DE1670301B2

DE1670301B2 - 7-(Pyridylmercaptoacetamido)cephalosporansäuren, deren Salze und Verfahren zu ihrer Herstellung

Info

Publication number: DE1670301B2
Application number: DE19681670301
Authority: DE
Inventors: Leonard Bruce North Syracuse N.Y. Crast Jun. (V.St.A.)
Original assignee: Bristol Myers Co
Current assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1967-01-05
Filing date: 1968-01-03
Publication date: 1975-05-07
Also published as: IL29235A; FR1580837A; BE709019A; FR8381M; SE349564B; CH487181A; DE1670301C3; NO140269B; AT276626B; DE1670301A1; NO140269C; GB1213571A; DK126595B; NL6800176A

Description

in der M ein Wasserstoffatom oder ein pharmazeutisch vertragliches nichttoxisches Kation bedeutet und Z die Gruppe

/.—κ

oder N

darstellt und deren nichttoxische Säureadditionssalze. 2. Verbindung nach Anspruch 1 der Formel

S-CH₇-C-NH

©der ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Salz dieser Verbindung.

3. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß tnan in aufeinanderfolgenden Stufen in an sich bekannter Weise

a) eine Verbindung der allgemeinen Formel

/ \
NH, — CH — CH CH,

40

45

C-

Il ο

C — CH,A

CO₇M

in der M die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung besitzt und A die Acetoxygruppe bedeutet oder die Hydroxylgruppe oder zusammen mit M eine monovalente Kohlenstoff-Sauerstoffbindung dar-Stellt, wobei in diesen beiden Fällen zuerst eine Wiederveresterung zur Acetoxyverbindung vorgenommen wird, mit etwa 1 bis 1,5 Moläqui-Valenten eines n-Halogenacetylhalogenids der allgemeinen Formel

Il

HaI-CH₁C-HaI

CO₂H

einer Base in einer Lösung eines mit Wasser mischbaren Ketons bei einer Temperatur von etwa — 20 bis etwa 50° C umsetzt und

b) die erhaltene «-Halogenacetamido-Verbindung der allgemeinen Formel

HaI-CH₁-C-NH

N J-CH₂-O-C-CH₃

CO,M

mit etwa 1 bis 1,5 Moläquivalenten eines Mercaptans der allgemeinen Formel

Z-SH

in der Z die Gruppe

— oder

darstellt, in Gegenwart von etwa 1 bis 1,5 Moläquivalenten einer Base in einem wäßrigen Lösungsmittelsystem bei einer Temperatur von etwa - 20 bis 50⁰C umsetzt.

in der Hai ein Chlor-, Brom- oder Jodatom bedeutet, oder eines funktioncllen Äquivalents in Gegenwart von etwa 1 bis 4 Moläquivalenten Die Erfindung betriff· neue synthetische 2-(Pyridylmercaptoacetamido) - cephalosporansäuren, deren Salze und das Verfahren zu ihrer Herstellung. Diese

erbindungen sind wertvo]\ als antibakterielb Mittel, s Mittel zur Behandlung von Mastitis bei Rindern nd als therapeutische Mittel zur Behandlung von ifektiösen Krankheiten, die durch grampositive und ramnegative Bakterien beim Geflügel und bei Tieren jwie beim Menschen verursacht werden. In der Vergangenheit haben sich antibakterielle /littel bei der Therapie von Infektionen, die entweder urch grampositive oder gramnegative Bakterien

verursacht werden, als sehr wirksam erwiesen, es gibt jedoch nur wenige, die gegen beide wirksam sind. Erfindungsgemäß werden deshalb neue Verbindungen geschaffen, die sowohl gegen grampositive als auch gegen gramnegative Bakterien, einschließlich der resistenten Stämme, wirksam sind.

Die Ziele der vorliegenden Erfindung werden erreicht durch die erfindungsgemäße Schaffung der Verbindungen der allgemeinen Formel

Z-S-CH₂-C-NH-CH-CH CH,

O = C-N C-CH₂-O-C-CH₃

in der Z einen 3-Pyridyl- oder 4-Pyridylrest der Formeln

/ V

^VN^:

oder

COOM Das Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen ist dadurch gekennzeichnet, daß man in aufeinanderfolgenden Stufen in an sich bekannter Weise

a) eine Verbindung der allgemeinen Formel

und M ein Wasserstoffatom oder ein pharmazeutisch verträgliches, nichttoxisches Kation bedeuten.

Die pharmazeutisch verträglichen nichttoxischen Kationen umfassen Metallkationen, wie Natrium, Kalium, Calcium und Aluminium und Kationen organischer Amine, wie Trialkylamine, z. B. Triäthylamin. Procain, Dibenzylamin, N-Benzyl-^-phenäthylamin, 1-Ephenamin, Ν,Ν'-Dibenzyläthylendiamin, Dehydroabietylaniin, N,N' - Bis - Dehydroabietyläthylendiamin und N-{niedrig)-Alkylpiperidine, z. B. N-Äthylpiperidin.

Da die erfindungsgemäßen Verbindungen auf Grund ihrer basischen Stickstoff-Funklionen in der Lage sind, mit Säuren Salze zu bilden, sind die Verbindungen gewissermaßen amphoter und umfassen deren nichttoxische Säureadditionssalze (d. h. die Aminsalze), wobei die Mineralsäureadditionssalze, wie das Hydrochlorid, Hydrobrormd, Hydrojodid. Sulfat, Sulfamat und Phosphat, und die organischen Säureadditionssalze, wie das Maieat, Acetat, Citrat, Succinat, Benzoat, Tartrat, Fumarat, Malat, Mandelat und Ascorbat eingeschlossen sind.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden nach einem Zweistufenverfahren hergestellt. Bisher war es allgemein üblich, 7-Aminocephalosporansäure mit einem Acylhalogenid oder seinem funktionellen Äquivalent zu acylieren. Dieses Verfahren liefert unter normalen Bedingungen gute Ausbeuten und ein qualitativ hochwertiges Produkt, ist jedoch nicht ohne weiteres zur Erzielung guter Ausbeuten oder zur Erzielung eines qualitativ hochwertigen Produktes geeignet, falls die Seitenkette des Acylierungsmittels eine basische Stickstoff-Funktion, wie ein primäres oder sekundäres Amin. enthält, das in der Lage ist. Amide zu bilden. Bei der Herstellung des aminenihaltenden Acylierungsmittels ist es überhaupt nicht ungewöhnlich, daß das Acylhalogenid oder sein funktionelles Äquivalent unter Erzeugung polymercr Teere und eines Zersetzungsproduktes selbst kondensiert. Das erfindungsgemäße Zweistufenverfahren vermeidet diesen Nachteil und ergibt Produkte in Ausbeuten, die kommerziell brauchbar sind.

/ \
NH₂ — CH — CH CH₂

3°

35 C-

Il ο

N C — CH₂A

y/

CO₂M

in der M Wasserstoff oder ein pharmazeutisch verträgliches nichttoxisches Kation bedeutet und A die Acetoxygruppe bedeutet oder die Hydroxylgruppe oder zusammen mit M eine monovalente Kohlen stoff-Sauerstoffbindung darstellt, wobei in diesen beiden Fällen zuerst eine Wiederveresterung zur Acetoxyverbindung vorgenommen wird, mit etwa I bis 1,5 Moläquivalenten eines a-Halogenacetylhalogenids der allgemeinen Formel

O

Il

Hai — CH₂C — Hai

in der Hai ein Chlor-, Brom- oder Jodatom bedeutet, oder eines funktionellen Äquivalents in Gegenwart von etwa 1 bis 4 Moläquivalenten einer Base in einer Lösung eines mit Wasser mischbaren Ketons bei einer

Temperatur von etwa - 20 bis etwa 5O⁰C umsetzt und

b) die erhaltene «-Halogenacetamido-Verbindung der allgemeinen Formel

Il

HaI-CH₅-C-NH

60

Il

CH₅-O-C-CH,

CO₂M

mit etwa 1 bis 1.5 Moläquivalenten eines Mercaptan der allgemeinen Formel

Z-SH

in der Z die Gruppe

oder

Ν=

darstellt, in Gegenwart von etwa 1 bis 1,5 Moläquivalenten einer Base in einem wißrigen Lösungsmittelsystem bei einer Temperatur von etwa — 20 bis 50⁰C umsetzt.

In einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens erfolgt die Umsetzung in Stufe a) mit etwa 1 Moläquivalent eines «-Halogenacetylhaiogenjds oder seines funktioneilen Äquivalents als Acylierungsmittel für eine primäre Aminogruppe, bevorzugt mit a-Bromacetylbromid in Gegenwart von 1 bis 4 Moläquivalenten, vorzugsweise von 2 bis 3 Moläquivalenten einer Base, wie beispielsweise Alkalimetallcarbonate oder -bicarbonate, d. h. NaHCO₃, Na₂CO₃, KHCO₃ oder K₂CO₃ oder Pyridin in einem aus Wasser und einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel bestehenden Keton-Lösungsmittelsysiem, wie Wasser in Verbindung mit Aceton, Metbvlisobutylketon (MIBK) oder Butanon, vorzugsv Mse jedoch mit Aceton bei einer Temperatur von 0 ι s 25 C, und in Stufe b) erfolgt die Umsetzung der <i-H alogenacetamidoverbindung vorzugsweise mit etwa 1 Moläquivalent des obigen Mercaptans in Gegenwart von vorzugsweise etwa 1 Moläquivalent einer Base, wie beispielsweise einem Alkalimetallhydroxyd, -bicarbonat oder -carbonat, d. h. NaOH, KOH, Na₂CO₃, K₂CO₃, KHCO₃ oder NaHCO₃ ii. einem wäßrigen Lösungsmittelsystem bei einer Temperatur von vorzugsweise etwa 10' C bis etwa 25 C.

Funktionelle Äquivalente umfassen die entsprechenden Säureanhydride, einschließlich der gemischten Anhydride und insbesondere die aus stärkeren Säuren, wie den niedrig-aliphatischen Monoestern der Kohlensäure, der Alkyl- und Arylsulfonsäuren und der stärker gehinderten Säuren, wie Diphenylessigsäure, hergestellten gemischten Anhydride. Darüber hinaus kann ein Säureazid oder ein aktiver Ester oder Thioester (z. B. mit p-Nitrophenol, 2,4-Dinitrophenol, Thiophenol, Thioessigsäure) verwendet werden, oder die freie Säure selbst kann mit 7-Aminocephalosporansäure gekuppelt werden, nachdem diese freie Säure zuerst umgesetzt wird mit Ν,Ν'-Dimethylchlorforminiumchlorid (britische Patentschrift 1008 170 und Novak und Weichet, Experientia XXI 6. 360 [1965]) od„'r durch Verwendung von Enzymen oder eines N.N'-Carbonyldiimidazols oder eines Ν,Ν'-Carbonylditriazols(südafrikanische Patentschrift 53 2684), eines Carbodiimidreagenzes (insbesondere N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid. N^'-Diisopropylcarbodiimid oder N - Cyclohexyl - N' -(2- morphol'noäthyl) - carbodiimid; Sheehan und Hess, J. Am. Chem. Soc, 77, 1067 [1955]) oder eines Alkinylaminreagenzes (R. Buijle und H. G. Viehe, Angew. Chem. International Edition 3, 582 [1964]) oder eines Keteniminreagenzes (C. L. Stevens und M. E. Mond. J. Am. Chem. Soc. 80, 4065 [1958]) oder eines Isoxazoliumsalzreagenzes (R. B. Woodward. R. A. Olofson und H. Mayer, J. Am. Chem. Snc. 8?. 1010 [1961]). Ein anderes Äquivalent des Säurechlorids ist ein entsprechendes Azolid, d. h. ein Amid der entsprechenden Säure, deren Amidstickstoff ein Glied eines quasiaromatischen fünfgliedrigen Ringes mit wenigstens 2 Stickstoffatomen ist, d. h. Imidazo!. Pyrazol, die Triazole, Bcnzimidazol, Ben/.olria/ol und deren substituierte Derivate. Als ein Beispiel für das allgemeine Verfahren zur Herstellung eines Azolids wird Ν,Ν'-Carbonyldiimidazol mit einer Carbonsäure in äquimolaren Mengen bei Raumtemperatur in Tetrahydrofuran, Chloroform oder Dimethylformamid zur Bildung des Imidazolids der Carbonsäure in praktisch quantitativer Ausbeute unter Freisetzung von Kohlendioxid und 1 Mol Imidazol umgesetzt. Dicarbonsäuren ergeben Diimidazolide. Das Nebenprodukt, Imidazol, fällt aus und kann abgetrennt werden, das Imidazolid kann isoliert werden, dies ist jedoch nicht wesentlich. Die Methoden zur Durchführung dieser Reaktionen zur Herstellung eines Cephalosporins und die zur Isolierung des so hergestellten Cephalosporins angewendeten Methoden sind dem Fachmann bekannt (USA.-Patentschriften 3079 314, 31 17 126 und 3129 224 und britische Patentschriften 9 32644, 9 57 570 und 959054).
Die beim erfindungsgemäßen Verfahren verwendeten Ausgangsmaterialien umfassen 7-Aminocephalosporansäure und Derivate der 7-Aminocephalosporansäure. 7-Aminocephalosporansäure wird durch Hydrolyse des Cephalosporins C hergestellt und besitzt die Formel 111

NH₂-CH-CH
O = C-

CH₂

N C — CH₂OCCH,
C

COOH

Saure Hydrolyse des Cephalosporins C zur Herstellung der 7-Aminocephalosporansäure führt daneben auch zur Bildung des Lactons, 3-Hydroxymethyl - 7 - aminodecephalosporansäurelacton, das durch weitere Hydrolyse der Acetoxygruppe und anschließende intramolekulare Veresterung gebildet wird. Das Lacton besitzt die Formel IV

NH, — CH

O = C

Enzymatische Hydrolyse der Acetoxygruppe der 7-Aminocephalosporansäure führt zur Bildung von 3-Hydroxymethyl-7-aminodecephalosporansäure der Formel V

NH₂

CH-CH CH₂

O = C

N
\

C-CH₂OH

COOH

und eine derartige Verbindung kann mit Essigsäure zur

Bildung der 7-Aminocephalosporansäure wieder verestert werden.

Die zuvor genannten Kerne und ihre Herstellung sind dem Fachmann bekannt, und sie werden beispielsweise in der USA.-Patentschrift 31 17126 und den britischen Patentschriften 9 32 644, 9 57 570 und 9 59 054 beschrieben.

Das Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der vorliegenden Erfindung wird im allgemeinen durch Auflösung einer molaren Menge einer Verbindung der Formeln 111, IV oder V in einer Wasser/ Aceton-Lösung (2:1), die mit 3 Mol eines Bicarbonats gepuffert ist, durchgeführt.

Die Lösung wird schnell gerührt, auf 0° C abgekühlt, und 1 Mol eines Halogenacetylhalogenids, Vorzugsweise Bromacetylbromid, wird schnell hinzugegeben. Die Temperatur wird 10 Minuten lang bei 0 bis 5° C gehalten, und anschließend wird zusätzlich 1 Stunde gerührt, wobei die Temperatur auf 25° C steigen gelassen wird. Die Mischung wird im Vakuum bei 20" C bis etwa zum halben Volumen eingeengt und anschließend das Volumen durch Zugabe von Wasser verdoppelt. Es werden zwei Ätherextraktionen durchgeführt und die Ätherextrakte verworfen. Die wäßrige Lösung wird mit einer Äthylacetatschicht bedeckt, gerührt und gekühlt, wobei während dieser Zeit die Lösung durch Zugabe von 40%iger H₃PO₄ auf einen pH-Wert von 2 angesäuert wird.

Die Mischung wird nitriert und die Äthylacetatschicht abgetrennt, mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und anschließend mit einer Lösung von Natrium- oder Kalium-2-äthylhexanoat in n-Butanol behandelt. Das sich bildende öl wird zur Induzierung der Kristallisation angerieben. Die erhaltenen Kristalle werden gesammelt, mehrmals mit Aceton gewaschen und im Vakuum über P₂O₅ getrocknet, um ein Natrium- oder Kalium-7-(a-bromacetamido)-cephalosporanat oder Derivat desselben entsprechend dem Ausgangsmaterial zu erhalten.

Das Bromacelamidocephalosporanat-Derivat wird bei Raumtemperatur in einer Wassermenge gelöst und während der tropfenweisen Zugabe im Verlauf einer Stunde einer Lösung, die sich aus äquimolaren Mengen eines mit basischem Stickstoff substituierten Mercaptans und eines Alkalicarbonats, d. h Natrium, Kalium usw.. zusammengesetzt, schnell gerührt. Das Rühren wird weitere 90 Minuten fortgesetzt, in deren Verlauf 40%ige Phosphorsäure hinzugegeben wird, bis ein pH-Wert von 2,5 bis 3,0 erreicht ist. Das Produkt, welches normalerweise kristallisiert, wird gesammelt, anschließend mit Wasser und Äthylacetat gewaschen, um die erwünschte Verbindung der allgemeinen Formel I zu ergeben.

Beim Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel 1 liegen die Verbindungen manchmal in wäßriger Lösung in Form ihrer Natriumoder Kaliumsalze vor. Diese Verbindungen in der wäßrigen Phase können dann in die freie Säure umgewandelt werden, vorzugsweise in der Kälte unter einer Schicht eines organischen Lösungsmittels durch te Zugabe einer Mineralsäure, z. B. 40%iger H₃PO₄ bis pH 2 bis 3. Die freie Säure kann anschließend mit einem mit Wasser nicht mischbaren, neutralen organischen Lösungsmittel, wie Äthylacetat, extrahiert werden, der Extrakt wird gewünschtenfalls schnell mit Wasser in der Kälte gewaschen und mit wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet, und die freie Saure wird aus der organischen Lösungsmittellösung wieder gewonnen.

Das Produkt in dem Äthylacetatextrakt in Form seiner freien Säure kann anschließend in jedes gewünschte Metall- oder Aminsalz umgewandelt werden, insbesondere durch Behandlung mit der geeigneten Base, z. B. einem freien Amin, wie einer Procainbase oder einer Lösung von Kalium-2-äthylhexanoat in trockenem n-Butanol, in die pharmazeutisch verträglichen nichttoxischen Aminsalze, die oben beschrieben wurden. Diese Salze sind normalerweise in Lösungsmitteln, wie Äthylacetat unlöslich und können durch einfache Filtration in reiner Form gewonnen werden.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen wurden hinsichtlich ihrer pharmakologischen Wirksamkeit mit der aus dem Stand der Technik als gut wirksam bekannten Verbindung Cephalothin verglichen.

Die erfindungsgemäße Verbindung 7-[«-(4-Pyridylthio)-acetamido]-cephalosporansäure, im folgenden kurz als BL-P1322 bezeichnet, besitzt bei experimentellen Bakterieninfektionen von Mäusen mit S. aureus A 9606 (P + ) einen CD_S0-Wert von 2 mg/kg im Vergleich zu 3 mg/kg bei Cephalothin. Die nachstehende Tabelle, die die in vitro Aktivität von Cephalothin und BL-P 1322 vergleicht, zeigt darüber hinaus, daß die Verbindung BL-P 1322 bei ähnlichem antimikrobiellem Spektrum wie die Vergleichsverbindung gegenüber Stämmen von Diplococcus pneumoniae, Enterobacter sp. und Mycobacterium tuberculosis wesentlich wirksamer ist.

Tabelle I

smus Anzahl	Mittlere	MlC^g/ml)
der ge
testeten
Stämme	Cepha	BL·PI322
	lothin

Staphylococcus	13	0,1	0,1
aureus (P-)
S. aureus (P + )	18	0,1	0,1
Diplococcus	14	0,1	0,03
pneumoniae
Streptococcus	18	0,01	0,01
pyogenes
Escherich ia coli	56	4	3
Proteus mirabilis	26	1	1
P. morganii	16	500	500
P. vulgaris	9	4	2
Klebsiella pneumoniae	10	4	4
Enterobacter sp.	10	133	38
Serratia marcescens	6	>500	>500
Shigella sp.	9	2	1
Salmonella sp.	20	2	1
Haemophilus influenzae	22	2	2
Neisseria gonorrhoea	15	3	8
N.meningitidis	2	0,4	0.4
Mycobacterium	1	100	25
tuberculosis
(P-) = nicht Pen rallinase bildend
<P+I = Pemctllina&e bildend

Die Verbindung BL-P 1322 zeichnet sich gega
über der Vergleichsverbinduag noch dadurch vortei
haft aus, daß ihre Serumbindung mn 44 bis 50% ante
halb der des Cephalothin(65%)liegt.

509519/3

862

Die erfindungsgemäße Verbindung 7-[a-(3-Pyridylthio)-acetamido]-cephalosporansäure, die im folgenden kurz als BL-P 1343 bezeichnet wird, ist gegenüber der Vergleichsverbindung Cephalothin insbesondere hinsichtlich ihres CD₅₀-Wertes gegenüber S. aureus 1633-2 überlegen. Sie besitzt gegenüber S. aureus 1633-2 einen oralen CD₅₀-Wert von 12 mg/kg im Vergleich zu 60 mg/kg bei Cephalothin. Die minimalen Hemmkonzentrationen der Verbindung BL-P 1343 gegenüber einer Vielzahl von Organismen zeigen, daß die Verbindung ein ähnliches antimikrobielles Spektrum wie die Vergleichsverbindung zeigt. Die nachfolgende Tabelle zeigt die minimalen Hemmkonzentrationen in μg/ml der Verbindung BL-P 1343 und der Vergleichsvcrbindung Cephalothin gegenüber einer Vielzahl von Organismen.

Tabelle II

Organismus

MIC (ng/ml)

Verbindung

Cephalothin

D. pneumoniae + 5% Serum	0,125	0,125
Str. pyogenes	0,032	0,032
S. aureus Smith	0,063	0,125
S. aureus Smith	0,2 .	0,4
+ 50% Serum
S. aureus 1633-2	0,2	0,2
Pr. morganii	>100	>100
E. coli A 9675	>100	25
E. Coli Juh'. A 15 119	25	12,5
SaI. enteritidis	0,8	0,8
K. pneumoniae A 9977	12,5	3,2
K. pneumoniae A 15 130	50	12,5
Ps. aeruginosa	>i00	>100

Die Toxizitäten wurden als LD₀-Wertc (nichtlelale Dosis für Mäuse) bestimmt. Die erfindungsgemäßen

10

Verbindungen BL-P1322 und BL-P1343 besitzen jeweils einen LD₀-Wert > 800 mg/kg/Tag.

Bei der Behandlung von bakteriellen Infektionen beim Menschen werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Übereinstimmung mit den üblichen Verfahren zur Verabreichung von Antibiotika oral oder parenteral in einer Menge von etwa 5 bis 60 mg/ kg/Tag und vorzugsweise etwa 20 mg/kg/Tag in aufgeteilten Dosierungen, z. B. 3- bis 4mal täglich, verabreicht. Sie werden in Dosierungseinheiten verabreicht, die beispielsweise 125 oder 250 oder 500 mg des aktiven Bestandteils zusammen mit geeigneten physiologisch verträglichen Trägern oder Verdünnungsmitteln enthalten. Die Dosierungseinheiten können in Form von flüssigen Formulierungen, wie Lösungen, Dispersionen oder Emulsionen oder in fester Form, wie Tabletten oder Kapseln, vorliegen.

Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung

der Erfindung. Alle Temperaturen werden in Grad

ίο Celsius angegeben.

In den folgenden Beispielen bedeutet ACS die Verbindung der Formel

NH₂-CH-CH CH₂

O = C N

C-CH₂-O-C-CH₃

OH

Desgleichen bedeutet in den folgenden Beispielen »MIC« die Minimum-Inhibitor-Konzentration in y/ml der Verbindung, die erforderlich ist, um das Wachstum des beschriebenen untersuchten Organismus zu inhibieren.

Beispiel 1

a) Natrium-7-(«-bromacetamido)-cephalosporanat

O
Br-CH,-C-NH-i (^\ O

-N J-CH₂-O-C-CH₃

CO₂Na

27,2 g (0,1 Mol) der 7-ACS, 33,2 g (0.3 Mol) NaHCO₃, 200 ml Wasser und 100 ml Aceton werden zusammengemischt, auf 0 C gekühlt und schnell gerührt, während 20,1 g (0,1 Mol) in 100 ml Aceton gelöstes Bromacetylbromid rasch auf einmal hinzugegeben wird. Die Temperatur wird 10 Minuten lang bei 0 bis 5° C gehalten, anschließend wird das Eis Salz-Bad entfernt und das Röhren 1 Stunde lang fortgesetzt, wobei die Temperatur auf 25° C steigt. Die Mischung wird im Vakuum bei 20⁰C auf die Hälfte des Volumens eingeengt, und 200 ml Wasser werden hinzugegeben. Zweimal wird mit 400 ml Äther extrahiert, und die Ätherextrakte werden weggeschüttet. Die wäßrige Lösung wird mit 200 ml Äthylacetat überdeckt und heftig gerührt und gekühlt, wobei mit 40%iger Phosphorsäure auf pH 2 angesäuert wird. Die Mischung wird filtriert, die Äthylacetat-

ss schicht abgetrennt und mit drei 100 ml Portionen Wasser gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und mit 30 ml Natrium-2-äthylhexanoat in n-Butano] (34 ml = 0,1 Mol) behandelt. Das öl, das sich absetzt, wird zur Einleitung der Kristallisation gekratzt.

Nach 20minütigem Rühren wird das Produkt von det Kolbenwand abgekratzt und gesammelt. Der Filterkuchen wird mit mehreren Portionen Aceton gewaschen, luftgetrocknet und im Vakuum über P₂O₅ getrocknet. Ausbeute 22,5 g, Zersetzung bei 193°C Das IR-Spektrum und das NMR-Spektrum stimmten mit der obengenannten Verbindung, Natrium-7-(<i· bromacetamido)-cephalosporanat, überein (s. USA.-Patentschrift 3173916).

862

b) 7-[u-(4-Pyridylthio)-acetamido]-cephalosporansäure

Il

-CH,-C-NH

Il

CH₇-O-C-CH,

CO₂H

ιο

Zu einer gerührten Lösung von 4,15 g (0,01 Mol) Natrium-7-(u-bromacetamido)-cephalosporanat und 0,84 g (0,01 Mol) NaHCO₃ in 25 ml Wasser werden 1,1 g (0,01 Mol) 4-Mercaptopyridin hinzugegeben. Heftige Kohlendioxidentwicklung tritt auf. Nach 10 Minuten wird der pH-Wert mit 40%iger H₃PO₄ auf pH 2 eingestellt, und ein Extrakt mit 25 ml Äthylacetat wird hergestellt und verworfen. Die wäßrige Lösung wird anschließend mit einer Lösung aus 4,44 g (0,01 Mol) einer langkettigen Alkylaminsulfonsäure in 50 ml Methylisobutylketon (MIBK) extrahiert. Der MIBK-Extrakt wird einmal mit 25 ml Wasser gewaschen und anschließend 10 Minuten über Na₂SO₄ getrocknet. Die filtrierte MIBK-Lösung wird anschließend auf etwa 100 ml mit MIBK Waschungen des Na₂SO₄ Filterkuchens verdünnt. Die Lösung wird im Vakuum bei 20° C auf ein Volumen von etwa 50 ml eingeengt, und anschließend werden unter Rühren 1,4 ml (0,01 Mol) Triäthylamin hinzugegeben. Das ausgefallene Produkt wird gesammelt und gründlich mit MIBK, trockenem Äther, Aceton und schließlich mit Petroläther gewaschen. Die kristalline Verbindung wiegt 1,5 g,und ihr IR- und NMR-Spektrum stimmt

mit der Struktur des gewünschten Produktes 7 - [α - (4 - Pyridylthio) - acetamid] - cephalosporansäure überein. Die MlC gegenüber Diplococcus pneumoniae plus 5% Serum (gelöst in verdünntem wäß-S rigem Natriumbicarbonat) beträgt 0,062 y/ml. Zersetzungstemperatur 155° C, umkristallisiert aus Aceton-Wasser.

Analyse C₁₇H₁₇N₃O₆S₂ wasserfrei:

Berechnet ... C 48,22, H 4,04, N 9,93%;
gefunden .... C 48,22, H 4,57, N 10,09%.

Analyse C₁₇H₁₇N₃O₆S₂ + ¹I₁ Aceton, Zersetzungstemperatur 155° C:

Berechnet ... C 49,01, H 4,45, N 9,28%;
gefunden .... C 48,87, H 4,48, N 9,33%.

Beispiel 2

7-[a-(3-Pyridylthio)-acetamido]-cephalosporansäure

S-CH₂-C-NH

-N J-CH₂-O-C-CH₃

Ersetzt man beim Verfahren des Beispiels 1 b das 4-Mercaptopyridin durch 3-Mercaptopyridin, so erhält man 7-[a-(3-Pyridylthio)-acetamido]-cephalosporansäure, Zersetzungspunkt 163° C.

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Claims

1870301 £ Patentansprüche:

1. Verbindungen der allgemeinen Formel

Z-S-CH₂-C-NH-CH-CH CH₂

O = C N C-CH₂O-C-CH₃

C COOM