DE1598134A1 - Verfahren zum Bakteriennachweis - Google Patents

Verfahren zum Bakteriennachweis

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DE1598134A1 DE19661598134 DE1598134A DE1598134A1 DE 1598134 A1 DE1598134 A1 DE 1598134A1 DE 19661598134 DE19661598134 DE 19661598134 DE 1598134 A DE1598134 A DE 1598134A DE 1598134 A1 DE1598134 A1 DE 1598134A1
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Stach Dr-Ing Kurt
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Description

  • Verfahren zum Bakterionnachweis Zusatz zur Patentanmeldung Aktenzeichen B 86.402 IX b/42 1 Gegenstand der Patentanmeldung B 86.402 IX b/42 1 ist ein Verfahren zum Nachweis von Bakterien, vorzugsweise in Urin, durch eine Fabreaktion, dadurch'gekennzeichnet, daß man das zu untersuchende medium mit einem flüssigen oder fasten Nährboden und einer nicht wachatumhemmenden menge einer Verbindung der Formel I, in der X Saueratof?, Schwefel oder ein alkyliertes Stickatoffatom bedeuet und R die folgenden Reste darstellt, in denen R1 eine gesättigte oder ungesättigte Alkyl-, Aryl-, Aralkyl-, Acyl-, Hydroxy oder Acyloxyalkylgruppe, R2 Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe, R3 und R4 Wasserstoff odar zusammen eine Isopropylidengruppe bedeuten und n die Zahl 2 oder 3 ist, zusammenbringt und nach 1 bis 16 Stunden Bebrütungszeit bei 20 @ 37 °C die Farbveränderung auswertet.
  • In Ausgestaltung des Verfahrens des Hauptpatents wurde nun gefunden, daß sich dio für die Praxis benötigten Bebrütungszeiten nochmals wesentlich verkürzen lassen und eino schärfere Abgrenzung der Keimzahlbereiche "normal" bzw. "asymptomatisch/signifikant" erreichen läßt, wenn man die zu untersuchende Probe, wie beispielsweise eine keimhaltige Nährbouillon oder einen mit Nährsubstanz versetzten ksimhaltigen Urin ohne Zusatz dtir Substanz I bebrütet, danach erst die Substanz I zufügt, kurze Zeit weiter bobrütet und dann die Farbveränderung auswertet.
  • Für eine Urinuntersuchung, für die nach der bisherigen Arbeitsweise etwa 9 - 10 Stunden erforderlich waren, liegt nach der neuen methode bereits nach ca. 5 - 6Stunden das Endergebnis vor.
  • Zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens wird ansonsten prinzipiell an der Arbeitsweise des Hauptpatents festgehalten, wobei sich insbesondere Teattabletten und Testpapiere vorzüglich eignen.
  • Das erfindungsgemäße Verfahren ist in den nachfolgenden Beispielen näher erläutert.
  • Beispiel 1 1,8 ml keimhaltige Nährbouillon werden 5 Stunden bei 37 °C bebrütet.
  • Danach werden 0,2 ml einer Lösung, de Do 29 in einer Konzentration von 500/ug/ml enthält, zugegeben (zur Herstellung dieser Lösung werden 10 mg Do 29 in 2 ml Dimethylformamid und 2 ml Polyoxyäthylensorbitan laureat ("tween 20") gelöst und anschließend mit 6 ml aqua dest. versetzt und mit aqua dest.nochmals im Verhältnis 1:1 verdünnt). Nach einer halbstUndigen Bebrütungszeit wird die Verfärbung ausgewertet.
  • In der nachfolgenden Tabelle I sind die Ergebnisse von Versuchen mit verschiedenen Keimen und verschiedenen Keimzahlen zusammengestellt.
  • Tabelle I
    Keimzahl pro ml
    Substanz Testkeime
    50.000-100.000 100.000-500.000 > 500.000
    Escherichie # schwach vi@l@tt violett
    coli (18)
    Straptococcus violett violett
    faecalis 155
    Proteus mira- violett
    Do 29 bilis (298) violett
    Staphylococcu braun-
    aureus, SG 511 # # violett
    12
    Klebsiella
    pneumoniae # # violett
    (188)
    Wie man der Tabelle entnehmen kann, beobachtet man wesentlich deutlichere Farbumschläge bei den für die Praxis bedeutungsvollen Keimzahlen.
  • Beispiel 2 In analoger Weise, wie im Beispiel 1 beschrieben, wird keimhaltige Nährbouillon oder ein keimhaltiger Urin 5 Stunden bei 37 °C vorbebrütet, dann mit 0,2 ml einer Lösung von HB 205 versetzt, eine halbe Stunde weiter bebrütet und anschließend ausgewertet Die Lösung an HB 205wird wie im Beispiel 1 aus 10 mg Substanz in 2 ml Dimethylformamid, 2 ml Polyoxyäthylensorbitanlaureat und 6 ml aqua dest. hergestellt und anschließend mit aqua dest. im Verhältnis 1 : 1 verdünnt. Die Ergebnisse mit verschiedenen Ksinarten und verschiedenen Keimzahlen sind in der nachfolgenden Tabelle II zusdmmengestellt.
  • Tabelle It
    Keimzahl pro ml
    Substanz Testkeime
    10.000-50.000 50.000-100.000 100.000-5000.000 >500.000
    Escherichia # # # # @@@@@@@@
    coli (18) # # # hel
    Streptococcus # # @@@@ @@@@
    faecalis (155)
    -@@ 205 Protsus mira- # # @@@@ @@@@
    bilis (298)
    Klebsielle
    pneumoniae hellgrün hellgrün hellgr@r
    (188)
    Wie man der Tabelle entnehmen kann, beobachtet man scharfe Grenzen das Farbumschlags bei für dio Praxis bedeutungsvollen Keimzahlen.

Claims (1)

  1. Patentanspruch Verfahren zum Nachweis von Bakterien, vorzugsweise in Urin, durch eine Farbreaktion, dadurch gekennzeichnet, daß man in Ausgestaltung des Verfahrens der Hauptpatentanmeldung B 86.402 IX b/42 1 das zu untersuchende medium mit einem flüssigen oder festen Nährboden bebrütet, mit einer nicht wachstumhemmenden menge einer Verbindung der Formel ; in der X Sauerstoff, Schwefel oder ein alkyliertes Stickstoffatom bedeutet und R die folgenden Reste darstellt, in denen R1. eine gesättigte oder ungesättigte Alkyl-, Aryl-, Aralkyl-, Acyl-, Hydroxy- oder Acyloxyalkylgruppe, 2 Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe, R3 und R4 Wasserstoff oder zusammen eine Isopropylidengruppe bedeuten und n die Zahl 2 odor 3 ist,zusammenbringt und nach 5 minuten bis 2 Stunden Bebrütungszeit bei 20 - 37 °C die Farbveränderung auswertet.
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