DE1300934B

DE1300934B - Verfahren zur Herstellung von 6-Desoxy-6-desmethyl-6-methylen-tetracyclinen bzw. ihren Salzen mit Saeuren oder Basen

Info

Publication number: DE1300934B
Application number: DEP27184A
Authority: DE
Inventors: Ferry Gales; Rennhard Hans Heinrich; Beereboom John Joseph; Blackwood Robert Keith; Stephens Jun Charles Robert
Original assignee: Pfizer Inc
Current assignee: Pfizer Inc
Priority date: 1960-05-23
Filing date: 1961-05-19
Publication date: 1969-08-14
Also published as: GB995033A; CY366A; CH444853A; CH434238A; MY6700048A; OA00136A; GB995031A; US3200149A; MY7400226A; DE1283834B; DE1298522B; GB998294A; FI40534B; CY480A; SE302119B; CH459189A; MY6700047A; MY6900209A; CY365A; CY381A

Description

Die Erfindung betrifft die Herstellung neuer Tetracyclinverbindungen.

Die Tetracyclinantibiotika umfassen eine Gruppe von biologisch aktiven Perhydronaphthacenverbindungen mit folgender Grundstruktur. Als Numerierungssystem wird das der »Chemical Abstracts« verwendet.

Wasserstoff in Gegenwart eines· Edelmetallkatalysators, vorzugsweise eines Rhodium- oder Palladiumkatalysators, dehalogeniert.

Das erfindungsgemäße Verfahren wird beispielsweise durch das folgende Reaktionsschema erläutert:

OH N(CHa)₂

OH
CONH,

OH O OH O

OH CONH,

OH O

Unter den biologisch aktiven Gliedern dieser Gruppe sind diejenigen, welche die folgenden Reste CH₂ OH N(CH₃)₂

enthalten:

.

/TV VV N— OH

Substituenten	Übliche Bezeichnung
4-N(CH₃)S₂, 6-OH,	Tetracyclin
6-CH_3: 12a-0H
4-N(CHs)₂, 5-OH,	5-Oxy-tetracyclin
6-OH, 6-CH₃, 12a-0H
4-N(CHa)₂, 6-OH,	7-Chlor-tetracyclin
6-CH₃, 7-Cl, 12a-0H
4-N(CH₃J₂, 5-OH,	o-Desoxy-S-oxytetra-
6-CH3, 12a-0H	cyclin
4-N(CH₃I₂₁O-CH₃, 12a- OH	6-Desoxy-tetracyclin
4-N(CHa)₂, 12a-OH	o-Desoxy-o-desmethyl-
	tetracyclin
4-N(CHa)₂₅O-OH,	7-Brom-tetracyclin
6-CH₃, 7-Br, 12a-0H
4-N(CHa)₂, 6-OH,	6-Desmethyl-7-chlor-
7-Cl, 12a-0H	tetracyclin
4-N(CHa)₂₅O-OH,	6-Desmethyl-tetra-
12a-0H	cyclin

CONH,

OH O OH O

Es wurde" nun gefunden, daß " man 6-Desoxyo-desmethyl-o-inethylen-tetracycline bzw. ihre Salze mit Säuren oder Basen erhält, wenn man lla-Halogen-6 - desoxy - 6 - desmethyl- 6 - methylen - tetracycline der allgemeinen Formel

X₃ CHX₂ X₅ N(CHa)₂

OH

in der X₁ = Chlor oder Fluor, X₂ und X₄ = Wasserstoff, Chlor, Brom, Jod oder Nitro bedeuten, jedoch nicht gleichzeitig Nitro bedeuten dürfen, X₃ = Wasserstoff, Chlor, Brom oder Jod und X₅ = Wasserstoff oder die Hydroxylgruppe sind, bzw. deren Salze in lla-Stellung chemisch, wie mit wäßrigem Alkalihydrosulfit bzw. mit Zink in wäßriger Säure, vorzugsweise Mineralsäure, oder katalytisch mit X₁ = Cl₁F

Obgleich es den Anschein hat, daß die Strukturen von manchen dieser Verbindungen isomer sind mit bekannten 5a,6-Anhydro-tetracyclinen, unterscheiden sie sich merklich von diesen, insbesondere hinsichtlich ihres breiteren Aktivitätsspektrums gegen eine Vielfalt von Mikroorganismen, ihrer höheren Aktivität gegen bestimmte einzelne Organismen und insbesondere gegen antibiotikaresistente Organismen. Außerdem schaffen die neuen Verbindungen einen Schutz des Tierkörpers gegen krankheitsverursachende Organismen. Diese Eigenschaft wird, wie gut bekannt ist, von den bekannten 5a,6-Anhydroverbindungen nicht geteilt.

Die. Dehalogenierung kann nach vielen der für die Entfernung von Halogen üblichen Methoden chemisch und auch katalytisch durchgeführt werden. Eine derartige katalytische Reduktion wird durchgeführt durch Behandlung des Ausgangsstoffes mit Wasserstoffgas in Gegenwart eines Edelmetallkatalysators, beispielsweise eines Palladium- oder Rhodiumkatalysators, bei Drücken von Atmosphärendruck bis zu einem Druck von 1000 Atmosphären und Temperaturen von O bis 100° C. Man kann eine Vielfalt von chemischen Methoden verwenden. Eine bekannte Methode ist die Reduktion mit Alkalihydrosulfiten. Hierbei wird die Ausgangsverbindung zu einer wäßrigen Lösung des im einzelnen ausgewählten Hydrosulfits gegeben, und derReaktions-

ansatzJbei Zimmertemperatur, die sich für diese

Umsetzung" als .am zweckmäßigsten erwiesen hat, stehengelassen. Weitere Methoden zur Entfernung des 11 abständigen Halogenatoms sind:

a) Behandlung mit verdünnter, wäßriger Jodwasserstoffsäure,

b) Behandlung mit metallischem Zink in Gegenwart eines Protonendonators, wie Essigsäure.

überraschenderweise wurde gefunden, daß man 11 a-Halogen-tetracycline leicht durch gleichzeitige

Behandlung der 11 α-Halogenverbindung mit Zink und Natriumjodid in einem gegenüber der Umsetzung inerten Lösungsmittel (vorzugsweise in niedermolekularen Alkanonen, wie Aceton) bei einer Temperatur zwischen Zimmertemperatur und Rückflußtemperatur unter Verwendung von äquivalenten bis zu überschüssigen Reagensmengen von 1000 Molprozent und mehr leicht dehalogenieren kann. Bei Rückflußtemperatur ist die Umsetzung in einer so kurzen Zeit wie 30 Minuten vollständig. Nach beendeter Umsetzung wird das Produkt durch Filtration und Einengung der Reaktionsmischung erhalten. Unter den oben beschriebenen Bedingungen der reduktiven Entfernung des 11 a-Halogenatoms werden Nitrogruppen zu Aminogruppen reduziert, so daß man die entsprechenden Aminoderivate erhält.

Für die Umwandlung der 11 a-Halogen-6-methylentetracycline in die 6-Methylen-tetracycline werden die 11 a-Chlor-6-methylen-tetracycline bevorzugt, da diese Verbindungen im allgemeinen ziemlich stabil zu sein scheinen und sich leicht dehalogenieren lassen, Die lla-Fluorverbindungen werden weniger leicht dehalogeniert.

Die 11 a-Dehalogenverbindungen weisen einen überraschend hohen Grad an Aktivität auf, wenn man sie in vitro gegen eine Vielfalt von krankheitsverursachenden Organismen prüft. Sie sind besonders wirksam gegen antibiotikaresistente Stämme von Mikroorganismen.

Die folgende Tabelle faßt die Aktivität von 6-Methylen-tetracyclin gegen eine Vielfalt von krankheitsverursachenden Mikroorganismen einschließlich antibiotikaresistenten Stämmen zusammen. Die Mindesthemmkonzentration wird durch die bekannte Technik der Verdünnungsreihe bestimmt. In der Tabelle sind auch die entsprechenden Werte von 11 a-Chlor-6-methylen-tetracyclin und von 6-Desoxytetracyclin eingeschlossen. Es ergibt sich, daß die Werte für 6-Methylen-tetracyclin im allgemeinen niedriger sind als diejenigen für 6-Desoxy-tetracyclin, was eine größere Aktivität anzeigt, insbesondere gegen Micrococcus pyogenes var. aureus 400, einen tetracyclinresistenten Organismus.

1 = o-Methylen-tetracyclin.

2 = o-Desoxy-tetracyclin.

3 = lla-Chlor-o-methylen-tetracyclin.

4 = o-Desoxy-o-desmethyl-o-methylen-

5-oxy-tetracyclin.

5 = T-Chlor-o-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-

5-oxy-tetracyclin.

Organismus

	Mmoesthemmkonzentration	2	(y/ml)	4	5
		0,78	3	0,78	0,25
1	0,39	50 (25 p)	0,78	0,03
<0,19	0,78	12,5	0,39	0,6
<0,19	3,12	25	0,39	0,06
<0,19	0,39	25	0,39	0,125
<0,19	3,12	—	3,12	1,0
<0,19 .	6,25	>100	0,19	0,19
0,78	0,01	25	0,09	0,01
0,19	25	3,12	0,78	—
<0,19	0,78	100 (50 p)	0,39	0,19
0,78	—	12,5	0,09	0,01
<0,19	—	—	0,25	0,25
—	6,3	—	6,3	1,56
—	6,3	>100	3,12	0,78
3,12	100	>100	•—	■ —
1,56	100	>100	100	3,12
12,5	12,5	>100	12,5	1,56
25,0	3,12	>100	3.15 (ρ)	0,78
3,12	6,3	100 (ρ)	3,15 (ρ)	0,78
0,78	0,78	>100	0,19	0,06
1,56	0,09	12,5	0,19	0,03
<0,19	3,12	6,25	3,12	0,39
<0,19	0,19	—	0,39	0,25
3,12	3,12	6,25	"1>56	0,25
<0,19	0,19	25	0,78	3,12
0,39	0,39	6,25	0,19	0,5
<0,19	—	25	0,39	—
<0,19	0,19	12,5	—	—
<0,19	0,78 '
<0,19

Micrococcus pyogenes var.aureus 5 ....

Streptococcus pyogenes

Streptococcus faecalis

Diplococcus pneumoniae

Erysipelothrix rhusiopathiae

Corynebacterium diphtheriae

Listeria monocytogenes

Bacillus subtilis

Lactobacillus casei

Bacterium amrrioniagenes

Streptococcus pyogenes 98

Micrococcus pyogenes var.aureus 209 ρ

Aerobacter aerogenes

Escherichia coli

Proteus vulgaris -

Pseudomonas aeruginosa

Salmonella gallinarium

Salmonella pullorum

Klebsiella pneumoniae

Neisseria gonorrhoeae

Hemophilus influenzae

Shigella sonnei

Brucella bronchiseptica

Malleomyces mallei

Vibrio comma

Pasteurella multocida

Streptococcus agalactiae .._;

Mycobacterium 607

5	1 300 934 Fortsetzung	Min 2	6	tion 4	5
Organismus	1	100 100 6,3 3,12	desthemmkonzentra (y/ml) 3	0,78 100 50
Mycobacterium berolinense	<0,19 50 <0,19 6,25 0,78	0,39 >100 100 >100 50
Candida albicans
Sarcina lutea	100 100
Antibiotikaresistente Stämme von Microcoecus pyogenes var.aureus Stamm 376*)
Stamm 400**)

*) Tetracyclinresistent bei einer Konzentration unter 100 }>/ml. ■*·.) Tetracyclinresistent bei einer Konzentration Unter 50 y/ttd. (p) = Teilhemmung.

Bei Wiederholung dieser In-vitro-Versuche in Gegenwart von Humanserum beobachtet man ähnliche Ergebnisse. Die folgende Tabelle faßt die Aktivität der in der Tabelle genannten Verbindungen bei der Prüfung in 20%igem Humanserum zusammen:

Microcoecus pyogenes
var.aureaus 5

Streptococcus pyogenes ...
Streptococcus pyogenes 98

Micrococcus pyogenes
vanaureus 209 ρ

Mindesthemmkonzcntration

0,78 0,78

0,39 0,09 0,19

0,39

Es sei bemerkt, daß 7-ChloΓ-6-desoxy-6-desmethyl-6-methylen-5-oxy-tetracyclin eine größere In-vitro-Aktivität gegen eine große Anzahl von Mikroorganismen als o-Desoxy-o-desmethyl-o-methylen-S-oxytetracyclin besitzt.

Prüft man o-Desoxy-o-desmethyl-o-methylen-5-oxy-tetracyclin in vivo sowohl bei oraler als auch bei parenteraler Gabe, so zeigt diese Verbindung eine größere Aktivität als Tetracyclin oder 5-Oxytetracyclin gegenüber einer durch Tetracyclin empfindliche Mikroorganismen erzeugten Infektion. Die ED₅₀ (ED = Schutzdosis) beträgt für die neue Verbindung bei einer Infektion durch Micrococcus pyogenes var.aureus 5 bei oraler Gabe 3,2 mg'kg und bei parenteraler Gabe 0,34 mg/kg. Die entsprechende ED₅₀ für Tetracyclin beträgt bei oraler Gabe 6,4 mg/kg und bei parenteraler Gabe 0,78 mg'kg.

Die 6-Methylenverbindungen können zu einer Vielfalt von Applikationsformen analog den Stammverbindungen verarbeitet werden. Sie sind brauchbar in der Humantherapie, und sie sind therapeutisch in Futtermitteln oder als Wachstumstiiiiulantien, in der Veterinärmedizin und in der Landwirtschaft brauchbar.

Die Ausgangs- und Zwischenverbindungen, die für das Verfahren gemäß der Erfindung benötigt werden, können wie folgt hergestellt werden:

a) ll«-Chlor-tetracyclin-6,12-hemiketal Zu einer Lösung von 2,2 g wasserfreiem Tetracyclin in 25 ml Dimethyläther des Äthylenglykols gibt man 800 mg N-Chlorsuccinimid unter Rühren bis zur Lösung. Man läßt die Mischung 7 Minuten stehen und verdünnt sie dann mit 25 ml Wasser. Es kristallisieren 813 mg des Produktes als weiße Nadeln.

Das kristalline Hydrochlorid dieses Produkts erhält man durch Lösen in überschüssiger, wäßriger Salzsäure (pH-Wert ungefähr 1) und Gefriertrocknung der Mischung.

b) 1 la-Chlor-ö-desoxy-o-desmethyl-6-methylen-tetracyclin (A)

Man löst lla-Chlor-tetracyclin-o.n-hemiketal in flüssigem Fluorwasserstoff (in einem Verhältnis von 2 g/l 5 ml) bei O⁵C. Man hält die Mischung 10 bis 15 Minuten bei dieser Temperatur. Danach wird der Fluorwasserstoff abgedampft. Der Rückstand wird zur Gewinnung des Hydrofluoridsalzes des 11 a-Chloro-desoxy-o-desmethyl-5-methylen-tetracycline als festes Produkt mit Äther verrieben und das feste Produkt aus Methanol umkristallisiert.

Andererseits kann man auch 10 g des rohen Hydrofluoridproduktes durch Erwärmen und Rühren in 350 ml Wasser lösen. Zu der klaren Lösung gibt man einen gleichen Raumteil konzentrierter Salzsäure, worauf das Produkt als Hydrochloridsalz kristallisiert.

Beispiel 1

11 a - Chlor - 6 - desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylentetracyclin (2,5 g) wird zu 75 ml Methanol gegeben. Dazu gibt man eine Lösung von Natriumhydrosulfit (2,5 g in 50 ml Wasser). Die Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und sechsmal mit je 40 ml Chloroform extrahiert. Die vereinten Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und dann im Vakuum vom Lösungsmittel befreit. Das erhaltene

"Produkt wird einmal mit Äther aufgeschlämmt, wobei man 2,1 g kristallines 6-Desoxy-6-desmethyl-

<>° 6-methylen-tetracyclin erhält. Das Produkt zeigt Ultrarot -Absorptionsmaxima ' (Kaliumbromid) bei 6,0, 6,2, 6,35 und 6,85 μ und Ultraviolett-Absorptionsmaxima (in 0,01 normaler methanolischer Salzsäure) bei 260 und 353 πΐμ (E}*_m = 278).

Bei der Prüfung gegen Klebsieila pneumoniae weist das Produkt eine Oxytetracyclinaktivität von 1200;- mg auf. Das Produkt zeigt einen Rf-Wert von 0,6 in folgendem System:

Mobile Phase

Toluol—Pyridin (gesättigt mit
einem pH-4,2-Puffer) (20:3)

Immobile Phase

pH-4,2-Puffer
(wäßrig)

Es folgt der Lösungsmittelfront in dem folgenden System:

Mobile Phase

Nitromethan, Chloroform,
Pyridin (20:10:3)

Immobile Phase

pH-3,5-Puffer
(wäßrig)

Beispiel 2

Eine Mischung von 250 mg 11 a-Chlor-6-desoxyo-desmethyl-o-methylen-tetracyclin-hydrochlorid und 100 mg Zinkstaub in 10 ml Aceton wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Man läßt die Mischung über Nacht bei Raumtemperatur stehen und behandelt sie dann mit 1 ml 5%iger Salzsäure. Die Mischung wird filtriert und im Vakuum konzentriert. Das erhaltene Rohprodukt wird wie folgt gereinigt: Es wird mit Butanol behandelt, filtriert, das Filtrat mit Hexan behandelt und wieder filtriert. Die unlöslichen Bestandteile werden mit Hexan extrahiert und der Extrakt und das Filtrat vereinigt. Der sich dabei bildende Niederschlag wird abgetrennt, mit Hexan gewaschen und getrocknet. Man erhält 94 mg 6 - Desoxy - 6 - desmethyl - 6 - niethylen - tetracyclin mit Ultraviolett -Absorptionsmaxima in 0,01 normaler methanolischer HCl bei 265 und 353 ηΐμ (E]* = 239).

Beispiel 3

250 mg lla-Chlor-o-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-tetracyclin und 250 mg Natriumiodid in 50 ml Aceton werden unter Rückfluß 2 Stunden erhitzt. Die Reaktionsmischung wird gekühlt, filtriert und das Filtrat im Vakuum zu einer halbfesten Masse eingedickt. Das Rohprodukt wird gereinigt, indem man es zweimal mit Äther wäscht und dann trocknet, wobei man 374 mg eines 6-Desoxy-6-desmethyl-6-methylen-tetracyclin enthaltenden Feststoffes erhält. Ultraviolett-Absorptionsmaxima werden bei 265 und 355 πΐμ (E|*_m = 149) in Q.Oinormaler methanolischer HCl gemessen.

Beispiel 4

Zu 1 g lla-Brom-o-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-tetracyclin-hydrobromid in 20 ml Wasser gibt man unter Rühren 320 mg Kaliumsulfit, welche in 5 ml Wasser gelöst sind. Nach 30 Minuten Rühren bei Zimmertemperatur und Filtration der Reaktionsmischung erhält man o-Desoxy-ö-desmethyl-o-methylen-tetracyclin. Dies Produkt zeigt den gleichen Reinheitsgrad wie das nach Beispiel 1 erhaltene Produkt.

Die Hydrochlorid-, Hydrobromid-, Sulfat-, Hydrojodid- und Phosphatsalze stellt man nach der folgenden, am Hydrochlorid beschriebenen Verfahrensweise her:

Man löst die amphotere Verbindung in Methanol, welches 1 Moläquivalent Chlorwasserstoff enthält, und fällt das Hydrochloridsalz durch Zugabe von Äther aus.

Das Natriumsalz wird hergestellt, indem man die Tetracyclinverbindung in einer äquivalenten Menge Natriumhydroxyd enthaltendem Wasser löst. Die Lösung wird zur Gewinnung des Natriumsalzes gefriergetrocknet.

In ähnlicher Weise werden andere Alkali- und Erdalkalisalze, beispielsweise die Kalium-, Lithium-, Barium-, Calcium-, Strontium- und Magnesiumsalze, . hergestellt.

In ähnlicher Weise bildet man andere Salze unter Verwendung von Säuren und Basen, beispielsweise von organischen Carbonsäuren, wie Weinsäure, Zitronensäure, Apfelsäure, Benzoesäure, Glykolsäure, Gluconsäure, Gulonsäure, Bernsteinsäure oder Essigsäure, oder von organischen (Aminen) und anderen anorganischen Basen. Die mit pharmazeutisch einwandfreien Säuren oder Basen gebildeten Salze sind brauchbar in der-Therapie; die mit pharmazeutisch nicht einwandfreien Säuren oder Basen sind zur Reinigung der neuen Produkte und zur Herstellung von pharmazeutisch einwandfreien Salzen verwendbar.

Beispiel 5

Man kühlt eine Lösung von 50 g lla-Chloro-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-tetracyclin-hydro- chlorid in 500 ml Monomethyläther des Äthylenglykols auf 4° C in einem Eisbad und behandelt die schnell gerührte Lösung nach und nach mit 50 g Zinkstaub während etwa 10 Minuten. Die Temperatur steigt während der Zugabe auf 12⁰C. Nach vollständiger Zugabe beginnt die Temperatur zu sinken. Nach einer Gesamtreaktionszeit von 15 Minuten entfernt man das Zink durch rasche Filtration und wäscht es mit Lösungsmittel. Zum Filtrat gibt man im Laufe von etwa 10 Minuten allmählich 1 1 Wasser. Es bildet sich eine gelbe Aufschlämmung des Zinkkomplexes des Produkts. Der pH-Wert der Lösung wird mit 10%igem, wäßrigem Natriumhydroxyd auf 6,8 eingestellt.
Die erhaltene Aufschlämmung digeriert man etwa I¹Z₂ Stunden in einem Eisbad und filtriert dann. Man schlämmt den feuchten Kuchen in 750 ml Wasser auf und fügt konzentrierte Salzsäure tropfenweise hinzu, bis man eine klare Lösung erhalten hat. Ein geringer Überschuß an konzentrierter Salzsäure bewirkt die rasche Kristallisation des 6-Desoxyo-desmethyl-o-methylen-tetracyclin-hydrochlorids in glänzenden Nadeln. Nach 1 stündiger Digerierung wird das Produkt filtriert und getrocknet. Die Ausbeute beträgt 37,8 g Das Produkt schmilzt bei 213,8 bis 214,2° C unter Zersetzung.

lla- Chlor - 6 - desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylentetracyclin wird auch durch folgende Verbindungen zu 6 - Desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylen - tetracyclin dechloriert:

wäßriges Phenylhydrazinacetat,
wäßriges Eisen(II)-sulfgt,
Natriumformaldehydsulfoxylat,
unterphosphorige Säure und

Pälladiumschwarz,
Eisenpulver in Dimethylformamid,
Raney-Nickel in 50%iger wäßriger Essigsäure.

Die nach den hier beschriebenen Verfahrensweisen isolierten 6 - Desoxy- 6 - desmethyl - 6 - methylen - tetracycline können geringe Mengen, d. h. weniger als 20%, ihrer C-4-Epimeren enthalten. 5-Hydroxymethylen-tetracycline sind gegen eine C-4-Epimerisation widerstandsfähiger. Die C-4-Epimeren der

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neuen Verbindungen können aus Mischungen durch übliche Verfahrensmaßnahmen, wie Papierchromatographie oder durch Gegenstromverteilung, isoliert werden.

5 Beispiele

Zunächst stellt man lla-Chlor-o-desoxy-o-desmethyl-6-methylen-5-hydroxy-tetracyclin (Verbindung B) in der folgenden Weise her: ro

Man gibt 5 g Ha-Chlor-5-hydroxy-tetracyclin-6,12-hemiketal zu 15 ml trockenem, flüssigem Fluorwasserstoff und rührt die Mischung 3V₂ Stunden bei Eisbadtemperatur. Der Fluorwasserstoff wird durch Erwärmen in einem Stickstoffstrom abgedampft, _r5 wobei man das Produkt als Hydrofluoridsalz erhält.

Das rohe Hydrofluoridsalz löst man in Wasser und gibt konzentrierte Salzsäure oder Perchlorsäure' (70%) tropfenweise zur Ausfällung des Hydrochloride salzes bzw. des Perchloratsalzes hinzu. Das Hydrojodidsalz fällt man aus Acetonlösung des rohen Hydrofluoridsalzes durch Zugabe von 47%ig^er Jodwasserstoffsäure aus.

Man gibt zu einer Lösung von 5 g der Verbindung B (als Hydrojodid) in 125 ml verdünnter Salzsäure (1 Teil konzentrierte HCl in 55 Teilen Wasser) bei 20⁰C 2 g Zinkstaub. Nach 10 Minuten Rühren wird das Zink abfiltriert, das Filtrat auf einen pH-Wert von 0,8 eingestellt und mit Butanol extrahiert. Der Butanolextrakt wird unter vermindertem Druck zu einem Rückstand eingeengt, welcher mit Äther verrieben wird. Der ätherunlösliche Rückstand wird aus einem Gemisch von Methanol, Aceton, konzentrierter Salzsäure und Äther kristallisiert. Man erhält das 6 - Desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylen-5 - hydroxy - tetracyclin als Hydrochlorid - monomethanolat (2,5 g) mit einem Schmelzpunkt von 205° C unter Zersetzung. Die Ultraviolett-Absorptionsanalyse gibt folgende Werte:

Beispiel 7

45

in 0,0In-HCl in Methanol: X_max 252 ηΐμ,

E\l = 450 und X_max 345 ηΐμ; Ε}* = 302; in 0,0In-NaOH in Methanol: X_max 235 πΐμ, ■EU = 442; X_max 254 πι_μ, E\f_m = 408;

X_max 385 ΐημ, Ε"}« = 329; X_inf 280 πΐμ,

E[*_n = 329;
in 0,6In-MgCl₂ in Methanol: X_max 240 mμ, EJ* = 461; X_max 277 mjx, EJ* = 326; X_max 351 πιμ, EJ* = 282.

Die Ultrarot-Absorptionsanalyse zeigt hauptsächliehe Spitzen bei 6,03, 6,2, 6,37 und 6,87 μ. Der biologische Versuch ergibt einen Wert von 2000 bis 2400 y/mg (Klebsieila pneumoniae; Trübungsmessung; Oxy tetracyclin als Standard).

Die Elementaranalyse des Produktes ergibt die folgenden Werte: C = 55,0%, H = 5,2%, N = 5,5%, Cl = 7,0%. OCH₃ = 3,4%· Das Produkt zeigt in den folgenden Systemen Rf-Werte von 0 bzw. 0,35>,=-=--

Mobile Phase

1. Toluol—Pyridin (gesättigt
mit pH-4,2-Puffer) (20:3)

2. Nitromethan, Chloroform,
Pyridin (gesättigt mit
pH-3,5-Puffer) (20:10:3)

Immobile Phase

pH^-Puffer (wäßrig)

pH-3,5-Puffer (wäßrig) 2,0 g lla-Chlor-S-hydroxy-o-desoxy-o-desmethyl-6-methylen-tetracyclin werden in 200 ml Essigsäure gelöst und dazu 2,0 g 5%iges Rhodium auf Aluminiumoxid gegeben. Die Mischung wird 3 Stunden bei Raumtemperatur mit Wasserstoff behandelt und dann filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum bis zur Bildung eines Feststoffes eingedampft. Der Rückstand wird kristallisiert, indem man ihn in einer Mischung von 7 ml Methanol und 7 ml Wasser löst und anschließend mit 3 g Sulfosalicylsäure behandelt. Die Mischung wird einige Minuten auf einem Dampfbad erwärmt und dann bei Raumtemperatur gerührt. Der erhaltene kristalline Niederschlag wird abfiltriert, wobei man 1,75 g S-Hydroxy-o-desoxy-o-desmethyl-6-methylen-tetracyclin in einer Ausbeute von 88% erhält. Das Produkt zeigt Ultraviolett-Absorptionsmaxima bei' 345 (E}*_m = 210), 318 (Schulter, Ei* =■ 179) und 260 πΐμ (Schulter, EU = 310).

Beispiele

65 g lla-Chlor-S-hydroxy-o-desoxy-o-desmethyl-6-methylen-tetracyclin-p-toluolsulfonat werden in 1 1 einer 50%ig^en Methanol-Wasser-Mischung aufgeschlämmt. Dazu werden portionsweise 17,4 g Natriumhydrosulfit gegeben. Die Reaktionsmischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann mit IQ g Aktivkohle behandelt und filtriert. Gibt man zu dem Filtrat 15 g 6-Sulfosalicylsäure, so kristallisiert 5 - Hydroxy - 6 - desoxy - 6 - desmethyl-6-methylen-tetracyclin als sulfosalicylsaures Salz aus (63,8 g, 96%).

Das sulfosalicylsäure Salz (12,3 g) wird in einer heißen Mischung von 60 ml Aceton, 60 ml Methanol und 12 ml konzentrierter Salzsäure gelöst. Die Lösung wird geklärt, gekühlt und über Nacht gerührt. Man erhält in einer Ausbeute von 62% (5,5 g) das solvatisierte Hydrochlorid. Das Produkt zeigt Ultraviolett-Absorptionsmaxima in 0,01normaler methanolischer HCl bei 253 und 345 Γημ (log ε = 4,37 und 4,19).

Analyse: C₂₂H₂₂O₈N₂ · HCl · 0,5H₂Q · 0,5CH₃OH.

Berechnet:

C 53,6, H 5,2, N 5,6, Cl" 7,0, H₂O 1,8,

OCH₃ 3,0%;
gefunden:

C 54,0, H 5,3, Ν'5,4, Cr 6,9, H₂O 1,9, OCH₃ 3,1%,

- - ' ' B e i s ρ i e 1 9

6,5 g lla-Fluor-S-hydroxy-o-desoxy-o-desmethyl-6-methylen-tetracyclin-hydrofluorid werden in 100 ml einer Mischung aus 1:1 Methanol—Wasser, die 2,5 ml konzentrierter Salzsäure enthält, gelöst. Dazu =gibt man 2,6 g Zinkstaub in kleinen Portionen und ,rührt die Mischung dann 15 Minuten. Das Reaktionsgemisch wird filtriert. Zum Filtrat werden 5 g Sulfosalicylsäure gegeben. Beim Stehen kristallisiert das Gemisch, und man erhält durch Filtrieren. 3,2 g (48%) S-Hydroxy-ö-desoxy-ö-desmethyl-ö-methylentetracyclin-sulfosalicylat. -Oas Produkt wird in gleicher Weise wie im Beispiel 8 in ein Hydrochloridhemihydrat-hemimethanolat übergeführt und entspricht nach dem Umkristallisieren dem Produkt des Beispiels 8.

Beispiel 10

9,4 g 7,11 a - Dichlor - 5 - hydroxy - 6 - methylen - tetracyclin-hydrojodid-diisopropanolat werden mit 60 ml Methanol und 60 ml Wasser verrührt. Dazu werden 4,3 g Natriumhydrosulfit gegeben, und die Mischung wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Der pH-Wert wird mit Salzsäure auf 1,2 eingestellt, und die unlöslichen Bestandteile werden durch Filtrieren entfernt. 5-Sulfosalicylsäuredihydrat (2 g), gelöst in 10 ml Methanol, werden zu dem Hydrat gegeben. Beim Stehen kristallisiert das 5-Sulfosalicylat des Produktes aus (4,9 g 57%)· Das Sulfosalicylatsalz wird mit 20 ml Methanol aufgeschlämmt, und der pH-Wert wird mit Triäthylamin auf 8,5 eingestellt. Die Lösung wird über Aktivkohle gereinigt, filtriert und der pH-Wert mit Salzsäure auf 5,5 eingestellt. Das amphotere Material kristallisiert und wird dann auf dem Filter mit Wasser und Methanol gewaschen. Die Ausbeute an luftgetrocknetem Produkt beträgt 2,5 g (73%).

Die Base wird in analysenreines Sulfosalicylat übergeführt, indem man 1 g zu einer Lösung von 1 g 5-Sulfosalicylsäuredihydrat in 13 ml Methanol gibt und unmittelbar darauf filtriert. 7-Chlor-6-methylen - 5 - hydroxy - tetracyclin - 5 - sulfosalicylat - monohydrat, das beim Stehen auskristallisiert, wird durch Filtrieren gewonnen und an Luft getrocknet. Die Ausbeute beträgt 1,2 g (80%)· Es zeigt Ultraviolett-Absorptionsmaxima in 0,01 normaler methanolischer HCl bei 239, 268, 346 ηΐμ (log ε = 4,46, 4,07 und 4,11).

Analyse: C₂₂H₂₁O₈N₂Cl · C₇H₆O₆S · H₂O.

Berechnet:

C 48,8, H 4,1, N 3,9, Cl 5,0, S 4,5,

Flüchtiges 2,5%;
gefunden:

C 48,9, H 4,0, N 4,0, Cl 5,1, S 4,4,

Flüchtiges-2,3%· 4<>

Beispiel 11

Man suspendiert ^c20 g des ß-Naphthalinsulfonats des 7,1 la-Dichlor-o-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-5-hydroxy-tetracyclins in 500 ml Methanol, welches 5 g 5%iges Rhodium auf Kohlenstoff enthält, und hydriert die Mischung bei Zimmertemperatur und einem Wasserstoffdruck von 1 at. Nach Aufnahme von 700 ml Wasserstoff filtriert man die R.eaktionsmischung, dampft das Filtrat zur Trockne ein und erhält 15,4 g Rückstand.

Man stellt eine methanolische Lösung von 11 g des Rückstandes mit Triäthylamin auf den pH-Wert

6.5 ein und gibt die Lösung auf eine Säule

(8 x 100 cm), welche 2 kg Cellulosepulver enthält, unter Verwendung von Wasser als stationärer Phase. Die Kolonne wird mit Essigsäureäthylester, welcher mit Wasser gesättigt ist, eluiert. Man fängt 45-ml-Fraktionen auf. Man verfolgt den Eluierungsverlaüf papierchromatographisch und gibt die Fraktionen 132 bis 260 zusammen, dampft sie zur Trockne ein, schlämmt den Rückstand in Äther auf und filtriert. Man erhält 2,74 g des reinen, amorphen, amphoteren 7-Chlor-6-desoxy-6-desmethyl-6-methylen-5-nydroxytetracyclins.

Man kristallisiert das Produkt durch Lösen von

.,6 g in 40 ml warmem Methanol und Kratzen. Die Filtration ergibt 890 g des Produkts als amphotere Base. Die Ultrarotanalyse zeigt die folgenden Spitzen: 2,96, 3,29, 3,42, 6,06, 6,18, 6,30, 6,58, 6,88, 7,19, 7,43, 7,70, 8,23, 9,06, 9,88, 10,63, 10,92, 11,55 und 11,76 μ. Die Ultraviolettanalyse ergibt die folgenden Werte:

in 0,01 n-HCl in Methanol: Maxima bei 247 ηΐμ (log ε = 4,28) und 346 πΐμ (log ε = 4,02);

Inflexion bei 370 ηΐμ (log ε = 3,98);

in 0,01 n-NaOH in Methanol: Maxima bei 234 πΐμ (log ε = 4,24), 253 ηΐμ (log ε = 4,22) und 389 ηΐμ (log ε = 4,12);

Inflexion bei 284 ηΐμ (log e = 4,07);

in 0,01 n-MgCl₂ in Methanol: Maxima bei 241 πΐμ (log ε = 4,32); 349 πΐμ (log ε = 4,04) und 372 mix (Schulter) (log e = 4,02).

Das Produkt zeigt die folgenden Rf-Werte in den angegebenen Lösungsmittelsystemen:

Lösungsmittelsystem

Rf-Wert	Mobile Phase	Immobile Phase
0,35	Essigsäureäthylester	wäßriger Phosphat
	mit Wasser gesättigt	puffer (pH-3)
0,33	Essigsäureäthylester	Puffer nach
	mit Wasser gesättigt	M c 11 ν a i η e
		(hergestellt aus
		4,14 ml einer 0,2 m
		Dinatriumphosphat-
		lösung unter Zusatz
		von so viel 0,1m
		Zitronensäure
		lösung, daß ins
		gesamt 10,00 ml
		entstehen)
		(pH 4,2)

Der biologische Versuch (Klebsiella pneumoniae— Oxytetracyclin als Standard) ergibt einen Wert von 6000 y/mg.

Hydriert man das kristalline Perchlorat des 7,1 la - Dichlor - 6 - desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylen-5-hydroxy-tetracyclins und kristallisiert das Hydrierungsprodukt aus Methanol und 70%iger Perchlorsäure, so erhält man das Perchlorat von 7-Chlor-6 - despxy - 6 - desmethyl - 6 - methylen - 5 - hydroxy - tetracyclin, das die gleichen Ultraviolettspektren wie die amphotere Base zeigt.

Man kann das 7,lla-Dichlor-6-desoxy-6-desmethylo-methylen-S-hydroxy-tetracyclin auch wie im Beispiel 6 mit Zink und Säure dechlorieren.

Beispiel 12

Behandelt man 7-Brom-lla-chlor-6-desoxy-6-desmethyl-o-methylen-S-oxy-tetracyclin mit Natriumhydrosulfit, wie es im Beispiel 10 beschrieben ist, so erhält man 7-Brom-6-desoxy-6->desmethyl-6-methylen-5-oxy-tetracyclin.

Die folgenden Verbindungen werden in gleicher Weise nach den Verfahrensweisen der vorhergehenden Beispiele in die entsprechenden lla-Deshalogenverbindungen übergeführt:

7-Chlor-11 a-fluor-o-desoxy-o-desmethylo-methylen-S-oxy-tetracyclin,

I 300 934

7-J od-11 a-chlor-o-desoxy-o-desmethylö-methylen-S-oxy-tetracyclin,

7-Brom-l 1 a-fluor-o-desoxy-ö-desinethylö-methylen-S-oxy-tetracyclin.

Beispiel 13

6-methylen-9-amino-tetracyclin enthaltenden Feststoffes erhält, der eine Klebsiella-pneumoniae-Aktivität von 330 y/mg hat. .

B ei spiel 15

50 g 1 la-Chlor-o-desoxy-ö-desmethyl-o-methylentetracyclin werden mit 250 ml kondensiertem Fluorwasserstoff und 14,7 g N-Chlorbernsteinsäureimid auf einem Eiswasserbad 1,5 Stunden gerührt. Das Reak-

11 a - Chlor - 5 - hydroxy - 6 - desoxy - 6 - desmethy 1-6-methylen-tetracyclin wird in situ hergestellt, indem
man 10 g lla-Chlor-oxy-tetracyclin-o^-hemiketal in ι ο tionsgemisch wird bei etwa 0⁰C langsam zu 1 1 Iso-30 ml kondensiertem Fluorwasserstoff bei der Tem- butylalkohol, der 50 ml konzentrierte Salpetersäure peratur eines Eisbades 3 Stunden rührt. Zu der enthält, gegeben, dazu gibt man gekühlten Äther. Reaktionsmischung gibt man 2,4 g Kaliumnitrat und Nach weiterem 20minutigem Rühren wird die Mirührt weitere 30 Minuten. Das Reaktionsgemisch schung filtriert und der Filterkuchen mit einer 1:2-wird auf gekühlte, verdünnte Salpetersäure (40 ml 15 Isopropylalkohol-Äther-Mischung und dann mit konzentrierte Salpetersäure zu 60 ml Wasser) ge- Äther gewaschen, wobei man 40,2 g des lla-Chlorschüttet und, nachdem man 20 Minuten in einem o-desoxy-ö-desmethyl-ö-chlormethylen-tetracyclin-Eisbad gerührt hat, daraus ein fester Rückstand nitratsalzes erhält, das ein Ultrarot-Absorptionsdurch Filtrieren gewonnen, der, mit Wasser ge- maximum bei 5,71-ηΐμ und Ultraviolett-Absorptionswaschen und dann getrocknet, 742 mg lla-Chlor- 20 maxima in 0,01 normaler methanolischer Salzsäure 5 - hydroxy - 6 - desoxy - 6-desmethyl - 6 - methylen- bei 242, 265 und 385 ομ (EJ* = 68,5). Weitere 9-nitro-tetracyclin ergibt. Weitere 2,50 g (insgesamt 9,45 g werden aus dem Filtrat gewonnen. Ein ana-3,24 g) werden erhalten, indem man das Filtrat mit lytisch reines Produkt wird durch Umkristallisieren Wasser verdünnt, filtriert und den Filterkuchen mit aus einem Äthanol-Aceton-Gemisch gewonnen und Wasser wäscht und trocknet. Das Produkt zeigt 25 es zeigt die folgenden Analysenwerte: C 46,5%, Ultraviolett-Absorptionsmaxima in 0,01 normaler H 3,83% (berechnet: C 46,5% und H 3,8% für methanolischer Salzsäure bei 260 und 350 ηΐμ. 50 mg C₂₂H₂₀N₂O₇Gl₂ ■ HNO₃ · 0,5H₂O).
des Produktes werden in 1,25 ml einer 1:56 konzen- Das Produkt wird wie folgt reduziert: 40 g werden

Inerten Salzsäure-Wasser-Mischung bei 20° C ge- bei 20⁰C in einer Mischung von 1000 ml Methanol geben, und zu der Aufschlämmung gibt man 30 mg 30 und 1000 ml Wasser mit 20 g Natriumhydrosulfit Zinkstaub. Nach 30minuügem Rühren wird die verrührt. Nach einer halben Stunde wird die Reak-Reaktionsmischung filtriert, und der Filterkuchen tionsmischung filtriert und das Methanol aus dem wird mit einer 1:56 konzentrierten Salzsäure-Wasser- Filtrat unter vermindertem Druck entfernt. Das Mischung gewaschen. Das Filtrat wird sechsmal mit Konzentrat wird portionsweise mit insgesamt 21 2*ml-Portionen Butanol extrahiert, wobei man nach 35 Butanol extrahiert, und die vereinten Extrakte Werden dem Abdampfen des Butanols 10 mg 9-Amino-5-hy- mit Aktivkohle behandelt, filtriert und dem Filtrat droxy-o-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-tetracycUn unter vermindertem Druck das Lösungsmittel abgedampft. Das Filtrat wird zur Trockne eingedampft, wobei man nach dem Waschen mit Äther 19,2 g 40 6 - Desoxy - 6 - desmethyl - 6 - chlormethyJen - tetracyclin erhält. Weitere 7 g werden aus dem Waschäther gewonnen.

Ein analytisch reines Produkt erhält man durch Umkristallisieren von 400 mg des Produktes aus gerührt. Unter Rühren gibt man die Reaktions- 45 einer Mischung von 16 ml Isopropylalkohol und mischung zu 75 ml Eiswasser und filtriert dann. Das 0,8 ml konzentrierter Schwefelsäure. Man erhält Filtrat wird eingedampft, wobei man 500 mg eines 250 mg, die gegen Klebsieila pneumoniae eine Aktigelben Feststoffes erhält, der wie folgt gereinigt wird: vität von 1170}'/mg zeigen und Ultraviolett-Ab-450 mg werden in 3,0 ml Aceton gerührt und 124 mg sorptionsmaxima bei 243 (E}*, = 350) und 352 n\u des nicht gelösten Salzes abfiltriert. Das Filtrat wird 50 (Ej *„ = 185).
zur Trockne eingedampft, und der erhaltene Feststoff mit Äther gewaschen und dann getrocknet,
wobei man 280 mg 7,lla-Dichlor-5-hydroxy-6-desoxy-o-desmethyl-o-methylen-tetracyclin erhält. Das
Produkt zeigt Ultrarot-Absorptionsmaxima bei 5,68 55
und 5,95 μ in Kaliumbromid und Ultraviolett-Absorptionsmaxima bei 2,57 und 3,78 ΐημ in 0,01 normaler methanoiischer Salzsäure. 250 mg werden mit
0,166 ml konzentrierter Salzsäure in 20 ml Methanoi
gerührt. Dazu gibt man 0,333 g Zinkstaub. ^NacjrSö
einer halben Stunde werden weitere 0,167-gZihicstaub zugegeben, und der pH-Werf .wird'dabei durch
Zugabe von konzentrierter Salzsäure auf 2 gehalten.
Nach einer weiteren halben Stunde wird die Reak

erhält.

Beispiel 14

600mg 7,lla-DichloΓ-5-hydroxy-6-desoxy-6-desmethyl-6-methylen-tetracyclin-perchlorai werden in
1,5 ml kondensiertem Fluorwasserstoff mit 100 mg
Natriumnitrat 15 Minuten auf einem Eiswasserbad

Analyse: C₂₂H₂₁O₇N₂Cl · H₂SO₄. · C₃H₈O.

Berechnet:

C 48,5, H 5,1, N 4,5, S 5,2%;
gefunden:

C 48,08, H 4,93, N 4,43, S 5,35%.

-" Beispiel 16

Eine Lösung von 0,54 ml Brom in 10 ml Essigsäure wird tropfenweise unter Rühren zu 2,8 g 11 a- Chlor- 6- desoxy- 6-desmethyI- 6- methylen-tetracyclin in 35 ml Trifluoressigsäure gegeben. Die sich bildende tiefgelbe Suspension wird 3 Stunden unter tionsmischung filtriert und das Filtrat im Vakuum 65 Rühren auf 16°C erhitzt und zeigt dann einen negaeingedampft. Der Rückstand wird mit 35 ml Äther tiven Stärke-Jod-Test. Die Reaktionsmischung wird gewaschen, wobei man nach dem Trocknen 290 mg gekühlt und nach Zugabe von 600 ml Äther über eines 7-Chlor-5 - hydroxy - 5 - desoxy - 6 - desmethyl- Nacht gerührt und filtriert. Der erhaltene Farbstoff

wird mit Äther gewaschen und in 100 ml Essigsäure gelöst. Nach Zugabe von 20 Tropfen konzentrierter Schwefelsäure tritt Kristallisation ein, und durch Filtrieren können 1,1 g 9-Brom-lla-Chlor-6-desoxy - 6 - desmethy 1 - 6 - brommethylen - tetracyclin - sulfat gewonnen werden. Beim Einengen des essigsauren Filtrats im Vakuum auf etwa 50 ml werden weitere 1,3 g gewonnen. Das Produkt zeigt Ultraviolett-Absorptionsmaxima in 0,01 normaler methanolischer HCl bei 251 und 383 ηΐμ und hat keine merkliche Aktivität gegen Klebsiella pneumoniae. Die Dehalogenierung in lla-Stellung wird durchgeführt, indem man 200 mg in einer Mischung aus 100 ml Methanol und 100 ml Wasser löst und dazu 200 mg Natriumhydrosulfit gibt. Nach 2 Stunden wird die Lösung gereinigt, indem man sie durch ein Filter mit Diatomeenerde filtriert und dann unter vermindertem Druck eindampft. Das Konzentrat wird mit Butanol extrahiert, das Butanol unter vermindertem Druck abgedampft und der Extrakt mit Äther gewaschen, wobei man 100 mg 9-Brom-6-desoxy-6-desmethyl-6-brommethylen-tetracyclin als festen Stoff erhält. Die In-vitro-Aktivität gegen eine große Anzahl von Mikroorganismen wird in der anschließenden Tabelle gezeigt.

Beispiel 17

960 mg N-Jodbernsteinsäureimid werden unter Rühren zu einer Lösung von 1,06 g lla-Chlor-30 6 - desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylen - tetracyclinhydrochlorid in 12 ml Trifluoressigsäure gegeben.

Die erhaltene gelborange Suspension wird 3 Stunden bei 6O⁰C gerührt und dann unter Rühren zu 200 ml Äther gegeben und 2 Stunden gekühlt. Der erhaltene Kristallbrei wird filtriert, wobei man 1,145 g gelber Kristalle erhält. Das Produkt wird in 10 ml warmem Methanol gelöst, die Lösung mit p-Toluolsulfonsäure behandelt und bei Raumtemperatur über Nacht stehengelassen. Nach dem Filtrieren erhält man 245 mg gelbes, kristallines lla-Chlor-6-desoxy-6 - desmethyl - 6 - j odmethylen - tetracyclin. Aus dem Filtrat kann man weitere 320 und 215 mg gewinnen, so daß die gesamte Ausbeute 0,78 g beträgt. Es werden Ultraviolett-Absorptionsmaxima in 0,01 normaler methanolischer HCl bei 221, 253 und 385 πΐμ gemessen. Die lla-Dehalogenierung wird entsprechend Beispiel 16 durchgeführt, wobei man in etwa 50gewichtsprozentiger Ausbeute 6-Desoxy-6-desmethyl-6-jodmethylen-tetracyclin erhält. Die In-vitro-Aktivität gegen eine große Anzahl von Mikroorganismen wird in der folgenden Tabelle gezeigt.

Mindesthemmkonzentration

	Konzentration	A	B
	r/ml
	0,39	0,78
Micrococcus pyogenes	0,39	0,39
var. aureus	0,78	0,78
Streptococcus pyogenes	0,39	0,78
Streptococcus faecalis	0,09	3,12
Diplococcus pneumoniae	0,39	1,56
Erysipelothrix rhusiopathiae	0,78	0,78
Corynebacterium diphtheriae ...
Listeria monocytogenes

55

60

0,09 0,19

0,78 —

0,39 3,12

100 100

25 50

>100 100 >100 >100

12,5 25

25 25

0,78 3,12

0,78 0,78

50 25

0,39 0,78

6,3 1,56

0,19 1,56

0,39 6,3

0,39 — '

0,78 — >100 >100

1,56 1,56

.1,56 3,12

A = 9-Brorn-6-desoxy-6-desmethyl-6-brommethylen-tetracyclin (Beispiel 16).

B =■ ö-Desoxy-ö-desmethyl-ö-jodmethylentetracyclin (Beispiel 17).

Claims

Patentansprüche:

.1. Verfahren zur Herstellung von 6-Desoxyo-desmethyl-ö-methylen-tetracyclinen bzw. ihren Salzen mit Säuren oder Basen, dadurch gekennzeichnet, daß man lla-Halogen-6 - desoxy - 6 - desmethyl - 6 - methylen - tetracycline der allgemeinen Formel

CHX₂ X₅ N(CH₃J₂

Bacillus subtilis

Lactobacillus casei

Bacterium ammoniagenes

Aerobacter aerogenes ,

Escherichia coli

Proteus vulgaris

Pseudomonas aeruginosa

Salmonella typhosa

Salmonella pullorum

Klebsiella pneumoniae

Neisseria gonorrhoeae

Hemophilus influenzae

Shigella sonnei

Brucella bronchiseptica

Malleomyces mallei

Vibrio comma

Pasteurella multocida

Mycobacterium 607

Mycobacterium berolinense

Candida albicans

Streptococcus agalactiae

Micrococcus pyogenes
var. aureus, gegen Antibiotika resistente Stämme

Konzentration

y/ml. A . B

OH O

in der X₁ = Chlor oder Fluor, X₂ und X₄ = Wasserstoff, Chlor, Brom, Jod oder Nitro bedeuten, jedoch nicht gleichzeitig Nitro bedeuten dürfen, X₃ = Wasserstoff, Chlor, Brom oder Jod und X₅ = Wasserstoff oder die Hydroxylgruppe sind, bzw. deren Salze in lla-Stellung chemisch, wie mit wäßrigem Alkalihydrosulfit

909 533'312

bzw. mit Zink in wäßriger Säure, vorzugsweise Mineralsäure, oder katalytisch mit Wasserstoff in Gegenwart eines Edelmetallkatalysators, vorzugsweise eines Rhodium- oder Palladiumkatalysators, dehalogeniert.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man die Hydrierung bei 0 bis 100⁰C und bei Wasserstoffdrücken von Atmo-

Sphären- bis überatmosphärischem Druck vornimmt.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man als Ausgangsverbindung lla-Fluor- oder lla-Chlor-6-desoxy-6-desmethyl - 6 - methylen - tetracyclin oder -5 - oxytetracyclin oder T.Ha-Dichlor-o-desoxy-ö-desmethyl-ß-methylen-S-oxy-tetracyclin verwendet.