DE60219196T2

DE60219196T2 - BICYCLISCHE [1,2,4]-TRIAZOL ADENOSIN A2a REZEPTOR ANTAGONISTEN

Info

Publication number: DE60219196T2
Application number: DE60219196T
Authority: DE
Inventors: Bernard R. West Orange NEUSTADT; Hong Hackensack LIU
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2001-11-30
Filing date: 2002-11-26
Publication date: 2008-01-03
Anticipated expiration: 2022-11-27
Also published as: TW200300689A; HK1064097A1; JP4429724B2; ZA200404168B; US6875772B2; WO2003048163A1; PE20030653A1; JP2005511697A; AU2002352933A1; US20050113380A1; EP1453836A1; KR20050044600A; JP2010018634A; IL161573A0; CA2468658A1; ES2283625T3; HUP0402324A3; EP1453836B1; US7078408B2; CA2468658C

Description

Hintergrund
Die vorliegende Erfindung betrifft substituierte bicyclische [1,2,4]-Triazol-Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonisten, die Verwendung der Verbindungen zur Behandlung von Erkrankungen des zentralen Nervensystems, insbesondere Morbus Parkinson, und pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Verbindungen enthalten.
Adenosin ist als endogener Modulator einer Anzahl physiologischer Funktionen bekannt. Auf der Ebene des kardiovaskulären Systems ist Adenosin ein starker Vasodilator und ein Herzdepressor. Im zentralen Nervensystem induziert Adenosin sedierende, anxiolytische und antiepileptische Wirkungen. Im respiratorischen System induziert Adenosin Bronchokonstriktion. Auf Ebene der Nieren übt es eine biphasische Wirkung aus, indem es in niedrigen Konzentrationen Vasokonstriktion induziert und in hohen Dosen Vasodilation induziert. Adenosin wirkt als Lipolyseinhibitor auf Fettzellen und als Antiaggregationsmittel für Thrombozyten.
Die Wirkung von Adenosin wird durch die Wechselwirkung mit unterschiedlichen membranspezifischen Rezeptoren vermittelt, die zu der mit G-Proteinen gekoppelten Familie von Rezeptoren gehören. Biochemische und pharmakologische Studien haben zusammen mit Fortschritten in der Molekularbiologie die Identifizierung von mindestens vier Subtypen von Adenosinrezeptoren ermöglicht: A₁, A_2a, A_2b und A₃. A₁ und A₃ haben hohe Affinität, sie inhibieren die Aktivität des Enzyms Adenylatcyclase, und A_2a und A_2b haben niedrige Affinität, sie stimulieren die Aktivität desselben Enzyms. Es sind auch Analoga von Adenosin identifiziert worden, die als Antagonisten mit den A₁, A_2a, A_2b und A₃-Rezeptoren wirken können.
Selektive Antagonisten für den A_2a-Rezeptor sind wegen ihrer geringeren Nebenwirkungen von pharmakologischem Interesse. Im zentralen Nervensystem können A_2a-Antagonisten antidepressive Eigenschaften haben und die kognitiven Funktionen stimulieren. Außerdem haben Daten gezeigt, dass A_2a-Rezeptoren in hoher Dichte in den Basalganglien vorhanden sind, die bekanntermaßen zur Steuerung der Bewegung wichtig sind. A_2a-Antagonisten können somit motorische Beeinträchtigung infolge von neurodegenerativen Erkrankungen verbessern, wie Morbus Parkinson, seniler Demenz, wie bei Morbus Alzheimer, sowie Psychosen organischen Ursprungs.
Es ist gefunden worden, dass einige mit Xanthin verwandte Verbindungen selektive A₁-Rezeptorantagonisten sind, und es ist gefunden worden, dass Xanthin- und Nicht-Xanthinverbindungen hohe A_2a-Affinität mit unterschiedlichen Selektivitätsgraden zu A_2a gegenüber A₁ haben. Einige imidazol- und pyrazolsubstituierte Triazol-Pyrimidin-Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonisten sind zuvor offenbart worden, beispielsweise in WO 95/01356 ; WO 97/05138 ; und WO 98/52568 . Bestimmte pyrazolsubstituierte Triazol-Pyrimidin-Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonisten sind in US-A-09/207 143 , eingereicht am 24. Mai 2001 offenbart. Bestimmte imidazolsubstituierte Triazol-Pyrimidin-Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonisten sind in der vorläufigen US-Patentanmeldung 60/329,567 offenbart, eingereicht am 15. Oktober 2001. US 5,565,460 offenbart bestimmte Triazol-triazine als Antidepressiva; EP 0 976 753 und WO 99/43678 offenbart bestimmte Triazol-pyrimidine als Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonisten, und WO 91/17999 offenbart bestimmte Triazolpyridine als Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonisten.
Zusammenfassung der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft eine Verbindung mit der Strukturformel I:
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon, worin
A N ist,
R^1a ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus H, (C₁-C₆)-Alkyl, Halogen, CN und -CF₃,
X -N(R⁹)- ist,
Y eine Bindung oder
ist;
p und q jeweils 2 sind,
Q und Q' jeweils
sind,
R R⁵-Aryl, R⁵-Heteroaryl, R⁶-(C₂-C₆)-Alkenyl oder R⁶-(C₂-C₆)-alkinyl ist;
R² R⁵-Aryl, R⁵-Heteroaryl, R⁵-Aryl(C₁-C₆)-alkyl oder R⁵-Heteroaryl(C₁-C₆)-alkyl ist oder R²-Y
ist;
U, V und W unabhängig aus der Gruppe bestehend aus N und CR¹ ausgewählt sind, mit der Maßgabe, dass mindestens einer von U, V und W CR¹ ist,
R¹ ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus H, (C₁-C₆)-Alkyl, Halogen, CN und -CF₃,
n 2 oder 3 ist, und
R⁵ 1 bis 3 Substituenten ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H, (C₁-C₆)Alkyl, -OH, (C₁-C₆)-Alkoxy, (C₁-C₆)-Alkoxy(C₁-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxy(C₁-C₆)-alkoxy, Halogen, -CF₃, -CN, -NH₂, (C₁-C₆)-Alkylamino, Di(C₁-C₆)alkylamino, Amino(C₁-C₆)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkylamino(C₁-C₆)alkyl, Di(C₁-C₆)alkylamino(C₁-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkanoylamino, (C₁-C₆)-Alkansulfonylamino, (C₁-C₆)-Alkylthio, (C₁-C₆)-Alkylthio(C₁-C₆)alkyl, R⁶-(C₂-C₆)-Alkenyl, R⁶-(C₂-C₆)-Alkinyl, Hydroxy(C₁-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxy-C(O)-amino oder Heterocycloalkyl(C₁-C₆)alkyl,
R⁶ 1 bis 3 Substituenten ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, OH, (C₁-C₆)-Alkoxy und Halogen,
R⁷ und R^7a jeweils H sind,
R⁹ H, (C₁-C₆)-Alkyl, Hydroxy(C₂-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxy(C₂-C₆)alkyl, Amino(C₂-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkylamino(C₂-C₆)alkyl, Di(C₁-C₆)alkylamino(C₂-C₆)alkyl, Halogen(C₃-C₆)alkenyl, CF₃-(C₁-C₆)-Alkyl, (C₃-C₆)-Alkenyl, -(C₃-C₆)-Cycloalkyl oder (C₃-C₆)-Cycloalkyl(C₁-C₆)alkyl ist, und
R¹⁰ H, -C(O)-O-(C₁-C₆)-Alkyl, R⁵-Aryl, -O(O)-(C₁-C₆)-Alkyl, -C(O)-(R⁵-Aryl) oder R⁵-Aryl-(C₁-C₆)-alkyl ist.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung ist eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel I in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung ist die Verwendung einer Verbindung der Formel I zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Erkrankungen des zentralen Nervensystems, wie Depression, kognitiven Störungen und neurodegenerativen Erkrankungen, wie Morbus Parkinson, seniler Demenz oder Psychosen organischen Ursprungs, oder Schlaganfall, wobei einem Säuger, der dieser Behandlung bedarf, eine Verbindung der Formel I verabreicht wird. Das Medikament ist insbesondere zur Behandlung von Morbus Parkinson, und die Behandlung umfasst die Verabreichung von mindestens einer Verbindung der Formel I an einen Säuger, der dieser Behandlung bedarf.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung ist die Verwendung einer Kombination von mindestens einer Verbindung der Formel I und einem oder mehreren Mitteln, die bekanntermaßen zur Behandlung von Morbus Parkinson brauchbar sind, beispielsweise Dopamin, einem dopaminergen Agonisten, einem Monoaminoxidase-Hemmer Typ B (MAO-B), einem DOPA-Decarboxylaseinhibitor (DCI) oder einem Catechol-O-methyltransferase-(COMT)-Hemmer, zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Morbus Parkinson. Es wird auch eine pharmazeutische Zusammensetzung beansprucht, die eine Verbindung der Formel I und ein oder mehrere Mittel, die bekanntermaßen zur Behandlung von Morbus Parkinson nützlich sind, in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Bei Verabreichung in Kombination können eine oder mehrere Verbindungen der Formel I und ein oder mehrere andere Antiparkinsonmittel gleichzeitig oder sequentiell in getrennten Do sierformen verabreicht werden. Daher wird auch ein Kit beansprucht, der in separaten Behältern in einer Einzelpackung pharmazeutische Zusammensetzungen zur kombinierten Verwendung zur Behandlung von Morbus Parkinson enthält, der in einem Behälter eine pharmazeutische Zusammensetzung enthält, die eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält, und in separaten Behältern eine oder mehrere pharmazeutische Zusammensetzung(en) enthält, die eine wirksame Menge eines Mittels, das zur Behandlung von Morbus Parkinson brauchbar ist, in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält bzw. enthalten.
Detaillierte Beschreibung
In Bezug auf die obigen Verbindungen der Formel I ist R vorzugsweise Furyl. R^1a ist vorzugsweise Wasserstoff. R⁹ ist vorzugsweise C₁-C₆-Alkyl, wobei Methyl und Ethyl am meisten bevorzugt sind. R² ist vorzugsweise R⁵-Aryl, insbesondere R⁵-Phenyl.
Wenn R²-Y
ist,
ist R¹⁰ vorzugsweise -C(O)-O-(C₁-C₆)-Alkyl, -C(O)-(C₁-C₆)-Alkyl oder -C(O)-(R⁵-Aryl).
R⁵ ist vorzugsweise 1 bis 2 Substituenten, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H, C₁-C₆-Alkoxy, (C₁-C₆)-Alkoxy-(C₁-C₆)-alkoxy, Halogen und -CF₃. Besonders bevorzugt sind H, Methoxy, Methoxyethoxy, Fluor und Chlor.
Der Begriff Alkyl schließt hier gesättigte gerade oder verzweigte Kohlenstoffketten ein.
Halo steht für Fluor-, Chlor-, Brom- oder Iodgruppen.
Alkenyl bedeutet eine gerade oder verzweigte Kohlenwasserstoffkette mit mindestens einer Doppelbindung. In ähnlicher Weise bedeutet Alkinyl eine gerade oder verzweigte Kohlenwasserstoffkette mit mindestens einer Dreifachbindung.
Aryl steht für einen monoaromatischen carbocyclischen Ring oder einen bicyclischen kondensiertes carbocyclischen Ring mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen, beispielsweise Phenyl und Naphthyl.
Heteroaryl bedeutet eine heteroaromatische Gruppe mit einem Ring mit 5 bis 6 Atomen, der aus 2 bis 5 Kohlenstoffatomen und 1 bis 3 Heteroatomen zusammengesetzt ist, die unabhängig aus der Gruppe bestehend aus N, O und S ausgewählt sind, oder eine bicyclische heteroaromatische Gruppe mit 5 bis 10 Atomen, die aus 1 bis 9 Kohlenstoffatomen und 1 bis 3 Heteroatomen zusammengesetzt sind, die unabhängig aus der Gruppe bestehend aus N, O und S ausgewählt sind, mit der Maßgabe, dass die Ringe keine benachbarten Sauerstoff- und/oder Schwefelatome einschließen. Beispiele für Einring-Heteroarylgruppen sind Pyridyl, Oxazolyl, Isoxazolyl, Oxadiazolyl, Furanyl, Pyrrolyl, Thienyl, Imidazolyl, Pyrazolyl, Thiazolyl, Isothiazolyl, Thiadiazolyl, Pyrazinyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl und Triazolyl. Beispiele für bicyclische Heteroarylgruppen sind Naphthyridyl (z. B. 1,5 oder 1,7), Imidazopyridyl, Pyridopyrimidinyl und 7-Azaindolyl. In die Definition von Heteroaryl sind auch benzokondensierte Heteroarylgruppen eingeschlossen, die einen Heteroarylring wie oben definiert enthalten, der an benachbarten Kohlenstoffatomen an einen Phenylring kondensiert ist. Beispiele für benzokondensierte Heteroarylgruppen sind Indolyl, Chinolyl, Isochinolyl, Phthalazinyl, Benzothienyl (d. h. Thionaphthenyl), Benzimida zolyl, Benzofuranyl, Benzoxazolyl und Benzofurazanyl. Es kommen alle Positionsisomere in Frage, z. B. 2-Pyridyl, 3-Pyridyl und 4-Pyridyl. Es sind für alle Heteroarylgruppen auch N-Oxide der Ring-Stickstoffatome eingeschlossen. R⁴- und R⁵-substituiertes Heteroaryl bezieht sich auf jene Gruppen, in denen substituierbare Ringkohlenstoffatome einen Substituenten wie oben definiert haben.
Heteroaryldiyl bedeutet einen Heteroarylring, der an zwei verschiedene Gruppen gebunden ist. Beispielhaft ist ein Pyridindiylring gezeigt:
In ähnlicher Weise bedeutet Arylen einen zweiwertigen Arylring, das heißt einen Arylring, der an zwei unterschiedliche Gruppen gebunden ist, z. B. Phenylen.
Heterocycloalkyl bedeutet einen 3- bis 6-gliedrigen gesättigten Ring, der aus 2 bis 5 Kohlenstoffatomen und 1 oder 2 Heteroatomen ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus N, S und O zusammengesetzt ist, mit der Maßgabe, dass sich nicht zwei Heteroatome nebeneinander befinden. Typische Heterocycloalkylringe sind Piperidinyl, Piperazinyl, Morpholinyl, Azetidinyl, Pyrrolidinyl, Tetrahydrothienyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydropyranyl und Thiomorpholinyl.
Bestimmte erfindungsgemäße Verbindungen können in unterschiedlichen stereoisomeren Formen vorliegen (z. B. Enantiomere, Diastereoisomere und Atropisomere). Die Erfindung beinhaltet alle derartigen Stereoisomere sowohl in reiner Form als auch gemischt einschließlich racemischer Mischungen.
Bestimmte Verbindungen sind von saurer Beschaffenheit, z. B. jene Verbindungen, die eine phenolische Hydroxylgruppe besitzen. Diese Verbindungen können pharmazeutisch annehmbare Salze bilden. Beispiele für solche Salze können Natrium-, Kalium-, Calcium-, Aluminium-, Gold- und Silbersalze einschließen.
Bestimmte basische Verbindungen bilden auch pharmazeutisch annehmbare Salze, z. B. Säureadditionssalze. Pyridostickstoffatome können beispielsweise Salze mit starker Säure bilden, während Verbindungen mit basischer Funktionalität, wie Aminogruppen, auch Salze mit schwächeren Säuren bilden. Beispiele für geeignete Säuren für die Salzbildung sind Salz-, Schwefel-, Phosphor-, Essig-, Citronen-, Oxal-, Malon-, Salicyl-, Äpfel-, Fumar-, Bernstein-, Ascorbin-, Malein-, Methansulfonsäure und andere Mineral- und Carbonsäuren, die Fachleuten wohl bekannt sind. Die Salze werden hergestellt, indem die freie Basenform mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Säure kontaktiert wird, um in konventioneller Weise ein Salz zu produzieren. Die freien Basenformen können durch Behandlung des Salzes mit einer geeigneten verdünnten wässrigen Basenlösung regeneriert werden, wie mit verdünnter wässriger NaOH, Kaliumcarbonat, Ammoniak oder Natriumbicarbonat. Die freien Basenformen unterscheiden sich in bestimmten physikalischen Eigenschaften etwas von ihren jeweiligen Salzformen, wie Löslichkeit in polaren Lösungsmitteln, die Säure- und Basensalze sind ansonsten für erfindungsgemäße Zwecke jedoch zu ihren jeweiligen freien Basenformen äquivalent.
Alle derartigen Säure- und Basesalze sollen pharmazeutisch annehmbare Salze innerhalb des Umfangs der Erfindung sein, und alle Säure- oder Basensalze werden für erfindungsgemäße Zwecke als zu den freien Formen der entsprechenden Verbindungen äquivalent angesehen.
Verbindungen der Formel I werden unter Verwendung von allgemeinen Verfahren hergestellt, die in der Technik bekannt sind. Die Verbindungen der Formel I werden vorzugsweise nach den Verfahren hergestellt, die in den folgenden Reaktionsschemata gezeigt sind. In den folgenden Schemata und Beispielen werden die folgenden Abkürzungen verwendet: Ph steht für Phenyl. Me ist Methyl. Et ist Ethyl, TFA ist Trifluoressigsäure, BSA ist N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamid, DMF ist Dimethylformamid, EtOAc ist Ethylacetat. THF ist Tetrahydrofuran, und DBU ist 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en Verbindungen der Formel IIa, worin A C(R¹) ist, liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche. Sie werden hier als Vergleichsbeispiele beschrieben, die nach Verfahren hergestellt werden können, die in der Anmeldung WO 01/11799 beschrieben sind. Verbindungen, in denen Y keine Bindung ist, können außerdem nach Verfahren hergestellt werden, die in Schema 1 illustriert sind.
Schema 1:
Wenn X Arylen ist, kann ein Intermediat des Typs 2 aktiviert werden, z. B. zu einem Chlorid, das danach mit einem Nukleophil 4 (z. B. Y = Piperazinyl) umgesetzt werden kann, um IIa zu liefern. Alternativ kann Bromid 3 mit einem Nukleophil vom Typ 5 umgesetzt werden, um IIa zu liefern.
Verbindungen der Formel IIb, worin A N ist und X -O-, -S- oder -(R⁹)- ist, können nach Verfahren hergestellt werden, die in den Schemata 2 und 3 beschrieben sind. Die Verbindungen, in denen X -O- oder -S- ist, liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Schema 2:
Chlorid 6 wird mit einem Amin, Alkohol oder Thiol in Gegenwart einer Base behandelt, um 7 zu ergeben. Die Reaktion mit dem geeigneten Hydrazid ergibt 8. Dehydratisierende Cyclisierung mit einem Mittel wie BSA ergibt dann die gewünschte Verbindung der Formel IIb.
In einer Variante des Schemas kann R in dem Hydrazid RCONHNH₂ eine entfernbare Schutzgruppe sein, wie t-Butoxy oder Benzyloxy. In einem derartigen Fall führt das Entschützen von 8 zu 8a,
das mit RCOOH oder dem entsprechenden Säurechlorid, -anhydrid oder gemischten Anhydrid acyliert werden kann. Dies führt zu einem neuen 8, das in die gewünschte Verbindung der Formel IIb umgewandelt werden kann.
In Schema 3 ist die Reihenfolge der Stufen umgekehrt, um Verbindungen der Formel IIb herzustellen.
Schema 3:
In Schema 4 werden Verbindungen der Formel IIc hergestellt, in denen A N ist und X -C(R³)(R^3a)- ist. Diese Verbindungen liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Schema 4:
Ketoester 11 wird in Pyrimidin 12 umgewandelt, danach in Chlorid 13. Die Reaktion mit einem Hydrazid liefert 14, und BSA-Cyclisierung ergibt 15. Die olefinische Bindung wird gespalten, um Aldehyd 16 zu ergeben. Wenn Y in IIc über ein Stickstoffatom an die Alkylenkette gelinkt wird, ergibt reduktive Aminierung von 16 die gewünschte Verbindung IIc.
Ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel IId oder IIe, wobei A N ist und X -S-, -SO- oder -SO₂- ist, ist in Schema 5 beschrieben. Diese Verbindungen liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Schema 5:
Chlorid 6 wird mit Na₂S umgesetzt, und das Intermediat wird dann mit einem Chlorid oder Äquivalent alkyliert, um 7a zu ergeben. Dies wird wie in Schema 2 in IId überführt. Nachfolgende Oxidation wird zur Herstellung des Sulfoxids oder Sulfons der Formel IIe verwendet.
Für Verbindungen IIf, bei denen R² eine R¹⁰-Einheit enthält, können diese Einheiten wie in Schema 6 gezeigt modifiziert werden. Die Verbindungen IIf liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche. Wenn R¹⁰ t-Butoxycarbonyl oder Benzyloxycarbonyl oder dergleichen ist, kann die Gruppe in H überführt werden, z. B. durch Behandlung mit Säure wie TFA beziehungsweise Hydrogenolyse. Das resultierende 17 kann danach in eine andere Verbindung IIf überführt werden. Für R¹⁰ = Alkoxycarbonyl oder Aroyl kann die Acylierung mit einem Alkylchlorformiat oder Aroylchlorid oder ähnlichem Acylierungsmittel erreicht werden. Für R¹⁰ = Aralkyl kann reduktive Alkylierung von 17 mit einem Arylaldehyd und NaBH(OAc)₃ erreicht werden.
Schema 6:
Es können ähnliche Methoden verwendet werden, um Verbindungen der Formel IIg herzustellen:
Präparation 1
Stufe 1: SOCl₂ (7,14 g, 60 mmol) wurde zu 2-(4-Fluorphenyl)ethanol (2,80 g, 20,0 mmol) gegeben. Es wurden zwei Tropfen DMF zugegeben und 3 Stunden auf 70°C erwärmt. Es wurde konzentriert, zwischen Hexan und Eiswasser partitioniert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Chlorid als fast farbloses Öl zu erhalten.
Stufe 2: Das Chlorid aus Stufe 1 (1,00 g, 6,3 mmol) wurde mit 40% wässriger CH₃NH₂ (20 g, 260 mmol) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 2,5 Stunden auf 65°C erwärmt. Es wurde abkühlen gelassen, mit Wasser verdünnt und mit EtOAc extrahiert. Das EtOAc wurde mit 0,5 M HCl extrahiert, mit 20% NaOH alkalisch gemacht und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Titelamin als gelbes Öl zu erhalten.
In ähnlicher Weise wurden die entsprechenden Alkohole in die folgenden Amine überführt.
In ähnlicher Weise wurden die entsprechenden Alkohole über die Mesylate in die folgenden Amine überführt.
Präparation 2
1-(2,4-Difluorphenyl)piperazin (0,50 g, 2,5 mmol), 2-Bromethanol (0,37 g, 3,0 mmol) und Et₃N (0,30 g, 3,0 mmol) in THF (5 ml) wurden kombiniert. Es wurde 4 Stunden auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen und zwischen Wasser und CH₂Cl₂ partitioniert. Das CH₂Cl₂ wurde mit Salzlösung gewaschen, mit MgSO₄ getrocknet und konzentriert, um den Titelalkohol als gelbes Öl zu erhalten.
In ähnlicher Weise wurden hergestellt:
Präparation 3
Stufe 1: Zu dem Produkt von Präparation 2 (0,50 g; 2,1 mmol) in CH₂Cl₂ (10 ml) wurde SOCl₂ (0,49 g, 4,2 mmol) gegeben. Es wurden zwei Tropfen DMF zugegeben und 4 Stunden gerührt. Es wurde konzentriert, zwischen EtOAc und Wasser partitioniert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Chlorid als fast farbloses Öl zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (0,51 g, 2,0 mmol) wurde mit 40 wässriger CH₃NH₂ (10 ml, 130 mmol) in EtOH kombiniert. Es wurde 2 Stunden bei 80°C in einem versiegelten Röhrchen erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert und zwischen EtOAc und Wasser partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Titelamin als gelbes Öl zu erhalten. In ähnlicher Weise wurden hergestellt:

Präparation 4
2,4-Difluorbrombenzol (4,0 g, 20,7 mmol), 2-Methylpiperazin (24,9 g, 249 mmol), NaO-tBu (2,79 g, 29,0 mmol), ±-BINAP (0,77 g, 1,2 mmol) und Pd₂(dba)₃ (0,24 g, 0,41 mmol) wurden in Toluol (40 ml) kombiniert. Es wurde 16 Stunden auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen und mit 1 N HCl (4 × 50 ml) extrahiert. Es wurde mit NaOH auf pH 13 alkalisch gemacht und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Produkt als braunes Öl zu ergeben.
Präparation 5
Stufe 1: 2,4-Difluoranilin (10,0 g, 77,4 mmol) und 2-Bromethylamin·HBr (15,9 g, 77,4 mmol) wurden in Toluol (100 ml) kombiniert. Es wurde 16 Stunden auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen und die Toluolphase entfernt. Die ölige Phase wurde in Wasser gelöst, mit NaOH auf pH 11 alkalisch gemacht und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und bei 120–130°C (1 mm) destilliert. Es wurde an Silika chromatographiert, um das Produkt als braunes Öl zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (3,0 g, 17 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (25 ml) gelöst. Es wurde in Eis gekühlt und Et₃N (5,3 ml, 38 mmol) zugegeben, gefolgt von 2-Brompropionylbromid (2,1 ml, 19 mmol). Es wurde auf RT erwärmen gelassen, 16 Stunden gerührt, in Eis gekühlt und weiteres Bromid (1,1 g) und Et₃N (1,0 g) zugegeben. Es wurde auf RT erwärmen gelassen, 2 Stunden gerührt, mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um rohes braunes Öl zu erhalten.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (5,86 g, 19 mmol) wurde mit DIPEA (2,97 g, 23 mmol) und KI (1,58 g, 9,5 mmol) in DMF (15 ml) behandelt. Es wurde 18 Stunden lang auf 80°C erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert und an Silika chromatographiert, um das Produkt als braunen Feststoff zu erhalten.
Stufe 4: Das Produkt aus Stufe 3 (1,33 g, 5,86 mmol) wurde in THF (20 ml) gelöst und in Eis abgekühlt. Langsam wurde 1,0 M BH₃-THF-Lösung (15 ml, 15 mmol) zugegeben. Es wurde auf RT erwärmen gelassen, eine Stunde gerührt, weitere BH₃-THF-Lösung (7 ml) zugegeben und 2 Stunden gerührt. Es wurde in Eis gekühlt und langsam mit MeOH gequencht. Es wurde konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und 0,5 N NaOH partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als gelbes Öl zu erhalten.
Präparation 6
Stufe 1: N-Benzyl-4-piperridon (3,57 ml, 20 mmol), 3-Ethoxymethacrolein (3,76 ml, 30 mmol), NH₄OAc (0,82 g, 11 mmol) und 28% wässriges Ammoniak (4,17 ml, 62 mmol) wurden kombiniert. Es wurde 48 Stunden in einem verschlossenen Röhrchen auf 90°C erwärmt, abkühlen gelassen und zwischen Et₂O und 1 N NaHCO₃ partitioniert. Das Et₂O wurde mit 1 N HCl extrahiert und der Extrakt mit NaOH auf pH 13 alkalisch gemacht. Es wurde mit Et₂O extrahiert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Das Öl wurde Kugelrohr-Destillation unterzogen und bei 0,5 mm bei 90–160°C aufgefangen, um das Produkt als oranges Öl zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt von Stufe 1 (1,73 g, 7,3 mmol) wurde in 10:1 MeOH/konz. HCl (44 ml) gelöst. Es wurde 10% Pd/C (0,40 g) zugegeben und 18 Stunden lang mit 60 psi hydriert. Es wurde durch Celite filtriert und zu einem Feststoff konzen triert. Es wurde in 95% EtOH gelöst und NaO-tBu (0,70 g) zugegeben. Es wurde konzentriert, mit EtOH behandelt, filtriert und konzentriert, um das Rohprodukt als gelben Feststoff zurückzulassen.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (0,200 g, 1,35 mmol), 1-Brom-2-chlorethan (0,45 ml, 5,4 mmol) und DIPEA (0,28 ml, 1,6 mmol) wurden in DMF (10 ml) kombiniert. Es wurde 48 Stunden gerührt, 1 N NaOH (5 ml) zugegeben und mit Et₂O extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und mittels PLC gereinigt, um das Produkt als gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 4: Das Produkt aus Stufe 3 (0,22 g, 1,0 mmol) wurde mit 40% wässrigem MeNH₂ (5,0 ml) und EtOH (5 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 3 Stunden lang auf 100°C erwärmt, abkühlen gelassen, 1 N NaOH (3 ml) zugegeben, konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und Wasser partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um die Titelverbindung als hellbraunes Öl zu erhalten.
Präparation 7
4-Fluorbenzylchlorid 1,74 g, 12,0 mmol), N,N'-Dimethylethylendiamin (3,17 g, 36 mmol), KI (0,20 g, 1,2 mmol) und NaHCO₃ (1,51 g, 18 mmol) wurden in EtOH (20 ml) kombiniert. Es wurde 4 Stunden auf Rückfluss erwärmt und konzentriert. Es wurde mit 1 N HCl und EtOAc partitioniert und die wässrige Phase mit NaOH alkalisch gemacht. Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Es wurde bei 0,5 mm bis 100°C destilliert, um die Titelverbindung als farblose Flüssigkeit zu erhalten.
Präparation 8
2,4-Difluorfluor-N-methylanilin (1,00 g, 6,98 mmol) und 4 M HCl/Dioxan (10 ml) wurden in MeOH (10 ml) kombiniert. Es wurde zu einem weißen Feststoff konzentriert. Es wurde 3-Methyl-2-oxazolidinon (0,60 g, 6,98 mmol) zugegeben. Es wurde 18 Stunden auf 160°C erwärmt. Es wurde abkühlen gelassen, mit NaOH alkalisch gemacht und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und an Silika chromatographiert, um die Titelverbindung als gelbes Öl zu erhalten. Dies enthielt etwas von dem Produkt, wobei Anilinmethyl entfernt war.
Beispiel 1
Stufe 1: 2-Amino-4,6-dichlorpyrimidin (0,50 g, 3,0 mmol), 2-(4-Methoxyphenyl)ethylamin (0,51 g, 3,4 mmol) und K₂CO₃ (0,46 g, 3,4 mmol) wurden in EtOH (8 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 1 Stunde auf 90°C erwärmt. Es wurde weitere 16 Stunden gerührt, mit Wasser (15 ml) verdünnt, filtriert und mittels PLC gereinigt, um das Chlorpyrimidin als weißen Feststoff zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (0,30 g, 1,08 mmol), 2-Furan-2-carbonsäurehydrazid (0,16 g, 1,3 mmol) und 1,0 N HCl (0,4 ml) wurden in EtOH (3 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 16 Stunden auf 90°C erwärmt. Es wurde mit NH₃ basisch gemacht, mit EtOAc extrahiert und mittels PLC gereinigt, um das Hydrazid als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 wurde zu BSA (4,0 ml) gegeben. Es wurde 18 Stunden auf 120°C erwärmt. Es wurde in CH₃OH gegossen, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 351 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurden die folgenden Verbindung. hergestellt (wobei Et₃N in Stufe 1 als Base verwendet wurde):
wobei R²-Y-(CH₂)_n-N(R⁹)- wie in der Tabelle definiert ist:

* Die Verbindungen der Beispiele 1-4 und 1-7 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.

In ähnlicher Weise wurde durch Verwendung von Benzoesäurehydrazid anstelle von Furan-2-carbonsäurehydrazid Beispiel 1-15 als gelber Feststoff hergestellt:
1-15: MS: m/e 503 (M + 1).
Beispiel 2
Die Verbindungen der Beispiele 2 und 2-2 bis 2-7 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 2-(4-Methoxyphenyl)ethanol (0,46 g, 3,0 mmol) wurde zu NaH (60% in Öl, 0,16 g, 4,0 mmol) in DMF (6 ml) gegeben. Es wurde 0,5 h gerührt und 2-Amino-4,6-dichlorpyrimidin (0,50 g, 3,0 mmol) zugegeben. Es wurde weitere 24 Stunden gerührt. Es wurde filtriert, mit CH₂Cl₂ gewaschen, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um das Chlorpyrimidin als weißen Feststoff zu erhalten.
Stufen 2 und 3 wurden wie in Beispiel 1 durchgeführt, um die Titelverbindung als weißen Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 352 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurden die Folgenden hergestellt:
wobei R²-Y-(CH₂)_n-O- wie in der Tabelle definiert ist:
In ähnlicher Weise wurde durch Verwendung von 5-Chlor-2-furan-2-carbonsäurehydrazid anstelle von Furan-2-carbonsäurehydrazid Beispiel 2-7 als gelber Feststoff hergestellt:
2-7: MS m/e 514, 516 (M + 1).
Beispiel 3
Die Verbindungen der Beispiele 3 und 3-2 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1:
3-Iodbenzylalkohol (2,00 g, 8,5 mmol), Acrylnitril (0,67 ml, 10,2 mmol) und Et₃N (4,3 ml, 26 mmol) wurden in DMF (30 ml) kombiniert. Es wurde mit N₂ gespült und (Ph₃P)₂PdCl₂ (0,12 g, 0,17 mmol) zugegeben. Es wurde 3 Tage in einem verschlossenen Gefäß auf 120°C erwärmt, abkühlen gelassen und zwischen CH₂Cl₂ und gesättigtem NaHCO₃ partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Es wurde an Silika chromatographiert, um das Nitril als gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 2:
Das Produkt von Stufe 1 (1,25 g, 7,9 mmol), t-Butyldimethylsilylchlorid (1,42 g, 10,2 mmol) und Imidazol (0,69 g, 10,2 mmol) wurden in DMF (15 ml) kombiniert. Es wurde 7 Stunden gerührt, zwischen Et₂O und Wasser partitioniert, das Et₂O getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um den Silylether als farbloses Öl zu erhalten.
Stufe 3:
Zu einer siedenden Suspension von Kalium-t-butoxid (2,34 g, 24,4 mmol) in THF (20 ml) wurden tropfenweise im Verlauf von 5 Stunden eine Lösung des Produkts von Stufe 2 (2,15 g, 7,9 mmol) und 3-(2-Furyl)-5-phenylsulfonylmethyl[1,2,4]triazol (2,27 g, 7,9 mmol) in THF (20 ml) gegeben. Es wurde 18 Stunden erwärmt, abkühlen gelassen, Wasser (30 ml) zugegeben und 3 × mit 5% CH₃OH/CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und an Silika chromatographiert, um die bicyclische Verbindung als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 4:
Tetrabutylammoniumfluorid (1,0 M in THF, 2,14 ml) wurde zu dem Produkt von Stufe 3 (0,75 g, 1,8 mmol) gegeben. Es wurde 2 Stunden gerührt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um den Alkohol als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 5:
Zu dem Produkt von Stufe 4 (0,200 g, 0,65 mmol) in CH₂Cl₂ (10 ml) wurden SOCl₂ (0,19 ml, 2,6 mmol) und 2 Tropfen Pyridin gegeben. Es wurde eine Stunde auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen, mit 1 N NaOH gewaschen, konzentriert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das rohe Chlorid als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 6: Das Produkt von Stufe 5 (0,090 g, 0,28 mmol) wurde mit (2,4-Difluorphenyl)piperazin (0,065 g, 0,33 mmol) und Diisopropylethylamin (0,058 ml) in DMF (4 ml) kombiniert. Es wurde 3 Tage gerührt, 3 Stunden auf 60°C erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als weißen Feststoff zu erhalten: MS m/e 487 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurde 1-(4-(2-Methoxyethoxy)phenyl)piperazin verwendet, um Beispiel 3-2 als weißen Feststoff zu erhalten.
3-2: MS m/e 525 (MH⁺).
Beispiel 4
Die Verbindungen der Beispiele 4 und 4-2 bis 4-4 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 2-Amino-4,6-dichlorpyrimidin (0,50 g, 3,0 mmol) und Na₂S (0,29 g, 3,7 mmol) wurden in DMF (6 ml) kombiniert. Es wurde 1 Stunde gerührt. Es wurde 4-Methoxyphenethylchlorid (0,64 g, 3,77 mmol) zugegeben und 18 Stunden auf 80°C erwärmt. Es wurde Wasser zugefügt und mit EtOAc extrahiert. Es wurde mittels PLC gereinigt, um das Chlorpyrimidin als weißen Feststoff zu erhalten.
Stufen 2 und 3: Es wurde wie in Beispiel 1, Stufen 2 und 3 gearbeitet, um die Titelverbindung als weißen Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 368 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurden aus den Produkten der Präparation 3-2, Stufe 1, und Präparation 3-6, Stufe 1, die Folgenden hergestellt:
4-2: MS: m/e = 496
4-3: MS: m/e = 564
4-4: MS m/e 458.
Beispiel 5
Stufe 1: 2-Amino-4,6-dichlorpyrimidin (1,00 g, 6,10 mmol), 2-Furan-2-carbonsäurehydrazid (0,97 g, 7,7 mmol) und K₂CO₃ (1,13 g, 8,2 mmol) wurden in EtOH (6 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 18 Stunden auf 100°C erwärmt. Es wurde abkühlen gelassen, filtriert, mit Wasser gewaschen, um Produkt zu erhalten. Das Filtrat wurde mit EtOAc extrahiert, konzentriert und aus EtOAc umkristallisiert, um weiteres Produkt als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (0,50 g, 2,13 mmol) wurde zu BSA (15 ml) gegeben. Es wurde 18 Stunden auf 120°C erwärmt, abkühlen gelassen und in CH₃OH (20 ml) gegossen. Es wurde konzentriert und eine Stunde in 50% EtOH (40 ml) auf Rückfluss erwärmt. Das EtOH wurde entfernt und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet und konzentriert, um das Produkt als weißen Feststoff zu erhalten.
Stufe 3: Das Produkt von Stufe 2 (0,093 g, 0,39 mmol), das Produkt von Präparation 3-2 (0,127 g, 0,43 mmol) und DBU (0,059 ml, 0,42 mmol) wurden in DMF (2 ml) kombiniert. Es wurde 2 Stunden auf 140°C erwärmt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als gelben Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 493 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurden unter Verwendung des geeigneten Amins aus Präparation 1 oder Präparation 3 die Folgenden hergestellt:

* Die Verbindungen der Beispiele 5-2, 5-28 bis 5-30 und 5-32 bis 5-43 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.

In ähnlicher Weise wurde 2-Amino-4,5,6-trichlorpyrimidin als Ausgangsmaterial verwendet, um Beispiel 5-44 als gelben Feststoff zu erhalten.
5-44: MS m/e 489, 491 (M + 1).
Beispiel 6
Stufe 1: 2-Amino-4,6-dichlorpyrimidin (0,477 g, 2,73 mmol), das Produkt von Präparation 3-2 (0,800 g, 2,73 mmol) und DIPEA (0,57 ml, 3,27 mmol) wurden in DMF (5 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 14 Stunden auf 90°C erwärmt. Es wurde abkühlen gelassen, konzentriert und an Silika chromatographiert, um das Produkt als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (1,07 g, 2,54 mmol), t-Butylcarbazat (1,01 g, 7,61 mmol) und 4,0 M HCl/Dioxan (0,76 ml, 3,04 mmol) wurden in EtOH (12 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 18 Stunden lang auf 100°C erwärmt, abkühlen gelassen und 2 N NH₃/MeOH (10 ml) zugegeben. Es wurde konzentriert und an Silika chromatographiert, um das Produkt als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (0,90 g, 1,74 mmol) wurde in CH₂Cl₂-MeOH (1:17, 20 ml) gelöst. Es wurde 4,0 M HCl/Dioxan (5,0 ml, 20 mmol) zugegeben. Es wurde 18 Stunden gerührt, konzentriert, 1 N NaOH (10 ml) zugegeben und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und an Silika chromatographiert, um die Titelverbindung als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 4: Zu einer Lösung von 3-Cyanbenzoesäure (0,047 g, 0,32 mmol) in DMF (3 ml) wurden das Produkt aus Stufe 3 (0,110 g, 0,26 mmol), EDCI (0,061 g, 0,32 mmol), HOBt·H₂O (0,043 g, 0,32 mmol) und NMM (0,035 ml, 0,32 mmol) gegeben. Es wurde 3 Stunden gerührt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um das Produkt als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 5: Das Produkt aus Stufe 4 (0,101 g, 0,18 mmol) wurde zu BSA (6,0 ml) gegeben. Es wurde 18 Stunden auf 120°C erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert, MeOH (20 ml) zugegeben, 0,5 Stunden gerührt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als gelben Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 528 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurde das Produkt aus Präparation 3 als Ausgangsmaterial verwendet, um Beispiel 6-2 als weißen Feststoff zu erhalten.
Beisp. 6-2: MS: m/e 490 (M + 1)
Beispiel 7
Die Verbindung von Beispiel 7 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 2-Amino-4,6-dichlorpyrimidin (0,515 g, 3,14 mmol) und Na₂S (0,294 g, 3,76 mmol) wurden in DMF (3 ml) kombiniert. Es wurde 1 Stunde gerührt. Das Produkt von Präparation 3 wurde zu Stufe 1 (0,900 g, 3,45 mmol) in DMF (2 ml) gegeben und 18 Stunden lang auf 80°C erwärmt. Es wurde abkühlen gelassen, CH₂Cl₂ zugefügt und filtriert. Es wurde konzentriert und an Silika chromatographiert, um das Produkt als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufen 2-5: Das Produkt von Stufe 1 wurde nach Beispiel 6, Stufen 2-5, behandelt, um die Titelverbindung als schmutzigweißen Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 493 (M + 1).
Beispiel 8
Die Verbindungen der Beispiele 8 und 8-2 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: Ethyl-3-oxo-6-heptenoat (6,68 g, 39,2 mmol) und Guanidincarbonat (12,7 g, 70,6 mmol) wurden in EtOH (100 ml) kombiniert. Es wurde 20 Stunden auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen und CH₂Cl₂ (100 ml) zugegeben. Es wurde filtriert, konzentriert und an Silika chromatographiert, um einen weißen Feststoff zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt von Stufe 1 (2,35 g, 14,2 mmol) wurde mit POCl₃ (20 ml) behandelt. Es wurde 2 Stunden auf Rückfluss erwärmt, konzentriert, auf Eiswasser gegossen und mit NaOH auf pH 9 alkalisch gemacht. Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, getrocknet (MgSO₄), konzentriert und an Silika chromatographiert, um ein gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (0,90 g, 4,9 mmol), 2-Furan-2-carbonsäurehydrazid (0,865 g, 6,86 mmol) und 4,0 M HCl/Dioxan (1,47 ml, 5,88 mmol) wurden in EtOH (10 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 18 Stunden lang auf 100°C erwärmt, abkühlen gelassen und 2 N NH₃/MeOH (10 ml) zugegeben. Es wurde konzentriert und an Silika chromatographiert, um das Produkt als gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 4: Das Produkt aus Stufe 3 (0,8 g, 2,9 mmol) wurde zu BSA (10 ml) gegeben. Es wurde 6 Stunden auf 130°C erwärmt, abkühlen gelassen und konzentriert. Es wurde mit Wasser gewaschen, um einen gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 5: Das Produkt aus Stufe 4 (0,10 g, 0,39 mmol) wurde in THF (8 ml) gelöst, in Eis abgekühlt, Wasser (5 ml), danach NaIO₄ (0,419 g, 1,96 mmol) zugegeben. Es wurden zwei Kristalle 050₄ zugegeben und 5 Stunden gerührt. Es wurde zwischen CH₂Cl₂ und Wasser partitioniert, getrocknet (MgSO₄), konzentriert und mittels PLC gereinigt, um einen gelben Feststoff zu erhalten.
Stufe 6: Das Produkt aus Stufe 5 (0,080 g, 0,31 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (5 ml) gelöst. Es wurden 1-(2,4-Difluorphenyl)piperazin (0,185 g, 0,93 mmol), AcOH (0,30 ml) und NaCNBH₃ (0,066 g, 0,31 mmol) zugegeben. Es wurde 18 Stunden gerührt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als weißen Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 440 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurde das passende Arylpiperazin verwendet, um Beispiel 8-2 als gelbes Pulver zu erhalten.
Beisp. 8-2: MS: m/e = 478 (M + 1).
Beispiel 9
Stufe 1: 1-(2-Hydroxyethyl)piperazin (3,25 g, 25 mmol) wurden in THF (40 ml) gelöst und in Eis gekühlt. Es wurde portionsweise Boc₂O (5,45 g, 25 ml) zugegeben. Es wurde erwärmen gelassen, 3 Stunden gerührt, konzentriert und mit heißem Hexan (50 ml) behandelt. Es wurde auf –15°C abgekühlt und das Hexan dekantiert, um ein viskoses oranges Öl zurückzulassen.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (3,49 g, 15,0 mmol) und Et₃N (1,72 g, 17,0 mmol) wurden in CH₂Cl₂ kombiniert und in Eis gekühlt. Es wurde tropfenweise MsCl (1,96 g, 17,0 mmol) in CH₂Cl₂ (10 ml) zugegeben. Es wurde erwärmen gelassen, 0,5 Stunden gerührt und konzentriert. Es wurde zwischen Et₂O und Wasser partitioniert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Rohprodukt als viskoses Öl mit Feststoff zu ergeben.
Stufe E: Das Rohprodukt aus Stufe 2 (4,6 g, ~15 mmol) wurde mit 40% wässrigem MeNH₂ (35 g, 0,45 Mol) und EtOH (35 ml) kombiniert. Nach einer Stunde wurde konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und 1 N NaOH partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um das Rohprodukt als gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 4: Das Rohprodukt aus Stufe 3 (0,46 g, ~1,5 mmol) wurde mit dem Produkt von Beispiel 5, Stufe 2 (0,236 g, 1,00 mmol) und K₂CO₃ (0,207 g, 1,50 mmol) in DMF (8 ml) kombiniert. Es wurde in einem verschlossenen Röhrchen 18 Stunden auf 130°C erwärmt, konzentriert und zwischen EtOAc (10% MeOH) und Wasser partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und an Silika mit Et₂O chromatographiert, um die Titelverbindung als gelben Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 443 (M + 1).
Beispiel 10
Die Verbindung von Beispiel 10 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 2-(4-Bromphenyl)ethanol (4,88 g, 24,3 mmol), Piperazin (12,5 g, 146 mmol), NaO-tBu (3,27 g, 34,0 mmol), +-BINAP (0,91 g, 1,5 mmol) und Pd₂(dba)₃ (0,28 g, 0,49 mmol) wurden in Toluol (40 ml) kombiniert. Es wurde 2 Stunden auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen und mit 1 N HCl (4 × 50 ml) extrahiert. Es wurde mit NaOH auf pH 13 alkalisch gemacht und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein braunes Öl zu ergeben.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (4,02 g, 19,5 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (50 ml) gelöst. Es wurde Boc₂O (4,51 g, 20,5 mmol) und danach Et₃N (3,26 ml, 23,4 mmol) zugegeben. Es wurde eine Stunde gerührt und mit 1 N NaOH gewaschen. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und an Silika chromatographiert, um ein braunes Öl zu erhalten.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (1,00 g, 3,26 mmol) und Et₃N (0,73 ml, 5,2 mmol) wurden in CH₂Cl₂ (20 ml) kombiniert. Es wurde in Eis gekühlt und allmählich MsCl (0,30 ml, 3,9 mmol) zugegeben. Es wurde eine Stunde gerührt, mit gesättigtem NaHCO₃ gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 4: Das Produkt aus Stufe 3 (1,15 g, 2,99 mmol) wurde in EtOH (10 ml) gelöst. Es wurde 40% wässriges MeNH₂ (10 ml) zugegeben und in einem verschlossenen Röhrchen 16 Stunden lang auf 100°C erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und 1 N NaOH partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄), konzentriert und mittels PLC gereinigt, um ein gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 5: Das Produkt aus Stufe 4 (0,466 g, 1,46 mmol), das Produkt von Beispiel 5, Stufe 2 (0,229 g, 0,97 mmol) und K₂CO₃ (0,202 g, 1,46 mmol) wurden in DMF (8 ml) kombiniert. Es wurde 18 Stunden lang in einem verschlossenen Röhrchen auf 140°C erwärmt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als gelben Schaum zu erhalten, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um das Produkt als gelbes Öl zu erhalten. MS: m/e = 519 (M + 1).
Beispiel 11
Die Verbindung von Beispiel 11 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche. Die Verbindung von Beispiel 10 (0,215 g, 0,41 mmol) wurde in 1:1 CH₂Cl₂-MeOH (10 ml) gelöst und 4 M HCl/Dioxan (2,0 ml) zugegeben. Es wurde 18 Stunden gerührt und 7 M NH₃/MeOH (4,0 ml) zugegeben. Es wurde konzentriert und an Silika chromatographiert, um das Produkt als weißen Schaum zu erhalten, MS: m/e = 419 (M + 1).
Beispiel 12
Die Verbindung von Beispiel 12 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche. Das Produkt aus Beispiel 11 (0,050 g, 0,12 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (5 ml) gelöst. Es wurde DIPEA (0,031 ml, 0,18 mmol) und AcCl (0,010 ml, 0,14 mmol) zu gegeben. Es wurde 1 Stunde gerührt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als weißen Schaum zu erhalten, MS: m/e = 461 (M + 1).
Beispiel 13
Die Verbindungen der Beispiele 13 und 13-2 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 1-(2,4-Difluordiphenyl)piperazin (1,00 g, 5,05 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (5 ml) gelöst. Es wurde in Eis gekühlt und N-Methylmorpholin (0,66 ml, 6,05 mmol) zusammen mit Chloracetylchlorid (0,45 ml, 5,6 mmol) zugegeben. Es wurde 2 Stunden gerührt, konzentriert und zwischen EtOAc und Wasser partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein gelbes Öl zu ergeben.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (1,49 g, 5,4 mmol) wurde in EtOH (10 ml) gelöst. Es wurde 40 wässriges MeNH₂ (15 ml) zugegeben und in einem verschlossenen Röhrchen 48 Stunden lang auf 100°C erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und 1 N NaOH partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein gelbes Öl zu ergeben.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (0,137 g, 0,51 mmol), das Produkt von Beispiel 5, Stufe 2 (0,080 g, 2 mmol) und K₂CO₃ (0,070 g, 0,51 mmol) wurden in DMF (4 ml) kombiniert. Es wurde 18 Stunden lang in einem verschlossenen Röhrchen auf 140°C erwärmt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als gelben Schaum zu erhalten, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um das Produkt als gelben Feststoff zu erhalten. MS: m/e = 469 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurde unter Verwendung von 2-Brompropionylbromid in Stufe 1 Beispiel 13-2 als schmutzigweißes Pulver hergestellt.
Beisp. 13-2: MS: m/e = 483 (M + 1).
Beispiel 14
Die Verbindung von Beispiel 14 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: Das Produkt von Beispiel 13-2, Stufe 2 (0,405 g, 1,43 mmol) wurde in THF (10 ml) gelöst. Es wurde 1,0 M LiAlH₄-Et₂O (0,86 ml, 0,86 mmol) zugegeben. Es wurde 4 Stunden auf 60°C erwärmt, abkühlen gelassen, Wasser (0,065 ml), danach 15% NaOH (0,065 ml), danach Wasser (3 × 0,065 ml) zugegeben. Es wurde filtriert und konzentriert. Es wurde zwischen CH₂Cl₂ und 1 N HCl partitioniert. Die wässrige Phase wurde mit NaOH auf pH 12 alkalisch gemacht, mit CH₂Cl₂ extrahiert, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Es wurde mittels PLC gereinigt, um ein farbloses Öl zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt von Stufe 1 wurde mit dem Produkt von Beispiel 5, Stufe 2 nach dem Verfahren von Beispiel 13, Stufe 3, behandelt, um die Titelverbindung als gelbes Öl zu erhalten, MS: m/e = 469 (M + 1).
Beispiel 15
Die Verbindung von Beispiel 15 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 1-(2,4-Difluorphenyl)piperazin (1,98 g, 10,0 mmol), Ethyl-2-brompropionat (1,81 g, 10,0 mmol) und K₂CO₃ (1,38 g, 10,0 mmol) wurden in EtOH (15 ml) kombiniert. Es wurde 18 Stunden lang auf 80°C erwärmt, weiteres Bromid (0,07 g) zugegeben, weitere 5 Stunden erwärmt, abkühlen gelassen, filtriert und konzentriert. Es wurde zwischen Et₂O und Wasser partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um eine farblose Flüssigkeit zu ergeben.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (2,38 g, 8,0 mmol) wurde mit 40% wässrigem MeNH₂ (9,3 g, 0,12 Mol) und EtOH (5 ml) kombiniert. Es wurde 18 Stunden in einem versiegelten Röhrchen auf 80°C erwärmt, abkühlen gelassen, konzentriert und zwischen EtOAc und Wasser partitioniert. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um einen gelben Feststoff zu ergeben. Umkristallisation aus MeOH-Wasser ergab weiße Nadeln, Schmelzpunkt 112–113°C.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 wurde wie in Beispiel 14, Stufe 1 (24 Stunden Erwärmen) mit LiAlH₄ behandelt, um ein gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 4: Das Produkt von Stufe 3 wurde mit dem Produkt von Beispiel 5, Stufe 2 nach dem Verfahren von Beispiel 13, Stufe 3, behandelt, um die Titelverbindung als farbloses Öl zu erhalten, MS: m/e = 451 (M + 1).
Beispiel 16
Die Verbindungen der Beispiele 16, 16-2 und 16-3 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche. Die Verbindung von Beispiel 5-41 (0,206 g, 0,50 mmol) wurde in 1:1 MeOH-CH₂Cl₂ (10 ml) gelöst Es wurde 4,0 M HCl/Dioxan (4,0 ml) zugegeben. Es wurde 2 Stunden gerührt und mit 2 M NH₃/MeOH gequencht. Es wurde konzentriert und an Silika chromatographiert, um die Titelverbindung als gelbes Öl zu erhalten, MS: m/e = 314 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurden die Beispiele 16-2 und 16-3 hergestellt.
Beisp. 16-2: MS: m/e 314 (M + 1).
Beisp. 16-3: MS: m/e 300 (M + 1).
Beispiel 17
Die Verbindungen der Beispiele 17, 17-2 und 17-3 liegen außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Die Verbindung aus Beispiel 16 (0,070 g, 0,22 mmol), 4-Methoxybenzoylchlorid (0,058 g, 0,34 mmol) und DIPEA (0,058 g, 0,45 mmol) wurden in DMF (4 ml) kombiniert. Es wurde 2 Stunden gerührt, konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als gelben Feststoff zu erhalten, MS: m/e = 448 (M + 1).
In ähnlicher Weise wurden die jeweiligen Verbindungen von Beispiel 16 bis Beispiele 17-2 und 17-2 umgewandelt.
Beisp. 17-2: MS: m/e 448 (M + 1).
Beisp. 17-3: MS: m/e 434 (M + 1).
Beispiel 18
Die Verbindung von Beispiel 18 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche. Die Verbindung von Beispiel 17-2 (0,119 g, 0,38 mmol), 2,4-Difluorbenzaldehyd (0,054 g, 0,38 mmol) und NaBH(OAc)₃ (0,157 g, 0,74 mmol) wurden in CH₂Cl₂ (10 ml) kombiniert. Es wurde 3 Stunden gerührt und weiterer Aldehyd (0,016 g) und Borhydrid (0,045 g) zugegeben. Es wurde 18 Stunden gerührt, mit CH₂Cl₂ verdünnt und mit gesättigter NaHCO₃, danach Salzlösung gewaschen. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Es wurde mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als farbloses Öl zu erhalten, MS: m/e = 440 (M + 1).
Beispiel 19
Die Verbindung von Beispiel 19 liegt außerhalb des Bereichs der angefügten Ansprüche.
Stufe 1: 2,4-Difluorbrombenzol (2,00 g, 10,4 mmol), 4-Piperazinonethylenketal (2,27 g, 15,5 mmol), NaO-tBu (1,39 g, 14,5 mmol), ±-BINAP (0,387 g, 0,65 mmol) und Pd₂(dba)₃ (0,119 g, 0,21 mmol) wurden in Toluol (20 ml) kombiniert. Es wurde 18 Stunden auf Rückfluss erwärmt, abkühlen gelassen und konzentriert. Es wurde an Silika chromatographiert, um ein braunes Öl zu erhalten.
Stufe 2: Das Produkt aus Stufe 1 (2,55 g, 10,0 mmol) wurde mit 5 N HCl (40 ml) in THF (25 ml) kombiniert. Es wurde 5 Tage gerührt und mit NH₄OH alkalisch gemacht. Es wurde konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und Wasser partitioniert. Es wurde mit Salzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein braunes Öl zu ergeben.
Stufe 3: Das Produkt aus Stufe 2 (1,75 g, 8,3 mmol) wurde in MeOH (15 ml) in Eis gekühlt und NaBH₄ (0,16 g, 4,1 mmol) zugegeben. Es wurde eine Stunde gerührt, auf Eis gegossen und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Es wurde mit Salzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein gelbes Öl zu ergeben.
Stufe 4: Das Produkt aus Stufe 3 (1,65 g, 7,7 mmol) und Et₃N wurden in CH₂Cl₂ (30 ml) kombiniert. Es wurde in Eis gekühlt und Methansulfonylchlorid (1,07 g, 9,4 mmol) zugegeben. Es wurde 1 Stunde gerührt und mit ges. NaHCO₃ gewaschen. Es wurde getrocknet (MgSO₄) und konzentriert, um ein gelbes Öl zu ergeben.
Stufe 5: Das Produkt aus Stufe 4 (1,00 g, 3,4 mmol) wurde in EtOH (10 ml) gelöst. Es wurde 40% wässriges MeNH₂ (20 ml, 0,2 Mol) zugegeben. Es wurde 3 Stunden in einem verschlossenen Röhrchen auf 100°C erwärmt, abkühlen gelassen und konzentriert. Es wurde zwischen CH₂Cl₂ und Wasser partitioniert. Es wurde mit Salzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Es wurde mittels PLC gereinigt, um ein gelbes Öl zu erhalten.
Stufe 6: Das Produkt aus Stufe 5 (0,035 g, 0,15 mmol) wurde mit dem Produkt von Beispiel 5, Stufe 2 (0,041 mg, 0,18 mmol) und K₂CO₃ (0,031 g, 0,23 mmol) in DMF (3 ml) kombiniert. Es wurde 18 Stunden auf 140°C erwärmt. Es wurde konzentriert und mittels PLC gereinigt, um die Titelverbindung als farbloses Gummi zu erhalten, MS: m/e = 426 (M + 1).
Wegen ihrer Adenosin-A_2a-Rezeptorantagonistaktivität sind erfindungsgemäße Verbindungen zur Behandlung von Depression, Störungen der kognitiven Funktion und neurodegenerativen Erkrankungen, wie Morbus Parkinson, seniler Demenz, wie Morbus Alzheimer, und Psychosen organischen Ursprungs brauchbar. Erfindungsgemäße Verbindungen können insbesondere die Beeinträchtigung der Motorik verbessern, die auf neurodegenerative Erkrankungen wie Morbus Parkinson zurückzuführen ist.
Die anderen Mittel, die bekanntermaßen zur Behandlung von Morbus Parkinson brauchbar sind und in Kombination mit den Verbindungen der Formel I verabreicht werden können, schließen ein: L-DOPA; dopaminerge Agonisten wie Quinpirol, Ropinirol, Pramipexol, Pergolid und Bromocriptin; MAO-B-Hemmer wie Deprenyl und Selegilin; DOPA-Decarboxylaseinhibitoren wie Carbidopa und Benserazid, und COMT-Inhibitoren, wie Tolcapon und Entacapon. Es können ein bis drei, vorzugsweise ein anderes Mittel in Kombination mit den Verbindungen der Formel I verwendet werden.
Die pharmakologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde durch die folgenden in vitro- und in vivo-Assays ermittelt, um die A_2a Rezeptoraktivität zu messen.
Protokoll des kompetitiver Bindungsassay zwischen humanem Adenosin A_2a und A₁-Rezeptor
Membranquellen:
A_2a: Humane A_2a Adenosinrezeptormembranen, Katalog Nr. RB-HA2a, Receptor Biology, Inc., Beltsville, MD, USA. Es wurde in Membranverdünnungspuffer (siehe unten) auf 17 μg/100 μl verdünnt.
Assaypuffer:
Membranverdünnungspuffer: Dulbecco's phosphatgepufferte Salzlösung (Gibco/BRL) + 10 mM MgCl₂.
Verbindungsverdünnungspuffer: Dulbecco's phosphatgepufferte Salzlösung (Gibco/BRL) + 10 mM MgCl₂ ergänzt mit 1,6 mg/ml Methylcellulose und 16% DMSO. Wurde täglich frisch hergestellt.
Liganden:
A_2a: [3H]-SCH 58261, kundenspezifische Synthese, Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ, USA. Der Vorrat wurde in 1 nM in Membranverdünnungspuffer hergestellt. Endassaykonzentration war 0,5 nM.
A₁: [3H]-DPCPX, Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ, USA. Der Vorrat wurde in 2 nM in Membranverdünnungspuffer hergestellt. Endassaykonzentration war 1 nM.
Unspezifische Bindung:
A_2a: Zur Bestimmung der unspezifischen Bindung wurden 100 μM CGS 15923 (RBI, Natick, MA, USA) zugegeben. Der Arbeitsvorrat wurde mit 400 nM in Verbindungsverdünnungspuffer hergestellt.
A₁: Zur Bestimmung der unspezifischen Bindung wurden 100 μM NECA (RBI, Natick, MA, USA) zugegeben. Der Arbeitsvorrat wurde in 400 μM in Verbindungsverdünnungspuffer hergestellt.
Verbindungsverdünnung:
1 mM Vorratslösungen der Verbindungen wurden in 100 DMSO hergestellt. Es wurde in Verbindungsverdünnungspuffer verdünnt. Es wurde in 10 Konzentrationen im Bereich von 3 μM bis 30 pM getestet. Es wurden Arbeitslösungen mit der 4-fachen Endkonzentration in Verbindungsverdünnungspuffer hergestellt.
Assayverfahren:
Assays wurden in Tiefmulden-96-Muldenplatten durchgeführt. Das Gesamtassayvolumen war 200 μl. 50 μl Verbindungsverdünnungspuffer (Gesamtligandenbindung) oder 50 μl CGS 15923 Arbeitslösung (A_2a unspezifische Bindung) oder 50 μl NECA Arbeitslösung (A₁ unspezifische Bindung) oder 50 μl Arzneimittelarbeitslösung wurden zugefügt. 50 μl Ligandenvorratslösung ([3H]-SCH 58261 für A_2a, [3H]-DPCPX für A₁) wurden zugefügt. 100 μl verdünnte Membranen wurden zugefügt, die den entsprechenden Rezeptor enthielten. Es wurde gemischt und bei Raumtemperatur 90 Minuten inkubiert. Es wurde mit einem Brandel-Zellernter auf Packard GF/B Filterplatten geerntet. Es wurden 45 μl Microscint 20 (Packard) zugefügt und mit dem Packard Top-Count Microszintillationszähler gezählt. Die IC₅₀-Werte wurden bestimmt, indem die Verdrängungskurven mit einem iterativen Kurvenanpassungsprogramm (Excel) angepasst wurden. Die Ki-Werte wurden mit der Cheng-Prusoff-Gleichung bestimmt.
Haloperidol-induzierte Katalepsie bei der Ratte
Es wurden männliche Sprague-Dawley Ratten (Charles River, Calco, Italien) verwendet, die 175 bis 200 g wogen. Der kataleptische Zustand wurde durch subkutane Verabreichung des Dopaminrezeptorantagonisten Haloperidol (1 mg/kg, sc) 90 Minuten vor dem Testen der Tiere mit dem vertikalen Gittertest induziert. Bei diesem Test wurden die Ratten auf der Drahtmaschenabdeckung eines 25 × 43 Plexiglaskäfigs angeordnet, der in einem Winkel von etwa 70 Grad zu dem Versuchstisch angeordnet war. Die Ratte wurde so auf dem Gitter angeordnet, dass alle vier Beine abgespreizt und gestreckt waren ("Froschstellung"). Die Verwendung einer derartigen unnatürlichen Körperhaltung ist für die Spezifität dieses Tests auf Katalepsie wesentlich. Die Zeitspanne von der Platzierung der Pfoten bis zur ersten vollständigen Entfernung einer Pfote (dezente Latenz) wurde maximal 120 Sekunden gemessen.
Die untersuchten selektiven A_2a Adenosinantagonisten wurden oral in Dosen im Bereich zwischen 0,3 und 3 mg/kg 1 und 4 Stunden vor der Bewertung der Tiere verabreicht.
6-OHDA Läsion des mittleren Vorderhirnbündels bei Ratten
In allen Experimenten wurden erwachsene männliche Sprague-Dowley Ratten verwendet (Charles River, Calco, Como, Italien), die 275–300 g wogen. Die Ratten wurden in Gruppen von 4 pro Käfig mit freiem Zugang zu Nahrung und Wasser unter kontrollierter Temperatur und 12 Stunden Hell/Dunkel-Zyklus untergebracht. Am Tag vor dem chirurgischen Eingriff wurden die Ratten über Nacht mit freiem Zugang zu Wasser fasten gelassen.
Die unilaterale 6-Hydroxydopamin-(6-OHDA)-Läsion des mittleren Vorderhirnbündels wurde mit geringen Veränderungen nach dem Verfahren durchgeführt, das von Ungerstedt et al. (Brain Research. 24, 1970, Seiten 485–493) und Ungerstedt, Eur. J. Pharmacol., 5 (1968), Seiten 107–110, beschrieben wurde. Kurz gesagt wurden die Tiere mit Chloralhydrat anästhesiert (400 mg/kg, ip) und 30 Minuten vor der 6-OHDA-Injektion mit Desipramin (10 mpk, ip) behandelt, um die Aufnahme des Toxins an den noradrenergischen Enden zu blockieren. Danach wurden die Tiere in einem Stereotaxierahmen angeordnet. Die Haut über der Hirnschale wurde umgeschlagen, und die Stereotaxiekoordinaten (–2,2 posterior vom Bregma (AP), +1,5 lateral vom Bregma (ML), 7,8 ventral von der Dura (DV)) wurden gemäß dem Atlas von Pellegrino et al. genommen (L. J. Pellegrino, A. S. Pellegrino und A. J. Cushman, A Stereotaxic Atlas of the Rat Brain, 1979, New York, Plenum Press). Ein Trepanationsloch wurde in dem Schädel über der Läsionsstelle positioniert und eine an einer Hamilton-Spritze befestigte Nadel wurde in das linke MFB abgesenkt. Danach wurden 8 μg 6-OHDA-HCl in 4 μl Salzlösung mit 0,05 Ascorbinsäure als Antioxidans gelöst und mit einer Infusionspumpe mit einer konstanten Durchflussrate von 1 μl/1 Min infundiert. Die Nadel wurde nach weiteren 5 Minuten gezogen, die chirurgische Wunde verschlossen und die Tiere sich 2 Wochen erholen gelassen.
Zwei Wochen nach der Läsion wurden den Ratten L-DOPA (50 mg/kg, ip) plus Benserazid (25 mg/kg, ip) verabreicht und auf Basis der Anzahl vollständiger kontralateraler Drehungen selektiert, die in dem zweistündigen Testzeitraum durch automatische Rotameter quantifiziert wurden (Vorbereitungstest). Jede Ratte, die nicht mindestens 200 vollständige Umdrehungen/2 Stunden zeigte, wurde nicht in die Studie eingeschlossen.
Ausgewählte Ratten erhielten das Testarzneimittel 3 Tage nach dem Vorbereitungstest (maximale Dopaminrezeptorüberempfindlichkeit). Die neuen A_2a-Rezeptorantagonisten wurden oral in Dosierniveaus im Bereich zwischen 0,1 und 3 mg/kg zu unterschiedlichen Zeiten (d. h. 1, 6, 12 h) vor der Injektion einer unter dem Schwellenwert liegenden Dosis von L-DOPA (4 mpk, ip) plus Benserazid (4 mpk, ip) und der Bewertung des Drehverhaltens verabreicht.
Mit den obigen Testverfahren wurden für bevorzugte und/oder repräsentative erfindungsgemäße Verbindungen die folgenden Ergebnisse erhalten.
Die Ergebnisse des Bindungsassays mit erfindungsgemäßen Verbindungen zeigten A_2a Ki Werte von etwa 0,3 bis etwa 50 nM, wobei bevorzugte Verbindungen Ki-Werte zwischen 0,3 und 10 nM zeigten.
Selektivität wird bestimmt, indem Ki für den A₁-Rezeptor durch Ki für den A_2a-Rezeptor geteilt wird. Erfindungsgemäße Verbindungen haben eine Selektivität im Bereich von etwa 1 bis etwa 1600. Bevorzugte Verbindungen haben eine Selektivität > 100.
Bevorzugte Verbindungen zeigen eine Abnahme der dezenten Latenz um 50 bis 75%, wenn sie oral mit 1–3 mg/kg auf antikataleptische Aktivität bei Ratten getestet wurden.
Eine bis drei Verbindungen der Formel I können in den hier beschriebenen Behandlungen verwendet werden, vorzugsweise eine.
Zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen aus den in dieser Erfindung beschriebene Verbindungen können inerte, pharmazeutisch annehmbare Träger fest oder flüssig sein. Zubereitungen in fester Form schließen Pulver, Tabletten, dispergierbare Körner, Kapseln, Medizinalkapseln und Zäpfchen ein. Die Pulver und Tabletten können aus etwa 5 bis etwa 70% aktivem Bestandteil zusammensetzt sein. Geeignete feste Träger sind in der Technik bekannt, z. B. Magnesiumcarbonat, Magnesiumstearat, Talkum, Zucker, Lactose. Tabletten, Pulver, Kapseln und Medizinalkapseln können als feste Dosierungsformen verwendet werden, die für die orale Verabreichung geeignet sind.
Zur Herstellung von Zäpfchen wird ein niedrig schmelzendes Wachs, wie eine Mischung von Fettsäureglyceriden oder Kakaobutter, zuerst geschmolzen und der aktive Bestandteil darin homogen dispergiert, wie durch Rühren. Die geschmolzene homogene Mischung wird dann in zweckmäßig bemessene Formen gegossen, abkühlen gelassen und dadurch verfestigt.
Zubereitungen in flüssiger Form schließen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen ein. Als Beispiel hierfür können Was ser oder Wasser/Propylenglykol-Lösungen für die parenterale Injektion genannt werden.
Zubereitungen in flüssiger Form können auch Lösungen für intranasale Verabreichung einschließen.
Aerosolzubereitungen, die zur Inhalation geeignet sind, können Lösungen und Feststoffe in Pulverform einschließen, die in Kombination mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger wie inertem komprimiertem Gas vorliegen können.
Ebenfalls eingeschlossen sind Zubereitungen in fester Form, die kurz vor Gebrauch in Zubereitungen in flüssiger Form für orale oder parenterale Verabreichung überführt werden sollen. Solche flüssigen Formen schließen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen ein.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch transdermal verabreichbar sein. Die transdermalen Zusammensetzungen können die Form von Cremes, Lotionen, Aerosolen und/oder Emulsionen annehmen, und können einem Transdermalpflaster vom Matrix- oder Reservoirtyp zugefügt werden, wie in der Technik zu diesem Zweck konventionell ist.
Die Verbindung wird vorzugsweise oral verabreicht.
Die pharmazeutische Zubereitung liegt vorzugsweise in Einheitsdosisform vor. In einer solchen Form wird die Zubereitung in Einheitsdosen unterteilt, die geeignete Mengen der aktiven Komponente enthalten, z. B. eine wirksame Menge, um den gewünschten Zweck zu erreichen.
Die Menge an aktiver Verbindung der Formel I in einer Einzelzubereitungsdosis kann gemäß der speziellen Anwendung auf etwa 0,1 mg bis 1000 mg, vorzugsweise etwa 1 mg bis 300 mg, variiert oder eingestellt werden.
Die tatsächlich verwendete Dosis kann gemäß den Erfordernissen des Patienten und dem Schweregrad des behandelten Zustands variiert werden. Das Ermitteln der richtigen Dosierung für eine spezielle Situation liegt innerhalb des Wissens des Fachmanns. Die Behandlung wird im Allgemeinen mit geringeren Dosierungen begonnen, die unter der Optimaldosis der Verbindung liegen. Nachfolgend wird die Dosierung in kleinen Schritten erhöht, bis die optimale Wirkung unter den Bedingungen erreicht wird. Aus Gründen der Zweckmäßigkeit kann die Gesamttagesdosis auf Wunsch aufgeteilt und portionsweise über den Tag verabreicht werden.
Die Menge und Frequenz der Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen und der pharmazeutisch annehmbaren Salze derselben werden gemäß der Beurteilung des behandelnden Arztes unter Berücksichtigung von Faktoren wie Alter, Zustand und Größe des Patienten sowie des Schweregrads der zu behandelnden Symptome festgelegt. Ein typisches empfohlenes Dosierschema für Verbindungen der Formel I ist orale Verabreichung von 10 mg bis 2000 mg/Tag, vorzugsweise 10 bis 1000 mg/Tag in zwei bis vier unterteilten Dosen, um Erleichterung bei Erkrankungen des zentralen Nervensystems, wie Morbus Parkinson, zu bewirken. Die Verbindungen sind bei Verabreichung innerhalb dieses Dosierungsbereichs nicht giftig.
Die Dosen und das Dosierschema anderer Mittel, die zur Behandlung von Morbus Parkinson verwendet werden, werden durch den behandelnden Arzt bestimmt, beispielsweise in Hinsicht auf zugelassene Dosen und Dosierschemata in der Packungsbeilage, wobei das Alter, das Geschlecht und der Zustand des Patienten und der Schweregrad der Erkrankung berücksichtigt werden. Es wird erwartet, dass niedrigere Dosen der Komponenten wirksam sind, wenn die Kombination einer Verbindung der Formel I und einem anderen Mittel gegen Parkinson-Erkrankung verabreicht wird, verglichen mit Dosen der Komponenten, die als Monotherapie verabreicht werden. Bei Verabreichung in Kombination kann die Verbindung der Formel I bzw. können die Verbindungen der Formel I und das andere Mittel/die anderen Mittel zur Behandlung der Parkinson-Erkrankung simultan oder sequentiell verabreicht werden. Dies ist besonders nützlich, wenn die Komponenten der Kombination vorzugsweise in unterschiedlichen Dosierschemata gegeben werden, z. B. wenn eine Komponente täglich und eine andere alle sechs Stunden verabreicht wird, oder wenn die bevorzugten pharmazeutischen Zusammensetzungen unterschiedlich sind, z. B. eine vorzugsweise eine Tablette und eine eine Kapsel ist. Daher ist ein Kit vorteilhaft, der die separaten Dosierformen enthält.
Es folgen Beispiele für pharmazeutische Dosierformen, die eine erfindungsgemäße Verbindung enthalten. Fachleute werden erkennen, dass Dosierformen modifiziert werden können, so dass sie sowohl eine Verbindung der Formel I als auch ein dopaminerges Mittel enthalten. Der Bereich der Erfindung gemäß ihrem Aspekt der pharmazeutischen Zusammensetzung soll durch die angegebenen Beispiele nicht eingeschränkt werden.
Beispiele für pharmazeutische Dosierungsformen

Beispiel A – Tabletten

Nr.	Bestandteile	mg/Tablette	mg/Tablette
1,	Aktive Verbindung	100	500
2,	Lactose USP	122	113
3,	Maisstärke, Lebensmittelqualität, als 10% Paste in Wasser	30	40
4,	Maisstärke, Nahrungsmittelqualität	45	40
5,	Magnesiumstearat	3	7
Summe		300	700

Herstellungsverfahren
Positionen Nr. 1 und 2 wurden in einem geeigneten Mischer 10 bis 15 Minuten gemischt. Die Mischung wurde mit Position Nr. 3 granuliert. Die feuchten Körner wurden nach Bedarf durch ein grobes Sieb (z. B. 1/4'', 0,63 cm) gemahlen. Die feuchten Körner wurden getrocknet. Die getrockneten Körner wurden nach Bedarf gesiebt und mit Position Nr. 4 gemischt und 10 bis 15 Minuten gemischt. Position Nr. 5 wurde zugegeben und 1 bis 3 Minuten gemischt. Die Mischung wurde mit einer geeigneten Tablettiermaschine auf geeignete Größe und geeignetes Gewicht gepresst. Beispiel B Kapseln

Nr. Bestandteil mg/Kapsel mg/Kapsel

1, Aktive Verbindung 100 500

2, Lactose USP 106 123

3, Maisstärke, Nahrungsmittelqualität 40 70

4, Magnesiumstearat NF 7 7

Summe 253 700
Herstellungsverfahren
Positionen Nr. 1, 2 und 3 wurden in einem geeigneten Mischer 10 bis 15 Minuten gemischt. Position Nr. 4 wurde zugege ben und 1 bis 3 Minuten gemischt. Die Mischung wurden auf einer geeigneten Verkapselungsmaschine in geeignete zweiteilige Hartgelatinekapseln gefüllt.

Claims

Verbindung mit der Strukturformel
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon, worin A N ist, R^1a ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus H, (C₁-C₆)-Alkyl, Halogen, CN und -CF₃; X -N(R⁹)- ist, Y eine Bindung oder
ist, p und q jeweils 2 sind, Q und Q'jeweils
sind, R R⁵-Aryl, R⁵-Heteroaryl, R⁶-(C₂-C₆)-Alkenyl oder R⁶-(C₂-C₆)-Alkinyl ist; R² R⁵-Aryl, R⁵-Heteroaryl, R⁵-Aryl(C₁-C₆)-alkyl oder R⁵-Heteroaryl(C₁-C₆)-alkyl ist oder R²-Y
ist, U, V und W unabhängig aus der Gruppe bestehend aus N und CR¹ ausgewählt sind, mit der Maßgabe, dass mindestens einer von U, V und W CR¹ ist, wobei R¹ ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus H, (C₁-C₆)-Alkyl, Halogen, CN und -CF₃; n 2 oder 3 ist, und R⁵ 1 bis 3 Substituenten ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H, (C₁-C₆)-Alkyl, -OH, (C₁-C₆)-Alkoxy, (C₁-C₆)-Alkoxy(C₁-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxy-(C₁-C₆)-alkoxy, Halogen, -CF₃, -CN, -NH₂, (C₁-C₆)-Alkylamino, Di(C₁-C₆)alkylamino, Amino(C₁-C₆)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkylamino(C₁-C₆)alkyl, Di(C₁-C₆)alkylamino(C₁-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkanoylamino, (C₁-C₆)-Alkansulfonylamino, (C₁-C₆)-Alkylthio, (C₁-C₆)-Alkylthio(C₁-C₆)alkyl, R⁶-(C₂-C₆)-Alkenyl, R⁶-(C₂-C₆)-Alkinyl, Hydroxy(C₁-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxy-C(O)-amino oder Heterocycloalkyl(C₁-C₆)alkyl; R⁶ 1 bis 3 Substituenten ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, -OH, (C₁-C₆)-Alkoxy und Halogen, R⁷ und R^7a jeweils H sind, R⁹ H, (C₁-C₆)-Alkyl, Hydroxy(C₂-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxy-(C₂-C₆)alkyl, Amino(C₂-C₆)alkyl, (C₁-C₆)-Alkylamino(C₂-C₆)-alkyl, Di(C₁-C₆)alkylamino(C₂-C₆)alkyl, Halogen(C₃-C₆)alkenyl, CF₃-(C₁-C₆)-Alkyl, (C₃-C₆)-Alkenyl, -(C₃-C₆)-Cycloalkyl oder (C₃-C₆)-Cycloalkyl(C₁-C₆)alkyl ist, und R¹⁰ H, -C(O)-O-(C₁-C₆)-Alkyl, R⁵-Aryl, -C(O)-(C₁-C₆)-Alkyl, -C(O)-(R⁵-Aryl) oder R⁵-Aryl-(C₁-C₆)-alkyl ist.
Verbindung nach Anspruch 1, bei der R² R⁵-Aryl ist.
Verbindung nach Anspruch 1, bei der R Furyl ist.
Verbindung nach Anspruch 1 ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Verbindungen mit der Formel
wobei R²-Y-(CH₂)_n-N(R⁹)- wie in der Tabelle definiert ist:
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung gemäß Anspruch 1 in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung des zentralen Nervensystems oder des Schlaganfalls.
Verwendung nach Anspruch 6, bei der das Medikament zur Behandlung von Depression, kognitiven Erkrankungen oder neurodegenerativen Erkrankungen ist.
Verwendung nach Anspruch 7, bei der das Medikament zur Behandlung von Morbus Parkinson, seniler Demenz oder Psychosen organischer Herkunft ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine therapeutisch wirksame Menge einer Kombination einer Verbindung gemäß Anspruch 1 und ein bis drei andere Mittel, die zur Behandlung von Morbus Parkinson brauchbar sind, in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Verwendung einer Kombination einer Verbindung gemäß Anspruch 1 und einem bis drei anderen Mitteln, die zur Behandlung von Morbus Parkinson brauchbar sind, zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Morbus Parkinson.
Kit, der in separaten Behältern in einer Einzelpackung pharmazeutische Zusammensetzungen zur kombinierten Verwendung zur Behandlung von Morbus Parkinson enthält, der in einem Behälter eine pharmazeutische Zusammensetzung enthält, die eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält, und in separaten Behältern eine oder mehrere pharmazeutische Zusammensetzung(en) enthält, die jeweils eine wirksame Menge eines Mittels, das zur Behandlung von Morbus Parkinson brauchbar ist, in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält bzw. enthalten.