EA019334B1 - Способы и композиции для лечения амилоидных заболеваний - Google Patents

Способы и композиции для лечения амилоидных заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA019334B1
EA019334B1 EA200900802A EA200900802A EA019334B1 EA 019334 B1 EA019334 B1 EA 019334B1 EA 200900802 A EA200900802 A EA 200900802A EA 200900802 A EA200900802 A EA 200900802A EA 019334 B1 EA019334 B1 EA 019334B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
amyloid
disease
compound according
alzheimer
subject
Prior art date
Application number
EA200900802A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200900802A1 (ru
Inventor
Ксианки Конг
Дэвид Мигнол
Изабелль Валяд
Ксинфу Ву
Франсин Жерве
Original Assignee
БиЭйчАй ЛИМИТЕД ПАТНЕРШИП
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US10/871,514 external-priority patent/US7414076B2/en
Application filed by БиЭйчАй ЛИМИТЕД ПАТНЕРШИП filed Critical БиЭйчАй ЛИМИТЕД ПАТНЕРШИП
Publication of EA200900802A1 publication Critical patent/EA200900802A1/ru
Publication of EA019334B1 publication Critical patent/EA019334B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/084—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C307/00—Amides of sulfuric acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfate groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C307/02—Monoamides of sulfuric acids or esters thereof, e.g. sulfamic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/13—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/13—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
    • C07C309/14—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton containing amino groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/13—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
    • C07C309/14—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton containing amino groups bound to the carbon skeleton
    • C07C309/15—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton containing amino groups bound to the carbon skeleton the nitrogen atom of at least one of the amino groups being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/45—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
    • C07C309/46—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton having the sulfo groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/63—Esters of sulfonic acids
    • C07C309/64—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/69—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/30—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/31—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups having the sulfur atoms of the sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/32—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups having the sulfur atoms of the sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/30—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/45—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups at least one of the singly-bound nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. N-acylaminosulfonamides
    • C07C311/46—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C335/00—Thioureas, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C335/30—Isothioureas
    • C07C335/32—Isothioureas having sulfur atoms of isothiourea groups bound to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C381/00—Compounds containing carbon and sulfur and having functional groups not covered by groups C07C301/00 - C07C337/00
    • C07C381/02—Thiosulfates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/084—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/088—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/16—Esters of thiophosphoric acids or thiophosphorous acids
    • C07F9/165—Esters of thiophosphoric acids
    • C07F9/1651—Esters of thiophosphoric acids with hydroxyalkyl compounds with further substituents on alkyl
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C07F9/2454—Esteramides the amide moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/2458—Esteramides the amide moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic of aliphatic amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/04—Systems containing only non-condensed rings with a four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
    • C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/18—Systems containing only non-condensed rings with a ring being at least seven-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/10—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being six-membered, e.g. tetraline
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/36—Systems containing two condensed rings the rings having more than two atoms in common
    • C07C2602/42—Systems containing two condensed rings the rings having more than two atoms in common the bicyclo ring system containing seven carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/56—Ring systems containing bridged rings
    • C07C2603/58—Ring systems containing bridged rings containing three rings
    • C07C2603/70—Ring systems containing bridged rings containing three rings containing only six-membered rings
    • C07C2603/74—Adamantanes

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы Vили его фармацевтически приемлемой соли, где заместители и индексы имеют значения, представленные в описании. Описаны способы ингибирования отложения β-амилоида и лечения или предупреждения заболевания или состояния, связанного с амилоидогенными белками или пептидами β-амилоида, фармацевтические композиции и применение соединений изобретения для изготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения амилоидных заболеваний.

Description

Амилоидоз относится к патологическому состоянию, характеризующемуся наличием амилоидных фибрилл. Амилоид является родовым названием, относящимся к группе разнообразных, но специфичных белковых отложений (внутриклеточных или внеклеточных), которые наблюдаются при различных заболеваний. Будучи различными по местонахождению, все амилоидные отложения имеют общие морфологические свойства, окрашиваются специфичными красителями (например, Конго красным) и после окрашивания имеют характерное красно-зелёное двойное лучепреломление в поляризованном свете. Они также имеют общие обычные ультраструктурные признаки и обычные рентгеновские и ИК-спектры.
Заболевания, связанные с амилоидами, могут либо ограничиваться одним органом, либо распространяться на несколько органов. Первый пример называют локализованным амилоидозом, тогда как второй называют системным амилоидозом. Некоторые амилоидные заболевания могут быть идиопатическими, но большинство этих заболеваний проявляются как осложнения предыдущего заболевания. Например, первичный амилоидоз (АЬ амилоид) может появиться без какой-либо другой патологии или может быть последствием дискразии плазматических клеток или множественной миеломы.
Обычно вторичный амилоидоз наблюдается как ассоциированный с хронической инфекцией (такой как туберкулёз) или хроническим воспалением (таким как ревматоидный артрит). Семейная форма вторичного амилоидоза также наблюдается в других типах семейного амилоидоза, например Семейная Средиземноморская Лихорадка (РМР). Этот семейный тип амилоидоза является генетически наследственной и обнаруживается в специфичных популяционных группах. Как при первичном, так и при вторичном амилоидозе отложения обнаруживают в некоторых органах и, следовательно, оба амилоидоза рассматриваются как системные амилоидные заболевания.
Локализованные амилоидозы представляют собой такие заболевания, которые включают систему единичного органа. Различные амилоиды также характеризуются типом белка, присутствующего в отложении. Например, нейродегенеративные заболевания, такие как скрепи, бычий губчатый энцефалит (болезнь коровьего бешенства), болезнь Крейтцфельда-Якоба и т.п., характеризуются появлением и аккумуляцией устойчивой к протеазам формы прионного белка (называемого А8ст или РгР-27). Аналогично, болезнь Альцгеймера, другое нейродегенеративное заболевание, характеризуется нейритными бляшками и нейрофибриллярными клубками. В данном случае амилоидные бляшки, обнаруживаемые в паренхиме и кровеносном сосуде, образуются отложением фибриллярного Αβ амилоидного белка. Другие заболевания, такие как диабет взрослых (диабет типа II), характеризуются локализованной аккумуляцией амилоидных фибрилл в поджелудочной железе.
В случае образования амилоидов отсутствует известная, общепринятая терапия, или лечение, в результате которой происходило бы заметное растворение амилоидных отложений ίη δίΐιι. которая предупреждала бы дальнейшие амилоидные отложения или предупреждала инициирование амилоидного отложения.
Каждый амилоидогенный белок способен претерпевать конформационное изменение и создавать βскладки и образовывать нерастворимые фибриллы, которые могут отлагаться вне или внутри клетки. Все амилоидогенные белки имеют различную аминокислотную последовательность, но одинаковое свойство образовывать фибриллы и связываться с другими элементами, такими как протеогликан, амилоид Р и компонент комплемента. Кроме того, все амилоидогенные белки имеют аминокислотные последовательности, которые, будучи различными, имеют сходство, такое как области, способные связываться с гликозаминогликановым (ОАС) участком протеогликана (называемым сайт связывания ОАС), а также другие области, которые промотируют образование β-складок. Протеогликаны представляют собой макромолекулы различного размера и различной структуры, которые распространены почти по всему организму. Их можно обнаружить в межклеточном компартменте, на поверхности клетки и как часть внеклеточной матрицы. Основная структура всех протеогликанов состоит из ядерного белка и, по меньшей мере, одной, но часто большего числа, полисахаридных цепей (ОАС), соединённых с ядерным белком. Открыто множество различных ОАС, включая хондроитин сульфат, дерматан сульфат, кератан сульфат, гепарин и гиалуронан.
В специфических случаях амилоидные фибриллы, если только они образовались, могут стать токсичными по отношению к окружающим клеткам. Например, показано, что Αβ фибриллы, организованные в виде сенильных бляшек, ассоциируются с мёртвыми нейронными клетками, дистрофическими нейритами, астроцитозом и микроглиозом у больных болезнью Альцгеймера. При испытании ίη νίίτο показано, что олигомерный (растворимый), а также фибриллярный Ав пептид способен инициировать процесс активации микроглии (макрофагов мозга), что объясняет микроглиоз и воспаление мозга, обнаруженные в мозге больных болезнью Альцгеймера. Как олигомерный, так и фибриллярный Ав пептид могут также индуцировать гибель нейронных клеток ίη νίίτο. См., например, М.Р. Ьатрей, с1. А1., Ргос. Ыаб. Асаб. 8с1. И8А 95, 6448- 53 (1998).
Показано, что при другом типе амилоидоза, наблюдаемом у больных диабетом типа II, амилоидогенный белок IΑРР, если организован в олигомерные формы или в фибриллы, индуцирует токсичность островковых β-клеток ίη νίίτο. Следовательно, появление IΑРР фибрилл в поджелудочной железе боль
- 1 019334 ных диабетом типа II способствует утрате островковых β-клеток (клеток Лангерганса) и дисфункции органа, которая может привести к инсулинемии.
Другой тип амилоидоза связан с β2 микроглобулином и встречается у больных, проходящих длительный курс гемодиализа. У пациентов, проходящих продолжительный курс гемодиализа, появляются фибриллы из в2-микроглобулина в запястном туннеле и в богатых коллагеном тканях в некоторых суставах. Это вызывает сильные боли, тугоподвижность и опухание суставов.
Амилоидоз также характерен для болезни Альцгеймера. Болезнь Альцгеймера является заболеванием, разрушающим мозг, которое приводит к прогрессирующей потере памяти, ведущей к слабоумию, психической нетрудоспособности и смерти через относительно продолжительное время. В процессе старения популяций в развитых странах число больных болезнью Альцгейпера достигает размера эпидемии.
У людей, страдающих болезнью Альцгеймера, развивается прогрессирующее слабоумие в состоянии зрелости, сопровождающееся тремя основными структурными изменениями в мозге: диффузная гибель нейронов во многих участках мозга; аккумуляция внутриклеточных отложений белка, называемых нейрофибриллярными клубками; и аккумуляция внеклеточных отложений белка, называемых амилоидными или сенильными бляшками, окружённых деформированными нервными окончаниями (дистрофические нейриты) и активированной микроглией (микроглиоз и астроцитоз). Основным составляющим этих амилоидных бляшек является амилоидный β пептид (Ав), белок из 39-43 аминокислот, который образуется расщеплением β-амилоидного белка-предшественника (АРР). Интенсивное исследование проводилось по изучению релевантности Ав отложений при болезни Альцгеймера, см., например, 8е1кое, Ттепбк ίη Се11 Βίοίομν 8, 447-453 (1998). Ав легко образуется при метаболическом процессировании амилоидного белка- предшественника (АРР) в эндоплазматическом ретикулуме (ЕВ), аппарате Гольджи, или в эндосомно- лизосомном метаболическом пути (системе), и, наиболее обычно, секретируется в виде пептида, содержащего 40 (Ав 1-40) или 42 (Ав-42) аминокислот (8е1кое, Аппи. Веу. Се11 Βίο1. 10, 373- 403 (1994)). Роль Ав как основной причины болезни Альцгеймера подтверждается присутствием внеклеточных отложений Ав в сенильных бляшках, характерных для болезни Альцгеймера, повышенным продуцированием Ав в клетках, содержащих мутантные гены, ассоциированные с болезнью Альцгеймера, например, амилоидного белка-предшественника, пресенилина I и пресенилина II; и токсичность растворимого (олигомерного) или фибриллярного Ав в отношении клеток в культуре. См., например, Сегуа15, Еиг. Вюрйатт. Ве\'1е\\·. 40-42 (Аи1итп 2001); Мау, ΌΌΤ, 459-62 (2001). Хотя существует симптоматическое лечение болезни Альцгеймера, в настоящее время это заболевание нельзя предупредить или лечить.
Болезнь Альцгеймера характеризуется диффузными и нейритными бляшками, церебральной ангиопатией и нейрофибриллярными клубками. Полагают, что амилоид бляшек и кровеносных сосудов образуется за счёт отложения нерастворимого Ав амилоидного белка, который можно описать как диффузный или фибриллярный. Полагают также, что как растворимый олигомерный Ав, так и фибриллярный Ав являются нейротоксическими и воспалительными.
Другим типом амилоидоза является церебральная амилоидная ангиопатия (САА). САА представляет собой специфичное отложение амилоидных в-фибрилл на стенках липтоменингеальной и корковой артерий, артериол и вен. Она обычно ассоциируется с болезнью Альцгеймера, синдромом Дауна и нормальным старением, а также с различными семейными состояниями, связанными с ударом или деменцией (см. Етапдюпе е1 а1., Атйо1б: 1. Рто1еш Εο1άίη§ Όίκοτά. 8, 8ирр1.1, 36- 42 (2001)).
Общедоступные в настоящее время методы лечения в-амилоидных заболеваний, почти все, являются лишь симптоматическими, дающими лишь временное или частичное клиническое улучшение. Хотя описаны некоторые фармацевтические агенты, которые предлагают ослабление симптомов, в настоящее время отсутствует комплексная фармакологическая терапия для предупреждения или лечения, например, болезни Альцгеймера.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к применению некоторых соединений для лечения амилоидных заболеваний. В частности, данное изобретение относится к способу лечения или предупреждения амилоидного заболевания у субъекта, заключающемуся во введении субъекту терапевтического количества соединения по изобретению. Изобретение также относится к каждому из новых соединений по изобретению, представленных в данном описании. Среди соединений для применения по изобретению соединения нижеприведённых формул, при введении которых уменьшается или ингибируется образование амилоидных фибрилл, специфичную дисфункцию органов (например, нейродегенерацию) или клеточную токсичность.
Изобретение относится к соединениям формулы V в'5 ϊ
Κ«-(33λ.-Ν—(СНЖ-З---А---В11
О (V)
- 2 019334 где
А обозначает азот или кислород;
К11 обозначает водород, группу, образующую сложный С1-С6алкиловый эфир, -(СН;),.-О. или, если А обозначает азот, то А и К11 вместе образуют остаток природной или неприродной аминокислоты или её метиловый или этиловый сложный эфир;
О обозначает водород, тиазолил, триазолил, имидазолил, бензотиазолил или бензимидазолил;
х обозначает 0, 1, 2, 3 или 4;
η обозначает 3 или 4;
аа обозначает остаток природной или неприродной аминокислоты, присоединенный через его карбонильную группу, причем указанный остаток аминокислоты находится в Ь-конфигурации;
т обозначает 1, 2 или 3;
К14 обозначает водород или или трет-бутилоксикарбонильную защитную группу;
К15 обозначает водород, незамещенный С1-С6алкил, С1-С6алкильную группу, замещенную С6арилом, или С6арил, и их фармацевтически приемлемым солям.
В одном варианте изобретения соединения по данному описанию предупреждают или ингибируют сборку амилоидного белка в нерастворимые фибриллы, которые, ίη νίνο, отлагаются в различных органах, или они способствуют клиренсу ранее образовавшихся отложений или замедляют отложение у пациентов, уже имеющих отложения. В другом варианте изобретения соединение может также предупреждать связывание амилоидного белка, в его растворимой, олигомерной форме или в его фибриллярной форме, с клеточной поверхностью или адгезию этого белка к клеточной поверхности. Ещё в одном варианте изобретения соединение может блокировать вызванные амилоидами клеточную токсичность или активацию макрофага. В другом варианте изобретения соединение может блокировать вызванные амилоидами нейротоксичность или микроглиальную активацию. В другом варианте изобретения соединение защищает клетки от вызванной амилоидом цитотоксичности островковых В- клеток. В другом варианте изобретения соединение может повышать клиренс из конкретного органа, например, мозга, или оно понижает концентрацию амилоидного белка таким образом, в нацеленном органе предупреждается образование фибрилл.
Соединения по изобретению можно применять терапевтически или профилактически для лечения заболеваний, ассоциированных с образованием, агрегацией или отложением амилоидных фибрилл. Соединения по изобретению могут действовать, облегчая течение амилоидного заболевания, по любому из приведённых ниже механизмов (предполагается, что этот перечень является иллюстративным и не лимитирующим): замедление скорости образования или отложения амилоидных фибрилл; уменьшение степени амилоидного отложения; ингибирование, уменьшение или предупреждение образования амилоидных фибрилл; ингибирование нейродегенерации или клеточной токсичности, вызванной амилоидом; ингибирование воспаления, индуцированного амилоидом; повышение клиренса амилоида; или содействие расщеплению (разрушению) амилоидного белка до его объединения в фибриллы.
Соединения по изобретению можно применять терапевтически или профилактически для лечения заболеваний, ассоциированных с образованием, агрегацией или отложением фибрилл β-амилоида. Соединения по изобретению могут действовать, облегчая течение заболевания, связанного с β-амилоидом, по любому из приведённых ниже механизмов (предполагается, что этот перечень является иллюстративным и не лимитирующим): замедление скорости образования или отложения β-амилоидных фибрилл; уменьшение степени β-амилоидного отложения; ингибирование, уменьшение или предупреждение образования β-амилоидных фибрилл; ингибирование нейродегенерации или клеточной токсичности, вызванной β-амилоидом; ингибирование воспаления, индуцированного β-амилоидом; повышение клиренса βамилоида из мозга; или содействие расщеплению (разрушению) β-амилоидного белка до его объединения в фибриллы.
Терапевтические соединения по изобретению могут быть эффективны при контроле β-амилоидного отложения либо после их проникновения в мозг (после прохождения через гематоэнцефалический барьер), либо с периферии. При действии с периферии соединение может изменять равновесие Αβ между мозгом и плазмой таким образом, который содействует удалению Αβ из мозга. Оно может также повышать катаболизм нейронного Αβ и изменять скорость удаления из мозга. Увеличение выхода Ар из мозга приводит к понижению концентрации Αβ в мозге и в спинномозговой жидкости (С8Е) и, следовательно, способствует уменьшению Αβ отложения. Или же, соединения, которые проникают в мозг, могли бы регулировать отложение, действуя непосредственно на Αβ в мозге, например, сохраняя его в нефибриллярной форме, способствуя его клиренсу из мозга или замедляя процессирование АРР. Эти соединения могли бы также предупреждать взаимодействие Αβ в мозге с клеточной поверхностью и, следовательно, предупреждать нейротоксичность, нейродегенерацию и воспаление. Они также могут снижать продуцирование Αβ активированной микроглией. Эти соединения могут также повышать разрушение при использовании макрофагов или нейронных клеток.
В одном варианте изобретения применяется способ лечения болезни Альцгеймера (например, спо
- 3 019334 радической формы, семейной или ранней АО). Способ также можно применять профилактически или терапевтически для лечения других случаев β-амилоидного отложения, таких как у больных с синдромом Дауна или у больных церебральной амилоидной ангиопатией (САА) или у больных с наследственной церебральной геморрагией.
В другом варианте изобретения применяют способ лечения лёгкой когнитивной недостаточности. Лёгкая когнитивная недостаточность (МС1) представляет собой состояние, характеризующееся лёгкой, но заметной утратой мыслительного навыка, квалификации, умения, которая необязательно связана с наличием деменции. МС1 часто, но не всегда, предшествует болезни Альцгеймера.
Кроме того, аномальная аккумуляция АРР и β-амилоидного белка в мышечных волокнах влечёт за собой патологию случайного миозита телец включений (1ВМ) (Аккапак е! а1., Ргок. Νη11. Асаб. 8ск И8А 93, 1314-1319 (1996); Аккапак е! а1., Сиггеи! Θρίπίοη ίη Вйеита1йо1оду 7, 486-496 (1995)). Соответственно, соединения по изобретению можно применять профилактически или терапевтически при лечении нарушений, при которых бета-амилоидный белок аномально отлагается в не-нейрологических участках, например, для лечения 1ВМ доставкой соединений к мышечным волокнам.
Кроме того, было показано, что Ар ассоциируется с аномальными внеклеточными отложениями, известными как друзы, которые аккумулируются вдоль базальной поверхности ретинального пигментированного эпителия у субъектов с возрастной дегенерацией жёлтого пятна (АМО). АМО является причиной необратимой потери зрения у людей старшего возраста. Полагают, что отложение Ав может являться важным компонентом локальных воспалительных событий, которые способствуют атрофии ретинального пигментированного эпителия, биогенезу друз и патогенезу АМО (ίοΐιηκοη. е! а1., Ргок. №11. Асаб. 8с1. И8А 99(18), 11830-5 (2002)).
Следовательно, настоящее изобретение относится к применению соединений Формулы V или других по данному описанию для предупреждения или лечения амилоидных заболеваний, включая, среди прочих, болезнь Альцгеймера, церебральную амилоидную ангиопатию, лёгкую когнитивную недостаточность, миозит телец включений, синдром Дауна, дегенерацию жёлтого пятна, а также другие типы амилоидоза, обусловленного 1АРР (например, диабет), первичный (АЬ) амилоидоз, вторичный (АА) амилоидоз и амилоидозы, обусловленные β2 микроглобулином (диализные).
При амилоидозе, связанном с диабетом Типа II (диабетическом) (1АРР), амилоидогенный белок 1АРР индуцирует токсичность островковых β клеток при объединении в олигомерные формы или в фибриллы. Следовательно, появление 1АРР фибрилл в поджелудочной железе больных диабетом типа II способствует утрате островковых β клеток (Лангерганса) и дисфункции органа, которая ведёт к инсулинемии.
Известно, что обычно первичный амилоидоз (АЬ амилоид) ассоциирован с дискразией плазматических клеток и множественной миеломой. Его также можно наблюдать в качестве идиопатического заболевания.
Вторичный (АА) амилоидоз обычно наблюдается в связи с хронической инфекцией (такой как туберкулёз) или хроническим воспалением (таким как ревматоидный артрит).
Семейную форму вторичного амилоидоза наблюдают также при Семейной средиземноморской лихорадке (ЕМЕ).
Амилоидоз, обусловленный β2 микроглобулином (диализный), наблюдают у пациентов при продолжительном курсе гемодиализа. У больных, проходящих длительный курс гемодиализа, появляются фибриллы из β2 микроглобулина в запястном туннеле и в тканях, обогащенных коллагеном, в некоторых суставах. Это вызывает сильные боли, тугоподвижность и опухание суставов. Эти отложения вызваны неспособностью сохранять низкие уровни β2Μ в плазме больных, подвергающихся гемодиализу. Повышенные концентрации белка β2Μ вызывают структурные изменения и могут привести к отложению модифицированного β2Μ в суставах в виде нерастворимых фибрилл.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к применению соединений Формулы V или других по данному описанию для лечения амилоидных заболеваний. Для удобства некоторые определения или термины, на которые есть ссылки в данном описании, представлены ниже.
Амилоидные заболевания
АА (Реактивный) амилоидоз
Обычно АА амилоидоз представляет собой проявление ряда заболеваний, которые вызывают продолжительную реакцию в острой фазе. Такие заболевания включают хронические воспалительные нарушения, хронические местные или системные микробные инфекции и злокачественные новообразования. Наиболее обычную форму реактивного или вторичного (АА) амилоидоза наблюдают в результате продолжительных воспалительных состояний. Например, у больных ревматоидным артритом или семейной средиземноморской лихорадкой (которая является генетическим заболеванием) может развиться АА амилоидоз. Термины АА амилоидоз и вторичный (АА) амилоидоз применяются поочерёдно (взаимозаменяемо).
АА фибриллы обычно состоят из фрагментов размером 8000 Да (АА пептид или белок), образую
- 4 019334 щихся при протеолитическом расщеплении сывороточного амилоидного протеина А (ΑροδΑΑ), циркулирующего аполипопротеина, который синтезируется, главным образом, в гепатоцитах в ответ на такие цитокины, как 1Ь-1, 1Ь-б и ΤΝΡ. Секретированный ΑροδΑΑ образует комплексы с НЭЬ. Отложение АА фибрилл может быть распространено в организме, преимущественно в паренхимных органах. Обычно местом, где находятся отложения, являются почки, также могут быть задеты печень и селезёнка. Отложение также наблюдают в сердце, желудочно- кишечном тракте и коже.
Основные заболевания, которые могут привести к развитию АА амилоидоза, включают, но без ограничения, воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, анкилоизирующий спондилоартрит, псориаз, псориатическая артропатия, синдром Рейтера, болезнь Стилла у взрослых, синдром Бехчета и болезнь Крона. АА отложения также могут возникать в результате хронических микробных инфекций, таких как проказа, туберкулёз, бронхоэктаз, декубитальные язвы, хронический пиелонефрит, остеомиелит и болезнь Уиппла. Некоторые злокачественные новообразования также могут вызвать отложения АА фибриллярного амилоидного белка. Эти злокачественные новообразования включают лимфому Ходжкина, рак почки, рак кишки, лёгкого и мочеполовой системы, базалиому и вилосистоклеточную лейкемию. Другими основными состояниями, которые могут обусловливать АА амилоидоз, являются болезнь Кастльмана и синдром Шнитцлера.
АЬ Амилоидоз (Первичный амилоидоз)
Отложение ΑΒ амилоида обычно связано почти с любой дискразией линии В лимфоцитов, от злокачественного развития плазматических клеток (множественная миелома) до доброкачественной моноклональной гаммапатии. Иногда присутствие амилоидных отложений может быть непосредственным показателем основной дискразии. ΑΒ амилоидоз также подробно описан в Ситгеп! Эгид Татде18, 2004, 5 159-171.
Фибриллы ΑΒ амилоидных отложений состоят из лёгких цепей моноклонального иммуноглобулина или их фрагментов. Более конкретно, фрагменты образованы из Ν-концевого участка лёгкой цепи (каппа или лямбда) и содержат целый вариабельный домен (Уь) или его часть. Отложения встречаются, главным образом, в мезенхимных тканях, вызывая периферическую и автономную нейропатию, туннельный запястный синдром, макроглоссию, рестриктивную кардиомиопатию, артропатию больших суставов, иммунные дискразии, миеломы, а также дискразии неизвестного происхождения. Однако следует отметить, что могут быть затронуты почти все ткани, в особенности внутренние органы, такие как почка, печень, селезёнка и сердце.
Наследственные системные амилоидозы
Существует множество форм наследственного системного амилоидоза. Хотя они являются относительно редко встречающимися состояниями, симптомы у взрослых и характер их наследования (обычно аутосомно-доминантный) приводят к закреплению (устойчивости) таких нарушений в целой популяции. Синдромы вызваны, главным образом, точковыми мутациями в белке-предшественнике, которые приводят к вариантным амилоидогенным пептидам или белкам. В табл. 1 дан состав фибрилл типичных форм таких нарушений.
- 5 019334
Таблица 1. Состав фибрилл типичных амилоидных заболеваний
Фибриллярный пептнд/белок Генетический вариант Клинический синдром
АТТК белок из транстиретина и фрагментов МебО, многие другие Семейная амилоидная полинейропатия (РАР) (Главным образом, периферических нервов)
АТТК. белок из транстиретина и фрагментов ТЬг45, А1а60, 8ег84, Ме1 111, Пе122 Сердечное поражение, преимущественно» без нейропатии,, семейная амилоидная полинейропатия» старческий (сенильный) системный амилоидоз» тендовагинит
Ν- концевой фрагмент аполипопротеина А1 (ароА1) Аг§26 Семейная амилоидная полинейропатия (РАР) (главным образом, периферических нервов)
Ν- концевой фрагмент аполипопротеина А1 (ароА1) Аг§26, ΑτβίΟ, АгрбО и др. Тип Остертага, не- нейропатический (преимущественно, висцеральное поражение)
ААроАП из аполипопротеина АП Семейный амилоидоз
Лизоцим (А1уз) ТЬг56, НЕ67 Тип Остертага, не- нейропатический (преимущественно, висцеральное поражение)
Фрагмент альфа цепи фяброгена Ьеи554, Уа1 526 Краниальная нейропатия с корнеальной дистрофией решётки
Фрагмент гельсолина (А§е1) Авп 187, Туг187 Краниальная нейропатия с корнеальной дистрофией решётки
Фрагмент цистатина С (Асуз) С1и68 Наследственная церебральная геморрагия (церебральная амилоидная ангиопатия)Исландского типа
β-амилоидныи белок (Αβ) из амилоидного белкапредшественника (АРР) О1п693 Наследственная церебральная геморрагия (церебральная амилоидная ангиопатия)Голландского типа
β-амилоидный белок (Αβ) из амилоидного белкапредшественника (АРР) 11е717, РЬе 717,<31у717 Семейная болезнь Альцгеймера
β- амилоидный белок (Αβ) из амилоидного белкапредшественника (АРР), например, ЪРР 695 О1пб18 болезнь Альцгеймера, синдром Дауна, наследственная церебральная геморрагия с амилоидозом, Голландского типа
β-амилондный белок (Αβ) из амилоидного белкапредшественника (АРР) Авп670, Ьеи 671 Семейная деменция- возможно, болезнь Альцгеймера
Прионный белок (РгР, АРгР*с) из белка- предшественника Ргр (инсерт 51- 91) Ьеи!02, Уа1167, Азп 178. Ьуа200 Семейная болезнь Крейтцфельда·* Якоба; синдром Герстмаина- ШтреусслераШейнкера (наследственные губчатые энцефалопатии, прионные заболевания)
АА из сывороточного амилоидного протеина А (АроЗАА) Семейная средиземноморская лихорадка, преимущественно, поражение почек (аутосомно- рецессивная)
АА из сывороточного амилоидного протеина А (АроЗАА) Синдром Макла- Уэльса, нефропатия, глухота, крапивница, боль в конечностях
Неизвестен Кардиомиопатия с устойчивой асистолией предсердий
Неизвестен Кожные отложения (буллёзные, папулёзные, пустулодермальные)
АН амилоидный белок из тяжёлой цепи иммуноглобулина (гамма I) ΑγΙ Амилоидоз, обусловленный миеломой
Аса! амилоидный белок из (про)кальцитонина (Про)кальци- ТОНИН Медуллярные карциномы щитовидной железы
ΑΑΝΡ амилоидный белок из предсердного натриуретического фактора Выделенный предсердный амилоид
Арго из пролактина Пролактиномы
АЬп/Абап из Авп пептида Британская и датская семейная деменция
Данные взяты из Тап 8Υ, Рсруй МВ. Лту1о1бо818. Н181ора1йо1о§у, 25(5), 403-414 (Νον 1994), \νΗΟ/ΐυΐδ №тепс1а1иге 8иЬсотт1йее, №тепс1а1иге о! Лту1о1б апб Лту1о1бо818. Ви11ейп о! 111е \7ог1й Неа1111 Огдаш/аЬоп 1993; 71: 10508; и Метйп1 еЬ а1., С1ш Скет ЬаЬ Меб 2001; 39(11): 1065-75
Данные в табл. 1 приведены в качестве примеров и не претендуют на ограничение объёма изобретения. Например, описано более 40 отдельных точковых мутаций в гене транстиретина, каждая из которых даёт клинически сходные формы семейной амилоидной полинейропатии.
Как правило, любое наследственное амилоидное нарушение может встречаться также в спорадической форме, и как наследственная, так и спорадическая (случайная) форма заболевания имеют одинаковые особенности в том, что касается амилоида. Например, наиболее распространённая форма вторичного АА амилоидоза встречается случайно, например, как результат постоянного воспаления, и не связан с
- 6 019334 семейной средиземноморской лихорадкой. Таким образом, общие сведения, касающиеся наследственных амилоидных нарушений, можно также отнести к спорадическим (случайным) амилоидозам.
Транстиретин (ТТН) представляет собой белок протяжённостью 14 кДа, который иногда называют преальбумин. Он продуцируется печенью и сосудистым сплетением и функционирует в процессе транспорта тироидных гормонов и витамина А.
По меньшей мере 50 вариантных форм белка, каждый из которых характеризуется единственной аминокислотной заменой, ответственны за различные формы семейной амилоидной полинейропатии. Например, замена пролин вместо лейцина в положении 55 приводит, главным образом, к прогрессирующей форме нейропатии; замена лейцина на метионин в положении 111 вызывает тяжёлую кардиопатию у голландских пациентов.
На амилоидных отложениях, выделенных из тканей сердца пациентов с системным амилоидозом, видно, что отложения состоят из гетерогенной смеси ТТН и его фрагментов, в целом называемых АТТН, полноразмерные последовательности которых охарактеризованы. Компоненты АТТВ фибрилл можно извлечь (экстрагировать) из таких бляшек и методами, известными в уровне техники, можно определить их структуру и последовательность (например, Си81ау8оп А., е! а1., ЬаЬога!огу 1пус81. 73: 703-708, 1995; Кате1аш Р., е! а1., ВюсНет. Вюрйуз. Вез. Соттип. 125: 22-628, 1984; Ргаз, М., е! а1., ΡΝΑ8 80: 539-42, 1983).
У людей с точковыми мутациями в молекуле аполипопротеина А1 (например, С1у^Агд26; Тгр^Агд50; Ьеи^Агд60) наблюдается форма амилоидоза (тип ОЦеПад). характеризующаяся отложениями белка аполипопротеина А1 или его фрагментов (АароА1). У этих больных наблюдаются низкие уровни липопротеина высокой плотности (НОЬ) и периферическая нейропатия или почечная недостаточность.
Мутация в альфа цепи фермента лизоцима (например, !1е^>Т11г56 или Азр^Н1з57) лежит в основе другой формы не-нейропатического наследственного амилоида типа Оз!ег1ад, наблюдаемого в английских семьях. В данном случае отлагаются фибриллы мутантного белка лизоцима (А1уз), и у пациентов, как правило, наблюдается недостаточность почечной функции. Этот белок, в отличие от большинства белков, образующих фибриллы, по данному описанию, обычно присутствует в полной (нефрагментированной) форме (Вепзоп М. Ό., е! а1. С1ВА Рйп. 8утр. 199: 104-131, 1996).
Лёгкие цепи иммуноглобулинов имеют тенденцию образовывать агрегаты различной морфологии, включая фибриллярную (например, АЬ амилоидоз и АН амилоидоз), гранулярную (например, болезнь лёгких цепей (БЛЦ, ЬСОП), болезнь тяжёлых цепей (БТЦ, НСЭЭ) и болезнь лёгких-тяжёлых цепей (БЛТЦ, ЕНСЭП)), кристаллическую (например, приобретённый синдром Фаркони) и микротубулярную (например, криоглобулинемия). Образование нерастворимых фибрилл лёгких цепей и тяжёлых цепей иммуноглобулинов и/или их фрагментов является показателем АЬ и АН амилоидоза, соответственно. В АЬ фибриллах лямбда (λ) цепи, такие как λ VI цепи (λ6 цепи), обнаружены в более высоких концентрациях, чем каппа (к) цепи. Мегйш е! а1., С1ш СНет ЬаЬ Мей 39(11): 1065-75 (2001). Амилоидоз тяжёлых цепей (АН) характеризуется агрегатами амилоидных белков гамма цепи 1дС1 подкласса. Επ1ί!ζ е! а1., Ргос Асай δα И8А 87: 6542-46 (1990).
Сравнение амилоидогенных лёгких цепей с неамилоидогенными показало, что первые могут включать замены, которые, по-видимому, дестабилизируют скручивание белка или стимулируют агрегацию. АЬ и БСЭЭ были определены из других амилоидных заболеваний благодаря их относительно малой популяции моноклональных лёгких цепей, которые образуются за счёт неопластического роста продуцирующей антитело В клетки. Как правило, АЬ агрегаты представляют собой хорошо организованные фибриллы лямбда цепей. Агрегаты БСОЭ являются относительно аморфными агрегатами как каппа, так и лямбда цепей, в основном каппа, иногда κίν. Ве11о!й е! а1., 1оигиа1 ок 81гис!ига1 Вю1оду 13: 280-89 (2000). Сравнение амилоидогенных и не- амилоидогенных тяжёлых цепей у пациентов с АН амилоидозом выявило недостающие и/или изменённые компоненты. Εϋ1ΐ!ζ е! а1., Ргос №111 Асай δα И8А 87: 654246 (1990) (патогенные тяжёлые цепи, отличающиеся значительно более низкой молекулярной массой, чем не-амилоидогенные тяжёлые цепи); и 8о1отоп е! а1., Ат I Нета! 45(2) 171-6 (1994) (амилоидогенные тяжёлые цепи, отличающиеся тем, что состоят исключительно из νΗ-Ό участка не-амилоидогенной тяжёлой цепи).
Следовательно, возможные способы обнаружения и мониторинга лечения субъектов с повышенным риском наличия АЬ, ЬСОП, АН и т.п. включают, но без ограничения, иммуноанализ плазмы или мочи на присутствие или пониженное отложение амилоидогенных лёгкой или тяжёлой цепей, например амилоида λ, амилоида к, амилоида к VI, амилоида γ или амилоида γ1.
Амилоидоз мозга
Наиболее часто встречающийся тип амилоида в мозге состоит, главным образом, из Ав пептидных фибрилл, приводящих к деменции, ассоциированной со случайной (не наследственной) болезни Альцгеймера. На самом деле, частота спорадической (случайной) болезни Альцгеймера значительно превышает формы, которые, как показано, являются наследственными. Тем не менее, фибриллярные пептиды, образующие бляшки, у обоих типов очень похожи. Амилоидоз мозга включает такие заболевания, со
- 7 019334 стояния, патологии и другие аномалии структуры или функции мозга, включая его компоненты, причиной которых является амилоид. Областью мозга, поражённой амилоидным заболеванием, может быть строма, включающая сосудистую сеть, или паренхима, включающая функциональные или анатомические области, или их нейроны. Больному необязательно поставлен точный диагноз конкретного определённого амилоидного заболевания. Термин амилоидное заболевание (заболевание, связанное с амилоидом) включает амилоидоз мозга.
β-амилоидный пептид (АР) представляет собой пептид из 39-43 аминокислот, образующийся протеолизом большого белка, известного как бета- амилоидный белок-предшественник (РАРР). Мутации в РАРР вызывают семейные формы болезни Альцгеймера, синдром Дауна, церебральную амилоидную ангиопатию и старческую деменцию, характеризующуюся церебральным отложением бляшек, состоящих из Ав фибрилл и других компонентов, которые более подробно описаны ниже. Известные мутации в АРР, ассоциированные с болезнью Альцгеймера, происходят непосредственно близ сайтов расщепления β или γ секретазой или в Ав. Например, положение 717 - ближайшее к сайту расщепления гаммасекретазой АРР при его процессировании в Ав, а положения 670/671 - ближайшие к сайту расщепления β-секретазой. Мутации в любом из этих остатков могут привести к болезни Альцгеймера, предположительно, за счёт повышение количества формы Ав из 42/43 аминокислот, образующейся из АРР. Семейная форма болезни Альцгеймера составляет только 10% испытуемой популяции. Большинство случаев болезни Альцгеймера являются спорадическими, в которых АРР и Ав не содержат никакой мутации. Структура и последовательность Ав пептидов различной длины общеизвестны в уровне техники. Такие пептиды можно получать методами, известными в технике, или можно выделить из мозга известными методами (например, С1епиег апб \Уоп§. Вюсйет. Вюрйук. Век. Сотт. 129, 885-90 (1984); С1епиег апб \Уоп§. Вюсйет. Вюрйук. Век. Сотт. 122, 1131-35 (1984). Кроме того, различные формы пептидов являются продажными. АРР экспрессируется и конститутивно катаболизируется в большинстве клеток. Повидимому, доминантный катаболитический путь представляет собой расщепление АРР внутри последовательности Ав ферментом, предварительно названным а-секретазой, который приводит к высвобождению растворимого фрагмента эктодомаина, известного как АРРка. Это расщепление мешает образованию Ав пептида. В отличие от этого не-амилоидогенного каскада реакций АРР может также расщепляться ферментами, известными как в- и γ-секретаза, по Ν- и С-концам Ав, соответственно, с последующим выделением Ав во внеклеточное пространство. К настоящему времени ВАСЕ идентифицирован как в-секретаза (Уаккег, е! а1. 8с1еисе 286: 735- 741, 1999), а пресенилины связаны с активностью γ-секретазы (Эе 81гоорег е! а1., №йиге 391, 387-90 (1998)). Ав пептид, содержащий 39-43 аминокислоты, продуцируется при последовательном протеолитическом расщеплении амилоидного белка- предшественника (АРР) в- и γ-секретазами. Хотя преимущественно продуцируется Ав40 форма, 5-7% тотального Ав существует в виде Ав42 (Сарра1 е! а1., 1п!. 1. Вюсйет. Се11 Вю1. 31. 885-89 (1999)).
По-видимому, длина Ав-пептида решающим образом изменяет его биохимические/биофизические свойства. Конкретно, дополнительные две аминокислоты на С-конце Ав42, являясь сильно гидрофобными, по-видимому, повышают предрасположенность Ав42 к агрегации. Например, 1аггей, е! а1. показали, что Ав42 агрегируется очень быстро ш уйго по сравнению с Ав40, это наводит на мысль, что более протяжённые формы Ав могут быть важными патологическими белками, которые участвуют в начальном посеве нейритных бляшек при болезни Альцгеймера (1аггей е! а1., ВюсйетИйу 32, 4693-97 (1993); 1аггей, е! а1., Апп. Ν.Υ. Асаб. 8сг 695, 144-48 (1993)). Эта гипотеза дополнительно подтверждается недавними анализами вклада конкретных форм Ав в генетических семейных формах болезни Альцгеймера (РАО). Например, мутантная форма АРР (АРРУ7171) Лондон, связанная с РАО, селективно повышает продуцирование Ав 42/43 форм по сравнению с Ав 40 (8ιιζιι1<ί е! а1., 8с1епсе 264, 1336-40 (1994)), тогда как мутантная форма АРР Шведский (АРРК670№М671Ь) повышает уровни как Ав40, так и Ав42/43 (Сйгоп е! а1., №йиге 360, 672-674 (1992); Са1 е! а1., 8аепсе 259, 514-16, (1993)). Также наблюдали, что РАОсвязанные мутации в генах пресенилин-1 (Р81) или пресенилин-2 (Р82) приводит к селективному повышению продуцирования Ав42/43, но не Ав40 (Вогсйе1!, е! а1., №игоп 17, 1005-13 (1996)). Это открытие подтверждено на трансгенных мышиных моделях, экспрессирующих Р8 мутанты, которые демонстрируют селективное увеличение в мозге Ав42 (Вогсйей, см. выше; ϋηΓΓ, е! а1., Nеи^οбедеие^айοи 5(4), 29398 (1996)). Таким образом, основной гипотезой об этиологии болезни Альцгеймера является то, что увеличение концентрации Ав42 в мозге вследствие повышенного продуцирования и выделения Ав42, либо пониженного клиренса (расщепление или клиренс из тканей мозга) - событие, являющееся причиной патологии заболевания.
Многие сайты мутации либо в Ав, либо в АРР гене были идентифицированы и клинически ассоциированы либо с деменцией, либо с церебральной геморрагией.
Типичные САА нарушения включают, но без ограничения, наследственная церебральная геморрагия с амилоидозом исландского типа (НСН^А-Ι); голландский вариант НС'НХУА (НСН^А-О; мутация в Ав); фламандскую мутацию Ав; арктическую мутацию Ав; итальянскую мутацию Ав; мутацию Ав вариант Айова; семейную британскую деменцию; и семейную датскую деменцию. САА также может быть
- 8 019334 спорадическим (случайным).
Применяемые в данном описании термины β амилоид, амилоид-β и т.п., если не указано иначе, относятся к белкам и пептидам β амилоида, амилоидным β белкам- или пептидам-предшественникам, их интермедиатам и модификациям и фрагментам. В частности, Άβ относится к любому пептиду, продуцированному протеолитическим процессированием генного продукта АРР, особенно к пептидам, которые ассоциированы с амилоидными патологиями, включая Άβ1-39, Άβ1-40, Άβ1-41, Άβ1-42 и Άβ1-43. Для удобства номенклатуры Άβ1-42 может в данном описании называться Άβ(1-42) или просто Άβ42 или Άβ42 (и аналогично для любых других амилоидных пептидов, обсуждаемых в данном описании). Применяемые в данном описании термины β амилоид, амилоид-β и πβ являются синонимами.
Если не указано иначе, термин амилоид относится к амилоидогенным белкам, пептидам или их фрагментам, которые могут быть растворимыми (например, мономерными или олигомерными) или нерастворимыми (например, имеющими фибриллярную структуру или находящимися в виде амилоидных бляшек). См, например, М. Р. Ьатрет! е! а1., Ргос. №11. Асаб. 8с1. И8А 95, 6448-53 (1998). Άмилоидоз или амилоидное заболевание или заболевание, связанное с амилоидом относится к патологическому состоянию, отличающемуся присутствием амилоидных волокон. 'Амилоид является родовым термином, относящимся к группе различных, но специфичных белковых отложений (внутриклеточных или внеклеточных), которые наблюдаются при многих различных заболеваниях. Встречаясь в различных местах, все амилоидные отложения имеют общие морфологические свойства, окрашиваются специфичными красителями (например, Конго красным) и после окрашивания имеют характерное красно- зелёное двойное лучепреломление в поляризованном свете. Они также имеют общие обычные ультраструктурные признаки и обычные рентгеновские и ИК-спектры.
Гельсолин является связывающим кальций белком, который связывается с фрагментами и филаментами актина. Мутации в положении 187 (например, Акр^Акп; Акр^Тут) белка приводят к форме наследственного системного амилоидоза, обычно обнаруживаемого у пациентов из Финляндии, а также у выходцев из Голландии и Японии. У поражённых болезнью людей фибриллы, образованные из фрагментов гельсолина (Аде1), обычно состоят из аминокислот 173-243 (карбоксиконцевой фрагмент длиной 68 кДа) и отлагаются в кровеносных сосудах и базальных мембранах, вызывая корнеальную дистрофию и краниальную нейропатию, которая прогрессирует в периферическую нейропатию, дистрофические кожные изменения и отложения в других органах (Капдак, Н., е! а1. Нитап Мо1. Сепе!. 5(9): 1237-1243, 1996).
Другие мутантные белки, такие как мутантная альфа цепь фибриногена (АПЬА) и мутантный цистатин С (Асук), также образуют фибриллы и вызывают характерные наследственные нарушения. Фибриллы АПЬА образуют отложения, характерные для наследственной церебральной амилоидной ангиопатии, обнаруженной в Исландии (1кке1Ьасйег, Наткоп'к Рттар1ек о! 1п!егпа1 Мебюше, МсСта^-НШ, 8ап Етапс1ксо, 1995; Вепкоп е! а1.). Показано, что, по меньшей мере, в нескольких случаях у пациентов с церебральной амилоидной ангиопатией (СЛЛ) имеются амилоидные фибриллы, содержащие не- мутантную форму цистатина С, связанную с бета-амилоидным белком (Яада1 А., е! а1. Мо1ес. Сйет. №игора1йо1. 33: 63-78, 1998).
В настоящее время считают, что некоторые формы прионного заболевания, которые ранее полагали преимущественно инфекционными по своей природе, являются наследственными, насчитывающими до 15% случаев. (Ва1б\ут. е! а1., в Кекеатсй Абуапсек ш А1/йейпег БЦеаке апб Ее1а!еб БЦотбегк, 1ойп \УПеу апб 8опк, Ыете Уотк, 1995). При наследственных и случайных (спорадических) прионных заболеваниях у больных появляются бляшки, состоящие из аномальных изоформ нормального прионного белка (РтР8с).
Преимущественная мутантная изоформа, РтР8с, также называемая А8ст, отличается от нормального клеточного белка своей резистентностью к расщеплению протеазой, нерастворимостью после экстракции детергентом, отложением во вторичных лизосомах, пост- трансляционным синтезом и высоким содержанием β-складок. Генетическая связь установлена, по меньшей мере, для пяти мутаций, вызывающих болезнь Крейтцфельда-Якоба (СТО), синдром Герстманна-Штреусслера-Шейнкера (С88) и летальную семейную бессонницу (ΕΕΙ). (Ва1бМп, см. выше). Способы извлечения фибриллярных пептидов из фибрилл скрепи, определение последовательностей и получение таких пептидов известны в технике (например, Веекек, М., е! а1. 1. Сеп. У1го1. 76: 2567-76, 1995).
Например, одна форма С88 связана с РгР мутацией в кодоне 102, тогда как С88 конечного мозга отличается мутацией в кодоне 117. Мутации в кодонах 198 и 218 приводят к появлению формы С88, при которой нейритные бляшки, характерные для болезни Άльцгеймера, содержат РгР вместо Άβ пептида. Некоторые формы семейной СГО ассоциируются с мутациями в кодонах 200 и 210; мутации в кодонах 129 и 178 обнаружены как при семейной СГО, так и при ΕΕΙ. (Ва1б\ут. см. выше).
Церебральный амилоидоз (амилоидоз мозга)
Локальное отложение амилоида обычно встречается в мозге, в частности, у людей старшего возраста. Наиболее часто встречающийся тип амилоида в мозге состоит, главным образом, из Άβ-пептидных фибрилл, которые вызывают деменцию или спорадическую (случайную, ненаследственную) болезнь
- 9 019334
Альцгеймера. Наиболее часто встречаются случаи спорадического, а не наследственного церебрального амилоидоза. Например, частота случайной болезни Альцгеймера и случайной САА значительно превышает частоту семейной АО и семейной САА. Кроме того, случайные и семейные формы заболевания нельзя отличить друг от друга (они отличаются только наличием или отсутствием наследственной генетической мутации); например, клинические симптомы и амилоидные бляшки, образующиеся как при случайной, так и при семейной АО, очень похожи, если не идентичны.
Церебральная амилоидная ангиопатия (САА) относится к специфичному отложению амилоидных фибрилл на стенках лептоменингеальной и кортикальной артерий, артериол и вен. Её обычно ассоциируют с болезнью Альцгеймера, синдромом Дауна и обычным старением, а также с рядом семейных состояний, связанных с ударом или деменцией (см. Етапдюпе с1 а1., Атйо16: 1. Ρτοΐβίη Εο1άίη§ Ώίδοτά. 8, 8ирр1. 36-42 (2001)). САА может быть спорадической (случайной) или семейной.
Старческий(сенильный) системный амилоидоз
Амилоидные отложения, либо системные, либо очаговые, увеличиваются с возрастом. Например, фибриллы транстиретина (ТТР) дикого типа обычно обнаруживают в тканях сердца старых людей. Они могут быть бессимптомными, клинически скрытыми, или могут вызывать сердечную недостаточность. Бессимптомные фибриллярные очаговые отложения могут находиться в мозге (Ав), крахмалистом теле простаты (β2 микроглобулин), суставах и семенных пузырьках.
Диализный амилоидоз
Бляшки, состоящие из фибрилл β2 микроглобулина (β2Μ), обычно появляются у пациентов, проходящих длительный курс гемодиализа или перитонеального диализа. β2 микроглобулин представляет собой полипептид длиной 11.8 кДа и является лёгкой цепью антигенов Класса I МНС, которые присутствуют во всех ядерных клетках. В нормальных обстоятельствах β2Μ обычно находится во внеклеточном пространстве, если нет почечной недостаточности, в этом случае β2Μ переносится в ткани, где он полимеризуется с образованием амилоидных фибрилл. Недостаточный клиренс, как в случае почечной недостаточности, приводит к отложению в запястном туннеле и других местах (главным образом, в богатых коллагеном тканях суставов). В отличие от других фибриллярных белков молекулы β2Μ не продуцируются при расщеплении более протяжённого белка-предшественника и обычно присутствуют в нефрагментированной форме в фибриллах. (Вепхоп. см. выше). Показано, что сохранение и аккумуляция этого амилоидного белка-предшественника является основным патогенным процессом, лежащим в основе ΏΡΑ. ΏΡΑ. характеризуется остеоартропатией периферических суставов (например, тугоподвижностью суставов, болью, опуханием и т.д.). Изоформы β2Μ, гликированный β2Μ или полимеры β2Μ в ткани являются наиболее амилоидогенной формой (в противоположность нативному β2Μ). В отличие от других типов амилоидоза β2Μ в основном ограничивается костно-суставными тканями. Висцеральные отложения наблюдаются редко. Изредка эти отложения могут находиться в кровеносных сосудах и других важных анатомических положениях.
Несмотря на усовершенствованные с точки зрения удаления β2Μ методы диализа, у большинства пациентов наблюдаются высокие концентрации β2Μ в плазме, которые остаются значительно выше нормы. Эти повышенные концентрации β2Μ обычно вызывают диабетический амилоидоз (ЭРА) и сопутствующее распространение заболевания, ведущее к смерти.
Островковый амилоидный полипептид и диабет
Г иалиноз островков (амилоидное отложение) описан впервые более века назад как присутствие агрегатов фиброзного белка в поджелудочной железе больных тяжёлой гипергликемией (Ор1е Е. Ь., 1. Ехр. Меб. 5: 397-428, 1901). В настоящее время островковый амилоид, состоящий преимущественно из островкового амилоидного полипептида (ΙΑΡΡ), или амилина, является характерным гистопатологическим маркёром более чем в 90% случаев диабета типа II (также известного как инсулиннезависимый диабет, или ΝΣΟΏΜ). Эти фибриллярные скопления возникают в результате агрегации островкового амилоидного полипептида (БАРР), или амилина, который представляет собой пептид из 37 аминокислот, образующийся из более протяжённого пептида- предшественника, называемого (про)Рго-1АРР.
ΙΑΡΡ секретируется вместе с инсулином в ответ на стимуляторы секреции β-клетками. Этот патологический признак не ассциирован с инсулинзависимым (Типа I) диабетом и является общим (объединяющим) характерным признаком для гетерогенных клинических фенотипов, диагностированных как ΝΓΟΟΜ.
Продолжительные исследования на кошках и иммуноцитохимические исследования на обезьянах показали, что прогрессирующее увеличение островкового амилоида связано с резким уменьшением популяции секретирующих инсулин β-клеток и увеличивает тяжесть заболевания. Поздние трансгенные исследования подтвердили связь между образованием IΑΡΡ бляшек и апоптозом β-клеток и дисфункцией, это показывает, что амилоидное отложение является главным фактором, определяющим повышение тяжести диабета Типа II.
Также было показано, что IΑΡΡ индуцирует токсичность островковых β-клеток ίη νίίτο, указывая, что появление IΑΡΡ фибрилл в поджелудочной железе больных диабетом Типа II и Типа I (пост
- 10 019334 трансплантация островков) может способствовать утрате островковых β-клеток (Лангерганса) и дисфункции органа. У больных диабетом Типа II накопление IΑΡΡ в поджелудочной железе вызывает образование олигомерного ΙΑΡΡ, приводя к созданию ΙΑΡΡ- амилоида в виде нерастворимых отложений, которые в конечном счёте разрушают продуцирующие инсулин β-клетки островков, вызывая истощение и недостаточность β клеток. (ЭДейеттатк, Ρ., Сптсйщ. Ь., Ас1а ΡηΐΠ. М1сгоЫо1. 8сапб., 5сс1. Α. 81: 291- 300, 393; бе Кошпд, ΕΙΡ., е! а1., Э1аЬе1о1од1а 36: 378-384, 1993; и коген/о, Α., е! а1., №1Шге 368: 756-760, 1994). Аккумуляция ΙΑΡΡ в виде фиброзных отложений также может оказывать влияние на обычное отношение про-ΙΑΡΡ к ΙΑΡΡ в плазме, повышая это отношение за счёт попадания (захвата) ΙΑΡΡ в отложения. Уменьшение массы β клеток может проявляться в виде гипергликемии и инсулинемии. Эта потеря массы β- клеток может привести к необходимости лечения инсулином.
Заболевания, вызванные гибелью или недостаточным функционированием конкретного типа или конкретных типов клеток можно лечить трансплантацией пациенту здоровых клеток релевантного типа. Этот метод был использован для лечения больных диабетом Типа Ι. Часто островковые клетки поджелудочной железы донора выращивают ίη У11то перед трансплантацией для того, чтобы использовать их после выделения для лечения, или для того, чтобы уменьшить их иммуногенность. Однако во многих случаях трансплантация островковых клеток не является успешной вследствие гибели трансплантированных клеток. Одной из причин такой малой доли успешных попыток является ΙΑΡΡ, который объединяется в токсические олигомеры. Токсическое действие может возникать вследствие внутриклеточной и внеклеточной аккумуляции фибриллярных олигомеров. Олигомеры ΙΑΡΡ могут образовывать фибриллы и становиться токсическими в отношении клеток ίη У11то. Кроме того, ΙΑΡΡ фибриллы, по-видимому, продолжают расти после трансплатации клеток и вызывают гибель или дисфункцию клеток. Это может происходить даже когда в клетках здорового донора и у получающего трансплантат пациента не наблюдается болезнь, характеризующаяся присутствием фибрилл. Например, соединения по настоящему изобретению можно использовать для получения тканей или клеток для трансплантации по методу, описанному в Международной заявке (РСТ) ЭДО 01/003680.
Соединения по изобретению могут также стабилизировать отношение концентраций ΡιόΙΑΡΡ/ΙΑΡΡ, проинсулин/инсулин и уровни С-пептида. Помимо этого в качестве биологических маркёров эффективности, результатов различных тестов, таких как тест секреции аргинина- инсулина, тест переносимости глюкозы и тесты чувствительности, все могут использоваться в качестве маркёров пониженной массы β-клеток и/или аккумуляции амилоидных отложений. Такой класс лекарственных препаратов можно использовать вместе с другими лекарственными веществами, нацеленными на резистентность к инсулину, продуцирование печёночной глюкозы. Такие соединения могут предупреждать терапию инсулином, сохраняя функцию β-клеток, и могут применяться для сохранения трансплантантов островков.
Амилоидоз гормонального происхождения
Эндокринные органы могут накапливать амилоидные отложения, в особенности у старых людей. Опухоли, секретирующие гормоны, могут также содержать амилоидные бляшки гормонального происхождения, фибриллы которых состоят из полипептидных гормонов, таких как кальцитонин (медуллярный рак щитовидной железы) предсердный натриуретический пептид (выделенный амилоидоз предсердий). Последовательности и структуры этих белков хорошо известны в уровне техники.
Смешанный амилоидоз
Существует множество других форм амилоидного заболевания, которые обычно проявляются как локализованные отложения амилоида. Эти заболевания являются результатом, главным образом, локализованным продуцированием или отсутствием катаболизма конкретных фибриллярных предшественников или предрасположением конкретной ткани (такой как суставная) к фибриллярному отложению. Примеры такого идиопатического отложения включают узелковый ΑΕ амилоид, кожный амилоид, эндокринный амилоид и амилоид, связанный с опухолью. Другие заболевания, связанные с амилоидом, включают заболевания, описанные в табл. 1, такие как семейная амилоидная полинейропатия (ΕΑΡ), старческий (сенильный) системный амилоидоз, тендовагинит, семейный амилоидоз, типа Остертаг, ненейропатический амилоидоз, краниальную нейропатию, наследственную церебральную геморрагию, семейную деменцию, хронический диализ, семейную болезнь Крейтцфельда-Якоба; синдром Герстманна-Штреусслера-Шейнкера, наследственный губчатый энцефалит, прионные заболевания, семейную средиземноморскую лихорадку, синдром Макла-Уэльса, нефропатию, глухоту, крапивницу, боль в конечностях, кожные отложения, множественную миелому, доброкачественную моноклональную гаммапатию, макроглобулинемию, амилоидоз, обусловленный миеломой, медуллярный рак щитовидной железы, изолированный амилоидоз предсердий и диабет.
Соединения по изобретению можно применять терапевтически или профилактически для лечения заболеваний, ассоциированных с образованием, агрегацией или отложением амилоидных фибрилл, вне зависимости от клинической картины. Соединения по изобретению могут облегчать течение амилоидного заболевания по любому из приведённых ниже механизмов, но без ограничения: замедление скорости образования или отложения амилоидных фибрилл; уменьшение степени амилоидного отложения; уменьшение степени амилоидного образования; ингибирование, уменьшение или предупреждение обра
- 11 019334 зования амилоидных фибрилл; ингибирование воспаления, индуцированного амилоидом; повышение клиренса амилоида, например, из мозга; или защита клеток от индуцированной амилоидом (олигомерным или фибриллярным) токсичности.
В одном варианте изобретения соединения по изобретению можно применять терапевтически или профилактически для лечения заболеваний, ассоциированных с образованием, агрегацией или отложением β-амилоидных фибрилл. Соединения по изобретению могут облегчать течение заболевания, связанного с β-амилоидом, по любому из приведённых ниже механизмов (предполагается, что этот перечень является иллюстративным и не лимитирующим): замедление скорости образования или отложения βамилоидных фибрилл; уменьшение степени β-амилоидного отложения; ингибирование, уменьшение или предупреждение образования β-амилоидных фибрилл; ингибирование нейродегенерации или клеточной токсичности, вызванной β-амилоидом; ингибирование воспаления, индуцированного β-амилоидом; повышение клиренса β-амилоида из мозга; или содействие расщеплению (разрушению) Άβ.
Соединения по изобретению могут быть эффективны при контроле β-амилоидного отложения либо после их проникновения в мозг (после прохождения через гематоэнцефалический барьер), либо с периферии. При действии с периферии соединение может изменять равновесие Άβ между мозгом и плазмой таким образом, чтобы содействовать удалению Άβ из мозга. Увеличение выхода Άβ из мозга приводит к понижению концентрации Άβ в мозге и, следовательно, способствует уменьшению Άβ отложения. Кроме того, соединения, которые проникают в мозг, могут регулировать отложение, действуя непосредственно на Άβ в мозге, например, сохраняя его в нефибриллярной форме или способствуя его клиренсу из мозга. Соединения могут замедлять процессирование ΆΡΡ; могут увеличивать расщепление при использовании макрофагов или нейронных клеток; или могут снижать продуцирование Άβ активированной микроглией. Эти соединения могли бы также предупреждать взаимодействие Άβ в мозге с клеточной поверхностью и, следовательно, предупреждать нейротоксичность, нейродегенерацию и воспаление.
В предпочтительном варианте изобретения применяется способ лечения болезни Άльцгеймера (например, спорадической или семейной АО). Способ также можно применять профилактически ли терапевтически для лечения других клинических случаев β-амилоидного отложения, таких как у больных с синдромом Дауна и у больных церебральной амилоидной ангиопатией (СЛЛ) или у больных с наследственной церебральной геморрагией, или больных ранней болезнью Άльцгеймера.
В другом варианте изобретения применяют способ лечения лёгкой когнитивной недостаточности. Лёгкая когнитивная недостаточность (МС1) представляет собой состояние, характеризующееся лёгкой, но заметной утратой мыслительных способностей, которая необязательно связана с наличием деменции. МС1 часто, но не всегда, предшествует болезни Άльцгеймера.
Кроме того, аномальная аккумуляция ΆΡΡ и β-амилоидного белка в мышечных волокнах влечёт за собой патологию случайного миозита телец включений (1ВМ) (Аккапак с1 а1., Ргок. Ναίΐ. Асаб. 8ск И8А 93, 1314-1319 (1996); Аккапак е! а1., Сиггей Θρίηίοη ίη Вйеита1йо1оду 7, 486-496 (1995)). Соответственно, соединения по изобретению можно применять профилактически или терапевтически при лечении нарушений, при которых бета-амилоидный белок аномально отлагается в ненейрологических участках, например, для лечения 1ВМ доставкой соединений к мышечным волокнам.
Кроме того, было показано, что Άβ ассоциируется с аномальными внеклеточными отложениями, известными как друзы, которые аккумулируются вдоль базальной поверхности ретинального пигментированного эпителия у субъектов со старческой дегенерацией жёлтого пятна (АКМО). АКМО является причиной необратимой потери зрения у людей старшего возраста. Полагают, что отложение Άβ может являться важным компонентом локальных воспалительных событий, которые способствуют атрофии ретинального пигментированного эпителия, биогенезу друз и патогенезу АКМО (ίοΐιηκοη. е1 а1., Ргок. N01. Асаб. 8с1. И8А 99(18), 11830-5 (2002)).
В другом варианте изобретение относится к способу лечения или предупреждения амилоидного заболевания у субъекта (предпочтительно, у человека), заключающемуся в введении субъекту терапевтического количества соединения формулы V или иным образом представленного в данном описании, так что уменьшается или ингибируется образование или отложение фибрилл, нейродегенерация или клеточная токсичность. В другом варианте изобретение относится к способу лечения или предупреждения амилоидного заболевания у субъекта (предпочтительно, у человека), заключающемуся в введении субъекту терапевтического количества соединения формулы V или иным образом представленного в данном описании, так что у пациентов с амилоидозом мозга, например, у больных болезнью Άльцгеймера, синдромом Дауна или церебральной амилоидной ангиопатией, когнитивная функция повышается или стабилизируется или дальнейшее ухудшение когнитивной функции предупреждается, замедляется или прекращается. Эти соединения могут также повысить качество повседневной жизни этих субъектов.
Терапевтические соединения по изобретению могут лечить амилоидоз, связанный с диабетом типа II, например, стабилизируя гликемию, предупреждая или уменьшая потерю Р-клеточной массы, снижая или предупреждая гипергликемию вследствие потери β-клеточной массы, и модулируя (например, повышая или стабилизируя) продуцирование инсулина. Соединения по изобретению могут также стабили
- 12 019334 зировать отношение концентраций про-ΙΑΡΡ/ΙΑΡΡ.
Терапевтические соединения по изобретению могут лечить АА (вторичный) амилоидоз и/или ΑΕ (первичный) амилоидоз, стабилизируя почечную функцию, снижая протеинурию, повышая клиренс креатинина (например, по меньшей мере на 50% и более или по меньшей мере на 100% и более), способствуя ремиссии хронической диареи или прибавке в весе (например, на 10% или более) или снижая сывороточный креатинин. Можно также уменьшить висцеральное содержание амилоида, определяемое, например, δΑΡ сцинтиграфией.
Соединения по изобретению
Настоящее изобретение относится, по меньшей мере, частично, к применению некоторых химических соединений (и их фармацевтических препаратов) для предупреждения или лечения амилоидных заболеваний, включая, среди прочего, болезнь Альцгеймера, церебральную амилоидную ангиопатию, миозит телец включений, синдром Дауна, амилоидоз, связанный с диабетом, амилоидоз, связанный с гемодиализом β2Μ), первичный амилоидоз (например, связанный с λ или к цепью), семейную амилоидную полинейропатию (ΤΑΡ), старческий (сенильный) системный амилоидоз, семейный амилоидоз, типа Остертаг не- нейропатический амилоидоз, краниальную нейропатию, наследственную церебральную геморрагию, семейную деменцию, хронический диализ, семейную болезнь Крейтцфельда-Якоба; синдром Герстманна-Штреусслера-Шейнкера, наследственный губчатый энцефалит, прионные заболевания, семейную средиземноморскую лихорадку, синдром Макла-Уэльса, нефропатию, глухоту, крапивницу, боль в конечностях, кардиомиопатию, кожные отложения, множественную миелому, доброкачественную моноклональную гаммапатию, макроглобулинемию, амилоидоз, обусловленный миеломой, медуллярный рак щитовидной железы и изолированный амилоидоз предсердий.
Химические структуры по данному описанию изображены в соответствии с известными в технике стандартами. Поскольку атом, такой как углеродный атом, так как он изображён, имеет недостающую валентность, предполагается, что эта валентность связана с водородом, даже если этот атом водорода не обязательно изображён. Структуры некоторых соединений по данному изобретению включает стереогенные атомы углерода. Следует отдавать отчёт, что изомеры, возникающие вследствие такой асимметрии (например, все энантиомеры и диастереомеры), входят в объём настоящего изобретения, если не указано иначе. Т.е., если не указано иначе, любой хиральный углеродный центр может иметь либо (Я)- или (8)-стереохимию. Такие изомеры можно получать в практически чистом виде классическими методами разделения или с помощью стереохимически контролируемого синтеза. Кроме того, когда это целесообразно, алкены могут иметь либо Е-, либо Ζ-геометрию. Помимо этого, соединения по настоящему изобретению могут существовать в несольватированной, а также в сольватированной с помощью соответствующих растворителей, таких как вода, ТГФ, этанол и т.п., форме. В целом сольватированные формы считаются эквивалентными несольватированным формам для целей настоящего изобретения.
Термин малая молекула относится к соединению, которое, само по себе, не является продуктом генной транскрипции или трансляции (например, белком, РНК или ДНК) и предпочтительно имеет низкую молекулярную массу, например менее примерно 2500 а.е.м.
Термин нуклеофил является обычно общепринятым в технике термином для обозначения химической группы, содержащей реакционноспособную пару электронов, которая реагирует с соединением, замещая уходящую группу (обычно другой нуклеофил), как это обычно происходит в химии алифатических соединений по мономолекулярному (известному как δΝ1) ИЛИ бимолекулярному (δΝ2) механизму. Примеры нуклеофилов включают не несущие заряд соединения, такие как амины, меркаптаны и спирты, и группы, имеющие заряд, такие как алкоксиды, тиолаты, карбанионы и ряд органических и неорганических анионов. Примеры анионных нуклеофилов включают, среди прочих, простые анионы, такие как азид, цианид, тиоцианат, формиат или хлорформиат и бисульфит. Металлоорганические реагенты, такие как медьорганические, цинкорганические, литийорганические соединения, реагенты Гриньяра, еноляты и ацетилиды, которые в соответствующих условиях являются подходящими нуклеофилами.
Аналогично, термин электрофил означает атом, молекулу или ион, способные принимать электронную пару, в частности пару электронов от нуклеофила, как это обычно происходит в реакции электрофильного замещения. В реакции электрофильного замещения электрофил связывается с субстратом с удалением другого электрофила, например, замещение протона на другой электрофил, такой как ион нитрония, в ароматическом субстрате (например, бензоле). Электрофилы включают циклические соединения, такие как эпоксиды, азиридины, эписульфиды, циклические сульфаты, карбонаты, лактоны и лактамы; а нециклические электрофилы включают сульфаты, сульфонаты (например, тозилаты), хлориды, бромиды и йодиды. Электрофил, как правило, может быть насыщенным углеродным атомом (например, метиленовая группа), связанным с уходящей группой; однако электрофил может также быть ненасыщенной группой, такой как альдегидная, кето-, сложноэфирная группа, или их сопряжённый (α,β - ненасыщенный) аналог, который при реакции с нуклеофилом образует аддукт.
Термин уходящая группа, как правило, относится к группе, которая легко вытесняется и замещается нуклеофилом (например, амином, тиолом, спиртом или цианидом). Такие уходящие группы общеизвестны и включают карбоксилаты, Ν-гидроксисукцинимид (ΝΗδ), Ν-гидроксибензотриазол, галоген
- 13 019334 (фтор, хлор, бром или йод), алкоксиды и тиоалкоксиды. Обычно в химическом синтезе используют ряд серосодержащих уходящих групп, включая алкансульфонилоксигруппы (например, С1-С4 алкан, такие как метансульфонилокси, этансульфонилокси, пропансульфонилокси и бутансульфонилоксигруппы) и галогенированные аналоги (например, галогено(С1-С4 алкан)сульфонилоксигруппы, такие как трифторметансульфонилокси (т.е. трифлат), 2,2,2-трихлорэтансульфонилокси, 3,3,3-трибромпропансульфонилокси- и 4,4,4-трифторбутансульфонилоксигруппы), а также арилсульфонилоксигруппы (например, С6-С10 арил, необязательно замещённый 1-3 С1-С4 алкильными группами, такие как бензолсульфонилокси, α-нафтилсульфонилокси, β-нафтилсульфонилокси, п-толуололсульфонилокси- (т.е. тозилаты), 4-трет-бутилбензолсульфонилокси, мезитиленсульфонилокси и 6-этил-а-нафтилсульфонилоксигруппы).
Активированные сложные эфирыможно представить формулой -СОЬ, где Ь обозначает уходящую группу, типичные примеры которой включают Ν-гидроксисульфосукцинимидильную и Νгидроксисукцинимидильную группы: группы, замещённые электроноакцепторными группами (например, пнитро, пентафтор, пентахлор, п-циано или п-трифторметил); и карбоновые кислоты, активированные карбодиимидом с образованием ангидрида или смешанного ангидрида, например -ОСОК или -ОСNКаNΗКЬ, где К3 и КЬ,независимо, обозначают С1-С6 алкильная, С5-С8 алкильная (например, циклогексильная), С1-С6 перфторалкильная или С1-С6 алкоксильная группы. Активированный сложный эфир можно получать ίη δίΐιι или может быть отдельным реагентом. Сульфосукцинимидиловые сложные эфиры, пентафтортиофеноловые сложные эфиры и сульфотетрафторфеноловые сложные эфиры являются предпочтительными активированными сложными эфирами. Однако сложноэфирной уходящей группой может быть, например, замещённая или незамещённая С1-С6 алкильная (такая как метильная, этильная, пропильная, изопропильная, бутильная, изобутильная, вт.-бутильная, трет-бутильная, пентильная или гексильная) группа, или замещённая С6-С14 арильная или гетероциклическая группа, такая как 2-фторэтильная, 2-хлорэтильная, 2бромэтильная, 2,2-дибромэтильная, 2,2,2-трихлорэтильная, 3- фторпропильная, 4-хлорбутильная, метоксиметильная, 1,1-диметил-1-метоксиметильная, этоксиметильная, Ν-пропоксиметильная, изопропоксиметильная, Ν-бутоксиметильная, трет-бутоксиметильная, 1-этоксиэтильная, 1-метил-1-метоксиэтильная, 1-(изопропокси)этильная, 3-метоксипропил-4-метоксибутильная, фторметоксиметильная, 2,2,2трихлорэтоксиметильная, бис(2-хлорэтокси)метильная, 3-фторпропоксиметильная, 4-хлорбутоксиэтильная, дибромметоксиэтильная, 2-хлорэтоксимпропильная, фторметоксибутильная, 2метоксиэтоксиметильная, этоксиметоксиэтильная, метоксиэтоксипропильная, метоксиэтоксибутильная, бензильная, фенетильная, 3-фенилпропильная, 4-фенилбутильная, α-нафтилметильная, β-нафтилметильная, дифенилметильная, трифенилметильная, α-нафтилдифенилметильная, 9-антранилметильная, 4-метилбензильная, 2,4,6-триметилбензильная, 3,4,5- триметилбензильная, 4-метоксибензильная, 4метоксифенилдифенилметильная, 2-нитробензильная, 4-нитробензильная, 4-хлорбензильная, 4бромбензильная, 4-цианобензильная, 4-цианобензилдифенилметильная или бис(2-нитрофенил)метильная группы.
Термин электроноакцепторная группа является общепринятой в уровне техники и описывает способность заместителя оттягивать на себя валентные электроны (например, π (пи) электроны) от соседних атомов, например заместитель является более электроотрицательным, чем соседние атомы, или он оттягивает на себя электроны сильнее, чем атом водорода в том же самом положении. Величина константы Гаммета сигма (а) является общепринятой мерой электронодонорной и электроноакцепторной способности группы, особенно значение сигма пара (ар). См., например, Лбмапсеб Огдаше СйетМгу Ьу 1. Матей, 54Ь Еб., ίοΐιη \Убеу & δοηκ, 1пс., №\ν Уогк, рр.368-75 (2001). Значения константы Гаммета обычно отрицательны для электронодонорных групп (пр=-0,66 для ΝΗ2) и положительны для электроноакцепторных групп (пр=0,78 для нитрогруппы), причём пр указывает на замещение в пара положении. Примеры электроноакцепторных групп включают, среди прочих, нитро, ацильную (кетон), формильную (альдегид), сульфонильную, трифторметильную, галогено (например, хлор или фтор) и цианогруппы. Напротив, электронодонорная группа обозначает заместитель, который отдаёт электроны легче, чем водород, в случае, если он занимает то же самое положение в молекуле. Примеры включают, среди прочих, амино (включая алкиламино и диалкиламино), арильную, алкокси (включая аралкокси), арилокси, меркапто и алкилтио и гидроксильные группы.
Применяемое в данном описании понятие арильные группы включает насыщенные углеводороды, содержащие один или более углеродный атом, включая линейные алкильные группы (например, метальную, этильную, пропильную, бутильную, пентильную, гексильную, гептильную, октильную, нонильную, децильную и т.д.), циклические алкильные группы (или циклоалкильные, или алициклические, или карбоциклические группы) (например, циклопропильную, циклопентильную, циклогексильную, циклогептильную, циклооктильную и т.д.), разветвлённые алкильные группы (изопропильную, трет-бутильную, вт.-бутильную, изобутильную и т.д.) и алкилзамещённые алкильные группы (например, алкилзамещённые циклоалкильные группы и циклоалкилзамещённые алкильные группы). Термин алифатическая группа включает органические частицы (фрагменты), для которых характерны линейные или разветвлённые цепи, содержащие, как правило, 1-22 атома углерода. В сложных структурах цепи
- 14 019334 могут быть разветвлёнными, мостиковыми или сшитыми. Алифатические группы включают алкильные группы, алкенильные группы и алкинильные группы.
В некоторых вариантах изобретения линейная или разветвлённая алкильная группа может содержать в основной цепи30 или меньше углеродных атомов, например, С1-С30 для линейной цепи или С3-С30 для разветвлённой цепи. В некоторых вариантах изобретения линейная или разветвлённая алкильная группа может содержать 20 или менее углеродных атомов в основной цепи, например, С1-С20 для линейной цепи или С3-С20 для разветвлённой цепи, и более предпочтительно, 18 углеродных атомов или менее. Аналогично, предпочтительные циклоалкильные группы содержат 4-10 углеродных атомов в циклической структуре, и, более предпочтительно, 4-7 углеродных атомов в циклической структуре. Термин низший алкил относится к алкильным группам, содержащим 1-6 углеродных атомов в цепи, и к циклоалкильным группам, содержащим 3-6 углеродных атомов в циклической структуре.
Если число углеродных атомов иначе не указано, низший, как в низший алифатический, низший алкил, низший алкенил и т.д., по данному описанию означает, что группа (фрагмент) содержит по меньшей мере один и примерно менее 8 углеродных атомов. В некоторых вариантах изобретения линейная или разветвлённая низшая алкильная группа содержит 6 или менее углеродных атомов в основной цепи (например, С1-С6 для линейной цепи, С3-С6 для разветвлённой цепи), и более предпочтительно 4 или менее. Аналогично, предпочтительные циклоалкильные группы содержат 3-8 углеродных атомов в циклической структуре и более предпочтительно 5-6 углеродных атомов в циклической структуре. Термин С1-С6, как в С1-С6 алкил, означает алкильные группы, содержащие 1-6 углеродных атомов.
Кроме того, если не указано иначе, термин алкил включает как незамещённые алкилы, так и замещённые алкилы, последний термин относится к алкильным группам, содержащие заместители, замещающие один или более атомов водорода при одном или более углеродных атомов в основной цепи углеводорода. Такие заместители могут включать, например, алкенильную, алкинильную, галогено, гидроксильную группы, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилокси, арилоксикарбонилокси, карбоксилатную, алкилкарбонильную, арилкарбонильную, алкоксикарбонильную, аминокарбонильную, алкиламинокарбонильную, диалкиламинокарбонильную, алкилтиокарбонильную, алкоксильную, фосфатную, фосфонато, фосфинато, циано, амино (включая алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино и алкилариламино), ациламино (включая алкилкарбониламино, арилкарбониламино, карбамоил и уреидо), имино, сульфгидрильную, алкилтио, арилтио, тиокарбоксилатную, сульфатную алкилсульфинил, сульфонато, сульфамоил, сульфонамидо, нитро, трифторметильную, циано, азидо, гетероциклическую, алкиларильную или ароматическую (включая гетероароматическую) группы.
Арилалкильная группа обозначает алкильную группу, замещённая арильной группой (например, фенилметильной (т.е. бензильной)). Алкиларильная группа обозначает арильную группу, замещённую алкильной группой (например, п-метилфенильной (т.е. п-толильной)). Термин н-алкил означает линейную (т.е. неразветвлённую) незамещённую алкильную группу. Алкиленовая группа обозначает двухвалентный аналог соответствующей алкильной группы. Термины алкенил и алкинил относятся к ненасыщенным алифатическим группам, аналогичным алкила, но содержащим по меньшей мере одну двойную или тройную углерод-углеродную связь, соответственно. Соответствующие алкенильная и алкинильная группы включают группы, содержащие около 2-12 углеродных атомов, предпочтительно от 2, примерно до 6 углеродных атомов.
Термин ароматическая группа или арильная группа включает ненасыщенные и ароматические циклические углеводороды, а также ненасыщенные и ароматические гетероциклы, содержащие один или более циклов. Арильные группы могут быть также конденсированными или мостиковыми с алициклическими или гетероциклическими циклами, которые не являются ароматическими, так что образуется полициклическая система (например, тетралин). Ариленовая группа является двухвалентным аналогом арильной группы. Арильные группы могут быть также конденсированными или мостиковыми с алициклическими или гетероциклическими циклами, которые не являются ароматическими, так что образуется полициклическая система (например, тетралин).
Обычной углеводородной арильной группой является фенильная группа, имеющая один цикл.
Сульфонатная группа обозначает группу -8О3Н или -8О3 -Х+, связанную с углеродным атомом, где Х+ обозначает катионную противоионную группу. Аналогично, сульфоновая кислота содержит группу -8О3Н или -8О3-Х+, связанную с углеродным атомом, где Х' обозначает катионную группу. Термин сульфат по данному описанию обозначает группу -О8О3Н или -О8О3 -Х+, связанную с углеродным атомом, а сульфокислота обозначает группу -О8О3Н или -О8О3 -Х+, связанную с углеродным атомом, где Х' обозначает катионную группу. Согласно данному изобретению подходящей катионной группой может быть атом водорода. В некоторых случаях катионная группа на самом деле может быть иной группой в терапевтическом соединении, которая положительно заряжена при физиологическом рН, например аминогруппой.
Противоион требуется для сохранения нейтрального общего заряда. Примеры анионных противоионов включают галоген, трифлат, сульфат, нитрат, гидроксид, карбонат, бикарбонат, ацетат, фосфат, оксалат, цианид, алкилкарбоксилат, Ν-гидроксисукцинимид, Ν-гидроксибензотриазол, алкоксид, тиоалкоксид, алкансульфонилокси, галогенированный алкансульфонилокси, арилсульфонилокси, бисульфат,
- 15 019334 оксалат, валерат, олеат, пальмитат, стеарат, лаурат, борат, бензоат, лактат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафтилат мезилат, глюкогептонат или лактобионат. Соединения, содержащие катионную группу, ковалентно связанную с анионной группой, можно называть внутренними солями.
Изобретение относится к соединениям формулы V
В15 о к14—(аа^-Ν—(СН^-З---А---В11
О (V) где
А обозначает азот или кислород;
К11 обозначает водород, группу, образующую сложный С1-С6алкиловый эфир, -(СН2)Х-О, или, если А обозначает азот, то А и К11 вместе образуют остаток природной или неприродной аминокислоты или её метиловый или этиловый сложный эфир;
О обозначает водород, тиазолил, триазолил, имидазолил, бензотиазолил или бензимидазолил;
х обозначает 0, 1, 2, 3 или 4;
η обозначает 3 или 4;
аа обозначает остаток природной или неприродной аминокислоты, присоединенный через его карбонильную группу, причем указанный остаток аминокислоты находится в Ь-конфигурации;
т обозначает 1, 2 или 3;
К14 обозначает водород или трет-бутилоксикарбонильную защитную группу;
К15 обозначает водород, незамещенный С1-С6алкил, С1-С6алкильную группу, замещенную С6арилом, или С6арил, и их фармацевтически приемлемым солям.
В одном варианте изобретения η обозначает 3. В некоторых вариантах изобретения т обозначает 1. В другом варианте изобретения т обозначает 2. В некоторых вариантах изобретения А-К11 обозначает остаток фенилаланина, присоединенный по его аминогруппе. Примеры аминокислотных остатков включают, но без ограничения, остатки лейцина или фенилаланина и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры. Примеры возможных сложных эфиров включают метиловый и этиловый. В другом варианте изобретения т обозначает 1. Примеры аа включают остатки природных и неприродных аминокислот, таких как фенилаланин, глицин и лейцин.
В другом варианте изобретения (аа)т обозначает рНе-рНе или её сложный эфир.
В некоторых вариантах изобретения К15 обозначает водород или С1-С6алкил.
Термин неприродная аминокислота относится к любому производному природной аминокислоты, включая Ό формы, и производным а и β-аминокислот. Отмечают, что некоторые аминокислоты, например гидроксипролин, которые классифицируются как неприродные аминокислоты по данному описанию, можно найти в природе в определённом организме или конкретном белке. Аминокислоты со многими различными защитными группами, пригодные для непосредственного применения в твердофазном синтезе пептидов, выпускаются промышленностью. Помимо двадцати основных наиболее обычных природных аминокислот, следующие примеры неприродных аминокислот и аминокислотных производных можно применять по изобретению (общепринятые сокращения даны в скобках): β-аланин (β-АЬА), γаминомасляная кислота (САБА), 2-аминомасляная кислота (2-АЬи), а^-дегидро^-аминомасляная кислота (8АИ), 1-аминоциклопропан-1-карбоновая кислота (АСРС), аминоизомасляная кислота (А1Ь), 2аминотиазолин-4-карбоновая кислота, 5-аминовалериановая кислота (5-Ауа), 6-аминогексановая кислота (6-АЬх), 8-аминооктановая кислота (8-Аос), 11-аминоундекановая кислота (11-Аип), 12аминододекановая кислота (12-Λίάο), 2-аминобензойная кислота (2-АЬх), 3- аминобензойная кислота (3АЬх), 4-аминобензойная кислота (4-АЬх), 4-амино-3-гидрокси-6-метилгептановая кислота (Статин, 81а1те, 81а), аминооксиуксусная кислота (Аоа), 2-аминотетралин-2-карбоновая кислота (АТС), 4-амино5-циклогексил-3-гидроксипентановая кислота (АСНРА), пара-аминофенилаланин (4-ИН2-РЬе), бифенилаланин (Βίρ), пара-бромфенилаланин (4-Вг-РЬе), орто-хлорфенилаланин (2-С1-РЬе), метахлорфенилаланин (3-С1-РЬе), пара-хлорфенилаланин (4-С1-РЬе), мета- хлортирозин (3-С1-Туг, парабензоилфенилаланин (Вра), трет-бутилглицин (ТЬС), циклогексилаланин (СЬа), циклогексилглицин (СЬд), 2,3-диаминопропионовая кислота (Орг), 2,4-диаминомасляная кислота (ОЬи), 3,4дихлорфенилаланин (3,4-С12-РЬе), 3,4-дифторфенилаланин (3,4-Е2-РЬе), 3,5-дийодтирозин (3,5-12-Туг), орто-фторфенилаланин (2-Е-РЬе), мета-фторфенилаланин (3-Е-РЬе), пара-фторфенилаланин (4-Е-РЬе), мета-фтортирозин (3-Е-Туг), гомосерин (Нее), гомофенилаланин (НГе), гомотирозин (Н1уг), 5гидрокситриптофан (5-ОН-Тгр), гидроксипролин (Нур), пара-йодфенилаланин (4-1-РЬе), 3-йодтирозин (31-Туг), индолин-2-карбоновая кислота (Ис), изонипекотиновая кислота (Ιηρ), мета-метилтирозин (3-МеТуг), 1-нафтилаланин (1-Ν;·ι1), 2- нафтилаланин (2-Ν;·ι1), пара- нитрофенилаланин (4-ЫО2-РЬе), 3- нитротирозин (3-ЫО2-Туг), норлейцин (Ме), норвалин (Ννα), орнитин (Огп), орто-фосфотирозин (Н2РО3-Туг), октагидроиндол-2-карбоновая кислота (О1с), пеницилламин (Реп), пентафторфенилаланин (Е5-РЬе), фенилглицин (РЬд), пипеколиновая кислота (Р1р), пропаргилглицин (Рга), пироглутаминовая кислота
- 16 019334 (РСЬИ), саркозин (8аг), тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота (Τίο), тиенилаланин и тиазолидин4-карбоновая кислота (тиопролин, Τ11). Кроме того, можно применять Ν-алкилированные аминокислоты, а также аминокислоты с аминсодержащими боковыми цепями (такие как Ьук и Огп), в которых амин ацилирован или алкилирован. Примеры соединений по изобретению включают, но без ограничения:
и их фармацевтически приемлемые соли.
Изобретение относится как к солям, так и к кислым/основным формам соединений по изобретению. Например, изобретение относится не только к конкретным солям соединений, изображённых в данном описании в виде солей, но изобретение также включает другие фармацевтически приемлемые соли и кислую и/или основную форму соединения. Изобретение относится также к солям соединений, показан ных в данном описании.
Соединения по изобретению представлены также ниже в табл. 2. Таблица 2
п> Структура/названне соединения
Υ Т4-Вос-Ь-РЬе-гомоТау-В-ОЕ(
” О
Ζ 1.-РЬстомоТау-1.-РЬе-ОЕ1 гидрохлорид О но сг
АА Ь- (Λ'- Вос)- РЬе- (3- аминопропан-1-сульфонил)- Ь- РЬе, натриевая соль <АО 0 н 0 Ή
АВ Вос)- РЬе-(3- аминопропан-1- сульфонил)- Ь- РЬе, метиловый эфир О НО сг
П) | Структура/названне соединения
1С
10
ю Структура/названне соединения
ΚΝ
Следует отметить, что в вышеприведённой таблице и на протяжении всей заявки, если при атоме не изображены атомы водорода, но атомы водорода требуются или необходимы с химической точки зрения
- 17 019334 для образования устойчивого соединения, то подразумевается, что эти атомы водорода присутствуют в соединении.
В одном варианте данное изобретение не относится к соединениям, описанным в Международных заявках АО 00/64420 и АО 96/28187. В этом варианте изобретение не относится к способам применения соединений, описанных в Международных заявках АО 00/64420 и АО 96/28187, для лечения заболеваний или нарушений, описанных в этих заявках. В другом варианте изобретение относится к способам применения соединений, описанных в Международных заявках АО 00/64420 и АО 96/28187, для способов, описанных в данной заявке, которые не описаны в Международных заявках АО 00/64420 и АО 96/28187. Как Международная заявка АО 00/64420, так и в Международная заявка АО 96/28187 вводятся ссылкой в данное описание во всей полноте.
Следует понимать, что применение любого из соединений по данному описанию или соединений, описанных в заявках, идентифицированных в разделе Родственные заявки, входит в объём настоящего изобретения и, как предполагается, охватывается настоящим изобретением, и каждая из заявок специально (однозначно) вводится в данное описание, по меньшей мере, для этих целей, и, кроме того, специально (однозначно) вводятся для всех других целей.
Субъекты и популяции пациентов
Термин субъект включает живые организмы, в которых может встречаться амилоидоз или которые подвержены амилоидным заболеваниям, например, болезни Альцгеймера, синдрому Дауна, САА, диализный (β2Μ) амилоидоз, вторичный (АА) амилоидоз, первичный (АЬ) амилоидоз, наследственный амилоидоз, диабет и т.д. Примеры субъектов включают человека, цыплят, уток, пекинских уток, гусей, обезьян, оленей, коров, кроликов, овец, коз, собак, кошек, мышей, крыс и их трангенные виды. Введение пролечиваемому субъекту композиций по данному описанию можно осуществлять известными методами в таких дозах и в течение такого времени, которые позволяют эффективно модулировать агрегацию вызванной амилоидом токсичности у субъекта, как далее представлено в данном описании. Эффективное количество терапевтического соединения, необходимое для достижения терапевтического эффекта, может меняться в зависимости от таких факторов как уже имеющееся количество амилоидных отложений в организме больного, возраст, пол, вес субъекта и способность терапевтического соединения модулировать агрегацию амилоида в организме субъекта. Схему приёма лекарственного вещества можно коррелировать таким образом, чтобы вызвать оптимальный терапевтический ответ. Например, можно принимать ежедневно в виде нескольких разделённых доз или, в зависимости от показаний, дозу можно пропорционально уменьшить.
В некоторых вариантах изобретения субъект нуждается в лечении способами по данному изобретению и выбирается для лечения с учётом такой необходимости. Субъекты, нуждающиеся в таком лечении, общеизвестны в уровне техники и включают субъектов, которые определяются как имеющие заболевание или нарушение, с амилоидным отложением или амилоидозом, имеют симптом такого заболевания или нарушения или субъекты с повышенным риском такого заболевания или нарушения, и у которых, на основании диагноза, например, медицинского диагноза, следует ожидать улучшения вследствие терапии (например, излечения, заживления, предупреждения, смягчения, облегчения, лечения, ослабления, положительной динамики или воздействия на заболевание или нарушение, симптом заболевания или нарушение или повышенный риск заболевания или нарушения).
В типичном аспекте изобретения субъектом является человек. Например, субъектом может быть человек старше 30 лет, человек старше 40 лет, человек старше 50 лет, человек старше 60 лет, человек старше 70 лет, человек старше 80 лет, человек старше 85 лет, человек старше 90 лет или человек старше 95 лет. Субъект может быть женщиной, в том числе женщиной в период менопаузы, которая получает гормональную (эстрогенную) заместительную терапию. Субъектом может быть мужчина. В другом варианте изобретения субъект моложе 40 лет.
Субъект может является человеком с повышенным риском заболевания болезнью Альцгеймера, например, будучи старше 40 лет или имея предрасположенность к болезни Альцгеймера. Факторы предрасположенности к болезни Альцгеймера, идентифицированные или предположенные в научной литературе, включают, среди других, генотип, предрасполагающий субъекта к болезни Альцгеймера; экологические факторы, предрасполагающие к болезни Альцгеймера; инфекция вирусными и бактериальными агентами, предрасполагающими к болезни Альцгеймера, в анамнезе; и сосудистые факторы, предрасполагающие субъекта к болезни Альцгеймера. У субъекта также может быть один или более факторов повышенного риска заболевания сердечно-сосудистым заболеванием (например, атеросклероз коронарных артерий, стенокардия и инфаркт миокарда) или церебрально-васкулярным заболеванием (например, атеросклероз интракраниальной или экстракраниальной артерий, удар, обморок и преходящие нарушения мозгового кровообращения), таким как гиперхолестеринемия, гипертензия, диабет, курение, или заболевание коронарной артерии, церебро-васкулярное заболевание и сердечно-сосудистое заболевание в анамнезе или в семейном анамнезе. Обычно гиперхолестеринемию определяют как сывороточную концентрацию тотального холестерина выше примерно 5.2 ммоль/л (около 200 мг/дл).
Полагают, что некоторые генотипы предрасполагают к болезни Альцгеймера. Эти генотипы включают такие как миссенс-мутации в пресенилине-1, пресенилине-2 и амилоидном белке-предшественнике
- 18 019334 (АРР), ассоциированные с болезнью Альцгеймера, и генотипы α-2-макроглобулина и ЬВР-1, которые, как полагают, повышают риск заболевания случайной (спорадической) (поздней) болезнью Альцгеймера. Е. уап Шеп, е1 а1., 1. Ыеиго5С1. 22(21), 9298-304 (2002); 1. 1. Со1о е1 а1., 1. Мо1. Ыеигокск 19(1-2), 37-41 (2002). Другим генетическим фактором риска развития болезни Альцгеймера являются варианты АроЕ, гена, который кодирует аполипопротеин Е (в особенности ароЕ4 генотип), компонент частиц липопротеинов низкой плотности. V. 1. 81г|Цта11ег е1 а1., Аппи. Веу. №игокск 19, 53-77 (1996). Молекулярные механизмы, по которым различные аллели АроЕ меняют вероятность развития болезни Альцгеймера, неизвестны, однако роль АроЕ в метаболизме холестерина согласуется с растущим числом данных, связывающих метаболизм холестерина с болезнью Альцгеймера. Например, постоянное применение лекарственных препаратов, снижающих уровень холестерина, таких как статины, недавно было связано с более низкой частотой болезни Альцгеймера, и было показано, что лекарственные препараты, снижающие уровень холестерина, снижают патологию у АРР трансгенных мышей. Эти и другие исследования наводят на мысль, что холестерин может влиять на процессирование АРР. Было предположено, что АроЕ4 изменяет направленную миграцию Ав (в мозг и из мозга) и способствует удерживанию Ав в мозге. Также предполагалось, что АроЕ4 способствует процессированию АРР с образованием Ав. Полагают, что экологические факторы предрасполагают субъекта к болезни Альцгеймера, включая экспозицию с алюминием, хотя эпидемиологические данные не являются чёткими. Кроме того, более ранняя инфекция некоторыми вирусными или бактериальными агентами, включая вирус герпеса и сЫатуФа рпеитотае, может предрасположить субъекта к болезни Альцгеймера. Наконец, другие факторы, предрасполагающие к болезни Альцгеймера, могут включать факторы риска сердечно-сосудистого или цереброваскулярного заболевания, включая курение сигарет, гипертензию и диабет. Риск болезни Альцгеймера также охватывает любые другие предрасполагающие факторы, не перечисленные выше или уже определённые, и включает повышенный риск болезни Альцгеймера, вызванный травмой головы, лекарственной терапией, диетой или образом жизни.
Способы по настоящему изобретению можно применять для одной или более нижеприведённых целей: для предупреждения болезни Альцгеймера, для лечения болезни Альцгеймера, для ослабления симптомов болезни Альцгеймера или для регуляции продуцирования или уровней амилоидных в (Ав) пептидов. В одном варианте изобретения человек несёт одну или более мутаций в генах, которые кодируют в-амилоидный белок-предшественник, пресенилин-1 или пресенилин-2. В другом варианте изобретения человек несёт ген Аполипопротеин ε4. В другом варианте у человека в семейном анамнезе имеется болезнь Альцгеймера или деменция. В другом варианте изобретения у человека наблюдается трисомия 21 (синдром Дауна). В другом варианте изобретения у субъекта наблюдается нормальный или низкий уровень тотального сывороточного холестерина крови. В другом варианте изобретения уровень тотального сывороточного холестерина крови ниже примерно 200 мг/дл или ниже примерно 180 мг/дл, и он может быть в интервале примерно 150-200 мг/дл. В другом варианте изобретения уровень тотального ЬВЬ холестерина ниже примерно 100 мг/дл или ниже примерно 90 мг/дл и может быть в примерном интервале 30-100 мг/дл. Способы измерения сывороточного тотального холестерина крови и тотального ΕΌΕ холестерина хорошо известны специалистам в данной области техники и, например, могут включать способы, описанные в Международной заявке \УО 99/38498 на стр. 11, вводимой в данное описание в качестве ссылки. Способы определения уровней других стеринов (стеролов, стероидных спиртов) в сыворотке описаны в Н. СуШпд е1 а1., 8егит 81его1к Эиппд 81апо1 Ек1ет Ееебтд т а М11б1у Нурегс1ю1ек1его1етю Рори1айоп, 1. Ыр1б Век. 40: 593- 600 (1999).
В другом варианте изобретения у субъекта наблюдается повышенный уровень сывороточного тотального холестерина крови. В другом варианте изобретения уровень сывороточного тотального холестерина крови составляет по меньшей мере около 200 мг/дл или по меньшей мере около 200 мг/дл и может быть в примерном интервале 200-1000 мг/дл. В другом варианте изобретения у субъекта повышенный уровень тотального ЬВЬ холестерина. В другом варианте изобретения уровень тотального ЬВЬ холестерина выше примерно 100 мг/дл или даже выше примерно 110 мг/дл и может быть в примерном интервале 100-1000 мг/дл.
В другом варианте изобретения человек находится в возрасте по меньшей мере около 40 лет. В другом варианте изобретения человек находится в возрасте по меньшей мере около 60 лет. В другом варианте изобретения человек находится в возрасте по меньшей мере около 70 лет. В другом варианте изобретения человек находится в возрасте по меньшей мере около 80 лет. В другом варианте изобретения человек находится в возрасте по меньшей мере около 85 лет. В другом варианте изобретения человек находится в возрасте примерно 60-100 лет.
Ещё в одном варианте изобретения, как показано, у субъекта имеется риск по показаниям диагностического метода визуализации мозга, например метода измерения активности мозга, отложения бляшек или атрофии мозга.
Ещё в одном варианте изобретения показано, что у субъекта риск, определённый когнитивным тестом, таким как Клинический Рейтинг Деменции (СОВ), Когнитивная Шкала Оценки Болезни Альцгеймера (АЭА8-Сод) или Мини-исследование Ментального Статуса (ММ8Е). У субъекта может быть
- 19 019334 оценка ниже средней по шкале когнитивного теста по сравнению с контрольным для аналогичного возраста и с известными данными. У субъекта также наблюдаться снижение оценки по сравнению с предыдущими оценками этого субъекта в том же самом или аналогичных тестах.
При определении СОЯ субъекта обычно оценивают и определяют показатель в каждой из шести когнитивных и поведенческих категорий: память, ориентация, оценка и разрешение проблем, общественное поведение, дом и увлечения и уход за собой. Оценка может включать информацию о прошлом, предоставленную субъектом, или, предпочтительно, свидетеля (соггоЬогаЮг), который хорошо знает субъекта. Субъекта оценивают и определяют показатели в каждой из этих областей и определяют общий балл (рейтинг) (0, 0,5, 1,0, 2,0 или 3,0). Нормальным считают рейтинг (квалификационная оценка, балл) 0. Рейтинг 1 считают соответствующим лёгкой деменции. Субъект с СОЯ 0,5 характеризуется лёгкой стойкой забывчивостью, частичной памятью о событиях и слабой, доброкачественной забывчивостью. В одном варианте изобретения субъекта оценивают с рейтингом по СОЯ выше 0, выше примерно 0,5, выше примерно 1,0, выше примерно 1,5, выше примерно 2,0, выше примерно 2,5 или примерно 3,0,
Другим тестом является мини-исследование Ментального Статуса (ММЗЕ), описанное Ео181еш М1ш-теп1а1 к1а1е. А ргасйса1 тейюб Гог дгабтд Не содшйуе к1а1е оГ райепГк Тог Не сйшаап. I. РкусЫаГг. Яек. 12: 189-198, 1975. ММ8Е оценивает наличие умственной отсталости (ухудшения). См. также Ео1к1е1п О1££егепйа1 άίηβηοκίκ οΓ бетепйа. Т1е сйшса1 ргосекк РкусЫаГг С1т ΝοΠ1ι Ат. 20: 45-57, 1997. ММ8Е является способом оценки начала деменции и наличия общего ухудшения умственной деятельности (общей умственной отсталости), наблюдаемых при болезни Альцгеймера и при деменции в случае множественного инфаркта. ММ8Е оценивается от 1 до 30. ММ8Е не оценивает основной когнитивный потенциал, как, например, так называемый тест. Вместо этого он проверяет умственные способности. Человек с нормальными умственными способностями получает 30 в ММ8Е объективном, беспристрастном тесте (однако, человек с оценкой 30 в тесте ММ8Е может получить оценку много ниже в тесте). См., например, КаиТег, I. №игоркусЫайу Сйп. №игоксг 10: 55- 63, 1998; Л1/11еипег Όίκ Аккос Όίκοτά. 12: 5457, 1998; ЕШк, Агсй. №иго1. 55:360-365, 1998; МадЫ, ЫГ. РкусйодепаГг. 8: 127-134, 1996: МопкН, АсГа №иго1. Зсапб. 92: 145-150, 1995. В одном варианте изобретения оценки субъекта ниже 30 по ММ8Е, по меньшей мере, один раз. В другом варианте изобретения субъект получает баллы ниже примерно 28, ниже примерно 26, ниже примерно 24, ниже примерно 22, ниже примерно 20, ниже примерно 18, ниже примерно 16, ниже примерно 14, ниже примерно 12, ниже примерно 10, ниже примерно 8, ниже примерно 6, ниже примерно 4, ниже примерно 2 или ниже примерно 1.
Другим способом оценки познавательной способности, в частности болезни Альцгеймера, является Когнитивная Шкала Оценки Болезни Альцгеймера (АОАЗ-Сод) или её вариант, называемый Стандартизованной Шкалой Оценки Болезни Альцгеймера (ЗАОАЗ). Она обычно используется как мера эффективности при клинических испытаниях лекарственных препаратов для лечения болезни Альцгеймера и родственных нарушений, характеризующихся ухудшением когнитивных способностей. ЗАОАЗ и АОАЗ-Сод не предназначены для диагностики болезни Альцгеймера; они применимы для характеристики симптомов деменции являются сравнительно чувствительным индикатором прогрессирования деменции (См., например, Оогайтату, №иго1оду 48: 1511- 1517, 1997; и ЗГапб1кй, I. Ат. бепаГг. Зос. 44: 712-716, 1996). Ежегодное ухудшение у непролеченных пациентов с болезнью Альцгеймера составляет примерно 8 пунктов (баллов) в год (См., например, Яакктб, М Рпт. Саге Сотрапюп I С1т РкусЫайу 1000 Аид; 2(4): 134-138).
АЭАЗ-Сод рассчитана для определения, с помощью анкет, прогрессирования и тяжести когнитивного ухудшения, наблюдаемого при АО, по 70-балльной шкале. Шкала АОАЗ-Сод количественно определяет число неправильных ответов. Соответственно, высокий балл по шкале указывает на более тяжёлый случай когнитивного ухудшения. В одном варианте изобретения у субъекта балл выше 0, выше примерно 5, выше примерно 10, выше примерно 15, выше примерно 20, выше примерно 25, выше примерно 30, выше примерно 35, выше примерно 40, выше примерно 45, выше примерно 50, выше примерно 55, выше примерно 60, выше примерно 65, выше примерно 68 или примерно 70.
В другом варианте изобретения у субъекта не проявляются симптомы болезни Альцгеймера. В другом варианте изобретения субъектом является человек в возрасте по меньшей мере 40 лет, у которого наблюдаются симптомы болезни Альцгеймера. В другом варианте изобретения субъектом является человек в возрасте по меньшей мере 40 лет, у которого наблюдаются один или более симптомов болезни Альцгеймера.
В другом варианте изобретения у субъекта наблюдается лёгкая когнитивная недостаточность. Ещё в одном варианте изобретения рейтинг СОЯ субъекта составляет 0,5. В другом варианте изобретения у субъекта наблюдается ранняя болезнь Альцгеймера. В другом варианте изобретения у субъекта церебральная амилоидная ангиопатия.
Применяя способы по данному изобретению, можно понизить уровни амилоидных β пептидов в плазме или спинномозговой жидкости (СЗЕ) субъекта по сравнению с уровнями перед лечением примерно на 10-100% или даже примерно на 50-100%.
В альтернативном варианте изобретения у субъекта перед лечением может быть повышенный уро
- 20 019334 вень амилоидного А[110 или Λβ.12 пептида в крови и С8Р, согласно способам по настоящему изобретению выше примерно 10 пг/мл или выше примерно 20 пг/мл, или выше примерно 35 пг/мл, или даже выше примерно 40 пг/мл. В другом варианте изобретения повышенный уровень амилоидного Λβ42 пептида может быть в примерном интервале от 30 до 200 пг/мл или даже примерно до 200 пг/мл. Специалист в данной области техники понимает, что по мере прогрессирования болезни Альцгеймера измеряемые уровни амилоидного β пептида в С8Р могут падать по сравнению с повышенными уровнями до начала заболевания. Этот эффект относят за счёт повышенного отложения, т.е. улавливания Ав пептида в мозге вместо нормального клиренса из мозга в С8Р.
В альтернативном варианте изобретения субъект может иметь повышенный уровень амилоидного Ав40 пептида в крови и С8Р перед лечением согласно способам по настоящему изобретению, более примерно 5 пг Ав42/мл или больше, примерно 50 пг Ав40/мл или более примерно, 400 пг/мл. В другом варианте изобретения повышенный уровень амилоидного Ав40 пептида может быть в интервале примерно от 200 пг/мл примерно до 800 пг/мл, даже примерно до 1000 пг/мл.
В другом варианте изобретения субъект может иметь повышенный уровень амилоидного Ав42 пептида в С8Р перед лечением, согласно способам по настоящему изобретению более примерно 5 пг/мл или больше, примерно 10 пг/мл или более, примерно 200 пг/мл или более, примерно 500 пг/мл. В другом варианте изобретения уровень амилоидного β пептида может быть в интервале примерно от 10 до 1000 пг/мл, или даже примерно от 100 до 1000 пг/мл.
В другом варианте изобретения субъект может иметь повышенный уровень амилоидного Ав40 пептида в С8Р перед лечением согласно способам по настоящему изобретению более примерно 10 пг/мл или больше, примерно 50 пг/мл или даже более, примерно 100 пг/мл. В другом варианте изобретения уровень амилоидного β пептида может быть в интервале примерно от 10 до 1000 пг/мл.
Количество амилоидного β пептида в мозге, С8Р, крови или плазме субъекта можно определить твердофазным иммуноферментным анализом (ЕЫ8А) или количественными методами иммуноблоттинга, или количественным δΕΕΟΙ-ТОР, хорошо известными специалистам в данной области техники, такими как раскрываемые 2Бапд, е! а1., I. Вю1. СНет. 274, 8966-72 (1999) и Ζΐκ-πΐβ, е! а1., В1осйет1з!гу 40, 5049- 55 (2001). См. также А. К. VеЬтаз, е! а1., ΟΝΛ Се11 Вю1. 20(11), 713-21 (2001); Р. Ьемтаик, е! а1., Нар1й Соттип. Мазз 8рес!гот. 17(12), 1291-96 (2003); В.М. Аиз!еп, е! а1., I. Рерййе δα. 6, 459-69 (2000); и Пау1з, е! а1., ВюТесЬтдиез 27, 1258-62 (1999). Эти тесты проводят на образцах мозга или крови, которые готовят хорошо известным специалисту в данной области техники способом. Другим примером применяемого способа определения уровней амилоидных Ав пептидов является иммуноанализ с меткой европием (Е1А). См., например, Международную заявку \УО 99/38498 стр.11.
Способы по изобретению можно применять в качестве терапии субъекта с болезнью Альцгеймера или деменцией, или способы по изобретению можно применять в качестве профилактики болезни Альцгеймера или деменции у субъекта, предрасположенного к ним, как в том случае, если субъекта, например, мутация в гене АРР, гене АроЕ или гене пресенилина. У субъекта может быть (или он может быть предрасположен к развитию, или можно подозревать у него) сосудистая деменция, сенильная деменция (старческое слабоумие), лёгкая когнитивная недостаточность или ранняя болезнь Альцгеймера (или он может быть предрасположен к развитию этих заболеваний, или их можно у него подозревать). Помимо болезни Альцгеймера, субъект может иметь другой амилоидное заболевание, такое как церебральная амилоидная ангиопатия, или у субъекта могут быть амилоидные отложения, в особенности амилоидные β-отложения в мозге.
Лечение амилоидных заболеваний
Настоящее изобретение относится к способам применения соединений и их фармацевтических композиций для лечения и предупреждения амилоидных заболеваний. Фармацевтические композиции по изобретению можно применять терапевтически или профилактически для лечения заболеваний, ассоциированных с образованием, агрегацией или отложением амилоидных фибрилл (например, АЬ амилоидного белка (λ или к-цепи, например, амилоида λ, амилоида к, амилоида κίν, амилоидаλVI, амилоида γ, амилоида γ1), Ав, 1АРР, в2М, АА или АН амилоидного белка).
Фармацевтические композиции по изобретению могут действовать, облегчая течение амилоидного заболевания, по любому из приведённых ниже механизмов (предполагается, что этот перечень является иллюстративным, а не лимитирующим): замедление скорости образования или отложения амилоидных фибрилл; уменьшение степени амилоидного отложения; ингибирование, уменьшение или предупреждение образования амилоидных фибрилл; ингибирование нейродегенерации или клеточной токсичности, вызванной амилоидом; ингибирование воспаления, индуцированного амилоидом; повышение клиренса амилоида из мозга; повышение расщепления Ав в мозге; или содействие клиренсу амилоидного белка до его объединения в фибриллы.
Модуляция амилоидного отложения включает как ингибирование по определению выше, так и увеличение амилоидного отложения или образования фибрилл. Таким образом, предполагается, что термин модуляция охватывает предупреждение или прекращение образования или аккумуляции амилоида, ингибирование или замедление дальнейшего образования или аккумуляции амилоида у субъекта,
- 21 019334 больного амилоидозом, например, уже имеющего амилоидное отложение, и уменьшение или реверсию образования или аккумуляции амилоида у субъекта, больного амилоидозом; и увеличение амилоидного отложения, например, повышение скорости или количества амилоидного отложения ίη νινο или ίη νίίτο. Соединения, повышающие содержание амилоида, можно применять на животных моделях амилоидоза, например, для того, чтобы можно было создать амилоидные отложения у животных в течение более короткого периода времени, или увеличить амилоидные отложения в течение нужного периода времени. Соединения, повышающие содержание амилоида, могут применяться при скрининге на соединения, которые ингибируют амилоидоз ίη νινο, например, на животных моделях, в клеточных анализах и в ίη νίίτο анализах на амилоидоз. Такие соединения можно применять, например, для проведения более быстрых и более точных (чувствительных) анализов на соединения. Μодуляцию амилоидного отложения определяют по сравнению с непролеченным субъектом или по сравнению с пролеченным субъектом до лечения.
Ингибированиеамилоидного отложения включает предупреждение или прекращение амилоидного образования, например, фибриллогенеза, клиренс амилоида, например, растворимого Ар, из мозга, ингибирование или замедление дальнейшего отложения амилоида у субъекта с амилоидозом, например, уже имеющего амилоидные отложения, и уменьшение или реверсию амилоидного фибриллогенеза или отложений у субъекта, уже имеющего амилоидоз. Ингибирование амилоидного отложения определяют в сравнении с непролеченным субъектом или в сравнении с пролеченным субъектом перед лечением, или, например, определяют клинически (измеряемым) значимым улучшением, или, например, если у субъекта амилоидоз мозга, например, болезнь Альцгеймера или церебральная амилоидная ангиопатия, стабилизацией когнитивной функции или предупреждением дальнейшего ухудшения когнитивной функции (т.е. предупреждение, замедление или прекращение прогрессирования заболевания) или улучшением показателей, таких как концентрация Λβ или тау в С8Е.
Лечение, терапия субъекта по данному описанию включает применение композиции по данному изобретению в отношении субъекта или введение её субъекту, или применение композиции по данному изобретению в отношении клетки или ткани субъекта или введение её в клетку или ткань субъекта с амилоидным заболеванием или состоянием, с симптомом такого заболевания или состояния или с повышенным риском такого заболевания или состояния (или предрасположенным к такому заболеванию или состоянию), с целью излечения, заживления, смягчения, облегчения, изменения, вылечивания, ослабления, положительной динамики или воздействия на заболевание или нарушение, симптом заболевания или нарушение или повышенный риск заболевания или нарушения (или предрасположенность к заболеванию или нарушению). Термин лечение относится к любому признаку успеха в терапии или к уменьшению интенсивности поражения, патологии или состояния, включая любой объективный или субъективный показатель, такой как ослабление боли; ремиссия; ослабление симптомов, или то, что делает поражение, патологию или состояние более приемлемыми для субъекта (позволяет их легче переносить); замедление скорости ухудшения или прогрессирования заболевания; то, что способствует менее изнурительному последнему мигу дистрофии; улучшение физического или умственного состояния; или, в некоторых ситуациях, предупреждение начала деменции. Лечение или облегчение симптомов можно проводить с учётом объективных или субъективных показателей; включая результаты физического обследования, психиатрической оценки или теста, определяющего познавательные способности, такого как СОК, ММ8Е, АОАЗ-Сюд или другого известного в уровне техники теста. Например, способы по изобретению позволяют успешно лечить деменцию, замедляя скорость или уменьшая степень когнитивного ухудшения.
В одном варианте изобретения термин лечение включает сохранение начального СОК рейтинга субъекта или на нулевом уровне. В другом варианте изобретения термин лечение включает снижение рейтинг СОК субъекта примерно на 0,25 или более, примерно на 0,5 или более, примерно на 1,0 или более, примерно на 1,5 или более, примерно на 2,0 или более, примерно на 2,5 или более, или примерно на 3,0 или более. В другом варианте изобретения термин лечение также включает уменьшение скорости повышения рейтинга СОК субъекта по сравнению с контрольными предыдущими данными. В другом варианте изобретения термин включает уменьшение скорости повышения рейтинга СОК субъекта, примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на 50% или более, примерно, на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более, или примерно на 100% или более, по сравнению с контрольными предыдущими данными повышения или с контрольными данными повышения в отсутствие лечения.
В другом варианте изобретения термин лечение также включает сохранение оценки ММЗЕ субъекта. Термин лечение включает увеличение числа баллов ММЗЕ примерно на 1, примерно на 2, примерно на 3, примерно на 4, примерно на 5, примерно на 7,5, примерно на 10, примерно на 12,5, примерно на 15, примерно на 17,5, примерно на 20 или примерно на 25 баллов. Термин также включает снижение скорости уменьшения оценки ММЗЕ субъекта по сравнению с предыдущими контрольными. В другом варианте изобретения термин включает снижение скорости уменьшения оценки ММЗЕ субъекта, при- 22 019334 мерно на 5% или менее, примерно на 10% или менее, примерно на 20% или менее, примерно на 25% или менее, примерно на 30% или менее, примерно на 40% или менее, примерно на 50% или менее, примерно на 60% или менее, примерно на 70% или менее, примерно на 80% или менее, примерно на 90% или менее, примерно на 100% или менее, по сравнению с контрольными предыдущими данными уменьшения или с контрольными данными уменьшения в отсутствие лечения.
Ещё в одном варианте изобретения термин лечение включает сохранение оценки ΑΌΑδ-Сод субъекта. Термин лечение включает снижение оценки ДЭЛЗ-Сод субъекта, примерно на 1 пункт или более, примерно на 2 пункта или более, примерно на 3 пункта или более, примерно на 4 пункта или более, примерно на 5 пунктов или более, примерно на 7,5 пунктов или более, примерно на 10 пунктов или более, примерно на 12,5 пунктов или более, примерно на 15 пунктов или более, примерно на 17,5 пунктов или более, примерно на 20 пунктов или более, или примерно на 25 пунктов или более. Термин также включает снижение скорости увеличения оценки Л^Α8-Сод субъекта по сравнению с предыдущими контрольными. В другом варианте изобретения термин включает снижение скорости увеличения оценки Л^Α8-Сод субъекта примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на 50% или более, примерно на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более, примерно на 100% или более, по сравнению с контрольными предыдущими данными увеличения или с контрольными данными увеличения в отсутствие лечения.
В другом варианте изобретения термин лечение, например АА или ΑΣ амилоидоза, включает повышение сывороточного креатинина, например увеличение клиренса креатинина на 10% или более, на 20% или более, на 50% или более, на 80% или более, на 90% или более, на 100% или более, на 150% или более, на 200% или более.
Термин лечение может также включать ремиссию нефротического синдрома (N8). Он может также включать ремиссию хронической диареи и/или прибавку в весе, например, на 10% или более, 15% или более или 20% или более.
Без всякой связи с теорией в некоторых аспектах фармацевтические композиции по изобретению содержат соединение, которое предупреждает или ингибирует образование амилоидных фибрилл либо в мозге, либо в другом важном органе (действуя локально, местно), либо в организме в целом (действуя системно). Фармацевтические композиции по изобретению могут эффективно регулировать амилоидное отложение либо после попадания их (композиций) в мозг (после проникновения через гематоэнцефалический барьер), либо с периферии. При действии с периферии соединение в фармацевтической композиции может изменять равновесие амилоидогенного пептида между мозгом и плазмой таким образом, чтобы способствовать удалению (выходу) амилоидогенного пептида из мозга. Соединение может также способствовать клиренсу (или катаболизму) амилоидного белка (растворимого), а затем предупреждать образование и отложение амилоидных фибрилл вследствие уменьшения пула амилоидного белка в конкретном органе, например, печени, селезёнке, поджелудочной железе, почке, суставах, мозге и т.д. Повышение выхода (удаления) амилоидогенного пептида из мозга приводит к уменьшению концентрации амилоидогенного пептида в мозге и, следовательно, способствует уменьшению отложения амилоидогенного пептида. В частности, агент может снижать уровни амилоидных β пептидов, например как Αβ40, так и Αβ42, в С8Е и в плазме, или агент может снижать уровни амилоидных р пептидов, например, Αβ40 и Αβ42, в С8Е и повышать их в плазме. Или соединения, которые проникают в мозг, могут контролировать отложение, действуя непосредственно на амилоидогенный пептид мозга, например, сохраняя его в нефибриллярной форме или содействуя его клиренсу из мозга, увеличивая его расщепление в мозге, или защищая клетки мозга от вредного влияния амилоидогенного пептида. Агент может также вызывать уменьшение концентрации амилоидогенного белка (т.е. в конкретном органе, таким образом, чтобы не достигалась опасная (критичная) концентрация, необходимая для стимуляции образования или отложения амилоидных фибрилл). Кроме того, соединения по данному описанию могут ингибировать или уменьшать взаимодействие между амилоидом и компонентом клеточной поверхности, например, гликозаминогликановой или протеогликановой составляющей базальной мембраны, в результате чего ингибирование или снижение этого взаимодействия вызывает наблюдаемый нейропротективный или клеточнопротективный эффект. Например, соединение может также предупреждать связывание или адгезию амилоидного пептида с клеточной поверхностью, процесс, который, как известно, вызывает поражение или токсичность клеток. Аналогично, соединение может блокировать индуцированную амилоидом клеточную токсичность, или активацию микроглии, или индуцированную амилоидом нейротоксичность, или ингибировать вызванное амилоидом воспаление. Соединение может также снижать скорость или количество агрегации амилоида, образования или отложения фибрилл, или соединение уменьшает степень амилоидного отложения. Вышеприведённые механизмы действия не следует истолковывать как ограничивающие объём изобретения, ввиду того, что изобретение может применяться на практике без такой информации.
Термин амилоидное-β заболевание (или заболевание, связанное с амилоидом-β, эти термины, применяемые в данном описании, являются синонимами) можно применять в отношении лёгкой когни
- 23 019334 тивной недостаточности; сосудистой деменции; ранней болезни Альцгеймера; болезни Альцгеймера, включая случайную (спорадическую, ненаследственную) болезнь Альцгеймера и семейную (наследственную) болезнь Альцгеймера; возрастного ухудшения когнитивных функций; церебральной амилоидной ангиопатии (САА); наследственной церебральной геморрагии; сенильной деменции (старческого слабоумия); синдрома Дауна; миозита телец включений (ΙΒΜ); или возрастной дегенерации жёлтого пятна (ΑΚΌΜ). Согласно некоторым аспектам изобретения амилоид-β представляет собой пептид, содержащий 39-43 аминокислоты, или амилоид-β представляет собой амилоидогенный пептид, продуцируемый при использовании βΛΡΡ.
Лёгкая когнитивная недостаточность (МС1) представляет собой состояние, характеризующееся лёгкой, но заметной утратой мыслительного навыка, квалификации, умения, которая необязательно связана с наличием деменции. МС1 часто, но не всегда, предшествует болезни Альцгеймера. Это диагноз, который наиболее часто ассоциируется с небольшими проблемами памяти, но он может также характеризоваться лёгкой недостаточностью других мыслительных навыков, таких как языковые навыки или навыки планирования. Однако, как правило, у человека с МС1 гораздо более значительные проблемы с памятью, чем можно было бы ожидать от человека в его возрасте или с его образованием. По мере прогрессирования состояния врач может изменить диагноз на Когнитивное расстройство от лёгкого до умеренного, что является общеизвестным в уровне техники.
Церебральная амилоидная ангиопатия (САА) относится к специфичному отложению амилоидных фибрилл на стенках лептомингеальной и кортикальной артерий, артериол и в капиллярах и венах. Её обычно ассоциируют с болезнью Альцгеймера, синдромом Дауна и нормальным старением, а также с различными семейными состояниями, связанными с ударом или деменцией (см. Ртапдюпе, е! а1., Αту1οίά: 1. Ρ^οΐе^η РоШпд Όίκοτά. 8, διιρρί. 1, 3б-42 (2001)). САА может быть случайной или наследственной. Определены и клинически связаны либо с деменцией, либо с церебральной геморрагией многие сайты мутаций либо в Аβ, либо в АРР гене. Примеры САА нарушений включают, но без ограничения, наследственную церебральную геморрагию с амилоидозом Исландского типа (ΗΟΗΆΑ-Ι); Голландский вариант Ηί.Ή\νΑ (ΗΟΗΆΑ-Ό; мутация в Аβ); Фламандскую мутацию Аβ; Арктическую мутацию Аβ; Айова мутацию Аβ; семейную Британскую деменцию. Известно, что церебральная амилоидная ангиопатия связана с церебральной геморрагией (или геморрагическим инсультом).
Кроме того, аномальная аккумуляция АРР и амилоидного-β белка в мышечных волокнах непосредственно связана с патологией случайного миозита телец включений (ΙΒΜ) (ΑδΚηηηδ е! а1., Ρτοκ. Νη!1. Αοηά. 8οί. υδΑ 93, 1314-1319 (199б); Α^πακ е! а1., Ситгеп! Ορίηίοη ш РйеитаПюкду 7, 48б-49б (1995)). Соответственно, соединения по изобретению можно применять профилактически или терапевтически при лечении нарушений, при которых бета-амилоидный белок аномально отлагается в ненейрологических участках, например, для лечения ΙΒΜ доставкой соединений к мышечным волокнам.
Кроме того, было показано, что Аβ ассоциируется с аномальными внеклеточными отложениями, известными как друзы, которые аккумулируются вдоль базальной поверхности ретинального пигментированного эпителия у людей с возрастной дегенерацией жёлтого пятна (ΑΚΜΌ). ΑΚΜΌ является причиной необратимой потери зрения у людей старшего возраста. Полагают, что отложение Аβ может являться важным компонентом локальных воспалительных событий, которые способствуют атрофии ретинального пигментированного эпителия, биогенезу друз и патогенезу ΑΡΜΌ (ΙοΗηκοη е! а1., Ρτοκ. Ν;·ι11. Αοη6. δοί. υδΑ 99(18), 11830-5 (2002)). Следовательно, изобретение относится также к лечению или предупреждению возрастной дегенерации жёлтого пятна.
Данное изобретение относится также к способу предупреждения или ингибирования амилоидного отложения у субъекта. Например, такой способ заключается во введении субъекту терапевтически эффективного количества соединения, способного снижать концентрацию амилоида (например, ΑΒ амилоидного белка (родственного λ или к-цепям, например амилоида λ, амилоида к, амилоида κίν, амилоида λVI, амилоида γ, амилоида γ1), Аβ, ΙΑΡΡ, β2Μ, ΑΑ, АН амилоидного белка или других амилоидов), так что предупреждается или ингибируется аккумуляция или отложение амилоида.
В другом аспекте данное изобретение относится к способу предупреждения, уменьшения или ингибирования амилоидного отложения у субъекта. Например, такой способ заключается во введении субъекту терапевтически эффективного количества соединения, способного ингибировать амилоид (например, ΑΒ амилоидный белок (родственный λ или к-цепям, например амилоид λ, амилоид к, амилоид κΙν, амилоид XVI, амилоид γ, амилоид γ1), Аβ, ΙΑΡΡ, β2Μ, ΑΑ, АН амилоидный белок или другие амилоиды), так что предупреждается, уменьшается или ингибируется это амилоидное отложение.
Данное изобретение относится также к способу модуляции, например, минимизации, поражения клеток, ассоциированного с амилоидом, содержащему стадию введения соединения, способного снижать концентрацию амилоида (например, ΑΒ амилоидного белка (родственного λ или к-цепям, например амилоида λ, амилоида к, амилоида кА амилоида λ VI, амилоида γ, амилоида γ1), Аβ, ΙΑΡΡ, β2Μ, ΑΑ, АН амилоидного белка или другого амилоида), так что модулируется указанное поражение клеток, обусловленное амилоидом. В некоторых аспектах изобретения способы модуляции обусловленного амилоидом поражения клеток содержат стадию введения соединения, способного понизить концентрацию амилоида
- 24 019334 или уменьшить взаимодействие амилоида с клеточной поверхностью.
Данное изобретение также включает способ непосредственного или опосредованного предупреждения гибели клеток в организме субъекта, причём метод заключается во введении субъекту терапевтически эффективного количества соединения, способного предупреждать опосредованные амилоидом (например, АЬ амилоидным белком (родственным λ или κ-цепям, например амилоидом λ, амилоидом к, амилоидом к1У, амилоидом λVI, амилоидом γ, амилоидом γ1), Ав, 1АРР, в2М, АА, АН амилоидным белком или другим амилоидом) события, которые приводят, непосредственно или опосредованно, к гибели клеток.
В одном варианте изобретения применяется способ лечения болезни Альцгеймера (например, случайной или семейной АО). Способ можно также применять профилактически или терапевтически для лечения других клинических случаев амилоидного-Р отложения, например, пациентов с синдромом Дауна и с церебральной амилоидной ангиопатией (САА) или наследственной церебральной геморрагией.
Соединения по изобретению можно применять профилактически или терапевтически при лечении нарушений, при которых амилоидный бета-пептид аномально отлагается в не-нейрологических участках, например, для лечения 1ВМ доставкой соединений к мышечным волокнам, или для лечения дегенерации жёлтого пятна доставкой соединения (соединений) по изобретению к базальной поверхности ретинального пигментированного эпителия.
Настоящее соединение также охватывает способ модуляции обусловленного амилоидом поражения клеток, содержащий стадию введения соединения, способного понизить концентрацию Ав, или способного минимизировать взаимодействие Ав (растворимого олигомерного или фибриллярного) с клеточной поверхностью, так что модулируется указанное обусловленное амилоидом поражение клеток. В некоторых аспектах по изобретению способы модуляции поражения клеток, обусловленного амилоидом, содержат стадию введения соединения, способного понизить концентрацию Ав или ослабить взаимодействие Ав с клеточной поверхностью.
Кроме того, согласно данному изобретению охватывается способ предупреждения гибели клеток в организме субъекта, причём указанный способ заключается во введении субъекту терапевтически эффективного количества соединения, способного предупредить опосредованные Ав события, которые приводят, непосредственно или опосредованно, к гибели клеток.
Настоящее изобретение также включает способ модуляции обусловленного амилоидом поражения клеток, содержащий стадию введения соединения, способного понизить концентрацию 1АРР, или способного минимизировать взаимодействие 1АРР (растворимого олигомерного или фибриллярного) с клеточной поверхностью, так что модулируется указанное обусловленное амилоидом поражение клеток. В некоторых аспектах изобретения способы модуляции поражения клеток, обусловленного амилоидом, содержат стадию введения соединения, способного понизить концентрацию 1АРР или ослабить взаимодействие 1АРР с клеточной поверхностью.
Согласно данному изобретению далее охватывается способ предупреждения гибели клеток в организме субъекта, причём указанный способ заключается во введении субъекту терапевтически эффективное количество соединения, способное предупредить события, опосредованные 1АРР, которые приводят, непосредственно или опосредованно, к гибели клеток.
Данное изобретение также включает способы и композиции, которые применимы при лечении амилоидоза. Способы по изобретению включают введение субъекту терапевтического соединения, которое ингибирует амилоидное отложение. Соответственно, композиции и способы по изобретению применимы для ингибирования амилоидоза при нарушениях, при которых происходит отложение амилоида. Способы по изобретению можно применять терапевтически для лечения амилоидоза или можно применять для профилактики заболеваний у субъектов, предрасположенных к (наследственному) амилоидозу или с идентифицированным повышенным риском развития амилоидоза, например, наследственного, или с идентифицированным повышенным риском развития амилоидоза. В некоторых вариантах изобретение включает способ ингибирования взаимодействия между амилоидогенным белком и компонентом (составляющим) базальной мембраны с целью ингибирования амилоидного отложения. Компонентом базальной мембраны является гликопротеин или протеогликан, предпочтительно, гепаран сульфат протеогликан. Терапевтическое соединение, применяемое в этом способе, может препятствовать связыванию компонента базальной мембраны с нацеленным сайтом связывания на амилоидогенном белке, тем самым ингибируя амилоидное отложение.
В некоторых аспектах способы по изобретению включают введение субъекту терапевтического соединения, которое ингибирует амилоидное отложение. Ингибирование амилоидного отложения включает предупреждение образования амилоида, ингибирование дальнейшего амилоидного образования у субъекта, больного амилоидозом, и уменьшение амилоидных отложений у субъекта, больного амилоидозом. Ингибирование амилоидного отложения определяют по отношению к непролеченному субъекту или по отношению к пролеченному субъекту до лечения. В одном варианте изобретения отложение амилоида ингибируется за счёт ингибирования взаимодействия между амилоидогенным белком и компонентом базальной мембраны. Термин базальная мембрана относится к внеклеточной матрице, содержащей
- 25 019334 гликопротеины и протеогликаны, включая ламинин, коллаген типа ГУ, фибронектин, перлекан, агрин, дерматан сульфат и гепаран сульфат протеогликан (Н8РС). В одном варианте изобретения отложение амилоида ингибируется препятствием взаимодействию между амилоидогенным белком и сульфированным гликозамингликаном, таким как Н8РС, дерматан сульфат, перлекан или аргин сульфат. Известно, что сульфированные гликозаминогликаны присутствуют во всех типах амилоидов (см. 8поте е! а1., ЬаЬ. Гпуек!. 56, 120-23 (1987)), а амилоидное отложение и Н8РС отложение встречаются случайно на животных моделях амилоидоза (см. 8по\у е! а1., ЬаЬ. Гпуек!. 56, 665-75 (1987) и Сегуа1к Р. е! а1. Сигг. Меб Сйет., 3, 361-370 (2003)). Были описаны консенсусные мотивы сайта связывания с Н8РС в амилоидогенных белках (см., например, Сагбт апб ХУейИганЬ Аг1епокс1егок1к 9, 21-32 (1989)).
Способность соединения предупреждать или блокировать образование или отложение амилоида может крыться в его способности связываться с нефибриллярным, растворимым амилоидным белком и сохранять его растворимость.
Способность терапевтического соединения по изобретению ингибировать взаимодействие между амилоидогенным белком и гликопротеиновой или протеогликановой составляющей базальной мембраны можно оценивать анализом связывания т νίΙΐΌ, таким как анализ, описанный в Патенте СШΆ 5164295, содержание которого вводится в данное описание в качестве ссылки. Или же способность соединения связываться с амилоидогенным белком или ингибировать связывание компонента базальной мембраны (например, Н8РС) с амилоидогенным белком (например, Άβ) можно измерять методом масс- спектрометрии, в котором растворимый белок, например Άβ, ГАРР, β2Μ, инкубируют с соединением. Соединение, которое связывается, например, с Άβ, вызывает изменение в масс-спектре белка. Типичные протоколы масс-спектрометрического анализа с применением Άβ и ГАРР можно найти в примерах, результаты приведены в табл. 3. Протокол можно легко модифицировать для корректировки точности данных, например, корректируя количество применяемого белка и/или соединения. Таким образом, например, можно детектировать связывание тестируемых соединений, связывание которых не определяется при применении менее чувствительных протоколов тестирования.
Имеются альтернативные способы скрининга соединений, и опытный практик может легко их применять для получения показателя способности тестируемых соединений связываться, например, с фибриллярным Άβ. Одним из таких анализов скрининга является УФ-спектроскопия. В типичном протоколе тестируемое соединение (20 мкМ) инкубируют с волокнами 50 мкМ Άβ(1-40) в течение 1 ч при 37°С в физиологическом растворе, забуференном Тпк (20 мМ Тпк. 150 мМ ЫаС1, рН 7,4, содержащем 0,01 азида натрия). После инкубации раствор центрифугируют в течение 20 мин при 21000 д для осаждения нитей Άβ(1-40) вместе с любым связанным тестируемым соединением. Количество тестируемого соединения, остающегося в супернатанте, можно затем определить, считывая оптическую плотность. Затем можно рассчитать фракцию связанного тестируемого соединения, сравнивая количество, остающееся в супернатантах после инкубации с Άβ, с количеством, остающимся при контрольных инкубациях, в отсутствие волокон Άβ. В качестве позитивного контроля в каждый анализ можно вводить тиофлавин Т и Конго красный, каждый из которых, как известно, связывается с Άβ волокнами. Перед анализом тестируемое соединение разводят до 40 мкМ, что вдвое больше концентрации в конечном тесте, а затем сканируют на спектрофотометре Не\\!е11 Раскагб 8453 ИУ/УГ8 для определения, достаточно ли оптической плотности для детектирования.
В другом варианте изобретение относится к способу к повышению когнитивной функции у субъекта, страдающего амилоидным заболеванием. Способ включает введение эффективного количества терапевтического соединения по изобретению, так чтобы повышалась когнитивная функция. Когнитивную функцию субъекта можно тестировать, используя способы, известные в уровне техники, такие как Клинический Рейтинг Деменции (СБЕ), мини-исследование Ментального Статуса (ММ8Е) или Когнитивная Шкала Оценки Болезни Άльцгеймера (АБА8-Сод).
В другом варианте изобретение относится к способу лечения субъекта от амилоидного заболевания. Способ включает когнитивное тестирование субъекта перед введением соединения по изобретению, введение эффективного количества соединения по изобретению субъекту и когнитивное тестирование субъекта после введения соединения, так что осуществляется лечение субъекта, если оценка субъекта в указанном когнитивном тесте улучшается.
Термины улучшение, улучшенная (повышение, повышенная) когнитивная (познавательная) способность (функция) употребляются в контексте настоящего изобретения, если существует статистически значимая разница в нормальном состоянии между поведением субъектов, пролеченных способами по изобретению, по сравнению с членами группы, принимавшей плацебо, предыдущими контрольными показателями или между последовательными тестами одного и того же субъекта.
В одном варианте изобретения СБЕ субъекта сохраняет значение 0. В другом варианте изобретения СБЕ субъекта понижается (т.е. улучшается), примерно на 0,25 или более, примерно на 0,5 или более, примерно на 1,0 или более, примерно на 1,5 или более, примерно на 2,0 или более, примерно на 2,5 или более, примерно на 3,0 или более. В другом варианте изобретения скорость повышения рейтинга СБЕ субъекта уменьшается, примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или
- 26 019334 более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на 50% или более, примерно на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более, или примерно на 100% или более, по сравнению с контрольными предыдущими данными повышения или с контрольными данными повышения в отсутствие лечения.
В одном варианте изобретения оценка ММ8Е субъекта сохраняется. Или же оценка ММ8Е может повышаться примерно на 1, примерно на 2, примерно на 3, примерно на 4, примерно на 5, примерно на 7,5, примерно на 10, примерно на 12,5, примерно на 15, примерно на 17,5, примерно на 20 или примерно на 25 баллов. В другом варианте изобретения скорость уменьшения оценки ММ8Е субъекта снижается по сравнению с предыдущими контрольными данными. Например, скорость уменьшения оценки ММ8Е субъекта снижается примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на 50% или более, примерно на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более, примерно на 100% или более, по сравнению с контрольными предыдущими данными уменьшения или с контрольными данными уменьшения в отсутствие лечения.
В одном варианте изобретение относится к способу лечения, замедления или прекращения амилоидного заболевания, ассоциированного с когнитивной недостаточностью (когнитивным расстройством), путём введения субъекту эффективного количества терапевтического соединения, причём ежегодное ухудшение когнитивной функции субъекта по шкале АОА8-Сод составляет менее 8 пунктов в год, менее 6 пунктов в год, менее 5 пунктов в год, менее 4 пунктов в год или менее 3 пунктов в год. Ещё в одном варианте изобретение относится к способу лечения, замедления или прекращения амилоидного заболевания, ассоциированного с когнитивной функцией, путём введения субъекту эффективного количества терапевтического соединения, так чтобы когнитивная функция субъекта по шкале АОА8-Сод оставалась постоянной в течение года. Термин постоянная включает флуктуации (отклонения) не более 2 пунктов. Оставаться постоянным включает флуктуации два пункта или менее в любом направлении. Ещё в одном варианте изобретения когнитивная функция субъекта улучшается на 2 пункта или более в год, на 3 пункта или более в год, на 4 пункта или более в год, на 5 пунктов или более в год, на 6 пунктов или более в год, на 7 пунктов или более в год, на 8 пунктов или более в год, и т.д. по шкале АОА8-Сод. В другом альтернативном варианте скорость увеличения оценки АОА8-Сод субъекта по сравнению с предыдущими контрольными снижается. Например, скорость увеличения оценки АОА8-Сод субъекта может снижаться примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на 50% или более, примерно на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более, примерно на 100% или более, по сравнению с контрольными предыдущими данными увеличения или с контрольными данными увеличения в отсутствие лечения.
В другом варианте изобретения отношение Άβ42:Άβ40 в С8Е или плазме субъекта снижается примерно на 15% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 35% или более, примерно на 40% или более, примерно на 45% или более или примерно на 50% или более. В другом варианте изобретения уровни Άβ в спинномозговой жидкости субъекта снижаются примерно на 15% или более, примерно на 25% или более, примерно на 35% или более, примерно на 45% или более, примерно на 55% или более, примерно на 75% или более или примерно на 90% или более.
Следует понимать, что повсюду, где в данном описании представлены величины и интервалы величин, например, возраст популяций субъектов, доза и уровни в крови, предполагается, что все значения и интервалы, охватываемые этими величинами и интервалами, входят в объём настоящего изобретения. Кроме того, все значения и интервалы могут также быть выше или ниже пределов интервала.
Кроме того, изобретение относится к любому новому химическому соединению по данному описанию. То есть, изобретение относится к новым соединениям и новым способам их применения по данному описанию, которые входят в объём раскрываемой в данном описании формулы изобретения и которые не раскрываются в цитированных патентах и патентных заявках.
Синтез соединений по изобретению
Обычно соединения по настоящему изобретению можно получать способами, проиллюстрированными на общих схемах реакций, например, описанных ниже, или модификациями этих способов, применяя легко доступные исходные, реагенты и обычные методы синтеза. В этих реакциях также возможно использовать варианты, которые известны сами по себе, но не упоминаются здесь. Также включены функциональные и структурные эквиваленты соединений по данному описанию, которые имеют одинаковые общие свойства, при этом получены один или более простых вариантов заместителей, которые не оказывают вредного влияния на основные свойства или полезность соединения.
Соединения по настоящему изобретению можно легко получать по схемам и протоколам синтезов по данному описанию, проиллюстрированным представленными конкретными методиками. Однако специалисты в данной области техники понимают, что можно использовать другие синтетические методы получения соединений по данному изобретению и что нижеприведённые методы даны лишь в качестве
- 27 019334 примера и не являются ограничивающими данное изобретение. См., например, СотргекегМуе Огдашс Τηηδίοπηαΐίοηδ Ьу К. Ьагоск, УСН РиЬНзкегз (1989). Также понятно, что применяется различная стандартная в уровне техники стратегия введения и снятия защитных групп (См., например, РгоЮскуе Огоирз ίη Огдашс Зуйкезщ Ьу Огсспс аЫ АнЬ). Специалисты в релевантной области техники знают, что выбор любой конкретной защитной группы (например, защитной амино или карбоксильной группы) зависит от устойчивости защитного фрагмента в условиях последующих реакций и поймут, какой выбор надо сделать.
Ниже выборочно представлены образцы обширной химической литературы в качестве иллюстрации знаний специалистов в данной области техники: СкетМгу οί 1ке Атию АсШз Ьу ί. Р. ОгеегМет амб М. \νίηίΙζ. ίοΐιη Абеу & 8οηδ, Шс.. Ыеи Υο6< (1961); СотргекегМуе Огдашс Τ^аη8ίο^таί^οη8 Ьу К. Ьагоск, УСН РиЬкзкегз (1989); Τ.Ό. Осаго с1 а1., ί. Меб. Скет. 31, 2193-99 (1988); Е.М. Οοτ6οη, с1 а1., ί. Меб. Скет. 31, 2199- 10 (1988); Ргасбсе οί Рерббе ЗуШкезщ Ьу М. Βο6ηπ51<ν апб А. Вοбаη8ζку, ЗргтдегУег1ад, Хе\е Υο6< (1984); Р^οίесί^νе Огоирз ίη Огдатс ЗугИкезЬ Ьу Τ. Огесте аг1б Р. АнЬ (1991); Азутте1пс ЗугИкезЬ: ί’οηδίπκΐίοη οί Ск1га1 Мο1еси1е5 Изтд Атию Ас1бз Ьу О. М. Сοррο1а амб Н.Р. ЗскизЫ, ίοΐιη А11еу & 8οηδ, Шс., Ыеи Υο6< (1987), Тке Скетка1 ЗугИкезЬ οί Рер(1бе8 Ьу ί. Шпсз, ОхШгб Ьшуег811у Ргезз, Хе\е Υο6< (1991); и Iηί^οбисί^οη οί Рер11бе СкетЫгу Ьу Р. Ό. Вабсу, ίοΐιη А11еу & 8οηδ, Шс., Хеи ΥοΑ (1992).
Синтез соединений по изобретению проводят в растворителе. Подходящими растворителями являются вещества, жидкие при комнатной температуре и при обычном давлении или остающиеся в жидком состоянии при температуре и давлении реакции. Подходящие растворители конкретно не ограничиваются при условии, что они не препятствуют самой реакции (т.е., предпочтительно, они являются инертными растворителями) и они растворяют определённое количество реагентов. В зависимости от обстоятельств растворители могут быть перегнанными или дегазированными. Растворителями могут быть, например, алифатические углеводороды (например, смесь гексанов, гептанов, лигроин, петролейный эфир, циклогексан или метилциклогексан) и галогенированные углеводороды (например, хлористый метилен, хлороформ, четырёххлористый углерод, дихлорэтан, хлорбензол, или дихлорбензол); ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, тетрагидронафталин (тетралин), этилбензол или ксилол); простые эфиры (например, диглим, метил- трет- бутиловый эфир, этил-трет-бутиловый эфир, диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран или метилтетрагидрофураны, диоксан, диметоксиэтан или диметиловый эфир диэтиленгликоля); нитрилы (например, ацетонитрил); кетоны (например, ацетон); сложные эфиры (например, метилацетат или этилацетат) и их смеси.
Как правило, после окончания реакции продукт выделяют из реакционной смеси обычными методами. Например, растворитель удаляют упариванием или фильтрованием, если продуктом является твёрдое вещество, необязательно в вакууме. По завершении реакции к остатку можно добавлять воду, подкислять или подщелачивать водный слой и отфильтровывать, но следует быть осторожными при работе с неустойчивыми в воде веществами. Аналогично, к реакционной смеси можно добавлять воду с гидрофобным растворителем для экстракции нацеленного соединения. Органический слой можно промывать водой, сушить безводным сульфатом магния или сульфатом натрия и упаривать растворитель, получая заданное соединение. Полученное таким образом заданное соединение можно, при необходимости, очищать, например, перекристаллизацией, повторным осаждением (репреципитацией), хроматографией, или превращая в соль добавлением кислоты или основания.
Соединения по изобретению могут поставляться в растворе в подходящем растворителе или не содержащей растворителя форме (например, в лиофилизированном виде). В другом аспекте изобретения соединения и буферы, необходимые для осуществления способов по изобретению, могут быть упакованы в виде набора, необязательно включающего контейнер. Набор может применяться для лечения или предупреждения амилоидного заболевания в соответствии со способами по данному описанию и может содержать инструкции по применению в способе по изобретению. Дополнительные компоненты набора могут включать кислоты, основания, буферизующие агенты, неорганические соли, растворители, антиоксиданты, консерванты или хелаторы металлов. Дополнительные компоненты набора присутствуют в виде чистых композиций или в виде водных растворов или растворов в органических растворителях, которые содержат один или более дополнительных компонентов набора. Кроме того, любой компонент или все компоненты набора, необязательно, содержат буферы.
Термин контейнер включает любую тару для хранения терапевтического соединения. Например, в одном варианте изобретения контейнер представляет собой упаковку, которая содержит соединение. В других вариантах изобретения контейнер не представляет собой упаковку, содержащую вещество, т.е. контейнер представляет собой тару, такую как коробка или склянка (флакон), которая содержит упакованное соединение или неупакованное соединение и инструкции по применению соединения. Кроме того, методы упаковки общеизвестны в уровне техники. Следует понимать, что инструкции по применению терапевтического соединения могут быть в упаковках, содержащих терапевтическое соединение, что помогает при работе с этим соединением.
Фармацевтические препараты
В другом варианте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержа
- 28 019334 щим агенты формулы V по данному описанию для лечения амилоидного заболевания, а также способы производства таких фармацевтических композиций.
Обычно агенты по настоящему изобретению можно получать способами, проиллюстрированными на общих схемах реакций, например, в патентах и патентных заявках, указанных в данном описании, или модификацией этих способов, с применением легкодоступных исходных, реагентов и обычных методов синтеза. В этих реакциях можно также применять варианты, которые известны сами по себе, но не упоминаются в данном описании. Также включены функциональные и структурные эквиваленты агентов по данному описанию, которые имеют одинаковые общие свойства, при этом получены один или более простых вариантов заместителей, которые не оказывают вредного влияния на основные свойства или полезность соединения.
Агенты по изобретению могут поставляться в растворе в подходящем растворителе или в не содержащей растворителя форме (например, в лиофилизированном виде). В другом аспекте изобретения агенты и буферы, необходимые для осуществления способов по изобретению, могут быть упакованы в виде набора. Набор может применяться в соответствии со способами по данному описанию и может содержать инструкции по применению в способе по изобретению. Дополнительные компоненты набора могут включать кислоты, основания, буферизующие агенты, неорганические соли, растворители, антиоксиданты, консерванты или хелаторы металлов. Дополнительные компоненты набора присутствуют в виде чистых композиций или в виде водных растворов или растворов в органических растворителях, которые содержат один или более дополнительных компонентов набора. Кроме того, любой компонент или все компоненты набора, необязательно, содержат буферы.
Терапевтический агент можно также вводить парентерально, интраперитонеально, интраспинально или интрацеребрально. Можно приготовить дисперсии в глицерине, жидкие полиэтиленгликоли и их смеси, и в маслах. В обычных условиях хранения эти препараты могут содержать консервант для предупреждения роста микроорганизмов.
Для введения терапевтического агента другим методом, нежели парентаральный, необходимо покрыть агент материалом для предупреждения его инактивации или ввести агент вместе с этим материалом. Например, терапевтический агент можно вводить субъекту в подходящем носителе, например, в липосомах, или разбавителе. Фармацевтически приемлемые разбавители включают физиологический раствор и водные буферные растворы. Липосомы включают СОЕ эмульсии вода в-масле в воде, а также обычные липосомы (81с)ап с1 а1., 1. №иго1ттипо1. 7,27 (1984)).
Фармацевтические композиции, пригодные для применения в виде инъекций, включают стерильные водные растворы (если они растворимы в воде) или дисперсии и стерильные порошки для немедленного приготовления инъецируемых растворов или дисперсии. Во всех случаях композиция должна быть стерильной и должна быть жидкой до такой степени, чтобы её можно было легко набирать шприцем. Она должна быть устойчивой в условиях производства и хранения и должна сохраняться от загрязнения микроорганизмами, такими как бактерии и грибки.
Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают, без ограничения, любые неиммуногенные фармацевтические адъюванты, пригодные для орального, парентерального, назального, мукозного, трансдермального, интраваскулярного (внутрисосодистого) (IV), внутриартериального (ΙΑ), внутримышечного (ΙΜ) и подкожного (8С) применения, такие как фосфатно-солевой буферный раствор (РБ8).
Носитель может быть растворителем или средой для дисперсии, содержащей, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и т.п.), их подходящие смеси и растительные масла. Соответствующую текучесть можно сохранять, применяя, например, покрытие, такое как лецитин, поддерживая нужный размер частиц в случае дисперсии и применяя поверхностно-активные вещества. Предупреждать действие микроорганизмов можно с помощью различных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тимерозала и т.п. Во многих случаях в состав композиции входят изотонические агенты, например, сахара, хлорид натрия или многоатомные спирты, такие как маннит и сорбит. Пролонгированное всасывание инъецируемых композиций можно осуществить, вводя в композицию агент, который замедляет всасывание, например моностеарат алюминия или желатин.
Стерильные инъецируемые растворы можно приготовить, вводя нужное количество терапевтического агента в подходящий растворитель с одним или с комбинацией перечисленных выше ингредиентов, если требуется, с последующей стерилизацией фильтрованием. Обычно дисперсии готовят, вводя терапевтический агент в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и требуемые другие вышеперечисленные ингредиенты. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных инъецируемых растворов способами приготовления являются вакуумная сушка и лиофилизация, при этом получают порошок активного ингредиента (т.е. терапевтический агент) плюс дополнительный нужный ингредиент из его раствора, предварительно стерилизованного фильтрацией.
Терапевтический агент можно вводить (пер)орально, например, с инертным разбавителем или усвояемым пищевым носителем. Терапевтический агент и другие ингредиенты могут быть также заключены в твёрдую или мягкую желатиновую капсулу, спрессованы в таблетки или вводиться непосредствен
- 29 019334 но в пищу субъекта. Для орального терапевтического применения терапевтический агент можно вводить с эксципиентами и применять в виде таблеток для проглатывания, трансбуккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, облаток и т.п. Процентное содержание терапевтического агента в композициях и препаратах, естественно, может меняться.
Количество терапевтического агента в таких композициях для применения в терапии таково, что получают нужную дозу.
Для простоты применения и однородности дозировки особенно предпочтительно готовить парентеральные композиции в виде стандартных лекарственных форм. Стандартная лекарственная форма по данному описанию относится к физически дискретным единицам, применимым в качестве однократных доз для проходящих лечение людей; причём каждая единица содержит заданное количество терапевтического агента, которое, вместе с требуемым терапевтическим носителем, по расчётам, вызывает нужный терапевтический эффект. Технические требования к стандартным лекарственным формам по изобретению диктуются и непосредственно определяются (зависят от): (а) индивидуальными особенностями (характеристиками) терапевтического агента и конкретным ожидаемым терапевтическим эффектом и б) ограничениями, свойственными технике приготовления смесей данного терапевтического агента для лечения амилоидного отложения у субъектов.
Следовательно, настоящее изобретение включает фармацевтические препараты, содержащие агенты по формуле V данного описания, в том числе их фармацевтически приемлемые соли, в фармацевтически приемлемых носителях для аэрозоля, орального и парентерального применения. Также настоящее изобретение включает такие агенты или их соли, которые лиофилизированы и которые могут быть восстановлены с образованием фармацевтически приемлемых препаратов для внутривенной, внутримышечной или подкожной инъекции. Введение может также быть интрадермальным или трансдермальным (внутрикожным и чрескожным). Согласно настоящему изобретению агент формулы V данного описания и его фармацевтически приемлемые соли можно вводить орально или ингаляцией в виде твёрдого вещества или можно вводить внутримышечно или внутривенно в виде раствора, суспензии или эмульсии. Или же агенты или соли можно также вводить ингаляцией, внутривенно или внутримышечно в виде липосомной суспензии.
Также охватываются фармацевтические препараты, пригодные для применения в виде аэрозоля, ингаляцией. Эти препараты содержат раствор или суспензию нужного агента формулы V данного описания или его соли, или множество твёрдых частиц агента или соли. Заданный препарат можно помещать в небольшую камеру и распылять. Распыление можно осуществлять с помощью сжатого воздуха или ультразвука, при этом образуется множество капелек жидкости или твёрдых частиц, содержащих агент или соли. Капельки жидкости или твёрдые частицы должны иметь размер примерно 0,5-5 мкм.
Твёрдые частицы можно получать, обрабатывая твёрдый агент формулы V данного описания, или его соль, любым подходящим способом, известным в уровне техники, например очень тонким измельчением. Например, размер твёрдых частиц или капелек составляет около 1-2 мкм. Для того, чтобы достичь этого, применяют промышленные распылители (небулайзеры).
Фармацевтический препарат, пригодный для применения в аэрозоле, может быть в виде жидкости, препарат содержит водорастворимый агент формулы V данного описания или его соль в носителе, содержащем воду. Может присутствовать поверхностно-активное вещество, которое уменьшает поверхностное натяжение препарата в достаточной степени, чтобы при распылении образовывались капельки нужного размера.
Композиции для перорального применения включают также жидкие растворы, эмульсии, суспензии и т.п. Фармацевтически приемлемые носители, пригодные для приготовления таких композиций, общеизвестны в уровне техники. Типичные компоненты носителей для сиропов, эликсиров, эмульсий и суспензий включают этанол, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, жидкую сахарозу, сорбит и воду. Типичные суспендирующие агенты для приготовления суспензий включают метилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, трагакант и альгинат натрия; типичные поверхностно-активные вещества включают лецитин и полисорбат 80, и типичные консерванты включают метилпарабен и бензоат натрия. Пероральные жидкие композиции могут также содержать один или более компонентов, таких как подсластители, агенты, придающие вкус и запах, и красители, раскрываемые выше.
Фармацевтические композиции можно также покрывать обычными способами, как правило, покрытиями, зависящими от рН или от времени, так что агент по изобретению высвобождается в желудочнокишечном тракте вблизи заданного места применения или в различное время, чтобы достичь нужного действия. Такие лекарственные формы обычно включают, но без ограничения, один из следующих агентов: ацетат фталат целлюлозы, фталат поливинилацетата, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, этилцеллюлозу, воски и шеллак.
Другие композиции, применимые для системной доставки агентов по изобретению, включают подъязычные, трансбуккальные и назальные лекарственные формы. Такие композиции, как правило, содержат один или более наполнителей, таких как сахароза, сорбит и маннит; и связующие, такие как смола акации аравийской, микрокристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Также в состав могут входить раскрываемые выше вещества, способствующие прогла
- 30 019334 тыванию, смазки, подсластители, красители, антиоксиданты и вещества, придающие вкус и запах.
Также возможно топическое (местное) применение композиций по данному изобретению, например, путём непосредственного нанесения слоя или распределения композиции на эпидермальную или эпителиальную ткань субъекта, или трандермальное применение с помощью пластыря. Такие композиции включают, например, лосьоны, кремы, растворы, гели и твёрдые вещества. Эти топические композиции могут содержать эффективное количество обычно по меньшей мере около 0,1% или даже около 15% агента по изобретению. Подходящие носители для топического (местного) применения обычно остаются на коже в виде сплошной плёнки и нелегко удаляется под действием кожного дыхания или воды. Обычно носитель является по природе органическим соединением и может диспергировать или растворять терапевтический агент. Носитель может содержать фармацевтически приемлемые эмольенты, эмульгаторы, загустители, растворители и т.п.
В одном варианте изобретения активный агент применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для ингибирования амилоидного отложения в организме субъекта. Например, терапевтически эффективная доза ингибирует отложение по меньшей мере приблизительно на 20% или по меньшей мере приблизительно на 40%, или даже по меньшей мере приблизительно на 60%, или по меньшей мере приблизительно на 80% по сравнению с непропеченными субъектами. У пациента с болезнью Альцгеймера терапевтически эффективная доза стабилизирует когнитивную функцию или предупреждает дальнейшее ухудшение когнитивной функции (т.е., предупреждение, замедление или прекращение прогрессирования заболевания). Соответственно настоящее изобретение охватывает терапевтические лекарственные вещества. Под лекарственным средством или лекарственным веществом понимают агент, оказывающий благотворное целебное или профилактическое действие на конкретное заболевание или состояние человека или животного.
В случае АА и АЬ амилоидоза агент может улучшить или стабилизировать конкретную функцию органа. В качестве примера почечную функцию можно стабилизовать или улучшить на 10% или выше, на 20% или выше, на 30% или выше, на 40% или выше, на 50% или выше, на 60% или выше, на 70% или выше, на 80% или выше, или выше чем на 90%.
В случае IАРР агент может сохранять или улучшать функцию островковых в-клеток, определяемую концентрацией инсулина или отношением РтоЛАРРЛАРР. В другом варианте изобретения отношение РтоЛАРР/АРР повышается примерно на 10% или больше, примерно на 20% или больше, примерно на 30% или больше, примерно на 40% или больше или примернона 50%. В другом варианте изобретения отношение повышается до 50%. Кроме того, терапевтически эффективное количество агента может эффективно улучшать уровни гликемии или инсулина.
В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для лечения АА (вторичного) амилоидоза и/или АЬ (первичного) амилоидоза, с помощью стабилизации почечной функции, снижения протеинурии, повышения клиренса креатинина (например, по меньшей мере на 50% или больше или по меньшей мере на 100% или больше), ремиссии хронической диареи или увеличения веса (например, на 10% или больше). Кроме того, агенты можно применять в терапевтически эффективной дозе, достаточной для положительной динамики при нефротическом синдроме.
Кроме того, активные агенты можно вводить в терапевтически эффективной дозе, достаточной для уменьшения у субъекта отложения амилоидного белка, например Ав40 или Ав42. Например, терапевтически эффективная доза уменьшает амилоидное отложение по меньшей мере приблизительно на 15%, или по меньшей мере приблизительно на 40%, или даже по меньшей мере приблизительно на 60%, или по меньшей мере приблизительно на 80% относительно непролеченных субъектов.
В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для увеличения амилоидного белка, например Ав40 или Ав42 в крови, С8Е или плазме субъекта. Например, терапевтически эффективная доза повышает концентрацию по меньшей мере приблизительно на 15%, или по меньшей мере приблизительно на 40%, или даже по меньшей мере приблизительно на 60%, или по меньшей мере приблизительно на 80% относительно непролеченных субъектов.
Ещё в одном варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы сохранить рейтинг СОВ субъекта на уровне исходного или на уровне 0. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы понизить рейтинг СОВ субъекта, примерно на 0,25 или более, примерно на 0,5 или более, примерно на 1,0 или более, примерно на 1,5 или более, примерно на 2,0 или более, примерно на 2,5 или более, или 3,0 или более. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы понизить скорость увеличения рейтинга СЬВ субъекта по сравнению с контрольными предыдущими данными или с контрольными данными, полученными на непролеченных пациентах. В другом варианте изобретения терапевтически эффективной дозы достаточно для того, чтобы понизить скорость увеличения рейтинга СОВ (относительно непролеченных субъектов) примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на
- 31 019334
50% или более, примерно на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более или, примерно на 100% или более.
Ещё в одном варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы сохранить оценки ММЗЕ субъекта. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы увеличить число баллов ММЗЕ примерно на 1, примерно на 2, примерно на 3, примерно на 4, примерно, на 5, примерно на 7,5, примерно на 10, примерно на 12,5, примерно на 15, примерно на 17,5, примерно на 20 или примерно на 25 баллов. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы снизить скорость уменьшения оценки ММЗЕ субъекта по сравнению с предыдущими контрольными. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы можно было снизить скорость уменьшения оценки ММЗЕ субъекта примерно на 5% или менее, примерно на 10% или менее, примерно на 20% или менее, примерно на 25% или менее, примерно на 30% или менее, примерно на 40% или менее, примерно на 50% или менее, примерно на 60% или менее, примерно на 70% или менее, примерно на 80% или менее, примерно на 90% или менее, примерно на 100% или менее, по сравнению с контрольными предыдущими данными уменьшения или с контрольными данными уменьшения в отсутствие лечения.
Ещё в одном варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы сохранить оценки ΆΌΆδ-Сод субъекта. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы снизить оценки ΆΌΆδ-Сод субъекта примерно на 2 пункта или более, примерно на 3 пункта или более, примерно на 4 пункта или более, примерно на 5 пунктов или более, примерно на 7,5 пунктов или более, примерно на 10 пунктов или более, примерно на 12,5 пунктов или более, примерно на 15 пунктов или более, примерно на 17,5 пунктов или более, примерно на 20 пунктов или более, или примерно на 25 пунктов или более. В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы снизить скорость увеличения оценки ΆΌΆδ-Сод субъекта по сравнению с предыдущими контрольными или с контрольными данными, полученными в отсутствие лечения. В другом варианте изобретения терапевтически эффективной дозы достаточно для того, чтобы снизить скорость увеличения оценки ΆΌΆδ-Сод субъекта (относительно непролеченных субъектов), примерно на 5% или более, примерно на 10% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 40% или более, примерно на 50% или более, примерно на 60% или более, примерно на 70% или более, примерно на 80% или более, примерно на 90% или более, примерно на 100% или более.
В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы понизить отношение Αβ42:Αβ40 в С8Е или плазме субъекта примерно на 15% или более, примерно на 20% или более, примерно на 25% или более, примерно на 30% или более, примерно на 35% или более, примерно на 40% или более, примерно на 45% или более или примерно на 50% или более.
В другом варианте изобретения активные агенты применяют в терапевтически эффективной дозе, достаточной для того, чтобы понизить уровень Αβ в С8Е или плазме субъекта примерно на 15% или более, примерно на 25% или более, примерно на 35% или более, примерно на 45% или более, примерно на 55% или более, или примерно на 75% или более или примерно на 95% или более.
Токсичность и терапевтическую эффективность таких агентов можно определить стандартными фармацевтическими методами на клеточных культурах или на подопытных животных, например, с целью определения ΕΌ50 (дозы, летальной для 50% популяции) и ΕΌ50 (дозы, терапевтически эффективной в 50% популяции). Отношение доз, вызывающих токсический и терапевтический эффект, есть терапевтический индекс, оно может быть также выражено в виде отношения ΕΌ50/ΕΌ50 и обычно чем больше терапевтический индекс, тем выше эффективность. Когда применяются агенты, которые обладают побочным действием, следует с осторожностью подходить к созданию системы доставки, которая нацеливает такие агенты на поражённую ткань, чтобы свести к минимуму возможное поражение непоражённых клеток и, тем самым, уменьшить побочный эффект.
Ясно, что соответствующие дозы зависят от ряда факторов, известных рядовому врачу, ветеринару или исследователю. Доза(ы) низкомолекулярного вещества меняются, например, в зависимости от особенностей, размера (габаритов) и состояния подлежащего лечению субъекта или обрабатываемого образца, кроме того, они зависят от способа введения композиции, если он применим, и от действия, которое, по предположению практикующего врача, низкомолекулярное вещество должно оказать на субъекта. Типичные дозы включают миллиграммы или микрограммы низкомолекулярного вещества на килограмм веса субъекта или образца (например, около 1-500 мкг/кг, примерно от 100 мкг/кг до 5 мг/кг или около 1-50 мкг/кг). Понятно, кроме того, что соответствующие дозы зависят от активности (вещества). Такие подходящие дозы можно определить методами анализа по данному описанию. Если животному (например, человеку) нужно вводить одно или более таких соединений, врач, ветеринар или исследова
- 32 019334 тель предписывает сравнительно низкую дозу, последовательно её повышая до тех пор, пока не будет получен нужный ответ. Кроме того, понятно, что специфичный уровень дозы для любого конкретного животного субъекта зависит от многих факторов, включая активность конкретного применяемого агента, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол и питание субъекта, время введения, способ применения, скорость экскреции и любую комбинацию лекарственных веществ.
Способность агента ингибировать амилоидное отложение можно оценивать на животной модельной системе, которая помогает прогнозировать эффективность ингибирования амилоидного отложения при болезнях человека, например, на трансгенной мыши, экспрессирующей человеческий АРР, или на других животных моделях, в которых наблюдается отложение Αβ, или, например, на животной модели АА амилоидоза. Аналогично, способность агента предупреждать или уменьшать когнитивную недостаточность (когнитивное расстройство) в модельной системе может быть показателем эффективности у людей. Или же, способность агента можно оценивать, изучая способность агента ингибировать образование амилоидных фибрилл ш νίΙΐΌ, например, анализ фибриллогенеза, например, по данному описанию, включая анализ ТИТ, СИ или ЕМ. Также можно определять (измерять) связывание агента с амилоидными фибриллами М8 анализом по данному описанию. Способность агента защищать клетки от индуцированной амилоидом токсичности оценивают ш νίΙΐΌ биохимическими анализами, определяя процент гибели клеток, вызванной амилоидным белком. Способность агента модулировать почечную функцию можно также оценивать на подходящей животной модельной системе.
Терапевтический агент по изобретению можно также применять ш νί\Ό для ингибирования амилоидного отложения или лечения некоторых амилоидных заболеваний, таких как β2Μ амилоидоз и другие диализные амилоидозы. Ех νί\Ό применение терапевтических агентов по изобретению можно осуществлять при контакте жидкости организма (например, крови, плазмы) с терапевтическим соединением по данному изобретению, так что терапевтическое соединение может осуществлять свою предполагаемую функцию, а затем вводить эту жидкость из организма субъекту. Терапевтическое соединение по изобретению может осуществлять свою функцию ех νί\Ό (например, диализный фильтр), ш νί\Ό (например, вводимое с жидкостью организма) или обоими способами. Например, терапевтическое соединение по изобретению можно применять для снижения уровней β2Μ в плазме и/или сохранения β2Μ в растворимой форме ех νί\Ό, ш νί\Ό или как ех νί\Ό, так и ш νί\Ό.
Гематоэнцефалический барьер
Вне зависимости от конкретного механизма, по которому соединение проявляет своё биологическое действие, это соединение предупреждает или лечит амилоидные заболевания, например такие, как болезнь Альцгеймера, САА, обусловленный диабетом амилоидоз, ЛЬ амилоидоз, синдром Дауна или β2Μ амилоидоз. Соединение может реверсировать отложение амилоида или способствовать отложению амилоида, или соединение может способствовать клиренсу бляшек, или замедлять (затруднять) отложение. Например, соединение может уменьшать концентрацию амилоида в мозге субъекта по сравнению с непролеченным субъектом. Соединение может проникать в мозг через гематоэнцефалический барьер (ВВВ) для проявления своего биологического действия. Соединение может сохранять амилоид в нефибриллярной форме, или же соединение может повышать скорость клиренса растворимого амилоида из мозга субъекта по сравнению с непролеченным субъектом. Соединение может также повышать скорость расщепления Αβ в мозге до объединения в фибриллы. Соединение может также действовать на периферии, вызывая изменение равновесия концентрации амилоидного белка в двух компартментах (т.е. системный против (νδ) центрального), в этом случае соединение не обязательно должно проникать в мозг для того, чтобы снизить концентрацию Αβ в мозге (синк- эффект, эффект проникновения, просачивания).
Агенты по изобретению, которые проявляют физиологическое действие ш νί\Ό в мозге, могут быть более применимы, если им облегчается доступ к клеткам-мишеням в мозге. Не ограничивающими примерами клеток мозга являются нейроны, глиальные клетки (астроциты, олигодендроциты, микроглия), клетки сосудов мозга (мышечные клетки, эндотелиальные клетки) и клетки, которые содержат оболочки мозга. Гематоэнцефалический барьер (ВВВ) обычно ограничивает доступ к клеткам мозга, действуя как в качестве физической, так и в качестве функциональной блокады, которая отделяет паренхиму мозга от системного кровотока (см., например, РаПпбде е1 а1., 1. №игоуйо1. 5(6), 556-69 (1999); КиЬш е1 а1., Ееу. №игойсг 22, 11- 28 (1999)). Молекулам (вещества) в кровотоке обычно облегчён доступ к клеткам мозга по одному из двух способов: опосредованный липидами перенос (транспорт) через ВВВ с помощью свободной диффузии или активный (или катализируемый) транспорт.
Агенты по изобретению можно готовить таким образом, чтобы улучшить распределение ш νί\Ό. например, в виде порошковых или жидких таблеток или раствора для орального применения или в виде назального спрея, капель в нос, геля или мази, с помощью трубки или катетера, шприцем, коктейлем, тампоном (компрессом) или в виде инфузии под слизистую оболочку. Например, гематоэнцефалический барьер (ВВВ) исключает множество высокогидрофильных агентов. Для того, чтобы гарантировать проникновение более гидрофильных терапевтических агентов по изобретению через ВВВ, их можно готовить, например, в липосомах. О способах производства липосом см., например, патенты США 4522811;
- 33 019334
5374548 и 5399331. Липосомы могут содержать один или более частей, фрагментов, которые селективно переносятся в конкретные (специфичные) клетки или органы (нацеливающие (направляющие) частицы (фрагменты), или наводящие группы, группы наведения, или векторы транспорта), тем самым обеспечивая доставку нацеленного лекарственного вещества (см., например, ν.ν. Капайе 1. С1ш. РНагтасо1. 29, 685 (1989)). Аналогично, агенты могут быть связаны с нацеливающими группами, которые облегчают проникновение через гематоэнцефалический барьер. В одном варианте в способе по настоящему изобретению применяется полиамин, связанный с агентом, который является низкомолекулярным соединением и применим для ингибирования, например, Αβ отложения.
Для облегчения транспорта (переноса) агентов по изобретению через ВВВ их можно соединить с вектором транспорта через ВВВ (обзор о векторах и механизмах транспорта через ВВВ см., В1ске1 е1 а1., Айу. Эгид ЭеРуегу Ке\зе\\ъ 46, 247-79 (2001)). Типичные векторы транспорта включают катионы альбумина или ОХ26 моноклональное антитело к рецептору трансферрина; эти белки претерпевают опосредованный всасыванием и рецептор-опосредованный, соответственно, трансцитоз через ВВВ. Природные метаболиты клеток, которые можно применять в качестве нацеливающих групп, включают, среди прочих, путресцин, спермидин, спермин или ОНА. Другие типичные нацеливающие группы включают фолат или биотин (см., например, Патент США 5416016); маннозиды (Ьтехаюа е1 а1., ВюсЬет. Вюрйув. Кее. Соттип. 153, 1038 (1988)); антитела (Р.С. В1оетап е1 а1., ЕЕВ8 Ье11. 357, 140 (1995); М. О\\а15, е1 а1., АпйтюгоЬ. Адеп1в Сйето1Ьег. 39, 180 (1995)); рецептор сурфактантного протеина А (Впвсое, е1 а1., Ат. 1. Рйувю1 1233, 134 (1995)); др120 (8сйге1ег, е1 а1., 1. Вю1. СЬет. 269, 9090 (1994); см также К. Кетапеп апй М. Ь. Ьаиккапеп, ЕЕВ8 Ье11. 346, 123 (1994); 1. 1. КШоп апй I. 1. Е1й1ег, 1ттипоте1йойв 4, 273 (1994).
Примеры других векторов транспорта через ВВВ, которые нацеливают системы рецептор- опосредованного транспорта в мозг, включают факторы, такие как инсулин, инсулиноподобный фактор роста (ЮЕ-Ι и ЮЕ-П), ангиотензин II, предсердный и мозговой натрийуретический пептид (А№ и ВЫР) и трансферрин. Моноклональные антитела к рецепторам, которые связывают эти факторы, могут также применяться в качестве векторов транспорта через ВВВ. Механизмы нацеливания векторов транспорта через ВВВ в случае обусловленного всасыванием трансцитоза включают катионные фрагменты, такие как катионный ЬВЬ, альбумин или пероксидаза хрена, соединённая с полилизином, катионный альбумин или катионные иммуноглобулины. Низкомолекулярные основные олигопептиды, такие как аналог динорфина Е-2078 и аналог АСТН эбиратид, также могут проникать в мозг с помощью опосредованного всасыванием трансцитоза и потенциальных векторов транспорта.
Другие векторы транспорта через ВВВ нацеливают системы на перенос питательных веществ в мозг. Примеры таких ВВВ векторов транспорта включают гексозные частицы, например, глюкозу, и монокарбоновые кислоты, например, молочную кислоту и нейтральные аминокислоты, например, фенилаланин и амины, например, холин, и основные аминокислоты, например, аргинин, нуклеозиды, например, аденозин, и пуриновые основания, например, аденин, и тиреоидный гормон, например, трийодтиридин. Антитела к внеклеточному домену переносчиков питательных веществ также можно применять в качестве векторов транспорта. Другие возможные векторы включают ангиотензин II и ΛΝΓ, которые могут участвовать в регуляции проницаемости ВВВ.
В некоторых случаях связь, соединяющая терапевтический агент с вектором транспорта, можно расщепить после переноса (транспорта) в мозг для того, чтобы освободить биологически активный агент. Типичные линкеры включают дисульфидные связи, сложноэфирные связи, тиоэфирные связи, амидные связи, связывание в виде слабых кислот и связывание в виде оснований Шиффа. Также можно использовать авидин/биотиновые линкеры, в которых авидин ковалентно связан с вектором транспорта лекарственного вещества через ВВВ. Авидин сам по себе может являться вектором транспорта лекарственного вещества.
Трансцитоз, включающий рецептор-опосредованный транспорт композиций через гематоэнцефалический барьер, также может быть применим для агентов по изобретению. Доставка, опосредованная рецептором трансферрина, раскрывается в патентах США 5672683; 5383988; 5527527; 5977307 и 6015555. Также известен трансферрин-опосредованный транспорт. Р. М. Епйеп е1 а1., РЬагшасоР Ехр. ТЬег. 278, 1491-98 (1996); Н. 1. Ьее, 1. РЬагтасок Ехр. ТЬег. 292, 1048-52 (2000). Доставка, опосредованная ЕСЕ рецептором, раскрывается в Υ. ОедисЫ е1 а1., Вюсоищд. СЬет. 10, 32-37 (1999), а трансцитоз описан в А. Сег1ей1 е1 а1., 1. Эгид Тагде1. 8, 435-46 (2000). В качестве носителей для доставки через гематоэнцефалический барьер также применяли фрагменты инсулина. М. Еики1а е1 а1., РЬагт. Кее. 11, 1681-88 (1994). Также описана доставка агентов с помощью конъюгата нейтрального авидина и катионного человеческого альбумина. Υ.8. Капд е1 а1., РЬагт. Кее. 1, 1257-64 (1994).
Для повышения пенетрации агентов по изобретению через гематоэнцефалический барьер можно осуществить другие модификации, используя методы и производные известные в уровне техники. Например, патент США 6024977 раскрывает ковалентные полярные липидные конъюгаты для нацеливания на мозг и центральную нервную систему. Патент США 5017566 раскрывает производные циклодекстрина, содержащие комплексы включения липоидных форм окислительно-восстановительных (редокс) нацеленных (нацеливающих) частиц дигидропиридина. Патент США 5023252 раскрывает применение фармацевтических композиций, содержащих нейрологически активное лекарственное вещество и соеди
- 34 019334 нение, облегчающее транспорт лекарственного вещества через гематоэнцефалический барьер, включая макроциклический сложный эфир, сложный диэфир, амид, диамид, амидин, диамидин, тиоэфир, дитиоэфир, тиоамид, кетон или лактон. Патент США 5024998 раскрывает растворы нерастворимых в воде лекарственных веществ с производными циклодекстрина для парентерального применения. Патент США 5039794 раскрывает применение фактора выхода метастатических опухолей для облегчения транспорта соединений через гематоэнцефалический барьер. Патент США 5112863 раскрывает применение Ν- ациламино производных кислот в качестве антипсихотических лекарственных веществ для доставки через гематоэнцефалический барьер. Патент США 5124146 раскрывает способ для доставки терапевтических агентов через гематоэнцефалический барьер местах повышенной проницаемости, обусловленных поражениями мозга. Патент США 5153179 раскрывает ацилированный глицерин и производные для применения в лекарственном препарате для повышенной пенетрации через клеточные мембраны. Патент США 5177064 раскрывает применение липоидных фосфонатных производных нуклеозидных антивирусных агентов для доставки через гематоэнцефалический барьер. Патент США 5254342 раскрывает рецепторопосредованный трансцитоз через гематоэнцефалический барьер с применением рецептора транферрина в сочетании с фармацевтическими соединениями, которые интенсифицируют или ускоряют этот процесс. Патент США раскрывает лечение эпилепсии имидатами противосудорожного сульфамата. Патент США 5270312 раскрывает замещённые пиперазины в качестве агентов для центральной нервной системы. Патент США 5284876 раскрывает конъюгаты лекарственных веществ на основе допамина с жирными кислотами. Патент США 5389623 раскрывает применение липидных дигидропиридиновых производных противовоспалительных стероидов или стероидных половых гормонов для доставки через гематоэнцефалический барьер. Патент США 5405834 раскрывает пролекарства - производные тиреотропин- высвобождающего гормона. Патент США 5413996 раскрывает конъюгаты ацилоксиалкилфосфонатов с нейрологически активными лекарственными веществами для анионной изоляции таких лекарственных веществ в ткани мозга. Патент США 5434137 раскрывает способы селективного открытия аномальных капилляров мозга, применяя инфузию брадикинина в каротидную артерию. Патент США 5442043 раскрывает пептидный конъюгат, а именно, конъюгат пептида с биологической активностью, не способного проникать через гематоэнцефалический барьер, и пептида, не проявляющего биологическую активность, но способного проходить через гематоэнцефалический барьер за счёт рецептор- опосредованного эндоцитоза. Патент США 5466683 раскрывает водорастворимые аналоги противосудорожного соединения для лечения эпилепсии. Патент США 5525727 раскрывает композиции для раздельного всасывания и удерживания в ткани мозга, представляющие собой конъюгат наркотических аналгетиков и их агонистов и антагонистов с липидной формой дигидропиридина, который образует редокс соль при всасывании через гематоэнцефалический барьер, что препятствует раздельному возвращению обратно в системный кровоток.
Оксид азота является сосудорасширяющим фактором периферической сосудистой сети в нормальной ткани организма. Увеличение образования оксида азота под действием синтазы оксида азота вызывает вазодилатацию, не уменьшая давление крови. Увеличение тока крови через мозг, независимое от давления крови, повышает церебральную биодоступность образуемых в крови композиций. Это увеличение количества оксида азота можно стимулировать, вводя Ь-аргинин. По мере увеличения количества оксида азота церебральный кровоток соответственно увеличивается и лекарственные вещества в токе крови уносятся увеличенным током в ткани мозга. Следовательно, Ь-аргинин можно применять в фармацевтических композициях по изобретению для увеличения доставки агентов в ткани мозга после введения фармацевтической композиции в ток крови субъекта практически одновременно с увеличивающим кровоток количеством Ь-аргинина, как описано в Μеждународной заявке АО 00/56328.
Другие примеры модификаций, которые повышают пенетрацию через гематоэнцефалический барьер, описаны в опубликованной Μеждународной (РСТ) заявке АО 85/02342, которая раскрывает композицию лекарственного вещества, содержащую глицеролипид или его производное. Опубликованная заявка РСТ АО 089/11299 раскрывает химический конъюгат антитела с ферментом, который доставляется конкретно к месту поражения мозга для активации вводимого отдельно нейрологически активного пролекарства. Опубликованная заявка РСТ АО 91/04014 раскрывает способы доставки терапевтических и диагностических агентов через гематоэнцефалический барьер инкапсулированием лекарственных веществ в липосомы, нацеленные на ткань мозга, с применением транспорт-специфичных рецепторных лигандов или антител. Опубликованная Μеждународная заявка РСТ АО 91/04745 раскрывает перенос (транспорт) через гематоэнцефалический барьер с помощью молекул адгезии клеточной поверхности и их фрагментов для повышения проницаемости при тесном контакте с эндотелием сосудов. Опубликованная Μеждународная заявка РСТ АО 91/14438 раскрывает применение модифицированного химерного моноклонального антитела для облегчения транспорта веществ через гематоэнцефалический барьер. Опубликованная Μеждународная заявка РСТ АО 94/01131 раскрывает липидоизированные белки, включая антитела. Опубликованная Μеждународная заявка РСТ АО 94/03424 раскрывает применение производных аминокислот в качестве конъюгатов с лекарственными веществами для облегчения транспорта через гематоэнцефалический барьер. Опубликованная Μеждународная заявка РСТ АО 94/06450 раскрывает конъюгаты нейрологически активных лекарственных веществ с нацеленной редокс-частицей
- 35 019334 типа дигидропиридина и содержащие аминокислотную связь и алифатический остаток. Опубликованная Международная заявка РСТ ЭДО 94/02178 раскрывает нацеленные на антитела липосомы для доставки через гематоэнцефалический барьер. Опубликованная Международная заявка РСТ ЭДО 95/07092 раскрывает применение конъюгатов лекарственное вещество- фактор роста для доставки лекарственных веществ через гематоэнцефалический барьер. Опубликованная Международная заявка РСТ ЭДО 96/00537 раскрывает полимерные микросферы в качестве инъецируемых частиц лекарственное вещество- носители для доставки с целью доставки биоактивных агентов к сайтам (местам) в центральной нервной системе. Опубликованная Международная заявка РСТ ЭДО 96/04001 раскрывает омега-3-конъюгаты жирных кислот с нейрологически активными лекарственными веществами для доставки через гематоэнцефалический барьер. Опубликованная Международная заявка РСТ ЭДО 96/22303 раскрывает конъюгаты жирной кислоты и глицеролипида нейрологически активными лекарственными веществами для доставки через гематоэнцефалический барьер.
Обычно рядовой специалист в данной области техники может легко получить сложный эфир, амид или гидразид агента по изобретению, например, из соответствующей карбоновой кислоты и подходящего реагента. Например, соединение, содержащее карбоксильную группу или её реакционноспособный эквивалент, может реагировать с гидроксилсодержащим соединением или его реакционноспособным эквивалентом таким образом, чтобы получился соответствующий сложный эфир. См., например, Сотрге11еп51уе Отдашс ТгапзГогтайопк, 2'1 Еб., Ьу КС. Ьагоск, УСН ΡιιΝίδΙκίΈ бо1т ЭДПеу & 8он5, Ь1б. (1989); Магсй’8 Αбνаηсеб Огдашс Сйет181гу, 511' Еб., Ьу М.В. 8тйй апб I. Магсй, 1о1т ЭДПеу & 8оп5, Ыб. (2000).
Фармацевтически приемлемые соли
Некоторые варианты агентов по настоящему изобретению могут содержать основную функциональную группу, такую как амино или алкиламино, и, следовательно, они способны образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми кислотами. В этом случае термин фармацевтически приемлемые соли относится к относительно нетоксическим солям присоединения неорганических и органических кислот к агентам по настоящему изобретению. Эти соли можно получать ίη δίΐιι в процессе окончательного выделения и очистки агентов по изобретению, или при отдельной реакции очищенного агента по изобретению в форме свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой, выделяя образующуюся при этом соль.
Типичные соли включают гидрогалогениды (включая гидробромид и гидрохлорид), сульфаты, бисульфаты, фосфаты, нитраты, ацетаты, валераты, олеаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бензоаты, лактаты, фосфаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, нафтилаты, мезилаты, глюкогептонаты, 2- гидроксиэтансульфонаты и лаурилсульфонаты и т.п. См., например, Вегде е! а1., 8аЙ§, I. Ρΐιπη. 8с£ 66, 1-19(1977).
В других случаях агенты по настоящему могут содержать одну или более кислых функциональных групп и, следовательно, способны образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми основаниями. Термин фармацевтически приемлемые соли в этих примерах относится к относительно нетоксическим солям присоединения неорганических и органических оснований к агентам по настоящему изобретению.
Эти соли можно также получать ίη δίΐιι в процессе окончательного выделения и очистки агентов по изобретению, или при отдельной реакции очищенного агента по изобретению в форме свободной кислоты с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат фармацевтически приемлемого катиона металла, с аммиаком, или с фармацевтически приемлемым органическим первичным, вторичным или третичным амином. Типичные соли щелочных или щелочно-земельных металлов включают соли лития, натрия, калия, кальция, магния и алюминия. Типичные органические амины, пригодные для образования солей присоединения оснований, включают этиламин, диэтиламин, этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперазин и т.п.
Фармацевтически приемлемые соли включают также, например, производные агентов, модифицированных с помощью получения из них кислых и основных солей, как подробнее описано ниже и в другом месте в данной заявке. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают соли минеральных и органических кислот с основными остатками, таким как аминогруппы; и органические соли щелочей с кислыми остатками, такими как карбоксильные группы. Фармацевтически приемлемые соли включают обычные нетоксические соли или соли четвертичных аммониевых оснований исходных агентов, полученные, например, при действии неорганических или органических кислот. Такие обычные нетоксические соли включают соли, полученные при действии неорганических кислот, таких как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, сульфаминовая, фосфорная и азотная кислота; и соли, полученные при действии органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, пальмовая, малеиновая, гидроксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфанилиновая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, этандисульфоновая, щавелевая и изетионовая кислота. Фармацевтически приемлемые соли можно синтезировать обычными химическими методами из исходного агента, который содержит основную и кислую группы. Обычно такие соли можно получать по ре
- 36 019334 акции этих агентов в форме свободной кислоты или свободного основания со стехиометрическим количеством подходящего основания или подходящей кислоты в воде или в органическом растворителе или в их смеси.
Все кислые, солевые, основные или другие ионные и неионные формы описанных соединений включаются в качестве соединений по данному изобретению. Например, если соединение в данном соединении представлено в виде кислоты, солевые формы соединения также охватываются. Аналогично, если соединение показано в виде соли, также охватываются кислая и/или основная формы.
Специалисты в данной области техники знают или смогут определить с помощью лишь обычных экспериментов, многочисленные эквиваленты конкретных методик, вариантов изобретения, пунктов Формулы изобретения и примеров по данному описанию. Считается, что такие эквиваленты входят в объём данного изобретения и охватываются прилагаемой формулой изобретения. Содержание всех ссылок, выданных патентов и опубликованных патентных заявок, цитированных в данной публикации, и, тем самым, вводимых ссылкой в данное описание. Изобретение дополнительно иллюстрируются следующими примерами, которые не следует рассматривать как дополнительное ограничение.
Примеры
Анализ связывания и антифибриллогенный анализ
Тестируемые соединения синтезируют и подвергают скринингу масс-спектрометрией (М8), за исключением выбранных соединений, которые получают промышленно. М8 анализом получают данные о способности соединений связываться с белками, в данном случае с в-амилоидом и 1АРР.
В М8 анализе на Ав40 образцы готовят в водных растворах (добавляя 20% этанол, если необходимо солюбилизировать в воде), 200 мкМ тестируемого соединения и 20 мкМ солюбилизированного Ав40, или 400 мкМ тестируемого соединения и 40 мкМ солюбилизированного Ав40. рН каждого образца доводят до 7.4 (±0.2), добавляя 0,1% водный раствор гидроксида натрия. Затем растворы анализируют массспектрометрией с ионизацией электрораспылением на масс-спектрометре ^а!егк ΖΡ 4000. Образцы непосредственно вводят (вливают) при скорости потока 25 мкл/мин в течение 2 ч после приготовления образца. Температуру в датчике поддерживают при 70°С, а напряжение конуса 20 В во всех анализах. Данные получают, используя программу Макк1упх 3.5. Методом масс-спектрометрии получают данные о способности соединений связываться с растворимым Ар, тогда как анализы Т11Т, ЕМ и СО позволяют получают данные об ингибировании фибриллогенеза
Анализ на 1АРР проводят в тех же условиях, за исключением того, что используют 200 мкМ тестируемого соединения и 20 мкМ солюбилизированного 1АРР.
Эффект кратковременного лечения у взрослых трансгенных ΓΝΚϋ 8, сверхэкспрессирующих вАРР
У трансгенных мышей, ТдСВЫО8, экспрессирующих человеческий амилоидный белокпредшественник (11АРР), развивается патология, напоминающая болезнь Альцгеймера. В частности, высокие уровни Ав40 и Ав42 получены в плазме и мозгу этих 8-9-недельных животных с последующей ранней аккумуляцией амилоидных бляшек, аналогичных сенильным бляшкам, наблюдающимся у больных АО. У этих животных также проявляется прогрессирующая когнитивная недостаточность, соответствующая проявлению дегенеративных изменений. См., например, (СЫкйй, е! а1., 1. Вю1. Сйет. 276, 21562-70(2001)).
Изучают терапевтический эффект кратковременного действия 19 соединений по изобретению, как описано далее. Соединения вводят в течение 14- или 28-дневного периода, в конце каждого из них определяют уровни Ав пептидов в плазме и мозгу Τ^ΒΝΟ8 животных.
Способы
В данном примере используют самок и самцов трансгенных мышей В6С3Р1 3его и 4ого поколений, им ежедневно вводят подкожно или дают перорально одно из трех серий соединений в течение 14-28 дней. В настоящем протоколе используются следующие сокращения для обозначения этих животных 3его и 4ого поколений обратного скрещивания: ТдСВ№8- 2.В6С3Б1^3); ТдСВЫО8- 2.В6С3Р1(^).
Группа контрольных животных (Группа 1) состоит из нативных ТдСВНО8-2.В6С3Р1(Н3) в возрасте 11±1 недель. Этих мышей используют для определения уровней Ав в плазме и мозгу ранее не обрабатывавшихся животных в начале лечения.
Начиная с 11-недельного возраста (±1 неделя) животные получают ежедневно соответствующее лечение в течение 14 или 18 дней (группы 2- 21) в дозе 250 мг/кг при 10 мл/кг, или только носитель (вода; группа 2), или только 1% метилцеллюлозу (группа 21). Способ введения является подкожным для водорастворимых соединений и оральным для соединений, солюбилизированных в 1% метилцеллюлозе (МС 1%). В конце периода лечения плазму и мозг после перфузии собирают для количественного определения уровней Ав.
- 37 019334
Таблица 4. Тест-система
Вид: Мышь
Штамм ТцСКИОЗ- 2.В6СЗЕ1(1Мз) & (Ν4)
Генотип: 11 АРР+/-
Пол Мужской и женский
Возраст в день 1: 11±1 недель
Вес тела в день 1: 10- 30 г
Число групп: 21
Число животных/ группа в день 1 Исходное: 8
Носитель и 12- 15
обработка:
Дополнения: Исходных мышей Т^СЮЧОв- 2 получают из Сеп1ге Гог КезеагсЬ ίη КеигобевепегаНуе О|5еа«5, ип1Уегы!у оГТогоЫо. Инбредных мышей В6СЗР1 получают из СНайеа К1уег (ОиеЬес, Сагиба).
Мыши, используемые в исследовании, берутся из колонии, разводимой в 1пз!йи! Агтапй Ргарр1ег, и перед началом исследования их акклиматизируют к окружающей среде.
Мониторинг здоровья животных
Всех животных ежедневно проверяют на признаки болезненности, когда утром дают ежедневную дозу, и дважды в день проверяют контроль смертности (один раз в день в течение уик-эндов и праздников). Подробное обследование проводят в начале лечения, ежедневно в течение курса исследования и один раз перед последними процедурами. При необходимости обследование проводят чаще. Отдельно регистрируют смерть и все индивидуальные клинические признаки. Индивидуальный вес тела регистрируют при рандомизации, один раз в неделю в течение исследования и один раз перед последними процедурами.
Отбор образцов
В контрольной группе, возраст 11±1 недель, и в конце периода лечения (14 или 28 дней) в группах 2-21 через 24 ч после последнего введения соединения животных умерщвляют и собирают пробы. Собирают примерно 500 мкл крови из орбитального синуса и хранят на льду до момента центрифугирования, центрифугируют при 4°С при минимальной скорости 3000 об./мин в течение 10 мин. Образцы плазмы сразу же замораживают и вплоть до анализа хранят при -80°С. Мозг удаляют, замораживают и вплоть до анализа хранят при -80°С.
Измерение уровней Αβ
Мозг взвешивают в замороженном состоянии и гомогенизируют с 4 объёмами ледяного буфера 50 мМ Тпз-С1 рН 8.0 с коктейлем ингибиторов протеаз (4 мл буфера на 1 г влажного мозга). Образцы центрифугируют при 15000д в течение 20 мин и супернатанты переносят в новые пробирки. Сто пятьдесят (150) мкл каждого супернатанта смешивают с 250 мкл 8 М гуанидин-НС1/50 мМ Тпз-С1 рН 8.0 (в соотношении 0.6 объёмов супернатанта: 1 объём 8 М гуанидин/50 мМ Тпз-С1 рН 8.0) и прибавляют 400 мкл 5 М гуанидин/50 мМ Тпз-С1 рН 8.0. Пробирки встряхивают в течение 30 с и замораживают при -80°С. Параллельно осадок (пеллеты) обрабатывают 7 объёмами 5 М гуанидин/50 мМ Тпз-С1 рН 8.0 (7 мл гуанидина на 1 г влажного мозга), встряхивают 30 с и замораживают при -80°С. Образцы размораживают при комнатной температуре, разрушают ультразвуком при 80°С в течение 15 мин и снова замораживают. Этот цикл повторяют 3 раза, чтобы гарантировать гомогенность, и образцы снова охлаждают до -80°С и хранят при этой температуре вплоть до анализа.
Уровни Λβ в образцах плазмы и мозга определяют методом ЕЬ18А, используя наборы человеческого Λβ40 и Λβ42 Р1иоготе!гю ЕЫ8А от Вюзоитсе (Са!. №. 89-344 и 89-348) в соответствии с рекомендациями производителя. Коротко говоря, образцы размораживают при комнатной температуре, действуют ультразвуком в течение 5 мин при 80°С (разрушают ультразвуком гомогенаты мозга, но не образцы плазмы) и хранят на льду. Λβ пептиды наносят на планшет, используя 100 мкл разведённого образца, и инкубируют, не встряхивая, инкубируют при 4°С в течение ночи. Образцы (жидкость) отсасывают (аспирация) и лунки 4 раза отмывают водным буфером из набора Вюзоитсе ЕЫ8А. Добавляют поликлональную кроличью антисыворотку к Λβ40 или Λβ42 (специфичную в отношении Λβ40 или Λβ42 пептида) (100 мкл) и планшет инкубируют при комнатной температуре в течение 2 ч при встряхивании. Жидкость из лунок отсасывают и лунки 4 раза отмывают, добавляют 100 мкл антитела к кроличьему иммуноглобулину, меченому щелочной фосфатазой, и инкубируют при комнатной температуре в течение 2 ч при встряхивании. Затем плашки отмывают 5 раз и в плашку добавляют флуоресцентный субстрат (100
- 38 019334 мкл). Планшет инкубируют в течение 35 мин при комнатной температуре и планшет считывают на фотометре для микротитровальных планшетов (ридере) при длине волны возбуждения 460 нм и излучения 560 нм.
Соединения оценивают на основании их способности модулировать уровни Аβ пептидов в плазме и уровни церебрального растворимого/нерастворимого Аβ в мозге. Уровни Аβ, наблюдаемые в плазме и мозге пролеченных животных, нормализуют по значениям, полученным в контрольных группах, получавших носитель (воду) или метилцеллюлозу, и располагают в ряд в соответствии с интенсивностью фармакологического действия (эффекта).
Действие продолжительного лечения на взрослых трансгенных мышей ϋΚΝϋ 8, сверхэкспрессирующих βΑΡΡ
Трансгенные мыши, ТдСЯХЭ8, те, которых используют при кратковременном лечении, сверхэкспрессируют человеческий АРР ген со шведской мутацией или мутацией Индиана, что приводит к образованию высоких уровней амилоидных пептидов и к развитию раннего активно прогрессирующего амилоидоза мозга. Полагают, что высокие уровни Аβ пептидов и относительный избыток Аβ42 по сравнению с Аβ40 связаны с наблюдаемой тяжёлой и ранней дегенеративной патологией. Характер амилоидного отложения, присутствие дистрофических нейритов и когнитивная недостаточность в этой линии трансгенных мышей хорошо изучены и описаны. Уровни Аβ пептидов в мозге этих мышей с возрастом резко увеличивается. В ходе исследования тотальные уровни амилоидных пептидов увеличиваются от ~ 1.6 х 105 пг/г мозга до ~ 3.8 х 106 за время от 9 до 17 недель.
В то время как раннее отложение амилоида в этой модели позволяет быстро тестировать соединения в относительно коротких временных рамках, активность (агрессивность) этой модели и высокие уровни Аβ пептида делают терапевтическую оценку в более длительном эксперименте более трудной задачей.
Изучают продолжительное терапевтическое действие соединений по настоящему изобретению на церебральное амилоидное отложение и уровни β-амилоида (Λβ) в плазме и мозге трансгенных мышей, ТдСЯЫЭ8, экспрессирующих человеческий амилоидный белок-предшественник (йАРР), как описано ниже. Соединения вводят в течение 8 или 16 недельного периода, по окончании которого определяют уровни Аβ пептидов в плазме и мозге ТдСЯЫЭ8 животных. Целью этого исследования является оценка эффективности соединений при модулировании прогрессирования амилоидогенного процесса в мозге и в плазме трансгенной мышиной модели болезни Альцгеймера (АО).
Способы
Мыши, используемые в исследовании, состоят из животных, несущих одну копию йАРР гена (+/-) от 2ого и 3его поколений от прародителей (Ν2 и Ν3), полученных путём обратного скрещивания от ТдСЯЫЭ8.Е'УВ(^)А.НЦ3) с В6АЕ/1 гибридных животных.
Ν1 = ТдСЯЫЭ8.Е1УВ№)А1(№!) х В6АЕ/1
Ν2 = ТдСЯN^8.ЕVВ(N2)А^(N3).В6ЛЕ/^(N1) х В6АЕ/1
Ν3 = ТдСЯЫЭ8.Е1УВ№)А1(№!). В6АЕ/1№) х В6АЕ/1
Для обозначения этих животных в настоящем исследовании применяются следующие сокращения: ТдСЯN^8.В6ЛЕ/^(N2); ТдСЯN^8.В6ЛЕ/^(N3).
Самцам и самкам трансгенных мышей ежедневно вводят подкожно (соединение ВХ) или дают перорально (соединения В\У и В2) соответствующие соединения в течение 8 или 16 недель.
Исходные (базовые) животные представляют собой 9±1-недельных, не лечившихся ранее ТдСЯЫО8.В6АЕ/1 животных 2ого и 3его поколений. Этих мышей используют для определения степени (величины) церебральных амилоидных отложений и уровней Аβ в плазме и мозге не лечившихся ранее трансгенных животных в начале лечения.
Начиная с 9-недельного возраста (±1 неделя) животные получают ежедневно соответствующее лечение в течение 8 или 16 недель в дозе 30 или 100 мг/кг при 10 мл/кг. Способ введения является подкожным для водорастворимых соединений (Соединение ВХ) и оральным для соединений, солюбилизированных в 1% метилцеллюлозе (МС 1%) (Соединения В\У и В2). В конце периода лечения плазму и мозг после перфузии собирают для количественного определения уровней Аβ.
Состояние здоровья животных контролируют, образцы собирают и определяют уровни Аβ как описано выше при описании исследования кратковременного лечения. Соединения оценивают на основании их способности модулировать уровни Аβ пептидов в плазме и уровни церебрального растворимого/нерастворимого Аβ в мозге. Уровни Аβ, наблюдаемые в плазме и мозге пролеченных животных, сравнивают с уровнями, полученными в контрольных группах, получавших носитель (воду) или метилцеллюлозу, и располагают в ряд в соответствии с интенсивностью фармакологического действия (эффекта).
Настоящее изобретение также относится к новым соединениям и их синтезу. Поэтому ниже представлены следующие примеры для иллюстрации получения некоторых из этих соединений.
- 39 019334
Синтез соединений по изобретению
Получение изобутилового эфира Е-(№Вос)-РЬе-Е-Рбе-гомотаурина
Компонент 1: Ε-ζΝ-Вос) Рбе-Ь-РЬе
К охлаждённому (0°С) раствору ди-Ь-Рбе-Рбе (1 г, 3.20 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) и 1 N №ОН (3,3 мл) прибавляют раствор (Вос)2О (800 мг, 3,5 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл). Смесь перемешивают при 0-5°С в течение 2 ч. Прибавляют новую порцию (Вос)2О (100 мг) и смесь перемешивают ещё в течение 60 мин при 0-5°С, а затем в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем смесь упаривают досуха. Растворяют остаток в смеси вода/ЕЮАс и, прибавляя 2Ν НС1, доводят рН до 2. Водный слой 3 раза экстрагируют ЕЮАс. Объединённые органические вытяжки сушат рассолом и растворитель упаривают. Часть твёрдого вещества, не растворяющуюся в смеси ЕЮАс/СНС13, отфильтровывают. Нужный Ε-(ΝВос)-Р11е-Б-Р11е 1 получают в виде белой пены (выход 913,7 мг, 2,215 ммоль, 71%).
Компонент 2: изобутиловый эфир 3-амино-1-пропансульфоновой кислоты
О +
ΝβΝ3
195.27
А О О
5, П=№
СзНвЫзНаОзЗ
187.14
1)РСЦ.К=С1 2>№υΟΗ,2,6-Μχίηβ,
3)Н2,Р<1€,7виОН
Стадия 1: Натриевая соль 3-азидо-1-пропансульфоновой кислоты (5)
К смеси азида натрия (3,22 г, 49,1 ммоль) в растворителе вода/ацетон (70 мл, 20 к 50) прибавляют раствор 1,3- пропансультона 4 (6,12 г, 49,1 ммоль) в ацетоне (30 мл). Прозрачный раствор перемешивают при комнатной температуре. Реакция заканчивается через 1 ч. Растворитель упаривают в вакууме. Твёрдый остаток промывают горячим эфиром (50 мл), а затем эфиром при комнатной температуре (150 мл). Сушат в вакуум-шкафу при 40°С в течение ночи. Титульное соединение 5 получают в виде твёрдого вещества белого цвета (выход 8,69 г, 46,4 ммоль, 95%).
Стадия 2: 3-азидо-1-пропансульфонилхлорид
Натриевую соль 3-азидо-1-пропансульфоновой кислоты 5 (1,87 г, 10,0 ммоль) суспендируют в сухом бензоле (20 мл) и к суспензии прибавляют РС15 (2,3 г, 10,5 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, затем в течение 1 ч нагревают при слабом кипении. Бензол и Р(О)С13 упаривают в вакууме. К сырой смеси прибавляют бензол и растворитель снова отгоняют в вакууме. Остаток сушат в вакууме. Высушенный остаток растворяют в хлористом метилене (безводный, 15 мл) и охлаждают до -10°С на бане лёд/ацетон.
Стадия 3: 3-азидо-1-пропансульфоновая кислота
К охлаждённому раствору сульфонилхлорида медленно прибавляют раствор изобутанола (1,00 мл, 10,8 ммоль) и 2,6-лутидина (1,3 мл, 11,2 ммоль) в хлористом метилене (10 мл). Смесь перемешивают при -10°С в течение 5 мин, затем при комнатной температуре в течение 2 ч. К реакционной смеси прибавляют воду (для прекращения реакции), а затем хлористый метилен для экстракции продукта. Органический слой промывают один раз водой, насыщенным водным раствором NаНСО3, рассолом, а затем сушат сульфатом магния. Растворитель упаривают в слабом вакууме, а остаток сушат в вакууме. Оставшийся 2,6-лутидина гидрохлорид удаляют, промывая остаток эфиром. Полученное масло (1,78 г) переносят на колонку для флеш-хроматографии (силикагель, ЕЮАс в смеси гексанов от 15 до 20%), получают заданный сложный эфир в виде масла (790 мг, 35%).
Стадия 4: изобутиловый эфир 3-амино-1-пропансульфоновой кислоты
К суспензии Рб/С (10%, 200 мг) в изобутаноле (4 мл), насыщенном Н2, в атмосфере Н2 через полую
- 40 019334 иглу вводят раствор изобутил-3-азидопропансульфоната (1,13 г, 5,11 ммоль). Затем смесь перемешивают в атмосфере Н2 (40 ρβί, 275,79 кПа) при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывают. Фильтрат упаривают досуха. Остаток сушат в вакууме. Титульное соединение 2, изобутиловый эфир гомотаурина, получают в виде коричневого масла (808,7 мг, 81%).
Реакция компонента 1 с компонентом 2
К охлаждённому (0-5°С) раствору Ν-Вос-Ь-Рйе-Ь-Рйе 1 (913,7, 2,215 ммоль) и изобутилового эфира гомотаурина 2 (423 мг, 2.21 ммоль) в хлористом метилене (безводный, 30 мл) прибавляют НОВТ (340 мг, 2.215 ммоль). Через 5 мин по каплям прибавляют раствор 1-циклогексил-3-(2морфолиноэтил)карбодиимид мето-патолуолсульфоната (982 мг, 2.215 ммоль) в хлористом метилене (10 мл). Раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К смеси прибавляют хлористый метилен (50 мл) и органический слой последовательно промывают 1 Ν КаНЗОд, насыщенным водным раствором NаНСОз и рассолом и сушат сульфатом натрия. Растворитель упаривают в вакууме. ТСХ показывает присутствие трёх веществ. Так как примеси менее растворимы в метаноле, повторной обработкой метанолом с последующим фильтрованием удаляют основную часть примесей. Колоночной хроматографией на силикагеле (2% МеОН в СНС13) получают трипептид 3 в виде янтарного стекловидного твёрдого вещества (156,1 мг, 12%).
Получение изобутилового эфира Ь-Рке-Ь-Рке-гомотаурина
К охлаждённому (0°С) раствору изобутилового эфира Ν-Вос-Ь-Рке-Ь-Рке-гомотаурина (202 мг, 0,343 ммоль) в метаноле прибавляют концентрированную НС1 (0,7 ммоль), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем оставляют на ночь в холодильнике. Растворитель упаривают в вакууме, твёрдый остаток сушат в вакууме, получают изобутиловый эфир Ь-Рке-Ь-Рке-гомотаурина в виде твёрдого вещества белого цвета (171,8 мг, 95%).
Получение этилового эфира №Вос-Ь-Рке-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Ь-Рке (Соединение Υ)
К охлаждённому (0°С) раствору 3-аминопропан-1-сульфонил-Ь-Рке-ОЕ1 (2.66 ммоль, 839 мг) в хлористом метилене (10 мл) прибавляют раствор Ν-грет-ВОС-Е-Рке Ν-гидроксисукцинимидоэфира (280 ммоль, 1,01 г) в хлористом метилене (12 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Прибавляют хлористый метилен и промывают 2Ν НС1, насыщенным водным раствором ΝαНСО3 и рассолом. Органический слой сушат сульфатом магния и растворитель удаляют в вакууме. Остаток наносят на колонку для флеш- хроматографии с силикагелем (2% МеОН в СНС13). Выделяют порцию чистого требуемого вещества (600 мг). Остальной продукт смешивают с 40% сукцинимида. К растворённой в хлористом метилене (8 мл) и охлаждённой до 0°С смеси добавляют немного 3-амино пропанола (70 мкл). Смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре. Прибавляют хлористый метилен и промывают 2Ν НС1, насыщенным водным раствором NаНСОз и рассолом. Органический слой сушат сульфатом магния и растворитель удаляют в вакууме. Продукт очищают колоночной флеш-хроматографией на силикагеле (2% МеОН в СНС13). Выделяют ещё одну порцию чистого требуемого вещества (432,4 мг) наряду с аддуктом сукцинимида и 3-аминопропанола (220,6 мг, 0,684 ммоль). Соединение Υ получают в виде белой кристаллической пены (1030 мг, 1,83 ммоля, 65%). 'Н и 13С ЯМР спектры соответствуют структуре.
Получение этилового эфира Е-Рке-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Ь-Рке (Соединение Ζ)
К охлаждённому (0°С) раствору этилового эфира №Вос-Е-Рке-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Е-Рке (197 мг, 0,350 ммоль) в этаноле (8 мл) прибавляют концентрированную НС1 (0,8 мл). Смесь охлаждают в бане лёд/вода и перемешивают в течение 45 мин, а затем 3 ч при комнатной температуре. В течение уикэнда (сб., вскр.) смесь хранят в морозильнике (-20°С). Растворитель отгоняют в вакууме. Остаток этанола удаляют трёхкратным совместным упариванием в вакууме с хлороформом. Остаток сушат в вакууме, получают кристаллы не чисто-белого цвета (175,3 мг) с количественным выходом. 1Н и 13С ЯМР спектры соответствуют структуре соединения Ζ.
- 41 019334
Получение натриевой соли Б-(ЖВос)-Рйе-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Б- Рйе (Соединение АА)
К раствору этилового эфира Ь-(№Вос)-Рйе-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Ь-Рйе (110 мг, 0,197 ммоль) в метаноле (2 мл)1 прибавляют один эквивалент 1Ν ΝαΟΗ (202 мкл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Образуется белая суспензия. Прибавляют МеОН (1 мл), воду (1 мл) и 1Ν ΝαΟΗ (10 мкл). Смесь перемешивают на тёплой водяной бане около 2 ч. Метанол отгоняют в вакууме. Влажный остаток лиофилизируют, получают соединение АА в виде белого порошка с количественным выходом (110,2 г). 1Н и 13С ЯМР спектры соответствуют структуре.
Получение метилового эфира Е-Рйе-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Б-Рйе (Соединение АВ)
Гидролиз проводят обычным методом с применением БЮН/МеОН. Продукт очищают перекристаллизацией из ЕЮАс и смеси гексанов.
Е-Рйе-(3-аминопропан-1-сульфонил)-Б-Рйе-ОН (203 мг, 0,382 ммоля) растворяют в метаноле (4 мл) и раствор охлаждают до 0°С. Прибавляют концентрированную НС1 (0,35 мл) и смесь перемешивают в течение 2 ч при 0°С и в течение 2,5 ч при комнатной температуре. Летучие отгоняют в вакууме. Водный остаток лиофилизируют, получают продукт в виде твёрдого вещества белого цвета (171,4 мг). Спектры ЯМР и М8 показывают, что продукт является смесью свободной кислоты и метилового эфира. Массспектр также показывает сильную ассоциацию пептида. Пик димера в масс-спектре является основным. Твёрдый продукт растворяют в метаноле и выдерживают с НС1 при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривают и остаток сушат в вакууме. Продукт получают в виде белого пенистого твёрдого вещества (180,4 мг, 97%). Ή и 13С ЯМР спектры соответствуют структуре соединения АВ.

Claims (24)

1. Соединение формулы V к15 О
К14—(аа)т—Ν—(СН2)П—5—А—К11 0 (V) где
А обозначает азот или кислород;
В11 обозначает водород, группу, образующую сложный С1-С6алкиловый эфир, -(СН2),.-0 или, если А обозначает азот, то А и В11 вместе образуют остаток природной или неприродной аминокислоты или её метиловый или этиловый сложный эфир;
О обозначает водород, тиазолил, триазолил, имидазолил, бензотиазолил или бензимидазолил;
х равно 0, 1, 2, 3 или 4;
п равно 3 или 4;
аа обозначает остаток природной или неприродной аминокислоты, присоединенный через его карбонильную группу, причем указанный остаток аминокислоты находится в Ь-конфигурации;
т равно 1, 2 или 3;
В14 обозначает водород или трет-бутилоксикарбонильную защитную группу;
В15 обозначает водород, незамещенный С1-С6алкил, С1-С6алкильную группу, замещенную С6арилом, или С6арил, и его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что п равно 3.
3. Соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что т равно 1 или 2.
4. Соединение по п.3, отличающееся тем, что т равно 1.
5. Соединение по п.3, отличающееся тем, что т равно 2.
6. Соединение по любому из пп.1-5, отличающееся тем, что А-В11 обозначает остаток фенилаланина, присоединенный по его аминогруппе.
7. Соединение по любому из пп.1-5, отличающееся тем, что А представляет собой кислород, а В11 представляет собой водород.
8. Соединение по любому из пп.1-7, отличающееся тем, что аа обозначает остаток природной Ьаминокислоты.
9. Соединение по любому из пп.1-8, отличающееся тем, что (аа)т обозначает остаток Бфенилаланина, Ь-глицина или Б-Рйе-Б-Рйе.
- 42 019334
10. Соединение по любому из пп.1-7, отличающееся тем, что аа обозначает остаток неприродной Ьаминокислоты.
11. Соединение по любому из пп.1-10, отличающееся тем, что В15 обозначает водород или С1С6алкил.
12. Соединение по любому из пп.1-10, отличающееся тем, что В15 обозначает С1-С6алкильную группу, замещенную С6арилом.
13. Соединение по любому из пп.1-10, отличающееся тем, что В15 обозначает водород.
14. Соединение по любому из пп.1-11, отличающееся тем, что В14 и В15 оба обозначают водород.
15. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно выбрано из группы, состоящей из или его фармацевтически приемлемых солей.
16. Фармацевтическая композиция для ингибирования отложения в-амилоида, содержащая соединение по любому из пп.1-15 вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
17. Способ ингибирования отложения в-амилоида, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-15 субъекту, нуждающемуся в этом.
18. Способ лечения или предупреждения заболевания или состояния, выбранного из болезни Альцгеймера, легкого когнитивного расстройства, когнитивного расстройства от легкого до умеренного, возрастного ухудшения когнитивных функций, старческого слабоумия, сосудистого слабоумия, церебральной амилоидной ангиопатии, миозита телец включения, возрастной дегенерации желтого пятна или синдрома Дауна, где указанные болезнь Альцгеймера, легкое когнитивное расстройство, когнитивное расстройство от легкого до умеренного, возрастное ухудшение когнитивных функций, старческое слабоумие, сосудистое слабоумие, церебральная амилоидная ангиопатия, миозит телец включения, возрастная дегенерация желтого пятна или синдром Дауна связаны с амилоидогенными белками или пептидами вамилоида, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-15 субъекту, нуждающемуся в этом.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанное заболевание или состояние выбрано из болезни Альцгеймера, легкого когнитивного расстройства, когнитивного расстройства от легкого до умеренного, возрастного ухудшения когнитивных функций и старческого слабоумия.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что указанное заболевание или состояние представляет собой болезнь Альцгеймера.
21. Применение соединения по любому из пп.1-15 для изготовления лекарственного средства для ингибирования отложения в-амилоида.
22. Применение соединения по любому из пп.1-15 для изготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения заболевания или состояния, выбранного из болезни Альцгеймера, легкого когнитивного расстройства, когнитивного расстройства от легкого до умеренного, возрастного ухудшения когнитивных функций, старческого слабоумия, сосудистого слабоумия, церебральной амилоидной ангиопатии, миозита телец включения, возрастной дегенерации желтого пятна или синдрома Дауна, где указанные болезнь Альцгеймера, легкое когнитивное расстройство, когнитивное расстройство от легкого до умеренного, возрастное ухудшение когнитивных функций, старческое слабоумие, сосудистое слабоумие, церебральная амилоидная ангиопатия, миозит телец включения, возрастная дегенерация желтого
- 43 019334 пятна или синдром Дауна связаны с амилоидогенными белками или пептидами β-амилоида.
23. Применение по п.22, отличающееся тем, что указанное заболевание или состояние выбрано из болезни Альцгеймера, легкого когнитивного расстройства, когнитивного расстройства от легкого до умеренного, возрастного ухудшения когнитивных функций и старческого слабоумия.
24. Применение по п.23, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой болезнь Альцгеймера.
EA200900802A 2003-06-23 2004-06-21 Способы и композиции для лечения амилоидных заболеваний EA019334B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US48090603P 2003-06-23 2003-06-23
US51204703P 2003-10-17 2003-10-17
US10/871,514 US7414076B2 (en) 2003-06-23 2004-06-18 Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US10/871,365 US7244764B2 (en) 2003-06-23 2004-06-18 Methods and compositions for treating amyloid-related diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200900802A1 EA200900802A1 (ru) 2010-04-30
EA019334B1 true EA019334B1 (ru) 2014-02-28

Family

ID=34139588

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200900802A EA019334B1 (ru) 2003-06-23 2004-06-21 Способы и композиции для лечения амилоидных заболеваний

Country Status (6)

Country Link
US (3) US7244764B2 (ru)
CN (1) CN101712640A (ru)
EA (1) EA019334B1 (ru)
IL (1) IL172194A (ru)
NZ (1) NZ579241A (ru)
TW (2) TWI361686B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11840565B2 (en) 2016-12-29 2023-12-12 University Of Miami Methods and compositions for treating virus-associated inflammation

Families Citing this family (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040208875A1 (en) * 1995-03-15 2004-10-21 Queen's University At Kingston Method for treating amyloidosis
DE60042896D1 (de) * 1999-04-28 2009-10-15 Bellus Health Int Ltd Zusammensetzungen und verfahren zur behandlung von amyloidosis mit sulphonatderivaten
WO2001003680A2 (en) * 1999-07-09 2001-01-18 Isis Innovation Limited Compounds for inhibiting diseases and preparing cells for transplantation
US7244764B2 (en) * 2003-06-23 2007-07-17 Neurochem (International) Limited Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US20050142191A1 (en) * 2003-06-23 2005-06-30 Neurochem (International) Limited Pharmaceutical formulations of amyloid inhibiting compounds
US20070010573A1 (en) * 2003-06-23 2007-01-11 Xianqi Kong Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US20060079578A1 (en) * 2003-06-23 2006-04-13 Julie Laurin Pharmaceutical formulations of amyloid inhibiting compounds
WO2006085149A2 (en) 2004-12-22 2006-08-17 Neurochem (International) Limited Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US20060257480A1 (en) * 2005-04-12 2006-11-16 Julie Laurin Pharmaceutical formulations of amyloid inhibiting compounds
TW200716088A (en) * 2005-04-15 2007-05-01 Neurochem Int Ltd Formulations and methods for treating amyloidosis
US7420071B2 (en) * 2005-05-04 2008-09-02 Uchicago Argonne, Llc Thermally stable surfactants and compositions and methods of use thereof
US20070049638A1 (en) * 2005-07-21 2007-03-01 Neurochem (International) Limited Polymorphic forms of 3-amino-1-propanesulfonic acid
WO2007125385A2 (en) * 2005-12-22 2007-11-08 Neurochem (International) Limited Treatment of renal disorders, diabetic nephopathy and dyslipidemias
JP5607930B2 (ja) 2006-10-12 2014-10-15 ビーエイチアイ リミテッド パートナーシップ ３−アミノ−１−プロパンスルホン酸を送達するための方法、化合物、組成物および媒体
AU2007337806A1 (en) * 2006-12-22 2008-07-03 Bellus Health (International) Limited Methods, compounds, and compositions for treating metabolic disorders and diabetes
EA036059B1 (ru) * 2007-12-28 2020-09-21 Протена Байосайенсиз Лимитед Способ получения антитела или его фрагмента, которое специфически связывается с агрегированным амилоидным белком
US20110237646A1 (en) * 2008-08-07 2011-09-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of transthyretin expression for the treatment of cns related disorders
WO2010054485A1 (en) * 2008-11-14 2010-05-20 Bellus Health (International) Limited Organic nutrient salts, methods of preparation and uses
EP2485591B1 (en) 2009-10-08 2016-03-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Iminothiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
UA108363C2 (uk) 2009-10-08 2015-04-27 Похідні імінотіадіазиндіоксиду як інгібітори bace, композиція на їх основі і їх застосування
WO2011044185A2 (en) 2009-10-08 2011-04-14 Schering Corporation Pentafluorosulfur imino heterocyclic compounds as bace-1 inhibitors, compositions, and their use
PT2563920T (pt) 2010-04-29 2017-05-26 Ionis Pharmaceuticals Inc Modulação da expressão de transtirretina
US8877795B2 (en) 2010-05-07 2014-11-04 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Identification of stabilizers of multimeric proteins
EP2694489B1 (en) 2011-04-07 2017-09-06 Merck Sharp & Dohme Corp. C5-c6 oxacyclic-fused thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
RU2466986C1 (ru) * 2011-05-30 2012-11-20 Учреждение Российской Академии Наук Институт Нефтехимии И Катализа Ран Способ получения n,n,-дизамещенных n-{[алкил(бензил)сульфанил]метил}аминов
RU2014111055A (ru) 2011-08-22 2015-09-27 Мерк Шарп И Доум Корп. 2-спирозамещенные иминотиазины и их моно- и диоксиды в качестве ингибиторов bace, композиции и их применение
EP3718547A1 (en) * 2011-10-03 2020-10-07 The University of Utah Research Foundation Application of 5-ht6 receptor antagonists for the alleviation of cognitive deficits of down syndrome
US9416129B2 (en) 2012-10-17 2016-08-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic substituted thiadiazine dioxide compounds as BACE inhibitors, compositions and their use
WO2014062549A1 (en) 2012-10-17 2014-04-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic substituted thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
CN104870000A (zh) 2012-12-20 2015-08-26 默沙东公司 作为bace抑制剂的c5,c6氧杂环稠合的亚胺基噻嗪二氧化物化合物,组合物及其用途
EP2934534B1 (en) 2012-12-21 2017-12-13 Merck Sharp & Dohme Corp. C5-spiro iminothiadiazine dioxides as bace inhibitors
WO2014150344A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Merck Sharp & Dohme Corp. C2-azaspiro iminothiazine dioxides as bace inhibitors
US9428476B2 (en) 2013-03-15 2016-08-30 Merck Sharp & Dohme Corp. S-imino-S-oxo-iminothiadiazine compounds as BACE inhibitors, compositions, and their use
US9422255B2 (en) 2013-03-15 2016-08-23 Merck Sharp & Dohme Corp. S-imino-S-oxo-iminothiazine compounds as BACE inhibitors, compositions, and their use
EP3083575B1 (en) 2013-12-18 2021-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. C-6 spirocarbocyclic iminothiadiazine dioxides as bace inhibitors, compositions, and their use
US9745324B2 (en) 2013-12-18 2017-08-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Iminothiadiazepane dioxide compounds as BACE inhibitors, compositions, and their use
US9732088B2 (en) 2014-06-02 2017-08-15 Merck Sharp & Dohme Corp. C2-carbocyclic iminothiazine dioxides as BACE inhibitors, compositions, and their use
WO2016025129A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Alhamadsheh Mamoun M Conjugation of pharmaceutically active agents with transthyretin ligands through adjustable linkers to increase serum half-life
US10238743B2 (en) 2014-10-03 2019-03-26 Merck Sharp & Dohme Corp. C5-C6-fused tricyclic iminothiadiazine dioxide compounds as BACE inhibitors, compositions, and their use
US10047098B2 (en) 2014-11-25 2018-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. C5-C6-oxacyclic fused iminopyrimidinone compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
US10071998B2 (en) 2015-01-20 2018-09-11 Merck Sharp & Dohme Corp. Iminothiadiazine dioxides bearing an amine-linked substituent as BACE inhibitors, compositions, and their use
EP3261655A4 (en) 2015-02-27 2018-10-10 Cognitive Clarity Inc. Compositions and methods for the treatment of "plaques and tangles" in humans and animals
CA2995093A1 (en) 2015-08-10 2017-02-16 Alzheon, Inc. Compositions and methods for treating and preventing neurodegenerative disorders
EP3414253B1 (en) 2016-02-11 2021-07-21 Merck Sharp & Dohme Corp. C5-c6-oxacylic fused iminothiazine dioxide compounds bearing an ether linker as bace inhibitors, compositions, and their use
CN106674063A (zh) * 2016-12-21 2017-05-17 中国科学院兰州化学物理研究所 两性有机小分子凝胶因子及其制备方法和应用
JP2021500864A (ja) 2017-09-29 2021-01-14 インテリア セラピューティクス，インコーポレイテッド Ｔｔｒ遺伝子編集およびａｔｔｒアミロイドーシスの治療用の組成物および方法
WO2020010236A1 (en) * 2018-07-06 2020-01-09 Yale University Methods and compositions for the treatment of amyloid-related disorders
CN109432045B (zh) * 2018-11-29 2021-11-23 佛山市正典生物技术有限公司 一种二氢吡啶微囊制剂及其制备方法
US11491201B2 (en) 2018-12-12 2022-11-08 Cognitive Clarity Inc. Compositions and methods for the treatment of “plaques and tangles” in humans and animals
CN109824555B (zh) * 2019-01-30 2021-02-19 华南理工大学 一种氨基磺酸及其制备方法与应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4870078A (en) * 1986-08-20 1989-09-26 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. W-amino alkylsulfonate derivatives for improving microcirculation
WO1996028187A1 (en) * 1995-03-15 1996-09-19 Queen's University At Kingston Method for treating amyloidosis
WO1997023458A1 (en) * 1995-12-22 1997-07-03 Warner-Lambert Company Subtype-selective nmda receptor ligands and the use thereof
US5716950A (en) * 1994-01-14 1998-02-10 Nippon Shoji Kabushiki Kaisha Diazacycloalkanealkylsulfonamide derivatives
WO2000064420A2 (en) * 1999-04-28 2000-11-02 Queen's University At Kingston Compositions and methods for treating amyloidosis using sulphonate derivatives
WO2000071101A2 (en) * 1999-05-24 2000-11-30 Queen's University At Kingston Methods and compounds for inhibiting amyloid deposits
WO2002007781A2 (en) * 2000-07-25 2002-01-31 Neurochem Inc. Amyloid targeting imaging agents and uses thereof

Family Cites Families (114)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2531468A (en) * 1949-04-14 1950-11-28 Eastman Kodak Co Polyvinyl sulfonates and process for their preparation
DE927992C (de) 1952-07-27 1955-05-23 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von Salzen des 1, 2-Dimethyl-3-phenyl-4-amino-5-pyrazolons
DE1122064B (de) * 1960-01-09 1962-01-18 Basf Ag Verfahren zur Einfuehrung von alyphatischen Kohlenwasserstoffresten in organische Verbindungen, die Hydroxylgruppen, tertiaere Aminogruppen, aromatische gebundene Sulfhydrylgruppen und bzw. oder aromatisch gebundene primaere oder sekundaere Aminogruppen enthalten
US3218352A (en) * 1962-05-03 1965-11-16 Abbott Lab Homotaurine process
US3658966A (en) * 1969-09-15 1972-04-25 Kowa Co Methods of treating hypertension
DE2140278A1 (en) 1970-01-19 1972-03-09 Crompton and Knowles Corp., Worcester, Mass. (V.St.A.) Water-soluble dyes and dye intermediates
US3872125A (en) * 1973-03-03 1975-03-18 Sandoz Ag 3-substituted-4-aryl isoquinolines
US4085134A (en) * 1974-02-15 1978-04-18 Petrolite Corporation Amino-phosphonic-sulfonic acids
US3920833A (en) * 1974-08-08 1975-11-18 Stanley Drug Products Inc Antifibrinolytic agents
US4187245A (en) 1975-06-02 1980-02-05 Petrolite Corporation Hydroxypropylene-amino-phosphonic-sulfonic acids
FR2384751A1 (fr) * 1977-03-23 1978-10-20 Francaise Coop Pharma Nouveaux derives de la taurine a activite neuro-musculaire renforcee
CA1140049A (en) * 1977-12-22 1983-01-25 Dke J.E. Helgstran Pharmaceutical preparations from derivatives of hydroxycarbonylphosphonic acid
FR2437834A1 (fr) 1978-10-04 1980-04-30 Lejeune Jerome Compositions pharmaceutiques a base de l-serine ou de glycine
FR2457281A1 (fr) * 1979-05-23 1980-12-19 Meram Lab Nouveaux derives de l'acide 3-aminopropanesulfonique ayant une activite membranaire renforcee
US4255448A (en) * 1979-09-10 1981-03-10 Wisconsin Alumni Research Foundation Method for reducing epileptiform activity
US4448779A (en) * 1981-07-16 1984-05-15 Sanofi Use of MS salt in geriatric medicine
JPS5879022A (ja) * 1981-11-04 1983-05-12 Bitamin Kenkyusho:Kk 第四級窒素原子を含有する新規な金属架橋高分子化合物、その製法及び該高分子化合物を有効成分とする高脂血症治療剤
US5525727A (en) * 1982-05-18 1996-06-11 University Of Florida Brain-specific drug delivery
US5087618A (en) * 1982-05-18 1992-02-11 University Of Florida Redox carriers for brain-specific drug delivery
US4540564A (en) * 1982-05-18 1985-09-10 University Of Florida Brain-specific drug delivery
FR2529546A1 (fr) * 1982-07-05 1984-01-06 Meram Lab Nouveaux sels d'amino-(et imino-)acides a, o-sulfoniques n-substitues, vecteurs cationiques de haute penetration cellulaire
US4522811A (en) * 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
IT1193590B (it) 1983-01-07 1988-07-08 Loris Jacopo Bononi Derivati amino-alchil-solfonici,procedimento per la loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono
DE3343530A1 (de) * 1983-12-01 1985-06-13 Max Planck Gesellschaft Arzneimittel mit verbesserter penetration der gewebsmembran
US4737353A (en) * 1984-04-13 1988-04-12 Union Carbide Corporation Beryllium-aluminum-phosphorus-silicon-oxide molecular sieve compositions
DE3438291A1 (de) * 1984-10-19 1986-04-24 Röhm GmbH, 6100 Darmstadt Verfahren zur herstellung einer waessrigen ueberzugsmitteldispersion und ihre verwendung zum ueberziehen von arzneimitteln
US5374548A (en) * 1986-05-02 1994-12-20 Genentech, Inc. Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor
MX9203291A (es) * 1985-06-26 1992-08-01 Liposome Co Inc Metodo para acoplamiento de liposomas.
JPH0733332B2 (ja) * 1985-11-19 1995-04-12 富山化学工業株式会社 痴呆症状改善・治療剤
US5023252A (en) * 1985-12-04 1991-06-11 Conrex Pharmaceutical Corporation Transdermal and trans-membrane delivery of drugs
FR2595356B1 (fr) 1986-03-05 1991-05-24 Pasteur Strasbourg Universite Derives des nitro ou aminobenzyltetrahydroisoquinoleines, procedes d'obtention, compositions pharmaceutiques les contenant, proprietes pharmacologiques et applications
JPH0786122B2 (ja) * 1986-05-30 1995-09-20 日本ペイント株式会社 三次元架橋された微小樹脂粒子およびその製造法
US5039794A (en) * 1986-09-19 1991-08-13 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Tumor egress factor and processes for producing the same
US4847082A (en) * 1987-01-21 1989-07-11 Robert Sabin Method of treatment of Alzheimer's disease using phytic acid
US5166320A (en) * 1987-04-22 1992-11-24 University Of Connecticut Carrier system and method for the introduction of genes into mammalian cells
IT1205042B (it) 1987-05-28 1989-03-10 Crinos Industria Farmaco Composizione farmaceutica ad attivita' terapeutica per il trattamento della demenza senile di tipo alzheimer
IT1211792B (it) 1987-09-21 1989-11-03 Sigma Tau Ind Farmaceuti O-alcanoil derivati dell'acido 3ammino-2-idrossipropansolfonico adattivita'anticonvulsivante e loro composizioni farmaceutiche per il trattamento terapeutico dell'epilessia
AU2800689A (en) * 1987-11-18 1989-06-14 State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon Health Sciences University Differential delivery of therapeutic agents across the blood brain barrier
US5002935A (en) * 1987-12-30 1991-03-26 University Of Florida Improvements in redox systems for brain-targeted drug delivery
US5017566A (en) * 1987-12-30 1991-05-21 University Of Florida Redox systems for brain-targeted drug delivery
US4968678A (en) 1988-02-19 1990-11-06 Eli Lilly And Company Tetrazole excitatory amino acid receptor antagonists
DE68905845T2 (de) 1988-02-19 1993-08-05 Lilly Co Eli Tetrazolverbindungen als antagonisten der excitatorischen aminosaeurerezeptoren.
US5284876A (en) * 1988-02-26 1994-02-08 Neuromedica, Inc. Method of treating tardive dyskinesia using dopaminergic agents of prodrugs of therapeutic agents
US5061721A (en) 1989-03-15 1991-10-29 G. D. Searle & Co. Composition containing d-cycloserine and d-alanine for memory and learning enhancement or treatment of a cognitive or psychotic disorder
US5108921A (en) * 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5194654A (en) * 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
DK437289D0 (da) * 1989-09-04 1989-09-04 Hans Bundgaard Prodrug derivatives of thyrotropin-releasing hormone (trh)
US5977307A (en) * 1989-09-07 1999-11-02 Alkermes, Inc. Transferrin receptor specific ligand-neuropharmaceutical agent fusion proteins
US5672683A (en) * 1989-09-07 1997-09-30 Alkermes, Inc. Transferrin neuropharmaceutical agent fusion protein
US5527527A (en) * 1989-09-07 1996-06-18 Alkermes, Inc. Transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical agent conjugates
US5463092A (en) * 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
DE3940410A1 (de) 1989-12-04 1991-06-06 Schering Ag Neue verwendung von nmda-rezeptor-antagonisten
JPH03236315A (ja) * 1989-12-05 1991-10-22 Nippon Oil & Fats Co Ltd 抗精神病薬
DE4004978A1 (de) 1990-02-19 1991-08-22 Nmi Naturwissenschaftl U Mediz Praeventive therapie fuer morbus alzheimer
JPH0725786A (ja) 1990-05-16 1995-01-27 Univ Rockefeller アルツハイマー病を伴うアミロイドーシスの治療
US5242932A (en) * 1991-12-17 1993-09-07 The Rockefeller University Treatment of amyloidosis associated with alzheimer disease
US5385915A (en) * 1990-05-16 1995-01-31 The Rockefeller University Treatment of amyloidosis associated with Alzheimer disease using modulators of protein phosphorylation
DE4021066A1 (de) 1990-07-03 1992-01-09 Hoechst Ag Langzeitprophylaxe gegen erkrankungen, die durch viren oder durch unkonventionelle viren verursacht werden
US5177064A (en) * 1990-07-13 1993-01-05 University Of Florida Targeted drug delivery via phosphonate derivatives
ATE150301T1 (de) * 1990-07-19 1997-04-15 Nippon Zoki Pharmaceutical Co Aminoalkanesulfonsäurederivate und pharmazeutische zusammensetzungen davon zur prävention oder behandlung von herzerkrankungen
US5827819A (en) * 1990-11-01 1998-10-27 Oregon Health Sciences University Covalent polar lipid conjugates with neurologically active compounds for targeting
US5270312A (en) * 1990-11-05 1993-12-14 Warner-Lambert Company Substituted piperazines as central nervous system agents
US5668117A (en) * 1991-02-22 1997-09-16 Shapiro; Howard K. Methods of treating neurological diseases and etiologically related symptomology using carbonyl trapping agents in combination with previously known medicaments
US5164295A (en) * 1991-03-06 1992-11-17 The Upjohn Company Method for identifying amyloid protein-extracellular matrix protein affinity altering compounds
US5192753A (en) * 1991-04-23 1993-03-09 Mcgeer Patrick L Anti-rheumatoid arthritic drugs in the treatment of dementia
GB9117716D0 (en) 1991-08-16 1991-10-02 Lynxvale Ltd Gaba derivatives and their therapeutic application
US5254342A (en) * 1991-09-30 1993-10-19 University Of Southern California Compositions and methods for enhanced transepithelial and transendothelial transport or active agents
ES2096064T3 (es) * 1991-12-19 1997-03-01 Ciba Geigy Ag Derivados del acido aminosulfonico y procedimiento para su obtencion.
US6004936A (en) 1992-05-29 1999-12-21 Queen's University At Kingston Method of use of serum amyloid a protein
US5318958A (en) 1992-05-29 1994-06-07 Queen's University At Kingston Amyloid precursor protein
US5258402A (en) * 1992-06-11 1993-11-02 Mcneil-Ppc, Inc. Imidate derivatives of pharmaceutically useful anticonvulsant sulfamates
US5276059A (en) * 1992-07-10 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibition of diseases associated with amyloid formation
US5383988A (en) * 1992-09-10 1995-01-24 Paragon Trade Brands, Inc. Modular apparatus for fabricating an absorbent article
EP0599303A3 (en) * 1992-11-27 1998-07-29 Takeda Chemical Industries, Ltd. Peptide conjugate
US5643562A (en) * 1993-03-29 1997-07-01 Queen's University Of Kingston Method for treating amyloidosis
US20040208875A1 (en) * 1995-03-15 2004-10-21 Queen's University At Kingston Method for treating amyloidosis
US5972328A (en) * 1993-03-29 1999-10-26 Queen's University At Kingston Method for treating amyloidosis
DE4313118A1 (de) 1993-04-22 1994-10-27 Hoechst Ag Verwendung von 1,2,3,4-Tetrahydroisochinolin-Derivaten als Antimykotika
US5434137A (en) * 1993-05-10 1995-07-18 Black; Keith L. Method for selective opening of abnormal brain tissue capillaries
US5488145A (en) * 1993-12-23 1996-01-30 Oklahoma Medical Research Foundation 2,4-disulfonyl phenyl butyl nitrone, its salts, and their use as pharmaceutical free radical traps
US5466683A (en) * 1994-08-25 1995-11-14 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Water-soluble analogs of carbamazepine
US6015555A (en) * 1995-05-19 2000-01-18 Alkermes, Inc. Transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical or diagnostic agent conjugates
US5858326A (en) * 1995-06-06 1999-01-12 Neurochem, Inc. Methods of increasing amyloid deposition
AU703540B2 (en) 1996-03-26 1999-03-25 Meddiss, Incorporated Methods for inducing analgesia or anesthesia and treating or preventing ischemic injury of tissues in general
CA2217322C (en) * 1996-10-03 2005-01-04 Coastside Bio Resources Inhibition of complement pathway by sea cucumber fractions
US6306909B1 (en) 1997-03-12 2001-10-23 Queen's University At Kingston Anti-epileptogenic agents
US5869469A (en) * 1997-08-18 1999-02-09 Queen's University At Kingston Phosphonocarboxylate compounds for treating amyloidosis
WO1999009999A1 (en) * 1997-08-28 1999-03-04 University Of Washington Specific saccharide compositions and methods for treating alzheimer's disease and other amyloidoses
US5952389A (en) * 1998-01-13 1999-09-14 Synchroneuron Methods of treating tardive dyskinesia and other movement disorders
US6294583B1 (en) * 1998-01-13 2001-09-25 Synchroneuron, Llc Methods of treating tardive dyskinesia and other movement disorders
US20020022657A1 (en) 1998-02-11 2002-02-21 Francine Gervais Methods for modulating neuronal cell death
US6329356B1 (en) 1998-04-10 2001-12-11 Neurochem, Inc. Phosphono-carboxylate compounds for treating amyloidosis
US6310073B1 (en) * 1998-07-28 2001-10-30 Queen's University At Kingston Methods and compositions to treat glycosaminoglycan-associated molecular interactions
WO2001003680A2 (en) * 1999-07-09 2001-01-18 Isis Innovation Limited Compounds for inhibiting diseases and preparing cells for transplantation
MXPA02006196A (es) * 1999-12-23 2002-12-09 Neurochem Inc Compuestos y metodos para modular la angiopatia amiloide cerebral.
US6376557B1 (en) * 2000-03-16 2002-04-23 Chanda Bhuwalka Zaveri Methods for treating alopecia
US7311893B2 (en) 2000-07-25 2007-12-25 Neurochem (International) Limited Amyloid targeting imaging agents and uses thereof
US7501429B2 (en) * 2001-04-11 2009-03-10 Queen's University At Kingston Pyrimidine compounds as anti-ictogenic and/or anti-epileptogenic agents
CA2448160A1 (en) * 2001-05-25 2002-12-05 Queen's University At Kingston Heterocyclic beta-amino acids and their use as anti-epileptogenic agents
BR0212078A (pt) * 2001-08-31 2004-09-28 Neurochem Int Ltd Método de tratar ou prevenir uma doença relacionada com amilóide em um paciente, composição farmacêutica, composto quìmico, e, uso de um composto
CA2399169A1 (en) 2001-09-07 2003-03-07 Queen's University At Kingston Diagnostic methods for determining susceptibility to convulsive conditions
US20050031651A1 (en) * 2002-12-24 2005-02-10 Francine Gervais Therapeutic formulations for the treatment of beta-amyloid related diseases
US7244764B2 (en) 2003-06-23 2007-07-17 Neurochem (International) Limited Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US20050038000A1 (en) * 2003-06-23 2005-02-17 Xianqi Kong Methods and compositions for the treatment of amyloid-and epileptogenesis-associated diseases
US20070010573A1 (en) * 2003-06-23 2007-01-11 Xianqi Kong Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US7253306B2 (en) 2003-06-23 2007-08-07 Neurochem (International) Limited Pharmaceutical drug candidates and methods for preparation thereof
US7414076B2 (en) 2003-06-23 2008-08-19 Neurochem (International) Limited Methods and compositions for treating amyloid-related diseases
US20050142191A1 (en) * 2003-06-23 2005-06-30 Neurochem (International) Limited Pharmaceutical formulations of amyloid inhibiting compounds
US20050215562A1 (en) * 2003-06-23 2005-09-29 Patrick Tremblay Methods for treating protein aggregation disorders
SI1646659T1 (sl) * 2003-06-23 2014-07-31 Kiacta Sarl Postopek za pripravo spojin 1,3-propan disulfonske kisline
US7262223B2 (en) 2004-01-23 2007-08-28 Neurochem (International) Limited Amidine derivatives for treating amyloidosis
US20080038192A1 (en) * 2004-07-19 2008-02-14 Neurochem Inc. Diagnostic Methods Of Multiple Organ Amyloidosis
EP1828111A2 (en) * 2004-11-12 2007-09-05 Neurochem (International) Limited Methods and fluorinated compositions for treating amyloid-related diseases
JP2008520647A (ja) * 2004-11-16 2008-06-19 ニューロケム （インターナショナル） リミテッド Ｃｎｓおよびアミロイド関連疾患治療のための化合物

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4870078A (en) * 1986-08-20 1989-09-26 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. W-amino alkylsulfonate derivatives for improving microcirculation
US5716950A (en) * 1994-01-14 1998-02-10 Nippon Shoji Kabushiki Kaisha Diazacycloalkanealkylsulfonamide derivatives
WO1996028187A1 (en) * 1995-03-15 1996-09-19 Queen's University At Kingston Method for treating amyloidosis
WO1997023458A1 (en) * 1995-12-22 1997-07-03 Warner-Lambert Company Subtype-selective nmda receptor ligands and the use thereof
WO2000064420A2 (en) * 1999-04-28 2000-11-02 Queen's University At Kingston Compositions and methods for treating amyloidosis using sulphonate derivatives
WO2000071101A2 (en) * 1999-05-24 2000-11-30 Queen's University At Kingston Methods and compounds for inhibiting amyloid deposits
WO2002007781A2 (en) * 2000-07-25 2002-01-31 Neurochem Inc. Amyloid targeting imaging agents and uses thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
VON K. LANYI et al., "Piperazin-Derivate II. Wirkung von Piperazin-Derivaten". Arzneimittel-Forschung. Drug Research, vol. 18, 1968, pp. 1431-1435, с. 1432, табл. 3, соединение 35 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11840565B2 (en) 2016-12-29 2023-12-12 University Of Miami Methods and compositions for treating virus-associated inflammation

Also Published As

Publication number Publication date
NZ579241A (en) 2010-10-29
IL172194A0 (en) 2011-08-01
US20100190753A1 (en) 2010-07-29
US7598269B2 (en) 2009-10-06
US7244764B2 (en) 2007-07-17
TW200520752A (en) 2005-07-01
IL172194A (en) 2014-04-30
CN101712640A (zh) 2010-05-26
EA200900802A1 (ru) 2010-04-30
US20050038117A1 (en) 2005-02-17
US20080015180A1 (en) 2008-01-17
TWI361686B (en) 2012-04-11
TW200600087A (en) 2006-01-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019334B1 (ru) Способы и композиции для лечения амилоидных заболеваний
EA012429B1 (ru) Способы и композиции для лечения амилоидных заболеваний
US7393875B2 (en) Methods and compounds for inhibiting amyloid deposits
EA016568B1 (ru) Способы, соединения, композиции и носители для доставки 3-амино-1-пропансульфоновой кислоты
US20060135403A1 (en) Therapeutic formulations for the treatment of beta-amyloid related diseases
SK25799A3 (en) Heterocyclic metalloprotease inhibitors
US20110281951A1 (en) Compositions and methods for treating amyloidosis
KR20000035925A (ko) 매트릭스 메탈로프로테아제 저해제인 포스핀산 아미드
SK25099A3 (en) Substituted cyclic amine metalloprotease inhibitors
SK15462000A3 (sk) Substituované pyrolidínové hydroxamáty ako inhibítory metaloproteázy
KR20200011485A (ko) 섬유증 치료를 위한 조성물
EA006199B1 (ru) Радиофармацевтические агенты для диагностики болезни альцгеймера
US20150065564A1 (en) Lipoyl compounds and methods for treating ischemic injury
CN108623501B (zh) 同位素富集的3-氨基-1-丙磺酸衍生物及其用途
US7262223B2 (en) Amidine derivatives for treating amyloidosis
US20180169066A1 (en) Carbazole derivatives for the treatment of fibrotic diseases and related symptoms, and conditions thereof
AU2016304862A1 (en) Compositions and methods for treating and preventing neurodegenerative disorders
JP2007516940A (ja) 改善された薬剤候補およびその調製法
JP2003513958A (ja) β−アミロイドペプチド放出および／またはその合成を阻害するために有用なβ−アミノ酸化合物
CN1839118B (zh) 治疗淀粉样相关疾病用的方法与组合物
US20210179543A1 (en) Calpain-2 selective inhibitor compounds for treatment of glaucoma
JP2007526228A (ja) アミロイド関連疾患およびてんかん発生関連疾患の治療のための方法および組成物
WO2005079780A1 (en) Amidine derivatives for treating amyloidosis

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AZ KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM BY RU