DK165220B - Liposomsammensaetninger indeholdende syntetiske phospholipider og et farmaceutisk aktivt stof samt deres fremstilling og phospholipidblanding til fremstilling af sammensaetningerne - Google Patents
Liposomsammensaetninger indeholdende syntetiske phospholipider og et farmaceutisk aktivt stof samt deres fremstilling og phospholipidblanding til fremstilling af sammensaetningerne Download PDFInfo
- Publication number
- DK165220B DK165220B DK471085A DK471085A DK165220B DK 165220 B DK165220 B DK 165220B DK 471085 A DK471085 A DK 471085A DK 471085 A DK471085 A DK 471085A DK 165220 B DK165220 B DK 165220B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- cis
- synthetic
- weight
- octadecenoyl
- liposomes
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/829—Liposomes, e.g. encapsulation
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
- Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
- Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
i
DK 165220B
Den foreliggende opfindelse angår farmaceutiske sammensætninger, som indeholder syntetiske phospholipider med en renhed på over 90 vægt-% og et farmaceutisk aktivt stof, blandinger af syntetiske phospholipider med en renhed på over 90 vægt-% og 5 fremgangsmåder til fremstilling af disse farmaceutiske sammensætninger .
De farmaceutiske sammensætninger ifølge opfindelsen anvendes i form af liposomer i vandige dispersioner.
Liposomer er beskrevet talrige steder i litteraturen. Der lp er foretaget mange undersøgelser over deres opbygning og anvendelse. Man skelner mellemunilamellare liposomer med et dobbeltlag af lipider og multilamellare liposomer med flere dobbeltlag af lipider, der er opbygget som skaller i et løg.
15 Til den farmaceutiske anvendelse egner sig især liposomer med en population af mest muligt homogen størrelse og en “8 * —6 diameter på fra ca. 2,0 x 10 til 5,0 x 10 m, fortrins- —8 —β vis fra ca. 2,0 x 10 til ca. 3,0 x 10 m. Det kugleformede hylster består af et eller flere dobbeltlag af lipid-20 komponenterne, f.eks. amphipatiske lipider, f.eks.
phospholipider, såsom lecithin, kephalin eller phosphatid-syre, og eventuelt neutrale lipider, f.eks. cholesterol.
Disse dobbeltlag omslutter et indre rum, som indeholder den vandige fase med en forbindelse, som skal indesluttes, 25 idet forbindelsen, som skal indesluttes, kan forekomme i den vandige fase og/eller i dobbeltlaget afhængigt af forbindelsens struktur og andre parametre, såsom temperatur eller koncentration.
Der er stor interesse for den terapeutiske anvendelse af 30 liposomer som bærestoffer for aktive stoffer af forskellig art. Det er således kendt at anvende liposomer som bærestoffer for proteiner, f.eks. antistoffer eller enzymer, hormoner, vitaminer eller gener eller til analytiske formål som bærer af mærkede forbindelser.
DK 165220 B
2
Farmaceutiske indgiftssystemer på liposombasis er beskrevet i oversigtsværket af G. Gregoriadis (udgiver) Liposome Technology, Vol. II, Incorporation of Drugs, Proteins and Genetic Material, CRC Press 1984. I oversigtsværket af 5 C.G. Knight (udgiver), Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic Applications, Elsevier 1981, er der i kapitel 16 på side 166 foretaget en sammenfatning af fordelene ved en farmaceutisk indgiftsform på liposombasis: 1. Liposomer trænger gennem biologiske membraner og letter 10 transporten af aktive stoffer gennem sædvanligvis uigennemtrængelige barrierer. Især letter liposomerne den intracel-lulære gennemtrængning med en indkapslet forbindelse.
2. Liposomer kan anvendes med henblik på målrettet vekselvirkning med bestemte cellevævsarter, forøget selektivitet 15 og formindsket toksicitet.
3. Et aktivt stofs farmakokinetik kan påvirkes fordelagtigt ved hjælp af liposomer, f.eks. ved ændring af frigørelsen, fordelingen og fjernelsen fra den systemiske cirkulation.
4. Følsomme aktive stoffer beskyttes mod ændringer som føl-20 ge af kemisk indflydelse og metabolisme ved hjælp af liposomer inden deaktiveringen.
5. Ved stimulering af immunreaktioner på liposomindkapslede antigener kan der opnås iromunmodulatoriske virkninger.
Som følge deraf opnås andre fordele ved liposomanvendelsen, 25 såsom en mindre mængde aktivt stof til opnåelse af en terapeutisk effekt i forhold til anvendelse af det fri aktive stof samt længere intervaller mellem indgivelsen af det aktive stof.
Indgiftssystemer på liposombasis er særligt fordelagtige 30 til indføring af stoffer i endocyterende celler, især
DK 165220B
3 retikuloendothelialsystemet. Således iagttages eksempelvis en lettelse af transporten af antibiotika i endocyterende celler og en forøget bekæmpelse af sygdomsfremkalderen i disse celler. Endocyterende celler indgår også i 5 betændelsesprocesserne. Man iagttager en hurtigere indføring af liposomindkapslede antirheumatiske aktive stoffer i sådanne celler end i det omliggende væv. Zytostatika indkapslet i form af liposomer kan indføres i de specifikke organer i retikuloendothelialsystemet (lever, milt, knogle-10 marv),eller der kan i lungerne som følge af filtrering i lungekapillærerne og efterfølgende transport med udtrængte blodmonocyter ske en opkoncentrering af aktive stoffer i alveolære makrofager, og dermed en forbedring af virkningen på lunge- eller levertumorer under samtidig opnåelse af 15 en formindskelse af toksiciteten.
Liposomer med indkapslede immunmodulatorer kan fremkalde en målrettet ændring af immunsystemets reaktion (immun-stimulation, immunsuppression).Således har G. Poste et al. konstateret en aktivering af tumoricide egenskaber hos 20 musemakrofager ved hjælp af liposomindkapslede lymphokiner, jævnfør Cancer Research 39, 881 (1979). Endvidere har man iagttaget en in-vitro aktivering af tumoricide egenskaber i alveolære makrofager fra rotter ved hjælp af syntetiske muramyldipeptider indkapslet i liposomer, jævnfør S. Sone 25 og I.J. Fidler, Cell. Immunol. .57, 42 (1981) .
Liposomer med immunmodulatorer, f.eks. muramyldi- og muramyl-tripeptider, humant gamma-interferon eller makrofagaktiverende faktor (MAF), er egnede til aktivering af det cellulære immunsystem, f.eks. cellerne i det monocytære system, f.eks.
30 blodmonocyter eller de alveolære eller peritoneale makrofager, til bekæmpelse af infektioner, især virusinfektioner,og til bekæmpelse af tumorceller i primære tumorvæv i blod og lymfe, samt af metastaser.
Det hidtil anvendte naturlige materiale til fremstilling af 35 liposomer, f.eks. naturlige phospholipider, f.eks. æg-
DK 165220B
4 -* phosphatidsyre, æg- eller sojalecithin eller æg- eller soja-kephalin samt phosphatidylserin fra oksehjerne, er en blanding af phosphoglycerider med acylrester af forskelligartet struktur, selv om dette materiale foreligger i renset form 5 og ifølge tyndt lagskroma tograf i og papirkromatografi er ét stof. Tørpræparater med naturlige phospholipider er termo-labile og kun holdbare i kort tid, og naturlige phospholipider i vandig fase er ligeledes ustabile, således at holdbarheden af vandige liposomblandinger ligeledes kun er be-10 grænset.
Som følge af den vekslende sammensætning af liposomblandin-gerne fra naturlige phospholipider, ringe udbytter, forskellig størrelsesfordeling og ringe stabilitet har in-vitro-og in-vivo-forsøgsresultaterne samt de kliniske resultater 15 ikke den nødvendige reproducerbarhed, hvilket hidtil har hæmmet den industrielle anvendelse af denne indgiftsform, som har været kendt i længere tid og været genstand for intensive undersøgelser.
I beskrivelsen til EP-patentansøgning nr. S8.046 omtales en 20 fremgangsmåde til fremstilling af unilamellare liposomer under anvendelse af naturlige og syntetiske phospholipider. Det fremgår imidlertid af eksemplerne, at størrelsesfordelingen for de fremstillede liposomer er meget forskellig og varierer med flere tierpotenser. Der opnås således fraktioner med små 25 liposomer i størrelsesområdet fra 2,0·10"8 til l,0*10“7m og store liposomer i størrelsesområdet op til 5,0·10-¾ og forskellige mængdefordelinger
Det er formålet med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe farmaceutiske sammensætninger, som i vandig fase dan-30 ner liposomdispersioner med ensartet størrelsesfordeling og høj stabilitet.
De farmaceutiske sammensætninger ifølge opfindelsen er ejendommelige ved, at de indeholder a) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% 35 med formlen
DK 165220B
5 snll CHa-O-Rj 2 Ra-0-όΗ 0 (S) 0 3 CH2-0~|-O-(CnH2n)-gj-C-0H Y (I) hvori R^ og hver for sig betyder <-'2Q_2Q”al*:enoyl me<^ et lige antal carbonatomer, n er et helt tal på 1-3, og Y® er kationen af en farmaceutisk acceptabel base, 5 b) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og med formlen sn 1 CHa-O-Rx
2 Ra-O-iH 0 A
3 1^-|e°-(cnK2n)-\\ di)
C
hvori R^ betyder ^0-20-51^3110^1 med et antal carbon- atomer, R2 betyder C^Q_2Q-alkenoyl med et lige antal carbon-10 atomer, Ra, R^ og Rc betyder hydrogen eller C1_4~alkyl, og n er et helt tal på 2-4, c) et stof eller en stofblanding med biologisk virkning og eventuelt en bærevæske og/eller yderligere faste bærematerialer.
De ovenfor og i det følgende anvendte almene begreber har 15 indenfor rammerne af den foreliggende opfindelse fortrinsvis følgende betydninger:
Udtrykket "lav" anvendt i sammenhæng med organiske grupper, f.eks. lavalkyl, lavalkylen, lavalkoxy og lavalkanoyl, betyder, at disse organiske grupper indeholder højst 7, for-20 trinsvis højst 4 carbonatomer, medmindre andet udtrykkeligt er anført.
Nomenklaturen for phospholipiderne med formlerne I og II følger rekommendationen i Eur. J. of Biochem. 79, 11-21 (1977) "Nomenclature of Lipids" fra IUPAC-IUB Kommissionen 25 vedrørende biokemisk nomenklatur (CBN) (sn-nomenklatur, stereospecifik nummerering).
DK 165220B
6
For de farmaceutisk aktive stoffer anvendes de af verdenssundhedsorganisationen (WHO) anbefalede frinavne (Recommended International Non-proprietary Names) , som er anført i standardværket "Pharmazeutische Chemie" (E. Schroder, C. Rufer og R. Schmiechen, Thieme Verlag Stuttgart, 1982) samt i Merck-Index (tiende udgave).
De anvendte syntetiske phospholipiders renhed er som nævnt mere end 90 vægtprocent, fortrinsvis mere end 95 vægtprocent.
I et syntetisk phospholipid med formlen I er R^ og R2 med 10 betydningen " C-^ g _ 2 g-alkenOy 1 med et lige antal carbonatomer" fortrinsvis 9-cis-dodecenoyl, 9-cis-tetradecenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 6-cis-octadecenoyl, 6-trans-octadecenoyl, 9-cis-octadecenoyl, 9-trans-octadecenoyl, 11-cis-octa-decenoyl eller 9-cis-icosenoyl.
Φ 15 Kationen Y af en farmaceutisk acceptabel base er eksempelvis en alkalimetalion, f.eks. en lithium-, natrium- eller kaliumion, en ammoniumion, en mono-, di- eller tri-C^_^-alkylammoniumion, f.eks. en trimethyl-, ethyl-, diethyl-eller triethylammoniumion, en 2-hydroxyethyl-tri-C.^-20 alkylammoniumion, f.eks. en cholinkation eller en 2-hydroxy-ethylammoniumion, samt kationen af en basisk aminosyre, f.eks. lysin eller arginin.
Y er fortrinsvis en natriumion.
I et syntetisk phospholipid med formlen I er R^ og R2 for-25 trinsvis ens og betyder 9-cis-dodecenoyl, 9-cis-tetradecenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 9-cis-octadecenoyl eller Φ 9-cis-icosenoyl, n er 1 og Y er en natriumion.
Et syntetisk phospholipid med formlen I er i første række natrium-1,2-di- (9-cis-octadecenoyl) -3-sn-phosphatidyl- (S) -30 serin. 1 et syntetisk phospholipid med formlen II er R^ med betydningen "C^Q_2Q-alkanoyl med et lige antal carbonatomer" fortrinsvis n-dodecanoyl, n-tetradecanoyl, n-hexadecanoyl,
DK 165220B
7 I et syntetisk phospholipid med formlen II har de ovenfor under formlen I anførte betydninger.
I et syntetisk phospholipid med formlen II er gruppen med formlen “(cnH2n)“ uforgrenet eller forgrenet alkylen, f.eks.
5 1,1-ethylen, 1,1-, 1,2- eller 1,3-propylen eller 1,2-, 1,3-eller 1,4-butylen eller fortrinsvis 1,2-ethylen (n=2).
I et syntetisk phospholipid med formlen II betyder R^ fortrinsvis n-dodecanoyl, n-tetradecanoyl, n-hexadecanoyl eller n-octadecanoyl, R2 betyder 9-cis-dodecenoyl, 9-cis-tetra-10 decenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 9-cis-octadecenoyl eller 9-cis-icosenoyl, R , R, og R betyder methyl, og n er 2.
cl JD C
Et syntetisk phospholipid med formlen II er i første række l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidyl-cholin.
15 For acylgrupperne R^ og R2 i phospholipiderne med formlerne I og II anvendes almindeligvis de i parentes anførte betegnelser: 9-cis-dodecenoyl (lauroleoyl), 9-cis-tetradecenoyl (myristoleoyl), 9-cis-hexadecenoyl (palmitoleoyl), 6-cis-20 octadecenoyl (petroseloyl), 6-trans-octadecenoyl (petrose-laidoyl), 9-cis-octadecenoyl (oleoyl), 9-trans-octadecenoyl (elaidoyl), 11-cis-octadecenoyl (vaccenoyl), 9-cis-icosenoyl (gadoleoyl), n-dodecanoyl (lauroyl), n-tetradecanoyl (myristoyl), n-hexadecanoyl (palmitoyl) , n-octadecanoyl 25 (stearoyl), n-icosanoyl (arachidoyl).
Stoffer eller stofblandinger med biologisk virkning er i første række farmaceutisk aktive stoffer og stofblandinger, som hører til gruppen antiphlogistika, antibiotika, anti-leishmania, antimykotika, antineoplastika og immunmodula-30 torer.
Farmaceutisk aktive stoffer hørende til gruppen antiphlogistika er f.eks. glucocorticoider, f.eks. cortison, hydro-cortison, prednison, prednisolon, fluocortolon, triamcinolon,
DK 165220 B
8 methylprednisolon, prednyliden, paramethason, dexamethason, betamethason, beclomethason, fluprednyliden, desoximethason, fluocinolon, flumethason, diflucortolon, clocortolon, clo-betasol eller fluocoxtinbutylester, ikke-steroide betændel-5 seshæmmende forbindelser hørende til gruppen substituerede phenyleddikesyresalte eller 2-phenylpropionsyresalte, f.eks. alclofenac, ibufenac, ibuprofen, clindanac, fenclorac, ketoprofen, fenoprofen, indoprofen, fenclofenac, diclofenac, flurbiprofen, pirprofen, naproxen, benoxaprofen, carprofen, 10 eller cicloprofen, anthranilsyrederivater, f.eks med fom-len λ £00Η I I ·. · V \h (iii) w
I I
•v · hvori R.^, R2 og R^ hver for sig betyder hydrogen, methyl, chlor eller trifluormethyl, f.eks. mefenaminsyre, flufen-15 aminsyre, tolfenaminsyre eller meclofenaminsyre, anilino-substituerede nicotinsyrederivater, f.eks. mifluminsyre, clonixin eller flunixin, heteroaryleddikesyrer eller 2-heteroaryleddikesyrer med en 2-indol-3-yl- eller pyrrol-2-yl-gruppe, f.eks. indometacin, oxmetacin, intrazol, 20 acemetazin, cinmetacin, zomepirac, tolmetin, colpirac eller tiaprofensyre, en indenyleddikesyre af sulindac-typen samt analgetisk virksomme heteroaryloxyeddikesyrer, f.eks. benzadac.
Farmaceutisk aktive stoffer hørende til gruppen antibiotika 25 er eksempelvis tetracyclinantibiotika med formlen
DK 165220B
9 \ · · 9T ΛΒ S v v v v !„ ! lv i ! (v) V V VIV Ymm» aé ia6^sr>smi hvori betyder hydrogen eller pyrrolidin-l-ylmethyl, R2 betyder hydrogen eller hydroxy, R3 betyder hydrogen, hydroxy eller methyl, R^ betyder hydrogen eller methyl, og R^ bety-5 der hydrogen, chlor eller dimethylamino, f.eks. chlortetra-cyclin, oxytetracyclin, tetracyclin, demethylchlortetra-cyclin, metacyclin, doxycyclin, minocyclin eller rolitetra-cyclin, aminoglycosider, f.eks. kanamycin, amikacin, gentamycin C^a, Celler C·^, sisomicin, netilmicin, 10 spectinomycin, streptomycin, tobramycin, neomycin B, dibekæcin eller kanendomycin, makrolider, f.eks. maridomycin eller erythromycin, lincomyciner, f.eks. clindamycin eller lincomycin. Penicillansyre (6-APA)- og cephalosporansyre (7-ACA)-derivater med henholdsvis 6β- og 7|3-acylaminogrup-15 per, som findes i fermentativt, halv- eller helsyntetisk fremstillede 63-acylaminopenicillansyre- eller 7(3-acyl-aminocephalosporansyrederivater eller i 3-stillingen omdannede 73-acylaminocephalosporansyrederivater, f.eks. de under navnene penicillin G eller V, phenethicillin, propi-20 cillin, nafcillin, oxacillin, cloxazillin, dicloxacillin, flucloxacillin, cyclazillin, epicillin, mecillinam, methicillin, azlocillin, sulbenicillin, ticarcillin, mezlocillin, piperacillin, carindacillin, azidocillin eller ciclazillin kendte penicillansyrederivater eller de 25 under navnene cefaclor, cefuroxim, cefazlur, cephacetril, cefazolin, cephalexin, cefadroxil, cephaloglycin, cefoxitin, cephaloridin, cefsulodin, cefotiam, ceftazidin, cefonicid, cefotazim, cefmenoxim, ceftizoxim, cephalothin, cephradin, cefamandol, cephanon, cephapirin, cefroxadin, cefatrizin, 30 cefazedon, ceftrixon eller ceforanid kendte cephalosporin-derivater samt andre β-lactam-antibiotika af clavam-, penem-
DK 165220 B
10 eller carbapenem-typen, f.eks. moxalactam, clavulansyre, nocardicin A, sulbactam, aztreonam eller thienamycin samt antibiotika af bicozamycin-, novobiocin-, chlor- eller thiamphenicol-, rifampicin-, fosfomycin-, colistin- eller 5 vancomycin-typen.
Farmaceutisk virksomme stoffer hørende til gruppen anti-leishmania er f.eks. antimonforbindelser, f.eks. brech-vinsten (kalium-antimony ltartrat), stibophen, natrium-stibocaptat samt natriumstibogluconat.
10 Farmaceutisk aktive stoffer hørende til gruppen anti-mykotika er f.eks. thiokulsyrederivater, f.eks. dibenz-thion, tolnaftat eller tolciclat, imidazolderivater, f.eks. clotrimazol, miconazol, econazol, isoconazol eller ketoconazol, eller polyen-antibiotika, f.eks. nystatin, 15 natamycin eller amphotericin B.
Farmaceutisk aktive stoffer hørende til gruppen anti-neoplastika er eksempelvis alkylanzier med bis-(2-chlor-> ethyl)-amin-gruppe, f.eks. chlormethin, chlorambucil, melphalan, uramustin, mannomustin, estramustinphosphat, 20 mechlorethaminoxid, cyclophosphamid, if osf amid eller trifosfamid, alkylanzier med aziridin-struktur, f.eks. tretamin, thiotepa, triaziguon eller mitomycin, alkyle-rende methansulfonsyreestere, f.eks. busulfan, alkyleren-r de N-alkyl-N-nitrosourinstofderivater, f.eks. carmustin, 25 lomustin, semustin eller streptozotocin, samt alkylanzier af mitobronitol-, dacarbazin- eller procarbazin-typen, antimetaboliter af folsyretypen, f.eks. methotrexat, purinder ivater, f.eks. mercaptopurin, thioguanin, azathioprin, thiamiprin, vidarabin eller puromycin, pyrimidinderivater, 30 f.eks. fluorouracil, floxuridin, tegafur, cytarabin, idoxuridin eller flucytosin, antibiotika, som anvendes ved behandling af kræft, f.eks. dactinomycin, daunorubicin, doxorubicin, mithramycin, bleomycin A2 eller B2 eller etoposid, samt vinca-alkaloider, f.eks. vineristin, even-
DK 165220B
11 tuelt i kombination med chlormethamin, prednisolon eller prednison og procarbazin.
Immunmodulatorer er eksempelvis muramylpeptider, f.eks. muramyldipeptider eller muramyltripeptider, især sådanne 5 med formlen *.ώ_ι)<8,0Β (n) Κ», £*-*> hvori X betyder grupperne -C(=0)- eller -C (=0)-0-, betyder L-Ala-D-isoGln-L-ala-2-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy)-ethylamid-, L-Ala-D-Glu(CY-L-Ala-10 2- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxy-phosphoryloxy)- ethylamid)-, L-Ala-D-isoGlnOH-, L-Ala-D-GlnNH2-a-n-butyl-ester-, L-Ala-D-isoGln-L-(stearoyl)-Lys-, L-Val-D-Gln-NI^-α-n-methylester-, L-Ala-D-isoGln-L-Ala-1,2-dipalmitoyl-sn-glycerolester- eller L-Ala-D-isoGln-L-Ala-cholesterolester-15 gruppen, R2 betyder hydrogen, methyl eller n-propyl, R3 betyder hydrogen, n-stearoyl, 10-(2,3-dimethoxy-l,4-dioxo- 5-methyl)-2,5-cvclohexadienoyl, 2-behenoyloxy-2-methyl-propanoyl eller n-octanoyl, R4 betyder hydrogen eller n-octanoyl, R,. betyder C^__4-alkvl, og Rg betyder hydrogen 20 eller C^_4-alkyl, samt de tilsvarende 2-palmitoylthio- derivater deraf, lipopeptider med immunmodulatoriske egenskaber af typen n-lauroyl-L-Ala-D-isoGln-(m-DAP-Gly)~NH2, n-lauroyl-L-Ala-D-isoGln-(L-DAP-Gly)-NH2, n-lauroyl-L-Ala-D-isoGln-(L-Lys-D-Ala)-NH2, n-octanoyl-L-Ala-D-isoGln-25 (L-Lys-D-Ala)-NH2 eller palmitoyl-Cys-((2R)-2,3-dilauroyl-oxypropyl)-Ala-D-Glu-(Gly-taurin-Na)-NH2, eller er lymphokiner, som er udskilt af lymphocyter, monocyter eller makrofager, når disse er blevet stimuleret med antigener eller mi togener eller lignende.
DK 165220 B
12
Til gruppen af lymphokiner hører eksempelvis de kendte interferontyper, især naturligt eller rekombineret, humant gamma-interferon, f.eks. humant gamma-interferon, som kan fremstilles som beskrevet i beskrivelserne til europæisk 5 patentansøgning nr. 63.482, 77.670, 83.777, 88.540, 89.676, 95.350, 99.084, 110.044 og 112.967 og de internationale ansøgninger (pct) WO 83/04.053 og WO 84/02.129.
Der foretrækkes rekombineret humant gamma-interferon ifølge europæisk patentansøgning nr. 121.157 med følgende amino-10 syresekvens:
HaN-Cys-Tyr-Cys-Gln-Asp-Pro-Tyr-Val-Gln-Glu-Ala-Glu-Asn-Leu-Lys-Lye-Tyr-Phe-Asn-Ala-Gly-His-Ser-Asp-Val-Ala-Asp-Asn-Gly-Thr-Leu-Phe-Leu-Gly-Ile-Leu-Lye-Asn-Trp-Lys-Glu-Glu-Ser-Asp-Arg-Lys-Ile-Met-Gln-Ser-Gln-Ile-Val-Ser-Phe-Tyr-Phe-Lys-Leu-Phe-Lys-Asn-Phe-Lys-Asp-Asp-Gln-15 Ser-Ile-Gln-Lys-Ser-Val-Glti-Thr-Ile-Lys-Glu-Asp-Met-Asn-Val-Lys-Phe-Phe-Asn-Ser-Asn-Lys-Lys-Lys-Arg-Asp-Asp-Phe-Glu-Lys-Leu-Thr-Asn-Tyr-Ser-Val-Thr-Asp-Leu-Asn-Val-Gln-Arg-Lys-Ala-Ile-His-Glu-Leu-Ile-Gln-Val-Met-Ala-Glu-Leu-Ser-Pro-Ala-Ala-Lys-Thr-Glu-Lys-Arg-Lys-Arg-Ser-Gln-Met-Leu-Phe-Gln-Gly-Arg-Arg-Ala-Ser-Gln-OH, 20 og rekombineret humant gamma-interferon ifølge beskrivelsen til GB-patentansøgning nr. 2.107.718 med følgende aminosyre-sekvens:
HaN-Cys-Tyr-Cys-Gln-Asp-Pro-Tyr-Val-Lys-Glu-Ala-
Glu-Asn-Leu-Lys-Lys-Tyr-Phe-Asn-Ala-Gly-Hls-Ser- 2 5 Aep-Val-Ala-Asp-Asn-Gly-Thr-Leu-Phe-Leu-Gly-Ile-
Leu-Ly8-Asn-Trp-Ly8-Glu-Glu-Ser-Asp-Arg-Lys-Ile-
Het-Gln-Ser-Gln-Ile-Val-Ser-Phe-Tyr-Phe-Lys-Leu-
Phe-Lys-A8n-Phe-Ly8-Asp-Asp-Gln-Ser-Ile-Gln-Ly8-
Ser-Val-Glu-Thr-Ile-Lys-Glu-Asp-Met-Asn-Val-Lye- 3 0 Phe-Phe-Asn-Ser-Asn-Lye-Lye-Lys-Arg-Asp-Asp-Phe-
Glu-Lys-Leu-Thr-Aen-Tyr-Ser-Val-Thr-Asp-Leu-Asn-Val-Gln-Arg-Lys-Ala-Ile-His-Glu-Leu-Ile-Gln-Val-Met-Ala-Glu-Leu-Ser-Pro-Ala-Ala-Lys-Thr-Gly-Lys-Arg-Lys-Arg-Ser-Gln-Met-Leu-Phe-Arg-Gly-Arg-Arg-35 Ala-Ser-Gln-OH.
DK 165220B
13
Til gruppen af lymphokiner hører desuden på renset form foreliggende, humant interleukin 2, f.eks. efter aktivering af humane, neoplastiske leukæmi- eller lymphom-celler med T-cellemitogen i kulturfiltratet fremstilleligt og 5 HPLC med omvendt fase renset interleukin 2, kulturfiltrater fra kulturer med humane T-lymphocyter fra milt eller perifert blod efter stimulering med antigener eller mitogener, f.eks. humane T-celle-leukæmi-lymphcsfi-vira (HTLV-I) phytohæmagglutinin eller concanavalin A, hvilke blandinger 10 indeholder de under begreberne makrofag-migrering-inhibe-ringsfaktor (MIF), leukocyt-migration-inhiberingsfaktor, leukocyt-migrering-forstærkningsfaktor, makrofag-aktive-rende faktor (MAF), koloni-stimulerende faktor, interleukin 1 og 2 samt gamma-interferon kendte bestanddele, især 15 sådanne kulturfiltrater eller isolater med et højt indhold af makrofag-aktiverende-faktor (MAF).
De farmaceutiske sammensætninger ifølge opfindelsen udmær-
— Q
ker sig ved relativt ensartet størrelse (ca. 2,0 - 3,0 x 10 m) og høj lagerstabilitet. Således er eksempelvis tørpræparater 20 (lyophilisater) bestående af de nævnte syntetiske phopholi-pider og muramylpeptider holdbare i flere måneder op til flere år. Tørpræparaterne kan kort før anvendelsen disper-geres på enkel måde i vandig pufferopløsning ved rystning (Vortex) eller vibrering og indgives in situ, idet man i 25 de fleste tilfælde kan undgå yderligere foranstaltninger, såsom filtrering, neutralisering, dialyse osv. Vandige liposomdispersioner med syntetiske phospholipider og muramylpeptider som indeslutningsforbindelse er holdbare ved temperaturer under 10°C i flere uger op til flere må-30 neder og kan endog gøres lagerstabile som lyophilisat.
De farmaceutiske.sammensætninger ifølge opfindelsen udmærker sig ved særlig god fysiologisk forenelighed, f.eks. ringe toksicitet, og gunstig farmakokinetisk profil, når de indgives i form af en vandig dispersion af liposomer.
35 Således indtræder meget hurtigt endocytose, især ved cellerne i det monocytære system. Liposomer bestående af de
DK 165220 B
14 nævnte syntetiske phospholipider og et muramyldi- eller muramyltripeptid som indeslutningsforbindelse opkoncen-treres særlig godt i lungen og leveren og endocyteres hurtigt af makrofager. Især stimuleres alveolære makro-5 fager, og fysiologisk fremmedartede materialer fjernes, f.eks. vira eller tumorceller i metastasefasen. De farmaceutiske sammensætninger ifølge opfindelsen i form af liposomer er derfor i særlig høj grad anvendelige i kræftbehandlingen til bekæmpelse af tumorer, som danner meta-10 staser. Blandingen af phospholipiderne (I) og (II) , som anvendes til fremstillingen af de farmaceutiske sammensætninger ifølge opfindelsen, har efter dispersion i vandig fase en faseovergangstemperatur (flydende-gelformig) , som er mindre end ca. 37°C. Fremstillingen af liposomdis-15 persionen kan gennemføres uden opvarmning.
Vandige dispersioner, hvori phospholipider med formlerne I og II foreligger i form af liposomer, hvori de nævnte forbindelser eller stofblandinger med biologisk virkning er indesluttet, er farmaceutiske indgiftssystemer, der, 20 eventuelt efter koncentrering eller isolering af liposomer-ne, f.eks. ved ultracentrifugering, er egnede til terapeutiske formål til den orale (p.o.) eller parenterale (i.v., i.m., i.p. eller topiske)indgift.
Ved oral indgift kan indgiftssystemer på liposombasis for- 25 bedre et aktivt stofs resorption.
Til oral indgift kan den liposomholdige vandige dispersion, pufret til pH-værdien 7,0-7,8, fortrinsvis 7,2-7,4, blandes med farmaceutisk acceptable fortyndingsmidler eller bærestoffer eller med gængse tilsætningsstoffer, f.eks. farve-30 stoffer eller smagsstoffer, og anvendes som sirup eller i form af kapsler.
Til den parenterale indgift dispergeres liposomerne i en steril vandig opløsning, der tjener som bærevæske, f.eks. steril, calciumfri, isotonisk natriumchloridopløsning eller
DK 165220B
15 glucoseopløsning, pufret til en pH-værdi på 7,0-7,8, fortrinsvis på 7,2-7,4.
Til den topiske indgift blandes den liposontholdige vandige dispersion, som er pufret til en pH-værdi på 7,0-7,8, for-5 trinsvis 7,2-7,4, med gængse faste bærematerialer, f.eks. fortykkelsesmidler, såsom hydroxypropylcellulose, samt egnede konserveringsmidler, antioxidationsmidler eller duftstoffer og anvendes som lotion eller gel til påføring på huden eller slimhinderne.
10 Opfindelsen angår især farmaceutiske sammensætninger indeholdende syntetiske phospholipider med en renhed på -over 90 vægt-% i et blandingsforhold mellem phospholi-piderne med formlen I og phospholipiderne med formlen IX på fra ca. 10:90 til ca. 50:50 molprocent og et farmaceu-15 tisk aktivt stof eller en stofblanding valgt blandt gruppen antiphlogistika, antibiotika, antileishmania, anti-mykotika, antineoplastika og immunomodulatorer og eventuelt en til en pH-værdi på 7,0-7,8 pufret bærevæske og/el-ler yderligere faste bærematerialer.
20 Opfindelsen angår fortrinsvis farmaceutiske sammensætninger, som indeholder a) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og med formlen I, hvori R1 og R2 er ens og betyder 9-cis-dedece- .noyl, 9-cis-tetradecenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 9-cis-octadecenoyl, Θ 25 eller 9-cis-icosenoyl, n er 1 og Y er en natriumion, b) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og med formlen II, hvori R1 betyder n-dedecanoyl, n-tetradecanoyl, n-hexadecanoyl eller n-octadecanoyl, R2 betyder 9-cis-dodecenoyl, 9-cis-tetradecenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 9-cis- 30 octadecenoyl eller 9-cis-icosenoyl, og R&, R^ og Rc betyder methyl, c) et farmaceutisk aktivt stof eller en stofblanding valgt blandt gruppen antiphlogistika, antibiotika, antileishmania, antimykotika, antineoplastika og immunmodulatorer og even- 35 tuelt en til pH-værdien 7,2-7,4 pufret bærevæske.
DK 165220B
16
Opfindelsen angår især farmaceutiske sammensætninger, som indeholder a) syntetisk natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phos-phatidyl- (S)-serin med en renhed på over 90 vægt-%, 5 b) syntetisk l-n-hexadecanoyl-2- (9-cis-octadecenoyl) -3-sn-phosphatidylcholin med en renhed på over 90 vægt-%, c) et farmaceutisk aktivt stof eller en stofblanding valgt blandt gruppen antiphlogistika, antibiotika, antileishmania, antimykotika, antineoplastika og immunmodulatorer og even-10 tuelt en til pH-værdien 7,2-7,4 pufret bærevæske.
Opfindelsen angår i første række farmaceutiske sammensætninger, som indeholder a) syntetisk natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphat-idyl-(S)-serin med en renhed på over 90 vægt-%, 15 b) syntetisk l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-s..-phos-phatidylcholin med en renhed på over 90 vægt-%, c) et farmaceutisk aktivt stof eller en stofblanding valgt blandt gruppen antiphlogistika, f.eks. diclofenac eller pirprofen, antineoplastika, f.eks. mitomycin, cytarabin, 20 dactinomycin, daunorubicin, doxorubicin eller etoposid, immunmodulatorer, f.eks. N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-iso-glutaminyl-L-alanin-2- (l,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy) -ethylamid, N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutaminsyre- (C^) -L-alanin-2- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-25 3-hydroxyphosphoryloxy)-ethylamid-dinatriumsalt, N-acetyl-desmethylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin-natr iumsalt, N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin-natriumsalt, N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-glutamin-a-n-butylester, Na-(N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl) -N^-stearoyl-30 L-lysin eller 6-0-stearoyl-N-acetylmuramyl-L-alanin-D-iso-glutamin, lymphokiner eller kombinationer deraf og eventuelt en til pH-værdien 7,2-7,4 pufret bærevæske.
Opfindelsen angår hovedsagelig farmaceutiske sammensætninger, som indeholder 35 a) syntetisk natrium-1,2-di-(9-Cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphat-
DK 165220B
17 idyl-(S)-serin med en renhed på over 90 vægt-%, b) syntetisk l-n-hexadecanoyl-2- (9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phos-phatidylcholin med en renhed på over 90 vægt-%, c) et farmaceutisk aktivt stof valgt blandt gruppen anti-5 neoplastika, f.eks. mitomycin, cytarabin, dactinomycin, daunorubicin, doxorubicin eller etoposid og immunmodula-torer, f. eks. N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryl-oxy)-ethylamid, N-acetyl-desmethylmuramyl-L-alanyl-D-iso-10 glutamin-natriumsalt, N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-iso-glutamin-natriumsalt eller lymphokiner, f.eks. humant gamma-interferon eller interleukin 2 eller stofblandinger, som findes i kulturfiltrater fra kulturer med humane T-lymphocvter fra milt eller perifert blod efter stimulering 15 med antigener eller mitogener, og som er karakteriseret ved et stort indhold af makrofag-aktiverende-faktor (MAF) eller kombinationer deraf, og eventuelt en til pH-værdien 7,2-7,4 pufret bærevæske.
Opfindelsen angår først og fremmest farmaceutiske sammen-20 sætninger, som indeholder a) syntetisk natrium-l,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphat-idyl-(S)-serin med en renhed på over 90 vægt-%, b) syntetisk l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phos-phatidylcholin med en renhed på over 90 vægt-%, 25 c) en forbindelse med immunmodulatorisk virkning, f.eks. N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy) -ethylamid, N-acetyl-desmethylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin-natrium-salt eller N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin-na-30 triumsalt, eventuelt i karibination med stofblandinger, som findes i kul tur filtrater fra kulturer med humane T-lympho-cyter fra milt eller perifert blod efter stimulering med antigener eller mitogener, og som er karakteriseret ved et indhold af MAF på mindst 70%, og eventuelt en til pH-35 værdien 7,2-7,4 pufret bærevæske.
DK 165220B
18
De nævnte farmaceutiske sammensætninger forhandles som tørpræparater og anvendes i form af en vandig liposomdis-persion i en bærevæske, som er pufret til pH-værdi 7,0-7,8.
Dosismængden for det aktive stof, som skal indgives, er 5 sædvanligvis den for den pågældende aktive forbindelse for den pågældende applikationsform, patientens alder og sundhedstilstand kendte og f.eks. i Deutsche Arzneimittel-buch (DAB) foreskrevne største og mindste mængde. Vandige dispersioner med liposomer fremstillet ved fremgangsmåden 10 ifølge opfindelsen har imidlertid også den fordel, at det aktive stof kan indgives i mindre doser og nå frem til receptorerne og dér fremkalde en terapeutisk virkning, eller man kan ved indgift af større doser undgå uønskede bivirkninger.
15 Den foretrukne dosismængde for de omtalte, i form af liposomer indkapslede immunmodulatorer af muramylpeptid- eller lipopeptidtypen udgør fra ca. 0,01 til ca. LO mg/kg legemsvægt pr. indgift. For lymphokiner i liposomform, f.eks. humant gamma-interferon eller blandinger indeholdende MAF, 20 udgør den foretrukne dosismængde ca. 100-100.000 enheder/ml gamma-interferon eller MAF.
Opfindelsen angår ligeledes blandinger, især homogene blandinger af syntetiske phospholipider med en renhed på over 90 vægt-% og med formlerne I og II, især blandinger i et blandings-25 forhold mellem phospholipiderne med formlen I og phospholipider-ne med formlen II på fra ca. 10:90 til ca. 50:50 molprocent. Fortrinsvis er blandingsforholdet 30:70 molporcent. Disse blandinger kan anvendes til fremstilling af liposomer i vandig fase indeholdende et vandopløseligt aktivt stof.
30 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af de farmaceutiske' sammensætninger er ejendommelig ved, at man fremstiller en homogen blanding bestående af syntetiske phospholipider med formlerne I og II med renheder på over 90 vægt-% og et li-pofilt stof eller en lipofil stofblanding med biologisk virk-35 ning, dispergerer den dannende homogene blanding i vandig fase til fremstilling af liposomer og, om nødvendigt, pufrer den dannede vandige dispersion til en pH-værdi på 7,0-7,8 og, om ønsket, opkoncentrerer og/eller isolerer de dannede liposomer.
DK 165220B
19
Fremstillingen af den homogene blanding gennemføres eksempel-5 vis ved film- eller fortrinsvis ved lyofilisatdannelse.
Filmdannelsen gennemføres ved opløsning af de syntetiske phos-pholipider med formlerne I og II og det lipofile stof eller den lipofile stofblanding, som skal indkapsles i et organisk opløsningsmiddel med lavt smeltepunkt og fjernelse af opløs-10 ningsmidlet.
Udvalget af egnede opløsningsmidler til fremstilling af en film afhænger af lipidkomponenternes opløselighed og opløseligheden af de forbindelser, som skal indesluttes. Egnede opløsningsmidler til fremstilling af den homogene blanding 15 ved filmdannelse er eksempelvis lavtkogende og smeltende (under 0°C), usubstituerede eller substituerede, f.eks. halogenerede, aliphatiske eller cycloaliphatiske carbon-hydrider, f.eks. n-hexan, cyclohexan, methylenchlorid eller chloroform, alkoholer, f.eks. methanol, lavalkancarboxyl-20 syreestere, f.eks. ethylacetat, eller ethere, f.eks. di-ethylether, eller blandinger af disse opløsningsmidler. Opløsningsmidlet afdampes i vakuum, fortrinsvis højvakuum, eller det fjernes med en indifferent gas, f.eks. nitrogen.
Lyofilisatdannelsen gennemføres ved lyofilisering af en op-25 løsning af de syntetiske phospholipider med formlerne I og II og det lipofile stof eller den lipofile stofblanding, som skal indkapsles i et organiske opløsningsmiddel med højt smeltepunkt på den i DE-fremlæggelsesskriftnr. 2.818.655 beskrevne måde. Egnede opløsningsmidler foreligger ved frysetørrin-30 gen, f.eks. ved temperaturen af en blanding af carbondioxid og methanol, ethanol eller acetone, sammen med lipidkomponen-terne og forbindelserne, som skal indesluttes, i fast tilstand og er eksempelvis organiske opløsningsmidler med et smelte-
DK 165220 B
20
O
punkt over 0°C, f.eks. iseddike, benzen eller dioxan, især tert-butanol. En homogen blanding kan fremstilles ved sprøjtetørring af en opløsning af phospholipiderne og de lipo-file forbindelser, som skal indesluttes, i et organisk 5 opløsningsmiddel, f.eks. chloroform. Den homogene blanding fås i form af et pulver.
Til fremstilling af den homogene blanding kan anvendes et omtrentligt blandingsforhold mellem phospholipider med 10 formlen I og phospholider med formlen II på fra ca. 10:90 til ca. 50:50 molprocent, især 30:70 molprocent. Det omtrentlige blandingsforhold mellem forbindelserne, som skal indesluttes, og den samlede mængde lipider ligger fra ca. 0,001:1,0 til 1,0 fortrinsvis fra 0,005:0,1 til 15 1,0 mol.
Den vandige fase dispergeres eksempelvis ved rystning (f.eks. Vortex-blander) eller omrøring, idet man til den vandige fase ifølge fremgangsmåde a) har sat den tidligere 20 fremstillede homogene blanding af phospholipiderne (I) og (II) og de lipofile indeslutningsforbindelser., eller som ifølge fremgangsmåde b) indeholder den vandopløselige indeslutningsforbindelse, hvortil man har sat den tidligere fremstillede homogene blanding af phospholipiderne (I) og 25 (II) . Dannelsen af liposomer, som kan være' store, små, uni-lamellare eller multilamellare, forløber spontant (spontaneous vesiculation), dvs. uden yderligere energitilførsel udefra og med stor hastighed. Der kan dispergeres fra ca. 0,1 til 50 vægtprocent, fortrinsvis 2-20 30 vægtprocent (beregnet på den samlede vægt af den vandige dispersion) af den homogene blanding i den vandige fase.
Surt eller basisk reagerende vandige dispersioner pufres til pH-værdien 7,0-7,8, fortrinsvis 7,2-7,4. Fortrinsvis 35 foretages dispergeringen i en vandig fase, som allerede er pufret på denne pH-værdi.
Fremgangsmåden er især velegnet, når der skal indesluttes lipofile og tungt vandopløselige aktive stoffer i form af 21
DK 165220B
0
Fremstillingen af de farmaceutiske sammensætninger ifølge opfindelsen i form af vandige liposomblandinger kan også gennemføres under anvendelse af samtlige andre hidtil kendte fremgangsmåder til fremstilling af liposomer, f.eks.
5 på sædvanlig måde ved indvirkning af ultralyd på den vandige dispersion, som indeholder phospholipiderne (I) og (II) og indeslutningsforbindelserne, ved infusionsmetoden eller ved såkaldt omvendt fase-fordampning.
10 Der foretages dispergering ved temperaturer under ca. 36°C, fortrinsvis ved stuetemperatur. Såfremt det er nødvendigt af hensyn til følsomheden af den forbindelse., som skal ind- j- kapsles, gennemføres fremgangsmåden under afkøling og eventuelt under en indifferent gasatmosfære, f.eks. en nitrogen-15 atmosfære eller en argonatmosfære. De dannede liposomer er i vandig fase bestandige i meget lang tid (op til flere uger eller måneder). Farmaceutiske sammensætninger i form af vandige liposomdispersioner kan eventuelt efter tilsætning af stabilisatorer, f.eks. mannitol eller lactose, gøres 20 opbevaringsbestandige ved frysetørring.
Størrelsen af de dannede unilamellare liposomer er bl.a. afhængig af det aktive stofs struktur og lipidkomponenterne, blandingsforholdet mellem komponenterne og koncentrationen 25 af disse komponenter i den vandige dispersion. Således kan man eksempelvis ved at hæve eller sænke koncentrationen af lipidkomponenterne fremstille vandige faser med et stort indhold af små eller store liposomer.
30 Ved efterbehandling af liposomd isper s ionen, f.eks. ved behandling med ultralyd eller ekstrudering gennem filtre med ens porer, f.eks. "Nucleopore"®, kan man opnå en særligt ensartet størrelsesfordeling for liposomerne.
35 Adskillelsen af de store liposomer fra de små liposomer, såfremt dette overhovedet er nødvendigt, gennemføres ved hjælp af gængse adskillelsesmetoder, f.eks. gelfiltrering, f.eks. med "Sepharose"® 4 B eller "Sephacryl" som bærer,
DK 165220 B
22 eller ved sedimentation af liposomerne i en ultracentrifuge, f.eks. ved 160.000 g. Eksempelvis aflejres store liposomer efter centrifugering i flere timer, f.eks. ca. 3 timer, i dette tyngdefelt, medens de små liposomer forbliver dis-5 pergeret og kan dekanteres. Efter flere ganges centrifugering opnår man en fuldstændig adskillelse af de store liposomer fra de små liposomer.
Liposomer adskilles fortrinsvis, når den vandige fase ikke indeholder indkapslede, vandopløselige forbindelser. Især bør vand-10 opløselige antineoplastika, f.eks. alkylanzier, fraskilles f.eks. ved filtrering, ultrafiltrering, dialyse eller centrifugering, da foreneligheden af disse aktive stoffer på opløst form ikke er særlig god. De berigede liposomer kan blandes med en bærevæske, f.eks. isotonisk, steril natriumchloridop-15 løsning. Vandige dispersioner med små liposomer med relativt ensartet størrelse fremstilles også ved behandling med ultralyd.
Også ved gelfiltrering kan man fraskille alle i den vandige fase forekommende liposomer med en diameter større end —8 20 6,0 x 10 m samt uindkapslede lipofile aktive stoffer og overskud af dispergerede lipider, som foreligger i højmolekylære aggregater, og således fremstille en vandig dispersion med en fraktion af liposomer med relativt ensartet størrelse.
25 Den opnåede dannelse af liposomer og forekomsten deraf i vandig fase kan påvises på i og for sig kendt måde ved hjælp af forskellige fysiske målemetoder, f.eks. med fryse-brudprøver (freeze fracture) og tyndtlagssnit i elektronmikroskopet eller ved røntgendifraktion, ved dynamisk lys-30 spredning, ved massebestemmelse af filtratet i den analytiske ultracentrifuge og først og fremmest spektroskopisk, 1 13 31 f.eks. i kerneresonansspektret ( H, c og P).
DK 165220B
23
Syntetiske phospholipider med formlerne I og II er kendte forbindelser. Eksempelvis er fremstillingen af 1,2-di-(9-cis-octa-• decenoyl)-3-sn-phosphatidyl-(S)-serin beskrevet af J. Browning og J. Seelig i oversigtsartiklen "Synthesis of Specifically 5 Deuterated Saturated and Unsaturated Phosphatidylserins" i Chem. and Physics of Lipids 24 (1979), 103-118.
De farmaceutisk virksomme forbindelser valgt blandt gruppen antiphlogistika, antibiotika, antileishmania og kemoterapeutika til behandling af kræft er kendt, jævnfør Merck-In-10 dex, 10. udgave,eller det ovenfor anførte oversigtsværk af Schroder et al. "Pharmazeutische Chemie".
De nævnte immunmodulatorer af muramylpeptid-typen med formlen VI er ligeledes kendte, jævnfør eksempelvis beskrivelsen til europæisk patentansøgning nr. 25.495 og 21.367, 15 samt fra FR-patentskrift nr. 7.637.091.
De omtalte immunmodulatorer af lipopeptidtypen er ligeledes kendte forbindelser, jævnfør f.eks. europæisk fremlæggelsesskrift nr. 114.787 eller europæisk patentskrift nr. 330.
Fremstillingen af renset interleukin 2 er beskrevet i 20 europæisk fremlæggelsesskrift nr. 0106179 samt i US-patent-skrift nr. 4.448.879.
Stofblandinger, som indeholder makrofag-migration-inhiberings-faktor (MIF), leukocyt-migration-inhiberingsfaktor, leukocyt-migration-forstærkningsfaktor, makrofag-aktiverende faktor 25 (MAF), koloni-stimulerende-faktor osv.,er beskrevet i talrige publikationer, f.eks. S.Z. Salahuddi et al., Science 223 (4637) 703-707 (1984). Fremstillingen af kulturfiltrater indeholdende en særlig stor mængde humant MAF er ligeledes beskrevet i talrige publikationer, f.eks. Le J. et al. J.
30 Immunology, vol. 131, 2821-2826 (1983), Kleinermann et al., J. Clinical Investigation, 72, 304-315 (1983) , D.J. Cameron, J. Clin. Lab. Immunol. (1984), 13, 47-50, samt E.S. Kleinermann og I.J. Fidler, Lymphokine Research, vol. 2, nr. 1, 7-12 (1983) .
0
DK 165220 B
24
De anvendte pufferopløsninger med pH-værdi 7,0-7/8 er fortrinsvis sterile phosphatpufferopløsninger på basis af dihydrogenphosphat og hydrogenphosphat, som eksempelvis kan fremstilles under anvendelse af forskrifterne anført i 5 Hagers Handbuch der Pharmazeutischen Praxis, Springer Verlag, bind 1, side 357-359. Der anvendes især sterile, iso-toniske, calciumfri pufferopløsninger med pH-værdi 7,2 (Dulbecco).
10 Opfindelsen illustreres nærmere i de efterfølgende eksempler.
Eksempel 1.
I en rundkolbe opløses 586 mg sterilttert-butanol, 0,1 mg 15 N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2- (1,2- dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy) -ethylamid (fremstillet ifølge EP-patentskrift nr. 25.495),. 75 mg (95% rent) natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidyl-(S)-serin (fremstillet ifølge J. Browning 20 og J. Seelig, Chem. and Physics of Lipids 24 (1979) 103-118) og 175 mg (95% rent) l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidylcholin (Avanti, Polar Lipids). Opløsningen -7~ sterilfiltreres over Acrodisc (2,0 x 10 m), fyldes i et sterilt hætteglas og indfryses ved -45°C. Hætteglasset tørres i vakuum, indtil man når en temperatur på 25 c, og forsegles under en argonatmosfære.
Inden brugen sættes ved stuetemperatur med en steril sprøjte 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret (pH-værdi 7,2-7,4) 30 natriumchloridopløsning (Dulbecco) til tørpræparatet (lyofi-lisat), og hætteglasset rystes i ti minutter på et standardiseret laboratorierystebord (Vortex, trin 6) . Den dannede liposomdispersion er lagerbestandig ved 4°C og er velegnet til parenteral (i.v.) indgift.
35 25
DK 165220B
0
Eksempel 2.
I en rundkolbe opløses 586 mg sterilt tert-butanol, 0,1 mg N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2-(1,2- dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy) -ethylamid 5 (fremstillet ifølge EP-patentskrift nr. 25.495) , 75 mg (95% rent) natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn- phosphatidyl-(S)-serin (fremstillet ifølge J. Browning og J. Seelig, Chera. and Physics of Lipids 24 (1979) 103-118) og 175 mg (95% rent) l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)- 10 3-sn-phosphatidylcholin (Avanti, Polar Lipids).Opløsningen -7 sterilfiltreres over Acrodisc (2,0 x 10 m) og fyldes på et sterilt hætteglas. Hætteglasset roteres ved 150 omdrejninger pr. minut, og opløsningsmidlet fjernes i en strøm af renset, ved 1 bar filtreret nitrogen. Derefter evakueres _2 15 hætteglasset i høj vakuum ved 6,0 x 10 mbar. Hætteglasset lukkes under en argonbeskyttelsesatmosfære.
Inden brugen sættes ved stuetemperatur ved hjælp af en steril sprøjte 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret 20 (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchloridopløsning (Dulbecco) til den fremstillede film, og hætteglasset rystes i ti minutter på et standardiseret laboratorierysteapparat (Vortex, trin 6) . Den dannede liposomdispersion er lagerbestandig ved 4°C og er egnet til parenteral (i.v.) indgift.
25
Eksempel 3.
Analogt med den ovenfor i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde fremstilles vandige dispersioner, som indeholder lipo- somer bestående af 75 mg (0,091 mmol) natrium-l,2-di-(9-cis- 30 octadecenoyl)-3-sn-phosphatidylserin, 175 mg (0,231 mmol) l-n-hexadecanoyl*r2- (9-cis-octadecenoyl) -3-sn-phosphatidylcholin og mere end 0,1 mg til 10 mg N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero- 3-hydroxyphosphoryloxy)-ethylamid.
35
Eksempel 4.
I en rundkolbe opløses 586 mg sterilt tert-butanol, 75 mg (95% rent) natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn- 0
DK 165220 B
26 phosphatidyl-(S)-serin og 175 mg (95% rent) 1-n-hexadecanoyl- 2- (9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidylcholin. Opløsningen _7 sterilfiltreres over Acrodisc (2,0 x 10 m) og fyldes i et sterilt hætteglas. Hætteglasset roteres ved 1750 omdrejnin- 5 ger pr. minut, og opløsningsmidlet afdampes i en strøm af renset nitrogen,, som er filtreret ved 1 bar. Derefter eva- -2 kueres hætteglasset i højvakuum ved 6,0 x 10 mbar. Hætteglasset lukkes under en argonbeskyttelsesatmosfære.
10 Inden brugen sættes der til den fremstillede film ved stuetemperatur ved hjælp af en steril sprøjte 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchlorid-opløsning (Dulbecco) indeholdende doxorubicin i en koncentration på 4 g/liter, og hætteglasset rystes i ti minutter 15 på et standardiseret laboratorierystebord (Vortex, trin 6). Derefter centrifugeres dispersionen ved 40.000 G i tres minutter. Filtratet fjernes, og liposomerne suspenderes i 2,5 ml 0,85%’s steril natriumchloridopløsning.
20 Eksempel 5.
I et hætteglas (15 ml) opløses 506 mg sterilttert-butanol, 75 mg (98% rent) natrium-l,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidyl-(S)-serin (fremstillet ifølge J. Browning og J. Seelig, Chem. and Physics of Lipids 24 (1979) 103) og 25 175 mg (99,5% rent) l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)- 3- sn-phosphatidylcholin (fremstillet ifølge H. Eibl, Chem. Physics of Lipids 26 (1980) 239,og H. Eibl, Angewandte Chemie 96 (1984) 247). Opløsningen sterilfiltreres over Acrodisc (2,0 x 10"7 m) , fyldes i et sterilt hætteglas og indfryses ved 30 -45°C. Hætteglasset tørres i vakuum,til der nås en tempera tur på 25°C, hvorpå det lukkes under en argonatmosfære.
Inden brugen sættes til dette tørpræparat ved hjælp af en steril sprøjte 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret * 35 natriumchloridopløsning (Dulbecco), som indeholder doxoru bicin i en koncentration på 4 g/liter, og hætteglasset rystes i et minut på et standardiseret laboratorierysteapparat.
(Vortex, trin 6). Efter tilsætning af 22,5 ml steril, 27
DK 165220B
0 calciumfri, phosphatpufret natriumchloridopløsning, som er ækvilibreret ved 10°C, rystes suspensionen i 2 minutter, hvorpå den centrifugeres ved 10.000 G og en temperatur på 10°c i tredive minutter. Remansen fjernes, og liposomerne 5 resuspenderes i 25 ml steril natriumchloridopløsning ved 10°C. Centifugeringsbehandlingen gentages, hvorefter liposomerne resuspenderes i 2,5 ml 0,85%'s steril natriumchloridopløsning. Liposomsuspensionen indeholder 9 mg doxorubicin pr. 250 mg lipid og er egnet til intravenøs indgift.
10
Eksempel 6.
Analogt med den ovenfor i eksempel 5 beskrevne fremgangsmåde fremstilles doxorubicin-holdige liposomer ud fra et tørpræparat, som indeholder 225 mu (0,297 mmol) (99,5% rent) 15 l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidyl-cholin og 25 mg (0,030 mmol) (98% rent) natrium-l,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphatidyl-s-serin. Liposomsuspensionen indeholder 7 mg doxorubicin pr. 250 mg lipid og er egnet til intravenøs indgift.
20
Eksempel 7.
Analogt med de i eksemplerne 4 og 5 beskrevne fremgangsmåder fremstilles en liposomdispersion ved dispersion af 25 et tørpræparat af phospholipiderne i 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchloridopløsning (Dulbecco), som indeholder mitomycin C i en koncentration på 1 g/liter, centrifugering og suspendering i en . natriumchloridopløsning.
30
Eksempel 8.
Analogt med den ovenfor i eksempel 5 beskrevne fremgangsmåde, men under udeladelse af centrifugeringen, fremstilles en liposomdispersion ved dispersion af et tørpræparat af 35 phospholipiderne i 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchloridopløsning (Dulbecco) indeholdende 50-200 mikrogram natrium-N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin (GB-patentskrift nr. 1.570.625) og 28
DK 165220B
0 1.000-10.000 enheder rekombineret, humant gamma-interferon isoleret som beskrevet i beskrivelsen til patentansøgning nr. 121.157 (Kyowa Hakko Kogyo Co.).
5 Eksempel 9.
Analogt med den ovenfor i eksempel 5 beskrevne fremgangsmåde, men under udeladelse af centrifugeringen, fremstilles en liposomsuspension ved dispersion af et tørpræparat af phospholipiderne i 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret 10 (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchloridopløsning (Dulbecco), som indeholder 50-200 mikrogram natrium-N-acetyldesmethyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin og 1.000-100.000 enheder rekombineret humant gamma-interferon.
15 Eksempel 10.
Analogt med den ovenfor i eksempel 4 beskrevne fremgangsmåde, idet man dog udelader centrifugeringen, fremstilles en liposomsuspension ved dispergering af et tørpræparat, af phospholipiderne i 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchloridopløsning (Dulbecco), som indeholder 50-200 mikrogram natrium-N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin og 1.000-100.000 enheder rekombineret, humant gamma-interferon.
25
Eksempel 11.
Analogt med den ovenfor i eksempel 4 beskrevne fremgangsmåde, idet man dog undlader centrifugeringen, fremstilles en liposomsuspension ved dispersion af et tørstofpræparat 30 af phospholipiderne i 2,5 ml steril, calciumfri, phosphatpufret (pH-værdi 7,2-7,4) natriumchloridopløsning (Dulbecco), som indeholder ca. 50-200 mikrogram natrium-N-acetyldes-methylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin og 1.000-100.000 enheder rekombineret, humant gamma-interferon.
35
Eksempel 12.
I en rundkolbe, som indeholder 1 g sorbitol (krystalstørrelse 125-500 ym) sættes dråbevis under vakuum 14,2 ml sterilt tert-butanol, som indeholder 1-10 mg N-acetyl-muramyl-L- 0
DK 165220 B
29 glycero-3-hydroxyphosphoryloxy)-ethylamid (fremstillet ifølge EP-patentskrift nr. 25.495), 75 mg natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl) -3-sn-phosphatidyl- (S) -serin og 175 mg 1-n-hexadecanoyl-2- (9-cis-octadecenoyl) -3-sn-phosphatidylcholin.
5 Derefter fjernes opløsningsmidlet under vakuum med kontrollerede temperaturbetingelser. Det dannede tørpulverpræparat lukkes under en argonatmosfære.
Inden brugen sættes til dette tørpræparat ved stuetemperatur 10 ved hjælp af en steril sprøjte 20 ml destilleret sterilt vand, og kolben rystes i ca. ti minutter.
Eksempel 13.
15 Analogt med den ovenfor i eksempel 12 beskrevne fremgangsmåde kan man i stedet for sorbitol også anvende glucose, saccharose, lactose eller natriumchlorid som bæremateriale.
20 25 30 35
Claims (7)
1. Farmaceutiske sammensætninger indeholdende syntetiske phospholipider, kendetegnet ved, at de indeholder 5 a) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og med formlen snll CH2-O-R1
2. Farmaceutiske sammensætninger ifølge krav 1, k e n- detegnet ved, at de indeholder syntetiske phospholipider i et blandingsforhold mellem phospholipider med formlen I og phospholipider med formlen II med renheder på over 90 vægt-% på fra ca. 10:: ca. 90 til ca. 50 : ca. 50 molprocent og et farnaceu-35 tisk aktivt stof eller en stofblanding valgt blandt anti-phlogistika, antibiotika, antileishmania, antimykotika, antineoplastika og immunmodulatorer og eventuelt en bærevæske pufret til pH-værdien 7,0-7,8 og/eller yderligere 0 DK 165220 B faste bærematerialer.
• 3. Farmaceutisk sammensætning ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at den indeholder 5 a) et syntetisk, phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og med formlen I, hvori R^ og R£ er ens og betyder 9-cis-dodecenoyl, 9-cis-tetradecenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 9-cis-octadecenoyl eller 9-cis-icosenoyl, n er 1, og Y er en natriumion, b) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og 10 med formlen II, hvori R^ betyder n-dodecanoyl, n-tetradecanoyl, n-hexadecanoyl eller n-octadecanoyl, R£ betyder 9-cis-dodecenoyl, 9-cis-tetradecenoyl, 9-cis-hexadecenoyl, 9-cis-octadecenoyl eller 9-cis-icosenoyl, og Ra, R^ og Rc betyder methyl, 15 c) et farmaceutisk aktivt stof eller en stofblanding valgt blandt antiphlogistika, antibiotika, antileishmania, anti-mykotika, antineoplastika og immunmodulatorer og eventuelt en bærevæske pufret til pH-værdien 7,2-7,4.
2 R2-0-CH p A 3 (II) 20 ° \ C hvori R^ betyder cio-20-alkanoyl med et lige antal carbonatomer, R2 betyder C^Q_2Q“alkenoyl med et lige antal carbonatomer, Ra, Rj^ og Rc betyder hydrogen eller C1_^-alkyl, og 25 n er et helt tal på 2-4, c) et stof eller en stofblanding med biologisk virkning og eventuelt en bærevæske og/eller yderligere faste bærematerialer.
2 Ra-0-όΗ 0 (S) p 3 0H2-0-|gO-(C H2n)-CH-C-0H Y (I)
10. NHa hvori og R2 hver for sig betyder cio-20”a^kenoYl med et lige antal carbonatomer, n er et helt tal på 1-3, og Y® er kationen af en farmaceutisk acceptabel base, 15 b) et syntetisk phospholipid med en renhed på over 90 vægt-% og med formlen sn 11 CHa-O-Ri _
4. Farmaceutisk sammensætning ifølge krav 3, kende tegnet ved, at den indeholder a) syntetisk natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphat-idyl-(S)-serin med en renhed på over 90 vægt-%, b) syntetisk 1-n-hexadecanoy1-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phos-25 phatidylcholin med en renhed på over 90 vægt-%, c) et farmaceutisk aktivt stof eller en farmaceutisk aktiv stofblanding valgt blandt antiphlogistika, antibiotika, antileishmania, antimykotika, antineoplastika og immunmodulato-rer og eventuelt en bærevæske pufret til pH-værdien 7,2-7,4. 30
5. Farmaceutisk sammensætning ifølge krav 4, kende tegnet ved, at den indeholder a) syntetisk natrium-1,2-di-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phosphat-35 idyl-(S)-serin med en renhed på over 90 vægt-%, b) syntetisk l-n-hexadecanoyl-2-(9-cis-octadecenoyl)-3-sn-phos-phatidylcholin med en renhed på over 90 vægt-%, c) en forbindelse med immunmodulerende virkning, f.eks. DK 165220B 0 N-acetyl-D-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy) -ethylamid, N-acetyl-desmethyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin-natrium-salt eller N-acetyl-D~muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin-natrium-5 salt, eventuelt i kombination med stofblandinger, som findes i kulturfiltrater fra kulturer med humane T-lymphocyter fra milt eller perifert blod efter stimulering med antigener eller mitogener, og som er karakteriseret ved mindst 70%'s indhold af MAF/ og eventuelt en bærevæske puf ret til pH-værdi- 10 en 7,2-7,4.
6. Blandinger til brug ved fremstilling af liposomer, kendetegnet ved, at de består af syntetiske phos-pholipider med formlerne I og II ifølge krav 1 med en renhed 15 på over 90 vægt-%.
7. Fremgangsmåde til fremstilling af farmaceutiske sammensætninger ifølge et af kravene 1-5, kendetegnet ved, at man fremstiller en homogen blanding bestående af syn- 20 tetiske phospholipider med formlerne I og II med renheder på over 90 vægt-% og et lipofilt stof eller en lipofil stofblanding med biologisk virkning, dispergerer den dannede homogene blanding i vandig fase til fremstilling af liposomer og, om nødvendigt, pufrer den dannede vandige dispersion til en ' 25 pH-værdi på 7,0-7,8, og, om ønsket, opkoncentrerer og/eller isolerer de dannde liposomer. 30 35
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CH495184 | 1984-10-16 | ||
CH495184 | 1984-10-16 |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK471085D0 DK471085D0 (da) | 1985-10-15 |
DK471085A DK471085A (da) | 1986-04-17 |
DK165220B true DK165220B (da) | 1992-10-26 |
DK165220C DK165220C (da) | 1993-03-22 |
Family
ID=4285361
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK471085A DK165220C (da) | 1984-10-16 | 1985-10-15 | Liposomsammensaetninger indeholdende syntetiske phospholipider og et farmaceutisk aktivt stof samt deres fremstilling og phospholipidblanding til fremstilling af sammensaetningerne |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4971802A (da) |
EP (1) | EP0178624B1 (da) |
JP (2) | JPH0618773B2 (da) |
KR (1) | KR890000908B1 (da) |
AT (1) | ATE58474T1 (da) |
AU (1) | AU590221B2 (da) |
CA (1) | CA1260393A (da) |
DD (1) | DD239117A5 (da) |
DE (1) | DE3580648D1 (da) |
DK (1) | DK165220C (da) |
ES (1) | ES8700934A1 (da) |
FI (1) | FI86371C (da) |
GR (1) | GR852492B (da) |
HK (1) | HK135793A (da) |
HU (1) | HU198128B (da) |
IE (1) | IE58143B1 (da) |
IL (1) | IL76700A (da) |
NO (1) | NO171443C (da) |
PH (1) | PH22978A (da) |
PT (1) | PT81298B (da) |
ZA (1) | ZA857888B (da) |
Families Citing this family (39)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH668554A5 (de) * | 1984-04-09 | 1989-01-13 | Sandoz Ag | Liposomen welche polypeptide mit interleukin-2-aktivitaet enthalten sowie verfahren zu ihrer herstellung. |
US5243062A (en) * | 1984-10-12 | 1993-09-07 | Ciba-Geigy Corporation | Substituted propane-phosphonous acid compounds |
JPS61172833A (ja) * | 1985-07-17 | 1986-08-04 | Nakanishi Michio | 消炎鎮痛性医薬組成物 |
US5133973A (en) * | 1986-08-07 | 1992-07-28 | Medice Chem.-Pharm. Fabrik Putter Gmbh & Co. Kg | Pharmaceutical preparations |
PT85537B (pt) * | 1986-08-18 | 1990-06-29 | Univ Texas | Processo para a preparacao de um sistema de administracao farmaceutica contendo peptidos apresentando quimiotaxia |
JPH0761940B2 (ja) * | 1986-11-17 | 1995-07-05 | 株式会社資生堂 | 外皮用リポソ−ム製剤 |
EP0274219A3 (en) * | 1986-12-04 | 1988-08-03 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Interleukin-2-containing liposome composition and method for the production thereof |
US4944941A (en) * | 1987-08-07 | 1990-07-31 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for the treatment of lung conditions |
US5830498A (en) * | 1987-10-16 | 1998-11-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal-polyene preliposomal powder and method for its preparation |
US5178875A (en) * | 1991-01-14 | 1993-01-12 | The Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal-polyene preliposomal powder and method for its preparation |
FI874742A (fi) * | 1987-10-28 | 1989-04-29 | K & V Licencing Oy | Foerfarande foer framstaellning av liposomer. |
EP0331635A3 (en) * | 1988-02-29 | 1990-02-28 | The Board of Regents of the University of Texas System | Preparations for treating bladder cancer |
DE3806852A1 (de) * | 1988-03-03 | 1989-09-14 | Knoll Ag | Neue (alpha)-aminodicarbonsaeure-derivate, ihre herstellung und verwendung |
JP2955314B2 (ja) * | 1988-10-27 | 1999-10-04 | リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティー・オブ・ミネソタ | Il―2含有リポソーム免疫アジュバント |
US5466468A (en) * | 1990-04-03 | 1995-11-14 | Ciba-Geigy Corporation | Parenterally administrable liposome formulation comprising synthetic lipids |
US5270053A (en) * | 1990-04-03 | 1993-12-14 | Ciba-Geigy Corp. | Parenterally administerable liposome formulation comprising synthetic lipid |
ATE108328T1 (de) * | 1990-04-03 | 1994-07-15 | Ciba Geigy Ag | Parenteral applizierbare liposomenformulierung aus synthetischen lipiden. |
US5162361A (en) * | 1990-04-10 | 1992-11-10 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Method of treating diseases associated with elevated levels of interleukin 1 |
EP0467838A3 (en) * | 1990-07-17 | 1992-09-02 | Ciba-Geigy Ag | Process for preparing an injectable liposome dispersion |
WO1992009268A1 (en) * | 1990-12-03 | 1992-06-11 | Vestar, Inc. | Prevention of synovial adhesions |
CA2127107C (en) * | 1991-12-31 | 2007-06-19 | Bruce L. A. Carter | Methods and compositions for reducing blood loss |
PT100487B (pt) * | 1992-05-14 | 1999-07-30 | Univ Texas | Formulacoes lipossomais de rifamicinas com elevada estabilidade e eficacia de incorporacao de antibiotico, e processo para a sua preparacao |
EP0616801B1 (de) * | 1993-03-24 | 1998-05-27 | Novartis AG | Verfahren zur Herstellung einer Liposomendispersion im Hochdruckbereich |
CA2163860A1 (en) * | 1993-06-30 | 1995-01-12 | Chung C. Hsu | Method for preparing liposomes |
US5474985A (en) * | 1993-12-22 | 1995-12-12 | The Regents Of The University Of California | Preventing and treating elevated intraocular pressure associated with administered or endogenous steroids using non-steroidal cyclooxygenase inhibitors |
US6313106B1 (en) * | 1995-06-07 | 2001-11-06 | D-Pharm Ltd. | Phospholipid derivatives of valproic acid and mixtures thereof |
US5599535A (en) * | 1995-06-07 | 1997-02-04 | Regents Of The University Of California | Methods for the cyto-protection of the trabecular meshwork |
US5674888A (en) * | 1995-06-07 | 1997-10-07 | University Of California | Method for the treatment of a trabecular meshwork whose cells are subject to inhibition of cell division |
EP0906088B1 (en) * | 1996-05-14 | 2005-11-23 | BURZYNSKI, Stanislaw R. | Liposomal antineoplaston therapies with markedly improved antineoplastic activity |
US6723338B1 (en) * | 1999-04-01 | 2004-04-20 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Compositions and methods for treating lymphoma |
GB9921958D0 (en) * | 1999-09-16 | 1999-11-17 | Pharmacia & Upjohn Spa | Formulations for parenteral use of estramustine phosphate and sulfoalkylether-cyclodextrins |
EP1337539A2 (en) * | 2000-11-29 | 2003-08-27 | Bracco International B.V. | Linkable sialyl lewis x analogs |
WO2007014754A1 (en) * | 2005-08-02 | 2007-02-08 | I.D.M. Immuno-Designed Molecules | Process for the preparation of liposomal formulations |
JP4931527B2 (ja) * | 2006-09-20 | 2012-05-16 | 富士フイルム株式会社 | フッ素化ホスファチジルセリン化合物 |
EP2125031B1 (en) * | 2006-12-19 | 2017-11-01 | Marina Biotech, Inc. | Lipids and lipid assemblies comprising transfection enhancer elements |
WO2013086243A2 (en) * | 2011-12-07 | 2013-06-13 | Omega Protein Corporation | Phospholipid compositions enriched for palmitoleic, myristoleic or lauroleic acid, their preparation and their use in treating metabolic and cardiovascular disease |
US9801874B2 (en) | 2012-11-20 | 2017-10-31 | Spectrum Pharmaceuticals | Method for the preparation of liposome encapsulated vincristine for therapeutic use |
TWI678213B (zh) | 2015-07-22 | 2019-12-01 | 美商史倍壯製藥公司 | 用於長春新鹼硫酸鹽脂質體注射之即可使用的調配物 |
CN113995852B (zh) * | 2021-11-08 | 2024-01-30 | 河北大学 | Arg-脂质体微囊、微囊包封的鱼精蛋白-siRNA复合体及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1523965A (en) * | 1976-03-19 | 1978-09-06 | Ici Ltd | Pharmaceutical compositions containing steroids |
USRE30748E (en) * | 1976-10-12 | 1981-09-22 | Phosphatidyl quaternary ammonium compounds | |
DE2647395C2 (de) * | 1976-10-20 | 1984-03-29 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Verfahren zur Herstellung von Estern des Glycerophosphocholins |
GB2026340B (en) * | 1978-07-03 | 1982-12-22 | Ash P | Stabilising microvesicles |
FI75578C (fi) * | 1979-07-25 | 1988-07-11 | Ciba Geigy Ag | Analogifoerfarande foer framstaellning av farmakologiskt verkande lipofila fosfatidylmuramylpeptider. |
US4302459A (en) * | 1980-03-19 | 1981-11-24 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Liposome carriers in leishmaniasis chemotherapy with 8-aminoquinoline derivatives |
IL64397A0 (en) * | 1981-01-07 | 1982-02-28 | Weder Hans G | Process for the preparation of liposomal medicaments |
US4485045A (en) * | 1981-07-06 | 1984-11-27 | Research Corporation | Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes |
EP0088046B1 (de) * | 1982-02-17 | 1987-12-09 | Ciba-Geigy Ag | Lipide in wässriger Phase |
DE3209537A1 (de) * | 1982-03-16 | 1983-09-22 | Siemens AG, 1000 Berlin und 8000 München | Elektrokleinmotor mit einer vorrichtung zum einstellen des axialspiels |
DE3239817A1 (de) * | 1982-07-06 | 1984-01-12 | Max Planck Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Neue glycerinderivate zur synthese von phospholipiden |
US4666893A (en) * | 1983-02-15 | 1987-05-19 | St. Thomas Institute | Methods of inducing resistance to bacterial and viral infections |
US4515736A (en) * | 1983-05-12 | 1985-05-07 | The Regents Of The University Of California | Method for encapsulating materials into liposomes |
US4622219A (en) * | 1983-06-17 | 1986-11-11 | Haynes Duncan H | Method of inducing local anesthesia using microdroplets of a general anesthetic |
GB8322178D0 (en) * | 1983-08-17 | 1983-09-21 | Sterwin Ag | Preparing aerosol compositions |
DE3346525C2 (de) * | 1983-12-22 | 1987-03-19 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Pharmazeutische Zubereitung mit speziellen 1,2-Diacyl-glycero-3-phosphocholinen zur Behandlung von Erkrankungen im Magen-Darmbereich |
JPS6150912A (ja) * | 1984-08-16 | 1986-03-13 | Shionogi & Co Ltd | リポソ−ム製剤の製造法 |
WO1986003938A1 (en) * | 1985-01-11 | 1986-07-17 | The Regents Of The University Of California | Method for preserving liposomes |
US4774085A (en) * | 1985-07-09 | 1988-09-27 | 501 Board of Regents, Univ. of Texas | Pharmaceutical administration systems containing a mixture of immunomodulators |
-
1985
- 1985-10-11 CA CA000492845A patent/CA1260393A/en not_active Expired
- 1985-10-14 IL IL76700A patent/IL76700A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 DE DE8585113027T patent/DE3580648D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-14 AT AT85113027T patent/ATE58474T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 FI FI853982A patent/FI86371C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 IE IE252785A patent/IE58143B1/en not_active IP Right Cessation
- 1985-10-14 EP EP85113027A patent/EP0178624B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-14 PT PT81298A patent/PT81298B/pt unknown
- 1985-10-15 ZA ZA857888A patent/ZA857888B/xx unknown
- 1985-10-15 AU AU48713/85A patent/AU590221B2/en not_active Expired
- 1985-10-15 NO NO854085A patent/NO171443C/no not_active IP Right Cessation
- 1985-10-15 HU HU853987A patent/HU198128B/hu unknown
- 1985-10-15 ES ES547889A patent/ES8700934A1/es not_active Expired
- 1985-10-15 DK DK471085A patent/DK165220C/da not_active IP Right Cessation
- 1985-10-15 GR GR852492A patent/GR852492B/el unknown
- 1985-10-15 DD DD85281752A patent/DD239117A5/de not_active IP Right Cessation
- 1985-10-16 PH PH32933A patent/PH22978A/en unknown
- 1985-10-16 JP JP60228985A patent/JPH0618773B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-16 KR KR1019850007613A patent/KR890000908B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1989
- 1989-08-16 US US07/395,286 patent/US4971802A/en not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-10-13 JP JP5255752A patent/JPH0816067B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-09 HK HK1357/93A patent/HK135793A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK165220B (da) | Liposomsammensaetninger indeholdende syntetiske phospholipider og et farmaceutisk aktivt stof samt deres fremstilling og phospholipidblanding til fremstilling af sammensaetningerne | |
KR970005171B1 (ko) | 아라키돈산 대사물질 관련 리포좀 제조방법 및 그 제제 | |
EP0937456B1 (en) | Erythropoietin liposomal dispersion | |
JPH0665650B2 (ja) | インタ−リユ−キン療法に関する改良 | |
JPH0240644B2 (da) | ||
JPH08268893A (ja) | スタウロスポリン誘導体の静脈内投与のための医薬組成物 | |
US4983397A (en) | Pharmaceutical compositions consisting of acylated phospholipids | |
US4916118A (en) | Pharmaceutical administration systems containing chemotactic peptides | |
JP2798302B2 (ja) | リポソームおよび脂質複合体組成物の調製 | |
IE911231A1 (en) | Long-acting liposome peptide pharmaceutical products and¹processes for the preparation thereof | |
CA1273575A (en) | Pharmaceutical compositions consisting of acylated phospholipids | |
CA2595485A1 (en) | Liposomal compositions for parenteral delivery of statins | |
CA1309346C (en) | Pharmaceutical administration systems containing chemotactic peptides | |
WO1989005149A1 (en) | Methyl cellulose pharmaceutical composition | |
JP3693209B2 (ja) | 閉鎖小胞の製造方法 | |
JPH01290634A (ja) | インターフェロン含有リポソーム製剤およびその製造法 | |
BE902089A (fr) | Perfectionnements a la therapie par l'interleukine. | |
PL197938B1 (pl) | Liposomowy preparat zawierający przeciwnowotworową substancję aktywną, sposób jego wytwarzania i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PUP | Patent expired |