DE1808834B2 - Stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, a -Amylase oder deren Gemische - Google Patents

Stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, a -Amylase oder deren Gemische

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Description

(a) der Gehalt an aktivem Enzym 0,001 bis 1,0% beträgt und es
(b) 65 bis 97% Wasser,
(c) 2 bis 27% eines Stabilisierungsmittels in der zur Stabilisierung erforderlichen Menge, nämlich Monohydroxyalkohole mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen Alkoxymonohydroxyalkohole der allgemeinen Formel
R1-O-R2-OH
worin Ri einen Alkyl- oder einen Alkoxyalkylrest mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen und 0 bis 1 Ätherbindungen und R2 einen Alkylenrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten oder Diaikylglykoläther der allgemeinen Formel
R1O(CH2CH2O)1R2
worin R1 und R2 jeweils Alkylreste mit 1 bis etwa 4 Kohlenstoffatomen und χ = 1 bis etwa 10 bedeuten, und
(d) 0 bis 15% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält.
2. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es im Falle eines Gehaltes an Λ-Amylase 2 bis 15% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält
3. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol, Isopropanol, Propanol, 3-Propoxypropanol, Diäthylenglykolmonobutyläther oder Äthylenglykoldimethyläther ist.
4. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß
(a) der Gehalt an aktivem Enzym 0,01 bis 0,5% beträgt, und es
(b) 72 bis 95% Wasser,
(c) als Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol, Isopropanol, Propanol, 3-Propoxypropanol oder Diäthylenglykolmonobutyläther, wobei das Methanol in Mengen von etwa 16% bis 27%, das Äthanol in Mengen von etwa 3 bis 5f 19%, das Propanol in Mengen von etwa 2 bis 8%, das Isopropanol in Mengen von etwa 4 bis 22%, das Propoxypropanol in Mengen von etwa 8 bis 17% und der Diäthylenglykolmonobutyläther in Mengen von 8 bis 17% verwendet werden, und
(d) 4 bis 10% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält.
5. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sein pH-Wert zwischen 5,0 und 10,0 liegt.
6. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sein pH-Wert zwischen 6,5 und 8,5 liegt.
7. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Protease eine alkalische Protease, nämlich Subtilisin, BPN', Elastase, Keratinase,
4C.
55 Carboxypeptidase, Aminopeptidase, Aspergillopeptidase A und Aspergillopeptidase B, ist.
8. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol oder Isopropanol ist, wobei das Methanol in Mengen von etwa 17 bis 25 Gew.-% des Präparates, das Äthanol in Mengen von etwa 6 bis 18 Gew.-% des Präparates und das Isopropanol in Mengen von etwa 9 bis etwa 20 Gew.-% des Präparates verwendet werden.
9. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es eine wirksame Menge eines Konservierungsmittels enthält.
Die Erfindung betrifft ein stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease. Λ-Amylase oder deren Gemische, das dadurch gekennzeichnet ist, daß, bezogen auf das Gewicht des Präparates,
(a) der Gehalt an aktivem Enzym 0,001 bis 1,0% beträgt und es
(b) 65 bis 97% Wasser,
(c) 2 bis 27% eines Stabilisierungsmittels in der zur Stabilisierung erforderlichen Menge, nämlich Monohydroxyalkohole mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, A'koxymonohydroxyalkohole der allgemeinen Formel
R1-O-R2-OH
worin Ri einen Alkyl- oder einen Alkoxyalkylrest mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen und 0 bis 1 Ätherbindungen und R2 einen Alkylenrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten oder Dialkylglykoläther der allgemeinen Formel
R1O(CH2CH2O)xR2
worin Ri und R2 jeweils Alkylreste mit 1 bis etwa 4 Kohlenstoffatomen und χ = 1 bis etwa 10 bedeuten, und
(d) 0 bis 15% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält.
Enzyme werden im allgemeinen in Form trockener Pulver gehandelt. Die pulverförmigen Enzympräparate müssen vor hohen Temperaturen und hoher relativer Feuchtigkeit geschützt werden, andernfalls werden die Enzyme rasch abgebaut und/oder desaktiviert (siehe z. B. Alcalase, Industriepublikation der Firma Novo Industri A/S, Kopenhagen, Dänemark). Wäßrige Enzympräparate sind nicht allgemein verfügbar, da die Enzyme in einem wäßrigen Milieu rasch abgebaut und/oder desaktiviert werden.
Es sind bereits Versuche durchgeführt worden, um Enzyme in wäßrigen Lösungen zu stabilisieren. Siehe US-PS 32 96 094, in welcher vorgeschlagen wird, speziell hydrolysiertes und löslich gemachtes Kollagen und Glycerin zur Stabilisierung wäßriger Lösungein von proteolytischen Enzymen zu verwenden. Diese Methode der Stabilisierung der Enzyme erfordert jedoch große Mengen an Glycerin, z. B. 35 bis 60 Gew.-% der gesamten Lösung und erhöht dadurch die Kosten der Enzymlösung erheblich.
Gemäß der US-PS 30 95 358 wird Sorbit zur Stabilisierung wäßriger Lösungen verwendet, die Enzyme, wie Papain und Gemische aus Protease und Amylase, erhalten aus Bacillus subtilis, enthalten. Diese
Methode erfordert ebenfalls große Mengen (65 bis 90 Gew.-% einer 60%igen Sorbitlösung) des Stabilisierungsmittels Sorbit. Das große Volumen an Sorbit, das zur Stabilisierung der Enzyme in wäßrigen Lösungen erforderlich ist, wirkt als Verdünnungsmittel und trägt erheblich zu den Kosten des Präparates bei.
Die beiden vorgenannten Literaturstellen veranschaulichen die erheblichen Probleme, denen man sich bei Versuchen zur Stabilisierung wäßriger Lösungen von Enzymen gegenübersieht:
(1) Unkosten und (2) außerordentliche Verdünnung des wäßrigen Produktes mit einem Stabilisierungsmittel.
Das erfindungsgemäße stabilisierte wäßrige Präparat der Enzyme Protease, «-Amylase oder deren Gemische ermöglicht es, die Probleme zu meistern, denen man sich aufgrund des Standes der Technik gegenübersieht Die trfindungsgemäß verwendeten Stabilisierungsmittel betragen nur 2 bis 27%, bezogen auf das Gewicht des Enzympräparates. Diese Stabilisierungsmittel stehen zu tragbaren Preisen bequem zur Verfügung. Die erfindungsgemäß eingesetzten Protease stabilisierenden Verbindungen besitzen wertvolle Lösungsmitteleigenschaften und sind daher besonders erwünscht, wenn das Präparat zur Anwendung in Wasch- und Reinigungsmitteln vorgesehen ist Die Alkohole, z. B. Äthanol, sind auch ausgezeichnete Adstringentien und üben so eine wertvolle Funktion aus, wenn das erfindungsgemäße Präparat als Mundwasser verwendet wird. Ein Zusatz der gegebenenfalls vorgesehenen nichtionischen oder zwitterionischen Detergenskomponenten erhöht die Stabilität der Enzyme in dem wäßrigen Präparat, verleiht ihm wünschenswerte oberflächenaktive Eigenschaften und erhöht die Reinigungskraft dieses Präparates.
In der Figur sind die stabilisierenden Wirkungen verschiedener Konzentrationen von erfindungsgemäßen Stabilisierungsmitteln in einer wäßrigen Lösung dargestellt, die 1% Alcalase (6% kristallines Enzym) und 5% äthoxylierten Talgalkohol (1 Mol Talgalkohol, der mit 30 Mol Äthylenoxid äthoxyliert ist) enthält und auf einen pH-Wert von pH 7,0 eingestellt ist Es ist zu ersehen, daß die bevorzugten Stabilisierungsmittel, d. h. Methanol, Äthanol und Isopropanol verwendet werden können, um während langer Lagerzeiträume die Enzymstabilität auf ein Maximum zu bringen.
In der Zeichnung ist auf der Ordinate die verbleibende Enzymaktivität nach 5wöchiger Lagerung bei einer Temperatur von 38° C aufgetragen und auf der Abszisse der Prozentgehalt des Stabilisierungsmittels.
Körnige, enzymhaltige Detergensmischungen sind in Europa seit mehreren Jahren in Verwendung und wurden in letzter Zeit auch in den Vereinigten Staaten von Amerika gebräuchlich. Diese enzymhaltigen körnigen Detergensmischungen sind insbesondere bei der Entfernung von Flecken aus Geweben, festen Haushaltsgegenständen, Böden und Wänden wirksam. Diese körnigen Detergensmischungen sind jedoch bei der Verwendung in kleinem Maßstab, z. B. bei der Fleckenentfernung, unbequem zu handhaben.
Die oben beschriebenen Nachteile werden mit den erfindungsgemäßen Präparaten vermieden. Das erfindungsgemäße wäßrige Präparat der Enzyme Protease, Λ-Amylase oder deren Gemische ist zweckmäßig als Fleckentfernungsmittel, als Zusatz für Detergentien, als Wasch- und Reinigungsmittel oder als Mundwasser verwendbar. Außerdem sind die Enzyme in den erfindungsgemäßen Präparaten während langer Lagerzeieen stabil.
Dieses Präparat enthält drei wesentliche Hauptbestandteile: Wasser, aktive Enzyme und Stabilisierungsmittel. Nichtionische oder zwitterionische Detergentien können den Präparaten als wahlweise zuzufügende Komponenten zugesetzt werden. Diese Komponenten und die Anwendungsmengen derselben sind nachstehend näher erläutert
Wasser stellt einen überwiegenden Anteil der erfindungsgemäßen Präparate dar und wird in Mengen
ίο von 65 bis 97 Gew.-% des Präparates und vorzugsweise in Mengen von 72 bis 95% verwendet Entionisiertes Wasser wird zwar bevorzugt, doch ist dessen Anwendung nicht zwingend.
Die Enzyme, die in wäßriger Lösung erfindungsgemaß stabilisiert werden, sind die alkalischen, neutralen und sauren Proteasen sowie a-Amylasen oder deren Gemische. Proteasen nach diesen Klassifikationen leiten sich im allgemeinen von Pilzen und Bakterien ab. Enzyme, die von pflanzlichen und tierischen Quellen stammen, können hier ebenfalls verwendet werden, sind aber nicht so bequem in die obigen alkalischen, neutralen und sauren Unterklassen einzuteilen. Diese Enzyme sind im pH-Bereich von etwa 3 bis 11 und bei Temperaturen im Bereich von etwa 4,4° C bis etwa 77° C aktiv. Optimale Aktivität dieser Proteasen zeigt sich im allgemeinen im pH-Bereich von etwa 5,0 bis 10 und vorzugsweise von 6,0 bis 9,5.
Die Proteasen sind beim Abbau von Proteinschmutz besonders wirksam. Die Proteasen katalysieren die Hydrolyse der Peptidbindung von Proteinen, Polypeptiden und verwandter Verbindungen. Auf diese Weise werden freie Amino- und Carboxygruppen erhalten, und die langkettigen Proteinstrukturen werden zu verschiedenen kürzeren Ketten verkleinert Diese kürzeren Ketten können leicht mit Wasser oder wäßrigen Detergensmischungen aus deren Umgebung entfernt werden.
Die alkalischen Proteasen sind besonders bevorzugte Enzyme zur Verwendung im Rahmen der Erfindung.
Alkalische Proteasen, die zur Anwendung im Rahmen der Erfindung geeignet sind, umfassen Subtilisin, BPN', Elastase, Keratinase, Carboxypeptidase, Aminopeptidase, Aspergillopeptidase A und Aspergillopeptidase B, Substilisin und BPN' werden besonders bevorzugt verwendet. Die alkalischen Proteasen werden deswegen im Rahmen der Erfindung insbesondere bevorzugt, da sie im pH-Bereich normaler Detergenskomponenten, d. i. pH 7,5 bis pH 10,5, optimale Aktivität zeigen und die alkalischen Proteasen zeigen in den erfindungsgeinäßen
so Präparaten eine überraschende Stabilität
Die neutralen Proteasen, die im Rahmen der Erfindung verwendet werden können, umfassen Kollagenase, Chymotrypsin und Trypsin und solche proteolytischen Enzyme, die aus Streptomycesspecies isoliert sind. Sowohl Chymotrypsin als auch Trypsin zeigen im neutralen bis alkalischen Bereich optimale Aktivität.
Beispiele saurer Proteasen, die zur Verwendung im Rahmen der Erfindung geeignet sind, umfassen Pepsin, Papain und Bromelin. Sowohl Papain ais auch Bromelin zeigen im sauren bis neutralen Bereich optimale Aktivität.
Die Λ-Amylasen werden in den erfindungsgeinäßen Präparaten ebenfalls stabilisiert. Alle a-Amylasen zeigen im sauren Bereich optimale Aktivität Die
b5 Λ-Amylasen sind spezie'l zum Abbau von Stärkemolekülen gut geeignet, da sie in der Stärke die «-1.4-glykosidischen Bindungen angreifen. Die verbleibenden kürzeren Ketten werden aus deren Umgebung
mit Wasser ader wäßrigen Lösungen der Detergentien leicht entfernt. Die «-Amylasen können aus tierischen Quellen, Getreidekörnern, Bakterien oder Pilzquellen erhalten werden.
Im Handel erhältliche Enzymmischungen, die die oben beschriebenen Enzyme enthalten, sind für die Anwendung im Rahmen der Erfindung geeignet. Diese handelsüblichen Enzymmischungen werden im allgemeinen in trockener, pulverisierter Form gehandelt und enthalten etwa 2% bis 80% aktive Enzyme in Kombination mit einem inerten, pulverförmigen Träger, wie Natrium- oder Calciumsulfat oder Natriumchlorid, als restlichen, 20% bis 98% ausmachenden Bestandteil. Der Gehalt an aktivem Enzym in den handelsüblichen Enzymmischungen ist das Ergebnis der angewendeten Herstellungsmethoden und steiit kein kritisches Merkmal dar, solange das Endprodukt gemäß der Erfindung den angegebenen speziellen Enzymgehalt aufweist. Die unlöslichen, inerten Materialien werden im allgemeinen aus dem erfindungsgemäßen Präparat entfernt, um ein Präparat mit befriedigendem klarem Aussehen, das frei von Fällungen ist, zu liefern.
Besondere Beispiele von im Handel erhältlichen Enzymmischungen sind nachstehend angegeben, wobei die Herstellerfirmen in Klammer beigefügt worden sind: Alcalase (Novo Industri, Kopenhagen, Dänemark); Maxatase (Koninklijke Nederlandsche Gist-En Spiritusfabriek N. V, Delft, Niederlande); Protease B-4000 und Protease AP (Schweizerische Ferment A. G., Basel, Schweiz); CRD-Protease (Monsato Company, St Louis, Missouri); Viokase (VioBin Corporation, Monticello, Illinois); Pronase-P, Pronase-E, Pronase-AS und Pronase-AF (sämtliche hergestellt von der Kaken-Chemical Company, Japan); Bioprase (Nagase & Co, Ltd, Osaka, Japan); Rapidase P-2000 (Rapidase, Seclin, Frankreich); Takamine, Bromelain 1:10, HT proteolytisches Enzym 200, Enzym L-W und Λ-Amylase (Miles Chemical Company, Elkharl, Indiana, USA); Rhozyme Ρ-11-Κοη-zentrat, Pectinol, Rhozyme PF, Rhozyme J-25 (Rohm & Haas, Philadelphia, Pennsylvania, USA); (Rhozyme PF und J-25 haben Salz- und Maisstärketräger und stellen Proteasen mit Diastaseaktivität dar); Amprozyme 200 (Jacques Wolf & Company; ein Betrieb der Nopco Chemical Company, Newark, New Jersey, USA) und Wallerstein 627-P (Wallerstein Company, Staten Island, New York).
CRD-Protease (auch bekannt als Monsanto DA-10) ist eine brauchbare pulverförmige Enzymmischung. Die CRD-Protease wird angeblich durch Mutation eines Bacillus subtilis erhalten. Es ist aus neutralen und alkalischen Proteasen und a-Amylase zusammengesetzt. Die neutrale Protease hat ein Molekulargewicht von etwa 44 000 und enthält 1 bis 2 Atome Zink je Molekül. Die CRD-Protease kann in wäßrigen Systemen, wie in jenen gemäß der Erfindung, verwendet werden. Der Gehalt an aktivem Enzym CRD-Protease, auf Basis von Gew.-%, liegt im allgemeinen im Bereich von etwa 20% bis 75%.
Pronase-P, Pronase-E, Pronase-AB und Pronase-AF sind pulverförmige Enzymgemische, die auch mit Vorteil im Rahmen der Erfindung verwendet werden können. Diese Enzyme werden der Kulturbrühe des Streptomyces Griseus erhalten, der für die Herstellung von Streptomycin Verwendung findet Sie werden durch eine aufeinanderfolgende Behandlung in einer Harzsäule isoliert Die Hauptkomponente der Pronase ist eine neutrale Protease, Streptomyces Griseus-Protease. Diese Enzymmischung enthält ein Calciumsalz als Stabilisator und ist innerhalb eines weiten pH-Bereiches recht gut stabil, z. B. bei pH-Werten von 4 bis 10, und ist innerhalb eines Temperaturbereiches von 10° C bis 66° C ziemlich stabil.
Ein weiteres Enzymgemisch, das für die erfindungsgemäßen Präparate bevorzugt verwendet wird, ist Alcalase (Novo Industri A/S, Kopenhagen, Dänemark), die als proteolytisches Enzympräparat beschrieben wird, das durch Submersfermentation eines speziellen Stammes von Bacillus subtilis hergestellt wird. Die primäre Enzymkomponente von Alcalase ist Subtilisin. Außer Proteasen enthält Alcalase geringe Mengen an Λ-Amylase. Alcalase ist ein feines graues, freifließendes Pulver, das einen Gehalt an kristallinem aktiven Enzymen von etwa 6% aufweist. Der Rest des Pulvers umfaßt in erster Linie Natriumsulfat, Calciumsulfat und verschiedene inerte organische Trägermaterialien. Aicalase zeigt außergewöhnliche Stabilität in den erfindungsgemäßen wäßrigen Präparaten.
Biophase ist ein pulverförmiges Enzymgemisch, das alkalische Proteasen (BPN') und und a-Amylasen enthält Dieses Enzymgemisch kann mit oder ohne Verdünnungsmittel, wie Natrium- und Calciumsulfat, erhalten werden.
Zur Erzielung bester Ergebnisse enthält das erfindungsgemäße Präparat vorzugsweise 0,01 bis etwa 0,5 Gew.-% aktive Enzyme, bezogen auf das Gewicht des Präparates. Wird eines der bevorzugten Enzymgemische verwendet, so enthält das erfindungsgemäße Präparat vorzugsweise etwa 0,1% bis 4,0% des Enzymgemisches, wie es in der im Handel vertriebenen Form erhältlich ist, z. B. mit etwa 2% bis 80% aktiven Enzymen. Der Gehalt an aktivem Enzym des erfindungsgemäßen wäßrigen Enzymgemischs liegt jedenfalls, wie oben angegeben, im Bereich zwischen 0,001 % undl%.
Die Stabilisierungsmittel, die die oben beschriebenen Enzyme stabilisieren, sind Monohydroxyalkohole mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxymonohydroxyalkohole oder Dialkylglykoläther. Besondere Beispiele geeigneter Monohydroxyalkohole umfassen
Methanol, Äthanol, Propanol,
Isopropanol, Butanol und Isobutanol.
Alkoxymonohydroxyalkohole umfassen
Methoxymethanol, 2-Methoxyäthanol,
3-Methoxypropanol, 2-Methoxypropanol,
Äthoxymethanol, 2-Äthoxyäthanol,
3-Äthoxypropanol, 2-Äthoxypropanol,
Propoxymethanol, 2-Propoxyäthanol,
3-Propoxypropanol, 2-Propoxypropanol,
Butoxymethanol, 2-Butoxyäthanol,
3-Butoxypropanol, 2-Butoxypropano! und
Diäthylenglykolmonobutyläther.
Beispiele von Dialkylglykoläthern der allgemeinen Formel
R1O(CH2CH2O)Jl2
worin Ri, R2 und χ die vorstehend angegebenen Bedeutungen haben, sind Äthylenglykoldimethyläther, Äthylenglykoldiäthyläther, Äthyienglykoldi-n-propyläther, Diäthylenglykoldimethyläther, Triäthylenglykoldimethyläther, der Methyläther
von hexaoxyäthyleniertem Butanol oder der Butyläther von decaoxy-äthyleniertem ButanoL
Bevorzugte Stabilisierungsmittel zur Verwendung im Rahmen der Erfindung sind
Methanol, Äthanol, Isopropanol,
Propanol, 3-Propoxypropanol,
piäthylenglykolmonobutylätheroder
Äthylenglykoldimethyläther.
Methanol, Äthanol und Isopropanol werden zur Verwendung im Rahmen der Erfindung besonders bevorzugt. Methanol und die von Methanol abgeleiteten Stabilisierungsmittel sollen wegen ihres giftigen Charakters nicht in wäßrigen Enzympräparaten verwendet werden, die in den Körper gelangen können.
Die enzymstabilisierenden Verbindungen, wie sie
Tabelle 1
vorstehend beschrieben sind, können in den erfindungsgemäßen Präparaten in wirksamen Mengen verwendet werden, die im Bereich von etwa 2 bis etwa 27 Gew.-°/o, bezogen auf das Gewicht des Präparates, liegen.
Um jedoch optimale Stabilisierungswirkungen während langer Lagerzeiten bei hohen Temperaturen zu erhalten, sollen die Stabilisierungsmittel in den nachstehenden Anwendungsbereichen benutzt werden. Die bevorzugten Anwendungsbereiche, wie sie in der nachstehenden Tabelle 1 für Methanol, Äthanol und Isopropanol angegeben sind, verleihen den wäßrigen Enzympräparaten eine solche Haltbarkeit, daß etwa 50% Enzymaktivität nach 5wöchiger Lagerung bei 38° C vorliegt.
Stabilisierungsmittel Anwendungsbereich Bevorzugter Anwendungs
in Gew.-% bereich in Gew.-%
des Enzympräparates des Enzympräparates
Methanol 16-27 17-25
Äthanol 3-19 6-18
Propanol 2- 8 -
Isopropanol 4-22 9-20
3-Propoxypropanol 8-17 -
Diäthylenglykolmonobutyläther 8-17 _
Wasserlösliche nichtionische und zwitterionische Detergentien können als gegebenenfalls vorliegende Bestandteile benutzt werden. Diese Detergentien erhöhen die Lagerstabilität der im Rahmen der Erfindung ve· wendeten Enzyme und verbessern die Detergenskennmerkmale des Präparats signifikant. Wegen dieser wertvollen Merkmale wird es bevorzugt, nichtionische und zwitterionische Detergentien den wäßrigen Enzympräparaten gemäß der Erfindung, insbesondere denjenigen mit einem Gehalt an «-Amylase, einzuverleiben. Die nichtionischen und zwitterionischen Detergentien werden in Mengen von 0 bis 15%, vorzugsweise 4 bis 10%, bezogen auf das Gewicht des Enzympräparates, verwendet. Wird Λ-Amylase verwendet, so werden 2 bis 15% des nichtionischen oder zwitterionischen Detergens bevorzugt.
Beispiele geeigneter nichtionischer Mittel zur Verwendung im Rahmen der Erfindung umfassen:
(1) Die Polyäthylenoxidkondensate von Alkylphenolen, z. B. die Kondensationsprodukte von Alkalphenolen mit einer Alkylgruppe, die etwa 6 bis 12 Kohlenstoffatome in gerader oder verzweigter Kette aufweist, mit Äthylenoxid, wobei dieses Athylenoxid in Mengen vorliegt, die 5 bis 25 Mol Äthylenoxid je Mol Alkylphenol entsprechen. Der Alkylsubstituent in solchen Verbindungen kann beispielsweise von polymerisiertem Propylen, Düsobutylen, Octen oder Nonen abgeleitet sein.
(2) Solche nichtionischen synthetischen Detergentien, die aus der Kondensation von Athylenoxid mit den Produkten stammen, die durch Umsetzung von Propylenoxid und Äthylendiamin erhalten werden. Beispiele hierfür sind Verbindungen, die etwa 40 bis etwa 80 Gew.-% Polyoxyäthylen enthalten und ein Molekulargewicht von etwa 5000 bis etwa 11 000 haben und aus der Umsetzung von Äthylenoxidgruppen mit einer hydrophoben Base stammen, die aus dem Reaktionsprodukt von Äthylendiamin und überschüssigem Propylenoxid besteht, wobei die Base ein Molekulargewicht in der Größenordnung von 2500 bis 3000 aufweist; solche Verbindungen haben sich z. B. als zufriedenstellend erwiesen.
(3) Das Kondensationsprodukt eines rviois aliphatischen Alkohols mit 8 bis 22 Kohlenstoffatomen in entweder gerader oder verzweigter Kette mit 5 bis 40 Mol Äthylenoxid, z. B. ein Kokosnußalkohol-Äthylen-
oxid-Kondensat mit 5 bis 40 Mol Äthylenoxid je Mol Kokosnußalkohol, wobei die Kokosnußalkoholfraktion 10 bis 14 Kohlenstoff a tome aufweist.
(4) Unsubstituierte Amide und Monoäthanol- und Diäthanolamide von Fettsäuren, die Säurereste mit etwa 8 bis etwa 22 Kohlenstoffatomen aufweisen. Diese Acylreste leiten sich üblicherweise von natürlich vorkommenden Glyceriden (z. B. Kokosnußöl, Palmöl, Sojabohnenöl und Talg) ab, können aber auch synthetischen Ursprungs sein (z. B. solche, die durch Oxydation von Erdöl oder durch Hydrieren von Kohlenmonoxid nach dem Fischer-Tropach-Verfahren entstehen).
(5) Langkettige tertiäre Aminoxide der allgemeinen Formel R2
R'(OR*)n—N-^O
R3
worin R1 einen Alkylrest mit etwa 8 bis 22 Kohlenstoffatomen, R2 und R3 jeweils Methyl-, Äthyloder Hydroxyäthylreste, R4 Äthylen und π = 0 bis etwa 10 bedeuten. Der Pfeil in der Formel ist eine übliche Darstellung einer semipolaren Bindung. Spezielle Beispiele der Aminoxiddetergentien umfassen: Dimethyldodecylaminooxid und Bis-(2-hydroxyäthyl)-dodecylaminoxid.
(6) Langkettige tertiäre Phosphinoxide der allgemeinen Formel
RR'R'T-* O,
worin R einen Alkyl-, Alkenyl- oder Monohydroxyalkylrest mit 10 bis 22 Kohlenstoffatomen in der Kettenlänge und R' und R" jeweils Alkyl- oder Monohydroxyalkyl-
Gruppen mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten. Der Pfeil in der Formel ist eine übliche Darstellung einer semipolaren Bindung. Beispiele geeigneter Phosphinoxide sind in der US-Patentschrift 33 04 263 angegeben und umfassen: Dimethyldodecylphosphinoxid und Bis- r> (2-hydroxyäthyl)-dodecylphosphinoxid.
(7) Langkettige Sulfoxide der allgemeinen Formel
R5-S-R6 '"
worin R5 einen Alkylrest mit etwa 10 bis 22 Kohlenstoffatomen, 0 bis etwa 5 Ätherbindungen und 0 bis etwa 2 Hydroxylsubstituenten bedeutet, wobei mindestens einer der Reste R5 einen Alkylrest darstellt,. r> der 0 Atherbindungen und etwa 10 bis 18 Kchienstoffatome aufweist, und worin R« einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen und 1 bis 2 Hydroxylgruppen ist. Spezielle Beispiele dieser Sulfoxide sind: Dodecylmethylsulfoxid und 3-Hydroxytridecylmethylsulfoxid.
Die zwitterionischen synthetischen Detergentien, die erfindungsgemäß verwendet werden können, sind allgemein Derivate aliphatischer quaternärer Ammonium-, Phosphonium- und Sulfonium-Verbindungen, in welchen der aliphatische Rest geradkettig oder verzweigtkettig sein kann und worin einer der aliphatischen Substituenten etwa 8 bis 22 Kohlenstoffutome enthält und einer eine anionische, wasserlöslichmachende Gruppe aufweist, z. B.
Carboxy-, Sülfo-, Sulfate-, Phosphato- oder Phosphono-Gruppe.
Beispiele von Verbindungen, die unter diese Definition fallen, sind
3-(N,N-Dimethyl-N-hexadecylammonio)-
propan-1-sulfonatund
3-(N,N-Dimethyl-N-hexadecylammonio)-2-hydroxypropan-1 -sulfonat.
Hinsichtlich weiterer Beispiele zwitterionischer synthetischer Detergentien, siehe kanadische Patentschrift 7 08 147. Auf diese Angaben in der Literatur wird besonders Bezug genommen.
Mischungen verschiedener nichtionischer Detergentien oder Mischungen nichtionischer Detergentien und zwitterionischer Detergentien können mit Vorteil im Rahmen der Erfindung verwendet werden.
Die verschiedenen Komponenten der erfindungsgemäßen Enzympräparate können in beliebiger Reihenfolge vermischt werden.
Es wird jedoch bevorzugt, die Alkohol-Wasser-Mischung zuerst herzustellen und die Enzyme zuzusetzen, so um irgendwelchen Abbau oder irgendwelche Desaktivierung in Lösungen zu vermeiden, die überwiegend aus entweder Wasser oder Alkohol bestehen. Die gegebenenfalls anzuwendenden Detergenskomponenten können zu beliebiger Zeit zugesetzt werden.
Der pH-Wert des stabilisierten wäßrigen Enzympräparats gemäß der Erfindung beträgt im allgemeinen etwa 5,0 bis 10,0 und vorzugsweise etwa 6,5 bis 8,5. Im bevorzugten pH-Bereich werden maximale Stabilisierungswirkungen erhalten. Der pH-Wert kann mittels einer Base, z. B. Natrium- oder Kaliumhydroxid, erhöht, oder mit einer Säure, z. B. Chlorwasserstoffsäure, erniedrigt werden.
Obgleich es nicht zwingend ist, wird es auch bevorzugt, daß diesem Präparat ein Konservierungsmittel zugesetzt wird, um Bakterien und Pilzwachstumi zu verhindern. Ein besonders gutes Konservierungsmittel ist Phenylmercuriacetat, das im allgemeinen im Rahmen der Erfindung in Mengen verwendet wird, die etwa 10 bis 40 Teile/Million des Präparates betragen. Es kann ein beliebiges Konservierungsmittel, das mit diesen Präparaten verträglich ist, verwendet werden.
Das erfindungsgemäße Enzympräparat, das Wasser, Stabilisierungsmittel, Enzyme und gegebenenfalls nichtionische und/oder zwitterionische Detergentien enthält, kann als Fleckentferner, Detergenszusatz oder als Detergensmischung verwendet werden. Das Präparat kann in eine Sprühdose abgepackt und zweckmäßigerweise zur Entfernung relativ kleiner Flecken aus Geweben verwendet werden, oder es kann auch in größeren Mengen als Detergenszusatz Anwendung finden. Dieses Präparat kann an Stelle von Hypochloritbieichmittcln eingesetzt werden, da es viele der Flecken entfernt, die diese Bleichmittel entfernen, und als weiteren Vorteil die Eigenschaft hat, daß es Fluoreszenzstoffe und Weißgrad erhöhende Mittel nicht angreift oder abbaut. Mit dem Zusatz der gegebenenfalls anzuwendenden nichtionischen und/oder zwitterionischen Detergentien kann dieses Präparat als einziges Detergens bei einem Waschverfahren benutzt werden.
Das Präparat ist auch zur Verwendung als Mundwasser geeignet. Das Alkoholstabilisierungsmittel, vorzugsweise Äthanol, wirkt als ein Adstringens, während die Enzyme bei der Entfernung von Zahnbelag wirksam sind und Nahrungsmittelteilchen aus den Zahnfleischspalten und Schleimschichten aus dem Mund entfernen.
Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung. Alle Angaben betreffend Teile, Prozentsätze und Verhältnisse beziehen sich, soweit nichts anders angegeben ist auf Gewicht
Die folgenden Präparate (Beispiele 1 bis 29) wurden hergestellt und in geschlossenen Glasflaschen während der angegebenen Zeitabschnitte gelagert Die Beispiele 1, 2, 10 und 24 stellen keine, die Erfindung erläuternden Beispiele dar, sondern werden lediglich zu Vergleichszwecken angeführt.
Beispiel
Nr.
Stabilisierungsmittel Gew.-%4)
TAE301) Al- H2O
calase2)
% Restaktivität3)
Lagerung Lagerang bei 27°C Lagerung bei 38°C
bei 100C Wo- 8 Wo- 3 Wo- 6 Wo- 8 Wo- 6 Wo- 2 Wo- 3 Wo- 5 Wo- 8 Wochen chen chen chen chen chen chen chen chen chen
FGHJKLMNOP
1 — 1 1 98 85 — 75
2 — - 1 99 77 - 50
3 5% Äthanol 5 1 89 - 98 -
4 10% Äthanol 5 1 84 — 95 —
69 91
12
46 69 57 41
11
Fortsetzung
12
Beispiel
Stabilisierungsmittel Gew.-%4)
TAE30 1) Al- H2O calase2)
% Restaktivität1)
Lagerung bei 27 C
Lagerung bei 38 C
Lagerung bei 10 C Wo- 8 Wo- 3 Wo- 6 Wo- 8 Wo- 6 Wo- 2 Wo- 3 Wo- 5 Wo- 8 Wochen chen chen chen chen chen chen chen chen chen
FGHJ KLMNOP
5 15% Äthanol 5 Stabilisierungsmittel 1 79
6 5% Methanol 5 1 89
7 10% Methanol 5 1 84
8 15% Methanol 5 1 79
9 20% Methanol 5 1 74
10 30% Methanol 5 1 64
11 5% Isopropanol 5 1 89
12 10% Isopropanol 5 1 84
13 15% Isopropanol 5 1 79
14 4% Propanol 5 1 90
15 7% Propanol 5 1 87
16 2% n-Butanol 5 1 92
17 4% n-Butanol 5 1 90
18 10% Äthanoi 1 1 88
19 10% Äthanol 5 1 84
20 20% Äthanol 1 1 78
21 20% Äthanol 5 1 74
22 20% Äthanol 0 1 79
23 10% 3-Propoxy- 5 1 84
propanol
*) Nach 22 Wochen erhaltener Wert.
**) Nach 12 Wochen erhaltener Wert.
±) Nach 4 Wochen erhaltener 1 Wert.
Beispiel Gewichts-%
Nr. HAPS5
99 78 90 92
98 105 109
- 100 - — 81 70 50
- 51 - - 33 0 0
- 70 - - 48 9 0
- 78 - - 55 29 0
- - - 78 - 69 -
- - - 20 - 2 -
- 83 - - 54 41 30
- 85 - - 68 48 37
- 110 - - 65 55 36
72 - 19 55 - - -
91 - 54 46 - - -
76 - 0 36 - - -
59 - 0 15 - - -
90 - 73 - 59 45 34
100 - 97*) - - 61 47
100 - - - - 25*) -
80 - - - - 15*) -
80 — - _ — 40 -
84**) -
Alcalase
% Restaktivität Lagerung in Wochen bei 27 C 3 8 \2
95,75
83,75 88 - -
83,75 100
89,75
79 - - 100 -
85,75
Fußnoten zu den Beispielen 1 bis 29:
') TAE30 = 1 Mol Talgalkohol, der mit 30 Molen Äthylenoxyd äthoxyliert ist
2I Alcalase = ein im Handel erhältliches proteolytisches Enzympräparat mit einem Gehalt an kristallinem Enzym von etwa 6%.
3) % Restaktivität, bestimmt nach der AzocoU-Methode. Die AzocoU-Methode beruht auf der Freisetzung eines wasserlöslichen Farbstoffes aus einem wasserunlöslichen Proteinfarbstoffsubstrat (Azocoll) durch ein proteolytisches Enzym. Die Menge des unter sorgfältig geregelten Bedingungen freigesetzten Farbstoffes wird spektrophotometrisch gemessen. Die enzymatische Aktivität wird aus der Menge an freigesetztem Farbstoff berechnet Die Anfangsaktivität entspricht 100%.
4) 30 ppm Phenylmercuriacetat wurden jedem Präparat zugesetzt, um Bakterien- und Pilzwachstum zu verzögern. Der pH-Wert jedes Präparates der Beispiele 1 bis 29 wird auf pH 7,0 gehalten.
^HAPS = 3-(N,N-Dimethyl-N-alkylammonio)-2-hydroxypropan-l-sulfonat, worin sich die Alkvlgruppe von einem Mittelschnitt-Kokosnußalkohol: 2% C10, 66% C12, 23% C14 und 9% C]6 ableitet
24 - 3,25 1
25 12% Diäthylenglykol-
monobutyläther		 3,25 1
26 12% 3-Propoxypropanol 3,25 1
27 3% Äthylenglykol-
monobutyläther
3% Diäthylenglykol-
monobutyläther		 3,25 1
28 15% Äthanol 5 1
29 10% 3-ProDOxypronanol 3.25 1
Wie aus Beispiel 2 hervorgeht, werden Proteasen (Alcalase) rasch in wäßriger Lösung abgebaut und/oder desaktiviert, falls kein Stabilisierungsmittel vorhanden ist. Nach dreiwöchiger Lagerung bei 38° C waren nahezu 90% der Enzymaktivität verlorengegangen. Unter milderen Bedingungen, d.h. bei 100C und 27°C war der Verlust an Enzymaktivität geringer, aber der Verlust war selbst unter diesen milden Bedingungen sehr wesentlich.
Die Zugabe eines nichtionischen Detergens, TAE30, zur wäßrigen Enzymlösung (Beispiel 1) hindert den Abbau und/oder die Desaktivierung der Enzyme bei niedrigen Lagertemperaturen: bei hohen Lagertemperaturen scheint jedoch das nichtionische Detergens die Abbau- und/oder Desaktivierungsgeschwindigkeit der Enzyme zu erhöhen.
Die Zugabe der erfindungsgemäßen Stabilisierungsmittel bei den Beispielen 3 bis 23 und 25 bis 29 führte stets zu einer erhöhten Enzymstabilität bei Lagerbedingungen von 100C. Um jedoch eine signifikant erhöhte Enzymstabilität bei höheren Temperaturen zu erhalten, müssen die bevorzugten Stabilisierungsmittel, d. s.
Methanol, Äthanol, Propanol, Isopropanol, 3-Propoxypropanol oder Diäthylenglykolmonobutyläther in den hier beschriebenen Anwendungsbereichen benutzt werden. Die Beispiele 4, 5, 9, 11, 12 und 13 veranschaulichen den bevorzugten Stabilisierungseffekt der besonders bevorzugten Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol und Isopropanol bei hohen Temperaturen (8 Wochen Lagerung bei 38°C).
Es wurden die folgenden stabilisierten wäßrigen
;o Enzympräparate (Beispiele 30 bis 77) hergestellt. In jedem Beispiel wurde das Wasser und das Stabilisierungsmittel innig gemischt, mit nichtionischem oder zwitterionischem Detergens versetzt und zuletzt die Enzyme zugesetzt Die Enzyme wurden in jedem Beispiel während der Lagerung bei hoher Temperatur (38° C) und während der Lagerung bei niedriger Temperatur (10°C) stabilisiert. Alle wirkten gut als Fleckentferner, Detergenszusätze und als Detergentien als solche. Die nichtionischen (TAE30) und die zwitterionischen (HAPS) Zusätze erhöhten die Lagerstabilität in jedem Falie.
Beispiel Nr. Gew.-% Isopropanol 3-Propoxy- Nichtionischer oder HAPS2) 1 inzym Amylase4) H2O5)
propanol zwitterionischer Zusatz 1
Stabilisierungsmittel C D TAE30') F ( 1 - H
_ _ _ - Mcalase3) _
Äthanol - - E - - -
A - - 5 - - - J
30 B - - 9 - - 84
31 10 10 - 5 - - - 80
32 10 10 - 9 - - - 79
33 15 15 - 5 - - 75
34 15 15 - 9 - - - 84
35 - - 10 5 - 80
36 - - 10 9 - 79
37 - - 15 5 5 - 75
38 - - 15 9 9 - 84
39 - - - 5 5 0,1 80
40 - - - 9 9 0,1 79
41 - - - 5 0,1 75
42 - - - 9 0,1 83,9
43 10 10 - 5 0,1 79,9
44 10 10 - 9 0,1 78,9
45 15 15 - 5 0,1 74,9
46 15 15 - 9 I 0,1 83,9
47 - - 10 5 I 0,1 79,9
48 - - 10 9 0,1 78,9
49 - - 15 5 I 0,1 74,9
50 - - 15 9 I 0,1 83,9
51 - - - 5 I - 79,9
52 - - - 9 I - .78,9
53 - - - - I - 74,9
54 - _ _ - I _ 84
55 10 - 80
56 10 _ 79
57 15 75
15
Fortsetzung
Beispiel Nr. Gew.-% Isopropanol Nichtionischer oder - HAPS2) - H2O5)
zwitterionischer Zusatz 10 -
Stabilisierungsmittel C 3-Propoxy- TAE30 1) 10 F 0,1
10 propanol 15 5 0,1
Äthanol 10 D E 15 9 0,1
A 15 _ - 5 0,1 J
58 B 15 - - - 9 0,1 84
59 _ - - - 5 0, 80
60 - - - 9 0, 79
61 - - - 5 0, 75
62 - - - 9 0, 84
63 - - - 5 0, 80
64 - - - 9 0, 79
65 - - 10 5 0, 75
66 - - 10 9 83,9
67 10 10 15 5 79,9
68 10 10 15 9 78,9
69 15 15 5 1 74,9
70 15 15 9 1 83,9
71 - - 5 1 79,9
72 - - 9 1 78,9
73 - - 5 1 74,9
74 - - 9 1 83,9
75 - Enzym 79,9
76 - 78,9
77 - 74,9
- Alcalase3) Amylase4)
G H
1
1
1
1
1
I
Fußnoten zu den Beispielen 30 bis 77:
1JTAEw = Talgalkohol, der mit 30 Molen Äthylenoxyd äthoxyliert ist.
2) HAPS = 3-(N,N-Dirnethyl-N-alkylammonio)-2-hydroxypropan-l-sulfonat, worin die Alkylgruppe vom Mittelschnitt-Kokosnußalkohol: 2% Cio, 66% Ci2, 23% C]4 und 9% Q6 abgeleitet ist.
3) Alcalase = siehe Beispiele 1 bis 29.
4) Wallerstein-bakterielle a-Amylase, Chargen-Nr. 4S46A.
5) Jedes Präparat der Beispiele 30 bis 77 enthielt 30 ppm Phenylmercuriacetat. Die pH-Werte dieser Präparate wurden auf 7,0 gehalten.
Beispiel 78
Ein stabiles wäßriges Enzympräparat wurde erfindungsgemäß aus folgenden Komponenten angesetzt:
Komponente
Gew.-%
Alcalase (6% kristallines Enzym) TAE30
Äthanol
Wasser
Phenylmercuriacetat
1%
5% 10% 84% 30 ppm
der pH-Wert dieses Präparates wurde mit Natriumhydroxid auf 7,0 eingestellt.
Dieses Präparat wurde für Reihen von Fleckentfernungs- und Waschtests, wie nachstehend angegeben, verwendet. Ähnlich verschmutzte Tücher wurden in wäßrigefi Lösungen, enthaltend äquivalente Mengen von IV4 Bechern einer handelsüblichen Detergensmischung (Tide®) in 60,64 I Wasser mit einer Härte von 6,7° bei 54° C während 10 Minuten gewaschen.
Das erfindungsgemäße Präparat wurde in der vorliegenden Form verwendet, d. h. es erfolgte keine Verdünnung bei den Durchfeuchtungsvorgängen in der 5. Minute, 30. Minute und nach 3 Stunden. Etwa V2 ml bis etwa 1 ml des Präparates wurden direkt auf jeden Fleck oder verschmutzten Bereich von etwa 5 bis 10 cm2 aufgesprüht. Die verschmutzten Tücher wurden während der angegebenen Zeitabschnitte liegengelassen und dann in der oben beschriebenen Weise in der handelsüblichen Detergensmischung gewaschen.
Das Präparat wurde auch als Zusatz zu der handelsüblichen Detergensmischung verwendet. Etwa 1,2 ml des erfindungsgemäßen Präparats wurden je 3,791 des Waschwassers bei diesen Waschvorgängen verwendet. Die Ergebnisse sind nachstehend zusammengestellt:
60
65
Beispiel 78
Flecken
Mögliche Bewertung
Waschen mit Tide® Waschen
mit Tide*
plus Präparat
5 Min.
Befeuchten,
dann
Waschen
mit Tide®
3OMiIL Befeuchten, dann Waschen mit Tide®
? Stunden Befeuchten, dann Waschen mit Tide«
Protein 80
Pigment 35
T-Oberhernd + Kissenbezug1) 20
Synthetischer Schmutz2) 10
EMPABlutNr. 1123) 10
Salatwürze 5
Andere Flecken4) 25
Baum Wolltücher) 5
Hemdkragen6) 5
Gesamtbewertung 195
30
12
12
70
54
19
10
5
8
4
17
2
3
122
61 21 10
5 10
4 19
136
68
21
14
22
150
') StofTstücke aus natürlich verschmutzten T-Oberhemden und Kissenbezügen.
2) Stoffstücke mit speziellem synthetischem Schmutz.
3) Blutgetränkte Tücher, die von der Eidgenössischen Materialprüfungs- und Versuchsanstalt für Industrie, Bahnwesen und Gewerbe, Schweiz, erhalten wurden.
4) Tücher, die mit 5 verschiedenen Arten von Schmutz verunreinigt sind.
5) Reine Baumwolltücher, die zur Ermittlung der relativen Redeposition verwendet wurden.
6) Natürlich verschmutzte Hemdkragenstücke.
Die mögliche Beurteilung für Protein leitet sich von folgendem ab: 16 gesonderte und verschiedene Proteinflecken wurden auf jedes Proteinprüftuch aufgebracht. Jeder Fleck wurde nach dem Waschvorgang visuell an Hand einer von 0 bis 5 reichenden Skala eingestuft. Eine Beurteilung von 5 gibt eine vollständige Entfernung an (die »mögliche Bewertung«), während 0 keine Entfernung bedeutet. Beurteilungen zwischen 0 und 5 geben dazwischenliegende teilweise Entfernung an. Die mögliche Proteinbeurteilung von 80 wird erhalten, indem die 16 Flecken mit den 5 möglichen Bewertungspunkten je Fleck multipliziert werden. Die möglichen Bewertungen für die anderen Flecken werden in gleicher Weise berechnet. Die Gesamtbewertungen sind ein Maß für ein breites Reinigungsspektrum.
Die Zugabe des erfindungsgemäßen Präparats zum Waschwasser, das das handelsübliche Detergens enthielt, erhöhte die Bewertung (Tide®+Präparat) gegenüber dem Waschen mit Detergens (Waschen mit Tide®) um etwa 40%, woraus ein signifikanter Vorteil bei der Reinigung ersichtlich ist. Wendete man ein 5 Minuten dauerndes Durchfeuchten an, so wurde die Gesamtbewertung (5 Min. Befeuchten, dann Waschen mit Tide®) um 70% gegenüber der Bewertung mit Tide® erhöht, während ein Befeuchten während 30 Min. oder 3 Stunden die Gesamtbewertung um nahezu 100% gegenüber der Bewertung des Waschens mit Tide6 allein erhöhl.
Beispiel 79
Ein Mundwasserpräparat wird aus den folgenden Komponenten angesetzt:
Komponenten Gew.-%
Äthanol 16,50
Wasser 79,10
Monsanto CRD Protease (DA-10) 2,00
(34% Enzym)
GeschmackstofF, Farbstoffe und Süßungs 2,15
mittel
Natriumhydroxid zur Einstellung eines 0,25
pH-Wertes von 7,0
Die Enzyme sind während langer Lagerungszeiträume bei relativ hohen Temperaturen stabil. Die Mischung ist zur Entfernung von Zahnbelag von den Zähnen, Nahrungsteilchen aus Zahnfleischspalten und Schleimbelag im Mund brauchbar.
Beispiel
Im wesentlichen gleiche Ergebnisse wie in den mische an Stelle von Alcalase und Monsanto CRD-Provorstehenden Beispielen wurden erhalten, wenn man tease (DA-10) verwendete, in dem die Enzyme in die folgenden Enzyme oder handelsüblichen Enzymge- wäßriger Lösung stabilisiert wurden:
Subtilisin, BPN', Elastase. Keratinase, Carboxypeptidase, Aminopeptidase, Aspergiliopeptidase A. Aspergillopeptidase B, Collagenase, Chymotrypsin, Trypsin, Pepsin, Papain, Bromelin, Maxatasc, Protease B-4000, Protease AP, Alcaiase, CRD Protease, Viokase, Pronase-P, Pronase-E, Pronase-AS, Pronase-AF, Bioprase, Rapidase P-2000,Takamin, HT proleolytisches Enzym 2000, Enzym, L-W, Rhozyin P-11-Konzentrat, Peotinol, Rhozym PF, Rhozym J-25 und Amprozym 200. Im wesentlichen gleiche Ergebnisse wie in den vorstehenden Beispielen wurden erhalten, wenn die übrigen vorstehend genannten Stabilisierungsmittel anstelle jener in den vorstehenden Beispielen eingesetzt wurden, indem die Enzyme in wäßriger Lösung stabilisiert wurden.
Im wesentlichen gleiche Ergebnisse wie in den vorstehenden Beispielen wurden erhalten, wenn man die übrigen vorstehend genannten nichtionischen und zwitterionischen Detergentien anstelle des Talgalkohols, der mit 30 Mol Äthylenoxid je MoI Talgalkohol äthcxyliert ist, und des 3-(N,r>i-Dimethyl-N-mittelschnittkokosnußalkylammonio)-2-hydroxypropan-1 sulfonats einsetzte, indem die stabilisierenden Wirkungen der Alkohole und Alkoxyalkohole erhöht wurden.
Gemäß den Beispielen 3 bis 24 und 26 bis 78 wurden die Enzyme im wäßrigen Präparat stabilisiert, falls kein nichtionisches oder zwitterionisches Produkt in der wäßrigen Lösung enthalten ist.
Ähnliche Ergebnisse wie in den Beispielen I bis 79 wurden erhalten, wenn der pH-Wert der erfindungsgemäßen Präparate auf 6,5, 8,0 und 8,5 eingestellt wurde, wot>ei die Enzyme für lange Zeiträume stabilisiert wurden. Die Enzymstabilisierung wurde auch gemäß den Beispielen 1 bis 79 erhalten, wenn der pH-Wert der Präparate auf 5,0,9,0 und 10,0 eingestellt wurde.
Hierzu 1 Blatt Zeichnungen

Claims (1)

10 15 25 30 Patentansprüche:
1. Stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, Λ-Amylase oder deren Gemische, dadurch gekennzeichnet, daß, bezogen auf das Gewicht des Präparates,
DE1808834A 1967-11-15 1968-11-14 Stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, a -Amylase oder deren Gemische Expired DE1808834C3 (de)

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