DE69533298T2

DE69533298T2 - Dioxabicyclo 3.3.0 octan-Derivate, z.B. Sesamin etc., zur Vorbeugung und Erleichterung von Allergiesymptomen

Info

Publication number: DE69533298T2
Application number: DE69533298T
Authority: DE
Inventors: Kengo Mishima-gun Akimoto; Michihiro Fukuoka-shi Sugano; Koji Fukuoka-shi Yamada; Michiko Kasuya-gun Nonaka; Joing-Yan Fukuoka-shi Gu
Original assignee: Suntory Ltd
Current assignee: Suntory Holdings Ltd
Priority date: 1994-05-12
Filing date: 1995-05-12
Publication date: 2004-12-30
Anticipated expiration: 2015-05-13
Also published as: EP0681788A2; DE69533298D1; US5922760A; ATE271786T1; AU1799495A; DK0681788T3; KR20070108291A; JP3818680B2; EP0681788A3; JPH0826989A; CA2149170A1; ES2220919T3; CA2149170C; AU703327B2; SG38841A1; EP0681788B1; PT681788E; SI0681788T1; KR950031067A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Herstellung von Mitteln für die Verhinderung oder Abschwächung von allergischen Symptomen unter Verwendung eines effektiven Bestandteils eines Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivats.
Hintergrund
Allergisches Asthma, allergische Rhinitis, atopische Störungen und ähnliche treten vermutlich aufgrund einer Einwirkung auf biologische Gewebe durch die verschiedenen chemischen Mediatoren auf, freigesetzt aus der Lunge und anderen Organen, was zu einer Kontraktion der glatten Muskulatur führt, wie z. B. dem Bronchialmuskel und pulmonaren Gefäßen, und einer überschüssigen Permeabilität von Epithelgefäßen. Von diesen chemischen Mediatoren sind die besonders beachteten Histamin und SRS-A (slow-reacting release Substanz der Anaphylaxe). In den letzten Jahren wurde SRS-A selbst als Peptidleukotriene C₄, D₄ und E₄ (LTC₄, LTD₄, LTE₄) identifiziert, und die vielfältigen physiologischen Wirkungen und pathologischen Verbindungen dieser Leukotriene wurde auf breiter Basis untersucht.
Weiterhin wurde SRS-A im Hinblick auf Bronchialasthma, allergische Rhinitis und Dermatitis, atopische Dermatitis und sogar ischämische Erkrankungen, wie z. B. Myokardinfarkt und Kardialanaphylaxie, endotoxischen Schock, Psoriasis und ähnlichem, als beteiligt angesehen. Dementsprechend wurde große Aufmerksamkeit auf die Entwicklung von Mitteln gerichtet, die die Produktion von SRS-A unterdrücken oder diesem entgegenwirken. Zusätzlich wurde durch den kürzlichen Anstieg der Anzahl der Patienten mit allergischen Symptomen, wie z. B. atopischer Dermatitis und Heuschnupfen, ihre Behandlung zu einem öffentlichen Interesse.
Es ist jedoch zum gegenwärtigen Zeitpunkt besonders üblich, sich auf symptomatische Therapien zu verlassen und trotz des starken Bedarfs an einem überlegenen Heilmittel, um allergische Symptome vollständig zu heilen, muß festgestellt werden, daß ihre Entwicklung immer noch weit außerhalb unserer Reichweite liegt. Kürzlich wurde ein Zahl unterschiedlicher Antihistamin-Arzneimittel und Mittel entwickelt, die die Erzeugung von SRS-A inhibieren oder dieser entgegenwirken, sie sind jedoch immer noch inadäquat im Hinblick auf ihre Nebenwirkungen. Andere Inhibitoren, die ver wendet werden, beinhalten adrenocorticotrope Hormone, jedoch führen diese häufig zu ernsthaften Nebenwirkungen bei den Patienten und sollten deshalb als Arzneimittel nicht weit verbreitet verwendet werden.
JP-A-02/138120 beschreibt die Behandlung verschiedener allergischer Erkrankungen, wie z. B. Bronchialasthma, allergische Rhinitis und Dermatitis, unter Verwendung einer 2,6-Diphenylfurofuran-Verbindung als Lipoxygenaseinhibitor; die Verbindung weist eine Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Struktur auf.
JP-A-04/290822 beschreibt die Behandlung von Allergien mit einer Mischung aus Perillaöl und Sesamöl.
EP-A-409654 beschreibt die Verwendung von Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindungen als Verbesserungsmittel der Leberfunktion in Form von Arzneimitteln, Nahrungsmitteln und Getränken.
Die vorliegende Erfindung stellt die Verwendung einer Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung bereit, dargestellt durch die folgende allgemeine Formel (I):
worin R¹, R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten, oder R¹ und R² und/oder R⁴ und R⁵ zusammen eine Methylen- oder Ethylengruppe bedeuten, und n, m und 1 bedeuten 0 oder 1, in Kombination mit einem Antioxidans, das nicht eine Verbindung der Formel (I) ist, für die Herstellung eines Nahrungsprodukts (Nahrungsmittel, Getränk oder Bestandteil dafür) oder eines Medikaments für die Verhinderung oder Abschwächung von Allergiesymptomen, assoziiert mit einer Arzneimittel-, Nahrungsmittel- oder Insektenallergie, und/oder für die Verhinderung oder Abschwächung von Allergiesymptomen, ausgewählt aus atopischer Dermatitis, atopischer Dermatitis im Jugendalter, Nesselsucht, Kontaktdermatitis, seniler Dermatose, Bronchialasthma, allergischer Rhinitis, Heuschnupfen, Ischämie, Kardialanaphylaxie, endotoxischer Schock und Psoriasis.
Die Verwendung bei der Herstellung von Nahrungsmittelprodukten mit einer Wirkung zur Verhinderung oder Abschwächung allergischer Symptome kann durch Zusatz der oben erwähnten Derivate oder von Extrakten, die sie als Hauptbestandteile enthalten, und von Antioxidantien zu Nahrungsmitteln, die im wesentlichen solche Derivate nicht enthalten, gekennzeichnet werden.
Kurze Beschreibung der Zeichnungen
1 ist eine Grafik, die den Unterschied zwischen LTC₄-Konzentrationen im Lungengewebe bei männlichen BN-Ratten darstellt, denen eine Diät verabreicht wird, die Sesamin und/oder Tocopherol enthält.
2 ist eine Gruppe von Grafiken, die die Konzentrationen von Serumimmunglobulin IgA, IgE, IgG und IgM bei männlichen BN-Ratten zeigt, denen eine Diät verabreicht wird, die Sesamin und/oder Tocopherol enthält.
3 ist eine Gruppe von Grafiken, die die Unterschiede an Konzentrationen von LTB₄ im Milzgewebe darstellt, von LTC₄ im Lungengewebe und die Blutplasma-Histaminkonzentrationen von männlichen SD-Ratten, denen eine Diät verabreicht wird, die Sesamin und/oder Tocopherol enthält.
Detaillierte Beschreibung
Die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivate, die die effektiven Bestandteile sind, die in der vorliegenden Erfindung verwendet werden, sind Verbindungen dargestellt durch die folgende allgemeine Formel (I):
worin R¹, R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen darstellen, oder R¹ und R² und/oder R⁴ und R5 bedeuten zusammen eine Methylen- oder Ethylengruppe, und n, m und 1 bedeuten 0 oder 1; und hier kann die Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen eine Methyl-, Ethyl-, n-Propyl- oder Isopropylgruppe sein oder ähnliche.
Konkrete Beispiele für die Verbindungen beinhalten Sesamin, Sesaminol, Episesamin, Episesaminol, Sesamolin, 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan, 2,6-Bis(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan und 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-Methoxy-4-hydroxyphenoxy)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan. Diese Verbindungen können in Form von Glucosiden vorliegen, und ein Enantiomer der oben erwähnten Verbindungen liegt auch im Umfang der vorliegenden Erfindung.
Die oben erwähnten Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivate (hiernach "die Derivate der vorliegenden Erfindung") werden allein verwendet oder zwei oder mehr davon als Kombination. Weiterhin sind die Derivate der vorliegenden Erfindung nicht auf hochreine Produkte begrenzt, da sie auch als Extrakte verwendet werden können, die im wesentlichen eines oder mehrere der oben erwähnten Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivate enthalten.
Ein Extrakt, enthaltend ein Derivat der vorliegenden Erfindung als Hauptbestandteil, kann durch Extraktion durch ein normales Verfahren aus einer natürlichen Substanz hergestellt werden, enthaltend das Derivat der vorliegenden Erfindung. Natürliche Substanzen, die Derivate der vorliegenden Erfindung enthalten, beinhalten Sesamöl, Sesambodensatz, Sesamöl-Nebenprodukte, Sesamsamen, Gokahi, abgeleitet von einer medizinischen Pflanze, bei der es sich um Acanthopanax gracilistylus W. W. Smith oder Acanthopanax sessiliflorus Seem oder Acanthopanax senticosus Harms oder Acanthopanax henryi Harms oder Acanthopanax verticillatus Hoo handelt; Toboku, abgeleitet von einer medizinischen Pflanze, bei der es sich um Paulownia fortunei Hewsl oder Paulownia tomentosa handelt; Hakukajuhi, abgeleitet von einer medizinischen Pflanze, bei der es sich um Ginkgo biloba L. handelt; Hihatsu, abgeleitet von einer medizinischen Pflanze, bei der es sich im Piper longum L. handelt; Saishin (Asiasari radix), abgeleitet von einer medizinischen Pflanze, bei der es sich um Asarum heterotropoides F. Schm. var. mandshuricum Kitag oder Asarum sieboldii Mig. handelt, usw..
Per Gehalt des Derivats der vorliegenden Erfindung in einem Extrakt, der es als Hauptbestandteil enthält, beträgt 0,1 Gew.-% oder mehr, vorzugsweise 1,0 Gew.-% oder mehr und besonders bevorzugt 5,0 Gew.-% oder mehr, und insbesondere im Fall von Sesamin und Episesamin beträgt der kombinierte Gehalt 0,05 Gew.-% oder mehr, vorzugsweise 0,5 Gew.-% oder mehr und besonders bevorzugt 2,0 Gew.-% oder mehr.
Um zum Beispiel einen Extrakt zu erhalten, bestehend im wesentlichen aus einem Derivat der vorliegenden Erfindung aus Sesamöl, kann die Extraktion und Konzentration unter Verwendung von einer Vielzahl von organischen Lösungsmitteln (wie z. B. Aceton, Methylethylketon, Diethylketon, Methanol, Ethanol usw.) durchgeführt werden, die mit Sesamöl im wesentlichen nicht mischbar sind und die in der Lage sind, das Derivat der vorliegenden Erfindung zu extrahieren und zu lösen.
Ein Beispiel hierfür ist ein Verfahren, bei dem Sesamöl einheitlich mit einem der oben erwähnten Lösungsmittel vermischt wird und man ihm dann ermöglicht, bei niedriger Temperatur zu stehen, wobei die Phasen durch ein gewöhnliches Verfahren wie eine Zentrifugation abgetrennt werden und das Lösungsmittel dann aus der Lösungsmittelfraktion evaporiert wird; insbesondere wird das Sesamöl in einer 2- bis 10-fachen Menge und vorzugsweise einer 6- bis 8-fachen Menge Aceton gelöst, man läßt es über Nacht bei –80°C stehen, währenddessen der Ölbestandteil präzipitiert, und Aceton wird aus dem Filtrat abdestilliert, erhalten durch Filtration um einen Extrakt zu erhalten, enthaltend ein Derivat der vorliegenden Erfindung als Hauptbestandteil davon.
Ein anderes Beispiel ist ein Verfahren, wobei Sesamöl mit heißem Methanol oder heißem Ethanol vermischt wird und man dies bei Raumtemperatur stehenläßt, und das Lösungsmittel wird aus der Lösungsmittelfraktion evaporiert; insbesondere wird das Sesamöl kräftig in einer 2- bis 10-fachen Menge vermischt und vorzugsweise einer 5- bis 7-fachen Menge heißem Methanol (50°C oder höher) oder heißem Ethanol (50°C oder höher), woraufhin man die Mischung bei Raumtemperatur stehenläßt, oder die Phasen werden durch ein gewöhnliches Verfahren wie Zentrifugation getrennt und das Lösungsmittel wird aus der Lösungsmittelfraktion abdestilliert, um einen Extrakt zu erhalten, enthaltend ein Derivat der vorliegenden Erfindung als Hauptbestandteil davon.
Zusätzlich kann auch ein superkritischer Gasextrakt verwendet werden, um einen Extrakt zu erhalten, enthaltend ein Derivat der vorliegenden Erfindung als Hauptbestandteil davon.
Das verwendete Sesamöl kann ein gereinigtes Produkt oder jedes Rohprodukt sein, vor dem Entfärbeschritt des Herstellungsverfahrens für das Sesamöl.
Um einen Extrakt zu erhalten, bestehend im wesentlichen aus einem Derivat der vorliegenden Erfindung, aus Sesamsamen oder Sesambodensatz (entfettete Sesamsamen, Restöl: 8 bis 10%), können die Sesamaaat oder der Sesambodensatz, falls nötig, zerkleinert werden und werden dann durch ein gewöhnliches Verfahren unter Verwendung eines gewünschten Lösungsmittels, z. B. jedem der oben erwähnten Lösungsmittel, die für die Extraktion von Sesamöl verwendet werden, extrahiert. Nach Abtrennung des Extraktrests kann das Lösungsmittel aus der Extraktlösung durch Evaporation usw. zum Erhalt des Extrakts entfernt werden.
Die betroffene Verbindung des Derivats der vorliegenden Erfindung kann aus dem Sesamölextrakt isoliert werden, aus dem Sesambodensatzextrakt oder dem Sesamsamenextrakt, hergestellt durch die oben erwähnten Verfahren, durch eine Behandlung gemäß üblichen Verfahren, wie z. B. Säulenchromato graphie, Hochleistungs-Flüssigchromatographie, Umkristallisierung, Destillation, Flüssig-Flüssig-Austausch-Verteilungschromatographie oder ähnliche. Insbesondere kann ein Derivat der vorliegenden Erfindung, wie z. B. Sesamin, Episesamin, Sesaminol, Episesaminol, Sesamolin, 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan, 2,6-Bis-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan oder 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenoxy)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan, unter Verwendung von Methanol/Wasser (60 : 40) in einem Elutionsmittel in einer Umkehrphasensäule (5C₁₈) erhalten werden, durch Abtrennung des oben erwähnten Extrakts durch Hochleistungs-Flüssigchromatographie und Abdestillation des Lösungsmittels und dann durch Umkristallisieren der erhaltenen Kristalle mit Ethanol. Die Verfahren zum Erhalt und Reinigen der Derivate der vorliegenden Erfindung und der Extrakte, die sie als Hauptbestandteil enthalten, sind nicht auf diese begrenzt.
Ein Derivat der vorliegenden Erfindung kann auch durch eine Synthese gemäß dem üblichen Verfahren erhalten werden.
Zum Beispiel können Sesamin und Episesamin durch das Verfahren von Beroza et al. (J. Am. Chem. Soc., 78, 1242 (1956)) synthetisiert werden, während Pinoresinol (worin R¹ = R⁴ = H, R² = R⁵ = CH₃ und n = m = l = 0 in der allgemeinen Formel (I)) durch das Verfahren von Freundenberg et al. (Chem. Ber., 86, 1157 (1953)) und Syringaresinol (worin R¹ = R⁴ = H, R² = R³ = R⁵ = CH₃, n = 1 und m = l = 1 in der allgemeinen Formel (I)) durch das Verfahren von Freundenberg et al. (Chem. Ber., 88, 16 (1955)) synthetisiert werden können.
Die Derivate der vorliegenden Erfindung oder Extrakte, die sie als Hauptbestandteile enthalten, werden mit Antioxidantien zur Verwendung als effektive Bestandteile gemäß der vorliegenden Erfindung kombiniert. Die für die Verwendung erhältlichen Antioxidantien beinhalten natürliche Antioxidantien, wie z. B. Tocopherole, Flavonderivate, Phyllodulcine, Kojisäure, Gallensäurederivate, Katechine, Fukinolsäure ("fukinolic acid"), Gossypol, Pyrazinderivate, Sesamol, Guaiacol, Guaiacolharz, p-Cumalinsäure, Nordihydroguaiaretsäure, Sterole, Terpene, Nukleinsäurebasen, Carotenoide usw., und synthetische Antioxidantien, wie z. B. Butylhydroxyanisol (BHA), Butylhydroxytoluol (BHT), monotertiäres Butylhydrochinon (TBHQ), 4-Hydruxymethyl-2,6-ditertiäres-butylphenol (HMBP) usw..
Tocopherole werden unter diesen Antioxidantien besonders bevorzugt und Beispiele für Tocopherole beinhalten α-Tocopherol, β-Tocopherol, γ-Tocopherol, δ-Tocopherol, ε-Tocopherol, ξ-Tocopherol, η-Tocopherol und Tocopherolester (Tocopherolacetat usw.). Zusätzlich können als Carotenoide β-Carotin, Canthaxanthin, Astaxanthin usw. erwähnt werden.
Es gibt keine besonders Begrenzungen für die Verhältnisse des Derivats der vorliegenden Erfindung wie auch des Antioxidans in Kombination, jedoch liegt das Antioxidans vorzugsweise mit 0,001 Gew.Teilen bis 1.000 Gew.Teilen im Hinblick auf 1 Gew.Teil des Derivats der vorliegenden Erfindung vor. In einem bevorzugteren Bereich liegt es mit 0,01 bis 100 Gew.Teilen und noch bevorzugter 0,029 bis 40 Gew.Teilen im Hinblick auf 1 Gew.Teil des Derivats der vorliegenden Erfindung vor.
Die effektiven Bestandteile der vorliegenden Erfindung, nämlich die Derivate der vorliegenden Erfindung in Kombination mit dem Antioxidans, sind für die Verhinderung oder Abschwächung von allergischen Symptomen wirksam, da sie die Freisetzung chemischer Mediatoren (Histamin, LTB₄, LTC₄ usw.) unterdrücken, indem sie einen Anstieg des Niveaus an IgA auslösen, das die Allergenabsorption inhibiert, und von IgG, das die Reaktion zwischen Allergenen und IgE anhält. Die Allergiesymptome, die der vorliegenden Erfindung zugrunde liegen, sind Symptome allergischer Erkrankungen, nämlich atopischer Dermatitis, atopischer Dermatitis im Jugendalter, Nesselsucht, Kontaktdermatitis, seniler Dermatose, Bronchialasthma, allergische Rhinitis, Heuschnupfen, ischämische Erkrankungen, Kardialanaphylaxie, endotoxischer Schock, Psoriasis, Arzneimittelallergie, Nahrungsmittelallergie und Insektenallergie. Gemäß der vorliegenden Erfindung hat die Abschwächung der Symptome eine breite Bedeutung und beinhaltet auch das Heilen der Störung.
Im Fall des Heuschnupfens nimmt man zum Beispiel an, daß die wirksamen Bestandteile der vorliegenden Erfindung, insbesondere das Derivat der vorliegenden Erfindung, und das Antioxidans an IgG binden, das durch die muköse Membran verteilt ist, bevor die Pollen (Allergene), absorbiert an der Oberfläche der nasalen Mukosa, mit dem IgE reagieren, das an die Mastzellen gebunden ist, und so die Reaktion zwischen dem Allergen und dem IgE inhibieren und daher kein Histamin aus den Mastzellen freigesetzt wird und die Allergiesymptome unterdrückt werden.
Nahrungsmittelallergien sind Allergien, ausgelöst durch täglich aufgenommene Nahrungsmittel, die zusätzlich zu Symptomen in den Verdauungsorganen, mit denen das Nahrungsmittel zuerst den Kontakt aufnimmt (Anschwellen der oralen mukösen Membran, juckendes Gefühl, Irritierbarkeit, Erbrechen, Abdominalschmerzen, Durchfall), außerdem Hautsymptome auslösen (Ekzeme, Nesselsucht) wie auch respiratorische Symptome (nasale Allergie, Bronchialasthma), Symptome im Urogenitaltrakt (erhöhte Frequenz des Wasser lassens, Wasserlassen in der Nacht), nervöse Symptome (Migräne) und ähnliches. Solche Allergene beinhalten Eier, Milch, Sojabohnen, Erdnüsse, Schokolade, Weizenmehl, Produkte aus dem Meer, Gewürze, Konservierungsmittel, Färbemittel und andere Nahrungsmittelzusätze, Mikroorganismen, Arzneimittel und ähnliches. Bei Kindern mit Bronchialasthma gibt es zunächst einen Ausbruch eines Ekzems aufgrund einer Nahrungsmittelallergie, worauf sich dann eine nasale Allergie aufgrund von inhalierten Allergenen zu einem Bronchialasthma entwickelt. Insbesondere zur Verhinderung eines Ausbruchs solcher Nahrungsmittelallergien ist die Verhinderung der Aufnahme der Allergene wichtig, jedoch ist dies nicht praktisch durchführbar.
Die Verwendung von effektiven Bestandteilen der vorliegenden Erfindung, nämlich den Derivaten der vorliegenden Erfindung, und den Antioxidantien sollte auch eine antiallergische Wirkung ausüben durch Auslösung eines Anstiegs des Niveaus eines IgA-Antikörpers, erzeugt durch die mesenteralen Lymphknoten, was ihm ermöglicht, an das Nahrungsmittel (Allergen), absorbiert an die enterale Mukosa, zu binden.
Wenn die effektiven Bestandteile der vorliegenden Erfindung als Arzneimittelprodukte verwendet werden, kann ihre Verabreichungsform entweder oral oder parenteral sein, abhängig von dem Bedarf, wobei die Formen Injektionen, Infusionen, Pulver, Körnchen, Tabletten, Kapseln, enterisch beschichtete Tabletten, Lutschtabletten, enterische Kapseln, Pastillen, Mischungen für die innere Verwendung, Suspensionen, Emulsionen, Sirupe, Flüssigkeiten für die externe Verwendung, Umschläge, Nasentropfen, Ohrentropfen, Augentropfen, Inhalationsmittel, Salben, Lotionen, Suppositorien usw. sein können, die abhängig von den Symptomen entweder alleine oder in Kombination verwendet werden können.
Diese Präparationen können gemäß den üblichen Verfahren hergestellt werden unter Verwendung, zusammen mit den aktiven Bestandteilen, bekannter Adjuvantien, die normalerweise auf dem Gebiet der Arzneimittelherstellung verwendet werden, einschließlich Arzneimittelträgern, Bindemitteln, Konservierungsmitteln, Stabilisatoren, Desintegratoren, Gleitmitteln, Geschmackskorregenzien und ähnlichen, abhängig vom Zweck. Wenn zum Beispiel Injektionen hergestellt werden, können Arzneimittel löslich machende Stoffe, wie z. B. nichtionische Tenside und ähnliche, verwendet werden, und insbesondere kann ein Derivat der vorliegenden Erfindung zur Lösung in einem nichtionischen Tensid erwärmt werden, wie z. B. in einem 80-fachen Volumen POE (60) hydriertem Castoröl oder POE Sorbitanmonooleat unter Lösung mit physiologischer Kochsalzläsung zur Vervollständigung der Präpa ration. Alternativ können geeignete isotonische Mittel, Stabilisatoren, Konservierungsmittel und Linderungsmittel ebenfalls zugefügt werden, falls nötig.
Zusätzlich können externe Präparationen Vaseline, Paraffin, Fette und Öle, Lanolin, Macrogol usw. als Basen zur Herstellung von Salben, Cremes und ähnlichem durch gewöhnliche Verfahren verwenden. Außerdem werden die Dosierungen abhängig vom Zweck der Verabreichung und den Bedingungen des Patienten (Geschlecht, Alter, Körpergewicht usw.) differieren, jedoch wird normalerweise für eine Verabreichung an Erwachsene die Gesamtmenge des Derivats der vorliegenden Erfindung in geeigneter Weise in einen Bereich von 1 mg bis 10 g pro Tag, vorzugsweise 1 mg bis 2 g pro Tag und noch bevorzugter 1 mg bis 200 mg pro Tag, im Fall einer oralen Verabreichung und in einem Bereich von 0,1 mg bis 1 g pro Tag, vorzugsweise 0,1 mg bis 200 mg pro Tag und noch bevorzugter 0,1 mg bis 100 mg pro Tag, im Fall einer parenteralen Verabreichung eingestellt werden.
Wenn die Derivate der vorliegenden Erfindung zusammen mit den Antioxidantien, insbesondere Tocopherolen, verabreicht werden, werden sich die Dosierungen der Derivate der vorliegenden Erfindung abhängig vom Zweck der Verabreichung und den Bedingungen des Patienten (Geschlecht, Alter, Körpergewicht usw.) unterscheiden, jedoch wird im Normalfall für eine Verabreichung an einen Erwachsenen die Gesamtmenge des Derivats der vorliegenden Erfindung in geeigneter Weise in einen Bereich von 0,1 mg bis 2 g pro Tag, vorzugsweise 0,1 mg bis 500 mg pro Tag und noch bevorzugter 0,1 mg bis 100 mg pro Tag, im Fall einer oralen Verabreichung und in einen Bereich von 0,01 mg bis 200 mg pro Tag, vorzugsweise 0,01 mg bis 50 mg pro Tag und noch bevorzugter 0,01 mg bis 20 mg pro Tag, im Fall einer parenteralen Verabreichung eingestellt werden, während das Mischverhältnis des Derivats der vorliegenden Erfindung und des Antioxidans in geeigneter Weise in einen Bereich von 0,001 bis 1.000 Gew.Teilen, vorzugsweise 0,01 bis 100 Gew.Teilen und noch bevorzugter 0,029 bis 40 Gew.Teilen, des Antioxidans zu 1 Gew.Teil des Derivats der vorliegenden Erfindung eingestellt werden wird. Die Verwendung der Derivate der vorliegenden Erfindung mit Antioxidantien, insbesondere Tocopherolen, sollte eine synergistische Wirkung für die Verhinderung und Abschwächung von allergischen Symptomen bereitstellen.
Die Derivate der vorliegenden Erfindung sind im Hinblick auf ihre Sicherheit überlegen, da sie Verbindungen sind, entdeckt in traditionellen Nahrungsmitteln oder verwandte Verbindungen. Dies ergibt sich auch deutlich aus der Tatsache, daß bei einer kontinuierlichen Verabreichung (oral) von Sesamin an 7-Wochen alte männliche IRC-Mäuse mit 2,14 g/Tag/kg für 2 Wochen keine abnormalen Symptome beobachtet wurden.
Wenn die effektiven Bestandteile der vorliegenden Erfindung als Nahrungsmittelprodukte verwendet werden, können sie in Form der oben erwähnten Arzneimittelpräparationen oder in Form von festen oder flüssigen Nahrungsmitteln oder populären Nahrungsmitteln, einschließlich Brot, Nudeln, Reissüßigkeiten (wie z. B. Keksen, Kuchen, Candy, Schokolade, japanische Süßigkeiten); landwirtschaftlichen Nahrungsmitteln wie z. B. Tofu und dessen Verarbeitungsprodukten; fermentierten Nahrungsmitteln wie z. B. japanischen Sake, medizinischen alkoholischen Getränken, süßem Sake (Mirin), Essig, Sojasoße und Sojapaste (Miso); Öl- und Fettnahrungsmitteln, wie z. B. Dressings, Majonäse, Margarine, Ziehfett und eßbarem Fett und Öl; Nahrungsmittelprodukten von Tieren wie z. B. Joghurt, Schinken, Bacon und Würstchen; Nahrungsmittelprodukten aus dem Meer wie z. B. gedämpfte Fischpaste (Kamaboko), gekochte Fischpaste (Hanpen) und gebratene Fischpaste; und Getränken wie z. B. Säften, Soft Drinks, Sportgetränken, alkoholischen Getränken, Tee und ähnlichem vorliegen.
Ebenso, wenn als Gesundheitsnahrungsmittel oder funktionelle Nahrungsmittel verwendet, können sie in Form der oben erwähnten Arzneimittelpräparationen oder Nahrungsmittelprodukte vorliegen, sie können jedoch auch in verarbeiteter Form vorliegen, wie z. B. Getränkeprodukten, halbverdauten Ernährungsstoffen, Komponentenernährungsstoffen oder Getränken, zu denen z. B. Proteine (Proteine aus Proteinquellen wie Milchprotein, Sojaprotein und Eialbumin, die balancierte Aminosäuren und einen hohen Nährwert aufweisen, werden meist verwendet, jedoch können auch Abbauprodukte von diesen, Eiweiß-Oligopeptide, Sojahydrolysate usw. und Mischungen aus Aminosäuremonomeren ebenfalls verwendet werden), Saccharide, Fette, Spurenelemente, Vitamine, Emulgatoren oder Gewürze zugefügt wurden.
Ein Nahrungsmittelprodukt kann durch ein allgemeines Verfahren der Herstellung unter Zugabe einer vorgeschriebenen Menge eines Derivats der vorliegenden Erfindung oder eines Extrakts, der dieses als Hauptbestandteil enthält, zu einem Nahrungsmittelprodukt, das im wesentlichen kein Derivat der vorliegenden Erfindung enthält, verarbeitet werden. Die Mischmenge wird von der Form der Präparation oder dem Nahrungsmittel abhängen und ist nicht besonders begrenzt, sollte im allgemeinen vorzugsweise jedoch bei 0,001 bis 50% liegen. Auch kann dies als Gesundheitsnahrungsmittel oder funktionelles Nahrungsmittelprodukt für die Verhinderung oder Abschwächung der oben erwähnten allergischen Symptome genommen werden oder für die Herstellung eines Krankenhausnahrungsmittels, und zwar ein Derivat der vorliegenden Erfindung oder ein Extrakt, der dies als Hauptbestandteil enthält, kann zu einem gewünschten Nahrungsmittel zugefügt werden, das im wesentlichen kein Derivat der vorliegenden Erfindung enthält, und einem Patienten in Form eines funktionellen Nahrungsmittelprodukts verabreicht werden, das an der Stelle unter Kontrolle einer Anweisung gemäß den Diätvorschriften des Arztes hergestellt wird.
Gemäß der vorliegenden Erfindung ist ein Nahrungsmittel, das im wesentlichen kein Derivat der vorliegenden Erfindung enthält, ein Nahrungsmittel, das nicht aus einem Ausgangsmaterial wie z. B. Sesam hergestellt wird, jedoch sind Nahrungsmittel, hergestellt aus Sesam und ähnlichem, ebenfalls als Nahrungsmittel enthalten, die im wesentlichen kein Derivat der vorliegenden Erfindung enthalten, wenn die Nahrungsmittelprodukte in ihrer endgültigen Form nur eine Spurenmenge eines Derivats der vorliegenden Erfindung enthalten, wobei der Gehalt des Derivats der vorliegenden Erfindung weniger als 0,1 mg und vorzugsweise 0,8 mg oder weniger pro täglichem Anteil des Nahrungsmittels beträgt; oder wenn der Gesamtgehalt an Sesamin, Sesaminol, Episesamin, Episesaminol, Sesamolin, 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan, 2,6-Bis(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan oder 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenoxy)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan weniger als 0,1 mg beträgt und vorzugsweise 0,8 mg oder weniger pro Tagesportion des Nahrungsmittels.
Die Nahrungsmittelprodukte der vorliegenden Erfindung werden vorzugsweise oral mit einer täglichen Gesamtdosierung der Derivate der vorliegenden Erfindung in einem Bereich von 1 mg bis 10 g, vorzugsweise 1 mg bis 2 g und besonders bevorzugt 1 mg bis 200 mg, als Regel genommen zum Zweck der Verhinderung oder Abschwächung allergischer Symptome und einem Erhalt der Gesundheit.
Wenn ein Derivat der vorliegenden Erfindung oder ein Extrakt, der dieses als Hauptbestandteil enthält, zusammen mit dem Antioxidans genommen wird, insbesondere einem Tocopherol, wird dies in der Regel vorzugsweise oral aufgenommen mit einer täglichen Gesamtdosierung des Derivats der vorliegenden Erfindung im Bereich von 0,1 mg bis 2 g, vorzugsweise 0,1 mg bis 500 mg und noch bevorzugter 0,1 mg bis 100 mg, und das Mischverhältnis des Derivats der vorliegenden Erfindung und des Antioxidans sollte in einem Bereich von 0,001 bis 1.000 Gew.Teilen, vorzugsweise 0,01 bis 100 Gew.Teilen und noch bevorzugter 0,029 bis 40 Gew.Teilen, des Antioxidans zu 1 Gew.Teil des Derivats der vorliegenden Erfindung liegen. Die kombinierte Verwendung eines Derivats der vorliegenden Erfindung und des Antioxidans, insbesondere eines Tocopherols, sollte eine synergistische Wirkung für die Verhinderung und Abschwächung allergischer Symptome und einen Erhalt der Gesundheit bereitstellen.
In den Fällen, in denen ein Derivat der vorliegenden Erfindung oder ein Extrakt, der dieses als Hauptbestandteil enthält, einem Nahrungsmittel zugefügt wird, das im wesentlichen kein Derivat der vorliegenden Erfindung enthält, jedoch ein Antioxidans, insbesondere ein Tocopherol, kann das Derivat der vorliegenden Erfindung oder der Extrakt, der dieses als Hauptbestandteil enthält, so zugefügt werden, daß das Verhältnis des Derivats der vorliegenden Erfindung und des Antioxidans in dem Nahrungsmittelprodukt in seiner endgültigen Form in einem Bereich von 0,001 bis 1.000 Gew.Teilen, vorzugsweise 0,01 bis 100 Gew.Teilen und noch bevorzugter 0,029 bis 40 Gew.Teilen des Antioxidans zu 1 Gew.Teil des Derivats der vorliegenden Erfindung liegt. Weiteres Antioxidans kann zu diesem Zeitpunkt, falls nötig, zugefügt werden.
Die vorliegende Erfindung wird konkreter unten im Hinblick auf die folgenden Beispiele beschrieben.
Beispiele
Beispiel 1
Experimentelle Tiere und Diäten
Vier Gruppen von 4 Wochen alten (durchschnittliches Körpergewicht: 96 g) männlichen Brown-Norway (BN) Ratten (von Seiwa Experimental Animals) wurden mit 8 Ratten pro Gruppe gebildet. Einer Gruppe wurde eine Normaldiät verabreicht, umfassend 20% Kasein, 5% Maisöl, 5% Cellulose, 3,5% Mineralmischung (AIN-TM: American Institute of Nutrition), 1% Vitaminmischung (AIN-TM), 0,2% Cholinbitartrat, 0,3% DL-Methionin, 15% Maisstärke und 50% Saccharose. Die verbleibenden 3 Gruppen wurden mit einer Diät versorgt, enthaltend 0,5% Sesamin oder 0,5% α-Tocopherol auf Kosten von Saccharose, unter zusätzlicher Zugabe von 0,5% Sesamin und 0,5% α-Tocopherol auf Kosten von Saccharose. Das verwendete Sesamin war eine Mischung aus Sesamin und Episesamin (Sesamin: 55,2%, Episesamin: 44,4%, Reinheit: 99,6%), gereinigt durch das in der japanischen ungeprüften Patentveröffentlichung Nr. 3-27319 beschriebene Verfahren. Nach 3 Wochen des Fütterns wurde Blut aus der Abdominalaorta unter Diethyletheranästhesie entnommen und Lunge und Milz wurden exzisiert.
Extraktion und Messung von Leukotrien C₄
Die Leukotrien C₄ (LTC₄) Konzentration im Lungengewebe, exzisiert aus Ratten, wurde durch Radioimmunoassay gemäß dem allgemeinen Verfahren überprüft.
Die Ergebnisse sind in 1 dargestellt. Wie diese Grafik deutlich zeigt, war LTC₄ deutlich niedriger bei Verabreichung von sowohl Sesamin als auch Tocopherol.
Analyse von CD4⁺(%), CD8⁺(%) durch Flußzytometrie
Die Verhältnisse von CD4⁺ und CD8⁺ Zellen im Blut wurden durch Flußzytometrie (FCM) gemessen. Die aus den Ratten ausgeschnittenen Milzen wurden in 5 ml Schalen übertragen, die RPMI 1640 Medium enthielten, das Fett wurde aus der Milz entfernt, beide Enden wurden abgeschnitten und die verbleibenden Bereiche wurden in 3 oder 4 Stücke geschnitten. Diese wurden in Schalen überführt, die frisches RPMI 1640 Medium enthielten, und mit einem Glasobjektträger zerrieben und Zellen, einschließlich Lymphozyten, wurden gesammelt.
Ein 4 ml Anteil eines Lymphozyten-Abtrennungsmediums (LSM) wurde zu jeder Zellgruppe zugefügt und die Mischungen wurden zentrifugiert, und dann wurden die resultieren Lymphozytenschichten für die Abtrennung abgezogen und in ein RPMI 1640 Medium übertragen. Zu jeder der Zellsuspensionen wurden 10 ml fötales Rinderserum (FBS) zugefügt und die Verdünnung wurde mit diesem Medium zur Herstellung von Lösungen von 1 × 10⁶ Zellen/ml durchgeführt, die in 10 ml Schalen gegossen wurden. Zu jeder 10 ml Schale wurden 100 μl einer Lysinlösung mit ansteigenden endgültigen Konzentrationen von 1 × 10^–4 ng/ml bis 10 ng/ml zugefügt.
Nach 48 Stunden wurde ein Teil jeder Kulturlösung für die Antikörpermessung entnommen, und die verbliebene Zellsuspension wurde adäquat pipettiert und dann in ein Zentrifugenröhrchen übertragen, das 10 ml RPMI 1640 Medium enthielt, und bei 1.200 Upm 5 Minuten zentrifugiert. Alle Überstände wurden verworfen, 1,5 ml RPMI 1640 wurde wieder zugefügt und die Mischungen wurden vollständig pipettiert, und 100 μl davon wurden in Mikroröhrchen gegossen.
Nach einer Zentrifugation wurden die Überstände verworfen, 2 ml RPMI 1640 Medium wurde den ausgefällten Lymphozyten zugefügt und die Mischungen wurden mit jeweils 1 ml in Mikroröhrchen vollständig pipettiert, und wiederum bei 1.200 Upm 5 Minuten zentrifugiert. Die Überstände wurden verworfen, 100 μl von 10%iger inaktivierter FBS-haltiger PBS (phosphatgepufferter Salzlösung) wurden zugefügt, 5 μl von jeweils dem Anti-Ratten CD₄-FITC-markierten Antikörper und dem Anti-Ratten CD₈-PE-markierten Antikörper wurden zugefügt, und man ließ die Mischungen auf Eis 30 Minuten stehen (alle 10 Minuten rühren). Zusätzlich wurde 1 ml von 10%iger inaktivierter FBS/PBS zugefügt, die Mischungen wurden bei 1.200 Upm 5 Minuten zentrifugiert, die Überstände wurden wiederum verworfen und dasselbe Verfahren wurde wiederholt. Die Überstände wurden verworfen, 0,5 ml von jeweils 4%iger Paraformaldehydlösung und PBS wurden zugefügt und die Mischungen wurden vollständig pipettiert (Immobilisierung der Lymphozyten). Diese Verfahren wurden für die Lymphozyten bei allen Konzentrationen des Lysins durchgeführt. Am folgenden Tag wurden die immobilisierten Lymphozyten durch Flußzytometrie (FCM) zur Bestimmung der Verhältnisse von CD4⁺ Zellen und CD8⁺ Zellen gemessen. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 dargestellt. Tabelle 1

Werte: Mittel ± SA
Kont.: Kontrolle (ohne Zugabe)
Ses: 0,5% zugefügtes Sesamin
Toc: 0,5% zugefügtes Tocopherol
Ses + Toc: 0,5% Sesamin und 0,5% Tocopherol zugefügt
Signifikante Unterschiede zwischen unterschiedlichen Buchstaben, a und b: P < 0,05
CD4⁺: Helfer-T-Zellen
CD8⁺: Suppressor-T-Zellen

Wie sich aus Tabelle 1 deutlich ergibt, waren die Milzlymphozyten Helfer-T-Zellen (CD4⁺) mit einem immunoreaktiven Effekt deutlich niedriger bei Zugabe von Sesamin.
Messung von Serum IgM, IgA, IgG und IgE Konzentrationen durch ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Das oben erwähnte Blut, entnommen aus der Ratten-Abdominalaorta, wurde verwendet.
Die verwendeten Reagenzien waren 50 mM carbonatgepufferte Spüllösung (0,05% Tween 20/PBS, Wako Pure Chemical Industry), ein Blockierungsmittel (Yukijirushi Dairy), 0,2 M Citratpuffer, enthaltend primäre und sekundäre IgA, IgM und IgG (Mie Kagaku), ABTS-Lösung, Substratlösung, Reaktionssuspensionslösung usw.. Die primären Antikörper von IgM, IgA und IgG wurden 1000-fach mit 50 mM Carbonatpuffer (pH 9,6) verdünnt, in eine Platte mit 96 Vertiefungen mit 100 μl in jede Vertiefung gegossen, und man ließ sie 1 Stunde bei 37°C stehen.
Nachdem die Platte 3- oder 4-mal mit einer Spüllösung gespült worden war, wurden 300 μl einer 4-fach verdünnten Block Ace in jede Vertiefung gegossen und man ließ dies 1 Stunde bei 37°C zum Blockieren stehen. Nach einem 3- oder 4-fachen Spülen der Platte mit Spüllösung wurden 50 μl einer Kulturüberstands, enthaltend IgM, IgA und IgG, jeder Vertiefung zugefügt, und man ließ dies 1 Stunde zur Reaktion bei 37°C stehen. Nach einem 3- oder 4-fachen Spülen der Platte mit Spüllösung wurden die enzymmarkierten Anti-IgM, -IgA und -IgG sekundären Antikörper in eine Platte mit 96 Vertiefungen mit 100 μl pro Vertiefung gegossen, und man ließ dies 1 Stunde bei 37°C stehen.
Die Platte wurde weiter 3- oder 4-mal mit Spüllösung gespült und dann wurde die Substratlösung einer Platte mit 96 Vertiefungen mit 100 μl pro Vertiefung zugefügt, und nach einer Reaktion bei 37°C für 5 bis 15 Minuten wurde die Reaktionssuspensionslösung mit 100 μl pro Vertiefung zugefügt und ein ELISA-Mikroplate-Spektrofotometer wurde verwendet, um die Absorption von jeder Vertiefung bei 415 nm zu messen. IgM-, IgA- und IgG-Standardlösungen wurden den korrespondierenden IgM-, IgA- und IgG-Kulturüberständen zugefügt und die Mengen an IgM, IgA und IgG in jedem Kulturüberstand wurden im Hinblick auf ihre primären Regressionslinien hin überprüft.
Das Meßverfahren der IgE-Konzentration war fast dasselbe wie das oben beschriebene Verfahren für die Messung der IgM-, IgA- und IgG-Antikörperkonzentrationen, außer daß das Abidin-Biotin-Verfahren verwendet wurde, worin enzymmarkiertes Abidin zugefügt wird, nachdem 100 μl eines biotinmarkierten Anti-IgE-Antikörpers in jede Vertiefung der Platte gegossen wurde. Man ließ die Platte 30 Minuten bei 37°C stehen. Nach 3- oder 4-maligem Spülen wurde die Substratlösung und die Reaktionssuspensionslösung jeweils zugefügt und der IgE-Gehalt wurden wie oben beschrieben gemessen.
Die Ergebnisse sind in 2 dargestellt. In der Gruppe, der α-Tocopherol (α-Toc) verabreicht wurde, lag das Niveau des Allergenabsorptions-inhibierenden Faktors IgA signifikant höher, während in der Gruppe, der Sesamin und α-Tocopherol (Ses + α-Toc) verabreicht wurde, das Niveau an IgE, das eine Hauptrolle bei der Typ I Allergie spielt, signifikant niedriger lag. Diese Ergebnisse legen nahe, daß die kombinierte Verwendung von Sesamin und α-Tocopherol eine antiallergische Wirkung ausübt.
Diskussion
Die Produktion des eine Allergie auslösenden chemischen Mediators LTC₄ war niedriger in der α-Toc-Gruppe und der Ses + α-Toc-Gruppe, war jedoch höher in der Sesamin-(Ses)-Gruppe. Ebenfalls im Hinblick auf die Produktion eines anderen allergieauslösenden chemischen Mediators PGE2 war eine Tendenz zu einer Reduktion bei den Ses- und α-Toc-Gruppen zu beobachten, jedoch ein Anstieg in der Ses + α-Toc-Gruppe. Diese Ergebnisse zeigen, daß Sesamin und α-Tocopherol unterschiedliche Wirkungsstellen haben, daß jedoch beide eine supprimierende Wirkung gegenüber allergischen Reaktionen ausüben. Zusätzlich wurde bestätigt, daß die simultane Verabreichung von Sesamin und α-Tocopherol zu einer synergistischen Wirkung der beiden führt. Es wird angegeben, daß die effektiven Bestandteile der vorliegenden Erfindung, Sesamin oder Sesamin und α-Tocopherol, nicht an einer einzelnen Stelle von Immunreaktionen wirken, sondern Immunreaktionen durch Kontrolle von mehr als einer Reaktion steuern. Die Verwendung einer solchen Kombination von Allergie unterdrückenden Faktoren sollte allergische Reaktionen bei Allergiepatienten abschwächen und ein Fortschreiten bei gesunden Personen zu allergischen Konstitutionen verhindern.
Beispiel 2
Sechs Gruppen von 4 Wochen alten (durchschnittliches Körpergewicht: 96 g) männlichen Brown-Norway (BN) Ratten wurden mit 8 Ratten pro Gruppe gebildet. Einer Gruppe wurde eine Normaldiät verabreicht, umfassend 20% Kasein, 5% Maisöl, 5% Cellulose, 3,5% Mineralmischung (AIN-TM), 1% Vitaminmischung (AIN-TM), 0,2% Cholinbitartrat, 0,3% DL-Methionin, 15% Maisstärke und 50% Saccharose. Den verbleibenden 5 Gruppen wurden Diäten verabreicht, die auf Kosten von Saccharose jeweils 0,5% Sesaminol, hergestellt aus rohem Sesamöl (Verbindung A), Sesamolin, hergestellt aus rohem/gereinigtem Sesamöl (Verbindung B) oder 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan (Verbindung C), 2,6-Bis-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan (Verbindung D) oder 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenoxy)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan (Verbindung E), hergestellt durch Acetonextraktion von Sesamsamen, wobei die Herstellung gemäß einem Verfahren der Patentanmeldung (japanische ungeprüfte Patentveröffentlichung Nr. 1-243992) mit weiterer Zugabe von 0,5% α-Tocopherol durchgeführt wurde, enthielten.
Nach 3 Wochen wurden die Leukotrien C₄ (LTC₄) Konzentrationen in der Lunge gemäß Beispiel 1 überprüft. Die LTC₄-Produktion in der Lunge in der normalen Diätgruppe betrug 62,7 ± 3,9 (ng/g), während sie in den Gruppen, denen eine Diät enthaltend die Verbindungen A, B, C, D und E mit α-Tocopherol verabreicht wurde, signifikant niedriger lag bei 32,1 ± 4,6, 34,4 ± 5,4, 40,2 ± 3,8, 44,5 ± 3,4 bzw. 39,7 ± 4,7.
Beispiel 3
Experimentelle Tiere und Diäten
Vier Gruppen von 4 Wochen alten männlichen (durchschnittliches Körgergewicht: 147 g) Sprague-Dawley (SD) Ratten (Seiwa Experimental Animals) wurden mit 6 Ratten pro Gruppe gebildet. Einer Gruppe wurde eine Normaldiät verabreicht, umfassend 20% Kasein, 5% Maisöl, 5% Cellulose, 3,5% Mineralmischung (AIN-TM: American Institute of Nutrition), 1% Vitaminmischung (AIN-TM), 0,2% Cholinbitartrat, 0,3% DL-Methionin, 15% Maisstärke und 50% Saccharose. Den verbleibenden 3 Gruppen wurden Diäten verabreicht enthaltend 0,5% Sesamin oder 0,5% α-Tocopherol auf Kosten von Saccharose unter zusätzlicher Zugabe von 0,5% Sesamin und 0,5% α-Tocopherol auf Kosten von Saccharose. Das verwendete Sesamin war dasselbe, das auch in Beispiel 1 verwendet wurde. Nach 3 Wochen Füttern wurde Blut aus der Abdominalaorta unter Diethyletheranästhesie entnommen und Lunge und Milz wurden ausgeschnitten.
Die Leukotrien B₄ (LTB₄) und Leukotrien C₄ (LTC₄) Konzentrationen in den Lungen- und Milzgeweben, die aus den Ratten ausgeschnitten worden waren, wurden durch ein Radioimmunoassay gemäß einem gewöhnlichen Verfahren überprüft. Zusätzlich wurden 1,5 ml Plasma in ein Zentrifugenröhrchen plaziert, enthaltend 1 ml 1 N HCLO₄, und damit vermischt und dann zentrifugiert (3.000 Upm, 30 Minuten), und das Histamin wurde extrahiert und gemäß dem gewöhnlichen Verfahren überprüft.
Die Ergebnisse sind in 3 dargestellt. Wie sich aus diesen Grafiken klar ergibt, war die Leukotrien B₄ (LTB₄) Konzentration im Milzgewebe und die Histaminkonzentration im Plasma niedriger bei Verabreichung von Sesamin und Tocopherol und war sogar signifikant niedriger bei der Verabreichung von beiden. Zusätzlich war die Leukotrien C₄ (LTC₄) Konzentration im Lungengewebe signifikant niedriger in synergistischer weise durch Verabreichung von sowohl Sesamin als auch Tocopherol. So gab es signifikant niedrigere Niveaus von allergiebezogenen chemischen Mediatoren bei Verabreichung von Sesamin allein oder einer Kombination von Sesamin und Tocopherol.
Für die Messung der mesenteralen Lymphknoten-Immunglobulin-Konzentration wurden mesenterale Lymphknoten ausgeschnitten und die Lymphozyten wurden in ein RPMI 1640 Medium (Nissui Pharmaceutical Co.) gequetscht, und nach Inkubation der Zellen für 30 Minuten bei 37°C zur Entfernung der Fibroblasten wurden 5 ml der Zellsuspension auf 4 ml Lympholyte-Rat (Cedarlane, Kanada) geschichtet und zentrifugiert (1.500 × g, 30 min). Die Lymphozytenbande an der Grenzfläche wurde wiedergewonnen und die Zellen wurden 3-mal mit dem RPMI 1640 Medium gespült. Die Lymphozyten wurden in 10% fötalem Rinderserum (FBS, Intergen Co., USA)/RPMI 1640 Medium kultiviert. Die MLN-Lymphozyten wurden auf 2 × 106 Zellen/ml eingestellt und 6 Stunden bei 37°C inkubiert, woraufhin die Konzentrationen an IgE, IgA, IgM und IgG durch den Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) gemessen wurden.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 dargestellt. Die Konzentration an antiallergischem IgA war signifikant höher bei Verabreichung von Sesamin. Weiterhin war die Konzentration an IgG, das die Reaktion zwischen Allergenen und IgE-Antikörpern inhibiert, in synergistischer Weise deutlich höher bei Verabreichung von sowohl Sesamin als auch Tocopherol.
Wie oben gezeigt, kann eine Kombination aus Sesamin und Tocopherol verwendet werden, um allergische Symptome zu verhindern oder zu verbessern. Tabelle 2 Einfluß von Sesamin und Tocopherol auf die Immunoglobulin-Konzentration in mesenteralen Lymphknoten-Lymphozyten

Werte: Mittel ± SA
Signifikante Unterschiede zwischen unterschiedlichen Buchstaben, a, b und c: P < 0,05
n.d.: nicht nachgewiesen

Beispiel 4
Zu 100 g Butterfett, aus dem die Buttermilch durch einen Rührvorgang (Verbuttern) während des Butterherstellungsverfahrens entfernt worden war, wurden 1,2 g einer Mischung aus Sesamin und Episesamin (Sesamin: 51,3%, Episesamin: 47,8%) und 1,2 g Tocopherolacetat zugefügt, und die Knetoperation (Bearbeiten) wurde zu einer homogenen Zusammensetzung zum Erhalt einer Butter durchgeführt, enthaltend effektive Bestandteile der vorliegenden Erfindung, die eine Wirkung zur Verhinderung oder Verbesserung allergischer Symptome aufwies.
Beispiel 5
Ein 0,5 g Anteil der effektiven Bestandteile der vorliegenden Erfindung wurde mit 20,5 g Kieselsäureanhydrid vermischt und dann wurden 79 g Maisstärke vor dem weiteren Vermischen zugefügt. Ein 100 ml Anteil einer 10%igen Hydroxypropylcellulose/Ethanol-Lösung wurde der Mischung zugefügt, die dann erwärmt, extrudiert und durch die gewöhnlichen Verfahren zum Erhalt von Körnern getrocknet wurde.
Beispiel 6
Ein 20 g Anteil Kieselsäureanhydrid wurde mit 3,5 g einer Mischung aus Sesamin und Episesamin (Sesamin: 51,3%, Episesamin: 47,8%) und 0,5 g Tocopherolacetat vermischt und dann wurden 10 g mikrokristalline Cellulose, 3,0 g Magnesiumstearat und 60 g Lactose zugefügt und damit vermischt, und die Mischung wurde unter Verwendung einer Einzelschuß-Schlagtablettiermaschine zur Herstellung von Tabletten mit einem Durchmesser von 7 mm und einem Gewicht von 100 mg tablettiert.
Beispiel 7
Ein 2,5 g Anteil der effektiven Bestandteile der vorliegenden Erfindung wurde bei 122°C in 200 g des nichtionischen Tensids TO-10M (Nikko Chemicals) gelöst und 4,7975 l physiologische Salzlösung, sterilisiert durch Erwärmen bei 60°C, wurden zugefügt und vollständig damit vermischt, woraufhin die Mischung in aseptische Gefäße verteilt wurde, die zur Herstellung von Injektionen versiegelt wurden.
Beispiel 8
Wasser wurde zu 100 Gew.Teilen Gelatine und zu 35 Gew.Teilen Glycerin-Nahrungsergänzungsmittei zugefügt, das darin bei 50 bis 60°C gelöst wurde, um eine Gelatinemembran mit einer Viskosität von 20.000 cps herzustellen. Dann wurden 95,1% Weizenkeimöl, 2,9% Vitamin E-Öl und 2% Sesamin zugemischt, um den Inhalt herzustellen. Diese wurden für ein Kapselformen und Trocknen durch gewöhnliche Verfahren verwendet, um Weichkapseln herzu stellen, enthaltend 180 mg der Inhalte pro Kapsel. Jede Kapsel enthielt 3,6 mg Sesamin und 2,34 mg α-Tocopherol.
Klinisches Beispiel 1
Atopischen Dermatitis-Patienten (5) wurde oral eine der in Beispiel 6 hergestellten Tabletten dreimal am Tag, morgens, mittags und abends (Gesamtheit pro Tablettendosierung des Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivats und Antioxidans: 12,4 mg), über eine Zeitspanne von 8 Wochen verabreicht und die Wirksamkeit wurde bewertet. Im Ergebnis konnte bei 3 der atopischen Dermatitis-Patienten die vorliegende Erfindung als etwas effektiv, effektiv oder sehr effektiv angesehen werden.
Klinisches Beispiel 2
Atopischen Rhinitis-Patienten (5) wurde oral eine der in Beispiel 8 hergestellten Kapseln dreimal am Tag, morgens, mittags und abends (Gesamtheit pro Kapseldosierung des Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivats und Antioxidans: 17,82 mg), über eine Zeitspanne von 8 Wochen verabreicht und die Wirksamkeit wurde bewertet. Im Ergebnis konnte bei 3 der atopischen Rhinitis-Patienten die vorliegende Erfindung als etwas wirksam, wirksam oder sehr wirksam betrachtet werden.
Klinisches Beispiel 3
Patienten mit Heuschnupfen (5) wurde oral eine der in Beispiel. 8 hergestellten Kapseln dreimal am Tag, morgens, mittags und abends (Gesamtheit pro Kapseldosierung des Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Derivats und Antioxidans: 17,82 mg), über eine Zeitspanne von 8 Wochen verabreicht und die Effizienz wurde bewertet. Im Ergebnis wurde bei 2 der Heuschnupfen-Patienten die vorliegende Erfindung als etwas effektiv, effektiv oder sehr effektiv betrachtet.

Claims

Verwendung einer Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung, dargestellt durch die folgende allgemeine Formel (I):
worin R¹, R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten, oder R¹ und R² und/oder R⁴ und R⁵ zusammen eine Methylen- oder Ethylengruppe bedeuten, und n, m und 1 bedeuten 0 oder 1, in Kombination mit einem Antioxidans, das nicht eine Verbindung der Formel (I) ist, für die Herstellung eines Nahrungsprodukts (Nahrungsmittel, Getränk oder Bestandteil dafür) oder eines Medikaments für die Verhinderung oder Abschwächung von Allergiesymptomen, ausgewählt aus atopischer Dermatitis, atopischer Dermatitis im Jugendalter, Nesselsucht, Kontaktdermatitis, seniler Dermatose, Bronchialasthma, allergischer Rhinitis, Heuschnupfen, Ischämie, Kardialanaplhylaxie, endotoxischer Schock und Psoriasis.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei das Antioxidans Tocopherol ist.
Verwendung gemäß Anspruch 1 oder 2, wobei die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung mindestens eine ist, ausgewählt aus Sesamin, Sesaminol, Episesamin, Episesaminol, Sesamolin, 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]-octan, 2,6-Bis(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan oder 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenoxy)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan.
Verwendung gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung als solche oder in Form eines Extrakts verwendet wird, worin der Hauptbestandteil die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung ist.
Verwendung der durch die allgemeine folgende Formel (I) dargestellten Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung:
worin R¹, R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten, oder R¹ und R² und/oder R⁴ und R⁵ zusammen eine Methylen- oder Ethylengruppe bedeuten, und n, m und 1 bedeuten 0 oder 1, in Kombination mit einem Antioxidans, das nicht eine Verbindung der Formel (I) ist, für die Herstellung eines Nahrungsprodukts (Nahrungsmittel, Getränk oder Bestandteil dafür) oder eines Medikaments für die Verhinderung oder Abschwächung eines allergischen Symptoms, assoziiert mit einer Arzneimittelallergie, Nahrungsmittelallergie oder Insektenallergie.
Verwendung einer Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung gemäß Anspruch 5, wobei das Antioxidans Tocopherol ist.
Verwendung einer Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung gemäß Anspruch 5 oder 6, worin die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung mindestens eine ist, ausgewählt aus Sesamin, Sesaminol, Episesamin, Episesaminol, Sesamolin, 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan oder 2,6-Bis-(3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan, 2-(3,4-Methylendioxyphenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyphenoxy)-3,7-dioxabicyclo[3.3.0]octan.
Verwendung gemäß einem der Ansprüche 5, 6 oder 7, wobei die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung als solche oder in Form eines Extrakts verwendet wird, worin der Hauptbestandteil die Dioxabicyclo[3.3.0]octan-Verbindung ist.