DE69002136T2

DE69002136T2 - Saccharidderivate von Protocatechualdehyd.

Info

Publication number: DE69002136T2
Application number: DE90114847T
Authority: DE
Inventors: Kazuyoshi Inada; Fumihiko Kimura; Sakuo Noda
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1989-08-02
Filing date: 1990-08-02
Publication date: 1993-10-14
Anticipated expiration: 2010-08-03
Also published as: KR920007273B1; EP0411624B1; NO903397D0; ZA906008B; CA2022516A1; CA2022516C; NO903397L; EP0411624A2; CN1049346A; NO170854C; DK0411624T3; AU6007590A; KR920003836A; US5120835A; JPH0363224A; EP0411624A3; CN1023646C; NO170854B; DE69002136D1; AU621504B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Saccharidderivate von Protocatechualdehyd, ein Verfahren zu deren Herstellung und die Verwendung der Derivate als entzündungshemmende Mittel.
Kürzlich hat Protocatechualdehyd Aufmerksamkeit als Antikrebsmittel (japanische offengelegte Patentveröffentlichung Nr. 55-51,018), als entzündungshemmendes Mittel (japanische offengelegte Patentveröffentlichung Nr. 58-83619) und als Heilmittel gegen Nephritis auf sich gezogen (japanische offengelegte Patentveröffentlichung Nr. 59-196818).
In vitro-Tests haben gezeigt, daß Protocatechualdehyd selbst dann, wenn er im niedrigen Konzentrationen verabreicht wird, eine brauchbare Wirkung als entzündungshemmendes Mittel zeigt, das die pharmakologische Wirkung hat, das Granulom-Wachstum, adjuvante Arthritis, Leukocytenmigration, Blutplättchenaggregation und dergleichen zu inhibieren. In In-vivo-Tests muß jedoch aufgrund der höheren Verstoffwechslungsgeschwindigkeit eine große Dosis Protocatechualdehyd über einen längeren Zeitraum verabreicht werden, um eine signifikante pharmakologische Wirkung zu erhalten. Außerdem wirft der Aldehydteil des Protocatechualdehyd-Moleküls Probleme in Bezug auf Reizung und Oxidierbarkeit auf.
Die JP-A 58-83,619 beschreibt ein entzündungshemmendes Mittel, das 3,4-Dihydroxybenzaldehyd als aktiven Bestandteil enthalt. Zur Verbesserung der reizenden Wirkung kann der aktive Bestandteil in eine Mischung oder ein Kondensat mit einem Saccharid ausgetauscht werden.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wurde als Ergebnis von Forschung und Entwicklung eines Arzneimittels, das an einen lebenden Organismus verabreicht werden kann, der nur eine kleine Dosis benötigt um eine signifikante pharmakologische Wirkung mit minimalen Nebenwirkungen zu erzielen, gefunden, daß diese Aufgabe gelöst werden kann durch die neuen Saccharidderivate von Protochatechualdehyd, worin der Aldehydteil zu Sacchariden umgesetzt ist.
Dementsprechend ist eine vordringliche Aufgabe der vorliegenden Erfindung, neue Saccharidderivate von Protochatechualdehyd bereitzustellen, die eine Verabreichung nur einer kleinen Dosismenge erfordern, um vorteilhafte pharmakologische Wirkungen wie beispielsweise eine entzündungshemmende Wirkung bei einem Minimum an Nebenwirkungen zu zeigen. Gleichzeitig bestand die Aufgabe darin, das Verfahren zu deren Herstellung und die Verwendung der Derivate bereitzustellen. Andere Aufgaben der vorliegenden Erfindung ergeben sich aus der nachfolgenden Beschreibung.
Die beigefügten Figuren 1 bis 8 zeigen die Infrarot-Absorptionsspektren der folgenden Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung:
Figur 1: Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid
Figur 2: Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid
Figur 3: Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-galactopyranosid
Figur 4: Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-galactopyranosid
Figur 5: Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-mannopyranosid
Figur 6: Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-mannopyranosid
Figur 7: Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-β-D-glucopyranosid
Figur 6: Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-β-D-glucopyranosid.
Die vorliegende Erfindung stellt neue Saccharidderivate von Protocatechualdehyd bereit, die durch die folgende allgemeine Formel (I) wiedergegeben werden:
worin R¹ für ein Wasserstoffatom oder eine Benzoylgruppe steht und R² für eine Alkylgruppe steht.
Die durch die obige allgemeine Formel (I) gezeigten Saccharide sind Derivate von Hexosen, die beispielsweise Derivate von Glucose, Mannose, Galactose, Talose, Allose, Altrose, Idose und Gulose einschließen. Unter diesen sind die Derivate der Glucose, Galactose und Mannose bevorzugt.
R² steht für eine Alkylgruppe, die die Hydroxylgruppe in der 1-Position der Saccharide schützt, wobei die Alkylgruppe 1 bis 4 Kohlenstoffatome enthalt, vorzugsweise 1 bis 2 Kohlenstoffatome.
Die Saccharidderivate von Protocatechualdehyd gemäß der vorliegenden Erfindung, die durch die obige allgemeine Formel (I) wiedergegeben werden, schließen beispielsweise die folgenden Verbindungen ein:
Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ia&sub1;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ib&sub1;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-β-D-glucopyranosid (Ia&sub2;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-β-D-glucopyranosid (Ib&sub2;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-galactopyranosid (Ia&sub3;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-galactopyranosid (Ib&sub3;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-β-D-galactopyranosid (Ia&sub4;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-β-D-galactopyranosid (Ib&sub4;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-mannopyranosid (Ia&sub5;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-mannopyranosid (Ib&sub5;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-β-D-mannopyranosid (Ia&sub6;)
Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyhden)-β-D-mannopyranosid (Ib&sub6;)
Ethyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ia&sub7;)
Ethyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ib&sub7;)
n-Propyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ia&sub8;)
n-Propyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ib&sub8;)
i-Propyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ia&sub9;)
i-Propyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ib&sub9;)
n-Butyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ia&sub1;&sub0;)
n-Butyl-4 6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden)-α-D-glucopyranosid (Ib&sub1;&sub0;)
Die Strukturformeln der obigen Verbindungen sind nachfolgend gezeigt, wobei die für die Verbindungen verwendeten Codezahlen (Ia&sub1;, Ib&sub1;, ..... Ia&sub1;&sub0;, Ib&sub1;&sub0;) denselben Codezahlen entsprechen, wie sie für die Strukturformeln verwendet wurden.
Die Saccaridderivate von Protocatechualdehyd gemäß der vorliegenden Erfindung können in der α-Form, der β-Form oder Mischungen daraus vorliegen. Die Saccharidreste in den Derivaten gemäß der vorliegenden Erfindung können in der D-Form, der L-Form oder deren Mischungen vorliegen.
Die Saccharidderivate von Protocatechualdehyd gemäß der vorliegenden Erfindung (nachfolgend als "Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung" bezeichnet) können vorteilhafterweise durch das folgende Verfahren hergestellt werden:
Man setzt die acetalisiene Verbindung (V), die durch Acetalisierung von 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd (II) unter Verwendung eines niederen Alkohls (IV) entsteht, mit dem Saccharidderivat um, das durch die folgende allgemeine Formel (III) wiedergegeben wird:
worin R² für eine Alkylgruppe steht. Dadurch wird Verbindung (Ia) gemäß der vorliegenden Erfindung erhalten, die eine Benzoylgruppe als Rest R¹ in der allgemeinen Formel (I) aufweist. Außerdem wird durch Ammonolyse Verbindung (Ib) gemäß der vorliegenden Erfindung erhalten, die ein Wasserstoffatom als Rest R¹ in der allgemeinen Formel (I) aufweist.
Der Reaktionsweg für die Synthese der Saccharidderivate von Protocatechualdehyd gemäß der vorliegenden Erfindung ist nachfolgend gezeigt. Ammonolyse
Die Acetalisierung in dem oben angegebenen Herstellungsverfanrens wird in der Weise durchgeführt, daß man 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd (II) ein einem niederen Alkohol (IV) wie beispielsweise Methanol oder Ethanol löst. Danach wird eine katalytische Menge eines Katalysators wie beispielsweise p-Toluolsulfonsäure zugesetzt. Hiernach wird die Mischung 2 bis 5 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Der niedere Alkohol wird aus der Reaktionsmischung verdampft, und der Rückstand oder die acetalisierte Verbindung (V), die aus dem Rückstand isoliert wird, wird mit den Saccharidderivaten (III) umgesetzt.
Die Saccharidderivate schließen beispielsweise 1-O-Methyl-α-D-glucopyranosid, 1-O-Methyl- β-D-glucopyranosid, 1-O-Methyl-α-D-galactopyranosid, 1-O-Methyl-β-D-galactopyranosid, 1-O-Methyl-α-D-mannopyranosid, 1-O-Methyl-β-D-mannopyranosid, 1-O-Ethyl-α-D- glucopyranosid, 1-O-n-Propyl-α-D-glucopyranosid, 1-O-i-Propyl-α-D-glucopyranosid und 1-O-n-Butyl-α-D-glucopyranosid ein.
Die acetalysierten Verbindungen von 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd (II) werden mit den Saccharidderivaten (III) in einem organischen Lösungsmittel in Gegenwart eines sauren Katalysators bei 55 bis 65 ºC umgesetzt. Diese Temperatur wird möglicherweise auf 80 bis 100 ºC angehoben, während der Alkohol, der freigesetzt wird, abgetrennt und entfernt wird. Das Lösungsmittel wird unter verringertem Druck am Rückfluß erhitzt. Obwohl jedes beliebige organische Lösungsmittel, das die Reaktion nicht nachteilig beeinträchtigt, verwendet werden kann, wird üblicherweise absolutes Dimethylformamid verwendet. Als Beispiel für den sauren Katalysator ist p-Toluolsulfonsäure zu nennen. Nachdem die Reaktion vollständig abgelaufen ist, wird die Verbindung (Ia) gemäß der vorliegenden Erfindung durch Verdampfen des organischen Lösungsmittels unter verringertem Druck, danach Lösen des Rückstandes in einem organischen Lösungsmittel wie beispielsweise Ethylacetat, Entfernen des sauren Katalysators durch Waschen mit einer Waschlösung wie beispielsweise gesättigter wäßriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung, danach Entfernen des organischen Lösungsmittels, sofern dies erforderlich ist, und letztendlich mögliches Reinigen des Produkts mittels einer üblichen Reinigungsmaßnahme wie beispielsweise Umkristallisation erhalten.
Die Verbindung (Ib) gemäß der vorliegenden Erfindung wird durch Ammonolyse der Verbindung (Ia) gemäß der vorliegenden Erfindung erhalten. Die Ammonolyse wird in der Weise durchgeführt, daß man die Verbindung (Ia) gemäß der vorliegenden Erfindung in einem Alkohol wie beispielsweise in absolutem Methanol suspendiert und danach Ammoniakgas in Blasenform in die Reaktionsmischung bei Raumtemperatur einleitet. Das Ammoniakgas wird in Blasenform langsam eingeleitet, um die Reaktionstemperatur durch Wärmeentwicklung nicht ansteigen zu lassen.
Der als Ausgangsstoff verwendete 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd (II) wird in der Weise erhalten, daß man beispielsweise Protocatechualdehyd und Triethylamin in Dichlormethan löst und danach Benzoylchlorid tropfenweise unter Rühren in einem Eiswasserbad zusetzt.
Als nächstes werden die medizinischen Anwendungen der Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung veranschaulicht.
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung können oral, intraintestinal oder durch Injektion in einer Vielzahl von pharmazeutischen Herstellungsformen und Formulierungen in Kombination mit medizinisch anerkannten Trägern und/oder Hilfsstoffen verabreicht werden. In diesem Fall können zwei oder mehrere Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung gemeinsam in Mischung miteinander verwendet werden, oder sie können in Kombination mit jeder beliebigen anderen pharmazeutisch aktiven Komponente verwendet werden.
Da die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung oral oder nichtoral verabreicht werden können, ist es möglich, verschiedene Arzneimittelformen heranzuziehen, die für die jeweilige Verabreichungsart geeignet sind. Außerdem können die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung in Form einer Verabreichungseinheit zugeführt werden. Darin ist eine Vielzahl von Zubereitungsformen wie beispielsweise Pulver, Granulat, Tablette, mit Zucker überzogene Tablette, Kapsel, Zäpfchen, Suspension, Flüssigkeit, Emulsion, Ampulle und Injektion zulässig, solange eine wirksame Dosismenge enthalten ist.
Dementsprechend sind die Arzneimittel gemäß der vorliegenden Erfindung als mittels jeden beliebigen Weges der pharmazeutischen Herstellung bereitstellbar zu verstehen. Der Gehalt an Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung (aktive Komponente) in der Zubereitung gemaß der vorliegenden Erfindung kann in weiten Grenzen zwischen 0,01 und 100 % schwanken, vorzugsweise von 0,1 bis 70 % (bezogen auf das Gewicht).
Wie oben erwähnt, werden die Arzneimittel gemäß der vorliegenden Erfindung an Menschen und Tiere oral oder nichtoral verabreicht. In diesem Fall schließt eine orale Verabreichung auch eine sublinguale Verabreichung ein, und eine nichtorale Verabreichung schließt subkutane, intramuskuläre und intravenöse Injektionen und Tropfinfusionen ein.
Da die Dosierung der Arzneimittel gemäß der vorliegenden Erfindung in Abhängigkeit vom Subjekt (Tier oder Mensch), von Alter, individuellen Verschiedenheiten, Krankheitszuständen und dergleichen schwankt kann das Arzneimittel gemäß der vorliegenden Erfindung in einer Menge verabreicht werden, die außerhalb des nachfolgend angegebenen Dosisbereichs liegt. Im Falle von Menschen liegt jedoch die allgemeine orale Dosis an Verbindungen gemäß der Erfindung bei 0,1 bis 500 mg pro 1 kg Gewicht pro Tag, vorzugsweise bei 0,5 bis 200 mg. Die allgemeine nichtorale Dosierung liegt bei 0,01 bis 200 mg pro 1 kg Gewicht pro Tag, vorzugsweise bei 0,1 bis 100 mg, wobei die tägliche Menge über 1 bis 4 Dosierungen verteilt verabreicht wird.
Wie bereits oben angegeben, sind die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung neue Verbindungen mit inhibierender Aktivität gegen das Granulomwachstum, mit niedrigerer Toxizität als Protocatechualdehyd und mit pharmazeutischer Wirkung selbst bei Verabreichung in kleiner Dosierung.
Dementsprechend sind die Verbindungen gemäß der Erfindung als entzündungshemmende Mittel für die Heilung von chronischem Gelenkrheumatismus usw. geeignet, wenn sie allein oder als aktive Komponente in pharmazeutischen Zubereitungen verabreicht werden.
Die vorliegende Erfindung wird nachfolgend unter Bezugnahme auf die folgenden Beispiele veranschaulicht.

Beispiel I

(1) Synthese von 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd

69 g Protocatechualdehyd und 111 g Triethylamin wurden in 1.500 ml Dichlormethan gelöst. Danach wurden 141 g Benzoylchlorid der Lösung über einen Zeitraum von 40 Minuten unter Rühren in einem Eiswasserbad tropfenweise zugesetzt. Nach dem Eintropfen wurde die resultierende Mischung 3 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit 1.000 ml Wasser, 1.000 ml 1 N Chlorwasserstoffsäure und danach mit 1.000 ml Wasser gewaschen. Die resultierenden Dichlormethanschichten wurden entwässert und mit Magnesiumsulfat getrocknet. Danach wurde das Dichlormethan verdampft, und der Rückstand wurde aus Benzol/Hexan umkristallisiert und nochmals aus Methanol umkristallisiert. Letzten Endes wurden 107 g 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd (Ausbeute: 62 %) in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt von 101,0 bis 101,8 ºC erhalten. Die Werte für die Elementaranalyse des Produktes waren die folgenden:
Gefunden (%): C: 72,8 H: 4,0
Berechnet (%): C: 72,8 H: 4,0

(2) Acetalisierung von 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd

18,5 g der wie oben beschrieben erhaltenen Verbindung 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd und 0,35 g p-Toluolsulfonsäure wurden in 150 ml absoluten Methanols gelöst. Nach Aufheizen für 4 Stunden auf Rückflußtemperatur wurde das Methanol bei 40 ºC unter verringertem Druck verdampft.
Der Verdampfungsprozeß wurde weitere 10 Minuten fortgesetzt, nachdem das Methanol abdestilliert war. Außerdem wurden weitere Versuche gemacht, Restmethanol durch Verringerung des Drucks mit einer Vakuumpumpe bei Raumtemperatur zu entfernen. Obwohl der Rückstand noch eine geringe Menge nicht-umgesetzten 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyds enthielt, wurde er in der nächsten Reaktionsstufe eingesetzt.

(3) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid

11 g 1-O-Methyl-α-D-glucopyranosid und 0,3 g p-Toluolsulfonsäure wurden dem Rückstand zugesetzt, der in dem obigen Reaktionsschritt (2) erhalten worden war. Danach wurde die Mischung in 90 ml Dimethylformamid gelöst. Die Verringerung des Drucks unter Verwendung eines Rotationsverdampfers wurde so eingestellt, daß Dimethylformamid unter Rückfluß in einem Wasserbad mit einer Temperatur von 60 bis 65 ºC gehalten wurde. Die Reaktion wurde bei dieser Temperatur 1 Stunde lang gehalten. Danach wurde die Temperatur des Wasserbads auf 85 ºC angehoben, um das Dimethylformamid unter verringertem Druck zu verdampfen. Dasselbe Temperaturniveau wurde für weitere 10 Minuten nach Beendigung der Destillation des Dimethylformamids aufrechterhalten. Danach wurde der Rückstand in 300 ml Ethylacetat gelöst, und diese Lösung wurde zweimal mit 200 ml einer gesättigten wäßrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat und anschließend zweimal mit 200 ml einer gesättigten wäßrigen Lösung von Natriumchlorid gewaschen. Die resultierende Ethylacetatschicht wurde mit Magnesiumsulfat entwässert, und danach wurde das Ethylacetat unter verringertem Druck verdampft. Der Rückstand wurde aus Methanol umkristallisiert und wurde außerdem aus Ethylacetat/n-Hexan umkristallisiert. Letzten Endes wurden 13 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid (Ausbeute: 50 %) in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt von 152 bis 153 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Die Werte für den optischen Drehwert, die Elementaranalyse, die Infrarot-Absorptionsspektren (IR) und ¹H-Kernmagnetischen Resonanzspektren (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden: Winkel der optischen Drehung: [α]D23,0 = + 60 º; (c = 1,0, Aceton)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 64,1 H: 5,0
Berechnet (%): C: 64,4 H: 5,0
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 1
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
7,4 - 8,1 (13H); 5,71 (1H); 4,73 (1H); 4,25 (1H); 3,7 - 3,9 (3H); 3,4 - 3,6 (5H)

(4) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid

10,8 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid, das gemäß dem obigen Schritt (3) erhalten worden war, wurden in 100 ml absoluten Methanols suspendiert, und Ammoniakgas wurde in Blasenform in die Suspension eingeleitet, um bei Raumtemperatur eine Ammonolyse durchzuführen. Das blasenförmige Einleiten von Ammoniakgas wurde mit solch langsamer Geschwindigkeit durchgeführt, daß man sich die Temperatur aufgrund von Wärmeentwicklung nicht erhöhen ließ, und wurde fortgesetzt, bis die Wärmeentwicklung zum Abschluß gekommen war. Danach wurde das Methanol unter verringertem Druck verdampft. Die Aufgabe des Rückstandes zur Dünnschichtchromatographie auf Silicagel (Lösungsmittel: Aceton/Ethylacetat 1/3 (v/v)) zeigte die Bildung einer Verbindung mit einem ungefähren Rf-Wert von 0,3 an. Die Probe veränderte ihre Farbe nach schwarz , sobald sie mit alkoholischen Lösungen von Eisen(III)-chlorid besprüht wurde. Die in Frage stehenden Verbindungen wurden aus dem Rest durch Säulenchromatographie an Silicagel isoliert (Lösungsmittel: Aceton/Ethylacetat 1/3 (v/v)) und wurden aus Ethylacetat umkristallisiert. Letzten Endes wurden 4,4 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid in einer Ausbeute von 68 % in Form von Kristallen erhalten, die einen Schmelzpunkt (unter Zerfall) von 172,5 bis 175,5 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) aufwiesen. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrärot- Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H-Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,5 = + 80,0 º; (c = 1,0, Methanol)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 53,3 H: 6,0
Berechnet (%): C: 53,5 H: 5,7
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 2
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
6,7 - 7,0 (3H); 5,42 (1H); 4,71 (1H); 4,14 (1H); 3,6 - 3,8 (3H); 3,3 - 3,5 (5H)

Beispiel 2

(1) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-galactopyranosid

Der Rückstand, der aus der Acetalisierung von 20 g 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (2) erhalten worden war, wurde mit 11,3 g 1-O-Methyl-α- D-galactopyranosid in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (3) umgesetzt. Nach einer Nachbehandlung wurde der nach der Verdampfung von Ethylacetat erhaltene Rückstand aus Methanol umkristallisiert und nochmals aus Ethylacetat umkristallisiert. Letzten Endes wurden 14,1 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-galactopyranosid in einer Ausbeute von 47 % in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt von 186,5 bis 187,5 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrarot-Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H- Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,5 = + 84,4 º; (c = 1,0, Aceton)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 64,3 H: 5,0
Berechnet (%): C: 64,4 H: 5,0
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 3
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
7,4 - 8,1 (13H); 5,73 (1H); 4,75 (1H); 4,32 (1H); 4,1 - 4,2 (2H); 3,7 - 3,9 (3H); 3,39 (3H)

(2) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)α-D-galactopyranosid

Wie in Beispiel 1 (4) wurde eine Ammonolyse durchgeführt, indem man 14,0 g des wie oben in Schritt (1) erhaltenen Produkts Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D- galactopyranosid einsetzte. Der nach der Verdampfung von Methanol erhaltene Rückstand wurde einer Säulenchromatographie an Silicagel unterzogen (Lösungsmittel: Aceton/Ethylacetat 1/3 (v/v)). Der Teil, der sich mit Eisen(III)-chlorid nach Dünnschichtchromatographie auf Silicagel (Rf-Wert: 0,2 bis 0,25) färbte, wurde isoliert. Danach wurde dieser Teil aus Aceton/Benzol umkristallisiert. Letzten Endes wurden 4,9 g Methyl-4,6-O-(3',4'- dihydroxybenzyliden-)α-D-galactopyranosid in einer Ausbeute von 58 % in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt (unter Zerfall) von 110 bis 113 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrarot-Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H-Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,7 = + 147 º; (c = 1,0, Methanol)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 53,3 H: 5,9
Berechnet (%): C: 53,5 H: 5,7
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 4
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
6,7 - 7,0 (3H); 5,44 (1H); 4,74 (1H); 4,0 - 4,3 (3H); 3,8 - 3,9 (2H); 3,66 (1H); 3,39 (3H)

Beispiel 3

(1) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-mannopyranosid

Der Rückstand, der aus der einer Acetalisierung von 10 g 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (2) erhalten worden war, wurde mit 5,6 g 1-O-Methyl- α-D-mannopyranosid in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (3) umgesetzt. Nach einer Nachbehandlung und vor einer Umkristallisation wurde der nach der Verdampfung von Ethylacetat erhaltene Rückstand mittels Säulenchromatographie an Silicagel (Lösungsmittel: Benzol/Ethylacetat 7/3 (v/v)) isoliert und danach aus Benzol/Cyclohexan umkristallisiert. Letzten Endes wurden 6,1 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-mannopyranosid in einer Ausbeute von 40 % in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt von 166,0 bis 166,7 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrarot-Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H-Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,5 = + 28,4 º; (c = 1,0, Aceton)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 64,1 H: 4,9
Berechnet (%): C: 64,4 H: 5,0
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 5
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):7,4 - 8,1 (13H); 5,73 (1H); 4,71 (1H); 4,23 (1H); 3,7 - 4,0 (5H); 3,38 (3H)

(2) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)α-D-mannopyranosid

Wie in Beispiel 1 (4) wurde eine Ammonolyse unter Einsatz von 3,83 g der wie oben in Schritt (1) beschrieben erhaltenen Verbindung Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden)α-D-mannopyranosid durchgeführt. Der nach der Verdampfung von Methanol erhaltene Rückstand wurde einer Säulenchromatographie an Silicagel unterzogen (Lösungsmittel: Benzol/Ethylacetat 1/2 (v/v)). Der Teil, der sich mit Eisen(III)-chlorid nach Dünnschichtchromatographie auf Silicagel (Rf-Wert: etwa 0,2) färbte, wurde isoliert. Danach wurde dieser Teil in erwärmtem Aceton gelöst und wurde dadurch auskristallisiert, daß man schrittweise Benzol zugab. Letzten Endes wurden 1,69 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)α-D-mannopyranosid in einer Ausbeute von 73 % in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt (unter Zerfall) von 120,5 bis 123,0 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrarot-Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H-Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,5 = + 32 º; (c = 1,0, Methanol)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 53,4 H: 5,7
Berechnet (%): C: 53,5 H: 5,7
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 6
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
6,7 - 7,0 (3H); 5,44 (1H); 4,68 (1H); 4,13 (1H); 3,6 - 3,9 (5H); 3,37 (3H)

Beispiel 4

(1) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)β-D-glucopyranosid

Der Rückstand, der bei einer Acetalisierung von 8,0 g 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (2) erhalten worden war, wurde mit 4,48 g 1-O-Methyl-β- D-glucopyranosid in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (3) umgesetzt. Nach einer Nachbehandlung wurde der nach der Verdampfung von Ethylacetat erhaltene Rückstand aus Methanol umkristallisiert und nochmals aus Ethylacetat/n-Hexan umkristallisiert. Letzten Endes wurden 5,23 g Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)β-D-glucopyranosid in einer Ausbeute von 43 % in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt von 182 bis 184 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrarot-Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H- Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,5 = -44,0 º; (c = 1,0, Aceton)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 64,1 H: 5,0
Berechnet (%): C: 64,4 H: 5,0
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 7
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
7,4 - 8,1 (13H); 5,72 (1H); 4,2 - 4,4 (2H); 3,80 (1H); 3,69 (1H); 3,4 - 3,6 (5H); 3,32 (1H)

(2) Synthese von Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)β-D-glucopyranosid

Wie in Beispiel 1 (4) wurde eine Ammonolyse durchgeführt, indem man 4, 15 g der wie oben in Schritt (1) erhaltenen Verbindung Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)β-D- glucopyranosid einsetzte. Der nach der Verdampfung von Methanol erhaltene Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silicagel isoliert. Zuerst wurde als Lösungsmittel Ethylacetat/Benzol 3/1 (v/v) verwendet; danach wurde Aceton verwendet. Der Teil, der sich mit Eisen(III)-chlorid bei der Dünnschichtchromatograpnie auf Silicagel (ungefährer Rf-Wert: 0,3) färbte, wurde isoliert (Rohausbeute: 2,3 g). Danach wurde dieser Teil aus Aceton/Benzol 1/1 (v/v) umkristallisiert. Letzten Endes wurden 1,56 g Methyl-4,6-O-(3',4'- dihydroxybenzyliden-)β-D-glucopyranosid in einer Ausbeute von 62 % in Form von Kristallen mit einem Schmelzpunkt (unter Zerfall) von 175,5 bis 178,0 ºC (in einem unter Vakuum verschlossenen Röhrchen) erhalten. Der optische Drehwinkel, die Werte für die Elementaranalyse, das Infrarot-Absorptionsspektrum (IR) und das ¹H-Kernmagnetische Resonanzspektrum (¹H-NMR) dieses Produktes waren die folgenden:
Winkel der optischen Drehung: [α]D23,5 = -74,4 º; (c = 1,0, Methanol)
Elementaranalysewerte:
Gefunden (%): C: 53,4 H: 5,8
Berechnet (%): C: 53,5 H: 5,7
IR (KBr-Tablette): siehe Figur 8
¹H-NMR (d-Aceton, TMS als interner Standard, ppm):
6,7 - 7,0 (3H); 5,45 (1H); 4,31 (1H), 4,20 (1H); 3,6 - 3,8 (2H); 3,3 - 3,5 (5H); 3,28 (1H)

Beispiel 5

Dieses Beispiel zeigt die Ergebnisse eines Tests bezüglich der Toxizität und der pharmakologischen charakteristischen Eigenschaften der Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung: Als Verbindungen der vorliegenden Erfindung wurden die folgenden Verbindungen als Testproben eingesetzt: Methyl-4,6-O-(3',4'-dihydroxybenzyliden-)α-D- glucopyranosid [(Ib&sub1;)] und Methyl-4,6-O-(3',4'-dibenzoyloxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid [(Ia&sub1;)]. Als Kontrollverbindung wurde Protocatechualdehyd (PAL) eingesetzt.

(1) Akute Toxizität

Gruppen von weiblichen Jc1:ICR-Mäusen, die jeweils fünf Tiere umfaßten, wurden nach oraler und intraperitonealer Verabreichung der Produkte sieben Tage lang beobachtet. Die LD&sub5;&sub0;-Werte der Produkte wurden mit dem Litchfield-Wilcoxon-Verfahren bestimmt.
Die vorgeschriebenen Mengen der Testarzneimittel, die in einer 0,3 %igen wäßrigen CMC- Lösung dispergiert waren, wurden mit einer Geschwindigkeit von 20 mg/ml oral verabreicht. Die Testarzneimittel, die in einer 10 %igen isotonischen Natriumchlorid-Ethanollösung gelöst waren, wurden mit einer Geschwindigkeit von 200 mg/ml intraperitoneal verabreicht. Zur Verabreichung wurden Magensonden bzw. Spritzen verwendet. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 gezeigt. Tabelle 1 Verbindung Orale Verabreichung Intraperitoneale Verabreichung

(2) Wirkung auf die Inhibierung von Granulom-Wachstum

Die Wirkung der Verbindungen auf die Inhibierung von Granulom-Wachstum wurden mittels des Verfahrens untersucht, das von "Fujimura et al., Oyo Yakuri, 19 (3), 329 (1980)" vorgeschlagen worden war. Hierzu wurden fünf Wochen alte männliche Donryu-Ratten herangezogen.
Als Papierscheibchen wurden Filterpapiere mit einem Durchmesser von 13 mm und einem Gewicht von 28 mg verwendet, die eine 2 %ige, 0,1 mg/ml von 1 Million Einheiten Dihydroxysteptomycin bzw. Penicillin enthaltende CMC-Lösung aufgesaugt enthielten. Ein Papierscheibchen wurde subkutan im Rücken der Ratte unter Betäubung implantiert. Die Testarzneimittel, die in 0,3 %igen CMC-Lösungen dispergiert waren, wurden zehn Tage oral verabreicht. Danach wurden am elften Tag die Granulome entfernt, und ihre Gewichte wurden gemessen. Der Kontrollgruppe wurde die original 0,3 %ige CMC-Lösung verabreicht, die kein Testarzneimittel enthielt.
Wie in Tabelle 2 gezeigt, zeigen die Ergebnisse dieses Tests an, daß die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung das Wachstum von Granulomen bei einer Dosis inhibieren, die kleiner ist als die von PAL.
Gemäß einer Druckschrift-Referenz (Drugs in Japan (Ethical Drugs), 9. Ausgabe (1985), Yakugyo Jiho Co., Ltd., Seite 105) ist der LD&sub5;&sub0;-Wert von Indometacin, das als positive Kontrollprobe in diesem Test verwendet worden war, 30,2 mg/kg für männliche Mäuse und 29 mg/kg für männliche Ratten. Es ist also Indometacin toxischer sowohl als PAL als auch als die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung.
Andere Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung, die in Übereinstimmung mit den vorstehend beschriebenen Beispielen 2 bis 4 erhalten wurden, zeigten ebenfalls eine ähnliche Wirkung bei der Inhibierung des Wachstums von Granulomen. Tabelle 2 Granulom Verbindung Dosierung (mg/kg/Tag) Zahl der Ratten Trockengewicht (mg) (Mittel) Inhibierungsrate (%) Kontrolle Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung Positive Kontrollverbindung Indometacin

Beispiel 6

Dieses Beispiel zeigt die pharmazeutische Zubereitung von Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung. Verbindung gemäß der vorliegenden Erfindung [Methyl-4,6-O-(3'4'-dihydroxybenzyliden-)α-D-glucopyranosid] Schweres Magnesiumoxid Lactose
Die genannten Komponenten wurden gleichmäßig unter Erhalt eines Pulvers gemischt. Dieses Pulver wurde in Kapseln abgefüllt um Kapselzubereitungen bereitzustellen.

Claims

1. Saccharidderivate von Protocatechualdehyd, die durch die folgende allgemeine Formel (I) wiedergegeben werden,

worin R¹ für ein Wasserstoffatom oder eine Benzoylgruppe steht und R² für eine Alkylgruppe steht, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome enthält.

2. Verfahren zur Herstellung von Saccharidderivaten von Protocatechualdehyd, die durch die allgemeine Formel (I) wiedergegeben werden,

worin R¹ für ein Wasserstoffatom oder eine Benzoylgruppe steht und R² für eine Alkylgruppe steht, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome enthält, dadurch gekennzeichnet, daß die acetalisierte Verbindung, die aus der Acetalisierung von 3,4-Dibenzoyloxybenzaldehyd der folgenden allgemeine Formel (II)

mit einem niederen Alkohol abgeleitet ist, und Saccharidderivate, die durch die allgemeine Formel (III) wiedergegeben sind,

worin R² für eine Alkylgruppe steht, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome enthält, miteinander umgesetzt werden und außerdem eine Ammonolyse durchgeführt wird, wenn dies erforderlich ist.

3. Verfahren nach Anspruch 2, worin die obige acetalisierte Verbindung und das Saccharidderivat, das durch die allgemeine Formel (III) wiedergegeben wird, in einem organischen Lösungsmittel in Gegenwart eines sauren Katalysators miteinander umgesetzt werden.

4. Verfahren nach Anspruch 2 oder 3, worin die Reaktion bei einer Temperatur von 55 bis 65 ºC durchgeführt wird, die gegebenenfalls auf 80 bis 100 ºC angehoben wird.

5. Entzündungshemmende Mittel, enthaltend als aktiven Bestandteil die Saccharidderivate von Protocatechualdehyd, die durch die allgemeine Formel (I) wiedergegeben werden,

6. Pharmazeutische Zubereitungen, die als aktive Komponente Saccharidderivate von Protocatechualdehyd gemäß der Formel (I) umfassen,

worin R¹ für ein Wasserstoffatom oder eine Benzoylgruppe steht und R² für eine Alkylgruppe steht, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome enthält, und pharmazeutisch annehmbare Träger und/oder Hilfsmittel umfassen.

7. Saccharidderivate von Protocatechualdehyd, die durch die allgemeine Formel (I) wiedergegeben werden:

worin R¹ für ein Wasserstoffatom oder eine Benzoylgruppe steht und R² für eine Alkylgruppe steht, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome enthält, zur Verwendung als entzündungshemmendes Mittel.