EA018437B1 - Замещенные производные 1,3-дифенилпропана, получение и их применение - Google Patents

Замещенные производные 1,3-дифенилпропана, получение и их применение Download PDF

Info

Publication number
EA018437B1
EA018437B1 EA200900044A EA200900044A EA018437B1 EA 018437 B1 EA018437 B1 EA 018437B1 EA 200900044 A EA200900044 A EA 200900044A EA 200900044 A EA200900044 A EA 200900044A EA 018437 B1 EA018437 B1 EA 018437B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
phenyl
phenoxy
dimethyl
compound
propyl
Prior art date
Application number
EA200900044A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200900044A1 (ru
Inventor
Жан-Франсуа Дельомель
Реми Анф
Карин Комон-Бертран
Original Assignee
Жанфит
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Жанфит filed Critical Жанфит
Publication of EA200900044A1 publication Critical patent/EA200900044A1/ru
Publication of EA018437B1 publication Critical patent/EA018437B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/76—Unsaturated compounds containing keto groups
    • C07C59/84—Unsaturated compounds containing keto groups containing six membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/52—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/34—Oximes with oxygen atoms of oxyimino groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/48—Oximes with oxygen atoms of oxyimino groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with the carbon atom of at least one of the oxyimino groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/10—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/18—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/22—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and doubly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/45—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having at least one of the nitrogen atoms doubly-bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/62—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/58—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C59/64—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings
    • C07C59/66—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings the non-carboxylic part of the ether containing six-membered aromatic rings
    • C07C59/68—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings the non-carboxylic part of the ether containing six-membered aromatic rings the oxygen atom of the ether group being bound to a non-condensed six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/76—Unsaturated compounds containing keto groups
    • C07C59/86—Unsaturated compounds containing keto groups containing six-membered aromatic rings and other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/76—Unsaturated compounds containing keto groups
    • C07C59/88—Unsaturated compounds containing keto groups containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/76—Unsaturated compounds containing keto groups
    • C07C59/90—Unsaturated compounds containing keto groups containing singly bound oxygen-containing groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/734—Ethers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/734—Ethers
    • C07C69/736—Ethers the hydroxy group of the ester being etherified with a hydroxy compound having the hydroxy group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D335/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D335/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D335/06—Benzothiopyrans; Hydrogenated benzothiopyrans

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение имеет отношение к замещенным производным 1,3-дифенилпропана формулы (I)в которой Xпредставляет собой атом галогена, группу Rили GR; Xпредставляет собой группу G-R; Хпредставляет собой группу R; Rпредставляет собой галогенированную алкильную группу, содержащую 1-24 атома углерода; Rпредставляет собой C-C-алкил, замещенный одной группой COOR; Rи R, одинаковые или различные, представляют собой незамещенный C-C-алкил; Gи G, одинаковые или различные, представляют собой атом кислорода или серы; А представляет собой (i) CHOR, где Rявляется Н или алкильной группой, содержащей 1-6 углеродных атомов, замещенной или незамещенной арильной группой, содержащей 5-14 углеродных атомов, возможно прерываемых одним или несколькими гетероатомами, выбранными из N, О, S или Р или (ii) группу (СО); Rпредставляет собой атом водорода или незамещенный C-C-алкил, фармацевтическим композициям, включающим их и к терапевтическому применению их, в особенности в области здравоохранения людей и животных.

Description

Настоящее изобретение имеет отношение к замещенным производным 1,3-дифенилпропана, к фармацевтическим композициям, включающим их, и к их терапевтическому применению, в частности, в областях, относящихся к здоровью людей и животных.
Заявители неожиданно обнаружили, что соединения в соответствии с настоящим изобретением обладают присущими им агонистическими свойствами в отношении ΡΡΑΚ
Молекулы, раскрытые в этом изобретении, поэтому представляют особый интерес при лечении осложнений метаболического синдрома, резистентности к инсулину, диабета, дислипидемии, атеросклероза, сердечно-сосудистого заболевания, ожирения, гипертонии, воспалительных заболеваний (астма и т.д.), нейродегенеративных заболеваний (болезнь Альцгеймера и т.д.), рака и т.д., а также для снижения глобального риска. Соединения в соответствии с этим изобретением предпочтительно применяют для лечения дислипидемии.
Уровень техники
Диабет, ожирение и дислипидемия (высокий уровень ЛПН-холестерина и триглицеридов, низкий уровень ЛВП-холестерина и т.д.) являются некоторыми из точно определяемых сердечно-сосудистых факторов риска, которые могут предрасполагать индивидуума к развитию сердечно-сосудистых заболеваний (Меияай М., 2004). Также следует принимать во внимание факторы риска, связанные с образом жизни, такие как табакокурение, сидячий образ жизни и несбалансированное питание. Эти факторы обладают синергическим эффектом: одновременное присутствие нескольких таких факторов драматическим образом увеличивает риск развития сердечно-сосудистых заболеваний. Таким образом, глобальный риск развития сердечно-сосудистого заболевания заслуживает внимания. В 2004 г. распространенность дислипидемии достигла 43,6% населения в промышленно развитых странах. В настоящее время резкое увеличение количества диабетиков делает диабет еще более важным фактором в эпидемиологии сердечно-сосудистых заболеваний: подсчитано, что к 2010 г. 7,6% населения будут диабетиками (Рох-Тиекег 1., 2005).
Согласно данным Международного общества по изучению атеросклероза (1п1егпайопа1 А1йего8с1его818 8ос1е1у. 2003), сердечно-сосудистое заболевание является первичной причиной смерти в промышленно развитых странах и становится еще более распространенным в развитых странах. Основными сердечно-сосудистыми заболеваниями являются сердечная недостаточность, ишемия головного мозга и заболевание периферических артерий.
Поэтому эти результаты оправдывают энергичные меры для значительного снижения процента заболеваемости и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний и для выявления необходимости поиска эффективных способов лечения, которые связаны с изменением образа жизни. Принимая во внимание факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и последствия этих заболеваний, это повсеместно требует неотложных мер.
Соединения в соответствии с изобретением благодаря их агонистическим свойствам в отношении ΡΡΑΚ представляют особенный интерес для лечения патологий, связанных с дисрегуляцией обмена липидов и/или углеводов, таких как диабет, ожирение, дислипидемия или воспаление, а также для снижения глобального риска развития сердечно-сосудистых заболеваний.
Известно, что ΡΡΑΚ.8 (α, γ и δ) вовлечены в этот тип патологических состояний (Ко1а Β.Ρ. е1 а1.,
2005) : поэтому для лечения этих патологий предлагают лиганды и рецепторы (ЬеГеЬуге Ρ. е1 а1., 2006), а различные модуляторы, агонисты или антагонисты ΡΡΑΚ, селективные или неселективные, в настоящее время находятся на стадии интенсивной разработки. Модулятор ΡΡΑΚ, обладающий полезными эффектами при резистентности к инсулину, ожирении, дислипидемии, гипертонии и/или воспалении, может применяться при лечении метаболического синдрома (или синдрома X) (Ьш Υ. апб МШег А., 2005).
Семейство ΡΡΑΚ.8 включает три изоформы, известные как α, γ и δ (также известна как изоформа β), каждая из которых кодируется разным геном. Эти рецепторы принадлежат к суперсемейству ядерных рецепторов и транскрипционных факторов, которые активируются в результате контакта с определенными жирными кислотами и/или их липидными метаболитами. Активированные ΡΡΑΚ.8 образуют гетеродимеры с рецепторами 9-цис-ретиноевой кислоты (КХК или ретиноидный рецептор X) и связываются со специфическими чувствительными элементами (ΡΡΚΕ или чувствительные элементы рецептора активаторов пролиферации пероксисом) промотора генов-мишеней, обеспечивая, таким образом, контроль транскрипции.
ΡΡΑΚα контролирует метаболизм липидов (в печени и мышцах) и гомеостаз глюкозы, влияет на внутриклеточный метаболизм липидов и углеводов путем прямого регулирования транскрипции генов, кодирующих белки, вовлеченные в гомеостаз липидов, обладает противовоспалительным и антипролиферативным действием и предупреждает проатерогенные эффекты накопления холестерина в макрофагах с помощью стимуляции выведения холестерина (ЬеГеЬуге Ρ., СЫпей 6., Ргискай 1.С., апб §1ае18 В.,
2006) . Фибраты (фенофибрат, безафибрат, ципрофибрат, гемфиброзил), действующие через ΡΡΑΚα, применяют в клинической медицине для лечения определенных типов дислипидемии путем снижения уровня триглицеридов и повышения уровня ЛВП (липопротеин высокой плотности).
- 1 018437
ΡΡΑΚγ играет ключевую роль в регулировании адипогенеза. Кроме того, он вовлечен в обмен липидов зрелых адипоцитов, гомеостаз глюкозы и особенно в развитие резистентности к инсулину, воспаление, аккумуляцию холестерина в макрофагах и пролиферацию клеток (Ьейтке М. апб Ьахаг М.А., 2005). Поэтому ΡΡΑΚγ играет роль в патогенезе ожирения, резистентности к инсулину и диабета. Тиазолидиндионы (росиглитазон, троглитазон и т.д.) представляют собой лиганды ΡΡΑΚγ, применяемые при лечении диабета 2-го типа.
В настоящее время имеются лиганды для ΡΡΑΚδ (Ь-165041, 0^501516. находящиеся сейчас в клинической разработке), но нет лиганда для ΡΡΑΚδ, который можно было бы применять в настоящее время в качестве лекарственного средства. Этот рецептор, однако, представляет собой привлекательную цель для разработки полезных лекарственных средств для лечения дислипидемии, атеросклероза, ожирения и резистентности к инсулину: ΡΡΑΚδ действительно вовлечен в регулирование метаболизма липидов и углеводов, энергетический баланс, нейродегенерацию, ожирение, образование ксантомных клеток макрофагов и воспаление (Стозз В. е! а1., 2005).
Помимо прямой роли, которую лиганды ΡΡΑΚ играют в регулировании метаболизма липидов и углеводов, эти молекулы обладают целым спектром плейотропного действия благодаря колоссальному разнообразию генов-мишеней для ΡΡΑΚ. Эти многочисленные свойства делают ΡΡΑΚδ интересными терапевтическими мишениями, имеющими отношение к лечению таких заболеваний, как атеросклероз, ишемия головного мозга, гипертония, болезни, связанные с неоваскуляризацией (ретинопатия, диабет и т.д.), воспалительные и аутоиммунные заболевания (болезнь Крона, псориаз, множественный склероз, астма и т.д.), неопластические заболевания (канцерогенез и т.д.), нейродегенеративные заболевания, осложнения, связанные с метаболическим синдромом, резистентность к инсулину, диабет, дислипидемия, сердечно-сосудистое заболевание, ожирение и т.д.; а также к снижению глобального риска.
Сущность изобретения
Соединения в соответствии с изобретением из-за их агонистических свойств в отношении ΡΡΑΚ являются выигрышным терапевтическим средством для совершенствования лечения патологий, относящихся к дисрегуляции обмена липидов и/или углеводов, в особенности дислипидемии, а также для снижения глобального риска развития сердечно-сосудистых заболеваний.
В более общем смысле, действуя одновременно на несколько процессов регуляции, соединения в соответствии с изобретением представляют собой выигрышные терапевтические средства для лечения осложнений, связанных с метаболическим синдромом (признаками которого являются ожирение, в частности абдоминальное ожирение, аномальная концентрация липидов крови (высокий уровень триглицеридов и/или высокий уровень ЛВП-холестерина (дислипидемия)), гипергликемия и/или резистентность к инсулину и гипертония), атеросклероза, сердечно-сосудистого заболевания, резистентности к инсулину, ожирения, гипертонии, диабета, дислипидемии, воспалительного заболевания (астма и т.д.), нейродегенеративных патологий (болезнь Альцгеймера и т.д.), рака и т.д., а также для снижения глобального риска.
Настоящее изобретение направлено на соединения, имеющие общую формулу (I)
χ5 (I) в которой Х1 представляет собой атом галогена, группу Κ1 или 01 -Κ1;
Х4 представляет собой группу 04-Κ4;
Κ1 представляет собой галогенированную алкильную группу, содержащую 1-24 атома углерода;
Κ4 представляет собой С1-С24-алкил, замещенный одной группой С00Р9;
Х3 и Х5, одинаковые или различные, представляют собой незамещенный С1-С24-алкил;
С| и 04, одинаковые или различные, представляют собой атом кислорода или серы;
А представляет собой:
(ί) СНОР^ где Κ8 является Н или алкильной группой, содержащей 1-6 углеродных атомов, замещенной или незамещенной одной арильной группой, содержащей 5-14 углеродных атомов, возможно прерываемых одним гетероатомом, выбранным из Ν, О, 8 или Р; или (ίί) группу (СО);
Κ9 представляет собой атом водорода или незамещенный С1-С6-алкил.
В контексте этого изобретения термин алкил обозначает углеводородный радикал, который является насыщенным, линейно-цепочечным, разветвленным или циклическим, галогенированный или нет, который имеет, в частности, от 1 до 24 и предпочтительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 атомов углерода, например метил, трифторметил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, пентил, неопентил, н-гексил или циклогексил.
Термин арил относится к ароматическим группам, включающим предпочтительно от 5 до 14 атомов углерода, предпочтительно от 6 до 14 атомов углерода, по возможности перемежающихся одним или
- 2 018437 несколькими гетероатомами, выбираемыми из Ν, О, 8 или Р (более точно гетероарил). Они в основном являются моно- или бициклическими и включают предпочтительно от 6 до 14 атомов углерода, например фенил, α-нафтил, β-нафтил, антраценил или флуоренил.
Под галогеном понимают атом брома, хлора, фтора или иода.
Галогенированный алкильный радикал представляет собой алкильный радикал, который был определен выше и который включает по меньшей мере один атом галогена или полностью галогенирован (пергалогенированный радикал).
Предпочтительно соединение по изобретению характеризуется тем, что А представляет собой карбонильную группу (СО), Х4 представляет собой О4К4, где К4 представляет собой С1-С10-алкил, О4 представляет собой атом кислорода, или Х4 соответствует формуле -ОС(СН3)2СООК9, где К9 был определен в п.1.
Предпочтительно соединения по изобретению характеризуются тем, что группы Х3 и Х5, одинаковые или различные, представляют собой незамещенный С1-С4-алкил, Х1 представляет собой группу К1 или О1К1, где О1 определена в п.1 и К1 представляет собой галогенированную С1-С3-алкильную группу.
Предпочтительно соединения по изобретению выбирают из
2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(трифторметокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(трифторметилтио)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
2-[2,6-диметил-4-[3-[4-бромфенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(трифторметил)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кисло ты,
2-[2,6-диметил-4-[3-гидрокси-3-[4-(трифторметилтио)фенил]пропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
2-[2,6-диметил-4-[3-(пиридин-3-илметокси)-3-[4-(трифторметокси)фенил]пропил]фенокси]-2метилпропионовой кислоты,
2-[4-(3-(4-иодбензилокси)-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2метилпропионовой кислоты,
2-[4-(3-метокси-3 -(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(3,3,3-трифторпропилокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2метилпропионовой кислоты,
2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты,
2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(2,2,2-трифторэтилтио)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты,
2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)пропионовой кислоты,
2-[4-(3-гидроки-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
4-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2,2-диметилмасляной кислоты,
2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-трет-бутилметилпропаноата,
2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-изопропилметилпропаноата,
2,2-дифтор-2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)уксусной кислоты.
В соответствии с конкретным воплощением изобретения предпочтительные соединения показаны ниже.
Соединение 1. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-(трифторметилокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовая кислота
Соединение 2. метилпропионовая кислота
- 3 018437
Соединение 3. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-бромфенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовая кислота
Соединение 4. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-(трифторметил)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2метилпропионовая кислота
Соединение 5. 2-[4-[3-[4-Хлор-2-гидроксифенил]-3-оксопропил]фенилтио]-2-метилпропионовая кислота
Соединение 6. 2-[2-Метил-4-[3-[4-(3,3,3-трифторпропилокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2метилпропионовая кислота
Соединение 7. 2-[2,6-Диметил-4-[3-гидрокси-3-[4-(трифторметилтио)фенил]пропил]фенокси]-2метилпропионовая кислота
Соединение 8. 2-[2,6-Диметил-4-(3-(пиридин-3-илметокси)-3-[4-(трифторметокси)фенил]пропил)фенокси] -2 -метилпропионовая кислота
Соединение 9. 2-[4-(3-(4-Иодбензилокси)-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2-метилпропионовая кислота
- 4 018437
Соединение 10. 2-[4-(3-Метокси-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2метилпропионовая кислота
Соединение 11. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-(3,3,3-трифторпропилокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]2-метилпропионовая кислота
Соединение 12. 2-(2,6-Диметил-4-(3-оксо-3-(4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)пропил)фенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 13. 2-(2,6-Диметил-4-(3-оксо-3-(4-(2,2,2-трифторэтилтио)фенил)пропил)фенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 14. 2-(4-(3-(4-Хлор-2-(метилтио)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 15. 2-(4-(3-(2,4-бис-(Трифторметил)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 16. 2-(4-(3-(2-Фтор-4-(трифторметил)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 17. 2-(4-(3-(2-Фтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенокси)-2-метилпропионовая кислота
- 5 018437
Соединение 18. 2-(2,6-Диметил-4-(3-(2-метил-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)-3-оксопропил)фенокси)-2-метилпропионовая кислота
Соединение 19. 2-(4-(3-(2-Метокси-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)-3-оксопропил)-2,6диметилфенокси)-2-метилпропионовая кислота
о
Соединение 20. 2-(4-(3-(2-Гидрокси-4-(трифторметил)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенокси)2-метилпропионовая кислота
Соединение 21. 2-(4-(3-(2-Метокси-4-(трифторметил)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 22. 2-(2,6-Диметил-4-(3-(2-изопропилокси-4-(трифторметил)фенил)-3оксопропил)фенокси)-2-метилпропионовая кислота
Соединение 23. 2-(2,6-Диметокси-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2метилпропионовая кислота
Соединение 24. 2-(4-(3-(2-Фтор-4-(трифторметил)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметоксифенокси)-2метилпропионовая кислота
- 6 018437
Соединение 25. си)пропионовая кислота
2-Метил-2-(2-метил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметилтио)фенил)пропил)фенок-
Соединение 26. си)пропионовая кислота
2-Метил-2-(2-метил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенок-
Соединение 27.
метилпропионовая кислота
2-(4-(3-(2-Фтор-4-(трифторметил)фенил)-3-оксопропил)фенилтио)-2-
Соединение 28. 2-Метил-2-(3-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)пропионовая кислота
Соединение 29.
си)пропионовая кислота
2-(2,6-Диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенок-
Соединение 30. 2-[4-(3-Гидрокси-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2метилпропионовая кислота
Соединение 31.
метилпропанамид
2-(2,6-Диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-
Соединение 32. 2-(4-(3-Гидроксиимино-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенок-
- 7 018437
Соединение 33. 2-(4-(3-Метоксиимино-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси)2-метилпропионовая кислота
Соединение 34.
диметилмасляная кислота
4-(2,6-Диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2,2-
Соединение 35.
(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты
2-(2,6-диметил-4-(3 -оксо-3 -(4Соединение 36.
(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты
Соединение 37. 2,2-Дифтор-2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)уксусная кислота
Соединение 38. 2-(2-Метокси-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенилтио)-2метилпропионовая кислота
Соединения настоящего изобретения включают их стереоизомеры (диастереоизомеры, энантиомеры), в очищенном состоянии или в виде смеси; рацемические формы, их геометрические изомеры, их таутомеры, их соли, их гидраты, их сольваты, их твердые формы и их смеси.
Соединения в соответствии с изобретением могут включать один или несколько асимметричных центров. Настоящее изобретение включает стереоизомеры (диастереоизомеры, энантиомеры), в очищенном состоянии или в виде смеси; а также рацемические формы и геометрические изомеры. Если необходимы энантиочистые (или обогащенные) смеси, их можно получить или с помощью очистки конечного продукта, или хиральных интермедиатов, или с помощью асимметрического синтеза в соответствии с методами, известными специалистам в этой области техники (например, с помощью реагентов и хиральных катализаторов). Некоторые соединения в соответствии с изобретением могут иметь таутомерные формы с различной стабильностью, и все эти формы, а также их смеси включены в это изобретение.
Это изобретение также имеет отношение к фармацевтически приемлемым солям соединений в соответствии с изобретением. Обычно этот термин обозначает слаботоксичные или нетоксичные соли, которые получают из органических или неорганических оснований или кислот. Эти соли могут быть получены во время заключительной стадии очистки соединения в соответствии с изобретением или путем
- 8 018437 включения соли в очищенное соединение.
Некоторые соединения в соответствии с изобретением и их соли могут быть стабильными в нескольких твердых формах. Настоящее изобретение включает все твердые формы соединений в соответствии с изобретением, которое включает аморфные, полиморфные, моно- и поликристаллические формы.
Соединения в соответствии с изобретением могут находиться в несольватированной или сольватированной форме, например, вместе с фармацевтически приемлемыми сольвентами, например с водой (гидраты) или этанолом.
Соединения в соответствии с изобретением, меченные одним или несколькими изотопами, также включены в изобретение: эти соединения структурно идентичны, но отличаются тем, что по меньшей мере один атом в структуре заменен на изотоп (радиоактивный или нерадиоактивный). Примеры изотопов, которые могут быть включены в структуру соединений в соответствии с изобретением, могут быть выбраны из водорода, углерода, кислорода и серы, например из Н, Н, С, С, О, О, 8, соответственно. Радиоактивные изотопы являются особенно предпочтительными, так как их легко получать и обнаруживать при исследовании биоусвояемости веществ ίη νίνο. Тяжелые изотопы (такие как 2Н) являются особенно предпочтительными, так как их применяют в качестве внутренних стандартов при аналитических исследованиях.
Настоящее изобретение также имеет отношение к способу синтеза соединений, имеющих формулу (I), как было определено ранее.
Способ настоящего изобретения включает стадию смешивания (ί) в щелочной или кислой среде по меньшей мере одного соединения, имеющего формулу (А) по меньшей мере с одним соединением, имеющим формулу (В)
в которых ранее группам X!, Х2, Х3, Х4 и Х5 уже были даны определения, затем стадию восстановления (ίί) полученного соединения, и в конечном итоге стадию, обеспечивающую присоединение функциональных групп (ш).
Экспериментальные условия для стадии (ί) в кислой или щелочной среде и для стадии (ίί) не представляют трудности для выполнения для специалистов в этой области техники и могут сильно различаться. Процедуры синтеза могут быть, в частности, теми же, что описаны в разделе Примеры в этом изобретении.
Смешивание двух соединений выгодно проводить при стехиометрическом соотношении. Его проводят предпочтительно при комнатной температуре (примерно от 18 до 25°С) и при нормальном атмосферном давлении.
В щелочной среде реакция присходит предпочтительно в присутствии сильного основания, например гидроокиси щелочных металлов, подобной гидроокиси натрия, или алкоголята щелочного металла, подобного этилату натрия.
В кислой среде реакция присходит предпочтительно в присутствии сильной кислоты, такой как соляная кислота.
Полученные соединения могут быть получены в очищенном состоянии с помощью классических методов специалистом средней квалификации в этой области техники. Они затем могут применяться, например, в качестве лекарственных средств или косметических продуктов.
Настоящее изобретение также направлено на соединения, такие как были описаны выше, в качестве лекарственных средств.
Другой объект настоящего изобретения имеет отношение к фармацевтической композиции, включающей в фармацевтически приемлемом носителе по меньшей мере одно соединение, которое было описано выше, возможно вместе в одним или несколькими другими терапевтическими и/или косметическими активными компонентами.
Предпочтительно это имеет отношение к фармацевтической композиции для лечения осложнений, ассоциированных с метаболическим синдромом, резистентностью к инсулину, диабетом, дислипидемией, атеросклерозом, сердечно-сосудистыми заболеваниями, ожирением, гипертонией, воспалительными заболеваниями (астма и т.д.), нейродегенеративными патологиями (болезнь Альцгеймера и т.д.) или раком и т.д. Эту фармацевтическую композицию в соответствии с изобретением предпочтительно применяют для лечения дислипидемии.
Предпочтительно это фармацевтическая композиция для лечения факторов риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с дисрегуляцией метаболизма липидов и/или нарушениями обмена углеводов (гиперлипидемия, диабет 2-го типа, ожирение и т.д.), путем снижения глобального риска.
- 9 018437
Другой объект изобретения имеет отношение к пищевой композиции, включающей по меньшей мере одно соединение, которое было описано выше.
Другой объект изобретения имеет отношение к применению по меньшей мере одного соединения, которое было описано ранее, для получения фармацевтических композиций, предназначенных для лечения множественных патологий, в частности тех, которые связаны с нарушениями метаболизма (например, дислипидемия). В общем смысле, объект изобретения имеет отношение к применению по меньшей мере одного соединения, которое было описано ранее, для получения фармацевтических композиций, предназначенных для лечения факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с нарушениями метаболизма липидов и/или углеводов, для снижения глобального риска.
Например, соединения в соответствии с изобретением (без ограничения) в идеальном случае могут быть успешно введены в комбинации с другими терапевтическими и/или косметическими средствами, доступными в настоящее время в продаже или находящимися на стадии разработки, такими как антидиабетические средства: средства, усиливающие секрецию (сульфонилмочевина (глибенкламид, глимепирид, гликлазид и т.д.) и глиниды (репаглинид, натеглинид и т.д.)), ингибиторы альфаглюкозидазы, агонисты ΡΡΑΚγ (тиазолидиндионы, такие как росиглитазон, пиоглитазон), смешанные агонисты ΡΡΑΚα/γ (тезаглитазар, мураглитазар), раи-ΡΡΑΚδ (соединения, которые одновременно активируют 3 изоформы ΡΡΑΚ), бигуаниды (метформин), ингибиторы дипептидилпептидазы IV типа (МК-431, вилдаглиптин), агонисты глюкагон-подобного пептида-1 (0ΩΡ-1) (эксенатид) и т.д.;
инсулин;
молекулы, снижающие уровень липидов и/или холестерина: фибраты (фенофибрат, гемфиброзил); ингибиторы НМС-СоА-редуктазы или гидроксилметилглутарил-коэнзим А-редуктазы (статины, такие как аторвастатин, симвастатин, флувастатин); ингибиторы всасывания холестерина (эзетимиб, фитостерины); ингибиторы белка-переносчика СЕТР или сложных эфиров холестерина (торсетрапиб); ингибиторы АСАТ или ацил-коэнзим А:холестерин ацилтрансферазы (авасимиб, эфлуцимиб), ингибиторы МТР (микросомального транспортного белка, переносящего триглицериды); вещества, связывающие желчные кислоты (холестирамин); витамин Е, полиненасыщенные жирные кислоты, омега-3 жирные кислоты, производные никотиновой кислоты (ниацин) и т.д.;
противогипертонические средства и гипотензивные средства: ингибиторы АСЕ (ангиотензинпревращающий фермент) (каптоприл, эналаприл, рамиприл или квинаприл); антагонисты рецептора ангиотензина II (лозартан, валсартан, телмисартан, эпросартан, ирбесартан и т.д.); бета-блокаторы (атенолол, метопролол, лабеталол, пропанолол); тиазидные и нетиазидные диуретики (фуросемид, индапамид, гидрохлортиазид, антиальдостерон); сосудорасширяющие средства; ингибиторы кальциевых каналов (нифедипин, фелодипин или амлодипин, дилтиазем или верапамил) и т.д.;
противотромбоцитные средства: аспирин, тиклопидин, дипиридамол, клопидогрел, флурбипрофен и т.д.;
средства против ожирения: сибутрамин, ингибиторы липазы (орлистат), ΡΡΑΚδ, антагонисты каннабиноидных рецепторов СВ 1 (римонабант) и т.д.;
противовоспалительные средства: например кортикоиды (преднизон, бетаметазон, дексаметазон, преднизолон, метилпреднизолон, гидрокортизон и т.д.); ΝδΑΙΌδ или нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, производные индола (индометацин, сулиндак); ΝδΑΙΌδ арилкарбоновой группы (тиапрофеновая кислота, диклофенак, этодолак, флурбипрофен, ибупрофен, кетопрофен, напроксен, набуметон, алминопрофен); ΝδΑΙΌδ, производные оксикама (мелоксикам, пироксикам, теноксикам); ΝδΑΙΌδ группы фенаматов, селективные ингибиторы СОХ2 (целекоксиб, рофекоксиб) и т.д.;
антиоксидантные средства: например пробукол и т.д.;
вещества, применяемые при лечении сердечной недостаточности: тиазидные и нетиазидные диуретики (фуросемид, индапамид, гидрохлортиазид, антиальдостерон), ингибиторы АСЕ (каптоприл, эналаприл, рамиприл или квинаприл), дигиталисные лекарственные средства (дигоксин, дигитоксин), бетаблокаторы (атенолол, метопролол, лабеталол, пропанолол), ингибиторы фосфодиэстеразы (эноксимон, милринон) и т.д.;
средства, применяемые при лечении коронарной недостаточности: бета-блокаторы (атенолол, метопролол, лабеталол, пропанолол), ингибиторы кальциевых каналов (нифедипин, фелодипин или амлодипин, бепридил, дилтиазем или верапамил), доноры N0 (окиси азота) (тринитрин, изосорбида динитрат, молсидомин), амиодарон и т.д.;
противораковые лекарственные средства: цитотоксические средства (вещества, взаимодействующие с ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислотой); алкилирующие средства, цисплатин и производные), цитостатические средства (аналоги СпКН (гонадотропин-высвобождающего гормона), аналоги соматостатина, прогестин, антиэстрогенные лекарственные средства, ингибиторы ароматазы и т.д.), модуляторы иммунного ответа (интерфероны, 1Ь2 и т.д.) и т.д.;
противоастматические лекарственные средства, такие как бронхорасширяющие средства (агонисты бета-2-рецепторов), кортикоиды, кромогликат, антагонисты лейкотриеновых рецепторов (монтелукаст) и
т.д.;
- 10 018437 кортикоиды, применяемые при лечении кожных патологий, таких как псориаз и дерматит;
сосудорасширяющие средства и/или антиишемические средства (буфломедил, экстракт гинкго билоба, нафтидрофурил, пентоксифиллин, пирибедил) и т.д.
Изобретение также имеет отношение к способу лечения патологий, связанных с метаболизмом липидов и/или углеводов, включающему введение субъекту, в частности человеку, эффективного количества соединения или фармацевтической композиции, которая была определена выше. В контексте изобретения термин эффективное количество относится к количеству соединения, достаточному для того, чтобы получить желаемый биологический результат. В контексте изобретения термин субъект означает млекопитающего и, более конкретно, человека.
Термин лечение обозначает исцеляющее, симптоматическое или профилактическое лечение. Соединения этого изобретения, таким образом, могут быть применены на субъектах (таких как млекопитающие, в частности люди), у которых есть признанное заболевание. Соединения этого изобретения также могут быть применены для того, чтобы задержать или уменьшить прогрессирование или предотвратить дальнейшее прогрессирование заболевания, улучшая, таким образом, состояние субъектов. Соединения этого изобретения в конечном итоге можно вводить здоровым субъектам, у которых может обычно развиваться заболевание или у которых существует значительный риск развития заболевания.
Фармацевтические композиции в соответствии с изобретением преимущественно включают один или несколько эксципиентов или наполнителей, приемлемых в фармацевтическом контексте (например, солевые растворы, физиологические растворы, изотонические растворы и т.д., совместимые с фармацевтическим использованием и хорошо известные специалистам средней квалификации в этой области техники). Композиции могут включать одно или несколько средств или наполнителей, выбираемых из диспергирующих веществ, растворителей, стабилизаторов, консервантов и т.д. Средства или наполнители, полезные в этих композициях (жидких, и/или инъецируемых, и/или твердых) представляют собой, в частности, метилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, полисорбат 80, маннит, желатин, лактозу, растительные масла, гуммиарабик, липосомы и т.д. Композиции могут быть составлены в форме инъецируемых суспензий, гелей, масел, пилюль, суппозиториев, порошков, гелькапсул, капсул, аэрозолей и т.д., в конечном итоге с помощью галеновых форм или приспособлений, обеспечивающих продолжительное и/или медленное высвобождение. Для этой разновидности композиций можно успешно применять такие средства, как целлюлоза, карбонаты или крахмалы.
Соединения или композиции в соответствии с изобретением можно вводить различными способами в различных формах. Так, например, их можно вводить систематическим путем, перорально, парентерально, с помощью ингаляции или с помощью инъекции, например, внутривенным, внутримышечным способом, подкожным способом, трансдермальным способом, внутриартериальным способом и т.д. Что касается инъекций, соединения обычно переводят в форму жидких суспензий, которые можно инъецировать, например, с помощью шприцев или перфузии.
Ясно, что скорость и/или доза, имеющая отношение к инъекции, может быть адаптирована специалистом средней квалификации в этой области техники в зависимости от пациента, патологии, формы введения и т.д. Обычно соединения вводят в дозах, которые изменяются от 1 мкг до 2 г на прием, предпочтительно от 0,1 мг до 1 г на прием. Введение можно осуществлять ежедневно или даже несколько раз в день, если это необходимо. Кроме того, в композиции в соответствии с изобретением может включать другие средства или активные компоненты.
Краткое описание чертежей
Сокращения, используемые на этих чертежах:
Срб - соединение,
С(г1 - контроль, трк - мг/кг/день,
ЬПЬ-сйо1е51его1 - ЛНП-холестерин = холестерин липопротеинов низкой плотности, НОЬ-сйо1е51его1 - ЛВП-холестерин = холестерин липопротеинов высокой плотности, УЪПЬ-сйо1е51его1 - ЛПОНП-холестерин = холестерин липопротеинов очень низкой плотности, Фиг. 1-1-1-18 - оценка ίη νίΙΐΌ ΡΡΑΚ-активирующих свойств соединений изобретения в зависимости от дозы.
Активацию ΡΡΑΚ.5 оценивали ίη уйго с помощью линии фибробластов почек обезьяны (СО8-7) путем измерения транскрипционной активности химер, составленных из ДНК-связывающего домена дрожжевого транскрипционного фактора Са14 и домена, связывающего лиганд различных ΡΡΑΡδ.
Соединения тестировали в дозах от 10-7 до 100 мкМ на химерах 6;·ι14-ΡΡΑΡα. γ и δ. Фактор индукции, т.е. соотношение между люминесценцией, индуцированной соединением, и люминесценцией, индуцируемой в контроле, измеряли для всех условий. Чем выше фактор индукции, тем более значительными активирующими свойствами в отношении ΡΡΑΚ. обладает соединение.
Фиг. 1-1, 1-2, 1-3 - оценка ίη уйго активирующих свойств соединения 1 в отношении ΡΡΑΚα, γ, δ. Фиг. 1-4, 1-5, 1-6 - оценка ίη уйго активирующих свойств соединения 2 в отношении ΡΡΑΚα, γ, δ. Фиг. 1-7, 1-8, 1-9 - оценка ίη уйго активирующих свойств соединения 3 в отношении ΡΡΑΚα, γ, δ.
- 11 018437
Фиг. 1-10, 1-11, 1-12 - оценка ίη νίίτο активирующих свойств соединения 4 в отношении ΡΡΑΚα, γ,
δ.
Фиг. 1-13, 1-14, 1-15 - оценка ίη νίίτο активирующих свойств соединения 5 в отношении ΡΡΆΚα, γ, δ.
Фиг. 1-16, 1-17, 1-18 - оценка ίη νίίτο активирующих свойств соединения 7 в отношении ΡΡΑΚα, γ, δ.
Фиг. 2-1-2-7 - оценка ίη νίνο, проведенная на мышах АроЕ2/Е2, параметров массы тела, гиполипидемических свойств и способности соединений в соответствии с изобретением стимулировать синтез ЛВП-холестерина.
Эффект соединений в соответствии с изобретением оценивали ίη νίνο на мышах, гуманизированных Е2-изоформой аполипопротеина Е (Е2/Е2).
Массу тела мышей Е2/Е2 с дислипидемией, уровень общего холестерина, триглицеридов и свободных жирных кислот в плазме крови измеряли через 8 дней после перорального введения соединения в соответствии с изобретением. Эти параметры сравнивали с параметрами, полученными для контрольных животных (животному не вводили соединения в соответствии с изобретением): измеренные различия демонстрируют эффект на массу тела и липидемический эффект соединений в соответствии с изобретением
Фиг. 2-1 - увеличение массы тела через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Фиг. 2-2 - уровень холестерина в плазме крови через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Фиг. 2-3 - уровень ЛВП-холестерина в плазме крови через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Фиг. 2-4 - уровень триглицеридов в плазме крови через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Фиг. 2-5 - уровень свободных жирных кислот в плазме крови через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Эффективность соединений в соответствии с изобретением также оценивали с помощью измерения в печеночной ткани экспрессии генов, вовлеченных в метаболизм липидов и углеводов и в рассеяние энергии. Уровень экспрессии каждого гена нормировали относительно уровня экспрессии гена-стандарта 36В4. Затем рассчитывали фактор индукции, т.е. соотношение между относительным сигналом (индуцируемым соединением в соответствии с изобретением) и средними относительными значениями, полученными для контрольной группы. Чем выше фактор индукции, тем сильнее соединение вызывает экспрессию печеночных генов. Конечный результат представлен в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Фиг. 2-6 - экспрессия ΡΌΚ4 (киназа пируватдегидрогеназы, изоформа 4) в печеночной ткани мышей Е2/Е2 через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Фиг. 2-7 - экспрессия Αροί,ΊΙΙ (аполипопротеин С3) в печеночной ткани мышей Е2/Е2 через 8 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день.
Фиг. 3-1-3-5 - оценка ίη νίνο, проведенная на мышах С57В16, параметров массы тела, гиполипидемических свойств и способности соединений в соответствии с изобретением стимулировать синтез ЛВПхолестерина.
Эффект соединений в соответствии с изобретением оценивали ίη νίνο на мышах С57В16 с помощью определения изменения массы тела, уровня ЛВП-холестерина и триглицеридов в плазме крови через 14 дней после перорального введения соединений в соответствии с изобретением. Эти параметры сравнивали с параметрами, полученными для контрольных животных (животным не вводили соединения в соответствии с изобретением): измеренные различия демонстрируют эффект соединений в соответствии с изобретением, который они оказывают на массу тела, и показывают их гиполипидемический эффект.
Фиг. 3-1 - увеличение массы тела через 14 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день.
Фиг. 3-2 - уровень ЛВП-холестерина в плазме крови через 14 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день.
Фиг. 3-3 - уровень триглицеридов в плазме крови через 14 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день.
Эффективность соединений в соответствии с изобретением также оценивали с помощью измерения в печеночной ткани экспрессии генов, вовлеченных в метаболизм липидов. Уровень экспрессии каждого гена нормировали относительно уровня экспрессии гена-стандарта 36В4. Затем рассчитывали фактор индукции. Чем выше фактор индукции, тем сильнее соединение вызывает экспрессию печеночных генов. Конечный результат представлен в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Фиг. 3-4 - экспрессия ΡΌΚ4 в печеночной ткани мышей С57В16 через 14 дней после воздействия
- 12 018437 соединением 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день.
Фиг. 3-5 - экспрессия ЛроСШ в печеночной ткани мышей С57В16 через 14 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день.
Фиг. 4-1-4-9 - оценка ίη νίνο, проведенная на мышах ЙЬ/ЙЬ, параметров массы тела, антидиабетических свойств, гиполипидемических свойств и способности соединений в соответствии с изобретением стимулировать синтез ЛВП-холестерина.
Эффект соединений в соответствии с изобретением оценивали ίη νίνο на мышах ЙЬ/ЙЬ с помощью определения изменения массы тела, уровня глюкозы, уровня инсулина, уровня общего холестерина и триглицеридов в плазме крови и с помощью анализа распределения холестерина в различных фракциях липопротеинов в плазме крови через 28 дней после перорального введения соединений в соответствии с изобретением. Эти параметры сравнивали с параметрами, полученными для контрольных животных (животным не вводили соединения в соответствии с изобретением): измеренные различия демонстрируют эффекты соединений в соответствии с изобретением, которые они оказывают на массу тела, резистентность к инсулину и показывают их гиполипидемический эффект.
Фиг. 4-1 - увеличение массы тела через 28 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-2 - гликемия через 28 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-3 - инсулинемия через 28 дней после воздействия соединением 1, которое вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-4 - уровень холестерина в плазме крови через 28 дней после воздействия соединением 1 и соединением 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-5 - распределение холестерина в различных фракциях липопротеинов в плазме крови через 28 дней после воздействия соединением 1 и соединением 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-б - уровень триглицеридов в плазме крови через 28 дней после воздействия соединением 1 и соединением 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-7 - уровень свободных жирных кислот в плазме крови через 28 дней после воздействия соединением 1 и соединением 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Эффективность соединений в соответствии с изобретением также оценивали с помощью измерения в печеночной и мышечной (скелетно-мышечной) тканях экспрессии генов, вовлеченных в метаболизм липидов и углеводов и в рассеяние энергии. Уровень экспрессии каждого гена нормировали относительно уровня экспрессии гена-стандарта 3бВ4 в печеночной ткани или относительно уровня экспрессии гена-стандарта 188 в икроножной скелетной мышце. Затем рассчитывали фактор индукции, т.е. соотношение между относительным сигналом (индуцируемым соединением в соответствии с изобретением) и средними относительными значениями, полученными для контрольной группы. Чем выше фактор индукции, тем сильнее соединение вызывает экспрессию генов. Конечный результат представлен в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Фиг. 4-8 - экспрессия ΡΌΚ4 в печеночной ткани мышей ЙЬ/ЙЬ через 28 дней после воздействия соединением 1 и соединением 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-9 - экспрессия ИСР2 (разобщающий белок-2) в скелетной мышечной ткани мышей ЙЬ/ЙЬ через 28 дней после воздействия соединением 1 и соединением 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 5 - оценка ίη νίίτο противовоспалительных свойств соединений в соответствии с изобретением с помощью измерения секреции МСР1 моноцитами, обработанными соединениями в соответствии с изобретением и стимулированными с помощью РМА.
Противовоспалительные эффекты соединения в соответствии с изобретением оценивали с помощью измерения секреции МСР1 (моноцитарный хемотаксический протеин-1) моноцитами ТНР1, обработанными в течение 24 ч соединениями в соответствии с изобретением и одновременно стимулированными РМА (форбол-12-миристат-13-ацетат, который вызывает воспалительный ответ в клетках и их дифференцировку в макрофаги). Чем меньше секретируется МСР-1, тем сильнее соединение в соответствии с изобретением подавляет воспалительную реакцию.
Статистический анализ.
Статистические исследования состояли из ί-теста Стьюдента (°/°°/°°°) и/или одномерного дисперсионного анализа ΑΝΟνΑ с последующим тестом Тьюки (*/**/***). Результаты сравнивали с контрольной группой, оценивая значение параметра р:
°/*: р<0,05; °/**: р<0,01; °°°/***: р<0,001.
Примеры
Традиционные реагенты и катализаторы являются коммерчески доступными (А1йпсй, А1Ра Аекаг, Асгок, Р1ика или Ьапсайет).
Спектры ядерного магнитного резонанса протонов (ΝΜΚ. 1Н) измеряли на спектрометре Вгикег АС300Р. Химические сдвиги выражали в ррт (в частях на миллион) и расщепление сигналов ΝΜΚ. описывали с помощью принятых сокращений.
- 13 018437
Пример 1. Основной способ синтеза соединений в соответствии с изобретением.
Большинство соединений в соответствии с изобретением специфически получали с помощью восстановления, за которым следовал один из способов, указанных ниже, с помощью соединений, заявленных и/или описанных в патенте И8 2005176808.
Другие соединения было легко получить, следуя простым хорошо известным методам получения, доступным для специалистов в этой области техники.
Основной способ А. Восстановление дифенилпропен-2-онов триэтилсиланом.
К раствору дифенилпропан-2-она в дихлорметане добавляли триэтилсилан и затем по каплям трифторуксусную кислоту (7,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре и за реакцией следили с помощью тонкослойной хроматографии. Реакционную смесь промывали водой. Водный слой экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке (препаративная НРЬС, Бсйгокрйег (Мегск) КР18 12 мкм 100А, колонка: 25x250 мм).
Основной способ В. Восстановление дифенилпропен-2-онов тетрахлорсиланом.
К раствору дифенилпропан-2-она в ацетонитриле добавляли иодид натрия и затем по каплям тетрахлорсилан. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре и за реакцией следили с помощью тонкослойной хроматографии. Через 30 мин-2 ч смесь разделяли между хлороформом и водой. Водный слой экстрагировали хлороформом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфитом натрия, затем сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке (препаративная НРЬС, йсйгокрйег (Мегск) КР18 12 мкм 100А, колонка: 25x250 мм).
Основной способ С. Восстановление дифенилпропен-2-онов палладием-на-угле.
К раствору дифенилпропен-2-она в этаноле добавляли каталитическое количество палладия-на-угле (10%). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода при нормальном атмосферном давлении. Катализатор фильтровали, фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке.
Основной способ Ό. Синтез спирта.
К раствору дифенилпропан-3-она в этаноле добавляли боргидрид натрия. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 50°С (122°Р). После охлаждения реакционную смесь гидролизовали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между дихлорметаном и разведенным раствором соляной кислоты.
Органическую фазу промывали водой, сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке (препаративная НРЬС, йсйгокрйег (Мегск) КР18 12 мкм 100А, колонка: 25x250 мм).
Основной способ Е. Синтез простого эфира.
Раствор дифенилпропан-3-ола в смеси 1/3:2/3 вода/спирт в присутствии каталитического количества трифторуксусной кислоты перемешивали в течение 16 ч при 60°С. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке (препаративная НРЬС, йсйгокрйег (Мегск) ВР18 12 мкм 100А, колонка: 25x250 мм).
Основной способ Е. Синтез с помощью оксимов и простых оксимных эфиров.
К раствору дифенилпропан-3-она в пиридине добавляли О-алкилгидроксиламина гидрохлорид. После 16 ч нагревания с обратным холодильником реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке.
Пример 2. Синтез соединений в соответствии с изобретением.
Соединение 1. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-(трифторметокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2метилпропионовая кислота
о
Это соединение получали в соответствии с основным способом В, используя 2-[2,6-диметил-4-[3-[4(трифторметокси)фенил]-3-оксо-проп-2-енил]фенокси]-2-метилпропионовую кислоту, 15 экв. иодида натрия и 15 экв. тетрахлорсилана.
Выход: твердое вещество белого цвета; Е=64-66°.
\\Ш Ή (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,52 (8, 6Н), 2,22 (8, 6Н), 2,96 (1, 2Н, 1=7,51 Гц), 3,26 (1, 2Н, 1=7,51 Гц), 6,87 (8, 2Н), 7,28 (б, 2Н, 1=8,61 Гц), 8,01 (б, 2Н, 1=8,61 Гц).
М8 (Е8-М8): 423,3 (М-1).
- 14 018437
Соединение 2. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-(трифторметилтио)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом А, используя 2-[2,6-диметил-4-[3[4-(трифторметилтио)фенил]-3-оксо-проп-2-енил]фенокси]-2-метилпропионовую кислоту и 1 экв. триэтилсилана.
Выход: твердое вещество белого цвета; Е=83-85°.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,52 (8, 6Н), 2,23 (8, 6Н), 2,97 (ΐ, 2Н, 1=7,59 Гц), 3,29 (ΐ, 2Н, 1=7,59 Гц), 6,88 (8, 2Н), 7,74 (ά, 2Н, 1=8,46 Гц), 7,99 (ά, 2Н, 1=8,46 Гц).
Μ8 (Ε8-Μ8): 439,2 (Μ-1).
Соединение 3. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-бромфенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом А, используя 2-[2,6-диметил-4-[3[4-бромфенил]-3-оксо-проп-2-енил]фенокси]-2-метилпропионовую кислоту и 1 экв. триэтилсилана.
Выход: вязкое масло белого цвета.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,52 (8, 6Н), 2,23 (8, 6Н), 2,96 (ΐ, 2Н, 1=7,60 Гц), 3,24 (ΐ, 2Н, 1=7,02 Гц), 6,89 (8, 2Н), 7,61 (ά, 2Н, 1=8,46 Гц), 7,83 (ά, 2Н, 1=8,46 Гц).
Μ8 (Ε8-Μ8): 417,2 (Μ-1) 79Вг и 419 (М-1) 81Вг.
Соединение 4. 2-[2,6-Диметил-4-[3-[4-(трифторметил)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом А, используя 2-[2,6-диметил-4-[3[4-(трифторметил)фенил]-3-оксо-проп-2-енил]фенокси]-2-метилпропионовую кислоту и 1 экв. триэтилсилана.
Выход: вязкое масло желтого цвета.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,52 (8, 6Н), 2,23 (8, 6Н), 2,98 (ΐ, 2Н, 1=7,29 Гц), 3,30 (ΐ, 2Н, 1=7,29 Гц), 6,88 (8, 2Н), 7,72 (ά, 2Н, 1=8,17 Гц), 8,06 (ά, 2Н, 1=8,17 Гц).
Μ8 (Ε8-Μ8): 407,4 (Μ-1).
Соединение 5. 2-[4-[3-[4-Хлор-2-гидроксифенил]-3-оксопропил]фенилтио]-2-метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом В, используя 2-[4-[3-[4-хлор-2гидроксифенил]-3-оксо-проп-2-енил]фенилтио]-2-метилпропионовую кислоту и 5 экв. иодида натрия и 5 экв. тетрахлорсилана.
Выход: твердое вещество белого цвета; Е=136-137°.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,52 (8, 6Н), 3,08 (ΐ, 2Н, 1=7,59 Гц), 3,30 (ΐ, 2Н, 1=7,59 Гц), 6,87 (άά, 1Н, 1=1,89 Гц, 1=8,79 Гц), 7,02 (ά, 1Н, 1=1,89 Гц), 7,22 (ά, 2Н, 1=7,89 Гц), 7,47 (ά, 2Н, 1=8,19 Гц), 7,66 (ά, 1Н, 1=8,46 Гц), 12,38 (8, 1Н).
Μ8 (Ε8-Μ8): 377,01 (Μ-1).
- 15 018437
Соединение 6. 2-[2-Метил-4-[3-[4-(3,3,3-трифторпропилокси)фенил] -3 -оксопропил] фенокси] -2метилпропионовая кислота
Это соединение получали с помощью восстановления в соответствии с основным способом С, используя сложный трет-бутиловый эфир 2-(4-(3-(4-гидроксифенил)-3-оксо-проп-1-енил)-2метилфенокси)-2-метилпропионовой кислоты, с последующим О-алкилированием фенола и ацидолизом сложного трет-бутилового эфира в соответствии со способом, описанным в патенте И8 2005/176808.
Выход: бесцветное вязкое масло.
ΝΜΒ 1Н (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,60 (8, 6Н), 2,23 (8, 3Н), 2,61-2,70 (т, 2Н), 2,95-2,99 (т, 2Н), 3,19-3,24 (т, 2Н), 4,26 (ί, 2Н, 1=6,5 Гц), 6,77 (б, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,93 (б, 2Н, 1=8,9 Гц), 6,93-6,98 (т, 1Н), 7,06 (б, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,95 (б, 2Н, 1=8,9 Гц).
Μ8 (Ε8-Μ8): 437,3 (Μ-1).
Соединение 10. 2-[4-(3-Метокси-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом Е, используя раствор 2-(4-(3гидрокси-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси)-2-метилпропионовой кислоты в смеси 1/3:2/3 вода/метанол.
Выход: бесцветное вязкое масло.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,46 (8, 6Н), 1,91-2,21 (т, 2Н), 2,15 (8, 6Н), 2,49-2,69 (т, 2Н), 3,83 (8, 3Н), 4,69 (бб, 1Н, 1=7,7 Гц, 1=5,1 Гц), 6,78 (8, 2Н), 7,19 (б, 2Н, 1=8,5 Гц), 7,36 (б, 2Н, 1=8,5 Гц).
Μ8 (Ε8-Μ8): 458,3 (Μ+ΝΉ4 +), 463,2 (ΜΐΝ;ι'). 479,2 (Μ+Κ+).
Соединение 12. 2-(2,6-Диметил-4-(3-оксо-3-(4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)пропил)фенокси)-2метилпропионовая кислота
Это соединение получали с помощью восстановления в соответствии с основным способом С, используя сложный трет-бутиловый эфир 2-(4-(3-(4-гидроксифенил)-3-оксо-проп-1-енил)-2,6диметилфенокси)-2-метилпропионовой кислоты с последующим О-алкилированием фенола и ацидолизом трет-бутилового эфира в соответствии со способом, описанным в заявке И8 2005176808.
Выход: твердое вещество белого цвета; Р=98-99°.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,45 (8, 6Н), 2,17 (8, 6Н), 2,89 (т, 2Н), 3,18 (т, 2Н), 4,40 (ц, 2Н, 1=8,1 Гц), 6,82 (8, 2Н), 6,95 (б, 2Н, 1=9,1 Гц), 7,93 (б, 2Н, 1=9,1 Гц).
Μ8 (Ε8-Μ8): 437,4 (Μ-1).
Соединение 17. 2-(4-(3-(2-Фтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)-3-оксопропил)-2,6-диметилфенок-
Это соединение получали с помощью восстановления в соответствии с основным способом С, используя сложный трет-бутиловый эфир 2-(4-(3-(2-фтор-4-гидроксифенил)-3-оксо-проп-1-енил)-2,6диметилфенокси)-2-метилпропионовой кислоты с последующим О-алкилированием фенола и ацидолизом трет-бутилового эфира в соответствии со способом, описанным в заявке И8 2005176808.
Выход: бесцветное вязкое масло.
ΝΜΒ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,51 (8, 6Н), 2,21 (8, 6Н), 2,92 (1, 2Н, 1=7,6 Гц), 3,23 (1б, 2Н, 1=7,6
Гц 1=3,1 Гц), 6,70 (бб, 1=8,7 Гц 1=2,3 Гц), 6,81 (бб, 1=12,6 Гц 1=2,3 Гц), 6,86 (8), 7,91 (1, 1Н, 1=8,7 Гц).
Μ8 (ΜΆΕΌΙ-ΤΘΡ): 479 (ΜΐΝ;ι).
- 16 018437
Соединение 30. 2-[4-(3-Гидрокси-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом Ό, используя 2-[2,6-диметил-4-[3[4-(трифторметилокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовую кислоту и 4 экв. боргидрида натрия.
Выход: бесцветное вязкое масло.
ΝΜΚ '11 (300 МГц, СЭС13, δ ррт): 1,46 (5, 6Н), 1,94-2,10 (т, 2Н), 2,17 (5, 6Н), 2,46-2,66 (т, 2Н), 4,69 (бб, 1Н, 1=7,6 Гц 1=5,5 Гц), 6,78 (5, 2Н), 7,17 (б, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,34 (б, 2Н, 1=8,3 Гц).
Μδ (Εδ-Μδ): 425,3 (Μ-1).
Соединение 33. 2-(4-(3-(Метоксиимино)-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6диметилфенокси)-2-метилпропионовая кислота
Это соединение получали в соответствии с основным способом Р, используя 2-[2,6-диметил-4-[3-[4(трифторметокси)фенил] -3 -оксопропил] фенокси] -2-метилпропионовую кислоту.
Выход: вязкое масло желтого цвета.
ΝΜΚ '11 (300 МГц, СИС13, δ ррт): 1,49 (5, 6Н), 2,21 (5, 6Н), 2,71-2,77 (т, 2Н), 2,95-3,01 (т, 2Н), 4,01 (5, 3Н), 6,82 (5, 2Н), 7,17 (б, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,59 (б, 2Н, 1=8,7 Гц).
Μδ (Εδ-φΤΟΡ): 476 (ΜΐΝ;ι').
Соединение 35. Сложный трет-бутиловый эфир 2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты
Это соединение получали с помощью восстановления в соответствии с основным способом С, используя 3-(4-гидрокси-3,5-диметилфенил)-1-(4-(трифторметокси)фенил)пропан-1-он с последующим Оалкилированием фенола и ацидолизом трет-бутилового эфира в соответствии со способом, описанным в заявке υδ 2005176808.
Выход: бесцветное вязкое масло.
ΝΜΚ '11 (300 МГц, СИС13, δ ррт): 1,42 (5, 6Н), 1,51 (5, 9Н), 2,21 (5, 6Н), 2,94 (1, 2Н, 1=7,9 Гц), 3,25 (1, 2Н, 1=7,9 Гц), 6,82 (5, 2Н), 7,28 (б, 2Н, 1=9,1 Гц), 8,01 (б, 2Н, 1=9,1 Гц).
Другие соединения получали в соответствии со способами, сходными со способами А-Р и несложными для выполнения специалистами в этой области техники.
Пример 3. Оценка ίη νίΐτο РРАК-активирующих свойств соединений в соответствии с изобретением. РРАК-активирующие свойства соединений в соответствии с изобретением оценивали ίη νίΐτο. Принцип.
Активацию РРАК.5 оценивали ίη νίΐτο, используя линию фибробластов почек обезьяны (СО8-7), с помощью определения транскрипционной активности химер, составленных из ДНК-связывающего домена дрожжевого транскрипционного фактора Са14 и домена, связывающего лиганд различных РРАК.5. Соединения тестировали в дозах от 10-7 до 100 мкМ на химерах Са14-РРАКа, γ и δ.
Протокол.
Культура клеток.
Клетки СО8-7 получали из АТСС (Американская коллекция типовых культур) и выращивали в среде ΌΜΕΜ (среда Игла в модификации Дульбекко), дополненной 10% (об./об.) фетальной сыворотки теленка, 100 Ед/мл пенициллина (С1Ьсо, Ра151еу, ИК) и 2 мМ Ь-глутамином (С1Ьсо, Ра151еу, ИК). Клетки инкубировали при 37°С во влажной атмосфере, содержащей 5% СО2.
Описание плазмид, использованных для трансфекции.
Плазмиды Са14(КЕ)_ТкрСЬ3, рСа14-11РРАК</.. рСа14-11РРАК','. рСа14-11РРАК<5 и рСа14-ф были описа- 17 018437 ны в литературе (Какре Е. с1 а1., 1999). Конструкции рСа14-ЬРРАКа, рСа14-ЬРРАКу и р6а14-ЬРРЛК5 получали с помощью клонирования в вектор рСа14-ф фрагментов ДНК, амплифицированных с помощью РСК и соответствующих ΌΕΕ-доменам ядерных рецепторов РРАКа, РРАКу и РРАК5 человека.
Трансфекция.
Клетки СОЗ-7 в суспензии трансфицировали с помощью 150 нг ДНК на лунку при соотношении рСа14-РРАК/Са14(КЕ)_ТкрСЕ3, равном 1/10, в присутствии 10% фетальной сыворотки теленка. Клетки помещали в 96-луночный планшеты (4x10 клеток/лунку), затем инкубировали в течение 24 ч при 37°С. Активацию с тестируемыми соединениями проводили в течение 24 ч при 37°С в среде, не содержавшей сыворотки. В конце эксперимента клетки лизировали и определяли люциферазную активность, используя §1еайу-Ы1е™ НТ8 (Регкт Е1тег) или 81еайу С1о\у ЕисКегаке (Рготеда) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Результаты.
Соединения в соответствии с изобретением тестировали на 3-х изоформах РРАК. Результаты, полученные с соединениями 1-5 и 7, подробно представлены на фиг. 1-1-1-18.
Заявители продемонстрировали значительный и дозо-зависимый прирост люциферазной активности в клетках, трансфицированных плазмидами рСа14-ЬРРАК и обработанных соединениями в соответствии с изобретением.
Неожиданно представленные экспериментальные данные демонстрируют, что соединения в соответствии с изобретением связываются с РРАКк ίη νίίτο и вызывают активацию транскрипционной активности.
Пример 4. Оценка ίη νίνο, проведенная на мышах АроЕ2/Е2, параметров массы тела, гиполипидемических свойств и способности соединений в соответствии с изобретением стимулировать синтез ЛВПхолестерина.
Принцип.
Свойства влиять на массу тела и гиполипидемические свойства соединений в соответствии с изобретением оценивали ίη νίνο с помощью измерения массы тела и липидов в плазме крови и с помощью анализа экспрессии гена-мишени РРАКк после обработки дислипидемических мышей Е2/Е2 соединениями в соответствии с изобретением.
Использованная мышиная модель представляет собой мышь АроЕ2/Е2, трансгенную мышь, имеющую изоформу Е2 аполипопротеина Е человека (ЗиИКаи Р.М. еί а1., 1998). У человека этот аполипопротеин, компонент липопротеинов низкой и очень низкой плотности (ЛНП-ЛПОНП), присутствует в трех изоформах Е2, Е3 и Е4. Форма Е2 несет в себе мутацию, затрагивающую аминокислоту в положении 158, которая значительно ослабляет сродство этого протеина по отношению к ЛНП-рецепторам. Поэтому выведение ЛПОНП практически отсутствует. Затем происходит накопление липопротеинов низкой плотности вместе со смешанной гиперлипидемией, известной также как тип III (высокий уровень холестерина и триглицеридов).
РРАКа регулирует экспрессию генов, вовлеченных в транспорт липидов (аполипопротеины, такие как Аро А1, Аро А11 и АроС111; мембранные переносчики, такие как ЕАТ) и катаболизм липидов (АСО, СРТ-Ι или СРТ-ΙΙ, ферменты β-окисления жирных кислот). В соответствии с этим, обработка активаторами РРАКа у человека, а также у грызунов приводит к снижению уровня циркулирующих триглицеридов. Измерение уровня липидов в плазме крови после обработки соединениями в соответствии с изобретением позволяет оценивать агонистические свойства в отношении РРАК и гиполипидемический эффект соединений в соответствии с изобретением.
Обработка активаторами РРАК также иногда приводит к повышению уровня плазматического ЛВП-холестерина у человека и у грызунов. Измерение уровня ЛВП-холестерина в плазме крови поэтому позволяет продемонстрировать стимулирующий эффект соединений в соответствии с изобретением на синтез ЛВП-холестерина.
Агонистические свойства РРАКа, ранее определенные ίη νίίτο, должны были привести к суперэкспрессии генов-мишеней в печени непосредственно под контролем РРАКа. Гены, которые мы исследовали в этом эксперименте, представляют собой Аро С111 (аполипопротеин, вовлеченный в метаболизм липидов) и РОК-4 (фермент, вовлеченный в метаболизм углеводов). Измерение транскрипционной активности генов-мишеней для РРАКа после обработки соединениями в соответствии с изобретением действительно позволяет оценивать гиполипидемические свойства соединений в соответствии с изобретением.
Протокол.
Обработка животных.
Трансгенных мышей АроЕ2/Е2 содержали при 12-часовом цикле свет/темнота (12 ч/12 ч) при постоянной температуре, составляющей 20±3°С. После одной недели акклиматизационного периода мышей взвешивали и делили на группы, состоящие из 6 животных, выбираемых таким образом, чтобы обеспечить равномерное распределение по массе их тела и уровню липидов в плазме крови, которые определяли перед экспериментом. Теститруемые соединения суспендировали в карбоксиметилцеллюлозе (81дта С4888) и вводили путем кормления через желудочный зонд один раз в день в течение 8 дней при
- 18 018437 выбранной дозировке. Животные имели свободный доступ к пище и воде (стандартная диета). Прием пищи и прирост массы тела записывали в течение всего эксперимента. В конце эксперимента животных после 4 ч голодания анестезировали, брали образец крови, используя антикоагулянт (ΕΌΤΑ), затем мышей взвешивали и умерщвляли с помощью эвтаназии. Плазму крови получали центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин. Образцы хранили при +4°С.
Извлекали образцы печени, замораживали их в жидком азоте и затем хранили при -80°С для дальнейшего анализа.
Измерение липидов плазмы крови.
Концентрацию липидов плазмы крови (общий холестерин и триглицеридов) измеряли с помощью энзиматического определения (ЬюМепеих-Еуоп-Ртапсе) в соответствии с рекомендациями фирмыпроизводителя.
Уровень холестерина и триглицеридов в плазме крови измеряли через 8 ч после перорального введения соединений в соответствии с изобретением. Эти уровни сравнивали с уровнями, измеренными для контрольных животных (не получавших соединения в соответствии с изобретением). Измеренное различие демонстрировало гиполипидемический эффект соединений в соответствии с изобретением.
Измерение ЛВП-холестерина.
Липопротеины низкой плотности (ЛПОНП и ЛНП) осаждали с помощью фосфовольфрамата. Осадок удаляли центрифугированием. ЛВП-холестерин, присутствующий в супернатанте, измеряли с помощью энзиматического определения (ЬюМепеих-Еуоп-Етапсе) в соответствии с рекомендациями фирмыпроизводителя.
Анализ экспрессии генов с помощью количественной ВТ-РСК.
Суммарную РНК экстрагировали из фрагментов печени с помощью набора Иис1ео8рт® 96 ΒΝΑ кй (Масйетеу №щек НоегбЕ Ртапсе) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Из 1 мкг суммарной РНК (количественно определенной с помощью набора ШЬодтееп ΒΝΑ диапййсайоп кй (Мо1еси1аг РтоЬек)) затем получали комплементарную ДНК методом обратной транскрипции с помощью 1-часовой реакции при 37°С в общем объеме 20 мкл, содержавшем IX буфер (81дша), 1,5 мМ ΌΤΤ, 0,18 мМ άΝΤΡδ (Рготеда), 200 нг ρ6Ν6 (Атегайат), 30 Ед. ингибитора Р№15е (81дта) и 1 мкл ММЬУ-КТ (81дта).
Эксперименты по количественной РСК проводили с помощью системы МутО 8тд1е-Со1от Веа1Ите РСК Бе1есйоп Зуйет (Вюгаб, Матпе8-1а-Содиейе, Ргапсе) и выполняли, используя набор ίθ 8УВР Стееп Зиретих кй в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя, в 96-луночном планшете в 5 мкл разведенного раствора для обратной транскрипции при температуре гибридизации 55°С. Использовали специфические пары праймеров изучаемых генов:
РБК4: смысловой праймер 5'-ΤΑСΤССΑСΤССΤССΑΑСΑССΤС-3' (8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 1) и антисмысловой праймер 5'- ΟΤΤΟΠΌΟΟΤΤ^ΟΤΟΌΤΤΟ-β' (8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 2);
АроСШ: смысловой праймер 5'-СΤСΤΤСССΤСΤССΤСССΑΤС-3' (8ΕΟ ГО ΝΟ: 3) и антисмысловой праймер 5'-ССΑΤССΤССΑСССΤСΤΤССΑ-3' (8ΕΟ ГО ΝΟ: 4). Значение испускаемой флуоресценции прямо пропорционально количеству кДНК, присутствующей в начале реакции и амплифицированной во время РСК. Для каждой исследованной мишени делали серию растворов с помощью подходящих разведений смеси из нескольких микролитров различных растворов для обратной транскрипции. Уровень относительной экспрессии для каждой мишени определяли, таким образом, с помощью кривых эффективности, полученных с помощью точек, относящихся к серии растворов для РСК.
Уровень экспрессии генов, представляющих интерес, затем нормировали относительно уровня экспрессии гена-стандарта 36В4 (для которого специфические праймеры представляют собой смысловой праймер 5'-СΑΤССΤСΑΑСΑΤСΤСССССΤΤСΤСС-3' (8ΕΟ ГО ΝΟ: 7) и антисмысловой праймер 5'СССΑΑССΤСΤΑΑΤСССΤСΤССΑСΑС-3' (НЕС) ГО ΝΟ: 8)).
Затем для каждого образца рассчитывали фактор индукции, т.е. соотношение между относительным сигналом (индуцируемым соединением в соответствии с изобретением) и средними относительными значениями, полученными для контрольной группы. Чем выше фактор индукции, тем сильнее соединение вызывает экспрессию генов. Конечный результат представляют в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Результаты.
Масса тела.
Фиг. 2-1 сравнивает прирост массы тела животных через 8 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день, с приростом массы тела контрольных животных. Неожиданно у животных, получавших соединение 1, была определена потеря массы тела.
Измерение липидов плазмы крови.
Фиг. 2-2 и 2-3 сравнивают уровни общего холестерина и ЛВП-холестерина в плазме крови через 8 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день, с уровнями, полученными для контрольных животных. Неожиданно уровень циркулирующего общего холестерина был значительно снижен, а уровень ЛВП-холестерина был значительно повышен с помощью такой обработки.
- 19 018437
Фиг. 2-4 и 2-5 сравнивают уровни триглицеридов и свободных жирных кислот в плазме крови через 8 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день, с уровнями, полученными для контрольных животных. Неожиданно уровень циркулирующих триглицеридов и свободных жирных кислот значительно снизился после такой обработки.
Анализ экспрессии генов с помощью количественной КТ-РСК.
Заявители также показали, что ίη νίνο соединения в соответствии с изобретением являются регуляторами экспрессии генов-мишеней для РРЛК8. Результаты, представленные на фиг. 2-6 и 2-7, показывают, что соединение 1, которое вводили в количестве 5, 10 и 50 мг/кг/день в течение 8 дней мышам Е2/Е2, индуцирует в печени значительное увеличение экспрессии гена, кодирующего ΡΌΚ4 (фиг. 2-6) и снижение в печени экспрессии гена, кодирующего АроС111 (фиг. 2-7). То, что все гены кодируют ферменты, специфически вовлеченные в метаболизм липидов и углеводов, и тот факт, что их экспрессия модулируется соединениями в соответствии с изобретением, подкрепляет идею, что эти соединения представляют собой огромный потенциал для лечения метаболических патологий.
Вывод.
Неожиданно представленные экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением ίη νίνο индуцируют потерю массы тела и стимулируют синтез ЛВП-холестерина, а также демонстрируют гиполипидемический эффект (снижение уровня триглицеридов и свободных жирных кислот в плазме крови). Кроме того, представленные экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением модулируют экспрессию генов, регулируемых путем активации РРАКк, которые кодируют ферменты, специфически вовлеченные в метаболизм липидов и углеводов.
Пример 5. Оценка ίη νίνο, проведенная на мышах С57В16, параметров массы тела, гиполипидемических свойств и способности соединений в соответствии с изобретением стимулировать синтез ЛВПхолестерина.
Принцип.
Эффекты соединений в соответствии с изобретением на массу тела и их гиполипидемические свойства оценивали ίη νίνο путем измерения массы тела и липидов в плазме крови и с помощью анализа экспрессии генов-мишеней для РРАКк после обработки дислипидемических мышей С57В16 соединениями в соответствии с изобретением.
Протокол.
Обработка животных.
Самок мышей С57В16 содержали при 12-часовом цикле (12 ч свет/12 ч темнота) при постоянной температуре 20±3°С. После одной недели акклиматизационного периода мышей взвешивали и делили на группы, состоящие из 6 животных, выбираемых таким образом, чтобы обеспечить равномерное распределение по массе их тела и уровню липидов в плазме крови, которые определяли перед экспериментом. Теститруемые соединения суспендировали в карбоксиметилцеллюлозе (81дта С4888) и вводили через желудочный зонд один раз в день в течение 14 дней при выбранной дозировке. Животные имели свободный доступ к пище и воде (стандартная диета). Прием пищи и прирост массы тела записывали в течение всего эксперимента. В конце эксперимента животных после 4 ч голодания анестезировали, брали образец крови, используя антикоагулянт (ΕΌΤΑ). Затем мышей взвешивали и умерщвляли с помощью эвтаназии. Плазму крови получали центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин. Образцы хранили при +4°С.
Извлекали образцы печени, замораживали их в жидком азоте и затем хранили при -80°С для дальнейшего анализа.
Измерение ЛВП-холестерина.
Липопротеины низкой плотности (ЛПОНП и ЛНП) осаждали с помощью фосфовольфрамата. Осадок удаляли центрифугированием. ЛВП-холестерин, присутствующий в супернатанте, измеряли с помощью энзиматического определения (ΝοΜόποιιχ-Ενοη-ΕΤαηοο) в соответствии с рекомендациями фирмыпроизводителя.
Измерение триглицеридов плазмы крови.
Концентрацию триглицеридов плазмы крови измеряли с помощью энзиматического определения (ΕίοΜόποιιχ-Ενοη-ΕΤ;·ιηοο) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Анализ экспрессии генов с помощью количественной КТ-РСК.
Суммарную РНК экстрагировали из фрагментов печени с помощью набора Νι.ιο1οο8ρίη® 96 ΚΝΑ ΚίΙ (МасЕегеу №1де1, ΗοβΓάΐ, ЕТаиес) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Из 1 мкг суммарной РНК (количественно определенной с помощью спектрофотомета) затем получали кДНК методом обратной транскрипции с помощью 1-часовой реакции при 37°С в общем объеме 20 мкл, содержавшем 1Х буфер (81дта), 1,5 мМ ΌΤΤ, 0,18 мМ бЭТРк (Рготеда), 200 нг ράΝ6 (Атетйат), 30 Ед. ингибитора К.№15е (81дта) и 1 мкл ММЬУ-КТ (81дта).
Эксперименты по количественной РСК проводили с помощью системы МугО 8ίΐ'^Κ-ί.'ο1οΓ Кеа1Т1те РСК □с1сс1юп 8у51ет (Вюгаб, Мате8-1а-Сο^иеΐΐе, ЕТаисе) и выполняли, используя набор ίθ 8УВК
- 20 018437
Сгееп 8иретш1х к11 в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя, в 96-луночном планшете в 5 мкл разведенного раствора для обратной транскрипции при температуре гибридизации 55°С. Использовали специфические пары праймеров изучаемых генов:
ΡΌΚ4: смысловой праймер 5'-ΤΑСΤССΑСΤССΤССΑΑСΑССΤС-3' (8Е0 ΙΌ N0: 1) и антисмысловой праймер 5'-6ТТСТТС66ТТСССТ6СТТ0-3' (81 У) ГО N0: 2);
ΑροΟΙΙ: смысловой праймер 5'-СТСТТСССТСТССТСССΑТС-3' (8Е0 ΙΌ N0: 3) и антисмысловой праймер 5'-ССΑТССТССΑСССТСТТССΑ-3' (8Е0 ΙΌ N0: 4). Значение испускаемой флуоресценции прямо пропорционально количеству кДНК, присутствующей в начале реакции и амплифицированной во время ΡΟΗ. Для каждой исследованной мишени делали серию растворов с помощью подходящих разведений смеси из нескольких микролитров различных растворов для обратной транскрипции. Уровень относительной экспрессии для каждой мишени определяли, таким образом, с помощью кривых эффективности, полученных с помощью точек, относящихся к серии разведений. Уровень экспрессии генов, представляющих интерес, затем нормировали относительно уровня экспрессии гена-стандарта 36В4 (для которого специфические праймеры представляют собой смысловой праймер 5'СΑТ6СТСΑΑСΑТСТСССССТТСТСС-3' (8ЕО ΙΌ N0: 7) и антисмысловой праймер 5'666ΑΑ66Т6ТΑΑТСС6ТСТССΑСΑ6-3' (8ЕО ΙΌ N0: 8)).
Затем для каждого образца рассчитывали фактор индукции. Чем выше фактор индукции, тем сильнее соединение вызывает экспрессию генов. Конечный результат представляют в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Результаты.
Масса тела.
Фиг. 3-1 сравнивает прирост массы тела животных через 14 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день, с приростом массы тела контрольных животных. Неожиданно у животных, получавших соединение 1, была определена потеря массы тела.
Измерение липидов плазмы крови.
Фиг. 3-2 сравнивает уровни ЛВП-холестерина в плазме крови через 14 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день, с уровнями, полученными для контрольных животных. Неожиданно уровень циркулирующего ЛВП-холестерина был значительно повышен благодаря такой обработке.
Фиг. 3-3 сравнивает уровни триглицеридов в плазме крови через 14 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день, с уровнями, полученными для контрольных животных. Неожиданно уровень циркулирующих триглицеридов значительно снизился благодаря такой обработке.
Анализ экспрессии генов с помощью количественной ΚТ-ΡСΚ.
Заявители также показали, что ίη νίνο соединения в соответствии с изобретением являются регуляторами экспрессии генов-мишеней для ΡΡΑΚδ. Результаты, представленные на фиг. 3-4 и 3-5, показывают, что соединение 1, которое вводили в количестве 3, 10 и 30 мг/кг/день в течение 14 дней мышам С57ВК, индуцирует в печени значительное увеличение экспрессии генов, кодирующих ΡΌΚ4 (фиг. 3-4), и снижение в печени экспрессии гена, кодирующего ΑροΟΙΙ (фиг. 3-5). То, что все гены кодируют ферменты, специфически вовлеченные в метаболизм липидов и углеводов, и тот факт, что их экспрессия модулируется соединениями в соответствии с изобретением, подкрепляет идею, что эти соединения представляют собой огромный потенциал для лечения метаболических патологий.
Вывод.
Неожиданно представленные экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением ίη νίνο индуцируют потерю массы тела, стимулируют синтез ЛВП-холестерина, а также демонстрируют гиполипидемический эффект (снижение уровня триглицеридов в плазме крови). Кроме того, представленные экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением модулируют экспрессию генов, регулируемых путем активации ΡΡΑΚδ, которые кодируют ферменты, специфически вовлеченные в метаболизм липидов и углеводов.
Пример 6. Оценка ίη νίνο, проведенная на мышах бЬ/бЬ, параметров массы тела, антидиабетических свойств, гиполипидемических свойств и способности соединений в соответствии с изобретением стимулировать синтез ЛВП-холестерина.
Принцип.
Эффекты соединений в соответствии с изобретением на массу тела, резистентность к инсулину и гиполипидемические свойства этих соединений оценивали ίη νίνο путем измерения массы тела и уровня глюкозы и инсулина в плазме крови, липидов в плазме крови и с помощью анализа распределения холестерина в различных фракциях липопротеинов в плазме крови, а также экспрессии генов-мишеней для ΡΡΑΚδ после перорального введения мышам бЬ/бЬ соединений в соответствии с изобретением.
Протокол.
Обработка животных.
Самок мышей бЬ/бЬ содержали при 12-часовом цикле (12 ч свет/12 ч темнота) при постоянной температуре 20±3°С. После одной недели акклиматизационного периода мышей взвешивали и делили на
- 21 018437 группы, состоящие из 8 животных, выбираемых таким образом, чтобы обеспечить равномерное распределение по их массе тела и уровню липидов в плазме крови, которые определяли перед экспериментом. Тестируемые соединения суспендировали в карбоксиметилцеллюлозе (81дта С4888) и вводили через желудочный зонд один раз в день в течение 28 дней при выбранной дозировке. Животные имели свободный доступ к пище и воде (стандартная диета). Прием пищи и прирост массы тела записывали в течение всего эксперимента. В конце эксперимента животных анестезировали после 4 ч голодания, брали образец крови, используя антикоагулянт (ΕΌΤΑ), затем мышей взвешивали и умерщвляли с помощью эвтаназии. Плазму крови получали центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин. Образцы хранили при +4°С.
Извлекали образцы тканей печени и скелетных мышц, сразу же замораживали их в жидком азоте и затем хранили при -80°С для дальнейшего анализа.
Измерение гликемии и инсулинемии в плазме крови.
Глюкозу в плазме крови мышей измеряют по энзиматическому колориметрическому методу с помощью набора С1исо8е ЯТИ Я11 (Вютепеих). Глюкозу превращают в глюконовую кислоту под действием глюкозооксидазы; реакция приводит к выделению перекиси водорода. Перекись водорода измеряют в реакции Триндера, катализируемой пероксидазой, в которой в присутствии фенола и амино-4антипирина образуется вода и окрашенный продукт хинонимин. Интенсивность окрашивания в результате образования хинонимина пропорциональна количеству глюкозы, присутствующей в образце.
Инсулин у мышей измеряют с помощью метода ΕΠ8Α (используя набор ГЫ8КЯ020 Я11 от фирмы Сгу§1а1 сЬет.). Микропланшет покрывают мышиными антителами к инсулину. Затем в планшет помещают сыворотку, которую анализируют на присутствие инсулина. Чтобы обнаружить комплекс, образованный мышиным инсулином и моноклональными антителами к инсулину, применяют антитела морской свинки к инсулину. В конце добавляют антитела к иммуноглобулинам морской свинки, меченные пероксидазой, и связывают их с антителами морской свинки к инсулину. Проводят колориметрическую реакцию, добавляя субстрат фермента ΘΡΌ (орто-фенилдиамин). Интенсивность окрашивания пропорциональна количеству инсулина, присутствующего в образце.
Измерение липидов плазмы крови.
Концентрацию липидов плазмы крови (общий холестерин и триглицериды) измеряли с помощью энзиматического анализа (ЬюМепеих-Еуоп-Егапсе) в соответствии с рекомендациями фирмыпроизводителя.
Анализ распределения холестерина во фракциях липопротеинов плазмы крови.
Различные фракции липидов (ЛПОНП, ЛНП, ЛВП) в плазме крови разделяли с помощью гельфильтрации. Затем в каждой фракции измеряли концентрацию холестерина с помощью энзиматического анализа (ЬюМепеих-Еуоп-Егапсе) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Анализ экспрессии генов с помощью количественной ЯТ-РСЯ.
Печеночная ткань.
Суммарную РНК экстрагировали из фрагментов печени с помощью набора Ыис1ео8рт® 96 ΡΝΑ 1<Ц (МасЬегеу №ще1, НоегбЕ Ргапсе) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Ткань скелетных мышц.
Суммарную РНК экстрагировали из фрагментов икроножной скелетной мышцы с помощью набора Я№а§у® НЬгои8 Т188ие кб (01адеп) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
Из 1 мкг суммарной РНК (количественно определенной с помощью спектрофотометрии) затем получали комплементарную ДНК методом обратной транскрипции с помощью 1-часовой реакции при 37°С в общем объеме 20 мкл, содержавшем 1Х буфер (81дта), 1,5 мМ ΌΤΤ, 0,18 мМ άΝΤΡδ (Рготеда), 200 нг ρ6Ν6 (Атегайат), 30 Ед. ингибитора Я№15е (81дта) и 1 мкл ММЕУ-ΒΤ (81дта).
Эксперименты по количественной РСЯ проводили с помощью системы МутО 8тд1е-Со1от Яеа1ГОте РСЯ Эе1ес11оп 8у§1ет (Вютаб, Магпе5-1а-Содие11е, Етапсе) и выполняли, используя набор ίθ 8УВЯ Сгееп 8иретт1х к11 в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя, в 96-луночном планшете в 5 мкл разведенного раствора для обратной транскрипции при температуре гибридизации 55°С. Использовали специфические пары праймеров изучаемых генов:
ΡΌΚ4: смысловой праймер 5'-ΤΑСΤССΑСΤ6СΤССΑΑСΑССΤ6-3' (8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 1) и антисмысловой праймер 5'- ΟΤΤΌΤΤϋΟΟΤΤϋϋΟΤΟΌΤΤΌ^' (8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 2);
ИСР2: смысловой праймер 5'-6ΤС66Α6ΑΤΑССΑ6Α6СΑСΤ6ΤС6-3' (8ΕΟ ГО ΝΟ: 5) и антисмысловой праймер 5'- СΑСΑΤСΑΑСΑ6666Α66С6Α-3' (8ΕΕ) ГО ΝΟ: 6).
Значение испускаемой флуоресценции прямо пропорционально количеству комплементарной ДНК, присутствующей в начале реакции и амплифицированной во время РСЯ. Для каждой исследованной мишени делали серию растворов с помощью подходящих разведений смеси из нескольких микролитров различных растворов для обратной транскрипции. Уровень относительной экспрессии для каждой мишени определяли, таким образом, с помощью кривых эффективности, полученных с помощью точек, относящихся к серии растворов РСЯ.
Уровень экспрессии генов, представляющих интерес, затем нормировали в печеночной ткани отно
- 22 018437 сительно уровня экспрессии гена-стандарта 36В4 (для которого специфические праймеры представляют собой смысловой праймер 5'-САТ6СТСААСАТСТСССССТТСТСС-3' (8ЕЦ ГО N0: 7) и антисмысловой праймер 5'-666АА66Т6ТААТСС6ТСТССАСА6-3' (8ЕЦ ГО N0: 8)); и в скелетно-мышечной ткани относительно уровня экспрессии гена-стандарта 188 (для которого специфические праймеры представляют собой смысловой праймер 5'-С66АСАС66АСА66АТТ6АСА6-3' (8ЕЦ ГО N0: 9) и антисмысловой праймер 5'-ААТСТС666Т66СТ6ААС6С-3' (8ЕЦ ГО N0: 10)). Затем для каждого образца рассчитывали фактор индукции. Чем выше фактор индукции, тем больше соединение вызывает экспрессию генов. Конечный результат представляют в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Результаты.
Масса тела.
Фиг. 4-1 сравнивает прирост массы тела животных через 28 дней после приема соединения 1, которое вводили в количестве 50 мг/кг/день, с приростом массы тела контрольных животных. Неожиданно у животных, получавших соединение 1, была определена потеря массы тела.
Измерение гликемии и инсулинемии.
Фиг. 4-2 и 4-3 сравнивают уровни глюкозы и инсулина в плазме крови через 28 дней после обработки соединением 1, которое вводили в количестве 50 мг/кг/день. Неожиданно гликемия и инсулинемия были значительно снижены в результате такой обработки.
Измерение липидов плазмы крови.
Фиг. 4-4 сравнивает уровень общего холестерина в плазме крови через 28 дней после приема соединения 1 и 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день, с уровнем, полученным для контрольных животных. Неожиданно уровень циркулирующего общего холестерина был значительно повышен. Фиг. 4-5 показывает, что это повышение уровня общего холестерина в плазме крови происходит из-за значительного повышения фракции ЛВП-холестерина, вызванного обработкой животных соединениями 1 и 3 в количестве 50 мг/кг/день.
Фиг. 4-6 и 4-7 сравнивают уровни триглицеридов и свободных жирных кислот в плазме крови через 28 дней после приема соединений 1 и 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день, с уровнями, полученными для контрольных животных. Неожиданно уровень циркулирующих триглицеридов и свободных жирных кислот значительно снизился в результате такой обработки.
Анализ экспрессии генов с помощью количественной ΚΕ-ΡΟΗ.
Заявители также показали, что т у1уо соединения в соответствии с изобретением являются регуляторами экспрессии генов-мишеней для ΡΡΑΚ8. Результаты, представленные на фиг. 4-8 и 4-9, показывают, что соединения 1 и 3, которые вводили в количестве 50 мг/кг/день в течение 28 дней мышам бЬ/бЬ, вызывали значительное увеличение в печени экспрессии генов, кодирующих ΡΌΚ4 (фиг. 4-8), и снижение экспрессии гена, кодирующего υί.'Ρ2 (фиг. 4-9) в скелетной мышце. Все кодирующие гены ферментов специфически вовлечены в метаболизм липидов и углеводов и в рассеяние энергии, и тот факт, что их экспрессия модулируется соединениями в соответствии с изобретением, подкрепляет идею, что эти соединения представляют собой огромный потенциал для лечения метаболических патологий.
Вывод.
Неожиданно представленные экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением ш у1уо индуцируют потерю массы тела и улучшение чувствительности к инсулину, стимулируют синтез ЛВП-холестерина, а также демонстрируют гиполипидемический эффект (снижение уровня триглицеридов в плазме крови). Кроме того, представленные экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением модулируют экспрессию генов, регулируемых путем активации ΡΡΑΚ8, которые кодируют ферменты, специфически вовлеченные в метаболизм липидов и углеводов и рассеяние энергии.
Пример 7. Оценка т νίΙΐΌ противовоспалительных свойств соединений в соответствии с изобретением.
Принцип.
Противовоспалительные эффекты соединений в соответствии с изобретением оценивали с помощью измерения секреции МСР1 (моноцитарный хемотаксический протеин-1) моноцитами, обработанными в течение 24 ч соединениями в соответствии с изобретением и одновременно стимулированными РМА (форбол-12-миристат-13-ацетат, который вызывает воспалительный ответ в клетках и их дифференцировку в макрофаги). Чем меньше секретируется МСР-1, тем сильнее соединение в соответствии с изобретением подавляет воспалительную реакцию.
Протокол.
Культура клеток ТНР-1 и их обработка.
Линию клеток моноцитов человека ТНР-1 (получена из АТСС) выращивали в среде ΚΡΜΙ1640 с 25 мМ Нере8 (61Ьсо; 42401-018), 1% глутамином (61Ьсо; 25030-24), 1% пенициллином/стрептомицином (Вюсйгот А6; А 2213) и 10% фетальной сывороткой теленка, лишенной комплемента (8УЕ. 61Ьсо; 26050-088).
Клетки помещают в 24-луночный планшет (Титана ΒΌ Ра1соп) при плотности 870000 клеток/лунку
- 23 018437 и затем инкубируют при 37°С и 5% СО2 в течение 24 ч в культуральной среде, содержащей 0,2% фетальной сыворотки теленка в присутствии 5 нг/мл форбол-12-миристат-13-ацетата (РМА) и 1 мкМ соединения 3 в соответствии с изобретением. Соединение в соответствии с изобретением растворяют в диметилсульфоксиде (ΌΜ8Θ, Ника; 41640). Эффект соединений в соответствии с изобретением сравнивают с эффектом ΌΜ8Θ самого по себе.
Измерение секреции МСР1.
Извлекают среду для обработки и измеряют концентрацию МСР1 с помощью набора ЕЫ8А Нитап ΜСΡ-1 ЕЫ8Л 8с1 (ВИ Ор!Е1А; 555179) в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
МСР1 помещают в планшет и обнаруживают с помощью специфического антитела к МСР1. Это специфическое антитело само распознается вторичным антителом, связанным с ферментом пероксидазой. Окрашивание, появляющееся в результате ферментативной активности, пропорционально связано с МСР1 и может быть измерено спектрофотометрическим методом. Делают измерения для точки с известной концентрацией, с помощью которой рассчитывают концентрацию МСР1 для каждого образца.
Затем рассчитывали фактор индукции, т.е. соотношение между сигналом, вызываемым соединением в соответствии с изобретением, и сигналом, определяемым в контрольной группе. Чем меньше этот фактор, тем сильнее соединение подавляет секрецию МСР1. Конечный результат представляют в виде средних значений индукции, полученных для каждой экспериментальной группы.
Результаты.
Заявители показали, что ίη уйго соединения в соответствии с изобретением оказывали противовоспалительные эффекты на моноциты. Результаты, представленные на фиг. 5, показывают, что соединение 3 в соответствии с изобретением в концентрации 1 мкМ вызывает значительное снижение секреции МСР1 моноцитами.
Вывод.
Неожиданно раскрытые экспериментальные данные показывают, что соединения в соответствии с изобретением обладают противовоспалительным эффектом на моноциты, стимулированные РМА.
Общие выводы
Заявители показали, что соединения в соответствии с изобретением вызывают потерю массы тела, обладают гиполипидемическими свойствами, снижают уровень холестерина и триглицеридов в плазме крови, стимулируют синтез ЛВП-холестерина и обладают антидиабетическими свойствами. Кроме того, заявители показали, что соединения в соответствии с изобретением обеспечивают регулирование экспрессии генов, кодирующих ферменты, специфически вовлеченные в метаболизм липидов и углеводов и рассеяние энергии.
Заявители также показали, что соединения в соответствии с изобретением обладают противовоспалительными свойствами.
Эти результаты, полученные ίη νίνο и ίη νίΐτο, демонстрируют терапевтический потенциал соединений в соответствии с изобретением при лечении важнейших патологий, таких как дислипидемия, диабет 2-го типа и ожирение.
Список литературы.
Рох-Тискег .1.. ТНе Сагс1|0\а8си1аг \1агкс1 ОиЙоок ΐο 2010, Βυ8ΙΝΕ88 ΙΝ8ΙΟΠΤ8 КЕРОКТ8, 2005, 1174,
6το88 В., еΐ а1., Ретох18оше Р^ο1^ίе^аΐο^-Αсί^νаΐеά КесерЮг Ь/ά: А ηονе1 1агце1 Гог 1Ие ^еάисΐ^οη οί аШето8с1его818, икис И18СОУЕКУ ТОИАУ: ТНЕКАРЕиТ1С 8ТКАТЕС1Е8, 2005, 2(3), 237-243,
1п1егпа11опа1 А1йего8с1его818 8ос1е1у, На^тοη^8еά Сйшсак С1^е1ше8 оп Ргеуепйоп οί АШето8с1етойс Уа8си1ат И18еа8е, 2003,
Ко1а В.Р., еΐ а1., Ап оуегие\у оп Ью1одюа1 тесйаш8Ш8 οί РРАК, РНагтасо1 Ке8, 2005, 51(2), 85-94,
ЬеГеЬуге Р., еΐ а1., 8ойтд ои1 Не го1е8 οί РРАКа1рНа ш епегду те1аЬоЙ8т ηπά уа8си1аг 1ютео81а818, ί С11п 1пуе81, 2006, 116 (3), 571-580,
Ьейтке Μ. ηπά йа/аг ΜΑ, ТНе тапу Гасе8 οί РРАКдатта, Се11, 2005, 123(6), 993-9,
Ь1и Υ. ηπά Μι1Κγ А., ЫдаЖ ΐο регох18оте р^ο1^ίе^аΐο^-асΐ^νаΐеά гесер1ог8 а8 Шегареийс орйоп8 Гог теЮЬойс 8νικΙιοιιιν\ ИКиб Ι)Ι8(Ό\ΊΉΥ ΤО^ΑΥ: ТНЕКАРЕиТ1С 8ТКАТЕС1Е8, 2005, 2(3), 165-169,
Μеη8а11 Μ., ТНе АЙа8 οί Неай И18еа8е ηπά 81гоке, 2004,
Ка8ре Е., еΐ а1., Μοάи1аΐ^οη οί га1 Иуег аройроргсИет депе ехрте88юп ηπά 8егит 11р1И 1еуе18 Ьу ΐеί^аάесуЙЫоасейс ηάά (ТТА) νίη РРАК(а1рНа) асЖайоп, к Ь1р1И Ке8., 1999, 40(11), 2099-2110,
8иШуап Р/Μ., еΐ а1., Туре III 11урегНрорго1етет1а ηπά 8роп1апеои8 а111его8с1его818 т тюе ге8и11тд Ггош депе гер1асетеп1 οί тои8е Арое \νί11ι Нитап Арое*2, к С1т 1пуе81, 1998, 102(1), 130-5.

Claims (12)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение, имеющее общую формулу (I)
    Х5 (I) в которой X! представляет собой атом галогена, группу К! или Οι -К1;
    Х4 представляет собой группу Ο4-Κ4;
    Κ1 представляет собой галогенированную алкильную группу, содержащую 1-24 атома углерода;
    Κ4 представляет собой С1-С24-алкил, замещенный одной группой СООК9;
    Хз и Х5, одинаковые или различные, представляют собой незамещенный С1-С24-алкил;
    Οι и Ο4, одинаковые или различные, представляют собой атом кислорода или серы;
    А представляет собой:
    (ί) СНОК8, где К8 является Н или алкильной группой, содержащей 1-6 углеродных атомов, замещенной или незамещенной одной арильной группой, содержащей 5-14 углеродных атомов, возможно прерываемых одним гетероатомом, выбранным из Ν, О, 8 или Р; или (ίί) группу (СО);
    К9 представляет собой атом водорода или незамещенный С1-С6-алкил.
  2. 2. Соединение по п.1, характеризующееся тем, что А представляет собой карбонильную группу (СО).
  3. 3. Соединение по п.1 или 2, характеризующееся тем, что Х4 представляет собой Ο4Κ4, где К4 представляет собой С1-Сю-алкил.
  4. 4. Соединение по пп.1-3, характеризующееся тем, что О4 представляет собой атом кислорода.
  5. 5. Соединения по любому из предыдущих пунктов, характеризующиеся тем, что Х4 соответствует формуле -ОС(СН3)2СООК9, где К9 был определен в п.1.
  6. 6. Соединения по любому из предыдущих пунктов, характеризующиеся тем, что группы Х3 и Х5, одинаковые или различные, представляют собой незамещенный С1-С4-алкил.
  7. 7. Соединения по любому из предыдущих пунктов, характеризующиеся тем, что Х1 представляет собой группу К! или О1К1, где Οι определен в п.1 и К! представляет собой галогенированную С1-С3алкильную группу.
  8. 8. Соединения по любому из предыдущих пунктов, характеризующиеся тем, что их выбирают из
    2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(трифторметокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(трифторметилтио)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-[2,6-диметил-4-[3-[4-бромфенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты, 2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(трифторметил)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-[2,6-диметил-4-[3-гидрокси-3-[4-(трифторметилтио)фенил]пропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-[2,6-диметил-4-[3-(пиридин-3-илметокси)-3-[4-(трифторметокси)фенил]пропил]фенокси]-2метилпропионовой кислоты,
    2-[4-(3-(4-иодбензилокси)-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-[4-(3-метокси-3 -(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-[2,6-диметил-4-[3-[4-(3,3,3-трифторпропилокси)фенил]-3-оксопропил]фенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты,
    2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(2,2,2-трифторэтилтио)фенил)пропил)фенокси)-2-метилпропионовой кислоты,
    2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)пропионовой кислоты,
    2-[4-(3-гидрокси-3 -(4-(трифторметокси)фенил)пропил)-2,6-диметилфенокси]-2-метилпропионовой кислоты,
    4-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2,2-диметилмасляной кислоты,
    2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-трет-бутилметилпропа
    - 25 018437 ноата,
    2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3 -(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)-2-изопропилметилпропаноата,
    2,2-дифтор-2-(2,6-диметил-4-(3-оксо-3-(4-(трифторметокси)фенил)пропил)фенокси)уксусной кислоты.
  9. 9. Фармацевтическая композиция, проявляющая свойства агониста РРЛК, включающая в фармацевтически приемлемом наполнителе по меньшей мере одно из соединений по пп.1-8.
  10. 10. Фармацевтическая композиция по п.9 для лечения осложнений, связанных с метаболическим синдромом, резистентности к инсулину, диабета, дислипидемии, атеросклероза, сердечно-сосудистых заболеваний, ожирения, гипертонии, воспалительных заболеваний, нейродегенеративных патологий или рака.
  11. 11. Фармацевтическая композиция по п.9 для лечения дислипидемии.
  12. 12. Фармацевтическая композиция по п.9 для лечения факторов риска развития сердечнососудистых заболеваний, относящихся к дисрегуляции метаболизма липидов и/или углеводов.
EA200900044A 2006-06-21 2007-06-21 Замещенные производные 1,3-дифенилпропана, получение и их применение EA018437B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0605540A FR2902789A1 (fr) 2006-06-21 2006-06-21 Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations
PCT/EP2007/056225 WO2007147880A1 (fr) 2006-06-21 2007-06-21 Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200900044A1 EA200900044A1 (ru) 2009-06-30
EA018437B1 true EA018437B1 (ru) 2013-08-30

Family

ID=37845179

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200900044A EA018437B1 (ru) 2006-06-21 2007-06-21 Замещенные производные 1,3-дифенилпропана, получение и их применение

Country Status (22)

Country Link
US (2) US8188148B2 (ru)
EP (2) EP2046715B1 (ru)
JP (2) JP5350230B2 (ru)
KR (2) KR101416262B1 (ru)
CN (3) CN101506139B (ru)
AU (2) AU2007262938B2 (ru)
BR (1) BRPI0713600B1 (ru)
CA (2) CA2655643C (ru)
CY (2) CY1115082T1 (ru)
DK (2) DK2046716T3 (ru)
EA (1) EA018437B1 (ru)
ES (2) ES2434071T3 (ru)
FR (1) FR2902789A1 (ru)
IL (2) IL196071A0 (ru)
MX (1) MX2008016239A (ru)
NO (1) NO341866B1 (ru)
NZ (1) NZ573674A (ru)
PL (2) PL2046716T3 (ru)
PT (2) PT2046715E (ru)
SI (2) SI2046716T1 (ru)
WO (2) WO2007147880A1 (ru)
ZA (1) ZA200810709B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU186145U1 (ru) * 2018-08-08 2019-01-11 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Центротех" (ООО "НПО "Центротех") Каркас виброрамы вибросита

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2902789A1 (fr) * 2006-06-21 2007-12-28 Genfit Sa Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations
FR2917084B1 (fr) * 2007-06-05 2009-07-17 Galderma Res & Dev Nouveaux derives d'acide 3-phenyl propanoique activateurs des recpteurs de type ppar, leur methode de preparation et leur utilisation dans des compositions cosmetiques ou pharmaceutiques.
US9221751B2 (en) 2009-11-26 2015-12-29 Genfit Use of 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivatives for treating liver disorders
PT2641596T (pt) * 2009-11-26 2018-07-31 Genfit Utilização de derivados de 1,3-difenilprop-2-en-1-ona para tratamento de doenças hepáticas
US10722575B2 (en) 2009-11-26 2020-07-28 Genfit Use of 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivatives for treating liver disorders
WO2011080276A1 (en) 2009-12-29 2011-07-07 Genfit Pharmaceutical combinations comprising a dpp-4 inhibitor and a 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivative
ES2656330T3 (es) 2010-05-17 2018-02-26 Genfit Preparación mejorada de derivados de chalcona
RU2579114C9 (ru) * 2010-07-12 2016-05-27 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг 1-гидроксиимино-3-фенил-пропаны
BR112014011581A2 (pt) * 2011-11-14 2017-05-09 Hoffmann La Roche 1-piridazinil-hidroxiimino-3-fenil-propanos como agonistas de gpbar1
BR112014016129B1 (pt) 2011-12-28 2022-04-05 Genfit Composto, derivado de 1,3-difenilpropano e composição farmacêutica
WO2017143038A1 (en) * 2016-02-16 2017-08-24 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated gft-505
IT201600098338A1 (it) 2016-09-30 2018-03-30 Univ Degli Studi Padova Composti 1-fenilpropanone e loro impiego
US11634387B2 (en) 2019-09-26 2023-04-25 Abionyx Pharma Sa Compounds useful for treating liver diseases
BR112022015800A2 (pt) 2020-02-10 2022-10-11 Genfit Tratamento de colangite biliar primária com elafibranor
WO2021169769A1 (zh) * 2020-02-28 2021-09-02 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 芳香族化合物及其药物组合物和用途
US20230165821A1 (en) 2020-05-18 2023-06-01 Genfit Elafibranor for the treatment of primary sclerosing cholangitis
MX2023002159A (es) 2020-08-26 2023-03-01 Genfit Composiciones y metodos para el tratamiento de la colangitis biliar primaria.
JP2024518521A (ja) 2021-05-11 2024-05-01 ジェンフィット 肝不全の治療において使用するためのｐｐａｒアゴニスト
CA3214544A1 (en) 2021-05-11 2022-11-17 Vanessa LEGRY Elafibranor derivatives agonists of ppar for use in the treatment of sepsis

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4121849A1 (de) * 1991-07-02 1993-01-14 Rhone Poulenc Rorer Gmbh (4-((omega)-arylalkyl)-phenyl)alkansaeuren, ihre salze und/oder ihre derivate
DE4327365A1 (de) * 1993-08-14 1995-02-16 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Phenolen und Phenolderivaten als Arzneimittel mit fibrinogensenkender Wirkung

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2149070C3 (de) 1971-10-01 1978-03-23 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Phenoxyalkylcarbonsäurederivate und deren Salze, Verfahren zu deren Herstellung und Arzneimittel
HU200591B (en) * 1986-07-11 1990-07-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Process for producing new diphenyl propylamine derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds
EP1177187B1 (en) * 1999-04-28 2007-07-25 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Di-aryl acid derivatives as ppar receptor ligands
DE19933421A1 (de) * 1999-07-16 2001-01-25 Gruenenthal Gmbh 2-Benzyl-3-dimethylamino-1-phenyl-propanderi- vate
FR2841900B1 (fr) 2002-07-08 2007-03-02 Genfit S A Nouveaux derives de 1,3-diphenylprop-2-en-1-one substitues, preparation et utilisations
US20070043035A1 (en) * 2003-10-28 2007-02-22 Gurram Ranga M Novel compounds and their use in medicine: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
MY147518A (en) * 2004-09-15 2012-12-31 Janssen Pharmaceutica Nv 4-((phenoxyalkyl)thio)-phenoxyacetic acids and analogs
FR2902789A1 (fr) * 2006-06-21 2007-12-28 Genfit Sa Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4121849A1 (de) * 1991-07-02 1993-01-14 Rhone Poulenc Rorer Gmbh (4-((omega)-arylalkyl)-phenyl)alkansaeuren, ihre salze und/oder ihre derivate
DE4327365A1 (de) * 1993-08-14 1995-02-16 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Phenolen und Phenolderivaten als Arzneimittel mit fibrinogensenkender Wirkung

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE CA [Online] CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLUMBUS, OHIO, US; HE, LAN ET AL.: "Synthesis and biological activity of flavane derivatives", XP002425766, retrieved from STN, Database accession no. 2006:290724, abstract, compose: RN914399-86-3 & CHINESE JOURNAL OF CHEMISTRY, 24(3), 401-408 CODEN: CJOCEV; ISSN: 1001-604X, 2006 *
LABAUDINIERE R. ET AL.: "OMEGA-[(OMEGA-ARYLALKYL)ARYL]ALKANOIC ACIDS: A NEW CLASS OF SPECIFIC LTA4 HYDROLASE INHIBITORS", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, WASHINGTON, US, vol. 35, no. 17, 1992, pages 3156-3169, XP001205195, ISSN: 0022-2623, abstract, the whole document, compounds 38, 39, 41, 43 *
MORISHITA S. ET AL.: "SYNTHESIS AND HYPOLILIDAEMIC ACTIVITY OF 2-SUBSTITUTED ISOBUTYRIC ACID DERIVATIVES", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, WASHINGTON, US, vol. 31, no. 6, June 1988 (1988-06), pages 1205-1209, XP002003702, ISSN: 0022-2623, abstract, the whole document, compound 4 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU186145U1 (ru) * 2018-08-08 2019-01-11 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Центротех" (ООО "НПО "Центротех") Каркас виброрамы вибросита

Also Published As

Publication number Publication date
NZ573674A (en) 2012-02-24
KR101416257B1 (ko) 2014-07-16
KR101416262B1 (ko) 2014-07-16
JP5350231B2 (ja) 2013-11-27
CA2655744C (fr) 2016-03-22
ES2466268T3 (es) 2014-06-09
DK2046715T5 (da) 2014-07-28
SI2046715T1 (sl) 2014-08-29
JP2009541270A (ja) 2009-11-26
EP2046715A1 (fr) 2009-04-15
EP2046716A1 (fr) 2009-04-15
SI2046716T1 (sl) 2014-02-28
CA2655744A1 (fr) 2007-12-27
CN101506138B (zh) 2014-02-19
BRPI0713600A2 (pt) 2012-11-06
CN104193660A (zh) 2014-12-10
CN101506139A (zh) 2009-08-12
EP2046715B1 (fr) 2014-04-16
CN101506138A (zh) 2009-08-12
IL196057A0 (en) 2009-09-01
CY1115414T1 (el) 2017-01-04
CA2655643A1 (fr) 2007-12-27
CA2655643C (fr) 2016-03-22
EP2046716B1 (fr) 2013-08-14
ES2434071T3 (es) 2013-12-13
IL196057A (en) 2012-07-31
US20110136888A1 (en) 2011-06-09
PT2046716E (pt) 2013-11-11
CN101506139B (zh) 2012-10-10
BRPI0713600B1 (pt) 2021-07-13
WO2007147879A1 (fr) 2007-12-27
MX2008016239A (es) 2009-02-25
US20100286276A1 (en) 2010-11-11
AU2007262939B2 (en) 2012-04-05
US8258182B2 (en) 2012-09-04
AU2007262938B2 (en) 2012-04-05
IL196071A0 (en) 2009-09-01
DK2046715T3 (da) 2014-06-02
KR20090059105A (ko) 2009-06-10
JP5350230B2 (ja) 2013-11-27
AU2007262938A1 (en) 2007-12-27
PL2046716T3 (pl) 2014-03-31
CY1115082T1 (el) 2016-12-14
EA200900044A1 (ru) 2009-06-30
WO2007147880A1 (fr) 2007-12-27
ZA200810709B (en) 2009-12-30
PL2046715T3 (pl) 2014-07-31
NO20085338L (no) 2009-03-23
US8188148B2 (en) 2012-05-29
KR20090035535A (ko) 2009-04-09
AU2007262939A1 (en) 2007-12-27
CN104193660B (zh) 2018-10-19
JP2009541269A (ja) 2009-11-26
FR2902789A1 (fr) 2007-12-28
DK2046716T3 (da) 2013-11-04
PT2046715E (pt) 2014-05-26
NO341866B1 (no) 2018-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA018437B1 (ru) Замещенные производные 1,3-дифенилпропана, получение и их применение
EA017449B1 (ru) Производные замещенных 3-фенил-1-(фенилтиенил)пропан-1-онов и 3-фенил-1-(фенилфуранил)пропан-1-онов, их получение и применение
US6881860B2 (en) Compounds and methods to increase plasma HDL cholesterol levels and improve HDL functionality
EP1385501A2 (en) Probucol monoesters and their use to increase plasma hdl cholesterol levels and improve hdl functionality
ZA200309059B (en) Modulators of peroxisome proliferator activated receptors (PPAR).
WO2008087367A2 (fr) Derives de (phenylthiazolyl)-phenyl-propan-1-one et de (phenyloxazodyl)-phenyl-propan-1-one substitues, preparations et utilisations
EA012699B1 (ru) Композиция на основе замещенных производных 1,3-дифенилпроп-2-ен-1-она и ее применение
FR2910892A1 (fr) Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations.
US20050054714A1 (en) Nitric oxide releasing drugs for Alzheimer&#39;s disease
US20040110803A1 (en) Methods and compositions for the use of D-malic acid to decrease serum triglyceride, cholesterol and lipoprotein levels
EA009023B1 (ru) Селективные модуляторы рецептора, активируемого пролифератором пероксисом

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM