DE69732483T2 - Heterocyclische Azahexanderivate mit antiviraler Wirkung - Google Patents

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Description

  • Die Erfindung betrifft heterocyclische Azahexanderivate, die als Substratisostere für retrovirale Aspartatproteasen verwendet werden können, Salze hiervon, Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen und ihrer Salze, pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Verbindungen oder ihre Salze enthalten und die Verwendung der Verbindungen oder ihrer Salze (alleine oder in Kombination mit anderen antiretroviral aktiven Verbindungen) bei der therapeutischen oder diagnostischen Behandlung des menschlichen oder tierischen Körpers oder zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen.
  • Hintergrund der Erfindung
  • Gemäß WHO Schätzungen gibt es deutlich mehr als 20 Millionen Menschen, die mit dem "Humanen Immundefizienzvirus" HIV-1 oder HIV-2 infiziert sind. Mit sehr wenigen Ausnahmen führt diese Erkrankung bei infizierten Menschen über Vorstadien, wie ARDS, zum Ausbruch einer Erkrankung des Immunsystems, das als "Erworbenes Immundefizienzsyndrom" oder AIDS bekannt ist. Mit der überwältigen Anzahl an Fällen führt die Erkrankung früher oder später zum Tod der infizierten Patienten.
  • Bisher hat die Behandlung der retroviralen Erkrankungen, wie AIDS, vor allem die Verwendung von Inhibitoren der reversen Transkriptase einbezogen, ein Enzym, das bei der Umwandlung der retroviralen RNA in DNA wirksam ist, wie 3'-Azido-3'-desoxythymidin (AZT) oder Didesoxyinosin (DDI) und auch Trinatriumphosphonoformiat, Ammonium-21-wolframat-9-antimonat, 1-β-D-Ribofuranoxyl-1,2,4-triazol-3-carboxamid und Didesoxycytidin und auch Adriamycin. Es wurden auch Versuche unternommen, den T4 Rezeptor beispielsweise in Form eines rekombinanten Moleküls oder Molekülfragments in den Körper einzuführen, der auf bestimmten Zellen des Abwehrsystems des menschlichen Körpers vorkommt und für das Andocken und die Einführung der infektiösen Viruspartikel in die Zellen und so für ihre Infektion verantwortlich ist, wobei es das Ziel ist, die Bindungsstellen des Virus zu blockieren, so dass die Virionen nicht länger fähig sind, an die Zellen zu binden. Verbindungen, die auf andere Art verhindern, dass das Virus die Zellmembran penetriert, wie Polymannoacetat, werden auch verwendet.
  • Der erste Inhibitor der sogenannten retroviralen Aspartatprotease, der zur Bekämpfung der Infektion zugelassen wurde, war Saquinavir [N-tert-Butyldecahydro-2-[2(R)-hydroxy-4-phenyl-3(S)-[[N-2-chinolylcarbonyl-L-asparaginyl]amino]butyl]-(4aS,8aS)-isochinolin-3(S)-carboxamid (Ro 31-8959)]. Seitdem sind andere gefolgt (Indinavir (Merck) und Ritonavir (Abbott)).
  • Es sind auch mehrere weitere Inhibitoren der retroviralen Aspartatprotease in der Entwicklung, einem Enzym, dessen Funktion folgendermaßen charakterisiert werden kann:
  • In den AIDS Viren HIV-1 und HIV-2 und anderen Retroviren, beispielsweise den entsprechenden Viren bei Katzen (FIV) und Affen (SIV) wird die proteolytische Reifung beispielsweise der Kernproteine des Virus durch eine Aspartatprotease, wie der HIV Protease, herbeigeführt. Ohne dieser proteolytischen Reifung können keine infektiösen Partikel gebildet werden. Aufgrund der zentralen Rolle dieser Aspartatproteasen, wie HIV-1 oder HIV-2 Protease bei der Reifung der Viren und auf der Basis von experimentellen Ergebnissen, beispielsweise mit infizierten Zellkulturen, wird plausibel, dass eine wirksame Unterdrückung des durch diese Protease herbeigeführten Reifungsschritts die Zusammensetzung von reifen Virionen in vivo verhindert. Daher können Inhibitoren der Protease therapeutisch verwendet werden.
  • Das Ziel der vorliegenden Erfindung ist es, einen neuen Typ einer Verbindung bereitzustellen, die insbesondere ausgestattet ist mit einem hohen Maß an hemmender Aktivität gegen die Virusreplikation in Zellen, einer hohen antiviralen Aktivität gegen verschiedene Virusstämme, einschließlich derer, die gegen bekannte Verbindungen resistent sind, wie Saquinavir, Ritonavir und Indinavir und besonders vorteilhaften pharmakologischen Eigenschaften, beispielsweise guter Pharmakokinetik, wie einer hohen Bioverfügbarkeit und hohen Blutspiegeln und/oder einer hohen Selektivität.
  • Die EP 0 604 368 A , EP 0 521 827 A und WO 94/19332 A beschreiben Azahexanderivate, das heißt Verbindungen der allgemeinen Formel
    Figure 00020001
    worin die Reste S1 bis S9 spezifische Bedeutungen haben die in den Dokumenten definiert sind.
  • Die Azahexane gemäß EP 0 604 368 A umfassen obligatorisch eine Acyloxygruppe, wie die S5 Gruppe. Die EP 0 521 827 A beschreibt Azahexanverbindungen dieser Formel, worin S7 unter anderem für ein substituiertes Alkyl stehen kann. In der Verbindung von Beispiel 68 dieses Dokuments steht S7 beispielsweise für eine p-Cyanophenylmethylgruppe. Schließlich beschreibt die WO 94/19332 A Azahexanverbindungen der oben angegebenen Formel, worin S5 für Hydroxyl steht, S6 für Wasserstoff steht und S7 unter anderem für eine Arylalkylgruppe stehen kann.
  • Ausführliche Beschreibung der Erfindung
  • Die Azahexanderivate gemäß der Erfindung sind Verbindungen der Formel I
    Figure 00020002
    worin
    R1 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht,
    R2 für sekundäres oder tertiäres Niederalkyl oder C1-C7 Alkylthio-C1-C7-alkyl steht,
    worin der Ausdruck "Nieder" für einen Rest mit bis zu und einschließlich 7 Kohlenstoffatomen steht,
    R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht,
    R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist,
    R5 unabhängig von R2 eine der für R2 aufgeführten Bedeutungen hat, und
    R6 unabhängig von R1 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht.
  • Die Verbindungen zeigen unerwartet gute und überraschend positive pharmakologische Eigenschaften, die später im Detail angegeben sind, und sind relativ einfach zu synthetisieren.
  • Falls nichts anderes angegeben ist haben die allgemeinen Ausdrücke, die hierin vorher und später verwendet werden, innerhalb des Umfangs der Beschreibung vorzugsweise die folgenden Bedeutungen:
  • Der Ausdruck "Nieder" steht für einen Rest mit bis zu und einschließlich maximal 7 Kohlenstoffatomen, und insbesondere bis zu und einschließlich maximal 4 Kohlenstoffatomen, wobei die in Frage kommenden Reste entweder unverzweigt oder verzweigt sind mit einfachen oder mehrfachen Verzweigungen.
  • Niederalkyl und C1-C4 Alkyl stehen speziell für tert-Butyl, sek-Butyl, Isobutyl, n-Butyl, Isopropyl, n-Propyl, Ethyl und Methyl.
  • Jeder Bezug auf Verbindungen, Salze und dergleichen in der Pluralform umfasst auch eine Verbindung, ein Salz und dergleichen.
  • Jedes vorkommende asymmetrische Kohlenstoffatom, beispielsweise die an die Reste R2 und R5 gebundenen Kohlenstoffatome, können in der (R)-, (S)- oder (R,S)-Konfiguration, vorzugsweise in der (R)- oder (S)-Konfiguration vorkommen, wobei die (S)-Konfiguration speziell im Fall der Kohlenstoffatome bevorzugt ist, die die Reste R2 und/oder R5 in den Verbindungen der Formel Ι tragen. Demnach können die in Frage kommenden Verbindungen in Form von Isomerengemischen oder in Form von reinen Isomeren, vorzugsweise in Form von enantiomerenreinen Diastereoisomeren vorkommen.
  • Niederalkoxycarbonyl steht vorzugsweise für C1-C4 Alkoxycarbonyl, worin der Alkylrest verzweigt oder unverzweigt sein kann und speziell Ethoxycarbonyl oder Methoxycarbonyl ist.
  • Sekundäres- oder tertiäres Niederalkyl ist speziell sek-Butyl, tert-Butyl oder Isopropyl.
  • Niederalkylthioniederalkyl steht speziell für Methylthiomethyl.
  • Phenyl, das unsubstituiert oder durch einen oder mehrere Niederalkoxyreste substituiert ist, ist speziell Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem bis drei Niederalkoxyresten, speziell Methoxy, substituiert ist. Falls drei Methoxysubstituenten vorkommen, befinden sich diese speziell in den Positionen 2, 3 und 4 des Phenylrings und falls ein Methoxysubstituent vorkommt, befindet sich dieser Substituent speziell in der Position 2, 3 oder vorzugsweise Position 4. Unsubstituiertes Phenyl ist bevorzugt.
  • C4-C8 Cycloalkyl steht speziell für Cyclopentyl oder vor allem Cyclohexyl.
  • Für R3 ist Phenyl gegenüber Cyclohexyl bevorzugt.
  • Bei Phenyl oder Cyclohexyl, das an der Position 4 durch ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über einen Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl (-SO-) und Sulfonyl (-SO2-) ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch Niederalkyl oder Phenylniederalkyl substituiert ist, hat das entsprechende Heterocyclyl die folgenden Bedeutungen:
  • Ungesättigtes Heterocyclyl, das über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl (-SO-) und Sulfonyl (-SO2-) ausgewählt sind und unsubstituiert oder substituiert durch Niederalkyl, speziell Methyl oder durch Phenylniederalkyl, worin der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist, speziell durch 1-Methyl-1-phenylethyl, ist speziell einer der folgenden Reste, die über ein Ringkohlenstoffatom gebunden sind: Thienyl (= Thiophenyl), Oxazolyl, Thiazolyl, Imidazolyl, 1,4-Thiazinyl, Triazolyl, das unsubstituiert oder insbesondere substituiert ist durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl, wie 1-, 2- oder 4-(Methyl oder tert-Butyl)-triazol-3-yl, Tetrazolyl, das unsubstituiert oder speziell durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise Niederalkyl substituiert ist, wie durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl, wie 2H-Tetrazol-5-yl, das durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise durch Niederalkyl substituiert ist, wie durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl, oder 1H-Tetrazol-5-yl, das durch tert-Butyl oder insbesondere durch Methyl, Pyridinyl, Pyrazinyl und Pyrimidinyl substituiert ist, insbesondere 2- oder 3-Thienyl (= Thiophen-2-yl oder Thiophen-3-yl), Thiazol-5-yl, Thiazol-2-yl, 2H-Tetrazol-5-yl, das unsubstituiert oder speziell an der Position 2 durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl substituiert ist, 1H-Tetrazol-5-yl, das an der Position 1 durch Methyl, Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl oder Pyrazin-2-yl substituiert ist.
  • R4 steht vorzugsweise für Phenyl, das an der Position 4 durch ungesättites Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl (-SO-) und Sulfonyl (-SO2)-) ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch Niederalkyl oder durch Phenylniederalkyl substituiert ist, worin das Heterocyclyl vorzugsweise die oben als bevorzugt angegebenen Bedeutungen hat.
  • Die Verbindungen der Formel I haben vorzugsweise die Formel Ia
    Figure 00040001
    worin die Reste wie definiert sind.
  • Salze sind speziell die pharmazeutisch annehmbaren Salze der Verbindungen der Formel Ι.
  • Solche Salze werden beispielsweise durch Verbindungen der Formel I mit einem basischen R4-CH2-tragenden Stickstoffatom als Säureadditionssalze gebildet, vorzugsweise mit anorganischen Säuren, beispielsweise Halogenwasserstoffsäuren, wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure oder Phosphorsäure oder mit starken organischen Sulfon-, Sulfo- oder Phosphorsäuren oder N-substituierten Sulfaminsäuren (vorzugsweise pKa < 1). Es können andere Salze vorkommen, wenn basische Heterocyclylreste, wie Pyridyl, in R4 vorhanden sind. Solche Salze umfassen speziell Säureadditionssalze mit organischen oder anorganischen Säuren, insbesondere die pharmazeutisch annehmbaren Salze. Geeignete anorganische Säuren sind beispielsweise Halogenwasserstoffsäuren, wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure. Geeignete organische Säuren sind beispielsweise Carbon-, Phosphon-, Sulfon- oder Sulfonaminsäuren, beispielsweise Essigsäure, Propionsäure, Octansäure, Decansäure, Dodecansäure, Glycolsäure, Milchsäure, 2-Hydroxybuttersäure, Gluconsäure, Glucosemonocarbonsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Adipinsäure, Pimelinsäure, Suberinsäure, Azelainsäure, Äpfelsäure, Weinsäure, Citronensäure, Glucarsäure, Galactarsäure, Aminosäuren, wie Glutaminsäure, Asparaginsäure, N-Methylglycin, Acetylaminoessigsäure, N-Acetylasparagin oder N-Acetylcystein, Bernsteinsäure, Acetoessigsäure, Phosphoserin, 2- oder 3-Glycerophosphorsäure, Glucose-6-phosphorsäure, Glucose-1-phosphorsäure, Fructose-1,6-bisphosphorsäure, Maleinsäure, Hydroxymaleinsäure, Methylmaleinsäure, Cyclohexancarbonsäure, Adamantancarbonsäure, Benzoesäure, Salicylsäure, 1- oder 3-Hydroxynaphthyl-2-carbonsäure, 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure, 2-Phenoxybenzoesäure, 2-Acetoxybenzoesäure, 4-Aminosalicylsäure, Phthalsäure, Phenylessigsäure, Mandelsäure, Zimtsäure, Glucuronsäure, Galacturonsäure, Methan- oder Ethansulfonsäure, 2-Hydroxyethansulfonsäure, Ethan-1,2-disulfonsäure, Benzolsulfonsäure, 2-Naphthalinsulfonsäure, 1,5-Naphthalindisulfonsäure, 2-, 3- oder 4-Methylbenzolsulfonsäure, Methylschwefelsäure, Ethylschwefelsäure, Dodecylschwefelsäure, N-Cyclohexylsulfaminsäure, N-Methyl-, N-Ethyl- oder N-Propylsulfaminsäure oder andere organische Protonensäuren, wie Ascorbinsäure.
  • Wenn negativ geladene Reste vorhanden sind, wie Tetrazolyl in R4, können Salze auch mit Basen, beispielsweise Metall- oder Ammoniumsalzen, wie Alkalimetall- oder Erdalkalimetallsalzen beispielsweise Natrium-, Kalium-, Magnesium- oder Calciumsalzen oder Ammoniumsalzen mit Ammoniak oder geeigneten organischen Aminen, wie tertiären Monoaminen, beispielsweise Triethylamin oder Tri-(2-hydroxyethyl)amin oder heterocyclischen Basen, beispielsweise N-Ethylpiperidin oder N,N'-Dimethylpiperazin, gebildet werden.
  • Zu Isolierungs- oder Reinigungszwecken ist es auch möglich, pharmazeutisch nicht annehmbare Salze zu verwenden, beispielsweise Picrate oder Perchlorate. Es werden nur die pharmazeutisch annehmbaren Salze oder die freien Verbindungen (wahlweise in Form von pharmazeutischen Zusammensetzungen) therapeutisch verwendet und diese sind bevorzugt.
  • In Anbetracht der engen Beziehung zwischen den neuen Verbindungen in freier Form und den Verbindungen in Form ihrer Salze, einschließlich der Salze, die als Zwischenprodukte verwendet werden können, beispielsweise zur Reinigung oder Identifizierung der neuen Verbindungen, ist, wenn eine freie Verbindung vorher oder später in diesem Zusammenhang genannt wird, auch ein entsprechendes Salz gemeint, wie es möglich oder geeignet ist.
  • Die Verbindungen der Formel I haben wertvolle pharmakologische Eigenschaften. Sie haben eine antiretrovirale Aktivität, speziell gegen die Viren HIV-1 und HIV-2, die als Ursachen von AIDS betrachtet werden und können überraschenderweise synergistische Effekte in Kombination mit anderen Verbindungen aufweisen, die gegen retrovirale Aspartatproteasen wirksam sind. Die Verbindungen der Formel Ι sind Inhibitoren der retroviralen Aspartatproteasen, speziell Inhibitoren der Aspartatprotease von HIV-1 oder auch HIV-2 und sind daher zur Behandlung von retroviralen Erkrankungen brauchbar, wie AIDS oder der vorhergehenden Stadien (beispielsweise ARDS). Die Verbindungen der Formel Ι hemmen auch die Aktivität gegen entsprechende Tierretroviren, wie SIV (bei Affen) oder FIV (bei Katzen).
  • Die Verbindungen der Formel Ι zeigen überraschenderweise besonders vorteilhafte und wichtige pharmakologische Eigenschaften, beispielsweise eine sehr hohe antivirale Aktivität in Zelltests gegen verschiedene Virusstämme, einschließlich der, die gegen andere Proteaseinhibitoren resistent sind, beispielsweise MT2-Zellen, gute Pharmakokinetiken, wie eine hohe Bioverfügbarkeit, eine hohe Selektivität und speziell hohe Blutspiegel (sogar im Fall einer oralen Verabreichung).
  • Die hemmende Wirkung der Verbindung der Formel Ι auf die proteolytische Aktivität der HIV-1 Protease kann beispielsweise gemäß bekannter Verfahren gezeigt werden (siehe A. D. Richards et al., J. Biol. Chem. 265 (14), 7733–7736 (1990)). In diesem Verfahren wird die Hemmung der Wirkung der HIV-1 Protease (Präparation siehe S. Billich et al., J. Biol. Chem. 263 (34), 17905–17908 (1990)) in Gegenwart des Icosapeptids RRSNQVSQNYPIVQNIQGRR (ein synthetisches Substrat der HIV-1 Protease, das durch Peptidsynthese gemäß bekannter Verfahren hergestellt wurde (siehe J. Schneider et al., Cell 54, 363–368 (1988)) gemessen, das als Substratanalogon eine der Spaltstellen des gag-Vorläuferproteins enthält (natürliches Substrat der HIV-1 Protease). Das Substrat und die Spaltprodukte werden durch Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) analysiert.
  • Die Testverbindung wird in Dimethylsulfoxid gelöst. Der Enzymtest wird durch die Zugabe von geeigneten Verdünnungen des Inhibitors in 20 mM β-Morpholinethansulfonsäurepuffer (MES) mit pH 6,0 zum Testgemisch ausgeführt. Das Gemisch besteht aus dem oben erwähnten Icosapeptid (122 μM) in 20 mM MES Puffer mit pH 6,0. Es werden 100 μl pro Testansatz verwendet. Die Reaktion wird durch die Zugabe von 10 μl HIV-1 Proteaselösung gestartet und wird nach einer Inkubation für 1 Stunde bei 37°C durch die Zugabe von 10 μl 0,3 M HClO4 gestoppt. Nach der Zentrifugation der Probe bei 10 000 × g für 5 Minuten werden 20 μl des entstehenden Überstands auf eine 125 × 4,6 mm Nukleosil® C18-5m HPLC Säule aufgetragen (Umkehrphasenmaterial, das von Macherey & Nagel, Düren, Deutschland vertrieben wird und auf einem Silicagel beruht, das mit C18 Alkylketten beladen wurde). Das ungespaltene Icosapeptid und dessen Spaltprodukte werden von der Säule durch den folgenden Gradienten eluiert: 100 Eluent 1 → 50% Eluent 1 + 50% Eluent 2 (Eluent 1: 10% Acetonitril, 90% H2O, 0,1% Trifluoressigsäure (TFA), Eluent 2: 75% Acetonitril, 25% H2O, 0,08% TFA) für 15 Minuten mit einer Flussrate von 1 ml/min. Die Quantifizierung der eluierten Peptidfragmente wird durch Messen der Peakhöhe des Spaltprodukts bei 215 nm ausgeführt.
  • Die Verbindungen der Formel I zeigen Hemmwirkungen im nanomolaren Bereich, wobei sie vorzugsweise HK50 Werte (HK50 ist die Konzentration, die eine Verringerung der Aktivität der HIV-1 Protease um etwa 50% im Vergleich mit einer Kontrolle ohne Inhibitor hervorruft) von etwa 2 × 10–7 M bis 5 × 10–9 M, vorzugsweise 5 × 10–8 bis 5 × 10–9 M zeigen.
  • Ein alternatives Verfahren (siehe Matayoshi et al., Science 247, 954–958 (1990) hier modifiziert) zur Bestimmung der Hemmwirkung gegen die HIV-1 Protease kann kurz wie folgt beschrieben werden: Die Protease (Reinigung: Seihe Leuthardt et al., FEBS Lett. 326, 275–280, (1993)) wird bei Raumtemperatur in 100 μl Testpuffer (20 mM MES pH 6,0, 200 mM NaCl, 1 mM Dithiothreit, 0,01% Polyethylenglycol (mittleres Molekulargewicht 6000 bis 8000 Da) mit 10 μM fluorogenem Substrat SC4400 (4-(4-Dimethylaminophenylazo)benzoyl-γ-aminobutyryl-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gln-EDANS (EDANS = 5-(2-Aminoethylamino)1-naphthalinsulfonsäure), Neosystem Laboratoire, Frankreich) inkubiert. Die Reaktion wird durch die Zugabe von 900 μl an 0,03 M HClO4 gestoppt. Die HIV-1 Proteaseaktivität wird durch Messen der Zunahme der Fluoreszenz bei λex = 336 nm, λem = 485 nm gemessen. Die HK50 Werte der Verbindungen der Formel I werden als Konzentration der Verbindung bestimmt, die zur Hemmung der Proteaseaktivität im Test um 50% erforderlich ist. Es werden numerische Werte aus Computer-erzeugten Graphen von Daten erhalten, die sich mindestens auf 5 Konzentrationen der in Frage kommenden Verbindung der Formel I mit einer dreifachen Bestimmung pro Konzentration beziehen.
  • In einem weiteren Test kann gezeigt werden, dass die Verbindungen der Formel I Zellen, die normalerweise durch HIV infiziert werden, vor einer solchen Infektion schützen oder zumindest eine solche Infektion verlangsamen. Für diesen Test werden MT-2 Zellen verwendet, die mit HIV-1/MN infiziert sind. MT-2 Zellen wurden mit HTLV-1 (einem Leukämie verursachenden Virus) und einem kontinuierlichen Produzenten hiervon transformiert und sie sind daher für den cytopathogenen Effekt von HIV besonders empfindlich. Die MT-2 Zellen können über das AIDS Research and Reference Reagent Program, Division of AIDS, NIAID, NIH von Dr. Douglas Richman erhalten werden (siehe J. Biol. Chem. 263, 5870–5875 (1988) und auch Science 229, 563–566, (1985)). Die MT-2 Zellen werden in RPMI 1640 Medium kultiviert (Gibco, Scotland, RPMI enthält ein Aminosäuregemisch ohne Glutamin), das mit 10% hitzeinaktviertem, fetalem Kälberserum, Glutamin und Standardantibiotika supplementiert ist. In allen Fällen sind die Zellen und auch die zur Infektion verwendeten Virusstammlösungen (HIV-1/MN) frei von Mykoplasmen. Die Virusstammlösung wird als Zellkulturüberstand der permanent infizierten Zelllinie H9/HIV-1/MN präpariert, die ebenfalls von AIDS Research and Reference Program, Division of AIDS, NIAID, NIH von Dr. Robert Gallo erhalten werden kann (siehe auch Science 224, 500–503 (1984) und Science 226, 1165–1170 (1984)). Der Titer der HIV-1/MN Virusstammlösung (bestimmt durch die Titration auf MT-2 Zellen) beträgt 4,2 × 105 TCID50/ml (TCID50 = Infektiöse Gewebekulturdosis = Dosis, die 50% der MT-2 Zellen infiziert). Um die Infektions-hemmende Wirkung der Verbindungen der Formel I zu messen, werden 50 μl der in Frage kommenden Testverbindung in Kulturmedium und 2800 TCID50 von HIV-1/MN in 100 μl Kulturmedium zu 2 × 104 exponentiell wachsenden MT-2 Zellen gegeben, die in 50 μl Kulturmedium zu Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen gegeben wurden (haben einen Rundboden). Nach 4 Tagen Inkubation (bei 37°C, 5% CO2) wird eine 10 μl Probe des Überstands aus jeder Vertiefung entnommen, in eine weitere Mikrotiterplatte mit 96 Vertiefungen gegeben und (erforderlichenfalls) bei –20°C gelagert. Um die Aktivität der Virus-assoziierten reversen Transkriptase zu messen, werden 30 μl Cocktail der reversen Transkriptase (RT) zu jeder Probe gegeben. Der Cocktail der reversen Transkriptase besteht aus 50 mM Tris (α,α,α-Tris(hydroxymethyl)methylamin, Ultra pur, Merck, Deutschland) pH 7,8, 75 mM KCl, 2 mM Dithiothreit, 5 mM MgCl2, 0,1% Nonidet P-40 (Detergenz, Sigma, Schweiz), 0,8 mM EDTA, 10 μg/ml Poly-A (Pharmacia, Uppsala, Schweden) und 0,16 μg/ml Oligo (T) (= pdT (12–18), Pharmacia, Uppsala, Schweden) als "Matrizenprimer", wobei erforderlichenfalls das Gemisch durch ein 0,45 um Acrodisc Filter filtriert wird (Gelman Sciences Inc., Ann Arbor, USA). Es wird bei –20°C gelagert. Vor dem Test werden 0,1% (V/V) [α-32P]dTTP zu den Aliquots der Lösung gegeben, um eine Radioaktivität von 10 μCi/ml herzustellen.
  • Nach dem Mischen wird die Platte für 2 Stunden für 37°C inkubiert. 5 μl des Fraktionsgemisches werden auf DE81 Papier überführt (Whatman, ein Filter pro Vertiefung). Die getrockneten Filter werden dreimal für 5 Minuten mit 300 mM NaCl/25 mM Trinatriumcitrat und dann einmal mit Ethanol gewaschen und erneut an der Luft getrocknet. Die Radioaktivität auf den Filtern wird in einem Matrix Packard Messgerät für 96 Vertiefungen gemessen (Packard, Zürich, Schweiz). Die ED90 Werte werden berechnet und als Konzentration der Testverbindung definiert, die die Aktivität der reversen Transkriptase um 90% im Vergleich mit einer Kontrolle ohne Testverbindung verringert.
  • Die bevorzugten Verbindungen der Formel I zeigen eine ED90, das heißt eine Hemmung von 90% der Virusreplikation, bei Konzentrationen von 10–7 bis 10–9 M, speziell von 5 × 10–9 bis 10–9 M.
  • Demnach sind die Verbindungen der Formel I zur hochwirksamen Verzögerung der Replikation von HIV-1 in Zellkulturen geeignet.
  • Um die Pharmakokinetiken zu bestimmen, werden die Verbindungen der Formel Ι in Diethylsulfoxid (DMSO) in einer Konzentration von 240 mg/ml gelöst. Die entstehenden Lösungen werden 1 : 20 (V/V) mit 20% (GIV) wässriger Hydroxypropyl-β-cyclodextrinlösung verdünnt, um eine Konzentration der in Frage kommenden Testverbindung von 12 mg/ml zu erhalten. Die entstehende Lösung wird kurz mit Ultraschall behandelt und oral an weibliche BALB/c Mäuse (Bomholtgarden, Kopenhagen, Dänemark) durch künstliche Sondenernährung mit einer Dosis von 120 mg/kg verabreicht. Bei festgelegten Zeiten (beispielsweise 30, 60, 90 und 120 Minuten) nach der Verabreichung werden die Mäuse getötet und das Plasma in heparinisierten Teströhrchen gelagert. Das Blut wird zentrifugiert (12000 × g, 5 Minuten) und das Plasma wird entfernt. Das Plasma wird durch die Zugabe eines gleichen Volumens Acetonitril vom Protein befreit. Das Gemisch wird mittels eines Vortexmischers gemischt und kann für 20 bis 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen. Der Niederschlag wird durch Zentrifugation (12000 × g, 5 Minuten) pelletiert und die Konzentration der Testverbindung wird durch Umkehrphasenhochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) bestimmt.
  • Die HPLC Analyse der gemäß dem oben beschriebenen Verfahren erhaltenen Proben wird auf einer 125 × 4,6 mm Nukleosil® C18-Säule (Umkehrphasenmaterial, das von Macherey & Nagel, Düren, Deutschland hergestellt wird und auf Silicagel basiert, das mit Kohlenstoffresten mit 18 Kohlenstoffatomen derivatisiert ist) mittels einer 2 cm langen Vorsäule desselben Säulenmaterials ausgeführt. Der Test wird mit dem folgenden linearen Acetontril/Wasser Gradienten (in jedem Fall in Gegenwart von 0,05% Trifluoressigsäure) ausgeführt: 20% Acetonitril bis 100% Acetonitril für 20 Minuten, dann 5 Minuten 100% Acetonitril, dann Rückkehr zu den Anfangsbedingungen für 1 Minute und erneute Äquilibrierung für 4 Minuten. Die Flussrate beträgt 1 ml/min. Unter diesen Bedingungen hat die Verbindung der Formel Ι aus Beispiel 1 beispielsweise eine Retentionszeit von etwa 15,5 Minuten und das Detektionslimit beträgt 0,1–0,2 μM. Die Testverbindung wird durch UV Absorptionsmessung bei 255 nm detektiert. Die Peaks werden durch die Retentionszeit und das UV Spektrum zwischen 205 und 400 nm identifiziert. Die Konzentrationen werden durch das externe Standardverfahren bestimmt, wobei die erhaltenen Peakhöhen zur Bestimmung der Konzentrationen durch den Vergleich mit Standardkurven verwendet werden. Die Standardkurven werden durch analoge HPLC Analyse des Mausplasmas erhalten, das bekannte Konzentrationen der in Frage kommenden Testverbindung enthält und gemäß dem oben beschriebene Verfahren aufgearbeitet wurde.
  • In diesem Experiment bilden die Verbindungen der Formel I Plasmakonzentrationen weit über der ED90, die oben im Zellexperiment bestimmt wurde, beispielsweise um bis zu 8000 fach höher als die ED90 nach 30 Minuten und bis zu 10 500 fach größer als die ED90 nach 90 Minuten, vorzugsweise Plasmakonzentrationen von 0,1 μM bis 25 μM, speziell 1 bis 25 μM 30 Minuten nach der oralen Verabreichung und Plasmakonzentrationen von 0,5 bis 35 μM, speziell 1 bis 35 μM 90 Minuten nach der oralen Verabreichung.
  • Analog kann der Blutspiegel der Verbindungen der Formel Ι, beispielsweise der Titelverbindung von Beispiel 46, mittels der Formulierungen entweder gemäß Beispiel 63 oder Beispiel 64 in Hunden gemessen werden, wobei beispielsweise 92 bis 100 mg/kg der Verbindung verwendet werden, die durch eine Magensonde verabreicht wird, wobei dann die Blutspiegel beispielsweise 1, 2, 3, 4, 6, 8 und 24 Stunden nach der Verabreichung gemessen werden. Hier können ebenfalls Blutspiegel im mikromolaren Bereich gefunden werden.
  • Insbesondere die Kombination der hohen Bioverfügbarkeit (hohe Plasmaspiegel), die an sich überraschend ist, und der unerwartet ausgezeichneten ED90 im Zellexperiment macht die erfindungsgemäßen Verbindungen auf eine unvorhergesehene Weise wertvoll. Die Aktivität gegen Inhibitoren der retroviralen Aspartatproteasen, gegen die sich bereits eine Resistenz entwickelt hat, ist auch immer noch möglich und ist ein weiterer wichtiger Vorteil der erfindungsgemäßen Verbindungen.
  • Dies kann beispielsweise durch die folgenden oder analoge Tests gezeigt werden:
  • Inhibitor-resistente HIV-1 Proteasevarianten werden folgendermaßen kloniert:
  • Durch PCR-unterstützte Mutagenese und Klonierung werden HIV-1 Proteasemutanten erzeugt, die auf dem infektiösen Klon pNL4-3 basieren (frei erhältlich über das "NIH AIDS Reference and Reagent Program", wobei die Originalliteraturstelle A. Adachi et al., J. Virol. (1986) 59, 284–291 ist, kann aber natürlich auch jeder andere HIV Klon oder sogar klinisches Material sein, vorausgesetzt die Vergleichbarkeit ist sichergestellt). Die ansonsten isogenen Punktmutanten enthalten nur die Veränderungen, die in Veröffentlichungen zusammen mit einer viralen Resistenz gegen verschiedene Proteaseinhibitoren beschrieben wurden. Die klonierten Fragmente sind beispielsweise nur 500 Basenpaare lang, wobei der Rest unverändert bleibt. Durch die Verwendung von Mutationen in immer dem gleichen Klon ist eine direkte Vergleichbarkeit sichergestellt, die nicht der Fall wäre, wenn man klinische Proben oder unterschiedliche HIV Klone verwenden würde. Im transienten DNA Transfektionstest in humane T4-positive Zellen (HeLa T4) zeigen die entstehenden Proviren auch eine verringerte Inhibitoraktivität im Vergleich mit dem Wildtypvirus, das heißt eine erhöhte Resistenz. Dieses System wird als transientes DNA Transfektionssystem für Tests verwendet:
    • 1) Um eine mögliche Kreuzresistenz von Proteasevarianten gegenüber verschiedenen Proteaseinhibitoren zu identifizieren, und
    • 2) um die Stärke und das Resistenzprofil der neuen Inhibitorkandidaten zu ermitteln.
  • Beispielsweise hat in diesem Transfektionssystem 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 46) eine in vitro Stärke, die mit einer HK90 von < 30 nM praktisch gesprochen besser ist als die von Saquinavir (Hoffmann-LaRoche, siehe später) und die Aktivität gegen eine resistente Variante (45I/76F Stamm), die sich gegen 5(S)-(tert-Butoxycarbonylamino)-4(S)-hydroxy-6-phenyl-2(R)-(2,3,4-trimethoxyphenylmethyl)hexanoyl-(L)-valyl-N-(2-methoxyethyl)amid entwickelt hat (= Lasinavir, siehe EP 0 708 085 A vom 24.4.1996, Novartis AG, ursprünglich Ciba-Geigy AG) ist mit Saquinavir vergleichbar und besser als die von Indinavir (Merck & Co., Inc., siehe später) oder Ritinavir (Abbott, siehe später). Im Vergleich mit anderen Stämmen (beispielsweise 46I/47V/50V (VX478)) haben 10 nM eine Aktivität, die stärker ist (nicht quantifiziert) als die von Saquinavir, Ritonavir und Indinavir. Anstelle der erwähnten Stämme können alle humanen T4-positiven Zellen, wie die HeLa T4 Zellen verwendet werden, die unter diesem Namen von Richard Axel und Paul Maddon in "NIH AIDS Reference und Reagent Program" hinterlegt wurden und über diese Quelle erhältlich sind.
  • Im Prinzip sind die relevanten Mutationen für die obigen Testsysteme für Resistenzen bekannt (siehe beispielsweise in Bezug auf den 49V/90M Stamm (Saquinavirresistenz): H. Jacobsen, K. Yasargil, D. L. Winslow, J. C. Craig, A. Krohn, I. B. Duncan und Mous, J. Virology 206, 527 (1995), Merck Mutationen (mehrere, beispielsweise 71V/82T/84V): J. H. Condra, W. A. Schleif, O. M. Blahy, L. J. Gabryelski, D. J. Graham, J. C. Quintero, A. Rhodes, H. L. Robbins, E. Roth, M. Shivaprakash et al., Nature 374, 569 (1995), Abbott 82V/84A Stamm: M. Markowitz, H. Mo, D. J. Kempf, D. W. Norbeck, T. N. Bhat, J. W. Erickson und D. D. Ho, J. Virol. 69, 701 (1995).
  • Bei der Bestimmung der antienzymatischen Aktivitäten gegen mehrere humane Aspartatproteasen gemäß bekannter Verfahren (siehe beispielsweise Biochem, J. 265, 871–878 (1990)) zeigen die Verbindungen der Formel Ι eine hohe Selektivität gegenüber der retroviralen Aspartatprotease von HIV, spe ziell HIV-1. Beispielsweise beträgt die Hemmkonstante (HK50) für Verbindungen der Formel Ι im Test gegen Cathepsin D mehr als 10 μM, speziell mehr als 25 μM. Die HK50 gegen humanes Cathepsin D wird in diesem Test bei pH 3,1 gemessen. Der Test wird gemäß bekannter Verfahren mittels des Substrats KPIQF*NphRL ausgeführt (siehe R. A. Jupp, B. M. Dunn, J. W. Jacobs, G. Vlasuk, K. E. Arcuri, D. F. S. Veber, D. S. Perow, L. S. Payne, J. Bogner, S. DeLazio, P. K. Charkrabarty, J. TenBroeke, D. G. Hangauer, D. Ondeyka, W. J. Greenlee und J. Kay: The selectivity of statine-based inhibitors against various human aspartic proteases, Biochem. J. 265: 871–878 (1990)).
  • Die Verbindungen der Formel Ι können alleine oder in Kombination (als Kombinationssatz aus entsprechenden Zusammensetzungen oder als Kombination von einzelnen Verbindungen oder einzelnen Zusammensetzungen in einer zeitlich abgestuften Abfolge) mit einem oder mehreren pharmazeutischen Wirkstoffen (oder Salzen hiervon, vorausgesetzt, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist), die gegen Retroviren wirksam sind, speziell HIV, wie HIV-1 und HIV-2, speziell mit Inhibitoren der reversen Transkriptase, genauer gesagt Nukleosidanaloga, speziell 3'-Azido-3'-desoxypyrimidin (= Zidovudin = Retrovir®, Burroughs-Wellcome, 2',3'-Didesoxycytidin (= Zalcitabin = Hivid®, Hoffman-LaRoche), 2'3'-Didesoxyinosin (= Didanosin = Videx®, Bristol-Myers-Squibb) oder (2R,cis)-4-Amino-1-(2-hydroxymethyl-1,3-oxathiolan-5-yl)-(1H)-pyrimidin-2-on (= Lamivudin, Glaxo), speziell d4C = 2',3'-Didehydro-2',3'-didesoxycytidin, d4T = 2',3'-Didehydro-2',3'-didesoxythymidin (= Stavudin = Zerit®) oder 2',3'-Didesoxyinosin (= ddlno = DZI = Didanosin = Videx®) oder nicht-Nukleosidanaloga, wie 11-Cyclopropyl-5,11-dihydro-4-methyl-(6H)-dipyrido[3,2-b,2',3'-e]-[1,4]-diazepin-6-on oder mit einem oder mehreren (speziell einem oder auch zwei) anderen Inhibitoren der retroviralen Aspartatproteasen, speziell der Aspartatproteasen von HIV, wie HIV-1 und HIV-2 und vor allem
    • a) Einem der in EP 0 346 847 A (offengelegt am 20.12.1989) und EP 0 423 695 A (offengelegt am 19.06.1991, entspricht der US 5 196 438 A , offengelegt am 20.03.1993) erwähnten Inhibitoren, speziell der als Ro 31-8959 bezeichneten Verbindung (= Saquinavir, Hoffmann LaRoche),
    • b) Einem der in EP 0 541 168 A (offengelegt am 12.05.1993, entspricht US 5 413 999 A ) erwähnten Inhibitoren, speziell der als L-735 524 bezeichneten Verbindung (= Indinavir = Crixivan, Merck & Co., Inc.),
    • c) Einem der in EP 0 486 948 A (offengelegt am 27.05.1992, entspricht der US 5 354 866 A ) erwähnten Inhibitoren, speziell der als ABT-538 bezeichneten Verbindung (= Ritonavir, Abbott),
    • d) Der als KVX-478 bezeichneten Verbindung (oder VX-478 oder 141W94, GlaxoWellcome, Vertex und Kissei Pharmaceuticals),
    • e) Der als AG-1343 bezeichneten Verbindung (Aguron),
    • f) Der als KNI-272 bezeichneten Verbindung (Nippon Mining),
    • g) Der als U-96988 bezeichneten Verbindung (Upjohn),
    • h) Der als BILA-2011 BS bezeichneten Verbindung (= Palinavir, Boehringer-Ingelheim) und/oder
    • i) Der Verbindung 5(S)-(tert-Butoxycarbonylamino)-4(S)-hydroxy-6-phenyl-2(R)-(2,3,4-trimethoxyphenylmethyl)hexanoyl-(L)-valyl-N-(2-methoxyethyl)amid (= Lasinavir, siehe EP 0 708 085 A , offengelegt am 24.04.1996, Novartis AG, ursprünglich Ciba-Geigy AG),
    oder in jedem Fall mit einem Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass salzbildende Gruppen vorhanden sind.
  • Die Verbindungn der Formel I können bei der Prävention, Kontrolle und Behandlung von Retrovirusinfektionen, speziell HIV, wie HIV-1 oder HIV-2 in Zellkulturen, speziell Zellkulturen von Lymphocytenzelllinien von Warmblütern verwendet werden, was besonders im Fall von sehr wertvollen Zellkulturen vorteilhaft ist, die beispielsweise spezifische Antikörper, Impfstoffe oder Botenstoffe bilden, wie Interleukine und dergleichen und daher von großem kommerziellem Wert sind.
  • Schließlich können die Verbindungen der Formel Ι als Standards in Experimenten verwendet werden, beispielsweise als HPLC Standards oder als Standards zum Vergleich von Tiermodellen in Bezug auf unterschiedliche Aspartatproteaseinhibitoren, beispielsweise in Bezug auf die erreichbaren Blutspiegel.
  • In den Gruppen der später erwähnten bevorzugten Verbindungen der Formel I ist es möglich, wo dies angebracht ist (beispielsweise um allgemeinere Definitionen durch spezifischere Definitionen zu ersetzen oder speziell durch Definitionen, die als bevorzugt beschrieben sind), Substituentendefinitionen aus den oben angegebenen allgemeinen Definitionen zu verwenden, wobei in jedem Fall die oben als bevorzugt beschriebenen oder als Beispiele angegebenen Definitionen bevorzugt sind.
  • Es wird eine Verbindung der Formel Ι, speziell der Formel Ia bevorzugt, worin
    R1 für Niederalkoxycarbonyl, speziell Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht,
    R2 für Isopropyl, sek-Butyl (vorzugsweise in der (S)-Konfiguration) oder tert-Butyl steht,
    R3 für Phenyl oder auch Cyclohexyl steht,
    R4 für Phenyl steht, das an der Position 4 durch einen der folgenden Rest substituiert ist, die über ein Ringkohlenstoffatom gebunden sind: Thienyl (= Thiophenyl), Oxazolyl, Thiazolyl, Imidazolyl, 1,4-Thiazinyl, Triazolyl, das unsubstituiert oder insbesondere substituiert ist durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl, wie 1-, 2- oder 4-(Methyl oder tert-Butyl)-triazol-3-yl, Tetrazolyl, das unsubstituiert oder speziell durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise Niederalkyl substituiert ist, wie durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl, wie 2H-Tetrazol-5-yl, das durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise durch Niederalkyl substituiert ist, wie durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl, oder 1H-Tetrazol-5-yl, das durch Methyl, Pyridinyl, Pyrazinyl und Pyrimidinyl substituiert ist, insbesondere 2- oder 3-Thienyl (= Thiophen-2-yl oder Thiophen-3-yl), Thiazol-5-yl, Thiazol-2-yl, 2H-Tetrazol-5-yl, das unsubstituiert oder speziell an der Position 2 durch 1-Methyl-1-phenylethyl oder vorzugsweise durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl substituiert ist, 1H-Tetrazol-5-yl, das an der Position 1 durch Methyl, Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl oder Pyrazin-2-yl substituiert ist,
    R5 für Isopropyl, sek-Butyl (vorzugsweise in der (S)-Konfiguration, tert-Butyl oder Methylthiomethyl steht, und
    R6 für Niederalkoxycarbonyl, speziell Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht,
    oder ein Salz hiervon (insbesondere ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon), mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  • Noch bevorzugter ist eine Verbindung der Formel Ι, worin
    R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht,
    R2 für Isopropyl, sek-Butyl oder tert-Butyl steht,
    R3 für Phenyl steht,
    R4 für Phenyl steht, das an der Position 4 des Phenylrings substituiert ist durch 2- oder 3-Thienyl (= Thiophen-2-yl oder Thiophen-3-yl), Thiazol-5-yl, Thiazol-2-yl, 2H-Tetrazol-5-yl, das unsubstituiert oder speziell an der Position 2 durch 1-Methyl-1-phenylethyl, oder vorzugsweise durch tert-Butyl oder speziell durch Methyl substituiert ist, 1H-Tetrazol-5-yl, das an der Position 1 durch Methyl substituiert ist, Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl oder durch Pyrazin-2-yl und speziell für 4-(Thiazol-2-yl)phenyl, 4-(Thiazol-5-yl)phenyl, 4-(Pyridin-2-yl)phenyl oder 4-(2-Methyltetrazol-5-yl)phenyl steht,
    R5 für Isopropyl, sek-Butyl, tert-Butyl oder Methylthiomethyl steht, und
    R6 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht,
    mit der Maßgabe, dass zumindest einer der zwei Reste R2 und R5 für tert-Butyl steht, mit der Maßgabe, dass R4 für Phenyl steht, das an der Position 4 des Phenylrings substituiert ist durch 2- oder 3-Thienyl (= Thiophen-2-yl oder Thiophen-3-yl), Thiazol-5-yl, Thiazol-2-yl, 2H-Tetrazol-5-yl, das unsubstituiert oder an der Position 2 durch 1-Methyl-1-phenylethyl, tert-Butyl oder durch Methyl substituiert ist, 1H-Tetrazol-5-yl, das an der Position 1 durch Methyl substituiert ist, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl oder durch Pyrazin-2-yl,
    oder ein (vorzugsweise pharmazeutisch annehmbares) Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  • Besonders bevorzugt ist eine Verbindung der Formel I, worin
    R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht,
    R2 für Isopropyl, sek-Butyl oder tert-Butyl steht,
    R3 für Phenyl steht,
    R4 für 4-(Thiazol-2-yl)phenyl, 4-(Thiazol-5-yl)phenyl, 4-(Pyridin-2-yl)phenyl oder 4-(2-Methyltetrazol-5-yl)phenyl steht,
    R5 für Isopropyl, sek-Butyl, tert-Butyl oder Methylthiomethyl steht, und
    R6 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht,
    oder ein (vorzugsweise pharmazeutisch annehmbares) Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  • Jede der später erwähnten Verbindungen der Formel I oder ein (vorzugsweise pharmazeutisch annehmbares) Salz hiervon ist vor allem bevorzugt:
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-5-methylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, oder
    1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan.
  • Es werden speziell Verbindungen der Formel Ι bevorzugt, die in den Beispielen erwähnt werden, oder pharmazeutisch annehmbare Salze hiervon, mit der Maßgabe, dass mindestens eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  • Die Verbindungen der Formel I und die Salze der Verbindungen mit mindestens einer salzbildenden Gruppe werden durch an sich bekannte Verfahren hergestellt, beispielsweise folgendermaßen:
    • a) Ein Hydrazinderivat der Formel
      Figure 00130001
      worin die Reste R4, R5 und R6 wie für Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wird zu einem Epoxid der Formel IV gegeben
      Figure 00130002
      worin die Reste R1, R2 und R3 wie für Verbindungen der Formel Ι definiert sind und freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und alle Schutzgruppen werden entfernt, oder
    • b) eine Aminoverbindung der Formel V
      Figure 00140001
      worin die Reste R1, R2, R3 und R4 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wird mit einer Säure der folgenden Formel
      Figure 00140002
      oder mit einem reaktiven Säurederivat hiervon kondensiert, worin die Reste R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wobei freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann werden alle Schutzgruppen entfernt, oder
    • c) eine Aminoverbindung der Formel VII
      Figure 00140003
      worin die Reste R3, R4, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wird mit einer Säure der folgenden Formel
      Figure 00140004
      oder mit einem reaktiven Säurederivat hiervon kondensiert, worin R1 und R2 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wobei freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann werden alle Schutzgruppen entfernt, oder
    • d) zur Herstellung einer Verbindung der Formel Ι, worin die Substituentenpaare R1 und R6 und R2 und R5 jeweils für zwei identische Reste stehen, wie für Verbindungen der Formel Ι definiert sind und R3 und R4 wie für Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wird eine Diaminoverbindung der Formel IX
      Figure 00150001
      worin die Reste wie eben definiert sind, mit einer Säure der folgenden Formel
      Figure 00150002
      oder mit einem reaktiven Säurederivat hiervon kondensiert, worin R1' und R2' jeweils wie für R1 und R6 und für R2 und R5 in Formel Ι definiert sind, die Paare R1 und R6 und R2 und R5 jeweils zwei identische Reste sind und freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen und dann werden alle Schutzgruppen entfernt, oder
    • e) eine Iminoverbindung der Formel (Ι')
      Figure 00150003
      worin die Reste R1, R2, R3, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wird mit einer Verbindung der Formel X umgesetzt
      Figure 00150004
      worin X für eine Abgangsgruppe steht und R4 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert ist, freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann werden alle Schutzgruppen entfernt, oder
    • f) eine Iminoverbindung der Formel (Ι')
      Figure 00160001
      worin die Reste R1, R2, R3, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel Ι definiert sind, wird mit einem Aldehyd der Formel X*
      Figure 00160002
      worin R4 wie für Verbindungen der Formel I definiert ist oder mit einem reaktiven Derivat hiervon in einer reduktiven Alkylierung umgesetzt, wobei freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann werden alle Schutzgruppen entfernt, und erforderlichenfalls wird eine Verbindung der Formel I mit zumindest einer salzbildenden Gruppe, die gemäß einem der Verfahren a) bis f) oben erhältlich ist, in deren Salz umgewandelt oder ein erhältliches Salz wird in die freie Verbindung oder in ein unterschiedliches Salz umgewandelt und/oder Isomerengemische, die erhalten werden können, werden getrennt und/oder eine Verbindung der Formel I gemäß der Erfindung wird in eine unterschiedliche Verbindung der Formel Ι gemäß der Erfindung umgewandelt.
  • Die obigen Verfahren werden später ausführlicher in Bezug auf die bevorzugten Ausführungsformen beschrieben.
  • In der folgenden Beschreibung der einzelnen Verfahren und der Herstellung der Ausgangsmaterialien werden, falls nichts anderes angegeben ist, die Reste R1, R2, R3, R4, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel I definiert, wobei in jedem Fall als bevorzugt angegebene Definitionen bevorzugt werden.
  • Verfahren a) (Anfügung eines Amin an ein Epoxid)
  • In den Hydrazinderivaten der Formel III hat die Aminogrupe, die an der Reaktion teilnimmt, vorzugsweise ein freies Wasserstoffatom, wurde jedoch selbst derivatisiert, um die Reaktivität des Hydrazinderivats zu erhöhen.
  • Das Epoxid der Formel IV ermöglicht die terminale Anfügung des Hydrazinderivats, um bevorzugt weitermachen zu können.
  • In den Ausgangsmaterialien können funktionelle Gruppen, deren Reaktion vermieden werden soll, speziell Carboxy-, Amino- und Hydroxygruppen, durch geeignete Schutzgruppen (herkömmliche Schutzgruppen) geschützt werden, die gewöhnlich bei der Synthese von Peptidverbindungen und auch bei der Synthese von Cephalosporinen und Penicillinen wie auch Nukleinsäurederivaten und Zuckern verwendet werden. Diese Schutzgruppen können schon in den Vorläufern vorhanden sein und sollen die in Frage kommenden funktionellen Gruppen vor unerwünschten Sekundärreaktionen schützen, wie Acylierung, Veretherung, Veresterung, Oxidation, Solvolyse und dergleichen. In bestimmten Fällen können die Schutzgruppen zusätzlich zu diesem Schutz einen selektiven, beispielsweise stereoselektiven Verlauf von Reaktionen bewirken. Ein Merkmal von Schutzgruppen ist, dass sie leicht entfernbar sind, das heißt ohne dass unerwünschte Sekundärreaktionen stattfinden, beispielsweise durch Solvolyse, Reduktion, Photolyse und auch enzymatisch, wie beispielsweise auch unter physiologischen Bedingungen. Analoge Reste zu Schutzgruppen können jedoch auch in den Endprodukten vorkommen. Verbindungen der Formel Ι mit geschützten funktionellen Gruppen können eine größere metabolische Stabilität oder pharmakodynamische Eigenschaften aufweisen, die auf eine bestimmte Art besser sind, als die entsprechenden Verbindungen mit freien funktionellen Gruppen. Hierin wird vorher und später auf Schutzgruppen in ihrem eigentlichen Sinn Bezug genommen, wenn die in Frage kommenden Reste nicht in den Endprodukten vorkommen.
  • Der Schutz von funktionellen Gruppen durch solche Schutzgruppen, die Schutzgruppen selbst und die Reaktionen für ihre Entfernung sind beispielsweise in Standardwerken beschrieben, wie J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London und New York 1973, in T. W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley New York, 1981, in "The Peptides", Band 3 (E. Gross und J. Meienhofer, Herausgeber), Academic Press, London und New York 1981, in "Methoden der organischen Chemie", Houben-Weyl, 4. Ausgabe, Band 15/Ι, Georg Thieme Verlag Stuttgart 1974 und in N.-D. Jakubke und N. Jescheit, "Aminosäuren, Peptide, Proteine", Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach und Basel 1982 und in Jochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Derivate", Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974.
  • Eine Carboxygruppe wird beispielsweise in Form einer Estergruppe geschützt, die selektiv unter milden Bedingungen abgespalten werden kann. Eine Carboxygruppe, die in einer veresterten Form geschützt wird, wird speziell durch eine Niederalkylgruppe verestert, die vorzugsweise an der Position 1 der Niederalkylgruppe verzweigt ist oder an der Position 1 oder 2 der Niederalkylgruppe durch geeignete Substituenten substituiert ist.
  • Eine geschützte Carboxygruppe, die mit einer Niederalkylgruppe verestert ist, ist beispielsweise Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl.
  • Eine geschützte Carboxygruppe, die mit einer Niederalkylgruppe verestert ist, die an der Position 1 der Niederalkylgruppe verzweigt ist, ist beispielsweise tert-Niederalkoxycarbonyl, beispielsweise tert-Butoxycarbonyl.
  • Eine geschützte Carboxygruppe, die durch eine Niederalkylgruppe verestert ist, die an der Position 1 oder 2 der Niederalkylgruppe durch geeignete Substituenten substituiert ist, ist beispielsweise Arylmethoxycarbonyl mit ein oder zwei Arylresten, worin Aryl für Phenyl steht, das unsubstituiert oder mono-, di- oder tri-substituiert ist beispielsweise durch Niederalkyl, beispielsweise tert-Niederalkyl, wie tert-Butyl, Niederalkoxy, beispielsweise Methoxy, Hydroxy, Halogen wie Chlor und/oder durch Nitro, beispielsweise Benzyloxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, das durch die erwähnten Substituenten substituiert ist, beispielsweise 4-Nitrobenzyloxycarbonyl oder 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, Diphenylmethoxycarbonyl oder Diphenylmethoxycarbonyl, das durch die erwähnten Substituenten substituiert ist, beispielsweise Di-(4-methoxyphenyl)methoxycarbonyl und auch Carboxy, das durch eine Niederalkylgruppe verestert ist, wobei die Niederalkylgruppe an der Position 1 oder 2 durch geeignete Substituenten substituiert ist, wie 1-Niederalkoxyniederalkoxycarbonyl, beispielsweise Methoxymethoxycarbonyl, 1-Methoxyethoxycarbonyl oder 1-Ethoxyethoxycarbonyl, 1-Niederalkylthioniederalkoxycarbonyl, beispielsweise 1-Methylthiomethoxycarbonyl oder 1-Ethylthioethoxycarbonyl, Aroylmethoxycarbonyl, worin die Aroylgruppe für Benzoyl steht, die unsubstituiert oder substituiert ist beispielsweise durch Halogen, wie Brom, beispielsweise Phenylacyloxycarbonyl, 2-Halogenniederalkoxycarbonyl, beispielsweise 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Bromethoxycarbonyl, oder 2-Ιodethoxycarbonyl, wie auch 2-(tri-substituiertes Silyl)niederalkoxycarbonyl, worin die Substituenten unabhängig voneinander ein aliphatischer, araliphatischer, cycloaliphatische oder aromatischer Kohlenwasserstoffrest sind, der unsubstituiert oder substituiert ist beispielsweise durch Niederalkyl, Niederalkoxy, Aryl, Halogen, und/oder durch Nitro, beispielsweise Niederalkyl, Phenylniederalkyl, Cycloalkyl oder Phenyl, das jeweils unsubstituiert oder wie oben substituiert ist, beispielsweise 2-Triniederalkylsilylniederalkoxycarbonyl, wie 2-Triniederalkylsilylethoxycarbonyl, beispielsweise 2-Trimethylsilylethoxycarbonyl oder 2-(Di-n-butylmethylsilyl)ethoxycarbonyl oder 2-Triarylsilylethoxycarbonyl, wie Triphenylsilylethoxycarbonyl.
  • Eine Carboxygruppe kann auch in Form einer organischen Silyloxycarbonylgruppe geschützt sein. Eine organische Silyloxycarbonylgruppe ist beispielsweise eine Triniederalkylsilyloxycarbonylgruppe, beispielsweise Trimethylsilyloxycarbonyl.
  • Eine geschützte Carboxygruppe ist vorzugsweise tert-Niederalkoxycarbonyl, beispielsweise tert-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethoxycarbonyl oder Diphenylmethoxycarbonyl.
  • Eine geschützte Aminogruppe kann durch eine Aminoschutzgruppe geschützt werden, beispielsweise in Form einer Acylamino-, Arylmethylamino-, veretherten Mercaptoamino-, 2-Acylniederalk-1-enylaminogruppe oder Silylaminogruppe oder in Form einer Azidogruppe.
  • In einer entsprechenden Acylaminogruppe steht Acyl beispielsweise für den Acylrest einer organischen Carbonsäure mit beispielsweise bis zu 18 Kohlenstoffatomen, insbesondere einer unsubstituierten oder substituierten, beispielsweise mit Halogen oder Aryl substituierten Niederalkancarbonsäure oder einer unsubstituierten oder substituierten, beispielsweise mit Halogen, Niederalkoxy oder Nitro substituierten Benzoesäure oder vorzugsweise einen Kohlensäurehalbester. Solche Acylgruppen sind beispielsweise Niederalkanoyl, wie Formyl, Acetyl, Propionyl oder Pivaloyl, Halogenniederalkanoyl, beispielsweise 2-Halogenacetyl, wie 2-Chlor-, 2-Brom-, 2-Ιod-, 2,2,2-Trifluor- oder 2,2,2-Trichloracetyl, unsubstituiertes oder substituiertes, beispielsweise durch Halogen, Niederalkoxy oder Nitro substituiertes Benzoyl, wie Benzoyl, 4-Chlorbenzoyl, 4-Methoxybenzoyl oder 4-Nitrobenzoyl, Niederalkoxycarbonyl, vorzugsweise Niederalkoxycarbonyl, das an der Position 1 des Niederalkylrests verzweigt ist oder an der Position 1 oder 2 geeignet substituiert ist, beispielsweise tert-Niederalkoxycarbonyl, wie tert-Butoxycarbonyl, Arylmethoxycarbonyl mit ein oder zwei Arylresten, die für Phenyl stehen, das unsubstituiert oder mono- oder polysubstituiert ist, beispielsweise durch Niederalkyl, insbesondere tert-Niederalkyl, wie tert-Butyl, Niederalkoxy, wie Methoxy, Hydroxy, Halogen, wie Chlor und/oder durch Nitro, beispielsweise Benzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, Diphenylmethoxycarbonyl, 9-Fluorenylmethoxycarbonyl oder Di-(4-methoxyphenyl)methoxycarbonyl, Aroylmethoxycarbonyl, worin die Aroylgruppe vorzugsweise Benzoyl ist, das unsubstituiert oder substituiert ist beispielsweise durch Halogen, wie Brom, beispielsweise Phenacyloxycarbonyl, 2-Halogenniederalkoxycarbonyl, beispielsweise 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Bromethoxycarbonyl, oder 2-Iodethoxycarbonyl, 2-(tri-substituiertes Silyl)niederalkoxycarbonyl, beispielsweise 2-Triniederalkylsilylniederalkoxycarbonyl, wie 2-Trimethylsilylethoxycarbonyl, oder 2-(Di-n-butylmethylsilyl)ethoxycarbonyl oder Triarylsilylniederalkoxycarbonyl, beispielsweise 2-Triphenylsilylethoxycarbonyl.
  • In einer Arylmethylaminogruppe, beispielsweise einer Mono-, Di- oder insbesondere Triarylmethylaminogruppe, sind die Arylreste insbesondere unsubstituierte oder substituierte Phenylreste. Beispiele für solche Gruppen sind Benzyl-, Diphenylmethyl- und insbesondere Tritylamino oder vor allem 1-Arylniederalkylmethylamino, worin der Niederalkylrest vorzugsweise an der Position 1 verzweigt ist, wie bei 1-Methyl-1-phenylethylamino.
  • In einer veretherten Mercaptoaminogruppe kommt die Mercaptogruppe insbesondere in Form einer substituierten Arylthio- oder Arylniederalkylthiogruppe vor, worin Aryl beispielsweise Phenyl ist, das unsubstituiert oder substituiert ist, beispielsweise durch Niederalkyl, wie Methyl oder tert-Butyl, Niederalkoxy, wie Methoxy, Halogen, wie Chlor und/oder durch Nitro, beispielsweise 4-Nitrophenylthio.
  • In einem 2-Acylniederalk-1-enyl Rest, der als Aminoschutzgruppe verwendet werden kann, steht Acyl beispielsweise für den entsprechenden Rest einer Niederalkancarbonsäure, einer Benzoesäure, die unsubstituiert oder substituiert ist, beispielsweise durch Niederalkyl, wie Methyl oder tert-Butyl, Niederalkoxy, wie Methoxy, Halogen, wie Chlor und/oder durch Nitro, oder insbesondere einen Kohlensäurehalbester, wie einen Carbonsäure-Niederalkylhalbester. Entsprechende Schutzgruppen sind insbesondere 1-Niederalkanoylniederalk-1-en-2-yl, beispielsweise 1-Niederalkanoylprop-1-en-2-yl, beispielsweise 1-Acetylprop-1-en-2-yl oder Niederalkoxycarbonylniederalk-1-en-2-yl, beispielsweise Niederalkoxycarbonylprop-1-en-2-yl, wie 1-Ethoxycarbonyl-prop-1-en-2-yl.
  • Eine Silylaminogruppe ist beispielsweise eine Triniederalkylsilylaminogruppe, beispielsweise Trimethylsilylamino oder tert-Butyldimethylsilylamino. Das Siliciumatom der Silylaminogruppe kann auch nur durch zwei Niederalkylgruppen substituiert sein, beispielsweise Methylgruppen und durch die Aminogruppe oder Carboxylgruppe eines zweiten Moleküls der Formel I. Verbindungen, die solche Schutzgruppen besitzen, können beispielsweise mittels der entsprechenden Chlorsilane, wie Dimethylchlorsilan als Silylierungsmittel hergestellt werden.
  • Eine Aminogruppe kann auch durch die Umwandlung in die protonierte Form geschützt werden, wobei geeignete korrespondierende Anionen speziell die von starken anorganischen Säuren sind, wie Schwefelsure, Phosphorsäure oder Halogenwasserstoffsäuren, beispielsweise das Chlor- oder Bromanion oder die von organischen Sulfonsäuren wie p-Toluolsulfonsäure.
  • Bevorzugte Aminoschutzgruppen sind Niederalkoxycarbonyl, Phenylniederalkoxycarbonyl, Fluorenylniederalkoxycarbonyl, 2-Niederalkanoylniederalk-1-en-2-yl, 1-Methyl-1-phenylethyl und Niederalkoxycarbonylniederalk-1-en-2-yl.
  • Eine Hydroxygruppe kann geschützt werden, beispielsweise durch eine Acylgruppe, beispielsweise Niederalkanoyl, das substituiert ist durch Halogen, wie Chlor, wie Acetyl oder 2,2-Dichloracetyl, oder speziell durch einen Acylrest eines Kohlensäuresemiesters, der für geschützte Aminogruppen erwähnt wurde. Eine bevorzugte Hydroxyschutzgruppe ist beispielsweise 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, Diphenylmethoxycarbonyl oder Trityl. Eine Hydroxygruppe kann auch geschützt werden durch Triniederalkylsilyl, beispielsweise Trimethylsilyl, Triisopropylsilyl, tert-Butyldimethylsilyl oder eine leicht entfernbare veresternde Gruppe, beispielsweise eine Alkylgruppe, wie tert-Niederalkyl, beispielsweise tert-Butyl, durch einen Oxa- oder Thia-aliphatischen oder -cycloaliphatischen, speziell 2-Oxa- oder 2-Thia-aliphatischen oder -cycloaliphatischen Kohlenwasserstoffrest, beispielsweise 1-Niederalkoxyniederalkyl oder 1-Niederalkylthioniederalkyl, wie Methoxymethyl, 1-Methoxyethyl, 1-Ethoxyethyl, Methylthiomethyl, 1-Methylthioethyl oder 1-Ethylthioethyl oder 2-Oxa- oder 2-Thiacycioalkyl mit 5 bis 7 Ringatomen, beispielsweise 2-Tetrahydrofuryl oder 2-Tetrahydropyranyl oder durch ein entsprechendes Thiaanalogon, wie auch 1-Phenylniederalkyl, wie Benzyl, Diphenylmethyl oder Trityl, wobei die Phenylreste unsubstituiert oder substituiert sein können, beispielsweise durch Halogen, wie Chlor, Niederalkoxy, wie Methoxy und/oder durch Nitro.
  • Eine Hydroxygruppe und eine Aminogruppe, die in einem Molekül benachbart zueinander liegen, können beispielsweise durch bivalente Schutzgruppen geschützt werden, wie eine Methylengruppe, die vorzugsweise substituiert ist, beispielsweise durch einen oder zwei Niederalkylreste oder durch Oxo, beispielsweise unsubstituiertes oder substituiertes Alkyliden, beispielsweise Niederalkyliden, wie Isopropyliden, Cycloalkyliden, wie Cyclohexyliden, eine Carbonylgruppe oder Benzyliden.
  • Im Zusammenhang mit der Beschreibung soll eine Schutzgruppe, beispielsweise eine Carboxyschutzgruppe, ausdrücklich auch als polymerer Träger verstanden werden, der in einer leicht entfernbaren Weise an die funktionelle Gruppe, beispielsweise die zu schützende Carboxygruppe, gebunden ist, beispielsweise ein Träger, der für die Merrifieldsynthese geeignet ist. Ein solcher geeigneter polymerer Träger ist beispielsweise ein Polystyrolharz, das schwach durch Co-Polymerisation mit Divinylbenzol vernetzt ist und Brückenglieder trägt, die für eine reversible Bindung geeignet sind.
  • Die Anbringung der Verbindungen der Formel III an die Epoxide der Formel IV wird vorzugsweise unter den Reaktionsbedingungen ausgeführt, die herkömmlich für die Anfügung von Nukleophilen an Epoxide verwendet werden.
  • Die Anbringung wird speziell ausgeführt in wässriger Lösung und/oder in Gegenwart von polaren Lösemitteln, wie Alkoholen, beispielsweise Methanol, Ethanol, Isopropanol oder Ethylenglycol, Ethern, wie Dioxan, Amiden, wie Dimethylformamid oder Phenolen, wie Phenol und auch unter wasserfreien Bedingungen in nicht polaren Lösemitteln, wie Benzol oder Toluol oder in Benzol/Wasser Emulsionen, wahlweise in Gegenwart von sauren oder basischen Katalysatoren, beispielsweise Alkalihydroxidlösungen, wie Natriumhydroxidlösung oder in Gegenwart von Festphasenkatalysatoren, die mit dem Hydrazin versetzt sind, wie Aluminiumoxid, in Ethern, beispielsweise Diethylether im allgemeinen bei Temperaturen von etwa 0°C bis zur Siedetemperatur des in Frage kommenden Reaktionsgemisches, vorzugsweise von 20°C bis zur Rückflusstemperatur, wahlweise unter erhöhtem Druck, beispielsweise in einem Druckrohr, wobei es in diesem Fall auch möglich ist, die bei Normaldruck messbare Siedetemperatur zu überschreiten und/oder unter Inertgas, wie Stickstoff oder Argon, wobei es für beide der zwei Verbindungen der Formel III und IV möglich ist, im Überschuss vorzukommen, beispielsweise in einem molaren Verhältnis von 1 : 1 bis 1 : 100, speziell in einem molaren Verhältnis von 1 : 1 bis 1 : 10, spezieller in einem Verhältnis von 1 : 1 bis 1 : 3.
  • Die Freisetzung der Schutzgruppen kann gemäß den später unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren ausgeführt werden.
  • Verfahren b) (Bildung einer Amidbindung)
  • In den Ausgangsmaterialien der Formeln V und VI werden funktionelle Gruppen, mit Ausnahme der Gruppen, die an der Reaktion teilnehmen oder die unter den Reaktionsbedingungen nicht reagieren, unabhängig voneinander durch eine der unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt.
  • Die Verbindungen der Formel VI enthalten entweder eine freie Carboxygruppe oder liegen in Form eines reaktiven Säurederivats hiervon vor, beispielsweise in Form eines abgeleiteten aktivierten Esters oder reaktiven Anhydrids oder in Form eines reaktiven cyclischen Amids. Die reaktiven Säurederivate können auch in situ gebildet werden.
  • Aktivierte Ester der Verbindung der Formel VI mit einer terminalen Carboxygruppe sind insbesondere Ester, die am verbindenden Kohlenstoffatom des veresternden Rests ungesättigt sind, beispielsweise Ester vom Vinylestertyp, wie Vinylester (die beispielsweise durch die Umesterung eines entsprechenden Esters mit Vinylacetat, dem aktivierten Vinylesterverfahren erhalten werden können), Carbamoylester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem Isoxazoliumreagenz, 1,2-Oxazolium- oder dem Woodwardverfahren, erhalten werden können), oder 1-Niederalkoxyvinylester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem Niederalkoxyacetylen, erhalten werden können, dem Ethoxyacetylenverfahren), oder Ester des Amidinotyps, wie N,N'-disubstituierte Amidinoester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem geeigneten N,N'-disubstituierten Carbodiimid erhalten werden können, beispielsweise N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid oder insbesondere N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid, dem Carbodiimidverfahren) oder N,N-disubstituierte Amidinoester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem N,N-disubstituierten Cyanamid erhalten werden können, dem Cyanamidverfahren), geeignete Arylester, insbesondere Phenylester, die durch elektronenziehende Substituenten geeignet substituiert sind (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem geeignet substituierten Phenol erhalten werden können, beispielsweise 4-Nitrophenol, 4-Methylsulfonylphenol, 2,4,5-Trichlorphenol, 2,3,4,5,6-Pentachlorphenol oder 4-Phenyldiazophenol in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, dem Verfahren der aktivierten Arylester), Cyanomethylester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit Chloracetonitril in Gegenwart einer Base erhalten werden können, dem Cyanomethylesterverfahren), Thioester, insbesondere unsubstituiert oder substituiert, beispielsweise Nitro-substituiert, Phenylthioester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem Thiophenol erhalten werden können, das unsubstituiert oder substituiert ist, beispielsweise durch Nitro, unter anderem mit Hilfe des Anhydrid- oder Carbodiimidverfahrens, dem Verfahren der aktivierten Thiolester) oder speziell Amino- oder Amidoester (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einer N-Hydroxyamino- oder N-Hydroxyamidoverbindung erhalten werden können, beispielsweise N-Hydroxysuccinimid, N-Hydroxypiperidin, N-Hydroxyphthalimid, N-Hydroxy-5-norbornen-2,3-dicarbonsäureimid, 1-Hydroxybenzotriazol oder 3-Hydroxy-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazin-4-on, beispielsweise gemäß dem Anhydrid- oder Carbodiimidverfahren, dem Verfahren der aktivierten N-Hydroxyester). Interne Ester, beispielsweise γ-Lactone, können auch verwendet.
  • Säureanhydride können symmetrische oder vorzugsweise gemischte Anhydride dieser Säuren sein, beispielsweise Anhydride mit anorganischen Säuren, wie Säurehalogenide, insbesondere Säurechloride (die beispielsweise erhalten werden können durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit Thionylchlorid, Phosphorpentachlorid, Phosgen oder Oxalylchlorid, dem Säurechloridverfahren), Azide (die beispielsweise erhalten werden aus einem entsprechenden Säureester durch das entsprechende Hydrazid und dessen Behandlung mit salpetriger Säure, dem Azidverfahren), Anhydride mit Kohlensäuresemiestern, wie mit den entsprechenden Estern, beispielsweise Kohlensäureniederalkylsemiester (spe ziel) Chlorameisensäuremethylester) (die beispielsweise erhalten werden können durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit Chlorameisensäureniederalkylester oder mit einem 1-Niederalkoxycarbonyl-2-niederalkoxy-1,2-dihydrochinolin, dem gemischten O-Alkylkohlensäureanhydridverfahren), oder Anhydride mit dihalogenierter, insbesondere dichlorierter Phosphorsäure (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit Phosphoroxychlorid erhalten werden kann, dem Phosphoroxychloridverfahren), Anhydride mit anderen Phosphorsäurederivaten (beispielsweise die, welche mit Phenyl-N-phenylphosphoramidchloridat oder durch die Umsetzung mit Alkylphosphorsäureamiden in Gegenwart von Sulfonsäureanhydriden und/oder Razemisierungs-verringernden Zusätzen, wie N-Hydroxybenzotriazol oder in Gegenwart von Cyanophosphonsäurediethylester erhältlich sind) oder Phosphorsäurederivate oder Anhydride mit organischen Säuren, wie gemischten Anhydriden mit organischen Carbonsäuren (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit einem unsubstituierten oder substituierten Niederalkancarbon- oder Phenylniederalkancarbonsäurehalogenid erhalten werden können, beispielsweise Phenylessigsäure-, Pivalinsäure- oder Trifluoressigsäurechlorid, dem gemischten Carbonsäureanhydridverfahren) oder mit organischen Sulfonsäuren (die beispielsweise durch die Behandlung eines Salzes, wie eines Alkalimetallsalzes der entsprechenden Säure mit einem geeigneten organischen Sulfonsäurehalogenid erhalten werden können, wie einem Niederalkansulfonsäure- oder Arylsulfonsäurechlorid, beispielsweise Methan- oder p-Toluolsulfonsäurechlorid, dem gemischten Sulfonsäureanhydridverfahren) und symmetrische Anhydride (die beispielsweise durch die Kondensation der entsprechenden Säure in Gegenwart eines Carbodiimids oder von 1-Diethylaminopropin erhalten werden können, dem Verfahren der symmetrischen Anhydride).
  • Geeignete cyclische Amide sind insbesondere Amide mit fünfgliedrigen Diazacyclen aromatischen Charakters, wie Amide mit Imidazolen, beispielsweise Imidazol (die beispielsweise durch die Behandlung der entsprechenden Säure mit N,N'-Carbonyldiimidazol erhalten werden können, dem Imidazolverfahren) oder Pyrazole, beispielsweise 3,5-Dimethylpyrazol (das beispielsweise durch das Säurehydrazid durch die Behandlung mit Acetylaceton erhalten werden kann, dem Pyrazolidverfahren).
  • Wie oben erwähnt können Carbonsäurederivate, die als Acylierungsmittel verwendet werden, auch in situ gebildet werden. Beispielsweise können N,N'-disubstituierte Amidinoester in situ durch die Umsetzung eines Gemisches des Ausgangsmaterials der Formel V und der als Acylierungsmittel verwendeten Säure in Gegenwart eines geeigneten N,N'-disubstituierten Carbodiimids, beispielsweise N,N'-Cyclohexylcarbodiimid oder speziell N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid, gebildet werden. Zusätzlich können Amino- oder Amidoester der als Acylierungsmittel verwendeten Säuren in Gegenwart des zu acylierenden Ausgangsmaterials der Formel V durch die Umsetzung eines Gemisches der entsprechenden Säure und der Aminoausgangsmaterialien in Gegenwart eines N,N'-disubstituierten Carbodiimids, beispielsweise N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid und einem N-Hydroxyamin oder N-Hydroxyamid, beispielsweise N-Hydroxysuccinimid, geeignetenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base, beispielsweise 4-Dimethylaminopyridin gebildet werden. Darüberhinaus kann die in situ Aktivierung durch die Umsetzung mit N,N,N',N'-Tetraalkyluroniumverbindungen erreicht werden, wie O-Benzotriazol-1-yl-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorphosphat, O-(1,2-Dihydro-2-oxo-1-pyridyl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafluorborat (in Gegenwart oder Abwesenheit von 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en(1,5-5)) oder O-(3,4-Dihydro-4-oxo-1,2,3-benzotriazolin-3-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafluorborat. Schließlich können Phosphorsäureanhydride der Carbonsäuren der Formel VI in situ hergestellt werden durch die Umset zung eines Alkylphosphorsäureamids, wie Hexamethylphosphorsäuretriamid, in Gegenwart eines Sulfonsäureanhydrids, wie 4-Toluolsulfonsäureanhydrid, mit einem Salz, wie Tetrafluorborat, beispielsweise Natriumtetrafluorborat oder mit einem anderem Derivat von Hexamethylphosphorsäuretriamid, wie Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)phosphoniumhexafluorid, vorzugsweise in Gegenwart eines die Razemisierung verringernden Zusatzes, wie N-Hydroxybenzotriazol.
  • Die Aminogruppe der Verbindungen der Formel V, die an der Reaktion teilnimmt, weist vorzugsweise ein reaktives Wasserstoffatom auf, speziell wenn die Carboxy-, Sulfonyl- oder Phosphorylgruppe, die hiermit reagiert, in reaktiver Form vorkommt, wobei sie jedoch selbst derivatisiert sein kann, beispielsweise durch die Umsetzung mit einem Phosphit, wie Diethylchlorphosphit, 1,2-Phenylenchlorphosphit, Ethyldichlorphosphit, Ethylenchlorphosphit oder Tetraethylpyrophosphit. Ein Derivat einer solchen Verbindung mit einer Aminogruppe ist beispielsweise auch ein Carbaminsäurehalogenid oder ein Isocyanat, wobei die Aminogruppe, die an der Reaktion teilnimmt, jeweils durch Halogencarbonyl, beispielsweise Chlorcarbonyl substituiert sein kann, oder in Form einer Isocyanatgruppe modifiziert sein kann.
  • Die Kondensation unter Bildung einer Amidbindung kann auf eine an sich bekannte Weise ausgeführt werden, wie sie beispielsweise in Standardwerken beschrieben ist, wie Houben-Weyl, "Methoden der organischen Chemie", 4. Ausgabe, Band 15/II (1974), Band XI (1955), Band E11 (1985), Georg Thieme Verlag Stuttgart, "The Peptides" (E. Gross und J. Meienhofer, Herausgeber), Band 1 und 2, Academic Press, London und New York, 1979/1980 oder M. Bodansky "Principles of Peptide Synthesis", Springer-Verlag, Berlin 1984.
  • Die Kondensation einer freien Carbonsäure mit dem geeigneten Amin kann vorzugsweise ausgeführt werden in Gegenwart von einem der herkömmlichen Kondensationsmittel oder unter Verwendung von Carbonsäureanhydriden oder Carbonsäurehalogeniden, wie Chloriden oder aktivierten Carbonsäureestern, wie p-Nitrophenylestern. Herkömmliche Kondensationsmittel sind beispielsweise Carbodiimide, wie Diethyl-, Dipropyl- oder Dicyclohexylcarbodiimid oder speziell N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid, auch geeignete Carbonylverbindungen, beispielsweise Carbonylimidazol, 1,2-Oxazoliumverbindungen, beispielsweise 2-Ethyl-5-phenyl-1,2-oxazolium-3'-sulfonat und 2-tert-Butyl-5-methylisoxazoliumperchlorat oder eine geeignete Acylaminoverbindung, beispielsweise 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin, N,N,N',N'-Tetraalkyluroniumverbindungen, wie O-benzotriazol-1-yl-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorphosphat oder speziell O-(1,2-Dihydro-2-oxo-1-pyridyl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafluorborat (in Gegenwart oder Abwesenheit von 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en-(1,5-5)), auch aktivierte Phosphorsäurederivate, beispielsweise Diphenylphosphorylazid, Diethylphosphorylcyanid, Phenyl-N-phenylphosphoramidochloridat, Bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphinsäurechlorid oder 1-Benzotriazolyloxytris(dimethylamino)phosphoniumhexafluorphosphat.
  • Falls gewünscht wird eine organische Base, vorzugsweise ein tertiäres Amin, beispielsweise ein Triniederalkylamin, speziell Ethyldiisopropylamin oder spezieller Triethylamin und/oder eine heterocyclische Base zugegeben, beispielsweise 4-Dimethylaminopyridin oder vorzugsweise N-Methylmorpholin oder Pyridin.
  • Die Kondensation der aktivierten Ester, reaktiven Anhydride oder reaktiven cyclischen Amide mit den entsprechenden Aminen wird herkömmlich in Gegenwart einer organischen Base, beispielsweise einfachen Triniederalkylaminen, beispielsweise Triethylamin oder Tributylamin oder einer der oben er wähnten organischen Basen ausgeführt. Falls gewünscht wird zusätzlich ein Kondensationsmittel verwendet, wie dies beispielsweise für die freien Carbonsäuren beschrieben ist.
  • Die Kondensation von Säureanhydriden mit Aminen kann beispielsweise in Gegenwart von anorganischen Carbonaten, beispielsweise Ammonium- oder Alkalimetallcarbonaten oder Hydrogencarbonaten, wie Natrium- oder Kaliumcarbonat oder -hydrogencarbonat (falls erwünscht zusammen mit einem Sulfat) bewirkt werden.
  • Carbonsäurechloride, beispielsweise die Chlorcarbonsäurederivate, die von der Säure der Formel VI abgeleitet sind, werden mit den entsprechenden Aminen vorzugsweise in Gegenwart eines organischen Amins kondensiert, beispielsweise den oben erwähnten Triniederalkylaminen oder heterocyclischen Basen, geeignetenfalls in Gegenwart eines Hydrogensulfats oder eines Hydroxids, vorzugsweise einem Alkalimetallhydroxid, wie Natriumhydroxid.
  • Die Kondensation wird vorzugsweise ausgeführt in einem inerten, aprotischen, vorzugsweise wasserfreien Lösemittel oder Lösemittelgemisch, beispielsweise in einem Carbonsäureamid, beispielsweise Formamid oder Dimethylformamid, einem halogenierten Kohlenwasserstoff, beispielsweise Methylenchlorid, Tetrachlorkohlenstoff oder Chlorbenzol, einem Keton, beispielsweise Aceton, einem cyclischen Ether, beispielsweise Tetrahydrofuran oder Dioxan, einem Ester, beispielsweise Ethylacetat oder einem Nitril, beispielsweise Acetonitril oder einem Gemisch hiervon, bei verringerter oder erhöhter Temperatur, wie dies geeignet ist, beispielsweise in einem Temperaturbereich von etwa –40°C bis etwa +100°C, vorzugsweise von etwa –10°C bis etwa +70°C und wenn Arylsulfonylester verwendet werden, auch bei etwa +100°C bis +200°C, speziell bei Temperaturen von 10°C bis 30°C und erforderlichenfalls unter einer inerten Gasatmosphäre, beispielsweise einer Stickstoff- oder Argonatmosphäre.
  • Es können wässrige, beispielsweise alkoholische Lösemittel, wie Ethanol oder aromatische Lösemittel, beispielsweise Benzol oder Toluol verwendet werden. Wenn Alkalimetallhydroxide als Basen vorhanden sind, kann auch Aceton zugegeben werden, wenn dies geeignet ist.
  • Die Kondensation kann auch gemäß der als Festphasensynthese bekannten Technik ausgeführt werden, die von R. Merrifield stammt und beispielsweise in Angew. Chem. 97, 801–812 (1985), Naturwissenschaften 71, 252–258 (1984) oder R. A. Houghten Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 5131–5135 (1985) beschrieben ist.
  • Die Abspaltung der Schutzgruppen kann gemäß den unten und in der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren ausgeführt werden.
  • Verfahren c) (Bildung einer Amidbindung)
  • In Ausgangsmaterialien der Formeln VII und VIII werden funktionelle Gruppen mit Ausnahme der Gruppen, die an der Reaktion teilnehmen oder die unter den Reaktionsbedingungen nicht reagieren, unabhängig voneinander durch eine der unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt.
  • Das Verfahren ist vollkommen analog zu dem unter Verfahren b) angegebenen, aber die Verbindungen der Formel VII werden anstelle der der Formel V verwendet und die Verbindungen der Formel VIII werden anstelle der der Formel VI verwendet.
  • Die Abspaltung der Schutzgruppen kann gemäß den später unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren ausgeführt werden.
  • Verfahren d) (Bildung einer Amidbindung)
  • In den Ausgangsmaterialien der Formel IX und in der Säure der Formel VIIIa, die zur Einführung der identischen Acylreste geeignet ist oder in reaktiven Derivaten hiervon werden funktionelle Gruppen, die nicht an der Reaktion teilnehmen oder unter den Reaktionsbedingungen nicht reagieren unabhängig voneinander durch eine der unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt.
  • Bevorzugte Ausgangsverbindungen der Formel IX, die durch Schutzgruppen geschützt werden können, sind die der Formel II, die später im Abschnitt beschrieben sind, der sich auf die Ausgangsverbindungen bezieht.
  • Das Verfahren ist vollkommen zu dem analog, das unter Verfahren b) angegeben ist, aber die Verbindungen der Formel IX werden anstelle der der Formel V verwendet und die Verbindungen der Formel VIIIa werden anstelle der der Formel VI verwendet.
  • Die Abspaltung der Schutzgruppen kann gemäß den später unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren ausgeführt werden.
  • Verfahren e) (Alkylierung eines sekundären Stickstoffatoms)
  • In den Ausgangsmaterialien der Formel I' und der Formel X oder in reaktiven Derivaten hiervon werden funktionelle Gruppen, die nicht an der Reaktion teilnehmen oder unter den Reaktionsbedingungen nicht reagieren unabhängig voneinander durch eine der unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt.
  • Eine Abgangsgruppe X ist speziell eine nukleofugale Abgangsgruppe, die ausgewählt ist aus Hydroxy, das durch eine starke anorganische oder organische Säure verestert ist, wie ein Hydroxy, das durch eine Mineralsäure verestert ist, beispielsweise einer Halogenwasserstoffsäure, wie Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff- oder Iodwasserstoffsäure, Hydroxy, das durch eine starke organische Sulfonsäure verestert ist, wie eine Niederalkansulfonsäure, die unsubstituiert oder substituiert ist, beispielsweise durch Halogen, wie Fluor oder durch eine aromatische Sulfonsäure, beispielsweise Benzolsulfonsäure, die unsubstituiert oder substituiert ist durch Niederalkyl, wie Methyl, Halogen, wie Brom und/oder durch Nitro, beispielsweise eine Methansulfonsäure, p-Bromtoluolsulfonsäure oder p-Toluolsulfonsäure und Hydroxy, das durch Stickstoffwasserstoffsäure verestert ist.
  • Die Substitution kann unter den Bedingungen einer nukleophilen Substitution erster oder zweiter Ordnung stattfinden.
  • Beispielsweise kann eine der Verbindungen der Formel X, worin X für eine Abgangsgruppe mit einer hohen Polarisierbarkeit der Elektronenhülle steht, beispielsweise Iod, mit einem polaren aprotischen Lösemittel, beispielsweise Aceton, Acetonitril, Nitromethan, Dimethylsulfoxid oder Dimethylformamid verwendet werden. Die Reaktion kann auch in Wasser, wahlweise im Gemisch mit einem organischen Lösemittel als Löslichkeitsvermittler ausgeführt werden, beispielsweise Ethanol, Tetrahydrofuran oder Aceton. Die Substitutionsreaktion wird geeigneterweise bei verringerter oder erhöhter Temperatur, beispielsweise in einem Temperaturbereich von etwa –40°C bis etwa 100°C, vorzugsweise von etwa –10°C bis etwa 50°C und erforderlichenfalls unter Inertgas, beispielsweise unter einer Stickstoff- oder Argonatmosphäre ausgeführt.
  • Das Verfahren e) ist nicht in allen Fällen erfolgreich, ist oft nur unter speziellen Bedingungen möglich und ist daher ein weniger bevorzugtes Verfahren.
  • Die Abspaltung der Schutzgruppen kann gemäß den später unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren ausgeführt werden.
  • Verfahren f) (Reduktive Alkylierung einer sekundären Aminogruppe)
  • In den Ausgangsmaterialien der Formel I' und Formel X* oder in reaktiven Derivaten hiervon werden funktionelle Gruppen, die nicht an der Reaktion teilnehmen oder unter den Reaktionsbedingungen nicht reagieren unabhängig voneinander durch eine der unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt.
  • Reaktive Derivate der Verbindungen der Formel I sind beispielsweise entsprechende Bisulfitaddukte oder speziell Semiacteale oder Ketale der Verbindungen der Formel X* mit Alkoholen, beispielsweise Niederalkanolen, oder Thioacetale der Verbindungen der Formel X* mit Mercaptanen, beispielsweise Niederalkansulfiden. Die freien Aldehyde der Formel X* sind bevorzugt.
  • Die reduktive Alkylierung wird vorzugsweise ausgeführt unter Hydrierung in Gegenwart eines Katalysators, speziell eines Edelmetallkatalysators, wie Platin oder speziell Palladium, das vorzugsweise an ein Trägermaterial gebunden ist, wie Kohlenstoff, oder ein Schwermetallkatalysator, wie Raney Nickel bei Normaldruck oder bei Drücken von 0,1 bis 10 Megapaskal (MPa) oder unter Reduktion mit komplexen Hydriden, wie Borhydriden, speziell Alkalimetallcyanoborhydriden, beispielsweise Natriumcyanoborhydrid in Gegenwart einer geeigneten Säure, vorzugsweise relativ schwachen Säuren, wie Niederalkancarbonsäuren oder speziell einer Sulfonsäure, wie p-Toluolsulfonsäure in herkömmlichen Lösemitteln, beispielsweise Alkoholen, wie Methanol oder Ethanol oder Ether, beispielsweise cyclische Ether, wie Tetrahydrofuran in Gegenwart oder Abwesenheit von Wasser.
  • Die Abspaltung der Schutzgruppen kann gemäß den später unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren ausgeführt werden.
  • Entfernung von Schutzgruppen
  • Die Entfernung von Schutzgruppen, die keine Bestandteile des gewünschten Endprodukts der Formel I sind, beispielsweise Carboxy-, Amino- und Hydroxyschutzgruppen wird auf eine an sich bekannte Weise, beispielsweise durch Solvolyse, speziell Hydrolyse, Alkoholyse oder Acidolyse oder durch Reduktion, speziell Hydrogenolyse oder chemische Reduktion und auch Photolyse, schrittweise oder gleichzeitig, wie dies geeignet ist, ausgeführt wobei es möglich ist, enzymatische Verfahren zu verwenden. Die Entfernung der Schutzgruppen ist beispielsweise in Standardwerken beschrieben, die im Abschnitt erwähnt sind, der die Schutzgruppen betrifft.
  • Beispielsweise kann geschütztes Carboxy, beispielsweise tert-Niederalkoxycarbonyl, Niederalkoxycarbonyl, das an der Position 2 durch eine trisubstituierte Silylgruppe oder an der Position 1 durch Niederalkoxy oder durch Niederalkylthio substituiert ist oder unsubstituiertes oder substituiertes Diphenylmethoxycarbonyl durch die Behandlung mit einer geeigneten Säure wie Ameisensäure oder Trifluoressigsäure, geeignetenfalls unter Zugabe einer nukleophilen Verbindung, wie Phenol oder Anisol in das freie Carboxy umgewandelt werden. Carboxy kann aus Niederalkoxycarbonyl auch durch Basen freigesetzt werden, wie Hydroxiden, beispielsweise Alkalimetallhydroxiden, wie NaOH oder KOH. Unsubstituiertes oder substituiertes Benzyloxycarbonyl kann beispielsweise durch Hydrogenolyse, das heißt durch die Behandlung mit Wasserstoff in Gegenwart eines metallischen Hydrierungskatalysators, wie einem Palladiumkatalysator freigesetzt werden. Zusätzlich kann geeignet substituiertes Benzyloxycarbonyl, wie 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, ebenfalls durch Reduktion in das freie Carboxy umgewandelt werden, beispielsweise durch die Behandlung mit einem Alkalimetalldithionit, wie Natriumdithionit, oder mit einem reduzierenden Metall, beispielsweise Zink oder einem reduzierenden Metallsalz, wie einem Chrom-(II)-Salz, beispielsweise Chrom-(II)-chlorid, gewöhnlich in Gegenwart eines Wasserstoffdonors, der zusammen mit dem Metall zur Bildung von naszierendem Wasserstoff fähig ist, wie eine Säure, insbesondere eine geeignete Carbonsäure, wie eine niedere Alkancarbonsäure, die unsubstituiert oder substituiert ist, beispielsweise durch Hydroxy, Niederalkansäure, beispielsweise Essigsäure, Ameisensäure, Glykolsäure, Diphenylglykolsäure, Milchsäure, Mandelsäure, 4-Chlormandelsäure oder Weinsäure, oder in Gegenwart eines Alkohols oder Thiols, wobei vorzugsweise Wasser zugegeben wird. Durch die Behandlung mit einem reduzierenden Metall oder Metallsalz, wie oben beschrieben, kann 2-Halogenniederalkoxycarbonyl (geeignetenfalls nach der Umwandlung einer 2-Bromniederalkoxycarbonylgruppe in eine entsprechende 2-Iodniederalkoxycarbonylgruppe) oder Aroylmethoxycarbonyl in freies Carboxy umgewandelt werden. Aroylmethoxycarbonyl kann auch durch die Behandlung mit einem nukleophilen, vorzugsweise salzbildenden Reagenz, wie Natriumthiophenolat oder Natriumiodid gespalten werden. 2-(Tri-substituiertes Silyl)niederalkoxycarbonyl, wie 2-Triniederalkylsilylniederalkoxycarbonyl kann auch in das freie Carboxy umgewandelt werden durch die Behandlung mit einem Salz der Fluorwasserstoffsäure unter Bildung des Fluoridanions, wie einem Alkalimetallfluorid, beispielsweise Natrium- oder Kaliumfluorid, geeignetenfalls in Gegenwart eines makrocyclischen Polyethers ("Kronenether"), oder mit einem Fluorid einer organischen quarternären Base, wie Tetra-niederalkylammoniumfluorid oder Triniederalkylarylniederalkylammoniumfluorid, beispielsweise Tetraethylammoniumfluorid oder Tetrabutylammoniumfluorid in Gegenwart eines aprotischen polaren Lösemittels, wie Dimethylsulfoxid oder N,N-Dimethylacetamid. Carboxy, das in Form eines organischen Silyloxycarbonyls geschützt ist, wie Triniederalkylsilyloxycarbonyl, beispielsweise Trimethylsilyloxycarbonyl, kann auf herkömmliche Weise durch Solvolyse befreit werden, beispielsweise durch die Behandlung mit Wasser, einem Alkohol oder einer Säure oder ferner einem Fluorid, wie dies oben beschrieben ist. Verestertes Carboxy kann auch enzymatisch gespalten werden, beispielsweise durch Esterasen oder geeignete Peptidasen, beispielsweise unter Verwendung von Trypsin.
  • Eine geschützte Aminogruppe wird auf eine an sich bekannte Weise in Abhängigkeit von der Art der Schutzgruppen durch verschiedene Verfahren freigesetzt, aber vorzugsweise durch Solvolyse oder Reduktion. Niederalkoxycarbonylamino, wie tert-Butoxycarbonylamino, kann gespalten werden in Gegenwart von Säuren, beispielsweise Mineralsäuren, beispielsweise Halogenwasserstoff, wie Chlorwasserstoff oder Bromwasserstoff oder Schwefel- oder Phosphorsäure, aber vorzugsweise Chlorwasserstoff oder in Gegenwart von starken organischen Säuren, wie Trihalogenessigsäure, beispielsweise Trifluoressigsäure oder Ameisensäure in Gegenwart oder Abwesenheit von polaren Lösemitteln, wie Wasser oder Ethern, vorzugsweise cyclischen Ethern, wie Dioxan oder Nitrilen, wie Acetonitril, 2-Halogenniederalkoxycarbonylamino (geeignetenfalls nach der Umwandlung einer 2-Bromniederalkoxycarbonylaminogruppe in eine 2-Iodniederalkoxycarbonylaminogruppe) oder direkt gelöst in einer flüssigen organischen carbonsäure, wie Ameisensäure, Aroylmethoxycarbonylamino oder 4-Nitrobenzyloxycarbonylamino kann beispielsweise durch die Behandlung mit einem geeigneten Reduktionsmittel gespalten werden, wie Zink in Gegenwart einer geeigneten Carbonsäure, wie wässriger Essigsäure. Aroylmethoxycarbonylamino kann auch durch die Behandlung mit einem nukleophilen vorzugsweise salzbildenden Reagenz gespalten werden, wie Natriumthiophenolat, und 4-Nitrobenzyloxycarbonylamino ebenfalls durch die Behandlung mit einem Alkalimetalldithionit, beispielsweise Natriumdithionit. Unsubstituiertes oder substituiertes Diphenylmethoxycarbonylamino, tert-Niederalkoxycarbonylamino oder 2-(trisubstituiertes Silyl)niederalkoxycarbonylamino, wie 2-Triniederalkylsilylniederalkoxycarbonylamino kann durch die Behandlung mit einer geeigneten Säure gespalten werden, beispielsweise Ameisensäure oder Trifluoressigsäure, unsubstituiertes oder substituiertes Benzyloxycarbonylamino kann beispielsweise gespalten werden durch Hydrogenolyse, das heißt durch die Behandlung mit Wasserstoff in Gegenwart eines geeigneten Hydrierungskatalysators, wie einem Platin- oder Palladiumkatalysator, unsubstituiertes oder substituiertes Triarylmethylamino oder Formylamino kann beispielsweise gespalten werden durch die Behandlung mit einer Säure, wie einer Mineralsäure, beispielsweise Chlorwasserstoffsäure, oder einer organischen Säure, beispielsweise Ameisen-, Essig- oder Trifluoressigsäure, geeignetenfalls in Gegenwart von Wasser, und eine in Form von Silylamino geschützte Aminogruppe kann beispielsweise durch Hydrolyse oder Alkoholyse freigesetzt werden. Eine Aminogruppe, die durch 2-Halogenacetyl geschützt ist, beispielsweise 2-Chloracetyl, kann beispielsweise durch die Behandlung mit Thioharnstoff in Gegenwart einer Base oder mit einem Thiolatsalz, wie einem Alkalimetallthiolat von Thioharnstoff und einer anschließenden Solvolyse, wie Alkoholyse oder Hydrolyse des entstehenden Substitutionsprodukts freigesetzt werden. Amino wird aus Trifluoracetylamino freigesetzt beispielsweise durch Hydrogenolyse mit Basen, wie Alkalimetallhydroxiden oder -carbonaten, wie Na2CO3 oder K2CO3 in polaren Lösemitteln, beispielsweise Alkoholen, wie Methanol, in Gegenwart oder Abwesenheit von Wasser bei Temperaturen von 0°C bis 100°C, speziell bei Rückflusstemperatur. Eine Aminogruppe, die durch 2-(trisubstituiertes Silyl)niederalkoxycarbonyl geschützt ist, wie 2-Triniederalkylsilylniederalkoxycarbonyl, kann auch durch die Behandlung mit einem Salz der Fluorwasserstoffsäure unter Bildung von Fluoridanionen in die freie Aminogruppe umgewandelt werden, wie dies oben in Zusammenhang mit der Freisetzung einer entsprechend geschützten Carboxygruppe beschrieben ist. Eine 1-Arylniederalkylmethylschutzgruppe, worin der Niederalkylrest vorzugsweise an der Position 1 verzweigt ist, wie 1-Methyl-1-phenylethyl, kann speziell in Gegenwart einer starken Säure entfernt werden, wie Schwefelsäure (beispielsweise 80% Schwefelsäure) in wässriger Lösung bei bevorzugten Temperaturen von –10°C bis 30°C, speziell bei etwa 0°C. Ähnlich kann Silyl, wie Trimethylsilyl, das direkt an ein Heteroatom gebunden ist, wie Stickstoff, unter Verwendung von Fluoridionen entfernt werden.
  • Amino, das in Form der Azidgruppe geschützt ist, kann beispielsweise durch Reduktion in das freie Amino umgewandelt werden, beispielsweise durch katalytische Hydrierung mit Wasserstoff in Gegenwart eines Hydrierungskatalysators, wie Platinoxid, Palladium oder Raney Nickel, durch Reduktion mittels Mercaptoverbindungen, wie Dithiothreit oder Mercaptoethanol oder durch die Behandlung mit Zink in Gegenwart einer Säure, wie Essigsäure. Die katalytische Hydrierung wird vorzugsweise in einem inerten Lösemittel durchgeführt, wie einem halogenierten Kohlenwasserstoff, beispielsweise Methylenchlorid oder in Wasser oder einem Gemisch aus Wasser und einem organischen Lösemittel, wie einem Alkohol oder Dioxan, bei etwa 20°C bis 25°C oder alternativ dazu unter Kühlen oder Erhitzen.
  • Eine Hydroxygruppe, die geschützt ist durch eine geeignete Acylgruppe, eine Triniederalkylsilylgruppe oder durch unsubstituiertes oder substituiertes 1-Phenylniederalkyl kann analog zur entsprechend geschützten Aminogruppe freigesetzt werden. Eine Hydroxygruppe, die durch 2,2-Dichloracetyl geschützt ist, kann beispielsweise durch basische Hydrolyse freigesetzt werden und eine durch tert-Niederalkyl, oder durch einen 2-Oxa- oder 2-Thia-aliphatischen oder -cycloaliphatischen Kohlenwasserstoffrest veresterte Hydroxygruppe, kann durch Acidolyse freigesetzt werden, beispielsweise durch die Behandlung mit einer Mineralsäure oder einer starken Carbonsäure, beispielsweise Trifluoressigsäure. Benachbarte Hydroxy- und Aminogruppen, die zusammen durch eine bivalente Schutzgruppe geschützt sind, beispielsweise durch eine Methylengruppe, die mono- oder disubstituiert ist durch Niederalkyl, wie durch Niederalkyliden, beispielsweise Isopropyliden, Cycloalkyliden, beispielsweise Cyclohexyliden, oder Benzyliden, können durch eine Säuresolvolyse freigesetzt werden, speziell in Gegenwart einer Mineralsäure oder einer starken organischen Säure. Eine Triniederalkylsilylgruppe wird ähnlich durch Acidolyse entfernt, beispielsweise durch eine Mineralsäure, vorzugsweise Fluorwasserstoffsäure oder eine starke Carbonsäure. 2-Halogenniederalkoxycarbonyl wird mittels der oben erwähnten Reduktionsmittel, beispielsweise einem reduzierenden Metall, wie Zink, reduzierenden Metallsalzen, wie Chrom-(II)-salzen oder unter Verwendung von Schwefelverbindungen, beispielsweise Natriumdithionit oder speziell Natriumsulfid und Schwefelkohlenstoff entfernt.
  • Wenn mehrere geschützte funktionelle Gruppen vorkommen, können erforderlichenfalls die Schutzgruppen so ausgewählt werden, dass mehr als eine solche Gruppe gleichzeitig entfernt werden kann, beispielsweise durch Entfernung von Trifluoracetyl als Aminoschutzgruppe durch Basenkatalyse, beispielsweise mit K2CO3 in Methanol/Wasser und der späteren Entfernung von tert-Butoxycarbonyl als Aminoschutzgruppe, beispielsweise mit HCl in Dioxan oder Acetonitril (in Gegenwart oder Abwesenheit von Wasser) oder mit Ameisensäure oder selektiver Entfernung von 1-Methyl-1-phenylethyl, wie eine Aminoschutzgruppe mittels Schwefelsäure oder im allgemeinen durch Acidolyse, wie durch Behandlung mit Trifluoressigsäure oder mit Wasserstoff und einem Hydrierungskatalysator, wie Palladium-auf-Kohle Katalysator. Im Gegensatz dazu können die Gruppen auch so ausgewählt werden, dass sie nicht alle gleichzeitig entfernt werden, sondern stattdessen in einer gewünschten Sequenz, wobei die entsprechenden Zwischenprodukte erhalten werden.
  • Zusätzliche Verfahrensschritte
  • In den zusätzlichen Verfahrensschritten, die optional sind, können funktionelle Gruppen der Ausgangsverbindungen, die nicht an der Reaktion teilnehmen, ungeschützt sein oder in geschützter Form vorliegen, beispielsweise können sie durch eine oder mehrere der oben unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt werden. Die Schutzgruppen können in den Endprodukten verbleiben oder einige oder alle können gemäß einem der unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" erwähnten Verfahren entfernt werden.
  • Salze der Verbindungen der Formel I mit einer salzbildenden Gruppe können auf eine an sich bekannte Weise hergestellt werden. Beispielsweise können Säureadditionssalze der Verbindungen der Formel I erhalten werden, wie durch die Behandlung mit einer Säure oder einem geeigneten Anionenaustauscherreagenz.
  • Salze können in die freien Verbindungen auf herkömmliche Weise umgewandelt werden, beispielsweise durch die Behandlung mit einem geeigneten basischen Mittel.
  • Stereoisomerengemische, beispielsweise Diastereomerengemische, können in die entsprechenden Isomere auf eine an sich bekannte Weise durch geeignete Trennverfahren getrennt werden. Beispielsweise können Diastereomerengemische in die einzelnen Diastereoisomere durch fraktionierte Kristallisation, Chromatographie, Lösemittelverteilung und dergleichen getrennt werden. Eine solche Tren nung kann auf jeder Stufe eines der Ausgangsmaterialien oder mit den Verbindungen der Formel I selbst ausgeführt werden.
  • In einer Verbindung der Formel I, worin R2 für Phenyl steht, kann der Phenylrest hydriert werden beispielsweise durch katalytische Hydrierung, speziell in Gegenwart von Schwermetalloxiden, wie gemischten Rhodium/Platinoxiden, beispielsweise mit dem Nishimurakatalysator, vorzugsweise in einem polaren Lösemittel, wie einem Alkohol, beispielsweise Methanol oder Ethanol bei Temperaturen von 0°C bis 80°C, speziell 10°C bis 40°C und bei einem bevorzugten Wasserstoffdruck von 1 bis 10 atm, vorzugsweise etwa bei Normaldruck.
  • In einer Verbindung der Formel I, worin R4 für 4-Tetrazol-5-ylphenyl steht, kann eine Niederalkylgruppe, beispielsweise Methyl, durch die Umsetzung mit einem Niederalkylhalogenid oder einem Niederalkylarylsulfonat, wie einem Niederalkyliodid oder einem Niederalkyltoluolsulfonat, beispielsweise Methyliodid oder tert-Butyliodid, vorzugsweise in Gegenwart von Cäsiumcarbonat in einem Gemisch eines cyclischen Ethers, wie Dioxan und einem N,N-Diniederalkylniederalkancarbonsäureamid, wie Dimethylformamid, bei bevorzugten Temperaturen von –10°C bis 40°C, speziell von 0°C bis etwa 30°C umgewandelt werden.
  • In einer Verbindung der Formel I, worin R4 für 4-(1- oder 2-Phenylniederalkyl, wie 1- oder 2-(1-Methyl-1-phenylethyl)tetrazol-5-yl)phenyl steht, kann der Phenylniederalkylrest (vorzugsweise 1-Methyl-1-phenylethyl) durch die Behandlung mit einer starken Mineralsäure, wie Schwefelsäure, in einer wässrigen Lösung, vorzugsweise bei Temperaturen von –20°C bis 30°C, beispielsweise bei 0°C entfernt werden.
  • Allgemeine Verfahrensbedingungen
  • Alle hierin beschriebenen Verfahrensschritte können unter bekannten Reaktionsbedingungen ausgeführt werden, aber vorzugsweise unter den spezifisch vorher erwähnten, in Abwesenheit oder gewöhnlich in Anwesenheit von Lösemitteln oder Verdünnungsmitteln, vorzugsweise denen, die gegenüber den verwendeten Reagenzien inert sind und zu deren Auflösung fähig sind, in Abwesenheit oder Anwesenheit von Katalysatoren, Kondensationsmitteln oder Neutralisierungsmitteln, beispielsweise Ionenaustauschern, typischerweise Kationenaustauschern, beispielsweise in der H+ Form in Abhängigkeit des Reaktionstyps und oder der Reaktanden bei einer verringerten, normalen oder erhöhten Temperatur, beispielsweise im Bereich von etwa –100°C bis etwa 190°C, vorzugsweise bei etwa –80°C bis etwa 150°C, beispielsweise bei –80°C bis 60°C, bei Raumtemperatur, bei –20°C bis 40°C oder beim Siedepunkt des verwendeten Lösemittels, unter atmosphärischem Druck oder in einem geschlossenen Gefäß, erforderlichenfalls unter Druck und/oder in einer inerten Atmosphäre, beispielsweise unter einer Argon- oder Stickstoffatmosphäre.
  • Salze können in allen Ausgangsverbindungen und Zwischenprodukten vorkommen, falls salzbildende Gruppen vorhanden sind. Salze können auch während der Umsetzung solcher Verbindungen vorkommen, mit der Maßgabe, dass sie die Reaktion nicht stören.
  • Bei allen Reaktionsstufen können Isomerengemische, die gebildet werden, in die einzelnen Isomere aufgetrennt werden, beispielsweise Diastereoisomere oder Enantiomere, oder in jede gewünschten Isomerengemische, beispielsweise Razemate oder Diastereoisomerengemische, beispielsweise analog zu den hierin unter "Zusätzliche Verfahrensschritte" beschriebenen Methoden.
  • In bestimmten Fällen, beispielsweise im Fall der Hydrierung, ist es möglich, stereoselektive Reaktionen zu erzielen, was beispielsweise eine einfachere Aufarbeitung von einzelnen Isomeren erlaubt.
  • Die Lösemittel, aus denen die ausgewählt werden können, die für jede einzelne Reaktion geeignet sind, sind unter anderem beispielsweise Wasser, Ester, wie Niederalkylniederalkanoate, beispielsweise Diethylacetat, Ether, wie aliphatische Ether, beispielsweise Diethylether oder cyclische Ether, beispielsweise Tetrahydrofuran, flüssige aromatische Kohlenwasserstoffe, wie Benzol oder Toluol, Alkohole, wie Methanol, Ethanol oder 1- oder 2-Propanol, Nitrile, wie Acetonitril, halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie Methylenchlorid, Säureamide, wie Dimethylformamid, Basen, wie heterocyclische Stickstoffbasen, beispielsweise Pyridin, Carbonsäureanhydride, wie Niederalkansäureanhydride, beispielsweise Essigsäureanhydrid, cyclische, lineare oder verzweigte Kohlenwasserstoffe, wie Cyclohexan, Hexan oder Isopentan oder Gemische dieser Lösemittel, beispielsweise wässrige Lösungen, falls nichts anderes in der Beschreibung der Verfahren angegeben ist. Solche Lösemittelgemische können bei der Aufarbeitung verwendet werden, beispielsweise durch Chromatographie oder Verteilung.
  • Die Erfindung betrifft auch die Formen des Verfahrens, worin man von einer Verbindung ausgeht, die an jeder Stufe des Verfahrens als Zwischenprodukt erhalten werden kann und die fehlenden Verfahrensschritte ausgeführt werden, oder den Prozess auf jeder Stufe abbricht oder eine Ausgangsverbindung unter den Reaktionsbedingungen gebildet wird oder in Form eines reaktiven Derivats oder Salzes verwendet wird, oder eine Verbindung bildet, die durch das erfindungsgemäße Verfahren unter den Verfahrensbedingungen hierin erhalten werden kann und diese Verbindung weiter in situ verarbeitet, wobei es bevorzugt ist, die Ausgangsmaterialien zu verwenden, die zu den hierin vorher als bevorzugt, besonders bevorzugt, insbesondere bevorzugt und/oder vor allem bevorzugt beschriebenen Verbindungen führen.
  • Die Herstellung der Verbindungen der Formel I wird vorzugsweise analog zu den in den Beispielen angegebenen Verfahren und Verfahrensschritten ausgeführt.
  • Die Verbindungen der Formel I, einschließlich ihrer Salze, können auch in Form von Hydraten erhalten werden oder ihre Kristalle können beispielsweise das zur Kristallisation verwendete Lösemittel enthalten.
  • Pharmazeutische Zusammensetzungen
  • sie Erfindung betrifft auch pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Verbindungen der Formel I und speziell der Formel Ia umfassen.
  • Die pharmakologisch annehmbaren Verbindungen der vorliegenden Erfindung können beispielsweise zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen verwendet werden, die eine wirksame Menge des Wirkstoffs zusammen oder im Gemisch mit einer signifikanten Menge an anorganischen oder organischen, festen oder flüssigen, pharmazeutisch annehmbaren Trägern umfassen.
  • Die Erfindung betrifft auch eine pharmazeutische Zusammensetzung, die zur Verabreichung an einen Warmblüter, speziell einen Menschen, zur Behandlung oder Prävention einer Erkrankung geeignet ist, die auf eine Hemmung einer retroviralen Protease anspricht, speziell einer retroviralen Aspartatprotease, wie HIV-1 oder HIV-2 gag Protease, beispielsweise einer retroviralen Erkrankung, wie AIDS oder der vorhergehenden Stadien, die eine Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon in einer Menge, die zur Hemmung der retroviralen Protease wirksam ist, zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
  • Die pharmazeutischen Zusammensetzungen gemäß der Erfindung sind Zusammensetzungen zur enteralen, wie nasalen, rektalen oder oralen oder parenteralen, wie intramuskulären oder intravenösen Verabreichung an Warmblüter (Menschen und Tiere), die eine wirksame Dosis des pharmakologischen Wirkstoffs alleine oder zusammen mit einer signifikanten Menge eines pharmazeutisch annehmbaren Trägers umfassen. Die Dosis des Wirkstoffs hängt von der Art des Warmblüters, dem Körpergewicht, dem Alter und dem individuellen Zustand, den individuellen pharmakokinetischen Daten, der zu behandelnden Erkrankung und dem Verabreichungsweg ab.
  • Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Behandlung von Erkrankungen, die durch Viren verursacht werden, speziell durch Retroviren, wie AIDS oder der vorhergehenden Stadien, worin eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon in einer Dosis verabreicht wird, die zur Behandlung dieser Erkrankung speziell bei einem Warmblüter wirksam ist, beispielsweise einem Menschen, der aufgrund der erwähnten Erkrankungen, speziell AIDS oder der vorhergehenden Stadien, einer solchen Behandlung bedarf. Die bevorzugte Dosis, die an Warmblüter verabreicht wird, beispielsweise Menschen mit etwa 70 kg Körpergewicht, beträgt etwa 3 mg bis etwa 3 g, vorzugsweise etwa 10 mg bis etwa 1,5 g, beispielsweise etwa 50 mg bis 1000 mg pro Person pro Tag, vorzugsweise aufgeteilt auf 1 bis 3 einzelnen Dosen, die beispielsweise dieselbe Größe haben können. Gewöhnlich erhalten Kinder die Hälfte der Dosis der Erwachsenen.
  • Die pharmazeutischen Zusammensetzungen umfassen etwa 1% bis etwa 95% des Wirkstoffs, vorzugsweise etwa 20% bis etwa 90% des Wirkstoffs. Pharmazeutische Zusammensetzungen gemäß der Erfindung können beispielsweise in Einheitsdosierungsform vorliegen, wie in Form von Ampullen, Gläschen, Zäpfchen, Dragees, Tabletten oder Kapseln.
  • Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung werden auf eine an sich bekannte Weise hergestellt, beispielsweise durch herkömmliche Löse-, Lyophilisier-, Misch-, Granulierungs- oder Konfektionierungsverfahren.
  • Lösungen des Wirkstoffs und auch Suspensionen und speziell isotonische, wässrige Lösungen oder Suspensionen werden vorzugsweise verwendet, wobei es möglich ist, beispielsweise im Fall von lyophilisierten Zusammensetzungen, die den Wirkstoff alleine oder zusammen mit einem Träger, beispielsweise Mannit enthalten, solche Lösungen oder Suspensionen vor der Verwendung herzustellen. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können sterilisiert werden und/oder enthalten Hilfsstoffe, beispielsweise Konservierungsmittel, Stabilisierungsmittel, Netzmittel und/oder Emulgiermittel, Löslichkeitsvermittler, Salze zur Regulierung des osmotischen Drucks und/oder Puffer oder Säuren, beispielsweise Citronensäure und sie werden auf eine an sich bekannte Weise hergestellt, beispielsweise durch herkömmliche Löse- oder Lyophilisierverfahren. Die erwähnten Lösungen oder Suspensionen können Viskositäts-erhöhende Substanzen enthalten, wie Natriumcarboxymethylcellulose, Carboxymethylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose (beispielsweise Cellulose HPM 603), Silicagel, Dextran, Polyvinylpyrrolidon oder Gelatine.
  • Suspensionen in Öl enthalten als Ölkomponente die pflanzlichen, synthetischen oder halbsynthetischen Öle, die herkömmlich für Injektionszwecke verwendet werden. Hier können insbesondere flüssige Fettsäureester erwähnt werden, die als Säurekomponente eine langkettige Fettsäure mit 8 bis 22, insbe sondere 12 bis 22 Kohlenstoffatomen enthalten, beispielsweise Laurinsäure, Tridecylsäure, Myristinsäure, Pentadecylsäure, Palmitinsäure, Margarinsäure, Stearinsäure, Arachidinsäure, Behensäure oder entsprechende ungesättigte Säuren, beispielsweise Ölsäure, Elaidinsäure, Eurinsäure, Brasidinsäure oder Linolensäure, erforderlichenfalls unter Zugabe von Antioxidantien, beispielsweise Vitamin E, β-Carotin oder 3,5-Di-tert-butyl-4-hydroxytoluol. Die Alkoholkomponente dieser Fettsäureester hat nicht mehr als 6 Kohlenstoffatome und ist ein mono- oder polyhydrischer, beispielsweise mono-, di- oder trihydrischer Alkohol, beispielsweise Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol oder Pentanol oder Isomere hiervon, aber insbesondere Glycol und Glycerin. Daher werden die folgenden Beispiele der Fettsäureester erwähnt: Ethyloleat, Isopropylmyristat, Isopropylpalmitat "Labrafil M 2375" (Polyoxyethylenglycerintrioleat von Gattefossé, Paris), "Miglyol 812" (Triglyceride von gesättigten Fettsäuren mit einer Kettenlänge von C8 bis C12 von Hüls AG, Deutschland) und insbesondere pflanzliche Öle, wie Baumwollsamenöl, Mandelöl, Olivenöl, Rizinusöl, Sojabohnenöl und insbesondere Erdnussöl und Sesamöl.
  • Die Injektionszusammensetzungen werden auf herkömmliche Weise unter sterilen Bedingungen hergestellt, wobei dasselbe auch für das Abfüllen der Zusammensetzungen in Ampullen oder Gläschen und das Verschließen der Gefäße zutrifft.
  • Pharmazeutische Zusammensetzungen für eine orale Verabreichung können durch die Kombination des Wirkstoffs mit festen Trägern erhalten werden, erforderlichenfalls durch Granulierung des entstehenden Gemisches und der Verarbeitung des Gemisches, falls erwünscht oder erforderlich, nach der Zugabe von geeigneten Hilfsstoffen, zu Tabletten, Drageekernen oder Kapseln. Es ist auch möglich, die Wirkstoffe in Kunststoffträger einzuarbeiten, die es erlauben, dass die Wirkstoffe in messbaren Mengen diffundieren oder freigesetzt werden.
  • Geeignete Träger sind insbesondere Füllstoffe, wie Zuckerarten, beispielsweise Lactose, Saccharose, Mannit oder Sorbit, Cellulosepräparationen und/oder Calciumphosphate, beispielsweise Tricalciumphosphat oder Calciumhydrogenphosphat und ferner Bindemittel, wie Stärkepasten, beispielsweise Mais-, Weizen-, Reis- oder Kartoffelstärke, Gelatine, Traganth, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose und/oder Polyvinylpyrrolidon und/oder falls gewünscht Zerfallshilfsmittel, wie die oben erwähnten Stärkearten und auch Carboxymethylstärke, quervernetztes Polyvinylpyrrolidon, Agar, Alginsäure oder ein Salz hiervon wie Natriumalginat. Hilfsstoffe sind insbesondere Fließregulatoren und Gleitmittel, beispielsweise Kieselsäure, Talkum, Stearinsäure oder Salze hiervon, wie Magnesiumstearat oder Calciumstearat und/oder Polyethylenglycol. Drageekerne werden mit geeigneten, wahlweise enterischen Ummantelungen ausgerüstet, die unter anderem konzentrierte Zuckerlösungen sein können, welche Gummi arabicum, Talkum, Polyvinylpyrrolidon, Polyethylenglycol und/oder Titandioxid enthalten oder Beschichtungslösungen in geeigneten organischen Lösemitteln oder zur Herstellung von enterischen Ummantelungen, Lösungen geeigneter Cellulosepräparationen, wie Ethylcellulosephthalat oder Hydroxypropylmethylcellulosephthalat.
  • Kapseln sind Hartgelatinekapseln und auch weiche, verschlossene Kapseln, die aus Gelatine und einem Weichmacher hergestellt sind, wie Glycerin oder Sorbit. Die Hartgelatinekapseln können den Wirkstoff in Form von Granula enthalten, beispielsweise mit Füllstoffen, wie Lactose, Bindemitteln, wie Stärkearten und/oder Gleitmitteln, wie Talkum oder Magnesiumstearat und falls gewünscht mit Stabilisatoren. In Kapseln ist der Wirkstoff vorzugsweise in geeigneten öligen Hilfsstoffen gelöst oder suspendiert, wie fetten Ölen, Paraffinöl oder flüssigen Polyethylenglycolen, wobei es auch möglich ist, Stabilisatoren und/oder antibakterielle Mittel zuzugeben. Öle, die erwähnt werden können, sind insbesondere flüssige Fettsäureester, die als Säurekomponente eine langkettige Fettsäure mit 8 bis 22, insbesondere 12 bis 22 Kohlenstoffatomen enthalten, beispielsweise Laurinsäure, Tridecylsäure, Myristinsäure, Pentadecylsäure, Palmitinsäure, Margarinsäure, Stearinsäure, Arachidinsäure, Behensäure oder entsprechende ungesättigte Säuren, beispielsweise Ölsäure, Elaidinsäure, Eurinsäure, Brasidinsäure oder Linolensäure, erforderlichenfalls unter Zugabe von Antioxidantien, beispielsweise Vitamin E, β-Carotin oder 3,5-Di-tert-butyl-4-hydroxytoluol. Die Alkoholkomponente dieser Fettsäureester hat nicht mehr als 6 Kohlenstoffatome und ist ein mono- oder polyhydrischer, beispielsweise mono-, di- oder trihydrischer Alkohol, beispielsweise Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol oder Pentanol oder Isomere hiervon, aber insbesondere Ethylen- oder Propylenglycol und Glycerin. Daher werden die folgenden Beispiele der Fettsäureester erwähnt: Ethyloleat, Isopropylmyristat, Isopropylpalmitat "Labrafil M 2375" (Polyoxyethylenglycerintrioleat von Gattefossé, Paris), "Miglyol 812" (Triglyceride von gesättigten Fettsäuren mit einer Kettenlänge von C8 bis C12 von Hüls AG, Deutschland), aber auch insbesondere pflanzliche Öle, wie Baumwollsamenöl, Mandelöl, Olivenöl, Rizinusöl, Erdnussöl, Sojabohnenöl und insbesondere Sesamöl. Paraffinöl ist auch möglich. Stabilisatoren, wie Emulgiermittel, Netzmittel oder oberflächenaktive Mittel, Bindemittel, wie Stärkepasten, unter Verwendung von beispielsweise Mais-, Weizen-, Reis- oder Kartoffelstärke, Gelatine, Traganth, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose oder Hydroxypropylcellulose (bevorzugt), Natriumcarboxymethylcellulose, Cyclodextrine und/oder Polyvinylpyrrolidon und/oder antibakterielle Mittel können auch zugegeben werden. Geeignete Emulgiermittel sind speziell Ölsäure, nicht-ionische oberflächenaktive Mittel vom Fettsäurepolyhydroxyalkoholestertyp, wie Sorbitanmonolaurat, -monooleat, -monostearat oder -monopalmitat, Sorbitantristearat oder -trioleat, Polyoxyethylenaddukte von Fettsäurepolyhydroxyalkoholestern, wie Polyoxyethylensorbitanmonolaurat, -monooleat, -monostearat, -monoplamitat, -tristearat oder -trioleat, Polyethylenglycolfettsäureester, wie Polyoxyethylstearat, Polyoxyethylenglycol-(300 oder 400)-stearat, Polyethylenglycol-2000-stearat, speziell Ethylenoxid/propylenoxidblockpolymer vom Pluronic® Typ (Wyandotte Chem Corp., Handelsname von BASF, Deutschland) oder vom Synperonic® Typ (ICI). Falls beispielsweise der Wirkstoff nicht in den erwähnten Ölen löslich ist, kommt er in Form einer Suspension vor, beispielsweise mit einer Partikelgröße von etwa 1 bis 100 μm. Solche Suspensionen können auch als solche verwendet werden, das heißt ohne Kapseln.
  • Farbstoffe oder Pigmente können zu den Tabletten- oder Drageebeschichtungen oder zu den Kapselhüllen zugegeben werden, beispielsweise zur Identifizierung oder um unterschiedliche Dosen des Wirkstoffs anzuzeigen.
  • Ausgangsmaterialien
  • Die vorliegende Erfindung betrifft auch neue Ausgangsmaterialien und/oder Zwischenprodukte und Verfahren zu ihrer Herstellung. Die verwendeten Ausgangsmaterialien und die ausgewählten Reaktionsbedingungen sind vorzugsweise die, welche zu den als bevorzugt beschriebenen Verbindungen führen.
  • Bei der Herstellung aller Ausgangsmaterialien können freie funktionelle Gruppen, die nicht an der in Frage kommenden Reaktion teilnehmen ungeschützt sein oder in geschützter Form vorliegen, beispielsweise können sie durch die oben unter Verfahren a) erwähnten Schutzgruppen geschützt sein. Diese Schutzgruppen können zur geeigneten Zeit durch die unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" angegebenen Reaktionen entfernt werden.
  • Die Ausgangsmaterialien von Verfahren a) sind bekannt und, falls sie neu sind, können sie gemäß an sich bekannter Verfahren hergestellt werden, beispielsweise können die Verbindungen der Formel III aus Hydrazin oder geeigneten Derivaten hiervon hergestellt werden und die Verbindungen der Formel IV können aus geeigneten Aminosäuren oder Analoga hiervon hergestellt werden, die beispielsweise eine der erwähnten R3 Seitenketten aufweisen.
  • Die Verbindungen der Formel III können beispielsweise erhalten werden aus Verbindungen der Formel H2N-NH-R7 (XI)die an sich bekannt sind oder aus Hydrazin durch die Einführung von Schutzgruppen hergestellt werden, wie sie unter Verfahren a) beschrieben sind und worin R7 für Wasserstoff oder eine Aminoschutzgruppe steht, wie dies oben unter Verfahren b) beschrieben ist, speziell tert-Niederalkoxycarbonyl, wie tert-Butoxycarbonyl, Arylniederalkoxycarbonyl, wie Benzyloxycarbonyl oder 9-Fluorenylmethoxycarbonyl oder eine der oben erwähnten Acylaminoschutzgruppen, speziell Trifluoracetyl, durch Alkylierung mit einer Verbindung der Formel X, wie dies oben unter Verfahren e) beschrieben ist, oder durch Umsetzung des Rests der Subformel -R4 (A)worin R4 wie definiert ist oder aus Verbindungen der Formel I durch die Umsetzung einer geeigneten Carbonylverbindung der Formel X* oder eines reaktiven Derivats hiervon, wie dies beides unter Verfahren f) definiert ist, mit der freien Aminogruppe der Verbindung der Formel XI oder eines acylierten Derivats hiervon und einer anschließenden Reduktion des entstehenden Hydrazons unter Bildung eines Hydrazinderivats der Formel
    Figure 00350001
    wobei die Reste in allen erwähnten Verbindungen wie oben definiert sind und die vorhandenen funktionellen Gruppen, die nicht an der Reaktion teilnehmen, erforderlichenfalls geschützt sind und Entfernung der Schutzgruppe R7 falls erforderlich und durch Kondensation unter den oben unter Verfahren b) erwähnten Bedingungen mit einer Säure der Formel VI oder einem Säurederivat hiervon, das unter Verfahren b) erwähnt wurde.
  • Die Carbonylverbindungen der Formel X* oder reaktive Derivate hiervon, die zur Einführung des Rests einer Subformel A geeignet sind und zur Herstellung von Verbindungen der Formel XII verwendet werden, wie dies oben unter Verfahren f) definiert ist, sind Aldehyde oder reaktive Derivate hiervon, wobei die reaktive Carbonylgruppe hiervon nach der Umsetzung mit den Verbindungen der Formel XI und der anschließenden Reduktion ein Bestandteil einer der oben erwähnten Reste der Subformel A ist.
  • Die Umsetzung der Carbonylverbindungen mit den Verbindungen der Formel XI unter Bildung der entsprechenden Hydrazone wird unter Bedingungen ausgeführt, die zur Umsetzung von Carbonylverbindungen mit Aminen verwendet werden, vorzugsweise in polaren organischen Lösemitteln, beispielsweise Ethern, wie Tetrahydrofuran oder Diethylether, Alkoholen, wie Methanol oder Ethanol, Carbonsäureami den, wie Dimethylformamid oder Estern, wie Ethylacetat oder in wässriger Lösung, vorzugsweise in Methanol und auch in Gegenwart oder Abwesenheit von Säurekatalysatoren, beispielsweise Carbonsäuren, wie Ameisensäure oder Essigsäure oder Sulfonsäuren, wie p-Toluolsulfonsäure bei Temperaturen von 0°C bis zur Rückflusstemperatur des Reaktionsgemisches, vorzugsweise bei Temperaturen von 20°C bis zur Rückflusstemperatur des Reaktionsgemisches.
  • Die Verbindungen der Formel
    Figure 00360001
    worin R4 und R7 wie für die Verbindungen der Formel XII definiert sind, werden erhalten.
  • Die Reduktion der entstehenden Hydrazone der Formel XII* wird vorzugsweise durch Hydrierung in Gegenwart eines geeigneten Katalysators oder mit komplexen Hydriden in Gegenwart von Säuren ausgeführt. Als Katalysatoren zur Hydrierung werden Metalle verwendet, wie Nickel, Eisen, Cobalt oder Ruthenium oder Edelmetalle oder Oxide hiervon, wie Palladium oder Rhodium oder Oxide hiervon, die wahlweise auf einen geeigneten Träger aufgebracht werden, wie Bariumsulfat, Aluminiumoxid oder Kohlenstoff (Aktivkohle) oder in Form von Skelettkatalysatoren, wie Raney Nickel. Lösemittel, die herkömmlich für die katalytische Hydrierung verwendet werden, sind beispielsweise Wasser, Alkohole, wie Methanol oder Ethanol, Ester, wie Ethylacetat, Ether, wie Dioxan, chlorierte Kohlenwasserstoffe, wie Dichlormethan, Carbonsäureamide, wie Dimethylformamid oder Carbonsäuren, wie Eisessig oder Gemische dieser Lösemittel. Die Hydrierung wird vorzugsweise bei Temperaturen von 10°C bis 250°C, speziell von Raumtemperatur bis 100°C und vorzugsweise bei Wasserstoffdrücken von 1 bis 200 bar, speziell von 1 bis 10 bar in einem herkömmlichen Gerät ausgeführt. Für die Reduktion mit komplexen Hydriden, speziell Borhydriden, wie Alkalimetallcyanoborhydriden, beispielsweise Natriumcyanoborhydrid, ist es bevorzugt, schwache Säuren zuzugeben, wie Sulfonsäuren, beispielsweise p-Toluolsulfonsäure oder Carbonsäuren, wie Essigsäure, vorzugsweise in Alkoholen, wie Methanol oder Ethanol oder Gemischen hiervon mit Wasser (siehe beispielsweise Tetrahedron 49, 8605–8628 (1993)).
  • Es ist auch für Verbindungen der Formel XI möglich, durch die direkte Reduktion mit den Verbindungen der Formel X* oder reaktiven Derivaten hiervon, wie dies unter Verfahren f) definiert ist, unter analogen Bedingungen zu denen in Verfahren f) erwähnten zu alkylieren.
  • Ebenfalls besonders bevorzugt zur Herstellung der Verbindungen der Formel XI sind Reaktionsbedingungen, die zu denen in J. Chem. Soc. Perkin I, 1712 (1975) beschriebenen analog sind.
  • Die Verbindungen der Formel III können auch beispielsweise erhalten werden durch Umsetzung einer Verbindung der Formel XII*, wie sie oben definiert ist, worin R7 für Wasserstoff steht (beispielsweise erhältlich durch die Entfernung von Schutzgruppen, wenn R7 für eine Schutzgruppe steht) direkt durch Kondensation unter den oben unter Verfahren b) erwähnten Bedingungen mit Säuren der Formel VI oder den unter Verfahren b) erwähnten Säurederivaten unter Bildung der Verbindungen der Formel
    Figure 00370001
    worin die Reste wie oben für die Verbindungen der Formel I definiert sind, die dann in die Verbindungen der Formel III durch Reduktion unter Bedingungen umgewandelt werden, die zu den für die Reduktion von Hydrazonen der Formel XII* erwähnten analog sind.
  • Die Verbindungen der Formel III* können auch aus den entsprechenden Verbindungen der Formel III' erhalten werden, die wie oben beschrieben definiert sind, indem man die letzteren mit Verbindungen der oben definierten Formel X* unter Bildung der Hydrazone der Formel III* unter Bedingungen umsetzt, die zu den oben für die Umsetzung der Carbonylverbindungen der Formel X* mit Hydrazinen der Formel XI beschriebenen analog sind.
  • Eine Verbindung der Formel IV kann beispielsweise hergestellt werden durch Reduktion einer Aminosäure der Formel
    Figure 00370002
    worin R8 für Wasserstoff oder speziell eine der unter Verfahren a) erwähnten Aminoschutzgruppen steht, speziell tert-Niederalkoxycarbonyl, wie tert-Butoxycarbonyl, Arylniederalkoxycarbonyl, wie Benzyloxycarbonyl oder 9-Fluorenylmethoxycarbonyl oder eine der unter Verfahren a) erwähnten Acylaminoschutzgruppen, speziell Trifluoracetyl und R3 wie für die Verbindungen der Formel I definiert ist, unter Bildung eines Aldehyds der Formel
    Figure 00370003
    worin die Reste wie oben definiert sind, anschließender Umsetzung des Aldeyhds mit einer Ylidverbindung, vorzugsweise einer Schwefelylidverbindung unter Bildung eines Epoxids der Formel
    Figure 00370004
    worin die Reste wie zuletzt definiert sind, Entfernung der Schutzgruppe R8 (die entstehende freie Aminoverbindung, worin R8 = Wasserstoff, kann stabil sein, beispielsweise in Form eines Säureadditionssalzes) und schließlich Acylierung der Aminogruppe der entstehenden Verbindung mit einer Säure der Formel VIII, worin die Reste wie oben für die Formel VIII definiert sind, unter geeigneten Bedingungen, die zu den für Verfahren b) beschriebenen Bedingungen analog sind.
  • Die Reduktion von Aminosäuren der Formel XIII zu den entsprechenden Aldehyden der Formel XIV wird beispielsweise durch die Reduktion der entsprechenden Alkohole und der anschließenden Oxidation zu den erwähnten Aldehyden ausgeführt.
  • Die Reduktion zu den Alkoholen (eine freie Verbindung oder (erforderlichenfalls nach der Einführung von Schutzgruppen, wie dies unter Verfahren a) beschrieben ist) einer durch R8 N-geschützten Verbindung der folgenden Formel
    Figure 00380001
    worin die Reste wie für die Verbindungen der Formel XIII) definiert sind, wird beispielsweise ausgeführt durch Hydrierung der Säurehalogenide oder anderer aktivierter Carbonsäurederivate, die unter Verfahren b) erwähnt sind, unter den für die Hydrierung von Hydrazonen erwähnten Bedingungen, die aus Verbindungen der Formel XII erhalten wurden, mit Diboran oder mit komplexen Hydriden, wie Natriumborhydrid. Die anschließende Oxidation der entstehenden Alkohole ist beispielsweise möglich durch die Oxidation der Hydroxygruppe mit einem Sulfoxid, wie Dimethylsulfoxid, in Gegenwart eines Reagenzes, das die Hydroxygruppe aktiviert, wie ein Carbonsäurechlorid, beispielsweise Oxalylchlorid, in inerten Lösemitteln, beispielsweise einem halogenierten Kohlenwasserstoff, wie Dichlormethan und/oder einem acyclischen oder cyclischen Ether, wie Tetrahydrofuran bei –80°C bis 0°C, beispielsweise bei –78°C bis –50°C oder beispielsweise durch Oxidation mit Chromsäure oder einem Derivat hiervon, wie Pyridiniumchromat oder tert-Butylchromat, Dichromat/Schwefelsäure, Schwefeltrioxid in Gegenwart von heterocyclischen Basen, wie Pyridin/SO3 und auch Salpetersäure, Pyrolusit oder Selendioxid in Wasser, organischen Lösemitteln, wie halogenierten Lösemitteln, beispielsweise Methylenchlorid, Carbonsäureamiden, wie Dimethylformamid oder Diniederalkylsulfoxiden, wie Dimethylsulfoxid in Gegenwart oder Abwesenheit von basischen Aminen, beispielsweise Triniederalkylaminen, wie Triethylamin bei Temperaturen von –50°C bis 100°C vorzugsweise von –10°C bis 50°C oder durch katalytische Dehydrierung, beispielsweise in Gegenwart von metallischem Silber, Kupfer, Kupferchromoxid oder Zinkoxid bei etwa 200°C bis 400°C (im Kontaktrohr) mit einer anschließenden schnellen Kühlung. Die Oxidation mit 2,2,6,6-Tetramethylpiperidin-1-oxyl in Gegenwart von NaOCl ist auch möglich (siehe Anelli et al., Org. Synth. 69, 212 (1990)).
  • Die direkte Reduktion der Aminosäuren zu den Aldehyden ist auch möglich, beispielsweise durch Hydrierung in Gegenwart eines teilweise vergifteten Palladiumkatalysators oder durch Reduktion der entsprechenden Aminosäureester, beispielsweise der Niederalkylester, wie des Ethylesters mit komplexen Hydriden, beispielsweise Borhydriden, wie Natriumborhydrid oder vorzugsweise Aluminiumhydriden, beispielsweise Lithiumaluminiumhydrid, Lithiumtri(tert-butoxy)aluminiumhydrid oder speziell Diisobutylaluminiumhydrid in nicht polaren Lösemitteln, beispielsweise Kohlenwasserstoffen oder aromatischen Lösemitteln, wie Toluol von –100°C bis 0°C, vorzugsweise von –70°C bis –30°C und der anschließenden Umsetzung unter Bildung der entsprechenden Semicarbazone, beispielsweise mit den entsprechenden Säuresalzen der Semicarbazone, wie Semicarbazidhydrochlorid in wässrigen Lösemittelsystemen, wie Alkohol/Wasser, beispielsweise Ethanol/Wasser bei Temperaturen von –20°C bis 60°C, vorzugsweise von 10°C bis 30°C und der Umsetzung des entstehenden Semicarbazons mit einem reaktiven Aldeyhd, beispielsweise Formaldehyd in einem inerten Lösemittel, beispielsweise einem polaren organischen Lösemittel, beispielsweise einem Carbonsäureamid, wie Dimethylformamid bei Temperaturen von –30°C bis 60°C, vorzugsweise von 0°C bis 30°C und dann mit einer Säure, beispielsweise einer starken Mineralsäure, wie einem Halogenwasserstoff in wässriger Lösung, wahlweise in Gegenwart des vorher verwendeten Lösemittels bei Temperaturen von –40°C bis 50°C, vorzugsweise von –10°C bis 30°C. Die entsprechenden Ester erhält man durch Umsetzung der Aminosäuren mit den entsprechenden Carbonsäuren, beispielsweise Ethanol, analog zu den in der Kondensation unter Verfahren b) verwendeten Bedingungen beispielsweise durch Umsetzung mit anorganischen Säurehalogeniden, wie Thionylchlorid in organischen Lösemittelgemischen, wie Gemischen aus aromatischen und alkoholischen Lösemitteln, beispielsweise Toluol und Ethanol bei Temperaturen von –50°C bis 50°C, vorzugsweise –10°C bis 20°C.
  • Die Herstellung der Verbindungen der Formel XIV wird in einer besonders bevorzugten Weise unter Bedingungen ausgeführt, die analog zu den in J. Org. Chem. 47, 3016 (1982) oder J. Org. Chem. 43, 3624 (1978) beschriebenen Reaktionsbedingungen sind.
  • Ein Schwefelylid, das zur Umwandlung der Verbindungen der Formel XIV in die Epoxide der Formel XV geeignet ist, ist beispielsweise ein Dialkylsulfoniummethylid, beispielsweise Dimethylsulfoniummethylid, ein Alkyl- oder Phenyldialkylaminosulfoxoniummethylid, beispielsweise Methyl- oder Phenyldimethylaminosulfoxoniummethylid oder ein Dialkylsulfoxoniummethylid, beispielsweise Dimethyl- oder Diethylsulfoxoniummethylid.
  • Die in Frage kommende Schwefeylidverbindung wird vorteilhafterweise in situ aus dem entsprechenden Sulfonium- oder Sulfoxoniumsalz und einer Base, beispielsweise Natriumhydrid in einem dipolaren, aprotischen Lösemittel, beispielsweise Dimethylsulfoxid oder einem Ether, beispielsweise Tetrahydrofuran oder 1,2-Dimethoxyethan hergestellt und dann mit der Verbindung der Formel XIV umgesetzt. Die Reaktion wird normalerweise bei Raumtemperatur unter Kühlen, beispielsweise bis zu –20°C oder unter leichtem Erhitzen, beispielsweise bis zu 40°C ausgeführt. Das Sulfid, Sulfinamid oder Sulfoxid, das zur selben Zeit gebildet wird, wird in der anschließenden Aufarbeitung entfernt.
  • Die Umsetzung mit einem Schwefelylid wird auf eine besonders bevorzugte Weise analog zu den in J. Org. Chem. 50, 4615 (1985) erwähnten Bedingungen bewirkt.
  • Eine Verbindung der Formel XV kann auch erhalten werden aus einer wie oben definierten Verbindung der Formel XIV durch Umsetzung hiervon mit einer Triniederalkylsilylmethyl-Grignardverbindung, die beispielsweise aus dem entsprechenden Halogenmethylsilan, wie Chlormethyltrimethylsilan hergestellt wurde, in einem inerten Lösemittel, beispielsweise einem Ether, wie Dioxan oder Diethylether bei Temperaturen von 0°C bis 50°C, beispielsweise bei Raumtemperatur bis etwa 40°C, anschließende Eliminierung unter Entfernung des Silylrests und der Bildung einer Doppelbindung, beispielsweise durch eine Lewissäure, wie BF3, wobei jede R8 Aminoschutzgruppe vorzugsweise auch entfernt wird, in einem inerten Lösemittel, beispielsweise einem Ether, wie Diethylether oder einem halogenierten Kohlenwasserstoff, wie Dichlormethan oder einem Gemisch hiervon bei Temperaturen von –50°C bis zur Rückflusstemperatur, speziell von 0°C bis 30°C, erforderlichenfalls durch erneute Acylierung unter Einführung einer Aminoschutzgruppe R12, wie sie oben definiert ist, und Oxidation der entstehenden Doppelbindung unter Bildung des Oxirans, vorzugsweise mit einer Percarbonsäure, beispielsweise m-Chlorperbenzoesäure oder Monoperphthalsäure (beispielsweise in Magnesiumsalzform) in einem inerten Lösemittel, beispielsweise einem halogenierten Kohlenwasserstoff, wie Dichlormethan, oder Alkoholen, wie Methanol, Niederalkanoylnitrilen, wie Acetonitril, Wasser oder Gemischen hiervon bei Temperaturen von –20°C bis zur Rückflusstemperatur des Gemisches, beispielsweise 10°C bis 50°C.
  • Die Verbindungen der Formel IV werden vorzugsweise hergestellt durch den Beginn mit einem wie oben definierten Alkohol der Formel XIII*, der auch im Handel erhältlich ist, Umsetzung dieses Alkohols mit einer Säure der Formel VIII oder mit einem reaktiven Derivat hiervon, wie dies für Verfahren c) definiert ist, unter den hierin erwähnten Bedingungen erforderlichenfalls unter Einführung von Schutzgruppen, wie sie unter Verfahren a) beschrieben sind, und der Entfernung zum geeigneten Zeitpunkt, wie dies unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschrieben ist, wobei eine Verbindung erhalten wird, die zur Verbindung der Formel XIII* analog ist, worin der Platz von R8 durch den entsprechenden Acylrest von der Säure der Formel VIII eingenommen wird, wobei die entstehende Verbindung unter den Bedingungen, die zu denen für die Oxidation von Alkoholen der Formel XIII* erwähnten analog sind, unter Bildung des entsprechenden Aldehyds der folgenden Formel oxidiert wird
    Figure 00400001
    worin die Reste wie oben definiert sind und der Aldeyhd dann beispielsweise mit einer Ylidverbindung, wie dies für die Umwandlung von Verbindungen der Formel XIV in die Verbindungen der Formel XV beschrieben ist, in die Verbindung der Formel IV umgewandelt wird.
  • Die Ausgangsmaterialien der Verfahren b), c) und d) sind bekannt oder können, falls sie neu sind, gemäß an sich bekannter Verfahren hergestellt werden: Beispielsweise kann eine Verbindung der Formel V aus einem geeigneten Hydrazinderivat der Formel XII, worin R7 für eine Schutzgruppe steht und die verbleibenden Reste wie für die Verbindungen der Formel V definiert sind, und einem geeigneten Epoxid der Formel IV hergestellt werden, worin die Reste wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind (Verfahren b), eine Verbindung der Formel VII kann aus einem geeigneten Hydrazinderivat der Formel III, worin die Reste wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, und einem geeigneten Epoxid der Formel XV hergestellt werden, worin R8 für eine Schutzgruppe steht und die verbleibenden Reste wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind (Verfahren c) und die Verbindung der Formel IX kann aus einem geeigneten Hydrazinderivat der Formel XII, worin R7 für Wasserstoff steht und die verbleibenden Reste wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, und einem geeigneten Epoxid der Formel XV hergestellt werden, worin R8 für eine Schutzgruppe steht und die verbleibenden Reste wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind (Verfahren d), analog zu Verfahren a), wahlweise unter Verwendung und Entfernung von Schutzgruppen, wie dies unter Verfahren a) und unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschrieben ist, wobei die Schutzgruppen R7 und R8 vorzugsweise wie oben in der Definition jeweils der Verbindungen der Formel XI und XIII definiert sind.
  • Die Verbindungen der Formel I', worin die Substituenten wie oben definiert sind, können beispielsweise hergestellt werden aus Verbindungen der Formel III'
    Figure 00410001
    worin die Reste wie oben für die Verbindungen der Formel I definiert sind, auf eine Weise, die zu der in Verfahren b) beschriebenen analog ist, durch die Umsetzung mit einer Verbindung der Formel IV, worin alle funktionellen Gruppen, die nicht an der Reaktion beteiligt sind, geschützt werden, wie dies in Verfahren b) beschrieben ist, und nach der Umsetzung wieder befreit werden können.
  • Die Verbindungen der Formel III' können aus den Verbindungen der Formel XI, wie sie oben beschrieben sind, durch die Umsetzung mit einer Säure der Formel VI oder eines reaktiven Säurederivats hiervon, worin die Reste wie oben definiert sind, auf eine Weise, die zu der für die Umsetzung der Verbindungen der Formel XII mit einer Säure der Formel VI beschriebenen analog sind und erforderlichenfalls Entfernung der Schutzgruppe R7 gemäß einem der unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschriebenen Verfahren erhalten werden.
  • Wenn zwei Aminoschutzgruppen vorhanden sind, können sie identisch oder unterschiedlich sein.
  • Die verwendeten Aminoschutzgruppen sind beispielsweise die oben unter Verfahren a) erwähnten Aminoschutzgruppen. Es werden die entsprechenden Verbindungen bevorzugt, worin die Schutzgruppen aus denen ausgewählt sind, die als bevorzugt für R7 und R8 jeweils in den Verbindungen der Formeln XI und XIII beschrieben sind.
  • Die Herstellung der geschützten Verbindungen der Formel I wird beispielsweise gemäß einem der vorher erwähnten Verfahren ausgeführt, speziell aus Verbindungen der Formeln III und IV, worin die funktionellen Gruppen durch Schutzgruppen geschützt werden können, wie sie unter Verfahren a) beschrieben sind.
  • Die Säuren der Formeln VI, VIII und VIIIa und die Verbindungen der Formel X und die Aldehyde, die zur Einführung des Rests der Subformel A geeignet sind, welche zur Herstellung der Verbindungen der Formel XII verwendet werden, können gemäß an sich bekannter Verfahren hergestellt werden, falls sie nicht bereits bekannt sind.
  • Die Herstellung der Säuren der Formel VI wird bewirkt durch die Umsetzung von Derivaten einer Niederalkoxycarbonsäure, die zur Einführung von Niederalkoxycarbonylresten geeignet sind, beispielsweise durch Umsetzung der entsprechenden Pyrocarbonsäurediniederalkylester (speziell Pyrocarbonsäuredimethylester, Aldrich, Buchs, Schweiz) oder vorzugsweise Halogenameisensäureniederalkylester, wie Chlorameisensäureniederalkylester (speziell Chlorameisensäuremethylester, Fluka, Buchs, Schweiz) mit Aminosäuren der Formel
    Figure 00410002
    worin R5 wie für Verbindungen der Formel VI definiert ist, unter Bedingungen, die zu denen für die unter Verfahren b) beschriebene Acylierung analog sind, speziell in einer wässrigen Alkalimetallhydroxidlösung, beispielsweise einer wässrigen Natriumhydroxidlösung in Gegenwart von Dioxan bei Temperaturen von 20 bis 100°C, speziell von 50 bis 70°C.
  • Demnach können die Verbindungen der Formel VIII erhalten werden aus Aminosäuren der folgenden Formel
    Figure 00420001
    worin R2 wie für die Verbindungen der Formel I definiert ist und die Verbindungen der Formel VIIIa können erhalten werden aus Aminosäuren der folgenden Formel
    Figure 00420002
    worin R2' wie für die Verbindungen der Formel VIII' definiert ist, durch Umsetzung mit Derivaten einer Niederalkoxycarbonsäure, die zur Einführung von Niederalkoxycarbonylresten geeignet sind.
  • Die Aminosäuren der Formeln XVI, XVII und XVIII sind bekannt oder können gemäß an sich bekannter Verfahren hergestellt werden. Sie kommen vorzugsweise in der (S)-Form vor (in Bezug auf das α-Kohlenstoffatom).
  • Die Verbindungen der Formel IV können auch durch Kondensation einer Verbindung der Formel XIX
    Figure 00420003
    mit einer wie oben definierten Verbindung der Formel XVIII erhalten werden. Die Kondensation mit einer Säure der Formel VIII oder eines Säurederivats hiervon wird unter Bedingungen ausgeführt, die analog zu denen oben unter Verfahren e) erwähnten sind. Man erhält die Verbindung der Formel XX
    Figure 00420004
    worin R1 und R2 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind.
  • Eine Epoxidierung mit Sauerstoff oder vorzugsweise chemisch gebundenem Sauerstoff, beispielsweise in Hydroperoxiden, Wasserstoffperoxiden oder Peroxysäuren, wie Perbenzoesäure, Perameisensäure, Peressigsäure, Monoperoxyphthalsäure, Perwolframsäure oder speziell m-Chlorperbenzoesäure in inerten Lösemitteln, wie Ethern, beispielsweise Diethylether oder chlorierten Kohlenwasserstoffen, wie Chloroform oder Dichlormethan, bei bevorzugten Temperaturen von –20°C bis 50°C ergibt eine Verbindung der Formel IV, wie sie oben definiert ist.
  • Das Ausgangsmaterial der Formel XIX wird vorzugsweise erhalten durch Umsetzung einer Verbindung der Formel XIV, worin R3 für Phenyl steht und R8 für eine Schutzgruppe steht, mit einem Grignard-Reagenz, das die Methylidengruppe einführt, speziell mit dem Trimethylsilylmethyl-Grignard-Reagenz (ClMgCH2Si(CH3)3-, das aus Chlormethyltrimethylsilan (Fluka, Buchs, Schweiz) unter Bedingungen hergestellt werden kann, die zur Herstellung von Grignardverbindungen üblich sind) in einem inerten Lösemittel, wie einem Ether, beispielsweise Diethylether bei einer bevorzugten Temperatur von –65°C bis 0°C und einer anschließenden Entfernung der Hydroxygruppe und der Trimethylsilylgruppe, beispielsweise mit Bortrifluorid in einem Ether, wie Diethylether bei bevorzugten Temperaturen von –20 bis 30°C unter gleichzeitiger Entfernung der Schutzgruppe R8 (speziell im Fall der Entfernung der tert-Butoxycarbonylschutzgruppe) oder unter anschließender Entfernung der Schutzgruppe, wie dies unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" beschrieben ist.
  • Ebenfalls möglich ist die von einer Verbindung der Formel XIV ausgehende Synthese, worin R3 für Phenyl steht und R8 für eine Schutzgruppe steht, unter Verwendung eines geeigneten Wittig-Reagenzes, wie Methyltriphenylphosphoniumbromid oder -iodid in Gegenwart einer starken Base, wie Natriumamid bei Temperaturen von –90 bis 0°C, gefolgt von der Entfernung der Schutzgruppe R8 gemäß den unter der Überschrift "Entfernung von Schutzgruppen" erwähnten Bedingungen.
  • Die Verbindungen der Formel X* sind bekannt, und können gemäß an sich bekannter Verfahren hergestellt werden, beispielsweise wie folgt:
  • Unter Verwendung einer Verbindung der Formel XXI
    Figure 00430001
    worin Hal für Halogen, speziell Brom oder Chlor steht und Umsetzung mit einem unsubstituierten Heterocyclus, der 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome enthält, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl (-SO-) und Sulfonyl (-SO2-) ausgewählt sind und unsubstituiert oder mit Niederalkyl oder mit Phenylniederalkyl substituiert ist, speziell mit Thiazol oder Thiophen, in Gegenwart von Tetrakis(triphenylphosphin)palladium als Katalysator und in Gegenwart eines Alkalimetallniederalkanoats, wie Kaliumacetat, in einem geeigneten Lösemittel, speziell einem N,N-Diniederalkylniederalkanoylamid, wie Dimethylacetamid, bei bevorzugten Temperaturen von 80°C bis zur Siedetemperatur des Gemisches, beispielsweise bei etwa 150°C, kann die entsprechende Verbindung der Formel X*, speziell 4-(Thiazol-5-yl)benzaldehyd oder 4-(Thiophen-2-yl)benzaldehyd erhalten werden.
  • Alternativ dazu ist es ausgehend von einer Verbindung der Formel XXI, die als letztes definiert wurde, möglich, das entsprechende Diniederalkylacetal (siehe beispielsweise J. Org. Chem. 56, 4280 (1991)) zu erhalten, beispielsweise das Brombenzaldehyddimethylacetal (erhältlich beispielsweise durch die Umsetzung von 4-Brombenzaldehyd mit Orthoameisensäuretrimethylester in einem Alkohol, wie Methanol, in Gegenwart einer Säure, wie p-Toluolsulfonsäure (kann auch in Form des Hydrats verwendet werden)). Das entstehende 4-Halogenbenzaldehyddiniederalkylacetal wird dann durch die Umsetzung mit Magnesium in Gegenwart einer katalytischen Menge an Iod in einem geeigneten Lösemittel, wie einem Ether, beispielsweise Tetrahydrofuran, bei bevorzugten Temperaturen von 0°C bis 70°C in das entsprechende Grignard-Reagenz der Formel XXII umgewandelt
    Figure 00440001
    worin Hal für Halogen, speziell Chlor oder Brom steht und Z für Niederalkyl steht, das dann in Gegenwart von 1,3-Bis(diphenylphosphino)propannickel-(II)-chlorid als Katalysator in einem geeigneten Lösemittel, wie Ether, beispielsweise Tetrahydrofuran, wobei in einer besonders bevorzugten Verfahrensvariante ein geeignetes komplexes Hydrid, speziell Diisobutylaluminiumhydrid (beispielsweise gelöst in einem Kohlenwasserstoff, wie Hexan) zugegeben wird, bei Temperaturen von 0°C bis 60°C mit einer Verbindung der Formel XXIII umgesetzt wird R9-Hal' (XXIII)worin R9 für einen ungesättigten Heterocyclus steht, der 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome enthält, ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl (-SO-) und Sulfonyl (-SO2-) und unsubstituiert oder mit Niederalkyl oder Phenylniederalkyl substituiert ist, und worin Hal' für Chlor oder insbesondere Brom steht, wobei eine anschließende Säurehydrolyse des Acetats (beispielsweise mit Chlorwasserstoff in Wasser) unter Bildung der entsprechenden Aldehydverbindung der Formel X* erfolgt. Speziell bevorzugt als Verbindungen der Formel XXIII sind 2-Bromthiazol, 2- oder 3-Brompyridin oder 2-Chlorpyrazin zur Herstellung der folgenden Verbindungen der Formel X*: 4-(Thiazol-2-yl)benzaldehyd, 4-(Pyridin-2-yl oder -3-yl)benzaldehyd oder 4-(Pyrazin-2-yl)benzaldehyd.
  • Die Verbindungen der Formel X*, worin R4 für 4-(Tetrazolyl-5-yl)phenyl steht werden durch die Umsetzung von 4-Cyanobenzaldehyd mit einem Alkalimetallazid, wie Natriumazid, in Gegenwart eines geeigneten Alkalimetallhalogenids, wie Lithiumchlorid, in einem geeigneten Lösemittel, wie 2-Methoxyethanol, vorzugsweise bei Siedetemperatur erhalten. Durch die Umsetzung mit Phenylniederalkylhalogeniden oder vorzugsweise mit Phenylniederalkenen, wie 2-Phenylpropen, in einem geeigneten Lösemittel, wie Toluol und einer geeigneten Säure, wie Methansulfonsäure, vorzugsweise unter Rückfluss, werden die entsprechenden 1- oder 2-Phenylniederalkylverbindungen der Formel X* erhalten. Durch die Umsetzung mit einem Niederalkylhalogenid, wie Iodid oder Bromid, beispielsweise Methyliodid, in Gegenwart von Alkalimetallcarbonaten, wie Kalium- oder speziell Cäsiumcarbonat und geeigneten Lösemitteln, wie Dioxan, bei bevorzugten Temperaturen von etwa 0°C bis etwa 30°C erhält man die Verbindungen der Formel X*, die im Tetrazolylring durch Niederalkyl oder durch Phenylniederalkyl substituiert sind, speziell 4-(1-Methyltetrazol-5-yl)benzaldehyd.
  • Die Verbindungen der Formel X können aus den entsprechenden Verbindungen der Formel X* erhalten werden durch Reduktion der Aldehydfunktion zu einer Hydroxymethylgruppe (beispielsweise mit komplexen Hydriden, wie Lithiumaluminiumhydrid in Ethanol, Disiamylboran in Tetrahydrofuran, Natriumborhydrid in Gegenwart von Lithiumchlorid in Diglycol oder Natriumborhydrid in Ethanol) und einer anschließenden Einführung des Rests X durch Veresterung mit einer starken anorganischen oder organischen Säure, wie mit einer Mineralsäure, beispielsweise einer Halogenwasserstoffsäure, wie Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure oder Iodwasserstoffsäure oder mit einer starken organischen Sulfonsäure, wie einer unsubstituierten oder substituierten, beispielsweise mit Halogen substituierten, wie mit Fluor substituierten Niederalkansulfonsäure oder einer aromatischen Sulfonsäure, beispielsweise einer Benzolsulfonsäure, die unsubstituiert oder mit Niederalkyl, wie Methyl, Halogen, wie Brom und/oder mit Nitro substituiert ist, beispielsweise Methansulfonsäure, p-Bromtoluolsulfonsäure oder p-Toluolsulfonsäure oder Stickstoffwasserstoffsäure gemäß Standardverfahren. Beispielsweise können durch Umsetzung mit anorganischen Säurehalogeniden, wie Thionyl oder Phosphorylhalogeniden (beispielsweise den Chloriden, Bromiden oder Iodiden), Halogenreste X eingeführt werden oder die verbleibenden Verbindungen der Formel X können durch Umsetzung mit anderen geeigneten organischen oder anorganischen Säuren erhalten werden, wie starken organischen Sulfonsäuren (die beispielsweise als Säurechloride verwendet werden).
  • Die Ausgangsmaterialien können analog zu den in EP 0 521 872 A oder EP 0 672 448 A erwähnten Verfahren hergestellt werden oder sind aus den hierin angegebenen Literaturstellen erhältlich oder sind bekannt, können gemäß an sich bekannter Verfahren hergestellt werden oder sind im Handel erhältlich.
  • Die Herstellung der Ausgangsmaterialien zur Herstellung der Verbindungen der Formel I wird vorzugsweise analog zu den in den Beispielen erwähnten Verfahren und Prozessschritten ausgeführt.
  • Von den erfindungsgemäßen Ausgangsmaterialien sind die folgenden besonders bevorzugt (wenn die Reste nicht spezifisch definiert sind, treffen in jedem Fall die in der Definition für die Verbindungen der Formel I angegebenen Bedeutungen zu):
    • (1) Verbindungen der Formel XX, worin R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht und R2 für tert-Butyl steht,
    • (2) Verbindungen der Formel IV, worin R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht und R2 für tert-Butyl steht,
    • (3) Verbindungen der Formel III*, speziell jene, worin R5 für tert-Butyl steht und R6 für Methoxy- oder Ethoxycarbonyl steht,
    • (4) Verbindungen der Formel XII,
    • (5) Verbindungen der Formel XII*,
    • (6) Verbindungen der Formel III,
    • (7) Verbindungen der Formel V,
    • (8) Verbindungen der Formel VII,
    • (9) Verbindungen der Formel IX,
    • (10) Verbindungen der Formel X,
    • (11) Eine Verbindung der Formel X*, ausgewählt aus 4-(1-Methyltetrazol-5-yl)benzaldehyd, 4-(Thiazol-2-yl)benzaldehyd, 4-(Pyridin-2-yl oder -3-yl)benzaldehyd, 4-(Pyrazin-2-yl)benzaldehyd, 4-(Thiazol-5-yl)benzaldehyd und 4-(Thiophen-2-yl)benzaldehyd,
    • (12) Verbindungen der Formel XXIV
      Figure 00460001
      worin R13 und R14 für Aminoschutzgruppen stehen, die sich voneinander unterschieden und aus denen unter Verfahren a) erwähnten ausgewählt sind, speziell tert-Niederalkoxycarbonyl, wie tert-Butoxycarbonyl oder eine Acylaminoschutzgruppe, speziell Trifluoracetyl, wobei vorzugsweise R13 für Trifluoracetyl steht und R14 für tert-Butoxycarbonyl steht (die Verbindungen sind Verbindungen der Formel IX, die an beiden Aminogruppen geschützt sind)
    • (13) Verbindungen der Formel XXV
      Figure 00460002
      worin R14 für eine Aminoschutzgruppe steht, wie sie für die Verbindungen der Formel XXIV definiert ist, speziell tert-Butoxycarbonyl,
    • (14) Verbindungen der Formel XXVI
      Figure 00460003
      worin R15 für eine Aminoschutzgruppe steht, speziell tert-Butoxycarbonyl und die verbleibenden Reste wie für Verbindungen der Formel I definiert sind,
    • (15) 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-N-(tert-butyloxycarbonyl)amino-2-N-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]amino-6-phenyl-2-azahexan (als Zwischenprodukt, aber auch pharmazeutisch aktiv).
  • Wenn salzbildende Gruppen in den oben unter (1) bis (15) erwähnten Verbindungen vorkommen, können die Ausgangsmaterialien auch in Form eines Salzes vorkommen.
  • Beispiele
  • Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Erfindung ohne den Umfang hiervon zu beschränken:
  • Die Temperaturen sind in Grad Celsius (°C) angegeben. Wenn keine Temperatur angegeben ist, werden die folgenden Reaktionen bei Raumtemperatur ausgeführt. Die Rf Werte, die das Verhältnis der Verzögerung der in Frage kommenden Substanz zur Verzögerung der Eluentenfront angeben, werden auf Silicageldünnschichtplatten (Merck, Darmstadt, Deutschland) durch Dünnschichtchromatographie (TLC) unter Verwendung der in jedem Fall angegebenen Lösemittelsysteme bestimmt.
  • Verwendete HPLC Gradienten:
    HPLC20–100 20% → 100% a) in b) für 20 Minuten
    HPLC22–100(12') 20% → 100% a) in b) für 12 Minuten, dann 8 Minuten 100% a)
    HPLC5–60 5% → 60% a) in b) für 15 Minuten.
  • Eluent a). Acetonitril + 0,05% TFA, Eluent b): Wasser + 0,05% TFA.
  • Säule (250 × 4,6 mm) gepackt mit "Umkehrphasenmaterial" C18-Nukleosil (5 μm mittlere Partikelgröße, Silcagel kovalent mit Octadecylsilanen derivatisiert, Macherey & Nagel, Düren, Deutschland). Detektion durch UV-Absorption bei 254 nm. Die Retentionszeiten (tRet) sind in Minuten angegeben. Flussrate 1 ml/min.
  • Die anderen verwendeten Abkürzungen haben die folgenden Bedeutungen:
    abs. Absolut (zeigt an, dass das Lösemittel wasserfrei ist)
    anal. Elementaranalyse
    Boc tert-Butoxycarbonyl
    DBU 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en-(1,5-5)
    TLC Dünnschichtchromatographie
    DIPE Diisopropylether
    DMF Dimethylformamid
    DPPP [1,3-Bis(diphenylphosphino)propan]nickel-(II)-chlorid (Aldrich, Milwaukee, USA)
    EDC N-Ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimidhydrochlorid
    Ether Diethylether
    FAB-MS Massenspektrometrie durch schnellen Atombeschuss
    ges. gesättigt
    HOAc Essigsäure
    HOBT 1-Hydroxybenzotriazol
    HPLC Hochleistungsflüssigchromatographie
    Hünig Base N-Ethyldiisoproylamin
    MeOH Methanol
    min Minuten
    NMM N-Methylmorpholin
    Pd/C Palladium auf Kohle
    Pd(PPH3)4 Tetrakis(triphenylphosphin)palladium
    iso-PrOH isopropanol
    Rf Verhältnis der Verzögerung zur Eluentenfront bei der TLC
    SiO2 Silicagel
    Smp. Schmelzpunkt
    Kochsalzlösung Gesättigte Natriumchloridlösung
    TEA Triethylamin
    TFA Trifluoressigsäure
    THF Tetrahydrofuran (destilliert über Natrium/Benzophenon)
    TPTU O-(1,2-Dihydro-2-oxo-1-pyridyl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafluorborat
    p-TSA p-Toluolsulfonsäure
  • Quelle einiger Aminosäurederivate, die als Ausgangsmaterialien verwendet werden:
    • – (2R)-[(1'S)-Boc-Amino-2'-phenylethyl]oxiran, J. Org. Chem, 50, 4615 (1985),
    • – (2R)-[(1'S)-(Trifluoracetyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran ( EP 0 521 827 A , Seite 78, Beispiel 16d)
    • – N-Methoxycarbonyl-(L)-Valin (Herstellung siehe Chem. Lett. 705 (1980))
    • – N-Ethoxycarbonyl-(L)-Valin (Herstellung siehe J. Org. Chem. 60, 7256 (1995))
    • – N-Methoxycarbonyl-(L)-Isoleucin (Herstellung siehe Chem. Lett. 705 (1980))
  • Beispiel 1: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Feuchtigkeit werden 735 mg (4,20 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin (siehe EP 0 604 368 , Beispiel 2b), 1548 mg (8,07 mmol) EDC und 654 mg (4,844 mmol) HOBT in 10 ml DMF gegeben. Dann werden 1,13 ml (8,07 mmol) TEA zu der weißen Suspension gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 30 Minuten gerührt. Es werden 595 mg (1,62 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-aza-hexan, die in 1 ml DMF gelöst sind, zugegeben und das Gemisch wird über Nacht zur Vervollständigung der Reaktion gerührt. Das Reaktionsgemisch wird durch Eindampfung konzentriert. Das entstehende Öl wird in Methylenchlorid gelöst und mit 10% Zitronensäurelösung, gesättigter NaHCO3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden 2× mit Methylenchlorid extrahiert und die vereinigten organischen Phasen werden durch Baumwollwatte filtriert und durch Eindampfung konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, CH2Cl2/MeOH/H2O/NOAc 85 : 13 : 1,5 : 0,5) und eine Fällung mit DIPE aus einer konzentrierten Lösung in Methylenchlorid ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,57 (CH2Cl2/MeOH,/H2O/,HOAc 85 : 13 : 1,5 : 0,5). HPLC20–100: tRet = 13,0. FAB MS (M + H)+ = 683.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 1a) 4-(Thiazol-5-yl)benzaldehyd
  • In einem Druckrohr wird ein Gemisch aus 3,7 g (20 mmol) an 4-Brombenzaldehyd (Fluka, Buchs, Schweiz), 6,64 ml (93 mmol) Thiazol, 2,94 g Kaliumacetat und 1,16 g (1 mmol) Pd(PPh3)4 in 50 ml Dimethylacetamid bei 150°C für 12 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird durch Eindampfung konzentriert. Dann wird Wasser zu dem Rückstand gegeben und das Gemisch wird 3× mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden durch Baumwollwatte filtriert, durch Eindampfung konzentriert unter Bildung der Titelverbindung chromatographiert (SiO2, Hexan/Ethylacetat 1 : 2): HPLC20–100: tRet = 11,4. 1H NMR (CD3OD) δ 9,98 (s, HCO), 9,03 (s, H(2)Thiazol) 8,32 (s, H(4)Thiazol) 7,95 und 7,85 (2d, J = 8, jeweils 2H), zusätzlich ebenfalls Signale des Hydrats (~12%): 8,92 (s, H(2)Thiazol) 8,15 (s, H(4)Thiazol) 7,62 und 7,53 (2d, J = 8, jeweils 2H), 5,54 (s, HC(OH)2).
  • 1b) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{(4-(thiazol-5-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Eine Lösung aus 1,22 g (6,45 mmol) an 4-(Thiazol-5-yl)benzaldehyd und 1,12 g (6,14 mmol) tert-Butylcarbazat (Fluka, Buchs, Schweiz) in 40 ml Ethanol wird bei 80°C für 12 Stunden gerührt. Das Abkühlen und eine Kristallisation durch die Zugabe von 60 ml Wasser bei 0°C ergeben die Titelverbindung:
    Smp. 170–171°C. HPLC20–100: tRet = 13,5.
  • 1c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiazol-5-yl)benzyl]hydrazin
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 20,4 g (67,2 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{[4-(thiazol-5-yl)phenyl]methyliden}hydrazon in 120 ml THF gegeben und 4,67 g (70,7 mmol, 95%) Natriumcyanoborhydrid werden zugegeben. Eine Lösung aus 12,8 g (67,2 mmol) p-Toluolsulfonsäuremonohydrat in 120 ml THF (pH 3–4) wird dann tropfenweise hierzu gegeben. Nach 7 Stunden werden Wasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennnt und weitere 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung, gesättigter NaHCO3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Zu dem entstehenden viskosen Öl werden dann 80 ml Dichlorethan und 80 ml an 1 N NaOH Lösung (Schaum) gegeben und das Gemisch wird unter Rückfluß für 7 Stunden zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird abgekühlt und mit Methylenchlorid und Wasser verdünnt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4), durch Eindampfung konzentriert und chromatographiert (SiO2. Hexan/Ethylacetat 2 : 1). Ein Rühren in Hexan ergibt die Titelverbindung: Smp. 93–95°C. TLC: Rf = 0,12 (Hexan/Ethylacetat 2 : 1).
    Analyse (C15H19N3O2S) berechnet: C 58,99, H 6,27, N 13,76, S 10,50. Gefunden: C 58,98, H 6,34, N 13,64, S 10,66. HPLC20–100: tRet = 10,1.
  • 1d) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Suspension aus 1,21 g (4,6 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-amino-2'-phenylethyl]oxiran und 1,4 g (4,6 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiazol-5-yl)benzyl]hydrazin in 25 ml Iso-PrOH wird über Nacht zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird abgekühlt und Wasser wird zugegeben. Die überstehende Phase wird von dem Öl, das ausgefallen ist, abdekantiert. Das Öl wird im Vakuum getrocknet und unter Bildung der Titelverbindung chromatographiert (SiO2, Methylenchlorid 1 Methanol 30 : 1), TLC: Rf = 0,2 (Methylenchlorid/Methanol 30 : 1). HPLC20–100: tRet = 17,2.
  • 1e) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Lösung aus 1,14 g (2,0 mmol) aus 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 100 ml Ameisensäure wird bei Raumtemperatur für 3 Stunden gerührt und dann durch Eindampfung konzentriert. Es wird gesättigte NaHCO3 Lösung und Me thylenchlorid zu dem Rückstand gegeben. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung behandelt, durch Baumwollwatte filtriert und durch Eindampfung unter Bildung der Titelverbindung konzentriert, die weiter direkt verwendet wird.
  • Beispiel 2: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 344 mg an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 191 μl (1,74 mmol) an NMM in 5,6 ml DMF zu 122 mg (0,696 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)valin und 173 mg (0,58 mmol) TPTU in 2,9 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 16 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird in Eiswasser gegossen, für 30 min gerührt und filtriert. Ein Säulenchromatographie des Rückstands (SiO2, Methylenchlorid/THF 4 : 1) und das Rühren in Ether ergeben die Titelverbindung: Smp. 134–135°C. HPLC20–100: tRet = 14,0. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 2a) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Suspension aus 5,32 g (20,5 mmol) an (2R)-[(1'S)-(Trifluoracetyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran und 5,7 g (18,6 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiazol-5-yl)benzyl]hydrazin (Beispiel 1c) in 95 ml Iso-PrOH wird für 8 Stunden zum Sieden erhitzt. Nach dem Abkühlen wird das Reaktionsgemisch teilweise durch Eindampfung konzentriert und bleibt bei 0°C stehen, wobei die Titelverbindung kristallisiert, die unter Unterdruck abfiltriert und getrocknet wird. TLC: Rf = 0,39 (Methylenchlorid/THF 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 16,5. FAB MS (M + H)+ = 565. Weiteres Produkt kann aus der Mutterlauge durch erneutes Sieden mit (2R)-[(1'S)-(Trifluoracetyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran in Iso-PrOH und Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid 1 THF 15 : 1) erhalten werden.
  • 2b) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 100 ml einer 1 N K2CO3 Lösung tropfenweise zu einer Lösung aus 5,646 g (10,0 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 100 ml Methanol gegeben und das Gemisch wird bei 70°C für 15 Stunden gerührt. Es wird dann Methylenchlorid und Wasser zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung unter Bildung der Titelverbindung konzentriert.
    Analyse (C25H32N4O3S (0,53H2O)): Berechnet C 62,80, H 6,97, N 11,72, S 6,71, H2O 2,00. Gefunden: C 63,2, H 7,01, N 11,57, S 6,49, H2O 1,98. HPLC20–100: tRet = 11,5.
  • 2c) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 1,36 g (7,2 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e), 2,59 g (13,5 mmol) EDC und 1,22 g (9,0 mmol) HOBT in 20 ml DMF gelöst. Nach 15 min werden 3,79 ml (27 mmol) TEA zugegeben und dann wird eine Lösung aus 2,11 g (4,5 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan in 41 ml DMF tropfenweise zugegeben. Nach 3 Stunden wird das Reaktionsgemisch durch Eindampfung konzentriert. Das entstehende Öl wird in Ethylacetat und einer kleinen Menge THF gelöst und 2× mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung, 2× Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden mit Ethylacetat extrahiert und die vereinigten organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/THF 5 : 1) und Kristallisation aus Ethylacetat/DIPE ergibt die Titelverbindung: HPLC20–100: tRet = 16,0. FAB MS (M + H)+ = 640.
  • 2d) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 742 mg (1,16 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 12 ml Ameisensäure bei Raumtemperatur für 7 Stunden gerührt und dann durch Eindampfung konzentriert. Es werden gesättigte NaHCO3 Lösung und Ethylacetat zu dem Rückstand gegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Wasser und Kochsalzlösung behandelt, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung unter Bildung der Titelverbindung konzentriert, die weiter direkt verwendet wird.
  • 2e) N-(Methoxycarbonyl)-(L)-tert-leucin
  • Es werden 23,5 ml (305 mmol) Methylchlorformiat über einen Zeitraum von 20 min zu einer Lösung aus 20 g (152 mmol) an (L)-tert-Leucin (= 2(S)-Amino-3,3-dimethylbuttersäure = (L)-α-tert-Butylglycin, Fluka, Buchs/Schweiz) in ein Gemisch aus 252 mg (504 mmol) an 2 N wässriger Natriumhydroxidlösung und 80 ml Dioxan gegeben und die Reaktionslösung wird bei 60°C für 14 Stunden erhitzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung 2× mit Methylenchlorid gewaschen. Die wässrige Phase wird mit 4 N wässriger Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 angesäuert und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Extrakte werden vereinigt, getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfung konzentriert, wobei sich das Produkt beginnt zu verfestigen. Ein Verdau des gefestigten Feststoffs mit Hexan ergibt die Titelverbindung in Form eines weißen Pulvers. Smp. 106–108°C.
  • Beispiel 3: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 292 mg an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 2d) und 165 μl (1,5 mmol) NMM in 4,8 ml DMF zu 113,5 mg an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e) und 149 mg (0,50 mmol) TPTU in 2,5 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 14 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird in 0,2 Liter Eiswasser gegossen, für 45 min gerührt und filtriert. Eine Säulenchromatographie des Rückstands (SiO2, Methylenchlorid/Ethanol 20 : 1) und Kristallisation aus Ethylacetat/Ether/Hexan ergibt die Titelverbindung: Smp. 207–209°C. TLC: Rf = 0,25 (Methylenchlorid/Ethanol 20 : 1) HPLC20–100: tRet = 14,7. FAB MS (M + H)+ = 711.
  • Beispiel 4: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 292 mg an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 2d) und 165 μl (1,5 mmol) NMM in 4,8 ml DMF zu 113,5 mg an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin und 149 mg (0,50 mmol) TPTU in 2,5 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 14 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 3 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. Smp. 139–141°C. TLC: Rf = 0,7 (Methylenchlorid 1 Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,6. FAB MS (M + 1)+ = 711.
  • Beispiel 5: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-S-methylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 292 mg an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 2d) und 165 μl (1,5 mmol) NMM in 4,8 ml DMF zu 116 mg (0,60 mmol) an N-Methaxycarbonyl-(L)-S-methylcystein und 149 mg (0,50 mmol) TPTU in 2,5 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 5 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 3 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. TLC: Rf = 0,4 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 13,6. FAB MS (M + 1)+ = 715.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 5a) N-Methoxycarbonyl-(L)-S-methylcystein
  • Unter Eiskühlung werden 16,8 (177,5 mmol) Chlorameisensäuremethylester tropfenweise zu einer Lösung aus 12,0 g (88,8 mmol) an S-Methyl-(L)-cystein-((S)-2-amino-3-methylmercaptopropionsäure: Fluka, Buchs /Schweiz) in 150 ml an 2 N Natriumhydroxidlösung und 18 ml Dioxan gegeben und das Gemisch wird bei 70°C über Nacht zur Vervollständigung der Reaktion gegeben. Das Reaktionsgemisch wird mit 150 ml Methylenchlorid verdünnt und die wässrige Phase wird abgetrennt, mit 1 N HCl angesäuert und 3× mit Ethylacetat extrahiert. Das Trocknen (Na2SO4) und die Konzentration der Ethylacetatphasen durch Eindampfung ergibt die Titelverbindung: FAB MS (M + H)+ = 194.
  • Beispiel 6: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxyxcarbonyl-(L)-valyl)-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 344 mg an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 2d) und 191 μl (1,74 mmol) NMM in 5,6 ml DMF zu 132 mg (0,7 mmol) an N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin ( EP 0 604 368 , Beispiel 9a) und 173 mg (0,58 mmol) TPTU in 2,9 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und analog zu Beispiel 3 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. TLC: Rf = 0,45 (Methylenchlorid/THF 4 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,7. FAB MS (M + 1)+ = 711.
  • Beispiel 7: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Argon werden 213 mg (1,13 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e), 431 mg (2,25 mmol) EDC und 304 mg (2,25 mmol) HOBT in 18 ml DMF gegeben. Nach 15 min werden 627 μl (4,5 mmol) TEA und 0,75 mmol an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan zugegeben. Nach 2 Stunden werden Wasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und weitere 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung, 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/THF 5 : 1) und Kristallisation aus Ether ergeben die Titelverbindung: Smp. 200–201°C. HPLC20–100: tRet = 14,0 FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 7a) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 2,66 g (15,2 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 5,64 g (28,5 mmol) EDC und 2,57 g (19 mmol) HOBT in 42 ml DMF gelöst. Es werden 7,9 ml (57 mmol) TEA zugegeben und nach 20 min wird eine Lösung aus 4,46 g (9,5 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 2b) in 85 ml DMF tropfenweise zugegeben. Nach 1,5 Stunden wird das Reaktionsgemisch analog zu Beispiel 2c aufgearbeitet. Eine Kristallisation aus TNF/Ether ergibt die Titelverbindung. Smp. 114–115°C. HPLC20–100: tRet = 15,1. FAB MS (M + H)+ = 626.
  • 7b) 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 1,25 g (2,0 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 18 ml Ameisensäure analog zu Beispiel 2d unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. HPLC20–100: tRet = 10,0.
  • Beispiel 8: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 213 mg (1,13 mmol) an N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin, 413 mg (2,25 mmol) EDC und 304 mg (2,25 mmol) HOBT in 18 ml DMF und 627 μl (4,5 mmol) TEA mit 0,75 mmol an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 7b) unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. Smp. 243–244°C. HPLC20–100: tRet = 14,0. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Beispiel 9: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 0,6 mmol 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 198 μl (1,8 mmol) NMM in 5,8 ml DMF zu 136 mg (0,72 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin und 179 mg (0,60 mmol) TPTU in 3 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 14 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 3 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. TLC: Rf = 0,59 (Methylenchlorid/THF 3 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,0. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Beispiel 10: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-S-methylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 0,58 mmol 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 191 μl (1,74 mmol) NMM in 5,6 ml DMF zu 134 mg (0,696 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-S-methylcystein (Beispiel 5a) und 173 mg (0,58 mmol) TPTU in 2,9 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 15 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 3 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. TLC: Rf = 0,17 (Methylenchlorid/THF 4 : 1). HPLC20–100: tRet= 13,0. FAB MS (M + H)+ = 701.
  • Beispiel 11: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Argon werden 0,5 mmol 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 165 μl (1,5 mmol) NMM in 4,8 ml DMF zu 113,5 mg (0,60 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e) und 149 mg (0,50 mmol) TPTU in 2,5 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 14 Stunden gerührt. Dann werden Eiswasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Ethylacetat) und Kristallisation aus Ethylacetat/Ether/Hexan ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,42 (Methylenchlorid/Ethanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,8. FAB MS (M + H)+ = 711.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 11a): 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 1,36 g (7,2 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-iso-leucin, 2,59 g (13,5 mmol) EDC und 1,22 g (9 mmol) HOBT in 20 ml DMF gelöst. Nach 30 min werden 3,79 ml (27 mmol) TEA zugegeben und eine Lösung aus 2,11 g (4,5 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 2b) in 40 ml DMF wird tropfenweise zugegeben. Nach 3 Stunden wird das Reaktionsgemisch analog zu Beispiel 2c unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. Smp. 163–166°C. Analyse (C33H45N5O6S (0,14H2O)) berechnet: C 61,71, H 7,11, N 10,90, S 4,99, H2O 0,39: Gefunden: C 61,61, H 7,10, N 10,79, S 4,76, H2O 0,4. HPLC20–100: tRet = 16,0. FAB MS (M + H)+ = 640.
  • 11b): 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 320 mg (0,50 mmol) an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 6 ml Ameisensäure analog zu Beispiel 2d unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt, die direkt weiter verwendet wird.
  • Beispiel 12: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 140 mg (0,80 mmol) N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 288 mg (1,5 mmol) EDC und 135 mg (1,0 mmol) HOBT in 2 ml DMF und 418 μl TEA mit 0,5 mmol an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 5 ml DMF unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. Smp. 202–204°C. HPLC20–100: tRet = 14,0. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Beispiel 13: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-(5S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 175 mg (0,92 mmol) N-Methoxycarbonyl-(L)-iso-leucin, 332 mg (1,7 mmol) EDC und 156 mg (1,15 mmol) HOBT in 2,5 ml DMF und 483 μl (3,47 mmol) TEA mit 0,578 mmol an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 11) in 5,2 ml DMF unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. Smp. 213–216°C. HPLC20–100: tRet = 14,7. FAB MS (M + H)+ = 711.
  • Beispiel 14: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 175 mg (0,92 mmol) N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin, 332 mg (1,7 mmol) EDC und 156 mg (1,15 mmol) HOBT in 2,5 ml DMF und 483 μl (3,47 mmol) TEA mit 0,578 mmol an 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 11b) in 5,2 ml DMF unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. Smp. 200–203°C. HPLC20–100: tRet = 14,6. FAB MS (M + H)+ = 711.
  • Beispiel 15: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-S-methylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 0,5 mmol 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 11b) und 165 μl (1,5 mmol) NMM in 4,8 ml DMF unter Eiskühlung zu 116 mg (0,60 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-S-methylcystein (Beispiel 5a) und 149 mg (0,50 mmol) TPTU in 2,5 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 12 Stunden gerührt. Dann werden Wasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und mit Ethylacetat 2× weiter extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung partiell konzentriert. Die Zugabe von Ether bewirkt eine Kristallisation der Titelverbindung. Smp: 179–181°C. TLC: Rf = 0,67 (Methylenchlorid/Ethanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 13,6. FAB MS (M + H)+ = 715.
  • Beispiel 16: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 2,58 g (13,7 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin und 4,09 g (13,7 mmol) TPTU in 15,5 ml DMF gelöst und 5,7 ml (24,8 mmol) Hünig Base werden unter Kühlen zugegeben und das Gemisch wird für 10 min gerührt. Dann wird eine Lösung aus 2,29 g (6,20 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan in 15,5 ml DMF zugegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 16 Stunden gerührt. Die hellgelbe Reaktionslösung wird in Eiswasser gegossen, Ethylacetat wird zugegeben und das Gemisch wird für 30 min gerührt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und weitere 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung und 2× mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 1 : 3) und Kristallisation aus Methylenchlorid/DIPE ergibt die Titelverbindung. TLC: Rf = 0,18 (Hexan/Ethylacetat 1 : 3). HPLC20–100: tRet 11,0. FAB MS (M + H)+ = 711. [α]° (c = 0,6, Ethanol) = –46°.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 16a) 4-(Thiazol-2-yl)benzaldehyd
  • Unter Argon werden 9,2 g (379 mmol) Magnesium in 84 ml THF gegeben und auf 60°C erhitzt. Eine Lösung aus 82,6 g (357 mmol) an 4-Brombenzaldehyddimethylacetal (zur Herstellung siehe J. Org. Chem. 56, 4280 (1991)) in 677 ml THF wird tropfenweise hierzu innerhalb von einem Zeitraum von 30 min gegeben und das Gemisch wird am Siedepunkt für weitere 40 min gerührt. Die Grignardlösung wird gekühlt, in einen Tropftrichter dekantiert und tropfenweise über einen Zeitraum von 30 min zu einer rötlichen Suspension aus 31,7 ml (338 mmol) an 2-Bromthiazol (Fluka, Buchs, Schweiz) und 5,39 g (9,95 mmol) DPPP in 1,68 Liter THF gegeben. Das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 12 Stunden gerührt und weitere 5,39 g DPPP werden zugegeben und das Gemisch wird für weitere 7 Stunden gerührt. Es werden 840 ml Wasser zugegeben und das Gemisch wird für 10 min gerührt. Dann wird das THF mittels eines Rotationsverdampfers eingedampft und der Rückstand wird für 1,5 Stunden in 1,0 Liter Ether und 340 ml an 2 N HCl gerührt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit 0,5 N HCl, Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Eine Chromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 4 : 1) und Verdau in Hexan ergibt die Titelverbindung. TLC: Rf = 0,21 (Hexan/Ethylacetat 3 : 1). Smp. 91–92°C. Analyse (C10H7NOS) berechnet C 63,47, H 3,73, N 7,40, S 16,94. Gefunden: C 63,14, H 3,79, N 7,27, S 17,08. 1H NMR (CDCl3) δ 10,05 (s HCO), 8,15 (d, J = 8, 2H), 7,95 (m, 3H), 7,45 (d, J = 3, 1H).
  • 16b) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{[4-(thiazol-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Eine Lösung aus 27,6 g (145 mmol) an 4-(Thiazol-2-yl)benzaldehyd und 19,7 g (149 mmol) tert-Butylcarbazat in 920 ml Ethanol wird bei 80°C für 18 Stunden gerührt. Ein Abkühlen, eine Konzentration durch Eindampfung und Rühren aus DIPE ergibt die Titelverbindung. TLC Rf = 0,31 (Toluol/Ethylacetat 3 : 1) HPLC20–100: tRet = 14,5.
  • 16c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiazol-2-yl)benzyl]hydrazin
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 77,6 g (256 mmol) an N-1-[tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{[4-(thiazol-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon in 450 ml THF gegeben und 16,9 g (257 mmol, 95%) Natriumcyanoborhydrid werden zugegeben. Eine Lösung aus 49,6 g (261 mmol) an p-Toluolsulfonsäuremonohydrat in 450 ml THF (pH 3–4) wird tropfenweise hierzu gegeben. Nach 17 Stunden werden weitere 3,38 g Natriumcyanoborhydrid zugegeben und das Gemisch wird mit p-Toluolsulfonsäuremonohydratlösung auf pH 3–4 eingestellt und für 3 Stunden zur Vervollständigung der Reaktion gerührt. Dann werden Wasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und weitere 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung, gesättigter NaHCO3 Lösung und 2× mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Das entstehende viskose Öl wird mit 300 ml 1,2-Dichlorethan aufgenommen: 300 ml einer 1 N NaOH Lösung werden langsam zugegeben (schäumt) und das Gemisch wird unter Rückfluß für 3,5 Stunden zum Sieden erhitzt. Das Gemisch wird abgekühlt und mit Methylenchlorid und Wasser verdünnt. Dann wird die wässrige Phase abgetrennt und 2× mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4), durch Eindampfung konzentriert und chromatographiert (SiO2, Toluol/Aceton 9 : 1 → 6 : 1). Das Rühren in Hexan ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,3 (Hexan/Ethylacetat 3 : 2). HPLC20–100: tRet = 11,1.
  • 16d) 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Lösung aus 6,00 g (22,8 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-amino-2'-phenylethyl]oxiran und 5,37 g (17,6 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiazol-2-yl)benzyl]hydrazin in 550 ml Iso-PrOH wird am Siedepunkt über Nacht erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur gekühlt, unter Rühren in 0,2 Liter Wasser gegossen und mit Eis gekühlt. Eine Filtration durch Saugen, Waschen mit Wasser und Ether und Trocknen ergibt die Titelverbindung. TLC: Rf = 0,36 (Hexan/Aceton 3 : 2). HPLC HPLC20–100: tRet 12,7. Ein weiteres Produkt kann aus der Mutterlauge durch Chromatographie (SiO2, Hexan/Aceton 3 : 2) isoliert werden.
  • 16e) 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Lösung aus 4,3 g (7,56 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 378 ml Ameisensäure wird bei Raumtemperatur für 3,5 Stunden (Argon) gerührt und dann durch Eindampfen konzentriert. Dann werden gesättigte NaHCO3 Lösung und Methylenchlorid zu dem Rückstand gegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Methylenchlorid extrahiert: Die organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung behandelt, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert. HPLC20–100: tRet = 6,8.
  • Beispiel 17: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 294 mg an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 165 μl (1,5 mmol) an NMM in 4,8 ml DMF zu 113,5 mg (0,60 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e) und 149 mg (0,50 mmol TPTU in 2,5 ml DMF bei 0°C gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 18 Stunden gerührt. Dann werden Wasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und zwei weitere Male mit Ethylacetat extrahiert: Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/THF 4 : 1) und Ausfällen mit Hexan aus einer konzentrierten Lösung in Methylenchlorid ergibt die Titelverbindung: HPLC20–100: tRet = 14,5. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 17a): 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Luft werden 4,8 g (18,5 mmol) an (2R)-[(1'S)-(Trifluoracetyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran und 3,78 g (12,4 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiazol-2-yl)benzyl]hydrazin (Beispiel 16c) in 62 ml Iso-PrOH für 10 Stunden zum Sieden erhitzt. Ein Abkühlen des Reaktionsgemisches, eine Filtration und anschließendes Waschen mit Ether ergibt die Titelverbindung:
    Analyse (C27H31N4F3O4S) berechnet: C 57,44, H 5,53, N 9,92, F 10,09, S 5,68. Gefunden: C 57,27, H 5,49, N 9,91, F 9,94, S 5,70. HPLC20–100: tRet = 16,9. FAB MS (M + 1)+ = 565. Ein weiteres Produkt kann aus dem Filtrat durch Konzentration durch Eindampfen, Säulenchromatographie (SiO2: Methylenchlorid/THF 25 : 1) und Rühren aus Ether/Ethylacetat isoliert werden.
  • 17b): 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 55 ml einer 1 N K2CO3 Lösung tropfenweise zu 3,12 g (5,5 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 55 ml Methanol gegeben und das Gemisch wird bei 70°C für 9 Stunden gerührt. Das Gemisch wird abgekühlt und ~30 ml Methanol werden verdampft. Dann werden Methylenchlorid und Wasser zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Wasser gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert. HPLC20–100: tRet = 11,9. FAB MS (M + H)+ = 469.
  • 17c) 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • sUnter einer Stickstoffatmosphäre werden 1,4 g (8,0 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 2,87 g (15 mmol) EDC und 1,35 g (10 mmol) HOBT in 22 ml DMF gelöst. Nach 45 min werden 4,2 ml (30 mmol) TEA und dann eine Lösung aus 2,34 g (5,0 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-aza-hexan in 45 ml DMF tropfenweise zugegeben. Nach 1,5 Stunden wird das Reaktionsgemisch durch Eindampfen konzentriert und der Rückstand wird in Methylenchlorid aufgenommen und mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden 2× mit Methylenchlorid extrahiert und die vereinigten organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/Ethylacetat 2 : 1) und Kristallisation aus Ethylacetat/Ether ergibt die Titelverbindung. Smp. 178–179°C. HPLC20–100: tRet = 15,8.
  • 17d) 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 0,94 g (1,5 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 18 ml Ameisensäure bei Raumtemperatur für 6 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 2d unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. FAB MS (M + H)+ = 526.
  • Beispiel 18: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 106 mg (0,56 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 201 mg (1,05 mmol) EDC und 95 mg (0,7 mmol) HOBT in 4,6 ml DMF und 293 μl (2,1 mmol) TEA mit 0,35 mmol an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. Smp. 227–229°C. HPLC20–100: tRet = 14,5. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Beispiel 19: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 106 mg (0,56 mmol) an N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin, 201 mg (1,05 mmol) EDC und 95 mg (0,7 mmol) HOBT in 4,6 ml DMF und 293 μl (2,1 mmol) TEA mit 0,35 mmol an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt.
    Analyse (C35H48N6O7S (0,20H2O)) berechnet: C 60,01, H 6,96, N 12,00, S 4,58, H2O 0,51. Gefunden: C 60,07, H 6,78, N 11,93, S 4,70, H2O 0,52. HPLC20–100: tRet = 14,6 FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Beispiel 20: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 7 werden 140 mg (0,80 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 288 mg (1,5 mmol) EDC und 135 mg (1,0 mmol) HOBT in 2,2 ml DMF und 418 μl (3,0 mmol) TEA mit 0,5 mmol an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 4,5 ml DMF unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. Smp. 207–210°C. HPLC20–100: tRet = 13,8. FAB MS (M + H)+ = 683.
  • Beispiel 21: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 294 mg an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-1-azahexan und 165 μl (1,5 mmol) an NMM in 4,8 ml DMF zu 113,5 mg (0,60 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e) und 149 mg (0,50 mmol TPTU in 2,5 ml DMF bei 0°C gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 16 Stunden gerührt. Dann werden Eiswasser und Ethylacetat zugegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und mit Ethylacetat extrahiert: Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Ethylacetat) und Kristallisation aus Ethylacetat/Ether/Hexan ergibt die Titelverbindung.
    Analyse (C36H50N6O7S (1,4%H2O)) berechnet: C 59,97, H 7,15, N 11,66, S 4,45. Gefunden: C 59,99, H 7,18, N 11,35, S 4,59.
    TLC: Rf = 0,51 (Methylenchlorid/THF 3 : 1). HPLC20–100: tRet = 15,2. FAB MS (M + H)+ = 711.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 21a) 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 938 mg (4,96 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 1,78 g (9,3 mmol) EDC und 838 mg (6,2 mmol) HOBT in 13,7 ml DMF gelöst. Nach 30 min werden 2,6 ml (18,6 mmol) TEA und dann eine Lösung aus 1,45 g (3,1 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-aza-hexan (Beispiel 17b) in 28 ml DMF tropfenweise zugegeben. Nach 3 Stunden wird das Reaktionsgemisch durch Eindampfen konzentriert und der Rückstand wird in Ethylacetat und in einer kleinen Menge THF aufgenommen und mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden mit Ethylacetat extrahiert und die vereinigten organischen Phasen werden über Na2SO4 getrocknet und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/THF 5 : 1) und Rühren aus Ethylacetat/DIPE ergibt die Titelverbindung. HPLC20–100: tRet = 16,3. FAB MS (M + H)+ = 640.
  • 21b) 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 761 mg (1,2 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan und 12 ml Ameisensäure bei Raumtemperatur für 7 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 2d unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet.
  • Beispiel 22: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl)-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 321 mg (0,60 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 21b) und 182 mg (1,8 mmol) an NMM in 5,8 ml DMF zu 136 mg (0,72 mmol) an N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin und 178 mg (0,60 mmol TPTU in 3 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 15 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird in Eiswasser gegossen und für 30 min gerührt und filtriert. Eine Kristallisation aus THF mit DIPE und Hexan ergibt die Titelverbindung. Smp. 209–211°C. HPLC20–100: tRet = 15,2. FAB MS (M + H)+ = 711.
  • Beispiel 23: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 321 mg (0,60 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 21b) und 182 mg (1,8 mmol) an NMM in 5,8 ml DMF zu 126 mg (0,72 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin und 178 mg (0,60 mmol TPTU in 3 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 15 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 3 aufgearbeitet. TLC: Rf = 0,15 (Methylenchlorid/THF 4 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,5. FAB MS (M + H)+ = 697.
  • Beispiel 24: 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-S-methylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Argonatmosphäre werden 303 mg (0,50 mmol) an 1-[4-(Thiazol-2-yl)-phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 21b) und 165 μl (1,5 mmol) an NMM in 5 ml DMF zu 116 mg (0,60 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-S-methylcystein (Beispiel 5a) und 149 mg (0,50 mmol) TPTU in 2,5 ml DMF unter Eiskühlung gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 4 Stunden gerührt. Das Gemisch wird in Eiswasser gegossen und für 30 min gerührt und 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser, gesättigter NaHCO3 Lösung und 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/Ethanol 20 : 1) und Rühren aus DIPE ergibt die Titelverbindung. TLC: Rf = 0,39 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,0. FAB MS (M + H)+ = 715.
  • Beispiel 25: 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Luft werden 261 mg (1,38 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e), 496 mg (2,58 mmol} EDC und 232 mg (1,72 mmol) HOBT in 7,5 ml DMF gelöst. Nach 15 min werden 0,72 ml (5,17 mmol) TEA und 585 mg (0,86 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid in 3,5 ml DMF zugegeben. Nach 20 Stunden wird das Gemisch durch Eindampfen konzentriert und Wasser und Methylenchlorid werden zu dem Rückstand gegeben. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2 weitere Male mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden mit 10% Zitronensäurelösung, gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Ein Ausfällen aus einer konzentrierten Lösung in Ethylacetat mit DIPE/Hexan ergibt die Titelverbindung.
    HPLC20–100: tRet = 17,5. FAB MS (M + H)+ = 814.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 25a) 4-(Tetrazol-5-yl)benzaldehyd
  • Es werden 20,0 g (0,47 mol) Lithiumchlorid und 20,5 g (0,315 mol) Natriumazid zu 41,2 g (0,315 mol) an 4-Cyanobenzaldehyd (Fluka, Buchs, Schweiz) in 310 ml Methoxyethanol (Fluka, Buchs, Schweiz) gegeben und das Gemisch wird für 6 Stunden zum Sieden erhitzt (Argonatmosphäre). Das gekühlte Reaktionsgemisch wird in 1 Liter Eis/37% HCl 10 : 1 gegossen und zur Vervollständigung der Reaktion sorgfältig gerührt. Eine Filtration und Waschen mit Wasser ergibt die Titelverbindung: Smp. 180–182°C.
    1H NMR (DMSO-d6) δ 10,11 (s, HCO), 8,29 und 8,14 (2d, J = 8, jeweils 2H).
  • 25b) 4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]benzaldehyd
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre wird eine Lösung aus 6,9 g (58 mmol) aus 2-Phenylpropen (Fluka, Buchs, Schweiz) und 22 ml Toluol tropfenweise zu 10 g (57 mmol) aus 4-(Tetrazol-5-yl)benzaldehyd und 1 g (5,7 mmol) Methansulfonsäure in 44 ml siedendem Toluol gegeben und das Gemisch wird dann unter Rückflussbedingungen für 1 Stunde gerührt. Das abgekühlte Reaktionsgemisch wird 2× mit gesättigter NaHCΟ3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert.
    1H NMR (DMSO-d6) δ 10,09 (s, HCO, 8,29 und 8,08 (2d, J = 8, jeweils 2H), 7,33 und 7,17 (2m, 5Η), 2,17 (s, 6Η).
  • 25c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[2-(1-methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenylmethyliden)hydrazon
  • Es werden 13,0 g (42 mmol) an 4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]benzaldehyd und 5,98 g (45,2 mmol) tert-Butylcarbazat in 300 ml Ethanol bei 80°C für 20 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird dann durch Eindampfung zur Hälfte konzentriert. Anschließend werden 420 ml Wasser zugegeben und das Gemisch wird 3× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit gesättigter NaHCΟ3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert: HPLC20–100: tRet = 16,4.
  • 25d) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[2-(1-methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]-benzyl}hydrazin
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 11,6 g (28,5 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[2-(1-methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl-methyliden}hydrazon in 140 ml THF gegeben und 2,32 g (31,3 mmol, 85%) Natriumcyanoborhydrid werden zugegeben. Eine Lösung aus 5,42 g (28,5 mmol) p-Toluolsulfonsäuremonohydrat in 90 ml THF wird hierzu tropfenweise gegeben. Nach 4 Stunden wird das Gemisch durch Eindampfen konzentriert und der Rückstand wird in Ethylacetat aufgenommen und mit gesättigter NaHCΟ3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden 2× mit Ethylacetat extrahiert und die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfen konzentriert. Der Rückstand wird in 250 ml Methanol und 125 ml THF aufgenommen, 37 g K2B4O7 × H2O in 125 ml Wasser werden unter Kühlen zugegeben und das Gemisch wird über Nacht gerührt. Das Gemisch wird teilweise durch Eindampfen mittels eines Rotationsverdampfers konzentriert und mit Methylenchlorid und Wasser verdünnt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert: HPLC20–100: tRet = 16,4.
  • 25e) 1-(4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • σEin Gemisch aus 6,05 g (23,4 mmol) an (2R)-[(1'S)-(Trifluoracetyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran und 9,54 g (23,4 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[2-(1-methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazo-5-yl]benzyl}hydrazin in 200 ml Iso-PrOH wird bei 90°C für 24 Stunden erhitzt. Eine Konzentration durch Eindampfen, Chromatographie (SiO2, Methylenchlorid/Ether 20 : 1) und Kristallisation aus MeOH ergibt die Titelverbindung. Analyse (C34H40N7O4F3) berechnet C 61,16, Η 6,04, N 14,68. Gefunden: C 61,37, Η 6,02, N 14,80.
  • 25f) 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 28 ml einer 1 N K2CΟ3 Lösung tropfenweise bei 70°C zu 1,9 g (2,8 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 29 ml Methanol gegeben und das Gemisch wird für 15 Stunden gerührt. Nach dem Kühlen und der Konzentration durch Eindampfen werden Methylenchlorid und Wasser zugegeben. Die wässrige Phase wird abgetrennt und mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Wasser gewaschen, getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert: HPLC20–100: tRet = 15,1. FAB MS (M + H)+ = 469.
  • 25g) 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Luft werden 868 mg (4,59 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e), 1,64 g (8,58 mmol) EDC und 773 mg (5,72 mmol) HOBT in 24,5 ml DMF gelöst. Nach 15 min werden 2,39 ml (17,2 mmol) TEA und 1,64 g (2,86 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan in 12 ml DMF zugegeben. Nach 20 Stunden wird das Gemisch durch Eindampfen konzentriert und Wasser und Methylenchlorid werden zu dem Rückstand gegeben. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2 weitere Male mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden mit 10% Zitronensäurelösung, gesättigter NaHCΟ3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SΟ4) und durch Eindampfen konzentriert. Ein Verdau aus DIPE ergibt die Titelverbindung.
    HPLC20–100: tRet 18,6. FAB MS (M + H)+ = 743.
  • 25h) 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 1,37 g (1,84 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 64 ml Acetonitril und 64 ml wässrigem 2 N HCl bei Raumtemperatur für 6 Tage gerührt. Das Reaktionsgemisch wird filtriert und das Filtrat wird durch Eindampfen unter einem Hochvakuum bei Raumtemperatur konzentriert und schließlich aus Dioxan unter Bildung der Titelverbindung lyophilisiert: HPLC20–100: tRet= 14,2
    1H MR (CD3OD) unter anderem δ 8,10 (d, J = 8, 2Harom) 7,8 (m, 1Harom) 7,53 (m, 2Harom) 7,32 (m, 3Harom) 7,17 (m, 6Harom) 2,23 (s, 2 H3CTetrazolschutzgruppe).
  • Beispiel 26: 1-[4-(Tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 34,5 ml einer 80% wässrigen H2SO4 Lösung zu 345,6 mg (0,424 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]-phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan unter Eiskühlung gegeben. Nach dem Rühren für 75 min wird das Gemisch in 800 ml Eiswasser gegossen und 3× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 3× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchormatographie (SiO2, Ethylacetat/Ethanol 8 : 1 → 2 : 1) ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,38 (Ethylacetat/Ethanol 2 : 1) HPLC20–100: tRet 12,5. FAB MS (M + H)+ = 696.
  • Beispiel 27: 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan (und 1-Methyl-1H-tetrazolylisomer
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 100 mg (0,144 mmol) an 1-[4-(Tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 1 ml DMF/Dioxan 1 : 1 gelöst und bei 0°C werden 73,2 mg (0,224 mmol) Cs2CO3 und 6,9 μl (0,111 mmol) Methyliodid in 1 ml Dioxan zugegeben. Das Gemisch kann sich über Nacht langsam auf Raumtemperatur erwärmen und ein weiteres Äquivalent Cs2CO3 und Methyliodid werden zugegeben. Nach dem Rühren für weitere 4 Stunden bei Raumtemperatur wird das Gemisch mit Ethylacetat und 1 N Natriumhydroxidlösung verdünnt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Methylenchlorid/Ethylacetat 1 : 1 → 1 : 2) ergibt die reine Titelverbindung A (~3 Teile), gefolgt von 1-[4-(1-Methyl-1H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan (B) (~1 Teil): A: TLC: Rf = 0,26 (Methylenchlorid/Ethylacetat 1 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,2. FAB MS (M + H)+ = 710. B: TLC: Rf = 0,09 (Methylenchlorid/Ethylacetat 1 : 1). HPLC20–100: tRet = 13,3. FAB MS (M + H)+ = 710.
  • Alternative Synthese der Titelverbindung
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 14,56 g (77 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin und 22,87 g (77 mmol) TPTU in 77 ml DMF und 37,3 ml (218 mmol) Hünig Base bei Raumtemperatur für 30 min gerührt. Das Reaktionsgemisch wird dann tropfenweise zu einer eisgekühlten Lösung aus 35,2 mmol an 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexandihydrochlorid in 77 ml DMF gegeben. Nach dem Rühren bei Raumtemperatur für 15 Stunden wird das Reaktionsgemisch teilweise durch Eindampfen konzentriert und der Rückstand (~80 ml) wird in 5 Liter Wasser gegossen. Das Gemisch wird für 30 min gerührt und das rohe Produkt wird dann abfiltriert. Ein Lösen in 90 ml siedendem Ethanol, Zugabe von 600 ml DIPE und anschließendes Abkühlen ergibt die Titelverbindung: Smp. 191–192°C. [α]D = –46° (c = 0,5, Ethanol).
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 27a) 4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)benzaldehyd
  • Unter Eiskühlung wird eine Lösung aus 75,5 g (0,434 mol) an 4-(Tetrazol-5-yl)benzaldehyd (Beispiel 25a) in 550 ml DMF/Dioxan 1 : 1 tropfenweise zu 179,7 g (1,30 mol) K2CO3 in 200 ml DMF/Dioxan 1 : 1 gegeben, das Gemisch wird für 30 Minuten gerührt und dann werden 40 ml (0,64 mol) Methyliodid zugegeben. Das Gemisch wird in einem Eisbad für 3 Stunden gerührt und schließlich für 15 Stunden bei Raumtemperatur. Dann wird das Reaktionsgemisch in 2,8 Liter Eiswasser gegossen und für 10 min gerührt. Die Titelverbindung wird abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Smp. 137–139°C. 1H NMR (CD3OD/CDCl3) d 10,05 (s, HCO, 8,29 und 8,03 (2d, J = 8, jeweils 2H), 4,43 (s, 3H).
  • 27b) N-1-(tert-Butyloxycarbonyl)-N-2-[4-(2-methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-methyliden]hydrazon
  • Es werden 75,0 g (0,40 mol) an 4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)benzaldehyd und 56,4 g (0,426 mol) tert-Butylcarbazat in 1400 ml Iso-PrOH bei 90°C für 24 Stunden gerührt. Dann werden 2,2 Liter Wasser zu dem abgekühlten Reaktionsgemisch gegeben und das Gemisch wird sorgfältig zur Vervollständigung der Reaktion gerührt. Die Titelverbindung wird abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Smp. 195–197°C.
    Analyse (C14H18N6O2) berechnet: C 55,62, H 6,00, N 27,80. Gefunden: C 55,50, H 5,93, N 27,61.
  • 27c) N-1-(tert-Butyloxycarbonyl)-N-2-(4-(2-methyl-2H-tetrazol-5-yl)benzyl]hydrazin
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 30,0 g (99,2 mmol) an N-1-(tert-Butyloxycarbonyl)-N-2-[4-(2-methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-methyliden]hydrazon in 350 ml THF gegeben und 8,79 g (119 mmol, 85%) an NaCNBH3 werden zugegeben. Eine Lösung aus 22,6 g (119 mmol) an p-Toluolsulfonsäuremonohydrat in 175 ml THF wird hierzu tropfenweise (→ Niederschlag) gegeben. Nach 2 Stunden wird der Feststoff abfiltriert, sorgfältig mit Ethylacetat gewaschen und verworfen. Es werden Wasser und Ethylacetat zu dem Filtrat gegeben und die wässrige Phase wird abgetrennt und 2 weitere Male mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden mit gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Die entstehenden Kristalle werden in 417 ml Methanol und 208 ml THF aufgenommen und eine Lösung aus 127 g (415 mmol) an K2B4O7 × 4H2O in 417 ml H2O wird tropfenweise zugegeben (→Schaumbildung). Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, in 2,2 Liter Wasser gegossen und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Das rohe Produkt wird mit dem Material eines zweiten identischen Ansatzes vereinigt und durch Silicagel mittels Methylenchlorid/THF 10 : 1 als Eluent filtriert. Eine Konzentration durch Eindampfen zu einem Restvolumen von etwa 0,1 Liter und die Zugabe von 150 ml DIPE ergibt die kristalline Titelverbindung (die alternativ dazu auch durch katalytische Hydrierung von N-1-(Boc)-N-2-[4-(2-methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-methyliden]hydrazon mit Lindlars Katalysator in Methanol erhalten werden kann): Smp. 100–102°C. TLC: Rf = 0,47 (Methylenchlorid/THF 10 : 1).
    1H NMR (CD3OD) d 8,06 und 7,52 (2d, J = 8, jeweils 2H), 4,42 (s, 3H), 4,00 (s, 2H), 1,44 (s, 9H). HPLC20–100: tRet = 10,2.
  • 27d) 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis(tert-butyloxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 36,33 g (138 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-amino-2'-phenylethyl]oxiran und 38,17 g (125 mmol) an N-1-(tert-Butyloxycarbonyl)-N-2-[4-(2-methyl-2H-tetrazol-5-yl)benzyl]hydrazin in 964 ml Iso-PrOH bei 90°C für 20 Stunden erhitzt. Die kristallisierte Titelverbindung kann aus dem gekühlten Reaktionsgemisch durch Filtration abgetrennt werden. Ein weiteres Produkt kristallisiert aus dem Filtrat nach der Zugabe von 1,2 Liter Wasser: Smp. 175–178°C. TLC: Rf = 0,22 (Methylenchlorid/Ethylacetat 6 : 1). HPLC20–100: tRet 16,9.
  • 27e) 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexandihydrochlorid
  • Es werden 93 ml an 4 N wässriger Chlorwasserstoffsäurelösung zu einer Lösung aus 20,0 g (35,2 mmol) an 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butyloxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 279 ml THF gegeben. Das Gemisch wird bei 50°C für 8 Stunden gerührt und dann durch Eindampfen (Raumtemperatur, Hochvakuum) vorsichtig konzentriert. Der ölige Rückstand wird 3 weitere Male in Ethanol aufgenommen und wieder durch Eindampfen unter Bildung der kristallinen Titelverbindung konzentriert. Um die analytischen Daten abzuschließen wird 1 g des rohen Produkts in 6 ml heißem Iso-PrOH gerührt, 6 ml DIPE werden zugegeben und ein Abkühlen und eine Trennung durch Filtration werden ausgeführt. Smp. 227–230°C. HPLC20–100: tRet = 7,4.
    Analyse (C19H25N7O × 2HCl (+0,20H2O)) berechnet C 51,40, H 6,22, N 22,08, Cl 15,97, H2O 0,81. Gefunden: C 51,50, H 6,33, N 22,28, Cl 15,88, H2O 0,80.
  • Beispiel 28: 1-(4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxcarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Luft werden 261 mg (1,38 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 496 mg (2,58 mmol) EDC und 232 mg (1,72 mmol) HOBT in 7,5 ml DMF gelöst. Nach 15 min werden 0,72 ml (5,17 mmol) TEA und 585 mg (0,86 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenyl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 25h) in 3,5 ml DMF zugegeben. Nach 20 Stunden wird das Gemisch wie unter Beispiel 25i beschrieben, aufgearbeitet. Ein Ausfällen mit DIPE aus einer konzentrierten Lösung in Methylenchlorid ergibt die Titelverbindung. HPLC20–100: tRet 17,5. FAB MS (M + H)+ = 814.
  • Beispiel 29: 1-[4-(Tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxcarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Es werden 35 ml einer 80% wässrigen H2SO4 Lösung zu 354 mg (0,435 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenl}-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxcarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan unter Eiskühlung gegeben. Nach dem Rühren für 75 min wird das Gemisch analog zu Beispiel 26 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet. HPLC20–100: tRet = 12,6. FAB MS (M + H)+ = 696.
  • Beispiel 30: 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 72 mg (0,103 mmol) an 1-[4-(Tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)-amino]-6-phenyl-2-azahexan in 0,5 ml DMF gelöst und bei 0°C werden 71 mg (0,217 mmol) Cs2CO3 und 6,9 μl (0,111 mmol) Methyliodid in 1 ml Dioxan zugegeben. Das Gemisch kann sich langsam auf Raumtemperatur über Nacht erwärmen und wird dann mit Ethylacetat und 1 N Natriumhydroxidlösung verdünnt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und 2× mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden 2× mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung A konzentriert, die zusätzlich ~20% 1-[4-(1-Methyl-1H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan enthält. (B): HPLC20–100A: tRet = 14,3. HPLC20–100. B: tRet = 13,3. FAB MS (M + H)+ = 710.
  • Beispiel 31: 1-[4-(2-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Luft werden 128 mg (0,67 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e), 243 mg (1,27 mmol) EDC und 114 mg (0,84 mmol) HOBT in 2 ml DMF gelöst. Nach 15 min werden 0,35 ml (2,5 mmol) TEA und 286 mg (0,42 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenl-ethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenl}-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid in 1,5 ml DMF zugegeben. Nach 20 Stunden wird das Gemisch wie unter Beispiel 25 beschrieben, aufgearbeitet. Eine Chromatographie (SiO2, Ethylacetat/Toluol/Methylenchlorid 2 : 1 : 1) ergibt die Titelverbindung. TLC: Rf = 0,22 (methylenchlorid/Ethylacetat 1 : 1), HPLC20–100: tRet 17,3. FAB MS (M + H)+ = 814.
  • Die Ausgangsmaterialien werden folgendermaßen erhalten:
  • 31a) 1-(4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)- amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Luft werden 270 mg (1,43 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-iso-leucin, 513 mg (2,67 mmol) EDC und 241 mg (1,78 mmol) an HOBT in 7,8 ml DMF gelöst. Nach dem Rühren für 15 Minuten werden 0,75 ml (5,4 mmol) TEA und 510 mg (0,89 mmol) an 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 25f) in 3,7 ml DMF zugegeben. Nach 20 Stunden wird das Gemisch analog zu Beispiel 25 g unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet: HPLC20–100: tRet = 18,5, FAB MS (M + H)+ = 743.
  • 31b) 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl)-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 317 mg (0,43 mmol) 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 15 ml Acetonitril und 15 ml an 2 N HCl bei 50°C für 20 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 25 h unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet: HPLC20–100: tRet = 14,4.
  • Beispiel 32: 1-[4-(Tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 26 wird 1-{4-[2-(1-Methyl-1-phenylethyl)-2H-tetrazol-5-yl]phenyl}-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan mit 80% Schwefelsäure unter Bildung der Titelverbindung von den Schutzgruppen befreit.
  • Beispiel 33: 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 30 wird 1-[4-(Tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in DMF/Dioxan mit Cs2CO3 und Methyliodid methyliert.
  • Beispiel 34: 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 54 mg (0,28 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin und 84 mg (0,28 mmol) an TPTU in 1 ml DMF und 94 μl (0,85 mmol) an NMM bei Raumtemperatur für 10 Minuten gerührt. Es werden dann 175 mg (0,283 mmol) an 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-amino-2-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid in 2 ml DMF hierzu gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, um die Reaktion zu vervollständigen. Das Reaktionsgemisch wird in 40 ml Wasser gegossen und dreimal mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen werden durch Baumwolle filtriert, durch Eindampfen konzentriert und chromatographiert (SiO2, Methylenchlorid l Methanol 25 : 1): TLC: Rf = 0,48 (Methylenchlorid/Methanol 19 : 1), HPLC20–100: tRet = 11,8, FAB MS (M + H)+ = 752.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 34a) N-1-(tert-Butyloxycarbonyl)-N-2-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]hydrazin
  • Unter Ausschluss von Luft werden 10,0 g (52,8 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin, 11,1 g (58 mmol) an EDC und 7,85 g (58 mmol) HOBT in 130 ml Ethylacetat gegeben und 7,0 ml (63 mmol) an NMM werden zugegeben. Nach 30 Minuten werden 7,69 g (58 mmol) tert-Butylcarbazat zugegeben und das Gemisch wird dann bei Raumtemperatur für 16 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 300 ml Ethylacetat verdünnt und mit gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert. Die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert: 1H NMR (CD3OD) δ 3,98 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 1,47 und 1,03 (2s, 2 × 9H).
  • 34b) [N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]hydrazin
  • 52,8 mmol an N-1-(tert-Butyloxycarbonyl)-N-2-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]hydrazin werden in 100 ml an 4 N HCl/Dioxan gelöst und bei Raumtemperatur für 18 Stunden gerührt. Die Suspension wird durch Eindampfen konzentriert, der Rückstand wird in gesättigter NaHCO3 Lösung aufgenommen und viermal mit großen Mengen an Methylenchlorid extrahiert. Eine Filtration der organischen Phasen durch Baumwollwatte und eine Konzentrierung durch Eindampfen ergibt die Titelverbindung:
    1H NMR (CD3OD) δ 3,89 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 0,99 (s, 9H).
  • 34c) N-1-[N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]-N-2-[4-(tetrazol-5-yl)phenylmethyliden]hydrazon
  • Eine Lösung aus 3,0 g (14,8 mmol) an [N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]hydrazin und 2,57 g (14,8 mmol) an 4-(Tetrazol-5-yl)benzaldehyd (Beispiel 25a) in 30 ml an iso-PrOH wird für 18 Stunden zu Sieden erhitzt. Das Gemisch wird abgekühlt, 100 ml Wasser werden zugegeben und die ausgefällte Titelverbindung wird abfiltriert: 1H NMR (CD3OD) δ 8,23 (s, 1H), 8,15–7,9 (m, 4H), 4,08 (s, 1H), 3,67 (s, 3H), 1,06 (s, 9H).
  • 34d) N-1-[N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]-N-2-[4-(2-tert-butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenylmethyliden]hydrazon
  • In einem Autoklaven werden 3,0 g (8,3 mmol) an N-1-[N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]-N-2-[4-(tetrazol-5-yl)phenylmethyliden]hydrazon, 1,2 g Isobuten und 54 μl Methansulfonsäure in 25 ml Toluol für 1 Stunde auf 110°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit gesättigter NaHCO3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert, die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 1 : 1) ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,22 (Hexan/Ethylacetat 1 : 1), HPLC20–100: tRet = 11,1, FAB MS (M + H)+ = 416.
  • 34e) N-1-[N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]-N-2-[4-(2-tert-butyl-2H-tetrazol-5-yl)benzyl]hydrazin
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 2,00 g (4,81 mmol) an N-1-[N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]-N-2-[4-(2-tert-butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-methyliden]hydrazon in 9 ml THF gelöst und 317 mg (4,8 mmol, 95%) an NaCNBH3 werden zugegeben. Eine Lösung aus 915 mg (4,8 mmol) an p-Toluol sulfonsäuremonohydrat in 9 ml THF wird hierzu tropfenweise gegeben. Nach 18 Stunden wird Ethylacetat zugegeben und das Gemisch wird mit gesättigter NaHCO3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden weitere zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Der Rückstand wird in 20 ml THF und 20 ml Wasser aufgenommen, 6,18 g (20 mmol) K2B4O7 × 4H2O werden zugegeben und das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit gesättigter NaHCO3 Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden zweimal mit Ethylacetat extrahiert, die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 1 : 2) ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,28 (Hexan/Ethylacetat 1 : 2).
    1H NMR (CD3OD) δ 8,07 und 7,53 (2d, J = 8, jeweils 2H), 4,03 (s, 2H), 3,84 (s, 1H), 3,64 (s, 3H), 1,81 und 0,92 (2s, jeweils 9H).
  • 34f) 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-N-(tert-butyloxycarbonyl)amino-2-N-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]amino-6-phenyl-2-azahexan
  • 737 mg (2,80 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-Amino-2'-phenylethyl]oxiran und 1,17 g (2,80 mmol) an N-1-[N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]-N-2-[4-(2-tert-butyl-2H-tetrazol-5-yl)benzyl]hydrazin werden in 15 ml an iso-PrOH für 16 Stunden bei 90°C erhitzt. Bei der Zugabe von 100 ml Wasser kristallisiert das Produkt und kann abfiltriert werden. Eine Umkristallisation durch die Zugabe von DIPE/Hexan zu einer konzentrierten Lösung in Methylenchlorid bei 0°C ergibt die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,34 (CH2Cl2/MeOH 30 : 1), HPLC20–100: tRet = 12,5.
  • 34A) 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-amino-2-N-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 200 mg (0,293 mmol) an 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-N-(tert-butyloxycarbonyl)amino-2N-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]amino-6-phenyl-2-azahexan in 2,3 ml THF gelöst, 1,6 ml wässrige 2 N HCl werden zugegeben und das Gemisch wird für 8 Stunden auf 50°C erhitzt. Die Reaktionslösung wird durch Eindampfen konzentriert, der Rückstand wird mehrmals in Ethanol aufgenommen und erneut durch Eindampfen konzentriert (→ Titelverbindung): TLC: Rf = 0,08 (CH2Cl2/MeOH 30 : 1), HPLC20–100: tRet = 9,9, 1H NMR (CD3OD) δ 8,03 und 7,50 (2d, J = 8, jeweils 2Η), 7,32 (m, 5H), 4,18 und 3,91 (2d, J = 4, 2H), 3,80 (m, 1Η), 3,68 (s, 1H), 3,58 (s, 3Η), 3,57 (m, 1H), 3,3–2,9 (m, 4H), 1,81 und 0,75 (2s, jeweils 9Η).
  • Beispiel 35: 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 54 mg (0,308 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin und 92 mg (0,308 mmol) an TPTU in 1 ml DMF und 101 μl (0,91 mmol) an NMM werden bei Raumtemperatur für 10 Minuten gerührt. 190 mg (0,308 mmol) an 1-[4-(2-tert-Butyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-amino-2-N-[N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl]amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 34g) in 2 ml DMF werden zugegeben und das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, um die Reaktion zu vervollständigen. Das Reaktionsgemisch wird mit Methylenchlorid verdünnt und mit Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden zweimal mit Methylenchlorid extrahiert, die organischen Phasen werden durch Baumwollwatte filtriert, durch Eindampfen konzentriert und chromatographiert (SiO2, Methylenchlorid 1 Methanol 30 : 1): TLC: Rf = 0,21 (Methylenchlorid 1 Methanol 19 : 1), FAB MS (M + H)+ = 738.
  • Beispiel 36: 1-[4-(2-Methyl-2Η-tetrazol-5-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Die Titelverbindung kann analog zu einem der oben vorher und später erwähnten Beispiele hergestellt werden.
  • Beispiel 37: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Feuchtigkeit werden 455 mg (2,6 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 940 mg (4,9 mmol) an EDC und 405 mg (3 mmol) an HOBT in 10 ml DMF gegeben und auf 40°C erhitzt. 1,1 ml (7,9 mmol) an TEA werden zugegeben und das Gemisch wird für weitere 15 Minuten gerührt. 500 mg (0,98 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid werden zugegeben und das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird ausgiebig durch Eindampfen unter Hochvakuum konzentriert, der Rückstand wird in Methylenchlorid gelöst und nacheinander mit Natriumcarbonatlösung (1×), Phosphatpuffer pH = 7 (2×) und Kochsalzlösung gewaschen. Nach der Entfernung des Lösemittels wird der Rückstand auf Silicagel chromatographiert (Eluent : Methylenchlorid/Methanol 15 : 1). Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden konzentriert und die Titelverbindung wird mit DIPE gefällt. Das Produkt kann aus Dioxan lyophilisiert werden. HPLC20–100: tRet = 10,06, FAB MS (M + H)+ = 677. 1Η NMR (CD3ΟD, 200 MHz) unter anderem: 8,58/m (1Η), 7,78 und 7,50/jeweils d, J = 5 (2 × 2H), 8,0–7,73/m (2H), 7,33/m (1Η), 7,30–7,05/m (5H), 3,62 und 3,60/jeweils s (2 × 3Η), 1,85 und 1,68/jeweils m (2 × 1H), 0,76/t, J = 4 (6Η), 0,65 und 0,58/jeweils d, J = 4 (2 × 3Η).
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 37a) 4-Brombenzaldehyddimethylacetal
  • 21,1 g (114 mmol) an 4-Brombenzaldehyd und 20 ml (182 mmol) an Trimethylorthoformiat (beide von Fluka, Buchs, Schweiz) werden in 35 ml Methanol gelöst und 0,65 g (3,4 mmol) an p-Toluolsulfonsäuremonohydrat werden bei Raumtemperatur zugegeben (exotherme Reaktion). Das Reaktionsgemisch wird bei Raumtemperatur für 20 Stunden unter Stickstoff gerührt. Die Säure wird dann mit 0,62 ml an 30% Natriummethanolatlösung in Methanol (3,4 mmol) neutralisiert, das Reaktionsgemisch wird mittels eines Rotationsverdampfers konzentriert und der Rückstand wird destilliert. Die Titelverbindung wird in Form einer farblosen Flüssigkeit erhalten. TLC: Rf = 0,58 (Hexan/ Ethylacetat 2 : 1) Sdp. 90–92°C (4 mbar). 1H NMR (CDCl3, 200 MHz): 7,50 und 7,32/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 5,36/s (1H), 3,31/s (6H).
  • 37b) 4-(Pyridin-2-yl)benzaldehyd
  • 6,93 g (29,9 mmol) an 4-Brombenzaldehyddimethylacetal in 40 ml THF werden tropfenweise zu einer warmen (40°C bis 50°C) Suspension aus 0,8 g (31,6 mmol) Magnesiumspänen und einer kleinen Menge Iod in 10 ml THF gegeben. Das Reaktionsgemisch wird auf 65°C erhitzt und bei dieser Temperatur für etwa 30 Minuten gerührt. Das Gemisch kann sich auf Raumtemperatur abkühlen und das Grignard-Reagenz wird tropfenweise zu einer Lösung aus 4,46 g (28,2 mmol) an 2-Brompyridin (Fluka, Buchs, Schweiz) und 0,4 g (0,74 mmol) DPPP (Fluka, Buchs, Schweiz) in 100 ml THF gegeben (leicht exotherme Reaktion). Nachdem die tropfenweise Zugabe vollständig ist wird das Reaktionsgemisch unter Rückfluss für 4 Stunden gekocht und kann dann abkühlen, wonach 100 ml Wasser zugegeben werden. Das Gemisch wird mittels eines Rotationsverdampfers auf etwa 50 ml konzentriert, mit Ethylacetat und mit 0,1 N Chlorwasserstoffsäure (3×) extrahiert. Die vereinigten HCl Extrakte werden bei Raumtemperatur für 20 Minuten gerührt, mit konzentrierter Ammoniaklösung basisch gemacht und mit Methylenchlorid extrahiert. Nach der Entfernung des Lösemittels wird der Rückstand auf Silicagel (Hexan/Ethylacetat 2 : 1) chromatographiert. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden konzentriert, wobei die gewünschte Titelverbindung spontan auskristallisiert.
    TLC: Rf = 0,22 (Hexan/Ethylacetat 2 : 1). HPLC20–100: tRet = 6,08. 1H NMR (CDCl3, 200 MHz): 8,73/d, J = 5 (2H), 8,16 und 7,97/jeweils d (2 × 2H), 7,80/d, J = 4 (2H), 7,3/m, (1H).
  • 37c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Eine Lösung aus 2 g (1,05 mmol) an 4-(Pyridin-2-yl)benzaldehyd und 1,37 g (1 mmol) tert-Butylcarbazat (Fluka, Buchs, Schweiz) in 30 ml Ethanol wird bei 80°C für 5 Stunden gerührt (nach 4 Stunden wird ein weiteres 0,05 Äquivalent an tert-Butylcarbazat zugegeben). Das Reaktionsgemisch kann abkühlen und wird mit Wasser verdünnt, wobei die gewünschte Titelverbindung auskristallisiert.
    TLC: Rf = 0,51 (Methylenchlorid/Methanol 15 : 1). HPLC20–100: tRet = 8,92. 1H NMR (CDCl3, 200 MHz): 8,68/m (1H), 8,21/s (1H), 7,98/d, J = 9 (2H, Teil A des aromatischen AB Systems), 7,85/s (1H), 7,8–7,6 (4H), 7,22/m (1H), 1,53/s (9H).
  • 37d) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-2-yl)benzyl]hydrazin
  • 2 g (6,7 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon und 0,2 g an 5% Pd/C in 30 ml Methanol werden unter Normaldruck bei Raumtemperatur für 8 Stunden hydriert. Der Katalysator wird abfiltriert und mit Methanol gewaschen, wonach das Lösemittel entfernt wird. Die Titelverbindung wird in Form eines farblosen, viskosen Öls erhalten, das sich beim Trocknen unter einem Hochvakuum verfestigt. TLC: Rf = 0,46 (Methylenchlorid/Methanol 15 : 1). HPLC20–100: tRet = 6,71.
    1H NMR (CDCl3, 200 MHz) unter anderem 8,69/m (1H), 7,96 und 7,45/jeweils d, J = 2 (2 × 2H), 7,8–7,65/m (2H), 7,22/m (1H), 4,06/s (2H), 1,47/s (9H).
  • 37e) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Lösung aus 1,06 g (4 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-Amino-2'-phenylethyl]oxiran und 1,2 g (4 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-2-yl)benzyl]hydrazin in 20 ml iso-PrOH wird für 16 Stunden bei 80°C gerührt. Nach dem Abkühlen wird die Reaktionslösung mittels eines Rotationsverdampfers eingedampft, wobei die Titelverbindung als farbloser Niederschlag ausfällt. Es dampfers eingedampft, wobei die Titelverbindung als farbloser Niederschlag ausfällt. Es kann weiteres Produkt durch die Zugabe von Wasser zur Mutterlauge ausgefällt werden.
    TLC: Rf = 0,53 (Methylenchlorid/Methanol 15 : 1). HPLC20–100: tRet = 13,15. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 8,57/s (1H), 7,85 und 7,48/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 8,0–7,7/m (2H), 7,33/m (1H), 7,3–7,0/m (6H), 3,91/s (2H), 3,82–3,55/m (2H), 3,05–2,45/m (4H), 1,31/s (18H).
  • 37f) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexanhydrachlorid
  • 10 ml DMF werden zu einem Gemisch gegeben, das aus 1,43 g (2,54 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 30 ml an 4 N Chlorwasserstoff in Dioxan (Aldrich) (exotherme Reaktion) besteht und das Gemisch wird für 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann wird das Lösemittel entfernt, Toluol wird dreimal zum Rückstand gegeben und das Gemisch wird durch Eindampfen konzentriert. Der Rückstand wird in heißem Methanol gelöst und die Titelverbindung wird in Form eines harzartigen Niederschlags mit DIPE/Hexan gefällt. Beim Trocknen unter einem Hochvakuum erhält man einen voluminösen Schaum.
    HPLC5-60: tRet = 9,87, 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 8,78/d, J = 5 (1H), 8,72/dxt, J = 2,5 und 7,5 (1H), 8,35/d, J = 7,5 (1H), 8,1/dxd, J = jeweils 7,5 (1H), 8,02 und 7,72/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 7,45–7,15/m (5H), 4,27 und 4,15/jeweils d, J = 12,5 (2 × 2H).
  • Beispiel 38: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 wird die Titelverbindung nach der Aufarbeitung erhalten aus 300 mg (0,59 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 37f), 446 mg (2,36 mmol) an N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin, 679 mg (3,54 mmol) an EDC, 398 mg (2,95 mmol) an HOBT und 0,82 ml {5,9 mmol) TEA in 10 ml DMF. TLC: Rf = 0,19 (Methylenchlorid/Methanol 15 : 1). HPLC20–100: tRet = 11,68. FAB MS (M + H)+ = 705.
  • Beispiel 39: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 erhält man die Titelverbindung aus 550 mg (1,52 mmol) an 1-[4-(Pyridin-3-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan, 691 mg (3,94 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 1,45 g (7,59 mmol) an EDC, 614 mg (4,55 mmol) an HOBT und 1,06 ml (7,59 mmol) an TEA in 10 ml DMF. (Im Gegensatz zur Beschreibung in Beispiel 37 wird die organische Phase mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung, 10% Citronensäure und Kochsalzlösung gewaschen.) TLC: Rf = 0,4 (Methylenchlorid/Methanol 15 : 1). HPLC20–100: tRet = 9,91, FAB MS (M + H)+ = 677.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 39a) 4-(Pyridin-3-yl)benzaldehyd
  • Analog zu Beispiel 37 b erhält man die Titelverbindung aus 6,39 g (29,9 mmol) an 4-Brombenzaldehyddimethylacetal (hergestellt gemäß Beispiel 37a), 0,8 g (31,6 mmol) Magnesiumspäne, 2,77 ml (28,2 mmol) an 3-Brompyridin (Fluka, Buchs, Schweiz) und 0,4 g (0,74 mmol) an DPPP in 150 ml THF. HPLC20–100: tRet = 5,50. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz): 10,04/s (1H), 8,87/d, J = 2,5 (1H), 8,58/dxd, J = etwa 1,5 und 5 (1H), 8,17/m unter anderem J = 7,5 (1H), 8,05 und 7,88/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 7,56/dxd, J = 7,5 und 5 (1H).
  • 39b) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-3-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Analog zu Beispiel 37 c erhält man die Titelverbindung aus 4,11 g (22,4 mmol) an 4-(Pyridin-3-yl)benzaldehyd und 2,82 g (21,3 mmol) an tert-Butylcarbazat (Fluka, Buchs, Schweiz) in 60 ml Ethanol. HPLC20–100: tRet = 8,88. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) 8,83/d, J = 2,5 (1H), 8,53/d, J = 5 (1H), 8,14/m unter anderem J = 7,5 (1H), 7,97/s (1H), 7,85 und 7,71/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 7,53/dxd, J = 7,5 und 5 (1H).
  • 39c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-3-yl)benzyl]hydrazin
  • Analog zu Beispiel 37 d wird die Titelverbindung aus 5,03 g (16,9 mmol) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-3-yl)phenyl]methyliden}hydrazon und 0,5 g an 5% Pd/C in 120 ml Methanol erhalten, wobei die Titelverbindung weiter in ungereinigter Form verarbeitet wird. HPLC20–100: tRet = 6,36. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 7,63 und 7,51/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 3,97/s (2H), 1,43/s (9H).
  • 39d) 1-[4-(Pyridin-3-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37e erhält man die Titelverbindung aus 3,82 g (12,8 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-3-yl)benzyl]hydrazin und 3,36 g (12,8 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-Amino-2'-phenylethyl]oxiran nach 14 Stunden bei 80°C. Es wird eine Reinigung durch Chromatographie auf Silicagel (Hexan/Ethylacetat 1 : 2) ausgeführt. TLC: Rf = 0,27 (Hexan/Ethylacetat 1 : 2). HPLC20–100: tRet = 13,0. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 7,62 und 7,52/jeweils d, J = 9 (2 × 2H), 7,4–7,0/m (5H), 3,93/s (2H), 1,33 und 1,31/jeweils s (2 × 9H).
  • 39e) 1-[4-(Pyridin-3-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan
  • 1 g (1,88 mmol) an 1-[4-(Pyridin-3-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan wird in 10 ml Ameisensäure gelöst und die Lösung wird bei Raumtemperatur für 5 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird durch Eindampfung konzentriert, der Rückstand wird in Methylenchlorid gelöst und die organische Phase wird mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen. Nach der Entfernung des Lösemittels erhält man die Titelverbindung in Form eines braunen Öls, das ohne weitere Reinigung verarbeitet wird.
  • Beispiel 40: 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 erhält man die Titelverbindung aus 473 mg (0,75 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid, 263 mg (1,5 mmol) an N-methoxycarbonyl-(L)-valin, 575 mg (3 mmol) an EDC (Fluka, Buchs, Schweiz), 405 mg (3 mmol) an HOBT (Fluka) und 1,7 ml (12 mmol) an TEA in 10 ml DMF. Die Aufarbeitung wird analog zu Beispiel 40 f mittels Ethylacetat anstelle von Methylenchlorid ausgeführt.
  • Die Verbindung kann aus Dioxan lyophilisiert werden. TLC: Rf = 0,28 (Ethylacetat). HPLC20–100: tRet 13,11, FAB MS (M + H)+ = 678.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 40a) 4-(Pyrazin-2-yl)benzaldehyd [siehe EP 0 344 577 A ]
  • 50 ml an THF werden über 2,72 g (112 mmol) Magnesiumspäne gegossen, die mit Hexan entfettet und mit einer kleinen Menge Iod aktiviert wurden, und das Gemisch wird auf 50°C erhitzt. Eine Lösung aus 4-Brombenzaldehyddimethylacetal (hergestellt gemäß Beispiel 37a) in 200 ml THF wird tropfenweise zum Gemisch innerhalb eines Zeitraums von etwa 30 Minuten gegeben. Anfänglich ist die Reaktion exotherm und gegen Ende der tropfenweisen Zugabe wird das Reaktionsgemisch auf etwa 60°C erhitzt. Nach dem Rühren bei 60°C für weitere 30 Minuten kann sich das Gemisch auf Raumtemperatur abkühlen und wird von nicht reagiertem Magnesium abdekantiert, die entstehende Lösung, die das Grignardreagenz enthält, wird tropfenweise bei Raumtemperatur über einen Zeitraum von 20 Minuten zu einer Suspension aus 11,45 g (100 mmol) an 2-Chlorpyrazin (Fluka, Buchs, Schweiz) und 1,6 g DPPP (Aldrich, Buchs, Schweiz) in 500 ml THF gegeben (leicht exotherme Reaktion). Das Gemisch wird dann bei Raumtemperatur für 19 Stunden gerührt. Dann werden 250 ml Wasser zum Reaktionsgemisch gegeben und das Gemisch wird für 10 Minuten gerührt. Das THF wird im Vakuum entfernt, 300 ml Ethylacetat und 100 ml an 2 N Chlorwasserstoffsäure werden zur verbleibenden Emulsion gegeben und das Gemisch wird für 5 Minuten gerührt. Nach der Trennung der organischen Phase wird die Phase zweimal mehr mit jeweils 100 ml an 0,5 N Chlorwasserstoffsäure für 5 Minuten gewaschen. Die Ethylacetatphase wird nacheinander mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen und wird konzentriert. Die Titelverbindung wird in Form von hellbraunen Kristallen erhalten. Eine Umkristallisation aus Methylenchlorid/Hexan wird ausgeführt. Smp: 86–88°C. TLC: Rf = 0,17 (Hexan/Ethylacetat 2 : 1). HPLC20–100: tRet = 11,06. 1H NMR (CDCl3, 200 MHz): 10,12/s (1H), 9,14/d, J ≤ 1 (1H), 8,70/d, J ≤ 1 (1H), 8,60/t J ≤ 1 (1H), 8,22 und 8,03/jeweils d, J = 9 (2 × 2H).
  • 40b) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyrazin-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Analog zu Beispiel 37 c erhält man die Titelverbindung aus 12,4 g (67,3 mmol) an 4-(Pyrazin-2-yl)benzaldehyd und 8,5 g (64 mmol) an tert-Butylcarbazat (Fluka, Buchs, Schweiz) in 170 ml Ethanol nach 5 Stunden bei 80°C, wobei die Verbindung spontan auskristallisiert. Smp. 190–198°C. TLC: Rf = 0,47 (Ethylacetat). HPLC20–100: tRet = 13,41.
  • 40c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyrazin-2-yl)benzyl]hydrazin
  • Analog zu Beispiel 37 d wird die Titelverbindung in Form eines Öls aus 0,6 g (2 mmol) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyrazin-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon und 0,15 g an 5% Pd/C in 15 ml THF nach einer Hydrierung für 13 Stunden bei Raumtemperatur erhalten. Die Titelverbindung kristallisiert spontan bei der Behandlung mit Ether aus. Eine Umkristallisation aus Ethylacetat/Petrolether wird ausgeführt. Smp. 110–111°C. HPLC20–100: tRet = 9,62. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz): 9,09/s (1H), 8,65/t, J ≤ 1 (1H), 8,51/t, J ≤ 1 (1H), 8,05 und 7,53/jeweils d, J = 5 (2 × 2H), 4,00/s (2H), 1,43/s (9H).
  • 40d) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 e erhält man die Titelverbindung in Form beiger Kristalle aus 10,5 g (35 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyrazin-2-yl)benzyl]hydrazin und 11,7 g (45 mmol) an (2R)-[(1'S)-(Trifluoracetyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran ( EP 0 521 827 A , Beispiel 16d) in 150 ml Isopropanol, Smp. 194–196°C. TLC: Rf = 0,38 (Hexan/Ethylacetat 1 : 2) HPLC20–100: tRet = 16,27.
  • 40e) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan
  • 11,75 g (21 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)(trifluoracetyl)amino-6-phenyl-2-azahexan werden in 500 ml Methanol bei 60°C gelöst und 105 ml einer 1 M K2CO3 Lösung in Wasser werden zugegeben. Das Gemisch wird für 3 Stunden bei 75°C gerührt, das Methanol wird verdampft und der Rückstand wird mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wird jeweils einmal mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen und konzentriert. Die Titelverbindung wird in Form von orange-braunen Kristallen erhalten, die aus Ethylacetat/Petrolether umkristallisiert werden können. Smp. 146–148°C. TLC: Rf = 0,08 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 11,23.
  • 40f) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 erhält man die Titelverbindung aus 3,2 g (7 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan, 254 g (14 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 5,4 g (28 mmol) an EDC (Fluka, Buchs, Schweiz), 3,8 g (28 mmol) an HOBT (Fluka, Buchs, Schweiz) und 7,1 g (70 mmol) an TEA in 130 ml DMF. Die Reaktion wird durch Entfernen des DMF, Aufnehmen des Rückstands in Methylenchlorid und Waschen der organischen Phase nacheinander mit Wasser, gesättigter Hydrogencarbonatlösung/Wasser 1.1, 10% Citronensäure, Wasser und Kochsalzlösung aufgearbeitet. Die Verbindung kristallisiert nach einer Konzentrierung aus. Smp. 218–220°C. TLC: Rf = 0,29 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 15,11.
  • 40g) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • 3,4 g (5,5 mmol) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 100 ml an 4 N Chlorwasserstoff in Dioxan (Aldrich) und 10 ml Methanol werden für 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösemittel werden entfernt, Dioxan wird zweimal zum Rückstand gegeben und verdampft. Die Titelverbindung wird in Form eines viskosen Öls erhalten, wobei die Verbindung bei einer Behandlung mit Ether auskristallisiert. Smp. 194–198°C. TLC: Rf = 0,35 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 9,77.
  • Beispiel 41: 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino]-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • 142 mg (0,75 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin und 223 mg (0,75 mmol) an TPTU in 3 ml DMF werden bei Raumtemperatur für 10 Minuten gerührt und dann wird eine Lösung aus 473 mg (0,75 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 40g) und 0,33 ml NMM in 3 ml DMF zugegeben. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Aufarbeitung wird durch die langsame, tropfenweise Zugabe des Reaktionsgemisches zu 100 ml Wasser, einem Rühren bei Raumtemperatur für 20 Minuten und einer Isolierung des entstehenden Niederschlags durch Filtration ausgeführt. Der Niederschlag wird mit Wasser gewaschen und in Methylenchlorid aufgenommen, die organische Phase wird nacheinander mit Wasser, gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung/Wasser 1 : 1, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Nach der Entfernung des Lösemittels wird der Rückstand in Ether verdaut, wobei die Titelverbindung in Form eines farblosen Pulvers erhalten wird. Die Verbindung kann aus Dioxan lyophilisiert werden. TLC: Rf = 0,28 (Ethylacetat). HPLC20–100: tRet = 13,78. FAB MS (M + H)+ = 692.
  • Beispiel 42: 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 41 wird die Titelverbindung aus 142 mg (0,75 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e), 223 mg (0,75 mmol) TPTU in 3 ml DMF (Lösung A) und 435 mg (0,75 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 40g) und 0,33 ml NMM in 3 ml DMF (Lösung B) erhalten, wobei die Titelverbindung spontan durch die Verdampfung des Lösemittels auskristallisiert. Die Verbindung kann aus Dioxan lyophilisiert werden. TLC: Rf = 0,46 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 13,85. FAB MS (M + H)+ = 692.
  • Beispiel 43: 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 41 wird die Titelverbindung nach einer Aufarbeitung aus 132 mg (0,7 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-iso-leucin, 208 mg (0,7 mmol) TPTU in 3 ml DMF (Lösung A) und 400 mg (0,7 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 44b) und 0,31 ml (2,8 mmol) NMM in 3 ml DMF erhalten, wobei die Titelverbindung in kristalliner Form durch einen Verdau mit Ether erhalten wird. Smp. 211–217°C. TLC: Rf = 0,41 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 14,49. FAB MS (M + H)+ = 706.
  • Beispiel 44: 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 41 wird die Titelverbindung aus 175 mg (1 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 297 mg (1 mmol) TPTU (Fluka, Buchs, Schweiz) in 4 ml DMF (Lösung A) und 571 mg (1 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-iso-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid und 0,44 ml (4 mmol) an NMM in 4 ml DMF (Lösung B) erhalten, wobei die Titelverbindung durch einen Verdau mit Ether in kristalliner Form erhalten werden kann. Smp. 205–208°C. HPLC20–100: tRet = 13,87, FAB MS (M + H)+ = 692.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 44a) 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 erhält man die Titelverbindung aus 2,3 g (5 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 40e), 1,9 g (10 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 3,8 g (20 mmol) an EDC, 2,7 g (20 mmol) an HOBT und 5,1 g (50 mmol) an TEA in 90 ml DMF. Die Aufarbeitung wird ausgeführt, wie dies in Beispiel 40f beschrieben ist. Die Verbindung kann aus Ethylacetat umkristallisiert werden. TLC: Rf = 0,58 (Methylenchlorid/Methanol 10 : 1). HPLC20–100: tRet = 15,68. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 9,08/s (1H), 8,65/bs (1H), 8,51/t, J ≤ 1 (1H), 8,02 und 7,52/jeweils d, J = 5 (2 × 2H), 7,3–7,1/m (5H), 3,92/s (2H), 3,62/s (3H), 1,28/s (9H), 0,8/t, J = 5 (3H), 0,73/d, J = 4 (3H).
  • 44b) 1-(4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Analog zu Beispiel 40 g wird die Titelverbindung aus 2,1 g (3,3 mmol) an 1-[4-(Pyrazin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(tert-butoxycarbonyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 60 ml an 4 N Chlorwasserstoff in Dioxan und 10 ml Methanol erhalten, wobei die Titelverbindung mit Ether zur Kristallisation gebracht wird. Smp. 200–201°C. HPLC20–100: tRet = 10,52.
  • Beispiel 45: 1-[4-(Thiophen-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 wird die Verbindung aus 500 mg (1,36 mmol) an 1-[4-(Thiophen-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan, 620 mg (3,54 mmol) N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 1,3 g (6,8 mmol) EDC, 551 mg (4,08 mmol) HOBT und 0,95 ml (6,8 mmol) TEA in 10 ml DMF erhalten, wobei die Titelverbindung aus Dioxan lyophilisiert wird. TLC: Rf = 0,51 (Methylenchlorid/Methanol 15 : 1).
    HPLC20–100: tRet = 15,30. FAB MS (M + H)+ = 682.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 45a) 4-(Thiophen-2-yl)benzaldehyd [siehe Heterocycles 31, 1951, (1990)]
  • 3,7 g (20 mmol) an 4-Brombenzaldehyd, 9,5 ml (120 mmol) an Thiophen, 2,94 g (30 mmol) an Kaliumacetat und 1,16 g (1 mmol) an Tetrakis(triphenylphosphin)palladium (Fluka, Buchs, Schweiz) in 50 ml Dimethylacetamid werden in einen Druckreaktor gegeben und bei 150°C unter Stickstoff für 16 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird durch Eindampfung konzentriert, der Rückstand wird in Wasser aufgenommen und dreimal mit Methylenchlorid extrahiert. Nach der Entfernung des Lösemittels wird der Rückstand auf Silicagel chromatographiert (Hexan/Ethylacetat 4 : 1). Die Titelverbindung wird in Form eines gelben Feststoffs erhalten. TLC: Rf = 0,36 (Hexan/Ethylacetat 4 : 1). HPLC20–100: tRet: = 15,26. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz): 9,98/s (1H), 7,93 und 7,85/jeweils d, J = 9,5 (2 × 2H), 7,60/d, J = 2,5 (1H), 7,52/d, J = 5 (1H), 7,17/dxd, J = 2,5 und 5 (1H).
  • 45b) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-(4-[(thiophen-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Analog zu Beispiel 37 c erhält man die Titelverbindung in Form von gelben Kristallen aus 2,47 g (13,1 mmol) 4-(Thiophen-2-yl)benzaldehyd und 1,65 g (12,49 mmol) an tert-Butylcarbazat (Fluka, Buchs, Schweiz) in 30 ml Ethanol (4,5 Stunden bei 90°C).
    Smp. 162–165°C. HPLC20–100: tRet = 16,08. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 7,91/s (1H), 1,53/s (9H).
  • 45c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiophen-2-yl)benzyl]hydrazin
  • 3,35 g (11,1 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(thiophen-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon und 0,819 g (11,1 mmol) an Natriumcyanoborhydrid (Fluka, Buchs, Schweiz) werden in 11 ml THF (schwarze Lösung) gelöst und tropfenweise über einen Zeitraum von 5 Stunden zu 2,11 g (11,1 mmol) an p-Toluolsulfonsäuremonohydrat gegeben, das in 11 ml THF gelöst ist. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur und unter Stickstoff gerührt (pH etwa 3 bis 4) und dann mit Ethylacetat verdünnt und dann wird die organische Phase nacheinander mit Kochsalzlösung, gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung und erneut Kochsalzlösung gewaschen. Die organische Phase wird durch Eindampfen konzentriert und der Rückstand wird in 13,3 ml an 1 N Natriumhydroxidlösung aufgenommen, 15 ml Methylenchlorid werden zugegeben und das Gemisch wird unter Rückfluss für 3 Stunden bei Raumtemperatur bei einer Badtemperatur von 60°C gekocht. Nach der Abtrennung der organischen Phase wird diese Phase durch Eindampfung konzentriert. Die Titelverbindung wird in Form eines leicht gelben Öls erhalten. HPLC20–100: tRet = 12,36. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 3,91/s (2H), 1,42/s (9H).
  • 45d) 1-[4-(Thiophen-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37 e erhält man die Titelverbindung aus 3,39 g (11,1 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(thiophen-2-yl)benzyl]hydrazin und 2,93 g (11,1 mmol) an (2R)-[(1'S)-Boc-Amino-2'-phenylethyl]oxiran (J. org. Chem. 50, 4615 (1985)) in 50 ml Isopropanol, wobei die Titelverbindung spontan beim Kühlen der Reaktionslösung auskristallisiert. Smp. 165–168°C. HPLC20–100: tRet = 18,84. 1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem 7,56/d, J = 9 (2H), 7,5–7,3/m (4H), 7,3–7,1/m (5H), 7,08/dxd, J 2 und 5 (1H), 3,85/s (2H), 1,33 und 1,32/jeweils s (2 × 9H).
  • 45e) 1-[4-(Thiophen-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 39 e wird die Titelverbindung in Form eines leicht gelblichen Öls aus 3,16 g (5,57 mmol) an 1-[4-(Thiophen-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 30 ml Ameisensäure nach dem Rühren bei Raumtemperatur für 6 Stunden erhalten, wobei das Öl ohne weitere Reinigung verarbeitet wird.
    1H NMR (CD3OD, 200 MHz) unter anderem: 7,62/d, J = 9 (2H), 7,5–7,1/mehrere m überlagert (9H), 7,09/dxd, J = 2 und 5 (1H), 3,72/s (2H).
  • Beispiel 46: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Verfahren A
  • Unter Ausschluss von Feuchtigkeit werden 10,85 g an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e) und 17,1 g TPTU in 65 ml DMF gegeben. 35,1 ml Hünig Base werden zur weißen Suspension gegeben und das Gemisch wird für 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Dann werden 13,2 g (26 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 37f), die in 65 ml DMF gelöst sind, zugegeben und das Gemisch wird für 24 Stunden gerührt, um die Reaktion zu vervollständigen (nach 20 Stunden werden weitere 5 ml Hünig Base zugegeben). Das Reaktionsgemisch wird in 600 ml Wasser gegossen und der entstehende Niederschlag abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Der Filterrückstand wird dann in Methylenchlorid gelöst und zweimal mit gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Nach dem Trocknen über Natriumsulfat und einer Konzentration wird der entstehende Schaum mit DIPE verdaut, der Feststoff wird abfiltriert und getrocknet. Das entstehende rohe Produkt wird erneut in Methylenchlorid gelöst, mit Aktivkohle behandelt und nach der Filtration mit Ether gefällt. Die entstehende Titelverbindung wird in einem geheizten Exsikkator bei 40°C unter einem Hochvakuum getrocknet. Smp. 202–204°C. TLC: Rf = 0,38 (Ethylacetat). HPLC20–100: tRet = 11,81, FAB MS (M + H)+ = 705. Es kann weiteres Produkt aus der Mutterlauge nach einer Chromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat, dann Ethylacetat) und einer Kristallisation aus Ether (Smp. 206–207°C) erhalten werden.
  • Verfahren B
  • Analog zu Beispiel 4 werden 1,32 g an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan in 5 ml an DMF zu 0,42 g (2,2 mmol) an (N-Methoxycarbonyl)-(L)-tert-leucin, 0,654 g (2,2 mmol) an TPTU und 840 μl (5 mmol) Hünig Base in 5 ml DMF gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur für 22 Stunden gerührt und analog zu Beispiel 3 unter Bildung der Titelverbindung aufgearbeitet.
  • Die Ausgangsmaterialien werden folgendermaßen hergestellt:
  • 46a) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2N-Boc-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 3,93 g (8,5 mmol) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(N-Boc-amino)-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 47b) in 50 ml DMF tropfenweise zu einem Gemisch aus 2,58 g (13,6 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin, 4,88 g (25,5 mmol) EDC und 2,3 g (17 mmol) HOBT in 50 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das Rohprodukt in Methylenchlorid/DIPE verdaut, abfiltriert und unter Bildung der Titelverbindung getrocknet. TLC: Rf = 0,5 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 12,32, FAB MS (M + H)+ = 634.
  • 46b) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Analog zu Beispiel 37f) werden 130 ml an 4 M HCl in Dioxan zu 4,4 g (6,94 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2N-Boc-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan gegeben und das Gemisch wird mit 7 ml DMF verdünnt. Nach 2,75 Stunden wird das Gemisch aufgearbeitet. Man erhält die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,44 (Methylenchlorid/Methanol: 9/1), HPLC20–100: tRet = 8,47, FAB MS (M + H)+ = 534.
  • Ein alternatives Verfahren zur Herstellung der Titelverbindung von Beispiel 46 ist folgendes:
  • Beispiel 46*: 1-(4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter Ausschluss von Feuchtigkeit werden 567 g (3,0 mol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin (Beispiel 2e) und 891 g (3,0 mol) TPTU in 3 Liter Methylenchlorid unter Eiskühlung gegeben, 775 g (6 mol) Hünig Base werden tropfenweise zugegeben und das Gemisch wird für 20 Minuten gerührt. Eine Suspension aus 432 g (1,0 mol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexantrihydrochlorid in 3 Litern Methylenchlorid wird dann zu der Lösung gegeben und das Gemisch wird bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, um die Reaktion zu vervollständigen. Das Reaktionsgemisch wird mit 10 Litern Wasser, 10 Liter gesättigter NaHCO3 Lösung und 5 Litern Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden weitere zweimal mit 5 Liter Methylenchlorid extrahiert, die organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfung konzentriert. Der Rückstand wird in 6 Litern Ethylacetat gelöst und durch 500 g an Silicagel filtriert, wobei die Säule mit 6 Litern Ethylacetat gewaschen wird und die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden durch Eindampfung konzentriert. Ein Rühren in siedendem DIPE/Ethanol 49 : 1 (9 Liter, 1 Stunde), ein Kühlen und eine Filtration ergeben die Titelverbindung, die dann weiter durch Umkristallisation aus Ethanol/Wasser gereinigt werden kann (Smp. 207–209°C).
  • Die Ausgangsmaterialien werden folgendermaßen hergestellt:
  • *a) 4-(Pyridin-2-yl)benzaldehyd
  • 11 g Iod werden gefolgt von 200 g an 4-Brombenzaldehyddimethylacetal (Beispiel 37a) zu 317 g (13,0 mol) Magnesium in 3,5 Litern THF gegeben (Stickstoffatmosphäre). Wenn die Reaktion gestartet wurde (erforderlichenfalls durch Erhitzen) werden 2540 g (insgesamt 2740 g, 11,8 mol) an 4-Brombenzaldehyddimethylacetal in 3,5 Litern Toluol tropfenweise zugegeben (von 25°C bis 30°C, 1 Stunde) und das Gemisch wird dann bei Raumtemperatur für 1 Stunde gerührt. Das Grignard-Reagenz wird dann in den Tropftrichter eines zweiten Geräts überführt, das 1750 g (11,0 mol) 2-Brompyridin (Fluka, Buchs, Schweiz) in 3,3 Litern THF, 38 g (70 mmol) DPPP und 330 ml Diisobutylaluminiumhydrid (20% In Hexan) enthält. Von 15°C bis 20°C wird das Grignard-Reagenz tropfenweise zugegeben (45 Minuten). Nach dem Rühren bei Raumtemperatur für 90 Minuten wird das Reaktionsgemisch in 10 kg Eis, 1,5 Liter konzentrierter Chlorwasserstoffsäure und 1,5 kg Citronensäure gegossen. 1 kg Hyflo Super Cel werden zugegeben und das Gemisch wird für 1 Stunde gerührt und dann filtriert, der Rückstand wird mit 2 Litern Wasser, zweimal 2 Litern Toluol und schließlich 2 × 2 Litern an 1 N HCl Lösung gewaschen. Das erste Filtrat und das Waschwasser werden vereinigt, die wässrige Phase wird abgetrennt und zweimal mit den zwei Toluolfiltraten extrahiert. Die entstehenden organischen Phasen werden mit den zwei Chlorwasserstoffsäure enthaltenden Filtraten gewaschen. Die wässrigen Phasen werden vereinigt, 6 Liter Toluol werden zugegeben und das Gemisch wird auf einen pH von 8 bis 9 mit 4,6 Litern Natriumhydroxidlösung (30% in Wasser) eingestellt. Das Gemisch wird durch Hyflo (Filtrationshilfe, die auf Kieselguhr basiert, Fluka, Buchs, Schweiz) filtriert, die wässrige Phase wird abgetrennt und zweimal mit 2 Litern Toluol extrahiert. Die organischen Phasen werden zweimal mit Wasser gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und mit Aktivkohle behandelt. Eine Zugabe von 0,5 kg Silicagel, ein Rühren, eine Filtration und eine Konzentration durch Eindampfung ergeben die Titelverbindung (physikalische Daten wie in Beispiel 37b).
  • *b) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon
  • Eine Lösung aus 1770 g (9,67 mol) an 4-(Pyridin-2-yl)benzaldehyd und 1220 g (9,2 mol) an tert-Butylcarbazat (Fluka, Buchs, Schweiz) in 12,5 Liter Ethanol wird für 4 Stunden zum Sieden erhitzt. Das Gemisch wird auf 40°C gekühlt und 6 kg Eis werden zugegeben, das Gemisch wird abfiltriert und die Titelverbindung wird mit 6 Liter Wasser gewaschen, wobei dann die Verbindung in reiner Form erhalten wird (physikalische Daten wie in Beispiel 37c).
  • *c) N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-4-[(pyridin-2-yl)benzyl]hydrazin
  • Eine Suspension aus 1655 g (5,57 mol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-{4-[(pyridin-2-yl)phenyl]methyliden}hydrazon in 12 Liter Methanol wird in Gegenwart von 166 g an 10% Pd/C unter Normaldruck bei Raumtemperatur hydriert. Der Katalysator wird abfiltriert und gründlich mit Methanol gewaschen und das Lösemittel wird entfernt. Eine Kristallisation aus Hexan ergibt die Titelverbindung: Smp. 74–77°C.
  • *d) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Eine Lösung aus 1185 g (4,5 mol) an (2R)-[(1'S)-(tert-Butoxycarbonyl)amino-2'-phenylethyl]oxiran und 1230 g (4,1 mol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-2-yl)benzyl]hydrazin in 14 Liter Isopropanol werden für 16 Stunden zum Sieden erhitzt. Nach dem Abkühlen werden 15 kg Eis und 10 Liter Wasser zugegeben, das Gemisch wird für 2 Stunden gerührt, die Kristalle werden abfiltriert und mit 6 Liter Wasser gewaschen. Ein zweimaliges Rühren in jeweils 5 Liter Ether, eine Filtration, ein Waschen mit 2 Litern Ether und schließlich 2 Litern an Ether/tert-Butylmethylether 1 : 1 ergibt die Titelverbindung: Smp. 183–188°C.
  • *e) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-diamino-6-phenyl-2-azahexantrihydrochlorid
  • Eine Lösung aus 1465 g (2,6 mol) an 1-[4-Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan in 12 Liter THF und 4 Litern Chlorwasserstoffsäure (4 N in Wasser) wird für 4 Stunden bei 50°C gerührt. Die wässrige Phase wird aus dem entstehenden Zweiphasengemisch abgetrennt und durch Eindampfung im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wird mit 4 Litern Ethanol verdünnt, durch Eindampfung konzentriert, mit 4 Litern Ethanol/Toluol 1 : 1 verdünnt, durch Eindampfung konzentriert, mit 4 Litern Ethanol verdünnt und durch erneute Eindampfung konzentriert. Ein Rühren in 9 Liter DIPE und eine Filtration ergeben die Titelverbindung (physikalische Daten wie in Beispiel 37f).
  • *e) (i) Alternativ dazu wird 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-di[(tert-butoxycarbonyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan folgendermaßen hergestellt
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 2,1 ml (2,1 mmol) einer 1,00 M Lösung aus Diisobutylaluminiumhydrid in Methylenchlorid langsam tropfenweise zu einer eiskalten Lösung aus 200 mg (0,347 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-1-oxo-5(S)-2,5-di[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4(S)-hydroxy-6-phenyl-2-azahexan in 5 ml THF (schäumt) gegeben. Nach 2 Stunden werden 7 ml Ethylacetat zugegeben und nach weiteren 30 Minuten 70 ml Methanol. Das Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur erwärmt und für 2 Stunden gerührt, 0,5 ml Wasser und 5 g Natriumsulfat werden zugegeben und das Gemisch wird erneut für 1 Stunde gerührt, um die Reaktion zu vervollständigen. Die Salze werden abfiltriert und das Filtrat wird durch Eindampfen konzentriert. Eine Mitteldruckchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 3 : 2 → Ethylacetat) ergibt die Titelverbindung: Smp. 184°C TLC (Hexan/Ethylacetat 1 : 1) Rf = 0,26, FAB MS (M + H)+ = 563.
  • Die Synthese des Ausgangsmaterials 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-1-oxo-5(S)-2,5-di[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4(S)-hydroxy-6-phenyl-2-azahexan wird durch die folgenden Schritte ausgeführt:
  • Schritt (1) 4-(Pyridin-2-yl)benzoesäuremethylester
  • 24,0 g (150 mmol) an 4-Cyanobenzoesäuremethylester (Fluka, Buchs, Schweiz) in 150 ml Toluol werden unter eine Acetylenatmosphäre in einem Autoklaven gegeben und 0,30 g (1,6 mmol) Cobaltocen (= Dicyclopentadienylcobalt, Aldrich, Milwaukee, USA) werden zugegeben. Das Gemisch wird dann einem Acetylendruck von 15 atm unterzogen, auf 180°C erhitzt und für 12 Stunden gerührt. Nach dem Abkühlen und dem Ablassen des Drucks werden 9,5 g Aktivkohle zur schwarzen Suspension gegeben, das Gemisch wird mit 250 ml Toluol verdünnt, für 30 Minuten gerührt, filtriert und durch Eindampfen konzentriert. Eine Kristallisation aus warmem Ether durch die Zugabe von Hexan ergibt die Verbindung: Smp. 96°C, TLC (Hexan/Ethylacetat 4 : 1) Rf = 0,37, FAB MS (M + H)+ = 214. Weiteres Produkt kann aus der Mutterlauge durch Säulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 19 : 1 → 4 : 1) erhalten werden.
  • Schritt (2) 4-(Pyridin-2-yl)benzoesäure
  • 12,85 g (60,2 mmol) an 4-(Pyridin-2-yl)benzoesäuremethylester in 125 ml Methanol und 67 ml an 1 N Natriumhydroxidlösung werden bei Raumtemperatur für 6 Stunden gerührt. Die entstehende Lösung wird teilweise durch Eindampfen konzentriert, der wässrige Rückstand wird mit Ethylacetat extrahiert und mit 2 N HCl Lösung auf pH ~1,5 angesäuert. Die Titelverbindung fällt aus und kann abfiltriert und mit Wasser gewaschen werden: TLC (Ethylacetat): Rf = 0,35, FAB MS (M + H)+ = 200.
  • Schritt (3) 4-(Pyridin-2-yl)benzoesäureisobutyloxyameisesäureanhydrid
  • Unter Ausschluss von Luft werden 6,0 g (30 mmol) an 4-(Pyridin-2-yl)benzoesäure bei –20°C in 90 ml THF suspendiert und 9,90 ml (90 mmol) an N-methylmorpholin und 4,32 ml (33 mmol) an Isobutylchlorformiat werden zugegeben. Nach 30 Minuten wird das Gemisch filtriert, mit einer kleinen Menge an kaltem THF gewaschen und das Filtrat wird teilweise durch Eindampfen konzentriert, der Rückstand wird mit Methylenchlorid verdünnt, mit Eiswasser und kalter Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen unter Bildung der Titelverbindung konzentriert: 1H NMR (CDCl3) unter anderem 8,75 (m, 1H), 8,16 (AB, J = 8, 4H), 7,81 (m, 2H), 7,32 (Vierliniensystem, J = 5, 1H), 4,16 (d, J = 7, 2H), 2,10 (Neunliniensystem, J = 7, 1H), 1,02 (d, J = 7, 6H).
  • Schritt (4) 1-(R)-Cyano-2(S)-(N-tert-butoxycarbonylamino)-3-phenylpropyl[4-(2-pyridyl)]benzoat
  • Bei 0°C werden 250 mg (0,9 mmol) an Benzyltriethylammoniumchlorid zu 2,0 g (30 mmol) Kaliumcyanid in 7,5 ml Wasser und 7,5 ml Methylenchlorid gegeben. Dann wird eine Lösung aus 6,21 g (24,9 mmol) Boc-(L)-Phenylalaninal in 10 ml Methylenchlorid und eine Lösung aus ~30 mmol 4-(Pyridin-2-yl)benzoesäureisobutyloxyameisensäureanhydrid in 10 ml Methylenchlorid gleichzeitig tropfenweise zugegeben. Nach 20 Minuten bei 0°C wird für weitere 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und das Reaktionsgemisch wird schließlich mit Methylenchlorid/Wasser verdünnt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und zweimal mit Methylenchlorid extrahiert, die organische Phase wird dreimal mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Säulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 4 : 1 → 2 : 1 ergibt ein ~5 : 1 Gemisch aus 1-(R)-Cyano-2(S)-(N-tert-butoxycarbonylamino)-3-phenylpropyl[4-(2-pyridyl)]benzoat und 1-(S)-Cyano-2(S)-(N-tert-butoxycarbonylamino)-3-phenylpropyl[4-(2-pyridyl)]benzoat: TLC (Hexan/Ethylacetat 4 : 1): Rf 0,11, FAB MS (M + 1)+ = 458, 1H NMR (CDCl3) unter anderem 5,66 (d, J = 6, 5/6H, 1-(R) Epimer), 5,53 (m, 1/6H, 1-(S)-Epimer).
  • Verdau in DIPE führt zu diastereomerenreinem 1-(R)-Cyano-2(S)-(N-tert-butoxycarbonylamino)-3-phenylpropyl[4-(2-pyridyl)]benzoat: Smp. 140–141°C.
  • Schritt (5) 4(S)-1,4-Di[tert-butoxycarbonyl)amino]-3(R)-[4-(pyridin-2-yl)phenyl]carbonyloxy-5-phenyl-1-azapent-1-en
  • 2,29 g (5,0 mmol) an 1-(R)-Cyano-2(S)-(N-tert-butoxycarbonylamino)-3-phenylpropyl[4-(2-pyridyl)]benzoat werden in 80 ml Methanol gelöst und 900 mg (15 mmol) Essigsäure und 661,5 mg (5 mmol) an tert-Butylcarbazat werden zugegeben, wobei nach der Zugabe von 2,3 g Raney Nickel das Gemisch hydriert wird. Das teilweise ausgefallene Produkt wird durch die Zugabe von Methanol und sanftem Erhitzen gelöst, der Katalysator wird abfiltriert und das Filtrat wird durch Eindampfen konzentriert. Der Rückstand wird in Ethylacetat/ges. NaHCO3 Lösung aufgenommen, die wässrige Phase wird abgetrennt und weitere zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Mitteldruckchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat 4 : 1 → Ethylacetat) ergibt die Titelverbindung: Smp. 195–196°C, TLC (Hexan/Ethylacetat 1 : 1) Rf = 0,39, FAB MS (M + H)+ = 575.
  • Schritt (6) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-1-oxo-5-(S)-2,5-di[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4(S)-hydroxy-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 111 mg (85%, 1,5 mmol) an NaCNBH3 zu einer Lösung aus 862 mg (1,5 mmol) an 4-(S)-1,4-Di[(tert-Butoxycarbonyl)amino]-3(R)-[4-(pyridin-2-yl)phenyl]carbonyloxy-5-phenyl-1-azapent-1-en in 10 ml THF gegeben. Eine Lösung aus 290 mg (1,5 mmol) an p-Toluolsulfonsäure in 4 ml THF wird hierzu tropfenweise gegeben. Nach dem Rühren für 2,5 Stunden werden weitere 55 mg an NaCNBH3 und 145 mg p-Toluolsulfonsäure in 2 ml THF zugegeben und das Gemisch wird erneut für 2,5 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wird dann in 230 ml einer 1% Lösung aus K2B4O7 × 4H2O in Wasser gegossen, über Nacht zur Vervollständigung der Reaktion gerührt, filtriert und mit Wasser gewaschen. Der Rückstand wird in Ethylacetat aufgenommen, die Lösung wird mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert {4-(S)-1,4-Di-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]-3(S)-[4-(pyridin-2-yl)phenyl]carbonyloxy-5-phenyl-1-azapentan: TLC (Hexan/Ethylacetat 1 : 1): Rf = 0,45}. Der entstehende Schaum wird in 25 ml Diethylenglycoldimethylether gelöst, 250 μl an 7-Methyl-1,5,7-triazabicyclo[4.4.0]dec-5-en (Fluka, Buchs, Schweiz) werden zugegeben und das Gemisch wird für 1,5 Stunden auf 80°C erhitzt. Das Gemisch wird durch Eindampfen unter einem Hochvakuum konzentriert und der Rückstand wird in Ethylacetat/Wasser aufgenommen, die wässrige Phase wird abgetrennt und weitere zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Eine Kristallisation aus DIPE/Hexan ergibt die Titelverbindung: Smp. 104–105°C, TLC (Hexan/Ethylacetat 1 : 1): Rf = 0,20, FAB MS (M + H)+ = 577.
  • Beispiel 47: [4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan
  • Unter einer Stickstoffatmosphäre werden 0,45 g (1,5 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 0,85 g (4,5 mmol) EDC und 0,4 g (3 mmol) HOBT in 10 ml DMF gelöst. Nach der Zugabe von 1,26 ml TEA und einem Rühren für 10 Minuten wird eine Lösung aus 0,96 g (1,5 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid in 10 ml DMF tropfenweise zugegeben. Nach 2 Stunden wird das Reaktionsgemisch durch Eindampfung konzentriert. Das entstehende Öl wird in Methylenchlorid aufgenommen und mit Wasser, zweimal gesättigter NaHCO3 Lösung, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Die wässrigen Phasen werden mit Methylenchlorid extrahiert, die vereinigten organischen Phasen werden getrocknet (Na2SO4) und durch Eindampfen konzentriert. Der Rückstand wird zuerst in DIPE und dann in Methylenchlorid/Ether verdaut, dann abfiltriert und unter Bildung der Titelverbindung getrocknet: TLC: Rf = 0,45 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 11,71, FAB MS (M + H)+ = 705.
  • Das Ausgangsmaterial wird folgendermaßen hergestellt:
  • 47a) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(N-Boc-amino)-5(S)-trifluoracetylamino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 37e) werden 7 g (23 mmol) an N-1-(tert-Butoxycarbonyl)-N-2-[4-(pyridin-2-yl)benzyl]hydrazin mit 6 g (23 mmol) an (2R)-[(1'S)-Trifluoracetylamino-2'-phenylethyl]oxiran in 125 ml Isopropanol bei 80°C unter Bildung der Titelverbindung umgesetzt. TLC: Rf = 0,33 (Methylenchlorid/Methanol: 1/1), HPLC20–100: tRet = 12,76, FAB MS (M + H)+ = 559.
  • 47b) 1-(4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(N-Boc-amino)-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 40e werden 5,6 g (10 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2-(N-Boc-amino)-5-(trifluoracetylamino)-6-phenyl-2-azahexan in 130 ml Methanol gelöst, auf 65°C erhitzt und durch die tropfenweise Zugabe von 50 ml einer wässrigen 1 M Kaliumcarbonatlösung umgewandelt. TLC: Rf = 0,17 (Methylenchlorid/Methanol: 9/1), HPLC20–100: tRet = 8,50, FAB MS (M + H)+ = 463.
  • 47c) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-Boc-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 1,62 g (3,5 mmol) an 1-[4-Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(N-Boc-amino)-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan in 25 ml an DMF tropfenweise zu einem Gemisch von 1,06 g (5,6 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 2,01 g (10,5 mmol) an EDC und 0,95 g (7 mmol) an HOBT in 20 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das rohe Produkt in DIPE verdaut, abfiltriert und getrocknet. TLC: Rf = 0,59 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 12,52. FAB MS (M + H)+ = 634.
  • 47d) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Analog zu Beispiel 40 g werden 40 ml an 4 M HCl in Dioxan zu 1,9 g (3 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-Boc-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-uhenyl-2-azahexan gegeben und mit 3 ml DMF verdünnt. Nach 2,5 Stunden wird das Gemisch aufgearbeitet. Die Titelverbindung wird erhalten: TLC: Rf = 0,55 (Methylenchlorid/Methanol: 9/1), HPLC20–100: tRet = 8,74, FAB MS (M + H)+ = 534.
  • Beispiel 48: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 0,964 g (1,5 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid in 10 ml DMF tropfenweise zu einem Gemisch aus 0,42 g (2,4 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 0,862 g (4,5 mmol) an EDC, 0,405 g (3 mmol) an HOBT und 1,26 ml TEA in 10 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das rohe Produkt in DIPE verdaut, abfiltriert und getrocknet. Eine anschließende Säulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat: 1/1 bis 3/1) ergibt die reine Titelverbindung (TLC: Rf = 0,35 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 10,9. FAB MS (M + H)+ = 691.
  • Beispiel 49: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-leucyl)amino-5(S)-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 0,315 g (0,5 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid in 3 ml DMF tropfenweise zu einem Gemisch aus 0,152 g (0,8 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-tert-leucin, 0,287 g (1,5 mmol) an EDC, 0,135 g (1 mmol) an HOBT und 0,49 ml TEA in 3 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das rohe Produkt durch eine anschließende Mitteldrucksäulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat) unter Bildung der Titelverbindung gereinigt. (TLC: Rf = 0,35 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 11,05. FAB MS (M + H)+ = 691.
  • Die Ausgangsverbindungen werden folgendermaßen hergestellt:
  • 49a) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-Boc-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 4,1 g (8,87 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-(N-Boc-amino)-5(S)-amino-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 47b) in 50 ml DMF tropfenweise zu einem Gemisch aus 2,49 g (14,2 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 5,1 g (26,6 mmol) an EDC, 2,4 g (17,7 mmol) an HOBT und 7,45 ml TEA in 50 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das rohe Produkt zweimal in DIPE verdaut, abfiltriert und unter Bildung der Titelverbindung getrocknet. TLC: Rf = 0,42 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 11,92. FAB MS (M + H)+ = 620.
  • 49b) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid
  • Analog zu Beispiel 37f) werden 30 ml an 4 M HCl in Dioxan zu 3,5 g (5,65 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenl]-4(S)-hydroxy-2-N-Boc-amino-5(S)-N-(N-methoxcarbonl-(L)-valyl)amino-6-phenl-2-azahexan gegeben und das Gemisch wird mit 5 ml DMF verdünnt. Nach 3,5 Stunden wird das Gemisch aufgearbeitet. Die Titelverbindung wird erhalten: TLC: Rf = 0,53 (Methylenchlorid/Methanol: 9/1), HPLC20–100: tRet = 8,00, FAB MS (M + H)+ = 520.
  • Beispiel 50: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 46 werden 0,96 g (1,5 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan × 3 HCl (Beispiel 47d) in 10 ml DMF mit 0,263 g (1,5 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-valin, 0,446 g (1,5 mmol) TPTU und 0,78 ml (4,5 mmol) an DBU in 7 ml DMF umgesetzt. Nach einer Aufarbeitung erhält man die Titelverbindung: TLC: Rf = 0,4 (Ethylacetat): HPLC20–100: tRet = 11,23, FAB MS (M + H)+ = 691.
  • Beispiel 51: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 1,26 g (2 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 49b) in 12 ml DMF tropfenweise zu einem Gemisch aus 0,6 g (3,2 mmol) an N-Methoxycarbonyl-(L)-isoleucin, 1,14 g (6 mmol) an EDC, 0,54 g (4 mmol) an HOBT und 1,68 ml TEA in 13 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das rohe Produkt in DIPE verdaut und anschließend durch Mitteldrucksäulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat) unter Bildung der Titelverbindung gereinigt. TLC: Rf = 0,32 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 11,04. FAB MS (M + H)+ = 691.
  • Beispiel 52: 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan
  • Analog zu Beispiel 1 wird eine Lösung aus 0,629 g (1 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-2-amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexanhydrochlorid (Beispiel 49b) in 5 ml DMF tropfenweise zu einem Gemisch aus 0,303 g (1,6 mmol) an N-Ethoxycarbonyl-(L)-valin, 0,575 g (3 mmol) an EDC, 0,27 g (2 mmol) an HOBT und 0,98 ml TEA in 7 ml DMF gegeben. Nach der Aufarbeitung wird das rohe Produkt in DIPE verdaut und anschließend durch Mitteldrucksäulenchromatographie (SiO2, Hexan/Ethylacetat) unter Bildung der Titelverbindung gereinigt. TLC: Rf = 0,33 (Ethylacetat), HPLC20–100: tRet = 11,13. FAB MS (M + H)+ = 691.
  • Beispiel 53: 1-[4-(Pyrid-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexanmethansulfonatsalz
  • 210 mg (0,28 mmol) an 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 46) werden in 10 ml Methylenchlorid unter Erhitzen gelöst und 19,5 μl (0,3 mmol) Methansulfonsäure werden zugegeben. Die Titelverbindung wird mit Ether gefällt, abfiltriert und unter verringertem Druck bei 50°C getrocknet. FAB MS (M + H)+ = 705. 1H NMR (CD3OD) (chemische Verschiebungen der Pyridinprotonen der freien Base in Klammern) 6 8,81 (8,6), 8,65 (7,9), 8,36 (7,8), 8,05 (7,35) und auch zusätzlich Signale der Methylgruppe des Salzes: δ 2,7 ppm.
  • Beispiel 54: 1-[4-(Pyrid-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexanhydrochloridsalz
  • 70 mg (0,094 mmol) an 1-[4-(Pyrid-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan (Beispiel 46) werden in 6 ml Dioxan gelöst und 25 μl an 4 M HCl Lösung in Dioxan werden zugegeben. Der entstehende Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet. FAB MS (M + H)+ = 705. 1H NMR (CD3OD) (chemische Verschiebungen der Pyridinprotonen der freien Base in Klammern) δ 8,81 (8,6), 8,65 (7,9), 8,36 (7,8), 8,05 (7,35). Elementaranalyse des Hydrats der Titelverbindung: Cl gefunden: 4,6%, Berechnet: 4,63%.
  • Beispiel 55: Gelatinelösung
  • Eine sterilfiltrierte, wässrige Lösung, die 20% Cyclodextrine als Löslichkeitsvermittler enthält, einer der in den vorangehenden Beispielen erwähnten Verbindungen der Formel I (beispielsweise der Titelverbindung von Beispiel 2) als Wirkstoff wird so unter Erhitzen unter aseptischen Bedingungen mit einer sterilen Gelatinelösung gemischt, die Phenol als Konservierungsstoff enthält, dass 1,0 ml der Lösung die folgende Zusammensetzung aufweist:
    Wirkstoff 3 mg
    Gelatine 150 mg
    Phenol 4,7 mg
    Destilliertes Wasser, das 20% Cyclodextrine als Löslichkeitsvermittler enthält 1,0 ml
  • Beispiel 56: Sterile Trockensubstanz zur Infektion
  • 5 mg einer der in den vorangehenden Beispielen erwähnten Verbindungen der Formel I (beispielsweise der Titelverbindung von Beispiel 3) als Wirkstoff werden in 1 ml wässriger Lösung gelöst, die 20 mg Mannit und 20% Cyclodextrin als Löslichkeitsvermittler enthält. Die Lösung wird unter aseptischen Bedingungen sterilfiltriert, in eine 2 ml fassende Ampulle eingeführt, tiefgefroren und lyophilisiert. Vor der Verwendung wird das Lyophilisat in 1 ml destilliertem Wasser oder 1 ml physiologischer Kochsalzlösung gelöst. Die Lösung wird intramuskulär oder intravenös verabreicht. Die Formulierung kann auch in Doppelkammereinwegspritzen eingebracht werden.
  • Beispiel 57: Nasenspray
  • 500 mg fein gemahlenes Pulver (< 5,0 mm) einer der in den vorangehenden Beispielen erwähnten Verbindungen der Formel I (beispielsweise die Verbindung von Beispiel 4) als Wirkstoff werden in einem Gemisch aus 3,5 ml Myglyol 812® und 0,08 g Benzylalkohol suspendiert. Die Suspension wird in einen Behälter eingebracht, der ein Dosierungsventil aufweist. 5,0 g Freon 12® (Dichlordifluormethan, Handelsname von DuPont) werden unter Druck durch das Ventil in den Behälter eingebracht. Das "Freon" wird im Myglyol/Benzylalkoholgemisch durch Schütteln gelöst. Der Spraybehälter enthält etwa 100 Einzeldosen, die einzeln verabreicht werden können.
  • Beispiel 58: Filmbeschichtete Tabletten
  • Die folgenden Bestandteile werden zur Herstellung von 10 000 Tabletten verarbeitet, die jeweils 100 mg Wirkstoff enthalten:
    Wirkstoff 1000 g
    Maisstärke 680 g
    Kolloidale Kieselsäure 200 g
    Magnesiumstearat 20 g
    Stearinsäure 50 g
    Natriumcarboxymethylstärke 250 g
    Wasser q. s.
  • Ein Gemisch aus einer der in den vorhergehenden Beispielen erwähnten Verbindungen der Formel I (beispielsweise die Verbindung von Beispiel 5) als Wirkstoff, 50 g Maisstärke und die kolloidale Kieselsäure werden mit der aus 250 g Maisstärke und 2,2 kg entmineralisiertem Wasser hergestellten Stärkepaste unter Bildung einer feuchten Masse verarbeitet. Diese Masse wird durch ein Sieb mit 3 mm Maschenweite gepresst und in einem Wirbelschichttrockner bei 45°C für 30 Minuten getrocknet. Die getrockneten Granula werden durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 1 mm gepresst, mit einem vorher gesiebten Gemisch (1 mm Sieb) aus 330 g Maisstärke, dem Magnesiumstearat, der Stearinsäure und der Natriumcarboxymethylstärke gemischt und unter Bildung von leicht konvexen Tabletten verpresst.
  • Beispiel 59: Kapseln (I)
  • Eine Verbindung aus einem der vorher erwähnten Beispiele (beispielsweise die Titelverbindung von Beispiel 6) wird mittels eines herkömmlichen Messermischers (beispielsweise Turmix) mikronisiert (Partikelgröße etwa 1 bis 100 um), Pluronic® F68 (Blockpolymer aus Polyethylen- und Polypropylenglycolen, Wyandotte Chem. Corp. Michigan, USA, auch erhältlich von Emkalyx, France, Handelsname der BASF) wird ähnlich mittels eines herkömmlichen Mischers mikronisiert und der Feinanteil wird mittels eines Siebes (0,5 mm) entfernt und wie folgt weiter verwendet. 16,00 g Sesamöl werden in einen Glasbecher gegeben und 1,20 g des mikronisierten Wirkstoffs, 1,20 g des Feinanteils von Pluronic® F 68 und 1,20 g Hydroxypropylmethylcellulose (Cellulose HP-M-603 von Shin-Etsu Chemicals Ltd., Tokyo, JP) werden unter Rühren mittels einer Rührvorrichtung (IKA Werk, Deutschland) in Kombination mit einem Zahnrührer (Durchmesser: 46 mm) (Rührgeschwindigkeit: 2000 U/min) zugegeben. Ein Rühren für 20 Minuten bei der angegebenen Geschwindigkeit bildet eine Suspension mit pastöser Konsistenz, die in Hartgelatinekapseln eingeführt wird (20 × 40 mm, R. P. Scherer AG, Eberbach, Deutschland).
  • Beispiel 60: Kapseln (II)
  • Zur Herstellung von 10 000 Kapseln, die 100 mg des Wirkstoffs (von einem der vorher erwähnten Beispiele, beispielsweise der Titelverbindung von Beispiel 7) pro Kapsel enthalten, werden die folgenden Bestandteile folgendermaßen verarbeitet:
    Wirkstoff 1000 g
    Pluronic® F 68 1000 g
    Hydroxypropylmethylcellulose 1000 g
    Sesamöl 1000 g
    (für den Ursprung der Bestandteile siehe Beispiel 10)
  • Das Sesamöl wird in ein heizbares Gefäß (Fryma) gegeben und das Pluronic® F 68 wird hineingestreut. Das Gefäß wird auf 60°C erhitzt und das Pluronic® F 68 wird unter Rühren verteilt (Dauer etwa 2 Stunden). Während dem Rühren und der Homogenisierung wird das Gemisch auf etwa 30°C abgekühlt. Die Hydroxypropylmethylcellulose und der Wirkstoff werden eingestreut und unter Rühren und Homogenisierung (etwa 1 Stunde) in der Ölmasse verteilt. Die Suspension mit pastöser Konsistenz wird in Hartgelatinekapseln (Größe 0, erhältlich von beispielsweise Elanco oder Parke-Davies (Caprogel)) oder Weichgelatinekapseln (20 mm länglich, R. P. Scherer AG, Eberbach, Deutschland) mittels eines herkömmlichen Geräts eingebracht.
  • Beispiel 61: Dispersion
  • Zur Herstellung einer Dispersion, die 120,0 mg Wirkstoff/10 ml (vorzugsweise die Titelverbindung von Beispiel 46) enthält, werden die folgenden Bestandteile folgendermaßen verarbeitet:
    Wirkstoff 120,0 mg
    Klucel HF (Hydroxypropylcellulose, Hercules, Deutschland) 50,0 mg
    Tween 20 (Polyoxyethylensorbitanmonolaurat, Fluka, Buchs, Schweiz) 100,0 mg
    Entmineralisiertes Wasser 10,0 ml
  • Das entmineralisierte Wasser wird in einen Behälter gegeben, die Hydroxypropylcellulose wird langsam unter Rühren mit einem Magnetrührer eingestreut und kann für 1 Stunde quellen. Das Polyoxyethylensorbitanmonolaurat wird dann zugegeben und das Gemisch wird für 5 Minuten mittels eines Magnetrührers gerührt. Schließlich wird der Wirkstoff zugegeben und das Gemisch wird für 15 Minuten unter Verwendung des Magnetrührers gerührt.
  • Beispiel 62: Hemmende Aktivität in Bezug auf die HIV-1 Protease
  • Unter Verwendung des oben beschriebenen Testsystems mit dem Icosapeptid RRSNQVSQNYPIVQNIQGRR werden die im folgenden angegebenen HK50 Werte für die folgenden Beispiele erhalten:
  • Figure 00910001
  • Figure 00920001
  • Beispiel 63: Schutz von MT-2 Zellen gegen die HIV Infektion
  • Mittels des vorher erwähnten Testsystems hat die Titelverbindung von Beispiel 46, nämlich 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-L-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan bei der Hemmung der Infektion von MT-2 Zellen durch den Virusstamm HIV-1/MN den folgenden ED90 Wert: ED90 = 0,003 μM.
  • Beispiel 64: Blutspiegel in Mäusen
  • Mittels des vorher erwähnten Testsystems zur Bestimmung der Pharmakokinetik der Verbindungen der Formel I zeigt die Titelverbindung von Beispiel 46, nämlich 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan die folgenden Blutspiegel nach einer oralen Verabreichung von 120 mg/kg:
  • Plasmaspiegel (μM) der Titelverbindung von Beispiel 46
    Figure 00920002
  • Beispiel 65: Formulierung als Lösung (I)
  • Die Formulierung umfasst 100 mg der Titelverbindung von Beispiel 46 als Wirkstoff, 100 mg razemische Milchsäure (90%), Cellulose HP-M-603, Silicagel (Aerosil 200) und entionisiertes Wasser (2 g).
  • Beispiel 66: Formulierung als Lösung (II)
  • Die Formulierung umfasst 18,4 mg der Titelverbindung von Beispiel 46 als Wirkstoff, 5 mg Cellulose HP M 603, 40 mg N-Methylpyrrolidon und zweifach destilliertes Wasser auf 1 ml.
  • Beispiel 67: Analog zu einem der vorher erwähnten Verfahren werden hergestellt
    • A) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(R)-hydroxy-5(S)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    • B) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(R)-hydroxy-5(R)-2,5-bis[N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan,
    • C) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4(S)-hydroxy-5(S)-2-[N-(N-methoxycarbonyl)-(L)-tert-leucyl)amino]-5-[N-(N-methoxycarbonyl-(D)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan, oder
    • D) 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl]-4-(S)-hydroxy-5(S)-2-[N-(N-methoxycarbonyl)-(D)-tert-leucyl)amino]-5-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan.

Claims (27)

  1. Verbindung der Formel I
    Figure 00940001
    worin R1 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht, R2 für sekundäres oder tertiäres Niederalkyl oder C1-C7 Alkylthio-C1-C7-alkyl steht, worin der Ausdruck "Nieder" für einen Rest mit bis zu und einschließlich 7 Kohlenstoffatomen steht, R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, R5 unabhängig von R2 eine der für R2 aufgeführten Bedeutungen hat, und R6 unabhängig von R1 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  2. Verbindung nach Anspruch 1 der Formel Ia
    Figure 00940002
    worin die Reste wie in Anspruch 1 definiert sind, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  3. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, worin R1 für C1-C4 Alkoxycarbonyl steht, R2 für Isopropyl, sek-Butyl oder tert-Butyl steht, R3 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, R4 für Phenyl steht, das an der Position 4 durch einen der folgenden Reste substituiert ist, der über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist: Thienyl, Oxazolyl, Thiazolyl, Imidazolyl, 1,4-Thiazinyl, Triazolyl, das unsubstituiert oder durch 1-Methyl-1-phenylethyl, tert-Butyl oder durch Methyl substituiert ist, Tetrazolyl, das unsubstituiert oder durch 1-Methyl-1-phenylethyl, tert-Butyl oder durch Methyl substituiert ist, Pyridinyl, Pyrazinyl und Pyrimidinyl, R5 für Isopropyl, sek-Butyl, tert-Butyl oder Methylthiomethyl steht, und R6 für C1-C4 Alkoxycarbonyl steht, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  4. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, worin R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht, R2 für Isopropyl, sek-Butyl oder tert-Butyl steht, R3 für Phenyl steht, R4 für Phenyl steht, das an der Position 4 des Phenylrings substituiert ist durch 2- oder 3-Thienyl, Thiazol-5-yl, Thiazol-2-yl, 2H-Tetrazol-5-yl, das unsubstituiert oder an der Position 2 durch 1-Methyl-1-phenylethyl, tert-Butyl oder durch Methyl substituiert ist, 1H-Tetrazol-5-yl, das an der Position 1 durch Methyl substituiert ist, Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl oder durch Pyrazin-2-yl, R5 für Isopropyl, sek-Butyl, tert-Butyl oder Methylthiomethyl steht, und R6 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht, mit der Maßgabe, dass zumindest einer der zwei Reste R2 und R5 für tert-Butyl steht, mit der Maßgabe, dass R4 für Phenyl steht, das an der Position 4 des Phenylrings substituiert ist durch 2- oder 3-Thienyl, Thiazol-5-yl, Thiazol-2-yl, 2H-Tetrazol-5-yl, das unsubstituiert oder an der Position 2 durch 1-Methyl-1-phenylethyl, tert-Butyl oder durch Methyl substituiert ist, 1H-Tetrazol-5-yl, das an der Position 1 durch Methyl substituiert ist, Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl oder durch Pyrazin-2-yl, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  5. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, worin R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht, R2 für Isopropyl, sek-Butyl oder tert-Butyl steht, R3 für Phenyl steht, R4 für 4-(Thiazol-2-yl)phenyl, 4-(Thiazol-5-yl)phenyl, 4-(Pyridin-2-yl)phenyl oder 4-(2-Methyltetrazol-5-yl)phenyl steht, R5 für Isopropyl, sek-Butyl oder Methylthiomethyl steht, und R6 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht, oder ein (vorzugsweise pharmazeutisch annehmbares) Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  6. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, ausgewählt aus den folgenden Verbindungen: 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-methylcysteinyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-ethoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Thiazol-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-isoleucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan, 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, und 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-2-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino-5(S)-N-(N-methoxycarbonyl-(L)-valyl)amino-6-phenyl-2-azahexan, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  7. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, nämlich 1-[4-(Thiazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan oder ein Salz hiervon.
  8. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, nämlich 1-[4-(2-Methyl-2H-tetrazol-5-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan oder ein Salz hiervon.
  9. Verbindung der Formel Ia nach Anspruch 2, nämlich 1-[4-(Pyridin-2-yl)phenyl-4(S)-hydroxy-5(S)-2,5-bis-[N-(N-methoxycarbonyl-(L)-tert-leucyl)amino]-6-phenyl-2-azahexan oder ein Salz hiervon.
  10. Verbindung der Formel I nach einem der Ansprüche 1 bis 9 oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung des tierischen oder menschlichen Körpers.
  11. Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung der Formel I nach einem der Ansprüche 1 bis 9 oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz einer solchen Verbindung mit mindestens einer salzbildenden Gruppe zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
  12. Verwendung einer Verbindung der Formel I nach einem der Ansprüche 1 bis 9 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes einer solchen Verbindung mit zumindest einer salzbildenden Gruppe zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Verwendung bei der Hemmung der Aspartatprotease von HIV.
  13. Verwendung einer Verbindung der Formel I nach einem der Ansprüche 1 bis 9 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes einer solchen Verbindung mit zumindest einer salzbildenden Gruppe zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Verwendung bei der Behandlung einer retroviralen Erkrankung.
  14. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 9 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes einer solchen Verbindung mit zumindest einer salzbildenden Gruppe zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung einer retroviralen Erkrankung.
  15. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel I nach Anspruch 1 oder eines Salzes hiervon, worin a) ein Hydrazinderivat der Formel
    Figure 00970001
    worin die Reste R4, R5 und R6 wie für Verbindungen der Formel I definiert sind, zu einem Epoxid der Formel IV gegeben wird
    Figure 00970002
    worin die Reste R1, R2 und R3 wie für Verbindungen der Formel I definiert sind und freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und alle Schutzgruppen entfernt werden, oder b) eine Aminogruppe der Formel V
    Figure 00970003
    worin die Reste R1, R2, R3 und R4 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, mit einer Säure der folgenden Formel
    Figure 00980001
    oder mit einem reaktiven Säurederivat hiervon kondensiert wird, worin die Reste R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, wobei freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann alle Schutzgruppen entfernt werden, oder c) eine Aminoverbindung der Formel VII
    Figure 00980002
    worin die Reste R3, R4, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, mit einer Säure der folgenden Formel
    Figure 00980003
    oder mit einem reaktiven Säurederivat hiervon kondensiert wird, worin R1 und R2 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, wobei freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann alle Schutzgruppen entfernt werden, oder d) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, worin die Substituentenpaare R1 und R6 und R2 und R5 jeweils für zwei identische Reste stehen, wie für Verbindungen der Formel I definiert sind und R3 und R4 wie für Verbindungen der Formel I definiert sind, eine Diaminoverbindung der Formel IX
    Figure 00980004
    worin die Reste wie eben definiert sind, mit einer Säure der folgenden Formel
    Figure 00990001
    oder mit einem reaktiven Säurederivat hiervon kondensiert wird, worin R1' und R2' jeweils wie für R1 und R6 und für R2 und R5 in Formel I definiert sind, die Paare R1 und R6 und R2 und R5 jeweils zwei identische Reste sind und freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen und dann alle Schutzgruppen entfernt werden, oder e) eine Iminoverbindung der Formel (I')
    Figure 00990002
    worin die Reste R1, R2, R3, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, mit einer Verbindung der Formel X umgesetzt wird
    Figure 00990003
    worin X für eine Abgangsgruppe steht und R4 wie für die Verbindungen der Formel I definiert ist, freie Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann alle Schutzgruppen entfernt werden, oder f) eine Iminoverbindung der Formel (I')
    Figure 00990004
    worin die Reste R1, R2, R3, R5 und R6 wie für die Verbindungen der Formel I definiert sind, mit einem Aldehyd der Formel X*
    Figure 00990005
    worin R4 wie für Verbindungen der Formel I definiert ist oder mit einem reaktiven Derivat hiervon in einer reduktiven Alkylierung umgesetzt wird, wobei freie funktionelle Gruppen mit Ausnahme der an der Reaktion teilnehmenden erforderlichenfalls in geschützter Form vorliegen, und dann alle Schutzgruppen entfernt werden, und erforderlichenfalls eine Verbindung der Formel I mit zumindest einer salzbildenden Gruppe, die gemäß einem der Verfahren a) bis f) oben erhältlich ist, in deren Salz umgewandelt wird oder ein erhältliches Salz in die freie Verbindung oder in ein unterschiedliches Salz umgewandelt wird und/oder Isomerengemische, die erhalten werden können, getrennt werden und/oder eine Verbindung der Formel I gemäß der Erfindung in eine unterschiedliche Verbindung der Formel I gemäß der Erfindung umgewandelt wird.
  16. Verbindung der Formel XX
    Figure 01000001
    worin R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht und R2 für tert-Butyl steht oder ein Salz hiervon.
  17. Verbindung der Formel IV
    Figure 01000002
    worin R1 für Methoxycarbonyl oder Ethoxycarbonyl steht, R2 für tert-Butyl steht und R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder durch einen oder mehrere C1-C7 Alkoxyreste substituiert ist, oder C4-C8 Cycloalkyl steht.
  18. Verbindung der Formel III*
    Figure 01000003
    worin R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome enthält, ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl und unsubsti tuiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, R5 für tert-Butyl steht und R6 für Methoxy- oder Ethoxycarbonyl steht, oder ein Salz hiervon, worin eine salzbildende Gruppe vorkommt.
  19. Verbindung der Formel XII
    Figure 01010001
    worin R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome enthält, ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist und R7 für eine Aminoschutzgruppe steht, oder ein Salz hiervon, falls eine salzbildende Gruppe vorkommt.
  20. Verbindung der Formel XII*
    Figure 01010002
    worin R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome enthält, ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist und R7 für eine Aminoschutzgruppe steht, oder ein Salz hiervon, falls eine salzbildende Gruppe vorkommt.
  21. Verbindung der Formel III
    Figure 01010003
    worin R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome enthält, ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, R5 für Isopropyl, sek-Butyl, tert-Butyl oder Methylthiomethyl steht und R6 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht, oder ein Salz hiervon, falls eine salzbildende Gruppe vorkommt.
  22. Verbindung der Formel V
    Figure 01020001
    worin R1 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht, R2 für sekundäres oder tertiäres Niederalkyl oder Niederalkylthioniederalkyl steht, worin der Ausdruck "Nieder" für einen Rest mit bis zu und einschließlich 7 Kohlenstoffatomen steht, R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  23. Verbindung der Formel VII
    Figure 01020002
    worin R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, R5 für sekundäres oder tertiäres Niederalkyl oder C1-C7 Alkylthio-C1-C7-alkyl steht, worin der Ausdruck "Nieder" für einen Rest mit bis zu und einschließlich 7 Kohlenstoffatomen steht und R6 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  24. Verbindung der Formel IX
    Figure 01030001
    worin R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  25. Verbindung der Formel XXIV
    Figure 01030002
    worin R13 und R14 für Aminogruppen stehen, die sich voneinander unterscheiden, R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  26. Verbindung der Formel XXV
    Figure 01030003
    worin R14 für eine Aminoschutzgruppe steht, R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, und R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
  27. Verbindung der Formel XXVI
    Figure 01040001
    worin R15 für eine Aminoschutzgruppe steht, R1 für C1-C7 Alkoxycarbonyl steht, R2 für sekundäres oder tertiäres Niederalkyl oder C1-C7 Alkylthio-C1-C7-alkyl steht, worin der Ausdruck "Nieder" für einen Rest mit bis zu und einschließlich 7 Kohlenstoffatomen steht, R3 für Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren C1-C7 Alkoxyresten substituiert ist, oder für C4-C8 Cycloalkyl steht, R4 für Phenyl oder Cyclohexyl steht, das jeweils an der Position 4 durch ein ungesättigtes Heterocyclyl substituiert ist, welches über ein Ringkohlenstoffatom gebunden ist, 5 bis 8 Ringatome aufweist, 1 bis 4 Heteroatome aufweist, die aus Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel, Sulfinyl und Sulfonyl ausgewählt sind und unsubstituiert oder durch C1-C7 Alkyl oder Phenyl-C1-C7-alkyl substituiert ist, oder ein Salz hiervon, mit der Maßgabe, dass zumindest eine salzbildende Gruppe vorhanden ist.
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