CZ355999A3

CZ355999A3 - Nový způsob přípravy fosfodiesterových sloučenin

Info

Publication number: CZ355999A3
Application number: CZ19993559A
Authority: CZ
Inventors: John C. Amedio; Paul J. Bernard; Mark Fountain
Original assignee: Epix Medical, Inc.
Priority date: 1997-04-11
Filing date: 1998-01-27
Publication date: 2000-01-12
Also published as: KR100593650B1; JP2005206605A; DE69812983D1; NO994919L; PL188258B1; EP1021452A1; JP2002511060A; JP4014231B2; DE69812983T2; SK138299A3; KR20010006177A; US5919967A; BR9809084B1; IS5193A; SK283832B6; DK1021452T3; PL337423A1; IL131964A0; AU728902B2; NO994919D0

Description

Nový způsob přípravy fosfodiesterových sloučenin

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká zlepšení způsobu přípravy fosfodiesterových sloučenin. Předkládaný vynález se především týká zlepšení způsobu přípravy fosfodiesterových sloučenin, které jsou vhodné jako kontrastní látky pro diagnostické zobrazování a výhodněji způsobu pro přípravu sloučenin diethylentriaminpentaoctové kyseliny („DTPA) obsahujících fosfodiestery.

Dosavadní stav techniky

Mnoho důležitých biologických látek, včetně fosfolipidú, oligonukleotidů, deoxynukleosidů, nukleotidů a nukleosidů, existuje ve formě symetrických a nesymetrických fosfodiesterů. Využitelnost těchto fosfodiesterových sloučenin v medicinálních aplikacích je známá. Viz. například Desseaux a kol., „Synthesis of Phosphodiester and Triester Derivates of AZT with Tethered N-Methyl Piperazine and N,N,N-trimethylethylenediamine, Bioorg. a Med. Chem. Letters, díl 3, č. 3, str. 1547-50 (1993); PCT přihláška č. WO 96/27379. Nedávná PCT přihláška č. WO 96/23526, kterou zde uvádíme jako odkaz, popisuje fosfodiesterové sloučeniny, které jsou vhodné jako kontrastní látky pro diagnostické zobrazování.

Je známo mnoho způsobů přípravy fosfodiesterových sloučenin založených na chemii trojmocného fosforu. Obecné při syntéze fosfodiesterových sloučenin hraje důležitou roli fosforylace. Ale všechny známé způsoby syntézy fosfodiesterových sloučenin přinášejí mnoho problémů, včetně toho, jakým způsobem fosforylace dosáhnout.

Jeden způsob přípravy fosfodiesterových sloučenin zahrnuje použití fosforamiditové chemie. Viz. například Bannwarth a kol., „A Simple and Effective Chemical Phosphorylation Proce• · · ···· · · · · ··· ·Φ· · · · · • » · * · · ·· ······ • · · ····· · · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 duře for Biomolecules, Helvetica Chimica Acta, díl 70, str. 175-186 (1987); Bannwarth a kol., „Bis(allyoxy)(diisopropylamino)phosphine as a New Phosphinylation Reagent of tne Pnosphorylation of Hydroxy Functions, Tetrahedron Letters, díl 30, č. 32, str. 4219-22 (1989); Moore a kol., „Conceptual

Basis of the Selective Activation of Bis(dialkylamino)methoxyphosphines by Weak Acids and Its Application toward the Preparation of Deoxynucleoside Phosphoramidites in Šitu, J.

Org. Chem, díl 50, str. 2019-2025 (1985); Hebert a kol., „A

New Reagent for the Removal of the 4-Methoxybenzyl Ether: Application to the Synthesis of Unusual Macrocyclic and Bolaform Phosphatidycholines, J.Org.Chem., díl 57, str. 177783 (1992); Desseaux a kol., Synthesis of Phosphodiester and

Triester Derivatives of AZT with Tethered N-Methyl Piperazine and N,N,N'-trimethylethylenediamine, Bioorg. & Med. Chem. Letters, díl 3, č. 8, str. 1547-50 (1993); Pirrung a kol.,

Inverse Phosphotriester DNA Synthesis Using PhotochemicallyRemovable Dimethoxybenzoin Phosphate Protecting Groups,

J.Org.Chem., díl 61, str. 2129-36 (1996).

Tyto fosforamiditové způsoby jsou však problematické z toho důvodu, že fosforamidity jsou typickými nestabilními sloučeninami (j.ak chemicky, tak kineticky) a při čištění destilací se mohou vznítit a způsobit výbuch. Dále je fosforamiditová metoda obvykle nevhodná pro přípravu fosfodiesterových sloučenin na komerční bázi. Je to proto, že výchozí látky pro přípravu fosforamiditú jsou velmi drahé a nejsou snadno dostupné, a protože způsoby využívající fosforamidity zahrnují obvykle další kroky (například další krok odštěpení chránících skupin po fosforylaci) a také několikakrokovou izolaci a/nebo čištění meziproduktů.

Způsoby využívající fosfodichloridáty jako fosforylační činidla mají podobné nevýhody. Viz. například Martin a kol., General Method for the Synthesis of Phospholipid Derivatives of 1,2-O-Diacyl-sn-glycerols, J.Org.Chem., díl 59, str. 4805-20 (1994); Martin a kol., A General Protocol for the Preparation of Phospholipides via Phosphate Coupling, Tetrahedron Letters, díl 29, č. 30, str. 3631-34 (1988); Lammers a kol., Synthesis of Phospholipids via Phosphotriester Intermediates, J.Roya Netherlands Chem. Soc'y, 98/4, str. 243-250 (duben 1979); Martin a kol., Synthesis and Kinetic Evaluation of Inhibitors of the Phosphatidylinositol-Specific Phospholipase C from Bacillus cereus, J.Org.Chem., díl 61, str. 8016-23 (1996) .

Další způsob využívaný pro přípravu fosfodiesterových sloučenin zahrnuje použití chloridu fosforitého, pomocí kterého se generuje hydrogenfosfonátový meziprodukt. Viz. například Lindh a kol., A General Method for the Synthesis of Glycerophospholipids and Their Analogues via H-Phosphonate Intermediates, J.Org.Chem., díl 54, str. 1338-42 (1989); Garcia a kol., Synthesis of New Ether Glycerophospholipids Structurally Related to Modulátor, Tetrahedron, díl 47, č. 48, str. 10023-34 (1991); Garigapati a kol., Synthesis of' Short Chain Phosphatidylinositols, Tetrahedron Letters, díl 34, č. 5, str. 76972 (1993). Tento způsob však vyžaduje použití kondenzačního činidla, které se může buď koupit nebo nezávisle syntetizovat, čímž se způsob prodražuje a komplikuje. Kromě toho je nutná mnohakroková izolace a čištění meziproduktů, často za pracných podmínek sušení H-fosfonátového meziproduktu.

Existuje tedy potřeba bezpečného, účinného a levného způsobu přípravy fosfodiesterových sloučenin ve vysokém výtěžku, s možností využití mnoha různých substituentů, který nevyžaduje buď použití chránících skupin nebo kondenzačního činidla. Zejména je nutné nalézt způsob, který by bylo možné provádět v jedné reakční nádobě, a který nevyžaduje mnohakrokovou izolaci a čistící kroky z důvodu vzniku mnoha meziproduktů.

Předkládaný vynález se týká bezpečného, účinnějšího a méně nákladného způsobu přípravy fosfodiesterových sloučenin a zejména fosfodiesterů obecného vzorce:

Podstata vynálezu

O li

R—0—P—O-Rl

OH

Způsob podle předkládaného vynálezu zahrnuje následující kroky:

(a) kondenzaci chloridu fosforitého s alkoholem za vzniku substituovaného dichlorfosfinu;

(b) kondenzaci tohoto dichlorfosfinu s aminovou bází za získání bis(amino)fosfinu;

(c) kondenzaci tohoto bis(amino)fosfinu s dalším alkoholem, který může být stejný nebo jiný než alkohol použitý v kroku (a), za získání disubstituovaného (amino)fosfinu;

(d) a reakci jmenovaného (amino)fosfinu s vodou a oxidačním činidlem za vzniku požadované fosfodiesterové sloučeniny.

Způsob podle předkládaného vynálezu vylučuje použití nestabilních fosforylačních činidel a také nutnost použít chránící skupiny nebo kondenzační činidlo. Předkládaný vynález tedy vylučuje nadbytečné kroky způsobu, jako je odstranění chránících skupin a syntéza kondenzačního činidla. Ve výhodném provedení podle předkládaného vynálezu probíhá proces syntézy fosfodiesterů v jedné reakční nádobě a není nutná mnohakroková izolace a/nebo čistící kroky.

• ·

Podrobný popis vynálezu

Aby mohl být vynález lépe pochopen, následuje podrobný popis.

Předkládaný vynález poskytuje zlepšený způsob přípravy fosfodiesterových sloučenin obecného vzorce:

O

R—0—P—0—Rl

I

OH kde R a R¹ mohou být stejné nebo různé a jsou vybrány ze skupiny,- kterou tvoří lineární, rozvětvené nebo cyklické alifatické skupiny, arylové skupiny, heterocyklické skupiny, peptidové skupiny, peptoidní skupiny, deoxyribo- nebo ribonukleotidové nebo nukleosidové skupiny nebo cyklické nebo acyklické organické chelatující skupiny, přičemž všechny tyto skupiny mohou být popřípadě substituované jedním nebo více atomy dusíku, kyslíku, síry, halogenu, alifatickými, amidovými, esterovými, sulfonamidovými, arylovými, acylovými, sulfonátovými, fosfátovými, hydroxylovými nebo organokovovými substituenty.

Ve výhodném·provedení podle předkládaného vynálezu se všechny syntetické kroky provádějí v jedné reakční nádobě, bez nutnosti mnohakrokové izolace a/nebo čistících kroků. Předkládaný vynález poskytuje účinný a vysoce výtěžný způsob přípravy fosfodiesterových sloučenin, který nevyžaduje drahé a nestabilní výchozí látky a nevyžaduje použití ani chránících skupin, ani kondenzačních činidel. Dále je způsob podle předkládaného vynálezu účinný pro vytváření fosfodiesterových můstků mezi mnoha substituenty.

Schéma způsobu

Podle předkládaného vynálezu se alkohol ROH, kde R má význam uvedený výše, reaguje s chloridem fosforitým, s výhodou • · · · • · • ·

v molárním poměru 1:1, za vzniku dichlorfosfinového reakčního produktu I:

PCI3, rozpouštědlo ROH ROPCI2 (I)

Reakce se provádí v přítomnosti etherického nebo uhlovodíkového rozpouštědla a při teplotě -50 až 15 °C, s výhodou při teplotě -10 až -5 °C, po dobu 30 minut až 3 hodin, s výhodou 1 až

1,5 hodiny. Rozpouštědlem muže být jakékoli etherické nebo uhlovodíkové rozpouštědlo a s výhodou múze být vybráno ze skupiny, kterou tvoří heptan, methylterc.butylether, dioxan, tetrahydrofuran, diethylether a ethylenglykoldialkylethery. Výhodněji je rozpouštědlem tetrahydrofuran.

Dichlorfosfin I se potom reaguje s asi 5 až 6 ekvivalenty aminové báze za vzniku bis(amino)fosfinového reakčního produktu II:

amin, rozpouštědlo ^amino ROPCI2 -► ROP (II) ''amino

Tato reakce se provádí v přítomnosti etherového nebo uhlovodíkového rozpouštědla, jak je popsáno výše, a při teplotě -50 až 15 °C, s výhodou -10 až -5 °C, po dobu 3 minut až 3 hodiny, s výhodou 15 minut až 30 minut. Bází použitou pro přípravu sloučeniny II může být aminová báze, a s výhodou báze, která má hodnotu pKa 5 až 11, výhodněji báze vybraná ze skupiny, kterou tvoří imidazol, 2,4-dimethylimidazol, ΙΗ-tetrazol, dialkylaminy (methyl, ethyl, butyl), pyridin, piperazin, piperidin, pyrrol, 1H-1,2,3-triazol a 1,2,4-triazol. Ve výhodnějším provedení se jako báze použije imidazol.

Bis(amino)fosfinová sloučenina II se potom reaguje s 0,75 až 1,0 ekvivalentem druhého alkoholu R¹OH, kde R¹ má stejný význam, jako je uvedeno výše, za vzniku (amino)fosfinového reakčního produktu III:

• · • · « ·

R0P(amino)2 + F^OH rozpouštědlo >- ROP' amino /

(III)

Tato reakce se provádí v přítomnosti etherového nebo uhlovodíkového rozpouštědla a při teplotě -50 až 15 °C, s výhodou -10 až -5 °C, po dobu 30 minut až 3 hodiny, s výhodou 1,0 až 1,5 hodiny. Rozpouštědlem může být jakékoli etherové nebo uhlovodíkové rozpouštědlo a s výhodou se může vybrat ze skupiny, kterou tvoří heptan, methylterc.butylether, dioxan, tetrahydrofuran, 1,3-aioxolan, diglym, diethylether, dialkylethery a ethylenglykoldialkylethery. Výhodněji se jako rozpouštědlo použije tetrahydrofuran.

Nakonec se (amino)fosfinová sloučenina vzorce III reaguje s 1 ekvivalentem kyselé vody, která má s výhodou pH 2,5 až 5 a 1 nebo více ekvivalenty oxidačního činidla za vzniku požadované fosfodiesterové sloučeniny IV amino . ~ ~ 9 / voda, oxid. činidlo, rozpouštědlo ||

ROP' *- R—0—P—0—Rl (IV)

ORl

OH

Oxidačním činidlem může být oxidační činidlo peroxidového typu a s výhodou vybráno ze skupiny obsahující jodistany. Výhodněji je oxidačním činidlem jodistan sodný.

Výše uvedená hydrolýza a oxidace se provádějí ve směsi rozpouštědel při teplotě -15 až 25 °C, s výhodou 0 až 2 °C, po dobu 10 až 24 hodin, s výhodou 10 až 15 hodin. Směsí rozpouštědel může být jakákoli kombinace rozpouštědel vybraných ze skupiny, kterou tvoří etherová a uhlovodíková rozpouštědla. Směs rozpouštědel s výhodou obsahuje tetrahydrofuran, heptan a toluen v objemovém poměru 10:10:1.

• ·

Použití produktů způsobu

Bylo zjištěno, že výše uvedený způsob je zvláště vhodný pro přípravu kontrastních činidel pro diagnostické zobrazování. Příklady fosfodiesterových kontrastních činidel, které se mohou připravit pomocí zlepšeného způsobu, zahrnují sloučeniny uvedené níže. a také další sloučeniny popsané v PCT přihlášce č. WO 96/23526.

00C—' \—coo'

Gd3 +

MS-317

Gd3 +

MS-325

MS-326 • 444 »44 444

MS-327

MS-323

V těchto případech se předpokládá, že nejméně jeden ze dvou alkoholu (ROH, R¹OH) jak je deinováno výše, dále obsahuje cyklický nebo acyklický organický chelatující ligand, s jakoukoli citlivou funkční skupinou (například karboxylátem) , na které je chelát chráněn vhodnými skupinami (například terč.butylovými skupinami). Vhodné chelatující ligandy jsou odborníkům v této oblasti známé. Například pokud se má fosfodiesterová sloučenina použít jako kontrastní činidlo pro magnetické resonanční zobrazování, patří mezi výhodné chelatující ligandy :

Gd3+ Ν N ooc—y 3-3 3 C00

Magnevist gadopentátdimeglumin

DTPA

Dotarem gadoterátmeglumin

DOTA »

* · 4 4 4 · • 4 · · coo

CH,

GčP +

4 4 4 · 4

4 4

4*4 · * ·

4

Omniscan gadodiamid

DTPA-BMA

ProHance gadoteridol

HP-DO3A

Odstranění všech chránících skupin na chelátu a také komplexace chelátu vhodným kovem se muže provést po provedení způsobu syntézy fosfodiesteru podle předkládaného vynálezu pomocí známých postupů. Viz. například Grote a kol., Stereocontrolled Synthesis of DTPA Analogues Branged in the Ethylene Unit, J. Org. Chem., 60:6987-97 (1995); Kang a kol., Synthesis, Characterization, and Crystal Structure of the Gadolinium (III) Chelate of (IR, 4R, 7R)-a, a , a-Trimethyll, 4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetic Acid (DO3MA), Inorg. Chem., 32:2912-18 (1993) a odkazy zde citované.

Také se předpokládá, že pro tyto fosfodiesterové kontrastní látky může alkohol (ROH, R¹OH) obsahovat skupiny označené jako skupiny usnadňující lokalizaci výsledného činidla do tkáně, buňky, proteinu nebo požadované oblasti, která se má zobrazit. Mezi příklady těchto skupin patří lipofilní a amfifilní látky, receptory ligandú, protilátky nebo části protilátek, peptidy nebo jejich biomolekuly, o kterých je známo, že koncentrují specifické biologické složky, které se mají zobrazit.

Aby mohl být předkládaný vynález lépe pochopen, je přiložen následující příklad. Tento příklad slouží pouze pro ilustraci a v žádném případě neomezuje rozsah podle předkládaného vynálezu .

·* ·· ·· • · · · · · • · β η ♦ · •· ···· • · · • · · ·· *

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava [4,4-difenylcyklohexyl)fosfooxymethyl]diethylentriaminpentaoctové kyseliny je uvedena ve schématu I:

OP(imido)2

OH

tSuOOCtBuOOC-COOtBu

-COOtBu

COOtBu tBuOOCt3u00C-

-COOtBu

Ph

H₂O, NalCú

Ph konc. HCl rozpouštědlo

HOOCHOOC-

— COOH

-COOH tBuOOCtBuOOC-

N N ' <

Ph

COOtBu

-COOtBu

-COOtBu tcsroriteno za míchání • · · · · · * · · • · · _ · · · i2 ’··’ :

Do reakční nádoby, která obsahuje roztok chloridu (13,2 ml, 0,151 mol) v tetrahydrofuranu (202 ml) se a při teplotě reakční směsi -6,2 až -5,3 °C během 1 hodiny přidá roztok 4,4-difenylcyklohexanolu (1) (38,34 g, 0,152 mol) v tetrahydrofuranu (243 ml). Směs se míchá dalších 34 minut za vzniku dichlorfosfinového reakčního produktu (2), který má ³¹P NMR chemický posun 174,28 ppm.

K tomuto roztoku se za míchání při teplotě -7,8 až -3,6 °C během 37 minut přidá imidazol (51,34 g, 0,753 mol) v tetrahydrofuranu (243 ml) . Vzniklá směs se míchá dalších 20 minut za--vzniku roztoku bis(amino)fosfinového reakčního produktu (3), který má ³¹P NMR chemický posun 106,36 ppm.

K této směsi se za míchání při teplotě -6,8 až -4,8 °C během 1 hodiny 6 minut přidá roztok obsahující penta-t-butylester 2(R)-hydroxymethylaiethylentriaminpentaoctové kyseliny (4) (160,0 g, 0,128 -mol, čistota: 56,32 % hmotnostních) v heptanu (114 ml) . Tato směs se potom míchá dalších 23 minut za vzniku roztoku (5), který má ³¹P NMR chemický posun 123,8 ppm.

Nakonec se během 1 minuty při teplotě reakční směsi -6,5 až

6,5 °C přidá voda (202 ml) . Směs se míchá 5 minut a potom se během 5 minut při teplotě reakční směsi 1,0 až 12,1 °C přidá heptan (620 ml), toluen (70 ml) a 5N vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (2 02 ml) . Potom se během 3 minut při teplotě reakční směsi 10,5 °C přidá jodistan sodný (22,6 g, 0,106 mol) . Reakční směs se během 35 minut ohřeje na teplotu místnosti a míchá se dalších 2,5 hodiny za vzniku roztoku (6), který má ³¹P NMR chemický posun 4,27 ppm. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje 10% vodným roztokem thiosíranu sodného (2x809 ml).

K této organické vrstvě se přidá tetraoktylamoniumbromid (8,21 g, 0,015 mol). Potom se během 22 minut při teplotě reakční směsi 22,8 až 25,0 °C.přidá koncentrovaná kyselina chloro• · · vodíková získání 7,78 ppm (11,51 M, sloučeniny Vrstvy se ·· · · · · · · • · · · · · · ··.· · ······ • · · · · · ·· · ..... ··

405 ml) . Tato směs se míchá 16 hodin za (7) , která má ³¹P NMR chemický posun oddělí a organická vrstva se vylije.

K výše uvedené vodné vrstvě se přidává 8M vodný roztok hydroxidu sodného (630 ml) dokud se nedosáhne pH 6,56. Roztok se odpařuje za sníženého tlaku (50 až 55 °C, vakuum 11,3 kPa) , dokud se neodpaří 400 ml rozpouštědla (asi 1 hodina) . Roztok se ochladí na teplotu místnosti a přidá se amberlitová pryskyřice XAD-4 (92,0 g) . Suspenze se míchá 50 minut při teplotě místnosti a odfiltruje se za získání světle žlutého vodného roztoku (1,1 1) .

Výše uvedený roztok se nanese na silikagelovou kolonu C-18 s reverzní fází · (271 g, plněno za vlhka v methanolu a potom promyto 800 ml methanolu, 800 ml směsi methanol/voda 1:1 a 800 ml vody) a eluuje se vodou. První 1,0 1 jímaného eluentu se vylije a dalších 1,3 litru se schová. K tomuto roztoku se přidá 6N vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (60 ml do pH 2,15) a 3N vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (30 ml do pH 1,63). Suspenze se míchá 1,25 hodiny a potom se filtruje. Pevná látka se promyje vodným roztokem o pH 1,67 (500 ml) a suší se (48-50 °C, 533-800 Pa) do konstantní hmotnosti (18 hodin) za získání bílé pevné látky, sloučeniny vzorce:

-COOH

-COOH (65,5 g, výtěžek: 68,89 %, čistota: 99,45 % hmotnostního,

98,95 % plochy, 3,02 % vody a 97,81 % chelatovatelné).

Claims

PATEN TOVÉ NÁROKY

1. Způsob přípravy fosfodiesterové sloučeniny vzorce:

O

II

R—0—P—0-Rl

OH kde R a R¹ mohou být stejné nebo různé a jsou vybrány ze skupiny, kterou tvoří lineární, rozvětvené nebo cyklické alifatické skupiny, arylové skupiny, heterocyklické skupiny, peptidové _ skupiny, peptoidní skupiny, deoxyribo- nebo ribonukleotidové nebo nukleosidové skupiny nebo cyklické nebo acyklické organické chelatující skupiny, přičemž všechny tyto skupiny mohou být popřípadě substituované jedním nebo více atomy dusíku, kyslíku, síry, halogenu, alifatickými, amidovými, esterovými, sulfonamidovými, acylovými, sulfonátovými, fosfátovými, hydroxylovými nebo organokovovými substituenty, kdy se tento způsob provádí v jedné reakční nádobě a v y z načuje se tím, že zahrnuje následující reakční kroky:

(a) reakci alkoholu ROH s chloridem fosforitým v přítomnosti rozpouštědla za vzniku dichlorfosfinové sloučeniny vzorce:

Cl /

R—0—P ^xci (b) kondenzaci dichlorfosfinové sloučeniny připravené v kroku (a) se aminovou baží v přítomnosti rozpouštědla za vzniku bis(amino)fosfinové sloučeniny vzorce:

• · • · amino

R—0—P \ . amino (c) kondenzaci bis(amino)fosfinové sloučeniny připravené v kroku (b) s druhým alkoholem R¹OH, v přítomnosti rozpouštědla, kde druhý alkohol může být stejný nebo jiný než alkohol použitý v kroku (a) , za vzniku (amino)fosfinové sloučeniny vzorce:

amino

R—0(d) hydrolýzu a oxidaci (amino)fosfinové sloučeniny připravené v kroku (c).
2. Způsob podle nároku Ivyznačující se tím, že se alkoxydichlorfosfinová sloučenina připravená v kroku (a) reaguje s 5 až 6 ekvivalenty aminové báze.
3. Způsob podle kteréhokoli z nároků 1 nebo 2 vyznačující se tím, že aminová báze má hodnotu pKa 5,0 až 11,0.
4. Způsob podle nároku 3 vyznačuj ící se tím, že báze je vybraná ze skupiny, kterou tvoří imidazol, 2,4dimethylimidazol, ΙΗ-tetrazol, dialkylaminy (methyl, ethyl, butyl), pyridin, piperazin, piperidin, pyrrol, 1H-1,2,3triazol a 1,2,4-triazol.
5. Způsob podle nároku 4vyznačující se tím, že bází je imidazol.

ekvivalentem j edním
6. Způsob podle nároku Ivyznačující se tím, že se jeden ekvivalent ROH reaguje s chloridu fosforitého.

• ·
7. Způsob podle nároku lvyznačující se tím, že rozpouštědlo použité v krocích (a) , (b) a (c) může být stejné nebo různé a je vybráno ze skupiny, kterou tvoří etherická a uhlovodíková rozpouštědla.
8. Způsob podle nároku 7vyznačující se tím, že rozpouštědlo je vybráno ze skupiny, kterou tvoří heptan, methylterc.butylether, dioxan, tetrahydrofuran, 1,3-dioxolan, diglym, diethylether, dialkylethery a ethylenglykoldialkylethery.
9. Způsob podle nároku 8vyznačující se tím, že rozpouštědlem je tetrahydrofuran.
10. Způsob podle nároku lvyznačující se tím, že se alkoxy(amino)fosfinová sloučenina připravená v kroku (b) kondenzuje s 1 ekvivalentem íÚOH.
11. Způsob podle nároku lvyznačující se tím, že se hydrolýza a oxidace dialkoxy(amino)fosfinové sloučeniny připravené v kroku (c) provádí s vodou a oxidačním činidlem při teplotě -15 až 25 °C po dobu 10 až 24 hodin.
12. Způsob podle nároku 11 vyznačující se tím, že oxidační činidlo obsahuje jodistan sodný.
13. Způsob podle nároku 11 vyznačující se tím, že rozpouštědlo obsahuje směs tetrahydrofuranu, heptanu a toluenu.

Způsob přípravy fosfodiesterových sloučenin vyznačující se tím, že obsahuje následující kroky:

(a) reakci 4,4-difenylcyklohexanolové sloučeniny s chloridem fosforitým za získání 4,4-difenylcyklohexyloxydichlorfosfinu vzorce:

(b) kondenzaci 4,4-difenylcyklohexyloxydichlorfosfinu připraveného v kroku (a) s aminovou bází za získání 4,4-difenylcyklohexyloxydiaminofosfinu vzorce:

(c) kondenzaci 4,4-difenylcyklohexyloxydiaminofosfinu připraveného v kroku (b) s pentaterc.butylesterem hydroxymethyl -DTPA za získání 4,4-d.ifenylcyklohexyloxy (hydroxymethyl-DPTA-oxy, pentaterc .butylester)aminofosfinu vzorce:

Ph p—amino i o

tBuOOC tBuOOC

N

-COOtBu

COOtBu

-COOtBu (d) hvdrolýzu a oxidaci 4,4-difenylcyklohexyloxy(hydroxymethyl-DPTA-oxy,pentaterc.butylester)aminofosfinu připraveného v kroku (c) zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a oxidačním činidlem za vzniku pentaterc.butylesteru • · · [(4,4-difenylcyklohexyl)fosfonooxymethyl]diethylentriaminu vzorce:

—COOtBu

-COOtBu
15.Způsob přípravy [(4,4-difenylcyklohexyl)fosfonooxymethyl]diethylentriaminpentaoctové kyseliny vyznačuj ící se t í m , že zahrnuje následující kroky:

(a) fosforylaci 1,0 ekvivalentu 4,4-difenylcyklohexanolu jedním ekvivalentem chloridu fosforitého za získání 4,4difenylcyklohexyloxydichlorfosfinu vzorce:

OPC1₂ (b) kondenzaci 4,4-difenylcyklohexyloxydichlorfosfinu připraveného v kroku (a) s 5 až 6 ekvivalenty imidazolu za získání 4,4-difenylcyklohexyloxydiimidofosfinu vzorce:

(c) kondenzaci 4,4-difenylcyklohexyloxydiimidofosfinu připraveného v kroku (b) s 0,75 až 1,0 ekvivalentem pentaterc.butylesteru hydroxymethyl-DTPA za získání 4,4-difenylcyklohexyloxy (hydroxymethyl-DTPA-oxy, pentaterc.butylester)imidofosfinu vzorce:

(d) hydrolýzu a oxidaci 4,4-difenylcyklohexyloxy(hydroxymethyl -DTPA-oxy, pentaterc.butylester)imidofosfinu připravené v kroku (c) zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a asi 0,5 až 2,0 ekvivalenty jodistanu sodného za vzniku pentaterc.butylesteru [(4,4-difenylcyklohexyl)fosfonooxymethyl]diethylentriaminu vzorce:
16. Způsob podle nároku 15 vyznačující se tím, že dále zahrnuje krok hydrolýzy pentaterc.butylesteru [(4,4-difenylcyklohexyl)fosfonooxymethyl]diethylentriaminu připraveného v kroku (d) kyselinou chlorovodíkovou za vzni- • · · • · · · · • · · · • · · * • · · · · ··· ·· ·· · · ku [(4,4 -di fenylcyklohexyl)fos fonooxymethyl 1 diethylene ri aminpentaoctové kyseliny vzorce: