EA021798B1 - Бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, обладающие ингибирующей nos активностью - Google Patents

Бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, обладающие ингибирующей nos активностью Download PDF

Info

Publication number
EA021798B1
EA021798B1 EA201170130A EA201170130A EA021798B1 EA 021798 B1 EA021798 B1 EA 021798B1 EA 201170130 A EA201170130 A EA 201170130A EA 201170130 A EA201170130 A EA 201170130A EA 021798 B1 EA021798 B1 EA 021798B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
optionally substituted
carbon atoms
compound
alkyl
mmol
Prior art date
Application number
EA201170130A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170130A1 (ru
Inventor
Джайлялль Рамно
Субхаш К. Аннеди
Сара Силверман
Питер Дав
Шон Мэддафорд
Суман Ракхит
Original Assignee
Ньюрэксон, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41465440&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA021798(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ньюрэксон, Инк. filed Critical Ньюрэксон, Инк.
Publication of EA201170130A1 publication Critical patent/EA201170130A1/ru
Publication of EA021798B1 publication Critical patent/EA021798B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/538—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Рассмотрены бензоксазины и бензотиазины формулы (I), где Q представляет собой O-(CHR)или S-(CHR); Rпредставляет собой Н, необязательно замещенный Cалкил, необязательно замещенный Салкарил, необязательно замещенный Салкгетероциклил, необязательно замещенный Сгетероциклил, необязательно замещенный Сциклоалкил, необязательно замещенный Салкциклоалкил или -(CRR)NRR; каждый из Rи Rпредставляет собой независимо Н, галоген или необязательно замещенный Салкил, каждый из Rи Rпредставляет собой независимо Н, галоген, (СН)NHC(NH)R; где r2 равно целому числу от 0 до 2; каждый из Yи Yпредставляет собой Н, или Yи Yвместе обозначают =O, или Yи Yпредставляют собой независимо Н или необязательно замещенный Салкил; где по крайней мере один из Rи Rпредставляет собой (СН)NHC(NH)R; Rпредставляет собой Н или необязательно замещенный Салкил; или их фармацевтически приемлемая соль. Кроме того, предложены фармацевтическая композиция и способ лечения или предотвращения состояния у млекопитающего, вызванного действием (оксид азота)-синтазы (NOS).

Description

Настоящее изобретение относится к области производных бензоксазинов, бензотиазинов и родственных соединений и их лекарственному применению.
Оксид азота (N0) играет разные роли как в нормальных, так и патологических процессах, включающих регуляцию кровяного давления, участие в нейротрансмиссии и в системах защиты макрофагов (8пуйег, 8.Н. аий Вгсй1. Ό.8., δοίοηΙίΓίο Атепсап, Мау; 266(5) 1992:68). N0 синтезируется тремя изоформами (оксид азота)-синтазы, конститутивной формой в эндотелиальных клетках ^N08), конститутивной формой в нейронных клетках (ηΝΟδ) и индуцируемой формой, найденной в клетках макрофагов (ίΝ08). Эти ферменты являются гомодимерными белками, которые катализируют окисление пяти электронов Ьаргинина, образуя N0 и цитруллин. Роль N0, продуцируемого каждой из изоформ N08, является действительно уникальной. Чрезмерная стимуляция или чрезмерное продуцирование индивидуальных изоформ N08, особенно ηNΟ8 и (N08, играет роль в нескольких нарушениях, включающих септический шок, артрит (Воидй1оп-8тйй е! а1., ГОгидк 1:321-334, 1998 апй СосЬгапе е! а1., Мей Ке8. Кеу. 16: 547-563, 1996), диабет, повреждение при ишемии-реперфузии, боль (Ьагкоп е! а1., Раш 86:103-111, 2000) и различные нейродегенеративные заболевания (Кегхугп е! а1., 1. Мей. Сйет. 38:4343, 1995), тогда как ингибирование еN08 приводит к нежелательным эффектам, таким как повышенная активация лейкоцитов и тромбоцитов, гипертензия и повышенный атерогенез (Уа1апсе е! а1., №11иге Кеу. Эгид Э^с. 1:939, 2002).
Ингибиторы N08 имеют потенциал для применения в качестве терапевтических средств при многих нарушениях. Однако сохранение физиологически важной функции (оксид азота)-синтазы предполагает желательность развития изоформа-селективных ингибиторов, которые предпочтительно ингибируют ηNΟ8 или пNΟ8 и ,N08 по сравнению с еN08. В частности, селективные ингибиторы N08, особенно ингибиторы пNΟ8 или ,N08 являются кандидатами для применения при лечении хронических болезненных состояний, таких как невропатическая боль, хроническая головная боль напряжения или трансформированная мигрень, при которых болезненное состояние является результатом устойчивости периферической и/или центральной сенсибилизации.
Сущность изобретения
Изобретение относится к соединению, имеющему формулу (I)
К1 представляет собой Н, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С1-4алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С2-9гетероциклил, необязательно замещенный С3-8циклоалкил, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил или -(С’В|ЛВ||5)^В|СРШ;
К1А и К1В представляют собой, независимо, Н, гидрокси, галоген, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С1-6алкокси, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил, необязательно замещенный С1-4алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С1-4алкгетероарил, необязательно замещенный С3-8циклоалкил или необязательно замещенный С2-9гетероциклил или К1А и К1В объединяются с образованием =0;
К1С и К1С представляют собой, независимо, Н, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С1-6алкокси, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил, необязательно замещенный С1-4алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С1-4алкгетероарил, необязательно замещенный С3-8циклоалкил, необязательно замещенный С2-9гетероциклил или ^защитную группу или К1С и К1С объединяются с образованием необязательно замещенного С2-9гетероциклила;
п равно целому числу 1-6;
каждый из К2 и К3 представляет собой, независимо, Н, галоген или необязательно замещенный С1-6алкил, каждый из К4 и К5 представляет собой, независимо, Н, галоген, (СН2)г2NНС(NН)К2А; где г2 равно целому числу от 0 до 2;
К2А представляет собой необязательно замещенный С2-9гетероциклил или необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил;
- 1 021798 где каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н, или Υ1 и Υ2 вместе обозначают =0, или Υ1 и Υ2 представляют собой, независимо, Н или необязательно замещенный С1-6алкил;
по крайней мере один из К4 и К5 представляет собой (ΟΗ2)γ2ΝΗΟ(ΝΗ)Κ2Α;
К6 представляет собой Н или необязательно замещенный С1-6алкил, или его фармацевтически приемлемой соли, где С2-9гетероциклил содержит от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; гетероциклильный остаток в С1-4алкгетероциклильной группе представляет собой С2-9гетероциклил, содержащий от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; гетероарильный остаток в С1-4алкгетероарильной группе представляет собой С2-9гетероарил, содержащий от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; и арильный остаток в С1-4алкарильной группе представляет собой С6-10арил;
где необязательные заместители для алкила выбраны из (1) алкокси с атомами углерода от одного до шести; (2) амино; (3) циклоалкила с атомами углерода от трех до восьми; (4) галогена; (5) гетероциклила; (6) гидрокси; (7) Ν-защищенного амино; (8) оксо; (9) -С02КА, где КА выбран из алкила или водороТЭ /-4 ТЭ /-4 /“’ тт да; (10) -ί'.’(Ό)ΝΚ К , где каждый из К и К независимо выбран из водорода или алкила; и (11) -ΝΚ К , где каждый из К° и Кн независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) Ν-защитной группы и (с) алкила с числом атомов углерода от одного до шести;
необязательные заместители для арила выбраны из (1) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (2) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (4) амино; (5) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) галогена; (7) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) гидрокси; (9) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (10) -(СН2)чС02Ка, где ц равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из алкила или водорода, (11) -(СН2)чС0ХКвКс, где ц равно целому числу от нуля до четырех и Кв и КС независимо выбраны из водорода или алкила, (12) перфторалкила; и (13) перфторалкокси;
необязательные заместители для циклоалкила выбраны из (1) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (2) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкоксиалкила, где алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (4) амино; (5) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) галогена; (7) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) гидрокси; (9) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (10) оксо; (11) -(СН2)чС02Ка, где ц равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из алкила или водорода, (12) -(СН2)^С0NКвКС, где ц равно целому числу от нуля до четырех и Кв и КС независимо выбраны из водорода или алкила; (13) перфторалкила и (14) перфторалкокси;
необязательные заместители для гетероциклила или гетероарила выбраны из (1) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (2) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (4) амино; (5) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) галогена; (7) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) гидрокси; (9) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (10) оксо; (11) -(СН2)чС02Ка, где ц равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из алкила или водорода; (12) -(СН2)чС0яКвКс, где ц равно целому числу от нуля до четырех и Кв и КС независимо выбраны из водорода или алкила; (13) перфторалкила; (14) перфторалкокси.
В предпочтительных вариантах воплощения О представляет собой -0-(СНК6)1-2 или -§-(СНК6)1-2- и К1 представляют собой Н, необязательно замещенный Соалкил, необязательно замещенный С1-4алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил или необязательно замещенный С2-9гетероциклил.
В предпочтительных вариантах воплощения К2А имеет формулу
и каждый из X1, X2, X4 и X5 независимо выбран из О, δ, ΝΒ7, N или СК8 X3 выбран из N или С;
К7 представляет собой Н или необязательно замещенный С1-6алкил;
К8 представляет собой Н, галоген, необязательно замещенный Соалкил, гидрокси или необязательно замещенный С1-6алкокси;
по меньшей мере один из X1, X2, X4 и X5 не является СК8.
Причем наиболее предпочтительно, когда К2А имеет формулу
- 2 021798 и каждый из X1 и X2 независимо выбран из О, 8, ΝΗ, N или СН и по меньшей мере один из X1 и X2 не является СН.
В предпочтительных вариантах воплощения указанное соединение имеет структуру, выбранную из « .О, К .5.
ХО хо или и у которой один из К4 и К5 имеет следующую структуру:
В предпочтительных вариантах воплощения указанное соединение имеет структуру, выбранную из Хк ВС ,-5..
или и где один из К4 и К5 имеет следующую структуру:
где X представляет О или 8.
В предпочтительных вариантах воплощения каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой О-СНК6
В других предпочтительных вариантах воплощения каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 8-СНК6.
В других предпочтительных вариантах воплощения Υ1 и Υ2 вместе образуют =О и О представляет собой О-СНК6.
В других предпочтительных вариантах воплощения Υ1 и Υ2 вместе образуют =О и О представляет собой 8-СНК6
В других предпочтительных вариантах воплощения Υ1 и Υ2 вместе образуют =О и О представляет собой О-(СНК6)2.
В других предпочтительных вариантах воплощения каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 8-(СНК6)2.
В других предпочтительных вариантах воплощения Υ1 и Υ2 вместе образуют =О и О представляет собой 8-(СНК6)2.
В других предпочтительных вариантах воплощения каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой О-(СНК6)2.
В других предпочтительных вариантах воплощения Υ1 и Υ2 вместе образуют =О и О представляет собой О-(СНК6)з.
В других предпочтительных вариантах воплощения каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 8-(СНК6)3.
В других предпочтительных вариантах воплощения Υ1 и Υ2 вместе образуют =О и О представляет собой 8-(СНК6)з.
В других предпочтительных вариантах воплощения каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой О-(СНК6)3.
В других предпочтительных вариантах воплощения К1 представляет собой необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С2-9гетероциклил или необязательно замещенный С1 -4алкгетероциклил.
Причем наиболее предпочтительно, когда К1 представляет собой необязательно замещенный аминоС1-6алкил.
Ещё один наиболее предпочтительный вариант, когда К1 представляет собой необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, где указанный гетероциклил представляет собой 5- или 6-членный циклический амин. Причем указанный циклический амин может быть замещен карбоновой кислотой, сложным С1-6эфиром или амидом.
Ещё один наиболее предпочтительный вариант, когда К1 представляет собой необязательно заме- 3 021798 щенный С2-9гетероциклил. Причем указанный гетероциклил может представлять собой необязательно замещенный пирролидинил или необязательно замещенный пиперидинил. В частности, К1 может представлять собой
или где К9 представляет собой Н, необязательно замещенный С1-6алкил или необязательно замещенный С1-4алкарил. Причем К9 может представлять собой Н.
В других предпочтительных вариантах воплощения К1 представляет собой необязательно замещенный С3-С8циклоалкил или -(0Κ1ΑΚ1Β)ηΝΚ1ΟΚ1ϋ. Например, К1 может представлять собой (СК1АК1В)ПЫК1СК1С. Причем каждый из К1А и К1В может представлять собой Н и η равно 2 или 3.
В предпочтительном варианте К1С может представлять собой Н и К1В представляет собой -СН3, -СН2СН3, -(СН2)2ОН или -СН2СО2Н или К1С и К1В соединяются с образованием необязательно замещенного пирролидинила или необязательно замещенного пиперидинила.
В других предпочтительных вариантах воплощения К1 может представлять собой -СН2СН^(СН3)2 или -ΟΗ^Η2ΝΗΟΗ3.
В других предпочтительных вариантах воплощения К1 представляет собой С3-С8циклоалкил, замещенный амино.
В других предпочтительных вариантах воплощения один из К4 или К5 представляет собой Н или Р.
Еще одним объектом изобретения является соединение, выбранное из группы, состоящей из
- 4 021798
- 5 021798
или их фармацевтически приемлемых солей.
Ещё одним другим объектом изобретения является соединение, представляющее собой
или его фармацевтически приемлемая соль.
Ещё одним другим объектом изобретения является соединение, представляющее собой
ΗΝ4, или его фармацевтически приемлемая соль.
Ещё одним другим объектом изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая любое охарактеризованное выше соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый эксципиент.
Ещё одним другим объектом изобретения является способ лечения или предотвращения состояния у млекопитающего, вызванного действием (оксид азота)-синтазы (N08). где указанный способ включает введение эффективного количества любого охарактеризованного выше соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли указанному млекопитающему, предпочтительно человеку. При этом указанное состояние может представлять собой головную боль, невропатическую боль, хроническую воспалительную боль, висцеральную боль, нейровоспаление, индуцированную лекарственными средствами гипералгезию и/или аллодинию, острую боль, хроническую боль, боль при раке костей, химическую зависимость или аддикцию, нарушение ЦНС, нейродегенеративное заболевание или повреждение нерва, связанное с сердечно-сосудистой системой состояние или желудочно-кишечное нарушение. При этом указанной головной болью может быть головная боль типа мигрени (с аурой или без нее), хроническая головная боль напряжения (СТТН), мигрень с аллодинией, головная боль вследствие чрезмерного употребления лекарственных средств, кластерная головная боль, хроническая головная боль или трансформированная мигрень. В другом варианте указанной головной болью может быть головная боль с лежащим в ее основе механизмом центральной сенсибилизации. Указанная хроническая боль может иметь
- 6 021798 компоненты центральной сенсибилизации либо представлять собой невропатическую боль. Причем указанная невропатическая боль может представлять собой связанную со СПИД болезненную невропатию, центральную боль после инсульта (СР8Р), диабетическую невропатию, невропатическую боль, индуцированную химиотерапией, постгерпетическую невралгию или тригеминальную невралгию. Предпочтительно, когда указанная невропатическая боль представляет собой постгерпетическую невралгию.
В предпочтительном варианте указанная выше хроническая воспалительная боль может быть результатом остеоартрита, ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилита, псориатического артрита, недифференцированной спондилоартропатии или воспалительного артрита.
В предпочтительном варианте индуцированная лекарственным средством гипералгезия или аллодиния может представлять собой индуцированную опиоидом гипералгезию/аллодинию или индуцированную триптанами (5-НТ1С/1В-агонисты) гипералгезию или аллодинию. Причем указанная индуцированная химиотерапией невропатическая боль может быть индуцирована паклитакселом, цис-платином или доксорубицином.
Указанная выше химическая зависимость или аддикция может представлять собой аддикцию к употреблению лекарственного средства; аддикцию к употреблению кокаина; аддикцию к никотину; индуцированную метамфетамином нейротоксичность; этанольную толерантность, этанольную зависимость или этанольную абстиненция, индуцированную морфином/опиоидом толерантность, индуцированную морфином/опиоидом зависимость, индуцированную морфином/опиоидом гипералгезию или индуцированную морфином/опиоидом абстиненцию.
Указанное выше нарушение ЦНС может представлять собой эпилепсию, тревогу, депрессию, синдром дефицита внимания и гиперактивности (ЛИНИ), психоз или деменцию.
Указанное выше нейродегенеративное заболевание или повреждение нерва может представлять собой острое повреждение спинного мозга, связанная со СПИД деменция, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (АЬ8), болезнь Хантингтона, рассеянный склероз, нейротоксичность или травма головы.
Указанное связанное с сердечно-сосудистой системой состояние может представлять собой инсульт, связанное с обходным сосудистым шунтом коронарной артерии (САВС) неврологическое нарушение, гипотермическую задержку работы сердца (НСА), боль после инсульта, кардиогенный коллапс (при инфаркте миокарда), повреждение при реперфузии или васкулярная деменция.
Указанное желудочно-кишечное нарушение может представлять собой связанную с илеостомией диарею или демпинг-синдром.
Указанное выше состояние у млекопитающего, вызванное действием (оксид азота)-синтазы (N08), может представлять собой висцеральную боль.
Указанное выше состояние у млекопитающего, вызванное действием (оксид азота)-синтазы (N08), может представлять собой инсульт, повреждение при реперфузии, нейродегенерация, травма головы, обходной сосудистый шунт коронарной артерии (САВО), мигрень с аллодинией, центральная боль после инсульта (СР8Р) или индуцированная морфином/опиоидом гипералгезия.
Охарактеризованное выше соединение общей формулы (I) может представлять собой гидрохлоридную соль.
Другие отличительные признаки и преимущества будут очевидны из нижеследующего описания и формулы изобретения.
Определения.
Термин Сх-уалкарил, применяемый в контексте, означает химический заместитель форму лы -КК', где К представляет собой алкиленовую группу с числом атомов углерода от х до у и К' представляет собой арильную группу, определяемую в контексте. Аналогично этому, термин Сх-Уалкгетероарил означает химический заместитель формулы -КК, где К представляет собой алкиленовую группу с числом атомов углерода от х до у и К представляет собой гетероарильную группу, определяемую в контексте. Другие группы, которым предшествует префикс алк-, определяются таким же образом. Примерные незамещенные алкарильные группы содержат от 7 до 16 атомов углерода.
Термин алкилциклоалкил представляет собой циклоалкильную группу, присоединенную к родительской молекулярной группе через алкиленовую группу.
Термин алкгетероциклил представляет собой гетероциклическую группу, присоединенную к родительской молекулярной группе через алкиленовую группу. Примерные незамещенные алкгетероциклильные группы содержат от 2 до 14 атомов углерода.
Термин алкокси представляет собой химический заместитель формулы -0К, где К представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода, если не указано иначе.
Термин алкоксиалкил представляет собой алкильную группу, которая замещена алкоксигруппой. Примерные незамещенные алкоксиалкильные группы включают от 2 до 12 атомов углерода.
Термины алкил и префикс алк-, применяемые в контексте, включают насыщенные группы как с неразветвленной, так и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 6 атомов углерода, если не указано иначе. Примерами алкильных групп являются метил, этил, н- и изопропил, н-, втор-, изо- и трет-бутил, неопентил и т.п. и они могут быть необязательно замещены одним, двумя, тремя или, в случае алкиль- 7 021798 ных групп с двумя или более атомами углерода, четырьмя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из (1) алкокси с атомами углерода от одного до шести; (2) алкилсульфинила с атомами углерода от одного до шести; (3) алкилсульфонила с атомами углерода от одного до шести; (4) амино; (5) арила; (6) арилалкокси; (7) арилоила; (8) азидо; (9) карбоксальдегида; (10) циклоалкила с атомами углерода от трех до восьми; (11) галогена; (12) гетероциклила; (13) (гетероцикл)окси; (14) гетероцикл)оила; (15) гидрокси; (16) Ν-защищенного амина; (17) нитро; (18) оксо; (19) спироциклила с атомами углерода от трех до восьми; (20) тиоалкокси с атомами углерода от одного до шести; (21) тиола; (22) -СО2КА, где КА выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила, (с) алкарила и (Д) водорода, где алкиленовая группа содержит от одного до шести атомов углерода; (23) -С(О)ЫКВКС, где каждый из КВ и КС независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (Д) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (24) -ЗО2КВ, где Кв выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила и (с) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (25) -ЗО2ЫКЕКР, где каждый из КЕ и КР независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (Д) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; и (26) -№К°КН, где каждый из К° и КН независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) Ν-защитной группы; (с) алкила с числом атомов углерода от одного до шести; (Д) алкенила с числом атомов углерода от двух до шести; (е) алкинила с числом атомов углерода от двух до шести; (Г) арила; (д) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (Ь) циклоалкила с числом атомов углерода от трех до восьми; и (ί) алкциклоалкила, где циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода, где в одном варианте осуществления две группы не связываются с атомом азота через карбонильную группу или сульфонильную группу.
Термин алкилен, применяемый в контексте, представляет собой насыщенную двухвалентную углеводородную группу, образованную из насыщенного углеводорода с неразветвленной или разветвленной цепью удалением двух атомов водорода, и примерами ее являются метилен, этилен, изопропилен и т.п.
Термин амино, применяемый в контексте, представляет собой -ΝΗ2, -ΝΗΡ.ΝΙ или -Ы(К№)2, где каждый К№ независимо представляет собой Н, ОН, NО2, ΝΗ2, ΝΒΝ22, ЗО2ОКЮ, ЗО2КЮ, ЗОКЮ, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С1-6алкокси, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил, необязательно замещенный С1-4алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С1-4алкгетероарил, необязательно замещенный Сз-8циклоалкил, необязательно замещенный С2-9гетероциклил или Ν-защитную группу или два К№ соединяются с образованием необязательно замещенного С2-9гетероциклила или Ν-защитной группы, и где каждый КМ2 независимо представляет собой Н, необязательно замещенную алкильную группу или необязательно замещенную арильную группу.
В предпочтительном варианте осуществления амино представляет собой -ΝΗ2 или -МНК№, где каждый К№ независимо представляет собой ОН, ЫО2, ΝΗ2, ΝΒΝ22, ЗО2ОКМ2, ЗО2КМ2, ЗОКЮ, необязательно замещенную алкильную группу или необязательно замещенную арильную группу и каждый Кю может быть Н, необязательно замещенной алкильной группой или необязательно замещенной арильной группой.
Термин аминоалкил, применяемый в контексте, представляет собой алкильную группу, определяемую в контексте, замещенную аминогруппой.
Термин арил, применяемый в контексте, представляет собой моно- или бициклическую карбоциклическую систему колец, имеющую одно или два ароматических кольца, и примерами такого термина являются фенил, нафтил, 1,2-дигидронафтил, 1,2,3,4-тетрагидронафтил, флуоренил, инданил, инденил и т.п. и арил может быть необязательно замещен одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из (1) алканоила, содержащего от одного до шести атомов углерода; (2) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (4) алкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (5) алкилсульфинила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) алкилсульфинилалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (7) алкилсульфонила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) алкилсульфонилалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (9) арила; (10) амино; (11) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (12) гетероарила; (13) алкарила, у которого алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (14) арилоила; (15) азидо; (16) азидоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (17) карбоксальдегида; (18) (карбоксальдегид)алкила, у которого алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (19) циклоалкила, имеющего от трех до восьми атомов углерода; (20) алкциклоалкила, у которого циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода, и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода; (21) галогена; (22) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (23) гетероциклила; (24) (гетероциклил)окси; (25) (гетероциклил)оила; (26) гидрокси; (27) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (28) нит- 8 021798 ро; (29) нитроалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (30) Ν-защитной группы; (31) Νзащищенного аминоалкила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (32) оксо; (33) тиоалкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (34) тиоалкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (35) -(СН2)чСО2Ка, где с] равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила, (с) алкарила и (Ь) водорода, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (36) -(СН2)чСОМКвКС, где с| равно целому числу от нуля до четырех и Кв и Кс независимо выбраны из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (Ь) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (37) -(СН2)ч8О2Кв, где ц равно целому числу от нуля до четырех и Кв выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила и (с) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (38) -(СН2)ч8О2МКеКв, где ц равно целому числу от нуля до четырех и каждый из КЕ и Кв независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (Ь) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (39) -(СН2)чМК°Кн, где с| равно целому числу от нуля до четырех и каждый из К° и КН независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода; (Ь) Ν-защитной группы; (с) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (Ь) алкенила, имеющего от двух до шести атомов углерода; (е) алкинила, имеющего от двух до шести атомов углерода; (ί) арила, (д) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (Ь) циклоалкила, имеющего от трех до восьми атомов углерода; и (ί) алкциклоалкила, у которого циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода; где в одном варианте осуществления две группы не связаны с атомом азота через карбонильную группу или сульфонильную группу; (40) тиола; (41) перфторалкила; (42) перфторалкокси; (43) арилокси; (44) циклоалкокси; (45) циклоалкилалкокси и (46) арилалкокси.
Термин карбонил, применяемый в контексте, представляет собой группу С(О), которую можно также представить как С=О.
Термин карбоксальдегид представляет собой группу СНО.
Термин карбоксальдегидалкил представляет собой карбоксальдегидную группу, присоединенную к родительской молекулярной группе через алкиленовую группу.
Термин хроническая головная боль напряжения (СТТН), применяемый в контексте, означает головную боль напряжения, которая удовлетворяет диагностическому критерию, определяемому (Не 1п1сгпайопа1 НеаЬасЬе 8осю1у С1а881ЙсаЬоп, 2пЬ ЕФйоп (1СНЭ-2). например головную боль, которая имеет место по меньшей мере 15 дней в месяце в среднем в течение периода >3 месяцев (по меньшей мере 180 дней в году).
Термин хроническая мигрень, которую называют также трансформированной мигренью, применяемый в контексте, относится к определению, данному в ΙΟΗΌ-2, и является головной болью типа мигрени, имеющей место 15 или более дней в месяц в течение более чем 3 месяцев в отсутствие чрезмерного использования лекарственных средств. Клинические методические рекомендации для диагноза хронической мигрени можно найти, например, в 1Ье 1СНЭ-2 и в О1езоп е1 а1., СерЬа1а1д1а, 26 (6):742-746, 2006.
Термин циклоалкил, применяемый в контексте, представляет собой одновалентную насыщенную или ненасыщенную неароматическую циклическую углеводородную группу, имеющую от трех до восьми атомов углерода, если не указано иначе, и примерами его являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, бицикло[2.2.1]гептил и т.п.
Циклоалкильные группы настоящего изобретения могут быть необязательно замещены (1) алканоилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (2) алкилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (3) алкокси, имеющим от одного до шести атомов углерода; (4) алкоксиалкилом, где алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (5) алкилсульфинилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (6) алкилсульфинилалкилом, где алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (7) алкилсульфонилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (8) алкилсульфонилалкилом, где алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (9) арилом; (10) амино; (11) аминоалкилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (12) гетероарилом; (13) аралкилом, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (14) арилоилом; (15) азидо; (16) азидоалкилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (17) карбоксальдегидом; (18) (карбоксальдегид)алкилом, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (19) циклоалкилом, имеющим от трех до восьми атомов углерода; (20) алкциклоалкилом, у которого циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода; (21) галогеном; (22) галогеналкилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (23) гетероциклилом; (24) (гетероциклил)окси; (25) (гетероциклил)оилом; (26) гидрокси; (27) гидроксиалкилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (28) нитро; (29) нитроалкилом, имеющим от одного до шести атомов углерода; (30) Ν-защитной группой; (31) Ν-защищенным аминоалкилом, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (32) оксо; (33) тиоалкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (34) тиоалкоксиалкилом, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от од- 9 021798 ного до шести атомов углерода; (35) -(СН2)чС02КА где я равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила, (с) алкарила и (ά) водорода, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (36) -(СН2)чС0ХКвКС, где я равно целому числу от нуля до четырех и Кв и КС независимо выбраны из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (ά) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (37) -(СН2)ч802Кс, где я равно целому числу от нуля до четырех и выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила и (с) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (38) -^Η2)4δΟ2ΝΚΕΚρ, где Я равно целому числу от нуля до четырех и каждый из КЕ и КР независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (ά) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (39) -(СЩ^кА1, где я равно целому числу от нуля до четырех и каждый из К0 и Кн независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода; (Ь) Ν-защитной группы; (с) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (ά) алкенила, имеющего от двух до шести атомов углерода; (е) алкинила, имеющего от двух до шести атомов углерода; (ί) арила, (д) алкарила, у которого алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (к) циклоалкила, имеющего от трех до восьми атомов углерода; и (ί) алкциклоалкила, у которого циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода; с условием, что две группы не связаны с атомом азота через карбонильную группу или сульфонильную группу; (40) тиолом; (41) перфторалкилом; (42) перфторалкокси; (43) арилокси; (44) циклоалкокси; (45) циклоалкилалкокси и (46) арилалкокси.
Термины циклоалкилокси и циклоалкокси, применяемые в контексте взаимозависимым образом, представляют собой циклоалкильную группу, определяемую в контексте, присоединенную к родительской молекулярной группе через атом кислорода. Примерные незамещенные циклоалкилоксигруппы содержат от 3 до 8 атомов углерода.
Термин эффективное количество соединения, применяемый в контексте, является количеством, достаточным для достижения благоприятных или желательных результатов, таких как клинические результаты, и как таковое термин эффективное количество зависит от контекста, в котором его применяют. Например, в контексте введения агента, который является ингибитором N08, эффективным количеством агента является, например, количество, достаточное для достижения уменьшения активности N08 по сравнению с реакцией, полученной без введения агента.
Термин галоген, применяемый в контексте, представляет собой бром, хлор, йод или фтор.
Термин гетероарил, применяемый в контексте, представляет собой подгруппу гетероциклов, определяемых в контексте, которые являются ароматическими, т.е. они содержат 4п+2 ρί-электронов в моно- или полициклической системе.
Термины гетероцикл и гетероциклил, применяемые в контексте взаимозаменяемым образом, представляют собой 5-, 6- или 7-членное кольцо, если не указано иначе, содержащее один, два, три или четыре гетероатома, независимо выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы. 5членное кольцо имеет от нуля до двух двойных связей и 6- и 7-членные кольца имеют от нуля до трех двойных связей. Термин гетероциклил представляет собой также гетероциклическое соединение, имеющее мостиковую полициклическую структуру, в которой один или несколько атомов углерода и/или гетероатомов соединяют мостиком два несоседних члена моноциклического кольца, например хинуклидинильную группу. Термин гетероцикл включает бициклические, трициклические и тетрациклические группы, в которых любое из вышеуказанных гетероциклических колец конденсировано с одним, двумя или тремя кольцами, например арильным кольцом, циклогексановым кольцом, циклогексеновым кольцом, циклопентановым кольцом, циклопентеновым кольцом и другим моноциклическим гетероциклическим кольцом, такие как индолил, хинолил, изохинолил, тетрагидрохинолил, бензофурил, бензотиенил и т.п. Примеры конденсированных гетероциклов включают тропаны и 1,2,3,5,8,8а-гексагидроиндолизин. Г етероциклы включают пирролил, пирролинил, пирролидинил, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридил, пиперидинил, гомопиперидинил, пиразинил, пиперазинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолил, изоксазолидинил, морфолинил, тиоморфолинил, тиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, изотиазолидинил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензотиазолил, бензоксазолил, фурил, тиенил, тиазолидинил, изотиазолил, изоиндазолил, триазолил, тетразолил, оксадиазолил, урицил, тиадиазолил, пиримидил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, дигидротиенил, дигидроиндолил, тетрагидрохинолил, тетрагидроизохинолил, пиранил, дигидропиранил, дитиазолил, бензофуранил, бензотиенил и т.п. Гетероциклические группы включают также группы формулы где Р' выбран из группы, состоящей из -СН2-, -СН2О- и -О-, и 0' выбран из группы, состоящей из -С(О)- и -(С(К') (Κ))ν-, где каждый из К' и К независимо выбран из группы, состоящей из водорода или алкила, имеющего от одного до четырех атомов углерода, и ν равно числу от одного до трех, такие как 1,3-бензодиоксолил, 1,4-бензодиоксанил и т.п. Любая из указанных в контексте гетероциклических
- 10 021798 групп может быть необязательно замещена одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из (1) алканоила, содержащего от одного до шести атомов углерода; (2) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (4) алкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (5) алкилсульфинила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) алкилсульфинилалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (7) алкилсульфонила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) алкилсульфонилалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (9) арила; (10) амино; (11) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (12) гетероарила; (13) алкарила, у которого алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (14) арилоила; (15) азидо; (16) азидоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (17) карбоксальдегида; (18) (карбоксальдегид)алкила, у которого алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (19) циклоалкила, имеющего от трех до восьми атомов углерода; (20) алкциклоалкила, у которого циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода, и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода; (21) галогена; (22) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (23) гетероциклила; (24) (гетероциклил)окси; (25) (гетероциклил)оила; (26) гидрокси; (27) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (28) нитро; (29) нитроалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (30) Ν-защитной группы; (31) Νзащищенного аминоалкила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (32) оксо; (33) тиоалкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (34) тиоалкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (35) (СН2)ЧСО2КА, где с] равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила, (с) алкарила и (б) водорода, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (36)
-(СН2)чСОМКвКс, где с| равно целому числу от нуля до четырех и Кв и КС независимо выбраны из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (б) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (37) -(СН2)Ч8О2КВ, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и Кв выбран из группы, состоящей из (а) алкила, (Ь) арила и (с) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (38) -(СН2)Ч8О^КЕКВ, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и каждый из КЕ и Кв независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) алкила, (с) арила и (б) алкарила, где алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (39) -(СН2)^К°КН, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и каждый из КС и КН независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода; (Ь) Ν-защитной группы; (с) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (б) алкенила, имеющего от двух до шести атомов углерода; (е) алкинила, имеющего от двух до шести атомов углерода; (ί) арила, (д) алкарила, у которого алкиленовая группа имеет от одного до шести атомов углерода; (б) циклоалкила, имеющего от трех до восьми атомов углерода; и (ί) алкциклоалкила, у которого циклоалкильная группа имеет от трех до восьми атомов углерода и алкиленовая группа имеет от одного до десяти атомов углерода; где в одном варианте осуществления две группы не связаны с атомом азота через карбонильную группу или сульфонильную группу; (40) тиола; (41) перфторалкила; (42) перфторалкокси; (43) арилокси; (44) циклоалкокси; (45) циклоалкилалкокси и (46) арилалкокси.
Термин (гетероцикл)окси, применяемый в контексте, представляет собой гетероциклическую группу, определяемую в контексте, присоединенную к родительской молекулярной группе через атом кислорода.
Термин (гетероцикл)оил, применяемый в контексте, представляет собой определяемую в контексте гетероциклическую группу, присоединенную к родительской молекулярной группе через карбонильную группу.
Термин гидрокси, применяемый в контексте, представляет собой группу -ОН.
Термин гидроксиалкил, применяемый в контексте, представляет собой алкильную группу, определяемую в контексте, замещенную одной-тремя гидроксигруппами, с условием, что не более чем одна гидроксигруппа может быть присоединена к одному атому углерода алкильной группы, и примерами его являются гидроксиметил, дигидроксипропил и т.п.
Термин Ν-защищенная амино, применяемый в контексте, относится к аминогруппе, определяемой в контексте, к которой присоединена Ν-защитная группа, определяемая в контексте.
Термин Ν-защитная группа, применяемый в контексте, представляет собой группы, предназначенные для защиты аминогруппы от нежелательных реакций во время синтетических процедур. Обычно применяемые Ν-защитные группы, описаны в публикации Сгеепе, Рго1есбуе Сгоирз ίη Огдаше 8уп1бс515. 3гб Еббюп Цобп ^беу & 8опз, №ν Уогк, 1999), включенный в текст в качестве ссылки. Ν-защитные группы включают ацильные, ароильные или карбамильные группы, такие как формил, ацетил, пропионил, пивалоил, трет-бутилацетил, 2-хлорацетил, 2-бромацетил, трифторацетил, трихлорацетил, фталил, о-нитрофеноксиацетил, α-хлорбутирил, бензоил, 4-хлорбензоил, 4-бромбензоил, 4-нитробензоил и хиральные вспомогательные средства, такие как защищенные или незащищенные Ό,Τ-аминокислоты, такие как аланин, лейцин, фенилаланин и т.п.; сульфонильные группы, такие как бензолсульфонил, п- 11 021798 толуолсульфонил и т.п.; образующие карбаматы группы, такие как бензилоксикарбонил, пхлорбензилоксикарбонил, п-метоксибензилоксикарбонил, п-нитробензилоксикарбонил, 2нитробензилоксикарбонил, п-бромбензилоксикарбонил, 3,4-диметоксибензилоксикарбонил, 3,5диметоксибензилоксикарбонил, 2,4-диметоксибензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, 2нитро-4,5-диметоксибензилоксикарбонил, 3,4,5-триметоксибензилоксикарбонил, 1-(п-бифенилил)-1метилэтоксикарбонил, а,а-диметил-3,5-диметоксибензилоксикарбонил, бензгидрилоксикарбонил, третбутилоксикарбонил, диизопропилметоксикарбонил, изопропилоксикарбонил, этоксикарбонил, метоксикарбонил, аллилоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, феноксикарбонил, 4нитрофеноксикарбонил, флуоренил-9-метоксикарбонил, циклопентилоксикарбонил, адамантилоксикарбонил, циклогексилоксикарбонил, фенилтиокарбонил и т.п., арилалкильные группы, такие как бензил, трифенилметил, бензилоксиметил и т.п., и силильные группы, такие как триметилсилил, и т.п. Предпочтительными Ν-защитными группами являются формил, ацетил, бензоил, пивалоил, трет-бутилацетил, аланил, фенилсульфонил, бензил, трет-бутилоксикарбонил (Вое) и бензилоксикарбонил (СЬ/).
Термин нитро, применяемый в контексте, представляет собой группу -ΝΟ2.
Термин оксо, применяемый в контексте, представляет собой =Ο.
Термин перфторалкил, применяемый в контексте, представляет собой алкильную группу, определяемую в контексте, в которой каждый радикал водорода, связанный с алкильной группой, заменен радикалом фтора. Примерами перфторалкильных групп являются трифторметил, пентафторэтил и т.п.
Термин перфторалкокси, применяемый в контексте, представляет собой алкоксигруппу, определяемую в контексте, где каждый радикал водорода, связанный с алкоксигруппой, заменен фторидным радикалом.
Термин фармацевтическая композиция, применяемый в контексте, представляет собой композицию, содержащую описанное в контексте соединение (например, любое из соединений (1)-(33) и соединений формулы (I)) в сочетании с фармацевтически приемлемым эксципиентом, и обычно изготавливаемую или продаваемую с разрешения правительственного агентства регламентирования, как часть лечебной схемы для лечения заболевания у млекопитающего. Фармацевтические композиции можно изготавливать, например, для перорального введения в виде дозированной лекарственной формы (например, таблетки, капсулы, мелкой капсулы, гелевого колпачка или сиропа); для местного введения (например, в виде крема, геля, лосьона или мази); для внутривенного введения (например, в виде стерильного раствора без эмболии в виде частиц и полученного в системе растворителей, подходящей для внутривенного применения) или в виде любого другого описанного в контексте препарата.
Фармацевтически приемлемый эксципиент, применяемый в контексте, относится к любому ингредиенту, другому, чем описываемые в контексте соединения (например, наполнителю, способному суспендировать или растворить активное соединение), и обладающему свойствами, позволяющими ему не проявлять токсичность и не вызывать воспаление у пациента. Эксципиенты могут включать, например, антиадгезивные агенты, антиоксиданты, связывающие вещества, покрытия, вспомогательные средства для прессования, дезинтегрирующие агенты, красители (красящие вещества), мягчители, эмульгаторы, наполнители (разбавители), пленкообразующие средства или покрытия, корригенты, отдушки, вещества, придающие скольжение (средства, усиливающие течение), смазывающие вещества, консерванты, типографские краски, сорбенты, суспендирующие или диспергирующие агенты, подслащивающие вещества или воду гидратации. Примеры эксципиентов включает, но не ограничиваются перечисленным, бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), карбонат кальция, фосфат кальция (гидрофосфат кальция), стеарат кальция, кроскармеллоза, сшитый поливинилпирролидон, лимонную кислоту, кросповидон, цистеин, этилцеллюлозу, желатин, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, лактозу, стеарат магния, мальтит, маннит, метионин, метилцеллюлозу, метилпарабен, микрокристаллическую целлюлозу, полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон, повидон, предварительно клейстеризованный крахмал, пропилпарабен, ретинилпальмитат, шеллак, диоксид кремния, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, цитрат натрия, натриевую соль гликолята крахмала, сорбит, крахмал (кукурузный), стеариновую кислоту, сахарозу, тальк, диоксид титана, витамин А, витамин Е, витамин С и ксилит.
Применяемый в контексте термин фармацевтически приемлемые пролекарства представляет собой пролекарства соединений настоящего изобретения, которые находятся в пределах сферы надежной врачебной оценки, подходящей для применения в контакте с тканями людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., имеют приемлемое отношение польза/риск и являются эффективными для предназначенного для них применения, а также цвиттерионные формы, когда они возможны, соединений изобретения.
Термин фармацевтически приемлемая соль, применяемый в контексте, представляет собой соли, которые находятся в пределах сферы надежной врачебной оценки являются подходящими для применения в контакте с тканями людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., имеют приемлемое отношение польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области. Например, фармацевтически приемлемые соли описаны в Вегде с1 а1., 1. РЬаттасеийса1 Зшепсек 66:1-19, 1977 и в РЬаттасеийса1 δηίΐδ: РгореЫек, 8е1еейои, апй Ике, (Ейк. Р.Н. §1аЫ аий С.О. ХУегтиЙ!), \УПеу-УСН. 2008. Соли можно получить ίη δίΐιι во время последнего выделения
- 12 021798 и очистки соединений изобретения или отдельно реакцией свободной основной группы с подходящей органической кислотой. Репрезентативные кислотно-аддитивные соли включают ацетат, адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорасульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, гемисульфат, гептонат, гексаноат, гидробромид, гидрохлорид, гидроиодид, 2гидроксиэтансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.п. Репрезентативные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния, и т.п., а также соли нетоксичных катионов аммония, четвертичного аммония и аминов, включающие, но не ограничивающиеся перечисленным, соли аммония, тетраметиламмония, тетраэтиламмония, метиламина, диметиламина, триметиламина, триэтиламина, этиламина и т.п.
Термины фармацевтически приемлемый сольват или сольват, применяемые в контексте, означают соединение изобретения, у которого молекулы подходящего растворителя включены в кристаллическую решетку. Подходящий растворитель является физиологически переносимым при вводимой дозе. Например, сольваты можно получить кристаллизацией, перекристаллизацией или осаждением из раствора, который включает органические растворители, воду или их смесь. Примерами подходящих растворителей являются этанол, вода (например, для получения моно-, ди- и тригидратов), ^метилпирролидинон (NМР), диметилсульфоксид (ДМСО), ^№-диметилформамид (ДМФА), ^№-диметилацетамид (ОМАС), 1,3-диметил-2-имидазолидинон (ОМЕИ), 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2-(1Н)пиримидинон (ОМРИ), ацетонитрил (АСЩ, пропиленгликоль, этилацетат, бензиловый спирт, 2-пирролидон, бензилбензоат и т.п. Когда растворителем является вода, сольват называют гидратом.
Применяемый в контексте термин Рй означает фенил.
Применяемый в контексте термин предотвращает относится к профилактическому лечению или лечению, которое предотвращает появление одного или нескольких симптомов или состояний заболевания, нарушения или описанных в контексте состояний (например, острой боли, хронической боли, воспалительной боли, невропатической боли, сильной боли, боли при раковом заболевании, мигрени (с аурой или аллодинией или без них) или хронической головной боли типа напряжения. Превентивное лечение можно начинать, например, до (профилактика перед подверганием риску) или после (профилактика после подвергания риску) события, которое предшествует началу заболевания, нарушения или состояний (например, воздействием на фактор, вызывающий мигрень, на другую причину боли или на патоген). Превентивное лечение, которое включает введение соединения изобретения или его фармацевтической композиции, может быть экстренным, кратковременным или постоянным. Вводимые дозы могут варьировать в течение курса превентивного лечения. См. также Катескт е! а1., Тгеа1теп1 оГ Рптагу Неайасйе: Ргеуепйуе ТгеаПпеШ оГ М1дгате. 1п: 8!апйагйк оГ Саге Гог Неайасйе П1адпок1к апй ТгеаПпеШ. Сйюадо (1Ь): №Юопа1 Неайасйе Роипйайоп; 2004, р. 40-52.
Термин пролекарство, применяемый в контексте, представляет собой соединения, которые быстро превращаются ш У1уо в родительское соединение указанной выше формулы (например, соединения формулы (I) и соединения (1)-(33)), например, гидролизом в крови. Пролекарствами соединений изобретения могут быть общепринятые сложные эфиры. Некоторыми обычными сложными эфирами, которые применяли в качестве пролекарств, являются фениловые сложные эфиры, алифатические (С7-С8 или С8С24)-сложные эфиры, сложные эфиры холестерина, ацилоксиметиловые сложные эфиры, карбаматы и эфиры аминокислот. Например, соединение изобретения, которое содержит ОН-группу, можно ацилировать в этом положении в форме его пролекарства. Полное обсуждение их представлено в публикациях Т. ШдисЫ апй V. 81е11а, Рго-йгидк ак №ус1 Оейуегу 8ук1етк, Уо1. 14 оГ !йе А.С.8. 8утрокшт 8епек, Ей\\агй В. Косйе, ей., ВюгеуегыЫе Сатегк ш Эгид ОеЧдп, Атепсап Рйагтасеийса1 Аккошайоп апй Регдатоп Ргекк, 1987, апй й.1йктк е! а1., 8уп1йейс Соттитсайопк 26 (23):4351-4367, 1996, каждая из которых включена в контекст в качестве ссылки. Пролекарства соединений настоящего изобретения предпочтительно являются фармацевтически приемлемыми.
Каждое из выражений селективно ингибирует ^N08 или селективный ингибитор ^N08 относится к веществу, которое ингибирует или связывает изоформу ^N08 более эффективно, чем еNΟ8 и/или (N08, при измерении анализом щ уПго, как, например, анализами, описанными в контексте. Селективное ингибирование можно выразить в терминах величины 1С50, величины К1 или инверсии величины процентного ингибирования, которое ниже или, наоборот, выше % ингибирования, когда вещество испытывают в анализе ^N08, чем при испытании в анализе еN08 и/или ,N08. Величина 1С50 или К1 предпочтительно в 2 раза меньше. Более предпочтительно величина 1С50 или К1 в 5, 10, 50 или даже более чем в 100 раз меньше.
Термин спироцикл, применяемый в контексте, представляет собой алкиленовый дирадикал, оба конца которого связаны с одним и тем же атомом углерода родительской группы с образованием спироциклической группы, а также гетероалкиленовый дирадикал, оба конца которого связаны с одним и тем же атомом.
- 13 021798
Термин сульфонил, применяемый в контексте, представляет собой группу -§(О)2-.
Термин тиоалкарил, применяемый в контексте, представляет собой тиоалкоксигруппу, замещенную арильной группой.
Термин тиоалкгетероциклил, применяемый в контексте, представляет собой тиоалкоксигруппу, замещенную гетероциклильной группой.
Термин тиоалкокси, применяемый в контексте, представляет собой алкильную группу, присоединенную к родительской молекулярной группе через атом серы. Примерные незамещенные тиоалкоксигруппы содержат 1-6 атомов углерода.
Термин тиол представляет собой группу -§Н.
Применяемый в контексте, а также хорошо понимаемый в данной области термин лечение является подходом для получения благоприятных или желательных результатов, таких как клинические результаты. Благоприятные или желательные результаты могут включать, но не ограничиваются указанным, ослабление или уменьшение интенсивности одного или нескольких симптомов или состояний; снижение степени заболевания, нарушения или состояния; стабилизированной (т.е. не ухудшающейся) степени заболевания, нарушения или состояния; предотвращение развития заболевания, нарушения или состояния; задержку или замедления развития заболевания, нарушения или состояния; снижение тяжести или временное облегчение заболевания, нарушения или состояния; и ремиссию (или частичную, или общую), независимо от того, поддающуюся или неподдающуюся обнаружению. Лечение может означать также пролонгирование продолжительности жизни по сравнению с предполагаемой продолжительностью жизни, если лечение не проводят. Временное облегчение или ослабление заболевания, нарушения или состояния означает, что степень и/или нежелательные клинические проявления заболевания, нарушения или состояния уменьшаются и/или время прогрессирования замедляется или удлиняется по сравнению со степенью или временем в отсутствие лечения.
Другие характерные черты и преимущества изобретения будут очевидны из нижеследующего подробного описания, чертежей и формулы изобретения.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 показан протокол испытания в отношении термической гипералгезии на модели невропатической боли Сйипд. Спинальный нерв Ь5/Ь6 хирургическим образом лигировали и животным предоставляли возможность для выздоровления в течение периода 7-10 дней. В течение этого периода у животных развивалась невропатическая боль. Уменьшение латентности отдергивания лапы после инфракрасного теплового стимула (пост-δΝΤ) измеряли после периода индукции для сравнения с базовыми линиями перед хирургической операцией (ВЬ). После введения лекарственных средств термическую гипералгезию измеряли в различных временных точках.
На фиг. 2 показан протокол испытания в отношении механической аллодинии на модели невропатической боли Сйиид. Спинальный нерв Ь5/Ь6 хирургическим образом лигировали и животным предоставляли возможность для выздоровления в течение периода 7-10 дней. В течение этого периода у животных развивалась невропатическая боль. Уменьшение тактильных пороговых величин (ροδΐ-δΝΤ) измеряли после периода индукции для сравнения с базовыми линиями перед хирургической операцией (ВЬ). После введения лекарственных средств тактильную аллодинию измеряли в различных временных точках с применением калиброванных филаментов νοη-Ртеу.
На фиг. 3 показана реверсия термической гипералгезии у крыс после внутрибрюшинного введения (ί.ρ.) соединения (8) (30 мг/кг) модели невропатической боли с лигированием Ь5/Ь6 спинального нерва (модель Сйипд).
На фиг. 4 показаны действия соединения (8) после ί.ρ. введения (доза 30 мг/кг) на реверсию тактильной аллодинии у крыс после лигирования Ь5/Ь6 спинального нерва (модель Сйипд).
На фиг. 5 показано действие против аллодинии соединения (8) после введения (3 мг/кг, перорально (р.о.)) в дуральную воспалительную модель мигрени.
На фиг. 6 показана реверсия механической аллодинии после введения (60, 100 или 200 мг/кг, перорально) соединения (8) в каррагенановую модель воспалительной боли.
На фиг. 7 показана реверсия термической гипералгезии после введения (60, 100 или 200 мг/кг, перорально) соединения (8) в каррагенановую модель воспалительной боли.
- 14 021798
Подробное описание
В изобретении описываются новые бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, обладающие ингибирующей активностью в отношении (оксид азота)-синтазы (N05). содержащие их фармацевтические и диагностические композиции и их лекарственное применение. Примерные соединения изобретения показаны в табл. 1.
Таблица 1
-О (смесь энантиомеров) _о (смесь энантиомеров)
(з» ά (4) Ц 0
(5) ΝΗ М'А, /к
{7) ί») νη
ΝΗ [ΤγθΊ (9) Н Эк γφ (10) V 8 \ ^ΝΗ
%“тХ) (11) ό (12) ΝΗ
ΥΌ0 (13) к 0 (смесь энантиомеров) Υόο (14) 0
Υ’ιΟφ (15) Λ об) νη Ύ·ΐγ 1 И Υν^οη
Υ'ΓΤ5! <ΐ7) ΝΗ Υγ 0 1 ΚοΎ'*'' А?€ф η σ») ιΥ> (Λ-ΟΗ (-)-5-изомер
- 15 021798
(19) ΝΗ (20) ΝΗ ,.ΝΗ
Χόοφ (21) ί Ύ> ΧΤΌΦ (22) V ''Ν'' 1
(23) ? ΉΗ 1 <и>
ДД) (25) V н ό ΝΗ ιΡτΧ (26) η ΗΝ—ΟΗ
•ХСО (27) ζ/ ίί (28) £/ Μ НК
ΝΗ ίΑν3''! (29) V Η 7 Η °ΧκΌφ °” 6 ΝΗ (смесь энантиомеров)
λΧΟΟ (31) V Η 7 Η (32) ΗΝ^
(зз) ΝΗ УАмА» 'χ
Примерные способы синтеза соединений изобретения описываются в контексте.
Способы получения соединений изобретения.
Соединения изобретения можно получать способами, аналогичными способам, разработанным в данной области, например последовательностями реакций, показанными на схемах 1-5. Система нумерации, применяемая для общих схем, не обязательно соответствует системе нумерации, применяемой в другом месте в описании или в формуле изобретения.
Соединение формулы С можно получить в стандартных условиях алкилирования обработкой соединения формулы А соединением формулы В или его подходящим образом защищенным производным, и ЬС представляет собой уходящую группу, такую как хлор, бром, йод или сульфонат (например, мезилат, тозилат или трифлат). Условия проведения алкилирования соединения формулы А соединением формулы В могут включать нагревание соединения формулы А и соединения В с растворителем или без него, предпочтительно с подходящим растворителем, таким как ДМФА, необязательно в присутствии подходящего основания, такого как карбонат калия или натрия или гидрид натрия (см. схему 1).
- 16 021798
Схема 1
к1-ю
И
А
В Ο,Ν
или Р4-С/Н2
Νί Ренея
С Я’
ΗίΝ—
Х«5. к-ме
Х = О,К«Вп
Соединение формулы Ό можно получить восстановлением нитрогруппы соединения формулы С или его подходящим образом защищенного производного в стандартных условиях, как показано на схеме 1. В одном примере стандартные условия восстановления включают применение никеля Ренея в полярном растворителе, таком как метанол, при температурах флегмы. Или же соединение формулы Ό можно получить гидрированием соединения формулы С с применением подходящего катализатора (например, палладия-на-угле) в этаноле или другом растворителе или комбинациях растворителей. Как показано на схеме 1, соединение формулы Р можно получить реакцией соединения формулы Е с соединением формулы Ό согласно предыдущей методике (публикация патента США № 20060258721 А1, включенная в контекст в качестве ссылки).
Альтернативно, получение соединения формулы К, у которого К1 представляет собой (СН2)ПХ|. где X1 представляет собой или
ния, указанные в контексте в качестве примеров, включает реакцию соединения формулы Н, где ЬО представляет собой подходящую уходящую группу, такую как хлор, бром, йод или сульфонат (например, мезилат, тозилат или трифлат), с соединениями формулы I в стандартных условиях алкилирования, как показано на схеме 2. Когда ЬО представляет собой альдегидную или кетоновую группу, можно применять стандартные условия восстановительного аминирования (см., например, АЬ0е1-Мар0 е! а1., I. 0г§. СЬет. 61:3849-3862, 1996) с применением подходящего восстанавливающего агента, такого как №ВН4. NаВН(0Ас)3, Ναί'ΝΒΗ) и т.п., в спиртовом растворителе, таком как этанол, с получением соединения формулы I. Восстановительное аминирование можно проводить в одной реакции или имин, являющийся результатом смешивания соединения формулы Н с соединением формулы I, можно получить предварительно ίη Фи с последующим восстановлением имина подходящим восстанавливающим агентом. Соединение I превращают в соединение К восстановлением нитро с последующим амидированием способом, аналогичным описываемому на схеме 1.
- 17 021798
Соединения общей формулы Ь можно получить из соединения формулы Ό восстановлением амида литийалюминийгидридом в апротонных растворителях (схема 3). В альтернативном случае соединение формулы Ь можно восстановить с применением подходящего восстанавливающего агента, такого как ВН3. Эти соединения затем превращают в соединение формулы М сочетанием с реагентом Е, как описано на схеме 1.
Соединения общей формулы Р можно получить из соединения N и соединения общей формулы О в стандартных условиях восстановительного амидирования (схема 4; АЪйе1-Марй с1 а1. 1. Огд. СЬет. 61:3849-3862, 1996). Соединения общей формулы К можно получить галогенированием ароматического кольца соединений общей формулы Р согласно разработанным методикам (см., например, йе 1а Маге, Е1ес1торЬШс На1одепайоп, СатЪпйде Итуегейу Ргекк, СатЪпйде (1976)). Предпочтительные условия включают реакцию соединений общей формулы Р с Ν-бромсукцинимидом в нейтральных условиях. Соединение формулы δ можно получить катализируемым металлом аминированием соединения формулы К, где X представляет собой хлор, бром или йод (№о1Ге е1 а1. 1. Огд. СЬет. 65:1158-1174, 2000) в присутствии подходящего аммониевого эквивалента, например имина бензофенона, иЖ81Ме3,)2. Ρ1ι3δίΝΗ2. №^81Ме3)2 или амида лития (Ниапд апй Вис11\уа1й, Огд. Ьей. 3(21):3417-3419, 2001). Предпочтительным галогеном является бром в присутствии катализатора палладия(0) или палладия(11). Примеры подходящих металлических катализаторов включают, например, палладиевый катализатор, координированный с подходящими лигандами. Подходящие лиганды для палладия можно значительно варьировать и они могут включать 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (ксантфос), 2,2'-бис-(дифенилфосфино)1,1'-бинафтил (ΒΙΝΑΡ), бис-(2-дифенилфосфинофениловый) простой эфир (ЭРЕрЬок), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (йррГ), 1,2-бис-дифенилфосфинобутан (йррЪ), 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан (йррр), (о-бифенил)-Р(трет-Ви)2, (о-бифенил)-Р(Су)2, Р(трет-Ви)3, Р(Су)3 и другие лиганды (см., например, Ниапд апй ВисЬта1й, Огд. Ьей. 3(21):3417-3419, 2001). Лигандом предпочтительно является Р(трет-Ви)3. Катализируемое Рй аминирование проводят в подходящем растворителе, таком как ТГФ, диоксан, толуол, ксилол, ЭМЕ и т.п., температуры реакции находятся между комнатной температурой и температурой флегмы. Превращение соединения δ в Т проводят в условиях схемы 1.
- 18 021798
Схема 4
Соединение формулы V, в которой Ьа1 = Р, С1, Вг или I, можно получить из соединения и и соединения О (схема 5) в стандартных условиях восстановительного аминирования, как ранее описано на схеме 4. Когда Ьа1 = Р или С1, соединение формулы Ζ можно получить из соединения формулы V реакцией с
V в основных условиях. Подходящее основание, такое как К2СО3, применяют в подходящем растворителе, подобном ДМФА. В некоторых случаях для такого превращения может быть необходимо нагревание. В альтернативном случае, когда Ьа1 = С1, Вг или I, соединение Ζ можно получить из соединений V и
V реакцией, катализируемой переходным металлом. Предпочтительные условия включают применение палладиевого катализатора, такого как Рй(ОАс)2 или Рй2(йЬа)3 с фосфиновым лигандом, таким как ΙοκίрЬок или СуРР'Ви (Наг1\ущ. Асе. СЬет. Кек., 2008, 41, 1534). Гидроксильную группу соединения Ζ можно превратить в ЬС, такой как хлор, бром, йод или сульфонат (например, мезилат, тозилат или трифлат), с получением соединения общей формулы Υ с применением стандартных условий. Предпочтительной уходящей группой является йод и ее можно ввести с применением трифенилфосфина и йода в подходящем растворителе, таком как ТГФ. Соединение Υ можно циклизовать в соединение Ζ нагреванием с основанием, таким как К2СО3, в подходящем растворителе, таком как ДМФА. Соединения формулы Ζ можно превратить в соединения изобретения А1 восстановлением нитрогруппы с последующим сочетанием амидина, как описано ранее на схеме 1.
Схема 5
В некоторых случаях химические превращения, указанные выше, могут быть модифицированы, например, применением защищенных групп, чтобы предотвратить побочные реакции вследствие реакционноспособных групп, например, присоединенных в качестве заместителей. Этого можно достичь при помощи общепринятых защитных групп, описываемых в РгоЮсОме Сгоирк ίη Огдашс СЬетщЬу, МсОт1е, Ей., Р1епит Ргекк, 1973 апй ίη Сгеепе апй ХУШк, РгоЮсЬме Сгоирк ίη Огдашс 8уп1Ьек1К, 1оЬп \УПеу & 8опк, 3гй ЕйФоп, 1999.
Соединения изобретения и промежуточные продукты при получении соединений изобретения можно выделять из их реакционных смесей и очищать (если необходимо) с применением общепринятых методик, включающих экстракцию, хроматографию, дистилляцию и перекристаллизацию.
Получение требуемой соли соединения достигают с применением стандартных способов. Например, нейтральное соединение обрабатывают кислотой в подходящем растворителе и образованную соль выделяют фильтрованием, экстракцией или любым другим подходящим способом.
Получение сольватов соединений изобретения может варьировать в зависимости от соединения и сольвата. Сольваты обычно получают растворением соединения в подходящем растворителе и выделе- 19 021798 нием сольвата охлаждением или добавлением антирастворителя. Сольват обычно сушат или подвергают азеотропной перегонке в условиях окружающей среды.
Получение оптического изомера соединения изобретения можно проводить реакцией подходящих оптически активных исходных веществ в условиях реакции, которые не вызовут рацемизацию. В альтернативном случае, индивидуальные энантиомеры можно выделить разделением рацемической смеси с применением стандартных методик, таких как фракционная кристаллизация или хиральная ВЭЖХ.
Соединение изобретения, меченное радиоактивным изотопом, можно получить с применением стандартных способов, известных в данной области. Например, тритий можно включить в соединение изобретения с применением стандартных методик, таких как гидрирование подходящего предшественника в соединение изобретения с применением газообразного трития и катализатора. В альтернативном случае, соединение изобретения, содержащее радиоактивный йод, можно получить из соответствующего производного триалкилолова (предпочтительно триметилолова) с применением стандартных условий иодирования, таких как иодид [1251] натрия в присутствии хлорамина-Т в подходящем растворителе, таком как диметилформамид. Соединение триалкилолова можно получить из соответствующего соединения нерадиоактивного галогена, предпочтительно йода, с применением стандартных условий катализируемого палладием станнилирования, такого как, например, гексаметилдиолово, в присутствии тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) в инертном растворителе, таком как диоксан, и при повышенных температурах, предпочтительно 50-100°С.
Фармацевтические применения.
В настоящем изобретении описаны все применения соединений изобретения, включая применение в терапевтических способах, независимо от того, применяют ли их отдельно или в комбинации с другим терапевтическим веществом, их применение в композициях для ингибирования активности N08, например ηΝ0δ, их применение в диагностических анализах и их применение в качестве средств для исследования.
Соединения изобретения обладают полезной ингибирующей N08 активностью и поэтому являются применимыми для лечения или снижения риска появления заболеваний или состояний, интенсивность симптомов которых уменьшают снижением активности N08. Такие заболевания или состояния включают заболевания и состояния, при которых синтез или сверхсинтез оксида азота играет способствующую им роль.
Данные доказывают роль оксида азота (N0) в качестве медиатора нейропередачи, синаптической пластичности и патологической боли в центральной и периферической нервных системах (8пубег, 8οίепсе 1992, 257:494-496; Ме11ег е! а1., Раш 52:127-136, 1993; Рга8е! е! а1., А. Ргод. №игоЪю1. 64: 51-68, 2001; апб Сйо1 е! а1., ί. №иго1. 8с1. 138 (1-2):14-20, 1996). Многочисленные исследования на животных моделях и генетических дефицитах предполагают главную роль N0 и ηNО8 в патобиологии сенсибилизированных болей, таких как невропатическая боль (СЬо1 е! а1., 1. №иго1. 8с1. 138(1-2):14-20, 1996), и ассоциированных поведенческих реакциях, таких как термическая гипералгезия (Ме11ег е! а1., №иго8С1. 50:7-10, 1992; Уатато!о е! а1., Апе8!Ье8ю1оду 82:1266-1273, 1995) и механическая аллодиния (Нао е! а1. Раш, 66:313-319, 1996; Рап е! а1., Апе8!Ье8ю1оду 89(6):1518-23, 1998). Например, повреждение спинномозгового нерва у мышей приводит к развитию механической повышенной чувствительности у мышей дикого типа, но не у мышей с дефицитом ηNО8 (Оиап е! а1., Мо1 Раш, 3:29, 2007). Аналогично этому, системное или подоболочечное введение ингибиторов N08, таких как Ь^АМЕ или 7-№, может снизить индуцированную повреждением нерва механическую повышенную чувствительность. Эта механическая повышенная чувствительность сопровождается повышением экспрессии белка ηNО8, но не еN08 или ^NО8. в ипсилатеральных спинно-мозговых узлах Ь5 через 7 дней после повреждения нерва (Оиап е! а1., Мо1. Раш, 3:29, 2007). Исследования экспрессии генов показали, что N100. белок, регулирующий активность фермента ηNО8, позитивно регулируется в спинном мозге и спинно-мозговых узлах ΌΡΟ) крысиной модели невропатической или воспалительной боли (СЬеп е! а1. 1. Мо1. Н18!о1. 39(2):125-33, 2008). На модели СЬипд невропатической боли (лигирование неповрежденного нерва или 8МЬ) ингибиторы N08, такие как Ь^АМЕ, могут уменьшать подобные невропатической боли поведенческие реакции, такие как механическая и холодная аллодиния, продолжительная боль (Уооп е! а1., №игоРерог1 9:367-372, 1998) и термическая гипералгезия (см., например, патент США № 7375219 и публикацию РСТ \У0 2009/062318, каждый из которых таким образом включен в качестве ссылки). Ингибиторы N08 обнаруживали эффективность при других болевых состояниях, сенсибилизированных компонентами центральной сенсибилизации, таких как индуцированная винкристином (химиотерапия) болезненная невропатия (Кате1 е! а1. Рат. 117(1-2):112-20, 2005), индуцированная полным адъювантом Фрейнда (СРА) хроническая воспалительная боль (СЬип е! а1., Раш 119:113-123, 2005), индуцированная каррагенаном механическая и термическая гипералгезия (Напбу е! а1., №игорЬагтасо1оду 37:37-43, 1998; 08Ъоте е! а1., Вг. ί. РЬагтасо1. 126(8):1840-1846, 1999), висцеральная гипералгезия после инстилляции зимозана внутрь толстой кишки (СоиДпЬо е! а1. Еиг. ί. РЬагтасо1. 429:319-325, 2001) и постгерпетическая аллодиния (8а8ак1 е! а1. №иго8иепсе, 150(2):459-466, 2007).
Согласно этому в настоящем изобретении описан способ лечения, предупреждения или снижения риска появления заболевания или состояния, вызванного активностью N08, который включает введение
- 20 021798 эффективного количества соединения изобретения в клетку или животному, нуждающемуся в этом. Такие заболевания или состояния включают, например, головную боль типа мигрени (с аурой или без нее), хроническую головную боль типа напряжения (СТТН), мигрень с аллодинией, головную боль вследствие чрезмерного употребления лекарственных средств, кластерную головную боль; невропатическую боль, такую как связанную со СПИД болезненную невропатию, центральную боль после инсульта (СРЗР), хроническую головную боль, диабетическую невропатию, невропатическую боль, индуцированную химиотерапией (например, паклитакселом, цис-платином, доксорубицином и т.д.), постгерпетическую невралгию, тригеминальную невралгию); хроническую воспалительную боль, являющуюся результатом остеоартрита, ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилоартрита, псориатического артрита, недифференцированной спондилоартропатии, воспалительного артрита, висцеральную боль, нейровоспаление, индуцированную лекарственной терапией гипералгезию и/или аллодинию, например, индуцированную опиоидом гипералгезию или триптан(5-НТ1С/1В-агонист)-индуцированную гипералгезию/аллодинию, острую боль, хроническую боль, диабетическую боль, боль при раке костей; химические зависимости или аддикции, например, привыкание к чрезмерному употреблению лекарственного средства, привыкание к употреблению кокаина, привыкание к никотину, индуцированную метамфетамином нейротоксичность, этанольную толерантность, зависимость или абстиненция или индуцированную морфином/опиоидом толерантность, зависимость, гипералгезия или абстиненция, нарушения ЦНС, включающие, но не ограничивающиеся перечисленным, например, эпилепсию, тревогу, депрессию (как таковую или в комбинации), синдром дефицита внимания и гиперактивности (АЭНИ), психоз или деменцию, нейродегенеративные заболевания или повреждение нерва, например острое повреждение спинного мозга, связанная со СПИД деменция, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (АЬ8), болезнь Хантингтона, рассеянный склероз, нейротоксичность или травма головы, связанные с сердечно-сосудистым заболеванием состояния, например инсульт, связанное с САВО неврологическое нарушение, НСА-кардиогенный шок, повреждение при реперфузии или васкулярная деменция, или желудочно-кишечные нарушения, например связанная с илеостомией диарея или демпинг-синдром.
Нижеследующее описание является кратким изложением и основой для связи между ингибированием ЫОЗ (особенно ПЫОЗ или ПЫОЗ и 1ЫОЗ) и некоторыми из этих состояний.
Мигрень с аурой или без ауры.
Первое наблюдение, сделанное Актапо ЗоЬгего в 1847 году, о том, что небольшие количества нитроглицерина, агента, высвобождающего ЫО, вызывают тяжелую головную боль, привело к гипотезе мигрени на основе оксида азота (О1екеп е! а1., СерЬа1ад1а 15:94-100, 1995). Известно, что серотонергические 5НТ1С/1В-агонисты, такие как суматриптан, которые применяют клинически при лечении мигрени, предотвращают снижение кортикального распространения в лиссэнцефалическом и гирэнцефалигическом мозге во время приступа мигрени, процесса, приводящего к широко распространенному высвобождению ИО. Действительно, было обнаружено, что суматриптан модифицирует искусственно повышенные уровни кортикального МО после инфузии глицерилтринитрата крысам (КеаД е! а1., Вгат Кек. 847:18, 1999; 1ЫД, 870 (1-2):44-53, 2000). В рандомизированном двойном слепом клиническом испытании на мигрень у людей наблюдали степень реакции 67% после одного внутривенного введения гидрохлорида Ь-Ν0-метиларгинина (Р-ХММА, ингибитора ΝΌ3). Действие не относили к простому, опосредуемому еХОЗ сужению сосудов, поскольку не наблюдали никакое влияние на скорость в средней церебральной артерии, определяемую транскраниальным допплеровским измерителем (Ьаккеп е! а1., Ьапсе! 349:401402, 1997). В недавнем адаптивном клиническом испытании, разработанном для лечения острой мигрени, введение селективного ингибитора |ХО8 0^274150 при дозах, составляющих от 5 до 180 мг, не отличалось от плацебо в терминах части субъектов, у которых не было боли через 2 ч после лечения. То же самое соединение, оцениваемое в клиническом испытании профилактики мигрени (120 мг ежедневно в течение 12 недель), было также неэффективном при снижении частоты приступов мигрени (Ноуе е! а1. СерЬа1а1д1а, 2009, 29, 132). Однако в открытом поисковом исследовании с применением гидроксикобаламина-поглотителя НО снижение частоты приступов мигрени на 50% наблюдали у 53% пациентов и наблюдали также снижение общей продолжительности приступов мигрени (уап Дег Киу е! а1., СерЬа1д1а 22(7):513-519, 2002). Результаты этих клинических испытаний предполагают, что |ХО8 или еХОЗ не играет значительную роль в индуцировании головной боли типа мигрени, а скорее указывают на пХОЗ в качестве ключевой изоформы при головной боли типа мигрени. Соединения изобретения (например, соединение формулы (I), такое как соединения (1)-(33)), можно также применять для профилактики мигрени.
Мигрень с аллодинией.
Клинические исследования показали, что у до 75% пациентов развивается кожная аллодиния (чрезмерная кожная чувствительность) во время приступов мигрени и что это развитие во время мигрени является вредным для противомигреневого действия триптановых 5НТ1В.ш-агонистов (ВшКеш е! а1., Апп. №ито1. 47:614-624, 2000; ВшКеш е! а1., Вгат, 123:1703-1709, 2000). Хотя раннее введение триптанов, таких как суматриптан, может прекращать мигреневую боль, позднее вмешательство суматритана не способно прекращать мигреневую боль или возвращать в прежнее состояние чрезмерную кожную чувствительность у пациентов, страдающих мигренью, уже связанных с аллодинией (ВшКеш е! а1., Апп. №и- 21 021798 го1. Ό0Ι: 10.1002/апа. 10785, 2003; Вцг5!еш аЫ 1акиЬо\У5кк Апп. №игок, 55:27-36, 2004). Развитие периферической и центральной чувствительности коррелирует с клиническими проявлениями мигрени. У пациентов, страдающих мигренью, пульсирующая боль имеет место через 5-20 мин после начала головной боли, тогда как кожная аллодиния начинается через 20-120 мин (Вцг5!еш е! а1., Вгат, 123:1703-1709, 2000). У крыс экспериментально индуцированная периферическая чувствительность менингеальных болевых рецепторов имеет место в пределах 5-20 мин после нанесения воспалительного супа (Ι.8.) на твердую мозговую оболочку (Безу ;·ιπά 81га55шап, I. РЬуПок, 538:483-493, 2002), тогда как центральная чувствительность тригеминоваскулярных нейронов развивается через 20-120 мин (Вцг5!еш е! а1., I. №игорку51о1. 79:964-982, 1998) после введения Ι.8.
Параллельные влияния при раннем или позднем введении антимигреневых триптанов, подобных суматриптану, на развитие центральной чувствительности демонстрировали на крысах (Вцг5!еш ;·ιπά 1акиЬо\У5кк см. выше). Так, раннее, но не позднее введение суматриптана, предотвращает длительное повышение 1.8.-индуцированной спонтанной активности, наблюдаемой в центральных тригеминоваскулярных нейронах (клиническая корреляция интенсивности мигреневой боли). Кроме того, позднее введение суматриптана крысам не предотвращает 1.8.-индуцированную нейронную чувствительность к механической стимуляции у кожи, расположенной вокруг глазницы, а также не снижает порог тепловой чувствительности (клиническая корреляция пациентов с механической и термической аллодинией в области вокруг глазницы). В противоположность этому, раннее введение суматриптана предотвращает вызванное Ι.8. индуцирование как термической, так и механической гиперчувствительности. После развития центральной чувствительности позднее воздействие суматриптина реверсирует увеличение дуральных рецептивных участков и повышает чувствительность до дурального сдавливания (клиническая корреляция пульсирующей боли, усиленной изгибанием), в то время как раннее воздействие предотвращает его.
В предыдущих испытаниях на мигреневых соединениях, таких как суматриптин (КаиЬе е! а1., Вг. 1. РЬагшасок 109:788-792, 1993), золмитриптан (Οоаά5Ьу е! а1., Раш 67:355-359, 1996), наратриптан (Οоаά5Ьу е! а1., Вг. 1. РЬагшасок, 328:37-40, 1997), ризатриптан (СитЬегЬа!сЬ е! а1., Еиг. 1. РЬагшасок, 362:43-46, 1998) или Ь-471-604 (СишЬегЬа!сЬ е! а1., Вг. 1. РЬагшасок 126:1478-1486, 1999), исследовали их влияния на несенсибилизированные центральные тригеминоваскулярные нейроны (в нормальных условиях) и поэтому эти исследования не отражали действия таких соединений при патофизиологических условиях мигрени. Хотя триптаны являются эффективными для прекращения пульсирующей боли при мигрени, независимо от того, вводили ли их рано или поздно, периферическое действие суматриптана не способно прекратить мигреневую боль с аллодинией после позднего введения посредством действий центральной сенсибилизации тригеминоваскулярных нейронов. Ограничения триптанов предполагают, что улучшение в лечении мигреневой боли можно достичь применением лекарственных средств, которые могут прерывать начало центральной сенсибилизации, таких как соединения настоящего изобретения.
Было обнаружено, что системно введенный нитроглицерин повышает уровни πΝ08 и с-Ро5иммунореакционных нейронов (нейронная активация маркеров) в тригеминальных хвостатых ядрах у крыс спустя 4 ч, позволяя предположить, что N0 вероятно опосредует центральную сенсибилизацию тригеминальных нейронов (Рагйикг е! а1., №игогерой 11(14):3071-3075, 2000). Кроме того, Ь^АМЕ может ослаблять экспрессию Ро5 в тригеминальных хвостатых ядрах после пролонгированной (2 ч) электрической стимуляции сагиттального синуса (Но5кш е! а1. №иго5ск Ьей. 266(3):173-6, 1999). В сочетании со способностью ингибиторов N08 прерывать острый приступ мигрени (Ьа55еп е! а1., СерЬа1а1д1а 18(1):27-32, 1998), соединения изобретения, отдельно или в комбинации с другими антиноцицептивными агентами, представляют собой превосходные кандидатуры терапевтических средств для прерывания мигрени у пациентов после развития аллодинии.
Хроническая головная боль (СТТН).
N0 содействует сенсорной передаче в периферической (А1еу е! а1., 1. №иго5ск 1:7008-7014, 1998) и центральной нервной системе (Ме11ег ;·πιά ОеЬЬай, Рат 52:127-136, 1993). Существенное экспериментальное доказательство показывает, что центральная сенсибилизация, вызванная пролонгированным ноцицептивным вводом из периферии, повышает возбудимость нейронов в ЦНС, и вызывается повышением активации N08 и синтеза N0 или ассоциирована с ними (ВегпЙ5еп, СерЬа1ад1а 20:486-508, 2000; \УооК аЮ 8а1!ег, 8аепсе 288:1765-1769, 2000). Обнаружено, что экспериментальная инфузия донора N0, глицерилтринитрата, вызывает головную боль у пациентов. В исследовании двойным слепым методом пациенты с хронической головной болью типа напряжения, получающие ^-NММА (ингибитор N08), имели значительное снижение в интенсивности головной боли (А5Ьша аЫ ВеЮйеп, 1. НеаάасЬе Раш 2:21-24, 2001; А5Ыпа е! а1., Ьапсе! 243 (9149):287-9, 1999). Таким образом, ингибиторы N08 настоящего изобретения могут быть применимыми для лечения хронической головной боли типа напряжения.
Острое повреждение спинного мозга и хроническая или невропатическая боль.
У людей N0 вызывает боль при внутрикожной инъекции (НоЬЬи5еп аЫ АгЩ!, №иго5ск Ьей. 165:71-74, 1994), тем самым показывая непосредственное участие N0 в боли. Кроме того, ингибиторы N08 оказывают слабое влияние или не оказывают влияние на нонацептивный перенос при нормальных состояниях (Ме11ег аЮ ОеЬЬаП, Раш 52:127-136, 1993). N0 принимает участие в переносе и модуляции нонацептивной информации на уровне периферии, спинного мозга и на надостном уровне (ЭиаПе е! а1.,
- 22 021798
Еиг. I. РЬагтасо1. 217:225-227, 1992; На1еу е! а1., №иго8С1епсе 31:251-258, 1992). Повреждения или дисфункции в ЦНС могут привести к развитию симптомов хронической боли, известной как центральная боль, и включают спонтанную боль, гипералгезию и механическую и холодную аллодинию (Радт, Те\!Ьоок οί Раш, СЬитсЬШ Ыушд8!опе, ЕФпЬигдЬ, 1989, рр. 634-655; Таккег Ιη: ТЬе Мападетеп! οί Раш, рр. 264-283, II Вотса (Ей.), Ьеа апй РеЫдег, РЬйайе1рЫа, РА, 1990; Сазеу, Рат апй Сеп!га1 №туои8 8у§!ет ЭЬеахе: ТЬе Сеп!га1 Рат 8упйготе§, рр. 1-11 К.Ь. Сакеу (Ей.), Кауеп Рге88, №\у Уогк, 1991). Было показано, что системное введение (внутрибрюшинное) ингибиторов N08 7-ΝΙ и ЬХАМЕ ослабляет хронические, подобные аллодинии симптомы у крыс с повреждением спинного мозга (Нао апй Хи, Раш 66:313319, 1996). Действия 7-ΝΙ не были связаны со значительным седативным действием и были реверсированы Ь-аргинином (предшественник N0). Считается, что сохранение термической гипералгезии опосредуется оксидом азота в поясничном спинном мозге ЬХАМЕ и может быть блокировано подоболочечным введением ингибитора (оксид азота)-синтазы, подобного ^-NАNЕ или растворимого ингибитора гуанилатциклазы метиленового синего (№иго8с1еп.ее 50(1):7-10, 1992).
Невропатическая боль может быть обусловлена первичным инсультом периферической (например, тройничная невралгия) или центральной нервной системы (например, таламическая боль). Вероятно, однако, что патфизиология, приводящая к состоянию невропатической боли, начинающемуся от распространений периферического повреждения на протяжении времени к другим участкам, чтобы поразить сильнее другие нейроны в спинно-мозговых узлах или изменить происходящее ингибирование передачи спинно-мозговой боли центрами головного мозга, такими как периакведуктальное серое вещество в мозге, 1оси5 согеаЬк (21ттегтапп, Еиг. I. РЬагтасо1. 429:23-27, 2001) или изменить нисходящие облегчающие пути в ростровентромедиальном мозговом веществе (КУМ) (Вее апй Эюкепюп, Рат, 140(1):209-23, 2008).
Таким образом, ингибиторы N08 настоящего изобретения могут быть применимы для лечения хронической или невропатической боли.
Диабетическая невропатия.
Эндогенный полиаминовый метаболит агматин является метаболитом аргинина, который является как ингибитором N08, так и антагонистом канала Хметил-Э-аспартата (NМ^А). Агматин является эффективным как в модели невропатической боли, созданной лигатированием спинно-мозгового нерва, так и стрептозотоциновой модели диабетической невропатии (Кагайад е! а1., №иго8ск Ьей. 339 (1):88-90, 2003). Таким образом, соединения, обладающие ингибирующей N08 активностью, такие как, например, соединение формулы I, комбинация ингибитора N08 и антагониста NМ^А должны быть эффективными при лечении диабетической невропатии и других состояний невропатической боли.
Воспалительные заболевания и нейровоспаление.
ЬР8, хорошо известное фармакологическое средство, индуцирует воспаление во многих тканях и активирует №кВ во всех областях головного мозга при введении внутривенно. Он активирует также провоспалительные гены при инъекции локально в полосатое тело (8!егп е! а1., ί. №иго1ттипо1оду, 109:245-260, 2000). Недавно было обнаружено, что как антагонист рецептора NМ^А МК801, так и селективный для головного мозга ингибитор ηN08 7-№ снижают активацию №кВ в головном мозге и таким образом показывают явную роль пути глутамата и N0 при нейровоспалении (О1е/ег е! а1., №иторЬагтасо1оду 45(8):1120-1129, 2003). Таким образом, введение соединения изобретения, либо отдельно, либо в комбинации с антагонистом NМ^А. должно быть эффективным при лечении заболеваний, являющихся результатом нейровоспаления.
Инсульт и повреждение при реперфузии.
Роль N0 в церебральной ишемии может быть защитной или деструктивной в зависимости от стадии развития ишемического процесса и от клеточного компартмента, продуцирующего N0 (Эа1ката е! а1., Вташ Ра!Ьо1оду 4:49, 1994). Хотя N0, продуцируемый еN08, является вероятно благоприятным посредством действия в качестве вазодилатора для повышения кровотока к пораженному участку (Ниапд е! а1., ί. СегеЬ. В1оой Р1о\у Ме!аЬ. 16:981, 1996), N0, продуцированный ηN08, содействует первоначальному метаболическому повреждению ишемической полутени, приводящему к более значительным инфарктам (Нага е! а1., ί. СегеЬ. В1оой Р1о\у Ме!аЬ. 16:605, 1996). Метаболическое нарушение, которое имеет место во время ишемии и последующей реперфузии, приводит к экспрессии и высвобождению некоторого количества цитокинов, которые активируют (N08 в нескольких типах клеток, в том числе некоторых типах клеток центральной нервной системы. N0 может продуцироваться при цитотоксических уровнях посредством (N08, и повышенные уровни ,N08 содействуют прогрессирующему повреждению ткани в ишемической полутени, приводящему к более значительным инфарктам (Раттепйет е! а1., Вг. I. РЬагтасо1. 127:546, 1999). Обнаружено, что ингибирование (-N08, ослабляет церебральное ишемическое повреждение у крыс (Ат. I. РЬу8ю1. 268:К286, 1995).
Показано, что синергическое нейрозащитное действие наблюдается при комбинированном введении антагониста NМ^А (например, МК-801 или ЬУ-293558) с селективными ингибиторами ηN08 (7-№ или АКЫ7477) при глобальной церебральной ишемии (Нюк8 е! а1., Еиг. I. РЬагтасо1. 381:113-119, 1999). Таким образом, соединения изобретения, введенные либо отдельно, либо в комбинации с антагонистами
- 23 021798
ΝΜΌΑ, или соединениями, обладающими смешанной активностью ηNОδ/NМ^Α, могут быть эффективными при лечении состояний инсульта и других нейродегенеративных нарушений.
Осложнения, являющиеся результатом операции обходного шунтирования коронарной артерии.
Церебральное повреждение и когнитивная дисфункция до сих пор остаются основными осложнениями у пациентов, подвергаемых операции обходного шунтирования коронарной артерии (САВС) (КосЬ е! а1., Ν. Епд. 1. Мей. 335:1857-1864, 1996; δ1ι;·ι\ν е! а1., О. 1. Мей. 58:59-68, 1986). Эта церебральная недостаточность после хирургической операции является результатом ишемии из-за предоперационного церебрального микроэмболизма. В рандомизированном исследовании антагониста NΜ^Α ремацемида пациенты обнаруживали значительное общее послеоперационное улучшение в способности к обучаемости помимо уменьшенных недостатков (АттотетйЬ е! а1., δΙίΌΐ^ 29:2357-2362, 1998). При условии участия эксайтотоксичности, вызванной избыточным высвобождением глутамата и притоком кальция, предполагается, что нейрозащитный агент, такой как соединение изобретения или антагонист NΜ^Α, либо отдельно, либо в комбинации (как обсуждалось выше), может обладать благоприятным действием, улучшающим неврологические последствия после САВС.
Связанная со СПИД деменция.
Инфекция ВИЧ-1 может вызвать деменцию. Белок оболочки др-120 ВИЧ-1 убивает нейроны в первичных кортикальных культурах при низких пикомолярных уровнях и требует наружный глутамат и кальций (Иа\\ъоп е! а1., 90 (8):3256-3259, 1993). Эту токсичность можно ослабить введением нейрозащитного агента, например соединения изобретения, либо отдельно, либо в комбинации с другим терапевтическим агентом, таким как, например, антагонист NΜ^Α (обсуждаемый выше).
Примеры других соединений, например антагонистов NΜ^Α, применимых для любой из комбинаций изобретения, включают аптиганел; безонпродил; будипин; конантокин С; делюцемин; дексанабинол; фелбамат; флуорофелбамат; гациклидин; глицин; ипеноксазон; кайтоцефалин; ланицемин; ликостинел; мидафотел; милнаципран; нерамексан; орфенадрин; ремацемид; топирамат;
(аК)-а-амино-5-хлор-1-(фосфонометил)-1Н-бензимидазол-2-пропановую кислоту;
1- аминоциклопентанкарбоновую кислоту;
[5-(аминометил)-2-[[[^)-9-хлор-2,3,6,7-тетрагидро-2,3-диоксо-1Н,5Н-пиридо[1,2,3-йе]хиноксалин5 -ил] ацетил] амино] фенокси]уксусную кислоту;
а-амино-2-(2-фосфоноэтил)циклогексанпропановую кислоту; а-амино-4-(фосфонометил)бензолуксусную кислоту;
(3Е)-2-амино-4-(фосфонометил)-3 -гептеновую кислоту;
3-[(1Е)-2-карбокси-2-фенилэтенил] -4,6-дихлор-1Н-индол-2-карбоновую кислоту;
соль 5-оксида 8-хлор-2,3-дигидропиридазино[4,5-Ъ]хинолин-1,4-диона с 2-гидрокси-^^№ триметилэтанаминием;
№-[2-хлор-5-(метилтио)фенил]^-метил^-[3-(метилтио)фенил]гуанидин;
№-[2-хлор-5-(метилтио)фенил]^-метил-^[3-[(К)-метилсульфинил]фенил]гуанидин;
6- хлор-2,3,4,9-тетрагидро-9-метил-2,3-диоксо-1Н-индено[1,2-Ъ]пиразин-9-уксусную кислоту;
7- хлортиокинуреновую кислоту;
(3 δ,4аК,6δ,8аК)декагидро-6-(фосфонометил)-3 -изохинолинкарбоновую кислоту;
(-)-6,7-дихлор-1,4-дигидро-5-[3-(метоксиметил)-5-(3-пиридинил)-4Н-1,2,4-триазол-4-ил]-2,3хиноксалиндион;
4,6-дихлор-3-[(Е)-(2-охо-1-фенил-3-пирролидинилиден)метил]-1Н-индол-2-карбоновую кислоту;
(2К^)-те1-5,7-дихлор-1,2,3,4-тетрагидро-4-[[(фениламино)карбонил]амино]-2-хинолинкарбоновую кислоту;
(3К^)-те1-3,4-дигидро-3-[4-гидрокси-4-(фенилметил)-1-пиперидинил]-2Н-1-6ензопиран-4,7-диол;
2- [(2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино]ацетамид;
1,4-дигидро-6-метил-5-[(метиламино)метил]-7-нитро-2,3-хиноксалиндион;
[2-(8,9-диоксо-2,6-диазабицикло[5.2.0]нон-1(7)-ен-2-ил)этил]фосфоновую кислоту;
(2К^)-1,2,3,4,5,6-гексагидро-3-[^)-2-метоксипропил]-6,11,11-триметил-2,6-метано-3-бензазоцин9-ол;
2-гидрокси-5-[[(пентафторфенил)метил]амино]бензойную кислоту;
1-[2-(4-гидроксифенокси)этил]-4-[(4-метилфенил)метил]-4-пиперидинол;
1- [4-(1Н-имидазол-4-ил)-3-бутинил]-4-(фенилметил)пиперидин;
2- метил-6-(фенилэтинил)пиридин;
3- (фосфонометил)-Ь-фенилаланин и
3,6,7 -тетрагидро-2,3-диоксо-^фенил-1Н,5Н-пиридо [ 1,2,3-йе]хиноксалин-5-ацетамид или соединения, описанные в патентах США № 6071966; 6034134 и 5061703.
Кардиогенный шок.
Кардиогенный шок ^δ) является основной причиной смерти пациентов с острым инфарктом миокарда, который соответствует высоким уровням NО и воспалительных цитокинов. Высокие уровни NО и пероксинитрита обладают многими действиями, включающими непосредственное ингибирование спо- 24 021798 собности миокарда сокращаться, подавление окислительного фосфорилирования в митохондриях миокарда, изменение в метаболизме глюкозы, снижение восприимчивости к катехоламину и индуцирование системной вазодилации (НосЬтап, Сагси1а!юп 107:2998, 2003). При клиническом испытании с участием 11 пациентов с персистентным шоком введение ингибитора ΝΟδ Ь-ΝΜΜΑ привело к повышениям в общем количестве мочи и кровяного давления и коэффициенту выживаемости 72% вплоть до 30 дней (Сойет е! а1., С1гси1аЬоп 101:1258-1361, 2000). При рандомизированном изучении 30 пациентов показано, что Ь-ΝΑΜΤ снижал смертность пациентов от 67 до 27% (Сойет е! а1., Еиг. Неай. 1. 24(14):1287-95, 2003). Аналогично этому, введение соединения изобретения, либо отдельно, либо в комбинации с другим терапевтическим агентом, может быть применимо для лечения кардиогенного шока.
Страх и депрессия.
Последние исследования крыс и мышей в тесте на принудительное плавание (ΡδΤ) показали, что ингибиторы ΝΟδ обладают антидепрессантной активностью у мышей (Наткш е! а1. Еиг. ί. РЬагт. 372:207-213, 1999) и что их действие опосредуется серотонин-зависимым механизмом (Наткш е! а1., №игорЬагтасо1оду 44 (5):616-623, 1993). 7-ΝΙ демонстрирует анксиолитическую активность в тесте для крыс с лабиринтом (Υί1άίζ е! а1., РЬагтасо1оду, ВюсЬепийгу апй ВеЬауют 65:199-202, 2000), тогда как селективный ингибитор ηΝΟδ ΤΚΙΜ является эффективным в тесте, проводимом в компартменте со сменой свет-темнота, на модели ΡδΤ депрессии и страха (Уо1ке е! а1., ВеЬауюта1 Вташ КекеатсЬ 140(1-2):141-7, 2003). Введение соединения изобретения пораженному индивидууму, либо отдельно, либо в комбинации с другим терапевтическим агентом, таким как, например, антидепрессант, может быть применимым для лечения страха или депрессии.
Синдром дефицита внимания и гиперактивности.
Неселективное внимание (ΝδΑ) к влиянию окружающей среды у крыс со спонтанной гипертензией (8НК) и слабой возбудимостью №р1е5 (ПНЕ) применяли в качестве животной модели синдрома дефицита внимания и гиперактивности (ЛОНО) (АкрМе е! а1., ВеЬау. Вташ Кек. 95(1):23-33, 1998). Эти генетически измененные животные обнаруживают повышенное число эпизодов подъема на задние лапы, которые имели более короткую продолжительность, чем наблюдаемую у нормальных животных. Одна инъекция Ь-ИАМЕ при 10 мг/кг вызывала повышение продолжительности подъема на задние лапы. Аналогично этому, при применении более нейронно селективного 7-ΝΙΝΑ наблюдали увеличение в продолжительности подъема на задние лапы после быстрого введения (внутрибрюшинного), тогда как введение одной дозы с медленным высвобождением или дозы с медленным многократным высвобождением (введение подкожно в ДМСО) приводило к противоположному эффекту. Таким образом, введение соединения изобретения может быть применимо для лечения АЭНЭ.
Психоз.
Фенилциклидин (РСР) является неконкурентным блокатором каналов ΝΜΌΑ, который индуцирует поведенческие побочные действия у человека и млекопитающих, соответствующие поведенческим действиям у пациентов с психозом. На двух животных моделях психоза селективный ингибитор ηΝΟδ АКК17477 противодействовал РСР-индуцированной гиперлокомоции и РСР-индуцированному дефициту в ингибировании предварительного импульса акустической реакции-испуга ОоЬапккоп е! а1., РЬагтасо1. ^хкок 84 (5):226-33, 1999). Эти результаты предполагают участие ηΝΟδ в психозе. Следовательно, введение соединения изобретения пораженному индивидууму может быть применимым для лечения такого или родственных заболеваний или нарушений.
Травма головы.
Механизм неврологического повреждения у пациентов с травмой головы соответствует механизму инсульта и связан с эксайтотоксичным притоком кальция вследствие избыточного высвобождения глутамата, окислительным стрессом и продуцированием свободных радикалов из-за митохондриальной дисфункции и воспаления (Эгид & Μа^кеΐ Оеуе1ортеп! 9(3):60-63, 1998). Животные, обработанные ингибиторами (оксид азота)-синтазы (ΝΟδ), такими как 7-ΝΙ и 3-бром-7-нитроиндазол, показали улучшение в неврологических дефицитах после экспериментального травматического повреждения головного мозга (ΤΕΙ) ^еяе^е е! а1., ί. №иго!гаита 13:209-14, 1996). Введение соединения изобретения пораженному индивидууму может быть также применимо для лечения неврологического нарушения при травматических повреждениях головы.
Г ипотермическая остановка сердца.
Г ипотермическая остановка сердца (НСА) является способом, применяемым для защиты от ишемического повреждения во время хирургической операции на сердце, когда головной мозг восприимчив к нарушению во время периода прерывания циркуляции крови. В качестве вспомогательных средств во время НСА применяли различные нейрозащитные средства, и прогнозируется, что снижение продуцирования оксида азота во время НСА приводит к улучшениям в неврологической функции. Это основано на предыдущих исследованиях, которые показали, что эксайтотоксичность глутамата играет роль в НСАиндуцированном неврологическом повреждении (Кейтопй е! а1., ί. Оюгас. Сатйюуакс. διΐΓ§. 107:776-87, 1994; Кейтопй е! а1., Апп. Оюгас. διΐΓ§. 59:579-84, 1995) и что ΝΟ опосредует эксайтотоксичность глутамата (Эа\У5оп апй διη^Γ, ί. №ито5ск 14:5147-59, 1994). При исследовании 32 собак, подвергаемых в течение 2 ч НСА при 18°С было показано, что ингибитор нейронного ΝΟδ уменьшает продуцирование
- 25 021798 церебрального NО, значительно уменьшает некроз нейронов и приводит к превосходящей неврологической функции относительно контролей (Тзепд е! а1., Апп. Тбогас. 8игд. 67:65-71, 1999). Введение соединения изобретения может также быть применимым для защиты пациентов от ишемического повреждения во время хирургической операции на сердце.
Нейротоксичность и нейродегенеративные заболевания.
По-видимому, митохондриальная дисфункция, эксайтотоксичность глутамата и вызванное свободными радикалами окислительное повреждение лежат в основе патогенеза многих нейродегенеративных заболеваний, включающих боковой амиотрофический склероз (АЬ8), болезнь Паркинсона (РИ), болезнь Альцгеймера (АО) и болезнь Хантингтона (НИ) (8сбик е! а1., Мо1. Се11. Вюсбет. 174 (1-2):193-197, 1997; Веа1, Апп. №шо1. 38:357-366, 1995), и NО является основным медиатором в этих механизмах. Например, Оа\узоп е! а1. в ΡΝΑ8 88 (14):6368-6371, 1991, было показано, что ингибиторы NО8, подобные 7-ΝΙ и ЬΝΑΜΕ предотвращают нейротоксичность, вызванную Ν-метил-О-аспартатом и родственными возбуждающими аминокислотами.
(a) Болезнь Паркинсона.
Исследования показали также, что NО играет важную роль в нейротоксичности 1-метил-4-фенил1,2,3,6-тетрагидропиридина (МРТР), обычно применяемого в животной модели болезни Паркинсона (Ма!!беуз е! а1., №игоЬю1оду оί О1зеазе 4:114-121, 1997). МРТР превращается в МРР+ посредством МАОВ и быстро поглощается допаминовым переносчиком в митохондрии содержащих допамин нейронов с последующей активацией ηNО8, приводящей к гибели нейронов. Мутантные мыши, лишенные гена ηNО8, но не гена еNО8, имели меньшие повреждения в черном веществе (головного мозга) после инъекции МРР+ в полосатое тело. В исследованиях на приматах 7-ΝΙ вызывал сильное нейрозащитное действие и действие против паркинсонизма после воздействия МРТР (Нап!гауе е! а1., №!иге Меб. 2:1017-1021, 1996), как и неспецифический ингибитор Ь-ΝΑΜΕ (Т.8. 8тйб е! а1. №игогерог1 1994, 5, 2598-2600). Эти результаты предполагают, что введение подходящей дозы ингибитора NО8, такого как, например, соединение изобретения, может быть благоприятным при лечении болезни Паркинсона.
(b) Болезнь Альцгеймера (АО).
Патология АО связана с β-амилоидными бляшками, пропитанными активированными микроглиями и астроцитами. Когда культивированные крысиные микроглии подвергали воздействию амилоида, имело место заметное высвобождение микроглиями оксида азота, особенно в присутствии гамма-интерферона (Сообуш е! а1., Вгаш Кезеагсб 692(1-2):207-14, 1995). В кортикальных нейронных культурах обработка ингибиторами (оксид азота)-синтазы обеспечивает нейрозащиту от токсичности, вызванной бетаамилоидом человека (Рез/пк е! а1., №игозск АЬз!г. 21:1010, 1995). В соответствии с глутаматной гипотезой эксайтотоксичности при нейродегенеративных заболеваниях, слабый антагонист ΝΜΟΑ амантадин повышает ожидаемый срок жизни РИ-пациентов (υί!!ί е! а1., №иго1оду 46(6):1551-6, 1996). В предварительном контролируемом плацебо исследовании пациентов с васкулярной деменцией или деменцией типа Альцгеймера антагонист ΝΜΟΑ мемантин был связан с наблюдением улучшенного клинического всестороннего изменения и улучшенных показателей оценочной шкалы поведения для балльной оценки гериатрических пациентов (АУтЫаб апб РогШз, 1п!. 1. СепаШ РзусЫайу 14:135-46, 1999). Эти результаты предполагают, что введение подходящей дозы ингибитора NО8, такого как, например, соединения изобретения, может быть благоприятным при лечении АО.
(c) Боковой амиотрофический склероз.
Боковой амиотрофический склероз (АЬ8) является летальным нейродегенеративным заболеванием, характеризующимся селективной моторной нейронной гибелью. Совокупное доказательство подтверждает, что патогенезом АЬ8 является недостаточное выведение глутамата посредством глутаматного переносчика и специфическое распределение Са2+-проницаемых рецепторов АМРА в моторных спинномозговых нейронах, указывает на индуцированную глутаматом нейротоксичность. В спинном мозге (8азай е! а1., Ас!а №игора1бо1. (Вег1) 101 (4):351-7, 2001) и глиальных клетках (Аппезег е! а1., Ехр. №иго1. 171 (2):418-21, 2001) пациентов с АЬ8 обнаружена повышенная иммунореактивность ηNО8, что позволяет считать NО важным фактором в патогенезе АЬ8. Эти результаты предполагают, что введение подходящей дозы ингибитора NО8, такого как, например, соединение изобретения, может быть благоприятным при лечении АЬ8.
(б) Болезнь Хантингтона.
Патогенез болезни Хантингтона (НИ), вызываемой мутацией в белке Н!!, связан с эксайтотоксичностью, окислительным стрессом и апоптозом, причем во всех этих процессах избыточный NО играет явную роль (Ре!егзоп е! а1., Ехр. №шо1. 157:1-18, 1999). Окислительное повреждение является одним из основных следствий дефектов в метаболизме энергии и присутствует в моделях НИ после инъекции эксайтотоксинов и митохондриальных ингибиторов (А. Ре!егзеп е! а1., Ехр. №иго1. 157:1-18, 1999). Эта митохондриальная дисфункция связана с селективной и прогрессирующей нейронной потерей при НИ (Вгоуп е! а1., Апп. №иго1. 41:646-653, 1997). NО может непосредственно ослаблять комплекс IV митохондриальной респираторной цепи (Са1аЬгезе е! а1., №игосбет. Кез. 25:1215-41, 2000). Стриарные средние, покрытые шипами нейроны, по-видимому, являются основной мишенью для индуцирования моторной дисфункции при НИ.
- 26 021798
Гиперфосфорилирование и активация рецепторов ΝΜΌΑ на этих нейронах, вероятно, принимает участие в индуцировании моторной дисфункции. Клинически было показано, что антагонист ΝΜΌΑ амантадин улучшает хореподобные дискинезии при ΗΌ (УегЬадеп МеОпап е! а1., №ито1оду 59:694- 699, 2002). При условии роли ΗΝΟ8 в опосредуемой ΝΜΌΑ нейротоксичности, предполагается, что ингибиторы πΝΟ8, особенно смешанные ингибиторы пНОЗ/ЛМОА или комбинаций лекарственных средств с активностью πΝΟ8 и ΝΜΌΑ, могут быть также применимыми при ослаблении действий и/или прогрессирования ΗΌ. Например предварительная обработка крыс 7-нитроиндазолом ослабляет стриарные повреждения, вызванные стереотаксическими инъекциями малоната, повреждение, которое приводит к состоянию, напоминающему болезнь Хантингтона (НоЬЬк е! а1., Апп. Кеу. РЬагт. Тах. 39:191-220, 1999). На модели ΗΌ трансгенной мыши К6/1, экспрессирующей мутированный ЬЬ экзон 1 человека, повтор 116 САС, мыши при 11, 19 и 35 неделях обнаруживали прогрессирующее повышение в перекисном окислении липидов с нормальными уровнями супероксиддисмутазы (8ΟΌ) при 11 неделях, аналогично мышам дикого типа (ТОТ); максимальный уровень при 19 неделях, выше уровня, наблюдаемого у мышей ТОТ, и соответствующего ранней фазе прогрессирования заболевания и, наконец, понижающиеся уровни при 35 неделях, ниже уровней, наблюдаемых у мышей ТОТ (Реге/-8еупапо е! а1., Вгаш Ке8. 951:36-42, 2002). Повышение активности 8ΟΌ приписывается компенсирующему нейрозащитному механизму с пониженными уровнями у мышей с 35 неделях, соответствующими ослабленному защитному механизму. Сопутствующие уровням 8ΟΌ уровни кальцийзависимого ΝΟ8 были одинаковыми для 11-недельных мышей обоих типов, ТОТ и К6/1, но значительно повышенными у 19-недельных мышей и пониженными у 35недельных относительно контрольных мышей ТОТ. Уровни экспрессии ΗΝΟ8 также резко повышались относительно контролей у 19-недельных, но значительно понижались относительно контролей с 35 неделями. Никакие значительные изменения не наблюдали в уровнях экспрессии еNΟ8, белок ίΝΟ8 также не могли детектировать во время развития заболевания. Прогрессирующее фенотипическое выражение заболевания, измеряемое по потере массы тела, поведению при сжимании ступней и горизонтальному и вертикальному движению, соответствует изменениям в активности ΝΟ8 и экспрессии пЯО8. Наконец, действия введения Ь-ΝΑΜΕ как трансгенным ΗΌ-мышам К6/2, так и мышам ТОТ, показало повышенные уровни поведения при сжимании при дозе 10 мг/кг, сходные с контролями, которые ухудшались при более высокой дозе 500 мг/кг (Леске1 е! а1., Вгаш Кек. 919 (1):70-81, 2001). Улучшение в повышении массы у мышей ΗΌ было также значительным при дозе 10 мг/кг, но уменьшалось относительно контролей при высоких уровнях доз Ь-ΝΑΜΕ. Эти результаты демонстрируют, что введение подходящей дозы ингибитора ΝΟ8, такого как, например, соединения изобретения, может быть благоприятным при лечении ΗΌ.
(е) Рассеянный склероз (Μ8).
Μ8 является воспалительным демиелинирующим заболеванием ЦНС, в котором принимают участие цитокины и другие воспалительные медиаторы. Во многих исследованиях предполагается, что ΝΟ и его реакционноспособное производное пероксинитрит принимают участие в патогенезе Μ8 (Лсаг е! а1. I. №иго1. 250 (5):588-92, 2003; Са1аЬгеке е! а1., №итосЬет. Кек. 28(9):1321-8, 2003). При экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите (ЕАЕ), модель Μ8, уровни πΝΟ8 значительно повышаются в спинном мозге крыс ЕАЕ, и обработка их 7-нитроиндазолом приводит к значительной задержке начала паралича при ЕАЕ (8Ып, I. Уе1. 8ск 2(3):195-9, 2001). Эти результаты предполагают, что введение подходящей дозы ингибитора ΝΟ8, такого как, например, соединение изобретения, может быть благоприятным при лечении Μ8.
(ί) Нейротоксичность, индуцированная метамфетамином.
Метамфетамин является нейротоксичным из-за деструкции нервных окончаний допамином ш У1уо. Обнаружено, что индуцированную метамфетамином нейротоксичность можно ослабить лечением ингибиторами ΝΟ8 ш уЪго (8Ьепд е! а1., Αпп. Ν. Υ. ΑсаЬ. 8ск 801:174-186, 1996) и ш уЬто на животных моделях (Ь/Ьак е! а1., №игогерог1 11 (13):2943-6, 2000). Аналогично этому, селективный ингибитор πΝΟ8 ΑΚ17477ΑΚ при дозе 5 мг/кг, введенной мышам подкожно, способен предотвратить индуцированную метамфетамином потерю нейрофиламентного белка ΝΡ68 в головном мозге мышей и предотвратить потерю стриального допамина и гомованилиновой кислоты (ΗνΑ) (8апсЬе/ е! а1., I. №итосЬет. 85(2):515524, 2003). Эти результаты предполагают, что введение подходящей дозы ингибитора ΝΟ8, такого как, например, соединение изобретения, может быть благоприятным при лечении индуцированной метамфетамином нейротоксичности.
Введение соединения изобретения, либо отдельно, либо в комбинации с другим терапевтическим агентом, таким как, например, антагонист ΝΜΌΑ, может быть благоприятным для предупреждения или лечения любого из описанных в контексте нейродегенеративных заболеваний. Кроме того, соединения изобретения можно испытывать в стандартных анализах, применяемых для определения нейрозащиты (см., например, Αт. I. РЬукю1. 268:К286, 1995).
Химические зависимости и привыкания к чрезмерному употреблению лекарственных средств (например, зависимости от лекарственных средств, алкоголя и никотина).
Ключевой стадией в процессе индуцированного лекарственным средством привыкания и зависимости является регуляция высвобождения допамина из мезолимбических допаминергических нейронов. Постоянное применение кокаина изменяет экспрессию ключевого белка, регулирующего синаптический
- 27 021798 уровень допамина -допаминового переносчика (ΌΑΤ).
(a) Привыкание к кокаину.
Исследования показали, что животные достоверно сами принимают стимуляторы внутривенно без контроля врача и что допамин является критическим в их усиливающих действиях. Недавно было обнаружено, что содержащие ИО нейроны солокализуются с допамином в областях полосатого тела и вентральном участке покрышки среднего мозга и что ИО может модулировать индуцированное стимулятором высвобождение допамина (ΌΑ). Введение антагонистов рецептора допамина Ό1 снижает уровни окрашивания стриарной ΝΑΌΡΗ-диафоразы, маркера для активности ΝΌ8, тогда как антагонисты Ό2 вызывают противоположное действие. Ь-аргинин, субстрат для ИО8, также является сильнодействующим модулятором высвобождения ΌΑ. Кроме того, многочисленные ИО-генерирующие агенты увеличивают отток ΌΑ или ингибируют повторное поглощение как ίη νίίτο, так и ίη νίνο. Обнаружено, что ЬΝΑΜΕ значительно изменяет усиление действие кокаина посредством уменьшения количества самопринимаемого кокаина и увеличения времени реакции между последовательными инъекциями кокаина (РиЙ1ак апй Βο/апЬ, δο^ Иеигокск ЛЬк. 22:703, 1996). Это указывает на то, что ингибирование NОδ соединениями изобретения может быть благоприятным при лечении кокаиновой наркомании.
(b) Индуцированные морфином/опиоидом симптомы привыкания и отмены.
Имеется много доказательств, подтверждающих роль путей как ΝΜΌΑ, так и ИО в опиоидной зависимости у взрослых и инфантильных животных. У взрослых или новорожденных грызунов, которым инъецировали сульфат морфина, развивается поведенческий синдром отмены после преципитации налтрексоном. Симптомы отмены после стимуляции налтрексоном можно уменьшить введением ингибиторов NОδ, таких как 7-ΝΙ или Ь-ΝΑΜΕ (Ζΐη.ι апй Ватт, ΡкусЬοрЬа^тасο1οду 150 (3):325-336, 2000). В родственном исследовании показано, что более селективный ингибитор ηNОδ 7-Ν1 сильнее ослабляет вызванные морфином симптомы отмены, включающие жевание, слюноотделение и половые действия, чем менее селективные соединения (Уаире1 е1 а1., ΡкусЬοрЬа^тасο1οду (Вег1.) 118 (4):361-8, 1995). Это указывает на то, что ингибирование NОδ соединениями изобретения может быть благоприятным при лечении индуцированной морфином/опиоидом симптомов привыкания и отмены.
(c) Привыкание к этанолу и зависимость от этанола.
Среди факторов, которые оказывают влияние на зависимость от алкоголя, привыкание к действиям этанола, имеется важный компонент, поскольку он способствует чрезмерному употреблению алкогольных напитков (Ье апй Кпаптаа, ΡкусЬοрЬа^тасο1οду (Вег1.) 94:479-483, 1988). В исследовании с крысами быстро развивалось этанольная толерантность к потере координации при двигательной активности и гипотермии, и их можно было блокировать введением гс.у. 7-ΝΙ без изменения церебральных концентраций этанола (\Уа/1а\\зк апй Μοπ-ιΙο, Вгат Кек. Ви11. 57(2):165-70, 2002). В других исследованиях ингибирование NОδ посредством Ь-ΝΑΜΕ (Кеэтат е1 а1., РЬттатоР ВюсЬет. ΒеЬаν. 50:265-270, 1995) или посредством инъекции гс.у. антисмыслового π^δ (ШаккПа е1 а1., РкитоЕ ВюсЬет. ΒеЬаν. 67:629-36, 2000) уменьшало потребление этанола у этих животных. Это указывает на то, что ингибирование NОδ соединениями изобретения может быть благоприятным при лечении привыкания к этанолу и зависимость от этанола.
Введение соединения изобретения, либо отдельно, либо в комбинации с другим терапевтическим агентом, таким как, например, антагонист ΝΜΌΑ, может быть благоприятным для лечения химических зависимостей и привыканий к чрезмерному употреблению лекарственных средств.
Эпилепсия.
Совместное введение 7-ΝΙ с некоторыми противосудорожными средствами, такими как карбамазепин, показало синергическое защитное действие против вызванных электрическим воспалением миндалин эпилептических припадков у крыс при концентрациях, которые не изменяют действие гоЮ-гой (Έογο\\Κζ е1 а1., ЕрЬерыа 41(9:112-8, 2000). Таким образом, ингибитор NОδ, такой как, например, соединение изобретения, либо отдельно, либо в комбинации с другим терапевтическим агентом, таким как, например, антиэпилептический агент, может быть применимым для лечения эпилепсии или подобного нарушения. Примеры противоэпилептических агентов, применимых в комбинации с соединением изобретения, включают карбамазепин, габапентин, ламотригин, окскарбазепин, фенилоин, топирамат и валпроат.
Диабетическая невропатия.
Мочевая экскреция побочных продуктов NО повышается у диабетических крыс после лечения стрептозотоцином, и предполагается, что повышенный синтез NО принимает участие в диабетической гломерулярной гиперфильтрации. Нейронная изоформа ηNОδ экспрессируется в петле Генле и тиси1а йепка почки и ингибирование этой изоформы с применением 7-ΝΙ уменьшает гломерулярную фильтрацию без влияния на давление почечной артериолы или почечный кровоток (Ыдиюп е1 а1., Сеп. ΡЬа^тасο1. 34(2):95-100, 2000). Как неселективный ингибитор NОδ Ь-ΝΑΜΕ, так и селективный ингибитор NОδ 7ΝΙ нормализует почечную гиперфильтрацию у диабетических животных (Ιΐο е1 а1., ί. ЬаЬ СЬп. Μей. 138(3):177-185, 2001). Следовательно, введение соединения изобретения может быть применимым для лечения диабетической нефропатии.
Головная боль вследствие чрезмерного употребления лекарственных средств.
Головная боль вследствие чрезмерного употребления лекарственных средств (МОН) связана с из- 28 021798 быточным применением комбинации аналгетиков, опиоидов, барбитуратов, аспирина, К’8АЮ8, кофеина и триптанов и является обычной проблемой, которая ограничивает применимость этих типов лекарственных средств (О|епег апй Ыттго!й Мейюайоп-оуегике йеайасйе: а \уог1й\\зйе ргоЫет. Ьапсе! №иго1. 2004:3, 475-483). Ее обычно определяют как головные боли, которые имеют место >15 дней в месяц (Неайасйе С1аккШсайоп СотппПее. Тйе 1п1егпайопа1 С1аккШсайоп оГ Неайасйе Эшогйегк (2пй Ей). Серйа1а1д1а 2004: 24 (8ирр1е.1); 9-160). Хорошо документировано, что экстренное лечение пациентов с головной болью или головной болью типа напряжения повышали риск обострения головной боли, развития ежедневной головной боли или приводило к тому, что такие пациенты могли становиться невосприимчивыми к лечению при чрезмерном применении экстренной лекарственной терапии (2ееЬегд е! а1. Серйа1а1д1а 2006:26, 1192-1198). Пациенты с МОН обычно невосприимчивы к профилактическим лекарственным терапиям при чрезмерном применении лекарственных средств. В настоящее время для лечения МОН выбрана лекарственная терапия с прерыванием лечения, хотя это часто связано с симптомами отмены, такими как тошнота, рвота и нарушение сна. Хотя пациенты с мигренью или головной болью типа напряжения, страдающие МОН, которые прерывают лекарственную терапию в течение 2 месяцев, имеют снижение частоты головной боли (45%), многие пациенты либо не имеют изменения (48%) после отмены терапии, либо имеют обострение головной боли (2ееЬегд е! а1. Серйа1а1д1а 2006:26, 1192-1198). Таким образом, остается огромная неудовлетворенная потребность в лекарственной терапии для пациентов, страдающих МОН.
Считается, что некоторые характерные черты МОН, такие как повышенная частота головной боли, расширение площади головной боли и развитие кожной аллодинии, являются результатом индуцированной лекарственной терапией центральной сенсибилизации тройничных ноцицептивных путей и периакведуктальной зоны серого вещества головного мозга (АаеЬег апй Мокко\\Ц/. Тйегареийс шрйсайопк оГ сеп!га1 апй репрйега1 пеиго1од1с тесйатктк ш пидгате. №иго1о§у: 2003, 61(8ирр1. 4); 89-20). Аналогично поведенческой сенсибилизации к психостимуляторам, повторное введение лекарственных средств для лечения головной боли (например, триптанов) приводит к перекрестной сенсибилизации среди различных лекарственных средств, применяемых для лечения головной боли. Изменения в синаптической пластичности включают изменения во внутриклеточных уровнях кальция и оксида азота. Пациенты, страдающие хронической головной болью, мигренью, и пациенты с МОН обнаруживают повышенные уровни нитратов тромбоцитов. Поэтому развитие сенсибилизации при МОН вероятно опосредуется изменениями в уровнях N0 и кальция в ЦНС (8агсй1е1й е! а1. №йтс ох1йе ра!к\уау, Са2+, апй кего!опт соп!еп! т р1а!е1е!к Ггот райейк киГГегшд Ггот сйготс йайу йеайасйе. Серйа1а1д1а 1999: 19; 810-816). При условии, что развитие центральной сенсибилизации опосредуется пNΟ8 (Са/коуа е! а1. Вгат. Кек. Ви11. 2002; 58(2):161-171, Сйо1 е! а1. 1. №иго1 8ск 1996; 138(1-2):14-20) само по себе, предполагается, что нейронные ингибиторы (оксид азота)-синтазы, такие как соединения изобретения, могут быть применимыми при предотвращении и лечении МОН, если их применяют совместно с другими лекарственными средствами для лечения головной боли. Предполагается также, что лечение как СТТН, так и мигрени ингибиторами ηNΟ8 не приведет к развитию МОН.
Желудочно-кишечные нарушения.
ηNΟ8 составляет более чем 90% всей N08 в тонкой кишке. Хотя ,N08 присутствует как составляющая, ее активность составляет меньше чем 10% общей активности N08, и еNΟ8, по существу, не поддается детектированию в кишечнике (Ци ХА е! а1. Туре I тйгс ох1йе куййаке (N08) 1к !йе ргейоттап! N08 ш га! кта11 т!ек!те. Кеди1айоп Ьу р1а!е1е!-асйуайпд Гас!ог. ВюсЫт. Вюрйук. Ас!а 1999; 1451: 211217). Считается, что основная функция иNΟ8 в кишечнике регулируется перистальтикой кишки посредством нейронной передачи сигнала в компонентах NАNС нервной системы. N0 регулирует мышечный тонус сфинктера в нижней части пищевода, привратнике, сфинктере 0йй1 и анусе. N0 регулирует также рефлекс аккомодации дна органа и перистальтический рефлекс кишечника. Известно, что ингибиторы N08 задерживают опорожнение желудка и прохождение содержимого толстой кишки (Т. ТакайакЫ ί. Сак!гоеп!его1. 2003; 38(5):421-30). Таким образом, ингибиторы иNΟ8 могут быть терапевтическими средствами при нарушениях С1, которые могут быть благотворными вследствие задержки опорожнения желудка или замедления прохождения содержимого толстой кишки. Демпинг-синдром является нарушением, при котором пища покидает желудок слишком быстро, заполняя тонкую кишку непереваренной пищей, которая является неадекватно приготовленной, чтобы позволить питательным компонентам эффективно абсорбироваться в тонкой кишке, такой синдром часто наблюдается после гастроэктомии. Следовательно, введение соединения изобретения может быть применимо для лечения желудочно-кишечных нарушений, таких как демпинг-синдром. Соединения изобретения можно также применять для лечения других синдромов раздражаемого желудка.
Висцеральная боль.
Висцеральная боль является самой обычной формой боли и одной из наиболее трудно поддающихся лечению форм боли. Висцеральная боль отличается от соматической боли и обычно описывается как боль, которая происходит из внутренних полостей или органов тела и имеет пять важных клинических и сенсорных характеристик: (1) она не вызывается всеми висцеральными органами (например, печенью, почками, легкими); (2) не всегда связана с висцеральным повреждением (например, разрыв кишечника
- 29 021798 не вызывает боль); (3) она является диффузной; (4) она относится к другим местоположениям и (5) ее можно отнести к другим автономным и двигательным рефлексам (например, тошноте, напряжению нижней-обратной мышцы из-за почечной колики) (Ьаисег 353, 2145-48, 1999). Предложено несколько теорий для механизмов висцеральной боли. По первой теории внутренние органы возбуждаются разными классами нейронов, один имеет дело с автономной регуляцией и другой с сенсорным феноменом, таким как боль. Вторая теория предполагает один однородный класс сенсорных рецепторов, которые являются активными при низких частотах (нормальные регулярные сигналы) или при высоких частотах активации (индуцируются сигналами интенсивной боли). Однако исследования показали, что внутренние органы возбуждаются двумя классами ноцицептивных сенсорных рецепторов: рецепторами с высокой пороговой величиной (в основном механическими рецепторами, найденными в сердце, венах, легких, дыхательных путях, пищеводе, билиарной системе, тонкой кишке, толстой кишке, мочеточнике, мочевом пузыре и матке, которые активируются вредными стимулами) и рецепторами кодирования с интенсивностью низкой пороговой величины, которые реагируют на нетоксичные и токсичные стимулы (сердца, пищевода, толстой кишки, мочевого пузыря и яичек). Еще одна теория предполагает компонент афферентных волокон, которые обычно невосприимчивы к стимулам (латентные ноцицепторы), которые могут стать активированными или сенсибилизированными во время воспаления (Ттеийз №ито8сг.15, 374-78, 1992). После сенсибилизации эти ноцицепторы теперь реагируют на безвредные стимулы, которые обычно имеют место во внутренних органах, что приводит к созданию повышенной блокады для конвергентного входа в спинной мозг и затем запуску центральных механизмов, которые усиливают эффект периферического входа.
Висцеральная боль может быть результатом новообразования, инфекции или повреждения. Например, висцеральная боль может быть вызвана заболеванием или повреждением внутреннего органа, который направляет боль в другие части тела. Соединения изобретения можно также применять для лечения висцеральной боли, которая, например, является вторичной для синдрома раздражаемого желудка, синдрома воспаленного желудка, панкреатита, дивертикулита, болезни Крона, перитонита, перикардита, гепатита, аппендицита, колита, холецистита, гастроэнтерита, эндометриоза, дисменореи, интерстициального цистита, простатита, плеврита, диспепсии нижнего желудочно-кишечного тракта, почечных колик или билиарных колик; висцеральной боли, которая является вторичной к заболеванию печени, почки, яичника, матки, мочевого пузыря, кишечника, желудка, пищевода, двенадцатиперстной кишки, кишечника, толстой кишки, селезенки, поджелудочной железы, аппендикса, сердца или брюшины; висцеральной боли, которая является результатом новообразования или повреждения; или висцеральной боли, которая является результатом инфекции. Висцеральная боль, которую лечат способами изобретения, может быть воспалительной или невоспалительной.
Модели и анализы висцеральной боли являются известными в данной области (см., например, Воигйи е! а1., Оа8!тоеи!его1о§у 128:1996-2008, 2005; Уега-РогЮсаггего е! а1., Оа81тоеи!его1о§у 130:21552164, 2006; апй §рагтаип е! а1., Оа81тоеп!его1о§у 112:1664-1672, 1997).
Препараты комбинирования и их применение.
Помимо препаратов, описанных выше, одно или несколько соединений изобретения можно применять в комбинации с другими терапевтическими средствами. Например, одно или несколько соединений изобретения можно комбинировать с другим ингибитором N08. Примеры ингибиторов, применимых для этой цели, включают, без ограничения, ингибиторы, описанные в патентах США № 6235747, 7141595 и 7375219; заявках на патенты США с номерами 09/127158, 09/325480, 09/403177, 09/802086, 09/826132, 09/740385, 09/381887, 10/476958, 10/483140, 10/484960, 10/678369, 10/819853, 10/938891, 11/436393, 11/787167, 12/054083 и 12/272656; международных публикациях АО 97/36871, АО 98/24766, АО 98/34919, АО 99/10339, АО 99/11620 и АО 99/62883.
В другом примере одно или несколько соединений изобретения можно комбинировать с антиаритмическим средством. Примеры антиаритмических агентов включают, без ограничения, лидокаин и миксилетин.
В комбинации с одним или несколькими соединениями изобретения можно также применять агонисты ОЛВЛ-В, агонисты альфа-2-адренергического рецептора, антагонисты холецистокинина, 5НТ1В/1Сагонисты или антагонисты СОКР. Неограничивающие примеры агонистов альфа-2-адренергического рецептора включают клонидин, лофексидин и пропанолол.
Неограничивающие примеры антагонистов холецистокинина включают Ь-365260; С1-988;
ЬУ262691; §0509 или антагонисты, описанные в патенте США № 5618811. Неограничивающие примеры 5ΗΤιΒ,ΐ[-агонистов, которые можно применять в комбинации с соединением изобретения, включают дигидроэготамин, элетриптан, фровантриптан, наратриптан, ризатриптан, суматриптан, донитриптан или золмитриптан. Неограничивающие примеры антагонистов СОКР, которые можно применять в комбинации с соединением изобретения, включают аналоги хинина, описываемые в международной публикации АО 9709046, непептидные антагонисты, описываемые в международных публикациях АО 0132648, АО 0132649, АО 9811128, АО 9809630, АО 9856779, АО 0018764, или другие антагонисты, такие как §В(+)-273779 или В1В№4096В8.
Антагонисты вещества Р, известные также в качестве антагонистов рецептора ΝΚ1, являются также
- 30 021798 применимыми в комбинации с одним или несколькими соединениями изобретения. Примеры ингибиторов, применимых для этой цели, включают, без ограничения, соединения-ингибиторы, описанные в патентах США № 3862114, 3912711, 4472305, 4481139, 4680283, 4839465, 5102667, 5162339, 5164372, 5166136, 5232929, 5242944, 5300648, 5310743, 5338845, 5340822, 5378803, 5410019, 5411971, 5420297, 5422354, 5446052, 5451586, 5525712, 5527811, 5536737, 5541195, 5594022, 5561113, 5576317, 5604247, 5624950 и 5635510; международных публикациях У0 90/05525, У0 91/09844, У0 91/12266, У0 92/06079, У0 92/12151, У0 92/15585, У0 92/20661, У0 92/20676, У0 92/21677, У0 92/22569, У0
93/00330, У0 93/00331, У0 93/01159, У0 93/01160, У0 93/01165, У0 93/01169, У0 93/01170, У0
93/06099, У0 93/10073, У0 93/14084, У0 93/19064, У0 93/21155, У0 94/04496, У0 94/08997, У0
94/29309, У0 95/11895, У0 95/14017, У0 97/19942, У0 97/24356, У0 97/38692, У0 98/02158 и У0
98/07694; публикациях европейских патентов № 284942, 327009, 333174, 336230, 360390, 394989, 428434, 429366, 443132, 446706, 484719, 499313, 512901, 512902, 514273, 514275, 515240, 520555, 522808, 528495, 532456 и 591040.
Подходящие классы антидепрессантных средств, которые можно применять в комбинации с соединением изобретения, включают, без ограничения, ингибиторы повторного поглощения норэпинефрина, селективные ингибиторы повторного поглощения серотонина (88К1), селективные ингибиторы повторного поглощения норадреналина/норэпинефрина (ΝΑΡΙ), ингибиторы моноаминоксидазы (МАО), обратимые ингибиторы моноаминоксидазы (К1МА), двойные ингибиторы повторного поглощения серотонина/норадреналина (δΝΡΙ), антагонисты α-адренорецептора, норадренергические и специфические серотонергические антидепрессанты (ΝηδδΑ) и атипичные антидепрессанты.
Неограничивающие примеры ингибиторов повторного поглощения норэпинефрина включают третичные аминовые трициклы и вторичные аминовые трициклы, такие как, например, адиназолам, аминептин, амоксапин, бутриптилин, демексиптилин, дезметиламитриптилин, дезметилкломипрамин, демексиптилин, дезипрамин, доксепин, дотиепин, флуацизин, имипрамин, оксид имипрамина, иприндол, лофепрамин, мапротилин, мелитрацен, метапрамин, норклолипрамин, нортриптилин, ноксиптилин, опипрамол, перлапин, пизотифен, пизотилин, пропизепин, протриптилин, хинупрамин, тианептин, тримипрамин, тримипраминамилтриптилиноксид и их фармацевтически приемлемые соли.
Неограничивающие примеры селективных ингибиторов повторного поглощения серотонина включают, например, кломипрамин, фемоксетин, флуоксетин, флувоксамин, пароксетин и сертралин и их фармацевтически приемлемые соли.
Неограничивающие примеры селективных ингибиторов повторного поглощения норадреналина/норэпинефрина включают, например, атомоксетин, бупропион, ребоксетин, томоксетин и вилоксазин и их фармацевтически приемлемые соли.
Неограничивающие примеры селективных ингибиторовповторного поглощения моноаминоксидазы включают, например, изокарбоксазид, фенелзин, транилципромин и селегилин и их фармацевтически приемлемые соли. Другие ингибиторы моноаминоксидазы, применимые в комбинации с соединением изобретения, включают клоргилин, цимоксатон, бефлоксатон, брофаромин, базинаприн, ВУ-616И (ВиггоидЬк Ус11сотс), ВУ-1370И87 (ВиггоидЬк Ус11сотс), С8-722 (К8-722) (§апкуо), Е-2011 (Είδαί), хармин, хармалин, моклобемид, РЬагтаРго|ес15 3975 (НоесЬкЦ, К0 41-1049 (КосЬе), К8-8359 (§апкуо), Т-794 (ТапаЬе 8е1уаки), толоксатон, Κ-Υ 1349 (КаЬг апй Уоийнп), ΕΥ-51641 (ЬЫу), ΕΥ-121768 (ЬЫу), М&В 9303 (Мау & Вакег), МОЬ 72394 (Мапоп Мегге11), МОЬ 72392 (Мапоп Мегге11), серклоремин и МО 1671 и их фармацевтически приемлемые соли. Подходящие обратимые ингибиторы моноаминоксидазы, которые можно применять в настоящем изобретении, включают, например, моклобемин и его фармацевтически приемлемые соли.
Неограничивающие примеры двойных ингибиторов повторного поглощения серотонина/норэпинефрина включают, например, дулоксетин, милнаципран, миртазапин, нефазодон и венлафаксин.
Неограничивающие примеры других антидепрессантов, которые можно применять в способе настоящего изобретения, включают адиназолам, алапроклат, аминептин, амитриптилин, комбинацию амитриптилин/хлордиазепоксид, атипамезол, азамиансерин, базинаприн, бефуралин, бифемелан, бинодалин, бипенамол, брофаромин, кароксазон, церикламин, цианопрамин, цимоксатон, циталопрам, клемепрол, кловоксамин, дазепинил, деанол, демексиптилин, дибензепин, диметакрин, дотиепин, дроксидопа, энефексин, эстазолам, этоперидон, фенгабин, фезоламин, флуотрацен, идазоксан, индалпин, инделоксазин, левопротилин, литоксетин; медифоксамин, метралиндол, миансерин, минаприн, монтирелин, небрацетам, нефопам, ниаламид, номифензин, норфлуоксетин, оротирелин, оксафлозан, пиназепам, пирлиндон, ритансерин, ролипрам, серклоремин, сетиптилин, сибутрамин, сулбутиамин, сулпирид, тенилоксазин, тозалинон, тимолиберин, тифлукарбин, тофенасин, тофизопам, толоксатон, вералиприд, виквалин, зимелидин и зометрапин и их фармацевтически приемлемые соли и растения зверобой пронзеннолистный или Нурепсшп регГогаРнп или их экстракты.
В другом примере опиоиды можно применять в комбинации с одним или несколькими соединениями изобретения. Примеры опиоидов, применимых для этой цели, включают, без ограничения, алфентанил, буторфанол, бупренорфин, декстроморамид, дезоцин, декстропропоксифен, кодеин, дигидрокодеин,
- 31 021798 дифеноксилат, эторфин, фентанил, гидрокодон, гидроморфон, кетобемидон, лоперамид, леворфанол, левометадон, меперидин, мептазинол, метадон, морфин, морфин-6-глюкуронид, налбуфин, налоксон, оксикодон, оксиморфон, пентазоцин, петидин, пиритрамид, пропоксифен, ремифентанил, сульфентанил, тилидин и трамадол.
Еще в одном примере противовоспалительные соединения, такие как стероидные средства или нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (ΝδΑΙΌ), можно применять в комбинации с одним или несколькими соединениями изобретения. Неограничивающие примеры стероидных средств включают преднизолон и кортизон. Неограничивающие примеры ΝδΑΙΌ включают ацеметацин, аспирин, целекоксиб, деракоксиб, диклофенак, дифлунизал, этензамид, этофенамат, эторикоксиб, фенопрофен, флуфенамовую кислоту, флурбипрофен, лоназолак, лорноксикам, ибупрофен, индометацин, изоксикам, кебузон, кетопрофен, кеторолак, напроксен, набуметон, нифлуминовую кислоту, сулиндак, толметин, пироксикам, меклофенамовую кислоту, мефенамовую кислотк, мелоксикам, метамизол, мофебутазон, оксифенбутазон, парекоксиб, фенитидин, фенилбутазон, пироксикам, пропацетамол, пропифеназон, рофекоксиб, салициламид, супрофен, тиапрофеновую кислоту, теноксикам, валдекоксиб, 4-(4циклогексил-2-метилоксазол-5-ил)-2-фторбензолсульфонамид, ^[2-(циклогексилокси)-4нитрофенил]метансульфонамид, 2-(3,4-дифторфенил)-4-(3-гидрокси-3-метилбутокси)-5-[4(метилсульфонил)фенил] -3 (2Н)-пиридазинон и 2-(3,5-дифторфенил)-3 -[4-(метилсульфонил)фенил] -2циклопентен-1-он). Соединения изобретения можно также применять в комбинации с ацетаминофеном.
Любую из указанных выше комбинаций можно применять для лечения любого подходящего заболевания, нарушения или состояния. Ниже описаны примеры применений комбинаций соединения изобретения и другого терапевтического агента.
Комбинации опиоид-ингибитор ΝΟδ, применяемые при хронической невропатической боли.
Повреждение нерва может привести к аномальным болезненным состояниям, известным как невропатическая боль. Некоторые из клинических симптомов включают тактильную аллодинию (ноцицептивные реакции на обычно безвредные механические стимулы), гипералгезию (боль с усиленной интенсивностью в ответ на обычно болезненные стимулы) и самопроизвольную боль. Лигирование спинномозгового нерва (δΝΕ) у крыс является животной моделью невропатической боли, которая вызывает самопроизвольную боль, аллодинию и гипералгезию, аналогичные клиническим симптомам, наблюдаемым у пациентов-людей (Ктш апб СЬипд, Раш 50:355-363, 1992; δοϊΐζβτ, №иго5с1епсе5 7:211-219, 1995).
Невропатическая боль может быть, в частности, нечувствительной к опиоидному лечению (Вепебе!ίί е! а1., Рат 74:205-211, 1998) и до сих пор считается, что она является относительно невосприимчивой к опиоидным аналгетикам (МасРайапе е! а1., РЬагтасо1. ТЬег. 75:1-19, 1997; \Уа150п. СЬп. 1. Рат 16:δ49δ55, 2000). Хотя повышение дозы может преодолеть пониженную опиодную эффективность, такое повышение ограничивается повышенными побочными действиями и толерантностью. Известно, что введение морфина активирует систему ΝΟδ, которая ограничивает аналгезирующее действие этого лекарственного средства (МасЬе15ка е! а1., №игоВерог1 8:2743-2747, 1997; \Уопд е! а1., Вг. 1. Апае5!Ь. 85:587, 2000; Χίίπίβςί апб С1агк, Мо1. Вгат. Ке5. 95:96-102, 2001). Однако показано, что комбинированное системное введение морфина и Ь-ΝΑΜΕ может ослабить механическую и холодную аллодинию при субпороговых дозах, при которых введение только одного лекарственного средства не было эффективным (И1идо1 е! а1., №иго5ст Ке5. Сот. 30(3):143-153, 2002). Влияние Ь-ΝΑΜΕ при совместном введении с морфином на аналгезию морфином, по-видимому, опосредуется ηΝΟδ, поскольку Ь-ΝΑΜΕ теряет свою способность потенцировать аналгезию морфина у ноль-мутантных мышей в отношении ηΝΟδ (С1агк апб Χί;·ιη8ςί, Мо1. Вгат. Ке5. 95:96-102, 2001). Повышенную аналгезию демонстрировали на моделях с подергиваниями хвостом и со сдавливание лапы при применении совместного введения ^-NΑΜΕ или 7-ΝΙ с любым из мю-, дельта- или каппа-селективного опиоидного агониста (МасЬе15ка е! а1., 1. РЬагтасо1. Ехр. ТЬег. 282:977-984, 1997).
Хотя опиоиды являются важными лекарственными средствами для лечения боли от умеренной до тяжелой, помимо обычных побочных действий, которые ограничивают их применение, парадоксикальное проявление до некоторой степени индуцированной опиоидом гипералгезии может фактически делать пациентов более чувствительными к боли и потенциально усиливать их боль (Αη§5! апб С1агк, Αι^ΐΐ^ίо1о§у, 2006, 104(3), 570-587; СЬи е! а1. 1. Раш 2006, 7(1) 43-48). Развитие толерантности и индуцированной опиоидом гипералгезии согласуется с повышенными уровнями продуцирования ΝΟ в головном мозге. Ослабленная аналгезирующая реакция на опиоиды является результатом ΝΟ-индуцированной позитивно регулированной гипераналгезирующей реакции (Нептеп апб Ро11аск, Вгат Ке5. 2004, 1023, 175184).
Таким образом, комбинация ингибитора πΝΌδ с опиоидом (например, комбинации, описанные выше) может усилить опиоидную аналгезию при невропатической боли и предотвратить развитие опиоидной толерантности и индуцированной опиоидом гипералгезии.
Комбинации антидепрессант-ингибитор ηNΟδ, применяемые при хронической боли, невропатической боли, хронической головной боли или мигрени.
Для лечения невропатической боли (МсОнау е! а1., Раш 68:217-227, 1996) и мигрени (Тоткшз е! а1., Αт. 1. Меб. III: 54-63, 2001) применяют многие антидепрессанты, которые действуют посредством серо- 32 021798 тонергической или норадренергической системы. N0 служит в качестве нейромодулятора этих систем (Оаййтайе аий Βοιιΐΐοη. Аппи. Кеу. ΡΗνδίοΙ. 57:683, 1995). Обнаружено, что 7-ΝΙ потенцирует высвобождение норадреналина (ΝΑ) посредством агониста никотинового рецептора ацетилхолина ΌΜΡΡ посредством переносчика ΝΑ (Κΐ88 е1 а1., №иго8С1епсе Ьей. 215:115-118, 1996). Было обнаружено, что местное введение антидепрессантов, таких как пароксетин, тианептин и имипрамин, снижает уровни N0 гиппокампа (Уедепег е1 а1., Вгаш Ке8. 959:128-134, 2003). Вероятно, что N0 является важным в механизме, при котором антидепрессанты являются эффективными для лечения боли и депрессии, и что комбинации ингибитора ηN0δ с антидепрессантом, такие как, например, комбинации, описанные выше, будут приводить к лучшим результатам лечения.
Комбинации 5НТ1В/1С-агониста серотонина или антагониста СОКР и ингибитора N05, применяемые при мигрени.
Введение глицерилтринитрата (ОТЦ), донора N0, индуцирует немедленные головные боли у нормальных индивидуумов и приводит к задержанным приступам мигрени у людей, подверженных мигрени, с 4-6-часовым латентным периодом (Шегееп е1 а1., Раш 38:17-24, 1989). У пациентов с приступом мигрени уровни СОКР (Са1сйотп Оепе Ке1а1ей Рерййе), сильнодействующего сосудорасширяющего агента, в сонной артерии коррелируют с началом и окончанием приступа мигрени (ЭигБат, Сигг 0рт 1пуе8Йд Эгнд8 5(7):731-5, 2004). Суматриптан, лекарственное средство против мигрени, обладающий аффинностью у рецепторов 5НТ1В, 5НТ1С и 5НТ1Р, уменьшает ОТ^индуцированную немедленную головную боль и параллельно сжимает церебральные и экстрацеребральные артерии (Шегееп апй 01е8еп, Серйа1ад1а 13 (5ирр1 13):186, 1993). Лекарственное средство против мигрени ризатриптан также снижает уровни СОКР плазмы после ослабления боли при мигрени (§1ер1еп е1 а1., №иго1. №игосй1г. Ро1. 37 (5):1013-23, 2003). Следовательно, как N0, так и СОКР принимают участи в мигрени в качестве причины. Обнаружено, что 5НТц;/ш-агонисты серотонина блокируют индуцированную рецептором NΜ^Α передачу сигнала N0 в срезах коры головного мозга (§1го87па.)йег е1 а1., Серйа1а1д1а 19(10):859, 1999). Эти результаты предполагают, что комбинация соединения изобретения и селективного или неселективного 5НТ1В/1С/1Р-агониста, такие как комбинации, описанные выше, могут быть применимыми для лечении мигрени.
Фармацевтические композиции.
Соединения изобретения предпочтительно вводят в состав фармацевтических композиций для введения субъектам-людям в биологически совместимой форме, подходящей для введения ш νίνο. Соответственно этому, в другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение изобретения в смеси с подходящим разбавителем, носителем или эксципиентом.
Соединения изобретения можно применять в форме свободного основания, в форме солей, сольватов и в виде пролекарств. Все формы находятся в пределах объема изобретения. В соответствии со способами изобретения, описанные соединения или их соли, сольваты или пролекарства можно вводить пациенту в различных формах в зависимости от выбранного пути введения, что будет понятно специалисту в данной области. Соединения изобретения можно вводить, например, пероральным, парентеральным, буккальным, сублингвальным, назальным, ректальным, чрескожным введением или введением в виде пластыря или при помощи насоса и в составе изготовленных соответственно фармацевтических композиций. Парентеральное введение включает внутривенные, внутрибрюшинные, подкожные, внутримышечные, трансэпитеалиальные, назальные, внутрилегочные, подоболочечные, ректальные и местные способы введения. Парентеральное введение может быть непрерывной инфузией на протяжении выбранного периода времени.
Соединение изобретения можно вводить перорально, например, с инертным разбавителем или с усваиваемым, съедобным носителем, или его можно поместить в капсулу из твердой или мягкой желатиновой оболочки, или его можно прессовать в таблетки, или его можно ввести непосредственно в пищу для питания. Для перорального терапевтического введения соединение изобретения можно ввести с эксципиентом и применять в форме разжевываемых таблеток, буккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, облаток и т.п.
Соединение изобретения можно также вводить парентерально. Растворы соединения изобретения можно приготовить в воде, подходящим образом смешанной с поверхностно-активным веществом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Дисперсии можно также получить в глицерине, жидких полиэтиленгликолях, ДМСО и их смесях со спиртом или без спирта и в масле. При обычных условиях хранения и применения эти препараты могут содержать консервант для предотвращения роста микроорганизмов.
Общепринятые методики и ингредиенты для выбора и получения подходящих препаратов описаны, например, в РепипдЮпУ Рйагтасеийса1 5с1епсе8 (2003 - 201й еййюп) и в Тйе Ипйей 51а1е8 ΡЬа^тасοре^а: Тйе №йюпа1 ΡοπηνιΕίΓν (И8Р 24 №19), опубликовано в 1999 году.
Фармацевтические формы, подходящие для инъецируемого применения, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для импровизированного получения стерильных инъецируемых растворов или дисперсий. Во всех случаях форма должна быть стерильной и должна быть жидкой до такой степени, чтобы ее можно было легко ввести через шприц.
Композиции для назального введения можно обычным образом изготовить в виде аэрозолей, ка- 33 021798 пель, гелей и порошков. Аэрозольные препараты обычно включают раствор или тонкую суспензию активного вещества в физиологически приемлемом водном или неводном растворителе, и они обычно присутствуют в количествах одной или многих доз в стерильной форме в герметизированном контейнере, который может быть в форме картриджа, или их пополняют для применения в распыляющем устройстве. Или же герметизированный контейнер может быть распределяющим устройством однократного пользования, таким как ингалятор для носа с одной дозой или аэрозольный распределитель, который снабжен дозирующим клапаном и который предназначен для устранения после применения. Когда лекарственная форма содержит аэрозольный ингалятор, он содержит пропеллент, которым может быть сжатый газ, такой как сжатый воздух, или органический пропеллент, такой как фторхлоруглеводород. Аэрозольные лекарственные формы могут быть также в форме распылителя с насосом.
Композиции, подходящие для трансбуккального или сублингвального введения, включают таблетки, лепешки и пастилки, в которых активный ингредиент изготовлен с носителем, таким как сахар, аравийская камедь, трагакант или желатин и глицерин. Композиции для ректального введения обычно имеют форму суппозиторий, содержащих общепринятую основу суппозитория, такую как какао-масло.
Соединения изобретения можно вводить животному, например человеку, как таковые или в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями, указываемыми выше, количество которых определяется растворимостью и химической природой соединения, выбранного пути введения и стандартной фармацевтической практикой.
Доза соединений изобретения и/или композиций, содержащих соединение изобретения, может варьировать в зависимости от многих факторов, таких как фармакодинамические свойства соединения; способ введения; возраст, состояние здоровья и масса реципиента; природа и экстенсивность симптомов; частота лечения и тип сопутствующего лечения, если оно требуется, и скорость выведения соединения из организма животного, подвергаемого лечению. Специалист в данной области может определить подходящую дозу на основе указанных выше факторов. Соединения изобретения можно вводить сначала в подходящей дозе, которую можно регулировать, если требуется, в зависимости от клинической реакции. В общем, удовлетворительные результаты можно получить, когда соединения изобретения вводят человеку при суточной дозе между 0,05 и 3000 мг (измерено в виде твердой формы). Предпочтительные диапазоны доз находятся между 0,05-500 мг/кг, более предпочтительно между 0,5-50 мг/кг.
Соединение изобретения можно применять отдельно или в комбинации с другими средствами, которые обладают NО8-ингибирующей активностью, или в комбинации с другими типами лечения (которые могут или не могут ингибировать N08) для лечения, профилактики и/или снижения риска инсульта, невропатической или мигреневой боли или других нарушений, для которых благоприятным является ингибирование N08. При комбинированных лечениях дозы одного или нескольких терапевтических соединений можно уменьшить по сравнению со стандартными дозами, когда их вводят отдельно. В этом случае дозы комбинаций соединений должны обеспечить терапевтическое действие.
Помимо указанных выше терапевтических применений соединение изобретения можно также применять в диагностических анализах, в анализах для скрининга и в качестве средств для исследований.
В диагностических анализах соединение изобретения может быть применимым при идентификации или детектировании активности N08. Для такого применения соединение можно метить радиоактивным изотопом (как описано в другом месте контекста) и контактировать с популяцией клеток организма. Присутствие радиометки на клетках может указывать активность N08.
В анализах для скрининга соединение изобретения можно применять для идентификации других соединений, которые ингибируют N08, например, в качестве лекарственных средств первой генерации. В качестве средств для исследования соединения изобретения можно применять в анализах ферментов и анализах для изучения локализации активности N08. Такая информация может быть применимой, например, для диагностики или мониторинга патологических состояний или их прогрессирования. В таких анализах соединение изобретения может быть радиомеченным.
Анализы ингибирования N08 ш νί\Ό.
Обнаружено, что соединения настоящего изобретения проявляют селективное ингибирование нейронной изоформы N08 (ηNО8). Эффективность соединений в отношении предпочтительного ингибирования ими ηNО8 по сравнению с ,N08 и/или еN08 может проводить специалист в данной области, например, с применением способов, описанных в контексте в примере 34 и ниже.
Нижеследующие неограничивающие примеры являются иллюстративными примерами настоящего изобретения.
- 34 021798
Примеры
Пример 1: синтез К-(4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-3-оксохроман-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (1)
7-Нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Получен согласно методике, описанной в 1. СЬет. КекеагсЬ (М) 2003, 1120-1128.
4-(2-( 1 -Метилпирролидин-2-ил)этил)-7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Суспензию гидрохлорида 7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,5 г, 2,575 ммоль), 2-(2хлорэтил)-1-метилпирролидина (0,94 г, 5,150 ммоль), Ν;·ιΙ (0,19 г, 1,287 ммоль) и К2СО3 (2,13 г, 15,452 ммоль) в сухом ДМФА (10 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (18 ч). Реакционную смесь разбавляли водой 150 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные слои этилацетата промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и сушили (Ка2ЗО4). Растворитель выпаривали и неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 3:97 (2 М КН3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение (0,525 г, 67%) в виде желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 1,47-1,65 (м, 4Н), 1,79-2,13 (м, 4Н), 2,18 (с, 3Н), 2,89-2,95 (м, 1Н), 3,98 (т, 2Н, 1=7,8 Гц), 4,79 (с, 2Н), 7,40 (д, 1Н, 1=9,0 Гц), 7,80 (д, 1Н, 1=2,7 Гц), 7,98 (дд, 1Н, 1=2,4, 9,0 Гц);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 306 (МН+, 100).
7-Амино-4-(2-( 1 -метилпирролидин-2-ил)этил)-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Раствор 4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,49 г, 1,604 ммоль) в сухом этаноле (5 мл) обрабатывали РД-С (~0,05 г) и продували газообразным водородом. Из колбы откачивали воздух и колбу продували дважды газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода (давление баллона) в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали метанолом (3x10 мл). Объединенные органические слои упаривали, получая при этом неочищенное указанное в заголовке соединение (0,44 г, количественный выход) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 1,39-1,51 (м, 2Н), 1,56-1,66 (м, 2Н), 1,76-2,06 (м, 4Н), 2,16 (с, 3Н), 2,88-2,94 (м, 1Н), 3,74-3,86 (м, 2Н), 4,46 (с, 2Н), 5,01 (с, 2Н), 6,22 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 6,26 (дд, 1Н, 1=2,1, 8,4 Гц), 6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 276 (МН+, 100).
Ν-(4-(2-( 1 -Метилпирролидин-2-ил)этил)-3 -оксохроман-7 -ил)тиофен-2-карбоксимидамид (1).
Раствор 7-амино-4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,12 г, 0,435 ммоль) в сухом этаноле (5 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоатом (0,24 г, 0,871 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи (18 ч). В это время добавляли дополнительный гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,24 г, 0,871 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 24 ч. Реакционный раствор разбавляли насыщенным раствором №НСО3 (25 мл) и продукт затем экстрагировали СН2С12 (2x20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (15 мл) и сушили (№-^О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 5:95 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение 1 (0,155 г, 93%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 1,46-1,65 (м, 4Н), 1,64-2,13 (м, 4Н), 2,20 (с, 3Н), 2,90-2,96 (м, 1Н), 3,86-3,93 (м, 2Н), 4,58 (с, 2Н), 6,49-6,58 (м, 4Н), 7,07-7,10 (м, 2Н), 7,60 (д, 1Н, 1=5,4 Гц), 7,73 (д, 1Н, 1=3,0 Гц);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 385 (МН+, 68), 274 (46), 193 (100); Е81-НКМ8: вычислено для С20Н25К4О^ (МН+) 385,1692; найдено 385,1687; чистота по ВЭЖХ: 98% общей площади.
- 35 021798
Пример 2: синтез ^(4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)хроман-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамида (2)
7-Амино-4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-3(4Н)-он.
Полные экспериментальные детали и спектральные данные см. в примере 1.
4-(2-(1-Метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-7-амин.
Раствор ЫА1Н4 (4,21 мл, 4,212 ммоль, 1,0 М раствор в ТГФ) обрабатывали по каплям 7-амино-4-(2(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-3(4Н)-оном (0,29 г, 1,053 ммоль) в сухом ТГФ (5 мл) при 0°С. Образовавшуюся смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали на протяжении ночи. Реакционную смесь осторожно гасили последовательным добавлением воды (0,16 мл), 2н. раствором №ГОН (0,16 мл) и водой (0,16 мл). Реакционную смесь фильтровали после перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре и промывали СН2С12 (3x10 мл). Объединенные слои СН2С12 упаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 5:95 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение (0,23 г, 84%) в виде сиропа.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 1,28-1,45 (м, 2Н), 1,56-1,65 (м, 2Н), 1,75-2,10 (м, 4Н), 2,18 (с, 3Н), 2,88-2,95 (м, 1Н), 3,03-3,10 (м, 4Н), 4,08 (т, 2Н, 1=4,8 Гц), 4,36 (с, 2Н), 6,00 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 6,06 (дд, 1Н, 1=2,4, 8,5 Гц), 6,43 (д, 1Н, 1=8,4 Гц);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 262 (МН+, 100), 163 (33), 112 (42).
^(4-(2-(1-Метилпирролидин-2-ил)этил)хроман-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамид (2).
Раствор 4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-7-амина (0,21 г, 0,803 ммоль) в сухом этаноле (5 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,45 г, 1,606 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаНСОз (20 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (2x20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (15 мл) и сушили (№^О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 5:95 (2 М ΝΉ3 в смеси МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение 2 (0,22 г, 75%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 1,35-1,52 (м, 2Н), 1,58-1,68 (м, 2Н), 1,82-2,08 (м, 4Н), 2,21 (с, 3Н), 2,90-2,97 (м, 1Н), 3,18-3,32 (м, 4Н), 4,16 (т, 2Н, 1=4,5 Гц), 6,22-6,34 (м, 4Н), 6,63 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,06 (дд, 1Н, 1=3,9, 5,1 Гц), 7,55 (д, 1Н, 1=5,1 Гц), 7,68 (д, 1Н, 1=3,6 Гц);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 371 (М+, 86), 260 (56), 186 (100), 128 (81), ЕδI-НКΜδ: вычислено для С20Н27К^ (МН+) 371,1900; найдено 371,1903; чистота по ВЭЖХ: 98,2% площади.
Пример 3: синтез №(3-оксо-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (3)
7-Нитро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Получен согласно методике, описанной в 1. СЬет. КекеагсЬ (М) 2003, 1120-1128.
7-Нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Суспензию 7-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,5 г, 2,575 ммоль), гидрохлорида 1-(2- 36 021798 хлорэтил)пирролидина (0,43 г, 2,575 ммоль) и К2СО3 (1,06 г, 7,726 ммоль) в сухом ДМФА (5 мл) перемешивали при 100°С на протяжении ночи (18 ч). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры, разбавляли водой (100 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные слои этилацетата промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и сушили (Ыа28О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 3:97 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение (0,49 г, 65%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 1,62-1,70 (м, 4Н), 2,46-2,54 (м, 4Н, слитый с ДМСО-б6 резонансом), 2,60 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 4,08 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 4,80 (с, 2Н), 7,44 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 7,80 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,96 (дд, 1Н, 1=2,7, 9,0 Гц);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 292 (МН+, 100).
7-Амино-4-(2-(пирролидин-1 -ил)этил)-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Раствор 7-нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,46 г, 1,579 ммоль) в сухом этаноле (5 мл) обрабатывали Ρά-С (~0,05 г) и продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода (давление баллона) в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали метанолом (3x10 мл). Объединенные органические слои упаривали и сушили в вакууме, получая при этом неочищенное указанное в заголовке соединение (0,4 г, 97%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 1,61-1,70 (м, 4Н), 2,44-2,56 (м, 6Н, слитый с ДМСО-б6), 3,90 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,47 (с, 2Н), 5,01 (с, 2Н), 6,22 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 6,25 (дд, 1Н, 1=2,4, 8,2 Гц), 6,84 (д, 1Н, 1=8,7 Гц);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 262 (МН+, 100), 191 (44).
С((3-Оксо-4-(2-пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид (3).
Раствор 7-амино-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-3(4Н)-он (0,125 г, 0,478 ммоль) в сухом этаноле (5 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,27 г, 0,956 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь перемешивали в течение 2 дней. Реакционную смесь затем разбавляли насыщенным раствором NаΗСО3 (20 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (2x20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (15 мл) и сушили (Να2δΟ4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 3:93 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение 3 (0,16 г, 90%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 1,64-1,72 (м, 4Н), 2,46-2,54 (м, 4Н, слитый с ДМСО-б6 резонансом), 2,60 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 3,99 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 4,58 (с, 2Н), 6,47-6,57 (м, 4Н), 7,06-7,12 (м, 2Н), 7,60 (д, 1Н, 1=4,2 Гц), 7,73 (д, 1Н, 1=3,3 Гц);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 371 (МН+, 66), 150 (63), 128 (100); ΕδΙ-ΗΚΜδ: вычислено для ^9Η23Ν4Ο2δ (МН+) 371,1536; найдено 371,1548; чистота по ВЭЖХ: 93,17% площади.
Пример 4: синтез С(4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (4)
7-Нитро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Получен согласно методике, описанной в 1. Сйет. Кекеагсй (Μ) 2003, 1120-1128.
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]оксазин.
Суспензию 7-нитро-2Н-бензо[Ъ]][1,4]оксазин-3(4Н)-она (300 мг, 1,545 ммоль) в ТГФ (3 мл) обрабатывали комплексом ВН3-ТГФ (15,45 мл, 15,45 ммоль, 1.0 М раствор в ТГФ) и образовавшийся оранжевый раствор кипятили с обратным холодильником на протяжении ночи. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. Добавляли МеОН (15 мл) и реакционную смесь затем концентрировали. Добавляли вторую порцию МеОН (20 мл) и раствор кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. В это время реакционную смесь концентрировали и остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (10%
- 37 021798
Е!0Ас:90% гексан, затем 30% Е!0Ас:70% гексан). После сушки при пониженном давлении получали оранжевое твердое вещество (240 мг, 86%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,68 (дд, 1=2,4, 8,9 Гц, 1Н), 7,54 (с, 1Н), 7,47 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 6,63 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,15 (т, 1=4,2 Гц, 2Н), 3,45-3,40 (м, 2Н).
7-Нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин.
Раствор 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазина (300 мг, 1,665 ммоль) в ДМФА (10 мл) обрабатывали NаН (213 мг, 5,33 ммоль, 60 мас.%, в минеральном масле) при 0°С, получая при этом яркооранжевую суспензию. Смесь перемешивали в течение 10 мин. Затем добавляли гидрохлорид 2хлорэтилпирролидина (566 мг, 3,33 ммоль), и реакционная смесь превращалась в ярко-красную суспензию. Реакционную смесь нагревали до 90°С в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь затем разбавляли водой (20 мл), переносили в делительную воронку и экстрагировали Е!0Ас (2x15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (3x5 мл), сушили (№2804), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением СН2С12, затем смеси 5:95 (2 М N4-, в МеОН):СН2С12, получая при этом твердое вещество (330 мг, 72%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,75 (дд, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Н), 7,47 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,80 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,18 (т, 1=4,2 Гц, 2Н), 3,58-3,55 (м, 4Н), 2,63 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,58-2,48 (м, 4Н), 1,70-1,63 (м, 4Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 278 (МН+, 100), 98 (20).
^(4-(2-(Пирролидин-1 -ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид (4).
Суспензию 7-нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазина (330 мг, 1,190 ммоль) и Рй-С (252 мг, 0,238 ммоль, 10 мас.%) в сухом Е!0Н (10 мл) продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч в атмосфере водорода (давление баллона). Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали Е!0Н (25 мл). Фильтрат обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,678 г, 2,377 ммоль) и перемешивали в течение трех дней при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаНС0з (50 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили (№2804) и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 2:98 Ме0Н:СН2С12, затем 5:95 (2 М N4-, в МеОН):СН2С12, получая при этом желтое твердое вещество (150 мг, 36%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,70 (д, 1=3,6 Гц, 1Н), 7,57 (дд, 1=5,1, 0,9 Гц, 1Н), 7,08 (дд, 1=5,1, 3,9 Гц, 1Н), 6,65 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,34 (дд, 1=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 6,252 (д, 1=2, 4 Гц, 1Н), 6,36-6,25 (м, 2Н), 4,15 (т, 1=4,2 Гц, 2Н), 3,38-3,30 (м, 4Н), 2,64 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,58-2,48 (м, 4Н), 1,70-1,67 (м, 4Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 357 (МН+, 100), 260 (40), 98 (27);
Е8РНКМ8: вычислено для С19Н2Х408 (МН+) 357,1743; найдено 357,1734; чистота по ВЭЖХ: 95,8% площади.
Пример 5: №(4-(2-(диметиламино)этил)-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил)тиофен2-карбоксимидамид (5)
7-Нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Получен согласно методике, описанной в I. СЬет. КекеагсЬ (М) 2003, 1120-1128.
4-(2-(Диметиламино)этил)-7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-3 (4Н)-он.
Суспензию 7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,5 г, 2,575 ммоль), гидрохлорида 2-хлорКХдиметилэтанамина (0,37 г, 2,575 ммоль) и К2С03 (1,06 г, 7,726 ммоль) в сухом ДМФА (5 мл) перемешивали при 100°С на протяжении ночи (18 ч). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры, разбавляли водой (100 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные слои этилацетата промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и затем сушили (№2804). Растворитель
- 38 021798 выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 3:97 (2 М ΝΗ3 в МеОН): (СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение (0,52 г, 76%) в виде желтого твердого вещества.
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 2,17 (с, 6Н), 2,42 (т, 2Н, 1=6,6 Гц), 4,07 (т, 2Н, 1=6,6 Гц), 4,79 (с, 2Н), 7,45 (д, 1Н, 1=9,0 Гц), 7,80 (д, 1Н, 1=2,7 Гц), 7,96 (дд, 1Н, 1=2,4, 9,0 Гц);
Е81-М8 (т/ζ, %): 266 (МН+, 100), 221 (66).
7-Амино-4-(2-(диметиламино)этил)-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-он.
Раствор 4-(2-(диметиламино)этил)-7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,5 г, 1,884 ммоль) в сухом этаноле (5 мл) обрабатывали Рй-С (~0,05 г) и продували газообразным водородом. Из колбы выкачивали газ и продували газообразным водородом (дважды) и раствор перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода (давление баллона) в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали метанолом (3x10 мл). Объединенные органические слои упаривали, получая при этом сырое, указанное в заголовке соединение (0,44 г, количественный выход) в виде твердого вещества.
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 2,16 (с, 6Н), 2,36 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,88 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 4,47 (с, 2Н), 5,01 (с, 2Н), 6,21 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 6,25 (дд, 1Н, 3=2,1, 8,5 Гц), 6,84 (д, 1Н, 1=8,4 Гц);
Е81-М8 (т/ζ, %): 236 (МН+, 31), 191 (100).
^(4-(2-(Диметиламино)этил)-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид (5).
Раствор 7-амино-4-(2-(диметиламино)этил)-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (0,125 г, 0,531 ммоль) в сухом этаноле (10 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,3 г, 1,062 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали на протяжении ночи (18 ч). В это время добавляли дополнительный гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,3 г, 1,062 ммоль) и перемешивание продолжали в течение еще 24 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаΗСО3 (20 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (2x20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (15 мл) и сушили (№28О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 5:95 (2 М Ν^ в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение 5 (0,16 г, 88%) в виде твердого вещества.
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 2,19 (с, 6Н), 2,43 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,97 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 4,58 (с, 2Н), 6,48-6,58 (м, 4Н), 7,06-7,14 (м, 2Н), 7,60 (д, 1Н, 1=5,1 Гц), 7,74 (д, 1Н, 1=3,3 Гц);
Е81-М8 (т/ζ, %): 345 (МН+, 100), 128 (85); Е81-НКМ8: вычислено для С17Н21^О28 (МН+) 345,1379; найдено 345,1384; чистота по ВЭЖХ: 93,15% площади.
Пример 6: синтез ^(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил)тиофен-
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин.
Полные экспериментальные детали и данные спектров см. в примере 4. ^^Диметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Раствор 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазина (240 мг, 1,33 ммоль) в ДМФА (10 мл) обрабатывали NаΗ (170 мг, 4,26 ммоль, 60 мас.%, в минеральном масле) при 0°С, получая при этом оранжевую смесь. Смесь затем обрабатывали гидрохлоридом 2-хлор-^^диметилэтанамина (384 мг, 2,66 ммоль) с получением темно-красной смеси. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. В это время реакционную смесь затем нагревали до 90°С и перемешивали в течение еще 45 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (15 мл) и реакционную смесь экстрагировали Е!ОАс (2x12 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (3x5 мл), сушили (№28О4), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя СН2С12, затем смесью 5:95 (2 М Ν^ в МеОН):СН2С12, получая при этом желто-оранжевое твердое вещество (210 мг, 63%).
- 39 021798 'ΐ I ЯМР (ДМСОД6) δ 7,75 (дд, 1=2,7, 9,0 Гц, 1Н), 7,48 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,82 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,18 (!, 1=4,5 Гц, 2Н), 3,57-3,53 (м, 4Н), 2,54-2,45 (м, 2Н), 2,23 (с, 6Н).
Ю(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид (6).
Суспензию ЮЮдиметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанамина (210 мг, 0,836 ммоль) и Рά-С (10 мас.%, 89 мг, 0,084 ммоль) в сухом Е!0Н (15 мл) продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч в атмосфере водорода (давление баллона). Реакционную смесь затем фильтровали через подушку целита и промывали Е!0Н (15 мл). Светло-пурпурный фильтрат концентрировали, получая при этом сырой 4-(2-(диметиламино)этил)3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-амин. Раствор этого сырого 4-(2-(диметиламино)этил)-3,4дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-амина (185 мг, 0,836 ммоль) в сухом Е!0Н (10 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоатом (477 мг, 1,672 ммоль) и смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаНСΟз (50 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили (№2804) и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 2:98 МеОН:СН2С12, затем смеси 5:95 (2 М NНз в МеОН):СН2С12, получая при этом желтое твердое вещество (150 мг, 54%).
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 7,69 (дд, 1=3,6, 0,9 Гц, 1Н), 7,56 (дд, 1=5,1, 0,9 Гц, 1Н), 7,07 (дд, 1=5,1, 3,9 Гц, 1Н), 6,64 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,35-6,26 (м, 4Н), 4,14 (т, 1=3,9 Гц, 2Н), 3,33-3,29 (м, 4Н), 2,42 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,19 (с, 6Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 331 (МН+, 100), 260 (25); Е81-НКМ8: вычислено для С17Н23Щ08 (МН+) 331,1587, найдено 331,1594; чистота по ВЭЖХ: 99,0% площади.
Пример 7: синтез дигидрохлорида Ю(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (7)
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин.
Полные экспериментальные детали и данные спектров см. в примере 4.
2-Хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанон.
Суспензию 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазина (8 г, 44,4 ммоль) в безводном толуоле (100 мл) при положительном давлении аргона обрабатывали по каплям 2-хлорацетилхлоридом (3,91 мл, 48,8 ммоль). Смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 25 мин, и она становилась ярко-желтым раствором. Раствору давали возможность охладиться до комнатной температуры и добавляли насыщенный раствор NаНСΟз (150 мл). Смесь переносили в делительную воронку и продукт
- 40 021798 экстрагировали СН2С12 (2x200 мл). Объединенные органические слои фильтровали через подушку силикагеля, промывали СН2С12 (50 мл) и концентрировали, получая при этом желтое твердое вещество (10 г, 88%).
' Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,22 (д, 1=9, 0 Гц, 1Н), 7,80 (дд, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Н), 7,72 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 4,74 (с, 2Н), 4,40 (т, 1=4,2 Гц, 2Н), 3,94 (т, 1=4,8 Гц, 2Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 279 ιΜΝι', 30), 257 (МН+, 100).
2-(Этиламино)-1 -(7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанон.
Раствор 2-хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанона (9,9 г, 38,6 ммоль) в безводном ацетонитриле (250 мл) при положительном давлении аргона обрабатывали Ι<2ί.'Ο3 (42,7 г, 309 ммоль), получая при этом желтую суспензию. Смесь охлаждали до 0°С и обрабатывали гидрохлоридом этанамина (15,7 г, 193 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2,5 ч. Смесь затем фильтровали через подушку целита, промывали СН2С12 (500 мл) и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением ЕЮАс, затем смеси 2,5:97,5 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12, получая при этом желтое твердое вещество (7,73 г, 76%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,29 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,80 (дд, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Н), 7,71 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 4,36 (т, 1=4,2 Гц, 2Н), 3,93 (т, 1=4,8 Гц, 2Н), 3,71 (с, 2Н), 2,62 (кв, 1=7,2 Гц, 2Н), 1,05 (т, 1=7,2 Гц, 3Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 266,1 (МН+, 100).
трет-Бутилэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамат.
Под положительным давлением аргона раствор 2-(этиламино)-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин4(3Н)-ил)этанона (7,73 г, 29,1 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (6,68 г, 30,6 ммоль) и триэтиламина (8,19 мл, 58,3 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (100 мл) перемешивали в течение получаса при комнатной температуре. Смесь разбавляли водой (200 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (2x200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (№2δΟ4) и концентрировали. Остаток подвергали хроматографии на короткой колонке силикагеля с применением СН2С12, затем смеси 2,5:97,5 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12, получая при этом твердое вещество (8,83 г, 83%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,30-8,22 (м, 1Н), 7,82-7,78 (м, 1Н), 7,71-7,70 (м, 1Н), 4,36-4,28 (м, 4Н), 3,943,92 (м, 2Н), 3,24 (т, 1=2,7 Гц, 2Н), 1,40, 1,30 (2хс, 9Н), 1,07-1,04 (м, 3Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 388 (Μ№+, 50), 366 (МН+, 35), 266 (100). трет-Бутилэтил(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
Желтый раствор трет-бутилэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)-2оксоэтил)карбамата (8,7 г, 23,8 ммоль) в безводном ТГФ (50 мл) под положительным давлением аргона обрабатывали комплексом боран-ТГФ (1 М раствор в ТГФ, 47,6 мл, 47,6 ммоль), получая при этом оранжевый раствор. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 20 мин. Ее затем охлаждали на ледяной бане и обрабатывали по каплям МеОН (100 мл). Раствор перемешивали в течение получаса при комнатной температуре и реакционную смесь затем концентрировали. Остаток подвергали флэшхроматографии на силикагеле с применением смеси 1:9 ЕЮАс:гексаны, получая при этом оранжевое твердое вещество (7,5 г, 91%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,72 (дд, 1=2,7, 9,0 Гц, 1Н), 7,49-7,47 (м, 1Н), 6,85-6,83 (м, 1Н), 4,18 (т, 1=4,2 Гц, 2Н), 3,59-3,53 (м, 2Н), 3,37-3,36 (м, 2Н), 3,20-3,18 (м, 2Н), 1,47 (с, 2Н), 1,30 (ушир.с, 9Н), 1,02 (т, 1=6,9 Гц, 3Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 374 (ΜΝΤ, 86), 352 (МН+, 7,8), 296 (100), 252 (87). трет-Бутилэтил(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
Суспензию трет-бутилэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (7 г, 19,92 ммоль) и Рй-С (2,11 г, 1,992 ммоль, 10 мас.%) в безводном ЕЮН (100 мл) продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч в атмосфере водорода (давление баллона). Реакционную смесь фильтровали через подушку целита и промывали ЕЮН (50 мл). Фильтрат, содержащий трет-бутил-2-(7-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)ил)этил)(этил)карбамат, обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (11,36 г, 39,8 ммоль) и перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали и затем распределяли между насыщенным раствором NаНСΟ3 (150 мл) и СН2С12 (75 мл). Смесь переносили в делительную воронку и продукт экстрагировали СН2С12 (2x100 мл). Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением последовательности элюэнтов (СН2С12; смесь 1:99 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12; смесь 1,75:98,25 (2 М ΝΉ3 в МЕОН):СН2С12 и смесь 2,5:97,5 (2 М Ν^ в МЕОН):СН2С12), получая при этом коричневое твердое вещество (4 г, 46,7%).
'II ЯМР (СПС13) δ 7,43-7,41 (м, 2Н), 7,11-7,05 (м, 1Н), 6,72-6,69 (м, 1Н), 6,54-6,51 (м, 2Н), 4,23-4,20 (м, 2Н), 3,39-3,25 (м, 8Н), 1,47 (с, 9Н), 1,11-1,10 (м, 3Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 431 (МН+, 100).
- 41 021798
N-(4-(2-(Этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
Под положительным давлением аргона оранжевую суспензию трет-бутилэтил-(2-(7-(тиофен-2карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (4 г, 9,29 ммоль) в МеОН (30 мл) и 1н. НС1 (30 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры, переносили на ледяную баню и затем добавляли 1н. №ОН (75 мл). Раствор приобретал молочно-зеленый цвет с черной суспензией. Смесь затем обрабатывали СН2С12 (50 мл) и перемешивали в течение получаса. После этого времени смесь переносили в делительную воронку и продукт экстрагировали СН2С12 (2x50 мл). Объединенные органические слои сушили (№-^О4) и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением последовательности элюентов: ΕΏΑ^ смесь 1:99 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12; смесь 2,5:97,5 (2 М ΝΗ3 в МеОН) и смесь 5:95 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12. Получали коричневое твердое вещество (2 г, 65,1%).
'Н ЯМР (СПС13) δ 7,40-7,37 (м, 2Н), 7,07-7,04 (м, 1Н), 6,75-6,72 (м, 1Н), 6,52-6,50 (м, 2Н), 4,82 (ушир.с, 2Н), 4,24 (т, 1=4,5 Гц, 2Н), 3,39-3,31 (м, 4Н), 2,86 (т, 1=6,3 Гц, 2Н), 2,71 (кв, 1=6,9 Гц, 2Н), 1,13 (т, 1=7,2 Гц, 3Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 331 (МН+, 100), 260 (95); Чистота по ВЭЖХ: 94,1% площади.
Дигидрохлорид N-(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-7 -ил)тиофен-2карбоксимидамида (7).
Суспензию N-(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (0,1 г, 0,303 ммоль) в МеОН (3 мл) под положительным давлением аргона обрабатывали 1 М эфирным раствором НС1 (1,51 мл, 1,51 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и смесь затем концентрировали, получая при этом желто-коричневое твердое вещество (93 мг, 76%).
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,20 (ушир.с, 1Н), 9,67 (ушир.с, 1Н), 9,23 (ушир.с, 2Н), 8,67 (ушир.с, 1Н), 8,16-8,08 (м, 2Н), 7,37-7,36 (м, 1Н), 7,04 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,87-6,81 (м, 2Н), 4,30-4,25 (м, 2Н), 3,66 (т, 1=6,3 Гц, 2Н), 3,12-2,95 (м, 4Н), 2,58-2,45 (м, 2Н), 1,24 (т, 1=7,2 Гц, 3Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 331 (МН+ свободное основание, 100), 260 (95); ΕδΙΉΚΜδ: вычислено для (МН+, свободное основание) 331,1587, найдено 331,1597; чистота по ВЭЖХ: 95,4% площади.
Пример 8: синтез Х-(4-(2-(метиламино) этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (8)
К перемешиваемой суспензии 6-нитробензо[й]тиазола (1,64 г, 9,10 ммоль) в этаноле (16 мл) добавляли гидразингидрат (2,66 мл, 54,6 ммоль). Образовавшийся темный раствор перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли водой и медленно подкисляли 3 М НС1, получая при этом желтую суспензию. Смесь затем экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом желтое твердое вещество, применяемое непосредственно в последующей реакции.
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,09 (ушир.с, 1Н), 7,87 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,74 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 6,27 (ушир.с,
2Н);
Μδ-ΕΙ: (т/ζ, %) 170 (М+, 100), 140 (28), 124 (35).
7-Нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-3 (4Н)-он.
К перемешиваемому раствору 2-амино-5-нитробензолтиола (1,72 г, 10,11 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли бикарбонат натрия (2,80 г, 33,4 ммоль) в виде раствора в воде (40,0 мл). К этому
- 42 021798 темно-красному раствору добавляли 2-хлорацетилхлорид (0,885 мл, 11,12 ммоль). Образовавшуюся смесь, которая становилась светло-красной, затем перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь затем разбавляли водой и экстрагировали три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в 10% этилацетате в дихлорметане, получая при этом требуемый продукт (1,02 г, 48,0%).
'II ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 11,17 (с, 1Η), 8,24 (д, 1=2,7 Гц, 1Η), 8,07 (дд, 1=9,0, 2,7 Гц, 1Η), 7,13 (д, 1=9,0 Гц, 1Η), 3,60 (с, 2Η);
Μ8-ΕΙ: (т/ζ, %) 210 (М+, 100), 181 (40), 131 (46).
4-(2-(Диметиламино)этил)-7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-3 (4Н)-он.
К перемешиваемой суспензии 7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-3(4Н)-она (1,02 г, 4,85 ммоль) и карбоната натрия (4,69 г, 34,0 ммоль) в ДМФА (30 мл) в колбе для проведения реакций под давлением в атмосфере аргона добавляли гидрохлорид 2-хлор-N,N-диметилэтанамина (3,49 г, 24,26 ммоль). Колбу сразу герметизировали и нагревали при перемешивании до 90°С на протяжении ночи. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали (2 х этилацетатом). Объединенные органические слои затем промывали смесью 1:1 насыщенного раствора соли и воды (3х), затем насыщенным раствором соли (1х). Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в 5% растворе (2 М ΝΗ3 в МеОН) в дихлорметане, получая при этом требуемый продукт (755 мг, 55,3%).
'II ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 8,30 (д, 1=2,7 Гц, 1Η), 8,13 (дд, 1=9,3, 2,7 Гц, 1Η), 7,59 (д, 1=9,3 Гц, 1Η), 4,11 (т, 1=6,9 Гц, 2Η), 3,62 (с, 2Η), 2,41 (т, 1=6,9 Гц, 2Η), 2,17 (с, 6Η);
Μ8-ΕΙ: (т/ζ, %) 281 (М+, 55), 251 (65), 58 (100).
N,N-Диметил-2-(7-нитро-2Η-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Η)-ил)этанамин.
К перемешиваемому раствору 4-(2-(диметиламино)этил)-7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-3(4Н)-она (730 мг, 2,59 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) в атмосфере аргона добавляли боран (1 М раствор в ТГФ; 7,784 мл, 7,78 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре, получая при этом желтый осадок. Смесь быстро нагревали до 60°С и твердое вещество измельчали. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С и гасили метанолом (добавляли медленно до прекращения выделения пузырьков). Смесь затем концентрировали, снова растворяли в МеОН (15 мл) и 1 М НС1 (5 мл) и нагревали до 60°С в течение 30 мин. Подвергнутую гашению смесь затем разбавляли водой и карбонатом натрия и затем экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в этилацетате, получая при этом желтое твердое вещество, требуемый комплекс в виде комплекса с бораном, который непосредственно применяли в последующей реакции.
К перемешиваемому раствору комплекса N,N-диметил-2-(7-нитро-2Η-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Η)ил)этанаминборан (350 мг, 1,245 ммоль) в метаноле (5 мл) и ТГФ (10 мл) в атмосфере аргона добавляли 10% РЬ-С (132 мг, 0,124 ммоль). Смесь затем перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Суспензию затем фильтровали через подушку целита, концентрировали и хроматографировали в 5% растворе (2 М ΝΗ3 в МеОН) в дихлорметане, получая при этом требуемый продукт (106,6 мг, 32,0%).
'Η ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 7,85-7,81 (м, 2Η), 6,81 (д, 1=9,0 Гц, 1Η), 3,81 (т, 1=5,1 Гц, 2Η), 3,56 (т, 1=6,9 Гц, 2Η), 3,06 (т, 1=5,1 Гц, 1Η), 2,47 (т, 1=6,9 Гц, 2Η), 2,21 (с, 6Η);
Μ8-ΕΙ: (т/ζ, %) 267 (М+, 13), 179 (29), 58 (100).
Фенилметил-(2-(7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору N,N-диметил-2-(7-нитро-2Η-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Η)-ил)этанамина (100 мг, 0,374 ммоль) в дихлорметане (5 мл) в атмосфере аргона добавляли фенилкарбонохлоридат (0,094 мл, 0,748 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре. Наблюдали образование осадка, и для обеспечения растворения добавляли триэтиламин (3 капли) (реакционная смесь становилась прозрачной). Смесь затем перемешивали на протяжении уикенда. Прозрачную желтую смесь затем разбавляли водой и карбонатом натрия и затем экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в этилацетате, получая при этом требуемый продукт (139 мг, 100%).
'II ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 7,84-7,74 (м, 2Η), 7,39-7,31 (м, 2Η), 7,23-7,16 (м, 1Η), 7,03-6,93 (м, 3Η), 3,853,78 (м, 3Η), 3,73-3,65 (м, 2Η), 3,55-3,50 (м, 1Η), 3,09, 2,97 (2с, 3Η), 3,09-3,05 (м, 2Η);
Μ8-ΕΙ: (т/ζ, %) 373 (М+, 4), 209 (31), 179 (100), 151 (28).
Фенил-2-(7-амино-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил(метил)карбамат.
К перемешиваемому раствору фенилметил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамата (100 мг, 0,268 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) и этаноле (4,00 мл) в атмосфере аргона добавляли 10% РЬ-С (28,5 мг, 0,027 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи в атмосфере водорода (давление баллона). Смесь затем фильтровали через подушку целита и концентрировали, получая при этом требуемый продукт (81 мг, 88%) в виде темного масла.
ΜΟ-ΕΙ: (т/ζ, %) 343 (М+, 64), 179(100), 151(45).
- 43 021798
Фенилметил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору фенил-2-(7-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил(метил)карбамата (80 мг, 0,233 ммоль) в этаноле (5 мл) в атмосфере аргона добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (133 мг, 0,466 ммоль). Смесь затем перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли водой и карбонатом натрия и затем экстрагировали дихлорметаном (2х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в этилацетате, получая при этом требуемый продукт (72 мг, 68%).
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,74-7,69 (м, 1Н), 7,58-7,56 (м, 1Н), 7,42-7,34 (м, 2Н), 7,25-7,17 (м, 1Н), 7,147,05 (м, 3Н), 6,83-6,80 (м, 1Н), 6,53-6,44 (м, 2Н), 6,36 (ушир.с, 2Н), 3,63-3,55 (м, 4Н), 3,49-3,45 (м, 2Н), 3,11, 2,98 (2с, 3Н), 3,06-3,01 (м, 2Н);
М8-Е1: (т/ζ, %) 452 (М+, 97), 288 (100).
Ю(4-(2-(Метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамид (8).
К перемешиваемому раствору фенилметил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (65 мг, 0,144 ммоль) в этаноле (4 мл) добавляли гидроксид натрия (57,4 мг, 1,436 ммоль) в виде раствора в воде (2 мл). Образовавшуюся смесь нагревали до 78°С и перемешивали на протяжении ночи. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и гидроксидом натрия и экстрагировали дихлорметаном (5х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в 10% растворе (2 М Ν^ в МеОН) в дихлорметане, получая при этом требуемый продукт (22 мг, 46%).
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,69 (д, 1=3,3 Гц, 1Н), 7,56 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,07 (т, 1=4,4 Гц, 1Н), 6,72 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,53-6,44 (м, 2Н), 6,29 (ушир.с, 2Н), 3,54-3,51 (м, 2Н), 3,3 (м, 2Н), 3,04-3,00 (м, 2Н), 2,66 (т, 1=6,8 Гц, 2Н), 2,32 (с, 3Н);
М8-Е1: (т/ζ, %) 332 (М+, 75), 288 (97), 260 (100); Е1-НКМ8: вычислено для С16Н20К,82 (М+) 332,1129, найдено 332,1145; чистота по ВЭЖХ: 95% площади.
Пример 9: синтез Ю(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6-ил)тиофен2-карбоксимидамида (9)
ЮЮДиметил-2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Раствор 6-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазина (1,0 г, 5,55 ммоль) в безводном ДМФА (25 мл) в атмосфере аргона охлаждали и обрабатывали порциями гидрида натрия (0,677 г, 16,93 ммоль) при 5-10°С. Порциями при 5-10°С добавляли гидрохлорид 2-хлор-^Юдиметилэтанамина (1,599 г, 11,10 ммоль) и образовавшейся гетерогенной красно-коричневой смеси давали возможность нагреться до комнатной температуры. Спустя 3 ч при комнатной температуре смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили добавлением воды (25 мл) и разбавляли Е!ОАс. Добавляли небольшое количество 1н. №ЮН для подщелачивания смеси до рН ~9-10. Органический слой отделяли и водный слой дополнительно экстрагировали Е!ОАс. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (х2), сушили (№28О4), фильтровали и концентрировали, получая при этом темно-красное масло. Вещество очищали на силикагеле, элюируя 5% раствором МеОН/СН2С12, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде темного оранжевокрасного масла (458 мг, 32,8%).
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,49-7,39 (м, 2Н), 6,87-6,84 (м, 1Н), 4,27-4,25 (м, 2Н), 3,50-3,37 (м, 4Н), 2,43 (т, 2Н, 1=6,7 Гц), 2,19 (с, 6Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 252 (МН+, 100).
4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6-амин.
В высушенную в сушильном шкафу, продутую аргоном 100 мл круглодонную колбу, снабженную магнитным стержнем, добавляли ЮЮдиметил-2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этанамин (0,10 г, 0,398 ммоль) и Е!ОН (10 мл). В это время начинали перемешивали реакционной смеси. Добавляли 10% Рб-С (0,042 г, 0,040 ммоль), из колбы откачивали воздух и смесь подвергали гидрированию в стандартных условиях (атмосферное давление Н2, создаваемое с применением баллона). Спустя 3 ч смесь
- 44 021798 фильтровали через подушку целита и промывали этанолом. Раствор бледно-персикового цвета, который темнел при воздействии воздуха, концентрировали приблизительно до 10 мл, получая при этом указанное в заголовке соединение. Это соединение применяли непосредственно на следующей стадии.
Е81-МС (т/ζ, %): 222 (МН+, 100).
^(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
К перемешиваемому раствору 4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6амина (0,088 г, 0,398 ммоль) в этаноле в атмосфере аргона добавляли гидроиодид метилтиофен-2карбимидотиоата (0,227 г, 0,795 ммоль). Образовавшуюся слабомутную желтую смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Спустя 20 ч через смесь барботировали аргон и затем ее концентрировали, получая при этом остаток. Остаток затем распределяли между Е!0Ас (100 мл) и насыщенным раствором NаНСΟз (~10 мл). Водный слой (рН~9) дополнительно экстрагировали Е!0Ас и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (№2804), фильтровали и концентрировали, получая при этом желтый остаток. Очистка на силикагеле (сухая хроматография, элюирование 5-7,5% раствором (2 М N4, в МеОН)/СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение 9 в виде желтого остатка (70 мг, 53,3%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6)5 7,70 (д, 1Н, 1=2,7 Гц), 7,57 (д, 1Н, 1=5,0 Гц), 7,07 (дд, 1Н, 1=5,0, 3,7 Гц), 6,59 (д, 1Н, 1=8,2 Гц), 6,30 (ушир.с, 2Н), 6,14 (с, 1Н), 6,00 (д, 1Н, 1=8,1 Гц), 4,18-4,02 (м, 2Н), 3,41-3,25 (м, 4Н+Н2О), 2,41 (т, 2Н, 1=6,7 Гц), 2,17 (с, 6Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 331 (МН+, 100).
Дигидрохлорид ^(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
^(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамид (0,065 г, 0,197 ммоль) растворяли в безводном МеОН (5 мл) и обрабатывали хлоридом водорода (1 М раствор в диэтиловом простом эфире; 0,433 мл, 0,433 ммоль) в течение 5 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь затем концентрировали, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества (58,5 мг, 73,7%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,36 (ушир.с, 1Н), 11,02 (ушир.с, 1Н), 9,70 (ушир.с, 1Н), 8,69 (ушир.с, 1Н), 8,15 (видимый д, 2Н, 1=4,5 Гц), 7,37 (видимый т, 1Н, 1=4,3 Гц), 7,07 (с, 1Н), 6:84 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 6,62 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 4,31-4,18 (м, 2Н), 3,76-3,65 (м, 2Н), 3,44-3,34 (м, 2Н), 3,35-3,22 (м, 2Н), 2,78, 2,77 (2хс, 6Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 331 (МН+, свободное основание, 100); Е81-НКМ8: вычислено для С17Н23Щ08 (МН+, свободное основание) 331,1587, найдено 331,1579.
Пример 10: синтез дигидрохлорида ^(4-(2-(метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-6-ил)тиофен-2-карбоксимидамида (10)
трет-Бутилметил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
В высушенную в сушильном шкафу, продутую аргоном колбу, снабженную магнитным стержнем, добавляли трет-бутилметил-(2-оксоэтил)карбамат (0,135 г, 0,777 ммоль) и ОСЕ (10 мл). В это время начинали перемешивали и добавляли 6-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин (0,10 г, 0,555 ммоль) с последующим добавлением уксусной кислоты (0,064 мл, 1,110 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (0,294 г, 1,388 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Спустя 18 ч реакционную смесь гасили добавлением насыщенного NаНСΟ3 (10 мл) и экстрагировали СН2С12. Водный слой экстрагировали дополнительно и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили Ща2804) и концентрировали. Сырой продукт объединяли с продуктом второй реакции (получен согласно вышеуказанной методике без применения уксусной кислоты). Объединенные продукты очищали на силикагеле, элюируя 50-70% раствором ЕЮЛс/гексаны, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде желтого остатка (130 мг, 34,7%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,58-7,37 (м, 2Н), 6,92-6,80 (м, 1Н), 4,25 (т, 2Н, 1=4,2 Гц), 3,58-3,36 (м, 6Н), 2,87-2,74 (м, 3Н), 1,27, 1,18 (2хс, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 360 (М№+, 100).
- 45 021798 трет-Бутил-2-(6-амино-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этил(метил)карбамат.
В высушенную в сушильном шкафу, продутую аргоном колбу, снабженную магнитным стержнем, добавляли трет-бутилметил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат (0,13 г, 0,385 ммоль), Е!0Н (10 мл). В это время начинали перемешивание. Добавляли 10% Рб-С (0,041 г, 0,039 ммоль), воздух из колбы откачивали и вещество подвергали гидрированию в стандартных условиях, как описано в контексте. Спустя 2,5 ч смесь фильтровали через подушку целита и промывали этанолом. Раствор бледно-персикового цвета, который медленно темнел при воздействии воздуха, концентрировали до объема ~10 мл, получая при этом указанное в заголовке соединение, которое применяли сразу на следующей стадии. Небольшую порцию концентрировали досуха для аналитических целей.
'Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 6,34 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 6,03-5,95 (м, 1Н), 5,75 (дд, 1Н, 1=8,3, 2,3 Гц), 4,35 (м, 2Н), 3,98 (т, 2Н, 1=4,1 Гц), 3,30-3,15 (м, 6Н), 2,81 (с, 3Н), 1,38, 1,30 (2хс, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 308 (МН+, 90), 252 (100).
трет-Бутилметил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ъ][1,4]-оксазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил 2-(6-амино-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-4(3Н)ил)этил(метил)карбамата (0,118 г, 0,384 ммоль) в этаноле в атмосфере аргона добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,219 г, 0,768 ммоль) и образовавшийся желтый раствор перемешивали при комнатной температуре. Спустя 44 ч через смесь барботировали аргон, смесь затем концентрировали до остатка и распределяли между Е!0Ас (100 мл) и насыщенным раствором NаНСОз (10 мл). Водный слой (рН ~9) дополнительно экстрагировали Е!0Ас и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (№2804), фильтровали и концентрировали, получая при этом оранжевый остаток. Остаток очищали дважды на силикагеле, для первой очистки применяли 100% Е!0Ас в качестве элюента и для второй очистки применяли 5% раствор (2 М N43 в МЕОН) в СН2С12, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества (80 мг, 50,0%).
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,68 (д, 1Н, 1=2,9 Гц), 7,57 (д, 1Н, 1=5,0 Гц), 7,10-7,03 (м, 1Н), 6,60 (д, 1Н, 1=8,1 Гц), 6,30 (м, 3Н), 6,00 (дд, 1Н, 1=8,1, 1,6 Гц), 4,18-4,02 (м, 2Н), 3,40-3,21 (м, 6Н, сливается с пиком Н2О), 2,81 (с, 3Н), 1,34, 1,29 (2хс, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 417 (МН+, 100).
Дигидрохлорид ^(4-(2-(метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К раствору трет-бутилметил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-4(3Н)ил)этил)карбамата (0,07 г, 0,168 ммоль) в МеОН с чистотой по ВЭЖХ (10 мл) добавляли 3 М хлористоводородную кислоту (0,56 мл, 1,681 ммоль). Образовавшийся желтый раствор нагревали для кипячения с обратным холодильником в атмосфере аргона. Спустя 60 мин реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разбавляли Н2О (20 мл) и последовательно промывали СН2С12 (20 мл) и Е!0Ас (20 мл). Водный слой концентрировали и сушили, получая при этом указанное в заголовке соединение 10 в виде желтого твердого вещества (37 мг, 56,5%).
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 11,37 (ушир.с, 1Н), 9,72 (ушир.с, 1Н), 9,23 (ушир.с, 2Н), 8,66 (ушир.с, 1Н), 8,21-8,08 (м, 2Н), 7,37 (видимый т, 1Н, 1=4,4 Гц), 7,03 (с, 1Н), 6,84 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 6,60 (д, 1Н, 1=7,3 Гц), 4,31-4,20 (м, 2Н), 3,70-3,45 (м, 2Н, сливается с пиком Н2О), 3,40-3,34 (м, 2Н), 3,18-3,02 (м, 2Н), 2,60-2,50 (м, 3Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 317 (МН+, свободное основание, 100); Е81-НРМ8: вычислено для С16Н21Щ08 (МН+, свободное основание) 317,1430, найдено 317,1422.
Пример 11: синтез №(4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (11)
- 46 021798
2-Амино-5-нитробензолтиол.
К суспензии 6-нитробензо[й]тиазола (5 г, 27,7 ммоль) в этаноле (45 мл) добавляли гидразингидрат (8,10 мл, 166 ммоль). Образовавшуюся смесь (темно-красную) перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем подкисляли медленным, осторожным добавлением 3 М НС1 в воде (50 мл). Эту смесь далее разбавляли водой (50 мл) и образовавшийся желто-оранжевый осадок экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом оранжевое твердое вещество (4,62 г, 98%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,12-8,09 (м, 1Н), 7,88-7,85 (м, 1Н), 6,75-6,71 (м, 1Н), 6,28 (ушир.с, 2Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 170 (МН+, 100).
2-(2-Хлорэтилтио)-4-нитроанилин.
К перемешиваемой суспензии 2-амино-5-нитробензолтиола (4,11 г, 24,15 ммоль) в этаноле (50 мл) и воде (10 мл) добавляли гидроксид натрия (0,966 г, 24,15 ммоль). К образовавшемуся раствору добавляли 1-6ром-2-хлорэтан (8,04 мл, 97 ммоль) и образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (3х. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом темно-желтое твердое вещество (5,13 г, 91%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,16 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,97 (дд, 1=9,0, 2,7 Гц, 1Н), 6,94 (ушир.с, 2Н), 6,79 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 3,68 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,11 (т, 1=7,2 Гц, 2Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 233 (МН+, 100), 216 (79).
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин.
К перемешиваемому раствору 2-(2-хлорэтилтио)-4-нитроанилина (5,13 г, 22,05 ммоль) в ДМФА (70 мл) добавляли карбонат калия (9,14 г, 66,1 ммоль) с последующим добавлением иодида натрия (0,330 г, 2,205 ммоль). Образовавшуюся суспензию перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь затем разбавляли водой и образовавшиеся кристаллы собирали вакуумным фильтрованием, получая при этом требуемый продукт (4,06 г, 94%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,81-7,73 (м, 3Н), 6,58 (т, 1=9,0 Гц, 1Н), 3,65-3,60 (м, 2Н), 3,01-2,97 (м, 2Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 197 (МН+, 100), 180 (99).
7-Нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин.
Смесь 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (1 г, 5,10 ммоль), гидрохлорида 1-(2хлорэтил)пирролидина (1,734 г, 10,19 ммоль) и пВи.ЦВг (0,082 г, 0,255 ммоль) в СН2С12 (10 мл) и 50% раствор №ГОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавляли СН2С12 (25 мл) и водой (50 мл). Смесь переносили в делительную воронку и слои разделяли. Водный слой экстрагировали СН2С12 (2x25 мл). Объединенные органические слои сушили (№^О4), фильтровали и концентрировали. Красное сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (СН2С12, затем 1,75-5% раствор (2 М ΝΉ3 в МеОН) в СН2С12), получая при этом 7-нитро-4-(2-(пирролидин-1ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин в виде коричневого вязкого масла (0,63 г, 42%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,86-7,82 (м, 2Н), 6,82 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 3,81 (т, 1=4,8 Гц, 2Н), 3,58 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 3,33 (с, 4Н), 3,05 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 2,63 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,50 (с, 4Н), 1,67 (с, 4Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 296, 294 (МН+, 100), 98 (13).
4-(2-(Пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7 -амин.
К раствору 7-нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (0,637 г, 2,172 ммоль) в МеОН (30 мл) добавляли никель Ренея (суспензия в воде) (~30 мг, 2,172 ммоль) с последующим добавлением гидразингидрата (1,056 мл, 21,72 ммоль) и смесь погружали в предварительно на- 47 021798 гретую масляную баню и кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку целита и промывали 100 мл МеОН. Сырое вещество фильтровали через слой диоксида кремния (3,5-10% раствор (2 М NНз в МеОН) в СН2С12). Растворитель выпаривали, получая при этом указанный в заголовке продукт в виде темно-коричневого масла (0,61 г, количественный выход).
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 6,49 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,26-6,23 (м, 2Н), 4,42 (ушир.с, 2Н), 3,38-3,35 (м, 2Н), 3,21 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,97-2,94 (м, 2Н), 2,55 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,45 (ушир.с, 4Н), 1,66 (ушир.с, 4Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 266, 264 (МН+, 100), 98 (34).
Ю(4-(2-(Пирролидин-1 -ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (1,239 г, 4,34 ммоль) добавляли к смеси 4-(2(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-амина (0,572 г, 2,172 ммоль) в Е!0Н (20 мл). Реакционную смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (30 мл). Смесь затем экстрагировали СН2С12 (50 мл) и водную фазу промывали СН2С12 (50 мл). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили Ща2804)). Сырое вещество подвергали флэшхроматографии на силикагеле (СН2С12, затем 5% раствором (2 М NНз в МеОН)/СН2С12). Собранные фракции давали соединение 11 в виде бледно-коричневой вязкой жидкости (0,71 г, 88%).
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 7,69 (д, 1=3,6 Гц, 1Н), 7,56 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,08-7,06 (м, 1Н), 6,67 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,50 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,46 (с, 1Н), 6,32 (ушир.с, 2Н), 3,57-3,53 (м, 2Н), 3,39-3,34 (м, 2Н), 3,03-3,00 (м, 2Н), 2,60 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,50 (ушир.с, 4Н), 1,68 (ушир.с, 4Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 375, 373 (МН+, 47), 278, 276 (100), 98 (21).
Дигидрохлорид Ю(4-(2-(пирролидин-1 -ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен2-карбоксимидамида.
К перемешиваемому раствору Ю(4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин7-ил)тиофен-2-карбоксимидамида (0,3524 г, 0,946 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли 1 М НС1 в простом эфире (4,73 мл, 4,73 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 5 мин в атмосфере аргона и затем концентрировали, получая при этом желтую пену (0,646 г, количественный выход).
'II ЯМР (ДМСОД6) δ 11,51 (с, 1Н), 11,23 (с, 1Н), 9,68 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,15-8,11 (м, 2Н), 7,377,34 (м, 1Н), 7,08 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,00 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,81-3,76 (м, 2Н), 3,66-3,64 (м, 2Н), 3,56-3,46 (м, 2Н), 3,33-3,30 (м, 2Н), 3,13-3,10 (м, 2Н), 3,06-3,00 (м, 2Н), 2,00-1,86 (м, 4Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 375, 373 (МН+, свободное основание, 66), 278, 276 (100), 98 (21);
НКМ8 (С19Н25^82, МН+, свободное основание): вычислено 373,1515, найдено 373,1518. Чистота по ВЭЖХ: 98% площади.
Пример 12: синтез дигидрохлорида Ю(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамида (12)
ЮЮДиметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Получен согласно методике, описанной в примере 8.
4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-амин.
Темную смесь ЮЮдиметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (1,0 г, 3,74 ммоль) в метаноле (10 мл) в атмосфере аргона обрабатывали никелем Ренея (~0,22 г, 3,74 ммоль) и гидразингидратом (1,82 мл, 37,4 ммоль). Реакционную смесь переносили на предварительно нагретую до 65°С масляную баню. Спустя 50 мин смеси давали возможность охладиться до комнатной температуры и затем выливали на подушку целита. Подушку целита промывали метанолом (20 мл). Фильтрат концентрировали и сырое вещество подвергали хроматографии на короткой колонке силикагеля (раствор 1:9 (2 М NНз в МеОН):СН2С12). Образовавшийся коричневый остаток применяли на следующей стадии.
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 6,49 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 6,27-6,23 (м, 2Н), 4,42 (ушир.с, 2Н), 3,40-3,30 (м, 2Н),
- 48 021798
3,18 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,98-2,94 (м, 2Н), 2,36 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,16 (с, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 238 (МН+, 100), 193 (56), 147 (58).
К-(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Суспензию 4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-амина (0,888 г, 3,74 ммоль) и гидроиодида метилтиофен-2-карбимидотиоата (2,134 г, 7,48 ммоль) в сухом этаноле (15 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (16 ч). Растворитель выпаривали и остаток распределяли между насыщенным раствором №НСО3 (50 мл) и СН2С12 (25 мл). После перемешивания в течение 20 мин смесь переносили в делительную воронку и органический слой удаляли. Водный слой экстрагировали СН2С12 (2x25 мл). Объединенные органические слои сушили (Ка^О4), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии с применением силикагеля (СН2С12, затем 5:95 смесь (2 М КН3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанный в заголовке продукт 12 в виде твердого вещества (0,44 г, 33,9%).
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 7,69 (д, 1=3,3 Гц, 1Н), 7,56 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,07 (дд, 1=4,8, 3,9 Гц, 1Н), 6,66 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,52-6,46 (м, 2Н), 6,32 (ушир.с, 2Н), 3,56-3,52 (м, 2Н), 3,36-3,32 (м, 2Н), 3,03-3,00 (м, 2Н), 2,41 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,19 (с, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 347 (МН+, 100), 276 (84%).
Дигидрохлорид К-(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
Раствор К-(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (0,44 г, 1,270 ммоль) в сухом этаноле (10 мл) обрабатывали хлористо-водородной кислотой (1 Μ в простом эфире, 6,35 мл, 6,35 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отделяли и промывали эфиром, получая при этом желто-зеленый порошок. Порошок сушили при пониженном давлении (0,46 г, 86%).
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 11,25 (ушир.с, 2Н), 9,69 (ушир.с, 1Н), 8,69 (ушир.с, 1Н), 8,15-8,13 (м, 2Н), 7,37-7,37 (м, 1Н), 7,07-7,01 (м, 3Н), 3,82-3,77 (м, 2Н), 3,70-3,60 (м, 2Н), 3,25-3,21 (м, 2Н), 3,15-3,10 (м, 2Н), 2,80 (д, 1=3,6 Гц, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 347 (МН+, свободное основание, 100); ΕδI-ΗКΜδ: вычислено для С17Н23К^2 (МН+, свободное основание): 347,1358, найдено 347,1343; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 13: синтез К-(4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (13)
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин.
Получали согласно методике, описанной в примере 11.
4-(2-( 1 -Метилпирролидин-2-ил)этил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин.
Смесь 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (1 г, 5,10 ммоль), гидрохлорида 2-(2-хлорэтил)1-метилпирролидина (1,876 г, 10,19 ммоль), и бромид тетрабутиламмония (0,082 г, 0,255 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и 50% раствора №ЮН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч (на протяжении ночи). Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (5 мл) и водой (20 мл) и смесь переносили в делительную воронку. Органический слой удаляли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x10 мл). Объединенные органические слои сушили (Ка^О4), фильтровали и концентрировали. Красное сырое вещество подвергали колоночной хроматографии на силикагеле с применением системы очистки Вю!аде (колонка с 80 г кремнийсодержащего адсорбента; градиент: дихлорметан 3СУ, затем изменение до смеси 6:94 (2 М ЯН3 в метаноле):дихлорметан через 15СУ; 254 нм; скорость потока: 45 мл/мин), получая при этом указанное в заголовке соединение в виде светло-оранжевого твердого вещества (0,827 г, 52,8%).
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 7,87 (дд, 1=3,0, 9,0 Гц, 1Н), 7,83 (д, 1=3,0 Гц, 1Н), 6,79 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,79- 49 021798
3,76 (м, 2Н), 3,46 (т, 1=8,1 Гц, 2Н), 3,08-3,05 (м, 2Н), 2,99-2,92 (м, 1Н), 2,23 (с, 3Н), 2,10-2,06 (м, 2Н), 1,921,78 (м, 2Н), 1,66-1,61 (м, 2Н), 1,54-1,47 (м, 2Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 308 (МН+, 100).
4-(2-( 1 -Метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-амин.
Раствор 4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (0,82 г, 2,67 ммоль) в метаноле (10 мл) в атмосфере аргона обрабатывали гидразингидратом (1,29 мл, 26,7 ммоль) и небольшим количеством никеля (~0,15 г, 2,67 ммоль). Реакционную смесь переносили на предварительно нагретую до 65°С масляную баню. Спустя 3 ч реакционную смесь выливали на подушку целита, промытую метанолом. Фильтрат концентрировали и остаток выливали на подушку силикагеля. Подушку силикагеля промывали смесью 1:9 (2 М N4-, в метаноле):дихлорметан (200 мл). Фильтрат концентрировали, сушили при пониженном давлении и применяли на следующей стадии.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 6,48 (ушир.д, 1=9,3 Гц, 1Н), 6,27-6,24 (м, 2Н), 4,42 (ушир.с, 2Н), 3,33-3,29 (м, 2Н), 3,13-3,06 (м, 2Н), 2,99-2,96 (м, 2Н), 2,96-2,90 (м, 1Н), 2,19 (с, 3Н), 2,06-1,97 (м, 2Н), 1,96-1,78 (м, 2Н), 1,63-1,60 (м, 2Н), 1,56-1,40 (м, 2Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 278 (МН+, 100).
№(4-(2-( 1 -Метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Суспензию 4-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-амина (0,7 г, 2,52 ммоль) и гидроиодида метилтиофен-2-карбимидотиоата (1,439 г, 5,05 ммоль) в сухом этаноле (15 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (16 ч) в атмосфере аргона. После этого времени растворитель выпаривали и остаток распределяли между насыщенным раствором NаНС0з (50 мл) и дихлорметаном (25 мл). Смесь переносили в делительную воронку и органический слой удаляли. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x25 мл). Объединенные органические слои сушили (№2804), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (последовательность элюентов: смесь 2:98 метанол:дихлорметан, 5:95 метанол:дихлорметан и 5:95 (2 М аммиак в метаноле):дихлорметан), получая при этом соединение 13 в виде желтого сиропа (0,48 г, 49%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,69 (ушир.д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,57 (ушир.д, 1=4,5 Гц, 1Н), 7,07 (дд, 1=3,9, 4,8 Гц, 1Н), 6,52 (дд, 1=1,8, 8,1 Гц, 2Н), 6,47 (ушир.д, 1=1,8 Гц, 1Н), 6,38 (ушир.с, 2Н), 3,51-3,47 (м, 2Н), 3,28-3,22 (м, 2Н), 3,05-3,02 (м, 2Н), 2,99-2,93 (м, 1Н), 2,24 (с, 3Н), 2,12-2,06 (м, 2Н), 1,94-1,87 (м, 2Н), 1,68-1,63 (м, 2Н), 1,51-1,42 (м, 2Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 387 (МН+, 90), 276 (100), 194 (50).
Дигидрохлорид N-(4^2^ 1 -метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7 ил)тиофен-2-карбоксимидамида. Раствор №(4-(2-( 1 -метилпирролидин-2-ил)этил)-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамида (0,48 г, 1,242 ммоль) в сухом этаноле (10 мл) обрабатывали хлористо-водородной кислотой (1 М в эфире; 6,21 мл, 6,21 ммоль) и перемешивали в течение получаса. Осадок собирали и промывали простым эфиром. Осадок растворяли в метаноле и концентрировали, получая при этом желто-оранжевое кристаллическое вещество (0,57 г, 100%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,22 (ушир.с, 1Н), 11,17 (ушир.с, 1Н), 9,68 (ушир.с, 1Н), 8,72 (ушир.с, 1Н), 8,15-8,13 (м, 2Н), 7,37-7,34 (м, 1Н), 7,05-6,99 (м, 2Н), 6,91 (ушир.д, 1=8,7 Гц, 1Н), 3,66-3,64 (м, 2Н), 3,553,41 (м, 3Н), 3,38-3,22 (м, 1Н), 3,12-3,09 (м, 2Н), 3,00-2,97 (м, 1Н), 2,76 (д, 1=4,8 Гц, 3Н), 2,32-2,18 (м, 2Н), 1,99-1,86 (м, 3Н), 1,77-1,71 (м, 1Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 387 (МН+, свободное основание, 100), 194 (19); Е8I-НКМ8: вычислено для С20Н27^82 (МН+, свободное основание) 387,1671, найдено 387,1654; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 14: синтез ^(4-(2-(пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен2-карбоксимидамида (14)
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин.
Получен согласно способу, описанному в примере 11.
- 50 021798
7-Нитро-4-(2-(пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин.
Смесь 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (1 г, 5,10 ммоль), гидрохлорида 1-(2хлорэтил)пиперидина (1,876 г, 10,19 ммоль) и бромида тетрабутиламмония (0,082 г, 0,255 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и 50% раствора №ОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (16 ч). Смесь разбавляли дихлорметаном (5 мл) и водой (20 мл) и смесь затем переносили в делительную воронку. Органический слой удаляли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x10 мл). Объединенные органические слои сушили (№^О4), фильтровали и концентрировали. Красное сырое вещество подвергали колоночной хроматографии на силикагеле с применением системы очистки Вю1аде (колонка с 80 г кремнийсодержащего адсорбента; градиент растворителя: дихлорметан 3СУ, затем изменение до смеси 6:94 (2 М МН3 в метаноле): дихлорметан на протяжении 15СУ; мониторинг при длине волны 254 нм; скорость потока = 45 мл/минута), получая при этом оранжевое твердое вещество (0,937 г, 59,8%).
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,85-7,81 (м, 2Н), 6,82 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 3,82-3,79 (м, 2Н), 3,58 (ΐ, 1=6,9 Гц, 2Н), 3,08-3,04 (м, 2Н), 2,50-2,45 (м, 2Н), 2,44-2,34 (м, 4Н), 1,49-1,46 (м, 4Н), 1,40-1,37 (м, 2Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 308 (МН+, 100).
4-(2-(Пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7 -амин.
Смесь 7-нитро-4-(2-(пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (0,9 г, 2,93 ммоль) в метаноле (10 мл) в атмосфере аргона обрабатывали сначала гидразингидратом (1,424 мл, 29,3 ммоль) и затем никелем Ренея (~0,172 г, 2,93 ммоль). Реакционную смесь переносили на предварительно нагретую до 65°С масляную баню. Спустя 1 ч реакционную смесь выливали на подушку целита. Подушку целита промывали метанолом (25 мл). Красный фильтрат концентрировали и подвергали хроматографии на короткой колонке с силикагелем (смесь 1:9 (2 М ЯН3 в МеОН):СН2С12). Фракции концентрировали и остаток применяли на следующей стадии.
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 6,49 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,26-6,23 (м, 2Н), 4,41 (с, 2Н), 3,38-3,35 (м, 2Н), 3,20 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,98-2,94 (м, 2Н), 2,40-2,34 (м, 6Н), 1,50-1,46 (м, 14Н), 1,38-1,36 (м, 2Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 278 (МН+, 100).
N-(4-(2-(Пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Суспензию 4-(2-(пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-амина (0,90 г, 3,24 ммоль) и гидроиодида метилтиофен-2-карбимидотиоата (1,85 г, 6,49 ммоль) перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (16 ч) в атмосфере аргона. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и дихлорметаном (25 мл). После перемешивания в течение 1 ч смесь выливали в делительную воронку. Органический слой удаляли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл). Объединенные органические слои сушили (№^О4), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (смесь от 2:98 до 5:95 МеОН:СН2С12, затем 5:95 (2 М ХН3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанное в заголовке соединение 14 в виде желтого твердого вещества (0,288 г, 23%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,69 (д, 1=3,3 Гц, 1Н), 7,57 (д, 1=4,5 Гц, 1Н), 7,09-7,06 (м, 1Н), 6,67 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,52-6,47 (м, 2Н), 6,39 (ушир.с, 2Н), 3,56-3,53 (м, 2Н), 3,39-3,33 (м, 2Н), 3,03-3,01 (м, 2Н), 2,452,39 (м, 6Н), 1,49-1,48 (м, 4Н), 1,39-1,38 (м, 2Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 387 (МН+, 77), 276 (46), 194 (100).
Дигидрохлорид N-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
Раствор N-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (0,288 г, 0,745 ммоль) в безводном метаноле (8 мл) обрабатывали хлористоводородной кислотой (1 Μ в простом эфире; 3,72 мл, 3,72 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч и затем концентрировали, получая при этом оранжевое твердое вещество (0,34 г, 99%).
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,21 (ушир.с, 1Н), 11,16 (ушир.с, 1Н), 9,67 (ушир.с, 1Н), 8,69 (ушир.с, 1Н), 8,15 (ушир.д, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,11 (ушир.д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,38-7,35 (м, 1Н), 7,11-6,98 (м, 3Н), 3,89-3,84 (м, 2Н), 3,68-3,64 (м, 2Н), 3,45-3,42 (м, 2Н), 3,22-3,15 (м, 2Н), 3,12-3,09 (м, 2Н), 2,89-2,88 (м, 2Н), 1,87-1,71 (м, 5Н), 1,42-1,38 (м, 1Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 387 (МН+, свободное основание, 100), 194 (23); ΕδΙΉΚΜδ: вычислено для СгсНгЩЗг (Μ^, свободное основание) 387,1671, найдено 337,1657; чистота по ВЭЖХ 99% площади.
Пример 15: синтез N-(4-(2-(диэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (15)
- 51 021798
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин.
Получен согласно методике, описанной в примере 11.
ЩСДиэтил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Смесь 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (1 г, 5,10 ммоль), гидрохлорида 2-хлор-ЩС диэтилэтанамина (1,754 г, 10,19 ммоль) и пВи.+Вг (0,082 г, 0,255 ммоль) в СЩС12 (10 мл) и воде (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавляли СЩС12 (5 мл) и водой (20 мл). Смесь переносили в делительную воронку и слои разделяли. Водный слой экстрагировали СЩС12 (2x10 мл). Объединенные органические слои сушили (Ν;·ι2δΟ4). фильтровали и концентрировали. Красное сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (СЩС12, затем смесь 1,75-3,5% (2 М ΝΗ3 в МеОН):СЩС12), получая при этом коричневое масло (1,15 г, 77%).
Ή ЯМР (ДМСО-а6) δ 7,86-7,81 (м, 2Н), 6,81 (д, 1=9 Гц, 1Н), 3,85-3,82 (м, 2Н), 3,53 (т, 1=6, 6 Гц, 2Н), 3,07-3,04 (м, 2Н), 2,58 (т, 1=6,3 Гц, 2Н), 2,52-2,45 (м, 4Н), 0,92 (т, 1=7,2 Гц, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 298, 296 (МН+, 100).
4-(2-(Диэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7 -амин.
К перемешиваемому раствору Щ№диэтил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (1,109 г, 3,76 ммоль) в МеОН (30 мл) добавляли никель Ренея (суспензия в воде; ~0,1 г, 3,76 ммоль), затем гидразингидрат (1,828 мл, 37,6 ммоль). Смесь погружали в предварительно нагретую масляную баню и кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин. Раствор охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и промывали посредством МеОН. Сырое вещество фильтровали через слой диоксида кремния (3,5% раствор (2 М ΝΗ3 в МеОН):СЩС12). Растворитель выпаривали, получая при этом продукт в виде темно-коричневого масла (1,07 г, количественный выход).
Ή ЯМР (СПС13) δ 6,58 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,45 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,40 (дд, 1=2,7, 8,7 Гц, 1Н), 3,53-3,50 (м, 2Н), 3,30 (м, 4Н), 3,03-2,99 (м, 2Н), 1,03 (т, 1=7,2 Гц, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 268, 266 (МН+, 100), 100 (52).
Ы-(4-(2-(Диэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7 -ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
Гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (2,266 г, 7,94 ммоль) добавляли к смеси 4-(2(диэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-7-амина (1,054 г, 3,97 ммоль) в ΕΐΟΗ (20 мл). Смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (30 мл) и экстрагировали СЩС12 (50 мл). Водную фазу промывали СЩС12 (50 мл). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (Να2δΟ4). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (СЩС12, затем 3,5% раствор (2 М ΝΗ3 в МеОН):СЩС12). Собранные фракции концентрировали и образец снова подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (2,5% раствор МеОН:СЩС12). Собранные фракции концентрировали, получая при этом соединение 15 в виде коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (СПС13) δ 7,40-7,36 (м, 2Н), 7,05 (дд, 1=3,9, 4,8 Гц, 1Н), 6,73 (м, 3Н), 3,65-3,61 (м, 1Н), 3,39 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,05-3,02 (м, 2Н), 2,67-2,54 (м, 6Н), 1,04 (т, 1=7,2 Гц, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 377, 375 (МН+, 35), 278, 276 (100).
Дигидрохлорид Ы-(4-(2-(диэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К перемешиваемому раствору Ы-(4-(2-(диэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (1,149 г, 3,07 ммоль) в МеОН (5 мл) добавляли 1 М ΗΟ в простом эфире (15,35 мл, 15,35 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 5 мин в атмосфере аргона и концентрировали, получая при этом желтое твердое вещество (1,37 г, количественный выход).
Ή ЯМР (ДМСО-а6) δ 11,24 (с, 2Н), 9,68 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,15-8,13 (м, 2Н), 7,37-7,34 (м, 1Н), 7,12-7,00 (м, 3Н), 3,88-3,83 (м, 2Н), 3,69-3,66 (м, 2Н), 3,17-3,10 (м, 8Н), 1,25 (т, 1=7,2 Гц, 6Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 377, 375 (МН+, свободное основание, 58), 278, 276 (100); ΕδΙ-ΗΚΜδ: вычислено для Ο9Η25Ν4δ2 (МН+, свободное основание) 375,1671, найдено 375,1667; чистота по ВЭЖХ: 95% площа- 52 021798 ди.
Пример 16: синтез дигидрохлорида ^(4-(2-(2-гидроксиэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамида (16)
Получен согласно методике, описанной в примере 11.
2-Хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
2-Хлорацетилхлорид (4,08 мл, 50,9 ммоль) по каплям добавляли к раствору, содержащему 7-нитро3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин (5 г, 25,5 ммоль) в толуоле (30 мл). Смесь кипятили с обратным холодильником при 110°С в течение 20 мин. Смесь гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Смесь переносили в делительную воронку и экстрагировали Е!ОАс (4x100 мл). Сырое вещество фильтровали через подушку силикагеля и промывали Е!ОАс. Фильтрат концентрировали, получая при этом желто-коричневое твердое вещество.
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,12 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,94 (дд, 1=2,7, 9,0 Гц, 1Н), 7,72 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,63 (с, 2Н), 3,96 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,32 (т, 1=5,4 Гц, 2Н, перекрытый с растворителем пик);
Е81-М8 (т/ζ, %): 273 (МН+, 100), 295 (40).
2-(2-Гидроксиэтиламино)-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
Раствор 2-хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (1,0 г, 3,67 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 4 М НС1 в 1,4-диоксане (4,58 мл, 18,33 ммоль) с последующим медленным добавлением раствора 2-аминоэтанола (2,207 мл, 36,7 ммоль) в воде (4 мл). Темный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Смесь разбавляли Е!ОАс (50 мл) и насыщенным бикарбонатом натрия (100 мл), затем перемешивали в течение 20 мин. Содержимое выливали в делительную воронку и органический слой отделяли, сушили (№28О4), фильтровали и концентрировали, получая при этом темно-желтый остаток. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 5:95 МеОН:СН2С12, затем 5:95 (2 М Ν^ в МеОН):СН2С12, получая при этом желтый остаток (320 мг, 29,4%).
!Н ЯМР (СПС13) δ 8,14 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,95 (дд, 1=2,7, 9,0 Гц, 1Н), 7,37 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,02 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,61 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,57 (с, 2Н), 3,28 (т, 1=5,4 Гц, 2Н), 2,77 (т, 1=4,8 Гц, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 298 (МН+, 100%).
трет-Бутил-2-гидроксиэтил-(2-(7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамат.
Раствор 2-(2-гидроксиэтиламино)-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (300 мг, 1,009 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали Вос-ангидридом (231 мг, 1,059 ммоль) с последующим добавлением триэтиламина (0,422 мл, 3,03 ммоль). Желтый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч (на протяжении ночи). Раствор разбавляли Е!ОАс (20 мл) и обрабатывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл). Смесь переносили в делительную воронку и экстрагировали. После экстракции органический слой отделяли, сушили (№28О4) и фильтровали через слой силикагеля. Слой промывали Е!ОАс (10 мл) и фильтрат концентрировали, получая при этом желтый остаток. Остаток подвергали хроматографии на силикагеле с применением системы для очистки Вю1аде (колонка: 40 г кремнийсодержащего адсорбента; градиент от 30% Е!ОАс/70% гексанов до 90% Е!ОАс/10% гексанов при пропускании смеси в количестве 10 объемов колонки; скорость потока = 35 мл/мин; длина волны при сборе 254 нм). После сушки при пониженном давлении получали желтый осадок (270 мг, 67,3%).
!Н ЯМР (СИС13) (смесь ротамеров) δ 8,15 (дд, 1=2,7, 8,1 Гц, 1Н), 7,94 (дд, 1=2,4, 8,7 Гц, 1Н), 7,58 и 7,31 (2жд, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,41 (ушир.с, 1Н), 4,12-3,88 (м, 4Н), 3,82-3,66 (м, 2Н), 3,48 апй 3,11 (2жт, 1=4,5 Гц, 2Н), 3,29 (т, 1=4,5 Гц, 2Н), 1,46 и 1,40 (2жс, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 420 (М+№, 70), 398 (МН+, 40), 298 (100).
- 53 021798 трет-Бутил-2-гидроксиэтил-(2-(7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
Раствор трет-бутил-2-гидроксиэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2оксоэтил)карбамата (250 мг, 0,629 ммоль) в ТГФ (10 мл) охлаждали до 0°С, затем обрабатывали бораном в ТГФ (1 М)(6,29 мл, 6,29 ммоль). Образовавшемуся ярко-желтому раствору давали возможность нагреться до комнатной температуры и затем перемешивали при такой температуре в течение 2,5 ч. Смесь охлаждали до 0°С и реакционную смесь затем осторожно гасили МеОН (сначала добавление по каплям; всего 20 мл). Охлаждающую баню удаляли и желтый раствор перемешивали в течение 20 мин, затем концентрировали. Оранжевый остаток растворяли в МеОН (50 мл) и концентрировали досуха. Этот остаток растворяли в Ε!ΟΑс (20 мл) и фильтровали через подушку силикагеля. Подушку силикагеля промывали Ε!ΟΑс (100 мл). Фильтрат концентрировали, получая при этом оранжевый остаток, который сушили при пониженном давлении в течение 4 ч (230 мг, 95%).
'II ЯМР (СЭС13) δ 7,97 (ушир.с, 1Н), 7,87 (ушир.д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,85-6,71 (м, 1Н), 3,81 (ушир.с, 5Н), 3,61 (ушир.с, 2Н), 4,54-3,31 (м, 4Н), 3,02 (перекр.видимый т, 2Н), 1,47 (ушир.с, 9Н);
ΕδΙ^δ (т/ζ, %): 406 (М+№, 60), 384 (МН+, 10), 328 (60), 284 (100).
трет-Бутил-2-гидроксиэтил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
В круглодонную колбу, содержащую трет-бутил-2-гидроксиэтил-(2-(7-нитро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат (220 мг, 0,574 ммоль), в атмосфере аргона загружали палладий на активированном угле (10 мас.%; 61,0 мг, 0,057 ммоль). Смесь продували аргоном перед добавлением Ε!ΟΗ (20 мл). Из образовавшейся суспензии откачивали воздух при помощи насоса и в систему при помощи баллона вводили водород. Смесь перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона, в течение 3 ч. Баллон с водородом убирали и к реакционной смеси добавляли гидроиодид метилтиофен2-карбимидотиоата (327 мг, 1,147 ммоль). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч (на протяжении ночи). После этого времени смесь фильтровали через подушку целита, которую затем промывали МеОН (10 мл). Фильтрат концентрировали и остаток распределяли между насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и СН2С12 (100 мл). Смесь переносили в делительную воронку и экстрагировали. После экстракции органический слой отделяли, сушили (№2δΟ4), фильтровали и концентрировали, получая при этом темный остаток. Этот остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 2:98 МеОН/СН2С12, затем 3,5:96,2 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12, получая при этом желтое твердое вещество (140 мг, 52,7%).
'Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,69 (ушир.д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,57 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,07 (дд, 1=3,9, 4,8 Гц, 1Н), 6,82-6,75 (м, 1Н), 6,53-6,42 (м, 2Н), 6,32 (ушир.с, 2Н), 4,73 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 3,54 (ушир.с, 2Н), 3,50-3,42 (м, 2Н), 3,38 (ушир.с, 4Н, перекрытый с растворителем пик), 3,27-3,19 (м, 2Н), 3,08-2,96 (м, 2Н), 1,41 (ушир.с, 9Н);
ΕδΙ^δ (т/ζ, %): 463 (МН+, 100), 398 (60); чистота по ВЭЖХ: 96,4% площади.
Дигидрохлорид ^(4-(2-(2-гидроксиэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7 ил)тиофен-2-карбоксимидамида.
К раствору трет-бутил-2-гидроксиэтил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь] [1,4]тиазин4(3Н)-ил) этил) карбамата (130 мг, 0,281 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли 3н. НС1 (2,81 мл, 8,43 ммоль). Желтый раствор нагревали при 75°С в течение 30 мин. После этого времени реакционную смесь фильтровали и концентрировали до половины ее объема. Желтый раствор затем экстрагировали 2x50 мл СН2С12 и водный слой концентрировали досуха, получая при этом желтый остаток. Этот остаток сушили при пониженном (высокий вакуум) давлении, получая при этом соединение 16 в виде желтого продукта.
'Н ЯМР ((ΊΑΟΙ)) δ 7,98-7,94 (м, 2Н), 7,29 (псевдо т, 1=4,2 Гц, 1Н), 7,04-6,94 (м, 3Н), 3,79 (ушир.т, 1=4,8 Гц, 2Н), 3,72-3,65 (м, 4Н), 3,28 (ушир.с, 2Н), 3,16 (ушмр.т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,09-3,06 (м, 2Н);
ΕδΙ^δ (т/ζ, %): 363 (МН+, свободное основание, 100), 276 (90); ΕδI-ΗΚΜδ: вычислено для СпНзКдЦЗг (МН+, свободное основание): 363,1307, найдено 363,1316; чистота по ВЭЖХ 96,2% площади.
- 54 021798
Пример 17: синтез дигидрохлорида 2-(метил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)амино)уксусная кислота (17)
^^Диметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Получали согласно методике, описанной в примере 8.
^Метил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Раствор ^^диметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (1,65 г, 6,17 ммоль) в С1СН2СН2С1 (20 мл) охлаждали до 0°С (баня лед/вода), затем обрабатывали по каплям альфахлорэтилхлорформиатом (1,009 мл, 9,26 ммоль). Образовавшуюся суспензию нагревали при 88°С в течение 1,5 ч, затем концентрировали досуха. Остаток растворяли в МеОН (50 мл) и нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Темную смесь концентрировали и распределяли между насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и СН2С12 (200 мл). Смесь переносили в делительную воронку и экстрагировали. После экстракции органический слой отделяли, сушили (№2804), фильтровали и концентрировали до получения коричневого остатка. Этот остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 5:95 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12 в качестве элюента, получая при этом желтый остаток (980 мг, 62,7%).
Ή ЯМР (СЭС1з) δ 7,97 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Н), 6,68 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,86-3,82 (м, 2Н), 3,55 (т, 1=6,6 Гц, 2Н), 3,04-3,01 (м, 2Н), 2,87 (т, 1=6,6 Гц, 2Н), 2,49 (с, 3Н), 1,32 (ушир.с, 1Н).
трет-Бутил-2-(метил-(2-(7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)амино)ацетат.
Раствор ^метил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (0,95 г, 3,75 ммоль), диизопропилэтиламина (1,960 мл, 11,25 ммоль) и трет-бутилбромацетата в ДМФА (20 мл) нагревали при 55°С в течение 17 ч (на протяжении ночи). Желтый раствор разбавляли насыщенным раствором соли (40 мл) и экстрагировали ЕЮАс (100 мл). Органический экстракт отделяли и промывали насыщенным раствором соли (20 мл). Органический слой сушили (№2804), фильтровали и концентрировали, получая при этом желтый остаток. Этот остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 2,5:97,5 МеОН:СН2С12, получая при этом желто-коричневый остаток. Собирали две фракции, причем последняя имела неполярное желтое пятно (950 мг, 68,9%).
Ή ЯМР (СЭС1з) δ 7,96 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,88 (д, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Н), 6,65 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,88-3,83 (м, 2Н), 3,55 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,20 (с, 2Н), 3,02-2,99 (м, 2Н), 2,76 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,44 (с, 3Н), 1,46 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 368 (МН+, 20), 312 (100).
трет-Бутил-2-((2-(7-амино-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)(метил)амино)ацетат.
Круглодонную колбу, содержащую трет-бутил-2-(метил(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)амино)ацетат (925 мг, 2,52 ммоль) продували аргоном и затем в нее загружали палладий-на-угле (10 мас.%); 268 мг, 0,252 ммоль). К этой смеси добавляли ЕЮН (40 мл). Из образовавшейся суспензии выкачивали воздух с применением насоса и в систему вводили водород при помощи баллона. Смесь перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона в течение 3 ч. Баллон убирали и через суспензию барботировали аргон в течение 10 мин. Смесь фильтровали через подушку целита и подушку целита промывали метанолом (20 мл). Фильтрат концентрировали и остаток сушили при пониженном давлении, получая при этом указанное в заголовке соединение (850 мг, количественный выход).
Ή ЯМР (СЭС1з) δ 6,59 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6.45 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 6,40 (дд, 1=2,7, 8,4 Гц, 1Н), 3,54-3,45 (м, 2Н), 3,33 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,27 (ушир.с, 2Н), 3,20 (с, 2Н), 3,04-2,98 (м, 2Н), 2,71 (т, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,42 (с, 3Н), 1,46 (с, 9Н);
- 55 021798
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 338 (МН+, 95), 282 (100).
трет-Бутил-2-(метил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)амино)ацетат.
К раствору ((2-(7-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)(метил)амино)ацетата (850 мг, 2,52 ммоль) в ЕЮН (25 мл) добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (1,43 г, 5,04 ммоль). Образовавшуюся суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч (на протяжении ночи), после этого времени суспензию разбавляли 20 мл СН2С12 с получением темно-желтого раствора. Затем через данный раствор в течение 30 мин барботировали аргон. Раствор переносили в делительную воронку, содержащую насыщенный раствор бикарбоната натрия (50 мл) и СН2С12 (100 мл), затем экстрагировали. После экстракции органический слой отделяли, сушили (№2504), фильтровали и концентрировали, получая при этом темный остаток. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 2:98 МеОН:СН2С12, затем смеси 2,5:97,5 (2 М N4-, в МеОН):СН2С12 с получением желто-зеленого остатка (420 мг, 37,3%). Собирали некоторое количество нечистых фракций (~340 мг).
Ή ЯМР (СПС13) δ 7,43-7,35 (м, 2Н), 7,06 (псевдо т, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,71 (ушир.д, 1=8,1 Гц, 2Н), 6,65 (дд, 1=1,8, 8,4 Гц, 1Н), 4,91 (ушир.с, 2Н), 3,66-3,58 (м, 2Н), 3,43 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,21 (с, 2Н), 3,07-2,99 (м, 2Н), 2,74 (т, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,45 (с, 3Н), 1,47 (с, 9Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 447 (МН+, 100), 391 (50); чистота по ВЭЖХ: 99,7% площади.
Дигидрохлорид 2-(метил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)амино)уксусной кислоты. В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу, снабженную магнитным стержнем, в атмосфере аргона загружали трет-бутил-2-(метил(2-(7-(тиофен-2карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)амино)ацетат (200 мг, 0,448 ммоль) в СН2С12 (3 мл) и раствор охлаждали до 0°С (баня лед/вода). К этому раствору добавляли анизол (0,098 мл, 0,896 ммоль) с последующим добавлением по каплям трифторуксусной кислоты (2,92 мл, 26,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин. Ледяную баню затем удаляли и смесь перемешивали в течение 3 дополнительных часов. После этого времени смесь концентрировали и обрабатывали 4,0 М НС1 в 1,4-диоксане (4 мл). Образовавшуюся суспензию разбавляли Εΐ20 (20 мл) и затем перемешивали в течение 20 мин. Смесь фильтровали и твердое вещество промывали Εΐ20 (20 мл). Твердое вещество сушили при пониженном давлении, получая при этом соединение 17 в виде светло-желтого порошка (200 мг, 96%). Анализ ВЭЖХ показал, что образец содержал ~3,4% исходного вещества.
'Н-ЯМР (С1);01)) δ 7,99 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,97 (д, 1=3,6 Гц, 1Н), 7,31 (псевдо т, 1=4,5 Гц, 1Н), 7,116,99 (м, 2Н), 6,95 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 4,16 (с, 2Н), 3,81 (ушир.т, 1=6,9 Гц, 2Н), 3,68 (ушир.т, 1=4,8 Гц, 2Н), 3,52-3,39 (м, 2Н), 3,10 (ушир.т, 1=4,8 Гц, 2Н), 3,03 (с, 3Н);
ΕδΙ-Μδ (анализ по положительным ионам): 391 (МН+, свободное основание, 100);
ΕδΙ-Μδ (анализ по отрицательным ионам): 389 (М-1, свободное основание, 100); ΕδΙ-ΜΓΜδ: вычислено для (МН+, свободное основание): 391,1256, найдено: 391,1255; чистота по ВЭЖХ:
96,64% площади.
Пример 18: синтез дигидрохлорида ^Л-О-Ц-Стиофен^-карбоксимидамидо^Нбензо[Ь] [1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)пирролидин-2-карбоновой кислоты (18)
2-Хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
Получен согласно методике, описанной в примере 16.
(δ)-трет-Бутил-1-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)пирролидин-2карбоксилат.
Раствор 2-хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (1,0 г, 3,67 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали ^-трет-бутилпирролидин^-карбоксилатом (0,942 г, 5,50 ммоль) с последующей обработкой насыщенным бикарбонатом натрия (4 мл). Смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч, затем перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (17 ч). Смесь разбавляли Εΐ0Αс (50 мл) и насыщенным бикарбонатом натрия (10 мл), затем перемешивали в течение 20 мин. Содержимое выливали в делительную воронку и органическую фазу отделяли, сушили (№2δ04), фильтровали и концентри- 56 021798 ровали, получая при этом темно-желтый остаток. Данный остаток подвергали хроматографии на силикагеле с применением системы очистки Вю1аде (колонка: 40 г кремнийсодержащего адсорбента; градиент от смеси 20:80 ΕΐΟΑс/гексаны до 60:40 ΕΐΟΑс/гексаны при пропускании смеси в количестве 8 объемов колонки; скорость потока: 35 мл/мин; длина волны при сборе 254 нм). Получали желтый остаток (1,47 г, 98%).
'II ЯМР (СИС13) δ 8,09 (д, 1=2,4 Гц, 1Η), 7,91 (дд, 1=2,4, 8,7 Гц, 1Η), 7,75 (д, 1=9,0 Гц, 1Η), 4,10 (ушир.с, 2Η), 3,74 (ушир.д, 1=13,2 Гц, 1Η), 3,40 (ушир.д, 1=13,5 Гц, 1Η), 3,37-3,21 (м, 3Η), 3,12-3,04 (м, 1Η), 2,61 (ушир.дд, 1=8,1, 16,2 Гц, 1Η), 2,21-2,07 (м, 1Η), 1,95-1,77 (м,3Н), 1,43 (с, 9Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 408 (МН+, 50), 352 (100).
(8)-трет-Бутил-1 -(2-(7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)пирролидин-2-карбоксилат.
М боран в ТГФ (17,18 мл, 17,18 ммоль) добавляли к (8)-трет-бутил-1-(2-(7-нитро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)пирролидин-2-карбоксилату (1,4 г, 3,44 ммоль) и образовавшийся желтый раствор перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (17 ч). Желтый раствор охлаждали до 0°С и осторожно гасили МеОН (10 мл). Раствор концентрировали, растворяли в МеОН (50 мл) и снова концентрировали, получая при этом темно-желтый остаток. Остаток подвергали хроматографии на силикагеле с применением системы очистки Вю!аде (колонка: 80 г кремнийсодержащего адсорбента; градиент от смеси 20:80 ΕΐΟΑс/гексаны до 60:40 ΕΐΟΑс/гексаны при пропускании смеси в количестве 10 объемов колонки; скорость потока = 45 мл/мин; длина волны при сборе 254 нм). Получали желтый остаток (550 мг, 40,7%).
'Η ЯМР (СИС13) δ 7,96 (д, 1=2,7 Гц, 1Η), 7,87 (дд, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Η), 6,68 (д, 1=9,3 Гц, 1Η), 3,86-3,82 (м, 2Η), 3,57 (т, 1=7,5 Гц, 2Η), 3,24-3,10 (м, 2Η), 3,05-2,96 (м, 3Η), 2,75-2,63 (м, 1Η), 2,52-2,41 (м, 1Η), 2,15-2,04 (м, 1Η), 1,97-1,78 (м, 3Η), 1,44 (с, 9Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 394 (МН+, 25), 338 (100).
(8)-трет-Бутил-1 -(2-(7-тиофен-2-карбоксимидамидо-2Н-бензо [1][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)пирролидин-2-карбоксилат.
Круглодонную колбу, содержащую (8)-трет-бутил-1-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)пирролидин-2-карбоксилат (525 мг, 1,334 ммоль) продували аргоном. В данную колбу загружали палладий на активированном угле (10 мас.%; 142 мг, 0,133 ммоль) с последующим добавлением ΕΐΟΗ (25 мл). Из образовавшейся суспензии выкачивали газ с применением насоса и в систему вводили водород при помощи баллона. Смесь перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона, в течение 2 ч. После этого времени баллон с водородом удаляли и к смеси добавляли гидроиодид метилтиофен-2карбимидотиоата (761 мг, 2,67 ммоль). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч (на протяжении ночи). В это время смесь фильтровали через подушку целита и подушку промывали МеОН (20 мл). Фильтрат концентрировали и остаток распределяли между насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и СН2С12 (100 мл). Смесь переносили в делительную воронку и экстрагировали. После экстракции органический слой отделяли, сушили (№28О4), фильтровали и концентрировали, получая при этом темный остаток. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле с применением смеси 2:98 МеОН:СН2С12, затем смеси 3,5:96,5 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12 с получением желто-зеленого остатка (398 мг, 63,1%).
'Η ЯМР (СИС13) δ 7,39 (дд, 1=1,2, 5,1 Гц, 1Η), 7,37 (дд, 1=1,2, 3,9 Гц, 1Η), 7,05 (дд, 1=3,6, 4,8 Гц, 1Η), 6,73 (ушир.д, 1=5,1 Гц, 1Η), 6,71 (ушир.с, 1Η), 6,65 (дд, 1=2,1, 8,7 Гц, 1Η), 4,86 (ушир.с, 2Η), 3,63-3,60 (м, 2Η), 3,44 (!, 1=7,5 Гц, 2Η), 3,25-3,19 (м, 1Η), 3,11 (ушир.дд, 1=5,4, 8,4 Гц, 1Η), 3,04-2,94 (м, 3Η), 2,71-2,59 (м, 1Η), 2,45 (ушир.дд, 1=7,8, 16,2 Гц, 1Η), 2,13-1,99 (м, 1Η), 1,97-1,74 (м, 3Η), 1,45 (с, 9Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 473 (МН+, 90), 417 (85), 276 (100); чистота по ВЭЖХ 99,6% площади.
Дигидрохлорид (8)-1-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)пирролидин-2-карбоновой кислоты.
Раствор (8)-трет-бутил-1-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)пирролидин-2-карбоксилата (200 мг, 0,423 ммоль) в СН2С12 (5 мл) обрабатывали анизолом (0,092 мл, 0,846 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и затем добавляли трифторуксусную кислоту (2,76 мл, 2,54 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, затем концентрировали досуха. К данному остатку добавляли 4 М НС1 в диоксане (3,17 мл, 12,69 ммоль) и образовавшуюся суспензию перемешивали в течение 20 мин. Данную смесь разбавляли Εΐ2Ο (10 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали Εΐ2Ο (10 мл) и затем сушили при пониженном давлении. Твердое вещество растворяли в 3н. НС1 (4,0 мл, 12,00 ммоль) и нагревали при 50°С в течение 1 ч. Желтый раствор концентрировали и сушили при пониженном давлении, получая при этом соединение 18 в виде желтого твердого вещества (200 мг, 97%).
'Η ЯМР (СИ3ОИ) δ 7,98-7,94 (м, 2Η), 7,28 (дд, 1=4,2, 4,8 Гц, 1Η), 7,05-7,01 (м, 2Η), 6,92 (д, 1=8,7 Гц, 1Η), 4,42 (дд, 1=7,8, 9,0 Гц, 1Η), 3,85-3,56 (м, 6Η), 3,48-3,29 (м, 2Η), 3,13-3,03 (м, 2Η), 2,62-2,47 (м, 1Η), 2,26-2,10 (м, 2Η), 2,08-1,92 (м, 1Η);
Ε8Ι-ΜΟ (т/ζ, %): 417 (МН+, свободное основание, 100); Ε8Ι-ΗΚΜ8: вычислено для Ο20Η25Ν4Ο282 (МН+, свободное основание) 417,1419, найдено 417,1399; чистота по ВЭЖХ: 99,5% площади; оптическое
- 57 021798 вращение: 25[α]589=-27,0°, с=0,52 в МеОН.
Пример 19: синтез N-(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)фуран-2карбоксимидамида (19)
N,N-Диметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Получен согласно методике, описанной в примере 8.
4-(2-Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7 -амин.
К раствору N,N-диметил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (0,9695 г, 3,63 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли никель Ренея (суспензия в воде; ~0,1 г, 3,63 ммоль), затем гидразингидрат (1,82 мл, 37,4 ммоль). Смесь погружали в предварительно нагретую масляную баню и кипятили с обратным холодильником в течение 20 мин. Раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подушку целита. Подушку для фильтрования промывали МеОН и сырое вещество концентрировали. Сырое вещество фильтровали через слой силикагеля (2,5:97,5 (2 М ΝΉ3 в МеОН): (СН2С12). Собранные фракции давали коричневое вязкое масло (0,84 г, 99%).
'Н ЯМР (СПС13) δ 6,58 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,45 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,40 (дд, 1=2,7, 8,7 Гц, 1Н), 3,51-3,48 (м, 2Н), 3,30 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,03-3,00 (м, 2Н), 2,48 (т, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,27 (с, 6Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 240, 238 (МН+, 100).
N-(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)фуран-2-карбоксимидамид.
Гидробромид бензилфуран-2-карбимидотиоата (1,139 г, 3,82 ммоль) добавляли к смеси 4-(2(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-амина (0,829 г, 3,49 ммоль) в ЕЮН (20 мл). Смесь перемешивали в течение 2 дней в атмосфере аргона. Раствор гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Раствор переносили в делительную воронку, разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали СН2С12 (50 мл). Водную фазу промывали СН2С12 (50 мл). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№2δΟ4). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (2,5-5% (2 М ΝΉ3 в МеОН): (СН2С12). Собранные фракции давали соединение 19 в виде коричневого масла (1,03 г, 90%).
'Н ЯМР (СПС13) δ 7,46 (с, 1Н), 7,03 (ушир.с, 1Н), 6,73-6,68 (м, 3Н), 6,50 (ушир.с, 1Н), 5,03 (ушир.с, 2Н), 3,62-3,59 (м, 2Н), 3,40 (т, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,05-3,02 (м, 2Н), 2,52 (т, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,29 (с, 6Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 333, 331 (МН+, 91), 260,262 (100).
Дигидрохлорид N-(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7 -ил)фуран-2карбоксимидамида. N-(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)фуран-2карбоксимидамид (0,166 г, 0,504 ммоль) растворяли в МеОН (2 мл). К раствору при комнатной температуре добавляли 1 М НС1 в эфире (2,52 мл, 2,52 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин в атмосфере аргона. Смесь концентрировали, получая при этом бледно-желтое твердое вещество (0,18 г, 93%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,36 (с, 1Н), 11,25 (ушир.с, 1Н), 9,68 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 7,91 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,07-6,96 (м, 3Н), 6,90 (д, 1=1,8 Гц, 1Н), 3,82-3,77 (м, 2Н), 3,67-3,63 (м, 2Н), 3,25-3,22 (м, 2Н), 3,12-3,09 (м, 2Н), 2,80 (с, 3Н), 2,78 (с, 3Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 333, 331 (МН+, свободное основание, 100), 260, 262 (57); НКΜδ: вычислено для С17Н23N4Οδ (МН+, свободное основание) 331,1587, найдено 331,1589; чистота по ВЭЖХ 98% площади.
- 58 021798
Пример 20: синтез ^(4-(2-(метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)фуран-2карбоксимидамида (20)
^^диметил-2-(7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
Получен согласно методике, описанной в примере 8.
^Метил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
1-Хлорэтилхлорформиат (0,612 мл, 5,61 ммоль) добавляли к раствору Н^диметил-2-(7-нитро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (1,0 г, 3,74 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (20 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Раствор нагревали до комнатной температуры и кипятили с обратным холодильником при энергичном перемешивании в течение 3 ч. Раствор концентрировали и затем кипятили с обратным холодильником в МеОН (20 мл). Раствор концентрировали, получая при этом темно-коричневое вязкое масло (1,05 г, количественный выход).
Ή ЯМР (СПС13) δ 7,96 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,86 (дд, 1=2,7, 9,3 Гц, 1Н), 6,67 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,85-3,82 (м, 2Н), 3,55 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 3,03-3,00 (м, 2Н), 2,86 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,48 (с, 3Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 256, 254 (МН+, 100).
трет-Бутилметил-(2-(7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору ^метил-2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (1,022 г, 4,04 ммоль) и триэтиламина (1,135 мл, 8,08 ммоль) в диоксане (20 мл) в атмосфере аргона добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (0,984 мл, 4,24 ммоль). Образовавшийся раствор перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Раствор затем разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали СН2С12 (50 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№2804). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (20-50% ЕЮАс:гексаны). Собранные фракции концентрировали, получая при этом желто-коричневое масло (0,95 г, 67%).
Ή ЯМР (СБС1з) δ 7,97 (с, 1Н), 7,87 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 6,76-6,66 (м, 1Н), 3,80 (ушир.с, 2Н), 3,60-3,54 (м, 2Н), 3,47-3,45 (м, 2Н), 3,03-2,99 (м, 2Н), 2,92-2,88 (м, 3Н), 1,42 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 278, 276 (М+№, 72), 356, 354 (МН+, 19), 298, 300 (100), 256, 254 (74). трет-Бутил-2-(7 -амино-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил(метил)карбамат.
К раствору трет-бутилметил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (0,8811 г,
2,493 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли никель Ренея (суспензия в воде; ~0,5 г, 2,493 ммоль) с последующим добавлением гидразингидрата (1,213 мл, 24,93 ммоль). Смесь затем погружали в предварительно нагретую масляную баню и кипятили с обратным холодильником в течение 5 мин. Раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подушку целита. Подушку для фильтрования промывали МеОН и сырое вещество концентрировали. Сырое вещество затем фильтровали через подушку диоксида кремния (70% Е!0Ас/гексаны). Собранные фракции концентрировали, получая при этом коричневое масло (0,78 г, 98%).
Ή ЯМР (СБС1з) δ 6,64-6,58 (м, 1Н), 6,45 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 6,39 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,53-3,50 (м, 2Н), 3,39-3,28 (м, 4Н), 3,01-2,98 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н), 1,45 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 326, 324 (МН+, 95), 268 (100).
трет-Бутил-2-(7-(фуран-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил(метил)карбамат.
Гидробромид бензилфуран-2-карбимидотиоата (1,199 г, 4,02 ммоль) добавляли к смеси трет-бутил2-(7-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил(метил)карбамата (0,763 г, 2,361 ммоль) в Е!0Н (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь гасили насыщенным рас- 59 021798 твором бикарбоната натрия (50 мл), разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали СН2С12 (2х50 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№28О4). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (2,5-5% (2 М Ν^ в МеОН):СН2С12. Собранные фракции концентрировали, получая при этом белую пену (0,88 г, 90%).
Ή ЯМР (СОС13) δ 7,85 (с, 1Н), 7,44 (с, 1Н), 6,74-6,69 (м, 1Н), 6,62 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,72 (ушир.с, 2Н), 3,64-3,60 (м, 2Н), 3,41 (с, 4Н), 3,04-3,01 (м, 2Н), 2,92 (с, 3Н), 1,45 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 419, 417 (МН+, 100).
Ю(4-(2-(Метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)фуран-2-карбоксимидамид.
Раствор трет-бутил-2-(7-(фуран-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил(метил)карбамата (0,823 г, 1,978 ммоль) в СН2С12 охлаждали до 0°С и обрабатывали трифторуксусной кислотой (5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в атмосфере аргона в течение 2 ч. Смесь гасили 1н. раствором №ЮН (70 мл) и переносили в делительную воронку. Раствор разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали СН2С12 (2х50 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№28О4). Сырое вещество концентрировали и подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (5-15% 2 М Ν^ в МеОН):СН2С12). Собранные фракции концентрировали, получая при этом соединение 20 в виде желтого вязкого масла (0,47 г, 76%).
Ή ЯМР (СОС13) δ 7,85 (с, 1Н), 7,44-7,43 (м, 1Н), 6,77-6,74 (м, 2Н), 6,70 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 6,62 (дд, 1=2,4, 8,7 Гц, 1Н), 3,59-3,56 (м, 2Н), 3,47 (с, 1Н), 3,40 (т, 1=6,6 Гц, 2Н), 3,05-3,01 (м, 2Н), 2,81 (т, 1=6,3, 2Н), 2,48 (с, 3Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 319, 317 (МН+, 96), 260 (100).
Дигидрохлорид Ю(4-(2-(метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)фуран-2карбоксимидамида. Ю(4-(2-(Метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)фуран-2карбоксимидамид (0,4353 г, 1,376 ммоль) растворяли в МеОН (3 мл). При комнатной температуре к раствору добавляли 1 М НС1 в простом эфире (6,88 мл, 6,88 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин в атмосфере аргона. Смесь концентрировали, получая при этом желтое твердое вещество (0,59 г, количественный выход).
Ή ЯМР (ДМСО-б6) δ 11,31 (с, 1Н), 9,58 (с, 1Н), 9,30 (ушир.с, 2Н), 8,82 (с, 1Н), 8,57 (с, 1Н), 7,98 (с, 1Н), 7,30 (д, 1=1,2 Гц, 1Н), 7,06-7,03 (м, 2Н), 6,97 (дд, 1=2,4, 8,7 Гц, 1Н), 3,74-3,63 (м, 4Н), 3,13-3,05 (м, 4Н), 2,58-2,55 (м, 3Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 319, 317 (МН+, свободное основание, 100), 260 (98); НКМ8: вычислено для С16Н20ЩО8 (МН+, свободное основание) 317,1430, найдено 317,1417; чистота по ВЭЖХ: 99% площади.
Пример 21: синтез Ю(4-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (21)
7-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин.
Получен согласно методике, описанной в примере 11.
4-(3-Хлорпропил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин.
Раствор 7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (1,0 г, 5,10 ммоль) и 1-хлор-3-йодпропана (1,075 мл, 10,19 ммоль) в СН2С12 (10 мл) обрабатывали 50% раствором №ЮН (10 мл) с последующей обработкой бромидом тетрабутиламмония (0,082 г, 0,255 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи (16 ч) при комнатной температуре и затем кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (50 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (3х25 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и сушили (№28О4). Растворитель выпаривали и неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (смесь от 1:4 до 2:3 Е!ОАс:гексаны), получая при этом указанное в заголовке соединение (0,65 г, 47%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (СОС13) δ 7,96 (д, 1Н, 1=2,7 Гц), 7,88 (дд, 1Н, 1=2,7, 9,3 Гц), 6,64 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 3,84-3,80 (м, 2Н), 3,65-3,60 (м, 4Н), 3,05-3,02 (м, 2Н), 2,16-2,08 (м, 2Н);
- 60 021798
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 273 (МН+, 100).
7-Нитро-4-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин.
Раствор 4-(3-хлорпропил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (0,54 г, 1,980 ммоль) в сухом ацетонитриле (20 мл) обрабатывали пирролидином (1,637 мл, 19,80 ммоль), карбонатом калия (2,74 г, 19,80 ммоль) и иодидом калия (0,657 г, 3,96 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь перемешивали при 60°С на протяжении ночи (18 ч). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (50 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные слои этилацетата промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и затем сушили (№^О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной флэш-хроматографией (смесь 5:95 (2 М Ν43 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанный в заголовке продукт (0,57 г, 94%) в виде сиропа.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,84-7,80 (м, 2Н), 6,87 (д, 1Н, 1=9, 6 Гц), 3,79-3,75 (м, 2Н), 3,49 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,08-3,05 (м, 2Н), 2,44-2,40 (м, 6Н), 1,76-1,69 (м, 6Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 308 (МН+, 100).
4-(3 -(Пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7-амин.
Раствор 7-нитро-4-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (0,55 г, 1,789 ммоль) в сухом метаноле (10 мл) обрабатывали гидразингидратом (0,652 мл, 17,89 ммоль), затем никелем Ренея (0,1 г, 1,789 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 5 мин с применением предварительно нагретой масляной бани. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку целита и промывали метанолом (3x10 мл). Объединенные слои метанола выпаривали и сырое вещество очищали колоночной флэш-хроматографией (смесь 5:95 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанный в заголовке продукт (0,45 г, 91%) в виде сиропа.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 6,51 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 6,26-6,23 (м, 2Н), 4,41 (с, 2Н), 3,37-3,30 (м, 2Н, перекрывается с пиком воды), 3,11 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 2,98-2,95 (м, 2Н), 2,42-2,37 (м, 6Н), 1,67-1,60 (м, 6Н).
Ν-(4-(3 -(Пирролидин-1 -ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [1,4]тиазин-7 -ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Раствор 4-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-7-амина (0,43 г, 1,550 ммоль) в сухом этаноле (15 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,884 г, 3,10 ммоль) при комнатной температуре и образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи (18 ч). Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаНСО3 (30 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (3x20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и затем сушили (№^О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 5:95 (2 М ΝΉ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом указанный в заголовке продукт 21 (0,51 г, 85%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,68 (д, 1Н, 1=4,5 Гц), 7,55 (д, 1Н, 1=5,1 Гц), 7,06 (дд, 1Н, 1=3,6, 4,9 Гц), 6,70 (д, 1Н, 1=8,7 Гц), 6,52-6,44 (м, 2Н), 6,32 (ушир.с, 2Н), 3,51-3,48 (м, 2Н), 3,27 (т, 211, 1=7,2 Гц), 3,04-3,00 (м, 2Н), 2,48-2,40 (м, 6Н), 1,80-1,60 (м, 6Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 387 (МН+, 68), 276 (100), 194 (75); чистота по ВЭЖХ: 98,32% площади.
Дигидрохлорид Ν-(4-(3 -(пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида.
Раствор Ν-(4-(3 -(пирролидин-1-ил)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамидо (0,48 г, 1,242 ммоль) в сухом метаноле (10 мл) обрабатывали хлористо-водородной кислотой (1 М раствор в простом эфире; 3,72 мл, 3,72 ммоль) при комнатной температуре и образовавшуюся смесь перемешивали в течение 15 мин. Растворитель затем выпаривали и продукт сушили в вакууме, получая при этом дигидрохлоридную соль (0,55 г, 96%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,34 (ушир.с, 1Н), 11,28 (с, 1Н), 9,68 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,16-8,12 (м, 2Н), 7,35 (т, 1Н, 1=4,2 Гц), 3,66-3,60 (м, 2Н), 3,50-3,40 (м, 4Н), 3,16-3,05 (м, 4Н), 3,02-2,92 (м, 2Н), 2,06-1,84 (м, 2Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 387 (МН+, свободное основание, 92), 276 (87), 194 (100); ЕδI-НКΜδ: вычислено для ^^^Ν^ (МН+, свободное основание) 387,1671, найдено 387,1659; чистота по ВЭЖХ: 98,58%.
- 61 021798
Пример 22: синтез №(4-(3-(диметиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамид (22)
4-(3-Хлорпропил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин.
Получен согласно методике, описанной в примере 21.
К^Диметил-3 -(7-нитро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропан-1 -амин.
Раствор 4-(3-хлорпропил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (0,7 г, 2,57 ммоль), диметиламина (2 М раствор в ТГФ) (2,57 мл, 5,13 ммоль), иодида калия (0,426 г, 2,57 ммоль) и карбоната калия (1,773 г, 12,83 ммоль) в сухом ацетонитриле (20 мл) перемешивали при 80°С в течение 6 ч в герметизированной трубке. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (60 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенные слои этилацетата промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и сушили Ща2804). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 1:9 (2 М NНз в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом указанный в заголовке продукт (0,3 г, 42%) в виде густого сиропа.
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,85-7,80 (м, 2Н), 6,85 (д, 1Н, 1=8,7 Гц), 3,77 (т, 2Н, 1=5,1 Гц), 3,47 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 3,06 (т, 2Н, 1=5,1 Гц), 2,24 (т, 2Н, 1=6,6 Гц), 2,14 (с, 6Н), 1,75-1,65 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 282 (МН+, 100).
4-(3 -(Диметиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7 -амин.
Раствор ^^диметил-3-(7-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропан-1-амина (0,27 г, 0,960 ммоль) в сухом метаноле (10 мл) обрабатывали гидразингидратом (0,349 мл, 9,60 ммоль) с последующим добавлением никеля Ренея (0,1 г, 0,096 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 мин на предварительно нагретой масляной бане. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку целита и промывали метанолом (3х 10 мл). Объединенные слои метанола упаривали и неочищенное вещество очищали колоночной флэш-хроматографией (смесь 5:95 (2 М NНз в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом указанный в заголовке продукт (0,24 г, 99%) в виде сиропа.
'Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 6,50 (дд, 1Н, 1=2,4, 7,0 Гц), 6,26-6,23 (м, 2Н), 4,41 (с, 2Н), 3,32-3,30 (м, 2Н), 3,09 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 2,98-2,95 (м, 2Н), 2,21 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 2,11 (с, 6Н), 1,63-1,54 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 252 (МН+, 100).
N-(4^3 -(Диметиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Раствор 4-(3-(диметиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-7-амина (0,22 г, 0,875 ммоль) в сухом этаноле (10 мл) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,499 г, 1,750 ммоль) при комнатной температуре и образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи (18 ч) при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаНСОз (25 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (3х20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (15 мл) и сушили (№2804). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 5:95 (2 М NНз в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом указанный в заголовке продукт 22 (0,27 г, 86%) в виде твердого вещества.
'Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,68 (д, 1Н, 1=3,0 Гц), 7,56 (д, 1Н, 1=5,1 Гц), 7,06 (дд, 1Н, 1=3,9, 4,8 Гц), 6,69 (д, 1Н, 1=8,7 Гц), 6,52-6,45 (м, 2Н), 6,33 (ушир.с, 2Н), 3,51-3,48 (м, 2Н), 3,25 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 3,04-3,01 (м, 2Н), 2,25 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 2,14 (с, 6Н), 1,70-1,61 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 361 (МН+, 93), 276 (100); чистота по ВЭЖХ: 98,23% площади.
Дигидрохлорид N-(4^3 -(диметиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен2-карбоксимидамида.
Раствор 4-((3 -(диметиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (0,16 г, 0,444 ммоль) в сухом метаноле (5 мл) обрабатывали хлоридом водорода (1 М
- 62 021798 раствор в эфире, 1,331 мл, 1,331 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 15 мин, растворитель выпаривали и остаток сушили в высоком вакууме, получая при этом указанный в заголовке продукт (0,19 г, 99%) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 11,22 (с, 1Н), 10,91 (ушир.с, 1Н), 9,67 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,15-8,11 (м, 2Н), 7,36 (т, 1Н, 1=4,5 Гц), 7,04-6,88 (м, 3Н), 3,64-3,61 (м, 2Н), 3,41 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,14-3,02 (м, 4Н), 2,72 (д, 6Н, 1=4,8 Гц), 2,06-1,98 (м, 2Н);
ΕδI-ΜС (т/ζ, %): 361 (МН+, свободное основание, 91), 276 (100); ΕδI-ΗКΜδ: вычислено для С18Н25К^2 (МН+, свободное основание) 361,1515, найдено 361,1515; чистота по ВЭЖХ: 98,15%.
Пример 23: синтез К-(4-(3-(метиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен2-карбоксимидамида (23)
4-(3-Хлорпропил)-7-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин.
Получен согласно методике, описанной в примере 21.
Ν-МетилО -(7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропан-1-амин. Раствор 4-(3 -хлорпропил)-7нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (1,1 г, 4,03 ммоль), гидрохлорида метиламина (0,545 г, 8,07 ммоль), иодида калия (0,669 г, 4,03 ммоль) и карбоната калия (2,79 г, 20,16 ммоль) в сухом ацетонитриле (25 мл) перемешивали при 80°С в герметизированной трубке в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (100 мл) и продукт экстрагировали этилацетатом (3x25). Объединенные слои этилацетата промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и сушили (№^О4). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали флэш-хроматографией (смесь 1:9 (2 М ЯН3 в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом указанное в заголовке соединение (0,8 г, 74%) в виде густого сиропа.
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 7,84-7,81 (м, 2Н), 6,86 (д, 1Н, 1=9,9 Гц), 3,78-3,75 (м, 2Н), 3,50 (т, 2Н, 1=7,5 Гц), 3,08-3,04 (м, 2Н), 2,48 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 2,27 (с, 3Н), 1,74-1,64 (м, 2Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 268 (МН+, 100).
трет-Бутилметил-(3 -(7-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропил)карбамат.
Раствор К-метил-3-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропан-1-амина (0,77 г, 2,88 ммоль) в сухом 1,4-диоксане (20 мл) обрабатывали триэтиламином (1,214 мл, 8,64 ммоль), затем ди-третбутилдикарбонатом (0,736 мл, 3,17 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч. Растворитель затем выпаривали и сырое вещество очищали флэш-хроматографией (смесь 1:1 Ε!ОΑс:гексаны) на силикагеле, получая при этом указанный в заголовке продукт (1,02 г, 96%) в виде желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (СВС13) δ 7,97 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,88 (дд, 1Н, 1=2,7, 9,3 Гц), 6,56 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 3,79-3,76 (м, 2Н), 3,41 (т, 2Н, 1=7,8 Гц), 3,31 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,04-3,00 (м, 2Н), 2,88 (с, 3Н), 1,92-1,82 (м, 2Н), 1,46 (с, 9Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 390 (Μ+№, 56), 368 (МН+, 10), 312 (60), 268 (100). трет-Бутил-3 -(7 -амино-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропил(метил)карбамат.
Суспензию трет-бутилметил-(3-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропил)карбамат (0,6 г,
1,633 ммоль) в сухом метаноле (10 мл) обрабатывали никелем Ренея (0,1 г, 1,633 ммоль) с последующем
- 63 021798 обработкой гидразингидратом (0,595 мл, 16,33 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение 10 мин на предварительно нагретой масляной бане. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку целита и промывали метанолом (3x10 мл). Объединенные слои метанола упаривали и сырое вещество очищали флэш-хроматографией (смесь 5:95 (2 М NНз в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом указанный в заголовке продукт (0,55 г, количественный выход) в виде коричневого сиропа.
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 6,46 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 6,25-6,21 (м, 2Н), 4,44 (с, 2Н), 3,32-3,28 (м, 2Н), 3,19 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,04 (т, 2Н, 1=7,2 Гц), 3,00-2,97 (м, 2Н), 2,77 (с, 3Н), 1,74-1,62 (м, 2Н), 1,38 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 338 (МН+, 100), 337 (96), 282 (54).
трет-Бутилметил-(3 -(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)ил)пропил)карбамат.
Раствор трет-бутил-3-(7-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пропил(метил)карбамат (0,52 г, 1,541 ммоль) в сухом этаноле (20) обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,879 г, 3,08 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали на протяжении ночи (18 ч). Реакционную смесь делали основной насыщенным раствором NаНСΟз (50 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (2x25 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и сушили (№2804). Растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь 2:98 (2 М МН3 в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом указанный в заголовке продукт (0,60 г, 87%).
Е81-М8 (т/ζ, %): 447 (МН+, 100).
Ю(4-(3-(Метиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Суспензию трет-бутилметил-(3-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)пропил)карбамата (0,55 г, 1,231 ммоль) в 3 М хлористо-водородной кислоте (25 мл) кипятили с обратным холодилмнатной темпьником в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до коературы, фильтровали и промывали водой (2x10 мл). Объединенные водные слои упаривали. Неочищенное вещество делали основным 3 М раствором №0Н (50 мл) и продукт экстрагировали СН2С12 (3x20 мл). Объединенные слои СН2С12 промывали насыщенным раствором соли (15 мл) и сушили (№2804). Органический растворитель выпаривали и сырое вещество очищали колоночной хроматографией (смесь от 5:95 до 1:9 (2 М NНз в МеОН):СН2С12) на силикагеле, получая при этом соединение 23 (0,4 г, 94%) в виде твердого вещества.
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 7,68 (дд, 1Н, 1=1,2, 3,7 Гц), 7,56 (дд, 1Н, 1=0,9, 5,1 Гц), 7,06 (дд, 1Н, 1=3,6, 4,9 Гц), 6,70 (д, 1Н, 1=8,7 Гц), 6,51-6,44 (м, 2Н), 6,31 (с, 2Н), 3,50-3,47 (м, 2Н), 3,32-3,25 (м, 4Н), 3,04-3,01 (м, 2Н), 2,27 (с, 3Н), 1,70-1,61 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 347 (МН+, 80), 276 (100); чистота по ВЭЖХ: 96,05% площади.
Дигидрохлорид Ю4-(3-(метиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
Раствор Ю(4-(3 -(метиламино)пропил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (0,37 г, 1,068 ммоль) в сухом метаноле (10 мл) обрабатывали хлоридом водорода (1 М в простом эфире) (3,20 мл, 3,20 ммоль) и перемешивали в течение 15 мин. Растворитель выпаривали и сырое вещество сушили в высоком вакууме, получая при этом дигидрохлорид 0,44 г, 98%) в виде твердого вещества.
'II ЯМР (ДМСОД6) δ 11,22 (с, 1Н), 9,66 (с, 1Н), 9,19 (ушир.с, 2Н), 8,69 (с, 1Н), 8,15-8,12 (м, 2Н), 7,35 (т, 1Н, 1=4,2 Гц), 7,04-6,89 (м, 3Н), 3,64-3,61 (м, 2Н), 3,44 (т, 2Н, 1=6,9 Гц), 3,10-3,07 (м, 2Н), 2,962,86 (м, 2Н), 2,53 (т, 3Н, 1=5,7 Гц), 1,98-1,86 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 347 (МН+, свободное основание, 65), 276 (100); Е81-НКМ8: вычислено для С17Н2зЩ§2 (МН+, свободное основание) 347,1358, найдено 347,1345; чистота по ВЭЖХ: 96,11% площади.
- 64 021798
Пример 24: синтез №(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (24)
К перемешиваемому раствору 2-хлор-5-нитроанилина (1,0 г, 5,79 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли карбонат калия (1,60 г, 11,59 ммоль) с последующим добавлением 2-меркаптоэтанола (0,813 мл, 11,59 ммоль). Образовавшуюся смесь затем нагревали при 60°С в течение 2 ч и затем выдерживали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали водой (3ж), 1н. №ЮН и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом красно-оранжевое твердое вещество (1,19 г, 96%).
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,52 (с, 1Н), 7,42-7,33 (м, 2Н), 5,79 (с, 2Н), 4,99 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 3,55 (кв, 1=6,2 Гц, 2Н), 3,02 (т, 1=6,6 Гц, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 215 (МН+, 23), 169 (100), 111 (63).
2-(2-Йодэтилтио)-5-нитроанилин.
К перемешиваемому раствору трифенилфосфина (1,81 г, 6,93 ммоль) и имидазола (1,887 мл, 13,86 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 0°С добавляли йод (1,759 г, 6,93 ммоль). После перемешивания в течение 5 мин добавляли 2-(2-амино-4-нитрофенилтио)этанол (990 мг, 4,62 ммоль) в виде раствора в ТГФ (5 мл). Образовавшуюся смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем разбавляли этилацетатом и промывали водой (3ж) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, затем хроматографировали в смеси 4:1 гексаны:этилацетат, получая при этом требуемое соединение (1,18 г, 79%) в виде оранжевого твердого вещества.
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,55 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,45 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,34 (дд, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 5,89 (ушир.с, 2Н), 3,38-3,26 (м, 4Н);
Е1-М8 (т/ζ, %): 324 (М+, 46), 196 (81), 154 (100), 126 (95).
6-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин.
К перемешиваемому раствору 2-(2-йодэтилтио)-5-нитроанилина (1,18 г, 3,64 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли карбонат калия (1,006 г, 7,28 ммоль). Образовавшуюся смесь затем перемешивали при 90°С в течение 1 ч. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (40 мл). Образовавшийся красный осадок собирали вакуумным фильтрованием, получая при этом указанное в заголовке соединение (625 мг, 87%).
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,38 (с, 1Н), 7,28 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,12 (д, 1=8,7 Гц, 6,78 (ушир.с, 1Н), 3,563,49 (м, 2Н), 3,08-3,03 (м, 2Н);
Е1-М8 (т/ζ, %): 196 (М+, 100), 181 (45), 122 (73).
2-Хлор-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
К перемешиваемому раствору 6-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (620 мг, 3,16 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2-хлорацетилхлорид (0,277 мл, 3,48 ммоль). Образовавшуюся смесь затем перемешивали при 60°С в течение 10 мин. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали водой (3ж), смесью 1:1 вода:насыщенный раствор бикарбоната натрия, насыщенным солевым раствором. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом требуемый продукт (860 мг, 100%).
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,36 (д, 1=2,1 Гц, 1Н), 7,96 (дд, 1=8,7, 2,1 Гц, 1Н), 7,52 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 4,63 (с, 2Н), 3,99-3,92 (м, 2Н), 3,39-3,33 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 295 (М+№, 68), 273 (МН+, 100), 197 (43).
- 65 021798
2-(Этиламино)-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
К перемешиваемому раствору 2-хлор-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (855 мг, 3,14 ммоль) в диоксане (15 мл) и триэтиламине (0,881 мл, 6,27 ммоль) добавляли гидрохлорид этанамина (1,278 г, 15,68 ммоль) в виде раствора в воде (7,50 мл). Образовавшуюся смесь энергично перемешивали при комнатной температуре на протяжении уикенда. Смесь затем разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (2х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:9 (2 М N4-, в метаноле):этилацетат, получая при этом требуемый продукт (775 мг, 88%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,37 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,93 (дд, 1=8,7, 2,4 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 3,973,90 (м, 2Н), 3,52 (с, 2Н), 3,37-3,33 (м, 2Н), 2,58-2,50 (м, 2Н), 2,07 (ушир.с, 1Н), 1,00 (т, 1=7,0 Гц, 3Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 282 (МН+, 100).
трет-Бутилэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамат.
К перемешиваемому раствору 2-(этиламино)-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (770 мг, 2,74 ммоль) в диоксане (10 мл) и триэтиламине (0,769 мл, 5,47 ммоль) добавляли ди-третбутилдикарбонат (627 мг, 2,87 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и смесью 1:1 воды и насыщенного раствора соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом бледно-желтое твердое вещество (1,02 г, 98%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,33 (с, 1Н), 7,94 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,51 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 4,18 (с, 2Н), 3,96-3,89 (м, 2Н), 3,32-3,19 (м, 4Н), 1,38, 1,30 (2с, 9Н), 1,09-1,00 (м, 3Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 404 (М+№, 51), 382 (МН+, 36), 282 (100). трет-Бутилэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору трет-бутилэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2оксоэтил)карбамата (1,01 г, 2,65 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли комплекс борантетрагидрофуран (1 М в тетрагидрофуране; 7,94 мл, 7,94 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь затем гасили посредством медленного добавления по каплям (чтобы избежать избыточного выделения пузырьков) МеОН (5 мл). Подвергнутую гашению реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали водой (2ж) и насыщенным карбонатом натрия (2Ж). Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом краснооранжевое масло (925 мг, 95%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,59-7,41 (м, 1Н), 7,39-7,32 (м, 1Н), 7,24-7,13 (м, 1Н), 3,69-3,62 (м, 2Н), 3,583,48 (м, 2Н), 3,45-3,35 (м, 2Н), 3,28-3,16 (м, 2Н), 3,15-3,08 (м, 2Н), 1,32, 1,24 (2с, 9Н), 1,04 (т, 1=6,9 Гц, 3Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 390 (М+№, 70), 368 (МН+, 12), 312 (47), 268 (100). трет-Бутил-2-(6-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил(этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору трет-бутилэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамата (925 мг, 2,52 ммоль) в этаноле (10 мл) добавляли никель Ренея (~148 мг, 2,52 ммоль) с последующим добавлением гидразингидрата (1,225 мл, 25,2 ммоль). Образовавшуюся смесь энергично перемешивали при 50°С в течение 10 мин. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и затем промывали последовательно смесью 1:1 воды и насыщенного карбоната натрия (3ж) и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом красное масло (810 мг, 95%);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 338 (МН+, 100), 282 (53), 238 (36).
трет-Бутилэтил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-(6-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил(этил)карбамата (800 мг, 2,371 ммоль) в этаноле (8 мл) добавляли гидроиодид метилтиофен-2карбимидотиоата (1,014 г, 3,56 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (3к). Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:1 гексаны:этилацетат, получая при этом требуемый продукт (415 мг, 39,2%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,70 (д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,49-7,44 (м, 1Н), 7,07 (т, 1=4,4 Гц, 1Н), 6,84 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 6,35-6,26 (м, 2Н), 6,08 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 3,64-3,49 (м, 2Н), 3,45-3,25 (м, 4Н), 3,24-3,12 (м, 2Н), 3,01-2,85 (м, 2Н), 1,39-1,29 (м, 9Н), 1,02 (т, 1=6,9 Гц, 3Н);
Е8РМ8 (т/ζ, %): 447 (МН+, 100).
^(4-(2-(Этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
К перемешиваемой суспензии трет-бутилэтил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (410 мг, 0,918 ммоль) в метаноле (6 мл) добавляли 3н. раствор НС1 (3,06 мл, 9,18 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 90°С в течение 30 мин. Смесь затем пропускали через шприц с фильтром 0,45 мкМ и фильтрат концентрировали в вакууме, получая при этом сухую пену. Остаток затем распределяли между смесью 1:1 вода:насыщенный раствор бикар- 66 021798 боната натрия и дихлорметана. Органический слой отделяли и водную фазу снова экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:4:5 (2 М ИЩ в метаноле):этилацетат:дихлорметан, получая при этом требуемый продукт 24 (135 мг, 42,4%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,71 (д, 1=3,6 Гц, 1Н), 7,58 (д, 5,1 Гц, 1Н), 7,08 (т, 1=4,4 Гц, 1Н), 6,82 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 6,33 (ушир.с, 2Н), 6,21 (с, 1Н), 6,07 (дд, 1=8,1, 1,5 Гц, 1Н), 3,63-3,57 (м, 2Н), 3,33-3,28 (м, 2Н), 3,01-2,96 (м, 2Н), 2,71-2,65 (м, 2Н), 2,53 (кв, 1=7,0 Гц, 2Н), 1,66 (ушир.с, 1Н), 1,17 (т, 1=7,0 Гц, 3Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 347 (МН+, 83), 276 (100); ^Μδ: вычислено для (МН+) 347,1358, найдено 347,1346; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Дигидрохлорид N-(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К раствору N-(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь] [1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (131 мг, 0,378 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли хлорид водорода (1 М в диэтиловом простом эфире; 1,134 мл, 1,134 ммоль). Образовавшуюся смесь концентрировали в вакууме, получая при этом оранжевое твердое вещество (159 мг, 100%).
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,43 (с, 1Н), 9,72 (с, 1Н), 9,22 (ушир.с, 2Н), 8,73 (с, 1Н), 8,18-8,12 (м, 2Н),
7,38-7,34 (м, 1Н), 7,14-7,05 (м, 2Н), 6,64-6,60 (м, 1Н), 3,70-3,61 (м, 4Н), 3,16-3,02 (м, 4Н), 2,99-2,88 (м, 2Н), 1,21 (т, 1=7,2 Гц, 3Н);
НИ^ (С17Н2зN4δ2, МН+, свободное основание): вычислено 347,1358, найдено 347,1346; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 25: синтез N-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6ил)тиофен-2-карбоксимидамида (25)
2-Хлор-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
Получен согласно методике, описанной в примере 24.
-(6-Нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-(пирролидин-1 -ил)этанон.
К перемешиваемому раствору 2-хлор-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (685 мг, 2,51 ммоль) в диоксане (10 мл), охлажденному до 0°С, добавляли НС1, 1 М раствор в диэтиловом простом эфире (2,51 мл, 2,51 ммоль) с последующим добавлением по каплям пирролидина (0,21 мл, 2,51 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин и затем нагревали до комнатной температуры, перемешивания на протяжении ночи. В это время добавляли дополнительный пирролидин (0,21 мл, 2,51 ммоль), с последующим добавлением воды (1 мл), чтобы помочь растворению. После 1 ч перемешивания при комнатной температуре смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия, водой (3х) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом желто-оранжевое масло (756 мг, 98%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,52 (ушир.с, 1Н), 7,93 (дд, 1=9,0, 1,6 Гц, 1Н), 7,49 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,01-3,91 (м, 4Н), 3,56 (с, 2Н), 3,45-3,35 (м, 2Н), 2,55-2,50 (м, 2Н), 2,22-2,14 (м, 4Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 308 (МН+, 100).
6-Нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин.
К перемешиваемому раствору 1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-(пирролидин-1ил)этанона (750 мг, 2,440 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли комплекс боран-тетрагидрофуран (1 М в тетрагидрофуране; 7,32 мл, 7,32 ммоль). Образовавшуюся смесь затем перемешивали при 55°С на протяжении ночи. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и осторожно гасили посредством медленного добавления по каплям метанола (5 мл). Гашеную смесь затем перемешивали при 55°С на протяжении ночи. В это время газы реакции вентилировали в атмосферу. Смесь затем концентрировали и хроматографировали на силикагеле, элюируя смесью 1:4:5 (2 М N4^ в метаноле):этилацетат:дихлорметан, получая при этом требуемый продукт (654 мг, 91%) в виде красного масла.
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,46 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,36 (дд, 1=8,4, 2,1 Гц, 1Н), 7,19 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,693,65 (м, 2Н), 3,50 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 3,14-3,10 (м, 2Н), 2,63 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,56-2,51 (м, 2Н), 1,71-1,66 (м, 4Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 294 (МН+, 100).
- 67 021798
N-(4-(2-(Пирролидин-1 -ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
К перемешиваемому раствору 6-нитро-4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазина (649 мг, 2,212 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли 10 мас.%, палладия на активированном угле (235 мг, 0,221 ммоль) в виде суспензии в этаноле (5 мл). Образовавшуюся суспензию перемешивали в атмосфере водорода (давление из баллона) в течение 3 ч (наблюдалось исчезновение желтого цвета). Баллон убирали и к смеси добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (1,262 г, 4,42 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали в атмосфере аргона на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли дихлорметаном и фильтровали через целит. Фильтрат затем разбавляли насыщенным раствором карбоната натрия и экстрагировали дихлорметаном (2х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:19 (2 М МН3 в метаноле):этилацетат, получая при этом требуемый продукт 25 (438 мг, 53,1%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,71 (д, 1=3,3 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,10-7,06 (м, 1Н), 6,83 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,38 (ушир.с, 2Н), 6,19 (с, 1Н), 6,08 (д, 1=1Н), 3,63-3,58 (м, 2Н), 3,40-3,33 (м, 2Н), 3,01-2,97 (м, 2Н), 2,61 (т, 1=6,8 Гц, 2Н), 2,49-2,42 (м, 4Н), 1,70-1,61 (м, 4Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 373 (МН+, 62), 276 (100); ^Μδ: вычислено для С^Н^А (МН+) 373,1515, найдено 373,1512; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Дигидрохлорид N-(4-(2-(пирролидин-1 -ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-6-ил)тиофен2-карбоксимидамида.
К раствору N-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (424 мг, 1,138 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли хлорид водорода (1 Μ в диэтиловом эфире; 3,41 мл, 3,41 ммоль). Образовавшуюся смесь концентрировали в вакууме, получая при этом оранжевое твердое вещество (507 мг, 100%).
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,60-11,40 (м, 2Н), 9,75 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 8,22-8,10 (м, 2Н), 7,36 (т, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,15-7,05 (м, 2Н), 6,64 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 3,80-3,71 (м, 2Н), 3,70-3,61 (м, 2Н), 3,58-3,45 (м, 2Н), 3,43-3,30 (м, 2Н), 3,16-3,07 (м, 2Н), 3,06-2,95 (м, 2Н), 2,05-1,92 (м, 2Н), 1,90-1,79 (м, 2Н);
ΗКΜδ (С^Н^А, МН+, свободное основание): вычислено 73,1515, найдено 373,1512. Чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 26: синтез N-(4-(2-(2-гидроксиэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6ил)тиофен-2-карбоксимидамида (26)
6-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин.
Получен согласно методике, описанной в примере 24.
2-(2-Гидроксиэтиламино)-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
К перемешиваемому раствору 6-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (500 мг, 2,55 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли 2-хлорацетилхлорид (302 мг, 2,68 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 60°С в течение 5 мин. Реакционная смесь сначала была мутной, затем становилась светлой. В это время реакционную смесь охлаждали до 0°С и к смеси одновременно добавляли по каплям хлорид водорода (4 М раствор в диоксане; 5,10 мл, 20,38 ммоль) и 2-аминоэтанол (1,868 г, 30,6 ммоль). Образовавшуюся смесь нагревали до комнатной температуры и добавляли воду (5 мл), чтобы помочь растворению. Смесь затем перемешивали при 60°С в течение 3 ч. Смесь затем разбавляли водой и насыщенным раствором карбоната натрия и затем экстрагировали дихлорметаном (5х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:4:5 (2
- 68 021798
М раствор ΝΉ3 в метаноле):этилацетат:дихлорметан, получая при этом требуемый продукт (473 мг, 62,4%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,36 (д, 1=2, 1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, 1=8,7, 2,1 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,50 (т, 1=5,1 Гц, 1Н), 3,96-3,90 (м, 2Н), 3,56 (с, 2Н), 3,48-3,40 (м, 2Н), 3,32-3,26 (м, 2Н), 2,58 (т, 1=5,0 Гц, 2Н), 2,18-2,08 (ушир.с, 1Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 298 (МН+, 100).
трет-Бутил-2-гидроксиэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамат.
К перемешиваемому раствору 2-(2-гидроксиэтиламино)-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этанона (470 мг, 1,581 ммоль) в диоксане (10 мл) и триэтиламине (0,444 мл, 3,16 ммоль) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (362 мг, 1,660 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали три раза смесью 1:1 воды и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом бледно-желтую пену (625 мг, 99%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,35-8,30 (м, 1Н), 7,99-7,91 (м, 1Н), 7,56-7,48 (м, 1Н), 4,67-4,59 (м, 1Н), 4,264,21 (м, 2Н), 3,96-3,88 (м, 2Н), 3,51-3,43 (м, 2Н), 3,31-3,21 (м, 4Н), 1,38, 1,31 (2с, 9Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 420 (Μ+№, 47), 398 (МН+, 34), 320 (35), 298 (100). трет-Бутил-2-гидроксиэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-гидроксиэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамата (620 мг, 1,560 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям добавляли комплекс боран-тетрагидрофуран (1 М раствор в тетрагидрофуране; 4,68 мл, 4,68 ммоль), чтобы избежать избыточное выделение пузырьков. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь затем гасили посредством медленного добавления по каплям МеОН. Подвергнутую гашению реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (3х). Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом красное масло (595 мг, 99%).
'II ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,59-7,44 (м, 1Н), 7,38-7,32 (м, 1Н), 7,22-7,13 (м, 1Н), 4,74 (т, 1=5,1 Гц, 1Н), 3,69-3,62 (м, 2Н), 3,61-3,39 (м, 6Н), 3,29-3,17 (м, 2Н), 3,15-3,04 (м, 2Н), 1,31, 1,24 (2с, 9Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 406 (Μ+№, 55), 328 (40), 284 (100).
трет-Бутил-2-гидроксиэтил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
Перемешиваемую суспензию трет-бутил-2-гидроксиэтил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамата (590 мг, 1,539 ммоль) и 10 мас.%, палладия на активированном угле (164 мг, 0,154 ммоль) в этаноле (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода (101325 Па) (1 атм) в течение 2 ч (желтый цвет исчезает). К этой смеси затем добавляли гидроиодид метилтиофен-2карбимидотиоата (878 мг, 3,08 ммоль) и образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли дихлорметаном и затем фильтровали через целит. Фильтрат затем разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (4х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в этилацетате, получая при этом требуемый продукт (339 мг, 47,6%) в виде желтой пены.
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,69 (с, 1Н), 7,58 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,07 (т, 1=4,2 Гц, 1Н), 6,41-6,25 (м, 3Н), 6,08 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 4,71-4,65 (м, 1Н), 3,63-3,54 (м, 2Н), 3,49-3,33 (м, 6Н), 3,27-3,15 (м, 2Н), 3,02-2,94 (м, 2Н),
1,39-1,29 (м, 9Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 463 (МН+, 100).
М-(4-(2-(2-Гидроксиэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-гидроксиэтил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (334 мг, 0,722 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли НС1, 3 М раствор в воде (2,407 мл, 7,22 ммоль). Образовавшийся раствор перемешивали при 90°С в течение 1 ч. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли насыщенным раствором карбоната натрия и экстрагировали дихлорметаном (6х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:9 (2 М ΝΉ3 в метаноле) гэтилацетат, получая при этом требуемый продукт 26 (175 мг, 66,9%).
'Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,71 (д, 1=3,3 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,10-7,06 (м, 1Н), 6,83 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,34 (ушир.с, 2Н), 6,22 (с, 1Н), 6,07 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,49-4,43 (м, 1Н), 3,63-3,55 (м, 2Н), 3,463,38 (м, 2Н), 3,37-3,28 (м, 2Н), 3,01-2,95 (м, 2Н), 2,71 (т, 1=6,4 Гц, 2Н), 2,59 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 1,91-1,75 (м, 1Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 363 (МН+, 100), 276 (99), 268 (62); ΠΚΜ8: вычислено для (МН+)
363,1307, найдено 363,1290; чистота по ВЭЖХ 97% площади.
Дигидрохлорид М-(4-(2-(2-гидроксиэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6ил)тиофен-2-карбоксимидамида.
К раствору М-(4-(2-(2-гидроксиэтиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2- 69 021798 карбоксимидамида (165 мг, 0,455 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли НС1 (1 М раствор в диэтиловом простом эфире; 1,365 мл, 1,365 ммоль). Образовавшийся раствор концентрировали, получая при этом желтое твердое вещество (197 мг, 99%).
'ίί ЯМР (ДМСО-б6) δ 11,46 (с, 1Н), 9,75 (с, 1Н), 9,21-9,09 (м, 2Н), 8,74 (с, 1Н), 8,21-8,11 (м, 2Н),
7,40-7,32 (м, 1Н), 7,12 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,03 (с, 1Н), 6,62 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 3,73-3,60 (м, 6Н), 3,18-3,07 (м, 4Н), 3,06-2,98 (м, 2Н);
ΗΚΜδ (С17Η23N4Οδ2, МН+, свободное основание): вычислено 363,1307, найдено 363,1290. Чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 27: синтез №(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен2-карбоксимидамида (27)
6-Нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин.
Получен согласно методике, описанной в примере 24.
^^Диметил-2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамин.
К перемешиваемой суспензии 6-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (500 мг, 2,55 ммоль), гидрохлорид 2-хлор-Ы^-диметилэтанамина (734 мг, 5,10 ммоль) и бромида тетрабутиламмония (41,1 мг, 0,127 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли 50% водный NаΟΗ (5 мл). Реакционный сосуд затем герметизировали и смесь энергично перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:4:5 (2 М МН3 в метаноле):этилацетат:дихлорметан, получая при этом требуемый продукт (80 мг, 11,74%) и значительные количества исходного вещества.
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,44 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,36 (дд, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 7,19 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,693,64 (м, 2Н), 3,48 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 3,14-3,09 (м, 2Н), 2,45 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,22 (с, 6Н);
ΕδΙ^δ (т/ζ, %): 268 (МН+, 100).
^(4-(2-(Диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Суспензию ^^диметил-2-(6-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанамина (75 мг, 0,281 ммоль) и палладия, 10 мас.%, на активированном угле (29,9 мг, 0,028 ммоль) в этаноле (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода (давление баллона) в течение 90 мин. В течение этого времени желтый цвет реакционной смеси исчезал. К этой смеси затем добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (160 мг, 0,561 ммоль) и образовавшуюся суспензию перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь затем разбавляли дихлорметаном и фильтровали для удаления палладия. Органический фильтрат дополнительно разбавляли водой и насыщенным раствором карбоната натрия (1:1). Органический слой отделяли и водный слой снова экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:19 (2 М МН3 в метаноле):этилацетат, получая при этом требуемый продукт 27 (61 мг, 62,8%).
'Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,71 (д, 1=3,3 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,10-7,06 (м, 1Н), 6,83 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,37 (ушир.с, 2Н), 6,17 (с, 1Н), 6,08 (д, 1=7, 8 Гц, 1Н), 3,63-3,58 (м, 2Н), 3,39-3,32 (м, 2Н), 3,012,96 (м, 2Н), 2,42 (т, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,10 (с, 6Н);
ΕδΙ^δ (т/ζ, %): 347 (МН+, 100), 276 (74); ΕδI-ΗΚΜδ: вычислено для С17Н2^2 (МН+) 347,1358, найдено 347,1349; чистота по ВЭЖХ: 95% площади.
Дигидрохлорид ^(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К раствору ^(4-(2-(диметиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (57 мг, 0,164 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли хлорид водорода (1 М в диэтиловом простом эфире; 0,493 мл, 0,493 ммоль). Образовавшуюся смесь затем концентрировали в вакууме, получая при этом желто-оранжевое твердое вещество (68 мг, 99%).
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 11,49 (с, 1Н), 11,09 (ушир.с, 1Н), 9,74 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 8,19-8,12 (м, 2Н),
- 70 021798
7,39-7,33 (м, 1Н), 7,15-7,05 (м, 2Н), 6,66-6,60 (м, 1Н), 3,79-3,70 (м, 2Н), 3,70-3,60 (м, 2Н), 3,32-3,21 (м, 2Н), 3,16-3,08 (м, 2Н), 2,81-2,74 (м, 6Н);
ΗΚΜδ (Ο7Η23Ν4δ2, МН+, свободное основание): вычислено 347,1358, найдено 347,1349. Чистота по ВЭЖХ: 95% площади.
Пример 28: синтез Ы-(4-(2-(метиламино) этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (28)
Получали согласно методике, описанной в примере 24.
2-(Метиламино)-1 -(6-нитро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
К перемешиваемому раствору 6-нитро-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазина (500 мг, 2,55 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) добавляли 2-хлорацетилхлорид (0,223 мл, 2,80 ммоль).
Образовавшуюся смесь перемешивали при 60°С в течение 10 мин, после этого времени реакционную смесь охлаждали до 0°С. К смеси затем добавляли метиламин (2 М в тетрагидрофуране; 12,7 мл, 25,4 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь затем разбавляли водой и насыщенным карбонатом натрия, затем экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:4:5 (2 М ΝΗ3 в метанол:этилацетат:дихлорметанол), получая при этом требуемый продукт (511 мг, 75%) в виде желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) δ 8,36 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,93 (дд, 1=8,7, 2,4 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 3,93 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,48 (с, 2Н), 3,34-3,28 (м, 2Н), 2,28 (с, 3Н), 2,00 (ушир.с, 1Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 268 (МН+, 100).
трет-Бутилметил-(2-(6-нитро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамат.
К перемешиваемому раствору 2-(метиламино)-1-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (506,5 мг, 1,895 ммоль) в диоксане (10 мл) и триэтиламине (0,533 мл, 3,79 ммоль) добавляли ди-третбутилдикарбонат (434 мг, 1,990 ммоль) и образовавшуюся смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали водой (3х) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом требуемый продукт (695 мг, 100%) в виде бледной пены.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) δ 8,36-8,28 (м, 1Н), 7,98-7,92 (м, 1Н), 7,56-7,48 (м, 1Н), 4,23-4,16 (м, 2Н), 3,963,88 (м, 2Н), 3,33-3,28 (м, 2Н), 2,84 (м, 3Н), 1,39, 1,30 (2с, 9Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 390 (Μ+Να, 100), 368 (МН+, 16), 312 (35), 268 (100). трет-Бутилметил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
К перемешиваемому раствору трет-бутилметил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2оксоэтил)карбамата (691 мг, 1,881 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли комплекс борантетрагидрофуран (1 М в тетрагидрофуране; 5,64 мл, 5,64 ммоль). Образовавшуюся смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и осторожно гасили посредством медленного добавления по каплям метанола (5 мл). Подвергнутую гашению смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали последовательно смесью 1:1 вода:насыщенный карбонат натрия (2х) и затем насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом красное масло (659 мг, 99%).
Ή ЯМР (ДМСО-а6) δ 7,56-7,39 (м, 1Н), 7,39-7,31 (м, 1Н), 7,24-7,14 (м, 1Н), 3,68-3,61 (м, 2Н), 3,603,49 (м, 2Н), 3,48-3,36 (м, 2Н), 3,13-3,05 (м, 2Н), 2,83 (с, 3Н), 1,30, 1,17 (2с, 9Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 376 (Μ+Να, 85), 354 (МН+, 24), 298 (100).
трет-Бутилметил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
Перемешиваемую суспензию трет-бутилметил-(2-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамата (650 мг, 1,839 ммоль) и палладия, 10 мас.%, на активированном угле (196 мг, 0,184 ммоль), в этаноле (10 мл) перемешивали в атмосфере водорода (давление баллона) при комнатной температуре в течение 2 ч. К смеси затем добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (787 мг, 2,76 ммоль) и образовавшуюся суспензию перемешивали при комнатной температуре на протяжении
- 71 021798 ночи. Смесь фильтровали для удаления палладия, разбавляли водой и насыщенным карбонатом натрия и затем экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 2:3 этилацетат:гексаны, получая при этом требуемый продукт (420 мг, 52,8%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,72-7,68 (м, 1Н), 7,58 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,09-7,05 (м, 1Н), 6,84 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 6,38-6,21 (м, 3Н), 6,08 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,64-3,56 (м, 2Н), 3,42-3,33 (м, 4Н), 3,03-2,94 (м, 2Н), 2,81 (с, 3Н), 1,36-1,22 (м, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 433 (МН+, 100).
^(4-(2-(Метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
К перемешиваемому раствору трет-бутилметил-(2-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (415 мг, 0,959 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли 3н. раствор НС1 (3,198 мл, 9,59 ммоль). Образовавшуюся смесь затем перемешивали при 90°С в течение 1 ч. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, делали основным 3н. гидроксидом натрия до рН 12 и экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:9 (2 М N43 в метаноле):этилацетат, получая при этом требуемый продукт 28 (165 мг, 51,7%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ7,71 (д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,10-7,06 (м, 1Н), 6,82 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,34 (ушир.с, 2Н), 6,22 (с, 1Н), 6,07 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 3,62-3,57 (м, 2Н), 3,32 (т, 1=6,8 Гц, 2Н), 3,012,97 (м, 2Н), 2,64 (т, 1=6,8 Гц, 1Н), 2,29 (с, 3Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 333 (МН+, 100), 276 (71); Е81-НКМ8: вычислено для С1бН21Щ82 (МН+) 333,1202, найдено 333,1207; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Дигидрохлорид ^(4-(2-(метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К раствору ^(4-(2-(метиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (158 мг, 0,475 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли хлорид водорода (1 М в диэтиловом простом эфире; 1,426 мл, 1,426 ммоль). Образовавшуюся смесь концентрировали в вакууме, получая при этом желтое твердое вещество (192 мг, 100%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,47 (с, 1Н), 9,76 (с, 1Н), 9,31-9,19 (м, 2Н), 8,74 (с, 1Н), 8,20-8,11 (м, 2Н), 7,39-7,33 (м, 1Н), 7,11 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,04 (с, 1Н), 6,62 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 3,71-3,61 (м, 4Н), 3,18-3,04 (м, 4Н), 2,58-2,52 (м, 3Н);
НКМ8 (С16Н21Щ82 (МН+, свободное основание)): вычислено 333,1202, найдено 333,1207; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 29: синтез ^(4-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (29)
трет-Бутил-4-(2-хлор-5 -нитрофениламино)пиперидин-1 -карбоксилат.
Раствор 2-хлор-5-нитроанилина (1 г, 5,79 ммоль) и трет-бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (2,309 г, 11,59 ммоль) в дихлорэтане (15 мл) и уксусной кислоте (0,995 мл, 17,38 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. После этого времени реакционную смесь обрабатывали триацетоксиборгидридом натрия (3,07 г, 14,49 ммоль) и образовавшуюся смесь перемешивали на протяжении уикенда. Добавляли дополнительные трет-бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилат (2,309 г, 11,59 ммоль), триацетоксиборгидрид натрия (3,07 г, 14,49 ммоль) и дихлорэтан (15 мл). Перемешивание про- 72 021798 должали в течение 2 дней. Смесь затем разбавляли водой и 1н. гидроксидом натрия (подщелачивали до рН 10) и затем экстрагировали дихлорметаном ^). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:19 этилацетат:гексаны, получая при этом желто-оранжевую пену (1,26 г, 61,1%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,54 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 7,51 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,39 (дд, 1=8,7, 2,4 Гц, 1Н), 5,765,63 (м, 1Н), 3,99-3,90 (м, 2Н), 3,74-3,62 (м, 1Н), 3,05-2,80 (м, 2Н), 1,89-1,80 (м, 2Н), 1,49-1,32 (м, 11Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 378 (М+№, 100), 356 (МН+, 40), 300 (62).
трет-Бутил-4-(2-(2-гидроксиэтилтио)-5-нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(2-хлор-5-нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилата (1,25 г, 3,51 ммоль) в ДМФА (10 мл) последовательно добавляли карбонат калия (0,971 г, 7,03 ммоль) и 2-меркаптоэтанол (0,493 мл, 7,03 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч, после чего анализ ТСХ (смесь 2:3 этилацетат:гексаны) показал, что реакция была завершена. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и насыщенным карбонатом натрия ^). Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 2:3 этилацетат:гексаны, получая при этом требуемый продукт (1,202 г, 86%) в виде оранжевой пены.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,51 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,43-7,37 (м, 2Н), 5,40 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 5,06 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 3,95-3,86 (м, 2Н), 3,75-3,60 (м, 1Н), 3,59-3,50 (м, 2Н), 3,01-2,85 (м, 4Н), 1,94-1,83 (м, 2Н), 1,49-1,29 (м, 11Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 420 (М+№, 22), 342 (100).
трет-Бутил-4-(2-(2-йодэтилтио)-5-нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трифенилфосфина (1,178 г, 4,49 ммоль) и имидазола (0,611 г, 8,98 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) при 0°С добавляли йод (1,292 г, 5,09 ммоль). Образовавшуюся темную смесь перемешивали при 0°С. Спустя 5 мин трет-бутил-4-(2-(2-гидроксиэтилтио)-5нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилат (1,19 г, 2,99 ммоль) добавляли в виде раствора в тетрагидрофуране (5 мл). Смесь затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором карбоната натрия, насыщенным тиосульфатом натрия, водой и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:2 этилацетат:гексаны, получая при этом требуемый продукт (1,50 г, 99%) в виде оранжевой пены.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,59-7,54 (м, 1Н), 7,45-7,38 (м, 2Н), 5,45-5,37 (м, 1Н), 3,98-3,85 (м, 2Н), 3,733,61 (м, 1Н), 3,35-3,27 (м, 5Н), 3,19-3,03 (м, 1Н), 3,02-2,82 (м, 2Н), 1,92-1,84 (м, 2Н), 1,45-1,34 (м, 11Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 530 (М+№, 6), 452 (25), 279 (100).
трет-Бутил-4-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(2-(2-иодэтилтио)-5-нитрофениламино)пиперидин-1карбоксилата (1,49 г, 2,94 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли карбонат калия (0,812 г, 5,87 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 90°С в течение 3 ч. Реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и насыщенным раствором карбоната натрия ^). Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:4 этилацетат:гексаны, получая при этом требуемый продукт (473 мг, 42,4%) в виде оранжевой пены.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,57 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,41 (дд, 1=8,7, 2,4 Гц, 1Н), 7,22 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 4,093,88 (м, 3Н), 3,47-3,42 (м, 2Н), 3,12-3,08 (м, 2Н), 3,01-2,85 (м, 2Н), 1,72-1,51 (м, 4Н), 1,41 (с, 9Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 402 (М+№, 95), 380 (МН+, 28), 324 (100), 280 (55).
трет-Бутил-4-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо [Ъ] [1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1 карбоксилат.
Суспензию трет-бутил-4-(6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилата (468 мг, 1,233 ммоль) и палладия, 10 мас.%, на активированном угле (131 мг, 0,123 ммоль), в этаноле (10 мл) и тетрагидрофуране (1 мл) перемешивали в атмосфере водорода (давление баллона) в течение 2 ч. В течение этого времени реакционная смесь становилась бесцветной. К смеси затем добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (528 мг, 1,850 ммоль) и образовавшуюся суспензию перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь затем разбавляли этилацетатом и фильтровали через подушку целита. Фильтрат промывали насыщенным карбонатом натрия ^). Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:5 этилацетат:дихлорметан, получая при этом требуемый продукт (403 мг, 71,2%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,72 (д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,59 (д, 1=5, 1 Гц, 1Н), 7,10-7,06 (м, 1Н), 6,86 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,42-6,28 (м, 3Н), 6,13 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 4,06-3,95 (м, 2Н), 3,85-3,76 (м, 1Н), 3,40-3,33 (м, 2Н), 2,99-2,93 (м, 2Н), 2,92-2,75 (м, 2Н), 1,69-1,48 (м, 4Н), 1,39 (с, 9Н);
ЕδI-Μδ (т/ζ, %): 459 (МН+, 100).
N-(4-(Пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилата (398 мг, 0,868 ммоль) в МеОН (6 мл) добавляли 3 М водный хлорид водорода (2,893 мл, 8,68 ммоль). Образовавшийся раствор перемешивали при 90°С в
- 73 021798 течение 45 мин. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, делали основной (рН 12) насыщенным карбонатом натрия и затем экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:6 (2 М ΝΗ3 в МеОН):этилацетат), получая при этом требуемый продукт 29 (216 мг, 69,4%) в виде бледно-желтой пены.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,71 (д, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,59 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,08 (дд, 1=5,1, 3,6 Гц, 1Н), 6,86 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,37 (ушир.с, 2Н), 6,26 (с, 1Н), 6,13-6,08 (м, 1Н), 3,68-3,52 (м, 1Н), 3,43-3,38 (м, 2Н), 3,01-2,93 (м, 4Н), 2,61-2,51 (м, 2Н), 1,64-1,52 (м, 4Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 359 (МН-, 100); Е81-НКМ8: вычислено для С18Н23К,§2 (МН+) 359,1358, найдено 359,1351; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Дигидрохлорид ^(4-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К раствору ^(4-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида (210 мг, 0,586 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли хлорид водорода (1 М раствор в диэтиловом простом эфире; 1,757 мл, 1,757 ммоль). Образовавшийся раствор концентрировали в вакууме, получая при этом бледно-желтое твердое вещество (252 мг, 100%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,45 (с, 1Н), 9,76 (с, 1Н), 9,22 (с, 2Н), 8,75 (с, 1Н), 7,40-7,34 (м, 1Н), 7,13 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,02 (с, 1Н), 6,64 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 4,02-3,92 (м, 1Н), 3,46-3,39 (м, 2Н), 3,37-3,26 (м, 2Н), 3,12-2,91 (м, 4Н), 2,15-1,98 (м, 2Н), 1,86-1,78 (м, 2Н);
НКМ8 (^8Η23Ν4§2 (МН+, свободное основание)): вычислено 359,1358, найдено 359,1351; чистота по ВЭЖХ: 97% площади.
Пример 30: синтез ^(4-(пирролидин-3-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (30)
2-(2-Хлорэтилтио)анилин.
К перемешиваемому раствору 2-аминобензолтиола (0,513 мл, 4,79 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли гидроксид натрия (192 мг, 4,79 ммоль) в виде раствора в воде (5,00 мл). К образовавшейся смеси добавляли 1-6ромо-2-хлорэтан (1,197 мл, 14,38 ммоль) и образовавшуюся смесь энергично перемешивали в течение 20 мин. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (3х). Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом желтую жидкость, 2-(2-хлорэтилтио) анилин (875 мг, 97%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 7,27 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,10-7,04 (м, 1Н), 6,73 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,56-6,49 (м, 1Н), 5,41 (ушир.с, 2Н), 3,62 (т, 1=7,4 Гц, 2Н), 3,02 (т, 1=7,4 Гц, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 188 (МН+, 100).
3,4-Дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин.
К перемешиваемому раствору 2-(2-хлорэтилтио)анилина (850 мг, 4,53 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли карбонат калия (1878 мг, 13,59 ммоль) с последующим добавлением иодида натрия (67,9 мг, 0,453 ммоль). Образовавшуюся смесь нагревали до 90°С и перемешивали на протяжении ночи. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали водой (3х) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 9:1 гексаны:этилацетат, получая при этом оранжевое масло (675 мг, 99%).
Ή ЯМР (ДМСО-й6) δ 6,85-6,75 (м, 2Н), 6,51-6,39 (м, 2Н), 6,00 (ушир.с, 1Н), 3,49-3,44 (м, 2Н), 2,982,93 (м, 2Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 152 (МН+, 100), 124 (44).
- 74 021798 трет-Бутил-3 -(2Н-бензо [Ь] [1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1 -карбоксилат.
Смесь 3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазина (1,00 г, 6,61 ммоль), ЮЬос-3-пирролидинона (1,34 г, 7,27 ммоль) и уксусной кислоты (0,94 мл, 16,52 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (20 мл) охлаждали до 0°С и затем обрабатывали твердым триацетоксиборгидридом натрия (2,10 г, 9,92 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 11 ч. К реакционной смеси добавляли дополнительные эквиваленты каждого из триацетоксиборгидрида натрия (1,40 г, 6,61 ммоль) и Ν-ЬосПпирролидинона (1,22 г, 6,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение более 2 дней и затем гасили 3н. №ЮН (50 мл). Смесь переносили в делительную воронку и экстрагировали Е!ОАс (2х50 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№28О4). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (10% смесь Е!ОАс/гексаны, затем 20% смесь Е!ОАс/гексаны). Образец подвергали дополнительной флэш-хроматографии на силикагеле (7,5-15% Е!ОАс/гексаны), получая при этом вязкое масло (0,41 г, 19%).
Ή ЯМР (СОС13) δ 7,08 (дд, 1=0,9, 7,5 Гц, 1Н), 7,04-6,99 (м, 1Н), 6,77 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,67-6,72 (м, 1Н), 4,39-4,36 (м, 1Н), 3,73-3,72 (м, 6Н), 3,10-3,06 (м, 2Н), 2,20-2,00 (м, 2Н), 1,47 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 345, 343 (М+№, 4), 322, 320 (МН+, 3), 267, 265 (100). трет-Бутил-3 -(7-бром-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилат.
Раствор трет-бутил-3-(2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилата (0,41 г, 1,302 ммоль) в ДМФА (5 мл) охлаждали до 0°С и обрабатывали по каплям Ν-бромсукцинимидом (0,17 г, 0,977 ммоль) в ДМФА (5 мл) в течение 15 мин. Реакционную смесь выдерживали при 0°С и перемешивали в течение 1 ч при такой температуре. В это время к реакционной смеси по каплям добавляли Νбромсукцинимид (0,023 г, 0,130 ммоль) в ДМФА (1 мл) и смесь затем перемешивали в течение 1 ч при 0°С. Раствор снова обрабатывали Ν-бромсукцинимидом (0,023 г, 0,130 ммоль) в ДМФА (1 мл) и перемешивали в течение 1 ч при 0°С. Раствор разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали Е!ОАс (2х 100 мл). Водную фазу промывали один раз Е!ОАс (50 мл). Органические растворы объединяли, промывали водой (100 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№28О4). Сырое вещество фильтровали через подушку диоксида кремния (20% смесь Е!ОАс/гексаны) и концентрировали, получая при этом прозрачное масло (0,47 г, 90%).
Ή ЯМР (СОС13) δ 7,18 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,07 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,62 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 4,34-4,28 (м, 1Н), 3,71-3,23 (м, 6Н), 3,03-3,04 (м, 2Н), 2,19-1,95 (м, 2Н), 1,47 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 423, 421 (М+№, 8), 401, 399 (МН+, 2), 343, 345 (100). трет-Бутил-3 -(7 -амино-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилат. трис-(Дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0,056 г, 0,062 ммоль) в ТГФ (3 мл) обрабатывали 10 мас.%. раствором три-трет-бутилфосфина в гексанах (0,748 мл, 0,247 ммоль) и смесь энергично перемешивали в атмосфере аргона в течение 10 мин. К смеси добавляли трет-бутил-3-(7-бром-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилат (0,49 г, 1,233 ммоль) в ТГФ (9 мл) и 1 М ЬШМО8 в ТГФ (3,70 мл, 3,70 ммоль). Реакционную смесь герметизировали, помещали на предварительно нагретую баню и кипятили с обратным холодильником при 100°С. Раствор охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали 1 М ТВАР в ТГФ (8 мл) и перемешивали в течение 40 мин. Смесь концентрировали и обрабатывали 1н. №ЮН (50 мл). Смесь переносили в делительную воронку, разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали Е!ОАс (2х50 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (№28О4). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (2570% Е!ОАс/гексаны). Собранные фракции концентрировали, получая при этом прозрачное коричневое масло (0,34 г, 83%).
Ή ЯМР (СОС13) δ 6,64 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 6,39 (ушир.с, 1Н), 4,08-4,02 (м, 1Н), 3,70-3,07 (м, 6Н), 3,09-3,07 (м, 2Н), 2,08-1,92 (м, 2Н), 1,46 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 338, 336 (МН+, 40), 282, 280 (100).
трет-Бутил-3 -(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо [Ь] [1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1 карбоксилат.
Гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,53 г, 1,874 ммоль) добавляли к смеси трет-бутил-3(7-амино-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилата (0,31 г, 0,937 ммоль) в Е!ОН (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Раствор затем переносили в делительную воронку, разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали СН2С12 (2х50 мл). Сырое вещество подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (50-90% Е!ОАс/гексаны). Концентрированные фракции давали желтое масло (0,29 г, 69%).
Ή ЯМР (СОС13) δ 7,41 (дд, 1=0,9, 5,1 Гц, 1Н), 7,38 (д, 1=3,6 Гц, 1Н), 7,06 (дд, 1=3,9, 4,9 Гц, 1Н), 6,796,76 (м, 2Н), 6,68-6,66 (м, 1Н), 4,84 (ушир.с, 2Н), 4,35-4,23 (м, 1Н), 3,74-3,22 (м, 6Н), 3,12-3,07 (м, 2Н), 2,19-1,99 (м, 2Н), 1,47 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 447,445 (МН+, 100).
Ю(4-(Пирролидин-3-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
Раствор трет-бутил-3-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)пирролидин-1-карбоксилата (0,24 г, 0,554 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывали 1н. раствором НС1
- 75 021798 (9,98 мл, 9,98 ммоль) при комнатной температуре. Образовавшуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин и охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали и гасили 1н. №ЮН (10 мл). Смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали СН2С12 (2x50 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (50 мл) и сушили (М-ьЗОЦ. Сырое вещество подвергали флэшхроматографии на силикагеле (5-20% смесь 2 М КН3 в МеОН/СН2С12). Собранные фракции давали соединение 30 в виде желтой пены (0,15 г, 79%).
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 7,69 (д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,56 (дд, 1=0,9, 4,9 Гц, 1Н), 7,07 (дд, 1=3,9, 4,9 Гц, 1Н), 6,79 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 6,52-6,49 (м, 2Н), 6,31 (ушир.с, 2Н), 4,26-4,17 (м, 1Н), 3,42-3,22 (м, 2Н), 3,10-2,90 (м, 4Н), 2,83-2,69 (м, 2Н), 2,07-1,96 (м, 1Н), 1,68-1,57 (м, 1Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 347, 345 (МН+, 72), 278, 276 (100).
Дигидрохлорид К-(4-(пирролидин-3-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К-(4-(Пирролидин-3-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамид (0,1264 г, 0,367 ммоль) в МеОН (3 мл) обрабатывали 1 М НС1 в эфире (1,835 мл, 1,835 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и концентрировали, получая при этом бледножелтое твердое вещество (0,16 г, количественный выход).
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 11,30 (с, 1Н), 9,83 (ушир.с, 1Н), 9,70 (с, 1Н), 9,57 (ушир.с, 1Н), 8,70 (с, 1Н), 8,15-8,13 (м, 2Н), 7,37-7,34 (м, 1Н), 7,10-7,00 (м, 3Н), 4,74-4,63 (м, 1Н), 3,60-3,40 (м, 5Н), 3,16-3,05 (м, 3Н), 2,26-2,15 (м, 1Н), 2,05-1,92 (м, 1Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 347, 345 (МН+ свободное основание, 61), 278, 276 (100);
ΗКΜδ (С^Нг^Зг, МН+, свободное основание): вычислено 345,1202, найдено 345,1195. Чистота по ВЭЖХ: 99% площади.
Пример 31: синтез К-(7-фтор-4-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен2-карбоксимидамида (31)
2-(2-Амино-5-фтор-4-нитрофенилтио)этанол.
К перемешиваемой суспензии 2,4-дифтор-5-нитроанилина (100 мг, 0,574 ммоль) и карбоната калия (159 мг, 1,149 ммоль) в ДМФА (1 мл) добавляли 2-меркаптоэтанол (0,081 мл, 1,149 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (3Ж). Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали, получая при этом основной продукт. Затем в качестве элюента применяли этилацетат, получая при этом меньший продукт. Определили, что основной продукт является требуемым продуктом (112 мг, 84%).
Ή ЯМР (ДМСО-Д6) δ 7,32 (д, 1=3,5 Гц, 1Н), 7,27 (д, 1=10,7 Гц, 1Н), 4,39 (с, 2Н), 3,85-3,76 (м, 2Н), 3,16-3,08 (м, 2Н), 2,13-2,05 (м, 1Н);
ΕδΙ-Μδ (т/ζ, %): 233 (МН+, 100), 215 (14), 187 (100), 129 (65).
трет-Бутил-4-(4-фтор-2-(2-гидроксиэтилтио)-5-нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилат.
К перемешиваемому раствору 2-(2-амино-5-фтор-4-нитрофенилтио)этанола (434 мг, 1,869 ммоль) и трет-бутил 4-оксопиперидин-1-карбоксилата (372 мг, 1,869 ммоль) в дихлорэтане (10 мл) и уксусной кислоте (0,321 мл, 5,61 ммоль) добавляли триацетоксиборгидрид натрия (594 мг, 2,80 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре. Спустя 1 ч добавляли дополнительный третбутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилат (372 мг, 1,869 ммоль) с последующим дополнительным добавлением триацетоксиборгидрида натрия (594 мг, 2,80 ммоль). После дополнительных 3 ч добавляли еще
- 76 021798 трет-бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилат (372 мг, 1,869 ммоль), затем еще триацетоксиборгидрид натрия (594 мг, 2,80 ммоль). Реакционную смесь перемешивали на протяжении ночи. Смесь затем гасили 1н. №ЮН (10 мл), водой (20 мл) и насыщенным карбонатом натрия (20 мл). Органические продукты затем экстрагировали дихлорметаном (3х20 мл). Объединенные органические слои сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали с применением смеси 1:3 этилацетат:гексаны на силикагеле, получая при этом требуемый продукт (710 мг, 91%).
'Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,45 (д, 1=12,0 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1=6, 6 Гц, 1Н), 5,08 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 5,02 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 3,96-3,84 (м, 2Н), 3,69-3,55 (м, 5Н), 2,99-2,83 (м, 2Н), 1,92-1,83 (м, 2Н), 1,45-1,18 (м, 11Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 360 (100), 128 (30).
трет-Бутил-4-(4-фтор-2-(2-йодэтилтио)-5-нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трифенилфосфина (668 мг, 2,55 ммоль) и имидазола (0,693 мл, 5,09 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл), охлажденном до 0°С, добавляли йод (732 мг, 2,88 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин. К этой смеси затем добавляли трет-бутил-4-(4фтор-2-(2-гидроксиэтилтио)-5-нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилат (705 мг, 1,697 ммоль) в виде раствора в тетрагидрофуране (5 мл) и образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия, водой, насыщенным тиосульфатом натрия и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали в смеси 1:9 этилацетат:гексаны, получая при этом требуемый продукт (398 мг, 44,6%).
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,53 (д, 1=11,7 Гц, 1Н), 7,27 (д, 1=6,6 Гц, 1Н), 5,10 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 3,96-3,85 (м, 2Н), 3,64-3,52 (м, 1Н), 3,50-3,41 (м, 2Н), 3,39-3,32 (м, 2Н), 2,99-2,81 (м, 2Н), 1,91-1,81 (м, 2Н), 1,481,32 (м, 11Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 470 (100), 426 (81).
трет-Бутил-4-(7-фтор-6-нитро-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1 -карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(4-фтор-2-(2-йодэтилтио)-5нитрофениламино)пиперидин-1-карбоксилата (394 мг, 0,750 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли карбонат калия (207 мг, 1,500 ммоль) и образовавшуюся смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч и затем при 90°С на протяжении ночи. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (3х), водой и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали, концентрировали и затем хроматографировали с применением смеси 1:9 этилацетат:гексаны, получая при этом требуемый продукт (193 мг, 64,7%) в виде красной пены.
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 7,42 (д, 1=6,6 Гц, 1Н), 7,30 (д, 1=11,7 Гц, 1Н), 4,10-3,95 (м, 2Н), 3,91-3,79 (м, 1Н), 3,41-3,36 (м, 2Н), 3,13-3,09 (м, 2Н), 2,99-2,78 (м, 2Н), 1,73-1,63 (м, 2Н), 1,63-1,51 (м, 2Н), 1,41 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 420 (М№+, 52), 398 (МН+, 35), 342 (100), 298 (64).
трет-Бутил-4-(6-амино-7 -фтор-2Н-бензо [Ъ] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1 -карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-(7-фтор-6-нитро-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)ил)пиперидин-1-карбоксилата (190 мг, 0,478 ммоль) в тетрагидрофуране (3,00 мл) добавляли никель Ренея (28,1 мг, 0,478 ммоль) в виде суспензии в метаноле (3 мл). К этой смеси затем добавляли гидразингидрат (0,233 мл, 4,78 ммоль) и образовавшуюся смесь перемешивали при 60°С в течение 8 мин. В течение этого времени реакционная смесь становилась светло-красной. Смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (2х), водой (2х) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали, получая при этом красное масло (172 мг, 98%).
'II ЯМР (ДМСО-б6) δ 6,61 (д, 1=11,1 Гц, 1Н), 6,34 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 4,76 (с, 2Н), 4,11-4,01 (м, 2Н), 3,62-3,51 (м, 1Н), 3,29-3,25 (м, 2Н), 2,93-2,88 (м, 2Н), 2,87-2,69 (м, 2Н), 1,71-1,61 (м, 2Н), 1,59-1,48 (м, 2Н), 1,40 (м, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 368 (МН+, 25), 312 (100).
трет-Бутил-4-(7-фтор-6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин1-карбоксилат.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(6-амино-7-фтор-2Н-бензо[Ъ][1,4]тиазин-4(3Н)ил)пиперидин-1-карбоксилата (168 мг, 0,457 ммоль) в этаноле (5 мл) и триэтиламине (0,643 мл, 4,57 ммоль) добавляли гидрохлорид метилтиофен-2-карбимидата (325 мг, 1,829 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 65°С на протяжении уикенда. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным карбонатом натрия (3х). Органическую фазу сушили, фильтровали и концентрировали и хроматографировали в смеси 1:9 этилацетат:гексаны, получая при этом желтое масло (18 мг, 8,26%).
'II ЯМР (Ме0И-б4) δ 7,65-7,61 (м, 1Н), 7,59-7,54 (м, 1Н), 7,14-7,08 (м, 1Н), 6,79 (д, 1=10,5 Гц, 1Н), 6,49 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,22-4,12 (м, 2Н), 3,80-3,67 (м, 1Н), 3,43-3,38 (м, 2Н), 3,05-3,01 (м, 2Н), 2,96-2,79 (м, 2Н), 1,83-1,73 (м, 2Н), 1,72-1,57 (м, 2Н), 1,46 (с, 9Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 477 (МН+, 100).
- 77 021798
Дигидрохлорид ^(7-фтор-4-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-6-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(7-фтор-6-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилата (16 мг, 0,034 ммоль) в метаноле (1 мл) добавляли 1 каплю концентрированной хлористо-водородной кислоты. Образовавшуюся смесь нагревали при 70°С в течение 1 ч. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли диэтиловым простым эфиром (4 мл). Образовавшийся бледный осадок собирали при помощи вакуумного фильтрования, получая при этом требуемый продукт 31 в виде дигидрохлоридной соли (8 мг, 53,0%).
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 11,35 (с, 1Н), 9,92 (с, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,57-8,51 (м, 2Н), 8,25-8,10 (м, 2Н), 7,40 (с, 1Н), 7,24-7,15 (м, 1Н), 7,05-6,99 (м, 1Н), 3,96-3,83 (м, 1Н), 3,45-3,20 (м, 2Н), 3,18-3,09 (м, 2Н), 3,09-2,91 (м, 2Н), 2,02-1,87 (м, 2Н), 1,87-1,75 (м, 2Н).
!Н ЯМР (ДМСО-й6 + 1+О) δ 8,16-8,09 (м, 1Н), 8,08-8,01 (м, 1Н), 7,39-7,33 (м, 1Н), 7,14 (д, 1=10,5 Гц, 1Н), 6,95-6,88 (м, 1Н), 3,91-3,80 (м, 1Н), 3,39-3,29 (м, 4Н), 3,11-3,05 (м, 2Н), 3,05-2,91 (м, 2Н), 1,90-1,78 (м, 4Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 377 (МН+, свободное основание, 50), 294 (100); Е81-НКМ8 (С18Н22^Р82, МН+, свободное основание): вычислено 377,1264, найдено 377,1263.
Пример 32: синтез №(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (32)
2-Хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
Получен согласно методике, описанной в примере 18.
2-(Этиламино)-1 -(7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанон.
Раствор 2-хлор-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (1,5 г, 5,50 ммоль) в диоксане (15 мл) и триэтиламине (1,533 мл, 11,00 ммоль) обрабатывали раствором гидрохлорида этанамина (2,243 г, 27,5 ммоль) в воде (7,5 мл). Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (16 ч). После этого времени реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3x30 мл). Объединенный органический слой сушили (№28О4), фильтровали и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (смесь 1:1 этилацетат:гексаны, затем 5:95 (2 М Ν^ в МеОН):СН2С12), получая при этом коричневое твердое вещество (0,56 г, 36,2%).
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,10 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,92 (дд, 1=2,4, 9,0 Гц, 1Н), 7,70 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 3,94 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,52 (с, 2Н), 3,33-3,28 (м, 2Н), 2,55-2,52 (м, 2Н), 0,98 (т, 1=6,9 Гц, 3Н);
Е81-М8 (т/ζ, %): 282 (МН+, 100%).
трет-Бутилэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамат.
Раствор 2-(этиламино)-1-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этанона (0,56 г, 1,991 ммоль) в безводном диоксане (10 мл) и триэтиламине (0,555 мл, 3,98 ммоль) обрабатывали ди-третбутилдикарбонатом (0,478 г, 2,190 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение получаса. Реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали водой (50 мл) и насыщенным раствором соли (3x15 мл). Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и концентрировали, получая при этом коричневый сироп (0,803 г, 100%).
!Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 8,13-8,11 (м, 1Н), 7,97-7,91 (м, 1Н), 7,71 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 4,18-4,16 (м, 2Н),
- 78 021798
3,95-3,92 (м, 2Η), 3,28-3,19 (м, 4Η), 1,38, 1,29 (2хс, 9Η), 1,05-1,02 (м, 3Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 404 (Μ+Ыа, 42%), 382 (МН+, 17%), 282 (100%). трет-Бутилэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамат.
Раствор трет-бутилэтил-(2-(7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)-2-оксоэтил)карбамата (0,8 г, 2,097 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (5 мл) обрабатывали комплексом боран-ТГФ (1 Μ в ТГФ; 6,29 мл, 6,29 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили добавлением по каплям метанола (10 мл) и затем концентрировали. Сырой остаток разбавляли метанолом (25 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 10 мин. Смесь затем концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (1:9-3:7 ΕΐΟΑ^ΟΗ2Ο12), получая при этом желтый сироп (0,493 г, 64%).
'Η ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 7,85-7,78 (м, 2Η), 6,94-6,85 (м, 1Η), 3,76-3,79 (м, 2Η), 3,62-3,57 (м, 2Η), 3,373,33 (м, 2Η), 3,22-3,19 (м, 2Η), 3,08-3,04 (м, 2Η), 1,35 и 1,30 (2 х ушир.с, 9Η), 1,03 (т, 1=6,9 Гц, 3Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 390 (Μ+Ыа, 67%), 368 (МН+, 17%), 312 (83%), 268 (100%). трет-Бутилэтил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамат.
Суспензию палладия-на-угле (10 мас.%; 0,142 г, 0,133 ммоль) и трет-бутилэтил-(2-(7-нитро-2Нбензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)-ил)этил)карбамата (0,49 г, 1,333 ммоль) в сухом этаноле (15 мл) перемешивали в атмосфере газообразного водорода (давление баллона) в течение 3 ч. Реакционную смесь затем помещали в атмосферу аргона, добавляли гидроиодид метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,761 г, 2,67 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи (16 ч). Смесь выливали на целит и целит промывали метанолом. Фильтрат концентрировали и подвергали колоночной хроматографии на силикагеле(смесь 1:1 ΕΐΟΑс:гексаны, затем 5:95 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом твердое вещество (0,4 г, 67,2%).
'Η ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 7,69 (ушир.д, 1=3,3 Гц, 1Η), 7,57 (дд, 1=1,2, 5,2 Гц, 1Η), 7,07 (дд, 1=3,6, 4,8 Гц, 1Η), 6,81-6,74 (м, 1Η), 6,49-6,46 (м, 2Η), 6,31 (ушир.с, 2Η), 3,59-3,54 (м, 2Η), 3,36-3,31 (перекрывание с пиком растворителя м, 4Η), 3,23-3,20 (м, 2Η), 3,03-3,00 (м, 2Η), 1,41 (с, 9Η), 1,04 (т, 1=6,9 Гц, 3Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 447 (МН+, 100%).
N-(4-(2-(Этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Η-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2-карбоксимидамид.
Раствор трет-бутилэтил-(2-(7-(тиофен-2-карбоксимидамидо)-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-4(3Н)ил)этил)карбамата (0,4 г, 0,896 ммоль) в метаноле (10 мл) обрабатывали 3н. НС1 (3,88 мл, 11,64 ммоль) и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и подщелачивали 1н. ΝηΟΗ. Продукт экстрагировали дихлорметаном (2х25 мл). Объединенный органический слой сушили (Ыа28О4) и концентрировали. Сырое вещество подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (5:95 (2 М ΝΗ3 в МеОН):СН2С12), получая при этом желтое твердое вещество (0,142 г, 45,8%).
'Н ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 7,69 (дд, 1=0,9, 3,6 Гц, 1Η), 7,56 (д, 1=5,1 Гц, 1Η), 7,07 (дд, 1=3,6, 4,8 Гц, 1Η), 6,72 (д, 1=8,7 Гц, 1Η), 6,49 (дд, 1=2,1, 8,4 Гц, 1Η), 6,45 (д, 1=2,1 Гц, 1Η), 6,31 (ушир.с, 2Η), 3,55-3,51 (м, 2Η), 3,30-3,24 (м, 2Η), 3,04-3,00 (м, 2Η), 2,62 (т, 1=6,9 Гц, 2Η), 2,56 (кв., 1=7,2 Гц, 2Η), 1,01 (т, 1=7,2 Гц, 3Η);
Ε8Ι-Μ8 (т/ζ, %): 347 (МН+, 75%), 276 (100%); чистота по ВЭЖХ 99,5% площади.
Дигидрохлорид Ы-(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида.
Раствор Ы-(4-(2-(этиламино)этил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамида (0,142 г, 0,410 ммоль) в сухом метаноле (5 мл) обрабатывали хлористо-водородной кислотой (1 Μ в простом эфире; 2,049 мл, 2,049 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь затем концентрировали, получая при этом желтое твердое вещество.
'II ЯМР (ДМСО-Ь6) δ 11,22 (ушир.с, 1Η) 9,68 (ушир.с, 1Η), 9,32 (ушир.с, 2Η), 8,69 (ушир.с, 1Η), 8,15-8,11 (м, 2Η), 7,36 (псевдо т, 1=7,2 Гц, 1Η), 7,06-6,99 (м, 3Η), 3,70-3,60 (перекрывание с пиком растворителя, м, 4Η), 3,12-3,02 (м, 4Η), 3,02-2,93 (м, 2Η), 1,23 (т, 1=7,2 Гц, 3Η).
Пример 33: синтез Ы-(4-(2-(диметиламино)этил)-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7ил)тиофен-2-карбоксимидамида (33)
4-(2-(Диметиламино)этил)-7 -нитро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]тиазин-3 (4Н)-он. Получен согласно методике, описанной в примере 8.
- 79 021798
Ю(4-(2-(Диметиламино)этил)-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-7-ил)тиофен-2карбоксимидамид.
Суспензию 4-(2-(диметиламино)этил)-7-нитро-2Н-бензо[Ь][1,4]тиазин-3(4Н)-она (0,3 г, 1,066 ммоль) и палладия-на-угле (10 мас.%, 0,113 г, 0,107 ммоль) в сухом этаноле (10 мл) перемешивали в атмосфере водорода (давление баллона) в течение 2 ч. Смесь пропускали через подушку целита и целит промывали этанолом. Фильтрат обрабатывали гидроиодидом метилтиофен-2-карбимидотиоата (0,608 г, 2,133 ммоль) и эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Растворитель выпаривали и остаток распределяли между дихлорметаном (50 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (25 мл), перемешивая в течение получаса. Смесь затем переносили в делительную воронку и водный слой удаляли. Органический слой сушили (№2804) и концентрировали. Остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (2,5:97,5 (2 М NНз в МеОН):СН2С12, затем 5:95 (2 М NНз в МеОН):СН2С12, затем 7,5:92,5 (2 М NНз в МеОН):СН2С12), получая при этом желтое твердое вещество (0,117 г, 30,4%).
'Н ЯМР (ДМСОД6) δ 7,75 (ушир.д, 1=3,0 Гц, 1Н), 7,61 (дд, 1=0, 9, 5,1 Гц, 1Н), 7,28 (д, 1=8,7 Гц, 1Н), 7,09 (дд, 1=3,6, 4,8 Гц, 1Н), 6,85 (ушир.д, 1=1,8 Гц, 1Н), 6,79 (дд, 1=1,5, 8,4 Гц, 1Н), 6,58 (ушир.с, 2Н), 4,00 (т, 6,9 Гц, 2Н), 3,44 (с, 2Н), 2,41 (т, 1=9,0 Гц, 2Н), 2,19 (с, 6Н).
Пример 34: анализ ферментов ηNΟ8 (человека), еNΟ8 (человека) и (N08 (человека).
Анализ (N08 человека проводили любым одним из двух протоколов, описываемых ниже контексте.
Протокол 1.
Рекомбинатную индуцируемую человеком N08 ((N08) продуцировали в инфицированных бакуловирусом клетках 8ί9 (АЬЕХ18). В радиометрическом способе активность NΟ-синтазы определяли измерением превращения [3Н]-Ь-аргинина в [3Н]-Ь-цитруллин. Для измерения (N08 10 мкл фермента добавляли к 100 мкл 100 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, содержащей 1 мМ СаС12, 1 мМ ЕЭТА, 1 мМ дитиотреитол, 1 мкМ РМЮ 1 мкМ РАО, 10 мкМ тетрагидробиоптерин, 120 мкМ NЛ^РН и 100 нМ СаМ.
Для измерения ингибирования фермента 15 мкл раствора испытуемого вещества добавляли к раствору для анализа фермента с последующей предварительной инкубацией в течение 15 мин при к.т. Реакцию инициировали добавлением 20 мкл Ь-аргинина, содержащего 0,25 мкКи [3Н]-аргинина/мл, и 24 мкМ Ь-аргинина. Общий объем реакционной смеси был 150 мкл в каждой лунке. Реакции проводили при 37°С в течение 45 мин. Реакцию останавливали добавлением 20 мкл охлажденного льдом буфера, содержащего 100 мМ НЕРЕ8, 3 мМ Е0ТА, 3 мМ ЕЭТА, рН 5,5. [3Н]Ь-цитруллин отделяли Э0\УЕХ (ионообменная смола Э0\УЕХ 50 \Vχ 8-400, 810МА) и Э0\УЕХ удаляли центрифугированием при 12000 д в течение 10 мин в центрифуге. Аликвоту (70 мкл) супернатанта добавляли к 100 мкл сцинтилляционной жидкости и радиоактивность (число импульсов) в образцах определяли в сцинтилляционном счетчике (1450 М1сгоЬе!а 1е!, ^а11ас). Специфическую активность N08 представляли как разность между активностью, полученной с испытуемым раствором, и активностью, наблюдаемой в контрольном образце, содержащем 240 мМ ингибитора ^-NММА. Все анализы проводили по меньшей мере в двух повторностях. Стандартные отклонения составляют 10% или меньше. Эти результаты показывают селективность соединений изобретения в отношении ингибирования πNΟ8. Результаты примерных соединений изобретения показаны также в табл. 2.
- 80 021798
Протокол 2
Реагенты и вещества
Фермент (Оксид азота)-синтаза (индуцируемая, человеческая рекомбинантная) ΐΝΟ5 II, Са£. № АЬХ-201-060, Аххога ЬЬС, СА 92121, Ы5А
Ь-ΝΜΜΑ Дигидрохлорид Цн-моиометил-Ь-аргинина, СаР # М7033, 3±дта АШгасЬ
Буфер для реакции 50 мМ Трис-НС1 (рН 7,4), СаР . № 93313, Зхдта-АШгтсЬ Со., ЕР. Ьоиав, МО 6 мкМ дигидрохлорид тетрагидробиоптерина (ВН4) , СаР № Т4425, 31дша 2 мкМ флавинадениндинуклеотид (РАЦ), СаР. № Р6625, ЗРдта 2 мкМ флавинаденинмононуклеотид (РМН), СаР. № Г8399, Зтдта
Буфер для остановки реакции 50 мМ Ы-2-гидроксиэтиллиперазин-Ц'-2- этансульфоновая кислота (НЕРЕЗ) (рН 5,5), Н7523, 31дта и 5 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота (ЕОТА), СаР. № ΕΏΞ, Задта
ΝΑΌΡΗ 12 мН, полученный в 10 мМ Трис-НС1 (рН 7,4), СаР. а» N7505, 31дгаа
Калмодулин 1 мкМ, СаР. В’ Р2277, Зрдша
[ 3Н]-Ь-аргинин 1 мкКи/реакцию, 40-70 Ки/ммоль, Са£. № ТКК- 698, АтегзЪат ВЬозсгепсез
Ь-аргинин 2,5 мкМ (конечная концентрация при
анализе), Саб. № А5131, Зтдгоа
Уравновешенная Смола АС-50И Х8 в буфере НЕРЕЗ (рН 5,5),
смола СаР. № 1421441, Βϊο-йас! ЬаЬогаРогхез ЬРЦ.
Чашки для центрифугирования СаР. № С8163, ПзЬег ΞοίθηΡίΐϊο
Микробета Иа11ас МЬсгоЬеба ТгИих, Регк1п Е1тег
Сцинтилляционная ОрРхрЬазе ЗирегтФх, СаР. В’ 1200-439, Регкхп
жидкость Е1тег
Термостат ЬаЬ-Ыпе Εηνίτο ЗЬакег
Микроце нтрифуга Мхкго 20
Методика.
Первичные исходные растворы каждого испытуемого соединения получали в дистиллированной воде в день изучения для получения конечной концентрации 6 мМ. Для определения величин Ιί\0 11 концентраций испытуемого соединения получали посредством 3-кратного серийного разведения. Испытуемые соединения испытывали в анализе ^NОδ при концентрации от 1000 мкМ до 0,0169 мкМ. Наполнитель для испытуемого соединения или ингибитора, дистиллированную воду, можно применять в качестве контроля (слепого опыта). Для определения неспецифической активности параллельно в качестве контроля выполняли опыт с 100 мкМ Ь-ΝΜΜΑ.
Все инкубации проводили в двух повторностях.
Реакционную смесь получали на льду добавлением следующих компонентов в подходящую лунку 1,0 мл 96-луночного полипропиленового планшета:
мкл раствора испытуемого соединения, эталонного ингибитора или контроля (наполнитель или Ь-ΝΜΜΑ);
мкл буфера для реакции (50 мМ Трис-НС1, 6 мкМ ВН4, 2 мкМ ΡΜΝ, 2 мкМ ΡΑΌ);
мкл 10 мМ раствора NЛ^ΡΗ;
мкл дистиллированной воды;
- 81 021798 мкл 1 мкМ калмодулина и мкл 0,0024 мкг/мкл ^N0δ.
Реакционную смесь подвергали предварительной инкубации при комнатной температуре в течение 15 мин. После этой предварительной инкубации реакцию инициировали добавлением к реакционной смеси 5 мкл субстрата Ь-аргинина (1 мкКи [3Н]-Ь-аргинина + 30 мкМ немеченого Ь-аргинина). Общий объем для реакции был 60 мкл. Аналитический планшет, содержащий реакционные смеси, герметизировали и инкубировали при 37°С в течение 30 мин. В конце этого периода инкубации в каждую лунку для остановки реакции добавляли 400 мкл охлажденного на льду буфера для остановки реакции (ТЭТА в буфере для остановки реакции хелатирует все количество доступного кальция). В каждую из аналитических лунок добавляли 100 мкл уравновешенной смолы с рН 5,5. Реакционные образцы интенсивно перемешивали и переносили в чашки для центрифугирования, после чего их центрифугировали при 13000 об/мин в течение 30 с. Чашки для центрифугирования удаляли из держателя и 20 мкл элюата (содержащего несвязанный Ь-цитруллин) добавляли в подходящие лунки 96-луночного планшета для жидкостной сцинтилляции. В каждую лунку добавляли также 175 мкл сцинтилляционной жидкости. Планшет герметизировали и радиоактивность количественно определяли с применением сцинтилляционного счетчика Μκγο^13.
Данные анализировали с применением сигмоидальной кривой доза-реакция (изменяемый наклон) для определения величины Ιί'.'50 испытуемого соединения.
У^Низ+(Верх - Низ)/(1+10Л((ЬодГСго - Х)*наклон ΗΪ11)) где X представляет собой логарифм концентрации испытуемого соединения или ингибитора;
Υ представляет собой количество образованного Ь-цитруллина (пмоль);
Низ относится к самой маленькой величине Υ и Верх относится к самой большой величине Υ.
Она идентична четырехпараметрическому логистическому уравнению.
Фактор наклона (называемый также наклоном НШ) описывает крутизну наклона. Стандартная кривая конкурентного связывания, которая подчиняется закону действующих масс, имеет наклон -1,0. Если наклон является пологим, фактор наклона будет отрицательной величиной (например, -0,85 или -0,60).
- 82 021798
Протокол анализа ηΝΟδ и еNΟδ человека.
Реагенты и вещества:
Ферменты (Оксид азота)-синтаза (нейронная, человеческая рекомбинантная) ηΝΟΞ I, Саб. № АЬХ-201-068, Аххога ЬЬС, СА 92121, ЦЗА (Оксид азота)-синтаза (эндотелиальная, человеческая рекомбинантная) еИОЗ III, Саб. № АЬХ-201-070, Аххога ЬЬС
Ь-ΝΜΜΑ Иь-монометил-Ь-аргинин, 1/04/05, Саб # А17933, НоуаЫосЬет
Ъ-ΝΑΜΕ Метиловый эфир ЬР-нитро-Ь-аргинина, СаЬ # N5751, А1с1г1сп
Буфер для реакции 2Х 50 мМ Трис-НС1 (рН 7,4), Саб.№ 93313, 31дта-А10г1сЬ Со., 36. Ьоибэ, МО 6 мкМ тетрагидробиоптерин (ВН4) , Саб № Т4425, ЗЬдта 2 мкМ флавинадениндинуклеотид (ΓΑϋ), Саб. № Е6625, Згдта 2 мкМ флавинаденинмононуклеотид (ΕΜΝ), Саб. № Г8399, Збдта
Буфер остановки реакции 50 мМ Ы-2-гидроксиэтилпинеразин-Ц/-2- этансульфоновая кислота (НЕРЕЗ) (рН 5,5), Н7523, 31дта и 5 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота (ЕБТА), Саб. № ЕБЗ, ЗЬдша
ΝΑβΡΗ 10 мМ, свежеполученный в день анализа, Саб. № 7505, ЗЬдша
Хлорид кальция 6 мМ, Саб.№ 21107, ЗЬдта
Калмодулин 1 мМ, Саб. № 2277, 31дл1а
рН] -Ь-аргинин 1мкКи/реакцию, 40-70 Ки/ммоль, Саб. В’
ТКК-698, АтегзЬат Вл.овс1епсез
Ь-аргинин 2,5 мкМ (конечная концентрация при анализе), СаЬ. № А5131, Згдта
Уравновешенная смола Смола АС-50И Х8 в буфере НЕРЕЗ (рН 5,5), Саб. № 1421441, Βίο-Кад ЬаЬогабогбез Ьб<1.
Чашки и держатель для Саб. № С8163, ПзНег Зс1епбЬ£1с
Центрифугирования Тг1-СагЬ 2000СА/ЬЬ, СапЬегга РаскагЦ
Сцинтилляционный Счетчик Сапада
Сцинтилляционная СаЬ. № 6012239, и1Ыта <3ο1ά, Регкгп-
ЖИДКОСТЬ Е1тег Ы£е апс!
Жидкая среда Апа1уб1са1 ЗсЬепсез, МА
СОг-термостат ЬаЬ-Ыпе Εηνίτο ЗНакег
Микроцентрифуга МЬкго 20
Мешалка для иниенсивного перемешивания Μϊηΐ Чогбех тбхег, ΙΚΑ
- 83 021798
Методика анализа иNΟ8 и еNΟ8 человека.
Первичные исходные растворы испытуемых соединений при концентрации 6 мМ получали из 2-5 мг порошка. Первичные исходные растворы каждого испытуемого соединения применяли свежеполученными в дистиллированной воде в день изучения для получения конечной концентрации 6 мМ. Для определения величин 1С50 12 концентраций испытуемого соединения получали посредством 3-кратного серийного разведения. Диапазон концентраций испытуемого соединения, применяемого для иNΟ8, был от 0,001 до 300 мкМ и для еNΟ8 был от 0,003 до 1000 мкМ. Наполнитель для испытуемого соединения или ингибитора можно применять в качестве контроля (слепого опыта). Для определения неспецифической активности применяли 100 мкМ Ь-кММА. Опыты с применением концентрации 1С50 Ь^АМЕ проводили параллельно в качестве контролей.
Все инкубации проводили в двух повторностях.
Реакционную смесь получали на льду добавлением микропипеткой следующих компонентов в полипропиленовую трубку микроцентрифуги:
мкл раствора испытуемого соединения, ингибитора или контроля (наполнителя или Ь-кММА);
мкл буфера для реакции (50 мМ Трис-НС1, 0,6 мкМ ВН4, 0,2 мкМ РМ^ 0,2 мкМ РАО);
мкл 10 мМ раствора NА^РН {1 мМ} (свежеприготовленный в 10 мМ Трис-НС1 (рН 7,4);
мкл 6 мМ СаС12 {600 мкМ};
мкл 1 мМ калмодулина {100 мкМ} и мкл 0,02 мкг/мкл иNΟ8 или 0,12 мкг/мкл еNΟ8.
Указанную выше реакционную смесь подвергали предварительной инкубации при комнатной температуре в течение 15 мин.
Реакцию начинали добавлением к реакционной смеси субстрата (в 5 мкл содержащего 1 мкКи [3Н]Ь-аргинина + 2,5 мкМ немеченого Ь-аргинина). Общий объем реакционной смеси был 60 мкл.
Реакционную смесь перемешивали с применением мешалки для интенсивного перемешивания и инкубировали при 37° в термостате в течение 30 мин.
Для остановки реакции добавляли 400 мкл охлажденного на льду буфера для остановки реакции в конце периода инкубации.
Реакционную смесь затем перемешивали с применением мешалки для интенсивного перемешивания и образцы реакционных смесей переносили в чашки для центрифугирования, которые центрифугировали с применением микроцентрифуги при 13000 об/мин в течение 30 с при комнатной температуре.
Чашки для центрифугирования удаляли из держателя, 450 мкл элюата (содержащего несвязанный Ь-цитруллин) переносили в сцинтилляционные флаконы. Добавляли 3 мл сцинтилляционной жидкости и радиоактивность количественно определяли в сцинтилляционном счетчике.
Данные анализировали с применением сигмоидальной кривой доза-реакция (изменяемый наклон) для определения величины 1С50 испытуемого соединения.
У=Низ+(Верх - Низ)/(1+10'((Ьод1С5о - X)*наклон НШ) ) где Х представляет собой логарифм концентрации испытуемого соединения или ингибитора;
Υ представляет собой количество образованного Ь-цитруллина (пмоль);
Низ относится к самой маленькой величине Υ и Верх относится к самой большой величине Υ.
Она идентична четырехпараметрическому логистическому уравнению.
Фактор наклона (называемый также наклоном НШ) описывает крутизну наклона. Стандартная кривая конкурентного связывания, которая подчиняется закону действующих масс, имеет наклон -1,0. Если наклон является пологим, фактор наклона будет отрицательной величиной (например, -0,85 или -0,60). Результаты примерных соединений изобретения также показаны в табл. 2.
- 84 021798
Таблица 2
Селективное ингибирование N08 человека соединениями (1)-(33)
Пример 35. Эффективность соединений на моделях прогнозирования состояний невропатической боли.
Было описано несколько животных моделей невропатической боли, которые включают повреждение нерва, включающего повреждение вследствие постоянного сжатия, включающие модель СО или Веппе! (см., например, Веппе!! апй Х1е, Раш, 33: 87-107, 1988; У188ег8 е! а1. РЬагтасо1. ВюсЬет. ВеЬау. 84: 479-486, 2006), лигирование неповрежденного нерва (модель 8Ж- или СЬипд; см., например, К1т е! а1. №иго8с1. Ье!!. 199: 158-60, 1995) и модель ЗеИгег (8е11хег е! а1. Рат 43: 205-18, 1990). Эти модели показывают хорошую корреляцию между лекарственными средствами с доказанной активностью для людей и фармакологической активностью их на этих моделях (Копйпеп апй Меей, Ш: Оо8!гоу8ку I., Сагг И.В., Ко^епЬигд М., е1Ьог8. 10* Уог1й Сопдге§8 оп Рат, 2003, 24. 8ап П1едо, СаПГогша: М.8Р Рге§8, 489-98). В общем, эти животные модели обнаруживают изменения в поведенческих реакциях, такие как пониженные механические пороговые величины, механическую гипералгезию, химическую гиперактивность, термическую гипералгезию и холодную аллодинию (Эоуйе11 е! а1. РЬагтасо1. ВюсЬет. ВеЬауюг 80: 93108, 2005).
Эффективность соединений изобретения с предполагаемой активность против гипералгезии и аллодинии для лечения невропатической боли анализировали с применением стандартных животных моделей.
(а) Модель СЬипд индуцированной повреждением боли, подобной невропатической боли.
Экспериментальные разработки для анализа невропатической боли на модели 8МЬ лигирования спинно-мозгового нерва СЬипд показаны на фиг. 1 и 2. Повреждение нерва посредством лигирования проводили согласно способу, описанному К1т апй СЬипд (К1т апй СЬипд, Рат 50:355-363, 1992). Эта методика индуцирует симптомы невропатической дизестезии, включающей тактильную аллодинию, термическую гипералгезию и защиту поврежденной лапы. Крыс анестезировали галотаном и обнажали позвонки на протяжении области Ь4-82. Спинно-мозговые нервы Ь5 и Ь6 обнажали, осторожно отделяли и туго лигировали шелковым шовным материалом 4-0, дистально к ИКО. После гарантирования гомеостатической стабильности раны зашивали и животным давали возможность выздоравливать в индивиду- 85 021798 альных клетках. Ложное оперирование крыс проводили идентичным способом, за исключением того, что спинно-мозговые нервы Ь5/Ь6 не лигировали. Любых крыс, проявляющих симптомы двигательной недостаточности, эвтаназировали. После периода выздоровления после хирургического вмешательства крысы проявляли повышенную чувствительность к болезненным и обычно неболезненным стимулам.
После стандартных внутрибрюшинных инъекций доз (например, 3 мг/кг) согласно опубликованной процедуре проявлялось явное действие соединения (8) на реверсивность термической гипералгезии (фиг. 3 и 4).
(b) Дуральное воспаление в качестве крысиной модели мигрени.
Было показано, что нанесение воспалительного супа (Ιδ) или химического стимула на верх твердой мозговой оболочки у крыс вызывает развитие центральной сенсибилизации и появление механической аллодинии на участках морды, а также задних лапах животных. Эти признаки имитируют характеристики, часто обнаруживаемые у индивидуумов, страдающих мигренью, во время головной боли, особенно, когда задерживают лечение, и имеет место развитие центральной сенсибилизации (Виг5!еш е! а1., Αηη. №иго1. 47:614-624, 2000; Виг5!еш е! а1., Вгат, 123:1703-1709, 2000). Соединение (8) испытывали на модели дурального воспаления мигрени согласно ранее описанным методикам (νΟ 2007/120830 или как описано в υδ-2008-0031822-Α1). Базовую линию пороговых величин отдергивания лап регистрировали приблизительно за 30 мин до введения Ιδ посредством присоединения калиброванных филаментов уоп Ргеу к задним лапам для измерения тактильной аллодинии. Приблизительно за 15 мин до введения Ιδ вводили испытуемое соединение в воде пероральным зондовым кормлением (1 мл/кг) при дозе 3 мг/кг через рот (р.о.). Измерения тактильной аллодинии регистрировали с интервалами 1 до 6 ч после введения Ιδ. Действие соединения 8 (3 мг/кг р.о.) против аллодинии показано на фиг. 5.
(c) Индуцированное каррагенаном воспаление в качестве модели первичной и вторичной боли.
Воспаление индуцировали подкожной инъекцией 0,1 мл 3% суспензии каррагенана в незатронутую сторону задней лапы слабо анестезированных крыс. Обычно значительное воспаление и отек были очевидными через 3 ч после инъекции. Каррагенановая модель является моделью воспалительной боли с двумя компонентами: первая, имеющая место сразу после инъекции, обеспечивает информацию по острой ноцицептивной реакции на болезненный стимул (в этом случае химический каррагенан). Имеется также второй, нейрогенный компонент, который развивается на несколько часов позднее и отражает тип нейронной активности вследствие компонентов гипералгезии и аллодинии, обнаруживаемых при невропатической боли. Значительное количество данных показало, что ΝΟ и его ферменты принимают участие в центральных механизмах воспалительной гипералгезии на уровне спинного мозга и что периферическое воспаление может позитивно регулировать экспрессию ήΝΟδ и индуцировать экспрессию ίΝΟδ в спинном мозге (ОиЬгшд е! а1., I. №иго5с1. 20:6714-6720, 2000; νυ е! а1., Εχρ. Вгат Ке5. 118:457-465, 1998; и νυ е! а1., Рат 94:47-58, 2001). Кроме того, исследования дефицита ίΝΟδ у животных показывают, что ΗΝΟδ является существенным при развитии и сохранении вторичных компонентов каррагенановой воспалительной боли, тогда как ίΝΟδ является достаточным, но не существенным в поздней стадии термической гипералгезии ((Тао е! а1., №иго5аепсе 120:847-854, 2003). На фиг. 6 показана реверсия механической аллодинии в ипсилатеральной лапе крыс после инъекции каррагенана и введения соединения
8. На фиг. 7 показана реверсия термической гипералгезии (последняя фаза) в ипсилатеральной лапе крыс под действием соединения (8) после внутрибрюшинного введения дозы, измеряемая посредством латентности отдергивания лапы в ответ на термический стимул.
Таким образом, соединение формулы (Ι) с активностью при ήΝΟδ и ίΝΟδ является применимым для лечения как мигрени, воспаления, так и болей невропатического типа и других болезненных состояний, в которых имеется компонент центральной нейронной сенсибилизации.
Другие варианты осуществления.
Хотя настоящее изобретение описано со ссылкой на примеры, которые в настоящее время являются предпочтительными, должно быть понятно, что изобретение не ограничивается описанными примерами. Наоборот, имеется в виду, что изобретение включает различные модификации и эквивалентные варианты, включенные в сущность и объем прилагаемой формулы изобретения.
Все публикации, патенты и заявки на патенты включены в контекст в качестве ссылки во всей их полноте до такой же степени, как если бы каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент была конкретно и отдельно указана, чтобы быть включенной в качестве ссылки во всей ее полноте. Указывается, что когда термин в настоящей заявке определяется отлично от документа, включенного в контекст в качестве ссылки, приведенное в контексте определение следует использовать в качестве определения для термина.
Другие варианты осуществления указываются в формуле изобретения.

Claims (57)

1. Соединение, имеющее формулу
К1 представляет собой Н, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С14алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С2-9гетероциклил, необязательно замещенный С3-8циклоалкил, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил или (СК 'К )п\К К ;
К1А и К1В представляют собой, независимо, Н, гидрокси, галоген, необязательно замещенный С16алкил, необязательно замещенный С1-6алкокси, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил, необязательно замещенный С1-4алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С1-4алкгетероарил, необязательно замещенный С3-8циклоалкил или необязательно замещенный С2-9гетероциклил или К1А и К1В объединяются с образованием =О;
К1С и К1В представляют собой, независимо, Н, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С1-6алкокси, необязательно замещенный С1-4алкциклоалкил, необязательно замещенный С14алкарил, необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил, необязательно замещенный С14алкгетероарил, необязательно замещенный С3-8циклоалкил, необязательно замещенный С29гетероциклил или Ν-защитную группу или К1С и К1В объединяются с образованием необязательно замещенного С2-9гетероциклила;
п равно целому числу 1-6;
каждый из К2 и К3 представляет собой, независимо, Н, галоген или необязательно замещенный С1-
6алкил,
2А каждый из К и К представляет собой, независимо, Н, галоген, (СΗ2)г2NΗС(NΗ)К' где г2 равно целому числу от 0 до 2;
К2А представляет собой необязательно замещенный С2-9гетероциклил или необязательно замещенный С1-4алкгетероциклил;
каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н, или Υ1 и Υ2 вместе обозначают =О, или Υ1 и Υ2 представляют собой, независимо, Н или необязательно замещенный С1-6алкил;
по крайней мере один из К4 и К5 представляет собой (СΗ2)г2NΗС(NΗ)К2Α;
К6 представляет собой Н или необязательно замещенный С1-6алкил, или его фармацевтически приемлемая соль, где С2-9гетероциклил содержит от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; гетероциклильный остаток в С1-4алкгетероциклильной группе представляет собой С2-9гетероциклил, содержащий от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; гетероарильный остаток в С1-4алкгетероарильной группе представляет собой С2-9гетероарил, содержащий от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; и арильный остаток в С1-4алкарильной группе представляет собой С6-юарил;
где необязательные заместители для алкила выбраны из (1) алкокси с атомами углерода от одного до шести; (2) амино; (3) циклоалкила с атомами углерода от трех до восьми; (4) галогена; (5) гетероциклила; (6) гидрокси; (7) Ν-защищенного амино; (8) оксо; (9) -СО2КА, где КА выбран из алкила или водоротэ ζ-, ТЭ ζ-, /ч ТТ да; (10) -С(О^К К , где каждый из К и К независимо выбран из водорода или алкила; и (11) -ΝΡ. К , где каждый из КО и КН независимо выбран из группы, состоящей из (а) водорода, (Ь) Ν-защитной группы и (с) алкила с числом атомов углерода от одного до шести;
необязательные заместители для арила выбраны из (1) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (2) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (4) амино; (5) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) галогена; (7) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) гидрокси; (9) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (10) -(СН2)ЧСО2КА, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из алкила или водорода, (11) -(СΗ2)^СОNКΒКС, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и КВ и КС независимо выбраны из водорода или алкила, (12) перфторалкила; (13) перфторалкокси;
необязательные заместители для циклоалкила выбраны из (1) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (2) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкоксиалкила, где ал- 87 021798 кильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (4) амино; (5) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) галогена; (7) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) гидрокси; (9) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (10) оксо; (11) -(СН2)ЧСО2КА, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из алкила или водорода, (12) -(СН2)^С0NΚВΚС, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и КВ и КС независимо выбраны из водорода или алкила; (13) перфторалкила; (14) перфторалкокси;
необязательные заместители для гетероциклила или гетероарила выбраны из (1) алкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (2) алкокси, имеющего от одного до шести атомов углерода; (3) алкоксиалкила, у которого алкильная и алкиленовая группы независимо имеют от одного до шести атомов углерода; (4) амино; (5) аминоалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (6) галогена; (7) галогеналкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (8) гидрокси; (9) гидроксиалкила, имеющего от одного до шести атомов углерода; (10) оксо; (11) -(СН2)ЧСО2КА, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и КА выбран из алкила или водорода; (12) -(СН2)^С0NΚВΚС, где с.] равно целому числу от нуля до четырех и КВ и КС независимо выбраны из водорода или алкила; (13) перфторалкила; (14) перфторалкокси.
2. Соединение по п.1, где О представляет собой -О-(СНК6)1-2 или -8-(СНК6)1-2 и К1 представляет собой Н, необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С!-4алкарил, необязательно замещенный С4-4алкгетероциклил или необязательно замещенный С2-9гетероциклил.
3. Соединение по п.1, где К2А имеет формулу и каждый из X1, X2, X4 и X5 независимо выбран из О, 8, ΝΚ7, Ν или СК8; X3 выбран из Ν или С;
К7 представляет собой Н или необязательно замещенный С1-6алкил;
К8 представляет собой Н, галоген, необязательно замещенный С1-6алкил, гидрокси или необязательно замещенный С1-6алкокси;
по меньшей мере один из X1, X2, X4 и X5 не является СК8.
4. Соединение по п.3, у которого К2А имеет формулу и каждый из X1 и X2 независимо выбран из О, 8, ΝΚ Ν или СН и по меньшей мере один из X1 и X2 не является СН.
5. Соединение по п.1, где указанное соединение имеет структуру, выбранную из хо или у которой один из К4 и К5 имеет следующую структуру:
где X2 представляет собой О или 8.
6. Соединение по п.1, где указанное соединение имеет структуру, выбранную из ха или где один из К4 и К5 имеет следующую структуру:
- 88 021798 и X2 представляет О или δ.
7. Соединение по п.1, у которого каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 0-СНК6.
8. Соединение по п.1, у которого каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой δ-СНК6
9. Соединение по п.1, у которого Υ1 и Υ2 вместе образуют =0 и О представляет собой 0-СНК6
10. Соединение по п.1, у которого Υ1 и Υ2 вместе образуют =0 и О представляет собой δ-СНК6.
11. Соединение по п.1, у которого Υ1 и Υ2 вместе образуют =0 и О представляет собой 0-(СНК6)2.
12. Соединение по п.1, у которого каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 5-(СНК6)2.
13. Соединение по п.1, у которого Υ1 и Υ2 вместе образуют =0 и О представляет собой 5-(СНК6)2.
14. Соединение по п.1, у которого каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 0-(СНК6)2.
15. Соединение по п.1, у которого Υ1 и Υ2 вместе образуют =0 и О представляет собой 0-(СНК6)3.
16. Соединение по п.1, у которого каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 5-(СНК6)3.
17. Соединение по п.1, у которого Υ1 и Υ2 вместе образуют =0 и О представляет собой 5-(СНК6)3.
18. Соединение по п.1, у которого каждый из Υ1 и Υ2 представляет собой Н и О представляет собой 0-(СНК6)3.
19. Соединение по любому из пп.1-18, у которого К1 представляет собой необязательно замещенный С1-6алкил, необязательно замещенный С2-9гетероциклил или необязательно замещенный С14алкгетероциклил.
20. Соединение по п.19, у которого К1 представляет собой необязательно замещенный аминоС1-
6алкил.
21. Соединение по п.19, у которого К1 представляет собой необязательно замещенный С14алкгетероциклил, где указанный гетероциклил представляет собой 5- или 6-членный циклический амин.
22. Соединение по п.21, у которого указанный циклический амин замещен карбоновой кислотой, сложным С1-6эфиром или амидом.
23. Соединение по п.19, у которого К1 представляет собой необязательно замещенный С29гетероциклил.
24. Соединение по п.23, где указанный гетероциклил представляет собой необязательно замещенный пирролидинил или необязательно замещенный пиперидинил.
25. Соединение по п.24, у которого К1 представляет собой или I где К9 представляет собой Н, необязательно замещенный С1-6алкил или необязательно замещенный
С1-4алкарил.
26. Соединение по п.25, у которого К9 представляет собой Н.
27. Соединение по любому из пп.1 и 3-18, у которого К1 представляет собой необязательно замещенный С3-С8циклоалкил или -(СК1АК1В)пМК1СК1С
28. Соединение по п.27, у которого К1 представляет собой
29. Соединение по п.28, у которого каждый из К1А и К1В представляет собой Н и п равно 2 или 3.
30. Соединение по п.28, у которого К1С представляет собой Н и К1С представляет собой -СН3, СН2СН3, -(СН2)2ОН или -СН2СО2Н или К1С и К1С соединяются с образованием необязательно замещенного пирролидинила или необязательно замещенного пиперидинила.
31. Соединение по п.28, у которого К1 представляет собой -СНЮН^СНзЦ или
32. Соединение по п.27, у которого К1 представляет собой С3-С8циклоалкил, замещенный амино.
33. Соединение по любому из пп.1-32, у которого один из К4 или К5 представляет собой Н или Ρ.
34. Соединение, выбранное из группы, состоящей из
- 89 021798
- 90 021798
- 91 021798 или их фармацевтически приемлемых солей.
35. Соединение, представляющее собой или его фармацевтически приемлемую соль.
36. Соединение, представляющее собой или его фармацевтически приемлемую соль.
37. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-36 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый эксципиент.
38. Способ лечения или предотвращения состояния у млекопитающего, вызванного действием (оксид азота)-синтазы (NОδ), где указанный способ содержит введение эффективного количества соединения любого из пп.1-36 или его фармацевтически приемлемой соли указанному млекопитающему.
39. Способ по п.38, где указанным млекопитающим является человек.
40. Способ по п.38, где указанное состояние представляет собой головную боль, невропатическую боль, хроническую воспалительную боль, висцеральную боль, нейровоспаление, индуцированную лекарственными средствами гипералгезию и/или аллодинию, острую боль, хроническую боль, боль при раке костей, химическую зависимость или аддикцию, нарушение ЦНС, нейродегенеративное заболевание или повреждение нерва, связанное с сердечно-сосудистой системой состояние или желудочно-кишечное нарушение.
41. Способ по п.40, в котором указанной головной болью является головная боль типа мигрени (с аурой или без нее), хроническая головная боль напряжения (СТТН), мигрень с аллодинией, головная боль вследствие чрезмерного употребления лекарственных средств, кластерная головная боль, хроническая головная боль или трансформированная мигрень.
42. Способ по п.40, где указанной головной болью является головная боль с лежащим в ее основе механизмом центральной сенсибилизации.
- 92 021798
43. Способ по п.40, где указанная хроническая боль имеет компоненты центральной сенсибилизации.
44. Способ по п.43, где указанной хронической болью является невропатическая боль.
45. Способ по п.44, где указанной невропатической болью является связанная со СПИД болезненная невропатия, центральная боль после инсульта (СРδР), диабетическая невропатия, невропатическая боль, индуцированная химиотерапией, постгерпетическая невралгия или тригеминальная невралгия.
46. Способ по п.45, где указанной невропатической болью является постгерпетическая невралгия.
47. Способ по п.40, где указанная хроническая воспалительная боль является результатом остеоартрита, ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилита, псориатического артрита, недифференцированной спондилоартропатии или воспалительного артрита.
48. Способ по п.40, где указанной индуцированной лекарственным средством гипералгезией или аллодинией является индуцированная опиоидом гипералгезия/аллодиния или индуцированная триптанами ^-НТв^-агонисты) гипералгезия или аллодиния.
49. Способ по п.45, в котором указанная индуцированная химиотерапией невропатическая боль индуцируется паклитакселом, цис-платином или доксорубицином.
50. Способ по п.40, где указанной химической зависимостью или аддикцией является аддикция к употреблению лекарственного средства; аддикция к употреблению кокаина; аддикция к никотину; индуцированная метамфетамином нейротоксичность; этанольная толерантность, этанольная зависимость или этанольная абстиненция, индуцированная морфином/опиоидом толерантность, индуцированная морфином/опиоидом зависимость, индуцированная морфином/опиоидом гипералгезия или индуцированная морфином/опиоидом абстиненция.
51. Способ по п.40, где указанным нарушением ЦНС является эпилепсия, тревога, депрессия, синдром дефицита внимания и гиперактивности (АЭНЭ), психоз или деменция.
52. Способ по п.40, где указанным нейродегенеративным заболеванием или повреждением нерва является острое повреждение спинного мозга, связанная со СПИД деменция, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (АББ), болезнь Хантингтона, рассеянный склероз, нейротоксичность или травма головы.
53. Способ по п.40, где указанным связанным с сердечно-сосудистой системой состоянием является инсульт, связанное с обходным сосудистым шунтом коронарной артерии (САБО) неврологическое нарушение, гипотермическая задержка работы сердца (НСА), боль после инсульта, кардиогенный коллапс (при инфаркте миокарда), повреждение при реперфузии или васкулярная деменция.
54. Способ по п.40, где указанным желудочно-кишечным нарушением является связанная с илеостомией диарея или демпинг-синдром.
55. Способ по п.40, где указанным состоянием является висцеральная боль.
56. Способ по п.38, где указанным состоянием является инсульт, повреждение при реперфузии, нейродегенерация, травма головы, обходной сосудистый шунт коронарной артерии (САВО), мигрень с аллодинией, центральная боль после инсульта (СРБР) или индуцированная морфином/опиоидом гипералгезия.
57. Соединение по п.36, где указанное соединение представляет собой гидрохлоридную соль.
Фиг. 1
Фиг. 2
- 93 021798
Действия соединения 8 против гипералгезии у Ь5/Ь6 8ΝΓ 8Г> крыс
Активность (± СКО) к»
30 60 90 120
Время (мин)
150
180
EA201170130A 2008-07-03 2009-07-03 Бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, обладающие ингибирующей nos активностью EA021798B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13388708P 2008-07-03 2008-07-03
PCT/CA2009/000923 WO2010000073A1 (en) 2008-07-03 2009-07-03 Benzoxazines, benzothiazines, and related compounds having nos inhibitory activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170130A1 EA201170130A1 (ru) 2011-08-30
EA021798B1 true EA021798B1 (ru) 2015-09-30

Family

ID=41465440

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170130A EA021798B1 (ru) 2008-07-03 2009-07-03 Бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, обладающие ингибирующей nos активностью

Country Status (20)

Country Link
US (3) US8106043B2 (ru)
EP (1) EP2310386A4 (ru)
JP (1) JP5572157B2 (ru)
KR (1) KR20110036607A (ru)
CN (1) CN102143961B (ru)
AR (1) AR072471A1 (ru)
AU (1) AU2009266386B2 (ru)
BR (1) BRPI0913915A2 (ru)
CA (1) CA2729246C (ru)
CL (1) CL2010001633A1 (ru)
EA (1) EA021798B1 (ru)
IL (1) IL210195A (ru)
MX (1) MX2011000124A (ru)
MY (1) MY158796A (ru)
NZ (1) NZ590727A (ru)
SG (1) SG192470A1 (ru)
TW (1) TWI458726B (ru)
UA (1) UA105182C2 (ru)
WO (1) WO2010000073A1 (ru)
ZA (1) ZA201100436B (ru)

Families Citing this family (119)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011009020A2 (en) 2009-07-16 2011-01-20 Mallinckrodt Inc. Compounds and compositions for use in phototherapy and in treatment of ocular neovascular disease and cancers
CN101830894B (zh) * 2010-06-01 2013-05-29 上海交通大学 一类苯并[d]噁唑化合物及其制备方法
WO2013076590A1 (en) * 2011-11-23 2013-05-30 Oxygen Healthcare Research Pvt. Ltd Benzothiazine compounds as h3 receptor ligands
CN102491919B (zh) * 2011-12-15 2014-03-19 南京友杰医药科技有限公司 去甲维拉帕米的合成方法
US10195153B2 (en) 2013-08-12 2019-02-05 Pharmaceutical Manufacturing Research Services, Inc. Extruded immediate release abuse deterrent pill
US11541048B2 (en) 2013-11-05 2023-01-03 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11590124B2 (en) 2013-11-05 2023-02-28 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11510918B2 (en) 2013-11-05 2022-11-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11229640B2 (en) 2013-11-05 2022-01-25 Antecip Bioventures Ii Llc Combination of dextromethorphan and bupropion for treating depression
US9457025B2 (en) 2013-11-05 2016-10-04 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods comprising bupropion or related compounds for sustained delivery of dextromethorphan
US9402843B2 (en) 2013-11-05 2016-08-02 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods of using threohydroxybupropion for therapeutic purposes
US11191739B2 (en) 2013-11-05 2021-12-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10772850B2 (en) 2013-11-05 2020-09-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11534414B2 (en) 2013-11-05 2022-12-27 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11382874B2 (en) 2013-11-05 2022-07-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10894047B2 (en) 2013-11-05 2021-01-19 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10512643B2 (en) 2013-11-05 2019-12-24 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11617728B2 (en) 2013-11-05 2023-04-04 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9474731B1 (en) 2013-11-05 2016-10-25 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11311534B2 (en) 2013-11-05 2022-04-26 Antecip Bio Ventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10688066B2 (en) 2018-03-20 2020-06-23 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion and dextromethorphan for treating nicotine addiction
US11141416B2 (en) 2013-11-05 2021-10-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10894046B2 (en) 2013-11-05 2021-01-19 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9700528B2 (en) 2013-11-05 2017-07-11 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11185515B2 (en) 2013-11-05 2021-11-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11065248B2 (en) 2013-11-05 2021-07-20 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11207281B2 (en) 2013-11-05 2021-12-28 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11524007B2 (en) 2013-11-05 2022-12-13 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11596627B2 (en) 2013-11-05 2023-03-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11576909B2 (en) 2013-11-05 2023-02-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US20160324807A1 (en) 2013-11-05 2016-11-10 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11364233B2 (en) 2013-11-05 2022-06-21 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10966974B2 (en) 2013-11-05 2021-04-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10966941B2 (en) 2013-11-05 2021-04-06 Antecip Bioventures Ii Llp Bupropion as a modulator of drug activity
US10933034B2 (en) 2013-11-05 2021-03-02 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10980800B2 (en) 2013-11-05 2021-04-20 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11478468B2 (en) 2013-11-05 2022-10-25 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11419867B2 (en) 2013-11-05 2022-08-23 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US20200338022A1 (en) 2019-01-07 2020-10-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11090300B2 (en) 2013-11-05 2021-08-17 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11197839B2 (en) 2013-11-05 2021-12-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11291638B2 (en) 2013-11-05 2022-04-05 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9408815B2 (en) 2013-11-05 2016-08-09 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US20160361305A1 (en) 2013-11-05 2016-12-15 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods comprising bupropion or related compounds for sustained delivery of dextromethorphan
US10966942B2 (en) 2019-01-07 2021-04-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11571399B2 (en) 2013-11-05 2023-02-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10864209B2 (en) 2013-11-05 2020-12-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11147808B2 (en) 2013-11-05 2021-10-19 Antecip Bioventures Ii Llc Method of decreasing the fluctuation index of dextromethorphan
US11344544B2 (en) 2013-11-05 2022-05-31 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10874663B2 (en) 2013-11-05 2020-12-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11433067B2 (en) 2013-11-05 2022-09-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11123344B2 (en) 2013-11-05 2021-09-21 Axsome Therapeutics, Inc. Bupropion as a modulator of drug activity
US10105361B2 (en) 2013-11-05 2018-10-23 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11253492B2 (en) 2013-11-05 2022-02-22 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11357744B2 (en) 2013-11-05 2022-06-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10874665B2 (en) 2013-11-05 2020-12-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11253491B2 (en) 2013-11-05 2022-02-22 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11298351B2 (en) 2013-11-05 2022-04-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11123343B2 (en) 2013-11-05 2021-09-21 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9198905B2 (en) 2013-11-05 2015-12-01 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for reducing dextrorphan plasma levels and related pharmacodynamic effects
US11273134B2 (en) 2013-11-05 2022-03-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11273133B2 (en) 2013-11-05 2022-03-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11617747B2 (en) 2013-11-05 2023-04-04 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11020389B2 (en) 2013-11-05 2021-06-01 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9457023B1 (en) 2013-11-05 2016-10-04 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10945973B2 (en) 2013-11-05 2021-03-16 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10105327B2 (en) 2013-11-05 2018-10-23 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphane and related pharmacodynamic effects
US11571417B2 (en) 2013-11-05 2023-02-07 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11497721B2 (en) 2013-11-05 2022-11-15 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11426370B2 (en) 2013-11-05 2022-08-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11096937B2 (en) 2013-11-05 2021-08-24 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11058648B2 (en) 2013-11-05 2021-07-13 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10881657B2 (en) 2013-11-05 2021-01-05 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10813924B2 (en) 2018-03-20 2020-10-27 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion and dextromethorphan for treating nicotine addiction
US11439636B1 (en) 2013-11-05 2022-09-13 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11234946B2 (en) 2013-11-05 2022-02-01 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11426401B2 (en) 2013-11-05 2022-08-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11517543B2 (en) 2013-11-05 2022-12-06 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11541021B2 (en) 2013-11-05 2023-01-03 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11291665B2 (en) 2013-11-05 2022-04-05 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9861595B2 (en) 2013-11-05 2018-01-09 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11298352B2 (en) 2013-11-05 2022-04-12 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9763932B2 (en) 2013-11-05 2017-09-19 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10898453B2 (en) 2013-11-05 2021-01-26 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11576877B2 (en) 2013-11-05 2023-02-14 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as modulator of drug activity
US11129826B2 (en) 2013-11-05 2021-09-28 Axsome Therapeutics, Inc. Bupropion as a modulator of drug activity
US10780064B2 (en) 2019-01-07 2020-09-22 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11285146B2 (en) 2013-11-05 2022-03-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11969421B2 (en) 2013-11-05 2024-04-30 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10080727B2 (en) 2013-11-05 2018-09-25 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10786469B2 (en) 2013-11-05 2020-09-29 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US12109178B2 (en) 2013-11-05 2024-10-08 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11007189B2 (en) 2013-11-05 2021-05-18 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US11285118B2 (en) 2013-11-05 2022-03-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10940124B2 (en) 2019-01-07 2021-03-09 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9867819B2 (en) 2013-11-05 2018-01-16 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US11213521B2 (en) 2013-11-05 2022-01-04 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9707191B2 (en) 2013-11-05 2017-07-18 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US20220233470A1 (en) 2013-11-05 2022-07-28 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US9968568B2 (en) 2013-11-05 2018-05-15 Antecip Bioventures Ii Llc Compositions and methods for increasing the metabolic lifetime of dextromethorphan and related pharmacodynamic effects
US10799497B2 (en) 2013-11-05 2020-10-13 Antecip Bioventures Ii Llc Combination of dextromethorphan and bupropion for treating depression
US10874664B2 (en) 2013-11-05 2020-12-29 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
US10172797B2 (en) 2013-12-17 2019-01-08 Pharmaceutical Manufacturing Research Services, Inc. Extruded extended release abuse deterrent pill
US9492444B2 (en) 2013-12-17 2016-11-15 Pharmaceutical Manufacturing Research Services, Inc. Extruded extended release abuse deterrent pill
CN103990106A (zh) * 2014-06-11 2014-08-20 河北医科大学 八肽胆囊收缩素在制药中的应用
JP6371463B2 (ja) 2014-07-17 2018-08-08 ファーマシューティカル マニュファクチュアリング リサーチ サービシズ，インコーポレーテッド 即時放出性乱用抑止性液体充填剤形
EP2985036A3 (en) * 2014-08-14 2016-03-09 Fraunhofer Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. CYP2J2 antagonists in the treatment of pain
EP3209282A4 (en) 2014-10-20 2018-05-23 Pharmaceutical Manufacturing Research Services, Inc. Extended release abuse deterrent liquid fill dosage form
FR3030513B1 (fr) * 2014-12-19 2016-12-23 Oreal Derives de benzoxazine cationiques et utilisation en coloration capillaire.
CN106279139B (zh) * 2016-08-08 2018-12-28 湘潭大学 可用作sglt2抑制剂的化合物及其制备方法和用途
CN106632353A (zh) * 2016-11-18 2017-05-10 山东友帮生化科技有限公司 3‑硝基‑6‑氯咪唑并[1,2‑b]哒嗪的合成方法
EP3877439A4 (en) * 2018-11-07 2022-08-10 Regents of the University of Minnesota ANALGESIC AND ANTI-ADDICTION COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF CHRONIC PAIN AND OPIOID DEPENDENCE
CA3122362A1 (en) 2018-12-05 2020-06-11 Northwestern University Neuronal oxide synthase inhibitors for immunotherapy
US10925842B2 (en) 2019-01-07 2021-02-23 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion as a modulator of drug activity
CN109771386B (zh) * 2019-01-10 2021-10-08 广东赛烽医药科技有限公司 一种氟哌噻吨美利曲辛片剂及其制备方法
US20240000806A1 (en) * 2020-11-20 2024-01-04 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods and materials for inhibiting cb1 activity
EP4337197A1 (en) * 2021-05-10 2024-03-20 Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. Pharmaceutical compositions for treating neurological conditions
US11717518B1 (en) 2022-06-30 2023-08-08 Antecip Bioventures Ii Llc Bupropion dosage forms with reduced food and alcohol dosing effects
US11730706B1 (en) 2022-07-07 2023-08-22 Antecip Bioventures Ii Llc Treatment of depression in certain patient populations

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5521145A (en) * 1994-04-04 1996-05-28 Sumitomo Chemical Company, Ltd. Iminothiazoline derivatives and herbicides containing them as active ingredients
US20060258721A1 (en) * 2005-04-13 2006-11-16 Shawn Maddaford Substituted indole compounds having NOS inhibitory activity
CA2607219A1 (en) * 2005-05-18 2007-02-15 Neuraxon, Inc. Substituted benzimidazole compounds with dual nos inhibitory activity and mu opioid agonist activity
CA2643822A1 (en) * 2006-04-13 2007-10-25 Neuraxon, Inc 1,5 and 3,6- substituted indole compounds having nos inhibitory activity
WO2008100463A1 (en) * 2007-02-13 2008-08-21 Schering Corporation 3,4-dihydr0-l,4-benz0xazine, 3, 4-dihydr0-1, 4-benzothiazine and 1,2,3,4-tetrahydro-quinoxaline derivatives as alpha2c adrenoreceptor agonists

Family Cites Families (103)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3862114A (en) 1971-11-22 1975-01-21 Ici Australia Ltd Analogs of substance p
US3912711A (en) 1972-07-03 1975-10-14 Susan E Leeman Synthetically produced undecapeptide, Substance P
US4481139A (en) 1983-04-13 1984-11-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Peptide antagonists of substance P
US4472305A (en) 1983-05-17 1984-09-18 Sterling Drug Inc. Hexapeptide amides
US4680283A (en) 1984-09-26 1987-07-14 Merck & Co., Inc. Analogs of substance P and eledoisin
US4839465A (en) 1987-01-20 1989-06-13 Sterling Drug Inc. Di-(D-tryptophyl and/or tetrahydropyridoindolylcarbonyl)-containing peptide amides and process for preparation thereof
DE3711335A1 (de) 1987-04-03 1988-10-20 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
US5410019A (en) 1987-09-24 1995-04-25 The Administrators Of The Tulane-Educational Fund Therapeutic peptides
US5378803A (en) 1987-12-11 1995-01-03 Sterling Winthrop Inc. Azole-fused peptides and processes for preparation thereof
GB8807921D0 (en) 1988-04-05 1988-05-05 Fujisawa Pharmaceutical Co Ws-9326 & its derivatives
GB8802229D0 (en) 1988-02-02 1988-03-02 Fujisawa Pharmaceutical Co Ws-9326 & its derivatives
US5187156A (en) 1988-03-16 1993-02-16 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Peptide compounds, processes for preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same
EP0360390A1 (en) 1988-07-25 1990-03-28 Glaxo Group Limited Spirolactam derivatives
WO1990005525A1 (en) 1988-11-23 1990-05-31 Pfizer Inc. Quinuclidine derivatives as substance p antagonists
ATE94384T1 (de) 1989-04-14 1993-10-15 Merz & Co Gmbh & Co Verwendung von adamantan-derivaten zur praevention und behandlung der cerebralen ischaemie.
US5164372A (en) 1989-04-28 1992-11-17 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. Peptide compounds having substance p antagonism, processes for preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same
IE903957A1 (en) 1989-11-06 1991-05-08 Sanofi Sa Aromatic amine compounds, their method of preparation and¹pharmaceutical compositions in which they are present
FR2654725B1 (fr) 1989-11-23 1992-02-14 Rhone Poulenc Sante Nouveaux derives de l'isoindolone, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
GB8929070D0 (en) 1989-12-22 1990-02-28 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptide compounds,processes for preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same
UA41251C2 (ru) 1990-01-04 2001-09-17 Пфайзер, Інк. Гидрированные азотсодержащие гетероциклические соединения, производные пиперидина, фармацевтическая композиция и способ угнетения активности вещества р в организме
US5232929A (en) 1990-11-28 1993-08-03 Pfizer Inc. 3-aminopiperidine derivatives and related nitrogen containing heterocycles and pharmaceutical compositions and use
WO1991012266A1 (en) 1990-02-15 1991-08-22 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Peptide compound
DE4007869A1 (de) 1990-03-13 1991-09-19 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
HUT62891A (en) 1990-06-01 1993-06-28 Pfizer Process for producing 3-amino-2-arylquinuclidine compounds and pharmaceuticql composition comprising such compounds
CA2086434C (en) 1990-07-23 1998-09-22 John A. Lowe, Iii Quinuclidine derivatives
HUT68667A (en) 1990-09-28 1995-07-28 Pfizer Fused ring analogs of nitrogen containing nonaromatic heterocycles
US5420297A (en) 1990-10-24 1995-05-30 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Peptides having substance P antagonistic activity
DE4034829A1 (de) 1990-11-02 1992-05-07 Merck Patent Gmbh Cyclopeptide
AU652407B2 (en) 1991-01-10 1994-08-25 Pfizer Inc. N-alkyl quinuclidinium salts as substance P antagonists
ATE154354T1 (de) 1991-02-11 1997-06-15 Merck Sharp & Dohme Azabicyclische verbindungen, diese enthaltende pharmazeutische zubereitungen und ihre therapeutische verwendung
DE69200921T2 (de) 1991-03-01 1995-05-04 Pfizer 1-azabicyclo[3.2.2]nonan-3-aminderivate.
US5484886A (en) 1991-04-25 1996-01-16 Merck & Co., Inc. Human neurokinin-1 receptor
FR2676055B1 (fr) 1991-05-03 1993-09-03 Sanofi Elf Composes polycycliques amines et leurs enantiomeres, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2676053B1 (fr) 1991-05-03 1993-08-27 Sanofi Elf Nouveaux composes dialkylenepiperidino et leurs enantiomeres, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2676054B1 (fr) 1991-05-03 1993-09-03 Sanofi Elf Nouveaux composes n-alkylenepiperidino et leurs enantiomeres, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2676442B1 (fr) 1991-05-17 1993-08-06 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveau derives de perhydroisoindole, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
FR2676446B1 (fr) 1991-05-17 1993-08-06 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux derives du thiopyranopyrrole, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
WO1992020661A1 (en) 1991-05-22 1992-11-26 Merck & Co., Inc. N, n-diacylpiperazines
DE69232334T2 (de) 1991-05-22 2002-11-14 Pfizer Inc., New York Substituierte 3-aminochinuclidine
DK0587723T3 (da) 1991-05-31 1996-04-01 Pfizer Quinuclidinderivater
GB9113219D0 (en) 1991-06-19 1991-08-07 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptide compound,processes for preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same
US5242944A (en) 1991-06-20 1993-09-07 Korea Research Institute Of Chemical Technology Phenylacetamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof
UA39168C2 (ru) 1991-06-20 2001-06-15 Пфайзер, Інк. Фторалкоксифенильные производные пиперидина или хинуклидина, которые являются антагонистами вещества p и фармацевтическая композиция на их основании
TW202432B (ru) 1991-06-21 1993-03-21 Pfizer
US5288730A (en) 1991-06-24 1994-02-22 Merck Sharp & Dohme Limited Azabicyclic compounds, pharmaceutical compositions containing them and their use in therapy
DE69208088T2 (de) 1991-07-05 1996-11-14 Merck Sharp & Dohme Aromatische verbindungen, diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen und ihre therapeutische anwendung
US5472978A (en) 1991-07-05 1995-12-05 Merck Sharp & Dohme Ltd. Aromatic compounds, pharmaceutical compositions containing them and their use in therapy
JPH06509090A (ja) 1991-07-10 1994-10-13 メルク　シヤープ　エンド　ドーム　リミテツド 芳香族化合物、それらを含む組成物、及び治療におけるそれらの使用
US5495047A (en) 1991-07-10 1996-02-27 Merck, Sharp & Dohme (Ltd.) Fused tricyclic compounds, pharmaceutical compositions containing them and their use in therapy
MY110227A (en) 1991-08-12 1998-03-31 Ciba Geigy Ag 1-acylpiperindine compounds.
US5459270A (en) 1991-08-20 1995-10-17 Merck Sharp & Dohme Limited Azacyclic compounds, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
BR9206500A (pt) 1991-09-26 1995-10-03 Pfizer Heterociclos contendo, nitrogênio tricíclico condensado como antagonistas de substancia receptora P
ATE161821T1 (de) 1991-11-12 1998-01-15 Pfizer Azyklische ethylendiaminderivate als 'substance p rezeptor' antagonisten
GB9201179D0 (en) 1992-01-21 1992-03-11 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
JP2656702B2 (ja) 1992-03-23 1997-09-24 ファイザー製薬株式会社 ペプチド性キヌクリジン
FR2689888B1 (fr) 1992-04-10 1994-06-10 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux derives de perhydroisoindole, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
EP0655055B1 (en) 1992-08-13 2000-11-29 Warner-Lambert Company Tachykinin antagonists
AU4224993A (en) 1992-08-19 1994-03-15 Pfizer Inc. Substituted benzylamino nitrogen containing non-aromatic heterocycles
FR2696178B1 (fr) 1992-09-30 1994-12-30 Sanofi Elf Amides basiques quaternaires, procédé pour leur préparation et compositions pharmaceutiques en contenant.
JP2656699B2 (ja) 1992-10-21 1997-09-24 ファイザー製薬株式会社 置換ベンジルアミノキヌクリジン
CA2149892C (en) 1992-11-20 1998-12-08 Koji Kobayashi Compound having prolyl endopeptidase inhibitory activity and pharmaceutical use thereof
US5338845A (en) 1992-12-02 1994-08-16 Sterling Winthrop Inc. Aspergillus species, cyclic dimeric dipeptide derivative substance P antagonist biosynthetic products thereof, and process for preparation thereof
US5408308A (en) 1993-01-29 1995-04-18 Corning Incorporated Method for monitoring hermetically-coated fibers
US5635510A (en) 1993-05-06 1997-06-03 Merrell Pharmaceuticals Inc. Substituted pyrrolidin-3-yl-alkyl-piperidines
WO1994029309A1 (en) 1993-06-07 1994-12-22 Merck & Co., Inc. Spiro-substituted azacycles as neurokinin antagonists
EP0634402A1 (en) 1993-07-14 1995-01-18 Takeda Chemical Industries, Ltd. Isochinolinone derivatives, their production and use
ES2132401T3 (es) 1993-07-26 1999-08-16 Pfizer Tetrahidro-1h-benzazepinonas y hexahidroazepinonas como antagonistas selectivos del receptor colecistoquinina-b.
TW365603B (en) 1993-07-30 1999-08-01 Rhone Poulenc Rorer Sa Novel perhydroisoindole derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions which contain them
WO1995011895A1 (en) 1993-10-26 1995-05-04 Ciba-Geigy Ag N-benzoyl-4-oxy/thio-2-substituted piperidines as substance-p receptor antagonists
US6403577B1 (en) 1993-11-17 2002-06-11 Eli Lilly And Company Hexamethyleneiminyl tachykinin receptor antagonists
JPH07324079A (ja) * 1994-04-04 1995-12-12 Sumitomo Chem Co Ltd イミノチアゾリン誘導体およびその用途
FR2719312B1 (fr) 1994-04-28 1996-06-14 Adir Nouveau pseudopeptides dérivés de neurokinines, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
DE4424787A1 (de) * 1994-07-14 1996-01-18 Bayer Ag Substituierte Aryliminoheterocyclen
US5576317A (en) 1994-12-09 1996-11-19 Pfizer Inc. NK-1 receptor antagonists and 5HT3 receptor antagonists for the treatment of emesis
DE19531152A1 (de) * 1994-12-15 1996-06-20 Bayer Ag Substituierte N-Aryl-Stickstoffheterocyclen
RU2156250C2 (ru) 1995-04-24 2000-09-20 Новартис Аг Производные хромона, способ их получения и фармацевтическая композиция
JPH11512396A (ja) 1995-09-05 1999-10-26 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 化合物および方法
GB9524157D0 (en) 1995-11-25 1996-01-24 Pfizer Ltd Therapeutic agents
TW382017B (en) 1995-12-27 2000-02-11 Janssen Pharmaceutica Nv 1-(1,2-disubstituted piperidinyl)-4-(fused imidazole)-piperidine derivatives
DE69728138T2 (de) 1996-03-29 2004-09-16 Pfizer Inc. 6-phenylpyridinderivate
AU2611297A (en) 1996-04-12 1997-11-07 Eli Lilly And Company Bisindoles for treating pain or nociception
AU3716997A (en) 1996-07-17 1998-02-09 Merck & Co., Inc. Alteration of circadian rhythmicity with a tachykinin antagonist
MY132550A (en) 1996-08-22 2007-10-31 Novartis Ag Acylaminoalkenylene-amide derivatives as nk1 and nk2 antogonists
WO1998009630A1 (en) 1996-09-09 1998-03-12 Smithkline Beecham Corporation Compounds and methods
JP3483893B2 (ja) 1996-09-10 2004-01-06 ドクトル カルル トーマエ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 修飾アミノ酸、これらの化合物を含む薬物及びそれらの調製方法
HN1997000027A (es) 1996-12-06 1997-06-05 Pfizer Prod Inc Derivados de 6-fenil piridil - 2 amina
AU744313B2 (en) 1997-02-10 2002-02-21 Pfizer Products Inc. 2-amino-6-(2-substituted-4-phenoxy)-substituted-pyridines
WO1998056779A1 (en) 1997-06-13 1998-12-17 Smithkline Beecham Corporation 4-sulfinyl benzamides as calcitonin gene-related peptide receptor antagonists
TW593225B (en) 1997-06-30 2004-06-21 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa 1-amino-alkylcyclohexane NMDA receptor antagonists
US6071966A (en) 1997-06-30 2000-06-06 Merz + Co. Gmbh & Co. 1-amino-alkylcyclohexane NMDA receptor antagonists
HN1998000118A (es) 1997-08-27 1999-02-09 Pfizer Prod Inc 2 - aminopiridinas que contienen sustituyentes de anillos condensados.
HN1998000125A (es) 1997-08-28 1999-02-09 Pfizer Prod Inc 2-aminopiridinas con sustituyentes alcoxi ramificados
DE69923448T2 (de) 1998-06-03 2005-12-29 Pfizer Products Inc., Groton 2-aminopyridine mit kondensierten ringsubstituenten als stickstoff-oxid-synthase inhibitoren
DE19844291A1 (de) * 1998-09-18 2000-03-23 Schering Ag Benzoxazin- und Benzothiazin-Derivate und deren Verwendung in Arzneimitteln
CA2345357A1 (en) 1998-09-30 2000-04-06 Merck Sharp & Dohme Limited Benzimidazolinyl piperidines as cgrp ligands
AU4249700A (en) * 1999-04-19 2000-11-02 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Hydroxamic acid derivative
DE19952146A1 (de) 1999-10-29 2001-06-07 Boehringer Ingelheim Pharma Arylalkane, Arylalkene und Aryl-azaalkane, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
DE19952147A1 (de) 1999-10-29 2001-05-03 Boehringer Ingelheim Pharma Neue Cyclopropane, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
DE10020667A1 (de) * 2000-04-19 2001-11-22 Schering Ag Neue Benzoxazin- und Benzothiazin-Derivate und deren Verwendung in Arzneimitteln
US20030082225A1 (en) 2001-10-19 2003-05-01 Mason Paul Arthur Sterile, breathable patch for treating wound pain
DK1539724T3 (da) * 2002-08-07 2008-02-11 Neuraxon Inc Aminobenzothiazolforbindelser med NOS-inhiberende aktivitet
CN101374830A (zh) * 2005-08-25 2009-02-25 先灵公司 α2C肾上腺素受体激动剂
US20090131503A1 (en) 2007-11-16 2009-05-21 Annedi Subhash C 3,5 - substituted indole compounds having nos and norepinephrine reuptake inhibitory activity

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5521145A (en) * 1994-04-04 1996-05-28 Sumitomo Chemical Company, Ltd. Iminothiazoline derivatives and herbicides containing them as active ingredients
US20060258721A1 (en) * 2005-04-13 2006-11-16 Shawn Maddaford Substituted indole compounds having NOS inhibitory activity
CA2607219A1 (en) * 2005-05-18 2007-02-15 Neuraxon, Inc. Substituted benzimidazole compounds with dual nos inhibitory activity and mu opioid agonist activity
CA2643822A1 (en) * 2006-04-13 2007-10-25 Neuraxon, Inc 1,5 and 3,6- substituted indole compounds having nos inhibitory activity
WO2008100463A1 (en) * 2007-02-13 2008-08-21 Schering Corporation 3,4-dihydr0-l,4-benz0xazine, 3, 4-dihydr0-1, 4-benzothiazine and 1,2,3,4-tetrahydro-quinoxaline derivatives as alpha2c adrenoreceptor agonists

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Indian Journal of Chemistry, July 1990, vol. 29B, p. 697-699 (RAM et al.), see whole document, in particular compound III (a-k) *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2010000073A1 (en) 2010-01-07
IL210195A (en) 2015-08-31
SG192470A1 (en) 2013-08-30
IL210195A0 (en) 2011-03-31
US20100009975A1 (en) 2010-01-14
MY158796A (en) 2016-11-15
JP2011526251A (ja) 2011-10-06
ZA201100436B (en) 2012-10-31
EA201170130A1 (ru) 2011-08-30
CL2010001633A1 (es) 2011-05-20
CN102143961A (zh) 2011-08-03
TW201002701A (en) 2010-01-16
US20120122855A1 (en) 2012-05-17
NZ590727A (en) 2012-12-21
AR072471A1 (es) 2010-09-01
US8618286B2 (en) 2013-12-31
AU2009266386A1 (en) 2010-01-07
BRPI0913915A2 (pt) 2015-10-13
TWI458726B (zh) 2014-11-01
US20140163016A1 (en) 2014-06-12
KR20110036607A (ko) 2011-04-07
EP2310386A1 (en) 2011-04-20
UA105182C2 (ru) 2014-04-25
EP2310386A4 (en) 2012-04-11
MX2011000124A (es) 2011-02-24
CA2729246A1 (en) 2010-01-07
CN102143961B (zh) 2014-11-05
US8106043B2 (en) 2012-01-31
JP5572157B2 (ja) 2014-08-13
CA2729246C (en) 2018-08-21
AU2009266386B2 (en) 2015-02-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA021798B1 (ru) Бензоксазины, бензотиазины и родственные соединения, обладающие ингибирующей nos активностью
US11912693B2 (en) Compounds for modulating S1P1 activity and methods of using the same
US8173813B2 (en) Quinolone and tetrahydroquinolone and related compounds having NOS inhibitory activity
ES2353247T3 (es) Derivados de (1h-indol-7-il)-pirimidin-2-il-amino)metadona y compuestos emparentados como inhibidores del igf-ri, para el tratamiento de cancer.
DK2651888T3 (en) N - ((1H-indol-3-yl) alkyl) -4-benzyl) benzamide and N - ((1H-pyrrolo [2,3-b] pyridin-3-yl) alkyl) -4-benzyl ) benzamide derivatives as alpha-synuclein aggregation inhibitors for the treatment of neurodegenerative diseases
ES2357129T3 (es) Compuestos indólicos sustituidos que tienen actividad inhibidora de nos.
EP2220074A1 (en) 3,5-substituted indole compounds having nos and norepinephrine reuptake inhibitory activity
WO2013006408A1 (en) Compounds and methods
CA2598536A1 (en) Oxyindole derivatives as 5ht4 receptor agonists
US20230114241A1 (en) Methods of treating epilepsy using the same
AU2009216149B2 (en) Amide derivative and pharmaceutical composition containing the same
BR112018000065B1 (pt) Compostos de aril sulfonamida como inibidores de anidrase carbônica, composição farmacêutica compreendendo os ditos compostos e usos terapêuticos dos mesmos no tratamento de câncer

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU