DE925292C - Verfahren zur Herstellung von Lactoflavin-5'-phosphat - Google Patents

Description

• Verfahren zur Herstellung von Lactoflavin-5'-phosphat

  Die Erfindung betrifft die Hertstetlung dies als

  Cofierment w iidhügen Lactofl#avin-5'-pihoisphabs der

  Formel

  Nach dien Angaben .dier biritiischen Patentschrift

  -15I 938 ist schon versucht wo@rdien, Ph osphorsäure-

  ester -dies Lactoflavi.ns durch Behandlung von

  Lactoflavin in Pyridin mit Pihoispho-roxychlori,d

  herzustellen. Das Verfahren erwies sich aber für

  die becJhni,s:che Hers-bellunig von Lacto@flavin-5'-phos-

  phat als gänzlkh ungeeignet (Helvetica Chimica

  Acta, Bd. 2o, [r937], S. 79 bi.s 83). Gegenüber dem

  voribekannben Verfahren der Phosp'hoTyl:i.eriung von

  L actoflazin mit C,hlo@rpbo:spharsäu:rie (deutsche

  Patenesührift 831 54.9) bat das vo@rlnegende Ver-

  fahren -die Vorteile, daß die Aufarbei-bung des

  Reaktionsgemisches viel einfacher ist und die Aus-

  beuten besser sind. Überdies erfordert das be-

  anspruchte Verfahren viel weniger Phosphorsäure

  als das genannte bekannte Verfahren. °

  Wie. gefunden wurde, kann die genannte Ver-

  bindung auf folgende Weise bereitet werden:

  Lactoflavin wird durch Einwirkung vorn meta-

  P,hosphorsäuire p!hoispho@ryl,i@ert, das aufs Poilyphois-

  phabenbestehende Rohprodukt hydrolysiert und

  das dabei anfallende Gem:i-sch von Lactofavin-

  5'-phosphat, Lactoflavin-diphosphat und Lactoflavin

  durch Kristallisation und Salzbildung getrennt.

  Zweckmäßigerweiee wird Lactoflavin in meta-

  Pho;sp'hoT:s.äure eingetragen und ungefähr io bis

  15 Minuten auf 6o° erwärmt. Das nach diieser

  PhosphorylierungsTeaktion erhaltene Gemiiisch von

  Polyphosphaten des 'Lactoflavins wird mit ver-

  dünnbeT Mineralsäuire hydarolysiiiert. Dabei entsteht

  ein Gemisch vom Lactoflavin-5"-phoisphat, wenig

  Lactorflia#vin und Lactoflavin-polyp'hoisphat (im

  wesentlichen -:(Iiphosphat), das sich durch frak-

  tionierte Kristallisation aus Wasser iineinen

  schwerer und einten leichter löslichen Anteil trennen

  läßt. In letzterem Ist das Lactoflavin-dipho,sphat

  enthalten. Die ischwerlösliche KT.istaldfrakti.on wird

  mit Naariumbiicarbonat behandelt, wobei Laoto-

  flavirn-5'-phoispbat als Na-Salz in Lösung geht,

  während Lactofl:avin ungelöst bleibt.

  Die so gewonnene Lactofavin-5'-phosphorsäur@e-

  ist eine in heißem Wasser mäßig lösliche Ver-

  bndung, .die in Kristallnadeln kristallisiert. Ihr

  Caleiumsalz löst sich wenig in Wasser auf; das

  Magnesiums,alz ist zdemlich leicht löslich inWasisier,

  die Natrium- und Kalisalze sehr leicht löslich.

  Beispiel

  i g feingepudweTtes Lactoflavin wird in meta-

  Phosphorsäure, die durch Erhitzen von 7 ccm

  85o/oniger oirtho-PhoispihorsäuTe erhalten worden war,

  eingetragen und :die Mischung während io bis

  15 Minuten auf 6o° erwärmt. Nach dem Erkalten

  nimmt .man die Maisse in 5 bis 6 ccm Wasser auf

  und zentrifugiert einen Niediers.chlag, dier im

  wesentlichen aufs unverändertem Lactoflavin be-

  steht, ab. D,üe klare Lösung wird in 50 ccm ab-

  solutem Äthanol eingegossen, woibeii ein gelber,

  flockiger Niederschlag von Podypho,spihaten -des

  Lac;tofavins ausfällt, den man

  und

  mit Alkohol und Äther wäscht. Ausbeute: 1,3 g.

  Dieses hygroiskopische Rohprodukt wird in

  ioo ccm i n-H Cl gelöst, die Lösung während

  io Minuten auf ioö° erwärmt, hierauf im Vakuum

  bis zur Trockne. eingedampft, der Rückstand mit

  30,ccm absolutem Äthanoil verrieben, dass Un-

  g erlöste ab,zentrifugiert und mit Alkohol und Äther

  gewaschen. Ausbeute: 9oo mg eines nicht hygrosko-

  pischen Niederschlags, der, wie sich durch Pap:iier-

  chiromatograp!hie nachweisen läßt, aus etwas

  Lactoflavin, etwas Lactoflavin-diphosphat und als

  Hauptmenge aus Lacto@flavin-5'-phoisphat besteht.

  Man löst,dieses Rohprodukt (9oo .mg) in 2o ccm

  Wasser. Aus ,dieser Lösung kristallii!s.iiert innerhalb

  24 Stunden ein Gemisch von Lactoflavin und

  Lactoiflavin-5'-phoisp!hat aus (5oo .mg), während in

  der Flüssigkeit die' Lactoflavin-idiphosphoirsäuTe

  gelöst bleibt. Sollte der Niederschlag noch etwas

  Dipiosphat enthalten, ,steine, weitere Kristalli-

  sation aus Wasser notwendig.

  Hierauf wird der Niederschlag, der aus Lacto-

  flavin und Lactoflavin-5'-phosphat besteht, in 2o ccm

  Wasser suspendiert und mit einer Natriumbicar-

  bonatlösung genau neutralisiert. Dabei löst sich

  Lactofiavin 5' phosphoTsäure als - Natriumsalz auf,

  während Lactoflavin ungelöst bleibt. Nach Zugabe

  von etwas Tierkohle trennt man :den unlöslichen

  Niederschlag ab, säuert das klare Filtrat mit Salz-

  .säure leicht an und konzentriert es im Vakuum.

  Nach kurzem Stehen kriistallisliert aus dieser Lö-

  sung Lactoflavim 5'-phosp)hat aus, welches praktisch

  nein ,ist. Die Kristalle- bestehen aus zu Drusen ver-

  wachsenen Nadeln. Die Verbindung enthält nach

  leim Trocdmen .im Valmum bei 70° 3 Moleküle

  Wasiser.

Claims (1)

1. PATENTANSPRÜCHE: i. Verfahren zur Herstellung von Lactofiavin- 5'-phoisp!hat, ,dadurch gekennzeichnet, daß man Lactofl avindurch Einwirkung von meta-Pihos- phorsäure pihoisplhoiryl;i#e#rt, das aus Polyphos- p!haten ,bestehende Rohprodukt hydrolysiert und das ,dabei anfallende Gemisch von Lactoflavin- 5'-pho-sphat, Lactoflaviin,diphoispb.at und Lacto- lavin durch Knistalliisation und Salzbildung trennt. 2. Verfahren gemäß Anspruch i, idadiuirch g- kennzeichnet, daß das aus Polyprhosphaten be- stehende Rohprodukt mit verdünnter Miineral- säuwe hydralysiert, dass HydTolyseproidukt durch friaaletioniierte Kristalliszti.on aus Wasser in einen leichter und einen schwerer löslichen Anteil getrennt und das Laetoiflavin-5'-p110sphat ans dem letzteren .als Na-Salz abgeschieden wird, indem man den schwerer löslichen Anteil z. B. mit Natriumbicarbon.at behandelt. Angezogene Druckschriften: Britische Patentschrift NT. 451938; deutsche Patentschrift Nr. 831 549.