

(2Κ,38)-N-((38)-7-хлор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (6);

(2Κ,38)-N-((38)-8-метокси-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (7);

(2Κ,38)-N-((38)-8-фтор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (8);

(2Κ,38)-N-((38)-7-метокси-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (9);

(2Κ,38)-N-((38)-7-фтор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (10);

(2Κ,38)-N-((38)-8-хлор-1-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (11);

(2Κ,38)-N-((38)-9-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (12);

(2Κ,38)-N-((38)-8-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (13);

(2Κ,38)-N-((38)-7-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (14);

(2Κ,38)-N-((38)-8-циано-9-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (15);

(2Κ,38)-N-((38)-8,9-дихлор-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (16);

(2Κ,38)-N-((38)-9-фтор-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (17);

(2Κ,38)-N-((38)-9-хлор-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис-(3,3,3трифторпропил)сукцинамида (18);

(2Κ,38)-N-((38)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (19);

(2Κ,38)-N1-((38)-8-метокси-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4- 75 022530 трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (20) и (2К,38)-^((38)-9-((2-метоксиэтил)амино)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)2,3-бис-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (21).

8. Соединение по п.1, выбранное из:

9. Соединение по п.8, где указанное соединение представляет собой

10. Соединение по п.9, где указанное соединение находится в кристаллической форме Ν-1, которая характеризуется одним из следующих:

a) симулированной порошковой рентгеновской дифрактограммой, по существу, такой, как показано на фиг. 1, и/или наблюдаемой картиной РХКЭ, по существу, такой, как показано на фиг. 1;

b) порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей четыре или более, предпочтительно пять или более значений 2Θ (СиКа λ=1,5418 А), выбранных из 5,7±0,2, 7,5±0,2, 10,3±0,2, 10,7±0,2, 15,2±0,2, 16,8±0,2, 20,2±0,2 и 20,7±0,2, где порошковая рентгенограмма формы Ν-1 измеряется при температуре около 20°С;

c) параметрами элементарной ячейки, по существу, равными следующим: размеры ячейки:

а = 9,41 А,

Ь = 17,74 А, с = 31,94 А, а = 90,0°, β = 98,4°, γ = 90,0°;

пространственная группа: Р21;

молекулы указанного соединения/асимметричную единицу: 4, где параметры элементарной ячейки формы Ν-1 измеряются при температуре около 10°С; и/или ά) относительными координатами атомов, по существу, как перечислены в следующей далее таблице, при температуре около 25°С.

- 76 022530

X У Ζ и (экв.)' N(7) 10824(5) 7415(3) 1732(1) 39(1) N(3) 4985(5) 565(2) 1293(1) 33(1) 0(3) 7152(4) 45(2) 1509(1) 45(1) N(8) 9981(6) 10557(3) 1329(2) 60(2) 0(7) 12033(5) 10000(2) 1229(1) 55(1) 0(6) 8697(5) 7992(2) 1768(1) 53(1) Р(4) 11039(5) 8541(3) 79(1) 76(1) С(17) 5836(7) 8(3) 1469(1) 30(1) N(11) 3979(5) 1500(3) 3735(1) 35(1) N(2) 5338(6) 2530(3) 994(1) 41(1) С(8) 7012(6) 1237(3) 77(2) 35(1) N(15) 9277(5) 4606(3) 3230(1) 37(1) С(39) 9990(7) 8020(3) 1739(2) 36(1) 0(2) 3365(5) 1827(2) 1076(1) 49(1) N(6) 10513(6) 5383(3) 1910(2) 46(1) С(41) 10028(6) 9204(3) 1300(2) 36(1) С(18) 5094(6) -692(3) 1616(2) 33(1) С(22) 5502(6) -1369(3) 1360(2) 34(1) С(23) 4828(7) -2081(3) 1501(2) 35(1) С(2) 6832(7) 2584(3) 978(2) 44(2) С(14) 5639(7) 1198(3) 1113(2) 37(1) С(36) 10130(7) 6682(3) 1698(2) 37(1) С(15) 4647(7) 1875(3) 1071(2) 37(1) 0(14) 3524(5) -2130(3) 1484(2) 63(1) 0(9) 5867(5) 1970(2) 3461(1) 46(1) С(64) 4608(7) 2008(3) 3517(2) 35(1) С(49) 7025(7) 893(4) 5004(2) 47(2)

- 77 022530

0(12) 7212(5) 3943(2) 3143(1) 57(1) Р(5) 8960(5) 8082(2) 93(1) 73(1) С(33> 8030(8) 6274(4) -21(2) 55(2) N(5) 9704(5) 6528(3) 1249(1) 36(1) С(42) 10783(8) 9965(4) 1287(2) 46(2) 0(5) 12472(5) 6155(3) 1945(1) 62(1) С(37) 11163(8) 6062(4) 1872(2) 46(2) Г(7) 9290(6) 2987(3) 5202(1) 94(2) С(65) 3707(6) 2688(3) 3341(2) 33(1) N(4) 5716(6) -2636(3) 1628(2) 53(1) С(7) 6778(6) 1429(3) 518(2) 34(1) 0(8) 2612(5) 231(2) 3943(1) 53(1) 0(11) 10584(6) 5864(3) 3001(1) 61(1) С(89) 8963(6) 2807(3) 3658(2) 41(1) С(70) 4269(7) 3355(4) 4041(2) 47(2) N(13) 8438(5) 5493(3) 3689(1) 37(1) С(20) 5588(7) -808(3) 2089(2) 38(1) С(85) 9369(8) 5946(4) 3070(2) 46(2) N(14) 8611(7) 6593(3) 3016(2) 55(1) N(16) 8948(7) 1437(3) 3656(2) 68(2) N(9) 5416(5) 1109(3) 4375(1) 37(1) С(71) 4930(8) 4055(3) 4280(2) 51(2) N(12) 4314(6) 4592(3) 3189(2) 68(2) С(1) 7546(7) 2068(3) 746(2) 41(2) 0(13) 11084(5) 2050(3) 3796(2) 67(1) С(73) 7471(7) 6206(4) 4209(2) 46(2) С(6) 9033(7) 2147(4) 744(2) 51(2) С(88) 9391(7) 3239(3) 3270(2) 44(2) С(40) 10716(7) 8794(3) 1708(2) 41(1) С(54) 7871(7) 381(4) 5261(2) 47(2) С(67) 3574(8) 4095(4) 3382(2) 51(2) Р(6) 8838(6) 3995(2) 4842(1) 84(1)

- 78 022530

С(79) 7137(9) 6649(4) 3054(2) 56(2) С(24) 8991(7) 5283(3) 1841(2) 45(2) С(31) 8282(6) 5837(3) 703(2) 37(1) С(47) 9570(7) 9167(4) 501(2) 46(2) С(63) 4839(6) 898(3) 3940(2) 34(1) С(90) 9762(7) 2060(3) 3707(2) 45(2) С(55) 6443(6) 715(3) 4559(2) 39(1) С(68) 3723(8) 2732(4) 2864(2) 60(2) С(59) 8345(10) -1056(5) 3924(2) 70(2) С(75) 7821(8) 5880(5) 4945(2) 68(2) С(32) 8425(7) 6417(3) 405(2) 50(2) 0(10) 2312(5) 4203(3) 3420(2) 75(2) С(48) 9694(8) 8740(4) 112(2) 57(2) N(10) 4682(6) -430(3) 4071(1) 46(1) С(60) 9196(10) -525(5) 4132(3) 78(3) С(72) 7560(6) 5996(3) 3766(2) 38(1) С(11) 7228(8) 906(5) -774(2) 65(2) С(95) 9510(8) 3334(4) 4845(2) 56(2) С(86) 8534(6) 5301(3) 3249(2) 36(1) С(16) 4463(10) 3237(4) 980(2) 75(3) С(62) 3917(7) 205(4) 3981(2) 43(2) С(46) 10181(7) 8747(4) 901(2) 44(2) С(57) 6210(8) -445(3) 4106(2) 51(2) С(30) 8759(6) 5995(3) 1157(2) 35(1) С(66) 4345(6) 3404(3) 3568(2) 37(1) С(87) 8540(6) 3940(3) 3212(2) 40(1) С(93) 9371(7) 3266(3) 4063(2) 46(2) С(58) 6870(9) -1041(4) 3907(2) 60(2) Р(2) 11777(9) 10008(4) 2879(2) 151(3) С(74) 7871(7) 5699(4) 4528(2) 55(2) С(25) 8132(7) 5566(3) 1483(2) 41(1) С(4) 9061(10) 3259(5) 1173(2) 76(2)

- 79 022530

С(26) 6645(7) 5450(3) 1443(2) 48(2) С(12) 7727(9) 1590(5) -595(2) 66(2) С(56) 7085(7) 83(4) 4344(2) 45(2) С(34) 7488(7) 5600(4) -167(2) 55(2) С(9) 6519(7) 574(4) -101(2) 49(2) С(3) 7607(10) 3182(4) 1190(2) 66(2) С(81) 5158(10) 6468(4) 3438(2) 76(2) С(45) 11099(16) 9317(7) 2895(3) 121(4) С(43) 10543(9) 9268(4) 2103(2) 64(2) Р(3) 9787(11) 9550(9) 2938(2) 245(7) С(53) 8327(8) 558(5) 5683(2) 66(2) С(29) 8344(10) 4873(4) 2138(2) 61(2) С(5) 9774(10) 2734(5) 964(2) 76(2) С(80) 6621(7) 6399(3) 3417(2) 53(2) С(94) 9050(7) 2877(4) 4460(2) 51(2) С(38) 11435(9) 4768(4) 2102(2) 71(2) С(13) 7606(7) 1760(3) -179(2) 48(2) С(61) 3913(9) -1147(4) 4095(2) 71(2) С(52) 8010(10) 1214(6) 5841(2) 79(2) С(10) 6633(9) 406(4) -526(2) 68(2) С(35) 7696(8) 5160(4) 553(2) 57(2) С(84) 9357(12) 7262(4) 2869(3) 91(3) С(91) 9330(8) 2785(4) 2864(2) 59(2) С(27) 6019(9) 5060(4) 1739(2) 69(2) С(44) 11196(10) 8906(4) 2495(2) 78(2) С(69) 3191(8) 2018(4) 2628(2) 61(2) С(78) 7034(8) 6922(4) 4311(2) 64(2) С(83) 6199(12) 7012(5) 2740(3) 87(3) С(82) 4221(10) 6784(6) 3121(4) 100(3) С(51) 7187(10) 1748(5) 5591(2) 79(2) С(76) 7428(9) 6592(6) 5047(2) 80(3) Р(1) 11661(10) 8983(5) 3228(2) 186(4)

- 80 022530

С(50) 6711(8) 1571(4) 5174(2) 58(2) С(77) 7057(9) 7114(5) 4734(3) 85(3) N(1) 5875(5) 999(2) 684(1) 34(1) С(102) 5582(7) -1953(3) 630(2) 49(2) С(101) 5084(7) -1277(3) 879(2) 44(2) С(100) 5214(10) -152(4) 2344(2) 73(2) С(104) 7326(8) 5036(4) 115(2) 70(2) С(28) 6897(11) 4774(4) 2086(3) 75(2) Р(40) 9173(5) 9112(2) -241(1) 74(1) С(105) 8587(8) 41(4) 4352(2) 60(2) С(124) 2922(10) 2104(6) 2165(3) 82(3) Р(42) 4029(8) 2397(5) 2012(2) 142(3) Р(43) 1850(8) 2595(5) 2046(2) 134(2) Р(41) 2570(8) 1475(4) 1965(2) 139(2) С022) 5045(7) 3962(4) 4744(2) 51(2) Р(44) 5920(5) 3370(2) 4887(1) 74(1) Р(45) 5616(5) 4563(2) 4959(1) 75(1) Р(46) 3833(5) 3823(2) 4879(1) 75(1) С0О8) 4748(13) 7054(5) 2773(3) 100(3) Р(47) 8547(9) 2143(4) 2026(2) 152(3) Р(48) 6731(8) 1653(4) 2180(2) 145(2) р(49) 10919(5) 3510(3) 4901(1) 81(1) С(123) 7913(9) 2494(5) 2683(2) 73(2) С(121) 7997(12) 1902(6) 2341(3) 89(3) С(120) 5377(8) -1834(4) 184(2) 53(2) С0О9) 5564(11) -282(5) 2811(2) 79(3) Р(55) 3970(4) -1704(2) 15(1) 70(1) Р(54) 6048(5) -1235(2) 59(1) 67(1) Р(56) 5748(5) -2425(2) -34(1) 69(1) Р(53) 4868(7) -845(3) 2948(1) 100(2) Р(51) 5179(13) 300(4) 3035(2) 189(4) Р(52) 6924(8) -420(6) 2920(2) 181(4) Р(60) 8732(11) 1307(3) 2477(2) 192(4)

11. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая соединение по любому из пп.1-10 и фармацевтически приемлемый носитель.

12. Применение соединения по любому из пп.1-10 в терапии при лечении рака.

13. Применение соединения по любому из пп.1-10 в изготовлении лекарственного средства для лечения рака.

14. Комбинация соединения по любому из пп.1-10 с одним или более дополнительных агентов, выбранных из дазатиниба, паклитаксела, тамоксифена, дексаметазона и карбоплатина, для лечения рака для последовательного или параллельного введения.