JPH07238038A

JPH07238038A - リン脂質含有医薬組成物

Info

Publication number: JPH07238038A
Application number: JP5255752A
Authority: JP
Inventors: Lajos Tarcsay; タルツァイラヨス; Hansjoerg Eibl; アイブルハンスイェルク; Peter Fankhauser; フランクハウザーペーター; Anita Peil; パイルアニタ
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1984-10-16
Filing date: 1993-10-13
Publication date: 1995-09-12
Anticipated expiration: 2011-02-21
Also published as: EP0178624B1; NO171443C; ES8700934A1; HU198128B; DE3580648D1; JPS6197215A; EP0178624A3; EP0178624A2; DK471085D0; FI86371B; JPH0816067B2; IE58143B1; AU4871385A; PT81298A; GR852492B; PT81298B; NO171443B; DD239117A5; CA1260393A; DK165220B

Abstract

(57)【要約】【目的】毒性の低いリポソーム形成用乾燥組成物を提
供する。【構成】ａ）次の式（Ｉ）：【化１】（式中Ｒ₁及びＲ₂はＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルケノイル基であ
り、ｎは１〜３の整数であり、そしてＹ⁺は医薬として
許容される塩基の陽イオンである）で表わされる実質的
に純粋な合成リン脂質、ｂ）式【化２】（式中、Ｒ₁はＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルカノイル基であり、Ｒ₂
はＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルケノイル基であり、Ｒ_a，Ｒ_b及びＲ
_cは水素原子又はＣ₁〜Ｃ₄アルキル基であり、そして
ｎは２〜４の整数である）で表わされる実質的に純粋な
合成リン脂質、並びにｃ）生物学的活性をもつ物質又は
物質混合物、を含有する乾燥調製物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は合成の実質的に純粋なリ
ン脂質及び薬学的に活性な物質を含有する医薬組成物に
関する。本発明の医薬組成物は水性分散体中のリポソー
ムの形態で使用される。

【０００２】

【従来の技術】リポソームは多数の刊行物中の文献に記
載されてきている。多くの研究はそれらの構造及び使用
に関するものである。１つの脂質二重層をもつ単膜リポ
ソームとタマネギの外皮に似た態様で配置されている幾
つかの脂質二重層をもつ多重膜リポソームとの間の区別
がなされている。特に、可能なかぎりむらのない大きさ
で直径が約２．０×１０^-8〜５．０×１０^-6ｍ、好まし
くは約２．０×１０^-8〜３．０×１０^-6ｍである集団を
もつリポソームは製薬用途に適している。

【０００３】その球状シエルは脂質成分、例えば両親媒
性脂質、例えばリン脂質、例えばレシチン、セファリン
又はホスファチジン酸でできた、又は、場合によっては
これらの脂質と天然脂質、例えばコレステロールとでで
きた１つ以上の二重層からなる。これらの二重層は封入
すべき化合物を含んだ水性相を収容している内部空間を
取り囲んでおり、封入すべき化合物に関してはその化合
物の構造及びその他のパラメーター、例えば温度又は濃
度に依存して、その水性相中及び（又は）二重層中に存
在することが可能である。

【０００４】広範囲の種類の活性物質のための担体とし
てのリポソームの治療用途にはたいへんな感心がある。
従ってリポソームは蛋白質（例えば抗体又は酵素）、ホ
ルモン、ビタミン又は遺伝子のための担体として、又は
分析の目的で標識化合物のための担体として提案されて
きている。

【０００５】リポソームに基いた医薬投与システムはグ
レゴリアデイス（G.Gregoriadis ）（編集者）の総観著
作物、リポソームテクノロジイ、第II巻、インコーポ
レーションオブドラッグス、プロテインズアンド
ジエネティックマテリアル（Liposome Technology,
vol. II, Incorporation of Drugs, Proteins and Gen
etic Material ）、シーアールシプレス（CRC Press
）、１９８４年発行に記載されている。ナイト（C.G.K
night）（編集者）の総観著作物、リポソームス：フロ
ムフィズィカルストラクテュアートウセラピュー
ティックアプリケーション（Liposomes ：From Physi
cal Structure to Therapeutic Applications ）、エレ
セビエール（Elsevier）、１９８１年発行の第１６章１
６６頁にはリポソームに基いた医薬投与形態の利益が次
のように要約されている：

【０００６】１．リポソームは生物学的膜に浸透し、そ
れで普通には不浸透性であるバリヤーを通しての活性物
質の移送を容易にする。特に、リポソームは包封された
化合物による細胞内浸透を容易にする。２．リポソームはあるタイプの細胞組織との特定の相互
作用の観点から、増加した選択性及び低下した毒性を目
的として使用することができる。

【０００７】３．活性物質の薬物動態はリポソームによ
って、例えば解放、分布及び体循環からの除去をいくぶ
ん変えることによって有益に影響され得る。４．化学的影響及び代謝によって引起される変化に対し
て敏感な活性物質はリポソームにより失活に対して保護
される。５．リポソームに包封された抗原の免疫反応を刺激する
ことによって免疫調節効果を得ることができる。

【０００８】これらはその上の利益、例えば治療効果を
達成するのに、遊離の活性物質を用いる時に比べて、リ
ポソームを用いた時に必要とされる活性物質の量を減少
させること、又は活性物質の投与回数を減少させること
をもたらす。リポソームに基いた投与システムは物質を
エンドサイテイシング細胞（endocytising cell ）中
に、特に細網内皮系統のエンドサイテイシング細胞中に
導入する時に特別の有益をもつ。例えば、エンドサイテ
イシング細胞中への抗生物質の移送の促進及びこれらの
細胞中に存在する原因として働く生体との改良された戦
いが観察されている。エンドサイテイシング細胞は又炎
症過程に伴なわれる。リポソームに包封された抗リウマ
チ性活性物質が周囲の組織中へよりも上記のような細胞
中へ一層迅速に導入されることが観察されている。

【０００９】リポソームの形態で内包された細胞増殖抑
制物質は細胞内皮系統の特定の器官（肝臓、脾臓、骨
髄）中に導入することができ、又は、肺において、肺の
毛細管中での濾過及びそれに続く遊走血液単核細胞によ
る移送の結果として、活性物質は肺胞マクロファージ中
に富化することができ、それ故に肺又は肝臓の腫瘍に対
する作用の改良を達成することが可能であり、一方同時
に毒性を低下させる。

【００１０】免疫モジュレーターを包封しているリポソ
ームは免疫系の反応（免疫刺激、免疫抑制）における調
節された変化を成し遂げることができる。例えば、カン
サーリサーチ（Cancer Research ）３９、８８１（１９
７９）において、ポステ（G. Poste）等はリポソームに
包封されたリンフォカインによるマウスのマクロファー
ジの抗腫瘍特性の活性化を観察している。ソーン（S. S
one ）及びフィドラー（I.J.Fidler）はセルイムノル
（Cell. Immunol.）５７、４２（１９８１）において、
リポソーム中に包封された合成ムラミルジペプチドによ
るラットの肺胞マクロファージの抗腫瘍特性の生体外活
性化を報告している。

【００１１】免疫モジュレーター（例えばムラミルジペ
プチド及びムラミルトリペプチド）ヒトγ−インターフ
ェロン又はマクロファージ活性化因子（ＭＡＦ）をもつ
リポソームは、感染、特にウイルス感染に対する防衛の
ために、また血液中及びリンパ液中の一次腫瘍組織中の
腫瘍細胞との戦いのために、そしてまた転移との戦いの
ために、細胞性免疫系、例えば単核細胞系の細胞、例え
ば血液単核細胞、肺胞マクロファージ又は腹腔マクロフ
ァージを活性化するのに適している。

【００１２】

【発明が解決しようとする問題点】リポソームの製造に
従来用いられている天然物質、例えば天然リン脂質（例
えば卵ホスファチジン酸、卵または大豆レシチン、又は
卵または大豆セファリン）及びウシ脳ホスファチジルセ
リンは、たとえこの物質が精製された形態であり、そし
て薄層又はペーパークロマトグラフィーに従って同種の
ものからなると想定されても、異なった構造のアシル基
をもつホスホグリセリドの混合物である。天然リン脂質
をもつ乾燥製剤は熱不安定性であり、それで短時間継続
するのみであり、また水性相中の天然リン脂質も不安定
であり、それで水性リポソーム混合物は同様に限られた
時間継続するのみである。

【００１３】天然リン脂質のリポソーム混合物の組成が
変化するために、また低い収率、種々の粒度分布及びそ
れらの低い安定度のために、生体外及び生体内の試験結
果及び臨床結果は必要な再現精度に欠け、このことは、
比較的長期間にわたって知られてきており且つ集中的な
研究がなされてきているこの投与形態の産業上の有用性
に対する効果を今まで制限してきている。本発明の課題
は、むらのない粒度分布及び高度の安定性をもつリポソ
ーム分散液を水性相中で生成する医薬組成物を製造する
ことである。

【００１４】

【問題点を解決するための手段】本発明は、ａ）式

【００１５】

【化５】

【００１６】（式中Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ他とは無関
係に偶数の炭素原子をもつＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルケノイル基で
あり、ｎは１〜３の整数であり、そしてＹ⁺は医薬とし
て許容される塩基の陽イオンである）で表わされる合成
の実質的に純粋なリン脂質、ｂ）式

【００１７】

【化６】

【００１８】（式中Ｒ₁は偶数の炭素原子をもつＣ₁₀〜
Ｃ₂₀アルカノイル基であり、Ｒ₂は偶数の炭素原子をも
つＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルケノイル基であり、Ｒ_a，Ｒ_b及びＲ
_cは水素原子又はＣ₁〜Ｃ₄アルキル基であり、そして
ｎは２〜４の整数である）で表わされる合成の実質的に
純粋なリン脂質、及びｃ）生物学的活性をもつ物質又は物質混合物を含有する
医薬組成物に関する。

【００１９】本発明の説明の範囲内において、前記及び
後記の一般用語は好ましくは次の意味をもつ：有機基と
の関連で用いる用語“低級”、例えば低級アルキル基、
低級アルキレン基、低級アルコキシ基、低級アルカノイ
ル基等は、そのような有機基が、特に別に定義していな
い限りは、７個以下、好ましくは４個以下の炭素原子を
含有することを意味する。

【００２０】式（Ｉ）及び（II）のリン脂質の命名法は
ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢコミッションオンバイオケミカル
ノーメンクレイチャー（Commission on Biochemical
Nomenclature）（ＣＢＮ）により Eur. J. of Biochem.
７９、１１〜２１（１９７７）“ノーメンクレイチャー
オブリピズ（Nomenclature of Lipids）”でなされ
た勧告に従っている（ｓｎ命名法、立体特異性番号付
け）。

【００２１】別に指摘しない限りは、薬学的に活性な物
質については世界保健機関（ＷＨＯ）により提案された
一般名称〔リコメンデッドインターナショナルノン
・プロプリエタリーネームズ（Recommended Internat
ional Non-proprietary Names)〕を用い標準著作物“フ
ァルマザイテシュヘミー（Pharmazeutishe Chemie)”
〔シュレーダー（E.Schreeder)、ルーファー（C.Rufer
）及びシュミーチェン（R.Schmiechen）、チーメベ
ルラグスタットガード（Thieme Verlag Stuttgart
）、（１９８２）及びメルクインデックス（Merck I
ndex ）（第１０版）から選ばれている。

【００２２】用いた合成リン脂質の純度は９０重量％を
越え好ましくは９５重量％を越える。式（Ｉ）の合成リ
ン脂質において、“偶数の炭素原子をもつＣ₁₀〜Ｃ₂₀ア
ルケノイル基”の意味をもつＲ₁及びＲ₂は好ましくは
９−シス−ドデセノイル基、９−シス−テトラデセノイ
ル基、９−シス−ヘキサデセノイル基、６−シス−オク
タデセノイル基、６−トランス−オクタデセノイル基、
９−シス−オクタデセノイル基、９−トランス−オクタ
デセノイル基、１１−シス−オクタデセノイル基又は９
−シス−エイコセノイル基である。

【００２３】医薬として許容される塩基の陽イオンＹ⁺
は、例えば、アルカリ金属イオン（例えばリチウムイオ
ン、ナトリウムイオン又はカリウムイオン）、アンモニ
ウムイオン、モノ−、ジ−又はトリ−Ｃ₁〜Ｃ₄アルキ
ルアンモニウムイオン（例えばトリメチル−、エチル
−、ジエチル−又はトリエチル−アンモニウムイオ
ン）、２−ヒドロキシエチル−トリ−Ｃ₁〜Ｃ₄アルキ
ルアンモニウムイオン（例えばコリン陽イオン）、又は
２−ヒドロキシエチルアンモニウムイオン、及び塩基性
アミノ酸例えばリシン又はアルギニンの陽イオンであ
る。

【００２４】Ｙ⁺は好ましくはナトリウムイオンであ
る。式（Ｉ）の合成リン脂質において、Ｒ₁及びＲ₂は
好ましくは同一であり、そして９−シス−ドデセノイル
基、９−シス−テトラデセノイル基、９−シス−ヘキサ
デセノイル基、９−シス−オクタデセノイル基又は９−
シス−エイコセノイル基であり、ｎは１であり、そして
Ｙ⁺はナトリウムイオンである。

【００２５】式（Ｉ）の合成リン脂質は特に１，２−ジ
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジル−（Ｓ）−セリンナトリウムである。式（II）
の合成リン脂質において、“偶数の炭素原子をもつＣ₁₀
〜Ｃ₂₀アルカノイル基”の意味をもつＲ₁は好ましくは
ｎ−ドデカノイル基、ｎ−テトラデカノイル基、ｎ−ヘ
キサデカノイル基、ｎ−オクタデカノイル基又はｎ−エ
イコサノイル基である。

【００２６】式（II）の合成リン脂質において、Ｒ₂は
式（Ｉ）で記載した意味をもつ。式（II）の合成リン脂
質において、式−（Ｃ_nＨ_2n）−の基は枝分れのない又
は枝分れしたアルキレン基、例えば１，１−エチレン
基、１，１−、１，２−又は１，３−プロピレン基又は
１，２−、１，３−又は１，４−ブチレン基、又は好ま
しくは１，２−エチレン基（ｎ：２）である。

【００２７】式（II）の合成リン脂質において、好まし
くはＲ₁はｎ−ドデカノイル基、ｎ−テトラデカノイル
基、ｎ−ヘキサデカノイル基又はｎ−オクタデカノイル
基であり、Ｒ₂は９−シス−ドデセノイル基、９−シス
−テトラデセノイル基、９−シス−ヘキサデセノイル
基、９−シス−オクタデセノイル基又は９−シス−エイ
コセノイル基であり、Ｒ_a，Ｒ_b及びＲ_cはメチルであ
り、そしてｎは２である。式（II）の合成リン脂質は特
に１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シス−オクタ
デセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジルコリンであ
る。下記の括弧内に与えられている名称は式（Ｉ）及び
（II）のリン脂質中のアシル基Ｒ₁及びＲ₂に対して普
通に使用されている：

【００２８】９−シス−ドデセノイル基（ラウロレオイ
ル基）、９−シス−テトラデセノイル基（ミリストレオ
イル基）、９−シス−ヘキサデセノイル基（パルミトレ
オイル基）、６−シス−オクタデセノイル基（ペトロセ
ロイル基）、６−トランス−オクタデセノイル基（ペト
ロセライドイル基）、９−シス−オクタデセノイル基
（オレオイル基）、９−トランス−オクタデセノイル基
（エライドイル基）、１１−シス−オクタデセノイル基
（バクセノイル基）、９−シス−エイコセノイル基（ガ
ドレオイル基）、ｎ−ドデカノイル基（ラウロイル
基）、ｎ−テトラデカノイル基（ミリストイル基）、ｎ
−ヘキサデカノイル基（パルミトイル基）、ｎ−オクタ
デカノイル基（ステアロイル基）、ｎ−エイコサノイル
基（アラキドイル基）。

【００２９】生物学的活性をもつ物質又は物質混合物は
特に、消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア物質、抗真
菌物質、抗腫瘍物質及び免疫モジュレーターを含む群か
らの薬学的に活性な物質である。

【００３０】消炎薬を含む群からの薬学的に活性な物質
は、例えば、グルココルチコイド、例えばコルチゾン、
ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、フ
ルオコルトロン、トリアムシノロン、メチルプレドニゾ
ロン、プレドニリデン、パラメタゾン、デキサメタゾ
ン、ベータメタゾン、ベクロメタゾン、フルプレドニリ
デン、デスオキシメタゾン、フルオシノロン、フルメタ
ゾン、ジフルコルトロン、クロコルトロン、クロベタゾ
ール又はフルオコルチンブチルエステル；

【００３１】置換されたフェニル酢酸塩又は２−フェニ
ルプロピオン酸塩を含む群からの非ステロイド系炎症抑
制剤、例えばアルクロフェナック、イブフェナック、イ
ブプロフェン、ＭＫ−８３０、ＢＬ−２３６５、クリン
ダナック、フェンクロラック、ケトプロフェン、フェノ
プロフェン、インドプロフェン、フェンクロフェナッ
ク、ジクロフエナック、フルルビプロフェン、ピルプロ
フェン、ナプロキセン、ベノキサプロフェン、カルプロ
フェン、又はシクロプロフェン；アントラニル酸誘導
体、例えば式

【００３２】

【化７】

【００３３】（式中、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₃はそれぞれ他
とは無関係に水素原子、メチル基、塩素原子又はトリフ
ルオロメチル基である）で表わされるアントラニル酸誘
導体、例えばメフェナム酸、フルフェナム酸、トルフェ
ナム酸又はメクロフェナム酸；アニリノ置換ニコチン酸
誘導体、例えばミフラム酸、クロニキシン又はフルニキ
シン；２−インドール−３−イル基又はピロール−２−
イル基をもつヘテロアリール酢酸又は２−ヘテロアリー
ル酢酸、例えばインドメタシン、オキシメタシン、イン
トラゾール、アセメタジン、シンメタシン、ゾメピラッ
ク、トルメチン、コールピラック又はチアプロフエン
酸；スリンダックタイプのインデニル酢酸及び鎮痛活性
のヘテロアリールオキシ酢酸、例えばベンザダックであ
る。抗生物質を含む群からの薬学的に活性な物質は、例
えば、式

【００３４】

【化８】

【００３５】（式中、Ｒ₁は水素原子又はピロリジン−
１−イル−メチル基であり、Ｒ₂は水素原子又はヒドロ
キシル基であり、Ｒ₃は水素原子、ヒドロキシル基又は
メチル基であり、Ｒ₄は水素原子又はメチル基であり、
そしてＲ₅は水素原子、塩素原子又はジメチルアミノ基
である）で表わされるテトラサイクリン抗生物質、例え
ばクロルテトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、
テトラサイクリン、デメチルクロルテトラサイクリン、
メタサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン又
はロリテトラサイクリン；アミノグリコシド、例えばカ
ナマイシン、

【００３６】アミカシン、ゲンタマイシンＣ_1a、Ｃ₂、
Ｃ_2b又はＣ₁、シソマイシン、ネチルマイシン、スペク
チノマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、
ネオマイシンＢ、ジベカシン又はカネンドマイシン；マ
クロライド、例えばマリドマイリン又はエリスロマイシ
ン；リンコマイシン、例えばクリンダマイシン又はリン
コマイシン；それぞれ６β−又は７β−アシルアミノ基
をもつペニシラン酸（６−ＡＰＡ）−及びセファロスポ
ラン酸（７−ＡＣＡ）−誘導体（これらは発酵的に、半
合成的に又は完全に合成的に得られる６β−アシルアミ
ノペニシラン酸又は７β−アシルアミノセファロスポラ
ン酸の誘導体又は３位で変性されている７β−アシルア
ミノセファロスポラン酸誘導体中に存在する）、

【００３７】例えばペニシリンＧ又はＶ、フェネチシリ
ン、プロピシリン、ナフシリン、オキサシリン、クロキ
サシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、サ
イクラシリン、エピシリン、メシリーナム、メチシリ
ン、アズロシリン、サルベニシリン、チカルシリン、メ
ズロシリン、ピペラシリン、カリンダシリン、アジドシ
リン又はサイクラシリンの名称で知られてきているペニ
シラン酸誘導体、又はセファクロール、セフロキシム、
セファズルール、セファセトリル、セファゾリン、セフ
ァレキシン、セファドロキシル、セファログリシン、セ
フオキシチン、スファロリジン、

【００３８】セフスロジン、セフォチアム、セフタジジ
ン、セフォニシド、セフォタキシム、セフメノキシム、
セフチゾキシム、セファロチン、セフラジン、セファマ
ンドール、セファノン、セファピリン、セフロキサジ
ン、セファトリジン、セファゼドン、セフトリキソン又
はセフォラニドの名称で知られてきているセファロスポ
リン誘導体、及びその他のクラバム、ペネム又はカルバ
ペネムタイプのβ−ラクタム抗生物質、例えばモキサラ
クタム、クラブラン酸、ノカルジシンＡ、スルバクタ
ム、アズトレオナム又はチエナマイシン、及びバイコザ
マイシン、ノボビオシン、クロラムフェニコール又はチ
アムフェニコール、リファムピシン、フォスフォマイシ
ン、コリスチン又はバンコマイシンタイプの抗生物質で
ある。

【００３９】抗リーシュマニア物質を含む群からの薬学
的に活性な物質は、例えば、アンチモン化合物、例えば
酒石酸アンチモニルカリウム、スチボフェン、ナトリウ
ムスチボカプテート及びナトリウムスチボグルコネート
である。抗真菌物質を含む群からの薬学的に活性な物質
は、例えば、チオ炭酸誘導体、例えばジベンズチオン、
トルナフテート又はトルシクレート；イミダゾール誘導
体、例えばクロトリマゾール、ミコナゾール、エコナゾ
ール、イソコナゾール又はケトコナゾール；又はポリエ
ン抗生物質、例えばニスタチン、ナタマイシン又はアム
フオテリシンＢである。

【００４０】抗腫瘍物質を含む群からの薬学的に活性な
物質は、例えば、ビス−（２−クロロエチル）アミン基
をもつアルキル化剤、例えばクロルメチン、クロラムブ
シル、メルファラム、ウラムスチン、マノムスチン、リ
ン酸エストラムスチン、メクロルエタミンオキシド、シ
クロホスファミド、イフォスファミド又はトリフォスフ
ァミド；アジリジン構造をもつアルキル化剤、例えばト
レタミン、チオテパ、トリアジクオン又はミトマイシ
ン；アルキル化性メタンスルホン酸エステル、例えばブ
スルファン；

【００４１】アルキル化性Ｎ−アルキル−Ｎ−ニトロソ
ウレア誘導体、例えばカルムスチン、ロムスチン、セム
スチン又はストレプトゾトシン；及びミトブロニトー
ル、ダカルバジン又はプロカルバジンタイプのアルキル
化剤、葉酸タイプの代謝拮抗物質、例えばメトトレキセ
ート、プリン誘導体例えばメルカプトプリン、チオグア
ニン、アザチオプリン、チアミプリン、ビダラビン又は
プロマイシン、ピリミジン誘導体、例えばフルオロウラ
シル、フルオキシウリジン、テガファー、シタラビン、
イドックスウリジン、フルシトシン、

【００４２】癌化学療法に用いられている抗生物質、例
えばダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシ
ン、ミスラマイシン、ブレオマイシンＡ₂又はＢ₂又は
エトポシド、及びビニカアルカロイド、例えばビンクリ
スチン、場合によってはクロルメタミン、プレドニソロ
ン又はプレドニソンと組合わされたもの、及びプロカル
バジンである。免疫モジュレーターは、例えば、ムラミ
ルペプチド、例えばムラミルジペプチド又はムラミルト
リペプチド、特に式

【００４３】

【化９】

【００４４】（式中、Ｘは基−Ｃ（＝Ｏ）−又は−Ｃ
（＝Ｏ）−Ｏ−であり、Ｒ₁はＬ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏ
Ｇｌｎ−Ｌ−Ａｌａ−２−（１，２−ジパルミトイル−
ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−
エチルアミド基、Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｃγ−Ｌ−
Ａｌａ）−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリ
セロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミ
ド基、Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎＯＨ基、Ｌ−Ａｌ
ａ−Ｄ−ＧｌｎＮＨ₂−α−ｎ−ブチルエステル基、Ｌ
−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎ−Ｌ−（ステアロイル）−
Ｌｙｓ基、Ｌ−Ｖａｌ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＮＨ₂−α−ｎ−
メチルエステル基、

【００４５】Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎ−Ｌ−Ａｌ
ａ−１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセリンエステ
ル基又はＬ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎ−Ｌ−Ａｌａ−
コレステロールエステル基であり、Ｒ₂は水素原子、メ
チル基又はｎ−プロピル基であり、Ｒ₃は水素原子、ｎ
−ステアロイル基、１０−（２，３−ジメトキシ−１，
４−ジオキソ−５−メチル）−２，５−シクロヘキサジ
エノイル基、２−ベヘノイルオキシ−２−メチルプロパ
ノイル基又はｎ−オクタノイル基であり、

【００４６】Ｒ₄は水素原子又はｎ−オクタノイル基で
あり、Ｒ₅はＣ₁〜Ｃ₄アルキル基であり、そしてＲ₆
は水素原子又はＣ₁〜Ｃ₄アルキル基である）で表わさ
れるもの及びそれの相当する２−パルミトイルチオ誘導
体；ｎ−ラウロイル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎ−
（ｍ−ＤＡＰ−Ｇｌｙ）−ＮＨ₂、ｎ−ラウロイル−Ｌ
−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎ−（Ｌ−ＤＡＰ−Ｇｌｙ）
−ＮＨ₂、ｎ−ラウロイル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓｏＧ
ｌｎ−（Ｌ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｌａ）−ＮＨ₂、

【００４７】ｎ−オクタノイル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−ｉｓ
ｏＧｌｎ−（Ｌ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｌａ）−ＮＨ₂又はパ
ルミトイル−Ｃｙｓ−（（２Ｒ）−２，３−ジラウロイ
ルオキシプロピル）−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｇｌｙ−
タウリン−Ｎａ）−ＮＨ₂タイプの免疫調節特性をもつ
リポペプチドであり、又はそれらは抗原又はマイトジエ
ン等によって刺激された時にリンパ球、単核細胞又はマ
クロファージによって分泌されるリンフォカインであ
る。

【００４８】リンフォカインを含む群としては、例え
ば、公知のタイプのインターフェロン、特に天然又は組
換え体のヒト−γインターフェロン、例えば、ヨーロッ
パ特許出願第６３，４８２号、第７７，６７０号、第８
３，７７７号、第８８，５４０号、第８９，６７６号、
第９５，３５０号、第９９，０８４号、第１１０，０４
４号及び第１１２，９６７号及び国際出願（ＰＣＴ）Ｗ
Ｏ８３／０４，０５３及びＷＯ８４／０２，１２９に従
って得ることのできるヒトγインターフェロンがある。

【００４９】ヨーロッパ特許出願第１２１，１５７号に
従った、次のアミノ酸配列をもつ組換え体ヒトγインタ
ーフェロン：Ｈ₂Ｎ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌ
ｕ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ
−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−
Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌ
ｅｕ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｌｙ
ｓ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ
−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ｇｌｎ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔ
ｙｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ａｓ
ｎ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ
−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−
Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ａ
ｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｓｐ
−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−
Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌ
ｅｕ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｌ
ａ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ
−Ｖａｌ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｓ−Ｓｅｒ−
Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｌ
ｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｍｅ
ｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ
−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−ＯＨ、

【００５０】及び英国特許出願第２，１０７，７１８号
に従った、次のアミノ酸配列をもつ組換え体ヒトγイン
ターフェロン：Ｈ₂Ｎ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌ
ｕ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ
−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−
Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌ
ｅｕ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｌｙ
ｓ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ
−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ｇｌｎ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔ
ｙｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ａｓ
ｎ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ
−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−
Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ａ
ｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｓｐ
−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−
Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌ
ｅｕ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｌ
ａ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ
−Ｖａｌ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−
Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｍｅ
ｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ
−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−ＯＨ、が好ましい。

【００５１】リンフオカインを含む群としてはまた精製
された形態のヒトインターロイキン２、例えば、Ｔ細胞
マイトジエンによるヒト腫瘍白血病細胞又はリンパ腫細
胞の活性化の後に培養物濾液中で得ることができまた逆
相ＨＰＬＣによって精製されているインターロイキン
２；抗原又はマイトジエンによる刺激の後に脾臓又は末
梢血液からのヒトＴリンパ球をもつ培養物から得ること
ができる培養物濾液、例えばヒトＴ細胞−白血病−リン
パ腫ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）、植物凝集素又はコンカ
ナバリンＡ；及びマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩ
Ｆ）、白血球遊走阻止因子、白血球遊走拡大因子、マク
ロファージ活性化因子（ＭＡＦ）、コロニー刺激因子、
インターロイキン１及び２及びγインターフェロンの用
語で知られてきている成分をもつ混合物を含有する培養
物濾液、特にマクロファージ活性化因子（ＭＡＦ）を高
い含有率でもつ培養物濾液又は単離物がある。

【００５２】本発明の医薬組成物は比較的むらのない大
きさ（約２．０〜３．０×１０^-9ｍ）及び良好な貯蔵安
定性を特徴とする。例えば、上記の合成リン脂質及びム
ラニルペプチドからなる乾燥製剤（凍結乾燥物）は数ケ
月から数年までの期間継続する。乾燥製剤は使用の直前
に振盪（ボルテックス）又は振動によって水性緩衝液中
に非常に簡単に分散させることができ、それで現場で使
用することができ、ほとんどの場合に濾過、中和、透析
等の如き追加の処置を避けることができる。合成のリン
脂質及び包装化合物としてのムラミルペプチドをもつ水
性リポソーム分散体は１０℃以下の温度で数週間から数
カ月の期間継続し、また凍結乾燥体の形態で貯蔵安定性
にすることさえできる。

【００５３】本発明の医薬組成物は特に良好な生理学的
安全度、例えば低い毒性及びそれらがリポソームの水性
分散体の形態で投与される時に好ましい薬物動態プロフ
ィルを特徴とする。従って、特に単核細胞系の細胞を通
して非常に迅速なエンドサイト−シスが起る。前記の合
成リン脂質及び包装化合物としてのムラミルジ−又はト
リ−ペプチドからなるリポソームは肺及び肝臓中に特に
十分に富化することができそしてマクロファージによっ
て迅速に取込まれる。特に、肺胞マクロファージは刺激
され、そして生理学的に異常な物質、例えばウイルス又
は転移腫瘍細胞を排除する。リポソームの形態の本発明
の医薬組成物はそれ故に転移腫瘍と戦うための癌の化学
療法に極めて適している。

【００５４】本発明の医薬組成物の製造に用いることの
できるリン脂質（Ｉ）及び（II）の混合物は、水性相中
での分散の後に約３７℃よりも低い相転移温度（液体−
ゲル形態）をもつ。リポソーム分散体は加熱することな
しで作ることができる。水性分散体中の式（Ｉ）及び
（II）のリン脂質がリポソームの形態となっており、そ
の内部に生物学的活性をもつ前記の化合物又は物質混合
物が封入されているその水性分散体は医薬投与システム
であり、これは、場合によっては例えば超遠心分離によ
って濃縮するか又は単離した後に経口（ｐ．ｏ．）又は
非経口（ｉ．ｖ．、ｉ．ｍ．、ｉ．ｐ．又は局所）投与
のための治療目的に適している。

【００５５】経口投与の場合には、リポソームに基いた
投与システムは活性成分の吸収を改善することができ
る。経口投与については、ｐＨ７．０〜７．８、好まし
くは７．２〜７．４に緩衝化されたリポソームを含有す
る水性分散体は製薬的に許容される稀釈剤又は担体と、
又は通例の添加物、例えば着色剤又は香料と混合するこ
とができ、又シロップの形態で又はカプセルの形態で用
いることができる。

【００５６】非経口投与については、リポソームは、ｐ
Ｈ７．０〜７．８、好ましくは７．２〜７．４に緩衝化
された担体液体として役立つ無菌水溶液、例えば無菌
の、カルシウムを含まない、等張塩水又はグルコース溶
液中に分散させる。局所投与については、ｐＨ７．０〜
７．８、好ましくは７．２〜７．４に緩衝化されたリポ
ソーム含有水性分散液を通例の固体担体、例えば増粘
剤、例えばヒドロキシプロピルセルロース、及び適した
防腐剤、酸化防止剤又は香料と混合され、それで皮膚又
は粘膜に塗布するためにローション又はゲルの形態で用
いられる。

【００５７】本発明は狭い意味では式（Ｉ）のリン脂質
対式（II）のリン脂質の混合比約１０：９０〜約５０：
５０モル％で合成の実質的に純粋なリン脂質を含有し、
また消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア物質、抗真菌
物質、抗腫瘍物質及び免疫モジュレーターを含む群から
の製薬的に活性な物質又は物質混合物を含有し、そして
場合によっては存在してもよい、ｐＨ７．０〜７．８に
緩衝された担体液及び（又は）追加の固体担体を含有し
てもよい医薬組成物に関する。

【００５８】本発明は好ましくは、ａ）式（Ｉ）においてＲ₁及びＲ₂は同じであって９−
シス−ドデセノイル基、９−シス−テトラデセノイル
基、９−シス−ヘキサデセノイル基、９−シス−オクタ
デセノイル基又は９−シス−エイコセノイル基であり、
ｎは１であり、そしてＹ⁺はナトリウムイオンである式
（Ｉ）で表わされる合成の実質的に純粋なリン脂質、

【００５９】ｂ）式（II）においてＲ₁はｎ−ドデカノ
イル基、ｎ−テトラデカノイル基、ｎ−ヘキサデカノイ
ル基又はｎ−オクタデカノイル基であり、Ｒ₂は９−シ
ス−ドデセノイル基、９−シス−テトラデセノイル基、
９−シス−ヘキサデセノイル基、９−シス−オクタデセ
ノイル基又は９−シスエイコセノイル基であり、そして
Ｒ_a，Ｒ_b及びＲ_cはメチル基である式（II）で表わさ
れる合成の実質的に純粋なリン脂質、

【００６０】ｃ）消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア
物質、抗真菌物質、抗腫瘍物質及び免疫モジュレーター
を含む群からの製薬的に活性な物質又は物質混合物、及
び場合によっては存在してもよい、ｐＨ７．２〜７．４
に緩衝された担体液体、を含有する医薬組成物に関す
る。

【００６１】本発明は特に、ａ）合成の、実質的に純粋なナトリウム１，２−ジ−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）合成の、実質的に純粋な１−ｎ−ヘキサデカノイル
−２−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホ
スファチジルコリン、ｃ）消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア物質、抗真菌
物質、抗腫瘍物質及び免疫モジュレーターを含む群から
の製薬的に活性な物質又は物質混合物、及び場合によっ
ては存在してもよい、ｐＨ７．２〜７．４に緩衝された
担体液体、を含有する医薬組成物に関する。

【００６２】本発明は一層特に、ａ）合成の、実質的に純粋なナトリウム１，２−ジ−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）合成の、実質的に純粋な１−ｎ−ヘキサデカノイル
−２−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホ
スファチジルコリン、

【００６３】ｃ）消炎薬、例えばジクロフナック又はピ
ルプロフェン；抗腫瘍物質、例えばミトマイシン、シタ
ラビン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソル
ビシン又はエトポシド；免疫モジュレーター、例えばＮ
−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミ
ニル−Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−
ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）エ
チルアミド、Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ
−グルタミン酸−（Ｃγ）−Ｌ−アラニン−２−（１，
２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシ
ホスホリルオキシ）エチルアミドの二ナトリウム塩、

【００６４】Ｎ−アセチルデスメチルムラミル−Ｌ−ア
ラニル−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩、Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミ
ンのナトリウム塩、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−
アラニル−Ｄ−グルタミン−α−ｎ−ブチルエステル、
Ｎα−（Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−
Ｄ−イソグルタミニル）−Ｎε−ステアロイル−Ｌ−リ
シン又は６−ｏ−ステアロイル−Ｎ−アセチルムラミル
−Ｌ−アラニン−Ｄ−イソグルタミン；リンフオカイン
又はそれらとの組合せ、を含む群からの製薬的に活性な
物質又は物質混合物、及び場合によっては存在していて
もよい、ｐＨ７．２〜７．４に緩衝された担体液体、を
含有する医薬組成物に関する。

【００６５】本発明は一層特に、ａ）合成の、実質的に純粋なナトリウム１，２−ジ−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）合成の、実質的に純粋な１−ｎ−ヘキサデカノイル
−２−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホ
スファチジルコリン、

【００６６】ｃ）抗腫瘍物質、例えばミトマイシン、シ
タラビン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソ
ルビシン又はエトポシド、及び免疫モジュレーター、例
えばＮ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグ
ルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミト
イル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキ
シ）エチルアミド、Ｎ−アセチルデスメチルムラミル−
Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩又は
Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソ
グルタミンのナトリウム塩であって、

【００６７】場合によってはヒトγインターフェロン又
はインターロイキン２、あるいは抗原又はマイトジエン
による刺激の後に脾臓又は末梢血液からのヒトＴリンパ
球をもつ培養物から得られた培養物濾液中に含まれてお
りそしてマクロファージ活性化因子（ＭＡＦ）の高い含
有率を特徴とする物質混合物と組合わされているもの、
を含む群からの製薬的に活性な物質及び場合によっては
存在していてもよい、ｐＨ７．２〜７．４に緩衝された
担体液体、を含有する医薬組成物に関する。

【００６８】本発明は何よりもまず、ａ）合成の、実質的に純粋なナトリウム１，２−ジ−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）合成の、実質的に純粋な１−ｎ−ヘキサデカノイル
−２−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホ
スファチジルコリン、

【００６９】ｃ）免疫調節作用をもつ化合物、例えばＮ
−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミ
ニル−Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−
ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）エ
チルアミド、Ｎ−アセチルデスメチルムラミル−Ｌ−ア
ラニル−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩又はＮ−ア
セチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタ
ミンのナトリウム塩であって、

【００７０】場合によっては抗原又はマイトジエンによ
る刺激の後に脾臓又は末梢血液からのヒトＴリンパ球を
もつ培養物から得られた培養物濾液中に含まれておりそ
して少なくとも７０％のＭＡＦ含有率を特徴とする物質
混合物と組合わされているもの、及び場合によっては存
在していてもよい、ｐＨ７．２〜７．４に緩衝された担
体液体、を含有する医薬組成物に関する。

【００７１】上記の医薬組成物は乾燥製剤の形態で市販
することができ、そしてｐＨ７．０〜７．８に緩衝化さ
れた担体液体中の水性リポソーム分散液の形態で用いる
ことができる。投与すべき活性物質の投与量は一般的に
は、例えばドイツ薬局方に規定されている、及び特定の
投与形態、患者の年令及び患者の健康に対して問題の活
性物質について知られている最高量及び最低量である。

【００７２】本発明に従って作ることのできるリポソー
ムをもった水性分散液は又、しかしながら、より少ない
投与量で投与された活性物質は受容器官に受け取らせる
ことができそれで治療効果をもたらすことができ、又は
一層高い投与量での投与では望ましくない副作用を避け
ることができる。リポソームの形態で包封されているム
ラミルペプチド又はリポペプチドタイプの前記の免疫モ
ジュレーターの好ましい投与量は１回の投与当り体重１
Kg当り０．０１〜約１０mgである。リポソーム形態のリ
ンフオカイン、例えばヒトγ−インターフェロン又はＭ
ＡＦを含有する混合物の場合には、好ましい投与量はγ
インターフェロン又はＭＡＦ１ml当り約１００〜１０
０，０００単位である。

【００７３】本発明は又式（Ｉ）及び（II）で表わされ
る合成の実質的に純粋なリン脂質の混合物、特に均質混
合物、特に式（Ｉ）のリン脂質対式（II）のリン脂質の
混合比が約１０：９０〜約５０：５０モル％である混合
物に関する。３０：７０モル％の混合比が好ましい。こ
れらの混合物は水溶性活性物質を含有する水性相中でリ
ポソームを作るのに用いることができる。

【００７４】本発明の医薬組成物又は前記した混合物
は、例えば、次のようにして作られる：ａ）式（Ｉ）及び（II）で表わされる合成の、実質的に
純粋なリン脂質及び生物学的活性をもつ親油性の物質又
は物質混合物を含む均質混合物を作り、そしてリポソー
ムの製造のためにその生成均質混合物を水性相中に分散
させ、又はｂ）式（Ｉ）及び（II）で表わされる合成の、実質的に
純粋なリン脂質を含む均質混合物を作り、そしてリポソ
ームの製造のために、その生成均質混合物を生物学的活
性をもつ水溶性物質又は物質混合物を含有する水性相中
に分散させ、そして必要ならばその生成した水性分散液
をｐＨ７．０〜７．８に緩衝し、そして所望によりその
生成リポソームを濃縮し且つ（又は）分離する。

【００７５】均質混合物は例えばフイルム形成によって
又は好ましくは凍結乾燥体の生成によって作られる。フ
イルムの形成は、変法ａ）に従って式（Ｉ）及び（II）
の合成リン脂質及び包封されるべき親油性物質又は物質
混合物を溶解させることによって、又は変法ｂ）に従っ
て式（Ｉ）及び（II）の合成リン脂質を、融点の低い有
機溶媒中に溶解させ、そして溶媒を除去することによっ
て実施される。

【００７６】フイルムの製造に適した溶媒の選択は脂質
成分及び包接化合物の溶解度に依存する。フイルム形成
による均質混合物の製造に適した溶媒は、例えば、低沸
点且つ低融点（０℃未満）で、置換されていない又は置
換されている、例えばハロゲン化されている脂肪族又は
脂環式の炭化水素、例えばｎ−ヘキサン、シクロヘキサ
ン、塩化メチレン又はクロロホルム；アルコール、例え
ばメタノール；低級アルカンカルボン酸エステル、例え
ば酢酸エチル；又はエーテル、例えばジエチルエーテ
ル、又はこれらの溶媒の混合物である。溶媒は真空中
で、好ましくは高真空下で、又は不活性ガス、例えば窒
素での吹き出しによって除去される。

【００７７】凍結乾燥体の生成は変法ａ）に従って式
（Ｉ）及び（II）の合成リン脂質及び包封されるべき親
油性物質又は物質混合物の溶液を凍結乾燥することによ
って、又は変法ｂ）に従ってドイツ特許出願第２，８１
８，６５５号に記載の方法で式（Ｉ）及び（II）の合成
リン脂質の、融点の高い有機溶媒中の溶液を凍結乾燥す
ることによって実施される。適した溶媒は脂質成分及び
包接化合物と共に凍結乾燥の間、例えばメタノール−、
エタノール−又はアセトン−ドライアイス混合物の温度
で固体であるものであり、それで、例えば０℃よりも高
い融点をもつ有機溶媒、例えば氷酢酸、ベンゼン又はジ
オキサン、特に第三ブタノールである。

【００７８】均一混合物は又、有機溶媒、例えばクロロ
ホルム中のリン脂質及び親油性包接化合物の溶液を噴霧
乾燥することによって作ることができる。均質混合物は
粉末の形態で得られる。式（Ｉ）のリン脂質対式（II）
のリン脂質のおおよその混合比約１０：９０〜約５０：
５０モル％、特に３０：７０モル％は均質混合物の製造
に適している。包接化合物対脂質の合計量のおおよその
混合比は約０．００１〜１．０：１．０、好ましくは
０．００５〜０．１：１．０モルである。

【００７９】分散は、例えば、変法ａ）に従って、前も
って作られたリン脂質（Ｉ）及び（II）及び親油性包接
化合物の均質混合物が加えられている水性相、又は変法
ｂ）に従って、水溶性包接化合物を含有しており且つ前
もって作られたリン脂質（Ｉ）及び（II）の均質混合物
が加えられている水性相を振盪する（例えばボルテック
スミキサー）かまたは攪拌することによってもたらされ
る。大きいか、小さいか、単膜か又は多重膜かであり得
るリポソームの生成は自生的に（自生小胞化）、即ち外
部エネルギーの追加の供給なしで、高速で起る。（水性
分散液の全重量との相関で）約０．１〜５０重量％、好
ましくは２〜２０重量％の均質混合物を水性相中に分散
させることができる。

【００８０】酸性的に又は塩基性的に反応する水性分散
液はｐＨ７．０〜７．８、好ましくは７．２〜７．４に
緩衝化される。分散は好ましくはすでにそのｐＨ値に緩
衝化されている水性相中で実施される。変法ａ）は親油
性でわずかに水溶性の活性物質、例えばムラミルジ−又
はトリペプチドをリポソームの形態で封入すべきである
時に特に適している。変法ｂ）は水溶性活性物質、例え
ばトリフォスファミドタイプのシタラビン又はシトスタ
チックスのリポソーム混合物を作る時にさし示される。

【００８１】水性リポソーム混合物の形態の本発明の医
薬組成物の製造はリポソームの製造について今まで知ら
れてきている他の任意の方法に従って、例えばリン脂質
（Ｉ）及び（II）及び包接化合物を含有する水性分散液
を超音波で、又は注入法又は逆相蒸発によって処理する
ことによって通例の方法で実施できる。分散は約３６℃
未満の温度で、好ましくは室温で実施される。包封すべ
き化合物の敏感さが必要とするならば、そのプロセス
を、冷却しながらそして場合によっては不活性ガス雰囲
気、例えば窒素又はアルゴン雰囲気下で実施する。生成
リポソームは水性相中で非常に長期間（数週間又は数カ
月まで）安定である。水性リポソーム分散液の形態の医
薬組成物は、場合によっては安定剤、例えばマンニトー
ル又はラクトースの添加後において、凍結乾燥によって
貯蔵安定性になる。

【００８２】生成される単膜リポソームの大きさは、と
りわけ、活性物質の構造及び脂質成分、これらの成分の
混合比及び水性分散液中のこれらの成分の濃度に依存す
る。例えば、脂質成分の濃度を増加又は減少させること
によって小さい又は大きいリポソームの含有率の高い水
性相を作ることができる。リポソーム分散液の後処理に
よって、例えば超音波での処理によって又はストレート
穴フィルター〔例えばヌクレオポール（Nucleopore) 〕
を通しての押出しによって、リポソームの特にむらのな
い大きさ分布を達成することが可能である。

【００８３】小さなリポソームからの大きなリポソーム
の分離は、実際に必要であるならば、通例の分離方法に
よって、例えばゲル濾過によって、例えば担体としてセ
ファロス（Sepharose)４Ｂ又はセファクリル（Sephacry
l)を用いて、又は超遠心分離、例えば１６０，０００ｇ
での超遠心分離でのリポソームの沈降によって実施され
る。例えば、数時間、例えば約３時間のそのような重力
場での遠心分離の後に、大きなリポソームは沈積し、一
方小さなリポソームは分散したままであり、それでデカ
ント分離できる。数時間の遠心分離の後、小さなリポソ
ームからの大きなリポソームの完全な分離が達成され
る。

【００８４】もし変法ｂ）に従って、水性相が包封され
ていない水溶性化合物を含有しているならば、リポソー
ムは好ましくは分別される。特に、水溶性抗腫瘍物質、
例えばアルキル化剤は、例えば濾過、限外濾過、透析又
は遠心分離によって分別されるべきである。なぜなら、
これらの活性物質は溶解した形態では特に十分には許容
されないからである。富化したリポソームは担体液体、
例えば等張の無菌塩水と混合することができる。比較的
むらのない大きさの小さなリポソームをもつ水性分散液
は超音波処理によっても得られる。

【００８５】６．０×１０^-8ｍよりも大きな直径をもつ
水性相中の全てのリポソーム及び高分子量凝集物中に存
在する包封されていない親油性活性物質及び余分の分散
した脂質も、ゲル濾過によって分別することも可能であ
り、それで比較的むらのない大きさのリポソーム部分を
もつ水性分散液を得ることが可能である。リポソームの
完了した生成及び水性相中のそれらの含有率は種々の物
理的測定法を用いてそれ自体公知の方法で検知できる。
例えば電子顕微鏡での凍結破壊試料及び薄片の使用、Ｘ
線回析、ダイナミックライトスカッタリング、分析超遠
心分離での濾液の質量測定及び特に分光分析法例えば核
共鳴スペクトル（¹Ｈ、¹³Ｃ及び³¹Ｐ）での分光分析法
で検知できる。

【００８６】式（Ｉ）及び（II）の合成の実質的に純粋
なリン脂質は公知である。例えばブラウニング（J.Brow
ning）及びシーリング（J.Seelig）はケム・アンドフ
ィズックスオブリピズ（Chem. and Physics of Lip
ids ）２４（１９７９），１０３〜１１８頁に記載の総
観的報文“シンセシスオブスペシフィカリリデュ
ーテレートッドサチュレーテッドアンドアンサチ
ュレーテッドフォスファチジルセリンズ（Synthesis
of Specifically Denterated Saturated and Unsaturat
ed Phosphatidylserins ）”において、１，２−ジ−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−（Ｓ）−セリンの製造を記載している。

【００８７】消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア物質
及び癌化学療法剤を含む群からの製薬的に活性な物質は
公知である。メルクインデックス（Merck Index ）、
第１０版、又は前記したシュレーダー（Schroeder ）等
の総観著作物“ファーマゼウティシュヘミヘ（Pharma
zeutische Chemie）”を参照のこと。式（VI）のムラミ
ルペプチドタイプの前記した免疫モジュレーターも公知
である。例えばヨーロッパ特許明細書第２５４９５号及
び第２１３６７号及びフランス特許明細書第７，６３
７，０９１号を参照のこと。

【００８８】リポペプチドタイプの前記の免疫モジュレ
ーターも公知である。例えばＥＰ−Ａ−１１４，７８７
又はヨーロッパ特許明細書第３３０号を参照のこと。精
製インターロイキン２の製造もＥＰ−Ａ−０１０６１７
９及び米国特許明細書第４，４４８，８７９号に記載さ
れている。マクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）、白
血球遊走阻止因子、白血球遊走拡大因子、マクロファー
ジ活性化因子（ＭＡＦ）、コロニー刺激因子等を含有す
る物質混合物は多数の刊行物、例えば、サラヒュディ
（Salahuddi S.Z.）等、サイエンス（Science)２２３
（４６３７）７０３−７０７（１９８４）に記載されて
いる。

【００８９】ヒトＭＡＦの特に高い含有率をもつ培養物
濾液の製造も多数の刊行物、例えばレ（Le J. ）等、
Ｊ．イムノロジィー（J.Immunology）ｖｏｌ．１３１、
２８２１〜２８２６（１９８３）、クレイネルマン（Kl
einermann ）等、Ｊ．クリニカルインベスティゲーシ
ョン（J.Clinical Investigation）、７２、３０４−３
１５（１９８３）、カメロン（Cameron D.J.）、J. Cli
n. Lab. Immunol.（１９８４）、１３、４７−５０、及
びクライネルマン（Kleinermann E.S.）及びフィドラー
（Fidler I.J. ）リンフォキンリサーチ（Lymphokine
Research ）、ｖｏｌ．２、 No.１、７−１２（１９８
３）に記載されている。

【００９０】７．０〜７．８のｐＨをもつ、使用する緩
衝液は好ましくは、例えば HagersHandbuch der Pharma
zeutischem Praxis. Springer Verlag, Vol 1,pp ３５
７−３５９に示された指示に従って製造できる二水素／
水素ホスフェートに基いた無菌ホスフェート緩衝液であ
る。特にｐＨ７．２をもつ無菌の等張のカルシウムを含
まない緩衝液（デュルベコ）が使用される。以下の実施
例は本発明を限定することなしで本発明を例示する。

【００９１】実施例１無菌の第三ブタノール５８６mg、Ｎ−アセチルムラミル
−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン
−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３
−ヒドロキシホスホリルオキシ）エチルアミド（ヨーロ
ッパ特許明細書第２５，４９５号に従って製造したも
の）０．１mg、ナトリウム１，２−ジ−（９−シス−オ
クタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−（Ｓ）
−セリン（純度９５％）〔ブラウニング（J.Brawning）
及びシーリグ（J.Seelig）の報文、ケム・アンドフィ
ズックスオブリピズ（Chem.and Physics of Lipid
）２４（１９７９）１０３〜１１８頁に従って製造し
たもの）７５mg、

【００９２】及び１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９
−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジ
ルコリン（アバンティ、極性脂質）（純度９５％）１７
５mgを丸底フラスコ中で溶解させる。その溶液をアクロ
ディスク（２．０×１０^-7ｍ）で無菌濾過し、無菌バイ
アル中に入れ、そして−４５℃で凍結させる。そのバイ
アル２５℃の温度に達するまで真空中で乾燥し、そして
アルゴン雰囲気下で密封する。

【００９３】使用の前に、無菌の、カルシウムを含まな
い、ホスフェートで緩衝化された（ｐＨ７．２〜７．
４）塩水（デュルベコ）２．５mlを無菌のシリンジを用
いて室温でこの乾燥製剤（凍結乾燥物）に加え、そして
そのバイアルを標準化された実験室用振盪機（ボルテッ
クス、段階６）で１０分間振盪する。その生成するリポ
ソーム分散液は４℃で貯蔵可能であり、そして非経口
（ｉ．ｖ．）投与に適している。

【００９４】実施例２無菌の第三ブタノール５８６mg、Ｎ−アセチルムラミル
−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン
−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３
−ヒドロキシホスホリルオキシ）エチルアミド（ヨーロ
ッパ特許明細書第２５，４９５号に従って製造したも
の）０．１mg、ナトリウム１，２−ジ−（９−シス−オ
クタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−（Ｓ）
−セリン（純度９５％）（ブラウニング及びシーリグの
報文、ケム・アンドフィズックスオブリピズ２５
（１９７９）１０３−１１８頁に従って製造したもの７
５mg及び１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シス−
オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン
（アバンティ、極性脂質）（純度９５％）１７５mgを丸
底フラスコ中で溶解させる。

【００９５】その溶液をアクロディスク（２．０×１０
^-7ｍ）で無菌濾過し、そして無菌バイアル中に入れる。
そのバイアルを１５０rpm で回転させそしてその溶媒
を、１バールの圧力下で、濾過されている精製窒素流中
で吹き出しによって除去する。次いでそのバイアルに
６．０×１０^-2ミリバールの高真空下で真空を生じさせ
る。そのバイアルをアルゴン保護ガス雰囲気下で密封す
る。

【００９６】使用の前に、無菌の、カルシウムを含まな
い、ホスフェートで緩衝化された（ｐＨ７．２〜７．
４）塩水（デュルベコ）２．５mlを室温で無菌のシリン
ジを用いて、すでに製造されているフイルムに加え、そ
してそのバイアルを標準化された実験室用振盪機（ボル
テックス、段階６）で１０分間振盪させる。その生成リ
ポソーム分散液は４℃で貯蔵可能であり、また非経口
（ｉ．ｖ．）投与に適している。

【００９７】実施例３ナトリウム１，２−ジ−（９−シス−オクタデセノイ
ル）−３−ｓｎ−ホスファチジルセリン７５mg（０．０
９１ミリモル）、１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９
−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジ
ルコリン１７５mg（０．２３１ミリモル）及びＮ−アセ
チルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−
Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−
グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）エチルア
ミド０．１〜１０mgからなるリポソームを含有する水性
分散液を実施例２で記載した方法と類似の方法で製造す
ることができる。

【００９８】実施例４無菌の第三ブタノール５８６mg、ナトリウム１，２−ジ
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジル−（Ｓ）−セリン（純度９５％）７５mg及び１
−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シス−オクタデセ
ノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン（純度９５
％）１７５mgを丸底フラスコ中で溶解させ、アクロディ
スク（２．０×１０^-7ｍ）で無菌濾過し、そして無菌の
バイアル中に入れる。そのバイアルを１７５０rpm で回
転させ、そして濾過されている精製窒素流中で１バール
の圧力下で吹き出しによって溶媒を除去する。次いでそ
のバイアルに６．０×１０^-2ミリバールの高真空下で真
空を生じさせる。そのバイアルをアルゴン保護ガス雰囲
気下で密封する。

【００９９】使用の前に、４ｇ／ｌの濃度でドキソルビ
シンを含有する無菌の、カルシウムを含まない、ホスフ
ェートで緩衝された（ｐＨ７．２〜７．４）塩水（デュ
ルベコ）２．５mlを室温で、無菌のシリンジを用いて、
すでに製造されているフィルムに加え、そしてそのバイ
アルを標準化された実験室用振盪機（ボルテックス、段
階６）で１０分間振盪させる。次いでその分散液を４０
０００ｇで６０分間遠心分離する。濾液を取り出し、そ
してそのリポソームを０．８５％無菌塩水２．５ml中に
懸濁させる。

【０１００】実施例５無菌の第三ブタノール５０６mg、ナトリウム１，２−ジ
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジル−（Ｓ）−セリン（純度９８％）（ブラウニン
グ及びシーリングの報文、ケム・アンドフィズックス
オブリピズ２４（１９７９）１０３頁に従って製造
したもの）７５mg及び１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジルコリン（純度９９．５％）〔エイブル（Ｈ．Ｅｉ
ｂｌ）の報文、ケム・アンドフィジックスオブリ
ピズ２６（１９８０）２３９頁及びエイブルの報文ア
ンゲワンテヘミエ（Angewandte Chemie ）９６（１９
８４）２４７頁に従って製造したもの）１７５mgをバイ
アル（１５ml）中で溶解させる。

【０１０１】その溶液をアクロデスク（２．０×１０^-7
ｍ）で無菌濾過し、無菌バイアル中に入れ、そして−４
５℃で凍結させる。そのバイアルを２５℃の温度に達す
るまで真空中で乾燥し、そしてアルゴン雰囲気下で密封
する。使用の前に、４ｇ／ｌの濃度でドキソルビシンを
含有する無菌の、カルシウムを含まない、ホスフェート
で緩衝された塩水（デュルベコ）２．５mlを無菌シリン
ジを用いてこの乾燥製剤に加え、そしてそのバイアルを
標準化された実験室用振盪機（ボルテックス、段階６）
で１分間振盪する。

【０１０２】無菌の、カルシウムを含まない、ホスフェ
ートで緩衝された塩水２２．５mlの添加（このことは１
０℃で平衡にならせている）の後、その懸濁液を２分間
振盪させ、次いで１００００ｇ及び１０℃で３０分間遠
心分離する。残留物を取り出しそしてリポソームを無菌
塩水２５ml中に１０℃で再懸濁させる。リポソームを
０．８５％無菌塩水２．５ml中再懸濁させるとすぐに遠
心分離プロセスをくり返す。リポソーム懸濁液は液体２
５０mg当り９mgのドキソルビシンを含有しており、ｉ．
ｖ．投与に適している。

【０１０３】実施例６実施例５で記載した方法と類似の方法で、１−ｎ−ヘキ
サデカノイル−２−（９−シス−オクタデセノイル）−
３−ｓｎ−ホスファチジルコリン（純度９９．５％）２
２５mg（０．２９７ミリモル）及びナトリウム１，２−
ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホス
ファチジル−Ｓ−セリン（純度９８％）２５mg（０．０
３０ミリモル）を含有する乾燥製剤からドキソルビシン
含有リポソームを作ることができる。そのリポソーム懸
濁液は液体２５０mg当り７mgのドキソルビシンを含有
し、そしてｉ．ｖ．投与に適している。

【０１０４】実施例７１ｇ／ｌの濃度でミトマイシンＣを含有する無菌の、カ
ルシウムを含まない、ホスフェートで緩衝された（ｐＨ
７．２〜７．４）塩水（デュルベコ）２．５ml中にリン
脂質の乾燥製剤を分散させ、その分散液を遠心分離し、
そしてその生成物を塩水中に懸濁させることによって、
実施例４及び５に記載の方法と類似の方法でリポソーム
分散液を作ることができる。

【０１０５】実施例８５０〜２００μｇのナトリウムＮ−アセチル−Ｄ−ムラ
ミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン（英国特許明
細書第１，５７０，６２５号）及びヨーロッパ特許出願
第１２１，１５７号（協和発酵工業株式会社）に従って
単離した１，０００〜１０，０００単位の組換え体ヒト
γ−インターフェロンを含有する無菌の、カルシウムを
含まない、ホスフェートで緩衝された（ｐＨ７．２〜
７．４）塩水（デュルベコ）２．５ml中にリン脂質の乾
燥製剤を分散させることによって、実施例５で記載した
方法と類似の方法で、しかし遠心分離は用いないでリポ
ソーム分散液を作ることができる。

【０１０６】実施例９５０〜２００μｇのナトリウムＮ−アセチルデスメチル
−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン及び
１，０００〜１００，０００単位の組換え体ヒトγ−イ
ンターフェロンを含有する無菌の、カルシウムを含まな
い、ホスフェートで緩衝化された（ｐＨ７．２〜７．
４）塩水（デュルベコ）中にリン脂質の乾燥製剤を分散
させることによって、実施例５に記載の方法と類似の方
法で、しかし遠心分離は用いないでリポソームの懸濁液
を作ることができる。

【０１０７】実施例１０５０〜２００μｇのナトリウムＮ−アセチル−Ｄ−ムラ
ミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン及び１，００
０〜１００，０００単位の組換え体ヒトγ−インターフ
ェロンを含有する無菌の、カルシウムを含まない、ホス
フェートで緩衝化された（ｐＨ７．２〜７．４）塩水
（デュルベコ）２．５ml中リン脂質の乾燥製剤を分散さ
せることによって、実施例４に記載の方法と類似の方法
で、しかし遠心分離プロセスは用いないでリポソームの
懸濁液を作ることができる。

【０１０８】実施例１１約５０〜２００μｇのナトリウムＮ−アセチルデスメチ
ル−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン及び
１，０００〜１００，０００単位の組換えたヒトγ−イ
ンターフェロンを含有する無菌の、カルシウムを含まな
い、ホスフェートで緩衝化された（ｐＨ７．２〜７．
４）塩水（デュルベコ）２．５ml中にリン脂質の乾燥製
剤を分散させることによって、実施例４に記載の方法と
類似の方法で、しかし遠心分離は用いないでリポソーム
懸濁液を作ることができる。

【０１０９】実施例１２１ｇのソルビトール（結晶の大きさ１２５〜５００μ
ｍ）を含有する丸底フラスコに、１〜１０mgのＮ−アセ
チルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−
Ｌ−アラニル−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−
グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチル
アミド（ヨーロッパ特許明細書第２５，４９５号に従っ
て製造したもの）、７５mgのナトリウム１，２−ジ−
（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−（Ｓ）−セリン及び１７５mgの１−ｎ−ヘキサ
デカノイル−２−（９−シス−オクタデセノイル）−３
−ｓｎ−ホスファチジルコリンを含有する無菌の第三ブ
タノール１４．２mlを真空中で滴下する。

【０１１０】次いで溶媒を調節された温度条件下で真空
中で除去する。その生成乾燥粉末製剤をアルゴン雰囲気
下で密封する。使用の前に、この乾燥製剤に無菌蒸留水
２０mlを室温で無菌シリンジを用いて添加し、そしてフ
ラスコを１０分間振盪させる。

【０１１１】実施例１３実施例１２で記載した方法と類似の方法において、担体
としてソルビトールの代りにグルコース、サッカロー
ス、ラクトース又は塩化ナトリウムを用いてもよい。

【０１１２】実験例１Ｉ．被験リポソーム組成物次の脂質組成のリポソームを調製した。（１）１，２−ジ−ｎ−ヘキサデカノイル−３−ｓｎ−
ホスファチジル−Ｓ−セリン（Avanti Polar Lipids In
c. Birmingham Ala.）及び１，２−ジ−ｎ−オクタデカ
ノイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン（Avanti）の
重量比３：７組成物（両脂質が飽和脂肪酸を含む比較
例）

【０１１３】（２）１，２−ジ−（９−シス−オクタデ
セノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−Ｓ−セリン
（Browning J. 及び Seeling J., Chem. and Physics o
f Lipids ２４（１９７９）１０３に従って製造したも
の）及び１，２−ジ−ｎ−オクタデカノイル−３−ｓｎ
−ホスファチジルコリン（Avanti）の重量比３：７の組
成物（式（II）のリン脂質においてＲ₁のみならずＲ₂
も飽和脂肪酸である故、比較例）

【０１１４】（３）１，２−ジ−（９−シス−オクタデ
セノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−Ｓ−セリン
（前記）及び１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シ
ス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジルコ
リン（Eibl H., Chem. and Physics of Lipids ２６
（１９８０）２３９及び Eibl H., Angewandte Chemie
９６（１９８４）２４７に従って製造したもの）の重量
比３：７の組成物（本発明）

【０１１５】リポソーム組成物を次の様にして調製し
た。前記脂質のクロロホルム溶液１mlを１５mlのバイア
ルに入れた。溶剤を除去した後、脂質が薄層となってバ
イアルの壁に付着した。残留する溶剤を、室温にて１５
時間真空にすることにより除去した。次に、バイアルを
窒素雰囲気下でシールした。バイアルを−２０℃にて貯
蔵した。バイアルを５０℃に加温し、２．５mlの無菌の
カルシウム不含有リン酸緩衝液（ｐＨ７．２〜７．４）
を無菌の注射器により注入し、室温にて放置することに
よりフィルムを１０分間予備膨潤させ、そして標準化さ
れた実験室振とう装置（ボルテックス、ダイアルセット
６）中で１０分間振とうすることにより分散させて、試
験すべきリポソーム組成物を調製した。

【０１１６】II．マウスにおける急性毒性試験静脈内急性毒性試験を、１７〜２４ｇのＴｉｆ：ＭＡＧ
ｆ（ＳＰＦ）マウスを用いて行った。すべてのマウス
を、温度２２±２℃、相対湿度５０〜７０％の調節され
た動物室に入れた。人工光線を毎日１４時間与えた。動
物を Macrolon （商標）ケージで飼育した。

【０１１７】リポソーム組成物（２．５ml）を、１０ml
／Kgの標準体積の注射が可能な濃度に希釈した。尾部静
脈を通して０．１ml／１０秒の速度で静内注射を行っ
た。投与レベル当り３匹の動物から成る群を用いた。処
置した後、マウスを５分間観察して死亡率を決定した。

【０１１８】 III.結果 ────────────────────────────── リポソーム脂質濃度注射量急性毒性組成物（mg／ml）（mg／Kg）（死亡数／全数） ────────────────────────────── １１０１０００／３２５２５０３／３２２５２５００／３５０５００３／３３２５２５００／３５０５０００／３ ──────────────────────────────

【０１１９】IV. 結論これらの結果から、２種類の飽和脂質成物１，２−ジ−
ｎ−ヘキサデカノイル−３−ｓｎ−ホスファチジル−Ｓ
−セリン及び１，２−ジ−ｎ−オクタデカノイル−３−
ｓｎ−ホスファチジルコリンを含むリポソーム組成物、
並びに１種の飽和脂質成分１，２−ジ−ｎ−オクタデカ
ノイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリンを含有するリ
ポソーム組成物は、２５０mg／Kg及び５００mg／Kgのレ
ベルにおいて毒性であり（３匹のマウスのすべてが死
亡）、

【０１２０】他方２種類の不飽和脂質成分１，２−ジ−
（９−ｃｉｓ−オクタデセノイル−３−ｓｎ−ホスファ
チジル−Ｓ−セリン及び１−ｎ−ヘキサデカノイル−２
−（９−ｃｉｓ−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホス
ファチジルコリンを含有するリポソーム組成物は５００
mg／Kgの高投与レベルにおいて非毒性であった（３匹の
マウスのすべてが生き残った）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ハンスイェルクアイブルドイツ連邦共和国，3406 ボーフェンデン，シュタインベーク 51 (72)発明者ペーターフランクハウザースイス国，4107 エッティンゲン，ハウプトシュトラーセ 65 (72)発明者アニタパイルスイス国，4057 バーゼル，フェルトベルクシュトラーセ 50

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ａ）次の式（Ｉ）：【化１】（式中Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ他方とは無関係に偶数個
の炭素原子をもつＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルケノイル基であり、ｎ
は１〜３の整数であり、そしてＹ⁺は医薬として許容さ
れる塩基の陽イオンである）で表わされる実質的に純粋
な合成リン脂質、ｂ）式【化２】（式中、Ｒ₁は偶数個の炭素原子をもつＣ₁₀〜Ｃ₂₀アル
カノイル基であり、Ｒ₂は偶数個の炭素原子をもつＣ₁₀
〜Ｃ₂₀アルケノイル基であり、Ｒ_a，Ｒ_b及びＲ _cは水
素原子又はＣ₁〜Ｃ₄アルキル基であり、そしてｎは２
〜４の整数である）で表わされる実質的に純粋な合成リ
ン脂質、並びにｃ）生物学的活性をもつ物質又は物質混合物、を含有す
る乾燥調製物。
【請求項２】式（Ｉ）のリン脂質対式（II）のリン脂
質の混合比が１０：９０〜約５０：５０モル％で実質的
に純粋な合成リン脂質を含有し、また消炎薬、抗生物
質、抗リーシュマニア物質、抗真菌物質、抗腫瘍物質及
び免疫モジュレーターを含む群からの医薬的に活性な物
質又は物質混合物を含有する、請求項１に記載の乾燥調
製物。
【請求項３】ａ）式（Ｉ）においてＲ₁及びＲ₂が同
じであって９−シス−ドデセノイル基、９−シス−テト
ラデセノイル基、９−シス−ヘキサデセノイル基、９−
シス−オクタデセノイル基又は９−シス−エイコセノイ
ル基であり、ｎが１であり、そしてＹ⁺がナトリウムイ
オンである（Ｉ）で表わされる実質的に純粋な合成リン
脂質、ｂ）式（II）においてＲ₁がｎ−ドデカノイル基、ｎ−
テトラデカノイル基、ｎ−ヘキサデカノイル基又はｎ−
オクタデカノイル基であり、Ｒ₂は９−シス−ドデセノ
イル基、９−シス−テトラデセノイル基、９−シス−ヘ
キサデセノイル基、９−シス−オクタデセノイル基又は
９−シスエイコセノイル基であり、そしてＲ_a，Ｒ_b及
びＲ_cがメチル基である式（II）で表わされる実質的に
純粋な合成リン脂質、ｃ）消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア物質、抗真菌
物質、抗腫瘍物質及び免疫モジュレーターを含む群から
の医薬的に活性な物質又は物質混合物を含有する、請求
項１に記載の乾燥調製物。
【請求項４】ａ）実質的に純粋な合成ナトリウム１，
２−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−
ホスファチジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）実質的に純粋な合成１−ｎ−ヘキサデカノイル−２
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジルコリン、並びにｃ）消炎薬、抗生物質、抗リーシュマニア物質、抗真菌
物質、抗腫瘍物質及び免疫モジュレーターを含む群から
の医薬的に活性な物質又は物質混合物を含有する、請求
項３に記載の乾燥調製物。
【請求項５】ａ）実質的に純粋な合成ナトリウム１，
２−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−
ホスファチジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）実質的に純粋な合成１−ｎ−ヘキサデカノイル−２
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジルコリン、ｃ）ジクロフェナック、ピルプロフェン、ミトマイシ
ン、シタラビン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、
ドキソルビシン、エトポシド、Ｎ−アセチルムラミル−
Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン−
２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−
ヒドロキシホスホリルオキシ）エチルアミド、Ｎ−アセ
チルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−グルタミン酸−（Ｃ
γ）−Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−
ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）エ
チルアミドの二ナトリウム塩、Ｎ−アセチルデスメチル
ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンのナトリ
ウム塩、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−
Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩、Ｎ−アセチル−Ｄ
−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−グルタミン−α−ｎ−
ブチルエステル、Ｎα−（Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミル
−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル）−Ｎε−ステ
アロイル−Ｌ−リシン又は６−Ｏ−ステアロイル−Ｎ−
アセチルムラミル−Ｌ−アラニン−Ｄ−イソグルタミ
ン、リンフオカイン及びそれらとの組合せを含む群から
の医薬的に活性な物質又は物質混合物を含有する、請求
項４に記載の乾燥調製物。
【請求項６】ａ）実質的に純粋な合成ナトリウム１，
２−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−
ホスファチジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）実質的に純粋な合成１−ｎ−ヘキサデカノイル−２
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジルコリン、ｃ）ミトマイシン、シタラビン、ダクチノマイシン、ダ
ウノルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、Ｎ−アセ
チルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−
Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−
グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）エチルア
ミド、Ｎ−アセチルデスメチルムラミル−Ｌ−アラニル
−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩又はＮ−アセチル
−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンの
ナトリウム塩を含む群からの医薬的に活性な物質を含有
し、これらは場合によってはヒトγ−インターフェロン
もしくはインターロイキン２、又は抗原もしくはマイト
ジエンによる刺激の後の脾臓又は末梢血液からのヒトＴ
リンパ球を有する培養物から得られた培養物濾液中に含
まれておりそしてマクロファージ活性化因子（ＭＡＦ）
の高い含有率を特徴とする物質混合物と組合わせて含有
する、請求項５に記載の乾燥調製物。
【請求項７】ａ）実質的に純粋な合成ナトリウム１，
２−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−
ホスファチジル−（Ｓ）−セリン、ｂ）実質的に純粋な合成１−ｎ−ヘキサデカノイル−２
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジルコリン、ｃ）Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグ
ルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミト
イル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキ
シ）エチルアミド、Ｎ−アセチルデスメチルムラミル−
Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩又は
Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソ
グルタミンのナトリウム塩であって場合によっては抗原
又はマイトジエンによる刺激の後の脾臓又は末梢血液か
らのヒトＴリンパ球を有する培養物から得られた培養物
濾液中に含まれておりそして少なくとも７０％のＭＡＦ
含有率を特徴とする物質混合物の組合わされているもの
を含有する、請求項６に記載の乾燥調製物。
【請求項８】ａ）次の式（Ｉ）：【化３】（式中Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ他方とは無関係に偶数個
の炭素原子をもつＣ₁₀〜Ｃ₂₀アルケノイル基であり、ｎ
は１〜３の整数であり、そしてＹ⁺は医薬として許容さ
れる塩基の陽イオンである）で表わされる実質的に純粋
な合成リン脂質、並びにｂ）式【化４】（式中、Ｒ₁は偶数個の炭素原子をもつＣ₁₀〜Ｃ₂₀アル
カノイル基であり、Ｒ₂は偶数個の炭素原子をもつＣ₁₀
〜Ｃ₂₀アルケノイル基であり、Ｒ_a，Ｒ_b及びＲ _cは水
素原子又はＣ₁〜Ｃ₄アルキル基であり、そしてｎは２
〜４の整数である）で表わされる実質的に純粋な合成リ
ン脂質を含有する乾燥調製物。
【請求項９】式（Ｉ）のリン脂質対式（II）のリン脂
質の混合比が１０：９０〜約５０：５０モル％で実質的
に純粋な合成リン脂質を含有する、請求項８に記載の乾
燥調製物。
【請求項１０】ａ）式（Ｉ）においてＲ₁及びＲ₂が
同じであって９−シス−ドデセノイル基、９−シス−テ
トラデセノイル基、９−シス−ヘキサデセノイル基、９
−シス−オクタデセノイル基又は９−シス−エイコセノ
イル基であり、ｎが１であり、そしてＹ⁺がナトリウム
イオンである式（Ｉ）で表わされる実質的に純粋な合成
リン脂質、並びにｂ）式（II）においてＲ₁がｎ−ドデカノイル基、ｎ−
テトラデカノイル基、ｎ−ヘキサデカノイル基又はｎ−
オクタデカノイル基であり、Ｒ₂は９−シス−ドデセノ
イル基、９−シス−テトラデセノイル基、９−シス−ヘ
キサデセノイル基、９−シス−オクタデセノイル基又は
９−シスエイコセノイル基であり、そしてＲ_a，Ｒ_b及
びＲ_cがメチル基である式（II）で表わされる実質的に
純粋な合成リン脂質、を含有する、請求項８に記載の医
薬組成物。
【請求項１１】ａ）実質的に純粋な合成ナトリウム
１，２−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓ
ｎ−ホスファチジル−（Ｓ）−セリン、並びにｂ）実質的に純粋な合成１−ｎ−ヘキサデカノイル−２
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジルコリン、を含有する、請求項１０に記載の乾燥
調製物。