DE2901046B2

DE2901046B2 - Taurinderivate, Verfahren für deren Herstellung und pharmazeutische Präparate, die sie enthalten

Info

Publication number: DE2901046B2
Application number: DE2901046A
Authority: DE
Inventors: Vittorio Edilnord Cigni-Brugherio Camboni; Raffaele Milano Passoni
Original assignee: LABORATORIO CHIMICO FARMACEUTICO CAUSYTH SpA MILANO IT
Current assignee: LABORATORIO CHIMICO FARMACEUTICO CAUSYTH SpA MILANO IT
Priority date: 1978-06-15
Filing date: 1979-01-12
Publication date: 1981-07-16
Also published as: DE2901046A1; FR2511365A1; DE2901046C3; LU81379A1; JPS6133171A; FR2465717A1; FR2511365B1; IT1096662B; JPS554381A; GB2023586B; ES482483A1; JPS5943942B2; BE876969A; NL7904644A; ES476812A1; ES482484A1; IT7824587A0; GB2023586A

Description

to

worin R und R' den Acylrest der Nicotinsäure, der 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure oder der Acetylsali- 15 cylsäure darstellen, und wobei R' auch den Rest

-CH₂-CH₂-O-R

darstellen kann, worin R die genannte Bedeutung hat, und deren Salze. 20

2. N-NicotinoyJ-N-^-nicotinoyloxyJäthyl-taurin, und deren Salze.

3. N,N-Di[2-{3,4,5-trimethoxybenzoyloxy)äthyl]-taurin, und deren Salze.

4. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen 25 der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise

a) Monoäthanoltaurin der Formel II

in Anwesenheit eines Säureakzeptors umsetzt :uid das erhaltene Zwischenprodukt gemäß a) acyliert, oder

c) eine Verbindung der obengenannten Formel V redt einem Salz eines Di-(/f-Acyloxy)-äthylamins der allgemeinen Formel VIII

NH(CH₂CH₂OR)₂ (Vm)

worin R die obige Bedeutung hat,

in Anwesenheit eines Säureakzeptors umsetzt, oder

d) ein Taurinsalz mit einer Verbindung der allgemeinen Formel IX

CH₂X
CH₂OR

(IX)

worin R und X die obigen Bedeutungen haben, umsetzt

5. Pharmazeutisches Präparat mit antilipämischer und/oder choleretischer Wirkung, enthaltend eine oder mehrere Verbindungen gemäß Ansprüchen 1 bis 3 als Wirkstoff.

CH₂-CH₂OH

CH,—N

H
CH₂-SO₃H

oder Diäthanoltaurin der Formel III

CH₂-CH₂OH

/
CH₂-N

CH₂-CH₂OH CH₂-SO₃H

(II)

30

35 Gegenstand der Erfindung sind Taurinderivate der allgemeinen Formel I

CH₂-CH₂-O

-R

CH₂-N

(III)

45

mit einem aktivierten Derivat der Nicotinsäure, de 3,4,5-Trimetoxybenzoesäure oder der Ace- 50 tylsalicylsäure der allgemeinen Formel IV

R-X (IV)

worin R die obige Bedeutung hat und X ein Halogenatom, einen Alkoxyrest oder einen 55 Alkoxycarbonyloxyrest darstellt, umsetzt, oder b) eine Verbindung der allgemeinen Formel V

R'
CH₂-SO₃H

worin R und R' den Acylrest der Nicotinsäure, der 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure oder der Acetylsalicylsäure darstellen, und wobei R' auch den Rest

-CH2-CH2-O-R

darstellen kann, worin R die genannte Bedeutung hat, und deren Salze.

Die Erfindung betrifft außerdem Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I. Eines dieser Verfahren besteht darin, daß das Monoäthanoltaurin II oder das Diäthanoltaurin IH mit einem aktivierten Derivat IV (Halogenid, Ester, gemischtes Anhydrid) der Nicotinsäure, der 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure oder der Acetylsalicylsäure nach dem folgenden Schema umgesetzt werden:

CH₂-CH₂OH
CH₂-N +2R-X (II)

CH₂-Y
CH₂SO₃Na

(V)

60

worin Y eine austretende Gruppe darstellt, mit ienem Salz eines /J-Acyloxyäthylamin der allgemeinen Formel VI 65

H₂N-CH₂CH₂OR
worin R die obige Bedeutung hat,

(Vl)

H
CH₂-SO₃H

CH₂—CH₂O — R

/
CH₂-N (IV)

\ R

CH₂-SO₃H

CH₂-CH₂OH

CH₂-N +2R-X (IU)

1 \

j CH₂-CH₂OH

CH₂—SOjH

(V) + HCl NH(CH₂CH₂OR)₂
(VIE)

C₂H₅ONa .

CH₂-N

4
\

CH₂-CH₂O-R

10

(IV)

CH₂-N(CH₂CH₂OR)₂

CH₂SO₃Na
G)

CH₂-CH₂O-R CH₂-SO₃H

worin R die obengenannte Bedeutung hat und X ein Halogenatom (vorzugsweise Chlor) oder einen Alkexyrest (wie Methoxy, Athoxy) oder einer

einen Alkoxy-carbo-

nyloxyrest (vorzugsweise den Rest

-O-CO-OC2H5)

darstellt

Die obengenannten Reaktionen werden unter den 25 Bedingungen durchgeführt, die im allgemeinen für die Acylierungen von Verbindungen mit Alkohol- und/oder Amincharakter angewendet werden. _>

In dem häufigsten Fall, wenn X ein Chlor atom darstellt, wird zum Beispiel die Acylierung in Anwesenheit einer tertiären Base wie Triäthylamin oder Pyridin durchgeführt

Nach einem weiteren Herstellungsverfahren läßt man wobei R und eine Verbindung der allgemeinen Formel V mit dem besitzen. Chlorid (oder mit einem anderen Saiz) eines jS-Acyloxy- J5 äthylamins der allgemeinen Formel VI in Anwesenheit eines Säureakzeptors, z. B. Natriumäthanolat, reagieren. Das so erhaltene Zwischenprodukt (VII) kann dann am Stickstoff mit einem aktivierten Derivat (IV) acyliert werden. Auf ähnliche Weise kann man Verbindungen 40 der Formel (V) mit einem Chlorid (oder mit einem anderen Salz) eines Di-(/?-Acyloxy)äthylamins (VIII) in Anwesenheit eines Säureakzeptors, z. B. Natriumäthanolat, reagieren lassen. Das Verfahren wird im folgenden Schema dargestellt: 45

CH₂-Y

I + HCI · H₂N-CH₂CH₂OR

CH₂SO₃Na

wobei R und X die obengenannten Bedeutungen besitzen, während Y eine austretende Gruppe, z. B. Chlor, Brom oder o-Tosylat ist

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I können auch durch Reaktion des Taurinnatriumsalzes mit einer Verbindung der allgemeinen Formel IX nach folgendem Schema erhalten werden:

CH₂NH₂ CH₂X

I +2 I

CH₂SO₃Na CH₂OR

(IX)

CH₂N(CH₂CH₂OR)₂

CH₂SO₃Na

(D
X die obenerwähnten Bedeutungen

Beispiel 1

N-Nicotinoyl-N-(2-nicotinoyloxy)äthyltaurin
(Formel I, mit

R = R'

CO

a) N-(2-Hydroxy)äthyltaurin (Formel II)

(V)

C₂H₅ONa

(VI)

CH₂—NH- CH₂CH₂OR

CH₂SO₃Na

(VII)

CH₂CH₂OR

Eine Lösung von 315 g Bromoäthanolsulfonatnatrium (Organic Synthesis, .Vol. Coll. II, S. 558) und 450 g Äthanolamin in 2 1 Wasser wird 30 Minuten lang auf 60-70⁰C erwärmt. Das Wasser und das sich im Überschuß befindliche Äthanolamin werden dann unter vermindertem Druck abdestilliert, und der Rest wird in 250 - 270 ml Wasser gelöst. Es werden 2,2 1 konzentrierte Salzsäure hinzugefügt, und die Lösung wird dann 15-20 Stunden lang im Kühlschrank aufbewahrt. Das ausgefallene Natriumchlorid wird abgesaugt, und die Lösung wird wieder konzentriert, bis ein viskoses Öl erhalten wird, das mit 60 ml Wasser verdünnt wird. Dann wird Äthanol (ca. 500 ml) hinzugefügt, um das Reaktionsprodukt auszufällen. Nach einer Nacht im Kühlschrank ist die Ausfällung fast vollständig. Das erhaltene Produkt wird abgesaugt. Es werden ca. 130-14Og eines kristallinen Stoffes erhalten. F. 180-183⁰C.

65 Elementaranalyse:

ber.: C = 28,40; H = 6,60%;
gef.: C = 28,70; H = 6,70%.

29 Ol 046

b) N-Nicotinoyl-N-(2-nicoüiioyloxy)äthyltaurin

35 g des nach a) erhaltenen N-(2-Hydroxy)äthaltaurin werden in 100 ml Pyridin eingegeben. Langsam und unter Rühren werden dann 75 g fein pulverisiertes Nicotinoytehlorid-chlorid zugefügt Die Temperatur steigt von selbst, sie soll jed&ch 80-85° C nicht übersteigen. Wenn die Temperatur zu sinken beginnt wird die Lösung eine Stunde lang auf 80—85° C erwärmt und anschließend abgekühlt Die viskose Lösung wird mit 105 ml Äthanol verdünnt, der pH wird durch Hinzufügen von konzentrierter Salzsäure auf 3,5 gebracht Es werden weitere 500 ml Äthanol hinzugefügt, und die Lösung wird im Kühlschrank aufbewahrt Nach 24 Stunden wird das gewünschte Produkt abgesaugt Es werden ca. 50 g N-NicotinoyI-N-(2-nicotinoyloxy)äthyltaurin mit dem Schmelzpunkt 175—176° C erhalten. Das Produkt kann durch Auflösung in einer geringen Wassermenge und durch erneute Ausfällung mit Äthanol gereinigt werden.

Elementaranalyse:
ber.: C = 50,65; H = 4,52%;
gef.: C = 50,82; H =4,48%.

Die durch IR-Spektroskopie und durch NMR erzielten Daten bestätigen die Natur des erhaltenen Produktes.

Beispiel 2

N,N-Di[2-(3,4,5-trimethoxybenzoyloxy)äthyl]-taurin (Formel I, mit R = 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure und

OCH,

-CH₂

-CH₂—O — C

OCH,

OCH₃

oxybenzoechlorid hinzugefügt Nach einer Stunde Stehen bei Raumtemperatur wird die Mischung eine weitere Stunde auf 80° C erwärmt Dann wird auf Raumtemperatur gekühlt mit 50 ml Äthanol verdünnt '. und im Kühlschrank aulbewahrt Dabei fällt eine farblose kristalline Verbindung, die bei 174-178° C schmilzt Nach Umkristallisation aus Methanol steigt der Schmelzpunkt auf 180-183⁰C Die Ausbeute beträgt 11,5 g reines Produkt

Elementaranalyse:

a) N,N-di(2-hydroxy)äthyltaurin (Formel III)

Eine Lösung von 90 g Bromoäthansulfonatnatrium (Organic Synthesis, Vol. Coll. II, S. 558) und 110 g Äthanolamin in 1500 ml Wasser wird ca. 2 Stunden lang im Dampfbad erwärmt. Die Reaktionsmischung wird über Nacht aufbewahrt. Das Wasser und das im Überschuß vorhandene Diäthanolamin werden dann unter vermindertem Druck destilliert. Der Rest wird mit 100 ml Wasser und 800 ml konzentrierter Salzsäure wieder aufgenommen. Die Lösung wird abgekühlt und vom Natriumchlorid abfiltriert. Dann wird unter vermindertem Druck konzentriert, bis ein öl erhalten wird, das mit heißem Äthanol wieder aufgenommen wird. Durch Kühlung wird ein kristallines Produkt erhalten mit dem Schmelzpunkt 163-165° C, das aus Äthanol und Wasser umkristallisiert werden kann. Es werden 16 g Substanz erhalten, deren analytische und spektroskopische Daten mit den vorgesehenen Daten übereinstimmen.

ber.: C = 51,91;H = 5,82;N=232%;
gef.: C = 52,07; H = 5,88; N = 2^6%.

Beispiel 3
N-Nicotinoyl-N-{2-nicotinoyloxy)äthyltaurin

Eine Lösung von 220 g Taurinnatriumsalz, 90 g Bariumhydroxid und 70 g Äthylenoxid in 900 ml Wasser wird 96 Stunden lang bei 10° C gehalten. Anschließend wird mit verdünnter H2SO4 das Barium ausgefällt Es wird filtriert und unter vermindertem Druck bis auf ca. 200 ml konzentriert Dann werden 1,8 1 konzentrierte HCl zugefügt. Das ausgefallene Natriumchlorid wird filtriert, und es wird unter vermindertem Druck bis zu einer sirupartigen Konsistenz eingeengt Durch Hinzufügen von Äthylalkohol wird eine Ausfällung mit Schmelzpunkt 180 —183° C erhalten, die dem nach dem Beispiel 1 a) erhaltenen Produkt entspricht

Wenn dieses nach dem im Beispiel Ib) beschriebenen Verfahren umgesetzt wird, wird das N-Nicotinoyl-N-(2-nicotinoyloxy)äthyltaurin mit dem Schmelzpunkt 175-176° C erhalten, das dem im Beispiel Ib) erhaltenen Produkt entspricht

Beispiel 4

N,N-Di-[2-(3,4,5-trimethoxybenzoyloxy)-äthyl]-taurin

Eine Lösung von 12 g Taurinnatriumsalz, 10 g Bariumhydroxid und 8 g Äthylenoxid in 100 ml Wasser wird 96 Stunden lang bei 10°C gehalten. Anschließend wird das Barium mit verdünnter H2SO4 ausgefällt. Es wird filtriert und unter vermindertem Druck bis auf ca. 50 ml konzentriert. Dann wird ungefähr 1 I konzentrierte HCl zugefügt. Die entstandene Ausfällung wird filtriert und unter vermindertem Druck bis zu einer sirupartigen Konsistenz eingeengt. Dann wird mit heißem Äthanol wieder aufgenommen und abgekühlt. Die erhaltene Ausfällung wird filtriert und aus 80%igem Äthanol umkristallisiert. F. 163-165°C. Das Produkt stimmt mit dem nach dem Beispiel 2a) erhaltenen Produkt überein.

Wenn mit diesem Produkt nach dem im Beispiel 2b) beschriebenen Verfahren vorgegangen wird, wird das

N,N-Di-[2-(3,4,5-trimethoxybenzoyloxy)äthyl]taurin, Schmelzpunkt 178-182° C, erhalten, das dem nach dem Beispiel 2b) erhaltenen Produkt entspricht

b) N,N-Di[2-(3,4,5-trimethoxybenzoyloxy)äthyl]-taurin

Es werden 8,5 g des in Beispiel 2a) erhaltenen Produkts in 25 ml wasserfreiem Pyridin suspendiert, und es werden langsam unter Rühren 18,4 g 3,4,5-Trimeth-Bei spiel 5
N-(Nicotinoyl)-N-(2-nicotinoyloxy)äthyl-taurin

Eine Mischung von 98 g Cholaminhydrochlorid, 2 1 Dimethoxyäthan und 180 g Nicotinoylchlorid-chlorid

wird eine Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die im Überschuß vorhandene HCI wird unter einem Stickstoffstrom entfernt. Dann wird unter vermindertem Druck eingedampft und in 3 I wasserfreiem Äthylalkohol wieder aufgelöst. Es werden 140 g Natriumäthyiat in 1 1 absolutem Alkohol und danach 210 g Bromoäthansulfonatnatrium zugefügt. Dann werden noch 170 g KJ zugefügt und 120 Stunden lang bei Raumtemperatur stehengelassen.

Es wird unter vermindertem Druck eingedampft. Dann werden 750 ml Pyridin und anschließend langsam und unter Rühren 180 g Nicotinylchlorid-chlorid zugefügt. Die Masse wird dabei abgekühlt, damit 80⁰C nicht überschritten werden. Dann wird IV2 Stunden lang erwärmt und danach gekühlt. Mit 0,5 1 Äthanol wird verdünnt, mit konzentrierter HCi bis auf pH 3,5 angesäuert, und es werden weitere 2,51 Äthanol hinzugefügt. Das Produkt mit dem Schmelzpunkt 174 —176° C wird filtriert. Es entspricht dem nach Beispiel 1 erhaltenen N-Nicotinoyl-N-(2-nicotinoyloxy)äthyltaurin.

Beispiele

N,N-Di-[2-(3,4,5-trimethoxybenzoyloxy)-äthylJ-taurin

Eine Mischung von 14 g Diäthanolaminchlorid, 200 ml id Dimethoxyäthan und 47 g 3,4,5-Trimethoxybenzoechlorid wird eine Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die im Oberschuß vorhandene HCl wird unter einem Stickstoffstrom entfernt; dabei wird unter vermindertem Druck eingedampft. Dann wird in 300 ml wasserfreiem Äthylalkohol wieder aufgenommen. Es werden 14 g Natriumäthyiat in 200 ml absolutem Alkohol zugefügt. Dabei wird gekühlt. Anschließend werden 21 g Bromoäthanolsulfonatnatrium und 1,7 g Kaliumiodid hinzugefügt. Nach 21 Stunden bei Raumtemperatur werden die anorganischen Salze abfiltriert, und es wird unter vermindertem Druck zu einem kleinen Volumen konzentriert.

Es wird eine Nacht lang aufbewahrt. Danach wird filtriert und aus Methanol umkristallisiert. Das Produkt besitzt einen Schmelzpunkt von 179—182 und entspricht dem nach Beispiel 2 erhaltenen Produkt.

Beispiel 7
N-(Nicotinoyl)-N-(2-nicotinoyloxy)äthyl-taurin

Zu 44 g Äthylenoxyd in 200 ml Tetrachlorkohlenstoff werden bei 0⁰C 180 g Nicotinoylchlorid-chlorid in kleinen Anteilen zugefügt Es wird 6 Stunden lang gerührt Dann wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck eingedampft und es wird mit 11 Dimethoxyäthan wieder aufgenommen. Es werden 150 g Taurinnatriumsalz und 1,5 g Kaliumiodid zugefügt Danach wird 96 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt Es wird unter vermindertem Druck eingedampft Dann werden langsam und unter Rühren 750 ml Pyridin und dann 180 g Nicotinoylchlorid-chlorid in kleinen Anteilen zugefügt Es wird 2 Standen lang auf 80° C erwärmt und dann gekühlt Dann werden 041 Äthanol hinzugefügt Mit konzentrierter HCI wird auf pH 33 angesäuert und es werden weitere 2,5 1 Äthanol zugefügt. Nach einigen Stunden Ruhe wird das ausgefällte Produkt filtriert. R 175-176° C. Das Produkt entspricht dem im Beispiel 1 erhaltenen Produkt.

Beispiel 8

N-N- Di-[2-(3,4,5-Trimet hoxybenzoyloxy)äthyl]-taurin

Zu 44 g Äthylenoxyd in 200 ml Tetrachlorkohlenstoff werden bei O⁰C 180 g Nicotinoylchlorid-chlorid in kleinen Anteilen zugefügt. Es wird 6 Stunden lang gerührt. Dann wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck eingedampft, und es wird mit einem Liter Dimethoxyäthan wieder aufgenommen. Es werden 75 g Taurinnatriumsalz und 1,5 g Kaliumiodid hinzugefügt. Danach wird 120 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Dann wird unter vermindertem Druck eingedampft. 100 ml Pyridin werden zugefügt, und es wird mit 300 ml Äthanol verdünnt. Der erhaltene Feststoff wird filtriert. Durch Umkristallisation aus Methanol wird ein Produkt mit dem Schmelzpunkt 179-182° C erhalten, das dem nach Beispiel 2 erhaltenen Produkt entspricht.

Die Verbindungen gemäß der Erfindung besitzen interessante pharmakologische Eigenschaften. Diese Eigenschaften werden beispielshalber für einige Produkte beschrieben.

Pharmakologische Eigenschaften des N-Nicotinoyl-N-(2-nicotinoyloxy)äthyl-taurin (Verbindung A)

Toxikologie
180 Tage lang geführte Behandlung

Mäuse beider Geschlechter wurden auf oralem Wege 180 Tage lang mit 200 mg/kg der Verbindung A behandelt. Es wurden weder Letalitätsfälle noch bedeutende Änderungen in der Gewichtszuwachskurve im Vergleich zu den Konlrolltieren festgestellt

Pharmakologie
Gefäßerweiternde Wirkung

Die Verbindung A wurde im Vergleich zu der Mischung aus N-Hydroxyäthyltaurin und Nicotinsäure untersucht sowie im Vergleich zur Nicotinsäure, zu Mesoinosithexanicotinat und zu 3-Pyridincarbinoltartrat.

Die gefäßerweiternde Wirkung wurde geprüft indem die Produkte auf endoperitoitealem Wege mit den in der Tabelle 1 aufgeführten Dosen verabreicht wurden. Test zur Untersuchung der Gefäßerweiterung der Bindehaut beim Meerschweinchen (J. PharmacoL, 21,192 -1969).

Jeder Wert stellt den Durchschnittswert von 10 Messungen dar.

Durch die Resultate wird nachgewiesen, daß die Verbindung A eine im Vergleich zum Pyridilcarbinol höhere Wirkung aufweist und zwar sowohl was die Anzahl der Effekte, als auch was die Wirkungsdauer betrifft Es ist interessant zu bemerken, daß die Mischung aus N-Hydroxyäthyl-taurin und Nicotinsäure keine Wirkung besitzt, so daß eine verschiedene Pharmakokinetik erkennbar ist

	Tabelle 1	mg/kg	29 01 046	0	Jl	Effekt	D	Dauer in min
9	Produkt			80		Zeitpunkt des		ausgedrückt
			100	Erscheinens in
		Positive Effekte,	0	see ausgedrückt	0
	r 0,1	%	0	0	120
	1,0		20	90	120
A	[ιο,ο		80	96	0
	10,0	0	0	0
Mischung*)	10,0	0	0	=
Nicotinsäure	25,0	100	=	87
	50,0	0	180	0
	0,1	40	0	0
Mesoinosit-	1,0	100	0	87
hexanicotinat	10,0		81	0
	0,1	0	=
3-Pyridilcarbinol-	1,0	=	120
tartrat	10,0	57

*) N-Hydroxyäthyltaurin + Nicotinsäure.

Choleretische Wirkung

Die von der Verbindung A ausgeübte Wirkung wurde im Vergleich zur Wirkung des N-Hydroxyäthyltaurins, der Nicotinsäure, der aus diesen 2 Verbindungen bestehenden Mischung und der «-(l-Hydroxy-4-phenylcyclohexyl)buttersäure, die ein bekannter Leberschutzstoff ist (Verbindung C), geprüft. Die Verabreichung der verschiedenen Produkte erfolgte auf intravenösem Wege mit der Dosis von 100 mg/kg.

Die Ratten werden intubiert. das Gallenvolumen wird nach der ersten Stunde gemessen, die Ratten werden dann mit den Produkten behandelt, und das Gallenvolumen wird nach der 2. Stunde gemessen, um die prozentmäßige Änderung zu ermitteln.

Aus der Tabelle 2 ist die choleretische Wirkung der Verbindung A ersichtlich, die praktisch bei den einzelnen Bestandteilen und bei der Mischung mit denselben Dosen nicht vorhanden ist.

Im Vergleich zur Verbindung C ergibt sich eine

geringere Erhöhung des Gallenvolumens, jedoch ein gleicher Zuwachs des Trockenrückstandes. Deshalb besitzt das Produkt keine hydrocholeretische, sondern eine echte choleretische Eigenschaft.

Auch in diesem Fall ist die Pharmakokinetik der Verbindung A anders als die Pharmakokinetik der Bestandteile der Mischung.

Tabelle 2

Verbindung

N-Hydroxyäthyltaurin

Nicotinsäure

Mischung

Volumen Galle ml/h Änderung 1. Std. 2. Std. %

Trockenrückstand mg/h Änderung
1. Std. 2. Std. %

0,82

0,72

-12,2 29,1

26,0

-10,9

0,57	0,54	- 5,3	21,7	20,6	- 5,7
0,83	0,88	+ 6,0	30,0	29,1	- 4,2
0,75	1,44	+ 52,0	25,7	35,3	+ 40,0
0,60	1,14	+ 90,0	23,5	32,7	+ 39,1

Schutz vor Lebervergiftung mit CCU in kaltem Zustand

Orale Verabreichung von 5 ml/kg einer 20%igen CCU-Lösung in öl und anschließend 5 Stunden bei 4° C Gleichzeitig mit dem CCl₄ werden 500 mg/kg der Verbindung A verabreicht BSF-Test im Blut Durch-

60

schnitt von 20 Tieren je Gruppe.

Im Vergleich zu den Kontrolltieren ergibt sich eine Verminderung um 16%.

Antflipämische Wirkung

Wistar-Ratten werden 50 Tage lang mit Morris- oder mit Handlerdiät behandelt Gleichzeitig mit der Diät erhielten die Ratten jeden Tag 200 mg/kg der Verbindung A oder des Chofins. Die Kontrolltiere erhielten nur die Diät Am Schluß der Behandlung wurde folgendes geprüft: a) im Serum: Gesamtcholesterin, Gesamtiipide und Beta-lipoproteine; b) in der Galle: die Exkretion der BSF.

Die in der Tabelle 3 aufgeführten Ergebnisse werden im Vergleich zu den Kontrolltieren in Form von prozentmäßiger Änderung ausgedrückt. Jeder Wert

stellt den von 10 Tieren erhaltenen Durchschnittswert dar.

Tabelle 3

Parameter

Morrisdiät A

Cholin

Handlerdiät
A

Cholin

a) Serum

Gesamtcholesterin -14,3 - 22,9

Gesamtlipide -17,0 + 2,3

Beta-Lipoproteine - 34,3 + 89,8

b) Galle

BSF +23,5 - 2,8

-26,9 -21,1

-19,6 +44,2

- 28,9

+ 36,0

-39,5

Es ergibt sich eine deutliche antilipämische Wirkung mit den verwendeten Diäten, die Aufschluß über eine gute orale Absorption gibt

25

Pharmakologische Eigenschaften des

N,N-di-[2-(3,4,5-Trimethoxybenzoyloxy)äthyl]-taurin

(Verbindung B)

Toxikologie
180 Tage lang dauernde Behandlung

Mäuse beider Geschlechter wurden 180 Tage lang mit 200 mg/kg der Verbindung B auf oralem Wege behandelt Es wurden weder Letalitätsfälle, noch bedeutende Änderungen bei der Gewichtszuwachskurve im Vergleich zu den Kontrolltieren festgestellt.

PHARMAKOLOGIE

Schutz bei Lebervergiftung mit CCU
in kaltem Zustand

Orale Verabreichung von 5 ml/kg einer 20%igen Lösung von CCU in öl und gleichzeitige Verabreichung von 500 mg/kg der Verbindung B auf endoperitonealem Wege. Danach 5 Stunden bei 4° C BSF-Test (50 mg/kg i. v.) im Blut

Vergleichsprodukt: Homozysteinathiolakton (OCT).

10 Tiere je Gruppe. Die Ergebnisse wurden in Form von prozentmäßiger Änderung im Vergleich zu den Kontrolltieren ausgedrückt

1. Probe:	-27,5
OCT =	-22,7
B
2. Probe:	-17,0
OCT =	-18,5
B

BSF-Gallenexkretion

Verabreichung der Verbindung B 100 mg/kg auf endoperitonealem Wege für die Dauer von 4 Tagen. Am 4. Tag, eine Stunde nach der letzten Verabreichung, erhielten die Ratten auf oralem Wege 10 ml/kg einer 10%igen Lösung von CCU in ÖL BSF-Test (5 mg/kg) in der Gaue.

10 Tiere je Gruppe; die Ergebnisse wurden in prozentmäßigen Werten des Exkrets ausgedrückt

Kontrolltiere = 56,6 (30')-66,0 (60')
CCl₄ = 33,1 (30')-43,9 (60')

CCU+ B = 44,1 (30')-50,9 (60')

Heilende Wirkung bei der Vergiftung mit CCU

Orale Verabreichung von 10 ml/kg einer 10%igen

Lösung von CCU in öl. Nach einer Stunde erhielten die Ratten 100 mg/kg der Verbindung B auf endoperitonealern Wege. 4 Stunden danach: BSF-Test (50 mg/kg i. v.)

im Blut.

5 Tiere je Gruppe; die Ergebnisse wurden in Form prozentmäßiger Änderung im Vergleich zu den Kontrolltieren ausgedrückt

B= -34,2.

40 Vergiftung mit CCU und heilende Behandlung

Am ersten Tag orale Vrabreichung von 10 ml/kg

einer 10%igen Lösung von CCU in öl und gleichzeitige Verabreichung von 100 mg/kg der Verbindung B auf endoperitonealem Wege.

Am 2. und am 3. Tag Verabreichung von 100 nig/kg

so der Verbindung B auf endoperitonealem Wege, danach BSF-Test (50 mg/kg i. v.) im Blut

5 Tiere je Gruppe; die Ergebnisse wurden in Form von prozentmäßiger Änderung im Vergleich zu den Kontrolltieren ausgedrückt

55 B=-26,1.

Antilipämische Wirkung

Wistar-Ratten wurden 45 Tage lang mit Morris-oder Handler- oder auch mit Nath-Diät behandelt Gleichzeitig mit der Diät erhielten sie jeden Tag 200 mg/kg der Verbindung B oder Cholin (ausgenommen bei der Nath-Diät) auf oralem Wege. Die Kontrolltiere erhielten nur die Diät

10 Tiere je Gruppe;_die Ergebnisse wurdfen in Form von prozentmäßiger Änderung im Vergleich zu den Kontrolltieren ausgedrückt.

13

29 Ol 046

Tabelle 4

Parameter

Handler-Diät B B

Cholin

Nath-Diät Morris-Diät

B B Cholin

a) Serum

Gesamtcholesterin - 6,3
Gesamtlipide -15,9

Beta-Lipoproteine

b) Leber

Gesamtlipide - 37,7

Gewicht des - 24,9

frischen Organs

c) Galle
BSF

- 7,3 + 9,1

-29,1 -13,3

-21,1 + 44,2

-35,2
■20,6
-29,7

- 29,2 - 23,4

+ 23,4 - 39,5

-23,2 -22,4 -23,7

-11,5

+ 23,8

-22,9 + 2,3 + 89,8

+ 14,0

- 2,8

Es ergibt sich eine deutliche, mit den verwendeten Diäten erreichte antilipämische Wirkung, die unter anderem Aufschluß über eine gute orale Absorption gibt.

Beispiel 9
(a) Herstellung von N.N-DiiacetylsalicyloyloxyäthylJtaurin

Die erfindungsgemäße Verbindung N,N-Di(acetylsalicyloyloxyäthyl)taurin (nachfolgend abgekürzt als »AST« bezeichnet) hat die Formel

CH₁COO

CH₂CH₂OCO

CH,N

CH₂CH₂OCO CH₂SO₃H

CH₁COO

und sie weist überraschenderweise wertvolle anti-inflammatorische, analgetische und antipyretische Eigenschäften auf.
Sie kann hergestellt werden durch Umsetzung von

Diäthanoltaurin mit einem aktivierten Derivat (beispielsweise einem Halogenid, Ester oder gemischten Anhydrid) der Acetylsalicylsäure entsprechend der w Gleichung

CH.CH.OH CH₂N +

CH₂CH₂OH CH₂SO₃H

COX

OCOCH₃

AST

worin X eine aktivierende Gruppe bedeutet.

Beispiele für andere geeignete Herstellungsverfahren sind folgende:

CH₂Y I CH₂SO₃M

+ HZ-NH₂ —CH₂CH₂OOC

CH₃COO

AST(M-SaIz)

15 16

worin Y eine austretende Gruppe, M ein Kaiion und / ein Anion bedeuten und

CH₂SO₃M

AST(M-SaIz)

CH₃COO

worin M und Y die oben angegebenen Bedeutungen haben.

Die AST-Salze können unter Anwendung üblicher Verfahren leicht in die freie Säure überführt werden und umgekehrt

Acetylsalicyloylchlorid wurde langsam zu 35,7 g gerührtem Diäthanoltaurin in 350 ml wasserfreiem Pyridin bei Raumtemperatur zugegeben, bis die Reaktionsmischung braun wurde (80 g). Nach weiterem

1 stündigem Rühren wurde die Reaktionsmischung mit

2 I Äthanol verdünnt und in einem Kühlschrank gekühlt Das Produkt kristallisierte nur schwer aus und es war schließlich erforderlich, die Wände des Gefäßes energisch zu reiben. Das kristallisierte Produkt wurde abfiltriert und wiederholt aus Aceton (oder Äthanol) umkristallisiert, bis die Lachsfarbe, die den ursprünglichen Niederschlag begleitete, veschwunden war. Auf diese Weise erhielt man 40 g N.N-Diiacetylsalicyloyloxyäthyl)taurin, F. 185 bis 188° C.

Elementaranalyse:
gef.: C = 53,75; H = 5,08; N = 2,60%;
ber.: C = 53,64; H =5,02; N = 2,61%.

NMR in C5D5N/D2O: δ 2,60 (s, CH₃COO-); 3,03 (t, J =6 Hz, -N(CH₂-)₂); 3,43 (s, -SCH₂CH₂N-); 4,42 (t, J=6Hz, -CH₂O-);7-8(m,ArH).

IR in Nujol, A_ma< 2800, 1750, 1715, 1600, 1450. 1370. 1250,1185,1170,1080,1020,910, 740 cm-'.

(b) Pharmakologische Eigenschaften

des erfindungsgemäßen
N,N-Di(acetylsalicyloy!oxyäthyl)taurins(AST)

Pharmaco-toxicologische Versuche, die mit Versuchstieren durchgeführt wurden, zeigten_: daß AST ausgeprägte antiinflammatorische, analgetische und antipyretische Eigenschaften aufwies, verglichen mit denjenigen der Acetylsalicylsäure. Außerdem war die untersuchte Verbindung weniger toxisch als Acetylsalicylsäure, führte zu keiner merklichen Magenschädigung und wies eine breitere pharmacodynamische Aktivität auf.

Akute Toxizität

Mäusen und Ratten wurden die untersuchten Verbindungen AST und ASA (Acetylsaücylsäure) oral, subcutan, intraperitoneal und intravenös verabreicht. Im Falle der oralen Verabreichung wurde das Produkt in der Säureform, suspendiert in einer wäßrigen Lösung von Carboxymethylcellulose, verwendet, während im Falle der parenteralen Verabreichung es durch Überführen in ein Salz mittels Natriumhydroxid in einer physiologischen Lösung mit einem neutralen End-pH-Wert löslich gemacht wurde. Die dabei erzielten Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 5 angegeben zusammen mit den Literaturwerten für ASA.

Wo dies möglich war. wurden die Werte für die LDw errechnet unter Anwendung der Probit-Methode; wenn auch bei sehr hohen Dosen keine Mortalität festgestell wurde, ist die untersuchte maximale Dosis angegeben.

Tabelle 5

Versuchstier	15	Maus	Art der Verabreichung	LD₅₀	(mg/kg)
Maus		AST	ASA
,₀ Maus	oral	5000	1050
Maus	subcutan	2000	-
Ratte	intraperitoneal	1300	420
intravenös	520	-
intravenös	530	—

Gastro-intestinale Verträglichkeit

Zur Durchführung der Versuche wurden Rattei verwendet, die 24 Stunden lang nicht gefüttert wordei waren. Das AST-Produkt wurde oral als Säure oder al: Natriumsalz in einer Dosis von 335 mg/kg, suspendier in 1 % Carboxymethylcellulose, verabreicht. Diese Dosii entspricht auf molekularer Basis einer Dosis ai Acetylsalicylsäure von 225 mg/kg, von der wiederhol gefunden wurde, daß sie Magengeschwüre hervorruft Sowohl die Behandlungsmethoden als auch die Beob achtungsdauer waren für die drei Gruppen vor Versuchstieren identisch.

Ais Ergebnis wurde gefunden, daß die mit Acetylsaii cylsäure behandelten Ratten 5 bis 10 hämorrhagischf Magengeschwüre aufwiesen, während die mit de: erfindungsgemäßen Verbindung behandelten Rattei keinerlei Veränderung der Magen- oder Intestinal Schleimhaut aufwiesen.

Analgetische Aktivität

(A) Durch intraperitoneale Injektion von Phenylchi non wurden bei Mäusen künstliche Schmerzkrümmun gen hervorgerufen. Das AST-Produkt wurde sowohl ir der Säureform (AST-Ac) als auch in Form seinei Natriumsalzes (AST-Na) oral verabreicht. Es wurde mi einer molekular äquivalenten Dosis Acetylsalicylsäun und mit Carboxymethylcellulose als Placebo verglichen Die Schmerzkrümmungen wurden in variierender Zeitintervallen durch die orale Behandlung induzier und nach den ersten 20 Minuten nach der Injektion vor Phenylchinon gezählt.

Tabelle 6

Untersuchtes Produkt und Form des
Produkts

ASA

AST-Ac

AST-Na

Dosis Inhibierung der Schmerzkrümmungen in %, bezo-

(mg/kg) gen auf die Behandlung mit dem Placebo

	nach	nach	nach
	1 Std.	2 Std.	4 Std.
200	23	37	17
300	IO	Il	0
300	56	87	46
			130 129/20

(B) Bei der Druchführung eines mechanischen Tabelle

Druckversuchs auf eine entzündete Rattenpfote wurde

das AST-Produkt sowohl in der Säureform als auch in Form seines Natriumsalzes oral verabreicht Es wurde mit einer molekular äquivalenten Dosis Acetylsalicylsäure und mit einem Carboxymethylcellulose-Placebo verglichen. Die Entzüncung der Pfote wurde durch lokale Injektion von Hefe gleichzeitig mit der oralen Behandlung mit den Arzneimitteln induziert und es wurde die Empfindlichkeit bestimmt in Gramm des mechanischen Druckes, der erforderlich war, um eine Reaktion bei dem Versuchstier hervorzurufen.

Tabelle 7

Untersuchtes Pro- Dosis duki und Form des Produkts (mg/kg)

Inhibierung des Ödems in %, bezogen auf die Behandlung mit dem Placebo

nach IStd.

nach 3 Std.

nach
5 Std.

ASA

AST-Ac

AST-Na 200
300
300

41
42
39

51
38
38

55
48
50

Untersuchtes Pro- Dosis
dukt und Form des
Produkts (mg/kg)

Inhibierung der Hyperalgesie in %, bezogen auf
die Behandlung mit einem Placebo

ASl-Ac

AST-Na

	nach	nach	nach
	1 Std.	3 Std.	5 Std.
200	27	1	0
300	47	47	19
300	64	33	30

Antiödem-Aktivität

(A) Zur Untersuchung der Antiödem-Aktivität, hervorgerufen durch Hefe in der Pfote einer Ratte, wurde das AST-Produkt sowohl in der Säureform als auch in Form seinesNatriumsalzes oral verabreicht. Es wurde mit einer molekular äquivalenten Dosis Acetylsalicylsäure und mit einem Carboxymethylcellulose-Placebo verglichen. Durch lokale Injektion von Hefe wurde ein ödem auf der Pfote des Versuchstieres induziert, während gleichzeitig die orale Behandlung mit den Arzneimitteln durchgeführt wurde, und es wurde das Volumen der Pfote in hundertstel ml bestimm'.

(B) Außerdem wurde die Antiödemaktivität gegenüber einem in einer Rattenpfote durch Nystatin hervorgerufenen ödem untersucht Wegen der langen Dauer dieses Ödemtyps konnten die Tiere wiederholt behandelt werden, um zu bestätigen, ob der gewünschte Effekt des AST-Produktes auch bei Anwendung der parenteralen Verabreichung vorhanden war oder nicht Der Vergleich wurde durchgeführt unter Anwendung einer molekular äquivalenten Dosis von Acetylsalicylsäure, die oral verabreicht wurde, und eines CarboxymethylcelluIose-Placebos, das ebenfalls oral verabreicht wurde. Das AST-Produkt wurde in Form der Säure oral und in Form eines Salzes intraperitoneal verabreicht

Die Dosen der Arzneimittel, die stets proportional zueinander waren, wurden von Tag zu Tag variiert, d. h. am ersten Tag wurde eine Dosis von 200 mg/kg ASA und 300 mg/kg AST verabreicht, am zweiten Tag wurde jede Dosis verdoppelt, am dritter Tag wurde jede doppelte Dosis in zwei äquivalente Komponenten aufgeteilt, die mit einem Zeitabstand von 9 Stunden (10 Uhr am Morgen und 7 Uhr am Nachmittag) verabreicht wurden. Am vierten Tag wurde keine Behandlung durchgeführt, um die Dauer des Effekts nach der vierten Verabreichung zu prüfen.

Das Antiödem-Agens wurde in der Nacht vor der ersten Behandlung mit den Arzneimitteln in die Pfote injiziert und das Volumen der Pfote wurde in hundertstel ml bestimmt.

Tabelle 9

Untersuchtes Produkt Art der Verab- Dosis (mg/kg) und Form des Produkts reichung

Inhibierung des Ödems in %, bezogen auf die Behandlung mit einem
Placebo

1. Tag des Odems	p.o.	200	Zeitpunkt der 1. Dosis	4 Std.	4 SId.	8 Std.
	p.o.	300	2 Std.	10	11	7
ASA	i.p.	300	8	3	2	3
AST-Ac	Art der Verab reichung	Dosis (mg/kg)	0	6	17	2
AST-Nc			6	des Ödems Behandlung		in %, bezo- mit einem
Untersuchtes Produkt und Form des Produkts			Inhibierung gen auf die Placebo	Zeitpunkt der 2. Dosis
2. Tag des Ödems	p.o.	400	2 Std.	8 Std.
	p.o.	600	10	15
ASA	i.n.	600	3	10
AST-Ac		11	!8
AST-Na

29 Ol 046

Fortsetzung

Untersuchtes Produkt und Form des Produkts	Art der Verab reichung	Dosis (mg/kg)	Inhibierung gen auf die Placebo	des Ödems Behandlung	4 Std.	in %, bezo- mit einem
3. Tag des Ödems			Zeitpunkt der 3. Dosis	11
			2 Std.	7	8 Std.
ASA	p.O.	200	8	17	14
AST-Ac	p.o.	300	8	6
AST-Na	i.p.	300	14	16

Untersuchtes Produkt Art der Verab und Form des Produkts reichung

4. Tafe des Ödems

Dosis (mg/kg) Inhibierung des Ödems in %, bezogen auf die Behandlung mit einem Placebo

Zeitpunkt der 4. Dosis

i: Std. 17 Std. 23 Std.

ASA

AST-Ac

AST-Na

p.o.
p.o.
i.p.

12

0
11

Antipyretische Aktivität

Zur Bestimmung der antipyretischen Aktivität gegenüber der durch subcutane Verabreichung von Hefe bei einer Ratte hervorgerufene Pyrexie wurde das AST-Produkt oral in Form der Säure und in Form seines Natriumsalzes sowie intraperitoneal in Form seines Salzes verabreicht Es wurde mit einer molekular äquivalenten Dosis Acetylsalicylsäure, die oral verabreicht wurde, und mit einem Carboxymethylcellulose-Placebo verglichen. Die Pyrexie wurde durch subcutane Injektion von Hefe am Abend vor der Behandlung mit dem Arzneimittel, d. h. 16 Stunden vorher, induziert.

Tabelle 10

Untersuchtes	Art der Ver	Dosis	Inhibierung der Pyrexie in %, bezogen auf die
Produkt und	abreichung		Behandlung mit einem Placebo
Form des		(mg/kg)
Produkts
			1 Std. 2 Std. 4 Std. 6 Std. 8 Std.

ASA
AST-Ac
AST-Na
AST-Na

p.o. p.o. p.o. i.p.

200
300
300
300

78	103	114	58	45
18	26	30	25	Q
8	0	0	0	0
65	75	56	50	69

Die vorstehenden Versuchsergebnisse zeigen, daß die erfindungsgemäße Verbindung AST sich ausgezeichnet eignet für die Behandlung von Entzündungszuständen, Schmerzzuständen, Fieber und generellen rheumatischen Zuständen. Unter Anwendung konventioneller Verfahren können daraus pharmazeutische Mittel für die orale oder parentarale Verabreichung hergestellt werden.

Claims

Patentansprüche:

l.Taurinderivate der allgemeinen Formel I CH₂-CH₂—O — R

/
CH₂-N

R'
CH₂-SO₃H

(D