DE4400310A1

DE4400310A1 - Neue Nukleosid-Lipid-Addukte, ihre Herstellung und ihre pharmazeutische Verwendung

Info

Publication number: DE4400310A1
Application number: DE19944400310
Authority: DE
Inventors: Hans Dr Brachwitz; Peter Prof Dr Langen; Iduna Dr Fichtner; Wolfgang E Prof Dr Berdel; Matthias Dr Baeseler; Uwe Dr Lachmann; Karin Dresler; Yvonne Thomas
Original assignee: Max Delbrueck Centrum fuer Molekulare in der Helmholtz Gemeinschaft
Current assignee: Max Delbrueck Centrum fuer Molekulare in der Helmholtz Gemeinschaft
Priority date: 1994-01-07
Filing date: 1994-01-07
Publication date: 1995-07-13
Also published as: EP0738274A1; WO1995018816A1

Description

Die Erfindung betrifft neue Nukleosid-Lipid-Addukte der allgemeinen Formel I einschließlich aller enantiomeren Formen sowie sämtlicher pharmazeutisch einsetzbaren Salze dieser Verbindungen. Gegenstand der Erfindung sind ferner Verfahren zur Herstellung der Verbindungen I und ihre pharmazeutische Verwendung. Anwendungsgebiet der Erfindung ist somit die chemische und die pharmazeutische Industrie.

Die natürlich vorkommenden Cytidinphosphat-diacylglycerole (CDP-DAG), die eine wichtige Zwischenstufe der zellulären Phosphatidylinositol-Synthese darstellen, weisen keine cytostatische Aktivität auf. Es ist aber bekannt, daß strukturmodifizierte CDP- DAG-Analoge das Wachstum von Tumorzellen hemmen, das Wachstum der homopoetischen Stammzellen jedoch wenig beeinflussen (Brachwitz et al., J. Cancer Res. (1990) 116 (Suppl. II), 993 Langen et al., Anticancer Res. 12 (1992) 2109).

Ziel der Erfindung war es nun, neue cytostatisch wirksame Nukleosid-Lipid-Addukte zu synthetisieren, die in Analogie zu den natürlich vorkommenden CDP-DAG in die Zelle eingeschleust werden und auf Grund ihrer Struktur eine hohe Biostabilität und damit längere Verweilzeit im Organismus besitzen und/oder durch Blockierung natürlicher Abbauwege bzw. Synthese metabolisch veränderter Spaltprodukte die Proliferation von Tumorzellen hemmen und die damit für eine pharmazeutische Verwendung in Frage kommen.

Die Zielstellung wird gemäß den Ansprüchen gelöst.

Gegenstand der Erfindung sind neue Nukleosid-Lipid-Addukte der allgemeinen Formel I

worin

a) R einen geradkettigen oder verzweigten, gesättigten oder einen ein- oder mehrfach ungesättigten, unsubstituierten oder ein- oder mehrfach durch Halogen, Hydroxy, Alkoxy oder Cyano substituierten Kohlenwasserstoffrest mit 1-22 C-Atomen bedeutet oder ist, worin
A gesättigtes oder ein- oder mehrfach ungesättigtes, unsubstituiertes oder ein- oder mehrfach durch Halogen, Hydroxy, Alkoxy oder Cyano substituiertes (C₅-C₃₀)- Alkoxy bzw. -Alkenoxy
bedeutet
B eine der für A gegebenen Bedeutungen hat oder Wasserstoff, Hydroxy, Halogen, Cyano, Acyloxy (C₂-C₂₂) oder eine Gruppe der allgemeinen Formel O-(CH₂)_x-CF₃, wobei x für 0-3 steht,
bedeutet.
c) Nk einen Nukleosid-, vorzugsweise Cytidin-, 2′-Desoxycytidin-, Thymidin-, Adenosin- und ara-Cytidin-Rest bedeutet,
d) n für 0 oder 1 und m für 1 oder 2 steht.

Bevorzugte Verbindungen sind:
Cytidin-5′-octylphosphonophosphat (Formel I: R = C₈H₁₇, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin- Rest),
Cytidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin- Rest),
Cytidin-5′-tetradecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₄H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest),
Cytidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest),
Cytidin-5′-octadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₈H₃₇, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest),
Cytidin-5′-(3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃-O- (CH₂)₃, n =0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest),
Cytidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃- O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest),
Cytidin-5′-hexadecylphosphonodiphosphat (Formel I, R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 2, Nk = Cytidin-Rest),
Cytidin-5′-hexadecyltriphosphat (Formel I, R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 2, Nk = Cytidin-Rest),
2′-Desoxycytidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = 2′-Desoxycytidin-Rest),
2′-Desoxycytidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = 2-Desoxycytidin-Rest),
2′-Desoxycytidin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = 2′- Desoxycytidin-Rest),
2′-Desoxycytidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = 2′- Desoxycytidin-Rest),
Thymidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I:R = C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest),
Thymidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest),
Thymidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I; R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂-, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest),
Thymidin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = Thymidin),
Thymidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n= 1, m= 1, Nk = Thymidin- Rest),
Thymidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1)diphosphat (Formel I ,: R = C₁₆H₃₃-O-CH₂- CHCl-CH₂, n = 1, m = 1, Nk = Thymidin-Rest),
Adenosin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Adenosin-Rest),
Adenosin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Adenosin-Rest),
Adenosin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 0, m = 1, Nk-Adenosin-Rest),
Adenosin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n= 1, m= 1, Nk = Adenosin- Rest),
Adenosin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = Adenosin- Rest),
Adenosin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1)diphosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 1, m = 1, Nk-Adenosin-Rest),
Ara-Cytidin-5-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = ara-Cytidin-Rest),
Ara-Cytidin-5′-octadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 0, m = 1, Nk = ara-Cytidin-Rest),
Ara-Cytidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 1, m = 1, Nk = ara- Cytidin-Rest),
Ara-Cytidin-5′-octadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 1, m = 1, Nk = ara- Cytidin-Rest).

Die Nukleosid-Lipid-Addukte der allgemeinen Formel I, in denen eine Diphosphat- (n = 1, m = 1) oder eine Phosphonophosphatgruppe (n = 0, m = 1) vorhanden ist, werden entweder durch Kondensation der Nukleosidmonophosphoamidate mit den entsprechenden Alkylphosphaten bzw. Alkylphosphonaten erhalten. Eine andere Variante des Verfahrens besteht in der Umsetzung einer aktivierten Lipidphosphat- bzw. -phosphonatkomponente, z. B. in Form eines Amidates, mit dem entsprechenden Nukleosidmonophosphat. Die Nukleosid-Lipid-Addukte der Formel I, die eine Triphosphat- (n = 1, m = 2) oder eine Phosphonodiphosphat-Gruppierung (n = 0, m = 2) aufweisen, lassen sich entsprechend durch Reaktion von Nukleosidmonophosphoamidaten mit Alkyldiphosphaten bzw. Alkylphosphonaten erhalten. Diese Verbindungen sind auch durch Kondensation der Nukleosiddiphosphoamidate mit den entsprechenden Alkylphosphaten bzw. Alkylphosphonaten synthetisierbar.

Weitere Synthesevarianten bestehen in der Umsetzung eines Nukleosiddiphosphates mit einem Alkylphosphoamidat bzw. Alkylphosphonoamidat und in der Umsetzung eines Nukleosidmonophosphates mit einem Alkyldiphosphoamidat bzw. Alkylphosphono phosphoamidat. Diese Reaktionen erfolgen im allgemeinen in einem polaren wasser freien Lösungsmittel, vorzugsweise Pyridin, bei 20-50°C.

Die Produkte werden isoliert und, wenn erforderlich, durch Chromatographie gereinigt.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I und deren Salze sind biologisch aktiv und besitzen eine ausgeprägte Antitumorwirksamkeit, welche u. a. an humanen immoralisierten Mammaepithelzellen H 184 A 1 und an menschlichen Mammatumor zellen (Matu) in vitro belegt wird. Die Selektivität der antiproliferativen Wirkung wird durch eine deutlich geringere Wachstumshemmung von Knochenmarkzellen in vitro durch die erfindungsgemäßen Verbindungen gezeigt.

In Tab. 1 ist die Hemmung des Zellwachstums von menschlichen Mammaepithelzellen H 184 1 und menschlichen Mammatumorzellen von ausgewählten Verbindungen der allgemeinen Formel I aufgeführt.

Tabelle 1

IC₅₀-Werte (50%ige Hemmung des Zellwachstums in µM) ausgewählter Substanzen der Formel I

Bei den erfindungsgemäßen Verbindungen lassen sich ferner Hinweise für eine selektive Antitumorwirkung in vitro finden, d. h. das Wachstum von Normalzellen wird im vergleichbaren Konzentrationsbereich weit weniger gehemmt als das von Tumorzellen, so daß eine verteilhafte Verwendung in der Humanmedizin zur Behandlung und Prophylaxe von Tumorerkrankungen möglich ist.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I und deren Salze können als Cytostatikum bevorzugt in 3-5%iger Mischung mit pharmazeutisch üblichen Träger- und Zusatz stoffen Verwendung finden.

Die Erfindung soll nachfolgend durch Ausführungsbeispiele näher erläutert werden.

Ausführungsbeispiele Beispiel 1 Cytidin-5′-octylphosphonophosphat (Formel I: R=C₈H₁₇, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin- Rest)

305 mg (1,57 mmol) Octylphosphonsäure wurden mit 1,5 g (2,1 mmol) Cytidin-5′-mono phosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) in 40 ml trockenem Pyridin bei 38°C 72 Stunden gerührt. Anschließend wurde der Ansatz im Vakuum bis zur Trockne einrotiert, dreimal mit trockenem Toluol kodestilliert und der Rückstand im Vakuum getrocknet, anschließend in CHCl₃/Methanol 1 : 1 aufgenommen und die Lösung durch tropfenweise Zugabe von 0,5 M HCl auf pH 3 eingestellt. Die Phasen wurden getrennt und die wäßrige Phase zweimal mit CHCl₃ extrahiert. Nachdem die vereinigten CHCl₃-Phasen noch einmal mit wenig Wasser gewaschen wurden, erfolgte die Trocknung über Na₂SO₄. Die Lösung wurde eingeengt, der Rückstand in ca. 15 ml CHCl₃ gelöst. Nach Zugabe von 30 ml Methanol/H₂O 2 : 1 wurde die Lösung mit methanolischem Ammoniak auf pH 9 eingestellt. Nach der Phasentrennung wurde die CHCl₃-Phase dreimal mit je 20 ml Methanol/H₂O 2 : 1 nachextrahiert. Die vereinigten wäßrigen Phasen wurden im Vakuum bis zur Trockne einrotiert und dreimal mit Toluol kodestilliert. Durch Zugabe von kaltem Aceton wurde das Rohprodukt auskristallisiert. Das entstandene Rohprodukt enthält geringe Mengen unumgesetztes Phosphonat.

Die weitere Reinigung erfolgte über eine CM-52-Cellulose-Säule (50 g). Sie wurde solange mit CHCl₃/CH₃OH 8 : 2 gewaschen, bis in den 150 ml-Fraktionen, die auf ca. 4 ml eingeengt wurden, im DC kein Phosphat nachweisbar war. Dann wurde der CH₃OH- Anteil auf 50% erhöht und die saubere Substanz eluiert. Das Eluat wurde bis zur Trockne eingeengt und mit Aceton auskristallisiert. Es wurden 513 mg saubere Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CHCl₃/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH = 50 : 30 : 8 : 4) R_f=0,37.

Beispiel 2 Cytidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin- Rest)

360 mg (1,45 mmol) Dodecylphosphonat wurden mit 1,32 g (1,9 mmol) Cytidin-5′- monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) in 30 ml trockenem Pyridin unter Rühren bei 35°C in 72 Stunden umgesetzt. Die Aufarbeitung des Ansatzes und die Reinigung des Rohproduktes erfolgte entsprechend Beispiel 1 über eine CM-52-Cellulose-Säule (25 g). Es wurden 90 mg reines Produkt in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CHCl₃/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,29.

Beispiel 3 Cytidin-5′-tetradecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₄H₂₅, n=0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest)

500 mg (1,8 mmol) Tetradecylphonat wurden mit 900 mg (1,3 mmol) Cytidin-5′-mono phosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) in 40 ml trockenem Pyridin bei 35°C unter Rühren in 5 Tagen umgesetzt. Die Aufarbeitung des Ansatzes und die Reinigung der Rohsubstanz erfolgte über eine CM-52-Cellulose-Säule (25 g) wie im Beispiel 1 beschrieben. Es wurden 273 mg saubere Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CHCl₃/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f=0,3.

Beispiel 4 Cytidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest)

326 mg (1,06 mmol) Hexadecylphosphonat wurden mit 700 mg (1,01 mmol) Cytidin-5′- monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) in 30 ml trockenem Pyridin bei 30°C unter Rühren in 70 Stunden umgesetzt. Die Aufarbeitung des Ansatzes und die Reinigung des Rohproduktes erfolgte über eine CM-52-Cellulose- Säule (25 g) wie im Beispiel 1 beschrieben. Es wurden 185 mg saubere Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CHCl₃/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,3.

Beispiel 5 Cytidin-5′-octadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₈H₃₇, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest)

500 mg (1,5 mmol) Octadecylphosphonat wurden mit 1,2 g (1,72 mmol) Cytidin-5′- monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) in 40 ml trockenem Pyridin bei 38°C unter Rühren in 4 Tagen umgesetzt. Die Aufarbeitung des Ansatzes und die Reinigung über eine CM-52-Cellulose-Säule (25 g) erfolgte entsprechend Beispiel 1. Es wurden 200 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CHCl₃/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH = 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,37.

Beispiel 6 Cytidin-5′-(3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃-O- (CH₂)₃, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 1 wurden 799,2 mg (1,15 mmol) Cytidin-5′-monophospho morpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) mit 364 mg (1 mmol) 3-Hexadecyloxy-propylphosphonsäure bei 35°C umgesetzt. Der Ansatz wurde wie in Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet. Es wurden 187,5 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalz (Dihydrat) erhalten.
DC (Kieselgel 60 , Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH = 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,45.

Beispiel 7 Cytidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃- O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 1 werden 793,2 mg (1,15 mmol) Cytidin-5-monophospho morpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz) mit 400 mg (1 mmol) 2-Chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphonsäure bei 35°C umgesetzt. Der Ansatz wurde wie in Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet. Es wurden 266 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzen (Dihydrat) erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f = 0,31.

Beispiel 8 Cytidin-5′-hexadecylphosphonodiphosphat (Formel I, R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 2, Nk = Cytidin-Rest)

909,2 mg (1,15 mmol) Cytidin-5′-diphosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclo hexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) wurden dreimal mit je 30 ml trockenem Toluol an einem Rotationsverdampfer zur Trockne gebracht und anschließend mit 25 ml trockenem DMSO aufgenommen. Nach Zugabe von 306 mg (1 mmol) Hexadecyl phosphonsäure wurde der Ansatz bei 25°C unter Feuchtigkeitsausschluß 60 Stunden gerührt. Der Umsatz wurde dünnschichtchromatographisch verfolgt (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/Wasser/konz. NH₃ 60 : 20 : 10).

Zur Isolierung des Produktgemisches aus der DMSO-Lösung wurde die fünffache molare Menge Nal in Aceton gelöst (25 ml) und diese Lösung unter Rühren zur DMSO- Reaktionslösung gegeben. Der erhaltene Niederschlag wurde in 20%igem Methanol gelöst, auf eine mit RP 18-Material gefüllte Säule gebracht und mit dem gleichen Lösungsmittel zur Entfernung von Nebenprodukten eluiert. Die Desorption des Cytidin hexadecylphosphonophosphates erfolgte durch stufenweises Erhöhen des Methanol gehaltes des Laufmittels. Es wurden 50 mg reine Substanz in Form des Trinatriumsalzes (Dihydrat) erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/Wasser/konz. NH₃ 60 : 20 : 10) R_f =0,4.

Beispiel 9 Cytidin-5′-hexadecyltriphosphat (Formel I, R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 2, Nk = Cytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 8 aus Cytidin-5′-diphosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′- dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) und Hexadecylphosphorsäure bei 35- 50°C. Die Substanz fällt als Dinatriumsalz (Dihydrat) an.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 60 : 10 : 20) R_f =0,4.

Beispiel 10 2′-Desoxycytidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = 2′-Desoxycytidin-Rest)

Eine Mischung von 250 mg (1 mmol) Dodecylphosphonat und 770,3 mg (1,15 mmol) 2′-Desoxycytidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexyl carboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) wurde zweimal mit absolutem Toluol im Vakuum einrotiert, der über P₂O₅ getrocknete Rückstand wurde in 40-50 ml absol. Pyridin gelöst und die Lösung 70 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Aufarbeitung erfolgte wie in Beispiel 1 beschrieben. Zur chromatographischen Reinigung der Substanz wurde eine CM-52-Cellulose-Säule benutzt. Es wurden 131 mg Produkt in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60 , Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 60 : 10 : 20) R_f =0,53.

Beispiel 11 2′-Desoxycytidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = 2-Desoxycytidin-Rest)

306,4 mg (1 mmol) Hexadecylphosphonat wurden, wie vorstehend beschrieben, mit 770,3 mg (1,15 mmol) 2′-Desoxycytidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin- N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Der Ansatz wurde entsprechend Beispiel 1 aufgearbeitet. Es wurden 140 mg Produkt in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f=0,54.

Beispiel 12 2′-Desoxycytidin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = 2′- Desoxycytidin-Rest)

287,6 mg (1,08 mmol Dodecylphosphat wurden mit 832,7 mg (1,24 mmol) 2′-Desoxy cytidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) entsprechend Beispiel 1 umgesetzt. Der Ansatz wurde wie dort beschrieben aufgearbeitet. Es wurden 207 mg in Form des Dinatriumsalzes (Dihydrat) erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,53.

Beispiel 13 2′-Desoxycytidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = 2′- Desoxycytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 10 wurden 322,4 mg (1,0 mmol) Hexadecylphosphat mit 770,3 mg (1,15 mmol) 2′-Desoxycytidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′- dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Die Aufarbeitung und Reinigung erfolgte nach Beispiel 1. Es wurden 210 mg reines Produkt in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60 Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20), R_f= 0,54.

Beispiel 14 Thymidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest)

225,7 mg (0,90 mmol) Dodecylphosphonat und 710,1 mg (1,04 mmol) Thymidin-5′- monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) wurden entsprechend Beispiel 1 umgesetzt. Die Reinigung des Roh produktes erfolgte über eine präparative DC-Platte (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, F254). 80 mg der Substanz wurden in 1-2 ml CHCl₃/CH₃OH 1 : 1 auf die Startlinie aufgetragen. Nach zweimaliger Entwicklung in CHCl₃/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4 wurde die UV-sichtbare Bande mit ca. 30 ml CHCl₃/CH₃OH 2 : 1 extrahiert. Der nach Eingedampfen erhaltene Rückstand wurde durch Behandlung mit Aceton kristallisiert. Es wurden 18 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes von einer DC-Platte erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, (n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,54.

Beispiel 15 Thymidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest)

Entsprechend der Vorschrift Beispiel 1 wurden 200 mg (0,65 mmol) Hexadecyl phosphonat mit 514 mg (0,75 mmol) Thymidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4- Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1 ,5 Mol Wasser) umgesetzt. Die Reinigung der Substanz erfolgte wie in Beispiel 14 beschrieben. Bei 60 mg aufgetragener Substanz wurden 14 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60 Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20), R_f =0,55.

Beispiel 16 Thymidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂-, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 1 wurden 200 mg (0,5 mmol) 2-Chlor-3-Hexadecyloxypropyl-1- phosphonsäure mit 409 mg (0,48 mmol) Thymidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4- Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1 ,5 Mol Wasser) umgesetzt. Die Isolierung und Reinigung der Substanz erfolgte wie in Beispiel 1 angegeben. Es konnten 56 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes (Dihydrat) erhalten werden.
DC (Kieselgel 60 Merck-Fertigplatten, Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,56.

Beispiel 17 Thymidin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = Thymidin)

234 mg (0,88 mmol) Dodecylphosphat wurden mit 692 mg (1,01 mmol) Thymidin-5′- monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Der Ansatz wurde entsprechend Beispiel 1 aufgearbeitet. Die Isolierung und Reinigung der Substanz erfolgte wie in Beispiel 14 beschrieben. Bei 70 mg aufgetragener Substanz konnten 22 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes (Monohydrat) erhalten werden.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,54.

Beispiel 18 Thymidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = Thymidin- Rest)

244 mg (0,508 mmol) Hexadecylphosphat wurden mit 400 mg (0,58 mmol) Thymidin- 5-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) in ca. 35 ml abs. Pyridin nach Vorschrift Beispiel 1 umgesetzt. Die Isolierung und Reinigung der Substanz erfolgte mittels präparativer DC entsprechend Beispiel 14. Bei 70 mg aufgetragener Substanz konnten 18 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes (Dihydrat) erhalten werden.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,55.

Beispiel 19 Thymidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1)diphosphat (Formel I,: R = C₁₆H₃₃-O-CH₂ CHCl-CH₂, n = 1, m = 1, NK = Thymidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 1 wurden 288,4 mg (0,7 mmol) 2-Chlor-3-hexadecyloxypropyl-1- phosphat mit 548 mg (0,8 mmol) Thymidin-5′-monophosphomorpholidat (als 4- Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt und aufgearbeitet. Die entstandene Substanz wird, wie in Beispiel 1 beschrieben, gereinigt. Es konnten 123 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes (Dihydrat) erhalten werden.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f = 0,56.

Beispiel 20 Adenosin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Adenosin-Rest)

Eine Mischung von 250 mg (1 mmol) Dodecylphosphonat und 816,3 mg (1,15 mmol) Adenosin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidin salz mit 1,5 Mol Wasser) wurde zweimal mit abs. Toluol einrotiert. Das erhaltene Gemisch wurde im Vakuum über P₂O₅ getrocknet, in 40-50 ml absol. Pyridin gelöst und bei Raumtemperatur gerührt. Die Umsetzung wurde mittels DC (CHCl₃/CH₃OH/H₂O/ CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) verfolgt. Nach 70 h wurde das Pyridin abdestilliert und das Produkt in 15 ml Wasser, 30 ml CH₃OH und 25 ml CHCl₃ aufgenommen und mit 1N Ameisensäure auf pH 4 eingestellt. Die obere Phase wurde nach dem Abtrennen zweimal mit Chloroform extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet, mit methanolischem NH₃ bis auf pH 9 gebracht und bis zur Trockne eingeengt. Es wurden 178 mg erhalten.

Die erhaltene Substanz wurde mittels HPLC über eine RP1 8-Säule gereinigt, sie fällt als freie Säure mit 2,5 mol Wasser an.
DC (Kieselgel 60 Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,52.

Beispiel 21 Adenosin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Adenosin-Rest)

Entsprechend Beispiel 20 wurden 300 mg (0,98 mmol) Hexadecylphosphonat mit 798,7 mg (1,13 mmol) Adenosin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclo hexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Es wurden 340 mg Rohprodukt erhalten. Die Isolierung und Reinigung der Substanz erfolgte wie unter Beispiel 20 beschrieben.
DC (Kieselgel 60 Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f=0,51.

Beispiel 22 Adenosin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 0, m = 1, Nk-Adenosin-Rest)

Entsprechend Beispiel 1 wurden 200 mg (0,5 mmol) 2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1- phosphonsäure 409,2 mg (0,58 mmol) Adenosin-5′-monophosphomorpholidat (als 4- Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Die Aufarbeitung des Ansatzes und die Reinigung des Endproduktes erfolgte wie unter Beispiel 1 angegeben. Es wurden 94 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60 Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,38.

Beispiel 23 Adenosin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = Adenosin-Rest)

Entsprechend dem Beispiel 20 wurden 300 mg (1,13 mol) Dodecylphosphat mit 919,57 mg (1,3 mmol) Adenosin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′- dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Es wurden 290 mg Rohprodukt erhalten. Die Aufarbeitung des Reaktionsgemisches und die Reinigung der Substanz erfolgte wie in Beispiel 20 angegeben.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f =0,52.

Beispiel 24 Adenosin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = Adenosin- Rest)

Beispiel 20 entsprechend wurden 300 mg (0,92 mmol) Hexadecylphosphat mit 750 mg (1,07 mmol) Adenosin-5′-monophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexyl carboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Es wurden 160 mg Rohprodukt erhalten. Die Aufarbeitung des Reaktionsgemisches und die Reinigung der Substanz erfolgte wie unter Beispiel 20 angegeben.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, n-Propanol/konz. NH₃/Wasser 66 : 10 : 20) R_f=0,51.

Beispiel 25 Adenosin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1)diphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 1, m = 1, Nk-Adenosin-Rest)

Entsprechend Beispiel 1 wurden 223 mg (0,54 mmol) 2-Chlor-3-hexadecyloxypropyl-1- phosphat mit 438,8 mg (0,62 mmol) Adenosin-5′-monophosphomorpholidat (als 4- Morpholin-N,N′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) umgesetzt. Die Aufarbeitung des Ansatzes und die Reinigung des Endproduktes erfolgte über eine CM- 52-Cellulose-Säule wie in Beispiel 1 dargestellt. Es wurden 123 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,38.

Beispiel 26 Ara-Cytidin-5-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = ara-Cytidin-Rest)

Eine Mischung von 310 mg (0,97 mmol) Hexadecylphosphonat und 758 mg 1.09 mmol) ara-Cytidinmonophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N ′-dicyclohexylcarboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) wurde mehrmals mit trockenem Toluol einrotiert, über P₂O₅ im Exsikkator nachgetrocknet, in 40 ml absolutem Pyridin gelöst und 16 Tage bei Raum temperatur gerührt. Nach beendeter Reaktion wurde der Ansatz im Vakuum einrotiert und zweimal mit Toluol nachdestilliert. Der erhaltene Rückstand wurde in 60 ml CHCl₃/ CH₃OH/H₂O 2 : 3 : 1 gelöst und nach Zugabe von 6 ml Ameisensäure 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Danach wurde die wäßrige Phase zweimal mit CHCl₃ ausgeschüttelt. Die vereinigten CHCl₃-Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne einrotiert. Das erhaltene Rohprodukt wurde säulenchromatographisch an 25 g CM-52-Cellulose gereinigt. Die Elution erfolgte zur Entfernung von Neben produkten zunächst mit CHCl₃, CHCl₃/Methanol-Gemischen 9 : 1, 8 : 2. Dann wurde der Methanol-Anteil stufenweise bis zu einem Verhältnis von 1 : 1 gesteigert. Die aus diesen Fraktionen erhaltene reine Substanz wird durch Behandlung mit Aceton kristallisiert. Es wurden 130 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f = 0,46.

Beispiel 27 Ara-Cytidin-5′-octadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 0, m = 1, Nk = ara-Cytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 26 wurden 300 mg (0,95 mmol) Octadecylphosphonat und 750 mg (1,05 mmol) ara-Cytidinmonophosphomorpholidat (als 4-Morpholin-N,N′-dicyclohexyl carboxamidinsalz mit 1,5 Mol Wasser) bei 35°C umgesetzt. Die Aufarbeitung des Reaktionsgemisches sowie die Isolierung des Produktes erfolgte wie in Beispiel 26 dargestellt über eine CM-52-Säule. Es wurden 130 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f = 0,45.

Beispiel 28 Ara-Cytidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 1, m = 1, Nk = ara- Cytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 26 wurden 310 mg (0,97 mmol) Hexadecylphosphat mit 758 mg (1,1 mmol) ara-Cytidinmonophosphomorpholidat bei Raumtemperatur umgesetzt. Die Aufarbeitung des Reaktionsgemisches sowie die Isolierung des Produktes erfolgte wie in Beispiel 26 dargestellt über eine CM-52-Säule. Es wurden 100 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f = 0,46.

Beispiel 29 Ara-Cytidin-5′-octadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 1, m = 1, Nk = ara- Cytidin-Rest)

Entsprechend Beispiel 26 aus 278 mg (0,97 mmol) Octadecylphosphat und 750 mg (1,05 mmol) ara-Cytidinmonophosphomorpholidat bei Raumtemperatur umgesetzt. Die Aufarbeitung des Reaktionsgemisches sowie die Isolierung des Produktes erfolgte wie in Beispiel 26 dargestellt über eine CM-52-Säule. Es wurden 178 mg reine Substanz in Form des Dinatriumsalzes erhalten.
DC (Kieselgel 60, Merck-Fertigplatten, CH₃Cl/CH₃OH/H₂O/CH₃COOH 50 : 30 : 8 : 4) R_f =0,46.

Claims

1. Neue Nukleosid-Lipid-Addukte der allgemeinen Formel I einschließlich aller enantiomeren Formen sowie sämtlicher pharmazeutisch einsetzbarer Salze dieser Verbindungen, worin

a) R einen geradkettigen oder verzweigten, gesättigten oder einen ein- oder mehrfach ungesättigten, unsubstituierten oder ein- oder mehrfach durch Halogen, Hydroxy, Alkoxy oder Cyano substituierten Kohlenwasserstoffrest mit 1-22 C-Atomen bedeutet, oder ist, worin
A gesättigtes oder ein- oder mehrfach ungesättigtes, unsubstituiertes oder ein- oder mehrfach durch Halogen, Hydroxy, Alkoxy oder Cyano substituiertes (C₅-C₃₀)- Alkoxy bzw. -Alkenoxy
bedeutet,
B eine der für A gegebenen Bedeutungen hat oder Wasserstoff, Hydroxy, Halogen, Cyano, Acyloxy (C₂-C₂₂) oder eine Gruppe der allgemeinen FormelO-(CH₂)_xCF₃wobei x für 0-3 steht, bedeutet,
c) Nk einen Nukleosid-, vorzugsweise Cytidin-, 2′-Desoxycytidin-, Thymidin-, Adenosin- und ara-Cytidin-Rest bedeutet,
d) n für 0 oder 1 und m für 1 oder 2 steht.

2. Cytidin-5′-alkylphosphonophosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 0, m = 1 ist und Nk einen Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

3. Cytidin-5′-alkylphosphonodiphosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 0, m = 2 ist und Nk einen Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

4. Cytidin-5′-alkyltriphosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 1, m = 2 ist und Nk einen Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze

5. 2′-Desoxycytidin-5′-alkylphosphonophosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 0, m = 1 ist und Nk einen 2′-Desoxycytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

6. 2′-Desoxycytidin-5′-alkyldiphosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 1, m = 1 und Nk einen 2′-Desoxycytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

7. Thymidin-5′-alkylphosphonophosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 0, m = 1 ist und Nk einen Thymidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

8. Thymidin-5′-alkyldiphosphate der Formel I, in der R die genannten Bedeutungen besitzt, n = 1, m = 1 ist und Nk einen Thymidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

9. Adenosin-5′-alkylphosphonophosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 0, m = 1 ist und Nk einen Adenosin-Rest bedeutet, und deren Salze.

10. Adenosin-5′-alkyldiphosphate der Formel I, in der R die genannten Bedeutungen besitzt, n = 1, m = 1 ist und Nk einen Adenosin-Rest bedeutet, und deren Salze.

11. Ara-Cytidin-5′-alkylphosphonophosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, b = 0, m = 1 ist und Nk einen ara-Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

12. Ara-Cytidin-5′-alkyldiphosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 1, m = 1 ist und Nk einen ara-Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

13. Ara-Cytidin-5′-alkylphosphonodiphosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 0, m = 2 ist und Nk einen ara-Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

14. Ara-Cytidin-5′-alkyltriphosphate der Formel I, in der R die bereits genannten Bedeutungen besitzt, n = 1, m = 2 ist und Nk einen ara-Cytidin-Rest bedeutet, und deren Salze.

15. Cytidin-5′-octylphosphonophosphat (Formel I: R=C₈H₁₇, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin- Rest).

16. Cytidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest).

17. Cytidin-5′-tetradecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₄H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest).

18. Cytidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest).

19. Cytidin-5′-octadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest).

20. Cytidin-5′-(3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁ ₆H₃₃-O- (CH₂)₃, n = 0, m = 1, Nk=Cytidin-Rest).

21. Cytidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 0, m = 1, Nk = Cytidin-Rest).

22. Cytidin-5′-hexadecylphosphonodiphosphat (Formel I, R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 2, Nk = Cytidin-Rest).

23. Cytidin-5′-hexadecyltriphosphat (Formel I, R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 2, Nk = Cytidin- Rest).

24. 2′-Desoxycytidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = 2′-Desoxycytidin-Rest).

25. 2′-Desoxycytidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = 2-Desoxycytidin-Rest).

26. 2′-Desoxycytidin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = 2′- Desoxycytidin-Rest).

27. 2′-Desoxycytidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = 2′-Desoxycytidin-Rest).

28. Thymidin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest).

29. Thymidin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest).

30. Thymidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I, R = C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂-, n = 0, m = 1, Nk = Thymidin-Rest).

31. Thymidin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk=Thymidin).

32. Thymidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = Thymidin-Rest).

33. Thymidin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1)diphosphat (Formel I,: R = C₁₆H₃₃-O- CH₂-CHCl-CH₂, n = 1, m = 1, NK = Thymidin-Rest).

34. Adenosin-5′-dodecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₂H₂₅, n = 0, m = 1, Nk = Adenosin-Rest).

35. Adenosin-5′-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = Adenosin-Rest).

36. Adenosin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1-phosphono)phosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃-O-CH₂-CHCl-CH₂, n = 0, m = 1, Nk-Adenosin-Rest).

37. Adenosin-5′-dodecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₂H₂₅, n = 1, m = 1, Nk = Adenosin- Rest).

38. Adenosin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 1, m = 1, Nk = Adenosin-Rest).

39. Adenosin-5′-(2-chlor-3-hexadecyloxypropyl-1)diphosphat (Formel I: R = C₁₆H₃₃-O- CH₂-CHCl-CH₂, n = 1, m = 1, Nk-Adenosin-Rest).

40. Ara-Cytidin-5-hexadecylphosphonophosphat (Formel I: R=C₁₆H₃₃, n = 0, m = 1, Nk = ara-Cytidin-Rest).

41. Ara-Cytidin-5′-octadecylphosphonophosphat (Formel I: R = C₁₈H₃₇, n = 0, m = 1, Nk = ara-Cytidin-Rest).

42. Ara-Cytidin-5′-hexadecyldiphosphat (Formel I: R=C₁₈H₃₇, n = 1, m = 1, Nk= ara- Cytidin-Rest).

43. Ara-Cytidin-5′-octadecyldiphosphat (Formel I: R = C₁₈H₃₇, n = 1, m = 1, Nk = ara- Cytidin-Rest).

44. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der allgemeinen Formel II, in der R und n die für die Verbindung I genannte Bedeutung hat, mit einem Nukleosid-5′- phosphoamidat, vorzugsweise Nukleosid-5′-monophosphomorpholidat kondensiert wird oder ein sich von dem Phosphat bzw. Phosphonat II ableitendes Amidat mit einem Nukleosid-5′-monophosphat kondensiert wird.

45. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel I, in der m = 2 ist und R, n und Nk die bereits genannten Bedeutungen besitzen, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel II, in der R und n die für Formel I genannten Bedeutungen besitzt, mit einem Nuleosid-5′-diphosphoamidat umsetzt
oder ein sich von dem Phosphat bzw. Phosphonat der allgemeinen Formel II sich ableitendes Amidat mit einem Nukleosid-5′-diphosphat umsetzt
oder eine Verbindung der allgemeinen Formel III, in der R und n die bereits genannten Bedeutungen besitzen, mit einem Nukleosid-5′-monophospoamidat umsetzt oder ein sich von dem Diphosphat bzw. Phophonophosphat der allgemeinen Formel III sich ableitendes Amidat mit einem Nukleosid-5′- monophosphat umsetzt.

46. Cytostatikum, das als Wirkstoff eine oder mehrere Verbindungen der allgemeinen Formel I enthält.

47. Cytostatikum, das 3-5% Wirkstoff der Formel I neben den pharmazeutisch üblichen Träger- und Zusatzstoffen enthält.