DE3032088A1 - Verfahren und vorrichtung zur lagerung tiefgefrorener biologischer substanzen - Google Patents
Verfahren und vorrichtung zur lagerung tiefgefrorener biologischer substanzenInfo
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Description
LINDE AKTIENGESELLSCHAFT
(H 1205) H 80/52
Sti/fz 22.-08.1980
Verfahren und Vorrichtung zur Lagerung tiefgefrorener biologischer Substanzen
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Lagerung von in Biobehältern eingefrorenen biologischen Substanzen bei Temperaturen
unterhalb von 200 K in einem geschlossenem Kühlbehälter.
Die Konservierung biologischer Substanzen zur Verhütung irreversibler
Zellschädigungen stellt ein schwieriges Problem dar, insbesondere die Konservierung von Blut. Seit einiger
Zeit werden nun Blutkonserven durch Tiefgefrieren haltbar gemacht.
Ein derartiges Verfahren ist beispielseiwe aus der DE-AS 12 38 618 bekannt. Den biologischen Substanzen, wie Blut, wird
dabei ein Schutz_additiv beigemischt, um zu verhindern, daß während des Tieffriervorganges, wenn das Blut durch den Temperaturbereich
des Einfrierens geführt wird, die Integrität der Zellmembran der roten Blutkörperchen beschädigt und die
Zellen hämolysiert werden können. Dann wird das Blut in einen Behälter abgefüllt und unter Schütteln in einem Kühlmittel,
wie flüssigem Stickstoff, abgekühlt. Auf diese Weise kann Blut zwar über längere Zeit hinweg konserviert-werden.
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Es hat sich jedoch gezeigt, daß bei diesen Verfahren eine unbeschränkte Lagerzeit nicht möglich ist und außerdem ein
erheblicher Prozentsatz an Blutkonserven nicht benutzt werden kann/ da die Konserven verdorben sind.
Der Erfindung liegt deshalb die Aufgabe zugrunde, ein einfaches
Verfahren zur Lagerung tiefgefrorener biologischer Substanzen bereit zu stellen, das eine sichere Lagerung über
lange Zeiträume hinweg ermöglicht und den Anteil an verdorbenen biologischen Substanzen auf ein Minimum reduziert.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß die
biologischen Substanzen mit Hilfe einer Umlaufvorrichtung gleichmäßig entlang eines in sich geschlossenen Weges durch
den Kühlbehälter bewegt werden.
Durch die Bewegung der Biobehälter in einem Kühlbehälter wird eine Durchmischung und somit eine Egalisierung der Temperaturverhältnisse
auf einfachste Weise ohne zusätzliche Hilfsmittel erreicht. Außerdem ist durch das erfindungsgemäße
Verfahren eine nahezu unbegrenzte Lagerzeit der Biobehälter möglich. Das spielt insbesondere bei der Blutkonservierung
eine große Rolle, da durch das erfindungsgemäße Lagerverfahren im Gegensatz zur derzeitigen Situation praktisch
keine Blutkonserven mehr verderben, also nahezu alle Blutspenden wieder eingesetzt werden können.
Nach einer besonders vorteilhaften Ausführungsform des Verfahrens
werden die Biobehälter zu Beginn der Lagerung über eine Schleuse formschlüssig in die Halterungen der Umlaufvorrichtung eingebracht und bei Bedarf über die Schleuse wieder
herausgenommen.
Da in dem Kühlbehälter einige tausend Biobehälter gelagert werden sollen und ein schnelles Auffinden, insbesondere bei
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autologen Blutspenden, eines bestimmten Biobehälters zwingend
erforderlich ist, wird die Position der Biobehälter auf der Umlaufvorrichtung für das Einbringen bzw. die Entnahme
vorzugweise in einer Datenbank gespeichert. Über eine Steuervorrichtung
kann dann der Motor derart geregelt werden, daß die Umlaufvorrichtung bzw. die Halterung mit dem gewünschten
Biobehälter genau vor der Schleuse zum Stehen gebracht wird. Als weitere Daten dienen dabei neben der Position des
Biobehälters auf der Umlaufvorrichtung das Eingabedatum,biologische
Merkmale der eingefrorenen Substanz und bei autologen Blutspenden die Bezugsperson. Zur Positionierung der
Halterung der Biobehälter auf der Umlaufvorrichtung sind
hierzu mit Vorteil Raster vorgesehen.
Zur Aufrechterhaltung der tiefen Temperautren wird gemäß einer besonders vorteilhaften Ausgestaltungsform des erfindungsgemäßen
Verfahrens ein Kühlmittel, wie ein tiefsiedendes verflüssigtes Gas, vorzugsweise verflüssigter Stickstoff
verwendet. Dieses wird in geregelter Weise, d.h. ein im Inneren des Kühlbehälters befindlicher Temperaturfühler schaltet
ein Eintrittsventil für das Kühlmittel, über Kühlschlangen im oberen Bereich des Kühlbehälters eingegeben, jedoch dann
frei in den Behälter eingeleitet (direkter Kontakt) oder durch ein geschlossenes .Kühlschlangensystem hindurchgeleitet
(indirekter Kontakt). Es bildet sich eine natürliche Konvektion aus, so daß sich ohne zusätzliche Einrichtungen im gesamten
Lagerbereich eine gleichmäßige Temperautr einstellt. Die üblichen Lagertemperaturen liegen dabei zwischen -130
und - 1900C z.B. bei Blut vorzugsweise bei -1400C.
Als Vorrichtung zur Durchführung des erfindungsemäßen Verfah-.rens
sind Kühlbehälter bevorzugt, die eine durch einen außenliegenden Motor angetriebene Umlaufvorrichtung mit Halterungen
für Biobehälter aufweisen. Zum Einbringen bzw. zur Entnähme von Biobehältern ist im oberen Bereich dieser Kühlbe-
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hälter eine Schleuse angeordnet, deren Form der Querschnittsform
der Biobehälter angepaßt ist. Außerdem sind im oberen Teil des Kühlbehälters Kühlschlangen angeordnet. Die Form
der Biobehälter ist vorzugsweise der Form der Halterungen angepaßt.
Ein zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens besonders
geeigneter Kühlbehälter ist gemäß einer bevorzugten Ausgestaltungsform
horizontal langgestreckt, zylindrisch ausgebildet. Die Umlaufvorrichtung des Kühlbehälters ist vorzugsweise
als Förderband ausgebildet und auf einer koaxial zur Kühlbehälterachse befindlichen Antriebswelle angeordnet.Der
Antrieb des Förderbandes ist dabei an das Ende des Kühlbehälters in vertikaler obenliegender Position angebracht.Gemaß
einer weiteren Ausgestaltungsform des Kühlbehälters ist
das Förderband aus einzelnen festen Gliedern gebildet und auf jedem Glied mindestens eine Halterung für die Biobehälter,
die eine der Halterung angepaßte Form aufweisen, angebracht.
Nach einer weiteren Ausführungsform kann der Biobehälter auch quaderförmig ausgebildet sein und im oberen Bereich einen
Warmluftkanal aufweisen, du'rch den die Antriebswelle für die Umlaufvorrichtung hindurchführt. Die Umlaufvorrichtung
selbst ist aus zwei gegenüberliegenden, synchron angetriebenen Förderelementen gebildet, die durch Querelemente, die
als Ketten, Bänder oder bretterförmig ausgebildet sein können, miteinander verbunden sind. Die Querelemente sind in
regelmäßigen Abständen, die durch die Größe der Biobehälter bestimmt sind, hintereinander angeordnet und weisen je nach
Ausführungsform der Querelemente verschiedene Halterungen
für die Biobehälter auf.
In den Figuren 1 bis 4 sind Ausführungsbeispiele einer Vorrichtung
zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens
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schematisch dargestellt.
Es zeigt:
Es zeigt:
Figur 1 einen Kühlbehälter zur Lagerung von Biobehältern im
Längsschnitt
Figur 2 den Kühlbehälter der Figur 1 im Querschnitt Figur 3 eine Umlaufvorrichtung eines weiteren Kühlbehälters
Figur 4 den Kühlbehälter zur Umlaufvorrichtung gemäß Figur 3.
Figur 1 zeigt einen Kühlbehälter 1 mit langgestreckter, zylindrischer
Form in liegender Position, durch den eine koaxial zur Längsachse befindliche Antriebswelle 2 mit Durchführungen
3/4 an beiden Enden führt. Ein Antrieb 5 und eine Kupplung 10 sind bei Durchführung 4 installiert. Dieser Stelle ist somit gleichzeitig der Bewegungsfestpunkt der Schrumpfbewegung
in Folge der Abkühlung gegeben. Auf der Antriebswelle 2 befindet sich beidseitig je ein Förderband 6. Die Achsen
7 dieser Förderbänder 6 führen durch die Längswelle 2.
Der Antrieb 8 der Förderbänder 6 ist an das Behälterende mit
dem Festpunkt der Längsachse 7 gelegt, so daß die Förderbänder selbst nur in vertikaler Stellung angetrieben werden, und
wenn erforderlich, an dieser Stelle durch eine im Kühlbehälter 1 befindliche Kupplung 9 gekuppelt werden.
Die Förderbänder 6 werden vorzugsweise aus einzelnen festen Gliedern, ähnlich einer Rolltreppe gebildet. Auf jedem Glied
ist eine Halterung 11 angebracht, die die Form eines Viertelkreises,
passend zur Lage des Kühlbehälterquerschnittes besitzt. Zur größeren Eigensteifigkeit dieser Halterungen 11
ist es vorteilhaft, eine Tiefe der Halterungen so zu wählen, daß hintereinander mehrere Biobehälter 12 Platz finden.
Für die Qualität der biologischen Substanzen ist es vorteilhaft, die Biobehälter in relativ dünner Plattenform (ca.8 mm)
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herzustellen, im vorliegenden Fall also in der geometrischen Form eines Kreissektors mit relativ dünner Wand. Die Biobehälter
dieser Art werden nun mehrfach hintereinander geschichtet und/oder auch nebeneinander, einen Viertelkreis
bildend, in der Halterung untergebracht, wobei durch Vergrößerung des Kühlbehälterdurchmessers in einem Viertelkreis
mehrere Biobehälter Platz finden können.
Das Einbringen (bzw. die Entnahme) der Biobehälter auf die Förderbänder 6 erfolgt durch eine schlitzförmige Schleuse 13,
die in unmittelbarer Nähe des Antriebs 8 der Förderbänder 6, also ebenfalls in vertikaler, obenliegender Position angebracht
ist. Damit liegen beide obenliengende Durchführungen in der Nähe des Bewegungsnullpunktes aus der Schrumpfung
durch die Abkühlung. Vorteilhaft ist der Schlitz der Schleuse 1 3 quer zur Behälterachse angeordnet.
Alle Antriebe, d.h. die Bewegung der Längsachse 2 und die Bewegung
der Förderbänder 6, sind formschlüssig. Dies ist erforderlich, da jeder einzelne Biobehälter durch seine Position
am Umfang und an der Längsachse des Kühlbehälters gekennzeichnet ist. Es hat sich als besonders vorteilhaft erwiesen,
die Positionierung der Biobehälter, die durch Raster auf der Umlaufvorrichtung erfolgt, mit einer Datenbank zu
koppeln.
Zum Einbringen eines Biobehälters wird demnach der Antrieb 8 der Förderbänder 6 so gesteuert, daß vor die Schleuse 13 eine
unbesetzte Halterung 11 gebracht wird, in die der Biobehälter
eingesetzt wird. Als weitere Daten für die Datenbank dienen dabei außerdem das Eingabedatum, die biologischen Merkmale
und bei autologen Blutspenden die Bezugsperson.
Ist der Biobehälter auf die Halterung 11, beispielsweise auf
Förderband 6a eingebracht, so werden beide Förderbänder wie-
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-AO*
der in Bewegung versetzt, insbesondere auch um die Durchmischung der Temperatur zu unterstüzten. Zum Einbringen (bzw.
zur Entnahme) eines Biobehälters auf das Förderband 6b wird bei 9 die Antriebsachse 7 der Förderbänder 6 abgekoppelt und
die Antriebswelle 2 bei 10 angekoppelt, so daß eine Drehbewegung
in Pfeilrichtung möglich ist.
Figur2 zeigt die Stellung der um 90° gedrehten Förderbänder. Die Achse 7, die durch Antriebswelle 2 führt, ist von 9 abgekoppelt
und um 90° gedreht. Auf diese Weise ist auch die · Bestückung der "unteren Förderbänder" 6b über die Schleuse
13 möglich. In Figur 2 sind außerdem im oberen Bereich des Kühlbehälters 1 Kühlschlangen 14 sichtbar, die der Übersichtlichkeit
halber in Figur 1 nicht eingezeichnet sind. Diese Kühlschlangen können entweder ein geschlossenes oder ein offenes
System bilden, was bedeutet, daß ein Kühlmittel, wie verflüssigter Stickstoff, über die Kühlschlangen eingegeben,
jedoch dann frei in den Innenraum des Kühlbehälters geleitet wird. Der Austritt des gasförmigen Kühlmittels erfolgt
dann vorzugsweise durch die Schleuse. Die Regelung zur Kühlung kann beispielsweise über einen im Inneren des Kühlbehälters befindlichen nicht dargestellten Temperaturfühler erfolgen, der ein Eintrittsventil für das Kühlmittel schaltet.Die
Biobehälter werden durch Halterungen so fixiert, daß sie sowohl am Wendepunkt der Förderbänder als auch in Kopflage einen
sicheren Halt finden.
Figur 3 zeigt eine Umlaufvorrichtung, wie sie vorzugsweise
in einem quaderförmigen Kühlbehälter angeordnet ist. Eine von einem Motor 16 angetriebene Welle 15 bewegt synchron in
Pfeilrichtung - über beispielsweise Zahnräder 17, 18 - zwei gegenüberliegende umlaufende Förderelemente 19 und 20. Als
Förderelemente können Ketten, Bänder, Keilriemen oderähnliches
dienen. Sie werden zum Dehnungsausgleich mindestens einmal bei 21 umgeleitet. Die Förderelemente 19 und 20 sind
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durch Querelementen 22 miteinander verbunden. Diese Querelemente 22 können ebenfalls als Ketten, aber auch starr, z.B.
als Stangen oder bretterförmig ausgebildet sein. An den Querelementen 22 sind Raster 23 für Halterungen 24. vorgesehen.
Beispiele für diese Halterungen sind Haken, ösen oder
Stellmöglichkeiten auf bretterförmigen Querelementen.
Die Biobehälter können den Halterungen entsprechend ebenfalls unterschiedliche Formen aufweisen, wie sie beispielhaft
in Figur 3 angedeutet sind.
Das Einbringen (bzw. Entnahme) von Biobehältern erfolgt über die in Figur 4 dargestellte schlitzförmige Schleuse 25 in angedeuteter
Weise. Die Schleuse 25 wie auch die Antriebswelle 15 befindet sich ω einem Warmlufkanal 26, der mit einer zusätzlichen
Vorrichtung zur Abschirmung der Kälte versehen ist. Diese zusätzliche Kälteisolierung kann zum Zeitpunkt
des Einbringes bzw. der Entnahme von Biobehältern entfernt werden.
Die Bewegung der Umlaufvorrichtung muß dabei keineswegs ausschließlich
auf- bzw. abwärts sein, sondern kann auch als beispielsweise serpentinenförmige Hin- und Herbewegung realisiert
werden.
Auch bei diesem Kühlbehälter ist die Position bzw. die Ein- und Ausgabe der Biobehälter vorteilhaft mit einer Datenbank
gekoppelt. Das Einbringen, die Entnahme und die Positionierung der Biobehälter, sämtliche Durchführungen und die obenliegende
sogenannte Deckenkühlung 14 sind entsprechend der obenbeschriebenen Ausgestaltungsform eines zylindrischen
Kühlbehälters auch auf diesen quaderförmigen Kühlbehälter zu übertragen.
Form. 5729 7.78
Claims (1)
- (H 1205) H 80/52Sti/fz 22.08.1980Patentansprüche15M Γ) Verfahren zur Lagerung von in Biobehältern eingefrorenen biologischen Substanzen bei Temperaturen unterhalb 200 K in einem geschlossenen Kühlbehälter, dadurch gekennzeichnet, daß die biologischen Substanzen mit Hilfe einer Umlaufvorrichtung gleichmäßig entlang eines in sich geschlossenen Weges durch den Kühlbehälter bewegt werden.2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Biobehälter bei Beginn der Lagerung über eine Schleuse formschlüssig in Halterungen der Umlaufvorrichtungen eingebracht und nach Bedarf über die Schleuse wieder herausgenommen werden.3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß für das Einbringen und die Entnahme der Biobehälter deren Posi-2Q tion auf der Umlaufvorrichtung in einer Datenbank gespeichert und über eine Steuervorrichtung in den Breich der Schleuse gebracht wird.4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß in den Innenraum des Kühlbehälters inForm. 5729 7.78geregelter Weise ein Kühlmittel für direkte oder indirekte Kühlung eingebracht wird.5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß das Kühlmittel ein tiefsiedendes verflüssigtes Gas, vorzugsweise verflüssigter Stickstoff, ist.6. Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens nach einem der Ansprüche 1 bis 5, gekennzeichnet durch einen Kühlbehälter mit einer durch einen außenliegenden Motor angetriebenen Umlaufvorrichtung mit Halterungen für Biobehälter, einer im oberen Bereich des Kühlbehälters angeordneten Schleuse, deren Form der Querschnittsform der Biobehälter angepaßt ist, sowie im oberen Teil des Kühlbehälters angeordneten Kühlschlangen.7. Vorrichtung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß zur Positionierung der Halterungen für die Biobehälter Raster vorgesehen sind.8. Vorrichtung nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Biobehälter eine der Halterung angepaßte Form aufweisen.9. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 6 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Kühlbehälter horizontal langgestreckt, zylindrisch ausgebildet ist.10. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 6 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Umlaufvorrichtung als Förderband ausgebildet und auf einer koaxial zur Kühlbehälterachse befindlichen Antriebswelle angeordnet ist, wobei das Förderband einen an das Kühlbehälterende in vertikaler obenliegender Position angebrachten Antrieb, aufweist. 35Form. 5729 7.78'11. Vorrichtung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß das Förderband aus einzelnen festen Gliedern gebildet ist und auf jedem Glied mindestens eine Halterung für die Biobehälter angebracht ist.12. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 6 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Kühlbehälter quaderförmig ausgebildet ist und im oberen Bereich einen Warmluftkanal aufweist, durch den die Antriebswelle für die ümlaufvorrichtung hin-durchführt.13. Vorrichtung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß der Kühlbehälter eine umlaufende Fördereinrichtung aus zwei gegenüberliegenden, synchron angetriebenen Förderele-"^ menten aufweist, wobei die Förderelemente durch Querelemente, die in Abhängigkeit von der Größe der Biobehälter in regelmäßigen Abständen hintereinander angeordnet sind und Halterungen für die Biobehälter aufweisen, miteinanderverbunden sind.
2014. Vorrichtung nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß die Querelemente als Ketten oder Bänder mit Haken oder ösen als Halterungen oder bretterförmig mit Stellmöglichkeiten für die Biobehälter ausgebildet sind.Form. 5729 7.78
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