DE60207824T2

DE60207824T2 - Cytidin-diphosphocholin gegen diabetische neuropathie

Info

Publication number: DE60207824T2
Application number: DE60207824T
Authority: DE
Inventors: Kazuki Endo; Toichi Abiru; Junzo Kamei
Original assignee: Yamasa Corp
Current assignee: Yamasa Corp
Priority date: 2001-09-05
Filing date: 2002-09-03
Publication date: 2006-07-06
Anticipated expiration: 2022-09-04
Also published as: MXPA04002099A; JP3968347B2; WO2003022290A1; US6924272B2; CN1551778A; EA200400394A1; HU225988B1; DE60207824D1; CA2459469A1; EA006776B1; KR20040033002A; EP1362593A4; US20050171051A1; HUP0401940A2; EP1362593B1; EP1362593A1; US20040014711A1; KR100740079B1; ATE311891T1; US7074773B2

Description

Die Erfindung betreffendes technisches Gebiet
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Cytidin-5'-diphosphocholin (CDP-Cholin) als aktiven Bestandteil zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie.
Stand der Technik
Derzeit betreffen die Behandlungen von Diabetes die Symptome und beruhen auf der Verabreichung von Insulin oder hypoglykämischen Mitteln. Eine Langzeitkontrolle des Blutzuckers ist jedoch schwierig, geschweige denn eine vollständige Heilung von Diabetes und im Fall eines längeren Krankheitszeitraums werden verschiedenartige Komplikationen ausgelöst. Von derartigen Komplikationen ist ein allgemeiner Krankheitszustand diabetischer peripherer Neuropathie eine beidseitig symmetrische, die Empfindungsnerven beherrschende Polyneuropathie. Bei akuten Symptomen werden eine Nervenerregung wie etwa eine Empfindungsabnormalität, Allodynie (unter Fühlen eines Schmerzes bei leichtem Berühren der Körperoberfläche) und dergleichen beobachtet und bei chronischen Symptomen werden ein verringertes Empfinden (Gliedertaubheit, Kälteempfinden usw.), Schmerz und dergleichen beobachtet. Außerdem entwickelt sich eine diabetische Dysautonomie hauptsächlich bei Diabetespatienten mit einer Polyneuropathie, was jedes unter der Kontrolle autonomer Nerven stehende Organ der Gefahr einer Abnormalität aussetzt und es werden eine abnormale Darmbewegung wie etwa Verstopfung und Diarrhöe, Impotenz, orthostatische Hypotonie, Dyshidrie, Verzögerung der Magenentleerung und dergleichen beobachtet.
Für diabetische Neuropathie, die derartige verschiedenartige Symptome zeigt, wurde Epalrestat (hergestellt durch Ono Pharmaceutical Co., Ltd.), das ein Aldosereduktasehemmer ist, nur in Japan zugelassen und verwendet. Es wurde jedoch auf verschiedene Probleme die Wirksamkeit und Nebenwirkungen dieses Wirkstoffs betreffend hingewiesen [The Informed Prescriber, Bd. 11, Seite 122 und 125, Dezember (1996)]. Weiterhin wurde außerdem Mexiletin-hydrochlorid (hergestellt durch Nippon Boehringer Ingelheim Co., Ltd.), das als therapeutischer Wirkstoff für (ventrikuläre) Tachyarrhythmie verwendet wird, zugelassen und wegen der Wirksamkeit und Wirkung zur Besserung der subjektiven Symptome (spontaner Schmerz, Taubheit) von diabetischer Neuropathie verwendet. Wie jedoch in der Phase III – kontrollierte klinische Studie – berichtet wurde, ist seine Spontanschmerzlinderungsrate höchstens 50% und der Wirkstoff ist als therapeutisches Mittel für diabetische Neuropathie nicht völlig zufriedenstellend.
Der Hauptzweck der Diabetestherapie ist heutzutage das Verhindern des Entstehens und Fortschreitens diabetischer Komplikationen zu verhindern und die Entwicklung eines Wirkstoffs für diabetische Komplikationen, der eine hohe therapeutische Wirkung und eine hohe Sicherheit zeigt, ist erwünscht.
Unter diesen Umständen ist bei einer Verbindung zwischen mit Nukleinsäure verwandten Verbindungen und Neuropathie berichtet worden, daß Triacetyluridin bei durch Taxol, das ein Antikrebsmittel ist (WO00/11952), ausgelöster peripherer Neuropathie (verringertes Empfinden) wirksam ist.
Durch Taxol, das ein Antikrebsmittel ist, ausgelöste periphere Neuropathie und diabetische Neuropathie sind jedoch völlig verschiedene Krankheiten, was die Entstehungsgründe betrifft. Außerdem hält es die vorstehende Veröffentlichung nicht für möglich oder legt es auch nicht nahe, ob Triacetyluridin bei Neuropathie, die aus einer Kohlenhydratstoffwechselstörung herrührt, nämlich diabetischer Neuropathie wirksam ist. Weiterhin führt die vorstehende internationale Veröffentlichung CDP-Cholin, das von Triacetyluridin verschieden ist, als aktiven Bestandteil beispielhaft an. CDP-Cholin wird jedoch in der vorstehenden Veröffentlichung ohne spezielle Daten bloß als Beispiel, viel weniger als eine sich auf die Wirkung von CDP-Cholin auf diabetische Neuropathie beziehende Beschreibung oder Daten dargestellt.
Offenbarung der Erfindung
Im Hinblick auf die vorstehende Situation haben die Erfinder die Wirksamkeit mit Nukleinsäure verwandter Verbindungen auf diabetische Neuropathie eingehend untersucht und fanden, daß obschon CDP-Cholin herkömmlicherweise nur zur Verwendung durch intravenöse Verabreichung zur Anwendung bei Störungen im Zentralnervensystem wie etwa mit einer Kopfverletzung und Gehirnoperation verbundener Bewußtseinsstörung erlaubt ist, es überraschenderweise bei oraler Verabreichung eine überlegene Besserungswirkung auf die bei diabetischer, peripherer Neuropathie beobachteten Symptome wie etwa Empfindungsabnormalität und dergleichen und auf die von diabetischer Dysautonomie stammenden Symptome wie etwa verschlechtertes Transportvermögen des Magen-Darm-Trakts und dergleichen zeigt, wodurch die vorliegende Erfindung erreicht wurde.
Demgemäß stellt die vorliegende Erfindung Folgendes bereit:

(1) Verwendung von CDP-Cholin oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie;
(2) die Verwendung aus vorstehend (1), wobei die diabetische Neuropathie eine hauptsächlich durch eine Kohlenhydratstoffwechselstörung verursachte Neuropathie ist;
(3) die Verwendung aus vorstehend (1), wobei die diabetische Neuropathie periphere Neuropathie ist;
(4) die Verwendung aus vorstehend (1), wobei die diabetische Neuropathie Dysautonomie ist;
(5) die Verwendung aus einem aus vorstehend (1) bis (4), wobei sich das pharmazeutische Mittel zur Prophylaxe oder Behandlung in einer Dosierungsform zur oralen Verabreichung befindet.

Kurze Beschreibung der Zeichnungen
1 zeigt die Ergebnisse für CDP-Cholin bezüglich der Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion, wobei die Längsachse die Reaktionslatenzzeit (Sekunden) zeigt und die Querachse den verstrichenen Zeitraum (Wochen) der CDP-Cholinverabreichung zeigt.
2 zeigt die Ergebnisse für CDP-Cholin bezüglich der Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion, wobei die Längsachse die Reaktionslatenzzeit (Sekunden) zeigt und die Querachse den Krankheitszeitraum (Wochen) des Diabetes zeigt.
3 zeigt die Ergebnisse für CDP-Cholin und verwandte Verbindungen bezüglich der Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion, wobei die Längsachse die Reaktionslatenzzeit (Sekunden) zeigt.
Beste Ausführungsform der Erfindung
Die vorliegende Erfindung stellt weiter die Verwendung von CDP-Cholin oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie bereit.
CDP-Cholin und ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon sind bei der Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie, insbesondere hauptsächlich durch Kohlenhydratstoffwechselstörungen verursachter Neuropathie wirksam. Eine derartige Neuropathie schließt die periphere Neuropathie und Dysautonomie ein, wobei der allgemeine Krankheitszustand der peripheren Neuropathie eine bilateral symmetrische und empfindungsnervendominierende Polyneuropathie ist. Die Einteilung, Bezeichnung und dergleichen von Neuropathie ist in der vorliegenden Beschreibung im Einklang mit der 17. Ausgabe von The Merck Manual.
Gemäß der vorliegenden Erfindung ist es zum Beispiel möglich, das Auftreten sowohl der Symptome im akuten Zustand (Empfindungsabnormalität, Allodynie und dergleichen) als auch der Symptome im chronischen Zustand (Gliedmaßentaubheit, Kältegefühl, Schmerz und dergleichen) zu hemmen oder derartige Symptome nach deren Auftreten durch Verabreichen von CDP-Cholin oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon an einen Diabetespatienten vor der Entwicklung der für periphere Neuropathie spezifischen Symptome oder nach deren Auftreten zu bessern. Es ist weiterhin möglich, das Auftreten der für Dysautonomie spezifischen Symptome wie etwa abnormale Darmbewegung, verzögerte Magenentleerung und dergleichen aufgrund eines verschlechterten Transportvermögens des Magen-Darm-Trakts zu hemmen oder derartige Symptome nach deren Auftreten durch Verabreichen von CDP-Cholin oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon an einen Diabetespatienten vor der Entwicklung der für Dysautonomie spezifischen Symptome oder nach deren Auftreten zu bessern.
CDP-Cholin kann in freier Form oder einer Salzform als aktiver Bestandteil eines Mittels oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie der vorliegenden Erfindung vorliegen. Beispiele der Salzform schließen Alkalimetallsalze wie etwa ein Lithiumsalz, Natriumsalz, Kaliumsalz und dergleichen, Erdalkalimetallsalze wie etwa ein Magnesiumsalz und dergleichen und dergleichen ein, sind aber nicht darauf beschränkt. Davon ist ein pharmazeutisch annehmbares Salz besonders bevorzugt.
CDP-Cholin und ein Salz davon kann ein Hydrat oder ein Solvat sein. Im Fall eines Hydrats wird ein Hydrat oder ein Salzhydrat, bei dem 1–20 Moleküle Wasser an 1 Molekül CDP-Cholin oder ein Salz davon festgehalten oder gebunden ist (sind), veranschaulicht.
Weiterhin kann CDP-Cholin und ein Salz davon und ein Hydrat oder ein Salzhydrat davon (hierin nachstehend einfach als CDP-Cholin bezeichnet) in Form eines Kristalls oder keines Kristalls in der vorliegenden Erfindung verwendet werden.
Derartiges CDP-Cholin ist eine bekannte Verbindung und kann als im Handel erhältliches Produkt erhalten werden oder kann gemäß einem bekannten Verfahren (siehe JP-A-6-31306, EP-Patent Nr. 329627, US-Patent Nr. 6057301 und dergleichen) hergestellt werden.
CDP-Cholin ist zur Prophylaxe oder Behandlung der vorstehenden diabetischen Neuropathie durch irgendeine aus der oralen Verabreichung, parenteralen Verabreichung, intrarektalen Verabreichung und örtlichen Verabreichung wirksam.
Ein Mittel oder eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie kann durch Mischen des vorstehend angeführten CDP-Cholins und eines herkömmlichen Trägers zur Zubereitung und Verarbeiten des Gemischs zu einer Zubereitung hergestellt werden. Der Gehalt an CDP-Cholin in der Zubereitung oder Zusammensetzung kann aus dem Bereich von mindestens 0,01% (Gew./Gew.), vorzugsweise 1–80% (Gew./Gew.) geeignet bestimmt werden.
Als Träger für die Zubereitung wird eine Substanz verwendet, die herkömmlicherweise auf dem Gebiet von Zubereitungen verwendet wird und die nicht mit CDP-Cholin reagiert. Spezifische Beispiele schließen Lactose, Glucose, Mannit, Dextrin, Stärke, Sucrose, Magnesiumaluminometasilikat, synthetisches Aluminiumsilikat, kristalline Cellulose, Carboxymethylcellulosenatrium, Hydroxypropylstärke, Carboxymethylcellulosecalcium, Ionenaustauschharz, Methylcellulose, Gelatine, Gummiarabicum, Hydroxypropylcellulose, niedrigsubstituierte Hydroxypropylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Polyvinylpyrrolidon, Polyvinylalkohol, leichte, wasserfreie Kieselsäure, Magnesiumstearat, Talk, Carboxyvinylpolymer, Titanoxid, Sorbitanfettsäureester, Natriumlaurylsulfat, Glycerin, Fettsäureglycerinester, gereinigtes Lanolin, glycerinierte Gelatine, Polysorbat, Macrogol, Pflanzenöl, Wachs, Paraffinöl, weißes Petrolatum, nichtionisches Tensid, Propylenglykol, Wasser und dergleichen ein.
Die Dosierungsform wird durch eine Tablette, Kapsel, Granulat, Pulver, Sirup, Suspension, Salbe, Gel, Pflaster, Injektion, Augentropfen und dergleichen veranschaulicht. Diese Zubereitungen können gemäß einem herkömmlichen Verfahren unter geeignetem Verwenden des vorstehenden Trägers für eine Zubereitung hergestellt werden. Im Fall einer flüssigen Zubereitung kann sie eine Form annehmen, die das Lösen oder Suspendieren in Wasser oder einem anderen geeigneten Medium bei Gebrauch umfaßt. Es ist ferner möglich, durch ein wohlbekanntes Verfahren auf Tabletten und Granulat eine Beschichtung aufzubringen.
Der Verabreichungsweg des Mittels oder der pharmazeutischen Zusammensetzung zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie kann jeder sein und wird in Abhängigkeit von deren Dosierungsform aus einer oralen Verabreichung, parenteralen Verabreichung, intrarektalen Verabreichung und lokalen Verabreichung ausgewählt.
Obschon die Dosis von CDP-Cholin, das ein aktiver Bestandteil des Mittels oder der pharmazeutischen Zusammensetzung zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie ist, in Abhängigkeit vom Verabreichungsverfahren, Symptom und Alter des Patienten und dergleichen schwankt, ist sie im allgemeinen etwa 0,1–1000 mg mg/kg/d, vorzugsweise etwa 0,5–500 mg/kg/d, die in einer Einzeldosis oder verteilten Dosen verabreicht werden können.
Das Mittel oder die pharmazeutische Zusammensetzung zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie kann andere zur Diabetesbehandlung wirkungsvolle Bestandteile wie etwa ein orales hypoglykämisches Mittel und dergleichen enthalten. Es kann in Kombination mit einem hypoglykämischen Mittel (z. B. Insulin, Gliclazid, Glibenclamid, Tolbutamid, Acetohexamid) verabreicht werden.
Beispiele
Die vorliegende Erfindung wird unter Bezug auf Beispiele und Formulierungsbeispiele, die nicht als einschränkend aufzufassen sind, genau erläutert.
Beispiel 1: Wirkung von CDP-Cholin auf diabetische periphere Neuropathie (1)

Testverbindung: Cytidin-5'-diphosphocholin-mononatriumsalz (CDP-Cholin-Na: hergestellt von Yamasa Corporation)
Test: Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion unter Verwenden einer diabetischen Maus (in vivo)

Dieser Test wurde gemäß dem Verfahren von Osawa und Kamei (Eur. J. Pharmacol., 372, 221–228 (1999)] ausgeführt.
(1) Vorbereitung der diabetischen Maus
In Citratpuffer (pH 4,5) gelöstes Streptozotocin (200 mg/kg) wurde in die Schwanzvene männlicher ICR-Mäuse (10 je Gruppe, Körpergewicht: etwa 20 g) unter Auslösen von Diabetes injiziert.
(2) Verabreichung von CDP-Cholin
CDP-Cholin-Na wurde in destilliertem Wasser gelöst und in einer Dosis von 100 mg/kg einmal täglich ab sofort nach Auslösen des Diabetes oral verabfolgt.
(3) Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion
Die Bestimmung wurde mittels eines Tail-Flick-Tests ausgeführt. Genauer wurde auf den Schwanz der Maus eine photothermische Stimulation ausgeübt und die Reaktionslatenzzeit, bis sie den die Wärme fühlenden Schwanz bewegt, wurde gemessen. Wie sich die Reaktionslatenzzeit bei der Diabetesgruppe verglichen mg/kg CDP-Cholin an die Diabetesgruppe werden in 1 dargestellt.
Wie aus dieser Figur offensichtlich ist, war die Reaktionslatenzzeit in den frühen Stadien des Diabetes (zwischen 1 und 4 Wochen) bei der Diabetesgruppe verglichen mit der Normalgruppe bedeutend verkürzt, die ein der bei humanen Diabetespatienten beobachteten Allodynie ähnliches Symptom (Hyperalgesie) zeigte. Eine signifikante Verlängerung der Reaktionslatenzzeit wurde ab 6 Wochen beobachtet und ein vermindertes Empfinden der Sinnesnerven wurde wie bei humanen Diabetespatienten beobachtet.
Als 100 mg/kg CDP-Cholin bei der widersprüchlichen biphasischen Neuropathie verabfolgt wurden, die im Lauf der Zeit bei der Diabetesgruppe beobachtet wurde, wurde die vorstehende Neuropathie nahezu vollständig gehemmt und die Reaktionslatenzzeit verschob sich um denselben Wert wie bei der normalen Gruppe. In der Figur stellen die Meßwerte die mittlere ± SA der Reaktionslatenzzeit von 10 Mäusen dar, wobei * einen signifikanten Unterschied (P < 0,05) zu der Normalgruppe darstellt und # einen signifikanten Unterschied (P < 0,05) zu der Diabetesgruppe darstellt.
Die Ergebnisse haben gezeigt, daß die orale Verabreichung von CDP-Cholin vor dem Entstehen von Symptomen, die für eine Vielzahl Symptome zeigende diabetische periphere Neuropathie spezifisch sind, eine Hemmung des Entstehens der Symptome gestattet.
Als die Dosis des CDP-Cholins auf 300 mg/kg eingestellt wurde, wurde eine ähnliche Wirkung gefunden. Es wurde bereits bestätigt, daß die Verabreichung von 100 oder 300 mg/kg CDP-Cholin an die Normalgruppe keine Wirkung auf die Reaktionslatenzzeit hat.
Beispiel 2: Wirkung von CDP-Cholin auf diabetische periphere Neuropathie (2)

Testverbindung: CDP-Cholin-Na
Test: Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion unter Verwenden einer diabetischen Maus (in vivo) (siehe das Verfahren von Osawa und Kamei [Eur. J. Pharmacol., 372, 221–228 (1999)]).

(1) Vorbereitung der diabetischen Maus
In Citratpuffer (pH 4,5) gelöstes Streptozotocin (200 mg/kg) wurde in die Schwanzvene männlicher ICR-Mäuse (12–13 je Gruppe, Körpergewicht: etwa 20 g) unter Auslösen von Diabetes injiziert.
(2) Verabreichung von CDP-Cholin
CDP-Cholin-Na wurde in destilliertem Wasser gelöst und in einer Dosis von 100 mg/kg einmal täglich beginnend mit dem Zeitpunkt, als 5 Wochen nach der Streptozotocinverabreichung vergangen waren, oral verabfolgt.
(3) Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion
Die Bestimmung wurde mittels eines Tail-Flick-Tests ausgeführt. Die Ergebnisse werden in 2 dargestellt.
Wie in dieser Figur dargestellt, wurde in dem Fall, als die Verabfolgung von CDP-Cholin (100 mg/kg) an die Diabetesgruppe 5 Wochen nach dem Streptozotocin begonnen wurde, die Verlängerung der Reaktionslatenzzeit, und zwar ein verringertes Gefühl der Empfindungsnerven nahezu vollständig gehemmt und die Reaktionslatenzzeit verschob sich um denselben Wert wie die normale Gruppe. In der Figur stellen die Meßwerte die mittlere ± SA der Reaktionslatenzzeit von 12–13 Mäusen dar, wobei * einen signifikanten Unterschied (P < 0,05) zu der Normalgruppe darstellt und # einen signifikanten Unterschied (P < 0,05) zu der Diabetesgruppe darstellt.
Die Ergebnisse haben gezeigt, daß die orale Verabreichung von CDP-Cholin selbst nach dem Entstehen von Symptomen, die für eine Vielzahl Symptome zeigende diabetische Neuropathie spezifisch sind, eine Hemmung der Symptome gestattet.
Obschon die Daten dieses Mal nicht dargestellt werden, wurde eine ähnliche Wirkung beobachtet, als die Dosis des CDP-Cholins auf 30 mg/kg eingestellt wurde.
Beispiel 3: Wirkung von CDP-Cholin auf diabetische periphere Neuropathie (3)

Testverbindung: CDP-Cholin-Na
Test: Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion unter Verwenden diabetischer Mäuse (in vivo) (siehe das Verfahren von Osawa und Kamei [Eur. J. Pharmacol., 372, 221–228 (1999)]).

(1) Vorbereitung der diabetischen Maus
In Citratpuffer (pH 4,5) gelöstes Streptozotocin (200 mg/kg) wurde in die Schwanzvene männlicher ICR-Mäuse (10 je Gruppe, Körpergewicht: etwa 20 g) unter Auslösen von Diabetes injiziert.
(2) Verabreichung von CDP-Cholin
CDP-Cholin-Na wurde in destilliertem Wasser gelöst und in einer Dosis von 100 mg/kg einmal täglich beginnend mit dem Zeitpunkt, als 8 Wochen nach der Streptozotocinverabreichung vergangen waren, oral verabfolgt.
(3) Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion
Die Bestimmung wurde mittels eines Tail-Flick-Tests ausgeführt. Als Ergebnis wurde die Reaktionslatenzzeit bei der Diabetesgruppe im Lauf der Zeit von dem Zeitpunkt ab, an dem 8 Wochen seit der Verabfolgung von vergangen waren, verlängert, aber eine Verlängerung der Reaktionslatenzzeit oder eine weitere Verschlechterung des verringerten Gefühls der Empfindungsnerven wurde bei der Gruppe mit einer Verabfolgung von 100 mg/kg CDP-Cholin nicht beobachtet und eine bedeutende Hemmwirkung auf die Verlängerung der Reaktionslatenzzeit wurde nach Ablauf von 11 Wochen nach der Streptozotocinverabreichung beobachtet.
Beispiel 4: Wirkung von CDP-Cholin auf diabetische Dysautonomie

Testverbindung: CDP-Cholin-Na
Test: Test auf die Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts diabetischer Mäuse (in vivo)

(1) Vorbereitung der diabetischen Maus
In Citratpuffer (pH 4,5) gelöstes Streptozotocin (200 mg/kg) wurde männlichen ICR-Mäusen (7–11 je Gruppe, Körpergewicht: etwa 20 g) zum Auslösen von Diabetes intraperitoneal injiziert.
(2) Verabreichung von CDP-Cholin
CDP-Cholin-Na wurde in destilliertem Wasser gelöst und in einer Dosis von 100 mg/kg einmal täglich unmittelbar nach dem Auslösen von Diabetes oral verabfolgt.
(3) Test auf die Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts
Die Mäuse, die 8 Wochen zuvor eine Streptozotocinverabfolgung erfahren hatten, wurden für den Test verwendet. Eine 5%ige Aktivkohlepulversuspension wurde durch Verwenden 0,5%iger wäßriger Carboxymethylcelluloselösung hergestellt und Mäusen, die seit dem Tag zuvor gefastet hatten, oral zu 0,1 ml/Maus verabfolgt. Nach 30 min wurde der Magen-Darm-Trakt vom Magenausgangsabschnitt zum Rektum entnommen und die Gesamtlänge wurde gemessen. Außerdem wurde die Position des Aktivkohlepulvers nach der Bewegung bestätigt und die Strecke der Bewegung vom Magenausgangabschnitt ab wurde gemessen. Diese wurde bezogen auf die Gesamtlänge vom Magenausgangabschnitt zum Rektum als 100% in Zahlenwerte umgewandelt und die Daten wurden verarbeitet und dazu hergenommen, die Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts auszudrücken.
Wie sich die Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts bei der Diabetesgruppe verglichen mit der Normalgruppe änderte und die Ergebnisse bei Verabfolgung von 100 mg/kg CDP-Cholin an die Diabetesgruppe werden in Tabelle 1 dargestellt. In Tabelle 1 wurden die Normalgruppe, Diabetesgruppe und Diabetesgruppe mit CDP-Cholin-Verabfolgung in drei Bewertungen von weniger als 40%, mindestens 40% und weniger als 60% Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts aufgeteilt und die Anzahl der Fälle bei jeder Bewertung wird als Prozentsatz dargestellt.
Wie aus dieser Tabelle offensichtlich ist, zeigte keine einzige Maus bei der Normalgruppe eine Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts von weniger als 40% und die Häufigkeit von Mäusen, die eine Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts von mindestens 40% und weniger als 60% zeigten, überschritt 90%. Im Gegensatz dazu zeigten die Mäuse bei der Diabetesgruppe eine hohe Häufigkeit von 54,5% der Mäuse, die eine Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts von weni ger als 40% zeigten, was eine deutlich verschlechterte Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts als bei der Normalgruppe anzeigte.
Die äußerst häufig bei der Diabetesgruppe gefundene funktionelle Verschlechterung der Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts wird durch Dysautonomie verursacht. Bei der Gruppe, der 100 mg/kg CDP-Cholin für eine derartige Störung gegeben wurde, zeigte nicht eine einzige Maus eine Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts von weniger als 40%, was auf diese Weise die vollständige Hemmung der Verschlechterung der Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts zeigte, die bei der Diabetesgruppe sehr häufig gefunden wurde.
Aus diesen Ergebnissen wurde verdeutlicht, daß die orale Verabreichung von CDP-Cholin eine Hemmung des Auftretens oder eine Besserung der für diabetische Dysautonomie spezifischen Symptome wie etwa eine Verschlechterung der Transportierbarkeit von Aktivkohlepulver des Magen-Darm-Trakts und dergleichen ermöglicht.
Tabelle 1
Beispiel 5: Wirkung verwandter Verbindungen auf diabetische periphere Neuropathie

Testverbindung 1: CDP-Cholin-Na Dosis 100 mg/kg (1,959 × 10^–4 Mol/kg)
Testverbindung 2: Triacetyluridin Dosis 100 mg/kg (2,7 × 10^–4 Mol/kg)
Testverbindung 3: Cytidin Dosis 100 mg/kg (4,111 × 10^–4 Mol/kg)
Testverbindung 4: Cytidin-5'-monophosphat-dinatriumsalz (5'-CMP-2Na) Dosis 100 mg/kg (2,723 × 10^–4 Mol/kg)
Testverbindung 5: Phosphorylcholinchlorid-calciumsalz (P-Cholin) Dosis: 100 mg/kg (3,88 × 10^–4 Mol/kg)
Testverbindung 6: Cytidin-5'-monophosphat-dinatriumsalz (5'-CMP-2Na) + Phosphorylcholinchlorid-calciumsalz (P-Cholin) Dosis: 72 mg/kg (1,959 × 10^–4 Mol/kg) als 5'-CMP-2Na und 50,5 mg/kg (1,959 × 10^–4 Mol/kg) als P-Cholin
Test: Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion unter Verwenden einer diabetischen Maus (in vivo) (siehe das Verfahren von Osawa und Kamei [Eur. J. Pharmacol., 372, 221–228 (1999)]).

(1) Vorbereitung der diabetischen Maus
In Citratpuffer (pH 4,5) gelöstes Streptozotocin (200 mg/kg) wurde in die Schwanzvene männlicher ICR-Mäuse (12–13 je Gruppe, Körpergewicht: etwa 20 g) unter Auslösen von Diabetes injiziert.
(2) Verabfolgung der Testverbindung
Die Testverbindungen wurden in destilliertem Wasser gelöst oder in 0,5%iger wäßriger Carboxymethylcelluloselösung suspendiert und einmal täglich beginnend mit dem Zeitpunkt, als 5 Wochen nach der Streptozotocinverabreichung vergangen waren, oral verabfolgt.
(3) Bestimmung (Schwellenanalyse) der thermischen nozizeptiven Reaktion
Die Bestimmung wurde mittels eines Tail-Flick-Tests ausgeführt. Als Ergebnis wurde die Reaktionslatenzzeit bei der Diabetesgruppe von dem Zeitpunkt ab, an dem 6 Wochen seit der Verabfolgung von vergangen waren, signifikant verlängert und es wurde ein verringertes Gefühl der Empfindungsnerven wie bei humanen Diabetespatienten beobachtet. Als die Verabreichung von CDP-Cholin (100 mg/kg) an die Diabetesgruppe 5 Wochen nach dem Streptozotocin begonnen wurde, wurde die Verlängerung der Reaktionslatenzzeit und zwar ein verringertes Gefühl der Empfindungsnerven nahezu vollständig gehemmt und die Reaktionsla tenzzeit lag auf demselben Wert wie bei der Normalgruppe. Bei einer anderen Gruppe mit Verabfolgung einer Testverbindung (einschließlich Triacetyluridin) wurde jedoch wie bei der Diabetesgruppe eine signifikante Verlängerung der Reaktionslatenzzeit gefunden und es wurde keine Hemmwirkung auf ein verringertes Gefühl der Empfindungsnerven, wie sie CDP-Cholin ermöglicht, beobachtet. Als typische Daten dazu werden die Daten nach Ablauf von 7 Wochen nach der Streptozotocinverabfolgung in 3 dargestellt. In der Figur zeigen die Meßwerte die mittlere ± SA der Reaktionslatenzzeit von 12–13 Mäusen, wobei * einen signifikanten Unterschied (P < 0,01) zu der Normalgruppe darstellt.
Es wurde auch bestätigt, daß Daten, die eine ähnliche Tendenz wie die Ergebnisse nach 7 Wochen zeigen, nach Ablauf von 6 oder 8 Wochen nach der Streptozotocinverabreichung erhalten werden.
Es wurde berichtet, daß die orale Verabreichung von CDP-Cholin zu nahezu demselben Wert der Bioverfügbarkeit wie bei intravenöser Verabreichung führt [Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol. 17, Suppl. B., 1–5, (1995)] und kombiniert mit den vorstehenden Ergebnissen, die keine Aktivität der verwandten Verbindungen zeigen, wird daraus gefolgert, daß das CDP-Cholin selbst das aktive Prinzip ist. Zubereitungsbeispiel 1 Tablette

CDP-Cholin 30,0 mg

feine gepulverte Cellulose 25,0 mg

Lactose 39,5 mg

Stärke 40,0 mg

Talk 5,0 mg

Magnesiumstearat 0,5 mg
Tabletten werden aus der vorstehenden Zusammensetzung durch ein herkömmliches Verfahren hergestellt. Zubereitungsbeispiel 2 Kapseln

CDP-Cholin 30,0 mg

Lactose 40,0 mg

Stärke 15,0 mg

Talk 5,0 mg
Kapseln werden aus der vorstehenden Zusammensetzung durch ein herkömmliches Verfahren hergestellt. Zubereitungsbeispiel 3 Injektion

CDP-Cholin 30,0 mg

Glucose 100,0 mg
Die vorstehende Zusammensetzung wird zum Herstellen einer Injektion in gereinigtem Wasser zur Injektion gelöst.
Industrielle Anwendbarkeit
Das Mittel oder die therapeutische Zusammensetzung zur Prophylaxe oder Behandlung diabetischer Neuropathie der vorliegenden Erfindung, die CDP-Cholin als aktiven Bestandteil enthält, hemmt das Auftreten für diabetische Neuropathie spezifischer Symptome wie etwa diabetische periphere Neuropathie und diabetische Dysautonomie und zeigt weiter eine starke bessernde Wirkung selbst nach deren Auftreten und ist in der Sicherheit überlegen. Es kann folglich zur Prophylaxe oder Behandlung von Neuropathie als therapeutischer Wirkstoff bei diabetischen Komplikationen verwendet werden. Da es weiterhin eine Wirkung bei oraler Verabreichung zeigt, ist es auch zum Verbessern der QOL (Lebensqualität) von Patienten geeignet.

Claims

Verwendung von Cytidin-5'-diphosphocholin oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels zur Prophylaxe oder Behandlung von diabetischer Neuropathie.
Verwendung des Anspruchs 1, wobei die diabetische Neuropathie eine hauptsächlich durch eine Kohlenhydratstoffwechselstörung verursachte Neuropathie ist.
Verwendung des Anspruchs 1, wobei die diabetische Neuropathie aus einer peripheren Neuropathie und Dysautonomie ausgewählt ist.
Verwendung eines der Ansprüche 1 bis 3, wobei sich das pharmazeutische Mittel zur Prophylaxe oder Behandlung in einer Dosierungsform zur oralen Verabreichung befindet.