DE2933872A1 - Mehrzweck-blutverduennungsmittel zur verwendung in elektronischen blutuntersuchungsgeraeten - Google Patents
Mehrzweck-blutverduennungsmittel zur verwendung in elektronischen blutuntersuchungsgeraetenInfo
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Description
D!pl.-lng. E. Eder
DIpI.-Ing. K. Schieschkt
8 Mürrher. 4?. Eti
DIpI.-Ing. K. Schieschkt
8 Mürrher. 4?. Eti
Mehrzweck-Blutverdünnungsmittel zur Verwendung in elektronischen Blutuntersuchungsgeräten
Die Erfindung betrifft ein azidfreies Blutverdünnungsmittel, insbesondere
zur Verwendung bei der elektronischen Zählung und Größenbestimmung von Blutkörperchen, bei der Bestimmung des
Hämoglobins und der Blutgesamtwerte sowie Blutplättchenkennwerte in einer einzelnen Blutprobe mittels geeigneter elektronischer
Blutuntersuchungsgeräte. Das Verdünnungsmittel umfaßt eine stabile wäßrige Lösung chemischer Salze, die eine Elektrolytlösung bilden,
welcher eine Blutprobe beigefügt werden kann, wodurch der größte Teil der roten und weißen Blutkörperchen, Blutplättchen und anderer
Blutbestandteile verdünnt wird und wodurch der gewünschte Kennwert
dieser Blutbestandteile meßbar, zählbar und auswertbar gemacht wird. Außerdem betrifft die Erfindung eine modifizierte Ausführungsform des Verdünnungsmittels zur Verwendung bei veterinärmedizinischen
Laborversuchen.
030010/0822
In der medizinischen Diagnostik ist es üblich, Blutproben von Patienten zu untersuchen und bestimmte herkömmliche Bestimmungen
durchzuführen. Dies liefert dem Arzt wichtige Hinweise für die durchzuführende Behandlung. Sechs besonders wichtige Kennwerte sind
hierbei die Zählung der roten Blutkörperchen (RBC), die Hämatokrit-Bestimmung
(HCT), die Hämoglobinbestimmung (HGB), das mittlere Blutkörperchenvolumen (MCV), der mittlere Blutkörperchen-Hämoglobingehalt
(MCH) sowie die mittlere Blutkörperchen-Hämoglobinkonzentration (MCHC). Eine weitere wichtige Bestimmung betrifft die
Zählung der weißen Blutkörperchen (WBC). Ein Gerät zur Aufnahme der Blutprobe des Patienten, zu ihrer automatischen und fortlaufenden
Verarbeitung und zur Lieferung der oben aufgeführten Kennwerte oder Bestimmungswerte wird in US-PS 3 549 994 beschrieben.
Diese Patentschrift definiert ausführlicher die besagten Kennwerte und beleuchtet die Probleme, die sich in der Handhabung der Blutprobe
stellen, während diese das Strömungssystem des Geräts nach dem genannten Patent durchläuft.
Coulter Electronics, Inc. in Hialeah, Florida, USA, stellt auch andere Blutkörperchenzähl- und -Untersuchungsgeräte her, die von
einfacherem Aufbau als das in US-PS 3 549 994 beschriebene Gerät sind und zur Bestimmung von roten und weißen Blutkörperchen, zur
Hämoglobinbestimmung und zur Feststellung der Blutgesamtwerte wie HCT, MCV, MCH und MCHC dienen. Das erfindungsgemäße Mehrzweck-Verdünnungsmittel
eignet sich natürlich auch zur Verwendung mit diesen Geräten, wo sich hinsichtlich einer zufriedenstellenden
Behandlung der Probe die gleichen Probleme stellen. Mit anderen Worten, das erfindungsgemäße Blutverdünnungsmittel ist auch zur
Verwendung mit anderen nach dem sogenannten Coulter-Prinzip arbeitenden elektronischen Teilchenuntersuchungsgeräten geeignet.
In US-PS 3 962 125 wird ein Verdünnungsmittel beschrieben, mit dem
insbesondere die bei Verwendung der bekannten Blutverdünnungsmittel mit Natriumazid als bakteriostatischem Mittel bestehenden Probleme
behoben werden.
/5 030010/0822
Dieses bekannte Verdünnungsmittel eignet sich jedoch nicht zur Bestimmung der Blutplättchen-Kennwerte, vor allem wegen der Blasenbildung
aufgrund der Detergenswirkung. Solche Blasen beeinträchtigen die Zählung der Blutplättchen durch ein elektronisches Gerät. Es
ist daher wünschenswert, ein Mehrzweck-Verdünnungsmittel zu schaffen,
das sich zur Verdünnung von Blutproben eignet, bei denen eine Plättchen-Bestimmung gewünscht wird.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, die Nachteile
bekannter Verdünnungsmittel zu beseitigen und ein verbessertes Mehrzweck-Blutverdünnungsmittel zur Verwendung bei elektronischer
Zählung und Größenbestimmung von Blutkörperchen und der Blutgesamtwerte und Plättchenkennwerte in einer einzelnen Blutprobe mittels
elektronischer Geräte zu schaffen.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß gelöst durch die in Anspruch 1 aufge führt e η He rkmale.
Das Mehrzweck-Blutverdünnungsmittel nach der Erfindung kann beispielsweise
wie folgt zusammengesetzt sein:
Natriumchlorid wasserfrei 5 g/l
Ilatriumdihydrogenphosphat χ H^O 0,2 g/l
Dinatriumphosphat χ 7H2O 2,0 g/l
Natriumsulfat wasserfrei 10 g/l
8-Chinolinol (8-Hydroxychinolin) 0,145 g/l
Novocainhydrochlorid wasserfrei 0,125 g/l
Aqua dest. ausreichend zur Herstellung
von 1 1
Das obenangegebene Verdünnungsmittel wurde durch einen Puffer in Form des Phosphatsalzes auf einen pH-Wert von 7,2 bis 7»6 eingestellt.
Die Osmolalität des Verdünnungsmittels wurde auf 316 bis
330 Milliosmol/kg gehalten. Anstelle von 8-Hydroxychinolin kann
/6 030010/0822
8-Hydroxychinolincitrat verwendet v/erden, wodurch sich der Vorteil
besserer Löslichkeit ergibt. Die verwendete Citratmenge liegt bei 0,145 g/l· Ebenso können anstelle der Natriumphosphatsalze Kaliumdihydrogenphosphat
und Dikaliumphosphat verwendet werden.
Das gewünschte osmotische Gleichgewicht wird durch die Verwendung
von Natriumchlorid hergestellt. Das Verdünnungsmittel ist vollkommen indifferent und osmotisch ausgeglichen gegenüber dem mittleren
Zellvolumen bei Verwendung von Novocainhydrochlorid und Phosphatsalzen als wirksame Puffer. Das Novocainhydrochlorid dient zur
Stabilisierung des Volumens der roten Blutkörperchen. Das Natriumsulfat dient dazu, Störungen durch erhöhte Werte der weißen Blutkörperchen
auszuschalten, die eine Hämoglobinbestimmung beeinträchtigen
würden.
Das bakteriostatische Mittel, das Natriumazid ersetzt,besteht aus
8-Chinolinol oder 8-Chinolinolcitrat. Das bakteriostatische Mittel
hat geringe Toxicität und verhindert daher eventuelle schädliche toxische Wirkungen bei Laboranten, wie es bei der Verwendung von
Natriumazid der Fall wäre. Außerdem bilden 8-Chinolinol oder 8-Chinolincitrat iit Kupfer oder Blei, welche gewöhnlich in Wasserleitungssystemen
verwendet werden, keine gefährlichen Substanzen. Als zufriedenstellender Ersatz haben sich 8-Hydroxychinaldin (2-Methyl-8-chinolinol),
8-Hydroxychinolin-5-sulfonsäuredihydrat und 8-Hydroxy-O-nitrochinolin erwiesen, die alle aus der Gruppe der
Hydroxychinoline stammen.
Es ist bekannt, in Verdünnungsreagenzien dieser Art das Novocainhydrochlorid
alleine in größeren Mengen zu verwenden. Solche größeren Mengen führten jedoch zu unerwünschter Hämolyse. Die
Verwendung von 8-Chinolinol als chelatbildendes Mittel in Anwesenheit von Novocainhydrochlorid zur Erhaltung der Morphologie der
roten Blutkörperchen war unserer Ansicht nach bisher weder bekannt noch war seine Wirksamkeit als Blutterdünnungsmittel in diesem
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Zusammenhang zu erwarten. Die verwendeten Bestandteile erwiesen sich in dem e rfindungsgemäßen Verdünnungsmittel als äußerst gut
miteinander verträglich und beeinträchtigten einander in ihrer Wirkungsweise nicht.
Novocainhydrochlorid ist allgemein als Anästhetikum bekannt. Andere
chemische Verbindungen, die sich als mit der Gruppe der Hydroxychinolinverbindungen
verträglich erwiesen, waren Methohexitalnatrium (a-d,l-1-methyl-5-allyl-5)-(1-methyl-2-pentinyl)-Natriumbarbiturat,
Mepivacainhydrochlorid ("i-Methyl-2,6'-pipecoloxylididmonohydrochlorid)
und Lidocainhydrochlorid. Diese Verbindungen sind ebenfalls allgemein als Anästhetika bekannt. Die genauen Mengen
jeder Komponente bestimmen sich aufgrund der chemischen Formel.
Das erfindungsgemäße Blutverdünnungsmittel ist des weiteren auch für die Verdünnung von Blutproben zur Bestimmung der Blutplätt&enwerte
geeignet. Da -es das Wachstum von Mikroorganismen wirksam verhindert, bilden sich keine Bläschen, wie dies bei Verwendung
anderer bakteriostatischer Mittel der Fall ist. Solche Bläschen könnten bei einem elektronischen Gerät zur Blutplättchenbestimmung
fälschlich als vorhandene Teilchen, z.B. Blutplättchen, ausgelegt
werden. Da das erfindungsgemäße Verdünnungsmittel bei seiner bakteriostatischen
und fungistatischen Wirkungsweise keine Bläschen bildet, ist es insbesondere für elektronische Geräte wie das
COUL(EER COUNTER® -Modell "S"-Plus geeignet, das bereits auf dem
Markt ist.
Ein weiterer Vorteil des Verdünnungsmittels hinsichtlich seiner Verwendbarkeit in elektronischen Geräten besteht darin, daß es
gegenüber den beim Modell COULTER COUNTER® "S"-Plus verwendeten
Abzweig- und Transfer -Ventilen nicht korrodierend wirkt. Das erfindungsgemäße Blutverdünnungsmittel wirkt als stromführender
Elektrolyt, wodurch die roten Blutkörperchen stabilisiert werden, so daß ihr Volumen genau meßbar wird und wobei keine nachteilige
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Wirkung auf die weißen Blutkörperchen besteht. Das Mittel kann auch als Elektrolyt zur elektronischen Zählung weißer Blutkörperchen
und Blutplättchen verwendet werden, ohne nachteilige Wirkung auf die Blutplättchen und ohne Beeinträchtigung der Umwandlung von
Hämoglobin in Cyanmethämoglobin, als welches das Hämoglobin bestimmt wird.
Die Herstellung des Verdünnungsmittels erfordert keine speziellen Verfahren und keine besondere Reihenfolge, in der die Bestandteile
dem V/asser hinzugefügt werden müssen. Die Erfindung bezieht sich infolgedessen nicht auf eine Methode für die Bildung des Mittels.
Das Mischen der Bestandteile geschieht mechanisch durch langsames Rühren über eine geeignete Zeitdauer. Die Lösung wird dann durch
ein 0,2 Mikron-Filter gefiltert und sofort in geeigneten Behältern aufbewahrt. Da keine schwierigen und teuren Verfahrensschritte
mit der Herstellung verbunden sind, entstehen daher nur mäßige Herstellungskosten.
Die obenbeschriebene Zusammensetzung ist zwar vorzuziehen, jedoch kann der Bereich des pH-Werts und der Osmolalität zu geeigneten
Zwecken weiter gefaßt werden. Der pH-Wert kann also zwischen 7»2
und 7,6 liegen. Ebenso kann die Osmolalität im Bereich zwischen 316 und 330 Ililliosmol festgelegt werden. Dies wird durch entsprechende
Veränderung der wirksamen Bestandteile erreicht.
Die erwähnten Vorteile des erfindungsgemäßen Blutverdünnungsmittels
gehen über den Inhalt der US-PS 3 962 125 hinaus und unterscheiden
sich davo.n insbesondere insoweit als sich das Verdünnungsmittel besonders für die Verwendung in elektronischen Teilchenuntersuchungsgeräten
eignet, wie sie allgemein von Coulter Electronics, Inc., Hialeah, Florida hergestellt werden. Langfristige Prüfungen der
Stabilität des erfindungsgemäßen Verdünnungsmittels haben kein mikrobielles Wachstum ergeben, und es wurde keine Detergenswirkung
festgestellt, die ihrerseits zu störender Bläschenbildung führen
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würde. Ebenso wurde keine nachteilige Beeinflussung der Geräteteile
festgestellt.
Das erfindungsgemäße Verdünnungsmittel läßt sich zur Verwendung in der Veterinärmedizin wie folgt anpassen:
a) die Menge an wasserfreiem Natriumchlorid wird auf 3,75 g/l reduziert,
b) der pH-Wert wird durch einen geeigneten Puffer, z.B. ein Phosphatsalz,
auf 7,0 "bis 7,6 eingestellt,
c) die Osmolalität wird auf 285-300 Hilliosmol/kg gehalten.
Patentanwälte DIpI.-Ing^?. Eder
Dip!.-Ing. &
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Claims (8)
1. /Azidfreies Mehrzweck-Blutverdünnungsmittel zur Verwendung bei
der elektronischen Zählung und Größenbestimmung von Blutkörperchen, zur Bestimmung der Hämoglobinkonzentration und
der Blutgesamtwerte sowie der Blutplättchenkennv/erte in einer einzelnen Blutprobe mittels elektronischer Geräte, gekennzeichnet
durch eine auf das osmotische Gleichgewicht eingestellte
Lösung aus Natriumchlorid, einem einbasigen Fhosphatsalz, einem zweibasigen Phosphatsalz und Natriumsulfat, ,
durch ein Hydroxychinolin enthaltendes bakteriostatisches Mittel,
durch eine Hydrochloridverbindung aus der Gruppe anästhetischer Verbindungen, welche sich mit dem bakteriostatischen
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Mittel verträgt und die Morphologie der roten Blutkörperchen während des Gerätebetriebs aufrechterhält,
wobei das Verdünnungsmittel aus einer wäßrigen Elektrolytlösung besteht, deren pH-Wert und Osmolalität innerhalb eines
ausgewählten Bereichs gehalten wird.
2. Blutverdünnungsmittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das bakteriostatische Mittel aus einer Verbindung aus der
Gruppe 8-Hydroxychinolin, 8-Hydroxychinolincitrat, 8-Hydroxychinaldin,
8-Hydroxy-5-nitrochinolin und 8-Hydroxychinolin-5-sulfonsäuredihydrat besteht.
3. Blutverdünnungsmittel nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet,
daß die Hydrochloridverbindung aus der Gruppe der Anästhetika bestehend aus Novocainhydrochlorid, Methohexital-Natriumbarbiturat,
Mepivacainhydrochlorid und Lidocainhydrochlorid gewählt wird.
M-. Blutverdünnungsmittel nach Anspruch 1, 2 oder 3>
dadurch gekennzeichnet, daß der pH-Wert zwischen 7»2 und 7 »6 liegt.
5. Blutverdünnungsmittel nach einem der Ansprüche 1-4, dadurch
gekennzeichnet, daß die Osmolalität im Basich zwischen 316 und
330 Milliosmol liegt.
6. Blutverdünnungsmittel nach einem der Ansprüche 1-5» dadurch gekennzeichnet, daß die Phosphatsalze Natriumphosphatsalze sind.
7· Blutverdünnungsmittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß das bakteriostatische Mittel aus 8-Chinolinol besteht.
8. Blutverdünnungsmittel nach Anspruch 7» dadurch gekennzeichnet,
daß die Hydrochloridverbindung aus Novocainhydrochlorid besteht.
Patentanwalt» /^
Dipl. -Ing.JÖ Edo r
Dlpi.-mg. ^fci
030010/0822
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