KR880000093B1

KR880000093B1 - 뉴클레오시드 유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR880000093B1
Application number: KR1019850006039A
Authority: KR
Inventors: 김돈기; 이기홍; 김지한
Original assignee: 보령제약 주식회사; 김승호
Priority date: 1984-12-07
Filing date: 1985-08-22
Publication date: 1988-02-23
Also published as: GB2168350B; DE3543346C2; FR2574411A1; GB8530115D0; KR860005574A; ES8802363A1; DE3543346A1; ES8706163A1; ES549587A0; ES557428A0; GB2168350A; FR2574411B1

Abstract

내용 없음.

Description

뉴클레오시드 유도체의 제조방법

본 발명은 항 바이러스 및 항암제로 유효한 다음의 일반식 (I)의 새로운 뉴클레오시드 유도체 및 이들 염의 제조방법에 관한 것이다.

상기 식에서,

B는 아데닌, 시토신, 5-플루오로우라실, 5-아자시토신, 6-머캅토푸린, 7-데아자아데닌이고,

A및 C는 H 또는 OH이고, W는 탄소수가 8내지 20개인 포화 또는 불포화 알킬기 및, 2 또는 3-알콕시 알킬기이고, W¹는 탄소수가 7내지 19개인 포화 또는 불포화 알킬기이다.

상기 일반식(I)중 인지질 부분은 L, D 그리고 DL형의 광학적 이성체이다. 뉴클레오시드는 9-β-D-아라비노푸라노실 아데닌(이하 ara-A라 칭한다), 1-β-D- 아라비노푸라노실시토신(이하 ara-C라 칭한다),5-플루오르-2'-데옥시우리딘 및 그의 항암 및 항 바이러스제로서 사용되는 뉴클레오시드이다.

본 발명은 일반식(I)의 새로운 1-0-알킬인지질과 뉴클레오시드와의 복합체(conjugate)를 얻는 방법에 관한것이다.

상기 일반식(I)화합물은 새로운 것이며, 본 발명자에 의해 최초로 합성한 화합물이다. 본 발명자와 공동 연구자에 의해 [Journal of Medical Chemistry 25, 1322(1982), Biochemical and Biophysical Research Communication 85, 715(1978)], 또 다른 연구자에 의해[Biochimica et Biopysiea Acta 69, 604(1980)]유사화합물 1,2-디아실글리세롤과 뉴클레오시드 복합체가 발표되었다. 그 제조방법은 뉴클레오시드-5'-모노포스포모르폴리데이트를 1,2-디아실 글리세로-3-포스페이트와 반응시키는 것이다. 그러나 본 발명의 인지질 부분은 1-0-알킬-2-0-아실글리세로-3-포스페이트이며, 지금까지 발표된 문헌에는 이것과 뉴클레오시드와의 복합체는 발표된 바 없으며, 본 발명자에 의해 최초로 제조된 새로운 화합물이다.

본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명의 목적은 특유하고 유익한 물리화학적 성질을 갖고 있는 항암 및 항 바이러스제를 제조하는데 있다. 즉 신규의 인지질 복합체를 항암 및 항바이러스제로 제조하는 것이다. 또한 본 발명의 목적은 이 복합체가 항암 및 항 바이러스제를 암세포나 바이러스에 감염된 세포에 운반하여 주는데 있고, 또한 인지질 복합체는 리포솜(liposome)을 형성하여 암세포의 세포막을 통과하기 용이하도록 할 수 있으며 일단 세포내에 들어가면 효소에 의해 항암 혹은 항 바이러스 뉴클레오시드 또는 뉴클레오티드가 복합체로 부터 분리되어 만일 그 세포가 인지질에 특정한 결합부위(binding site)가 있다면 표적 특이성 화합물이 될 수 있다. 더구나 인산화반응(phosphorylation)이 효력에 요구되는 뉴클레오시드는 이미 뉴클레오티드가 복합체에서 분리되어 나오므로 뉴클레오시드 키나제가 결핍된 내성 세포에 특히 효과가 있을 수 있다. 뿐만 아니라 1-0-알킬인지질 자체도 약리작용 특히 항암 또는 면역조절 작용을 지니고 있으므로 뉴클레오시드와 후자의 효력을 합치면 상가내지 상승 효과를 기대할 수 있는 장점이 있다. 그 이유를 다시설명하면 1-0-알킬인지질중 1-0-알킬-2-리소인지질과 그 합성 유도체인 1-0-알킬-2-0-메틸포스파티딜-콜린 또는 에탄올아민은 여러 동물에서의 암의 성장이나 전이를 억제하거나 예방하는 효과가 있고 또 면역조절 작용을 지니고 있는 것으로 발표되었다. [참조 : Anticancer Research 1, 135 ＆345, 1981 : Seminar in Immuno pathology Vol 3, 187-203, (1979)].

또한 복합체 형태로 남아있을 동안은 ara-C혹은 ara-A의 NH₂기가 시티딘 데아미나제 또는 아데노신 데아미나제에 의한 탈 아미노화가 방지되고 복합체 자체가 유지성이므로 일종의 지속성 방출 프로드럭(prodrug)의 역할을 하면서 표적 세포에 도달하고 세포내에서 인지질과 뉴클레오티드로 가수분해되어 두 약물을 혼합하여 투여한 결과와 같게 되므로 두 약물이 지니고 있는 약리작용을 기대할 수 있고, 따라서 항암제의 치료 효과를 상승시킬 수 있는 것이다.

일반식(I)화합물의 제조 방법은 다음 반응도식에 표시한 바와 같이, 뉴클레오티드(III)를 모프폴리데이트(VI)또는 p¹-뉴클레오시드-5'-p²-디페닐 피로포스페이트(VII)로 만들어 1-0-알킬-2-0-아실글리세로-3-포스페이트(VIII)와 반응시켜 복합체(Ia) 내지(Id)(공정도식중의 방법 ㄱ또는 방법ㄴ)를 제조하거나 도는 인지질(VIII)을 그의 모르폴리데이트(IX) 또는 p¹-글리세롤-5'-p²-디페닐피로포스페이트(X)로 만들어 뉴클레오티드(III)와 반응시켜 복합체(Ic)내지 (Id)(공정도식중의 방법 ㄷ과 방법ㄹ)를 제조하는 것이다.

본 발명의 화합물 및 이들의 염은 약학적으로 받아들일 수 있는 유기 또는 무기담체와함께 약학적 제제 형태로 사용될 수 있다. 제제의 방법은 통상의 약학적 형태 즉, 현탁제, 유화제, 주사제, 분말제, 과립제, 캡슐제, 정제 및 환제로 될 수 있다.

또한 통상의 부형제, 보존제, 안정제, 분산제, 습윤제 또는 유화제와 같은 보조제, 충전제, 완충제, 착색제 등을 포함할 수 있다.

이하 실시예에서 본 발명에 대해 보다 상세히 설명한다.

[실시예 1]

1-β-D-아라비노푸라노실시토신-5'-디포스페이트-1-0-옥타데실-2-0-팔미토일-Sn-글리세롤 또는 1-β-D-아라비노푸라노실시토신-5'-디포스페이트-β-팔미토일-L-바틸알콜(Ia, ara-CDP-L-PBA)(반응도식중의 방법ㄱ) 1-0-옥타데실-2-0-팔미토일-Sn-글리세로-3-포스페이트(VIII, n=17, m=14, L-이성체)1.7g(2.6밀리몰)을 피리딘과 공비증발시켜 건조한 다음 건조한 ara-CMP 모르폴리데이트 4-모르폴리노-N, N'-디시클로헥실카복스아미디늄염(VI,B=시토신) 1.8g(2.6밀리몰)과 함께 무수 피리딘 150ml에 용해시킨 후 5일간 무수 조건하에 실온에서 교반하여 반응시킨다. 피리딘을 감압 농축 제거한 후 미량의 피리딘을 톨루엔과 공비 증발시케 제거한다. 잔사를 빙초산 15ml와 클로로포름-CH₃OH-물(2 : 3 : 1)(용매 CMW) 150ml에 용해시킨후, 실온에서 1시간 교반후 클로로포름 250ml를 가한다. 유기용매층을 분리하여 감압 증류 농축시키고 미량의 빙초산을 제거하기 위하여 톨루엔 10ml와 3회 공비 증발시킨다. 잔사를 용매 CMW) 100ml에 용해시킨후 DE-52(아세테이트)셀룰로스 컬럼(2.5 x 50cm, jacked, 5℃)에 흡착시키고, 이어서 0-0.15M NH₄OAC 선형구배를 함유한 용매 CMW (각각 1500ml씩)로 용리시켜 분액하여, 900내지 1500ml 분액을 모아 30℃이하에서 백색결정이 형성될때까지 감압농축시킨다. 백색결정분말(목적물의 NH₄염)을 여과하고 물로 씻은 후 Na염으로 전환하기위해 CMW에 용해시킨후, 암버라이트 CG-50(Na⁺)컬럼 (2.5 x 15cm)을 통과시키고 용리액을 모아 감압증류후, 그 잔사를 클로로포름과 아세톤으로 결정시켜 백색 목적물 820mg(31.2％)을 얻는다.

1) 융점 : 199내지 202℃

2) [α].²⁵=+33.5°(C=0.23, 클로로포름-메탄올-물, 2 : 3 : 1)

3) NMR (90 MHz) : 용매(CDCl₃-CD₃OD-D₂O, 2 : 3 : 1)

: δppm 0.95(6, t, 2CH₃), 1.14-1.87(58, m, 29 CH₂), 2.29(2, t, CH₂-C=O), 3.27-4.42(11, m, H2', H3', H4', H5', CH₂-OCH₂및 CH₂-O), 5.15(1, m, 글리세롤 CH), 5.94(1, d, j=7Hz, 시토신 H5), 6.18(1, d, J=5Hz, Hl'), 7.80(1, d,J=7Hz, 시토신 H6).

4) 원소분석 : C₄₆H₈₇N₃O₁₄P₂1.5(CH₃)₂CO H₂O

이론치 : C 56.51 H 9.20 N 3.92 P 5.77

실험치 : C 56.81 H 9.27 N 3.69 P 5.87

[실시예 2]

1-β-D-아라비노푸라노실시토신-5'-디포스페이트-rac-1-0-옥타데실-2-0-팔미토일글리세롤(Ib, ara-CDP-DL-PBA)(1)방법 A(반응도식 중의 방법ㄱ)

이물질은 rac-1-0-옥타데실-2-0-파리토일글리세로-3-포스페이트(VIII, n=17m=14,DL-혼합물)와 ara-CMP-모르폴리데이트(VI, B=시토신)를 위와 같은 방법으로 반응시킨후 분리하여 35％수득률로 얻는다. 크로마토 그래피이동도와 NMR데이타는 상기 실시예와 같다.

(2)방법 B(반응도식 중의 방법 ㄴ)

이물질은 또한 다른 제조 방법으로도 제조할 수 있다.ara-CMP(III, B=시토신)323mg(1밀리몰)과 트리-n-옥틸아민 371mg(1밀리몰)을 메탄올 7ml에 가온하여 녹인후 감압증류하여 용매를 제거하고 미량의 수분을 제거하기 위하여 소량의 N,N-디메틸포름아미드(DMF)에 잔사를 녹인후 감압증류시킨다. 건조된 ara-CMP트리-0-옥틸암모늄염을 디옥산 10ml와 DMF 5ml에 녹인후 디페닐 포스포클로리데이트 0.3ml와 트리-n-부틸아민 0.45ml을 가하고 실온해서 무수상태로 2-3시간 반응시킨다. 용매를감압증류 제거한 후 에테르 50ml를 가하여 P'-(1-β-D-아라비노푸라노실시토신-5'-일)-P²-디페닐 피로포스페이트 (VII, B=시토신)를 침전시켜 0℃에서 30내지 60분 보전한 후 에테르를 가하여 제거한다. 침전을 디옥산 2ml에 녹여 감압 증류시켜 미량의 수분을 제거한다. rac-1-0-옥타데실-2-0-팔미;토일글리세로-3-포스페이트(VIII,n=17, m=14, DL-혼합물) 663mg(1밀리몰)을 P₂O₅하에 밤새 건조시킨후 무수 피리딘 1ml에 녹여 디옥산 0.5ml에 녹인 상기 피로포스페이트(VII)과 혼합하여 무수 조건하에 1일간 실온 반응시킨다. 용매를 감압 증류제거한후 그잔사에 에테르25ml를 가해 목적물을 침전시킨후 용매 CMW 100ml에 용해시켜 DE-52(아세테이트)셀룰로스 컬럼(2.5×50cm, jacked, 5℃)에 흡착시킨후 상기와 같은 방법으로 용리, 정제한다. 수득을 30％, 크로마토그래피 이동도와 NMR데이터는 방법 A로 제조한 목적물에서와 동일하다.

[실시예 3]

1-β-D-아라비노푸라노실시토신-5'-디포스페이트-rac-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일 글리세롤 혹은 1-β-D-아라비노푸라노실 시토신-5'-디포스페이트-β-팔미토일-DL-키밀 알콜(IC, ara-CDP-DL-PCA)

(1)방법 A(반응도식 중의 방법 ㄱ)

이물질 역시 근본적으로 실시예 1과 같은 방법으로 제조한다. 피라딘과 함께 공비 건조한 rac-1-0-헥사데실-2-0- 팔미토일글리세로-3-프스페이트(VIII, n=15, m=14, DL-혼합물) 4.19g (6.6밀리몰)과 ara-CMP 모로폴리데이트(VI, B=시토신)3.43g (5밀리몰)을 무수피라딘 300ml에 용해시킨후 5일간 실온에서 무수 상태로 반응시킨다. 피리딘을 감압농축 제거한후 잔사를 실시예 1과 같은 방법으로 처리하여 DE-52(아세테이트)셀룰로스 컬럼)(2.5×50cm, Jaeked 5℃)에 흡착시키고, 이어서 0-0.15M NH₄OAC 선형구배를 함유한 용매 CMW(각각 1500ml)로 용리시켜 분액하여 목적물이 함유도어 있는 분액을 모아 30℃ 이하에서 백색결정이 형성될때까지 감압농축시킨 후 여과하고 그 결정을 암버라이트CG-50(Na+)칼럼에 의해 Na염으로 만든다. 수율 : 30％

1)융점 : 202내지 205℃ (분해)

2)NMR(90 MHz) : 용매(CDCl₃-CD₃OD-D₂O,2 : 3 : 1) : δPPm 0.87(6, t, 2 CH₃), 1.07-1.78(54H, m, 27 CH₂), 2.35(2, t, CH₂-C=0), 3.27-4.35(11,m, H2', H3', H4', H5,'CH₂-0-CH₂, CH₂-0), 5.15(1, m 글리세롤 CH), 5.92(1, d, J=7H_Z, 시토신 H5), 6.14(1, d, J=5H_Z, H1'), 7.88 (1, d, J=7H_Z, 시토신 H6).

3) 원소분석 : C₄₄H₈₁N₃O₁₄P₂Na₂0.5H₂O

이론치 : C 53.21 H 8.43 N 4.23 P 6.24

실험치 : C 53.69 H 9.27 N 3.92 P 5.72

(2)방법 B(반응도식 중의 방법 ㄷ)

rar-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세로-3-포스페이트(VIII,n=15,m=14,DL=혼합물) 3.17g(5밀리몰), 모르폴린 1.7ml (20밀리몰), t-BuOH 50ml의 환류 혼합물에 N,N'-디시클로헥실카보디이미드(DCC)4.12g(20밀리몰)을 t-BUOH 75ml에 녹인 용액을 서서히 적하시키고 환류 조건하에서 2시간 반응시킨다. 반응액을 실온에서 밤새 교반한 후 물 20ml를 가해 과량의 DCC를 2시간 동안 실온에서 교반하여 분해시킨다. 백색결정을 여과 제거하고 여과액을 감압증류 농축한 후 에테르로 추출한다. 이추출액을 감압 증류시키고 그 잔사(IX, n=15, m=14,DCC-혼합물)를 톨루엔으로 2회 공비 증류하여 건조시킨후 ara-CMP(III, B=시토신) 2.13g(6.6밀미몰) 및 트리-n-옥틸아민 4.67g(13.2밀리몰)을 가한후 피리딘 3회 더 공비 증류하여 건조시킨후 피리딘 200ml에 용해시켜 무수조건하에서 실온에서 7일간 교반 반응시킨다. 피리딘을 감압 농축제거한 후 미량의 피리딘을 소량의 톨루엔과 공비 증류하여 제거한다. 잔사를 빙초산 30ml와 용매 CMW 300ml에 용해 시켜 실온에서 1시간 동안 교반한후 클로로포름 500ml를 가한다. 유기용매층을 분리하여 감압 농축시키고 미량의 빙초산을 제거하기 위하여 톨루엔 10ml와 3회 공비증발시킨다. 잔사를 용매 CMW 100ml에 용해시킨후 DE-52(아세테이트) 셀룰로스 컬럼(2.5×50cm, Jacked 5℃)에 흡착시킨후 이어서 0-.015 MNH₄OAC선형구배를 함유한 용매 CMW로 실시예 1과 같은 방법으로 용리 분액하여 목적물을 분리한다. 수득율 30％, 크로마토그래피 이동도와 NMR 데이타는 상기 실시예와 동일하다.

[실시예 4]

9-β-D-아라비노푸라노실아데닌-5'-디포스페이트-rac-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세롤 또는 9-β-D-아라비노푸라노실아데닌-5'-디포스페이트-β-팔미토일-DL-키밀알콜(Id, ara-ADP-DL-PCA)(반응도식중의 방법 ㄱ)rar-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세로-3-포스페이트(VIII,n=15,m=14, DL-혼합물) 1.90g(3밀리몰)을 피리딘으로 공비 중발건조한 후(3회)무수ara-AMP 모르폴리데이트 4-모르폴리노N, N'-디시클로헥실-카복스아미디늄염(VI, B=아데닌) 2.13g(3밀리몰)과 무수피리딘200ml에 용해시킨후, 실온에서 7일간 무수상태로 교반응시킨다. 피리딘을 감압증류 제거한 후 그 잔사를 실시예 1과 같은 방법으로 처리한 후 목적물을 DE-52(아세테이트)셀룰로스 컬럼 (2.5×50cm, Jacked, 5℃)과 0-0.15M MH₄OAC선형구배를 함유한 용매 CMW로써 용리 분액하여 분리한다. CG-50(Na⁺)칼럼으로 Na염을 만든다. 수득량은 851mg(29％)이다.

1)NMR(90 MHz) : 용매(CDCl₃-CD₃OD-D₂O,2 : 3 : 1) : δPPm 0.87(6, t, 2 CH₃), 1.07-1.78(54H, m, 27 CH₂), 2.35(2, t, CH₂-C=0), 3.27-4.35(11,m, H2', H3', H4', H5', CH₂-0-CH₂, CH₂-0), 5.07(1, m 글리세롤 CH), 6.33(1, d, J=4.5-H_Z, H1'), 8,17(1, S, 아데닌 H2), 8.40 (1, S, 아데닌 H8).

[실험예 1]

마우스에 복강내 이식한 L 1210 임파성 백혈병에 대한 제암작용 :

DBA/2J 마우스(평균체중 25g, 숫컷)에 1×10⁶및1×10⁵L 1210 백혈병 세포를 복강내에 접종한 후 24시간 후 0.9％ NACI 용해한 약물을 복강내에 주사로 투여하여 생존일을 45일간 측정했다. 그 방법은 미국의 National Cancer Institute Protcols (Cancer Chemotherapy Reports 3, 1-03, 1972)에 의한 것이다, 치료횟수는 qd 1,qd 15, 9 및 qd 1-5이며, 각 약물은 광범위의 용량으로 치료하여 표 I 에 나타난 최적 용량은 효과가 가장 큰 용량이다. 작용도는 수명의 연장을 비교함으로써 측정하였고 후자는 평균 생존일을 대조군과 비교함으로써 결정하였다.

표I는 ara-C와 그 복합체 ata-CDP-DL-PBA(Ib)와 ara-CDP-DL-RCA(IC) 의 치료결과를 종합한것이다. 첫째로 ara-C민감성 L 1210임파성 백혈별 마우스를 치료한 결과인데 무치료 대조 마우스는 종양을 접종한 후 7 내지 8일만에 치사되었다. ara-C를 1회 최적용량400mg (1644μ몰)/kg을 투여했을 경우는 예측한 대로 수명이 연장된 경우(％ ILS)가 14％하였으며, 200mg (822μ몰)씩 매일 1회 5일 투여했을때는 ％ ILS가 129％로 효과를 보였다. 그런데 복합체 ara-CDP-DL-PBA(Ib)와 ara-CDP-DL-RCA(IC)를 1회 최적용량 400mg(395와 407μ몰)/kg을 각각 투여했을 경우 ％ ILS는 257％와 293％로 큰 효과를 보였다. 최적용량을 5회 투여 했을 경우 역시 ％ ILS는 229％와 264％로 큰 효과를 보였다. 1회 투여를 ara-C와 그복합체의 결과로 비교할때는 비교가 되지도 않지만, 5회 투여 역시 ara-C의 1/8 혹은 1/10의 몰용량으로 2배 이상의 효과를 복합체는 보이고 있으며 독성도 훨씬 적었다. 둘째로는 데옥시시티딘 키나제가 소량 존재함으로써 ara-C 저항력을 갖는 ara-C내성 L 1210 임파성 백혈병 마우스를 치료한 결과이다. 무치료 대조마우스는 종양을 접종한 후 8 내지 11일만에 치사되었다. ara-C의 1회 용법치료는 효과가 전혀 없었고 (ILS,6％), 5일간 치료는 65％의 ILS를 보이고 있다. 이 결과를 보면 이 ara-C 는 데옥시시티딘 키나제가 전혀 없는 것이 아니라 소량은 존재하고 있는 것을 나타낸다.

그러나, ara-C의 복합체인 ara-CDP-DL-PBA(Ib)와 ara-CDP-DL-RCA(IC)의 치료결과는 놀랄만하게 장래성이 있었다. 전체용량 400mg/kg을 한번에 투여하거나 5회로 나누어 80mg/kg/일을 투여하거나 그결과는 ILS 259~356％였으며, 6마리 쥐중 1내지 3마리가 45일 이상 살고 완치되었다. 더구니 167mg/kg/일을 1, 5, 9일째 3회 투여했을때 ara-CDP-PBA-(Ib)는 >289％ ara-CDP-DL-PCA(Ic)는 >374％의 ILS를 보였고 3마리 이상 특히 ara-CDP-DL-PCA는 6마리중 6마리가 45일 이상 살고 완치되는 결과를 보여 주었다. 결국은 ara-c용량의 3분의 1몰 용량으로 5배 이상의 효과를 볼 수 있었다.

이와같인 데옥시시티딘 키나제 함량이 적은 ara-C 내성 L1210백혈병 마우스에이 복합체가 효과가 있는 것은 이복합체가 세포내에 엔도시토시스나 다른 메카니즘에 의하여 도입되어 효소에 의하여 가수 분해되어 인지질과 ara-CMP가 유리되어 나와 이 ara-CMP가 ara-CTP로 계속 인산화 되는 것으로 추정할 수 있다.

결국은 ara-CMP가 복합체에서 유리되어 ara-C가 인산화 되는데 필요한 데옥시시티딘 키나제를 필요로 하지 않은 것이다.

이상의 실시예에서 본것과 같이 이복합체는 모약물인 ara-c의 효력보다 훨씬 큰 효과를 모약물보다 적은 용량을 투여하여 얻을 수 있으므로 모약물의치료 효과를 개선할 수 있다. 더구나 ara-C의 경우는 반감기가 작아 계속 투여하여야 효력이 있는데 이 복합체는 1회용법 투여로도 큰 효과를 볼 수 있기 때문에 지속성 방출 약물로 사용될 수 있다. 특히 ara-C내성 L 1210 백혈병 마우스에 효과가 있는 것을 보면 세포내에서 ara-CMP와 인지질로 가수분해되는 것 같으며 데옥시시티딘 키나제의 결핍으로 인한 내성 셀라인 (cell line)에 큰효과를 볼 수 있다. 더구나 이 인지질은 1-0-알킬-2-0-아실글리세로-3-포스페이트이며 생화학적인 반응후에 1-0-알킬-2-리소포스파티딜-콜린이나 에탄올 아민으로 변하면 이 물질 자체가 역시 암세포의 성장과 전이를 억제하고 또 면역 조절작용이 있어 상가 혹은 심지어 상승 효과까지 기대할 수 있으므로 단순한 ara-C의 프로드럭으로 간주하기 보다 그이상의 새로운약으로 기대할 수 있다. 더구나 다른 친유성 프로드럭보다 이 복합체는 수용액에 음파파쇄에 의해 투명하게 용해시킬 수 있는 장점도 있다. 또한 백혈병 환자를 ara-C로 치료하는데 있어서 그 약물의 저항력의 발생은 그 세포내의 데옥시시틴딘 키나제와 시티딘 데아미 나제의 상대적 함량에 밀접한 관계가 있다는 보고가 있다. (Annals of New York Academy of Science 255. 274, 1975)

그런데 ara-C 복합체는 시티딘 데아미나제에 저항력도 있고 아미노기가 가수분해 되지 않으므로 ara-C에 저항성을 보인 백혈병 환자 치료에 큰 효과가 있을 것으로 생각된다.

[표 1]

마우스에 복강내 접종한 L 1210 임파성 백혈병 세포에 대한 제암작용

a : 각 그룹당 DBA/2 J 마우스 (평균체중 25g, 숫컷)1×10⁶L 1210/0 세포 또는 1×10⁵L 1210/ ara-c세포를 접종함.

b : 최대 효과 유발

c : 수명 연장률 : (T/C-1)×100

d : ara-C 민감성 L 1210

e : 데옥시시티딘 결핍에 기인하는 ara-C 내성 L 1210 아계

f : 45일까지

g : ara-CMP(III, B=시토신) 및 rac-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세로-3-포스페이트(VIII, n=15, m=14, DL-혼합물).

Claims

다음 일반식(III)의 뉴클레오티드를 다음 일반식(VI)의 모르폴리데이트 또는 다음 일반식(VII)의 P¹-뉴클레오시드-5¹-P²-디페닐피로포스페이트로 만들고, 이들을 다음 일반식(VIII)의 1-0-알킬-2-0-아실글리세로-3-포스페이트와 반응 시킴을 특징으로 하는 다음 일반식(I)의 뉴클레오시드 복합체 및 이의 염의 제조방법.

상기 일반식에서, B는 아데닌, 시토신, 5-플루오로우라실, 5-아자시토신, 6-머캅트푸린 또는 7-데아자 아데닌이고, A및 C는 H또는 OH이고, W는 탄소수가 8내지 20개인 포화 또는 불포화 알킬기, 2또는 2-알콕시 알킬기이고, W¹는 탄소수가 7내지 19개인 포화 또는 불포화 알칼기이다.
다음 일반식(VIII)의 인지질을 다음 일반식(IX)의 인지질모르폴리데이트 또는 일반식(X)의 P¹-글리세롤-5'-P²디페닐피로포스페이트로 만들고, 이들을 일반식(III)의 뉴클레오티드와 반응시킨을 특징으로 하는다음 일반식(I)의 뉴클레오시드 복합체 및 이의 염의 제조방법.

상기 일반식에서, B, A, C, W 및 W¹는 전기한 바와 같다.
제1항 또는 제2항에 있어서, 최종 생성물이 1-β-D-아라비노 푸라노실시토실-5'-디포스페이트-1-0-옥타데실-2-0-팔미토일-Sn-글리세롤인 제조방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 최종 생성물이 1-β-D-아라비노푸라노실시토실-5'-디포스페이트-rac-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세롤인 제조방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 최종 생성물이 1-β-D-아라비노푸라노실시토실-5'-디포스페이트-rac-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세롤인 제조방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 최종 생성물이 9-β-D-아라비노푸라노실시아테닌-5'-디포스페이트rac-1-0-헥사데실-2-0-팔미토일글리세롤인 제조방법.