CZ44094A3 - Esters of sulfamic acid with polybasic alcohols and pharmaceutical compositions containing thereof - Google Patents

Esters of sulfamic acid with polybasic alcohols and pharmaceutical compositions containing thereof Download PDF

Info

Publication number
CZ44094A3
CZ44094A3 CZ94440A CZ44094A CZ44094A3 CZ 44094 A3 CZ44094 A3 CZ 44094A3 CZ 94440 A CZ94440 A CZ 94440A CZ 44094 A CZ44094 A CZ 44094A CZ 44094 A3 CZ44094 A3 CZ 44094A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
estrone
sulfamate
steroid
group
steroid sulfatase
Prior art date
Application number
CZ94440A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ295939B6 (cs
Inventor
Michael John Reed
Barry Victor Lloyd Potter
Original Assignee
Imperial College
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Imperial College filed Critical Imperial College
Publication of CZ44094A3 publication Critical patent/CZ44094A3/cs
Publication of CZ295939B6 publication Critical patent/CZ295939B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/30—Oestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/32—Antioestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/36—Antigestagens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0072—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the A ring of the steroid being aromatic

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Surgical Instruments (AREA)
  • Mechanical Treatment Of Semiconductor (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Vynález se týká nových sloučenin, které mohou být použity jako inhibitory steroidní sulřatasv a farmaceutických přípravků, které je obsahují.
Dosavadní stav techniky
Prekursory steroidních hormonů, které mají sulfátovou skupinu v pozici 3 steroidního jádra, jsou v dalším textu zjednodušeně označovány jako steroidní sulfátyc· Tyto látky jsou důležitými meziprodukty metabolismu steroidů v lidském organismu. Estron sulfát a dehydroepiandrosteron (DHA) sulfát jsou známé jako důležité meziprodukty tvorby tělních estrogenů estronu a estradiolu. Estron sulfát je jedním z hlavních prekursorů estrogenů v oběhu zvláště žen po menopause a aktivita enzymu estronsulfatasy v tumorech prsu je 100 až 1000 násobně vyšší než aktivita jiných enzymů, které se účastní tvorby estrogenů (James se spoluautory, Steroids 50, 269-279, 1987).
Estrogeny jako estron a estradiol a zejména jejich nadprodukce se značně uplatňují za maligních podmínek, např. při rakovině prsu (viz Breast Cancer, Treatment and Prognosis, R. A. Stolí, ed., str. 156 - 172, Blackwell Scientific Publications 1986). Kontrola produkce estrogenů je proto specifickým cílem mnoha proti rakovinných terapií, využ ívajících buď chemoterapeutik, nebo operativní postupů, tj.odstranění vejcovodů nebo nadledvinek. Endokrinní terapie se, dosud zaměřovala na využití látek, které inhibují aktivitu enzymu aromatasy. Jak ukazuje schéma č.l, znázorňující metabolické přeměny estrogenů, aktivita tohoto enzymu se uplatňuje při přeměně androgenů androstendionu na
‘γ2'·''’ -Μ' estron a testosteronu na estradiol.
Nedávno publikovaná mezinárodní patentová přihláška W091/13083 se zabývá využitím odlišného místa (či spíš dvou míst) metabolické dráhy estrogenu, tj. přeměny DHA sulfátu na DHA a estron sulfátu na estron za účasti enzymu steroidní sulfatasy. 3-monoa1ky1thiofosfonáty esteru steroidú, přesněji estron-3-methy lthiofosf onát, jsou současně užíváni' jako inhibitor steroidní sulfatasy.
Tento vynález se zabývá novými sloučeninami, které jsou schopné inhibovat aktivitu enzymu steroidní sulfatasy v podmínkách in vitro a in vivo.
Dalším cílem je stanovení nových sloučenin, inhibujících steroidní sulfatasu za podmínek jak in vitro, tak i in vivo, se zvýšenou aktivitou.
Dále se vynález zabývá stanovením farmaceutických prostředků, účinných při léčbě na estrogenu závislých tumorů a při léčbě rakoviny prsu.
Podstata vynálezu
Vynález spočívá v objevu nových látek, které projevují (v některých případech extremně silnou) inhibični aktivitu vůči enzymu steroidní sulfatase. Těmito látkami jsou sulfamátové estery polycyk1ických alkoholů, které mají povahu jejichž sulfátová skupina slouží aktivitou steroidní sulfatasy (EC pak N-alkyl a N-aryl deriváty esterů a jejich farmaceuticky nových látek, o nichž pojednává po 1ycyk1 ických alkoholů a jako substrát pro enzymy s 3.1.6.2). Dále jsou to uvedených sulfamátových využitelné soli.
Obecně lze složení
- 3 vynález, vyjádřit vzorcem č.I
No· vzorec č.I polycyklický systém
Rkde: zbytky R-^ a R2 jsou každý nezávisle zvolen ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a aryl, anebo společně představují alkylen, obsahující bud jeden nebo více heteroatomú či skupin v alkylenovém řetězci, a skupina označená jako -O-polycykl. systém představuje zbytek polycyklického alkoholu, jehož sulfátová skupina je substrátem enzymů s aktivitou steroidní sulfatasy (EC 3.1.6.2).
V textu zmiňovaými polycyklickými alkoholy, jejichž sulfátová skupina je substrátem enzymů s aktivitou steroidní sulfatasy, jsou míněny polycyklické alkoholy se sulfátovou skupinou odvozenou od vzorce
HO- S - 0 polycyklický systém
- 4 pro něž je hodnota Km získaná při inkubaci těchto látek s enzymem steroidní sulfatasou (EC 3.1.6.2) při pH 7.2 a teplotě 37°C menší než 50 μιηοΐ.
Přehled obrázků na výkresech:
Inhibiční aktivita uváděných látek vůči steroidní sulfatase je znázorněna na obrázcích na přiložených výkresech:
Schéma č.l ukazuje metabolické dráhy enzymů a steroidních meziproduktů, účastnících se tvorby estradiolu in vivo.
Obrázek č.2 dokládá inhibiční účinek estron-3-sulfamátu (v závislosti na jeho dávce) na aktivitu steroidní sulfatasy v lidských buňkách MCF-7 in vitro. Na ose x jsou vyneseny použité molární koncentrace inhibitoru, estron-3-sulfamátu. Na ose y je vynesena aktivita enzymu steroidní sulfatasy, vyjádřená množstvím vzniklého produktu £ za dobu inkubace na 10 buněk.
Obrázek č.3 dokládá inhibiční účinek estron-3-N,N-dimethylsulfamátu (v závislosti na jeho dávce) na aktivitu steroidní sulfatasy v lidských buňkách MCF-7 in \ vitro. Na ose x jsou vyneseny použité molární koncentrace inhibitoru. Na ose y je vynesena aktivita enzymu steroidní sulfatasy, vyjádřená množstvím vzniklého produktu za dobu inkubace (20 hod.) na 10 buněk.
Obrázek č.4 uvádí křivky závislosti aktivity steroidní sulfatasy na logaritmu koncentrace inhibitoru,
4a estron-3-sulfamátu a estron-3-N,N-dimethylsulfamátu, v lidských buňkách MCF-7 in vitro. Na ose x jsou uvedeny hodnoty záporného dekadického logaritmu koncentrace inhibitoru, na ose y je vyneseno procento inhibice enzymové aktivity.
Obrázek č.5 znázorňuje dávkově závislý inhibiční účinek estron-3-sulfamátu vůči aktivitě steroidní sulfatasy v lidských mikrosomech placenty za podmínek in vitro a hodnotu IC50 pro výše uvedenou látku (tj. koncentraci, která vyvolá 50% inhibici reakce). Na ose x jsou vyneseny mikromolární koncentrace inhibitoru, estron-3-sulfamátu, na ose y procento inhibice enzymové aktivity.
Tento vynález předkládá jako nové látky sulfamátové estery polycyklických alkoholů, které mají povahu polycyklických alkoholů a jejichž sulfátová skupina slouží jako substrát pro enzymy s aktivitou steroidní sulfatasy, tak, jako bylo dříve definováno, a rovněž jejich N-alkyl, N-cykloalkyl, N-alkenyl a N-aryl deriváty. Jejich vzorec odpovídá dříve uvedenému vzorci č.I.
Polycyklická část sloučeniny by měla obsahovat maximálně asi 40 uhlíkových atomů a to včetně všech substituentů, nejlépe však do třiceti uhlíkových atomů. Přednost je dávána polycyklickým látkám obsahující steroidní skelet cyklopentanfenantrenu. Je výhodné, pokud je sulfamylová nebo substituovaná sulfamylová skupina na tento skelet vázána v poloze 3, jak ukazuje vzorec č.II.
Λ)
«. 1
Ο kde Ri a Ra odpovídají výše definovaným skupinám a cyklický systém ABCD představuje substituované či nesubstituované, saturované nebo nesaturované steroidní jádro, nejlépe estron nebo dehydroepiandrosteron.
Dalšími vhodnými cyklickými steroidy jsou:
substituované 2-OH-estron, 7a-0H-e stron, estrony:
2-methoxyestron, 4-OH-estron, 16a-0H-estron a Ιόβ-OH-estron
6a-0H-estron, estradioly a substituované estradioly:
2-OH-17β-estradio 1, 2-methoxy-17P-estradio1, 4-0H-17P-estfadiol, 6a-OH-17p-estradiol, 7α-0Η-17β-εstradió1, 16a-OH-17a-estrádio 1, 160-OH-17a-estradio 1, 16β-0H-17β-estradio1, 17a-estradiol, 17p-estradiol a 17a-ethiny1-ΙΤβ-estradio1 estrioly a substituované estrioly:
estriol, 2-OH-estri o 1, 2-methoxyestrio1, 4-OH-estrio 1 ,
6a-0H-estri o 1, 7a-0H-estrio1 substituované dehydroepiandrosterony:
6a-0H-dehydroepiandrosteron, 7a-0H-dehydroepiandrosteron, 16a-0H-dehydroepiandrosteron a 16β-OH-dehydΓoepiandrosteron
Steroidní cyklický systém ABCD může obecně obsahovat
- 6 ;ΐ·>
množství neinterferujících substituentů. V úvahu připadá jeden či více hydroxylových zbytků, z alkyl ovýc h substituentů přednostně skupiny s 1 až 6 uhlíkovými atomy, tj. methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sekundární butyl, terciální butyl, n-pentyl a další pentylové isomery, n-hexyl a další hexylové isomery, z alkoxylových substituentů přednostně skupiny obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů tj. skupina methoxy1 ová, ethoxylová, propoxvlová atd., dále alkinyl (jako např. ethinyl) nebo halogenový atom, například u fluorových substituentů.
Jako cyklický systém nesteroidové povahy může být použit diethy1sti 1boestro1, stilboestrol nebo jiný cyklický systém se sulfátovými skupinami, jehož Km vzhledem ke steroidní sulfatase (EC 3.1.6.2) nepřevyšuje 50 pmol.
V případě N-substituce obsahují látky, navrhované tímto vynálezem, jeden nebo dva N-a1kylové, N-alkenylové, N-cykloalkýlové nebo N-arylové substituenty. Tyto substituenty by měly obsahovat, at už každý z nich nebo sumárně, maximálně deset uhlíkových atomů. Pokud je jako Pí nebo R2 navázána aikylová skupina, měly by R1 a R2 být nezávisle zvoleny z nižších alkylových skupin, methylové, ethylové, propylové atd., obsahujících nejvýše 5 uhlíkových atomů. Je výhodné, pokud je oběma substituenty R1 i R2 methylová skupina. Pokud je jedním ze substituentů aryl, jedná se přednostně o fenyl a tolyl (-PI1CH3; ortho, meta či para). Pokud R1 a R2 představují cykloalkýlové skupiny, jde především o cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl apod. Ke spojení R1 a R2 dochází v případě alkylenové skupiny s řetězcem 4 až 6 uhlíkových atomů, který může obsahovat jeden či více heteroatomů, přip. skupin. Jedná se o morfolinové, pyrro1 idi nové nebo piperidinové, tj. pěti, šesti nebo sedmičlenné heterocykly se skupinami -0- nebo -NH-.
Ί
Mezi alkylové, cykloalkylové, alkenylové a arylové skupiny jsou zahrnuty i skupiny, které jsou samy substituované takovým zbytkem nebo zbytky, které neovlivňují inhibiční aktivitu dané látky vůči sulfatase. Příkladem jsou substituenty jako hydroxylové, halogenová, alkoxylová, alkylová, arylová skupina nebo aminoskupina.
Přednost je dávána sloučeninám podle vzorce III a IV:
Ri a Rz představuje vodíkový atom nebo alkyl Cí-Cs , tj. estron-3-sulfamát a dehydroepiandrosteron-3-sulfamát a jejich N-(Ci-Cs) alkylové deriváty, zejména dimethy1 deriváty kde Ri = R2 = CH3 .
Uváděné estery kyseliny sulfamové jsou připravovány reakcí po 1ycyk1 ického alkoholu, tj. estronu nebo dehydro- 8 epiandrosteronu, se sulfamoyl chloridem R1R2NSO2CI podle následujícího schématu:
REAKČNÍ SCHÉMA I
Reakce probíhá za následujících podmínek: hydroxid sodný a sulfamoyl chlorid se za teploty 0°C přidají ke stále míchanému roztoku estronu v bezvodém dimethylformamidu. Poté může být reakce zahřáta na laboratorní teplotu, zatímco míchání pokračuje po dalších 24 hodin. Reakční směs je pak přidána do studeného saturovaného roztoku uhličitanu sodného (soda bicarbona) a vzniklá vodná fáze je extrahována dichlormethanem. Spojené organické extrakty jsou sušeny pomocí bezvodého síranu hořečnatého. Po zfiltrování je solvent vakuově odpařen a dalším odpařením za přítomnosti toluenu vzniklá hrubý extrakt, který je dále chromatograficky čištěn.
Pokud je potřeba, funkční skupiny po 1ycyk1 ického
......
alkoholu (sterolu) mohou být chráněny známým způsobem a ochranné skupiny (skupina) odstraněny na konci reakce.
Pro farmaceutické podání mohou být zde pojednávané inhibitory steroidní sulfatasy upraveny kterýmkoli vhodným způsobem za použití obvyklých farmaceutických metod úpravy a farmaceutických nosičů, pomocných látek, rozpouštědel apod., obvykle pro parenterální podání. Přibližné hodnoty efektivní dávky se pohybují v rozmezí od 100 do 800 mg na den v závislosti na individuální účinnosti dané látky, podané pacientovi průměrné váhy (70 kg). Obvyklejší dávkování látek, kterým je dávána přednost a jsou účinnější, se pohybuje v rozmezí mezi 200 a 800 mg/den, lépe mezi 200 a 500 mg/den a nejlépe mezi 200 a 250 mg/den. Látky mohou být podávány buď jednou denně, nebo v dávce rozdělené do několika intervalů během dne anebo opakovaně po několik dnů. Pro perorální podání mohou být upraveny do formy tablet, kapslí, roztoku nebo suspenze o obsahu 100 až 500 mg příslušné sloučeniny v jedné dávce. Tyto látky mohou být případně s výhodou upraveny pro parenterální podání za využití vhodného nosiče, tak, aby jich jednorázová denní dávka byla v rozmezí 200 až 800 mg, lépe 200 až 500 mg a nejlépe 200 až 250 mg. Je zřejmé, že účinnost denní dávky závisí na vlastní aktivitě aktivní složky a na tělesné váze pacienta, což posoudí podle svých znalostí ošetřující lékař.
Ve zvláštních případech lze uvažovat o použití inhibitoru steroidní sulfatasy v kombinované terapii buď společně s jiným inhibitoram sulfatasy nebo v kombinaci s inhibitorem aromatasy, např. 4-hydroxyandrostenedionem (ů-OHA).
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava estron-3-sulfamátu
Hydrid sodný (607, disperse., 2 díly) a sulfamoyl chlorid (2 díly) se při teplotě 0°C přidají ke stále míchanému roztoku estronu (1 díl) v bezvodém dimethylformamidu. Poté může být reakce zahřáta na laboratorní teplotu, zatímco míchání pokračuje po dalších 24 hodin.
Reakční směs je pak přidána do studeného saturovaného roztoku uhličitanu sodného a vzniklá vodná fáze je extrahována dichlormethanem. Spojené organické extrakty jsou sušeny pomocí bezvodého síranu hořečnatého. Po zfiltrování je solvent vakuově odpařen a dalším odpařením za přítomnosti toluenu vzniká hrubý extrakt, který je dále chromatograficky čištěn.
Analysou byla získána následující data:
δ1H (270MHz; CD3OD): 0, .91 (s, 3H, Cie-Me), 1.40-2.55 (
m, 13H), 2.90-2.92 (m, 2H), 7.04 (br d, 2H, J=10.44Hz),
(br d, 1H, J=8.42Hz).
δ1 3 C (67.8MHz; CD3 OD) : 14 . 53 (q, Cis-Me), 22.80 (t), 27.24
(t) , 27.73 (t), 30.68 (t) , 33.05 (t), 37.01 (t), 39.76 (d),
45.73 (s, C1 8), 51.86 (d) , 120.76 (d), 123.54 (d), 127.89
(d) , 139.83 (s), 150.27 (s) , 223.87 (s, C=0).
m/z (%): 349 (9) (m+) , 270 (100), 213 (26), 185 (43), 172
(31) , 159 (21), 146 (36) , 91 (33), 69 (37), 57 (73), 43
(56), 29 (24).
Mikroanalysá:
předpoklad zjištěno
C
61.87% 61.90%
H
6.63% 6.58%
N
4.01% 3.95%
Příklad 2
Příprava estron-3-N-methyi$ulfamátu
Postup přípravy byl stejný jako v příkladě 1 jen s tím rozdílem, že místo sulfamo.yl chloridu bylo použito stejné množství N-methy1 sulfamoy1 chloridu.
Analysou byla získána následující data:
δ1H (270MHz; CDCla): 0.91 (s, 3H, Cis-Me), 1.28-1.68 (m, 6H), 1.93-2.60 (serie m, 7H), 2.90-2.95 (m, 2H), 2.94 (d, 3H, J = 5.13Hz, MeN- ) , 4.68-4.71 (br m, obměnitelný, ÍH, - N H) , 7.02-7.07 (m, 2H), 7.26-7.32 (m,lH).
m/z (%): 364 [M+H] +
Příklad 3
Příprava estron-3-N,N-dimethy1su1 famátu
Postup přípravy byl stejný jako jako v příkladě 1 jen s tím rozdílem, že sulfamoyl chlorid byl nahrazen stejným množstvím N,N-dimethylsulfamoyl chloridu.
Analysou byla získána následující data:
δ1H (270MHz; CDCI3): 0.92 (s, 3H, Cia-Me), 1.39-1.75 (m, 5H), 1.95-2.60 (serie m, 6H), 2.82 (s, 3H, MeN-), 2.96-3.0 (m, 4H), 2.98 (s, 3H, MeN-), 7.04 (br d, 2H, J=7.69Hz), 7.29 (br d, J=7.88Hz).
m/z (%): 377 [M]+
N
3.71%
3.60%
Mikroana1vsa:
předpoklad zjištěno
63.63%
63.50%
H
7.21%
7.23%
Příklad 4
Inhibice aktivity enzymu steroidní sulfatasy v buňkách MCF-7 pomocí estron-3-su1famátu
Steroidní sulfatasa je definována jako sterylsulfatasa, EC 3.1.6.2.
Aktivita steroidní sulfatasy se měří v podmínkách in. vitro v intaktních lidských buňkách MCF-7 rakoviny prsu. Tato linie buněk, závislých na přítomnosti hormonu, je široce užívána ke studiu kontroly buněčného růstu. Vykazuje rovněž signifikantní aktivitu steroidní sulfatasy (Maclndoe se spolupracovníky, Endocrino1ogy 123,1281-1287, 1988; Purohit a Reed, Int. J. Cancer 50, 901-905, 1992) a je k disposici ve veřejné sbírce buněčných kultur v USA (American Type Culture Collection, ATCC), stejně jako ve Velké Britanii (The Imperiál Cancer Research Fund). Buňky jsou udržovány v minimálním esenciálním mediu (MEM, Flow Laboratories, Irvine, Scotland), obsahujícím 20 mM HEPES, 5% fetální hovězí sérum, 2 mM glutamin, neesenciální mastné kyseliny a 0.075% uhličitan sodný. Až do třicáté replikace jsou užívány lahvičky na tkáňové kultury o velikosti 25 cm2, obsahující přibližně 1 x 105 buněk/lahvičku ve výše uvedepém mediu. Buňky jsou pěstovány do 80% konfluence s výměnou media každý třetí den.
Intaktní monomo 1 eku1ární vrstvy výše zmíněných kultivačních lahviček buněk MCF-7 ze tří se promyjí Earlovým pufračním roztokem (EBSS, výrobek ICN Flow, High Wycombe,
Velká Britanie). Poté jsou spolu s 5 pmol (7 χ 105 dpm) [6,7-3H]estron-3-sulfátu o specifické aktivitě 60 Ci/mmol (New England Nuclear, Boston, Mass., USA) inkubovány po 3 až teplotě'37°C v 2.5 ml media MEM bez přídavku estron-3-sulfamátu v následujících 1 pM, 1 pM, 0.01 nM, Po zkončení inkubace
A hodiny při séra v přítomnosti koncentracích: 0, 0.1 fM, 0.01 pM, 0
0.1 nM, 1 nM, 0.01 μΜ, 0.1 μΜ, 1 μΜ je každá lahvička ochlazena a medium (1 ml) napipetováno do jednotlivých zkumavek, obsahujících (14C]estron v množství 7 χ 103 dpm o specifické aktivitě 97 Ci/mmol (produkt Amersham International Sad i ochemi ca 1 Centre, Amersham, Velká Britanie). Tato reakční směs se po 30 sekund důkladně protřepe s 5 ml toluenu. Je prokázáno, že tímto postupem je odstraněno z vodné fáze více než 90% [14C]estronu a méně než 0.1% [3H]estron-3-sulfátu. 2 ml organické fáze je odebráno a odpařeno ke stanovení obsahu isotpú 3H a 14C ve zbylé části pomocí scintilační spektrometrie. Množství hydrolysovaného estron-3-sulfátu je zjištěno výpočtem na základě změřené radioaktivity 3H (korigované vzhledem k množství media, použité organické fáze a výtěžku přidaného [1 4C]estronu) a specifické aktivity substrátu. Každá serie pokusů zahrnuje rovněž inkubaci mikrosomú připravených z lidské placenty s positivní aktivitou sulfatasy (positivní kontrola) a inkubaci kultivačních lahviček neobsahujících buňky (pro odhad neenzymatické hydrolysy substrátu). Počet buněčných jader v jedné lahvičce
Counter po interakci z
sapomnem
Jedna lahvička stavu buněčné membrány a životnosti modři (H.J. Phillips, Tissue culture Kruše a M.K. Patterson, editoři, Press, New York, 1973).
se stanoví na přístroji Coulter mononuk1eární vrstvy buněk se každé serie slouží ke stanovení buněk pomocí trypanové and Application, D.F. str. 406-408, Academie
Údaje o účinku estron-3-sulfamátu jsou uvedeny v tabulce I a na obr. č. 2 a 4. Výsledky, týkající se aktiviWí λ;- ' ty steroidní sulfatasy jsou vyjádřeny jako průměr ± 1 S.D. celkového produktu (tj. estron + estradiol), vzniklého během doby inkubace (20 hodnot statisticky během inkubace
Statistická významnost Studentovým t-testem.
hodin) a vztaženého na 106 buněk a, u významných, stupněm inhibice, vzniklé bez přítomnosti výsledků byla estron-3-sulfamátu.
hodnocena nepárovým
Tabulka I
Aktivita steroidní sulfatasy v buňkách MCF-7 za přítomnosti estron-3-sulfamátu
koncentrace estron-3-sulfamátu aktivita steroid. sulfatasy π (fmol/20h/106 buněk) % inhibice (% redukce vůči kontrole )
0 (kontrola) 319.7 ± 18.5 —
1.0 f M 353.3 ± 39.0 -
0.01 pM 362.3 + 21.2. -
0.1 pM 330.7 ± 17.8 -
1.0 pM 321.8 ± 6.2 -
0.01 níí 265.1 ± 11.0 * 17.2
0.1 nM 124.8 ± 12.4*** 60.9
1.0 nM 16.49 ± 4.7*** 95.0
0.01 μΜ 3.92 ± 0.4*** 98.8
0.1 μΜ 2.53 ± 1.1*** 99.2
1.0 μΜ 1.68 ± 0.7*** 99.5
π je udáno ± 1 S.D. n=3 * p < 0.05 * * * p < 0.001
Příklad 5
Inhibice aktivity steroidní sulfatasy v buňkách MCF-7 účinkem estron-3-N,N-dimethy1 sulfamátu
2¼
Výsledky, týkající se estron-N,N-dimethyl sulfamátu byly získány stejným postupem, jaký byl popsán v příkladu 8. Pouze místo látky estron-3-sulfamátu byl použit estron-3-N,N-dimethy1su1famát v koncentracích 0, 0.001 μΜ, 0.01 μΜ,
0.1 μΜ a 1 μΜ.
z
Údaje o účinku estron-3-N,N-dimethy1su1famátu jsou uvedeny v tabulce II na obr. č. 3 stejným způsobem, jakým byla zpracována tabulka I a obr. č.2. V obr. č.4 jsou navíc srovnány křivky logaritmické dávkové závislosti estron-3-sulfamátu a estron-3-N,N-dimethy1su1famátu.
Tabulka II
Aktivita steroidní sulfatasy v buňkách MCF-7 za přítomnosti estron-3-N,N-dimethy1su1famátu koncentrace e s tron-3-N,N-dimethylsulfamátu aktivita steroid. sulfatasy π (fmo1/20h/106 buněk) i % inhibice j (% redukce I vůči kontro1e)
1 (kontrola) ί 82.63 + 3.6 ; -
0.001 μΜ 68.33 1 + 3.2** : 17.3
0.01 μΜ ' 46.0 + 4.9*** ί 44.3
0.1 μΜ 17.43 + 4.3*** 78.9
1.0 μΜ 11.89 + 3.7*** j 1 85.6
je udáno ± 1 S.D. η = 3 * ρ < 0.01 * * * ρ <
0.001
Příklad 6
Inhibice aktivity po preinkubaci s dimethylsulfamátem.
steroidní sulfatasy estron-3-sulfamátem v buňkách MCF-7 nebo estron-3-N,NObdobný postup jako v příkladu A byl použit při
preinkubaci buněk MCF-7 s estron-sulfanátem a s estron-3-N,N-dimethylsulfamátem.
Intaktní monomo1ekulární vrstvy (buněk) byly nejprve inkubovány po 2 hodiny při 37°C s 0.1 μΜ e s tron-3-s u 1 f amátem, estron-3-N,N-dimethy1su1famátem nebo s pouhým mediem (kontrola). Buňky pak byly z media odsáty a třikrát promyty 5 ml media. Poté byly resuspendovány a inkubovány 3-4 hodiny v mediu, které obsahovalo 5 pmol (7 x 105 dpm) [6,7-3H]estron-3-sulfátu. Další postup byl shodný s postupem popsaným v příkladech 3 a 4.
Údaje o účincích estron-3-sulfamátu a estron-3-N,N-dimethylsulfamátu jsou uvedeny v tabulce III stejným způsobem, jakám byla zpracována tabulka I.
Tabulka III
Aktivita steroidní sulfatasy v buňkách MCF-7, preinkubovaných s estron-3-sulfamáty
Preinkubace ----------------—----- aktivita steroid. sulfatasy it (fmo1/20h/106 buněk) ....... ........ % inhibice (% redukce vůči kontrole)
kontrol a 65.4 í 6.4 — i
estron-3-sulfamát 1.7 * 0.2*** 97.4
estron-3-N,N- 53.1 d 3.4* 18.8 Π
j dimethylsulfamát* i
K je udáno ± 1 S.D. n=3 * p < 0.05 *** p < 0.001
Příklad 7
Inhibice aktivity steroidní sulfatasy v mikrosomech placenty účinkem estron-3-sulfamátu «a
- 17Lidské placenty z normálně donošených těhotenství (z porodního oddělení St. Mary's Hospital, Londýn) byly důkladně roztříhánv · nůžkami, promyty studeným fosfátovým pufrem (pH 7.4, 50mM) a poté resuspendovány ve studeném fosfátovém pufru v poměru 5 ml/g tkáně. Homogenisace (Ultra Turrax homogeniser) byla provedena třikrát po 10 sekundách, oddělených dvouminutovým ochlazením v ledu. Jádra a buněčné trosky byly odstraněny centrifugací při 4°C a 2000 g po dobu 30 minut; supernatant rozdělený na 2 ml dávky byl poté uchováván při -20°C. Koncentrace bílkovin v něm byla stanovena metodou podle Bradforda (Anal. Biochem. 72, 248-254, 1976).
Při inkubacích (v objemu 1 ml) byla užívána koncentrace bílkovin 100 ug/ml, jako substrát 20μΜ [6,73HJestron-3sulfát o spec. aktivitě 60 Ci/mmol (z New England Nuclear, Boston, Mass., USA) a doba inkubace 20 minut při 37°C . Estron-3-sulfamát byl přidáván v osmi koncentracích: 0 (tj. kontrola), 0.05 μΜ, 0.1 μΜ, 0.2 μΜ , 0.4 μΐί, 0.6 μΜ , 0.8 μΜ , a 1.0 μΜ. Po zkončení inkubace byl každý vzorek ochlazen a 1 ml media byl napipetován do jednotlivých zkumavek, obsahujících [14Cjestron (7 χ 103 dpm) o specifické aktivitě 97 Ci/mmol (z Amersham International Radiochemical Centre, Amersham, Velká Britanie). Reakční směs byla po 30 sekund důkladně protřepána s 5 ml toluenu. Pokusy ukázaly, že z vodné fáze bylo tímto postupem odstraněno >90 % [14C]estronu a < 0.1 % [3H]estron-3-sulfátu. 2 ml organické fáze bylo odebráno a odpařeno ke stanovení obsahu 3H a 14C ve zbylé části pomocí scintilační spektrometrie. Množství hydrolysovaného estron-3-sulfátu bylo zjištěno výpočtem na základě změřené radioaktivity 3H (korigované vzhledem k množství media, použité organické fáze a výtěžku přidaného [1 AC]estronu) a specifické aktivity substrátu.
Údaje o účincích estron-3-sulfamátu jsou uvedeny v
17Lidské placenty z normálně donošených těhotenství (z porodního oddělení St. Mary's Hospital, Londýn) byly důkladně rozstříhány nůžkami, promyty studeným fosfátovým pufrem (pH 7.4, 50mM) a poté resuspendovány ve studeném fosfátovém pufru v poměru 5 ml/g tkáně. Homogenisace (Ultra Turrax homogeniser) byla provedena třikrát po 10 sekundách, oddělených dvourainutovým ochlazením v ledu. Jádra a buněčné trosky byly odstraněny centrifugací při 4° C a 2000 g po dobu 30 minut; supernatant rozdělený na 2 ml dávky byl poté uchováván při -20°C. Koncentrace bílkovin v něm byla stanovena metodou podle Bradforda (Anal. Biochem. 72,
248-254, 1976).
Při inkubacích (v objemu 1 ml) byla užívána koncentrace bílkovin 100 pg/ml, jako substrát 20μΜ [6,73H]estron-3sulfát o spec. aktivitě 60 Ci/mmol (z New England Nuclear, Boston, Mass., USA) a doba inkubace 20 minut při 37°C.
Estron-3-sulfamát byl přidáván v osmi koncentracích: 0 (tj. kontrola), 0.05 μΜ, 0.1 μΜ, 0.2 μΜ, 0.4 μΜ , 0.6 μΜ, 0.8 μΜ, a 1.0 μΜ. Po skončení inkubace byl každý vzorek ochlazen a 1 ml media byl napipetován do jednotlivých zkumavek, obsahujících [14Cjestron (7 χ 103 dpm) o specifické aktivitě 97 Ci/mmol (z Amersham International Radiochemical Centre, Amersham, Velká Britanie). Reakční směs byla po 30 sekund důkladně protřepána s 5 ml toluenu. Pokusy ukázaly, že z vodné fáze bylo tímto postupem odstraněno >90 % [14C]estronu a < 0.1 % [3H]estron-3-sulfátu. 2 ml organické fáze bylo odebráno a odpařeno ke stanovení obsahu 3H a 14C ve zbylé části pomocí scintilačni spektrometrie. Množství hydrolysóvaného estron-3-sulfátu bylo zjištěno výpočtem na základě změřené radioaktivity 3H (korigované vzhledem k množství media, použité organické fáze výtěžku přidaného [1 4C]estronu) a specifické aktivity substrátu.
Údaje o účincích estron-3-sulfamátu jsou uvedeny v ?
•J i®® tabulce IV a na obr. č.5. Údaje o aktivitě steroidní sulfatasy jsou v tabulce IV vyjádřeny množstvím celkového produktu (estron a estradiol), vzniklým během inkubační doby (čas), a procentem inhibice vůči kontrole, inkubované v nepřítomnosti estron-3-sulfamátu. Na obr. č.5 je aktivita steroidní sulfatasy vyjádřena procentem její inhibice v závislosti na koncentraci estron-3-sulfamátu a dále je zde uvedena hodnota ICso této látky, rovná 0.07 μΜ (tj. koncentrace, která vyvolá 50% inhibici reakce).
Tabulka IV
Aktivita steroidní sulfatasy v mikrosomech placenty za přítomnosti estron-3-sulfamátu
koncentrace estron-3-sulfamátu aktivita steroid. sulfatasy η (pmo1/hod/O.1 mg bílk.) % inhibi c e (% redukce vůči kontrole)
0 (kontro 1 a) 768.6
0.05 μΜ 430.4 44.0
0.1 μΜ 305.9 60.2
0.2 μΜ 140.0 81.8
0.4 μΜ 83.3 89.2
0.6 μΜ 61.8 92.0
0.8 μΜ 49.2 93.6
1.0 μΜ --,-—1 51.6 93.3
TC je průměrem dvou měření
Příklad 8
Inhibice aktivity steroidní sulfatasy v jaterních mikrosomech krys, kterým byl podkožně podáván estron-3-sulfamát
- 19 Čtyřem skupinám po třech samicích krys kmene Wistar; o váze 80-110 g bylo po sedm dní jedenkrát denně podkožně podáváno 100 μί jedné z následujících látek (jako vehiculum byl použit propy 1eng1yko1):
propy1englyko1 (kontrola vehicula) estron-3-sulfamát 10 mg/kg/den estron-3-sulfát (10 mg/kg/den, substrátová kontrola) estron-3-sulfát a estron-3-su1famát (á lOmg/kg/den)
Osmý den byla všechna zvířata zabita a byla jim odebrána játra. Příprava jaterních mikrosomů byla shodná s postupem, popsaným v příkladu č. 6 (kromě toho, že šlo o krysí játra), v duplicitním stanovení aktivity steroidní sulfatasy však byly použity [6,7-3H]estron-3-su1fát a [7-3H]dehydroepiandrosteron-3-su1 fát jako separátní substráty .
Údaje o aktivitě steroidní sulfatasy jsou uvedenyi v tabulce V a jsou vyjádřeny jako celkový produkt vzniklý během inkubační doby ve formě průměru + 1 S.D. Výsledky inkubací u skupin, kterým byl podáván estron-3-sulfamát, jsou vyjádřeny také procentem inhibice aktivity steroidní sulfatasy vzhledem k příslušným kontrolám.
1333
Ι&ζ,
Tabulka V
Aktivita steroidní sulfatasy v krysích jaterních mikrosomech po subkutáním podání estron-3-sulfamátu
j skupina ’substrát : aktivita steroid. % inhibice
! i j sulfatasy π vůči kontrole
' nmol/30 min/200 pg ! bílkovinv L :
1 1 i kontrola i E1 -S 20.95 ± 0.2
•(vehikulum) i Ei -S03 NH2 ! •I.) Ei -S 0.34 ± 0.1*** 98.4
i l i kontrola (E1 -S) E1 -S 20.6 ±0.4
E1 -S + Ei -S03 NH2 E1 -S 0.21 + 0.03*** 99.0
kontrola DHA-S 1.73 ± 0.4
(vehi culum) Ei -SO3NH2 DHA-S 0.1 ± 0.01*** 94 . 2
kontrola (E1-S) DHA-S 1.71 ± 0.1 -
E1-S + E1-SO3NH2 DHA-S 0.09 ± 0.01*** 94.7
π je udáno ± 1 S.D. n=3 * * * p < 0.001π
Ei-S = estron-3-sulfamát
DHA-S = dehydroepiandrosteron-3-sulfamát
E1-SO31VH2 = estron-3-N,N-dimethy1 sulfamát
Dr. ZDENKA KOŘEJ/o V,
- 21 tím
— —----------~—
< Ό
Ό f— X)
£* cp
r—» czj 2 C-
Ξ T >
O CT O
<
zc
0
N A R 0 K

Claims (1)

  1. PATENTOVÉ
    1. Farmaceutický přípravek, vyznačující se , že obsahuje inhibitor steroidní sulfatasy spolu,s nebo nosičem, kde je (nebo obsahuje farmaceuticky přijatelným rozpouštědlem tímto inhibitorem steroidní sulfatasy účinné množství takové látky) sulfamátový ester polycykličkého alkoholu, nebo N-alkylový, N-alkenylový, N-cykloalkylový či N-arylový derivát takového esteru, nebo farmako1ogicky přijatelná sul kteréhokoliv takového esteru nebo N-substituovaného esteru, alkoholová součást esteru je zbytek polycyklického a 1 koho 1u,jehož sulfát je hydrolysovate1pý enzymy s aktivitou steroidní sulfatasy (E.C. 3.1.6.1).
    2. Farmaceutický přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím ,že inhibitor steroidní sulfatasy je sloučeninou podle vzorce
    Ri
    S-0’
    II o
    polycyklický systém kde Ri a R2 jsou každý nezávisle zvolen ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkyl, alkenyl, cykloalkyl a aryl, anebo společně představují alkylen, obsahující buď jeden nebo více heteroatomú či skupin v alkylenovém řetězci,a skupina označená jako -0-polycyklický systém je uvedený zbytek zmíněného polycyklického alkoholu.
    3. Farmaceutický přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že skupina označená jako -O-poly22
    Aa cyklický alkohcl je sterolový zbytek.
    4. Farmaceutický přípravek podle nároku 3, vyzná · č u .i i c i s e t í m' , že uvedený sterol je 3-sterol.
    5. Farmaceutický přípravek podle nároku 4, vyzná čující se ti m, že uvedený sterol je zvolen ze skupiny, zahrnující estron, dehydroepiandrosterony, substituované estrony a substituované dehydroepiandrosterony.
    6. Farmaceuticý přípravek podle kteréhokoliv z nároků 2 a ž 5, vyznačující se tím.ževuvedeném vzorci je (jsou) Ri a R2 substituent(y) C1-C1o alkylem.
    7. Farmaceutický přípravek podle nároku 6, vyzná čující se tím, že uvedený N-alkylový substituent (nebo substituenty) je (jsou) C1-Cs alkylem.
    8. Farmaceutický přípravek podle nároku 6, vyzná čující se tím, že alkylový substituent (alkylové substituenty) tvoří methylová skupina (methylové skupiny).
    9. Estron-3-sulfamát.
    10. Estron-3-N,N-dimethylsulfamát.
    11. Estron-3-N-monomethylsulfamát.
    12. Způsob léčení na estronu závislých tumorů u savců, který zahrnuje i podání savcům, buď ve směsi nebo ve spojení s jednou nebo více jinými chemoterapeutickými nebo jinými farmaceuticky aktivními sloučeninami jako součásti kombinovaného terapeutického režimu, inhibitor aktivity steroidní sulfatasy in vivo, vyznačující se tím, že jako inhibitor steroidní sul23 fatasy používá účinné množství sloučeniny podle vzorce
    Ri.
    R2
    S-0'
    II o
    polycyklický systém kde Ri a R2 jsou každý nezávisle zvolen ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkyl, alkenyl, cykloalkyl a aryl, anebo společně představují alkylen, obsahující buď jeden nebo více heteroatomů či skupin v alkylenovém řetězci, a skupina označená jako -0-po1ycyklický systém je uvedený zbytek polycyklického alkoholu, jehož sulfátový ester je substrátem enzymů s aktivitou steroidní sulfatasy (EC 3.1.6.2).
    13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se t i m , že ve vzorci uvedeného inhibitoru steroidní sulfatasy skupina označená 0-po1ycyklický systém je zbytek 3-sterolu.
    14. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že uvedený zbytek 3-sterolu je zvolen ze zbytků 3-estronu a 3-dehydroepiandrosteronu.
    15. Způsob podle nároku 12, vyznačující t í m , že inhibitor steroidní sulfatasy je zvolen ze skupiny, zahrnující estron-3-sulfamát, estron-3-(C1-Ce)a 1ky1 sulfamát, dehydroepiandrosteron-3-sulfamát a dehydroepiandrosteron-3-(Ci-Ce)alkylsulfamát.
    tím ,
    Způsob podle nároku 12, vyznačující se že inhibitor steroidní sulfatasy je zvolen ze
    - 24 skupiny, zahrnující estron-3-su1famát, estron-3-N,N-dimethylsulfamát a estron-3-N-monomethy1su1famát.
    Dr. ZĎEfÍKA KOREJZOVá <s
    >O
    Schéma
    TJ x><
    £-* řu r-3
    Z>
    CO < Ό 70
    CO —I -<
    o
    S Q X / >
    0
    ΓΓΛ rc
    N'
    CO
    4>*
    CZJ o
    cxx ) f\o
    -J rc o<
    9HS o
    o o
    LO o
    in cn o
    o cn o
    tn
    CM o
    o
    CJ
    Ξ ό
    ó c
    c ó
    o o
    CL
    O o
    o ó ft [estron-3-sulfamát]
    o O o o o o o o o c un o Lf) o lf) o lf) •cr cn cn CJ CJ
    (^acinq OT/qO£/I<W) q^npojd ΑχχτιιζΛ
    ST
    75*-
    O
    CO
    O.
    r~ o
    co o
    tn o
    CM
CZ1994440A 1991-08-29 1992-08-28 Polycyklická sloučenina, obsahující kruhový systém CZ295939B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB919118478A GB9118478D0 (en) 1991-08-29 1991-08-29 Steroid sulphatase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ44094A3 true CZ44094A3 (en) 1995-01-18
CZ295939B6 CZ295939B6 (cs) 2005-12-14

Family

ID=10700604

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ1994440A CZ295939B6 (cs) 1991-08-29 1992-08-28 Polycyklická sloučenina, obsahující kruhový systém

Country Status (25)

Country Link
US (3) US5616574A (cs)
EP (6) EP1099706B1 (cs)
JP (6) JP3219408B2 (cs)
KR (4) KR100258396B1 (cs)
AT (5) ATE194843T1 (cs)
AU (2) AU689043B2 (cs)
BR (1) BR9206434A (cs)
CA (4) CA2305767A1 (cs)
CY (4) CY2253B1 (cs)
CZ (1) CZ295939B6 (cs)
DE (5) DE69233149T2 (cs)
DK (4) DK0921130T3 (cs)
ES (4) ES2196483T3 (cs)
FI (5) FI940903A7 (cs)
GB (1) GB9118478D0 (cs)
GE (6) GEP20022766B (cs)
GR (1) GR3034579T3 (cs)
HU (1) HUT66097A (cs)
LV (1) LV12618B (cs)
NO (6) NO307301B1 (cs)
RU (4) RU2210574C2 (cs)
SG (7) SG103374A1 (cs)
SK (4) SK282187B6 (cs)
UA (4) UA41875C2 (cs)
WO (1) WO1993005064A1 (cs)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6476011B1 (en) 1991-08-28 2002-11-05 Sterix Limited Methods for introducing an estrogenic compound
GB9603325D0 (en) * 1996-02-16 1996-04-17 Imperial College A compound
US6903084B2 (en) 1991-08-28 2005-06-07 Sterix Limited Steroid sulphatase inhibitors
US6011024A (en) * 1991-08-28 2000-01-04 Imperial College Of Science Technology & Medicine Steroid sulphatase inhibitors
GB9118478D0 (en) * 1991-08-29 1991-10-16 Imperial College Steroid sulphatase inhibitors
GB9604709D0 (en) * 1996-03-05 1996-05-01 Imperial College A compound
GB9625334D0 (en) * 1996-12-05 1997-01-22 Imperial College Compound
WO1995026717A1 (en) * 1994-04-05 1995-10-12 Celltech Therapeutics Limited Use of estrone derivatives as steroid sulphatase inhibitors
DE4429397C2 (de) * 1994-08-09 2003-11-20 Jenapharm Gmbh Estra-1,3,5(10)-trien-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen
DE4447715C2 (de) * 1994-08-09 1998-02-05 Jenapharm Gmbh Verwendung von Estra-1,3,5(10)-trien-Derivaten zur hormonalen Behandlung von Prostatakarzinomen
GB9422777D0 (en) * 1994-11-11 1995-01-04 Imperial College Assay
US5571933A (en) * 1994-11-17 1996-11-05 Duquesne University Of The Holy Ghost Derivatives of estra 1,3,5(10)triene-17-one, 3-amino compounds and their use
US5705495A (en) * 1995-10-19 1998-01-06 Jenapharm Gmbh & Co. Kg. Sulfamate derivatives of 1,3,5(10)-estratriene derivatives, methods for their production and pharmaceuticals containing these compounds
US6506792B1 (en) 1997-03-04 2003-01-14 Sterix Limited Compounds that inhibit oestrone sulphatase and/or aromatase and methods for making and using
US6921776B1 (en) 1996-02-16 2005-07-26 Sterix Limited Compound
ATE286038T1 (de) * 1996-03-05 2005-01-15 Sterix Ltd Verbindungen mit sulfonsäure-amidgruppe
AU713341B2 (en) * 1996-09-12 1999-12-02 Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. 3-substituted-d-homo-1,3,5,(10)-estratriene derivatives
US20040127473A1 (en) * 1996-12-05 2004-07-01 Reed Michael John Compound
US6642220B1 (en) 1996-12-05 2003-11-04 Sterix Limited Compounds that inhibit oestrone sulphatase; compositions thereof; and methods employing the same
US5763432A (en) * 1997-01-29 1998-06-09 Sri International Steriod inhibitors of estrone sulfatase and associated pharmaceutical compositions and methods of use
DE19712488A1 (de) 1997-03-25 1998-10-01 Knoell Hans Forschung Ev Steroidsulfamate, Verfahren zu ihrer Herstellung und Anwendung derselben
GB9708716D0 (en) * 1997-04-29 1997-06-18 Imperial College Chronic heart failure
US5880115A (en) * 1997-07-18 1999-03-09 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same
US6288050B1 (en) * 1997-07-18 2001-09-11 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same
US6376687B1 (en) 1997-07-18 2002-04-23 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same
GB2331987B (en) * 1997-12-04 2002-11-27 Imperial College Polycyclic sulphamate inhibitors of oestrone sulphatase
GB2331988B (en) 1997-12-04 2003-04-16 Imperial College Polycyclic sulphamate inhibitors or oestrone sulphatase
US6046186A (en) * 1997-12-24 2000-04-04 Sri International Estrone sulfamate inhibitors of estrone sulfatase, and associated pharmaceutical compositions and methods of use
GB9807779D0 (en) 1998-04-09 1998-06-10 Ciba Geigy Ag Organic compounds
AU4093799A (en) 1998-05-22 1999-12-13 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and therapies based thereon
AU765386B2 (en) * 1998-06-10 2003-09-18 Sterix Limited Pharmaceutical composition with tumor necrosis factor a and 2-methoxyestrone-3-(o)-sulphamate for inhibition of estrone sulphatase
US6248780B1 (en) 1998-10-01 2001-06-19 Duquesne University Of The Holy Ghost Compounds for the treatment of estrogen-dependent illnesses and methods for making and using the same
US6667299B1 (en) 2000-03-16 2003-12-23 Hollis-Eden Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions and treatment methods
WO2000053620A1 (en) * 1999-03-10 2000-09-14 Nippon Organon K. K. Novel estradiol derivatives
JP2000309599A (ja) 1999-04-13 2000-11-07 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd エストラ−１，３，５（１０），１６−テトラエン誘導体
AU2005225148B2 (en) * 1999-04-30 2008-04-03 Sterix Limited Use
JP5042411B2 (ja) * 1999-04-30 2012-10-03 ステリックス リミテッド 抗腫瘍剤としてのエストロン誘導体の使用
US7078395B1 (en) 1999-06-16 2006-07-18 Sterix Limited Methods for treating or preventing cancer by preventing, inhibiting or arresting cell cycling
GB9913536D0 (en) * 1999-06-10 1999-08-11 Sterix Ltd Use
US6583130B1 (en) 1999-09-13 2003-06-24 Schering Ag C13-substituted estra-1,3,5,(10)-trien-3-yl sulfamates, methods of preparing same, and pharmaceutical compositions containing these compounds
DK1237902T3 (da) * 1999-12-13 2006-03-06 Sterix Ltd Halogenerede sulphamat-, fosfonat-, thiofosfonat-, sulfonat- og sulfonamidforbindelser som hæmmere af steroid sulfatase
US7335650B2 (en) 2000-01-14 2008-02-26 Sterix Limited Composition
JPWO2001081364A1 (ja) * 2000-04-24 2004-01-08 協和醗酵工業株式会社 エストラ−１，３，５（１０）−トリエン誘導体
DE10027887A1 (de) * 2000-05-31 2001-12-13 Jenapharm Gmbh Verbindungen mit einer Sulfonamidgruppe und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen
GB0020498D0 (en) * 2000-08-18 2000-10-11 Sterix Ltd Compound
JP2004521951A (ja) 2001-07-13 2004-07-22 シエーリング アクチエンゲゼルシャフト Ｈｒｔのためのドロスピレノン及びエストロゲンスルファメートの組み合わせ
AU2002322720B2 (en) 2001-07-25 2008-11-13 Raptor Pharmaceutical Inc. Compositions and methods for modulating blood-brain barrier transport
DE10139494A1 (de) * 2001-08-13 2003-03-06 Jenapharm Gmbh Antitumor wirksame 2-Alkoxyestradiolsulfamate
US8026229B2 (en) 2001-08-13 2011-09-27 Sterix Limited Antitumor-active 2-alkoxyestradiol sulfamates
EP1657247B1 (en) * 2001-10-18 2008-09-17 Sterix Limited Steroidal compounds for inhibiting steroid sulphotase
JP4553586B2 (ja) * 2001-10-18 2010-09-29 ステリックス リミテッド ステロイドスルファターゼを阻害するための、ステロイド化合物
US20040254241A1 (en) * 2002-08-28 2004-12-16 Yoji Ino Aryl sulfamate derivatives
JPWO2004035089A1 (ja) * 2002-10-09 2006-02-09 協和醗酵工業株式会社 ホルモン依存性癌の治療剤
DE10307104A1 (de) 2003-02-19 2004-09-23 Schering Ag Antitumor wirksame 2-substituierte Estra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate
DE10307103A1 (de) * 2003-02-19 2004-09-09 Schering Ag Antitumor wirksame 2-substituierte D-Homostra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate
DE10307105A1 (de) * 2003-02-19 2004-09-09 Schering Ag Antitumor wirksame 2-substituierte 18a-Homoestra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate
DE60328233D1 (de) * 2003-05-16 2009-08-13 Theramex Sulfamatbenzothiophenderivate als steroidsulfataseinhibitoren
EP1627871B1 (en) * 2003-05-21 2010-04-14 ASKA Pharmaceutical Co., Ltd. Cyclic aminophenyl sulfamate derivative
TWI331154B (en) * 2003-11-12 2010-10-01 Solvay Pharm Gmbh Novel 17-hydroxysteroid dehydrogenase type i inhibitors
US7534780B2 (en) 2004-05-21 2009-05-19 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Estradiol prodrugs
GB0412492D0 (en) 2004-06-04 2004-07-07 Sterix Ltd Compound
CA2789262C (en) 2005-04-28 2016-10-04 Proteus Digital Health, Inc. Pharma-informatics system
US8030298B2 (en) 2005-05-26 2011-10-04 Abbott Products Gmbh 17β-HSD1 and STS inhibitors
GB0511190D0 (en) * 2005-06-01 2005-07-06 Sterix Ltd Use
EP1945240B1 (en) 2005-09-16 2016-12-28 Raptor Pharmaceutical Inc Compositions comprising receptor-associated protein (rap) variants specific for cr-containing proteins and uses thereof
GB0624105D0 (en) * 2006-12-01 2007-01-10 Sterix Ltd Use
GB0706072D0 (en) 2007-03-28 2007-05-09 Sterix Ltd Compound
US20100204146A1 (en) 2007-09-17 2010-08-12 Preglem S.A. Treatment of Oestrogen Dependant Conditions in Pre-menopausal Women
EP2149371A1 (en) * 2008-07-28 2010-02-03 PregLem S.A. Use of steroid sulfatase inhibitors for the treatment of preterm labor
TR201908314T4 (tr) 2009-02-20 2019-06-21 2 Bbb Medicines B V Glutatyon bazlı ilaç dağıtım sistemi.
KR101909711B1 (ko) 2009-05-06 2018-12-19 라보라토리 스킨 케어, 인크. 활성제-칼슘 포스페이트 입자 복합체를 포함하는 피부 전달 조성물 및 이들을 이용하는 방법
GB0914767D0 (en) 2009-08-24 2009-09-30 Sterix Ltd Compound
CN110974840A (zh) * 2019-12-27 2020-04-10 天津市肿瘤医院 一种类固醇硫酸酯酶抑制剂及其药物用途

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE114806C (cs) *
DE1593846A1 (de) * 1967-01-28 1971-02-25 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von Sulfamidsaeure-arylestern
US3647738A (en) * 1970-11-03 1972-03-07 Union Carbide Corp Alpha-olefin polymer compositions
GB1398026A (en) * 1972-11-10 1975-06-18 Jenapharm Veb Steroid esters
DE2418217A1 (de) * 1974-04-13 1975-11-06 Hoechst Ag Sulfamidsaeureester und verfahren zu ihrer herstellung
DD114806A1 (cs) * 1974-10-11 1975-08-20
US4340602A (en) * 1978-10-18 1982-07-20 Wayne State University Compositions inhibiting estrogen sulfotransferase activity
US4810700A (en) * 1978-10-18 1989-03-07 Wayne State University Compositions inhibiting estrogen sulfotransferase activity
US4937237A (en) * 1988-12-23 1990-06-26 Smithkline Beckman Corporation Phosphinic acid substituted aromatic steroids as inhibitors of steroid 5-60 -reductase
PT94305B (pt) * 1989-06-12 1997-02-28 Robins Co Inc A H Processo para a preparacao de compostos tendo um ou mais radicais aminossulfoniloxi uteis como produtos farmaceuticos
GB9003939D0 (en) * 1990-02-21 1990-04-18 Imperial College Sulphatase inhibitors
GB9625334D0 (en) * 1996-12-05 1997-01-22 Imperial College Compound
GB9118478D0 (en) * 1991-08-29 1991-10-16 Imperial College Steroid sulphatase inhibitors
GB9603325D0 (en) * 1996-02-16 1996-04-17 Imperial College A compound
GB9118465D0 (en) * 1991-08-29 1991-10-16 Imperial College Steroid sulphatase inhibitors
US5571933A (en) * 1994-11-17 1996-11-05 Duquesne University Of The Holy Ghost Derivatives of estra 1,3,5(10)triene-17-one, 3-amino compounds and their use
DE19540233B4 (de) * 1995-10-19 2005-08-25 Schering Ag Sulfamat-Derivate von 1,3,5(10)-Estratrien-Derivaten, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen
ATE286038T1 (de) * 1996-03-05 2005-01-15 Sterix Ltd Verbindungen mit sulfonsäure-amidgruppe
US5880115A (en) * 1997-07-18 1999-03-09 Duquesne University Of The Holy Ghost Steroid sulfatase inhibitors and methods for making and using the same

Also Published As

Publication number Publication date
CA2114630A1 (en) 1993-03-18
JP2000355542A (ja) 2000-12-26
NO20025725L (no) 1994-04-29
FI940903A0 (fi) 1994-02-25
CA2114630C (en) 2003-09-30
JPH07501515A (ja) 1995-02-16
DE69233053T2 (de) 2003-11-20
JP3581802B2 (ja) 2004-10-27
NO995076L (no) 1994-04-29
KR100321018B1 (ko) 2002-03-20
FI20050991L (fi) 2005-10-03
EP0982032A2 (en) 2000-03-01
HUT66097A (en) 1994-09-28
EP0928609A2 (en) 1999-07-14
ATE278704T1 (de) 2004-10-15
KR100321019B1 (ko) 2002-03-20
DE69233431T2 (de) 2006-02-23
UA70957C2 (uk) 2004-11-15
RU2182152C2 (ru) 2002-05-10
NO314287B1 (no) 2003-03-03
RU2210574C2 (ru) 2003-08-20
SG88783A1 (en) 2002-05-21
GEP20022637B (en) 2002-02-25
CA2305758A1 (en) 1993-03-18
ATE237333T1 (de) 2003-05-15
FI20002260A7 (fi) 2000-10-13
AU717116B2 (en) 2000-03-16
GEP20022802B (en) 2002-09-25
HK1025051A1 (en) 2000-11-03
EP1099706A3 (en) 2002-09-04
ATE246706T1 (de) 2003-08-15
ES2148178T3 (es) 2000-10-16
JP3581820B2 (ja) 2004-10-27
SG103820A1 (en) 2004-05-26
NO995076D0 (no) 1999-10-18
EP0641355B1 (en) 2000-07-19
DE69233149T2 (de) 2004-06-24
SK282187B6 (sk) 2001-12-03
FI20050991A7 (fi) 2005-10-03
DE69231280T2 (de) 2000-11-30
EP0982032A3 (en) 2002-03-20
HK1019753A1 (en) 2000-02-25
SK282189B6 (sk) 2001-12-03
JP2003176297A (ja) 2003-06-24
DK0921130T3 (da) 2003-07-21
ES2196483T3 (es) 2003-12-16
FI20002259L (fi) 2000-10-13
JP3219408B2 (ja) 2001-10-15
GEP20022766B (en) 2002-08-26
JP2000355598A (ja) 2000-12-26
RU94019334A (ru) 1996-10-20
UA70958C2 (uk) 2004-11-15
ATE239753T1 (de) 2003-05-15
AU689043B2 (en) 1998-03-19
FI940903A7 (fi) 1994-04-20
NO940635D0 (no) 1994-02-24
LV12618A (en) 2001-02-20
SG115508A1 (en) 2005-10-28
EP0921130A3 (en) 2001-09-05
NO995075D0 (no) 1999-10-18
SG73391A1 (en) 2006-08-30
NO20025725D0 (no) 2002-11-28
NO308774B1 (no) 2000-10-30
CA2305749A1 (en) 1993-03-18
AU5837396A (en) 1996-09-05
KR100322650B1 (ko) 2002-03-20
RU2207134C2 (ru) 2003-06-27
EP1099706B1 (en) 2004-10-06
JP2002255993A (ja) 2002-09-11
DE69233020D1 (de) 2003-05-22
DE69233053D1 (de) 2003-06-12
EP0928609A3 (en) 2001-11-07
SK282186B6 (sk) 2001-12-03
AU668882B2 (en) 1996-05-23
DE69231280D1 (de) 2000-08-24
LV12618B (en) 2001-07-20
US5830886A (en) 1998-11-03
NO20002595D0 (no) 2000-05-19
NO318009B1 (no) 2005-01-17
SG88782A1 (en) 2002-05-21
FI20002260L (fi) 2000-10-13
ES2193475T3 (es) 2003-11-01
NO20044458L (no) 1994-04-29
FI20002261A7 (fi) 2000-10-13
DE69233431D1 (de) 2004-11-11
DK0641355T3 (da) 2000-10-09
DE69233149D1 (de) 2003-09-11
EP0928609B1 (en) 2003-04-16
HK1020672A1 (en) 2000-05-19
NO307301B1 (no) 2000-03-13
EP0982032B1 (en) 2003-08-06
GB9118478D0 (en) 1991-10-16
EP0641355A1 (en) 1995-03-08
RU2001125673A (ru) 2003-06-27
DE69233020T2 (de) 2003-11-06
US6159960A (en) 2000-12-12
WO1993005064A1 (en) 1993-03-18
SG103374A1 (en) 2004-04-29
CY2397B1 (en) 2004-09-10
FI20002259A7 (fi) 2000-10-13
CY2253B1 (en) 2003-07-04
HU9400583D0 (en) 1994-05-30
NO308903B1 (no) 2000-11-13
EP0921130A2 (en) 1999-06-09
GEP20022803B (en) 2002-09-25
EP1099706A2 (en) 2001-05-16
JP3581821B2 (ja) 2004-10-27
BR9206434A (pt) 1994-09-27
FI20002261L (fi) 2000-10-13
EP1522543A1 (en) 2005-04-13
GR3034579T3 (en) 2001-01-31
EP0921130B1 (en) 2003-05-07
NO940635L (cs) 1994-04-29
CA2305767A1 (en) 1993-03-18
SG106116A1 (en) 2004-09-30
AU2490592A (en) 1993-04-05
CY2394B1 (en) 2004-09-10
NO995075L (no) 1994-04-29
UA70956C2 (uk) 2004-11-15
CY2398B1 (en) 2004-09-10
GEP20033094B (en) 2003-10-27
CZ295939B6 (cs) 2005-12-14
ATE194843T1 (de) 2000-08-15
UA41875C2 (uk) 2001-10-15
US5616574A (en) 1997-04-01
ES2204059T3 (es) 2004-04-16
AU1007799A (en) 1999-03-04
JP2000038341A (ja) 2000-02-08
NO2595A (no) 1994-04-29
DK0928609T3 (da) 2003-07-21
KR100258396B1 (ko) 2000-08-01
SK24694A3 (en) 1994-11-09
DK0982032T3 (da) 2003-11-03
SK282188B6 (sk) 2001-12-03
GEP20063773B (en) 2006-03-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ44094A3 (en) Esters of sulfamic acid with polybasic alcohols and pharmaceutical compositions containing thereof
US20020177619A1 (en) Steroid sulphatase inhibitors
EP1051178A1 (en) Steroid 3-o-sulphamate derivatives as inhibitors of oestrone sulphatase
US7968561B2 (en) Steroidal compounds as steroid sulphatase inhibitors
AU668882C (en) Steroid sulphatase inhibitors
AU726811B2 (en) Steroid sulphatase inhibitors
AU723707B2 (en) Steroid sulphatase inhibitors
HK1025051B (en) Use of a sterol compound comprising a sulphamic acid ester group for the manufacture of medicaments for the control of oestrogen production
HK1020672B (en) Pharmaceutical compositions containing sulphamate derivatives as steroid sulphatase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20060828