EA015964B1 - Вакцина - Google Patents

Вакцина Download PDF

Info

Publication number
EA015964B1
EA015964B1 EA200900288A EA200900288A EA015964B1 EA 015964 B1 EA015964 B1 EA 015964B1 EA 200900288 A EA200900288 A EA 200900288A EA 200900288 A EA200900288 A EA 200900288A EA 015964 B1 EA015964 B1 EA 015964B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
type
adsorbed
gru
vaccine
dose
Prior art date
Application number
EA200900288A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200900288A1 (ru
Inventor
Эрве Де Эмптинн
Мишель Дюшен
Анна Мари
Марк Сонвео
Original Assignee
Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=38823705&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA015964(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GBGB0617602.8A external-priority patent/GB0617602D0/en
Priority claimed from GB0625593A external-priority patent/GB0625593D0/en
Application filed by Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. filed Critical Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А.
Publication of EA200900288A1 publication Critical patent/EA200900288A1/ru
Publication of EA015964B1 publication Critical patent/EA015964B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
    • A61K39/13—Poliovirus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0016—Combination vaccines based on diphtheria-tetanus-pertussis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0016—Combination vaccines based on diphtheria-tetanus-pertussis
    • A61K39/0018—Combination vaccines based on acellular diphtheria-tetanus-pertussis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/08—Clostridium, e.g. Clostridium tetani
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/099—Bordetella
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/14—Antitussive agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55544—Bacterial toxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32671—Demonstrated in vivo effect
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

Стандартная доза полиовакцин содержит 40 D-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 1 (Mahoney), 8 D-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 2 (MEF-1) и 32 D-антигенные единицы инактивированного полиовируса типа 3 (Saukett). В настоящем изобретении раскрыто, что уменьшенные дозы инактивированного полиовируса могут поддерживать адекватный или улучшенный уровень защиты против полиомиелита.

Description

Настоящее изобретение относится к области вакцин для защиты против полиомиелита и, в частности, к комбинированным вакцинам для защиты против заболеваний полиомиелитом, дифтерией, столбняком и коклюшем.
Предшествующий уровень техники
Весьма желательно иметь комбинированные вакцины (которые обеспечивают защиту против различных патогенов) для того, чтобы минимизировать количество иммунизаций, необходимых для придания защиты против различных патогенов, снизить затраты при введении и увеличить переносимость и скорости обработки. Документально подтвержденное явление антигенной конкуренции (или интерференции) осложняет разработку многокомпонентных вакцин. Антигенная интерференция относится к наблюдению, что введение множества антигенов часто приводит к ослабленному ответу на некоторые антигены по сравнению с иммунным ответом, наблюдающимся, когда такие антигены вводят по отдельности.
Известны комбинированные вакцины, которые могут предупреждать инфекцию, вызываемую ВогОс1с11а рсгЦ.18818. С1о81пбшт 1е1аш, СогупеЬас1егшт ШрЫНепае и, возможно, инактивированным полиовирусом (1РУ), и/или вирусом гепатита В, и/или НаеторЫ1и§ типа В (см., например, XV О 93/24148, XVО 97/00697 и νθ 2000/030678).
После многих лет исследований стандартная доза полиовакцин, принятая как эффективная сообществом по вакцинам, в настоящее время содержит 40 Ό-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 1 (Майопеу), 8 Ό-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 2 (МЕР-1) и 32 Όантигенные единицы инактивированного полиовируса типа 3 (8аикей) (например, 1пГаппх-1РУ™).
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что уменьшенные дозы ГРУ могут поддерживать адекватный или улучшенный уровень защиты против полиомиелита. Такие вакцины обладают значительными преимуществами, включая способность предоставления большего количества доз ГРУвакцин для индивидуумов, нуждающихся в этом.
Сущность изобретения
Соответственно согласно настоящему изобретению предложены различные вакцины с уменьшенной дозой ГРУ (которые могут иметь только компоненты ГРУ или могут иметь компоненты ГРУ, комбинированные с другими антигенами).
Соответственно в одном аспекте согласно настоящему изобретению предложена ГРУ-вакцина по изобретению, содержащая инактивированный полиовирус типа 1 в дозе более 10 Ό-антигенных единиц и менее 20 Ό-антигенных единиц, например 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 или 19 Ό-антигенных единиц.
В одном из воплощений согласно настоящему изобретению предложена 1РУ-вакцина по изобретению, содержащая инактивированный полиовирус типа 3 в дозе 8-20 Ό-антигенных единиц, например 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 Ό-антигенных единиц.
В другом воплощении согласно настоящему изобретению предложена ГРУ-вакцина по изобретению, содержащая инактивированный полиовирус типа 2 в дозе 2-4 Ό-антигенные единицы, например 2, 3 или 4 Ό-антигенные единицы.
В другом воплощении согласно настоящему изобретению предложена ГРУ-вакцина по изобретению, дополнительно содержащая дифтерийный анатоксин, и/или столбнячный анатоксин, и/или коклюшную вакцину в форме убитой цельноклеточной вакцины Рте или бесклеточных коклюшных антигенов.
В другом аспекте согласно настоящему изобретению предложена ГРУ-вакцина по изобретению, представляющая собой не содержащую тиомерсала комбинированную ΌΤΤ (дифтерийно-столбнячнококлюшную)-1РУ-вакцину, содержащую инактивированный полиовирус типа 1 в дозе от 10 до 36 Όантигенных единиц.
В другом воплощении согласно настоящему изобретению предложена не содержащая тиомерсала комбинированная ОТР-1РУ-вакцина по изобретению, содержащая инактивированный полиовирус типа 2 в дозе 2-7 Ό-антигенных единиц, например 5, 6 или 7 Ό-антигенных единиц.
В другом воплощении согласно настоящему изобретению предложена не содержащая тиомерсала комбинированная ОТР-1РУ-вакцина по изобретению, содержащая инактивированный полиовирус типа 3 в дозе 8-29 Ό-антигенных единиц, например 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 или 29 Ό-антигенных единиц.
В другом воплощении вакцины по настоящему изобретению также могут содержать один или более антигенов, выбранных из группы, состоящей из поверхностного антигена вируса гепатита В, антигена(ов) НаеторЫ1и8 тПиепхае Ь, антигена(ов) Нелепа тешпщЦЙ18 А, антигена(ов) Нелепа тешпдййщ С, антигена(ов) Нелепа тешпдйзйщ V, антигена(ов) Нелепа тешпдй1й18 Υ, везикулы или антигена(ов) Ыещкепа тешпдйМщ В, антигена(ов) вируса гепатита А и антигена(ов) 8а1топе11а 1урЫ, в частности капсульных сахаридных антигенов указанных бактерий.
Также предложены способы получения вакцин по изобретению.
Определения
Термин вакцина может быть заменен термином иммуногенная композиция и наоборот.
Ό-антигенные единицы (также известные как международные единицы или МЕ): Ό-антигенная
- 1 015964 форма полиовируса индуцирует появление защитных нейтрализующих антител. Ό-антигенные единицы, которые упоминаются в данном описании (например, в вакцинах по изобретению), представляют собой измеренные общие Ό-антигенные единицы каждого типа неадсорбированного нефасованного антигена ГРУ перед получением конечной вакцины, которые добавляют в каждую человеческую дозу изготавливаемой вакцины (обычно в конечном объеме 0,5 мл). Надежные способы измерения Ό-антигенных единиц хорошо известны в данной области техники и опубликованы, например, в Европейской фармакопее. Например, Ό-антигенные единицы можно измерить с использованием ЕЬГЗЛ-теста, как описано ниже в примере 1 (Количественное определение Ό-антигена с помощью ЕЫ8Л). Европейская фармакопея предоставляет тест-образец (биологический эталонный препарат согласно Европейской фармакопее, предоставляемый Секретариатом Европейского фармакопейного комитета, например, код Р 216 0000) для стандартизации таких способов среди производителей (Рйагтеигора 8рес1а1 Гббие, Βίο 96-2). Таким образом, значение Ό-антигенных единиц хорошо понятно в данной области техники.
Термин доза в данном описании обычно соответствует одному введению вакцины по изобретению, которое обычно представляет собой одну инъекцию. Типичная человеческая доза составляет 0,5 мл. Конечно, согласно схеме введения вакцины можно вводить различные дозы.
Термин ГРУ или вакцина, содержащая эти компоненты, в данном описании предназначен для обозначения инактивированного полиовируса типа 1 (например, Майопеу, который предпочтительно используется, или Вгипйййе, который продается 5>1а1еп8 8егиш Ιηδίίίπΐ (Датский государственный институт вакцин и сывороток) под названием О1ТеК1Ро1), типа 2 (например, МЕЕ-1) или типа 3 (например, Заикей) либо комбинации любых двух или всех этих трех типов. Примером ГРУ-вакцины в полной (или стандартной) дозе (40-8-32 Ό-антигенных единиц ГРУ типов 1, 2 и 3 соответственно) для задач этого изобретения могла бы служить Ройопх® (С8К Вю1одюа18 8.Л.). Таким образом, если в данном описании указано, что в вакцине по изобретению присутствует Х% стандартной дозы ГРУ, то это означает, что в каждой дозе указанной вакцины содержатся Ό-антигенные единицы, равные Х% от 40, 8 и/или 32 Ό-антигенных единиц ГРУ 1, 2 и/или 3 типов соответственно (которые измерены в нефасованной форме каждого типа антигена ГРУ).
Термины липополисахарид (ЬР8) и липоолигосахарид (ЬО8) взаимозаменяемы.
Термин сахарид на протяжении всего описания может указывать на полисахарид или олигосахарид и включает в себя и то и другое. Капсульный сахаридный антиген может представлять собой полноразмерный полисахарид, или он может распространяться на бактериальные уменьшенные в размере сахариды и олигосахариды (которые от природы имеют небольшое количество повторяющихся единиц или которые представляют собой полисахариды, уменьшенные в размере для облегчения работы с ними, но все еще способные индуцировать защитный иммунный ответ у хозяина), которые хорошо известны в области вакцин (см., например, ЕР 497525).
Термин нуклеиновая кислота в данном описании может включать в себя одно- или двухцепочечную дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) или одно- или двухцепочечную рибонуклеиновую кислоту (РНК) либо их смесь.
Термин компонент(ы) патогена или компонент(ы), обеспечивающий защиту против такого патогена в вакцинах по изобретению в данном описании предназначен для обозначения одного или более антигенов этого патогена.
Термины примерно или приблизительно в данном описании используют для обозначения среднего значения ±10% от установленной величины, но должны быть использованы в контексте их применения.
Описание чертежей
Фиг. 1 - оценка относительной эффективности (ВР) ОТР^ЗЕ-НВ-ГРУ по Способу получения 3 в зависимости от дозы ГРУ.
Эффективность ГРУ в низких дозах для композиций, изготовленных согласно Способу получения 3, исследовали ίη νί\Ό в сравнении с эталонными композициями (композиция Ройопх и ЭТРаГРУНВ). ВР ГРУ измеряли в дозах 100, 50, 25 и 12,5% от стандартной дозы ГРУ (40/8/32 Ό-антигенные единицы для типов 1/2/3).
Фиг. 2 - оценка относительной эффективности (ВР) композиций ОТР^ЗЕ-НВ-ГРУ для разных технологических процессов (1огти1айоп По\\ъ11ее1).
Эффективность ГРУ в низких дозах для обеих композиций, изготовленных согласно Способу получения 3 и Способу получения 4, исследовали ίη νί\Ό в сравнении с эталонными композициями (композиция Ройоп.х и ОТРаГРУНВ). ВР измеряли как для Способа получения 3, так и для Способа получения 4 в дозе 25% от стандартной дозы ГРУ (40/8/32 Ό-антигенные единицы для типов 1/2/3) в сравнении с плацебо, содержащим только 25% ГРУ.
Фиг. 3. Относительная эффективность ГРУ типов 1, 2 и 3 в момент времени 0 и 8 месяцев.
Относительную эффективность ГРУ измеряли (относительно ОТРаНВГРУ (РеФаг1х) (фиг. 3а)) или Ройопх (фиг. 3б)) с целью определить, оказывает ли компонент Н1Ь (НаеторЫ1и8 тПиепхае типа Ь) влияние на эффективность ГРУ, и с целью оценить стабильность ГРУ во времени при разных дозах ГРУ.
- 2 015964
Подробное описание
Согласно настоящему изобретению предложена вакцина (например, комбинированная вакцина), содержащая антигены полиовируса (ГРУ) и, возможно, СотупеЬасГетшт б|р1Иепае (Ό), С1ок1пбшт 1е1аш (Т), Вогбе1е11а рейиккщ (Р) или вируса гепатита В.
Антигены по изобретению.
Компоненты ГРУ-вакцин.
Вакцины по изобретению могут быть составлены из ГРУ типа 1, или ГРУ типа 2, или ГРУ типа 3 либо ГРУ типов 1 и 2, или ГРУ типов 1 и 3, или ГРУ типов 2 и 3, или ГРУ типов 1, 2 и 3.
Способы получения инактивированного полиовируса (ГРУ) общеизвестны в данной области техники. В одном из воплощений ГРУ будет представлять собой ГРУ типов 1, 2 и 3, как принято в области вакцин, и может представлять собой полиовакцину Солка, которая инактивирована формальдегидом (см., например, 8н11ег е! а1., 2000, Реб1а!т. Сйп. Νοιίΐι Ат., 47: 287; 21ттеттап & 8рапп, 1999, Ат. Рат. Р11ук1с1ап, 59: 113; 8а1к е! а1., 1954, ОГПаа1 Моп1й1у РиЬйсайоп оГ Атепсап РиЬИс Неа11й АккошаНоп, 44(5): 563; Неппекеп, 1981, Оеуе1ор. Вю1. 81апбагб, 47: 139; Вибо^кку, 1991, Абу. Уник Век., 39: 255).
В одном из воплощений ГРУ не является адсорбированным (например, перед смешиванием с другими компонентами, если они присутствуют). В другом воплощении компонент(ы) ГРУ по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия (например, до или после смешивания с другими компонентами, если они присутствуют). В другом воплощении компонент(ы) ГРУ по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении компонент(ы) ГРУ может(могут) быть адсорбирован(ы) на смеси гидрата окиси алюминия и фосфата алюминия. Если они адсорбированы, то один или более компонентов ГРУ могут быть адсорбированы по отдельности или вместе в виде смеси. ГРУ может быть стабилизирован с использованием конкретного способа сушки, как описано в \УО 2004/039417.
Полиовирус можно выращивать в клеточной культуре. Клеточная культура может представлять собой линию клеток УЕВО или РМКС, представляющую собой стабильную клеточную линию, полученную из почки мартышки. Клетки УЕВО могут представлять собой удобно культивируемые микроносители. Культивирование клеток УЕВО до и во время вирусной инфекции может включать применение полученного от коров материала, такого как телячья сыворотка, и этот материал следует получать из источников, которые не содержат губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота (В8Е).
Культура также может включать такие вещества, как гидролизат лактальбумина. После выращивания вирионы можно очистить с использованием таких методик, как ультрафильтрация, диафильтрация и хроматография. Перед введением пациентам вирусы должны быть инактивированы, и этого можно достичь обработкой формальдегидом.
Вирусы могут быть выращены, очищены и инактивированы по отдельности и затем комбинированы с получением концентрированной нефасованной смеси для применения в ГРУ-вакцине или для добавления к адсорбированному дифтерийному и столбнячному антигену и коклюшным компонентам для ОТР^-ГРУ- или ОТРа-ГРУ-содержащих вакцин.
Антигены в вакцинах по изобретению будут присутствовать в иммунологически эффективных количествах, т.е. введение такого количества индивидууму либо в однократной дозе, либо в виде части серии оказывается эффективным для лечения или предупреждения заболевания. Лечение дозами может осуществляться по схеме однократного приема или схеме многократного приема (например, включая бустерные дозы).
В настоящее время стандартные дозы полиовакцин обычно содержат 40 Ό-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 1, 8 Ό-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 2 и 32 Ό-антигенных единиц инактивированного полиовируса типа 3 (например, ГпГаппх-ГРУ™).
Однако авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что для получения хорошего иммунного ответа можно использовать уменьшенные дозы ГРУ. В одном из воплощений вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать от 10 до 36 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 1 (например, 11-32, 12-28, 13-24, 14-20 или 15-19 Ό-антигенных единиц). В другом воплощении вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать ГРУ типа 1 в дозе 10-20 Ό-антигенных единиц или дозе более 10 Ό-антигенных единиц и менее 20 Ό-антигенных единиц. В другом воплощении вакцинная доза по настоящему изобретению может содержать 26-49, 30-45, 33-40, 35-37% или приблизительно либо точно одну треть от стандартной дозы 40 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 1 (эквивалентную приблизительно 10,4-19,6, 12-18, 13,2-16, 14-14,8 или 13,3 Ό-антигенным единицам). В другом воплощении вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать 11-32 Ό-антигенные единицы, 12-28 Όантигенных единиц, 13-24 Ό-антигенные единицы или 14-20 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 1.
Альтернативно, вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать 10-19,5 Όантигенных единиц, 12-19 Ό-антигенных единиц, 14-18,5 Ό-антигенных единиц или 15-17 Ό-антигенных единиц; например примерно или точно 16 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 1.
В другом воплощении вакцины по настоящему изобретению могут содержать менее 4 Όантигенных единиц, 2-4 Ό-антигенные единицы (эквивалентные 25-50% от стандартной дозы 8 Όантигенных единиц) или примерно или точно 3 Ό-антигенные единицы ГРУ типа 2 (эквивалентные 37,5%
- 3 015964 от стандартной дозы 8 Ό-антигенных единиц).
В другом воплощении вакцина по настоящему изобретению может содержать приблизительно или точно одну треть от стандартной дозы 8 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 2 (эквивалентной приблизительно 2,7 Ό-антигенных единиц).
В другом воплощении вакцины по настоящему изобретению могут содержать 2-7 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 2. В другом воплощении вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать 3-6 Ό-антигенных единиц или 4-5 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 2.
Альтернативно, вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать 2-4,5 Ό-антигенных единиц, 2,5-4 Ό-антигенные единицы или 3-3,5 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 2.
В другом воплощении вакцины по настоящему изобретению могут содержать 8-20 Ό-антигенных единиц, более 8 и менее 20 Ό-антигенных единиц, 9-19 Ό-антигенных единиц, 10-18 Ό-антигенных единиц, 11-17 Ό-антигенных единиц, 12-16 Ό-антигенных единиц или 13-15 Ό-антигенных единиц; например, примерно или точно 14 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 3 (эквивалентных 25-62,5%, 28,125-59,375%, 31,25-46,875% или 43,75% от стандартной дозы 32 Ό-антигенных единиц).
В другом воплощении вакцина по настоящему изобретению может содержать приблизительно или точно одну треть от стандартной дозы 32 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 3 (эквивалентной приблизительно 10,7 Ό-антигенных единиц).
В другом воплощении вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать 8-29 Όантигенных единиц, 9-26 Ό-антигенных единиц, 10-23 Ό-антигенных единиц, 11-20 Ό-антигенных единиц, 12-17 Ό-антигенных единиц или 13-14 Ό-антигенных единиц ГРУ типа 3.
Альтернативно, вакцинная доза ГРУ по настоящему изобретению может содержать 8-19,5 Όантигенных единиц, 9-19 Ό-антигенных единиц, 10-18,5 Ό-антигенных единиц, 11-18 Ό-антигенных единиц, 12-17,5 Ό-антигенных единиц, 13-17 Ό-антигенных единиц или 14-16 Ό-антигенных единиц; например примерно или точно 15 Ό-антигенных единиц.
Компоненты ОТР-вакцин.
ОТР-вакцины представляют собой общеизвестные вакцины для предупреждения или лечения дифтерии, столбняка и заболевания, вызываемого В. рейиккК. Вакцины по изобретению могут содержать дифтерийный, столбнячный и/или коклюшный компонент(ы).
Дифтерийный антиген обычно представляет собой дифтерийный анатоксин. Получение дифтерийных анатоксинов (ΌΤ) документально подтверждено. Может быть использован любой подходящий дифтерийный анатоксин. Например, ΌΤ может быть получен в результате очистки токсина из культуры СогупеЬас1епшп ШрЫНейае с последующей химической детоксикацией, но, альтернативно, изготовлен путем очистки рекомбинантного или генетически детоксифицированного аналога токсина (например, СЯМ197 или других мутантов, как описано в υδ 4709017, ϋδ 5843711, ϋδ 5601827 и Όδ 5917017). В одном из воплощений ΌΤ представлен в количестве 5-50, 7-30 КГ (флокулирующих единиц) или приблизительно или точно 7,5 КГ или 25 КГ на 0,5-мл дозу. В другом воплощении ΌΤ представлен в низкой дозе менее 5 КГ или 1-4 КГ либо приблизительно или точно 2 КГ на 0,5-мл дозу. В одном из воплощений дифтерийный анатоксин по изобретению может быть адсорбирован на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении дифтерийный анатоксин по изобретению может быть адсорбирован на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении дифтерийный анатоксин может быть адсорбирован на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия.
Столбнячный антиген по изобретению обычно представляет собой столбнячный анатоксин. Способы получения столбнячных анатоксинов (ТТ) общеизвестны в данной области техники. В одном из воплощений ТТ получают путем очистки токсина из культуры ΟΙοδΙπάίιιιη 1е1аш с последующей химической детоксикацией, но, альтернативно, готовят путем очистки рекомбинантного, или генетически детоксифицированного аналога токсина (например, как описано в ЕР 209281). Может быть использован любой подходящий столбнячный анатоксин. Столбнячный анатоксин может охватывать иммуногенные фрагменты полноразмерного белка (например, фрагмент С - см. ЕР 478602). В одном из воплощений ТТ представлен в количестве 2,5-30 КГ, 3-20 КГ, 5-15 КГ или точно или приблизительно 10 КГ на 0,5-мл дозу. В одном из воплощений столбнячный анатоксин по изобретению может быть адсорбирован на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении столбнячный анатоксин по изобретению может быть адсорбирован на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении столбнячный анатоксин может быть адсорбирован на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия.
Коклюшный компонент по изобретению может быть либо бесклеточным (Ра; от рейиккК асе11и1аг), когда используются очищенные коклюшные антигены, либо цельноклеточным (Рте; от рейиккК те1о1есе11), когда в качестве коклюшного компонента используются убитые цельные коклюшные клетки. Рте можно инактивировать несколькими известными методами, включая безртутные методы. Такие способы могут включать инактивацию нагреванием (например, 55-65°С или 56-60°С в течение 5-60 мин или в течение 10-30 мин, например 60°С в течение 30 мин), формальдегидом (например, 0,1% при 37°С, 24 ч), глутаровым альдегидом (например, 0,05% при комнатной температуре, 10 мин), ацетоном-Г (например, три обработки при комнатной температуре) или ацетоном-ГГ (например, три обработки при комнатной
- 4 015964 температуре и четвертая обработка при 37°С) (см., например, Сир1а с1 а1., 1987, 1. ΒίοΙ. 81апб., 15: 87; Оир1а с1 а1., 1986, Уассше, 4: 185). Способы получения убитой, цельноклеточной Вогбе1е11а репи8818 (Рте), подходящей для этого изобретения, описаны в XVО 93/24148, которые являются подходящими технологическими способами получения ΌΤ-ΤΤ-Рте-НерВ-содержащих вакцин. В прошлом при получении убитой цельноклеточной Вогбе1е11а репи8818 использовали тиомерсал (см. ниже). Однако в одном из воплощений он не используется в способе получения вакцин по настоящему изобретению.
Обычно используют Рте-дозу, равную 5-50 1ОИ (международных единиц мутности (I п(егпа11опа1 Орасйу Иш1)), 7-40 ЮИ, 9-35 ЮИ, 11-30 ЮИ, 13-25 ЮИ, 15-21 1Ои или примерно или точно 20 ЮИ.
Бесклеточные Ра-вакцины также общеизвестны и могут содержать 2 или более антигенов, выбранных из коклюшного анатоксина (РТ), филаментозного гемагглютинина (ЕНА), пертактина (РВЫ), агглютиногенов 2 и 3. В одном из воплощений Ра-вакцина содержит РТ, РНЛ и РВЫ. Наборы или вакцины по изобретению могут содержать РТ, детоксифицированный общеизвестным способом формальдегидной обработки или посредством мутаций (производное РТ). Обнаружено, что замены остатков в пределах 81субъединицы данного белка приводят к получению белка, который сохраняет иммунологические и защитные свойства РТ, но при снижении или отсутствии токсичности (ЕР 322533). Детоксифицирующие мутации, рассмотренные в формуле изобретения ЕР 322533, представляют собой примеры детоксифицированных ΌΤ-мутантов по настоящему изобретению. Такие мутанты могут быть использованы в дозах ниже 20-25 мкг.
В одном из воплощений РТ используют в количестве 2-50, 5-40, 10-30 мкг либо точно или приблизительно 25 мкг на 0,5-мл дозу. В другом воплощении РТ используют в количестве точно или приблизительно 2,5 или 8 мкг на 0,5-мл дозу.
В одном из воплощений ЕНА используют в количестве 2-50, 5-40, 10-30 мкг либо точно или приблизительно 25 мкг на 0,5-мл дозу. В другом воплощении ЕНА используют в количестве точно или приблизительно 2,5 или 8 мкг на 0,5-мл дозу.
В одном из воплощений РВЫ используют в количестве 0,5-20, 0,8-15, 2-10 мкг либо точно или приблизительно 8 мкг на 0,5-мл дозу. В другом воплощении РВЫ используют в количестве точно или приблизительно 0,8 или 2,5 мкг на 0,5 мл.
В одном из воплощений коклюшный компонент по изобретению может быть адсорбирован на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении коклюшный компонент по изобретению может быть адсорбирован на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении коклюшный компонент может быть адсорбирован на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия. Например, в одном из воплощений, по меньшей мере, РВЫ адсорбирован на гидрате окиси алюминия, при этом РΤ/ЕНА адсорбирован на гидрате окиси алюминия, фосфате алюминия или смеси их обоих.
Дополнительные антигены.
Вакцинные композиции по изобретению, возможно, также содержащие ^ΤР (ОТРте или ^ΤРа), могут дополнительно содержать один или более антигенов, выбранных из группы, состоящей из поверхностного антигена вируса гепатита В, антигена(ов) Наешорййиб шПиепхае Ь, антигена(ов) Ые188епа шепшщΐίάίδ А, антигена(ов) Ые188епа тешпдй1б18 С, антигена(ов) Ые188епа тешпдй1б18 ν-135, антигена(ов) Ые188епа тешпдйИ18 Υ, везикулы или очищенного антигена(ов) Ые188епа тешпдй1б18 В, антигена(ов) вируса гепатита А, антигена(ов) 8а1топе11а 1ур1и и ВΤ8,8. Обычно могут быть использованы капсульные сахаридные или ЬО8 антигены этих патогенов. Антигены обычно будут представлены в концентрации по меньшей мере 1 мкг/мл каждый, например 1-20, 2-15, 2,5-10, 3-8 или 4-6 мкг/мл. В общем случае концентрация любого антигена будет достаточной для вызывания иммунного ответа против этого антигена. Предпочтительно, чтобы защитная эффективность индивидуальных антигенов не устранялась при их объединении, хотя фактическая иммуногенность (например, ЕЫ8А-титры) может быть снижена.
Дополнительный(е) антиген(ы) в одном из воплощений изобретения может(могут) быть адсорбирован(ы) на соли алюминия, например на гидрате окиси алюминия. В другом воплощении дополнительные антигены по изобретению могут быть адсорбированы на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении дополнительные антигены могут быть адсорбированы на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия, или могут быть неадсорбированными.
Если используют капсульный сахаридный или ЬО8 антиген, то он может быть конъюгирован с белком-носителем, содержащим Т-хелперные эпитопы, для усиления иммуногенности. Изобретение также может включать свободные белки-носители.
В качестве альтернативы использованию в композициях по изобретению белковых антигенов может быть использована нуклеиновая кислота, кодирующая антиген. Таким образом, белковые компоненты композиций по изобретению могут быть заменены на нуклеиновую кислоту (например, ДНК, которая может находиться в форме плазмиды), кодирующую этот белок. Аналогично, композиции по изобретению могут содержать белки, которые имитируют сахаридные антигены, например мимеотопы или антиидиотипические антитела. Они могут заменять индивидуальные сахаридные компоненты или могут дополнять их.
- 5 015964
Антиген вируса гепатита В.
Получение поверхностного антигена вируса гепатита В (НВкАд) документально подтверждено. См., например, НагИогб е! а1., 1983, Эеуе1ор. Вю1. 81апбагб, 54: 125; Сгедд е! а1., 1987, В1о!есЬпо1оду, 5: 479; ЕР 0226846; ЕР 0299108. Он может быть получен следующим образом. Один способ включает очистку антигена в форме частиц из плазмы хронических носителей вируса гепатита В, поскольку в процессе НВУинфекции в печени синтезируются большие количества НВкАд, которые высвобождаются в кровоток. Другой способ включает экспрессирование данного белка методами рекомбинантной ДНК. НВкАд может быть получен путем экспрессии в дрожжах 8ассНагошусе5 сегеуыае. рюЫа, клетках насекомых (например, Н15) или клетках млекопитающих. НВкАд может быть вставлен в плазмиду, и его экспрессия из плазмиды может контролироваться промотором, таким как промотор СЛРОН (гена глицеральдегид-3фосфатдегидрогеназы). Дрожжи можно культивировать в синтетической среде. Затем НВкАд может быть очищен способом, включающим такие стадии, как осаждение, ионообменная хроматография и ультрафильтрация. После очистки НВкАд может быть подвергнут диализу (например, с использованием цистеина). НВкАд можно использовать в форме частиц.
Как использовано в данном описании, экспрессия поверхностного антигена вируса гепатита В или НВкАд охватывает любой антиген НВкАд или его фрагмент, проявляющий антигенность поверхностного антигена НВУ. Следует понимать, что в дополнение к 226 аминокислотной последовательности 8антигена НВкАд (см. Тю11а18 е! а1., 1985, ЫаЩге, 317: 489 и приведенные там ссылки), НВкАд, как он описан в данном изобретении, может, при желании, содержать всю или часть пре-8-последовательности, которая описана в приведенных выше ссылках и в ЕР 0278940. В частности, НВкАд может представлять собой полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, содержащую остатки 133-145, за которыми следуют остатки 175-400 Ь-белка НВкАд, относительно открытой рамки считывания вируса гепатита В аб-серотипа (этот полипептид обозначается как Ь*; см. ЕР 0414374). НВкАд в пределах объема изобретения также может включать пре81-пре82 8-полипептид, описанный в ЕР 0198474 (ЕибоДошск), или его аналоги, например, описанные в ЕР 0304578 (МсСогшюк и 1опе5). НВкАд, как он описан в данном изобретении, также может относиться к мутантам, например ускользающему мутанту, описанному в XVО 91/14703 или ЕР 0511855А1, особенно НВкАд, где аминокислотной заменой в положении 145 является замена глицина на аргинин.
НВкАд может быть представлен в форме частиц. Частицы могут содержать, например, 8-белок сам по себе или могут представлять собой комбинированные частицы, например Ь*, 8, где Ь* определен выше, а 8 означает 8-белок НВкАд. Указанная частица предпочтительно находится в форме, в которой она экспрессируется в дрожжах.
В одном из воплощений НВ 5Ад представляет собой антиген, используемый в ЕпдепхВ™ (С1ахо8ш1!йК1ше Вю1одюак 8.А.), который дополнительно описан в νθ 93/24148.
В одном из воплощений НВкАд присутствует в количестве 5-20, 8-15 мкг или приблизительно или точно 10 мкг на 0,5-мл дозу.
Поверхностный антиген вируса гепатита В может быть адсорбирован на фосфате алюминия, что может быть сделано перед смешиванием с другими компонентами (описано в νθ 93/24148). Компонент вируса гепатита В, по существу, не должен содержать тиомерсала (способ получения НВкАд без тиомерсала описан ранее в ЕР 1307473).
Антиген(ы) НаешорЫ1и8 шПиепхае Ь.
Вакцины, содержащие антигены НаешорЫ1и8 шПиепхае типа В, описаны в νθ 97/00697. В вакцинах по изобретению может быть использован любой подходящий антиген НаешорЫ1и8 шПиепхае типа В. Антиген может представлять собой капсульный сахарид (РВР) НаешорЫ1и8 шПиепхае типа В (Н1Ь), конъюгированный с белком-носителем. Сахарид представляет собой полимер рибозы, рибита и фосфата. Н1Ь-антиген, возможно, может быть адсорбирован на фосфате алюминия, как описано в νθ 97/00697, или может быть неадсорбированным, как описано в νθ 02/00249, или может не подвергаться конкретному процессу адсорбции.
Под антигеном, не адсорбированным на адъювантной соли алюминия, в данном описании подразумевают, например, что особая или специальная стадия адсорбции антигена на свежеприготовленной адъювантной соли алюминия не включена в способ получения композиции. Н1Ь может быть конъюгирован с любым носителем, который может обеспечить по меньшей мере один Т-хелперный эпитоп (примеры которого описаны ниже) и который может представлять собой столбнячный анатоксин, дифтерийный анатоксин, СКМ-197 (мутант дифтерийного токсина) или белок Ό.
Н1Ь может быть лиофилизирован и может быть разведен непосредственно перед использованием (например, с применением разбавителя, возможно, содержащего другие антигенные компоненты вакцин по изобретению).
В одном из воплощений Н1Ь присутствует в количестве 5-20, 8-15 мкг либо приблизительно или точно 10 мкг сахарида на 0,5-мл дозу.
В другом воплощении Н1Ь присутствует в низкой дозе (например, 1-6, 2-4 мкг либо приблизительно или точно 2,5 мкг сахарида), как описано в νθ 02/00249.
Антигены №155епа шешпдйИЦ типов А, С, ν или Υ.
- 6 015964
Вакцины по изобретению могут дополнительно содержать капсульный сахарид бактерии, выбранной из группы, состоящей из N. тепшдШбк типа А (МепА, возможно, конъюгированный с белкомносителем), N. тепшщБбк типа С (МепС, возможно, конъюгированный с белком-носителем), N. тешп§ίΐί6ίδ типа ν-135 (Меп\У. возможно, конъюгированный с белком-носителем) и N. тешпдШбк типа У (МепУ, возможно, конъюгированный с белком-носителем).
Вакцины по изобретению могут содержать один или более антигенов разных штаммов N. тешпдйάίδ, которые могут быть использованы сами по себе или в любой комбинации двух, трех или четырех компонентов, как описано подробно ниже:
МепА, МепС, Меп^, МепУ, или МепА + МепС, МепА + Меп^, МепА + МепУ, МепС + Меп^, МепС + МепУ, Меп\У + МепУ, или МепА + МепС + МепХУ, МепА + МепС + МепУ, МепА + Меп\У + МепУ, МепС + Меп\У + МепУ, или МепА + МепС + Меп\У + МепУ.
В одном из воплощений компонент(ы) №1б8епа тешпдйШб по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на соли алюминия, например на гидрате окиси алюминия. В другом воплощении компонент(ы) №1б8епа тешпдйШб по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении компонент(ы) №1б8епа тепшдШбк по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия. В одном из воплощений компонент(ы) №1б8епа тепшдШбк по изобретению может(могут) быть неадсорбированным(и) на адъюванте, например адъювантной соли алюминия.
Везикула или антиген(ы) №188епа тешпдйШб типа В.
Вакцины по изобретению также могут содержать компонент МепВ, такой как везикула или пузырек наружной мембраны, как описано в \УО 01/09350, \УО 03/105890, \УО 04/014417 или \УО 04/014418, или конъюгированный капсульный сахаридный антиген МепВ (или его производное) (например, см. XV О 96/40239), или свободный либо конъюгированный менингококковый ЬО8 Ь2 или Ь3 либо Ь2 и Ь3 (согласно VО 2004/014417). В одном из воплощений МепВ-компонент(ы) по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении МепВ-компонент(ы) по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении компонент(ы) МепВ может(могут) быть адсорбирован(ы) на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия. В одном из воплощений компонент(ы) МепВ может(могут) быть неадсорбированным(и) на адъюванте, например адъювантной соли алюминия.
Антиген(ы) 8а1топе11а 1урЫ.
Вакцины по изобретению могут дополнительно содержать VI сахарид 8а1топе11а 1урЫ, который может представлять собой зарегистрированный продукт Турйепх®, описанный в ЕР 1107787, или его конъюгат (например, с белком-носителем, как описано в данном изобретении). Процесс конъюгирования может быть осуществлен, как описано в VО 2007/000343. В одном из воплощений VI сахарид(ы) по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении VI сахарид(ы) изобретения может(могут) быть адсорбирован(ы) на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении VI сахарид(ы) может(могут) быть адсорбирован(ы) на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия. В одном из воплощений VI сахарид(ы) может(могут) быть неадсорбированным(и) на адъюванте, например адъювантной соли алюминия.
Антиген(ы) вируса гепатита А.
Компонент, обеспечивающий защиту против гепатита А, может представлять собой убитую аттенуированную вакцину против гепатита А, например продукт, известный как Наупх™ (зарегистрированная торговая марка от 61ахо8тййК1ше Вю1ощеа18 8.А.), представляющий собой убитую аттенуированную вакцину, происходящую из штамма НМ-175 вируса гепатита А (НАУ) (см. Е.Е. Апбге е! а1., 1паейуа!еб Сапб1ба1е Vасс^ηе8 £ог НерайИб А, 1980, Ргод. Меб. Уго1., 37:72; и монографию по продуктам Наупх, опубликованную 8тййК1ше Веесйат Вю1од1еа18, 1991). В Е1ейт1д е! а1., 1990, Ргод. Меб. Уго1., 37: 56 приведен обзор клинических аспектов, вирусологии, иммунологии и эпидемиологии гепатита А и обсуждаются подходы к разработкам вакцин против этой распространенной вирусной инфекции. Как использовано в данном описании, экспрессионный антиген НАУ' относится к любому антигену, способному стимулировать нейтрализующее антитело к НАV у людей. В одном из воплощений антиген НАV содержит инактивированные аттенуированные вирусные частицы или в другом воплощении он может представлять собой капсид НАV или вирусный белок НАУ который может быть удобно получен с использованием технологии рекомбинантной ДНК. В одном из воплощений компонент вируса гепатита А по изобретению может быть адсорбирован на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении компонент вируса гепатита А по изобретению может быть адсорбирован на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении компонент вируса гепатита А может быть адсорбирован на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия.
Малярийный(е) антиген(ы).
Вакцины по изобретению могут дополнительно содержать малярийный(е) антиген(ы). Малярийный антиген может представлять собой КТ8,8 (гибридный белок между С8 и НВбАд - описанный в И8 6306625 и ЕР 0614465). В одном из воплощений КТ8,8 может быть использован в вакцинах по изобрете
- 7 015964 нию вместо НВкАд. Другие малярийные антигены также могут быть использованы в вакцинах по изобретению, включая С8 белок, ВТ8, ТВАР, 16 кДа белок В 2992, АМА-1, М8Р1, возможно, включая СрО (АО 2006/029887, АО 98/05355, АО 01/00231).
В одном из воплощений малярийный(е) антиген(ы) по изобретению может(могут) быть адсорбированы) на соли алюминия, например гидрате окиси алюминия. В другом воплощении малярийный(е) антиген(ы) по изобретению может(могут) быть адсорбирован(ы) на такой соли алюминия, как фосфат алюминия. В другом воплощении малярийный(е) антиген(ы) может(могут) быть адсорбирован(ы) на смеси как гидрата окиси алюминия, так и фосфата алюминия. В одном из воплощений малярийный антиген дополнен адъювантом в виде эмульсии типа масло-в-воде, и/или производным липида А (таким как МРЬ), и/или стерином (таким как холестерин), и/или токолом (таким как α-токоферол). В другом воплощении малярийный(е) антиген(ы) может быть неадсорбированным на адъюванте, например адъювантной соли алюминия.
Конъюгаты.
Бактериальные капсульные сахаридные конъюгаты по изобретению могут содержать любой пептид-, полипептид- или белок-носитель, содержащий по меньшей мере один Т-хелперный эпитоп. Используемый белок-носитель(и) может быть выбран из группы, состоящей из столбнячного анатоксина, дифтерийного анатоксина, СВМ197, рекомбинантного дифтерийного токсина (который описан в любом из И8 4709017, АО 93/25210, АО 95/33481 или АО 00/48638), пневмолизина (возможно, химически детоксифицированного или представляющего собой детоксифицированный мутант) 8. рпеитошае (см., например, АО 2004/081515 и приведенные там ссылки), ОМРС (белка С наружной мембраны) N. шешп§ίΐίάίδ (ЕР 0372501) и белка Ό (ΡΌ) Н. шПиспхас (ЕР 594610). Другие носители могут включать синтетические пептиды (ЕР 0378881; ЕР 0427347), белки теплового шока (АО 93/17712; АО 94/03208), коклюшные белки (АО 98/58668; ЕР 0471177), цитокины (АО 91/01146), лимфокины (АО 91/01146), гормоны (АО 91/01146), ростовые факторы (АО 91/01146), искусственные белки, содержащие разнообразные человеческие СЭ4' Т-клеточные эпитопы из различных антигенов, происходящих из патогенов (Еа1ищ с1 а1., 2001, Еиг. 1. 1ттипо1., 31: 3816), пневмококковый поверхностный белок РкрА (АО 02/091998), железосвязывающие белки (АО 01/72337), токсин А или В С. бИйсйе (АО 00/61761), пневмококковый Р1ЦЭ (АО 00/37105), пневмококковый Р11ШЕ (например, АО 01/98334 и АО 03/054007), РНХ и т.д.
Все сахариды могут находиться на одном и том же носителе, в частности все сахариды конкретного микроорганизма, например сахариды МепА, МепС, МепА и МепУ, все могут быть конъюгированы с ТТ, ΌΤ или СРМ-197. Однако вследствие известного эффекта индуцированной носителем супрессии может быть предпочтительно, если в каждой из композиций по изобретению содержащиеся в них сахаридные антигены (п антигенов) конъюгированы с более чем одним носителем. Так, (п-1) сахаридов могли бы переноситься (по отдельности) одним типом носителя, а 1 - другим носителем, или (п-2) - одним, а 2 двумя разными носителями и т.д. Например, в вакцине, содержащей 4 бактериальных сахаридных конъюгата, 1, 2 или все четыре могли бы быть конъюгированы с разными носителями. Белок Ό, однако, может использоваться для различных (2, 3, 4 или более) сахаридов в композиции без заметного эффекта индуцированной носителем супрессии. Н1Ь может быть представлен в виде конъюгата с ТТ, ΌΤ или СРМ197. а МепА, МепС, МепУ и МепА могут представлять собой конъюгаты либо с ТТ, ΌΤ, СВМ197, либо с РЭ. VI может присутствовать в виде конъюгата с ТТ, ΌΤ или СВМ197. Белок Ό полезен в качестве носителя, поскольку предоставляет дополнительный антиген, который может обеспечить защиту против Н. шПиепхае. В одном из воплощений все сахариды конъюгированы с одним и тем же белком-носителем.
V может быть конъюгирован с белком-носителем, например, способом химической конденсации с использованием карбодиимида (например, ЕЭЛС (1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид)) (при условии, что повторяющаяся субъединица VI содержит группы карбоновой кислоты). Этого можно достичь либо путем: (1) одинарной карбодиимидной реакции между СООН из VI и ΝΗ2 белка, либо (2) двойной карбодиимидной реакции, которая может протекать либо между СООН из VI и ΝΗ2 молекулы гомобифункционального линкера и СООН белка и ΝΗ2 молекулы гомобифункционального линкера, либо между СООН из VI и ΝΗ2 молекулы гетеробифункционального линкера и ΝΗ2 белка и СООН молекулы гетеробифункционального линкера.
Конъюгирование может быть использовано вместе со свободным белком-носителем(ями). В одном из воплощений, когда заданный белок-носитель присутствует в композиции по изобретению как в свободной, так и в конъюгированной форме, неконъюгированная форма составляет не более 5% от общего количества белка-носителя в композиции в целом, или в другом воплощении она присутствует в количестве менее 2 мас.%.
Сахарид может быть связан с белком-носителем любым известным способом (например, по Ыкййе, патент США 4372945, и по Агтог и др., патент США 4474757) с использованием любого подходящего линкера, где это необходимо.
Обычно перед конъюгированием сахарид будет активирован или функционализирован. В активацию могут быть вовлечены, например, цианилирующие агенты, такие как СЭАР (тетрафторборат 1цианодиметиламинопиридиния) (АО 95/08348 и АО 96/29094). Реакция цианилирования может быть проведена в относительно мягких условиях, позволяющих избежать гидролиза чувствительных к щело
- 8 015964 чам сахаридов. Этот синтез позволяет осуществлять прямое связывание с белком-носителем. В других подходящих методиках используют карбодиимиды, гидразиды, активные сложные эфиры, норборнан, паранитробензойная кислота, Ν-гидроксисукцинимид, 8-ΝΗ8, ЕБС (1-этил-3-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимид) или Τ8Τυ (тетрафторборат 0-(№сукцинимидил)-1,1,3,3-тетраметилурония).
Связи через линкерную группу могут быть образованы с использованием известной методики, например методики, описанной в И8 4882317 и И8 4695624. Один тип связи осуществляется посредством восстановительного аминирования сахарида, связывания полученной аминогруппы с одним концом адипиновокислотной линкерной группы (ЕР 0477508, Рогго е! а1., 1985, Мо1. 1ттипо1., 22: 907, ЕР 0208375) и затем связывания белка с другим концом адипиновокислотной линкерной группы. Другие линкеры включают В-пропионамидо (\У0 00/10599), нитрофенилэтиламин (Сеует е! а1., 1979, Меб. МютоЬю1. 1ттипо1., 165: 171), галогеноацилгалогениды (И8 4057685), гликозидные связи (И8 4673574; И8 4761283; И8 4808700), 6-аминокапроновую кислоту (И8 4459286), АБН (дигидразид адипиновой кислоты) (И8 4965338), С4-С12-группировки (И8 4663160) и т.д. В качестве альтернативы применению линкера можно использовать прямую связь. Прямые связи с белком могут включать окисление сахарида с последующим восстановительным аминированием белка, как описано, например, в И8 4761283 и И8 4356170, или прямую реакцию с использованием СБ АР.
После конъюгирования свободные и конъюгированные сахариды могут быть разделены. Существует много подходящих способов для этого разделения, включая гидрофобную хроматографию, тангенциальную ультрафильтрацию, диафильтрацию и т.д. (см. также Ье1 е! а1., 2000, Беу. Вю1. (Ваке1), 103: 259; XV 0 00/38711; И8 6146902). В одном из воплощений, если вакцина содержит заданный сахарид как в свободной, так и конъюгированной формах, то неконъюгированная форма составляет не более 20 мас.% от общего количества этого сахарида в композиции в целом (например, не более 15%, не более 10%, не более 5%, не более 2%, не более 1%).
Количество сахарида, которое способно придать защиту хозяину (эффективное количество), может быть определено специалистом. В одном из воплощений каждая доза будет содержать 0,1-100 мкг сахарида, в другом воплощении каждая доза будет содержать 0,1-50 мкг, в другом воплощении каждая доза будет содержать 0,1-10 мкг, в еще одном другом воплощении каждая доза будет содержать от 1 до 5 мкг.
Адъюванты.
Вакцины по изобретению могут содержать фармацевтически приемлемый эксципиент, например подходящий адъювант. Подходящие адъюванты включают соль алюминия, такую как гидрат окиси алюминия или фосфат алюминия, но также могут представлять собой соль кальция, железа или цинка, или могут представлять собой нерастворимую суспензию ацилированного тирозина или ацилированных сахаров, или могут представлять собой катионные или анионные производные сахаридов, полифосфазены, биоразлагаемые микросферы, монофосфориллипид А (МРЬ), производные липида А (например, пониженной токсичности), 3-О-деацилированный МРЬ, с.|ш1 А, сапонин, 0821, токол (ЕР 0382271), неполный адъювант Фрейнда (Бйсо ЬаЬотаФпек, Бе!той, М1), адъювант 65 Мегск (Мегск апб Сотрапу, 1пс., Вакгау, N1), А8-2 (8тйк-К1ше Веескат, РЫ1абе1рЫа, РА), СрС-содержащие олигонуклеотиды, биоадгезивы и мукоадгезивы, микрочастицы, липосомы, композиции полиоксиэтиленовых простых эфиров, композиции полиоксиэтиленовых сложных эфиров, мурамилпептиды или имидазохинолоновые соединения (например, имиквимод (ппк|иатоб) и его гомологи). Человеческие иммуномодуляторы, подходящие для применения в качестве адъювантов в данном изобретении, включают цитокины, такие как интерлейкины (например, 1Ь-1, 1Ь-2, 1Ь-4, 1Ь-5, 1Ь-6, 1Ь-7, 1Б-12 и т.д.), макрофагальный колониестимулирующий фактор (М-С8Е), фактор некроза опухолей (ΤΝΕ), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (СМ-С8Е).
В одном из воплощений изобретения адъювантная композиция препаратов индуцирует иммунный ответ преимущественно ТН1-типа. Высокие уровни цитокинов ТН1-типа (например, ΙΕΝ-γ, ΤΝΕα, 1Ь-2 и 1Б-12) способствуют индукции клеточно-опосредованных иммунных ответов на введенный Б-антиген. В одном из воплощений, где наблюдается преимущественно ответ ТН1-типа, уровень цитокинов ТН1-типа будет увеличиваться в большей степени, чем уровень цитокинов ТН2-типа. Уровни этих цитокинов можно легко оценить с использованием стандартных анализов. Для обзора семейств цитокинов см. Моктапп апб Сойтап, 1989, Апп. Веу. 1ттипо1., 7:145.
Таким образом, подходящие адъювантные системы, которые стимулируют преимущественно ТН1ответ, включают производные липида А (например, пониженной токсичности), монофосфориллипид А (МРЬ) или его производное, в частности 3-де-О-ацилированный монофосфориллипид А (3Б-МРЬ), и комбинацию монофосфориллипида А, возможно 3-де-О-ацилированного монофосфориллипида А вместе с солью алюминия.
Улучшенная система включает комбинацию монофосфориллипида А и производного сапонина, в частности комбинацию 0821 и 3Б-МРЬ, которая описана в \У0 94/00153, или менее реактогенную композицию, где 0821 погашен холестерином, которая описана в XV0 96/33739. Особенно эффективная адъювантная композиция, содержащая 0821, 3Б-МРЬ и токоферол в эмульсии типа масло-в-воде, описана в ν0 95/17210. Вакцина может дополнительно содержать сапонин, который может представлять собой 0821. Композиция также может содержать эмульсию типа масло-в-воде и токоферол (ν0
- 9 015964
95/17210). Неметилированные СрС-содержащие олигонуклеотиды (\УО 96/02555) также являются избирательными индукторами ТН1-ответа и подходят для применения в настоящем изобретении.
Вакцины по изобретению также могут содержать комбинации одного или более адъювантов по изобретению, идентифицированных выше.
Любой адъювант по изобретению может быть адсорбирован компонентом ГРУ по изобретению или комбинирован с ним.
Если упоминается гидрат окиси алюминия или фосфат алюминия, то ссылка делается на все адъюванты гидрата окиси алюминия и/или фосфата алюминия, как описано в Нет апб \У1Шс. Рйатт. Вю1ес11по1., 1995, 6: 249-276.
В одном из воплощений фосфат алюминия также может быть упомянут как гидроксифосфат алюминия. В другом воплощении фосфат алюминия имеет отрицательный заряд при рН 7,4. Обычно изоэлектрическая точка (р1) фосфата алюминия составляет 5-7 или 6-7 либо приблизительно или точно 5. В другом воплощении фосфат алюминия характеризуется молярным соотношением фосфата к алюминию, равным 0,3-0,9, или 0,3-0,6, или 0,8-0,9.
В одном из воплощений гидрат окиси алюминия имеет положительный заряд при рН 7,4. Обычно р1 гидрата окиси алюминия составляет 8-11, 9-11, 10-11 либо приблизительно или точно 11.
Обычно общее содержание алюминия составляет 200-1000, 300-900, 400-800, 500-700 мкг либо приблизительно или точно 630 мкг А13+ на 0,5-мл дозу. Это может относиться ко всему гидрату окиси алюминия или всему фосфату алюминия. Альтернативно, содержание А13+ может быть приведено для смеси гидрата окиси алюминия и фосфата алюминия в следующем соотношении фосфат алюминия: гидрат окиси алюминия: 1:8-8:1, 1:4-4:1, 3:8-8:3, 1:2-2:1 или 1:1. В одном из воплощений используют соотношение фосфат алюминия: гидрат окиси алюминия, равное 12:1-4:1, 11:1-5:1, 10:1-6:1, 9:1-7:1 или 8:1.
Несмотря на то что перед смешиванием для образования комбинированной вакцины большая часть алюминия представлена в виде предварительно адсорбированных на нем антигенов, некоторое количество алюминия может быть добавлено в свободной форме в процессе получения комбинированной вакцины по изобретению, например, до стадии корректировки рН, описанной в данном изобретении. Обычно содержание свободного алюминия на 0,5-мл дозу может составлять 0-300, 50-250, 75-200, 100-150 мкг либо приблизительно или точно 115 мкг А13+. Свободный А13+ весь может представлять собой А1(ОН)3 или А1РО4, либо смесь А1(ОН)3 и А1РО4 в следующем соотношении (мас.:мас. А13+:А13+): 1:1-1:6, 1:1,11:5, 1:1,2-1:4, 1:1,3-1:3, 1:1,4-1:2, например 23/92 или 69/46, или 6:1-1:1, 5:1-1,1:1, 4:1-1,2:1, 3:1-1,3:1, 2:11,4:1, например 46/69 или 92/23.
Альтернативно, некоторые компоненты вакцин по изобретению могут специально не адсорбироваться на адъюванте, в частности солях алюминия.
ГРУ может быть не адсорбирован или адсорбирован на А1(ОН)3 или смеси А1(ОН)3 и А1РО4. ΌΤ может быть адсорбирован на А1(ОН)3 или А1РО4, ΤΤ может быть адсорбирован на А1(ОН)3 или А1РО4, Р\т может быть адсорбирован на А1РО4 или смешан с ним, РВЫ может быть адсорбирован на А1(ОН)3, ЕНА может быть адсорбирован на А1(ОН)3, РТ может быть адсорбирован на А1(ОН)3, НВ может быть адсорбирован на А1РО4, Н1Ь может быть адсорбирован на А1РО4 или не адсорбирован, Меп АС\УУ может быть адсорбирован на А1(ОН)3 или А1РО4 либо не адсорбирован, компонент МепВ может быть адсорбирован на А1(ОН)3 или А1РО4 либо не адсорбирован, У1 может быть адсорбирован на А1(ОН)3 или А1РО4 либо не адсорбирован, НерА может быть адсорбирован на А1(ОН)3 или А1РО4.
Антигены, которые предварительно адсорбированы на соли алюминия, можно предварительно адсорбировать по отдельности перед их смешиванием. В другом воплощении смесь антигенов может быть предварительно адсорбирована перед смешиванием с другими адъювантами. В одном из воплощений ГРУ может быть адсорбирован отдельно или в виде смеси ГРУ типов 1, 2 и 3 либо когда он уже смешан с адсорбированными Ό- и Т-компонентами.
Термин адсорбированный антиген подразумевает, например, более 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 или 90% адсорбированного (антигена).
Значение терминов фосфат алюминия и гидрат окиси алюминия, как они использованы в данном описании, включает все формы гидрата окиси алюминия или фосфата алюминия, которые подходят для применения в качестве адъювантов для вакцин. Например, фосфат алюминия может представлять собой осадок нерастворимого фосфата алюминия (аморфного, полукристаллического или кристаллического), который возможно, но не исключительно, может быть получен в результате смешивания растворимых солей алюминия и солей фосфорной кислоты. Гидрат окиси алюминия может представлять собой осадок нерастворимого (аморфного, полукристаллического или кристаллического) гидрата окиси алюминия, который возможно, но не исключительно, может быть получен в результате нейтрализации раствора солей алюминия. Особенно подходят различные формы гелей гидрата окиси алюминия и фосфата алюминия, доступные из коммерческих источников, например А1йубтоде1 (гидрат окиси алюминия, 3%-ная суспензия в воде) и Абщрйок (фосфат алюминия, 2%-ная суспензия в физиологическом растворе), поставляемые Втепп1ад ВюкесЮт (Дания).
Неиммунологические компоненты вакцин по изобретению.
Обычно вакцины по изобретению, в дополнение к упомянутым выше антигенным и адъювантным
- 10 015964 компонентам, будут содержать один или более фармацевтически приемлемых носителей или эксципиентов, которые включают любой эксципиент, который сам по себе не индуцирует продукции антител, вредных для индивидуума, получающего данную композицию. Подходящими эксципиентами обычно являются большие, медленно метаболизируемые макромолекулы, такие как белки, сахариды, полимолочные кислоты, полигликолевые кислоты, полимеры аминокислот, сополимеры аминокислот, сахароза (Рао1еГй с1 а1., 2001, Уассше, 19: 2118), трегалоза (\УО 00/56365), лактоза и липидные агрегаты (такие как капельки масла или липосомы). Такие носители общеизвестны средним специалистам в данной области техники. Вакцины также могут содержать разбавители, такие как вода, физиологический раствор, глицерин и т.д. Кроме того, могут присутствовать вспомогательные вещества, такие как увлажняющие или эмульгирующие агенты, поддерживающие рН вещества, и тому подобное. Стерильный апирогенный, забуференный фосфатом физиологический раствор представляет собой типичный носитель. Исчерпывающее обсуждение фармацевтически приемлемых эксципиентов приведено в ссылке Сепиато, 2000, КешшдГоп: 8с1епсе апб РтасПсе о£ Рйатшасу, 20-е изд., Ι8ΒΝ: 0683306472.
Композиции по изобретению могут быть лиофилизированными или в водной форме, т.е. растворы или суспензии. Жидкие композиции этого типа позволяют вводить композиции непосредственно из их упакованной формы без необходимости разведения их в водной среде и, таким образом, являются идеальными для инъекции. Композиции могут быть представлены во флаконах или они могут быть представлены в легко заполняемых шприцах. Шприцы могут поставляться с иглами или без них. Шприц будет содержать однократную дозу композиции, в то время как флакон может содержать одну дозу или множество доз (например, две дозы). В одном из воплощений доза предназначена для человека. В другом воплощении доза предназначена для взрослого человека, подростка, ребенка ясельного возраста, младенца или ребенка в возрасте до года и может быть введена путем инъекции.
Жидкие вакцины по изобретению также подходят для разведения в них других вакцин из лиофилизированной формы. В том случае, когда вакцина должна быть использована для такого экстемпорального разведения, в данном изобретении предложен набор, который может содержать два флакона или может содержать один готовый заполненный шприц и один флакон, при этом содержимое шприца используется для разведения содержимого флакона перед инъекцией.
Вакцины по изобретению могут быть упакованы в стандартную лекарственную форму или в многодозовую лекарственную форму (например, две дозы). Что касается многодозовых лекарственных форм, то флаконы предпочтительнее предварительно заполненных шприцов. Эффективные объемы дозировок могут быть установлены рутинно, однако типичная человеческая доза композиции для инъекции имеет объем 0,5 мл.
В одном из воплощений вакцины по изобретению имеют рН от 6,0 до 8,0, в другом воплощении вакцины по изобретению имеют рН от 6,3 до 6,9, например 6,6±0,2. Вакцины могут быть забуферены при этом рН. Стабильный рН можно поддерживать путем использования буфера. Если композиция содержит соль гидрата окиси алюминия, то можно использовать гистидиновый буфер (\УО 03/009869). Композиция должна быть стерильной и/или апирогенной.
Композиции по изобретению могут быть изотоничными в отношении людей.
Вакцины по изобретению могут содержать антимикробное средство, в частности, когда они упакованы в многодозовом формате. Тиомерсал должен быть исключен, поскольку это приводит к потере эффективности компонента ГРУ. Можно использовать другие антимикробные средства, такие как 2феноксиэтанол или парабены (метил-, этил-, пропилпарабены). Предпочтительно, чтобы любой консервант присутствовал в низких концентрациях. Консервант может быть добавлен экзогенным путем и/или может представлять собой компонент нефасованных антигенов, которые смешивают для получения композиции (например, присутствовать в качестве консерванта в коклюшных антигенах).
В одном из воплощений вакцины по изобретению не содержат тиомерсала или, по существу, не содержат тиомерсала. Под не содержат тиомерсала или по существу, не содержат тиомерсала понимают, что тиомерсал присутствует в конечной композиции в количестве, не достаточном для оказания отрицательного влияния на эффективность компонента ГРУ. Например, если тиомерсал используют в процессе очистки Р\т или поверхностного антигена вируса гепатита В, то он должен быть, по существу, удален перед смешиванием с ГРУ. Содержание тиомерсала в конечной вакцине должно составлять менее 0,025, 0,02, 0,01 или 0,001 мкг/мкг белка, например 0 мкг/мкг белка. В одном из воплощений тиомерсал не добавляют и не используют в очистке какого-либо компонента. См., например, ЕР 1307473 для гепатита В и смотри выше для способов с Р\г. когда инактивация достигается в отсутствие тиомерсала.
Вакцины по изобретению могут содержать детергент, например Твин (полисорбат), такой как Твин 80. Обычно детергенты присутствуют в низких концентрациях, например менее 0,01%.
Вакцины по изобретению могут содержать соли натрия (например, хлорид натрия) для придания тоничности. Композиция может содержать хлорид натрия. В одном из воплощений концентрация хлорида натрия в композиции по изобретению находится в диапазоне от 0,1 до 100 мг/мл (например, 1-50, 2-20, 5-15 мг/мл), а в другом воплощении концентрация хлорида натрия составляет 10±2 мг/мл №С1, например примерно 9 мг/мл.
- 11 015964
Обычно вакцины по изобретению будут содержать буфер. Типичным является фосфатный или гистидиновый буфер.
Вакцины по изобретению могут содержать свободные фосфатные ионы в растворе (например, путем использования фосфатного буфера) с целью противодействия адсорбции антигенов. Концентрация свободных фосфатных ионов в композиции по изобретению находится в одном из воплощений в диапазоне от 0,1 до 10,0 мМ, или в другом воплощении от 1 до 5 мМ, или в другом воплощении составляет примерно 2,5 мМ.
Свойства вакцин по изобретению.
В одном из воплощений вакцины по изобретению изготавливают в виде вакцины для введения ίη νίνο хозяину таким образом, чтобы индивидуальные компоненты композиции были приготовлены так, чтобы их иммуногенность, по существу, не ослаблялась под действием других индивидуальных компонентов композиции. Под по существу, не ослаблялась понимают, что после иммунизации получают титр антител против каждого компонента, который составляет более 60, 70, 80 или 90% или 95-100% от титра, полученного при введении каждого антигена по отдельности. Таким образом, в предпочтительных воплощениях (по существу) никакого вредного эффекта по отношению к другим компонентам (в контексте эффективности защиты) в комбинации не наблюдается по сравнению с их введением по отдельности.
Вакцинные композиции.
В одном из воплощений вакцины по изобретению изготовлены в виде вакцин для введения ίη νίνο хозяину таким образом, что они дают титр антител, превосходящий показатель серопротекции для каждого антигенного компонента для приемлемого процента субъектов-людей. Этот тест важен для оценки эффективности вакцины во всей популяции. Антигены с ассоциированным титром антител, выше которого хозяина рассматривают как имеющего сероконверсию против антигена, общеизвестны, и такие титры опубликованы организациями, такими как ВОЗ. В одном из воплощений более 80% статистически значимой выборки субъектов имеют сероконверсию, в другом воплощении более 90% статистически значимой выборки субъектов имеют сероконверсию, в другом воплощении более 93% статистически значимой выборки субъектов имеют сероконверсию и в еще одном воплощении 96-100% статистически значимой выборки субъектов имеют сероконверсию.
Количество антигена в каждой вакцинной дозе выбрано как количество, которое индуцирует иммунопротективный ответ без существенных неблагоприятных побочных эффектов типичных вакцин. Такое количество будет варьировать в зависимости от того, какие конкретные иммуногены используются. Обычно ожидается, что каждая доза будет содержать 1-1000 мкг суммарного иммуногена, или 1-100 мкг, или 1-40 мкг, или 1-5 мкг. Оптимальное количество для конкретной вакцины может быть установлено в результате исследований с наблюдением титров антител и других ответов у субъектов. Курс первичной вакцинации может включать 2-3 дозы вакцины, введенные с интервалом от одного до двух месяцев, например, согласно рекомендациям ВОЗ для ΌΤΡ-иммунизации (т.е. в первый год жизни). Бустерные дозы могут следовать на второй и/или последующий год(ы) жизни.
Эффективность полиовируса, измеренная с использованием теста серонейтрализации на крысах.
Для задач данного изобретения анализ для ΙΡν количественной оценки иммуногенности ΙΡνсодержащих вакцин по изобретению должен быть проведен с использованием однократной дозы вакцины и должен быть выполнен путем определения соотношения среднего геометрического титра (ΟΜΤ) тестируемой вакцины к ΟΜΤ эталонной вакцины, и данные представляют в виде относительного ответа (ЯК) или относительной эффективности (ЯР). Эталонный ΟΜΤ может представлять собой ΟΜΤ, полученный с использованием любой ΙΡν-вакцины, содержащей 40-8-32 Ό-антигенных единиц ΙΡν типов 12-3 соответственно, и может представлять собой ΟΜΤ, полученный с использованием известной вакцины Ροϊίοήχ®. Обычно ΚΡ-тест осуществляют следующим образом.
Эффективность полиовируса типов 1, 2 и 3 определяют на крысах по серонейтрализации.
Группы по 10 здоровых крыс (8ргадие-ОаМеу (ОРА) или любой предварительно оговоренной линии) подвергают внутримышечной инокуляции разведениями (1/1,25; 1/3,125; 1/7,81) тестируемых образцов или эталонным веществом в забуференном фосфатом физиологическом растворе. При необходимости диапазон разведений может быть расширен до четырех разведений путем инокуляции неразбавленной вакцины и трех ранее упомянутых разведений. Десять крыс, инокулированных разбавителем, используют в качестве отрицательных контролей. Крыс наблюдают один раз в неделю для определения какой-либо аномальной реакции. Через 20-22 суток после инокуляции каждое животное подвергали глубокой анестезии и собирали кровь и сыворотку для анализа с использованием теста серонейтрализации.
Для проведения теста серонейтрализации образцы сыворотки инактивируют путем инкубации при 56°С в течение 30 мин в водяной бане. Готовят серии из трех разведений образцов сыворотки, одну для каждого полиотипа, в микропланшетах, используя соответствующую среду для разведения. Планшеты хранят при +4°С.
Для этих трех типов полиовируса в разведения сывороток добавляют заранее заданное количество вируса (30-300 ССШ50 (средняя инфицирующая доза для клеточной культуры)). Три вирусные суспензии разбавляют, принимая во внимание соответствующие им титры. Конечное разведение называют рабочим разведением. Каждое рабочее разведение добавляют в соответствующие микропланшеты. Затем
- 12 015964 планшеты герметично закрывают и инкубируют при 37±1°С в течение 16 ч. Затем добавляют клетки Нер-2, и микропланшеты инкубируют при 37±1°С в течение 7 суток. Цитопатогенный эффект (СРЕ) вируса определяют, используя инвертированный микроскоп, после окрашивания Кумасси голубым. Присутствие антиполиомиелитных антител ингибирует рост вируса и появление соответствующего СРЕ. Титры антиполиовирусных антител (типа 1, 2 и 3) соответствуют обратной величине последнего разведения, при котором отсутствует какой-либо СРЕ. В каждой группе регистрируют животных с нейтрализующими антителами и для разного типа полиовируса определяют титр антител из каждого образца сыворотки. Титр нейтрализующих антител выражают в виде 1од2 обратной величины наибольшего разведения образца сыворотки, при котором полностью ингибируется цитопатический эффект полиовируса на клетках Нер-2.
Также определяют средний геометрический титр (СМТ) для каждого разведения и каждого типа вируса в каждой группе крыс.
Упаковка вакцин по изобретению.
Вакцины по изобретению могут быть упакованы в контейнер различных типов, например во флаконы, в шприцы и т.д. Многодозовый флакон обычно будет иметь пластиковый канал с возможностью к повторному герметичному закрыванию, через который можно ввести стерильную иглу для извлечения дозы вакцины и который герметично закрывается, как только игла удалена.
Вакцина может поставляться в разных контейнерах (например, 2 или 3). Содержимое контейнеров можно смешивать непосредственно перед введением хозяину в виде однократной инъекции или можно вводить последовательно в разные участки тела. Доза вакцины или каждая вакцина, если набор вводят последовательно (в двух или более контейнерах), обычно будет составлять 0,5 мл.
В одном из воплощений этого аспекта изобретения предложен набор, содержащий две поливалентные вакцины для придания хозяину защиты против заболевания, вызываемого полиовирусом, Вогбе1е11а рейиккк, С'бойпбшт 1е1аш, СотуиеЬас1етшт б|р1И11епае и, возможно, одним или более чем одним из вируса гепатита В, НаеторйНик шПиепхае типа В, Ыеккепа тешидШбк типа А, Ыеккепа тешидШбк типа С, №к§епа тешидйтбк типа ЭД, №к5епа тешидйтбк типа Υ, №к5епа тешидйтбк типа В, 8а1тоие11а 1урЫ, вируса гепатита А или малярии.
Набор включает в себя первый контейнер, содержащий:
(1) (а) инактивированный полиовирус (1РУ) по изобретению, (b) дифтерийный анатоксин (ΌΤ или Ό) (см. выше), (c) столбнячный анатоксин (ТТ или Т) (см. выше), (б) убитую цельноклеточную Вогбе1е11а рейиккк (Рте) либо два или более бесклеточных коклюшных компонентов (Ра) (см. выше), (е) возможно, поверхностный антиген вируса гепатита В (НерВ или НВ) (см. выше), (ί) возможно, конъюгат белка-носителя и капсульного сахарида Н. тПиеихае типа В (Н1Ь) (см. выше), (д) возможно, один из двух или оба конъюгата белка-носителя и капсульного сахарида N. тешидШбк типа А (МеиА) или N. тешидШбк типа С (МеиС) (см. выше), и второй контейнер, содержащий:
(2А) (а) конъюгаты белка-носителя и капсульного сахарида N. тешидШбк типа А (МеиА), N. теишдШбк типа С (МеиС), N. тешидШбк типа ЭД (МеиЭД) и/или N. тешидйтбк типа Υ (МеиΥ) (см. выше для сахаридных комбинаций по изобретению различных Меи), и (Ь) возможно, конъюгат белка-носителя и капсульного сахарида Н. шПиеи/ае типа В (Н1Ь), или (2В) (а) конъюгат белка-носителя и капсульного сахарида Н. шПиеихае типа В (Н1Ь), и (Ь) возможно, конъюгат белка-носителя и VI сахарида 8а1тоие11а 1урЫ.
Данный набор, возможно, может включать в себя третий контейнер, содержащий:
(3) (а) возможно, поверхностный антиген вируса гепатита В, (Ь) возможно, конъюгат белка-носителя и VI сахарида 8а1тоие11а 1урЫ.
И в том и другом случае контейнеры могут дополнительно содержать антиген(ы) НерА, и/или антигены) МеиВ, и/или РТ8.8. и/или антиген(ы) 81гер1ососси5 риеитоша. В каждом случае в обоих контейнерах будет присутствовать один и тот же антиген.
В одном из воплощений первый контейнер в дополнение к компонентам а)-б) также имеет е), ί), д), е)+Е), е)+д), Е)+д) или е)+Е)+д).
В одном из воплощений вакцина из первого контейнера может быть жидкой, а вакцина из второго контейнера может быть либо жидкой, либо лиофилизированной (например, в присутствии известного стабилизирующего эксципиента, такого как сахароза или трегалоза).
Контейнеры из набора могут быть упакованы по отдельности или, возможно, упакованы вместе. В одном из воплощений предложен набор с перечнем инструкций по введению вакцин в двух или более контейнерах.
В одном из воплощений, если контейнер в наборе содержит некоторый сахаридный конъюгат, то такой же конъюгат не будет представлен в других контейнерах набора.
- 13 015964
Авторы изобретения полагают, что в наборе, предложенном выше, могут присутствовать предпочтительно различные антигены к иммунной системе хозяина оптимальным образом. Данный набор может обеспечивать практикующего врача оптимальным способом иммунизации хозяина с одним или более чем одним из следующих преимуществ: защитной эффективностью для всех антигенов, минимальной реактогенностью, минимальной интерференцией, обусловленной супрессией носителя, минимальной адъювант/антигенной интерференцией или минимальной антиген/антигенной интерференцией. Таким образом, этих целей можно достичь минимальным количеством (двумя) введений, возможно, осуществляемых за один визит к врачу.
В одном из воплощений вакцины из первого и второго контейнеров вводят последовательно в разные участки (как описано ниже под заголовком Введение вакцин по изобретению), и в альтернативном воплощении авторы изобретения предполагают, что содержимое первого и второго контейнеров можно смешивать (возможно, экстемпорально) перед введением в виде единой вакцины.
Получение вакцин по изобретению.
Согласно настоящему изобретению также предложен способ получения вакцинной композиции, включающий стадию смешивания компонентов вакцины вместе с фармацевтически приемлемым эксципиентом.
В одном из воплощений настоящего изобретения предложена вакцина, как она описана в данном изобретении, для применения в виде лекарственного средства для лечения или предупреждения заболеваний, вызываемых инфекцией полиовирусом и, возможно, Вогбе1е11а репизз1з, ОозМбшт 1с1ап1, СогуиеЬас1егшт ПтрШНеНае, вирусом гепатита В, НаеторЫ1из тПиеп/ае. №1ззепа тешидШФз типа А, №1ззепа тешидйШз типа С, №1ззепа тешидйШз типа ^, №1ззепа тешидйГб1з типа Υ, 8а1тоие11а 1ур1и или вирусом гепатита А.
В другом воплощении изобретения предложено применение вакцин по изобретению в изготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения заболеваний, вызываемых инфекцией полиовирусом и, возможно, Вогбе1е11а рейизз1з, С1оз1пбшт 1е1аг1к СогуиеЬасГегшт брЫйепае, вирусом гепатита В, НаеторЫ1из ίπΠικι·^·^ №1ззепа тешидШФз типа А, №1ззепа тешидйШз типа С, №1ззепа тешидШФз типа ^, №1ззепа тешидйШз типа Υ, 8а1тоие11а 1ур1и или вирусом гепатита А.
В дополнение к этому также предложен способ иммунизации человека-хозяина против заболевания, вызываемого полиовирусом и, возможно, Вогбе1е11а рейизз1з, С1оз1пбшт 1е1аш, СогуиеЬас1егшт ШрЫНепае, вирусом гепатита В, НаеторЫ1из №1ззепа тешидШФз типа А, №1ззепа тешидйШз типа
С, №1ззепа тешидйГФз типа ^, №1ззепа тешидйШз типа Υ, 8а1тоие11а 1ур1и или вирусом гепатита А, включающий введение хозяину иммунопротективной дозы вакцины по изобретению.
Количество антигена в каждой вакцинной дозе выбрано как количество, которое индуцирует иммунопротективный ответ без существенных, неблагоприятных побочных эффектов типичных вакцин. Такое количество будет варьировать в зависимости от того, какой конкретный иммуноген применяют и в каком виде он присутствует. В одном из воплощений каждая доза будет содержать 0,1-100 мкг сахарида, в другом воплощении каждая доза будет содержать 0,1-50 мкг, в другом воплощении каждая доза будет содержать 0,1-10 мкг, в еще одном другом воплощении каждая доза будет содержать от 1 до 5 мкг сахарида.
В одном из воплощений содержание белковых антигенов в вакцине будет находиться в диапазоне 1100 мкг, в другом воплощении содержание белковых антигенов в вакцинах будет находиться в диапазоне 5-50 мкг, в другом воплощении содержание белковых антигенов в вакцинах будет находиться в диапазоне 5-25 мкг.
Получение вакцин в целом описано в Уассше Иез1ди (Т1е зиЬиш! аиб афиуаи! арргоасй (ебз Ротее11 М.Р. & Ыететаи М.1.) (1995) Р1еиит Ргезз, №те Уогк). Инкапсулирование в липосомы описано Ри11ег1ои, патент США 4235877. Конъюгирование белков с макромолекулами описано, например, Ь1кЫ1е, патент США 4372945 и Агтог и др., патент США 4474757. Применение Οιιί1 А описано в Иа1здаагб е1 а1., 1977, Ас1а Уе1. 8саиб., 18: 349. 3И-МРЬ доступен от КГЬ1 Гттииосйет (И8А) и описан в заявке на патент Великобритании № 2220211 и в патенте США 4912094. Р821 описан в патенте США 5057540.
В другом воплощении изобретения предложена поливалентная вакцина, содержащая инактивированный полиовирус (ГРУ) по изобретению и, возможно, убитую цельноклеточную Вогбе1е11а рег1изз1з (Рте), столбнячный анатоксин (ТТ), дифтерийный анатоксин (ИТ), конъюгат белка-носителя и капсульного сахарида Н. тПнеи/ае типа В (ШЬ - возможно конъюгирован с ТТ, ИТ или СКМ197), где количество конъюгата на 0,5-мл дозу нефасованной вакцины составляет 1-8 мкг, а иммуногенность конъюгата эквивалентна или усилена по сравнению с подобными композициями, содержащими более высокие количества конъюгата. Возможно, что также может быть включен поверхностный антиген вируса гепатита В.
В одном из воплощений количество конъюгата на 0,5-мл дозу нефасованной вакцины составляет менее 10 мкг (сахарида в конъюгате), в другом воплощении количество конъюгата равно 1-7, в другом воплощении количество конъюгата равно 2-6 мкг или в другом воплощении примерно 2,5, 3, 4 или 5 мкг.
Следует понимать, что некоторые компоненты, например компоненты ИТРте, могут быть комбинированы отдельно перед добавлением адсорбированного НВзАд или других компонентов.
Также предложен способ получения вакцин по изобретению, включающий стадию смешивания ГРУ
- 14 015964 типа 1, ГРУ типа 2 и/или ГРУ типа 3 с фармацевтически приемлемым эксципиентом. В типичном способе получения нефасованной вакцины по изобретению с дополнительными антигенами компоненты ГРУ будут добавлены к смеси компонентов И и Т, т.е. компоненты ΌΤ смешивают с компонентами ГРУ. Такой порядок смешивания позволяет регулировать ионную силу и/или рН композиции (например, рН меньше 7) перед добавлением компонентов Ра или Рте. Обычно первым добавляют НВ, предварительно адсорбированный на А1РО4, если он включен в композицию, затем добавляют ΌΤ, предварительно адсорбированный на А1(ОН)3 или А1РО4, затем добавляют ТТ, предварительно адсорбированный на А1(ОН)3 или А1РО4, затем добавляют ГРУ, возможно, предварительно адсорбированный на А1(ОН)3, перед корректировкой рН, например, до рН 5,9-7,2, или рН 6-7, или рН 6,2-6,8, или рН 6,4-6,6, и затем добавляют Рте, предварительно адсорбированный на А1РО4. Возможно, антигены Н1Ь, У1, МепА, МепС, МепУ, МепУ, МепВ и/или НерА могут быть добавлены в любой момент этого процесса. В одном из воплощений антигены Н1Ь, У1, МепА, МепС, МепУ, МепУ, МепВ и/или НерА добавляют перед корректировкой рН. В одном из воплощений один или более антигенов по изобретению адсорбируют на фосфате алюминия или гидрате окиси алюминия либо смеси их обоих. В другом воплощении антигены по изобретению смешивают с фармацевтически приемлемым эксципиентом и/или адъювантом(ами).
В одном из воплощений вакцинная композиция по изобретению может быть изготовлена в следующем порядке: добавляют предварительно адсорбированный НВкАд, затем предварительно адсорбированный дифтерийный анатоксин, затем предварительно адсорбированный столбнячный анатоксин и ГРУ, далее корректируют рН до приблизительно 6,5 перед добавлением предварительно адсорбированного Рте.
В другом воплощении вакцинная композиция по изобретению может быть изготовлена в следующем порядке: добавляют предварительно адсорбированный столбнячный анатоксин, затем ГРУ, затем предварительно адсорбированный НВ 5Ад, затем предварительно адсорбированный дифтерийный анатоксин, далее корректируют рН до приблизительно 6,5 перед добавлением предварительно адсорбированного Рте.
В общем случае комбинированные вакцинные композиции, соответствующие любому аспекту изобретения, могут быть изготовлены следующим образом: компоненты ГРУ, ОТРте, НерВ, МепА, МепС, МепУ, МепУ, МепВ, У1, вируса гепатита А или другие компоненты предварительно адсорбируют на подходящем адъюванте, особенно гидрате окиси алюминия или фосфате алюминия либо смеси их обоих. Через некоторое время, в течение которого осуществляется полная и стабильная адсорбция соответствующих компонентов, разные компоненты комбинируют в соответствующих условиях. Конъюгат(ы) Н1Ь, У1, МепА, МепС, МепУ и/или МепУ могут быть или могут не быть адсорбированы на адъювантной соли алюминия перед смешиванием с ^ΤРте-вакциной.
В одном из воплощений вакцины по изобретению изготавливают при температуре от 15 до 30°С (например, от 19 до 27°С или при 23±4°С).
Введение вакцин по изобретению.
Согласно изобретению предложен способ повышения иммунного ответа у млекопитающего, включающий стадию введения эффективного количества вакцины по изобретению. Вакцины могут быть введены с профилактической целью (т.е. для предупреждения инфекции). Иммунный ответ предпочтительно обеспечивает защиту и предпочтительно вовлекает антитела. Данный способ может увеличивать бустерный ответ.
После первоначальной вакцинации субъекты могут получить одну или несколько бустерных (последующих) иммунизаций, вводимых с адекватными промежутками. Режим введения доз может соответствовать однократной схеме или многократной схеме. В схеме первичной иммунизации и/или в схеме бустерной иммунизации можно использовать многократные дозы. После схемы введения первичной дозы, которую можно осуществлять в первый год жизни, может следовать схема введения бустерных доз. Подходящие временные промежутки между примирующими дозами (например, в интервале 4-16 недель) и между примированием и бустерным введением могут быть определены обычным образом.
В одном из воплощений млекопитающее представляет собой человека. Если вакцина предназначена для профилактического применения, то таким человеком предпочтительно является ребенок (например, ребенок ясельного возраста или младенец) или подросток; если вакцина предназначена для терапевтического применения, то таким человеком предпочтительно является взрослый человек. Вакцину, предназначенную для детей, можно также вводить взрослым людям, например, для оценки безопасности, дозировки, иммуногенности и т.д.
Вакцинные композиции по настоящему изобретению могут быть использованы для защиты или лечения млекопитающего, чувствительного к инфекции, посредством введения указанной вакцины непосредственно пациенту. Прямая доставка может быть выполнена посредством парентерального введения (внутримышечно, внутрибрюшинно, интрадермально, подкожно, внутривенно или в интерстициальное пространство ткани); или посредством ректального, перорального, влагалищного, местного, трансдермального, интраназального введения, введения в глаз, ухо, легкое или другого введения через слизистые. В одном из воплощений введение осуществляют посредством внутримышечной инъекции в бедро или плечо. Инъекцию можно делать с помощью иглы (например, подкожной иглы), однако в качестве аль
- 15 015964 тернативы можно использовать безыгольную инъекцию. Типичная внутримышечная доза составляет 0,5 мл.
Бактериальные инфекции поражают различные участки тела, и поэтому композиции по изобретению могут быть изготовлены в различных формах. Например, композиции могут быть изготовлены в виде инъекцируемых препаратов, либо в виде жидких растворов или суспензий. Композиция может быть изготовлена для легочного введения, например, в виде ингалятора с использованием тонкоизмельченного порошка или спрея. Композиция может быть изготовлена в виде суппозитория или пессария. Композиция может быть изготовлена для назального, ушного или глазного введения, например, в виде спрея, капель, геля или порошка (см., например, А1теИа & А1раг, 1996, 1. Эгид Татдейпд, 3: 455; Вегдс.|Ш51 е1 а1., 1998, АРМ18, 106: 800). Имеется сообщение об успешном интраназальном введении ЭТР-вакцин (Куап е1 а1., 1999, 1пГес1. Гттип., 67: 6270; Νηβηί е1 а1., 2001, Уассте, 19: 4824). В одном из воплощений вакцины первого и второго (и третьего, где это приемлемо) контейнеров вводят совместно в разные участки тела, а в альтернативном воплощении авторы полагают, что содержимое первого и второго контейнеров можно смешивать (возможно, экстемпорально) перед введением в виде единой вакцины.
Изобретение может быть использовано для того, чтобы вызвать системный иммунитет и/или мукозальный иммунитет.
Один из способов контроля эффективности терапевтического лечения включает мониторинг бактериальной инфекции после введения композиции по изобретению. Один из способов контроля эффективности профилактического лечения включает мониторинг иммунных ответов против антигенов после введения композиции. Иммуногенность композиций по изобретению может быть определена путем введения их тестируемым субъектам (например, детям в возрасте 12-16 месяцев или животным моделям - УО 01/30390) и затем определения стандартных иммунологических параметров. Эти иммунные ответы обычно будут определять примерно через 4 недели после введения композиции и сравнивать с величинами, определенными до введения композиции. Общеизвестно, что для оценки эффективности ЭТРвакцин скорее используются стандартные животные модели, модели ш νίίτο и корреляты защиты, чем оценка реальной защитной эффективности на пациентах.
Авторы изобретения предполагают, что термины содержащий, содержат и содержит в данном описании подразумевают возможную замену терминами состоящий из, состоят из и состоит из соответственно в каждом случае. Это не меняет обычного значения этих терминов и предназначено только для обоснования такой замены, а не для того, чтобы сделать их эквивалентными по значению.
Все цитированные ссылки и публикации включены в данное описание посредством ссылки.
Примеры
Примеры приведены исключительно с целью иллюстрации и не предназначены для ограничения объема изобретения.
Пример 1. Тесты на низкодозовых ГРУ-композициях.
Перед получением всех композиций из примера 1 антигены адсорбируют путем добавления соли алюминия, за исключением ГРУ, который добавляют без адсорбции.
В приведенных ниже таблицах представлен способ адсорбции для Ό, Т, Р\т и НВкАд.
А1РО4
Э (7,5 1170,075 мгА13+)
I
Перемешивание в течение 15-20 мин при комнатной Г
I
Корректировка рН до рН 5,1 +/- 0,1
I
Перемешивание в течение 15-20 мин при комнатной 1°
I
Контроль рН 5,1 +/- 0,1
I
Перемешивание в течение 15-45 мин при комнатной V
I
Созревание в течение 7 суток +/- 8 ч при 37°С +/- 1°С:
- 16 015964
- без перемешивания (стеклянный сосуд),
- с перемешиванием (сосуд из нержавеющей стали) I
Перемешивание в течение 15-45 мин при комнатной (° I
Корректировка рН до рН 6,1 +/- 0,1
I Перемешивание в течение 15-20 мин при комнатной 1°
I Контроль рН 6,1 +/- 0,1
I Хранение минимум 7 суток при +2/+8°С перед получением композиции
Таблица 1
Способ проведения адсорбции дифтерийного анатоксина
КОНЕЧНАЯ КОМПОЗИЦИЯ на дозу
Дифтерийный 7,5 И (+/- 420 И/мл)
Таг31 0,075 мг
ЫаС1 150 мМ
рн 6,1 +/-0,1
Объем приблизительно 18 мкл
А1(ОН)3 тип зиРЕКЕОЗ
I зТ (3,25 и/0,070 мг А)3+)
Перемешивание в течение 15-20 мин при КТ I
Корректировка до рН 6,1 +/- 0,1 I
Перемешивание в течение 15-20 мин при КТ I
Контроль рН 6,1 +/- 0,1
I Перемешивание в течение 16-24 ч при КТ I
ИаС1, 1500 мМ (после добавления: 150 мМ)
I Перемешивание в течение 15-45 мин при КТ
I
Корректировка до рН 6,1 +/- 0,1
I Перемешивание в течение 15-20 мин при КТ I
Контроль рН 6,1 +/- 0,1
I Хранение минимум 14 суток при +2°С/+8°С перед получением композиции
Таблица 2
Способ проведения адсорбции столбнячного анатоксина
КОНЕЧНАЯ КОМПОЗИЦИЯ на дозу
Столбнячный 3,25 и (+/- 360 Ы/мл)
АГ 0,070 мг
ИаС! 150 мМ
рн 6,1 +/-0,1
Объем приблизительно 9 мкл
- 17 015964 αιρο4
0,17 мг А137дозу (Вгепп(ад) I Корректировка рН до рН 6,5 +/- 0,1 I
Перемешивание в течение 15-20 мин при комнатной 1° I
Контроль рН 6,5 +/- 0,1
I
Ρνν юи/дозу
I Перемешивание в течение 15-45 мин при комнатной Iе I
Измерение рН
I
Хранение при +2°С - +8°С
Таблица 3
Способ проведения адсорбции Р\т
мкг 3+ 1
ΑΙ3 0,20 мг А1РО4
Перемешивание в течение 15-30 мин при комнатной 1° I
Корректировка рН до рН 5,3+/-0,1 I
Перемешивание в течение 15-30 мин при комнатной 1° I
Контроль рН при рН 5,3+/-0,1 I
Перемешивание в течение 20 ч +/- 4 ч при комнатной 1° (адсорбция) I
Корректировка рН до рН 6,1+/-0,1 I
Перемешивание в течение 15-30 мин при комнатной Г
I Контроль рН при рН 6,1+/-0,1
I Хранение 14 суток при комнатной 1° (созревание) I
Хранение при 2°С-8°С
Таблица 4
Способ проведения адсорбции НВкАд
КОНЕЧНАЯ КОМПОЗИЦИЯ на дозу
Антигены Адъювант (АГ] (мг)
НВвАд 10 мкг А1РО4 0,200 мг
ΑΙ3* 0,200 мг А1Р04
ЫаС1 150 мМ
РН
Объем
6,1+/-0,1 приблизительно 50 мкл
- 18 015964
Тестировали несколько разных композиций:
комбинацию дифтерийного анатоксина, столбнячного анатоксина, коклюшного цельноклеточного антигена и поверхностного антигена вируса гепатита В, ЭТРте8Р-НВ, в качестве эталона (ОТРтеЗР означает, что эта композиция не содержит тиомерсала), изготовленную согласно способу получения 1 (табл. 5);
продукт С1ахо 8тЦ11К1те Вю1одюа18 8.А. Ро1юпх® (1РУ независимый, неадсорбированный) в качестве неадсорбированного эталона в стандартной дозе, изготовленный согласно способу получения 2 (табл. 5);
комбинацию дифтерийного анатоксина, столбнячного анатоксина, коклюшного цельноклеточного антигена, поверхностного антигена вируса гепатита В и инактивированного полиовируса, ЭТРте8Р-НВ1РУ, с добавлением ГРУ перед Рте, изготовленную согласно способу получения 3 (табл. 5);
комбинацию дифтерийного анатоксина, столбнячного анатоксина, коклюшного цельноклеточного антигена, поверхностного антигена вируса гепатита В и инактивированного полиовируса, ЭТР\\ЗР-НВГРУ, с добавлением ТРУ сразу после адсорбированного Т. Этот способ добавления способствует адсорбции ГРУ на А1(ОН)3. Эту вакцину изготавливают согласно способу получения 4 (табл. 5).
Плацебо содержит только соли алюминия, ГРУ и буферы для других антигенов. Поскольку ГРУ является единственным антигеном в этом плацебо, нет никакой конкуренции в отношении адсорбции. Следовательно, ГРУ полностью адсорбируется. Эту вакцину изготавливают согласно способу получения 5 (табл. 5).
Вакцины, изготовленные согласно способу получения 2, 3, 4 и 5, готовили в интервале доз ГРУ от 12,5 до 100% стандартной дозы ГРУ 40/8/32 МЕ/0,5 мл.
Таблица 5
Способ получения из расчета на 0,5-мл дозу
Стадия Способ получения 1: βΤΡνν^ρ-ΗΒ
Вода для инъекций для достижения конечного объема дозы 0,5 мл
Добавить №С11,5 М для достижения конечной концентрации 150 мМ
Добавить 115 мкг АР* в виде ΑΙΡΟ4
Добавить 10 мкг НВзАд адсорбированного
Добавить 7,5 ЬГ дифтерийного анатоксина адсорбированного
Добавить 3,25 ЬГ столбнячного анатоксина адсорбированного
Перемешивание
Довести рН до 6,5+/-0,1
Перемешивание
Добавить 20 ЮЫ Ри адсорбированного
Перемешивание
Хранить в интервале от+2 до+8°С
Стадия Способ получения 2: ΙΡν независимый
Добавить ΙΡν в дозе
- 19 015964
Перемешивание
Довести рН до 6,9+/-0,2
Хранить в интервале от +2 до +8°С
Стадия| Способ получения 3: ϋΤΡν^-ΗΒ-ΙΡν
Вода для инъекций для достижения конечного объема дозы 0,5 мл
Добавить ΝθΟΙ 1,5 М для достижения конечной концентрации 150 мМ
Добавить 115 мкг ΑΙ3* в виде ΑΙΡΟ.
Добавить 10 мкг НВзАд адсорбированного
Добавить 7,5 ίί дифтерийного анатоксина адсорбированного
Добавить 3,25 ίί столбнячного анатоксина адсорбированного
Перемешивание
Добавить ΙΡν в дозе
Довести рН до 6,5+/-0,1
Перемешивание
Добавить 20 Юи Ρνν адсорбированного
Перемешивание
Хранить в интервале от +2 до +8°С
Стадия Способ получения 4: ОТРж5р-НВ-1РУ
- 20 015964
1 2 3 4 Вода для инъекций для достижения конечного объема дозы 0,5 мл Добавить ЫаС11,5 М для достижения конечной концентрации 150 мМ Добавить 3,25 И столбнячного анатоксина адсорбированного Добавить ΙΡν в дозе
Тип 1 Тип 2 Тип 3
40 МЕ 8МЕ 32 МЕ
20 МЕ 4МЕ 16 МЕ
ЮМЕ 2 МЕ 8МЕ
5МЕ 1 МЕ 4МЕ
5 Перемешивание
6 Добавить 115 мкг А| в виде А1РО4
7 Добавить 10 мкг НВзАд адсорбированного
8 Добавить 7,5 Ι_ί дифтерийного анатоксина адсорбированного
9 Перемешивание
10 Довести рН до 6,5+/-0,1
11 Перемешивание
12 Добавить 20 ΙΟΙΙ Ρνν адсорбированного
13 Перемешивание
14 Хранить в интервале от +2 до +8°С
Способ получения 5: плацебо
Аналогично способу получения 3, однако все антигены, кроме ΙΡν, не включены.
Для композиции по способу получения 1: НВ к Ад, Ό и Т адсорбируют по отдельности на А1РО4, А1РО4 и А1(ОН)3 соответственно. Эти три антигена последовательно добавляют к суспензии, содержащей воду, №С1 и свободный А1РО4. Смесь перемешивают в течение 60-75 мин. Затем рН корректируют до 6,5, после чего добавляют адсорбированный Рте.
Для композиции по способу получения 3: эти три адсорбированных антигена последовательно добавляют к суспензии, содержащей воду, №С1 и свободный А1РО4. Смесь перемешивают в течение 60-75 мин, после чего добавляют ГРУ. Величину рН корректируют до 6,5, после чего добавляют Рте-антигены.
Для композиции по способу получения 4: Т-антиген адсорбируют на А1(ОН)3. Предварительно адсорбированный Т-антиген добавляют к суспензии, содержащей воду и №С1, затем ГРУ типов 1, 2 и 3. Смесь перемешивают в течение 60-75 мин, после чего добавляют свободный А1РО4. Затем добавляют предварительно адсорбированный НВкАд, после чего предварительно адсорбированный Ό-антиген, и смесь далее перемешивают в течение дополнительных 60-75 мин. Величину рН корректируют до 6,5, после чего добавляют Рте-антигены.
В конечном счете выбирают способ получения 3 вследствие легкости выполнения, поскольку этот протокол включает только одну стадию перемешивания. В данном способе получения вакцины тиомерсал не используют и не добавляют к конечному вакцинному продукту.
В приведенной ниже таблице представлен состав композиций для 0,5-мл дозы.
- 21 015964
Таблица 6
Состав композиций из расчета на 0,5-мл дозу
Описание АР в виде А1РО4 для адсорбции ϋ АР в виде А|(ОН)3дпя адсорбции ϋ АР в вида ΑΙΡΟ4 для адсорбция НВ&Ад АР в виде А1₽О«дпя адсорбции Рмг Свободе. А1РОЛ Саободн. АЦОН)Э Доза дифтерийн. анатоксина Доза стопбнячн. анатоксина Коклюш. доза Доза НВзАд Доза!РУ
%от станд. дозы О-антиген. единицы (*) (Т1/Т2ЛГЗ)
Способ получения 1 СГРйТдр-НВ 75 мкг 70 мкг 200 мкг 170 мкг 115 мкг ΝΑ 7,5 и 3,25 и 20 юи 10 мкг МА ЫА
Способ получения 2 ιρν ЫА ΝΑ ЫА ЫА ΝΑ ΝΑ ΝΑ МА МА ΝΑ 100% 50% 25% 12,5% 40/8/32 20/4/16 10/2/8 5/1/4
Способ получения 3 ΟΤΡν/δτ-ΗΒ-ΙΡν 75 мкг 70 мкг 200 мкг 170 мкг 115 мкг МА 7,5 Ц 3,25 и 20 юи 10 мкг 100% 50% 25% 12,5% 40/8/32 20/4/16 10/2/8 5/1/4
Способ получения 4 ОТРидр-НВ-ίΡν 76 мкг 70 мкг 200 мкг 170 мкг 115 мкг ΝΑ 7,5 и 3,25 и го юи 10 мкг 100% 50% 25% 12,5% 40/8/32 20/4/16 10/2/8 5/1/4
Способ получения 5 Плацебо МА ЫА МА ΝΑ 550 мкг 70 мкг ΝΑ ΝΑ ЫА ЫА 100% 50% 25% 12,5% 40/8/32 20/4/16 10/2/8 5/1/4
ЫА - не анализировали.
(*) Содержание в ϋ-антигенных единицах означает величины, запланированные для разведения концентрированной нефасованной формы инактивированного полиовируса в процессе получения.
Определение эффективности полиовируса на крысах по серонейтрализации.
Эффективность вакцины определяли согласно тесту серонейтрализации после внутримышечной инокуляции крыс (8ргадие-Оате1еу (ОЕА) или любой предварительно оговоренной линии). Группы из 10 наивных здоровых крыс инокулировали внутримышечно (0,5 мл) разведениями тестируемых образцов, эталонным веществом в забуференном фосфатом физиологическом растворе или разбавителем (забуференным фосфатом физиологическим раствором). Десять крыс, инокулированных разбавителем, использовали в качестве отрицательных контролей. Через 20-22 суток после инокуляции (период иммунизации) каждое животное подвергали глубокой анестезии, после чего отбирали кровь посредством пункции в сердце. Образцы крови центрифугировали (при приблизительно 800 д) и сыворотки анализировали.
Тест серонейтрализации.
Сыворотки инактивировали путем инкубации при 56°С в течение 30 мин. Готовили три серии разведений сывороток, одну для каждого полиотипа, в микропланшетах, используя соответствующую среду для разведения. Для трех типов полиовируса добавляли предварительно определенное количество вируса в разведения сывороток. Эти три вирусные суспензии разбавляли, принимая во внимание их соответствующие титры. Конечное разведение называется рабочее разведение. Каждое рабочее разведение добавляли в соответствующие микропланшеты. Затем планшеты герметично закрывали и инкубировали при 37±1°С в течение 16 ч. Затем добавляли клетки Нер-2 и микропланшеты инкубировали при 37±1°С в течение 7 суток. Цитопатогенный эффект (СРЕ) вируса считывали, используя инвертированный микро скоп, после окрашивания Кумасси голубым.
Присутствие антиполиомиелитных антител ингибирует рост вируса и возникновение соответствующего СРЕ. Титры антиполиовирусных антител (тип 1, 2 и 3) соответствуют обратной величине последнего разведения без какого-либо СРЕ.
В каждой группе регистрируют животных с нейтрализующими антителами и для разного типа полиовируса определяют титр антител из каждого образца сыворотки. Титр нейтрализующих антител выражают в виде 1од2 обратной величины наибольшего разведения образца сыворотки, при котором полностью ингибируется цитопатический эффект полиовируса на клетках Нер-2. Затем определяют средний геометрический титр (ΟΜΤ) для разведения и типа вируса в каждой группе крыс.
Кроме того, для каждого типа вируса разведение вакцины и затем количество Ό-антигена, которое индуцировало нейтрализующие антитела у 50% крыс (ΕΌ50), рассчитывали с использованием пробитанализа. ΕΌ50 выражали в Ό-антигенных единицах.
Для количественного определения эффективности относительно эффективности эталонной вакцины (обычно Ро11ог1х®, но, возможно, и П'ГРаНВ1РУ-вакцины, такой как РеШап.х®) измеряли относительную эффективность (ВР), определенную как соотношение двух эквивалентных дозовых ответов при многодозовом тестировании. В этом подходе эффективность тестируемой вакцины рассчитывают с использованием метода параллельных линий (рага11е1 1те апа1у818), который описан в Ешпеу, 1978 (8(а(18Нса1 МеЛоб ш Вю1одюа1 Аккау, Сйапек 6п£йп & Сотрапу ИТ. Ьопбоп, 1978).
Определение эффективности полиовируса типов 1, 2 и 3 с помощью ЕЫ8А.
Определение эффективности полиовируса с помощью ЕЫ8А осуществляют в одну или две стадии в зависимости от того, выполняется ли измерение на нефасованном неадсорбированном 1РУ относительно вакцин, изготовленных в виде препаратов, соответственно:
- 22 015964
1) десорбция конечной адсорбированной вакцины (для измерения Ό-антигенных единиц в изготовленных в виде препаратов вакцинах - не требуется для измерения в неадсорбированном нефасованном антигене 1РУ);
2) проведение ЕЫ8А-теста для количественного определения содержания Ό-антигена в десорбированной и неадсорбированной вакцине и/или нефасованной форме полиовируса.
Стадия десорбции.
После центрифугирования в течение 10 мин подвергаемой тестированию адсорбированной вакцины осуществляют три последовательные десорбции, добавляя к осадку десорбирующий фосфатный буфер, перемешивая и инкубируя при комнатной температуре. Периоды первой и второй десорбции составляют около 2 ч, при этом период инкубации для третьей экстракции составляет одну ночь при комнатной температуре. Сборы с этих трех экстракций объединяют и разбавляют фосфатно-буферным раствором (РВ8) без Са и Мд, содержащим бычий сывороточный альбумин (БСА) и Твин 20.
Три полиовирусных антигена количественно определяют с помощью ЕЬ18А, как описано ниже.
Количественное определение Ό-антигена с помощью ЕЫ8А.
Титрационные микропланшеты покрывают специфическими кроличьими 1дС против полиовируса (типа 1, 2 или 3), разбавленными карбонатным/бикарбонатным буфером (рН 9,6), и инкубируют в течение ночи при 4°С. После промывки добавляют насыщенный раствор (забуференный фосфатом физиологический раствор без Са и Мд + 1% БСА). Контроли (РВ8) и последовательные разведения образцов вакцины и неадсорбированного внутрилабораторного стандарта добавляют в двух повторностях. Внутрилабораторная трехвалентная стандартная композиция содержит откалиброванные антигены типа 1, 2 и 3. Калибровочным веществом является биологический эталон Европейской фармакопеи (Еигореап РНагтасорое1а Вю1одка1 геГегепсе (ЕРВВР)).
На всех следующих стадиях титрационные микропланшеты инкубируют в течение 1 ч 30 мин при 37°С и промывают. Добавляют кроличьи 1дС против полиовируса (типа 1, 2 или 3), конъюгированные с пероксидазой, разбавленные фосфатным буфером (без Са и Мд + Твин 20), содержащим БСА. Добавляют раствор субстрата, содержащий тетраметилбензидин, растворенный в диметилсульфоксиде (ДМСО) и разбавленный в ацетатном буфере, содержащем 0,003% Н2О2, с последующей 15-30-минутной инкубацией в темноте. Затем добавляют блокирующий раствор, содержащий Н28О4. Оптическую плотность (О.О.) в каждой лунке считывают в пределах одного часа, используя фотометр, установленный на 450 нм, при сравнении с 620 нм.
Концентрацию Ό-антигена в тестируемых образцах рассчитывают из стандартной кривой, полученной путем построения зависимости величин О.О. от концентраций стандартного антигена.
Как дополнение к определению эффективности с помощью ЕЬ18А любой неадсорбированный антиген IΡV может быть определен с использованием способа определения полноты (адсорбции).
Полнота адсорбции несвязанного с адъювантом полиовируса типа 1, 2 и 3, определяемая с помощью ЕЫ8А.
Осуществляют два последовательных центрифугирования. Затем супернатант собирают и тестируют в неразведенном виде в двух повторностях на микропланшетах с помощью ЕЫ8А. Титрационные микропланшеты покрывают специфическими кроличьими 1дС против полиовируса (типа 1, 2 или 3), разбавленными карбонатным/бикарбонатным буфером (рН 9,6), и инкубируют в течение ночи при 4°С. После промывки добавляют насыщенный раствор (забуференный фосфатом физиологический раствор без Са и Мд + 1 % БСА). Контрольные образцы (РВ8), супернатант и неадсорбированный стандарт собственного производства добавляют в двух повторах.
На всех следующих стадиях титрационные микропланшеты инкубируют в течение 1 ч 30 мин при 37°С и промывают. Добавляют кроличьи антиполиовирусные (типа 1, 2 или 3) 1дС, конъюгированные с пероксидазой, разбавленные фосфатным буфером (без Са и Мд + Твин 20), содержащим БСА. Добавляют раствор субстрата, содержащий тетраметилбензидин, растворенный в диметилсульфоксиде (ДМСО) и разбавленный в ацетатном буфере, содержащем 0,003% Н2О2, с последующей 15-30-минутной инкубацией в темноте. Затем добавляют блокирующий раствор, содержащий Н28О4. Оптическую плотность (О.О.) в каждой лунке считывают в пределах одного часа, используя фотометр, установленный на 450 нм, при сравнении с 620 нм.
Полноту считают положительной (антиген в супернатанте), если средняя ОО образца превышает средние величины ОО контрольных образцов + 3 стандартных отклонения и если средняя ОО образца выше 0,1.
В случае положительной полноты содержание антигена измеряют с помощью ЕЫБА-способа, как описано на второй стадии определения эффективности полиовируса типа 1, 2 и 3 с помощью ЕЫ8А.
Способ определения международной единицы мутности (ЮИ).
Концентрация клеток (в ЮИ) может быть определена с использованием либо визуального 1РРО (международный эталонный препарат мутности) стандартного раствора, либо путем измерения поглощения при 660 нм.
Затем определяют мутность суспензии единичного штамма, применяя уравнение для заданной мутности, как изложено ниже:
- 23 015964
АО = ЬО/КОхСО;
где АО = заданная мутность (акыдпеб орасйу), Ь0 = мутность живого сбора (куе катуек! орасйу), К0 = мутность убитого сбора (к111еб катуек! орасйу) и СО = мутность концентрата.
Результаты
Определение эффективности полиовируса на крысах по серонейтрализации в стандартной дозе 40:8:32.
Проводили эксперименты с целью определения эффективности 1РУ типов 1, 2 и 3. Результаты показаны в табл. 8 ниже (в представленном документе 40:8:32 Ό-антигенных единиц 1РУ типов 1, 2 и 3 соответственно эквивалентны дозе 100% 1РУ).
Таблица 8
Эффективность 1РУ типов 1, 2 и 3 в трех разных вакцинных композициях
Описание Эффективность ΙΡν (ЕО50, выраженная в МЕ/дозу)
Тип 1 Тип 2 Тип 3
Эталонная РоНолх 20,78 8,88 40,02
Эталонная ЭТРаНВ1РУ 3,21 0,57 8,62
□ΤΡνν5Ρ-ΗΒ-ΙΡν Способ получения 3 <1,93 0,64 <2,57
Композиция ^ΤР^8Ρ-ΗВ-IРV (100% 1РУ) демонстрирует эффективности 1РУ, превышающие эффективность эталонной Рокопх и аналогичные или превышающие эффективность эталонной Б'ГРаНВГРУ.
Оценка эффективности 1РУ с уменьшенными дозами 1РУ.
Эффективность измеряют в соответствии с описанными выше методами ίπ уйго и ίπ у1уо. Измеренную с помощью ЕЫ8А эффективность уменьшенной дозы 1РУ для обеих композиций способов получения 3 и 4 исследовали ш уйто и сравнивали с эффективностью эталонной ^ΤРаIРVΗВ, как показано в табл. 9. Для способа получения 3 тестировали две партии для каждой композиции.
Процент выхода (тесоуету) рассчитывали относительно содержания антигенов в нефасованной форме 1РУ для каждой композиции (например, 40/8/32 для композиции, содержащей 100% 1РУ; 20/8/16 для композиции, содержащей 50% 1РУ; 10/4/8 для композиции, содержащей 25% 1РУ; 5/2/4 для композиции, содержащей 12,5% 1РУ).
Таблица 9
Образец Т1 Т2 ТЗ
Эффективность полиовируса (% выхода) Полнота (% выхода) Эффективность полиовируса (% выхода) Полнота (% выхода) Эффективность полиовируса (% выхода) Полнота (% выхода)
ОТРа1РУНЭ эталонная 82% ΝΡ 99% ΝΡ 93% ΝΡ
0ΤΡνι/8Ρ-ΗΒ-ΙΡν 1 “Способ получения 3 100% ΙΡν 46% 47% 94% <5% 24% 74%
ΟΤΡνιΰΡ-ΗΒ-ΙΡν 2 “Способ получения 3“ 100% 1РУ 80% <5% 100% <5,0% 81% 17%
ОТРадЗЕ-ΗΒ-ΙΡν 1 “Способ получения 3” 50% ΙΡν 48% 31% 98% <5% 29% 64%
ΟΤΡνι/8Ε-ΗΒ-ΙΡν 2 “Способ получения 3 50% ΙΡν 71% <5% 99% <5% 91% >5%
ΟΤΡίΛβΕ-ΗΒ-ΙΡν 1 “Способ получения 3” 25% 1РУ 54% 34% 115% <5% 33% 72%
ΩΤΡνν8Ρ4ίΒ-ΙΡν 2 “Способ получения 3 25% ΙΡν 81% <5% 115% <5% 107% <5%
0ΤΡι^3Ε-ΗΒ-ΙΡν ‘Способ получения 3 12,5% ΙΡν 50% 24% 110% <5% 28% 60%
ϋΤΡι«3Ρ-ΗΒ-ΙΡν ‘Способ получения 4 100% ΙΡν 41% 48% 93% <5% 23% 51%
ΟΤΡ’Λ'δΕ-ΗΒ-ΙΡν “Способ получения 4 50% ΙΡν 47% 37% 98% <5% 28% 69%
0ΤΡνΐί3Γ-ΗΒ-ΙΡν “Способ получения 4 25% ΙΡν 51% 28% 80% <5% 33% 61%
0ΤΡ«3Ρ-ΗΒ-ΙΡν ‘Способ получения 4 12,5% ΙΡν 42% 22% 100% <5% 40% 58%
Плацебо ‘Способ получения 5” 100% ΙΡν 86% <5% 98% <5% 107% <5%
Плацебо ‘Способ получения 5“ 50% ΙΡν 94% <5% 110% <5% 11% <5%
Плацебо “Способ получения 5” 25% ΙΡν 80% <5% 100% <5% 104% <5%
Плацебо “Способ получения 5’ 12,5% ΙΡν 72% <5% 100% <5% 98% <5%
В табл. 9 показано, что полнота адсорбции одинакова для всех доз 1РУ. Тип 1 и тип 3 сильно десорбированы (17-74%), в то время как тип 2 остается хорошо адсорбированным. Эти три типа являются хорошо адсорбированными для плацебо-композиции для всех доз 1РУ. Адсорбция аналогична таковой для эталонной И'ГРаГУНВ-вакцины.
Наблюдается вариабельность значений 1РУ-полноты из-за того, что достоверность метода количественного определения полноты не подтверждена ни для □ΤΓ^ΗΕ 1РУ композиций, ни для низких концентраций 1РУ (<40/8/32 Ό-антигенных единиц/0,5 мл).
- 24 015964
Относительную эффективность (выраженную в сравнении с эталонной вакциной Ро1юпх) уменьшенной дозы ГРУ для обеих композиций, изготовленных согласно способам получения 3 и 4, исследовали ίπ у1уо в сравнении с эталонными композициями, как показано на фиг. 1 и 2. Для способа получения 3 тестировали по две партии для каждой композиции.
На фиг. 1 показано, что эффективность ГРУ в ОТР\\'8Е-НВ-1РУ с 100% ГРУ слегка превышает эффективность ГРУ в ИТРаНВГРУ. Можно видеть, что эффективность ГРУ в ОТР\\'8Р-НВ-1РУ 50% из композиции способа получения 3 аналогична ИТРаНВГРУ 100%. Эффективность ГРУ для ОТР\\'8Р-НВ-1РУ 25%, изготовленной согласно способу получения 3, слегка ниже таковой для РоРопх®. Также было обнаружено, что 12,5% дозы ГРУ было недостаточно для получения хорошей эффективности ГРУ.
На фиг. 2 показано, что эффективность ГРУ одинакова для композиции способа получения 3 и композиции способа получения 4. Также показано, что имеется тенденция к лучшей эффективности для плацебо, чем для ЭТРте8Р-НВ-ГРУ.
Следовательно, эти данные подтверждают, что уменьшенной дозы ГРУ достаточно для получения хорошей эффективности ш у1уо.
Пример 2. Возможность использования вакцин по изобретению без тиомерсала.
Тест эффективности защиты (РЕТ, ргезегуаБуе еГПсасу !ез!) позволяет продемонстрировать антимикробную активность тестируемой вакцины. Тест заключается в контрольном заражении вакцинной композицией, на конечной стадии ее получения в контейнере, с использованием предусмотренного инокулята подходящих микроорганизмов, хранении инокулируемой композиции при заданной температуре, извлечении образцов из контейнера через конкретные интервалы времени и подсчете микроорганизмов во взятых образцах.
Процедура РЕТ-тестирования описана в Европейской фармакопее (ЕР) (5.1.3) и И8Р (Фармакопея США) (<51>). Согласно этим руководствам антимикробную активность оценивают путем сравнения уменьшения количества жизнеспособных микроорганизмов с использованием критериев, приведенных в следующей далее табл. 7
Таблица 7
Критерии ЕР и И8Р
Микроорганизмы Время Критерии: снижение !од
ЕРА ЕР В ЕР С ивр
Бактерии 31ар(1у1ососсиз аигеиз ЕзсдепсГиа соП 6ч сут. 1 2 3 1 ΝΪ*
Рзеидотопаз аегид/поза сут. 7 3 Νί* 1
сут. 14 сут. 28 ΝΓ Νί* 3 Νί* 3 Νί*
Дрожжи и грибки СапсНда а!Ысапз АзрегдШиз гндег сут. 7 сут. 14 2 1 Νί* Νί* Νί*
сут. 28 Νί* Νί* Νί* Νί*
Νγ*: не установлен. N1*: увеличения нет.
Пример 3. Влияние Н1Ь-компонента на эффективность ГРУ и стабильность ГРУ во времени.
Относительную эффективность ГРУ измеряли, как описано в примере 1, для определения возможного влияния Н1Ь-компонента на эффективность ГРУ и для оценки стабильности ГРУ во времени при разных дозах ГРУ. Исследовали вакцины ИТР^НВГРУ (40-8-32), ИТР^НВГРУ с повторно разведенным Н1Ь, которую хранили в течение 8 месяцев, ИТР^НВГРУ (20-4-16), ИТР^НВГРУ (20-4-16) с повторно разведенным Н1Ь, которую хранили в течение 8 месяцев, ИТРтеНВГРУ (20-4-16), которую хранили в течение 8 месяцев, ИТР^НВГРУ (10-2-8) и ИТР^НВГРУ (10-2-8) с повторно разведенным Н1Ь, которую хранили в течение 8 месяцев. КР-величины измеряли относительно ИТРаГРУНВ (РеФапх) (фиг. 3а)) или Ро1юпх (фиг. 3б)). Было обнаружено, что Н1Ь-компонент не оказывает никакого воздействия на эффективность ГРУ. Было обнаружено, что относительная эффективность ГРУ сохранялась через 8 месяцев (фиг. 3).
Пример 4. Влияние соотношения А1РО4/А1(ОН)3 на внешний вид, адсорбцию Ό и Т и эффективность ГРУ.
Готовили композиции с изменением состава алюминиевого компонента.
Композиция ИТР^у-НВ-ГРУ обычно содержит 630 мкг алюминия: 560 мкг А13+ в виде А1РО4, 70 мкг А13+ в виде А1(ОН)3. Соли алюминия используют для адсорбции Ό, Т, Р\г и НВзАд. В процессе получения композиции добавляют 115 мкг А13+ в виде свободного А1РО4.
Готовили композиции со следующими соотношениями свободного А13+.
- 25 015964
Таблица 10
Соотношение А1РО4/А1(ОН)3
А1(ОН)з мкг Аг* αιρο4 мкг ΑΙ®*
Серия 1 0 115
Серия 2 23 92
Серия 3 69 46
Серия 4 46 69
Серия 5 92 23
Серия 6 115 0
Таблица 11
Способ получения ОТР\\'НВ-1РУ
Стади Способ получения 3: ОТРу/зр-НВ-1РУ я
Вода для инъекций для достижения конечного объема дозы 0,5 мл
Добавить 1,5 М ИаС1 для достижения конечной концентрации 150 мМ
Добавить 115 мкг ΑΙ3* при различных соотношених ΑΙ(ОН)з/А1РО4
Добавить 10 мкг НЬвАд адсорбированного
Добавить 7,5 ίί дифтерийного анатоксина адсорбированного
Добавить 3,25 ίΐ столбнячного анатоксина адсорбированного
Перемешивание
Добавить ΙΡν в дозе 40/8/32 МЕ
Перемешивание
Довести рН до 6,5+/-0,1
Перемешивание
Добавить 20 Юи Рш адсорбированного
Перемешивание
Хранить в интервале от +2 до +8°С
Визуальное наблюдение показало, что вплоть до соотношения 69/46 получают приемлемую агрегацию.
Композиции готовили с использованием того же способа получения и диапазона доз для ГРУ, составляющего от 0 до 100% от обычной дозы ГРУ.
Процент адсорбции Ό- и Т-анатоксинов измеряли с помощью ЕЫ8А. Стабильность адсорбции отслеживали после обработки в течение 7 суток при 37°С. Результаты представлены в табл. 12 и 14.
Таблица 12
Процент десорбции Ό-анатоксина в ОТР\\'НВ-1РУ в диапазоне доз ГРУ
СООТНОШЕНИЕ АКОН)з/А1РО4
Доза 1РУ 0/115 23/92 46/59
ТО 7 сут. 37°С ТО 7 сут. 37°С ТО 7 сут. 37°С
0% <1% 25% <1% 6% /
25% <1% 29% <1% 15% <1% 5%
50% 3% 41% <1% 26% <1% 17%
100% 4% 49% <1% 23% <1% 11%
Таблица 13
Процент десорбции Т-анатоксина в ОТР\\'НВ-1РУ в диапазоне доз ГРУ
СООТНОШЕНИЕ АЦОН)з/А1РО4
Доза ΙΡν 0/115 23/92 46/69
ТО 7 сут. 37°С ТО 7 сут. 37°С ТО 7 сут. 37°С
Р»8Р 0% <1% 34% <1% 12% /
25% <1% 50% <1% 32% <1% 12%
50% 5% 61% <1% 51% <1% 33%
100% 8% 63% <1% 41% <1% 29%
Отслеживали адсорбцию ГРУ. Стабильность адсорбции отслеживали после обработки в течение 21 суток при 25°С.
- 26 015964
Таблица 14 Процент десорбции ГРУ в ^ΤРтеНВ-ГРУ в диапазоне доз ГРУ
ιρν Оценка неадсорбированного Ад (антигена)
СООТНОШЕНИЕ АЦОН)з/А1РО4
0/115 23/92 46/69
Доза Тип ТО 21 сут. 25“С ТО 21 сут. 25°С ТО 21 сут. 25°С
0% Ν/Α Ν/Α Ν/Α Ν/Α Ν/Α АГРЕГАЦИЯ
25% Тип 1 -10-20% -20-30% -10-20% -20-30% <10% -20-30%
Тип 2 <10% <10% <10% <10% <10% <10%
Тип 3 >30% >30% -20-30% >30% <10% >30%
50% Тип 1 >30% >30% -10-20% >30% -10-20% >30%
Тип 2 -10-20% -10-20% <10% <10% <10% <10%
Тип 3 >30% >30% -10-20% >30% -10-20% >30%
100 % Тип 1 >30% >30% -10-20% >30% -10-20% >30%
Тип 2 -10-20% -10-20% <10% <10% <10% <10%
Тип 3 >30% >30% -20-30% >30% -20-30% >30%
Ν/А - нет данных.
Увеличение содержания А1(ОН)3 в композициях делает возможным улучшение адсорбции для Ό, Т и ГРУ.
Лучшее адсорбционное соотношение получали для соотношения А1(ОН)3/А1РО4), равного 46/69. При этом соотношении адсорбция Т и Ό является полной на момент времени Т0; десорбция после ускоренного исследования стабильности, т.е. через 7 суток при 37°С, обнаруживает менее 20% десорбции для Ό, менее 30% для Т;
адсорбируется ГРУ каждого типа. Через 21 сутки при 25°С имеет место десорбция ГРУ типа 3.
Композиции с соотношением 46/69 тестировали ш νίνο и сравнивали с вакциной Τеί^аνас, Ройопх и тРаГУ.
Таблица 15
Результаты эффективности ш νίνο
Образец Εϋ50
Тип 1 Тип 2 Тип 3
ϋΤΡν,-ΗΒ-ΙΡν 100%/Н|Ь Соотношение 46/69 <1,93 <0,64 2,57
ϋΤΡλν-ΗΒ-ΙΡν 50%/Н)Ь Соотношение 46/69 <1,59 0,46 <1,67
ΟΤΡ«/-ΗΒ-ΙΡν 25%/НГЬ Соотношение 46/69 3,08 0,96 3,25
Те1гауас 8,53 0,39 9,15
РоНопх 9,52 2,64 15,06
ϋΤΡθΗΒΙΡν <5,18 <0,64 15,01
Нет никаких значительных различий (ΕΌ50) между композициями ^ΤРтеНВ-ГРУ. ^ΤРаНВГРУ, Τеΐгауас и РоНопх дают похожие результаты и хуже, чем композиции ПЕРте-НВ-ГРУ (за исключением ГРУ типа 2, для которого все композиции эквивалентны).
Пример 5. Клиническая оценка исследуемой ^ΤРте-НВУ-ГРУ/Н^Ь вакцины с уменьшенными дозировками ГРУ.
Исследование осуществимости, фаза ГГ, запланировано для оценки иммуногенности, реактогенности и безопасности трех разных композиций исследуемой ^ΤРте-НВУ-ГРУ/Н^Ь вакцины от ΟδΚ Вю1од1са15 в сравнении с коммерческими ^ΤРте-НВУ/Н^Ь и ГРУ вакцинами, вводимыми параллельно.
Показание/популяции.
Первичная иммунизация здоровых младенцев в первую неделю жизни против дифтерии, столбняка, коклюша, гепатита В, полиомиелита и заболеваний НаеторЫ1и8 тПиепхае типа Ь.
Исследуемые группы:
^ΤРте-НВУ-ГРУ (страндартная доза)/Н1Ь вакцина ^ΤРте-НВУ-ГРУ (49% стандартной дозы)/Н1Ь вакцина ^ΤРте-НВУ-ГРУ (26% стандартной дозы)/Н1Ь вакцина ^ΤРте-НВУ/Н^Ь + ГРУ вакцины
Общие первичные задачи.
Общие первичные задачи будут оцениваться последовательно: т. е. вторые и третьи задачи будут оцениваться только тогда, когда на предшествующие задачи будет получен ответ.
Продемонстрировать не меньшую эффективность ОТРте-НВУ-ГРУ (стандартная доза)/Н1Ь вакцины относительно ГРУ-вакцины, вводимой совместно с ^ΤРте-НВУ/Н^Ь вакциной, в контексте антительного ответа к трем типам полиовируса через один месяц после курса первичной вакцинации.
Задача не меньшей эффективности будет достигнута, если верхний предел стандартизированного
- 27 015964 асимптотического 95% С1 (доверительный интервал) по разнице между группами (ИТР^-НВУ/НТЬ + ГРУ минус ЭТР^-НВУ-ГРУ (стандартная доза)/Н1Ь) в контексте показателей серопротекции для каждого из трех типов полиовируса составит не более 10%.
Продемонстрировать не меньшую эффективность ЭТР^-НВУ-ГРУ (49% стандартной дозы)/Н1Ь вакцины относительно ГРУ-вакцины, вводимой совместно с ИТР^-НВУ/НТЬ вакциной, в контексте антительного ответа к трем типам полиовируса через один месяц после курса первичной вакцинации.
Задача не меньшей эффективности будет достигнута, если верхний предел стандартизированного асимптотического 95% С1 по разнице между группами (ОТР\\-НВУ/Н|Ь + ГРУ минус ЭТР^-НВУ-ГРУ (49% стандартной дозы)/Н1Ь) в контексте показателей серопротекции для каждого из трех типов полиовируса составит не более 10%.
Продемонстрировать не меньшую эффективность ЭТР^-НВУ-ГРУ (26% стандартной дозы)/Н1Ь вакцины относительно ГРУ-вакцины, вводимой совместно с ИТР^-НВУ/НТЬ вакциной, в контексте антительного ответа к трем типам полиовируса через один месяц после курса первичной вакцинации.
Задача не меньшей эффективности будет достигнута, если верхний предел стандартизированного асимптотического 95% С1 по разнице между группами (ОТР\\-НВУ/Н|Ь + ГРУ минус ЭТР^-НВУ-ГРУ (26% стандартной дозы)/Н1Ь) в контексте показателей серопротекции для каждого из трех типов полиовируса составит не более 10%.
Вторичные задачи.
Иммуногенность.
Оценить иммуногенность ИТР^-НВУ-ГРУ/НЬ вакцины-кандидата в контексте ответа на все вакцинные антигены по сравнению с ИТР^-НВУ/НТЬ и ГРУ вакцинами, вводимыми совместно.
Реактогенность.
Оценить реактогенность и безопасность исследуемых вакцин в контексте предусмотренных симптомов, не предусмотренных симптомов и серьезных неблагоприятных событий.
Схема вакцинации.
Схема первичной вакцинации тремя дозами в возрасте 6, 10 и 14 недель. Все субъекты получают дозу вируса гепатита В при рождении.
Страна.
Филиппины.
Забор образцов крови до и после вакцинации 3.
Вакцинные композиции.
Таблица 16
Вакцинные композиции
Вакцина Композиция/дозу Внешний вид Объем
ОТРи/-НВУ-1РУ/Н|Ь от 68К Вю1од1са1з Дифтерийный анатоксин: не менее 30 МЕ (7,5 Ц). Столбнячный анатоксин: не менее 60 Беловатая жидкость в однодозовых 0,5 мл развед. вакцины
- 28 015964
Компонент ΙΡν (стандартная доза) Компонент ΙΡν (49% стандартной дозы) Компонент ΙΡν (26% стандартной дозы) МЕ (3,25 ί,ΐ). ΒορύθΙθίΙθ рег(и8313, убитая: не менее 4 МЕ (20 ои). рек-ДНК НВзАд: 10 мкг. Алюминий в виде солей: 0,66 мг. Инактивированный полиовирус типа 1: 40 ϋ-антигенных единиц. Инактивированный полиовирус типа 2: 8 О-антигенных единиц. Инактивированный полиовирус типа 3: 32 О-антигенные единицы. 49% полной стандартной дозы ΙΡν (408-32). 26% полной стандартной дозы ΙΡν (408-32). флаконах
Конъюгат капсульного полисахарида НаеторМиз ίη/Ιιιβηζββ типа Ь: 2,5 мкг и столбнячного анатоксина: 5-10 мкг. Лактоза: 12,6 мг. Алюминий в виде солей: 30 мкг. Лиофилизир. таблетка в однодозовых флаконах
ОТР«-НВУ/Н1Ь от О8К Вю[од1са1з (Ζίίυΐίχ™ гиЬ) Дифтерийный анатоксин: не менее 30 МЕ (7,5 И). ΛΜΛΤΑί,ΑΙ.η. |1А . ΩΠ чу ΐ ν* IиплΆποικι япеи уга^п. пс глчгпчтс νν МЕ (3,251.1). Вогс/е1еЯа реНизяз, убитая: не менее 4 МЕ (20 ои). рек-ДНК НВвАд: 10 мкг. Алюминий в виде солей: 0,66 мг. Тиомерсал: 8 мкг. Беловатая жидкость в двухдозовых флаконах 1 мл развед. оаКципп
Конъюгат капсульного полисахарида НаеторЬНиз /пПиешае типа Ь: 2,5 мкг и столбнячного анатоксина: 5-10 мкг Лактоза: 12,6 мг. Алюминий в виде солей: 30 мкг. Лиофилизир. таблетка в двухдозовых флаконах
1РУотСЗК В1о1од1са1в (ΡοΙίοπχ™) Инактивированный полиовирус типа 1: 40 О-антигенных единиц. Инактивированный полиовирус типа 2: 8 О-антигенных единиц. Инактивированный полиовирус типа 3: 32 О-антигенные единицы. 2-Феноксиэтанол, максимально 2,5 мг. Полисорбат, максимально 50 мкг. Формальдегид, максимально 100 мкг. Забуференный фосфатом физиологический раствор. Содержит аминокислоты для инъекции, сколько требуется до 0,5 мл. Беловатая жидкость в однодозовых флаконах 0,5 мл
Предварительная адсорбция антигенов.
В ^ТРте-НВV-IРV-композиции объединены дифтерийный анатоксин, столбнячный анатоксин, три штамма Вогбе)е11а рейи^А очищенный основной поверхностный антиген (НВкАд) вируса гепатита В (НВУ) и инактивированный полиовирус (1РУ). Эти антигены, за исключением IРV, сначала предварительно адсорбировали на соли алюминия, после чего смешивали с солью алюминия, забуференным хлоридом натрия и водой для инъекций.
Адсорбция дифтерийного анатоксина.
Очищенный дифтерийный концентрат адсорбировали на фосфате алюминия в соотношении 15 Ь£ дифтерийного анатоксина/0,15 мг А13+. Эти два компонента перемешивали в течение 15-45 мин при комнатной температуре. рН корректировали до рН 5,1±0,1 с последующим перемешиванием в течение 15-45 мин. Смесь хранили в течение одной недели при 37°С. После перемешивания в течение 15-45 мин при комнатной температуре рН корректировали до рН 6,1±0,1. Адсорбированный концентрат хранили при +2 - +8°С в течение по меньшей мере 7 суток перед конечной стадией получения □ΤΡιν-ΜΕ-ΦΥ вакцины. На фиг. 1 ниже разъяснен технологический процесс адсорбции предварительно адсорбированной дифтерийной нефасованной формы.
- 29 015964
Схема адсорбции дифтерийного анатоксина
А1РО4
0(15 1470,15 мгА13‘)
Перемешивание в течение 15-45 минут при комнатной температуре
Корректировка и контроль рН (5,1 ± 0,1)
Перемешивание в течение 15-45 минут при комнатной температуре
Адсорбция в течение 7 суток при 37°С
Перемешивание в течение 15-45 минут при комнатной температуре
Корректировка и контроль рН (6,1 ± 0,1)
Хранение минимум 7 суток при +2°С - +8°С перед получением композиции
Адсорбция столбнячного анатоксина.
Очищенный столбнячный концентрат адсорбировали на гидрате окиси алюминия в соотношении 3,25 Ь£/0,07 мг А13+. Эти два компонента перемешивали в течение 15-20 мин. рН корректировали до рН 6,1±0,1. Смесь хранили при перемешивании в течение 16-24 ч при комнатной температуре. Добавляли 1500 мМ раствор хлорида натрия от номинальной концентрации (после добавления: 150 мМ). После перемешивания в течение 15-45 мин при комнатной температуре рН корректировали до 6,1±0,1. Адсорбированный концентрат хранили при +2 - +8°С в течение по меньшей мере 14 суток перед конечной стадией получения ΌΤΡ^-ΗΒ-ΙΡν вакцины.
Схема адсорбции столбнячного анатоксина
А1(ОН)з
Т (3,25 ίί/0,07 мг ΑΙ3*)
Перемешивание в течение 15-20 минут при комнатной температуре
Корректировка и контроль рН (6,1 ± 0,1)
Перемешивание в течение 16-24 часов при комнатной температуре №С1,1500 мМ (после добавления: 150 мМ)
Перемешивание в течение 15-45 минут при комнатной температуре
Корректировка и контроль рН (6,1 ± 0,1)
Хранение минимум 14 суток при +2°С - +8°С перед получением композиции
Адсорбция антигена вируса гепатита В.
Стерильную очищенную нефасованную форму НВкАд смешивали со стерильной суспензией фосфата алюминия с целью получения суспензии, которая содержит на 10 мкг НВкАд: 0,2 мг А13+(в виде фосфата алюминия), 150 мМ №1С1. в конечном объеме примерно 50 мкл.
Методика адсорбции НВзАд
НВзАд (10 мкг/0,5 мл)
А13+ (0,2 мг/0,5 мл) (А1РО4)
Перемешивание 15-20 минут при комнатной температуре
Корректировка и контроль рН (5,3 ± 0,1)
Перемешивание 16-24 часа при комнатной температуре
Корректировка рН (6,1 ί 0,1)
Хранение 14 суток при комнатной температуре
Хранение при 4°С
Адсорбция Ρ^-антигена.
Раствор Λ1ΡΟ.·| переносили в асептических условиях в стерильный сосуд. Раствор перемешивали в течение 5-10 мин и рН корректировали до 6,5+/-0,1 с помощью 1 М НС1 или 0,5 М ΝαΟΗ непосредственно в сосуде. Раствор перемешивали в течение 15-20 мин. рН контролировали (6,5+/-0,1) и корректировали, при необходимости.
Перед адсорбцией коклюшный объединенный сбор (РРН, регП5515 ροο^ά Нагуе51) перемешивали в
- 30 015964 течение минимум 15 мин перед использованием и затем РРН добавляли в стерильный сосуд, содержащий А1РО4. Суспензию перемешивали в течение минимум 15 мин при комнатной температуре, и ее можно было хранить в течение ночи при комнатной температуре. Если продукт хранили в течение ночи при комнатной температуре, его следовало ресуспендировать в течение минимум 30 мин перед распределением. Отбирали образцы для тестирования. Адсорбированную нефасованную форму Рте распределяли в стерильные стеклянные бутылки и хранили при 2-8°С.
Схема адсорбции Рте
Перенесение А1РОд в стерильный сосуд из нержавеющей стали
Корректировка рН до 6,5 ± 0,1
Перемешивание 15-20 минут при комнатной температуре
Контроль и корректировка рН при необходимости (6,5 ± 0,1)
Добавление РРН в стерильный сосуд из нержавеющей стали
Перемешивание минимум 15 минут при комнатной температуре
Распределение в стеклянные бутылки
Хранение адсорбированного Рте при 2-8°С
Конечная композиция БТРте-ИВУ-ГРУ
Способ осуществляли, как изложено ниже:
раствор хлорида натрия и воду для инъекций смешивали с целью достижения конечной концентрации 150 мМ ЫаС1;
добавляли А1РО4 для получения концентрации свободного А13+ 0,115 мг/дозу;
добавляли адсорбированные НЕР, дифтерийные и столбнячные концентраты для получения конечной концентрации 10 мкг НВкАд, 7,5 Ь£ дифтерийного анатоксина и 3,25 Ь£ столбнячного анатоксина на 0,5-мл дозу;
добавляли ГРУ для получения конечной концентрации 40/8/32 или 19,6/3,9/15,7 или 10,4/2,1/8,3 МЕ/дозу;
осторожное перемешивание в течение 60-120 мин при комнатной температуре; рН корректировали до 6,5+/-0,1;
перемешивание в течение 15-20 мин при комнатной температуре;
контролировали рН: 6,5+/-0,1;
добавляли адсорбированный Рте-концентрат для получения конечной концентрации 20 ЮИ на 0,5 мл дозу;
перемешивание в течение 15-45 мин при комнатной температуре;
измеряли рН;
конечную нефасованную форму хранили при температуре в интервале от +2 до +8°С до розлива.
Схема получения вакцины ОТРте-НВУ №Р1 (вода для инъекций) в объеме 0,5 мл №С11,5 М до 150 мМ
А1РО4 (115 мкг А13+)
НВеАд адсорбированный, 10 мкг
Дифтерийный анатоксин адсорбированный, 7,5 ЬГ
Столбнячный анатоксин адсорбированный, 3,25 ЬГ
ΙΡν 40/8/32 или 19,6/3,9/15,7 или 10,4/2,1/8,3 Ю/дозу
Перемешивание в течение 60-120 мин при комнатной температуре
Корректировка и контроль рН (6,5 +/- 0,1)
Рте адсорбированный, 20 Юи
Перемешивание в течение 15-45 мин при комнатной температуре
Пример 6. Клиническая оценка исследуемой ОТРа-НВУ-ГРУ/НЬ вакцины с уменьшенными дозировками Н1Ь и ГРУ.
- 31 015964
Экспериментальное исследование, фаза ГГ, запланировано для оценки иммуногенности, реактогенности и безопасности четырех разных композиций исследуемой ОТРа-НВУ-ГРУ/НГЬ вакцины от С8К Вю1одюа18 в сравнении с коммерческой ОТРа-НВУ-1РУ/Н1Ь вакциной и коммерческими ОТР\\-НВУ/Н|Ь и ГРУ вакцинами, вводимыми параллельно.
Показание/популяции.
Первичная иммунизация здоровых младенцев в первую неделю жизни против дифтерии, столбняка, коклюша, гепатита В, полиомиелита и заболевания НаеторШик тПиепхае типа Ь.
Исследуемые группы:
ЭТРа-НВУ-ГРУ (49% стандартной дозы)/Н1Ь 5 мкг вакцина
ЭТРа-НВУ-ГРУ (49% стандартной дозы)/Н1Ь 2,5 мкг вакцина
ЭТРа-НВУ-ГРУ (26% стандартной дозы)/Н1Ь 5 мкг вакцина
ЭТРа-НВУ-ГРУ (26% стандартной дозы)/Н1Ь 2,5 мкг вакцина
ЭТРа-НВУ-ГРУ/Н|Ь вакцина ОТР\\-НВУ/Н|Ь + ГРУ вакцины
Первичные задачи.
Оценить иммуногенность ОТРа-НВУ-ГРУ/НГЬ вакцин-кандидатов в контексте ответа на РКР и три антигена полиовируса (полно 1, 2 и 3).
Вторичные задачи.
Иммуногенность.
Оценить иммуногенность всех исследуемых вакцин в контексте ответа на все вакцинные антигены. Реактогенность.
Оценить реактогенность и безопасность исследуемых вакцин в контексте ответа предусмотренных симптомов, не предусмотренных симптомов и серьезных неблагоприятных событий.
Схема вакцинации.
Схема первичной вакцинации тремя дозами в возрасте 6 недель. Все субъекты получают дозу вируса гепатита В при рождении.
Страна.
ТВС.
Забор образцов крови.
До и после вакцинации 3.
Вакцинные композиции.
Вакцина состоит из двух частей: жидкой части (ЭТРа-НВ-ГРУ) и лиофилизированной части (Н1Ь).
Проводят предварительную адсорбцию Ό, Т, РТ, РИА, РΚN и НВкАд. Воду и №-1С1 смешивают с разными антигенами. Смесь перемешивают до гомогенности и корректируют рН. Конечный состав ЭТРа-НВ-ГРУ части данной вакцины представлен в приведенной ниже таблице.
Таблица 17
Состав одной 0,5 мл человеческой дозы ЭТРа-НВУ-ГРУ
Компонент Количество
ϋ анатоксин 25 и
Т анатоксин 10 1Г
РТ 25 мкг
ЕНА 25 мкг
ΡΚΝ 8 мкг
НВаАд 10 мкг
1РУтипа 1 40 или 19,6 или 10,4 МЕ
ΙΡν типа 2 8 или 3,9 или 2,1 МЕ
(РУ типа 3 32 или 15,7 или 8,3 МЕ
АР от 700 до 790 мкг
Проводят предварительную адсорбцию Н1Ь. Предварительно адсорбированный Н1Ь смешивают с сахарозой или лактозой перед лиофилизацией. Количество Н1Ь будет составлять 2,5, или 5, или 10 мкг на человеческую дозу. Содержание алюминия будет находиться в диапазоне от 30 до 120 мкг А13+ в виде А1РО4 на человеческую дозу.

Claims (24)

1. ГРУ (инактивированный полиовирус)-вакцина, содержащая:
(а) дифтерийный анатоксин (ПТ);
(б) столбнячный анатоксин (ТТ);
(в) убитую цельноклеточную Вогбе(е11а рейиккщ (Рте), по существу, не содержащую тиомерсала; или два или более бесклеточных коклюшных компонента (Ра) (например коклюшный анатоксин (РТ), филаментозный гемагглютинин (РНА) и пертактин (РКЦ));
- 32 015964 (г) инактивированный полиовирус типа 1 в дозе более 10 Ό-антигенных единиц и менее 20 Όантигенных единиц.
2. Вакцина по п.1, где инактивированный полиовирус типа 1 составляет 26-49, 30-45, 33-40 или 3537% от стандартной дозы 40 Ό-антигенных единиц.
3. Вакцина по п.1 или 2, дополнительно содержащая инактивированный полиовирус типа 3 в дозе 820 Ό-антигенных единиц, 9-19 Ό-антигенных единиц, 10-18 Ό-антигенных единиц, 11-17 Ό-антигенных единиц, 12-16 Ό-антигенных единиц или 13-15 Ό-антигенных единиц; например примерно или точно 14 Ό-антигенных единиц.
4. Вакцина по пп.1-3, дополнительно содержащая инактивированный полиовирус типа 2 в дозе 2-4 Ό-антигенные единицы.
5. Вакцина по пп.1-4, в которой один или более компонентов, выбранных из дифтерийного анатоксина, столбнячного анатоксина, убитой цельноклеточной Вогбе(е11а рейи8818, двух или более бесклеточных коклюшных компонентов, инактивированного полиовируса типа 1, типа 2 или типа 3, адсорбированы на гидрате окиси алюминия, фосфате алюминия или смеси их обоих.
6. Вакцина по пп.1-5, дополнительно содержащая поверхностный антиген вируса гепатита В, по существу, не содержащий тиомерсала.
7. Вакцина по п.6, где указанный поверхностный антиген вируса гепатита В адсорбирован на фосфате алюминия.
8. Вакцина по пп.1-7, дополнительно содержащая конъюгат белка-носителя и капсульного сахарида НаеторЫ1и8 ^ηί1иеиζае типа В (Н1Ь).
9. Вакцина по п.8, где указанный конъюгат белка-носителя и капсульного сахарида НаеторЫ1и8 шПнеихае типа В (Н1Ь) является адсорбированным на фосфате алюминия или неадсорбированным на адъюванте.
10. Вакцина по пп.1-9, дополнительно содержащая один или более компонентов, выбранных из одного или более конъюгатов белка-носителя и капсульного сахарида бактерии, выбранной из группы №188епа тешидШб18 типа А, №188епа тешидШб18 типа С, №188ейа тешидй1б18 типа ЭД и №188епа тешидШб18 типа Υ; везикулы или ЬО8 (липоолигосахарид) наружной мембраны №188ейа тешидй1б18 типа В (МеиВ) или конъюгированного капсульного сахарида МеиВ, или его производного; νί-сахарида 8а1тоие11а 1урЫ, конъюгированного с белком-носителем; или антигена вируса гепатита А.
11. Вакцина по п.10, где один или более конъюгатов белка-носителя и капсульного сахарида бактерии, выбранной из группы №188епа тешидШб18 типа А, №188епа тешидй1б18 типа С, №188епа тешидШб18 типа ЭД и №188ейа тешидй1б18 типа Υ, являются адсорбированными на гидрате окиси алюминия или фосфате алюминия либо смеси их обоих либо неадсорбированными на адъюванте;
и где везикула или ЬО8 (липоолигосахарид) наружной мембраны №188ейа тешидй1б18 типа В (МеиВ) или конъюгированный капсульный сахарид МеиВ либо его производное являются адсорбированными на гидрате окиси алюминия или фосфате алюминия либо смеси их обоих либо неадсорбированными на адъюванте;
и где νί-сахарид 8а1тоие11а 1урЫ, конъюгированный с белком-носителем, является адсорбированным на гидрате окиси алюминия или фосфате алюминия либо смеси их обоих либо неадсорбированным на адъюванте;
и где антиген вируса гепатита А является адсорбированным на гидрате окиси алюминия или фосфате алюминия либо смеси их обоих.
12. Способ предупреждения или лечения инфекции, вызываемой полиовирусом, С1о8йтбшт 1е1аш, СотуиеЬас1егшт б1рН(Нег1а и Вогбе1е11а рейи8818, путем введения вакцины по пп.1-11 человеку, нуждающемуся в этом.
13. Способ предупреждения или лечения инфекции, вызываемой полиовирусом, С1о8йтбшт 1е1аш, СотуиеЬас1епцт б1рВ(Нег1а и Вогбе1е11а рейи8818, и инфекции, вызываемой одним или более чем одним из вируса гепатита В, НаеторЫ1и8 тПиенхае Ь, №188епа тешидй1б18 типа А, №188епа тешидШб18 типа С, №188ейа тешидШб18 типа ЭД, №188епа тешидй1б18 типа Υ, №188епа тешидШб18 типа В, 8а1тоие11а 1ур1н и вируса гепатита А, путем введения вакцины по пп.1-11.
14. Применение вакцины по пп.1-11 для предупреждения заболевания, вызываемого полиовирусом, С1о81йбшт 1е1аш, С’огупеЬас1епит б|р1И11епа и Вогбе(е11а рейи8818.
15. Применение вакцины по пп.1-11 для предупреждения заболевания, вызываемого полиовирусом, С1о81йбшт 1е1аи1, СогупеЬас1епит б|р1И11епа и Вогбе1е11а рейи8818 и одним или более чем одним из вируса гепатита В, НаеторЫ1и8 ^ηί1иеиζае Ь, №188епа тешидй1б18 типа А, №188епа тешидШб18 типа С, №188епа тешидШб18 типа ЭД, №188епа тешидШб18 типа Υ, №188епа тешидй1б18 типа В, 8а1тоие11а 1ур1н и вируса гепатита А.
16. Вакцина по пп.1-11, где ΙΡν типа 1 происходит из штамма МаЪоиеу.
17. Вакцина по пп.1-11, где ΙΡν типа 2, если он присутствует, происходит из штамма МЕР-1.
18. Вакцина по пп.1-11, где ΙΡν типа 3, если он присутствует, происходит из штамма 8аикей.
19. Способ по пп.12, 13, где ΙΡν типа 1 происходит из штамма МаЬоиеу.
20. Способ по пп.12, 13, где ΙΡν типа 2, если он присутствует, происходит из штамма МЕР-1.
- 33 015964
21. Способ по пп.12, 13, где ГРУ типа 3, если он присутствует, происходит из штамма 8аике11.
22. Применение по пп.14, 15, где ГРУ типа 1 происходит из штамма МаЬопеу.
23. Применение по пп.14, 15, где ГРУ типа 2, если он присутствует, происходит из штамма МЕР-1.
24. Применение по пп.14, 15, где ГРУ типа 3, если он присутствует, происходит из штамма 8аике11.
EA200900288A 2006-09-07 2007-09-07 Вакцина EA015964B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0617602.8A GB0617602D0 (en) 2006-09-07 2006-09-07 Vaccine
GB0625593A GB0625593D0 (en) 2006-12-21 2006-12-21 Vaccine
PCT/EP2007/059390 WO2008028956A1 (en) 2006-09-07 2007-09-07 Vaccine

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200900288A1 EA200900288A1 (ru) 2009-08-28
EA015964B1 true EA015964B1 (ru) 2012-01-30

Family

ID=38823705

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200900289A EA016417B1 (ru) 2006-09-07 2007-09-07 Способ получения вакцины
EA200900288A EA015964B1 (ru) 2006-09-07 2007-09-07 Вакцина

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200900289A EA016417B1 (ru) 2006-09-07 2007-09-07 Способ получения вакцины

Country Status (26)

Country Link
US (3) US8956625B2 (ru)
EP (3) EP2066344B2 (ru)
JP (5) JP5814507B2 (ru)
KR (2) KR20090057423A (ru)
CN (2) CN103585624A (ru)
AT (1) ATE511398T1 (ru)
AU (2) AU2007293672B2 (ru)
BR (2) BRPI0716518B8 (ru)
CA (2) CA2662051A1 (ru)
CO (2) CO6160334A2 (ru)
CR (2) CR10669A (ru)
CY (2) CY1111680T1 (ru)
DK (2) DK2097102T3 (ru)
EA (2) EA016417B1 (ru)
ES (1) ES2387582T3 (ru)
HK (1) HK1129563A1 (ru)
HR (2) HRP20110431T1 (ru)
IL (2) IL197272A (ru)
MA (2) MA30715B1 (ru)
MX (2) MX2009002560A (ru)
NO (2) NO20090865L (ru)
NZ (2) NZ575272A (ru)
PL (2) PL2066344T3 (ru)
PT (2) PT2097102E (ru)
SI (2) SI2066344T1 (ru)
WO (2) WO2008028956A1 (ru)

Families Citing this family (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8431136B2 (en) * 2005-06-27 2013-04-30 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunogenic composition
EP2066344B2 (en) * 2006-09-07 2016-06-29 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Inactivated Poliovirus combination vaccine
KR101617464B1 (ko) 2006-09-29 2016-05-02 잇판사이단호진한다이비세이부쯔뵤우겐큐우카이 Ｉｐｖ―ｄｐｔ 백신
GB0810894D0 (en) 2008-06-13 2008-07-23 Novartis Vaccines & Diagnostic Conjugated saccharide
PE20100365A1 (es) 2008-10-24 2010-05-21 Panacea Biotec Ltd Novedosas vacunas de combinacion con tos ferina de celulas enteras y metodo para su elaboracion
GB0822633D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Formulation
GB0822634D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Meningitis vaccines
US8574589B2 (en) * 2009-05-11 2013-11-05 Novartis Ag Antigen purification process for pertactin antigen
MX2012002723A (es) 2009-09-02 2012-04-11 Novartis Ag Composiciones inmunogenicas que incluyen moduladores de la actividad de receptores tipo toll.
AU2011258156B2 (en) * 2010-05-26 2016-11-24 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
WO2011148382A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Biological E Limited An improved process for the purification of capsular polysaccharides of haemophilus influenza - b, neisseria meningitis such as serotypes a, c, y and w-135, and other similar related capsular polysaccharides produced from both gram negative and gram positive microorganisms using aluminium phosphate with alcohol.
ES2458355T3 (es) 2010-09-01 2014-05-05 Novartis Ag Adsorción de inmunopotenciadores sobre sales metálicas insolubles
RU2013144207A (ru) 2011-03-02 2015-04-10 Новартис Аг Комбинированные вакцины с пониженными дозами антигена и/или адъюванта
GB201105981D0 (en) * 2011-04-08 2011-05-18 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel process
EP2771296B1 (en) 2011-10-25 2017-09-27 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
DE102011122891B4 (de) 2011-11-11 2014-12-24 Novartis Ag Fermentationsmedium, das frei von tierischen Bestandteilen ist, zur Herstellung von Diphtherie-Toxoiden zur Verwendung bei der Impfung von Menschen
DE102011118371B4 (de) 2011-11-11 2014-02-13 Novartis Ag Zur Impfung von Menschen geeignete Zusammensetzung, die ein Diphtherie-Toxoid umfasst, sowie Verfahren zu deren Herstellung
GB2495341B (en) 2011-11-11 2013-09-18 Novartis Ag Fermentation methods and their products
EP2592137A1 (en) 2011-11-11 2013-05-15 Novartis AG Fermentation media free of animal-derived components for production of diphtheria toxoids suitable for human vaccine use
RU2014140521A (ru) 2012-03-08 2016-04-27 Новартис Аг Адъювантные составы бустерных вакцин
EP2822584A1 (en) 2012-03-08 2015-01-14 Novartis AG Combination vaccines with tlr4 agonists
CA2882619A1 (en) * 2012-09-06 2014-03-13 Novartis Ag Combination vaccines with serogroup b meningococcus and d/t/p
CN104717977A (zh) 2012-10-03 2015-06-17 诺华股份有限公司 免疫原性组合物
AU2013328548A1 (en) 2012-10-12 2015-05-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Non-cross-linked acellular pertussis antigens for use in combination vaccines
KR20140060053A (ko) * 2012-11-09 2014-05-19 아이진 주식회사 인플루엔자 백신용 면역증강제
EA030749B1 (ru) 2013-03-08 2018-09-28 Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. Бесклеточная противококлюшная вакцина
US9717649B2 (en) 2013-04-24 2017-08-01 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9700486B2 (en) 2013-04-24 2017-07-11 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9713572B2 (en) 2013-04-24 2017-07-25 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9849066B2 (en) * 2013-04-24 2017-12-26 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9603775B2 (en) 2013-04-24 2017-03-28 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9700485B2 (en) 2013-04-24 2017-07-11 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9707153B2 (en) 2013-04-24 2017-07-18 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9707155B2 (en) 2013-04-24 2017-07-18 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9717648B2 (en) 2013-04-24 2017-08-01 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9839579B2 (en) 2013-04-24 2017-12-12 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US9707154B2 (en) 2013-04-24 2017-07-18 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
CN104634959B (zh) * 2013-11-08 2016-08-24 丽珠集团疫苗工程股份有限公司 一种处理液以及采用其测定铝盐吸附型疫苗中抗原含量的方法
AR101256A1 (es) * 2014-07-21 2016-12-07 Sanofi Pasteur Composición vacunal que comprende ipv y ciclodextrinas
KR102219638B1 (ko) * 2014-10-07 2021-02-23 세럼 인스티튜트 오브 인디아 프라이비트 리미티드 엔테로바이러스 불활화 및 보강제 흡착 방법과 이로부터 수득되는 저용량 백신 조성물
US11793869B2 (en) 2014-10-07 2023-10-24 Serum Institute Of India Pvt Ltd. Methods for enterovirus inactivation, adjuvant adsorption and dose reduced vaccine compositions obtained thereof
AU2017273650B2 (en) * 2016-06-01 2022-08-18 Access To Advanced Health Institute Nanoalum particles containing a sizing agent
CN106290886A (zh) * 2016-07-28 2017-01-04 北京科兴生物制品有限公司 一种检测ⅲ型脊髓灰质炎病毒d抗原含量的方法
US11235054B2 (en) * 2016-08-26 2022-02-01 Serum Institute Of India Private Limited Multivalent vaccine composition
CA3070039A1 (en) 2017-07-18 2019-01-24 Serum Institute Of India Pvt Ltd. An immunogenic composition having improved stability, enhanced immunogenicity and reduced reactogenicity and process for preparation thereof
CN108241058A (zh) * 2018-01-13 2018-07-03 中国医学科学院医学生物学研究所 一种脊髓灰质炎病毒ⅲ型d抗原预包被检测方法及其检测试剂盒和应用
CN108387726A (zh) * 2018-01-13 2018-08-10 中国医学科学院医学生物学研究所 脊髓灰质炎病毒ⅰ、ⅱ、ⅲ型d抗原同步快速鉴别、定量检测方法及其检测试剂盒和应用
JOP20190242A1 (ar) 2018-10-12 2020-04-12 Serum Institute Of India Pvt Ltd تركيبة لقاح توليفي تشمل فيروس شلل الأطفال ذو جرعة مخفّضة خاملة التنشيط وطريقة لتحضيرها
WO2020165920A1 (en) * 2019-02-12 2020-08-20 Biological E Limited Multivalent vaccine composition
US11701417B2 (en) * 2019-03-27 2023-07-18 West Virginia University Vaccine formulation to protect against pertussis
EP3799884A1 (en) 2019-10-01 2021-04-07 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunogenic compositions
CN111000994A (zh) * 2019-12-26 2020-04-14 北京科兴中维生物技术有限公司 一种液体疫苗组合物及其制备方法与应用
CN110917344B (zh) * 2019-12-26 2022-11-04 北京科兴中维生物技术有限公司 一种液体疫苗组合物及其应用
CN111053898B (zh) * 2019-12-26 2023-05-16 北京科兴中维生物技术有限公司 一种疫苗组合物及其应用
WO2021176409A1 (en) 2020-03-05 2021-09-10 Sanofi Healthcare India Private Limited Preservative combination for vaccine composition
CN114748616A (zh) * 2022-05-23 2022-07-15 中国医学科学院医学生物学研究所 一种成人青少年用无细胞百白破联合疫苗及其制备方法
GB202211033D0 (en) 2022-07-28 2022-09-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Purification process

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998000167A1 (en) * 1996-07-02 1998-01-08 Connaught Laboratories Limited Multivalent dtp-polio vaccines
WO2004039399A1 (en) * 2002-11-01 2004-05-13 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunogenic composition

Family Cites Families (111)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB759221A (en) 1953-06-25 1956-10-17 Centrale Suiker Mij Nv Process for the separation of valuable organic compounds from desugarized molasses and vinasse
GB777018A (en) 1955-05-02 1957-06-12 Parke Davis & Co Poliomyelitis vaccine products and methods for preparing the same
US3097140A (en) 1958-10-31 1963-07-09 Merck & Co Inc Preparing a mixed polio, pertussis, tetanus, and diphtheria vaccine with benzethonium chloride
US4057685A (en) 1972-02-02 1977-11-08 Abbott Laboratories Chemically modified endotoxin immunizing agent
US4235877A (en) 1979-06-27 1980-11-25 Merck & Co., Inc. Liposome particle containing viral or bacterial antigenic subunit
US4372945A (en) 1979-11-13 1983-02-08 Likhite Vilas V Antigen compounds
IL61904A (en) 1981-01-13 1985-07-31 Yeda Res & Dev Synthetic vaccine against influenza virus infections comprising a synthetic peptide and process for producing same
US4356170A (en) 1981-05-27 1982-10-26 Canadian Patents & Development Ltd. Immunogenic polysaccharide-protein conjugates
US4673574A (en) 1981-08-31 1987-06-16 Anderson Porter W Immunogenic conjugates
US4459286A (en) 1983-01-31 1984-07-10 Merck & Co., Inc. Coupled H. influenzae type B vaccine
US4663160A (en) 1983-03-14 1987-05-05 Miles Laboratories, Inc. Vaccines for gram-negative bacteria
US4761283A (en) 1983-07-05 1988-08-02 The University Of Rochester Immunogenic conjugates
US4695624A (en) 1984-05-10 1987-09-22 Merck & Co., Inc. Covalently-modified polyanionic bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers, and methods of preparing such polysaccharides and conjugates and of confirming covalency
US4882317A (en) 1984-05-10 1989-11-21 Merck & Co., Inc. Covalently-modified bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers and methods of preparing such polysaccharides and conjugataes and of confirming covalency
US4808700A (en) 1984-07-09 1989-02-28 Praxis Biologics, Inc. Immunogenic conjugates of non-toxic E. coli LT-B enterotoxin subunit and capsular polymers
FI861417A0 (fi) 1985-04-15 1986-04-01 Endotronics Inc Hepatitis b ytantigen framstaelld med rekombinant-dna-teknik, vaccin, diagnostiskt medel och cellinjer samt foerfaranden foer framstaellning daerav.
US4709017A (en) 1985-06-07 1987-11-24 President And Fellows Of Harvard College Modified toxic vaccines
GB8516442D0 (en) 1985-06-28 1985-07-31 Wellcome Found Cloned antigen
IT1187753B (it) 1985-07-05 1987-12-23 Sclavo Spa Coniugati glicoproteici ad attivita' immunogenica trivalente
US4895800A (en) 1985-11-26 1990-01-23 Phillips Petroleum Company Yeast production of hepatitis B surface antigen
EP0278940A3 (en) 1987-01-30 1988-12-07 Smithkline Biologicals S.A. Hepatitis b virus surface antigens and hybrid antigens containing them
US5057540A (en) 1987-05-29 1991-10-15 Cambridge Biotech Corporation Saponin adjuvant
EP1088830A3 (en) 1987-06-22 2004-04-07 Medeva Holdings B.V. Hepatitis b surface antigen particles
DE3789866T2 (de) 1987-07-17 1994-09-22 Rhein Biotech Proz & Prod Gmbh DNA-Moleküle, die für FMDH-Kontrollabschnitte und Strukturgene für ein Protein mit FMDH-Aktivität kodieren, sowie deren Anwendung.
IT1223334B (it) 1987-11-02 1990-09-19 Sclavo Spa Polipeptidi immunologicamente attivi con una tossicita' alterata utili per la preparazione di un vaccino antipertosse
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
NL8802046A (nl) 1988-08-18 1990-03-16 Gen Electric Polymeermengsel met polyester en alkaansulfonaat, daaruit gevormde voorwerpen.
DE3841091A1 (de) 1988-12-07 1990-06-13 Behringwerke Ag Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US6306625B1 (en) 1988-12-30 2001-10-23 Smithkline Beecham Biologicals, Sa Method for obtaining expression of mixed polypeptide particles in yeast
EP0378881B1 (en) 1989-01-17 1993-06-09 ENIRICERCHE S.p.A. Synthetic peptides and their use as universal carriers for the preparation of immunogenic conjugates suitable for the development of synthetic vaccines
DK0382271T3 (da) 1989-02-04 1995-05-01 Akzo Nobel Nv Tocoler som adjuvanser i vacciner
GB8914122D0 (en) 1989-06-20 1989-08-09 Wellcome Found Polypeptide expression
CA2063271A1 (en) 1989-07-14 1991-01-15 Subramonia Pillai Cytokine and hormone carriers for conjugate vaccines
EP0414374B1 (en) 1989-07-25 1997-10-08 Smithkline Biologicals S.A. Novel antigens and methods for their preparation
IT1237764B (it) 1989-11-10 1993-06-17 Eniricerche Spa Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici.
GB9007024D0 (en) 1990-03-29 1990-05-30 Imperial College Novel vaccine
SE466259B (sv) 1990-05-31 1992-01-20 Arne Forsgren Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal
EP0484621A3 (en) 1990-07-11 1992-08-26 American Cyanamid Company Efficacious vaccines against bordetella pertussis comprising a combination of individually purified pertussis antigens
ATE128628T1 (de) 1990-08-13 1995-10-15 American Cyanamid Co Faser-hemagglutinin von bordetella pertussis als träger für konjugierten impfstoff.
US5153312A (en) 1990-09-28 1992-10-06 American Cyanamid Company Oligosaccharide conjugate vaccines
CA2059692C (en) 1991-01-28 2004-11-16 Peter J. Kniskern Pneumoccoccal polysaccharide conjugate vaccine
CA2067003A1 (en) 1991-04-29 1992-10-30 Peter J. Kniskern Hbsag escape mutant vaccine
WO1993010152A1 (en) 1991-11-16 1993-05-27 Smithkline Beecham Biologicals S.A. HYBRID PROTEIN BETWEEN CS FROM PLASMODIUM AND HBsAG
IT1262896B (it) 1992-03-06 1996-07-22 Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini.
JP3506431B2 (ja) 1992-05-06 2004-03-15 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ ジフテリア毒素受容体結合領域
NZ253065A (en) 1992-05-23 1996-10-28 Smithkline Beecham Biolog Combination vaccines comprising hepatitis b surface antigens and other antigens wherein aluminium phosphate adjuvant is used to adsorb the hepatitis antigen
AU671649B2 (en) 1992-06-18 1996-09-05 President And Fellows Of Harvard College Diphtheria toxin vaccines
HU219808B (hu) 1992-06-25 2001-08-28 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Adjuvánst tartalmazó vakcinakompozíció és eljárás annak előállítására
IL102687A (en) 1992-07-30 1997-06-10 Yeda Res & Dev Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them
AU678613B2 (en) 1993-09-22 1997-06-05 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Method of activating soluble carbohydrate using novel cyanylating reagents for the production of immunogenic constructs
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US6455673B1 (en) 1994-06-08 2002-09-24 President And Fellows Of Harvard College Multi-mutant diphtheria toxin vaccines
US5917017A (en) 1994-06-08 1999-06-29 President And Fellows Of Harvard College Diphtheria toxin vaccines bearing a mutated R domain
CA2194761C (en) 1994-07-15 2006-12-19 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
ATE241384T1 (de) 1995-03-22 2003-06-15 Jackson H M Found Military Med Herstellung von immunogenen konstrukten unter verwendung von löslichen kohlehydraten, die durch organische cyanylierungs-reagenzien aktiviert wurden
UA56132C2 (ru) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиция вакцины (варианты), способ стабилизации qs21 по отношению к гидролизу (варианты), способ приготовления вакцины
EP1233022B1 (en) 1995-05-04 2015-12-09 Aventis Pasteur Limited Methods of preparation of components of acellular pertussis vaccines
ES2308962T3 (es) 1995-06-07 2008-12-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vacunas que comprenden un conjugado de antigeno polisacarido-proteina transportadora y una proteina transportadora libre.
US5811102A (en) 1995-06-07 1998-09-22 National Research Council Of Canada Modified meningococcal polysaccharide conjugate vaccines
SI1082965T1 (sl) 1995-06-23 2009-08-31 Glaxosmithkline Biolog Sa Sestavek cepiva, ki vsebuje antigen konjugata polisaharida, adsorbiranega na aluminijevem fosfatu
GB9616351D0 (en) 1996-08-02 1996-09-11 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
GB9713156D0 (en) 1997-06-20 1997-08-27 Microbiological Res Authority Vaccines
AU4707097A (en) 1997-09-15 1999-04-05 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Multivalent vaccines
GB9806456D0 (en) 1998-03-25 1998-05-27 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
CA2340692A1 (en) 1998-08-19 2000-03-02 North American Vaccine, Inc. Immunogenic .beta.-propionamido-linked polysaccharide protein conjugate useful as a vaccine produced using an n-acryloylated polysaccharide
ATE240118T1 (de) 1998-08-28 2003-05-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Salmonella typhi impfstoffzusammensetzungen
EP1004314A1 (fr) * 1998-11-26 2000-05-31 Pasteur Merieux MSD Vaccin T.d. Polio rappel pour une population vaccinée ou sensibilisée
ES2322306T3 (es) 1998-12-21 2009-06-18 Medimmune, Inc. Proteinas de streptpcpccus pneumoniae y fragmentos inmunogenicos para vacunas.
US6146902A (en) 1998-12-29 2000-11-14 Aventis Pasteur, Inc. Purification of polysaccharide-protein conjugate vaccines by ultrafiltration with ammonium sulfate solutions
FR2791895B1 (fr) 1999-03-23 2001-06-15 Pasteur Merieux Serums Vacc Utilisation de trehalose pour stabiliser un vaccin liquide
JP2002541808A (ja) 1999-04-09 2002-12-10 テクラブ， インコーポレイテッド ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア
GB9915204D0 (en) 1999-06-29 1999-09-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
GB9918319D0 (en) 1999-08-03 1999-10-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
US6515117B2 (en) 1999-10-12 2003-02-04 Bristol-Myers Squibb Company C-aryl glucoside SGLT2 inhibitors and method
GB9925559D0 (en) 1999-10-28 1999-12-29 Smithkline Beecham Biolog Novel method
GB0007432D0 (en) 2000-03-27 2000-05-17 Microbiological Res Authority Proteins for use as carriers in conjugate vaccines
IL153558A0 (en) 2000-06-20 2003-07-06 Shire Biochem Inc Streptococcus antigens
AU8189501A (en) 2000-06-29 2002-01-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
GB0108364D0 (en) 2001-04-03 2001-05-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine composition
UA79735C2 (ru) 2000-08-10 2007-07-25 Глаксосмітклайн Байолоджікалз С.А. Очищение антигенов вируса гепатита b (hbv) для использования в вакцинах
KR100401423B1 (ko) * 2001-01-10 2003-10-17 주식회사 엘지생명과학 혼합 백신의 제조 방법
US6936590B2 (en) 2001-03-13 2005-08-30 Bristol Myers Squibb Company C-aryl glucoside SGLT2 inhibitors and method
DE10117500A1 (de) 2001-04-07 2002-10-17 Cognis Deutschland Gmbh Reinigungstücher zur Haarpflege
CA2444481A1 (en) 2001-04-11 2002-10-24 Bristol-Myers Squibb Company Amino acid complexes of c-aryl glucosides for treatment of diabetes and method
AU2002309706A1 (en) 2001-05-11 2002-11-25 Aventis Pasteur, Inc. Novel meningitis conjugate vaccine
WO2003009869A1 (en) 2001-07-26 2003-02-06 Chiron Srl. Vaccines comprising aluminium adjuvants and histidine
FR2828406B1 (fr) * 2001-08-08 2005-06-24 Aventis Pasteur Composition vaccinale bivalente havi
WO2003054007A2 (en) 2001-12-20 2003-07-03 Shire Biochem Inc. Streptococcus antigens
GB0213622D0 (en) 2002-06-13 2002-07-24 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine Corporation
CA2493124C (en) 2002-08-02 2014-04-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vaccine
AU2004219910B2 (en) 2003-03-13 2010-06-17 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Purification process for bacterial cytolysin
GB0405787D0 (en) 2004-03-15 2004-04-21 Chiron Srl Low dose vaccines
EA011158B1 (ru) 2004-03-16 2009-02-27 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Замещённые глюкопиранозилом бензольные производные, содержащие эти соединения лекарственные средства, их применение и способ их получения
GB0420634D0 (en) 2004-09-16 2004-10-20 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccines
NZ560930A (en) * 2005-02-16 2011-06-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Hepatitis B virus vaccine comprising a hepatitis B virus surface antigen, aluminium phosphate, 3-O-deacylated monophosphoryl lipid A and a triethylammonium ion
US8431136B2 (en) 2005-06-27 2013-04-30 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunogenic composition
RU2457858C2 (ru) 2005-09-01 2012-08-10 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс Гмбх Унд Ко Кг Множественная вакцинация, включающая менингококки серогруппы с
WO2007098186A2 (en) * 2006-02-22 2007-08-30 Novavax, Inc. Adjuvant and vaccine compositions
EP2066344B2 (en) 2006-09-07 2016-06-29 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Inactivated Poliovirus combination vaccine
GB0617602D0 (en) 2006-09-07 2006-10-18 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
GB0625593D0 (en) 2006-12-21 2007-01-31 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
EP2131857B1 (en) * 2007-03-22 2015-07-29 The Regents of the University of Colorado, a body corporate Method of preparing an immunologically-active adjuvant-bound dried vaccine composition
PE20100366A1 (es) * 2008-10-24 2010-05-21 Panacea Biotec Ltd Novedosas composiciones de vacuna con tos ferina acelular asi como el metodo para su elaboracion
GB0822633D0 (en) * 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Formulation
GB0822634D0 (en) * 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Meningitis vaccines
CN102307477B (zh) * 2009-01-05 2015-07-29 埃皮托吉尼西斯股份有限公司 佐剂组合物及使用方法
TW201136603A (en) 2010-02-09 2011-11-01 Merck Sharp & Amp Dohme Corp 15-valent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine composition
GB201015132D0 (en) * 2010-09-10 2010-10-27 Univ Bristol Vaccine composition
US10092640B2 (en) * 2011-01-05 2018-10-09 Bharat Biotech International Limited Combination heptavalent vaccine
GB201105981D0 (en) * 2011-04-08 2011-05-18 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel process
EP3400960A1 (en) * 2012-09-18 2018-11-14 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Outer membrane vesicles

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998000167A1 (en) * 1996-07-02 1998-01-08 Connaught Laboratories Limited Multivalent dtp-polio vaccines
WO2004039399A1 (en) * 2002-11-01 2004-05-13 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunogenic composition

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BEDFORD H. & ELLIMAN D.: "Misconceptions about the new combination vaccine", BRITISH MEDICAL JOURNAL, vol. 329, 2004, pages 411, 412, XP002463165, page 411, right-hand column, line 13 - line 15 *
DOI Y. ET AL.: "PROGRESS WITH INACTIVATED POLIOVIRUS VACCINES DERIVED FROM THE SABIN STRAINS", DEVELOPMENTS IN BIOLOGICALS, KARGER, BASEL, CH, vol. 105, 2001, pages 163-169, XP009040789, ISSN: 1424-6074, fig. 3 *
DRAGUNSKY E.M. ET AL.: "EVALUATION OF IMMUNOGENICITY AND PROTECTIVE PROPERTIES OF INACTIVATED POLIOVIRUS VACCINES: A NEW SURROGATE METHOD FOR PREDICTING VACCINE EFFICACY", JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, CHICAGO, IL, US, vol. 190, no. 8, 15 October 2004 (2004-10-15), pages 1404-1412, XP009040799, ISSN: 0022-1899, fig. 3, tab. 2 *
HERREMANS T.M.P.T. ET AL.: "Induction of mucosal immunity by inactivated poliovirus vaccine is dependent on previous mucosal contact with live virus", J. IMMUNOL., vol. 162, 1999, pages 511-5018, XP002463164, page 5012, left-hand column, line 11 - line 14 *

Also Published As

Publication number Publication date
MA30715B1 (fr) 2009-09-01
EA200900288A1 (ru) 2009-08-28
CR10669A (es) 2009-04-28
CR10672A (es) 2009-04-29
IL197272A (en) 2016-03-31
JP5814507B2 (ja) 2015-11-17
PT2066344E (pt) 2011-07-05
US8945582B2 (en) 2015-02-03
EP2066344B2 (en) 2016-06-29
PT2097102E (pt) 2012-08-03
BRPI0716518B1 (pt) 2020-05-19
KR20090057423A (ko) 2009-06-05
BRPI0716518A2 (pt) 2013-10-08
CA2662064A1 (en) 2008-03-13
PL2097102T3 (pl) 2012-10-31
IL197310A (en) 2012-04-30
MX2009002561A (es) 2009-03-20
EP2097102B1 (en) 2012-05-30
CO6160334A2 (es) 2010-05-20
EA200900289A1 (ru) 2009-08-28
MX2009002560A (es) 2009-03-20
NO20090897L (no) 2009-05-29
EP2066344B1 (en) 2011-06-01
BRPI0716519A2 (pt) 2013-10-08
CN103357003A (zh) 2013-10-23
WO2008028956A1 (en) 2008-03-13
AU2007293673A1 (en) 2008-03-13
AU2007293673B2 (en) 2013-06-27
CY1113419T1 (el) 2016-06-22
DK2066344T3 (da) 2011-09-05
HK1129563A1 (en) 2009-12-04
EP2491947A2 (en) 2012-08-29
NZ575272A (en) 2012-02-24
CA2662051A1 (en) 2008-03-13
JP2013256505A (ja) 2013-12-26
PL2066344T3 (pl) 2011-10-31
US8956625B2 (en) 2015-02-17
US20100034850A1 (en) 2010-02-11
NZ575273A (en) 2012-02-24
ES2387582T3 (es) 2012-09-26
JP2015028041A (ja) 2015-02-12
CN103585624A (zh) 2014-02-19
EA016417B1 (ru) 2012-04-30
SI2097102T1 (sl) 2012-09-28
JP2016020361A (ja) 2016-02-04
KR20090058552A (ko) 2009-06-09
EP2066344A1 (en) 2009-06-10
EP2491947A3 (en) 2012-10-17
CO6160335A2 (es) 2010-05-20
HRP20120557T1 (hr) 2012-07-31
IL197272A0 (en) 2011-08-01
AU2007293672B2 (en) 2013-06-27
BRPI0716518B8 (pt) 2021-05-25
ATE511398T1 (de) 2011-06-15
SI2066344T1 (sl) 2011-09-30
DK2097102T3 (da) 2012-07-30
MA30716B1 (fr) 2009-09-01
NO20090865L (no) 2009-05-29
US20150273047A1 (en) 2015-10-01
US20100040647A1 (en) 2010-02-18
AU2007293672A1 (en) 2008-03-13
EP2097102A2 (en) 2009-09-09
WO2008028957A3 (en) 2008-07-03
WO2008028957A2 (en) 2008-03-13
JP2010502679A (ja) 2010-01-28
CY1111680T1 (el) 2015-10-07
IL197310A0 (en) 2011-08-01
JP2010502678A (ja) 2010-01-28
HRP20110431T1 (hr) 2011-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA015964B1 (ru) Вакцина
JP4954056B2 (ja) 低用量のＨｉｂ結合体との組合せワクチン
RU2160120C2 (ru) Комбинированная вакцина на основе поверхностного антигена вируса гепатита в, способ ее получения и способ предупреждения инфекции гепатита в у человека
JP2016502994A (ja) ジフテリア及び／又は破傷風から防御するためのコンジュゲート
ES2365557T3 (es) Vacunas de combinación de poliovirus inactivado.
RU2287344C2 (ru) Комбинированная вакцина на основе поверхностного антигена вируса гепатита в, способ ее получения и способ предупреждения инфекции гепатита в у человека
DE HEMPTINNE et al. Patent 2662064 Summary
DE HEMPTINNE et al. Patent 2662051 Summary

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU