EA004804B1 - Применение доцетаксела для лечения печеночно-клеточного рака - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение основано на открытии того факта, что доцетаксел является значительно более активным в отношении клеток печеночно-клеточного рака, чем паклитаксел, в концентрациях до 1 мкМ. Соответственно, оно предлагает применение доцетаксела или его гидрата в производстве лекарственных средств для применения при лечении печеночно-клеточного рака.

Description

Настоящее изобретение относится к лечению печеночно-клеточного рака.

Печеночно-клеточный рак (или злокачественная гепатома) (НСС) является одним из наиболее распространенных видов рака в странах юго-восточной Азии и Африки. На Тайване НСС является главной причиной смерти пациентов мужского пола, имеющих злокачественные опухоли. Выживаемость пациентов с НСС очень мала. Это является, главным образом, следствием отсутствия эффективных способов лечения. Облучение и химиотерапия до настоящего времени не дают удовлетворительных результатов; оперативное или хирургическое вмешательство является наиболее эффективным лечением НСС. Однако хирургическое вмешательство подходит только пациентам с малыми операбельными опухолями.

В последнее время возобновился интерес к антимитотическим лекарственным средствам, таким как паклитаксел. Паклитаксел впервые был выделен из коры тиса. Противоопухолевое действие паклитаксела известно с 1971 г. Паклитаксел ингибирует деление опухолевых клеток, оказывая действие на сборку микротрубочек. Анализ ίη νίίτο с использованием опухолевых клеток показал, что паклитаксел подавляет клетки, главным образом, в фазе О2/М клеточного цикла (8с1иГГ РВ апб ΗοπνιΙζ 8В, Ргос. Ν;·ι11. Лсаб. 8с1. 77, 1561 - 1565, 1980). Недавние исследования показали, что паклитаксел эффективен в отношении клеток различных злокачественных опухолей, таких как опухоль головного мозга, рак желудка и предстательной железы, рак молочной железы, меланома и рак яичников.

Однако, паклитаксел неэффективен в отношении печеночно-клеточного рака. В ΒτίίίδΕ 1оигпа1 оГ Сапсег, 78 (1), 34-39, 1998, сообщается о II фазе клинических испытаний паклитаксела на пациентах с НСС. В этой статье сделан вывод о том, что паклитаксел не оказывает противоопухолевого действия у пациентов с НСС.

Как объяснялось выше, обнаружено было, что цитотоксический эффект паклитаксела зависит от клеточного цикла; причем, он подавляет клеточный цикл, главным образом, на фазе О2/М. Однако в настоящее время установлено, что доцетаксел может достигать цитотоксического эффекта в отношении клеток НСС, независимо от клеточного цикла. Это указывает на то, что цитотоксический эффект доцетаксела в отношении клеток НСС достигается с помощью механизма, отличного от механизма действия паклитаксела. Кроме того, активность доцетаксела в отношении клеток НСС ίη νίίτο значительно выше активности паклитаксела в концентрациях до 1 мкМ. Учитывая высоко цитотоксическую природу таксоидов, повышенная активность при низкой концентрации наводит на мысль о том, что доцетаксел, в отличие от паклитаксела, найдет практическое применение в клинической практике для лечения печеночноклеточного рака.

Соответственно, настоящее изобретение предлагает применение доцетаксела или его гидрата в производстве лекарственных средств для использования при лечении печеночноклеточного рака.

Настоящее изобретение предоставляет также способ лечения пациентов, страдающих печеночно-клеточным раком, который включает введение пациенту эффективного количества доцетаксела или его гидрата. Настоящее изобретение предоставляет также способ улучшения состояния пациента, страдающего печеночноклеточным раком, который включает введение указанному пациенту эффективного количества доцетаксела или его гидрата.

Доцетаксел представляет известное соединение. Его формула

Способы получения доцетаксела описаны в ЕР-А-253738 и ЕР-А-336841.

Доцетаксел можно применять, например, в безводной форме или в форме гидрата. В настоящем документе ссылки на доцетаксел включают ссылки на его гидраты.

Гидраты доцетаксела можно получать растворением безводного доцетаксела в органическом растворителе, таком как ацетон, этанол, ацетонитрил или Ν,Ν-диметилформамид, и перекристаллизацией гидрата доцетаксела добавлением полученного таким способом раствора к воде. Гидрат доцетаксела обычно представляет собой дигидрат, тригидрат или тетрагидрат. В частности, было найдено, что тригидрат является особенно стабильным, и тригидрат доцетаксела, соответственно, является предпочтительным. Тригидрат доцетаксела можно получить с помощью способов, описанных в ЕР-А-770070.

Доцетаксел оказался неожиданно активным в отношении печеночно-клеточных раков. В частности, его можно использовать для лечения печеночно-клеточных раков, фиброламеллярных вариантов и смешанных печеночноклеточных холангиокарцином.

Согласно настоящему изобретению доцетаксел можно вводить любым обычным путем, известным для введения доцетаксела. Так, его можно, например, вводить парентерально. Обычно его вводят внутривенно, предпочтительно внутривенной инфузией.

В настоящем изобретении доцетаксел обычно изготавливают в виде готовой формы фармацевтически приемлемой композиции, содержащей доцетаксел и фармацевтически при3 емлемый носитель или разбавитель. Подходящие носители и разбавители включают нетоксичные растворители и суспензионные среды, например стерильные водные среды. Предпочтительно композициям придают форму водных растворов или суспензий, например растворов, подходящих для инъекции или инфузии, которые могут содержать эмульгирующие агенты, красящие агенты, консерванты или стабилизаторы.

Фармацевтические композиции, подходящие для парентерального введения, включают стерильные водные или неводные растворы или суспензии. Подходящие стерильные неводные растворы и суспензии включают растворы и суспензии в природных растительных маслах, таких как оливковое масло, кунжутное масло или жидкая нефть, или в инъецируемых органических сложных эфирах, таких как этилолеат. Подходящие стерильные водные растворы включают растворы доцетаксела в воде. Обычно рН стерильных водных растворов, подходящих для парентерального введения, устанавливают соответствующим образом. Далее, таким стерильным водным растворам обычно придают изотоничность, например, с помощью достаточного количества хлорида натрия или глюкозы. Особенно предпочтительно, чтобы растворы, подходящие для введения путем инфузии, имели величину рН, сходную с рН крови, и были изотоническими.

Стерилизацию можно осуществлять нагреванием или любыми другими средствами, которые не оказывают неблагоприятного действия на композицию.

Фармацевтические композиции, содержащие доцетаксел, подходящие для применения по настоящему изобретению, могут дополнительно включать поверхностно-активный агент. Предпочтительными поверхностно-активными агентами являются полисорбаты, полиоксиэтиленгликолевые сложные эфиры и сложные простые эфиры полиэтиленгликоля и касторовых масел. Примеры подходящих поверхностно-активных агентов и фармацевтических композиций, содержащих поверхностно-активные агенты, можно найти в Аи-А-666859.

Доцетаксел можно также изготавливать для применения по настоящему изобретению в виде лиофилизованной композиции. Такие лиофилизованные композиции имеют хорошую физическую и химическую стабильность и могут, следовательно, храниться в течение длительных периодов времени. Лиофилизованные композиции, содержащие доцетаксел, можно получать лиофилизацией водного раствора доцетаксела с помощью обычных приемов. Они могут дополнительно включать агенты, придающие массу, такие как лактоза. Они могут также включать агенты, корригирующие тоничность, такие как сахара и полимеры. Примеры подходящих агентов, корригирующих тоничность, включают глюкозу, декстрозу и маннит, а также полимеры, например поливинилпирролидон.

Лиофилизованную композицию можно повторно растворять перед употреблением в любой совместимой и фармацевтически приемлемой инъецируемой среде. Лиофилизат можно преимущественно брать в дважды дистиллированную воду для инъекций в объеме, эквивалентном первоначальному объему лиофилизуемого раствора.

Фармацевтическая композиция, содержащая доцетаксел, подходящая для применения по настоящему изобретению, обычно содержит по меньшей мере 0,01 мас.% терапевтически активного продукта. Обычно фармацевтическая композиция содержит от 0,01 до 1000 мг, предпочтительно от 0,1 до 500 мг терапевтически активного продукта.

Предпочтительно раствор, подходящий для внутривенной инъекции, содержит от 38 до 42, более предпочтительно около 40 мг/мл активного продукта. Обычно такие растворы помещают во флаконы с содержанием 20 или 80 мг активного продукта.

Предпочтительно раствор, подходящий для инфузии, содержит от 0,1 до 11, предпочтительно от 0,1 до 10, более предпочтительно от 0,3 до 0,9 мг/мл активного продукта.

Лечение доцетакселом согласно настоящему изобретению можно осуществлять одновременно с другими видами лечения, включая лечение другими антинеопластическими лекарственными средствами, моноклональными антителами, иммунной терапией или облучением или модификаторами биологического ответа. Подходящие модификаторы биологического ответа включают лимфокины и цитокины, такие как интерлейкины, интерфероны (α, β или δ) и ΤΝΕ (факторы некроза опухолей). Другие химиотерапевтические агенты, которые полезны для лечения заболеваний, являющихся следствием патологической пролиферации клеток, включают алкилирующие агенты, например, азотистые горчичные соединения, такие как мехлорэтамин, циклофосфамид, мелфалан и хлорамбуцил, алкилсульфонаты, такие как бусульфан, нитрозомочевины, такие как кармустин, ломустин, семустин и стрептозоцин, триазены, такие как дакарбазин, антиметаболиты, такие как аналоги фолиевой кислоты, например, метотрексат, аналоги пиримидина, такие как фторурацил и цитарабин, аналоги пурина, такие как меркаптопурин и тиогуанин, природные продукты, например, алкалоиды ушеа, такие как винбластин, винкристин и виндезин, эпиподофиллотоксины, такие как этопозид и тенипозид, антибиотики, такие как дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, блеомицин, пликамицин и митомицин, ферменты, такие как Ьаспарагиназа, различные агенты, такие как координационные комплексы платины, например, цисплатин, замещенные мочевины, такие как гидроксимочевина, производные метилгидразина, такие как прокарбазин, адренокортикальные супрессанты, такие как митотан и аминоглютетимид, гормоны и антагонисты, такие как адренокортикостероиды, такие как преднизон, прогестины, такие как капроат гидроксипрогестерона, ацетат метоксипрогестерона и ацетат мегестрола, эстрогены, такие как диэтилстильбэстрол и этинилэстрадиол, антиэстрогены, такие как тамоксифен, и андрогены, такие как пропионат тестерона и флюоксиместерон.

Одновременное лечение циклофосфамидом, 5-фторурацилом, этопозидом, винорелбином или метотрексатом является предпочтительным, поскольку между этими соединениями и доцетакселом может достигаться синергизм. Кроме того, 2-метоксиэстрадиол является активным в отношении печеночно-клеточных раков, и, было найдено, что он хорошо переносится мышами при ежедневном введении в течение 1 месяца (К1аиЬет с1 а1., Сапсег Кезеатсй, 57, 8186, 1997). Одновременное лечение 2метоксиэстрадиолом поэтому также является предпочтительным, особенно, когда требуется постоянное лечение.

В настоящем изобретении доцетаксел вводят при дозировке, которая обеспечивает лечение печеночно-клеточного рака. Дозировка варьирует в зависимости от пути введения и физических характеристик пациента. Подходящие дозы включают дозы, которые являются терапевтически эффективными для лечения заболеваний, являющихся следствием аномальной пролиферации клеток. Доцетаксел можно вводить с частотой, необходимой для получения желаемого терапевтического эффекта.

Обычная доза доцетаксела для лечения людей составляет от 50 до 150, предпочтительно 60-100, более предпочтительно около 100 мг доцетаксела/м² поверхности кожи пациента. Когда доцетаксел вводят с помощью инфузии, скорость инфузии обычно составляет от 1 до 200, предпочтительно около 100 мг/м² доцетаксела в час.

Указанную выше дозу можно при необходимости повторять.

Обычно ее повторяют ежедневно или еженедельно. Предпочтительно ее повторяют каждые 3 недели. Например, доцетаксел можно вводить в дозе около 100 мг/м² в виде внутривенной инфузии на протяжении 1 ч каждые 3 недели.

Следующий пример иллюстрирует настоящее изобретение.

Пример

Материалы и методы

Если не указано иное, используемые методы являются стандартными биохимическими приемами. Используемые клеточные линии все имеются в продаже.

Культура клеток.

В экспериментах, подробно описанных ниже, используются клеточные линии гепатомы человека Нер3В (номер в АТСС НВ 8064), НерС2 (номер в АТСС НВ 8065) и НА22Т/УСН и клеточная линия гепатомы мышей Нера 1-6. Данные клетки культивировали в ΌΜΕΜ (С1ВСО, ВКЬ), содержащей 10% плодной бычьей сыворотки (Нус1опе), 0,01 мг/мл гентамицина и 0,1 мМ аминокислоты, не являющейся незаменимой. Клетки выращивали в инкубаторе в атмосфере СО₂ 5% при 37°С и 95% фильтрованном воздухе.

Обработка лекарственным средством.

В экспериментах, подробно описанных ниже, указанные выше клетки гепатомы обрабатывали различными концентрациями паклитаксела (0,001-10 мкМ) и доцетаксела (0,001-10 мкМ) в течение 24 и 72 ч. Паклитаксел растворяли в диметилсульфоксиде (ΌΜ8Ο), а доцетаксел растворяли в этаноле в качестве основных растворов. Конечная концентрация носителя составляла менее 0,1%.

Изучение жизнеспособности клеток: исследование МТТ.

Клетки культивировали в 96-луночном планшете для культивирования клеток (СО8ТАК) при плотности 4 х 10⁴ клеток/мл. После обработки лекарственным средством в течение 24 или 72 ч среду отбрасывали и заменяли равным объемом (100 мкл) свежей среды, содержащей МТТ (0,456 мг/мл; бромид 3-[4,5диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия) и инкубировали в течение 1,5 ч при 37°С. Свежую среду затем удаляли и добавляли 100 мкл ΌΜ8Ο. Жизнеспособность клеток определяли колориметрическим сравнением путем считывания величин ОП с ридера-микропланшет (8РЕСТКА ΜΑΧ 250) с длиной волны поглощения 570 нм.

Результаты представлены на фиг. 1, на которой закрашенные кружки представляют данные после обработки в течение 24 ч, а незакрашенные кружки представляют данные после обработки в течение 72 ч. Данные представляют среднюю величину ± стандартная ошибка средней величины от двух повторностей трех независимых экспериментов.

Анализ вытеснения йодида пропидия (Р1).

Клетки выращивали в колбах 5 см² (ί.ΌΒΝΙΝΟ) и обрабатывали паклитакселом и доцетакселом, как описано выше. Затем добавляли йодид пропидия (10 мкг/мл) и инкубировали в течение 15 мин при 37°С. Затем перед сбором прилипших клеток среду собирали. Собирали как суспендированные, так и прилипшие клетки и ресуспендировали их в 500 мкл РВ8 для анализа проточной цитометрии, как описано ниже. Сигналы дебриса удаляли отсечением сигналов Е8С-88С.

Ί

Анализ содержания ДНК с помощью проточной цитометрии.

Лизирующий буфер (0,5% Тгйои Х-100, 0,2 мкг/мл №1₂ЕЭТЛ-2Н₂О и 1% альбумин бычьей сыворотки в РВ8) добавляли к клеточным осадкам, которые затем оставляли на льду на 15 мин. Затем к смеси добавляли 100% метанол, предварительно охлажденный до -20°С, после чего центрифугировали при 300 хд в течение 5 мин. Надосадочную жидкость сливали, а клеточный осадок промывали РВ8. Промытый осадок окрашивали раствором для окрашивания ДНК (50 мкг/мл йодида пропидия и 5 килоединиц/мл РНКазы А) в течение 30 мин при 4°С в темноте. Содержание ДНК каждой клетки измеряли с использованием проточного цитометра Вес!ои Эюктзоп ЕАС8Са11Ьиг, как описано ниже.

Проточная цитометрия.

Клетки (10000) анализировали на проточном цитометре Вески Эюктзоп ЕЛСЗСайЬиг, с использованием аргон-ионного лазера (15 мВт) с падающим лучом при 488 нм. Для анализа вытеснения Р1 красную флуоресценцию собирали через фильтр 585 нм и сигналы дебриса удаляли отсечением сигналов Е8С-88С. Данные собирали и анализировали с использованием программы ЕАСЗ/СЕЬЬРиез! на компьютере Ро\\'ег Масшкзй 7600/120. Апоптотические клетки и клетки на конкретных фазах клеточного цикла определяли с помощью программы МобЕй ЬТ.

Результаты проточной цитометрии представлены в табл. 1 и 2 и на фиг. 2. Табл. 1 дает величины проницаемости клеточной мембраны клеток гепатомы после обработки паклитакселом и доцетакселом. Табл. 2 подробно дает процентное содержание апоптотических клеток (суб-60/61), обнаруженных после обработки паклитакселом и доцетакселом. Фиг. 2 показывает гистографический анализ ДНК, детализирующий влияние паклитаксела и доцетаксела на прогресс клеточного цикла.

Таблица 1 Проницаемость клеточной мембраны клеток гепатомы после обработки паклитакселом и доцетакселом

Данные представляют среднюю величину ± стандартная ошибка средней величины от двух повторностей по меньшей мере трех независимых экспериментов. Клетки обрабатывали лекарственными средствами в течение 24-72 ч, а проницаемость мембран измеряли с помощью проточноцитометрического анализа вытеснения пропидия в жизнеспособных гепатомных клетках. Данные представляют процентное содержание клеток с интактной клеточной мембраной по сравнению с контролем.

Таблица 2

Апоптоз, индуцированный паклитакселом и доцетакселом

Числа представляют % апоптотических клеток (суб-60/61) по результатам определения с помощью проточной цитометрии.

Оценка фрагментации ДНК с помощью электрофореза.

Оценку фрагментации ДНК осуществляли по методу Негтапп е! а1., Ыис1е1с Ас1бз Кез., 22, 5506-5507, 1994.

Вкратце, на клетки НЕР 62 (2 х 10⁷) обрабатывали в течение 72 ч паклитакселом и доцетакселом, как описано выше, и центрифугировали. Полученные таким способом клеточные осадки ресуспендировали в буфере для лизиса ΝΡ-40 (1% ΝΡ-40 в 20 мМ ЕЭТА. 50 мМ ТрисНС1, рН 7,5). После лизиса клеток в течение нескольких секунд собирали надосадочные жидкости (5 минут при 1600 хд). Экстракцию повторяли с тем же самым буфером для лизиса. К надосадочным жидкостям добавляли 8Ό8 (конечная концентрация 1%) и РНКазу (конечная концентрация 2,5 мкг/мкл) и инкубировали в течение 2 ч при 56°С, после чего расщепляли протеиназой К (2,5 мкг/мкл) в течение 2 ч при 37°С. Затем смеси добавляли к 10М ацетату аммония перед 100% осаждением этанолом в течение 30 мин при -20°С. ДНК собирали центрифугированием (10 мин при 12000 хд) с последующим электрофорезом на 1,5% агарозном геле.

Результаты представлены на фиг. 3. На фиг. 3 М означает маркер 100 пар оснований. Полоса 1 показывает контроль среды. Полосы 2 и 3 показывают средние группы обработки паклитакселом (0,1 и 1 мкМ). Полосы 4 и 5 показывают средние группы обработки доцетакселом (0,1 и 1 мкМ).

Результаты

Изучение жизнеспособности клеток.

Фиг. 1 показывает дозозависимое влияние паклитаксела и доцетаксела на жизнеспособность клеток клеточных линий гепатомы (Нер 62, Нер 3В, НЛ22Т/У6Н и Нера 1-6) . Как видно из фиг. 1, почти в каждом случае доцетаксел достигал пониженной жизнеспособности при 0,01 и 0,1 мкМ.

В случае клеток Нер 62 после обработки паклитакселом или доцетакселом жизнеспособность клеток показала тенденцию к снижению. Жизнеспособность клеток Нер 62 составляла 61,81 и 39,45% от контроля для групп паклитаксела (10 мкМ) через 24 и 72 ч соответственно. В случае клеток Нер 62, обработанных доцетакселом, максимальное снижение жизнеспособности наблюдалось при 1 мкМ доцетаксела, а при 10 мкМ доцетаксела никакого дальнейшего снижения жизнеспособности не наблюдалось. Жизнеспособность составляла 65,03 и 48,99% для клеток, обработанных 1 мкМ доцетакселом в течение 24 и 72 ч соответственно.

Заслуживает внимание тот факт, что в случае клеток Нер 3В значительное снижение жизнеспособности (37,06%) наблюдалось после обработки 0,01 мкМ доцетакселом в течение 72 ч.

В случае клеток Нера 1-6, обработанных доцетакселом, максимальная цитотоксичность (65,34 и 30,71%) наблюдалась в группах, обработанных 1 мкМ доцетакселом в течение 24 и 72 ч соответственно.

Анализ вытеснения йодида пропидия (ΡΙ).

Табл. 1 показывает, что проницаемость мембраны клеток Нер 62 и Нер 3В после обработки паклитакселом и доцетакселом зависела от дозы и времени.

В случае клеток НЛ22Т/У6Н после обработки паклитакселом (0,01-1 мкМ) в течение 72 ч по сравнению с группами доцетаксела наблюдалось меньшее увеличение проницаемости мембран. Примечательно, что после обработки 0,01 мкМ доцетакселом в течение 72 ч только 55,44% клеток имели интактные мембраны, тогда как после той же дозы паклитаксела интактные мембраны имели 92,58% обработанных клеток.

Анализ клеточного цикла.

Фиг. 2 показывает, что обработка клеток Нер 62 в течение 24 ч 1 мкМ паклитакселом приводит к явному подавлению на фазе 62/М. Сходные ДНК гистограммы наблюдались через 72 ч после воздействия.

Как показано в табл. 2, апоптотические клетки (суб-60/61) были обнаружены после обработки 0,001, 0,01, 0,1 и 1 мкМ доцетакселом в течение 24 ч с процентными степенями апоптоза 31,02, 45,24, 38,77 и 28,33% соответственно. Через 72 ч после обработки доцетакселом (0,001-1 мкМ) процент апоптотических клеток составлял 21,92, 42,45, 42,44 и 56,66% соответственно.

В случае клеток Нер 3В, обработка 0,1 или 1 мкМ паклитакселом в течение 24 ч приводила к подавлению на фазе 62/М, а инкубация с 0,1 или 1 мкМ паклитакселом в течение 72 ч приводила к увеличению процентных количеств суб60/61 до 38,37 или 47,01% соответственно. Напротив, клетки Нер 3В, обработанные 0,01, 0,1 или 1 мкМ доцетакселом в течение 24 или 72 ч, имели более высокий процент популяций суб60/61 59,14, 58,69 и 65,74% в случае 24часового воздействия и 64,12, 81,66 и 79,33% в случае 72-часового воздействия.

В случае клеток НЛ22Т/У6Н возрастающие концентрации паклитаксела (от 0,001 до 1 мкМ) коррелировали с увеличением процента клеток 62/М при 24-часовой обработке. В группах с обработкой 0,1 или 1 мкМ паклитакселом в течение 72 ч никакой значительной популяции суб-60/61 не наблюдалось. Напротив, достоверно установлено, что клетки НЛ22Т/У6Н, обработанные 0,01 мкМ доцетакселом в течение 24 ч, имели более высокое процентное содержание суб-60/61 (41,75%), чем при обработке 0,1 мкМ (18,61%) или 1 мкМ (22,94%) доцетакселом. Когда клетки обрабатывали доцетакселом в течение 72 ч, были обнаружены значительные процентные доли суб-60/61 в клетках НЛ22Т/У6Н, обработанных 0,01 мкМ (56,64%), 0,1 мкМ (58,61%) и 1 мкМ (60,98%) доцетакселом.

В случае клеток Нера 1-6 обработка паклитакселом (0,01, 0,1 или 1 мкМ) в течение 24 ч приводила к повышенному образованию популяций суб-60/61 (24,02, 55,64 или 64,38% соответственно), а подавление на фазе 62/М наблюдалась в группах с обработкой 0,1 и 1 мкМ паклитакселом. Когда клетки Нера 1-6 обрабатывали 0,1 и 1 мкМ паклитакселом в течение 72 ч, большинство клеток погибало, и никакого явного профиля клеточного цикла не наблюдалось. Обработка доцетакселом (0,01, 0,1 и 1 мкМ) клеток Нера 1-6 приводила к образованию клеток суб-60/61 (52,81, 50,76 и 53,8% в случае 24часового воздействия и 31,25, 53,95 и 62,49% в случае 72-часового воздействия соответственно).

Анализ фрагментации ДНК.

Фиг. 3 показывает, что обработка паклитакселом (0,1 и 1 мкМ) и доцетакселом (0,1 и 1 мкМ) индуцировала фрагментацию ДНК в клетках Нер 62.

Claims (5)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Применение доцетаксела или его гидрата в качестве активного ингредиента для производства лекарственного средства для лечения печеночно-клеточного рака.
2. 2. Применение по п.1, где гидратом является тригидрат.
3. 3. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство предназначено для парентерального введения.
4. 4. Применение по п.3, где лекарственное средство предназначено для интраперитонеального, подкожного, внутривенного, внутримы шечного или интрастернального введения и содержит от 38 до 42 мг/мл активного соединения.
5. 5. Применение по п.3, где лекарственное средство предназначено для введения путем инфузии и содержит от 0,1 до 11 мг/мл активного соединения.

   ·<< ¹²⁰ N ⁶⁰ ’ 30 X: г • 30 нер ег 120 ...к. ³° ж 120 V* θο° . . . ³⁹ ’^⁼^· Нер ЗВ •I . 120 £ 30 60 • 30 ΗΑ22ΤΛ/ΘΗ 120 г 30 ж. 120 ν* θθ V** 30 'ТХ' Нера1-6